UNIDADE XIII FITOCROMO E FOTOMORFOGNESE 1. 2. 2.1. 2.2. 2.3. 3.

. Introduo Fitocromo Descoberta Propriedades fsicas e qumicas Distribuio Caractersticas das respostas das plantas induzidas pelo fitocromo 4. Funes ecolgicas 4.1. Evitar a sombra 4.2. Ritmos circadianos 4.3. Especializao do fitocromo 5. Domnios funcionais do fitocromo 6. Mecanismos celulares e moleculares

INTRODUO
Sabe-se que a luz est relacionada ao crescimento vegetal controlando vrios processos fisiolgicos, tais como: Fotossntese (azul e vermelho), fototropismo (azul), abertura estomtica (azul e vermelho) e fotomorfognese (azul, vermelho e vermelho-distante). O efeito da radiao luminosa (280 a 800 nm) no desenvolvimento vegetal, ou seja, a morfognese controlada pela luz, independente da fotossntese, sendo denominado de FOTOMORFOGNESE. As primeiras observaes foram feitas por Julius von Sachs (1882) em abbora: Plntulas que crescem no escuro adquirem uma aparncia caracterstica (caules finos, rudimentares e alongados e folhas amareladas). Ele denominou esta sndrome de doena do estiolamento.

As respostas fotomorfogenticas em plantas parecem estar sob o controle de trs fotorreceptores

FITOCROMO - Absorve luz nas regies do azul, vermelho e vermelho distante; CRIPTOCROMO - Flavoprotena que absorve luz nas regies UV-A (320-400 nm) e do azul; FOTORRECEPTOR UV-B - Compostos que absorvem luz na regio do ultravioleta (280-320 nm).

obs 1: Estes fotorreceptores controlam vrios processos morfogenticos, tais como, a germinao de sementes, o desenvolvimento da planta, culminando com a formao de novas flores e sementes; obs 2: O fitocromo o fotorreceptor mais importante nas plantas vasculares; obs 3: Alguns efeitos da luz azul so mediados pelo fitocromo, porm, a sua converso pela luz vermelha 50 a 100 vezes mais efetiva que a luz azul.

HISTRICO SOBRE A DESCOBERTA DO FITOCROMO

GARNER & ALLARD (1920) DESCOBRIRAM QUE A DURAO RELATIVA DO DIA E DA NOITE CONTROLAVA A FLORAO DE CERTAS ESPCIES; FLINT & McALLISTER (1935) DEMONSTRARAM QUE SEMENTES FOTOBLSTICAS APRESENTAM UMA RESPOSTA A LUZ BEM CARACTERSTICA: NO GERMINAM NO ESCURO, MAS GERMINAM NA PRESENA DA LUZ (MXIMA PROMOO NA FAIXA DO VERMELHO); HAMNER & BONNER (1938) TRABALHANDO COM Xanthium strumarium DESCOBRIRAM QUE NESTA ESPCIE (PDC) A INTERRUPO DA NOITE LONGA INIBIA A FLORAO. SENDO A LUZ VERMELHA MAIS EFICIENTE NA INIBIO; OBS: CEVADA DE INVERNO (PDL) FLORESCE COM A INTERRUPO DA NOITE LONGA COM LUZ BRANCA OU VERMELHA; VRIOS PESQUISADORES (DCADA DE 30 E INCIO DE 1940) ESTUDARAM A FENOMENOLOGIA DA AO DA LUZ NO ESTABELECIMENTO DE PLNTULAS E DE PARTES DE PLANTAS ESTIOLADAS, PORM AMPLIARAM MUITO POUCO O QUE J SE CONHECIA NO INCIO DO SCULO;

CRIAO (1945) EM BELTSVILLE, MARYLAND, EUA, DE UM LABORATRIO PARA ESTUDAR A FOTOMORFOGNESE, ESPECIALMENTE O FOTOPERIODISMO (BORTHWICK, PARKER & HENDRICKS). APS, ASSOCIARAM-SE A ESTE GRUPO EBEN & VIVIAN TOOLE (SEMENTES) E SIEGELMAN, BUTLER & NORRIS (BIOQUMICA). SUAS PRICIPAIS CONTRIBUIES FORAM: DETERMINAO DO ESPECTRO DE AO (INDUO E INIBIO) DA GERMINAO (1952); IDEM PARA A INIBIO DO ESTIOLAMENTO DE PLNTULAS (1952); IDEM PARA A INIBIO DA FLORAO DE PDC E INDUO DA FLORAO DE PDL (1952); DEMONSTRAO DA REAO REVERSVEL (1952) 660 FV FVD 735 ESCURO

UNIVERSALIDADE DE VRIAS RESPOSTAS FOTOMORFOGENTICAS (1952-1959);

DESCRIO DAS PROPRIEDADES FISIOLGICAS, ISOLAMENTO E CARACTERIZAO DO FOTORRECEPTOR FITOCROMO (1959 e 1960).

Por que se diz que o fitocromo o pigmento da fotomorfognese?

