1.

Sobre a técnica cromatografia em camada delgada, responda:
(a) Quais os fundamentos básicos? A cromatografia em camada delgada (ou fina) é uma técnica de adsorção líquido-sólido bastante simples e barata, que consiste na separação de uma mistura através da migração por capilaridade diferencial de seus componentes sobre uma camada delgada de adsorvente retido sobre uma superfície plana. Na cromatografia de camada delgada, a fase móvel (líquido) ascende por ação de capilaridade por uma camada fina do adsorvente (fase estacionária) estendida sobre um suporte. O suporte mais típico é uma placa de vidro. Sobre a placa espalha-se uma fina camada de adsorvente suspenso em água ou outro solvente e deixa-se secar. A placa coberta chama-se “placa de camada fina ou placa cromatográfica”. Quando a placa cromatográfica é colocada verticalmente em um recipiente fechado (cuba cromatográfica) que contém uma pequena quantidade de solvente, este eluirá pela camada do adsorvente por ação capilar.

(b) Cite os usos mais consagrados da técnica (importância). A cromatografia em camada delgada é usada para determinar a pureza do composto, identificar componentes em uma mistura comparando-os com padrões, acompanhar o curso de uma reação pelo aparecimento dos produtos e desaparecimento de um dos reagentes e ainda para isolar componentes puros de uma mistura. (c) Enumere as vantagens e desvantagens da técnica. A cromatografia em camada delgada é uma técnica simples, de fácil compreensão e execução, de baixo custo, apresenta separação relativamente rápida, é versátil, e reprodutível quando se tem prática. Entretanto, como envolve processos manuais, como por exemplo a preparação da placa e aplicação da amostra, pode causar erros. Essa técnica não possui, também, boa eficiência em análise quantitativa.

(d) O que é e como é calculado o Rf (Fator de Retardamento)?
Parâmetro usado frequentemente em cromatografia, o Rf é definido como a razão entre a distância percorrida pela mancha do componente e a distância percorrida pelo eluente, ou seja:

(e) Como o fator de retenção de um soluto pode ser alterado? O fator de retenção pode ser alterado através de mudanças nas fases estacionária e/ou móvel. Essa cuba reveladora pode ser constituída de vapor de iodo que reage com compostos orgânicos formando complexo colorido. (f) Que características deve ter um solvente para ser considerado um bom eluente de desenvolvimento? Para ser considerado um bom eluente. (g) Quais artifícios podem ser utilizados quando suspeitamos que um componente da amostra a ser analisada pode não ser visível a olho nu? Quando algum componente da amostra não é visível a olho nu. tricloreto de antimônio ou permanganato de potássio seguido de aquecimento para ocorrer a reação cromogênica. (d) cromatografia em fase estacionária reversa: a fase móvel é polar e a fase estacionária apolar. pode ser utilizada uma cuba reveladora para sua visualização. 2. e d 2 a distância percorrida pelo eluente. no volume ou na concentração da substância aplicada. Outras alternativas para se revelar a placa cromatográfica. eluição com um único solvente ou com uma mistura de solventes de composição constante. apresentar baixa viscosidade e não interagir com o soluto. seriam a utilização de luz ultravioleta ou de reveladores energéticos como ácido sulfúrico. Sugira um tipo de cromatografia líquida que seja adequada para separar: a) e . 3.Rf = d1d2 Onde: Rf é o fator de retardamento. d1 a distância percorrida pela mancha do componente. o solvente deve ser volátil. (b) eluição isocrática: eluição com composição da fase móvel constante. (c) cromatografia em fase estacionária normal: a fase estacionária é mais polar do que a fase móvel. mudanças na temperatura. Defina: (a) eluição com gradiente: a composição da fase móvel é variada durante a eluição. ou seja. a fase móvel é formada por dois ou mais solventes onde a razão entre estes é variada durante o processo de eluição. ou seja.

