1.

Sobre a técnica cromatografia em camada delgada, responda:
(a) Quais os fundamentos básicos? A cromatografia em camada delgada (ou fina) é uma técnica de adsorção líquido-sólido bastante simples e barata, que consiste na separação de uma mistura através da migração por capilaridade diferencial de seus componentes sobre uma camada delgada de adsorvente retido sobre uma superfície plana. Na cromatografia de camada delgada, a fase móvel (líquido) ascende por ação de capilaridade por uma camada fina do adsorvente (fase estacionária) estendida sobre um suporte. O suporte mais típico é uma placa de vidro. Sobre a placa espalha-se uma fina camada de adsorvente suspenso em água ou outro solvente e deixa-se secar. A placa coberta chama-se “placa de camada fina ou placa cromatográfica”. Quando a placa cromatográfica é colocada verticalmente em um recipiente fechado (cuba cromatográfica) que contém uma pequena quantidade de solvente, este eluirá pela camada do adsorvente por ação capilar.

(b) Cite os usos mais consagrados da técnica (importância). A cromatografia em camada delgada é usada para determinar a pureza do composto, identificar componentes em uma mistura comparando-os com padrões, acompanhar o curso de uma reação pelo aparecimento dos produtos e desaparecimento de um dos reagentes e ainda para isolar componentes puros de uma mistura. (c) Enumere as vantagens e desvantagens da técnica. A cromatografia em camada delgada é uma técnica simples, de fácil compreensão e execução, de baixo custo, apresenta separação relativamente rápida, é versátil, e reprodutível quando se tem prática. Entretanto, como envolve processos manuais, como por exemplo a preparação da placa e aplicação da amostra, pode causar erros. Essa técnica não possui, também, boa eficiência em análise quantitativa.

(d) O que é e como é calculado o Rf (Fator de Retardamento)?
Parâmetro usado frequentemente em cromatografia, o Rf é definido como a razão entre a distância percorrida pela mancha do componente e a distância percorrida pelo eluente, ou seja:

no volume ou na concentração da substância aplicada. Outras alternativas para se revelar a placa cromatográfica. (d) cromatografia em fase estacionária reversa: a fase móvel é polar e a fase estacionária apolar. ou seja. o solvente deve ser volátil. Essa cuba reveladora pode ser constituída de vapor de iodo que reage com compostos orgânicos formando complexo colorido.Rf = d1d2 Onde: Rf é o fator de retardamento. Sugira um tipo de cromatografia líquida que seja adequada para separar: a) e . seriam a utilização de luz ultravioleta ou de reveladores energéticos como ácido sulfúrico. (c) cromatografia em fase estacionária normal: a fase estacionária é mais polar do que a fase móvel. d1 a distância percorrida pela mancha do componente. Defina: (a) eluição com gradiente: a composição da fase móvel é variada durante a eluição. eluição com um único solvente ou com uma mistura de solventes de composição constante. e d 2 a distância percorrida pelo eluente. (f) Que características deve ter um solvente para ser considerado um bom eluente de desenvolvimento? Para ser considerado um bom eluente. pode ser utilizada uma cuba reveladora para sua visualização. 3. mudanças na temperatura. 2. apresentar baixa viscosidade e não interagir com o soluto. tricloreto de antimônio ou permanganato de potássio seguido de aquecimento para ocorrer a reação cromogênica. (b) eluição isocrática: eluição com composição da fase móvel constante. (g) Quais artifícios podem ser utilizados quando suspeitamos que um componente da amostra a ser analisada pode não ser visível a olho nu? Quando algum componente da amostra não é visível a olho nu. ou seja. (e) Como o fator de retenção de um soluto pode ser alterado? O fator de retenção pode ser alterado através de mudanças nas fases estacionária e/ou móvel. a fase móvel é formada por dois ou mais solventes onde a razão entre estes é variada durante o processo de eluição.

