Titulo- Polmero natural Extraccin de ADN

Objetivos 1. Comprender la base de las tcnicas de extraccin de ADN 2. Extraer y manipular el ADN de clulas vegetales Materiales 3 Fresas Jabn de fregar Agua destilada Bolsa Ziploc Embudo filtros de caf Beakers pequeos 2 Tubos de ensayo y Gradilla Beaker grande 500 mL Etanol al 95% BIEN FRO (ideal: del congelador) Palillos de plstico para revolver el ADN Teora Los polmeros son molculas que tienen la capacidad de unirse y formar cadenas. La molcula de ADN es un polmero de cadenas de nucletidos. Es decir es polinucletido. Existen diversos procedimientos para extraer ADN de las clulas. Estos varan en la cantidad y pureza del ADN que se obtiene al finalizar el procedimiento, pero la base de todos ellos es muy similar. La extraccin de ADN requiere una serie de etapas bsicas. En primer lugar tienen que romperse la pared celular y la membrana plasmtica para poder acceder al ncleo de la clula. A continuacin debe romperse tambin la membrana nuclear para dejar libre el ADN. Por ltimo hay que proteger el ADN de enzimas que puedan degradarlo y para aislarlo hay que hacer que precipite en alcohol. La solucin con detergente y sal es capaz de romper la pared celular y las membranas plasmtica y nuclear. El alcohol se utiliza para precipitar el ADN que es soluble en agua pero, cuando se encuentra en alcohol se desenrolla y precipita en la interfase entre el alcohol y el agua. Cuando el ADN va a utilizarse en el laboratorio para otras aplicaciones, se toman estas fibras que precipitan en la interfase y se disuelven en agua o en un amortiguador apropiado. Esta solucin de ADN se puede mantener a 4C (en un refrigerador) por aos, puesto que es una molcula muy estable. Procedimiento 1. Introduzca 3 fresas en una bolsa Ziploc, intente sacar el aire antes de cerrar. 2. Aplaste las fresas por unos dos minutos hasta formar un pur. Tenga cuidado de no romper la bolsa. 3. Agregue una cucharadita de jabn de fregar a la bolsa y mezcle nuevamente por un minuto.

4. Filtre el contenido de la bolsa a travs de gasa o un filtro de caf de manera que caiga en un beaker pequeo o cualquier recipiente pequeo. 5. Una vez terminada la filtracin puede botar los restos de fresas y la gasa (filtro). 6. Transfiera el filtrado a un tubo de ensayo de forma que 1/8 del tubo est lleno. 7. Agregue lentamente etanol bien fro a la muestra hasta que la mitad del tubo est lleno. El etanol se agrega de manera que se deslice por la pared del tubo, no directamente sobre el filtrado. 9. En la interfase podr ver el ADN precipitar. 10. Las fibras de ADN las puede extraer del tubo de ensayo usando un palillo plstico Preguntas de discusin 1. Es posible ver la doble hlice del ADN a simple vista? Por qu? ______________________________________________________________________ ______________________________________________________________________ ______________________________________________________________________ 2. De qu est compuesto el material blanco que precipit en la interfase? ______________________________________________________________________ ______________________________________________________________________