1.

Sobre a técnica cromatografia em camada delgada, responda:
(a) Quais os fundamentos básicos? A cromatografia em camada delgada (ou fina) é uma técnica de adsorção líquido-sólido bastante simples e barata, que consiste na separação de uma mistura através da migração por capilaridade diferencial de seus componentes sobre uma camada delgada de adsorvente retido sobre uma superfície plana. Na cromatografia de camada delgada, a fase móvel (líquido) ascende por ação de capilaridade por uma camada fina do adsorvente (fase estacionária) estendida sobre um suporte. O suporte mais típico é uma placa de vidro. Sobre a placa espalha-se uma fina camada de adsorvente suspenso em água ou outro solvente e deixa-se secar. A placa coberta chama-se “placa de camada fina ou placa cromatográfica”. Quando a placa cromatográfica é colocada verticalmente em um recipiente fechado (cuba cromatográfica) que contém uma pequena quantidade de solvente, este eluirá pela camada do adsorvente por ação capilar.

(b) Cite os usos mais consagrados da técnica (importância). A cromatografia em camada delgada é usada para determinar a pureza do composto, identificar componentes em uma mistura comparando-os com padrões, acompanhar o curso de uma reação pelo aparecimento dos produtos e desaparecimento de um dos reagentes e ainda para isolar componentes puros de uma mistura. (c) Enumere as vantagens e desvantagens da técnica. A cromatografia em camada delgada é uma técnica simples, de fácil compreensão e execução, de baixo custo, apresenta separação relativamente rápida, é versátil, e reprodutível quando se tem prática. Entretanto, como envolve processos manuais, como por exemplo a preparação da placa e aplicação da amostra, pode causar erros. Essa técnica não possui, também, boa eficiência em análise quantitativa.

(d) O que é e como é calculado o Rf (Fator de Retardamento)?
Parâmetro usado frequentemente em cromatografia, o Rf é definido como a razão entre a distância percorrida pela mancha do componente e a distância percorrida pelo eluente, ou seja:

eluição com um único solvente ou com uma mistura de solventes de composição constante. ou seja. apresentar baixa viscosidade e não interagir com o soluto. 2. o solvente deve ser volátil. (f) Que características deve ter um solvente para ser considerado um bom eluente de desenvolvimento? Para ser considerado um bom eluente. (c) cromatografia em fase estacionária normal: a fase estacionária é mais polar do que a fase móvel. (d) cromatografia em fase estacionária reversa: a fase móvel é polar e a fase estacionária apolar. Outras alternativas para se revelar a placa cromatográfica. Defina: (a) eluição com gradiente: a composição da fase móvel é variada durante a eluição. a fase móvel é formada por dois ou mais solventes onde a razão entre estes é variada durante o processo de eluição. 3. seriam a utilização de luz ultravioleta ou de reveladores energéticos como ácido sulfúrico. ou seja. (g) Quais artifícios podem ser utilizados quando suspeitamos que um componente da amostra a ser analisada pode não ser visível a olho nu? Quando algum componente da amostra não é visível a olho nu. tricloreto de antimônio ou permanganato de potássio seguido de aquecimento para ocorrer a reação cromogênica. (b) eluição isocrática: eluição com composição da fase móvel constante. e d 2 a distância percorrida pelo eluente. no volume ou na concentração da substância aplicada.Rf = d1d2 Onde: Rf é o fator de retardamento. pode ser utilizada uma cuba reveladora para sua visualização. (e) Como o fator de retenção de um soluto pode ser alterado? O fator de retenção pode ser alterado através de mudanças nas fases estacionária e/ou móvel. mudanças na temperatura. Sugira um tipo de cromatografia líquida que seja adequada para separar: a) e . Essa cuba reveladora pode ser constituída de vapor de iodo que reage com compostos orgânicos formando complexo colorido. d1 a distância percorrida pela mancha do componente.

