1.

Sobre a técnica cromatografia em camada delgada, responda:
(a) Quais os fundamentos básicos? A cromatografia em camada delgada (ou fina) é uma técnica de adsorção líquido-sólido bastante simples e barata, que consiste na separação de uma mistura através da migração por capilaridade diferencial de seus componentes sobre uma camada delgada de adsorvente retido sobre uma superfície plana. Na cromatografia de camada delgada, a fase móvel (líquido) ascende por ação de capilaridade por uma camada fina do adsorvente (fase estacionária) estendida sobre um suporte. O suporte mais típico é uma placa de vidro. Sobre a placa espalha-se uma fina camada de adsorvente suspenso em água ou outro solvente e deixa-se secar. A placa coberta chama-se “placa de camada fina ou placa cromatográfica”. Quando a placa cromatográfica é colocada verticalmente em um recipiente fechado (cuba cromatográfica) que contém uma pequena quantidade de solvente, este eluirá pela camada do adsorvente por ação capilar.

(b) Cite os usos mais consagrados da técnica (importância). A cromatografia em camada delgada é usada para determinar a pureza do composto, identificar componentes em uma mistura comparando-os com padrões, acompanhar o curso de uma reação pelo aparecimento dos produtos e desaparecimento de um dos reagentes e ainda para isolar componentes puros de uma mistura. (c) Enumere as vantagens e desvantagens da técnica. A cromatografia em camada delgada é uma técnica simples, de fácil compreensão e execução, de baixo custo, apresenta separação relativamente rápida, é versátil, e reprodutível quando se tem prática. Entretanto, como envolve processos manuais, como por exemplo a preparação da placa e aplicação da amostra, pode causar erros. Essa técnica não possui, também, boa eficiência em análise quantitativa.

(d) O que é e como é calculado o Rf (Fator de Retardamento)?
Parâmetro usado frequentemente em cromatografia, o Rf é definido como a razão entre a distância percorrida pela mancha do componente e a distância percorrida pelo eluente, ou seja:

Rf = d1d2 Onde: Rf é o fator de retardamento. a fase móvel é formada por dois ou mais solventes onde a razão entre estes é variada durante o processo de eluição. (f) Que características deve ter um solvente para ser considerado um bom eluente de desenvolvimento? Para ser considerado um bom eluente. Sugira um tipo de cromatografia líquida que seja adequada para separar: a) e . no volume ou na concentração da substância aplicada. d1 a distância percorrida pela mancha do componente. 2. ou seja. Essa cuba reveladora pode ser constituída de vapor de iodo que reage com compostos orgânicos formando complexo colorido. 3. pode ser utilizada uma cuba reveladora para sua visualização. (e) Como o fator de retenção de um soluto pode ser alterado? O fator de retenção pode ser alterado através de mudanças nas fases estacionária e/ou móvel. (d) cromatografia em fase estacionária reversa: a fase móvel é polar e a fase estacionária apolar. mudanças na temperatura. eluição com um único solvente ou com uma mistura de solventes de composição constante. e d 2 a distância percorrida pelo eluente. Defina: (a) eluição com gradiente: a composição da fase móvel é variada durante a eluição. (c) cromatografia em fase estacionária normal: a fase estacionária é mais polar do que a fase móvel. Outras alternativas para se revelar a placa cromatográfica. o solvente deve ser volátil. ou seja. apresentar baixa viscosidade e não interagir com o soluto. seriam a utilização de luz ultravioleta ou de reveladores energéticos como ácido sulfúrico. (b) eluição isocrática: eluição com composição da fase móvel constante. (g) Quais artifícios podem ser utilizados quando suspeitamos que um componente da amostra a ser analisada pode não ser visível a olho nu? Quando algum componente da amostra não é visível a olho nu. tricloreto de antimônio ou permanganato de potássio seguido de aquecimento para ocorrer a reação cromogênica.