1. Devido as similaridades entre o espectro de ao e o espectro de absoro; 2. A reversibilidade do pigmento in vitro coincide com a reversibilidade dos processos fisiolgicos in vivo

Quimicamente o fitocromo uma cromoprotena (holoprotena): apoprotena e cromforo

O fitocromo nativo um dmero Tipo I (PHY A): 250 kDa (2 x 125 kDa) Escuro de absoro: V = 667 nm e VD = 730 nm Tipo II (PHY B): 236 kDa (2 x 118 kDa) Luz de absoro: V = 652 nm e VD = 724 nm O tipo I aproximadamente nove vezes mais abundante que o tipo II em plantas de ervilha cultivadas no escuro.

Reao autocataltica (Associao espontnea)

O Fitocromo uma protena quinase autofosforilante regulada pela luz

DOMNIOS FUNCIONAIS DO FITOCROMO

PEST Pro-Glu-Ser-Thr

Contudo, a anlise da funo do fitocromo complicada pelo fato de que existe mais de um tipo de fitocromo que so codificados por genes separados (famlia multignica) e cada um deles tem funo especfica no desenvolvimento.

ESPECIALIZAO DO FITOCROMO
O phyA necessrio para as respostas luz vermelho distante contnua; O phyB controla as respostas luz branca ou luz vermelho contnua; Os papis dos phyC, phyD e phyE no desenvolvimento ainda esto sendo esclarecidos. obs 1: Embora phyA e phyB sejam as formas predominantes do fitocromo em Arabidopsis, phyC, phyD e phyE parecem ter papis especficos na regulao das respostas s luzes vermelho e vermelho distante. obs 2: As interaes dos fitocromos so importantes no incio da germinao.

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 Ele detectado em Angiospermas, Pteridfitas, Brifitas e algas.

Gimnospermas,

O FVD distribudo entre o citosol e o ncleo.

ESTADO FOTOESTACIONRIO (FOTOEQUILBRIO)

Fotoequilbrio ()
= FVD / FV + FVD = FVD / Ftotal Para o V = 0,85; Para o VD = 0,03; Para a luz solar = 0,60

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Caractersticas das respostas das plantas induzidas pelo fitocromo

SO AGRUPADAS EM DOIS TIPOS:
1.

Eventos bioqumicos rpidos;

2. Mudanas morfolgicas lentas que incluem movimento e crescimento. Obs 1: as respostas do fitocromo variam no: Lag time: que o tempo decorrido entre o estmulo e a resposta; Rpido: 8 min (inibio do alongamento do caule pela luz vermelha); Longo: vrias semanas (florao). Tempo de escape da fotorreversibilidade que varia de menos de 1 minuto at horas para diferentes respostas. Obs 2: as respostas do fitocromo podem ser distinguidas pela quantidade de luz exigida.

Existem duas interpretaes para as respostas fotomorfogenticas com base no requerimento de energia. 1. O nico pigmento responsvel pela absoro da luz na fotomorfognese o fitocromo, que age em funo da fluncia da luz incidente (mol de ftons m-2). (IRRADINCIA = velocidade da fluncia, mol de ftons m-2 s-1). FLUNCIA MUITO BAIXA (VLFR) (10-4 a 0,05 mol m-2). Ex: estimula o crescimento do coleptilo e inibe o do mesoctilo de aveia estiolada; FLUNCIA BAIXA (LFR) (1 a 103 mol m-2). Ex: germinao de sementes fotoblsticas, florao e a maioria das respostas fotomorfogenticas;

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ALTA IRRADINCIA (HIR) (> 10 mmol x m-2 x s-1, > sendo a resposta proporcional ao tempo de exposio, dentro de certa faixa de amplitude). Ex: sntese de antocianinas, inibio do alongamento do hipoctilo de plntulas (mostarda, alface e petnia), induo da florao (hyosciamus), abertura do gancho plumular de alface e crescimento de cotildones de mostarda. 2. Alm do fitocromo, o criptocromo (CRY1 e CRY2) seria, na fotomorfognese, o pigmento responsvel das reaes de alta irradincia no azul e UV-A.

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Lei da reciprocidade de Bunsen & Roscoe (1850)

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Funes ecolgicas do fitocromo

At agora foram discutidas as respostas reguladas pelo fitocromo estudadas em laboratrio. Entretanto, o fitocromo tem uma importante funo ecolgica em plantas crescendo no ambiente natural. O fitocromo permite que as plantas se adaptem s alteraes nas condies de luminosidade. A presena de um pigmento reversvel vermelho/vermelhodistante nas plantas verdes, sugere que estes comprimentos de onda da luz fornecem informaes que ajudam as plantas a se ajustarem ao ambiente. A razo entre luz vermelha (V) e vermelho-distante (VD) varia bastante de acordo com o ambiente e pode ser definida como:

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A razo V/VD e o sombreamento

Para uma planta de sol ou planta que evita sombra, existe um evidente valor adaptativo em alocar seus recursos em direo a um rpido crescimento em extenso, quando ela sombreada por outra planta.