Para que este diminua. e a fase móvel também polar. ou seja. eluirá mais. aparentemente diminuiria o tempo de retenção? Explique.→ Cromatografia por adsorção (isômeros) b) CH3CH2OH e CH3CH2CH2OH → Cromatografia por partição c) Ba2+ e Sr2+ → Cromatografia por partição (papel) d) C4H9COOH e C5H11COOH → Cromatografia por partição e) Glicosídeos de alta massa molecular → Cromatografia por exclusão por tamanho. Com isso. é desejável aumentar ou diminuir a proporção de benzeno conforme a coluna é eluída? Explique sua resposta. utilizando-se o clorofórmio que é polar. o tempo de retenção para n-pentano seria menor ou maior? Explique sua resposta. o tempo de retenção é de 28 minutos. sendo formada por uma solução de HCl em acetona. ao ser trocado pelo óleo de silicone que é um líquido apolar. a ordem dos fatores de retenção será: . Para a separação. os analitos polares ficarão retidos no sistema. como líquido estacionário. Que solvente. Para que estes sejam eluídos. tornando-a mais polar. Se um líquido apolar. o tempo de retenção para o n-pentano seria maior. um solvente de polaridade intermediária. já que este é apolar e teria maior afinidade com a fase estacionária que também é apolar. deve ser usado um solvente mais polar do que a fase estacionária. Cátions inorgânicos podem ser separados por cromatografia líquida segundo sua capacidade de formar complexos com íons cloreto. Em uma coluna de sílica gel. Prediga os valores relativos do fator de retenção dos três sais. Uma cromatografia gás-líquido foi operada com didecilftalato. 7. Como se trata de uma cromatografia em papel. utilizando-se um solvente apolar. como óleo de silicone. o sal que for mais solúvel em HCl apresentará menor fator de retenção. a fase estacionária é saturada com água e o solvente transportador é uma solução de HCl em acetona. Como o líquido estacionário didecilftalato é um solvente de polaridade intermediária. As solubilidades relativas dos seguintes cloretos em ácido clorídrico concentrado são CuCl 2 > CoCl2 > NiCl2. tetracloreto de carbono ou clorofórmio. deve-se aumentar a polaridade da fase móvel e. Como a sílica gel é polar e utilizando o tolueno que é um solvente apolar. Assim. o tempo de retenção será menor 5. 6. para isso. ou seja. a fase estacionária é saturada com água que é um solvente polar. do que a sílica gel. encontrou-se um composto com tempo de retenção de 28 min quando a fase móvel era tolueno. tivesse sido usado. Como a fase estacionária do sistema (sílica gel) é polar. 4. deve-se diminuir a proporção de benzeno no gradiente já que este é o componente apolar da fase móvel. No preparo de um gradiente de benzeno/acetona para HPLC em coluna de sílica gel.

que por ser menos polar. Como a fase estacionária é saturada com água. ou seja. quanto maior a polaridade do eluente. O contrário ocorre com a p-toluidina.CuCl2>CoCl2>NiCl2 8. Explique o fundamento das técnicas de cromatografia em camada delgada em escala analítica e em escala preparativa. Que efeito é esperado sobre os valores de Rf dos dois compostos. da fase móvel. a mais polar seria o cloreto de metileno contendo 50% de acetato de etila e o menos polar o cloreto de metileno puro. Um par de aminoácidos foi separado em uma coluna na qual a fase estacionária está saturada com água e o solvente transportador é o metanol. apresentará o maior fator de retenção e o maior tempo de eluição. vai eluir menos. Contudo. 11. maior o fator de retenção do β-naftol (mais polar do que a p-toluidina). o aminoácido A apresentará o maior fator de retenção por ser o mais polar. Em seguida. Como é possível verificar o fim de uma reação química utilizando-se a técnica de cromatografia em camada delgada (CCD)? Para se verificar o fim da reação química utilizando cromatografia em camada delgada. separação das substâncias indesejáveis ou dos componentes de uma mistura. Para as composições dos solventes dadas. e a fase móvel (metanol) também é polar. CH 3OH. Que aminoácido você esperaria que tivesse o maior fator de retenção? Explique seu raciocínio. considerando o aumento da proporção do acetato de etila nas fases móveis? Justifique sua resposta. Os cromatogramas foram obtidos utilizando-se 3 diferentes eluentes: cloreto de metileno puro. deve-se montar uma placa cromatográfica contendo os padrões dos reagentes separados e do produto a ser obtido e determinar o fator de retenção correspondente a cada uma das espécies. ou seja. 10. A cromatografia em escala analítica trata-se da identificação e quantificação de compostos enquanto em escala preparativa trabalha-se com purificação de compostos. Os aminoácidos que foram separados nessa coluna são: (a) HOOCH(NH2)CH2OH e (b) HOOCCH(NH2)CH3. Como é realizada a confirmação da identidade (análise qualitativa) de compostos quando a análise emprega CLAE (Cromatografia Líquida de Alta Eficiência)? . o aminoácido mais polar apresentará maior afinidade pela fase estacionária. apresentará o menor fator de retenção. Uma solução diluída de β-naftol e outra de p-toluidina foram aplicadas em placas cromatográficas de sílica gel. cloreto de metileno contendo 25% de acetato de etila e cloreto de metileno contendo 50% de acetato de etila. mas fortemente ele é adsorvido pela fase estacionária. ou seja. acompanha-se a reação química utilizando-se uma placa cromatográfica até que se observe a formação de um produto com o mesmo fator de retenção do padrão que foi estudado anteriormente 12. Como a fase estacionária (sílica gel) é polar. ele vai eluir mais sobre a placa cromatográfica. Quanto mais polar for o ácido. 9. que é um solvente polar. portanto.