já que este é apolar e teria maior afinidade com a fase estacionária que também é apolar. Em uma coluna de sílica gel. o tempo de retenção é de 28 minutos. tetracloreto de carbono ou clorofórmio. Com isso. do que a sílica gel. eluirá mais. No preparo de um gradiente de benzeno/acetona para HPLC em coluna de sílica gel. utilizando-se um solvente apolar. utilizando-se o clorofórmio que é polar. Que solvente. é desejável aumentar ou diminuir a proporção de benzeno conforme a coluna é eluída? Explique sua resposta. tivesse sido usado. 6. deve-se diminuir a proporção de benzeno no gradiente já que este é o componente apolar da fase móvel. a fase estacionária é saturada com água que é um solvente polar. deve ser usado um solvente mais polar do que a fase estacionária. 7. Se um líquido apolar. deve-se aumentar a polaridade da fase móvel e. um solvente de polaridade intermediária. e a fase móvel também polar. a fase estacionária é saturada com água e o solvente transportador é uma solução de HCl em acetona. Para que estes sejam eluídos. para isso. Como se trata de uma cromatografia em papel. Prediga os valores relativos do fator de retenção dos três sais. como líquido estacionário. o tempo de retenção para o n-pentano seria maior. sendo formada por uma solução de HCl em acetona. Assim. os analitos polares ficarão retidos no sistema. Como a sílica gel é polar e utilizando o tolueno que é um solvente apolar. Para que este diminua. Como o líquido estacionário didecilftalato é um solvente de polaridade intermediária. ou seja. ao ser trocado pelo óleo de silicone que é um líquido apolar. As solubilidades relativas dos seguintes cloretos em ácido clorídrico concentrado são CuCl 2 > CoCl2 > NiCl2. Uma cromatografia gás-líquido foi operada com didecilftalato.→ Cromatografia por adsorção (isômeros) b) CH3CH2OH e CH3CH2CH2OH → Cromatografia por partição c) Ba2+ e Sr2+ → Cromatografia por partição (papel) d) C4H9COOH e C5H11COOH → Cromatografia por partição e) Glicosídeos de alta massa molecular → Cromatografia por exclusão por tamanho. Como a fase estacionária do sistema (sílica gel) é polar. o tempo de retenção para n-pentano seria menor ou maior? Explique sua resposta. ou seja. aparentemente diminuiria o tempo de retenção? Explique. como óleo de silicone. Cátions inorgânicos podem ser separados por cromatografia líquida segundo sua capacidade de formar complexos com íons cloreto. Para a separação. 4. o tempo de retenção será menor 5. o sal que for mais solúvel em HCl apresentará menor fator de retenção. tornando-a mais polar. encontrou-se um composto com tempo de retenção de 28 min quando a fase móvel era tolueno. a ordem dos fatores de retenção será: .

separação das substâncias indesejáveis ou dos componentes de uma mistura. CH 3OH. ou seja. a mais polar seria o cloreto de metileno contendo 50% de acetato de etila e o menos polar o cloreto de metileno puro. quanto maior a polaridade do eluente. Quanto mais polar for o ácido. portanto. acompanha-se a reação química utilizando-se uma placa cromatográfica até que se observe a formação de um produto com o mesmo fator de retenção do padrão que foi estudado anteriormente 12. Explique o fundamento das técnicas de cromatografia em camada delgada em escala analítica e em escala preparativa. que é um solvente polar. maior o fator de retenção do β-naftol (mais polar do que a p-toluidina). apresentará o maior fator de retenção e o maior tempo de eluição. Os aminoácidos que foram separados nessa coluna são: (a) HOOCH(NH2)CH2OH e (b) HOOCCH(NH2)CH3. vai eluir menos. ou seja. que por ser menos polar. Em seguida. Para as composições dos solventes dadas.CuCl2>CoCl2>NiCl2 8. ou seja. 9. Uma solução diluída de β-naftol e outra de p-toluidina foram aplicadas em placas cromatográficas de sílica gel. deve-se montar uma placa cromatográfica contendo os padrões dos reagentes separados e do produto a ser obtido e determinar o fator de retenção correspondente a cada uma das espécies. Que efeito é esperado sobre os valores de Rf dos dois compostos. Um par de aminoácidos foi separado em uma coluna na qual a fase estacionária está saturada com água e o solvente transportador é o metanol. mas fortemente ele é adsorvido pela fase estacionária. Que aminoácido você esperaria que tivesse o maior fator de retenção? Explique seu raciocínio. apresentará o menor fator de retenção. ele vai eluir mais sobre a placa cromatográfica. o aminoácido mais polar apresentará maior afinidade pela fase estacionária. A cromatografia em escala analítica trata-se da identificação e quantificação de compostos enquanto em escala preparativa trabalha-se com purificação de compostos. Contudo. Como a fase estacionária é saturada com água. da fase móvel. o aminoácido A apresentará o maior fator de retenção por ser o mais polar. cloreto de metileno contendo 25% de acetato de etila e cloreto de metileno contendo 50% de acetato de etila. 10. Como é possível verificar o fim de uma reação química utilizando-se a técnica de cromatografia em camada delgada (CCD)? Para se verificar o fim da reação química utilizando cromatografia em camada delgada. Como a fase estacionária (sílica gel) é polar. O contrário ocorre com a p-toluidina. e a fase móvel (metanol) também é polar. Como é realizada a confirmação da identidade (análise qualitativa) de compostos quando a análise emprega CLAE (Cromatografia Líquida de Alta Eficiência)? . 11. Os cromatogramas foram obtidos utilizando-se 3 diferentes eluentes: cloreto de metileno puro. considerando o aumento da proporção do acetato de etila nas fases móveis? Justifique sua resposta.