Se um líquido apolar. a fase estacionária é saturada com água que é um solvente polar. aparentemente diminuiria o tempo de retenção? Explique. do que a sílica gel. Assim. o tempo de retenção será menor 5. Prediga os valores relativos do fator de retenção dos três sais. deve-se aumentar a polaridade da fase móvel e. Como a fase estacionária do sistema (sílica gel) é polar. As solubilidades relativas dos seguintes cloretos em ácido clorídrico concentrado são CuCl 2 > CoCl2 > NiCl2. é desejável aumentar ou diminuir a proporção de benzeno conforme a coluna é eluída? Explique sua resposta. a ordem dos fatores de retenção será: . Uma cromatografia gás-líquido foi operada com didecilftalato. Como o líquido estacionário didecilftalato é um solvente de polaridade intermediária.→ Cromatografia por adsorção (isômeros) b) CH3CH2OH e CH3CH2CH2OH → Cromatografia por partição c) Ba2+ e Sr2+ → Cromatografia por partição (papel) d) C4H9COOH e C5H11COOH → Cromatografia por partição e) Glicosídeos de alta massa molecular → Cromatografia por exclusão por tamanho. e a fase móvel também polar. eluirá mais. tivesse sido usado. utilizando-se o clorofórmio que é polar. o sal que for mais solúvel em HCl apresentará menor fator de retenção. Com isso. o tempo de retenção para n-pentano seria menor ou maior? Explique sua resposta. ao ser trocado pelo óleo de silicone que é um líquido apolar. um solvente de polaridade intermediária. o tempo de retenção é de 28 minutos. deve ser usado um solvente mais polar do que a fase estacionária. Para que este diminua. como óleo de silicone. Cátions inorgânicos podem ser separados por cromatografia líquida segundo sua capacidade de formar complexos com íons cloreto. os analitos polares ficarão retidos no sistema. deve-se diminuir a proporção de benzeno no gradiente já que este é o componente apolar da fase móvel. ou seja. tornando-a mais polar. já que este é apolar e teria maior afinidade com a fase estacionária que também é apolar. como líquido estacionário. o tempo de retenção para o n-pentano seria maior. Em uma coluna de sílica gel. 7. Para a separação. encontrou-se um composto com tempo de retenção de 28 min quando a fase móvel era tolueno. para isso. Como se trata de uma cromatografia em papel. sendo formada por uma solução de HCl em acetona. tetracloreto de carbono ou clorofórmio. Que solvente. Para que estes sejam eluídos. ou seja. utilizando-se um solvente apolar. 4. Como a sílica gel é polar e utilizando o tolueno que é um solvente apolar. a fase estacionária é saturada com água e o solvente transportador é uma solução de HCl em acetona. 6. No preparo de um gradiente de benzeno/acetona para HPLC em coluna de sílica gel.

Um par de aminoácidos foi separado em uma coluna na qual a fase estacionária está saturada com água e o solvente transportador é o metanol. maior o fator de retenção do β-naftol (mais polar do que a p-toluidina). que é um solvente polar. o aminoácido A apresentará o maior fator de retenção por ser o mais polar. mas fortemente ele é adsorvido pela fase estacionária. Em seguida. 10. Que efeito é esperado sobre os valores de Rf dos dois compostos. separação das substâncias indesejáveis ou dos componentes de uma mistura. Que aminoácido você esperaria que tivesse o maior fator de retenção? Explique seu raciocínio. que por ser menos polar.CuCl2>CoCl2>NiCl2 8. portanto. 9. 11. da fase móvel. Uma solução diluída de β-naftol e outra de p-toluidina foram aplicadas em placas cromatográficas de sílica gel. ou seja. Para as composições dos solventes dadas. a mais polar seria o cloreto de metileno contendo 50% de acetato de etila e o menos polar o cloreto de metileno puro. CH 3OH. O contrário ocorre com a p-toluidina. Explique o fundamento das técnicas de cromatografia em camada delgada em escala analítica e em escala preparativa. apresentará o menor fator de retenção. Como a fase estacionária é saturada com água. considerando o aumento da proporção do acetato de etila nas fases móveis? Justifique sua resposta. Os cromatogramas foram obtidos utilizando-se 3 diferentes eluentes: cloreto de metileno puro. quanto maior a polaridade do eluente. Como é realizada a confirmação da identidade (análise qualitativa) de compostos quando a análise emprega CLAE (Cromatografia Líquida de Alta Eficiência)? . e a fase móvel (metanol) também é polar. Contudo. Como a fase estacionária (sílica gel) é polar. A cromatografia em escala analítica trata-se da identificação e quantificação de compostos enquanto em escala preparativa trabalha-se com purificação de compostos. deve-se montar uma placa cromatográfica contendo os padrões dos reagentes separados e do produto a ser obtido e determinar o fator de retenção correspondente a cada uma das espécies. Quanto mais polar for o ácido. Como é possível verificar o fim de uma reação química utilizando-se a técnica de cromatografia em camada delgada (CCD)? Para se verificar o fim da reação química utilizando cromatografia em camada delgada. apresentará o maior fator de retenção e o maior tempo de eluição. ou seja. o aminoácido mais polar apresentará maior afinidade pela fase estacionária. vai eluir menos. ou seja. Os aminoácidos que foram separados nessa coluna são: (a) HOOCH(NH2)CH2OH e (b) HOOCCH(NH2)CH3. ele vai eluir mais sobre a placa cromatográfica. acompanha-se a reação química utilizando-se uma placa cromatográfica até que se observe a formação de um produto com o mesmo fator de retenção do padrão que foi estudado anteriormente 12. cloreto de metileno contendo 25% de acetato de etila e cloreto de metileno contendo 50% de acetato de etila.