nas composições das fases móveis e estacionárias.16 Área relativa do pico 10. nas composições das fases móveis e estacionárias. com tempos de retenção próximos.Cromatografia Líquida de Alta Eficiência a confirmação da identidade de um composto é feita através da comparação entre os tempos de retenção das substâncias e dos padrões. então. nos tamanhos das partículas. As duas . 16. respectivamente. Como pode ser manipulado o fator de separação na: (a) Cromatografia gasosa? O fator de separação pode ser manipulado na cromatografia gasosa através de variações: na temperatura. forçada a passar através de uma fase estacionária imiscível fixa.49 mg de B com 10.97 e 6.0 mL. colocada em uma coluna ou sobre uma superfície sólida. que pode ser um gás. 13. Quais espécies podem ser separadas por Cromatografia Líquida de Alta Eficiência. Em todas as separações cromatográficas. uma das quais é estacionária (fixa) e a outra. contendo apenas A.0 mL de uma amostra desconhecida. Foram observadas áreas de picos de 5. Determine a concentração de A (mg/mL) na amostra desconhecida. Uma mistura conhecida de compostos A e B produziu os seguintes resultados da CLAE: Composto A B Concentração (mg/mL) 1. A combinação da cromatografia gasosa com a espectrometria de massas. compostos iguais apresentam o mesmo tempo de retenção iguais. Discuta por que a combinação da cromatografia gasosa com a espectrometria de massas é tão vantajosa. mas não podem ser separadas por Cromatografia Gasosa? Substâncias não-voláteis ou termicamente frágeis podem ser separadas por Cromatografia Líquida de Alta Eficiência e não por Cromatografia Gasosa. 17. móvel. nos tamanhos das partículas. e diluindo a mistura formada a 25.38 para A e B. Essa técnica baseia-se no princípio da adsorção seletiva. 14. identificar ou separar os componentes de uma mistura. ou seja. por ser uma técnica hifenizada.37 Uma solução foi preparada através da mistura de 12. (b) Cromatografia líquida? O fator de separação pode ser manipulado na cromatografia líquida através de variações: na pressão. Responda as seguintes questões: (a) O que é cromatografia? A cromatografia é uma técnica para analisar. Essa fase móvel é.86 4. pode ser usada para a identificação de misturas complexas. 15. É definida como a separação de dois ou mais compostos diferentes por distribuição entre fases.03 1. a amostra é transportada por uma fase móvel. um líquido ou um fluido supercrítico.