No preparo de um gradiente de benzeno/acetona para HPLC em coluna de sílica gel. Que solvente. sendo formada por uma solução de HCl em acetona. tivesse sido usado. como líquido estacionário. deve-se aumentar a polaridade da fase móvel e. ou seja. utilizando-se o clorofórmio que é polar. o tempo de retenção será menor 5. eluirá mais. 6. deve ser usado um solvente mais polar do que a fase estacionária. Como a sílica gel é polar e utilizando o tolueno que é um solvente apolar. Com isso. já que este é apolar e teria maior afinidade com a fase estacionária que também é apolar. Como o líquido estacionário didecilftalato é um solvente de polaridade intermediária. Cátions inorgânicos podem ser separados por cromatografia líquida segundo sua capacidade de formar complexos com íons cloreto. Para que este diminua. a fase estacionária é saturada com água que é um solvente polar. para isso. 4. a fase estacionária é saturada com água e o solvente transportador é uma solução de HCl em acetona. o tempo de retenção é de 28 minutos. Em uma coluna de sílica gel. do que a sílica gel. Assim. um solvente de polaridade intermediária. o sal que for mais solúvel em HCl apresentará menor fator de retenção. Para que estes sejam eluídos. tetracloreto de carbono ou clorofórmio. é desejável aumentar ou diminuir a proporção de benzeno conforme a coluna é eluída? Explique sua resposta. tornando-a mais polar. o tempo de retenção para o n-pentano seria maior. como óleo de silicone. o tempo de retenção para n-pentano seria menor ou maior? Explique sua resposta. encontrou-se um composto com tempo de retenção de 28 min quando a fase móvel era tolueno. Para a separação. e a fase móvel também polar. ao ser trocado pelo óleo de silicone que é um líquido apolar. Prediga os valores relativos do fator de retenção dos três sais. Como a fase estacionária do sistema (sílica gel) é polar. a ordem dos fatores de retenção será: . os analitos polares ficarão retidos no sistema. 7. Como se trata de uma cromatografia em papel. utilizando-se um solvente apolar. Se um líquido apolar.→ Cromatografia por adsorção (isômeros) b) CH3CH2OH e CH3CH2CH2OH → Cromatografia por partição c) Ba2+ e Sr2+ → Cromatografia por partição (papel) d) C4H9COOH e C5H11COOH → Cromatografia por partição e) Glicosídeos de alta massa molecular → Cromatografia por exclusão por tamanho. ou seja. deve-se diminuir a proporção de benzeno no gradiente já que este é o componente apolar da fase móvel. As solubilidades relativas dos seguintes cloretos em ácido clorídrico concentrado são CuCl 2 > CoCl2 > NiCl2. Uma cromatografia gás-líquido foi operada com didecilftalato. aparentemente diminuiria o tempo de retenção? Explique.

Como a fase estacionária (sílica gel) é polar. a mais polar seria o cloreto de metileno contendo 50% de acetato de etila e o menos polar o cloreto de metileno puro. ou seja. que é um solvente polar. CH 3OH. Como a fase estacionária é saturada com água. Que aminoácido você esperaria que tivesse o maior fator de retenção? Explique seu raciocínio. 9. 10. portanto. separação das substâncias indesejáveis ou dos componentes de uma mistura. acompanha-se a reação química utilizando-se uma placa cromatográfica até que se observe a formação de um produto com o mesmo fator de retenção do padrão que foi estudado anteriormente 12. Como é possível verificar o fim de uma reação química utilizando-se a técnica de cromatografia em camada delgada (CCD)? Para se verificar o fim da reação química utilizando cromatografia em camada delgada. apresentará o menor fator de retenção. ele vai eluir mais sobre a placa cromatográfica. quanto maior a polaridade do eluente. ou seja. Em seguida. Os cromatogramas foram obtidos utilizando-se 3 diferentes eluentes: cloreto de metileno puro. o aminoácido A apresentará o maior fator de retenção por ser o mais polar. Como é realizada a confirmação da identidade (análise qualitativa) de compostos quando a análise emprega CLAE (Cromatografia Líquida de Alta Eficiência)? . o aminoácido mais polar apresentará maior afinidade pela fase estacionária. apresentará o maior fator de retenção e o maior tempo de eluição. Um par de aminoácidos foi separado em uma coluna na qual a fase estacionária está saturada com água e o solvente transportador é o metanol. Uma solução diluída de β-naftol e outra de p-toluidina foram aplicadas em placas cromatográficas de sílica gel. mas fortemente ele é adsorvido pela fase estacionária.CuCl2>CoCl2>NiCl2 8. O contrário ocorre com a p-toluidina. Contudo. da fase móvel. maior o fator de retenção do β-naftol (mais polar do que a p-toluidina). 11. ou seja. Os aminoácidos que foram separados nessa coluna são: (a) HOOCH(NH2)CH2OH e (b) HOOCCH(NH2)CH3. e a fase móvel (metanol) também é polar. deve-se montar uma placa cromatográfica contendo os padrões dos reagentes separados e do produto a ser obtido e determinar o fator de retenção correspondente a cada uma das espécies. A cromatografia em escala analítica trata-se da identificação e quantificação de compostos enquanto em escala preparativa trabalha-se com purificação de compostos. vai eluir menos. Explique o fundamento das técnicas de cromatografia em camada delgada em escala analítica e em escala preparativa. que por ser menos polar. considerando o aumento da proporção do acetato de etila nas fases móveis? Justifique sua resposta. Para as composições dos solventes dadas. cloreto de metileno contendo 25% de acetato de etila e cloreto de metileno contendo 50% de acetato de etila. Que efeito é esperado sobre os valores de Rf dos dois compostos. Quanto mais polar for o ácido.