nos tamanhos das partículas.97 e 6.Cromatografia Líquida de Alta Eficiência a confirmação da identidade de um composto é feita através da comparação entre os tempos de retenção das substâncias e dos padrões. então. A combinação da cromatografia gasosa com a espectrometria de massas.0 mL. Discuta por que a combinação da cromatografia gasosa com a espectrometria de massas é tão vantajosa. nos tamanhos das partículas. nas composições das fases móveis e estacionárias.37 Uma solução foi preparada através da mistura de 12. nas composições das fases móveis e estacionárias. Uma mistura conhecida de compostos A e B produziu os seguintes resultados da CLAE: Composto A B Concentração (mg/mL) 1. Responda as seguintes questões: (a) O que é cromatografia? A cromatografia é uma técnica para analisar. É definida como a separação de dois ou mais compostos diferentes por distribuição entre fases. 14. e diluindo a mistura formada a 25. Em todas as separações cromatográficas. mas não podem ser separadas por Cromatografia Gasosa? Substâncias não-voláteis ou termicamente frágeis podem ser separadas por Cromatografia Líquida de Alta Eficiência e não por Cromatografia Gasosa. a amostra é transportada por uma fase móvel. As duas .38 para A e B. 13. Foram observadas áreas de picos de 5. (b) Cromatografia líquida? O fator de separação pode ser manipulado na cromatografia líquida através de variações: na pressão. contendo apenas A. ou seja. que pode ser um gás.86 4. Essa técnica baseia-se no princípio da adsorção seletiva. forçada a passar através de uma fase estacionária imiscível fixa. Quais espécies podem ser separadas por Cromatografia Líquida de Alta Eficiência. por ser uma técnica hifenizada. pode ser usada para a identificação de misturas complexas. identificar ou separar os componentes de uma mistura.49 mg de B com 10. 16. Determine a concentração de A (mg/mL) na amostra desconhecida. colocada em uma coluna ou sobre uma superfície sólida. móvel. respectivamente. um líquido ou um fluido supercrítico.16 Área relativa do pico 10. compostos iguais apresentam o mesmo tempo de retenção iguais.03 1. 17. uma das quais é estacionária (fixa) e a outra.0 mL de uma amostra desconhecida. Como pode ser manipulado o fator de separação na: (a) Cromatografia gasosa? O fator de separação pode ser manipulado na cromatografia gasosa através de variações: na temperatura. Essa fase móvel é. com tempos de retenção próximos. 15.