modo de separação e segundo a fase estacionária utilizada. (c) Para que é utilizada a cromatografia? A cromatografia é um método de separação que encontra aplicação em todos os ramos da ciência. os componentes que interagem mais fracamente com a fase estacionária movem-se mais rapidamente. (b) Descreva fase móvel e estacionária. Como se classificam os métodos cromatográficos quanto à forma física. 18.Cromatografia por Adsorção . os componentes da amostra são separados em bandas ou zonas discretas. que podem ser analisadas quantitativa ou qualitativamente.Cromatografia em coluna: Cromatografia Líquida Cromatografia Gasosa Cromatografia Supercrítica . Fase móvel é a fase responsável por arrastar os componentes das amostras de acordo com seu grau de afinidade. Esta técnica pode ser utilizada para a identificação ou purificação de compostos e para a separação de componentes de uma mistura.Cromatografia por Exclusão Quanto à fase estacionária: . Ao contrário. Já a fase estacionária comporta-se como um suporte para a fase móvel que deve ser de polaridade diferente desta.fases são escolhidas de modo que os componentes da amostra distribuam-se entre as fases móvel e estacionária em graus variados.Cromatografia por Partição . Os componentes que são retidos mais fortemente na fase estacionária movem-se mais lentamente no fluxo da fase móvel.Cromatografia por Troca Iônica .Cromatografia Planar: Cromatografia Centrífuga Cromatografia em Camada Delgada (CCP) Cromatografia em Papel (CP) Quanto ao modo de separação: . Como conseqüência dessas velocidades de migração diferentes. Quanto à forma física: .

Utilização de gás: Cromatografia Gasosa (CG) Cromatografia Gasosa de Alta Resolução (CGAR) . uma amostra líquida fui por uma tira de papel adsorvente vertical. No primeiro caso.Cromatografia por Líquida .Utilização de líquido: Cromatografia Líquida Clássica (CLC) Cromatografia Líquida de Alta Eficiência (CLAE) . Na cromatografia em papel.Cromatografia com fases Quimicamente Ligadas 19. por adsorção ou ligação química. Como se classificam os métodos cromatográficos segundo a fase móvel empregada? Quanto à fase móvel: . estando um deles fixado a um suporte sólido. No segundo caso. A organização molecular que compõe as cadeias de celulose do papel é polar 21. Ao realizar uma separação por cromatografia gasosa. os componentes de uma amostra vaporizada são separados em conseqüência de sua partição entre uma fase móvel gasosa e uma fase estacionária líquida ou sólida contida dentro da coluna.Cromatografia por Sólida . a fase móvel também é um gás e a fase estacionária é um sólido que retém os analitos por adsorção física. Qual o princípio da cromatografia gasosa? Como a mesma é classificada segundo a fase estacionária? Na cromatografia gasosa. Baseia-se na diferença de solubilidade das substâncias em questão entre as duas fases imiscíveis.. A eluição é feita por um fluxo de fase móvel gasosa inerte. a fase móvel é um gás enquanto a fase estacionária é um líquido retido. 22. sendo geralmente a água um dos líquidos. Quais as misturas que podem ser separadas por cromatografia gasosa? . Qual é o princípio da cromatografia em papel? A cromatografia em papel é uma técnica de partição líquido-líquido. Dois tipos de cromatografia gasosa são encontrados: a cromatografia gás-líquido e cromatografia gás-sólido. O solvente é saturado em água e a partição se dá devido à presença de água em celulose (papel filtro).Utilização de Gás Pressurizado: Cromatografia Supercrítica (CSC) 20. a amostra é vaporizada e injetada na cabeça da coluna cromatográfica. na superfície de um sólido inerte.

27.Podem ser separadas por cromatografia gasosa as misturas cujos constituintes sejam termicamente estáveis e voláteis e que dissolva. 25. Na cromatografia Gasosa. 400 oC. a escolha da temperatura adequada é de fundamental importância. Já as colunas com suporte revestido. qual o critério você utilizaria para escolher a temperatura do sistema? Numa análise cromatográfica de misturas complexas. Cite as vantagens e desvantagens dos seguintes detectores: (a) Detector por condutividade térmica . 24. alta confiabilidade e facilidade de uso. Quais as principais características de um sistema de gás de arraste em cromatografia? O gás do sistema deve ser quimicamente inerte e apresentar alta pureza. faixa de temperatura desde ambiente até. Diferencie coluna tubular de parede recoberta. pelo menos parcialmente. estabilidade térmica. São densamente empacotadas com fase estacionária de material uniforme. o ideal seria aumentar gradativamente ou por etapas. maior capacidade de amostra. Esse tipo de coluna retém. numa análise cromatográfica de misturas complexas (constituintes com volatilidade muito diferentes). boa estabilidade e reprodutibilidade. no gás da fase móvel. pelo menos. quais as propriedades desejáveis para uma fase estacionária líquida? As propriedades desejadas para uma fase estacionária líquida são: baixa volatilidade. resposta rápida independente da vazão. portanto. Quais as características das colunas recheadas ou empacotadas em Cromatografia Gasosa? As colunas recheadas ou empacotadas em cromatografia gasosa são feitas de vidro. similaridade de resposta a todos os solutos e não-destrutivo (não destrua a amostra). 28. Quais as características para um detector ideal em cromatografia gasosa? Um detector ideal em cromatografia gasosa deve apresentar sensibilidade adequada. 29. Como nessas misturas encontram-se compostos com diferentes pontos de ebulição. metal ou de teflon. muitas vezes. Se você tivesse que realizar. a temperatura da coluna de modo que ocorra a eluição tanto dos componentes mais voláteis quando dos menos voláteis. finamente dividido ou com suporte sólido que é recoberto com uma fina camada de fase estacionária. resposta linear aos solutos que se estenda a várias ordens de grandeza. 23. inércia química e características do solventes apropriadas. Colunas de parede recoberta são simplesmente tubos capilares recobertos com uma fina camada de fase estacionária. o que evita reações indesejáveis com o analito. 26. mais fase estacionária do que uma coluna revestida tendo. de coluna tubular revestida com suporte. a superfície interna do capilar é recoberta por um filme fino de um material suporte.

