ADRIANA DANILO FONSECA JOO PAULO JUCIRLENE RIBEIRO MARLON LIMA RAIANY ARAJO SUELEN CARVALHO

RELATRIO DE BIOQUMICA
ESPECTROFOTOMETRIA

UNIVERSIDADE PRESIDENTE ANTNIO CARLOS - UNIPAC

IPATINGA 2011

ADRIANA DANILO FONSECA JOO PAULO JUCIRLENE RIBEIRO MARLON LIMA RAIANY ARAJO SUELEN CARVALHO

ESPECTROFOTOMETRIA

Relatrio de concluso da aula prtica, realizada no laboratrio de Qumica, no dia 16 de fevereiro de 2011, como sob a orientao do Curso do de professor Jorgino Julio apresentado exigncia em Antnio graduao Qumica, Presidente Engenharia Universidade Carlos-

UNIPAC Ipatinga.

UNIVERSIDADE PRESIDENTE ANTNIO CARLOS - UNIPAC

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IPATINGA 2011

SUMRIO

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INTRODUO

2 OBJETIVO..............................................................................................................................6 3 MATERIAL E REAGENTES.................................................................................................7 4 METODOLOGIA....................................................................................................................8 5 RESULTADOS E DISCUSSO.............................................................................................9 6 CONCLUSO.......................................................................................................................11 7 REFERNCIAS.....................................................................................................................12

INTRODUO
A lei de lambert que tambm conhecida como lei de Beer na qual relaciona

a quantidade de energia luminosa absorvida pela soluo-absorbncia- e sua concentrao. A determinao da concentrao de um soluto em uma soluoproblema por espectrofotometria envolve a comparao da absorbncia da soluoproblema com uma soluo de referncia, na qual j se conhece a concentrao do soluto. Em geral, utilizada uma soluo-padro com diferentes concentraes, que tem sua absorbncia determinada. Esses so preparados diluindo-se a soluopadro na proporo necessria para a obteno das concentraes desejadas. Para fazer essas observaes foi preciso usar um aparelho o espectrofotmetro o qual mede a intensidade de uma fonte luminosa separando a luz em feixes com diferentes comprimentos de onda, ou seja, o espectrofotmetro um aparelho que permite a passagem de um feixe de luz monocromtica atravs de uma soluo, com isso ele mede a quantidade de luz que foi absorvida (absorbncia) e a luz que atravessou essa soluo (transmitncia). A partir de um prisma, o aparelho separa a luz em diversos feixes com diferentes comprimentos de onda entre o ultravioleta e o infravermelho e esses comprimentos diferentes denominam-se absorbncia. O espectrofotmetro permite saber qual a quantidade de luz que absorvida em cada comprimento de onda especfico. Com a absorbncia obtida no espectrofotmetro e a concentrao se obtm um grfico e sua curva padro.

2 OBJETIVO
Determinar a concentrao de uma espcie em soluo a partir do grfico da variao de absorvncia em funo da concentrao de vrias solues-padro.

3 MATERIAL E REAGENTES
Foram utilizados; balo volumtrico, pipeta, pipetador, cubetas, pissetes de gua destilada, espectrofotmetro e solues aquosa de sulfato de cobre (CuSO4).

4 METODOLOGIA
Em tubos de ensaio foram preparadas oito solues de sulfato de cobre (CuSO 4) que deveriam ter um volume final de 10 mL e concentraes que variavam de 20 mg/L a 160 mg/L (conforme tabela 1). Aps as solues serem devidamente homogeneizadas elas foram levadas ao espectrofotmetro para medir a absorbncia. Utilizando um feixe de luz de 650 nm.

5 RESULTADOS E DISCUSSO
Aps as amostras serem analisadas no espectrofotmetro, foram obtidos os seguintes resultados: Concentrao Final 20 40 60 80 100 120 140 160 Volume Final 10ml 10ml 10ml 10ml 10ml 10ml 10ml 10ml Volume Soluo CuSO4 1ml 2ml 3ml 4ml 5ml 6ml 7ml 8ml Volume H2O 9ml 8ml 7ml 6ml 5ml 4ml 3ml 2ml ABS 650 nm 0,163 0,176 0,194 0,261 0,324 0,392 0,456 0,524 0,322

Tubos 1 2 3 4 5 6 7 8 9

Tabela 1: valor da absorbncia obtida na leitura do espectrofotmetro para cada amostra.

Os dados da tabela demonstram que, quanto maior a concentrao da soluo maior ser o seu valor de absorbncia, devido ao fato de que uma maior concentrao implica em um maior nmero de partculas que interagem com a radiao luminosa. Utilizando dados da tabela foi construdo o seguinte grfico:

Segundo a lei de Beer-Lambert a absorbncia deve variar linearmente com a concentrao como demonstrado pela reta no grfico acima, porm como pode ser observado, algumas amostras no se comportaram de acordo com esperado na lei de Beer, pelos seguintes motivos: mau homogeneizao, encaixe de forma incorreta da cubeta no espectrofotmetro e/ou erro volumtrico no processo de pipetagem. Apesar de apresentar um pequeno erro, o experimento obteve um resultado satisfatrio, uma vez que seu coeficiente de correlao R obteve um valor de 0, 966, um valor prximo de 1 (um); uma vez que R=1 a correlao dita perfeita. Variando os dois primeiros valores obtemos um grfico ainda mais prximo da correlao perfeita. Como mostrado o grfico a seguir;

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6 CONCLUSO
Conclu-se que a espectrofotometria de grande importncia tanto em anlise fsicoqumicas como em anlises biolgicas, devido ao seu alto grau de preciso e eficincia na determinao da concentrao de substncias atravs da variao do grau de absorbncia. Observou-se em nosso experimento que o Sulfato de Cobre possui um grau de absorbncia de 163 - 524 nm, valor este que se encontra prximo do terico de 650nm.

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7 REFERNCIAS
FELTRE, Ricardo Qumica Geral. Vol.1. 5 edio. So Paulo: Editora Moderna HARRIS, C Daniel. Anlise Qumica Quantitativa. Fundamentos da

Espectrofotometria. 6ed. Rio de Janeiro: LTC, 2005. P. 398-423 Universidade de So Paulo. Lei de Beer. Disponvel em: http://plato.if.usp.br/12004/fap0181d/Lei%20de%20Beer.htm. Acessado em 10/03/2011 s 18h20min.

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