É definida como a separação de dois ou mais compostos diferentes por distribuição entre fases. nas composições das fases móveis e estacionárias. Responda as seguintes questões: (a) O que é cromatografia? A cromatografia é uma técnica para analisar.49 mg de B com 10. nas composições das fases móveis e estacionárias. e diluindo a mistura formada a 25. Discuta por que a combinação da cromatografia gasosa com a espectrometria de massas é tão vantajosa. forçada a passar através de uma fase estacionária imiscível fixa.86 4. nos tamanhos das partículas.97 e 6. 16. Determine a concentração de A (mg/mL) na amostra desconhecida. móvel. 17. por ser uma técnica hifenizada. colocada em uma coluna ou sobre uma superfície sólida.Cromatografia Líquida de Alta Eficiência a confirmação da identidade de um composto é feita através da comparação entre os tempos de retenção das substâncias e dos padrões. respectivamente. Em todas as separações cromatográficas. (b) Cromatografia líquida? O fator de separação pode ser manipulado na cromatografia líquida através de variações: na pressão. compostos iguais apresentam o mesmo tempo de retenção iguais. um líquido ou um fluido supercrítico. As duas . então. 15. ou seja. uma das quais é estacionária (fixa) e a outra. A combinação da cromatografia gasosa com a espectrometria de massas.38 para A e B. contendo apenas A. identificar ou separar os componentes de uma mistura. com tempos de retenção próximos.0 mL.37 Uma solução foi preparada através da mistura de 12. pode ser usada para a identificação de misturas complexas. mas não podem ser separadas por Cromatografia Gasosa? Substâncias não-voláteis ou termicamente frágeis podem ser separadas por Cromatografia Líquida de Alta Eficiência e não por Cromatografia Gasosa. Essa fase móvel é. nos tamanhos das partículas. Uma mistura conhecida de compostos A e B produziu os seguintes resultados da CLAE: Composto A B Concentração (mg/mL) 1. Essa técnica baseia-se no princípio da adsorção seletiva. 13.03 1.0 mL de uma amostra desconhecida. Foram observadas áreas de picos de 5. 14.16 Área relativa do pico 10. Como pode ser manipulado o fator de separação na: (a) Cromatografia gasosa? O fator de separação pode ser manipulado na cromatografia gasosa através de variações: na temperatura. a amostra é transportada por uma fase móvel. Quais espécies podem ser separadas por Cromatografia Líquida de Alta Eficiência. que pode ser um gás.