identificar ou separar os componentes de uma mistura. por ser uma técnica hifenizada.38 para A e B. mas não podem ser separadas por Cromatografia Gasosa? Substâncias não-voláteis ou termicamente frágeis podem ser separadas por Cromatografia Líquida de Alta Eficiência e não por Cromatografia Gasosa. móvel. Quais espécies podem ser separadas por Cromatografia Líquida de Alta Eficiência. um líquido ou um fluido supercrítico. que pode ser um gás. contendo apenas A. com tempos de retenção próximos. uma das quais é estacionária (fixa) e a outra. Em todas as separações cromatográficas. nos tamanhos das partículas.37 Uma solução foi preparada através da mistura de 12.49 mg de B com 10. A combinação da cromatografia gasosa com a espectrometria de massas. Essa técnica baseia-se no princípio da adsorção seletiva. 17. 13. Foram observadas áreas de picos de 5. 14.Cromatografia Líquida de Alta Eficiência a confirmação da identidade de um composto é feita através da comparação entre os tempos de retenção das substâncias e dos padrões. Responda as seguintes questões: (a) O que é cromatografia? A cromatografia é uma técnica para analisar. então. nas composições das fases móveis e estacionárias. a amostra é transportada por uma fase móvel. Discuta por que a combinação da cromatografia gasosa com a espectrometria de massas é tão vantajosa.97 e 6. Uma mistura conhecida de compostos A e B produziu os seguintes resultados da CLAE: Composto A B Concentração (mg/mL) 1. nos tamanhos das partículas. É definida como a separação de dois ou mais compostos diferentes por distribuição entre fases. Essa fase móvel é. ou seja. e diluindo a mistura formada a 25. nas composições das fases móveis e estacionárias. 16.86 4. 15. respectivamente.03 1. pode ser usada para a identificação de misturas complexas.16 Área relativa do pico 10. Como pode ser manipulado o fator de separação na: (a) Cromatografia gasosa? O fator de separação pode ser manipulado na cromatografia gasosa através de variações: na temperatura. forçada a passar através de uma fase estacionária imiscível fixa.0 mL. compostos iguais apresentam o mesmo tempo de retenção iguais. Determine a concentração de A (mg/mL) na amostra desconhecida. colocada em uma coluna ou sobre uma superfície sólida. As duas .0 mL de uma amostra desconhecida. (b) Cromatografia líquida? O fator de separação pode ser manipulado na cromatografia líquida através de variações: na pressão.