os componentes que interagem mais fracamente com a fase estacionária movem-se mais rapidamente.Cromatografia por Exclusão Quanto à fase estacionária: .Cromatografia por Adsorção . Fase móvel é a fase responsável por arrastar os componentes das amostras de acordo com seu grau de afinidade. 18. Quanto à forma física: . modo de separação e segundo a fase estacionária utilizada.Cromatografia por Partição . Ao contrário. os componentes da amostra são separados em bandas ou zonas discretas. Como conseqüência dessas velocidades de migração diferentes. que podem ser analisadas quantitativa ou qualitativamente. Os componentes que são retidos mais fortemente na fase estacionária movem-se mais lentamente no fluxo da fase móvel. (b) Descreva fase móvel e estacionária. Como se classificam os métodos cromatográficos quanto à forma física.Cromatografia Planar: Cromatografia Centrífuga Cromatografia em Camada Delgada (CCP) Cromatografia em Papel (CP) Quanto ao modo de separação: . Já a fase estacionária comporta-se como um suporte para a fase móvel que deve ser de polaridade diferente desta. (c) Para que é utilizada a cromatografia? A cromatografia é um método de separação que encontra aplicação em todos os ramos da ciência.Cromatografia em coluna: Cromatografia Líquida Cromatografia Gasosa Cromatografia Supercrítica .fases são escolhidas de modo que os componentes da amostra distribuam-se entre as fases móvel e estacionária em graus variados.Cromatografia por Troca Iônica . Esta técnica pode ser utilizada para a identificação ou purificação de compostos e para a separação de componentes de uma mistura.

Quais as misturas que podem ser separadas por cromatografia gasosa? . A organização molecular que compõe as cadeias de celulose do papel é polar 21. a fase móvel é um gás enquanto a fase estacionária é um líquido retido. Como se classificam os métodos cromatográficos segundo a fase móvel empregada? Quanto à fase móvel: . Na cromatografia em papel.Utilização de Gás Pressurizado: Cromatografia Supercrítica (CSC) 20. No primeiro caso. os componentes de uma amostra vaporizada são separados em conseqüência de sua partição entre uma fase móvel gasosa e uma fase estacionária líquida ou sólida contida dentro da coluna.Utilização de gás: Cromatografia Gasosa (CG) Cromatografia Gasosa de Alta Resolução (CGAR) .Cromatografia por Líquida . Dois tipos de cromatografia gasosa são encontrados: a cromatografia gás-líquido e cromatografia gás-sólido. O solvente é saturado em água e a partição se dá devido à presença de água em celulose (papel filtro). Baseia-se na diferença de solubilidade das substâncias em questão entre as duas fases imiscíveis.Utilização de líquido: Cromatografia Líquida Clássica (CLC) Cromatografia Líquida de Alta Eficiência (CLAE) . Ao realizar uma separação por cromatografia gasosa. Qual o princípio da cromatografia gasosa? Como a mesma é classificada segundo a fase estacionária? Na cromatografia gasosa. estando um deles fixado a um suporte sólido.Cromatografia com fases Quimicamente Ligadas 19.. Qual é o princípio da cromatografia em papel? A cromatografia em papel é uma técnica de partição líquido-líquido. No segundo caso. 22. A eluição é feita por um fluxo de fase móvel gasosa inerte. por adsorção ou ligação química. a amostra é vaporizada e injetada na cabeça da coluna cromatográfica. a fase móvel também é um gás e a fase estacionária é um sólido que retém os analitos por adsorção física.Cromatografia por Sólida . uma amostra líquida fui por uma tira de papel adsorvente vertical. sendo geralmente a água um dos líquidos. na superfície de um sólido inerte.

muitas vezes. boa estabilidade e reprodutibilidade. portanto. resposta linear aos solutos que se estenda a várias ordens de grandeza. pelo menos. qual o critério você utilizaria para escolher a temperatura do sistema? Numa análise cromatográfica de misturas complexas. no gás da fase móvel. o ideal seria aumentar gradativamente ou por etapas. Esse tipo de coluna retém. numa análise cromatográfica de misturas complexas (constituintes com volatilidade muito diferentes). São densamente empacotadas com fase estacionária de material uniforme. Se você tivesse que realizar. 27. Já as colunas com suporte revestido. 28. metal ou de teflon. Colunas de parede recoberta são simplesmente tubos capilares recobertos com uma fina camada de fase estacionária. Diferencie coluna tubular de parede recoberta. 400 oC. faixa de temperatura desde ambiente até. Na cromatografia Gasosa.Podem ser separadas por cromatografia gasosa as misturas cujos constituintes sejam termicamente estáveis e voláteis e que dissolva. finamente dividido ou com suporte sólido que é recoberto com uma fina camada de fase estacionária. a temperatura da coluna de modo que ocorra a eluição tanto dos componentes mais voláteis quando dos menos voláteis. 24. 26. mais fase estacionária do que uma coluna revestida tendo. Quais as características das colunas recheadas ou empacotadas em Cromatografia Gasosa? As colunas recheadas ou empacotadas em cromatografia gasosa são feitas de vidro. Como nessas misturas encontram-se compostos com diferentes pontos de ebulição. similaridade de resposta a todos os solutos e não-destrutivo (não destrua a amostra). 29. pelo menos parcialmente. Quais as características para um detector ideal em cromatografia gasosa? Um detector ideal em cromatografia gasosa deve apresentar sensibilidade adequada. resposta rápida independente da vazão. estabilidade térmica. 23. a escolha da temperatura adequada é de fundamental importância. a superfície interna do capilar é recoberta por um filme fino de um material suporte. Quais as principais características de um sistema de gás de arraste em cromatografia? O gás do sistema deve ser quimicamente inerte e apresentar alta pureza. de coluna tubular revestida com suporte. inércia química e características do solventes apropriadas. Cite as vantagens e desvantagens dos seguintes detectores: (a) Detector por condutividade térmica . o que evita reações indesejáveis com o analito. quais as propriedades desejáveis para uma fase estacionária líquida? As propriedades desejadas para uma fase estacionária líquida são: baixa volatilidade. maior capacidade de amostra. alta confiabilidade e facilidade de uso. 25.