os componentes que interagem mais fracamente com a fase estacionária movem-se mais rapidamente. (b) Descreva fase móvel e estacionária.Cromatografia por Partição .fases são escolhidas de modo que os componentes da amostra distribuam-se entre as fases móvel e estacionária em graus variados.Cromatografia Planar: Cromatografia Centrífuga Cromatografia em Camada Delgada (CCP) Cromatografia em Papel (CP) Quanto ao modo de separação: . (c) Para que é utilizada a cromatografia? A cromatografia é um método de separação que encontra aplicação em todos os ramos da ciência. Ao contrário. 18. que podem ser analisadas quantitativa ou qualitativamente. Como se classificam os métodos cromatográficos quanto à forma física.Cromatografia por Exclusão Quanto à fase estacionária: . modo de separação e segundo a fase estacionária utilizada. os componentes da amostra são separados em bandas ou zonas discretas. Fase móvel é a fase responsável por arrastar os componentes das amostras de acordo com seu grau de afinidade.Cromatografia por Troca Iônica .Cromatografia por Adsorção . Como conseqüência dessas velocidades de migração diferentes.Cromatografia em coluna: Cromatografia Líquida Cromatografia Gasosa Cromatografia Supercrítica . Já a fase estacionária comporta-se como um suporte para a fase móvel que deve ser de polaridade diferente desta. Quanto à forma física: . Esta técnica pode ser utilizada para a identificação ou purificação de compostos e para a separação de componentes de uma mistura. Os componentes que são retidos mais fortemente na fase estacionária movem-se mais lentamente no fluxo da fase móvel.

Cromatografia por Líquida . Qual o princípio da cromatografia gasosa? Como a mesma é classificada segundo a fase estacionária? Na cromatografia gasosa. por adsorção ou ligação química. a fase móvel é um gás enquanto a fase estacionária é um líquido retido. os componentes de uma amostra vaporizada são separados em conseqüência de sua partição entre uma fase móvel gasosa e uma fase estacionária líquida ou sólida contida dentro da coluna. Como se classificam os métodos cromatográficos segundo a fase móvel empregada? Quanto à fase móvel: . sendo geralmente a água um dos líquidos.Utilização de gás: Cromatografia Gasosa (CG) Cromatografia Gasosa de Alta Resolução (CGAR) . Na cromatografia em papel.Utilização de líquido: Cromatografia Líquida Clássica (CLC) Cromatografia Líquida de Alta Eficiência (CLAE) . Dois tipos de cromatografia gasosa são encontrados: a cromatografia gás-líquido e cromatografia gás-sólido. uma amostra líquida fui por uma tira de papel adsorvente vertical. na superfície de um sólido inerte. Qual é o princípio da cromatografia em papel? A cromatografia em papel é uma técnica de partição líquido-líquido. 22.Utilização de Gás Pressurizado: Cromatografia Supercrítica (CSC) 20.. O solvente é saturado em água e a partição se dá devido à presença de água em celulose (papel filtro).Cromatografia por Sólida .Cromatografia com fases Quimicamente Ligadas 19. A eluição é feita por um fluxo de fase móvel gasosa inerte. estando um deles fixado a um suporte sólido. Baseia-se na diferença de solubilidade das substâncias em questão entre as duas fases imiscíveis. a amostra é vaporizada e injetada na cabeça da coluna cromatográfica. Quais as misturas que podem ser separadas por cromatografia gasosa? . Ao realizar uma separação por cromatografia gasosa. No segundo caso. A organização molecular que compõe as cadeias de celulose do papel é polar 21. a fase móvel também é um gás e a fase estacionária é um sólido que retém os analitos por adsorção física. No primeiro caso.

pelo menos parcialmente. Diferencie coluna tubular de parede recoberta. de coluna tubular revestida com suporte. Cite as vantagens e desvantagens dos seguintes detectores: (a) Detector por condutividade térmica . 27. 28. muitas vezes. estabilidade térmica. a escolha da temperatura adequada é de fundamental importância. 24. o ideal seria aumentar gradativamente ou por etapas. Quais as principais características de um sistema de gás de arraste em cromatografia? O gás do sistema deve ser quimicamente inerte e apresentar alta pureza. a temperatura da coluna de modo que ocorra a eluição tanto dos componentes mais voláteis quando dos menos voláteis. Colunas de parede recoberta são simplesmente tubos capilares recobertos com uma fina camada de fase estacionária. Quais as características das colunas recheadas ou empacotadas em Cromatografia Gasosa? As colunas recheadas ou empacotadas em cromatografia gasosa são feitas de vidro. 400 oC.Podem ser separadas por cromatografia gasosa as misturas cujos constituintes sejam termicamente estáveis e voláteis e que dissolva. 26. a superfície interna do capilar é recoberta por um filme fino de um material suporte. 29. numa análise cromatográfica de misturas complexas (constituintes com volatilidade muito diferentes). faixa de temperatura desde ambiente até. 23. no gás da fase móvel. o que evita reações indesejáveis com o analito. Esse tipo de coluna retém. maior capacidade de amostra. inércia química e características do solventes apropriadas. finamente dividido ou com suporte sólido que é recoberto com uma fina camada de fase estacionária. portanto. resposta rápida independente da vazão. Se você tivesse que realizar. metal ou de teflon. Como nessas misturas encontram-se compostos com diferentes pontos de ebulição. Na cromatografia Gasosa. 25. qual o critério você utilizaria para escolher a temperatura do sistema? Numa análise cromatográfica de misturas complexas. São densamente empacotadas com fase estacionária de material uniforme. quais as propriedades desejáveis para uma fase estacionária líquida? As propriedades desejadas para uma fase estacionária líquida são: baixa volatilidade. pelo menos. mais fase estacionária do que uma coluna revestida tendo. Já as colunas com suporte revestido. resposta linear aos solutos que se estenda a várias ordens de grandeza. Quais as características para um detector ideal em cromatografia gasosa? Um detector ideal em cromatografia gasosa deve apresentar sensibilidade adequada. alta confiabilidade e facilidade de uso. similaridade de resposta a todos os solutos e não-destrutivo (não destrua a amostra). boa estabilidade e reprodutibilidade.