Cromatografia por Troca Iônica .Cromatografia por Exclusão Quanto à fase estacionária: .Cromatografia por Partição .Cromatografia por Adsorção . Como se classificam os métodos cromatográficos quanto à forma física.Cromatografia Planar: Cromatografia Centrífuga Cromatografia em Camada Delgada (CCP) Cromatografia em Papel (CP) Quanto ao modo de separação: . (c) Para que é utilizada a cromatografia? A cromatografia é um método de separação que encontra aplicação em todos os ramos da ciência. (b) Descreva fase móvel e estacionária. os componentes da amostra são separados em bandas ou zonas discretas. modo de separação e segundo a fase estacionária utilizada. Quanto à forma física: . Como conseqüência dessas velocidades de migração diferentes. Os componentes que são retidos mais fortemente na fase estacionária movem-se mais lentamente no fluxo da fase móvel. Já a fase estacionária comporta-se como um suporte para a fase móvel que deve ser de polaridade diferente desta. 18. Fase móvel é a fase responsável por arrastar os componentes das amostras de acordo com seu grau de afinidade.fases são escolhidas de modo que os componentes da amostra distribuam-se entre as fases móvel e estacionária em graus variados. Ao contrário.Cromatografia em coluna: Cromatografia Líquida Cromatografia Gasosa Cromatografia Supercrítica . os componentes que interagem mais fracamente com a fase estacionária movem-se mais rapidamente. Esta técnica pode ser utilizada para a identificação ou purificação de compostos e para a separação de componentes de uma mistura. que podem ser analisadas quantitativa ou qualitativamente.

No primeiro caso.Utilização de gás: Cromatografia Gasosa (CG) Cromatografia Gasosa de Alta Resolução (CGAR) . a fase móvel é um gás enquanto a fase estacionária é um líquido retido. Como se classificam os métodos cromatográficos segundo a fase móvel empregada? Quanto à fase móvel: . sendo geralmente a água um dos líquidos. Na cromatografia em papel. A eluição é feita por um fluxo de fase móvel gasosa inerte. Qual o princípio da cromatografia gasosa? Como a mesma é classificada segundo a fase estacionária? Na cromatografia gasosa.Cromatografia com fases Quimicamente Ligadas 19. a fase móvel também é um gás e a fase estacionária é um sólido que retém os analitos por adsorção física.Cromatografia por Líquida . estando um deles fixado a um suporte sólido. A organização molecular que compõe as cadeias de celulose do papel é polar 21. uma amostra líquida fui por uma tira de papel adsorvente vertical.Utilização de Gás Pressurizado: Cromatografia Supercrítica (CSC) 20.Utilização de líquido: Cromatografia Líquida Clássica (CLC) Cromatografia Líquida de Alta Eficiência (CLAE) . Quais as misturas que podem ser separadas por cromatografia gasosa? . Ao realizar uma separação por cromatografia gasosa.Cromatografia por Sólida . 22. Qual é o princípio da cromatografia em papel? A cromatografia em papel é uma técnica de partição líquido-líquido.. Baseia-se na diferença de solubilidade das substâncias em questão entre as duas fases imiscíveis. os componentes de uma amostra vaporizada são separados em conseqüência de sua partição entre uma fase móvel gasosa e uma fase estacionária líquida ou sólida contida dentro da coluna. por adsorção ou ligação química. a amostra é vaporizada e injetada na cabeça da coluna cromatográfica. O solvente é saturado em água e a partição se dá devido à presença de água em celulose (papel filtro). Dois tipos de cromatografia gasosa são encontrados: a cromatografia gás-líquido e cromatografia gás-sólido. No segundo caso. na superfície de um sólido inerte.

23. Na cromatografia Gasosa. São densamente empacotadas com fase estacionária de material uniforme. a temperatura da coluna de modo que ocorra a eluição tanto dos componentes mais voláteis quando dos menos voláteis. muitas vezes. o ideal seria aumentar gradativamente ou por etapas. Quais as principais características de um sistema de gás de arraste em cromatografia? O gás do sistema deve ser quimicamente inerte e apresentar alta pureza. resposta rápida independente da vazão. finamente dividido ou com suporte sólido que é recoberto com uma fina camada de fase estacionária. o que evita reações indesejáveis com o analito. de coluna tubular revestida com suporte. Se você tivesse que realizar. pelo menos. similaridade de resposta a todos os solutos e não-destrutivo (não destrua a amostra). 24. mais fase estacionária do que uma coluna revestida tendo. estabilidade térmica. numa análise cromatográfica de misturas complexas (constituintes com volatilidade muito diferentes). maior capacidade de amostra. Esse tipo de coluna retém.Podem ser separadas por cromatografia gasosa as misturas cujos constituintes sejam termicamente estáveis e voláteis e que dissolva. portanto. 28. Como nessas misturas encontram-se compostos com diferentes pontos de ebulição. a escolha da temperatura adequada é de fundamental importância. 27. 29. Cite as vantagens e desvantagens dos seguintes detectores: (a) Detector por condutividade térmica . Quais as características das colunas recheadas ou empacotadas em Cromatografia Gasosa? As colunas recheadas ou empacotadas em cromatografia gasosa são feitas de vidro. no gás da fase móvel. a superfície interna do capilar é recoberta por um filme fino de um material suporte. alta confiabilidade e facilidade de uso. metal ou de teflon. 25. 400 oC. Colunas de parede recoberta são simplesmente tubos capilares recobertos com uma fina camada de fase estacionária. Diferencie coluna tubular de parede recoberta. resposta linear aos solutos que se estenda a várias ordens de grandeza. quais as propriedades desejáveis para uma fase estacionária líquida? As propriedades desejadas para uma fase estacionária líquida são: baixa volatilidade. Quais as características para um detector ideal em cromatografia gasosa? Um detector ideal em cromatografia gasosa deve apresentar sensibilidade adequada. Já as colunas com suporte revestido. 26. faixa de temperatura desde ambiente até. pelo menos parcialmente. qual o critério você utilizaria para escolher a temperatura do sistema? Numa análise cromatográfica de misturas complexas. boa estabilidade e reprodutibilidade. inércia química e características do solventes apropriadas.