resistência. para muitos campos da ciência. Quais as características de um HPLC? A cromatografia líquida de alta eficiência é a mais usada de todas as técnicas analíticas de separação devido à sua sensibilidade. sua adequação à separação de espécies não-voláteis ou termicamente frágeis e. ampla faixa linear de resposta. que se baseia nas diferentes solubilidades dos componentes da amostra na fase estacionária. (b) Detector por ionização em chama Vantagem: alta sensibilidade. 31. Desvantagem: faixa linear estreita. Desvantagem: compostos com potenciais de ionização mais elevados não são detectados. (a) Adsorção ou líquido-sólida: processo baseado em interações eletrostáticas. ampla faixa linear de resposta. Descreva as características dos seguintes métodos de separação em cromatografia líquida. dipolares (Van Der Waals) ou ligações de hidrogênio. superfície e distribuição de tamanho dos poros controlados. seletividade para compostos que contém halogênio e muitos outros. com textura. o processo é interfacial. (d) Detector termiônico Vantagem: alta sensibilidade para compostos que contenham fósforo e nitrogênio. Desvantagem: destrói a amostra. Desvantagem: baixa sensibilidade. (d) Exclusão de tamanho: baseia-se em um processo puramente mecânico. ocorrendo por absorção ou partição. não é aplicável a muitos analitos. (b) Partição: a fase estacionária é um segundo líquido que é imiscível com o líquido da fase móvel. fácil utilização. resposta altamente dependente da vazão. simplicidade e não destrói a amostra. Os . A fase móvel é geralmente uma solução iônica com propriedades tamponantes escolhidas de forma a ser compatível com o tipo de trocador usado. baixo ruído. 30. sua ampla aplicabilidade a substâncias de grande interesse para a indústria. Desvantagem: destrói o analito. boa faixa linear. que ocorrem entre grupos ativos presentes na superfície da fase estacionária sólida e a fase móvel. A fase estacionária é uma matriz de composição inerte. Quando a fase estacionária é um líquido. (c) Troca iônica: a fase estacionária é constituída de uma matriz onde são adicionados grupos funcionais ionizáveis. acima de tudo. (c) Detector por captura de elétrons Vantagem: alta sensibilidade. espalhado na superfície de um suporte sólido e inerte ou nas paredes de um tubo.Vantagem: grande aplicabilidade geral. (e) Detector por fotoionização Vantagem: faixa linear alta e detector mais sensível para hidrocarbonetos aromáticos e compostos organossulfurados ou organofosforados. fácil adaptação para medidas quantitativas apuradas.

Quais as características da fase móvel na cromatografia líquida? A fase móvel não pode alterar a coluna. permitir a recuperação da amostra. dissolver a amostra (diluir). ter baixa viscosidade. deve ser compatível com o detector. ser de alta pureza e não tóxica.componentes presentes na fase móvel podem ser separados pela diferença de tamanho das partículas no qual partículas menores conseguem penetrar nos poros da fase estacionária enquanto as partículas maiores não. . 32.