Vantagem: grande aplicabilidade geral. (e) Detector por fotoionização Vantagem: faixa linear alta e detector mais sensível para hidrocarbonetos aromáticos e compostos organossulfurados ou organofosforados. Desvantagem: destrói a amostra. sua ampla aplicabilidade a substâncias de grande interesse para a indústria. A fase estacionária é uma matriz de composição inerte. seletividade para compostos que contém halogênio e muitos outros. (c) Detector por captura de elétrons Vantagem: alta sensibilidade. (c) Troca iônica: a fase estacionária é constituída de uma matriz onde são adicionados grupos funcionais ionizáveis. ampla faixa linear de resposta. (b) Detector por ionização em chama Vantagem: alta sensibilidade. Descreva as características dos seguintes métodos de separação em cromatografia líquida. fácil adaptação para medidas quantitativas apuradas. resistência. que se baseia nas diferentes solubilidades dos componentes da amostra na fase estacionária. 31. simplicidade e não destrói a amostra. que ocorrem entre grupos ativos presentes na superfície da fase estacionária sólida e a fase móvel. com textura. (d) Detector termiônico Vantagem: alta sensibilidade para compostos que contenham fósforo e nitrogênio. baixo ruído. o processo é interfacial. Os . (a) Adsorção ou líquido-sólida: processo baseado em interações eletrostáticas. boa faixa linear. dipolares (Van Der Waals) ou ligações de hidrogênio. para muitos campos da ciência. fácil utilização. sua adequação à separação de espécies não-voláteis ou termicamente frágeis e. espalhado na superfície de um suporte sólido e inerte ou nas paredes de um tubo. Desvantagem: compostos com potenciais de ionização mais elevados não são detectados. superfície e distribuição de tamanho dos poros controlados. resposta altamente dependente da vazão. Desvantagem: baixa sensibilidade. Quando a fase estacionária é um líquido. Quais as características de um HPLC? A cromatografia líquida de alta eficiência é a mais usada de todas as técnicas analíticas de separação devido à sua sensibilidade. (d) Exclusão de tamanho: baseia-se em um processo puramente mecânico. Desvantagem: destrói o analito. não é aplicável a muitos analitos. ocorrendo por absorção ou partição. 30. acima de tudo. (b) Partição: a fase estacionária é um segundo líquido que é imiscível com o líquido da fase móvel. Desvantagem: faixa linear estreita. A fase móvel é geralmente uma solução iônica com propriedades tamponantes escolhidas de forma a ser compatível com o tipo de trocador usado. ampla faixa linear de resposta.

componentes presentes na fase móvel podem ser separados pela diferença de tamanho das partículas no qual partículas menores conseguem penetrar nos poros da fase estacionária enquanto as partículas maiores não. ser de alta pureza e não tóxica. 32. deve ser compatível com o detector. ter baixa viscosidade. Quais as características da fase móvel na cromatografia líquida? A fase móvel não pode alterar a coluna. . dissolver a amostra (diluir). permitir a recuperação da amostra.

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