para muitos campos da ciência. sua ampla aplicabilidade a substâncias de grande interesse para a indústria.Vantagem: grande aplicabilidade geral. 31. que ocorrem entre grupos ativos presentes na superfície da fase estacionária sólida e a fase móvel. dipolares (Van Der Waals) ou ligações de hidrogênio. Desvantagem: baixa sensibilidade. Desvantagem: destrói o analito. 30. boa faixa linear. resistência. Desvantagem: compostos com potenciais de ionização mais elevados não são detectados. A fase móvel é geralmente uma solução iônica com propriedades tamponantes escolhidas de forma a ser compatível com o tipo de trocador usado. Desvantagem: destrói a amostra. baixo ruído. acima de tudo. (d) Exclusão de tamanho: baseia-se em um processo puramente mecânico. espalhado na superfície de um suporte sólido e inerte ou nas paredes de um tubo. com textura. (e) Detector por fotoionização Vantagem: faixa linear alta e detector mais sensível para hidrocarbonetos aromáticos e compostos organossulfurados ou organofosforados. fácil adaptação para medidas quantitativas apuradas. Quais as características de um HPLC? A cromatografia líquida de alta eficiência é a mais usada de todas as técnicas analíticas de separação devido à sua sensibilidade. superfície e distribuição de tamanho dos poros controlados. fácil utilização. ampla faixa linear de resposta. (d) Detector termiônico Vantagem: alta sensibilidade para compostos que contenham fósforo e nitrogênio. o processo é interfacial. (a) Adsorção ou líquido-sólida: processo baseado em interações eletrostáticas. não é aplicável a muitos analitos. (c) Detector por captura de elétrons Vantagem: alta sensibilidade. (b) Partição: a fase estacionária é um segundo líquido que é imiscível com o líquido da fase móvel. Quando a fase estacionária é um líquido. (b) Detector por ionização em chama Vantagem: alta sensibilidade. resposta altamente dependente da vazão. Os . ocorrendo por absorção ou partição. seletividade para compostos que contém halogênio e muitos outros. que se baseia nas diferentes solubilidades dos componentes da amostra na fase estacionária. sua adequação à separação de espécies não-voláteis ou termicamente frágeis e. ampla faixa linear de resposta. simplicidade e não destrói a amostra. Desvantagem: faixa linear estreita. (c) Troca iônica: a fase estacionária é constituída de uma matriz onde são adicionados grupos funcionais ionizáveis. A fase estacionária é uma matriz de composição inerte. Descreva as características dos seguintes métodos de separação em cromatografia líquida.

dissolver a amostra (diluir). deve ser compatível com o detector.componentes presentes na fase móvel podem ser separados pela diferença de tamanho das partículas no qual partículas menores conseguem penetrar nos poros da fase estacionária enquanto as partículas maiores não. permitir a recuperação da amostra. . ser de alta pureza e não tóxica. Quais as características da fase móvel na cromatografia líquida? A fase móvel não pode alterar a coluna. 32. ter baixa viscosidade.

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