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A razo V/VD e a germinao de sementes

A qualidade da luz tambm participa na regulao da germinao de algumas sementes. Como vimos, o fitocromo foi descoberto em estudos de germinao de sementes de alface dependente da luz (fotoblsticas positivas).

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Hormnios e fotoblastia
GA substitui o requerimento de luz; Citocinina tambm substitui o requerimento de luz em algumas espcies; AIA em geral no tem efeito ou inibe em alta concentrao; ABA inibidor. Sntese de GA FVD Sntese de citocinina Anulam o efeito do ABA Causa quebra de dormncia Destruio de ABA

Vantagens ecolgicas da fotoblastia

Evitar problema de exausto de reservas durante a germinao; Evitar que sementes germinem em condies desfavorveis, como sob a sombra de outras rvores; Sementes so desenterradas ao longo do tempo germinam apenas aquelas que esto expostas luz isto evita que em um ano ruim a espcie desaparea. Obs: Salientar a importncia deste fato para evitar a proliferao de ervas daninhas fotoblsticas (efetuar o adensamento da cultura).

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As interaes do fitocromo so importantes no incio da germinao

O phyA e o phyB tm papis mutuamente antagnicos

Funes ecolgicas: Ritmos circadianos

Vrios processos biolgicos, como a FS e a RS, exibem um ciclo alternado de alta e baixa atividade, com periodicidade de 24 horas, os RITMOS CIRCADIANOS. Devido a persistncia do ritmo na ausncia de fatores de controle externos, ele considerado endgeno. A natureza endgena dos ritmos circadianos sugere que eles sejam controlados por um regulador interno, chamado de OSCILADOR. Uma caracterstica importante do oscilador que ele no afetado pela temperatura, o que permite ao relgio funcionar sob uma variedade de condies climticas e sazonais (O relgio exibe uma compensao de temperatura).

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A luz um forte modulador de ritmos em plantas. Na natureza, os perodos tendem a ser de 24 horas, devidos aos efeitos sincronizantes da luz ao amanhecer, chamados de SINCRONIZAO. Tanto a luz vermelha quanto a luz azul so efetivas na sincronizao. O efeito da luz vermelha fotorreversvel pela luz vermelho-distante, um indicativo da participao do fitocromo. Enquanto que, o efeito da luz azul mediado por um fotorreceptor de luz azul.

O fitocromo regula os movimentos de fechamento das folhas (nictinastismo de folha de Mimosa pudica

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LHY Protena reguladora do tipo MYB (Late elongated HYpocotyl). CCA1 Protena reguladora do tipo MYB (Cyrcadian Clock Associated 1. TOC1 Regulador positivo dos genes LHY e CCA1.

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MECANISMO DE AO DO FITOCROMO
RESPOSTA FINAL: RESPOSTAS RPIDAS: Movimento de cloroplasto e de fololos que envolvem a ativao de ATPase e fluxo de ons. RESPOSTAS LENTAS: Envolve a fotomorfognese. GENES DE RESPOSTA PRECOCE: GENES DE RESPOSTA TARDIA: Envolve mudanas na atividade de protenas (enzimas, bombas, canais, etc.)

Envolve mudanas na expresso de genes, que podem ser: Fatores de transcrio presentes Fatores de transcrio ausentes (necessita sua expresso)

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Regulao da expresso gnica pelo fitocromo

PIF3 Fator 3 de interao do fitocromo (fator de transcrio); PIC Complexo de pr-iniciao; MYB Fator nuclear de transcrio; Motivo G-BOX Confere aos genes a regulao pela luz.

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Figura 17.22 Sntese dos fatores conhecidos envolvidos na expresso gnica regulada por fitocromos. provvel que rotas combinadas e fitocromo-especficas sejam descobertas, na medida que mais sinalizadores intermedirios sejam identificados (Sharma, 2001).

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A luz vermelha converte PrA e PrB em suas formas Pfr; AS formas Prf do fitocromo phyA e phyB podem se autofosforilar; PfrA ativado fosforila a substrato 1 fitocromo quinase (PKS1); PfrA e PfrB ativados podem interagir com protenas-G; cGMP, calmodulina (CAM) e clcio Ca2+) podem ativar fatores de transcrio (X e Y); PfrA e PfrB ativados entram no ncleo; PfrA e PfrB podem regular a transcrio diretamente ou por meio da interao com o fator 3 de interao com o fitocromo (PIF3); O nucleosdeo difosfato quinase 2 (NDPK2) ativado por PfrB; No escuro, COP1 (fotomorfognese constitutiva 1) entra no ncleo e reprime os genes regulados pela luz; No escuro, HY5 (fator de transcrio de leucina) degradado com o auxlio do complexo proteossmico COP/DET/FUS;

10. No escuro, COP1, uma ligase E3, ubiquitina o HY5; 11

12. Na luz, COP1 interage diretamente com SPA1 e exportado para o citoplasma.

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