ocorrendo por absorção ou partição. (d) Detector termiônico Vantagem: alta sensibilidade para compostos que contenham fósforo e nitrogênio. resposta altamente dependente da vazão. o processo é interfacial. Descreva as características dos seguintes métodos de separação em cromatografia líquida. para muitos campos da ciência. A fase estacionária é uma matriz de composição inerte. (c) Detector por captura de elétrons Vantagem: alta sensibilidade. sua adequação à separação de espécies não-voláteis ou termicamente frágeis e. boa faixa linear. 30. ampla faixa linear de resposta. (d) Exclusão de tamanho: baseia-se em um processo puramente mecânico. acima de tudo. fácil utilização. com textura. Desvantagem: compostos com potenciais de ionização mais elevados não são detectados. Quando a fase estacionária é um líquido. superfície e distribuição de tamanho dos poros controlados. Desvantagem: destrói a amostra. ampla faixa linear de resposta. Desvantagem: destrói o analito. baixo ruído. (e) Detector por fotoionização Vantagem: faixa linear alta e detector mais sensível para hidrocarbonetos aromáticos e compostos organossulfurados ou organofosforados. simplicidade e não destrói a amostra. espalhado na superfície de um suporte sólido e inerte ou nas paredes de um tubo. resistência. (b) Detector por ionização em chama Vantagem: alta sensibilidade. 31. dipolares (Van Der Waals) ou ligações de hidrogênio. sua ampla aplicabilidade a substâncias de grande interesse para a indústria. A fase móvel é geralmente uma solução iônica com propriedades tamponantes escolhidas de forma a ser compatível com o tipo de trocador usado. seletividade para compostos que contém halogênio e muitos outros. Quais as características de um HPLC? A cromatografia líquida de alta eficiência é a mais usada de todas as técnicas analíticas de separação devido à sua sensibilidade.Vantagem: grande aplicabilidade geral. (a) Adsorção ou líquido-sólida: processo baseado em interações eletrostáticas. (b) Partição: a fase estacionária é um segundo líquido que é imiscível com o líquido da fase móvel. que ocorrem entre grupos ativos presentes na superfície da fase estacionária sólida e a fase móvel. (c) Troca iônica: a fase estacionária é constituída de uma matriz onde são adicionados grupos funcionais ionizáveis. fácil adaptação para medidas quantitativas apuradas. Desvantagem: faixa linear estreita. Desvantagem: baixa sensibilidade. Os . não é aplicável a muitos analitos. que se baseia nas diferentes solubilidades dos componentes da amostra na fase estacionária.

32. Quais as características da fase móvel na cromatografia líquida? A fase móvel não pode alterar a coluna. . deve ser compatível com o detector. ter baixa viscosidade.componentes presentes na fase móvel podem ser separados pela diferença de tamanho das partículas no qual partículas menores conseguem penetrar nos poros da fase estacionária enquanto as partículas maiores não. ser de alta pureza e não tóxica. permitir a recuperação da amostra. dissolver a amostra (diluir).

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