Universidade Federal da Bahia

Instituto de Ciências da Saúde Departamento de Ciências da Biointeração Curso: Biotecnologia Disciplina: Parasitologia Aplicada a Biotecnologia ± ICS 015 Docente: Prof. Adriano Monte Alegre e Profª Luciana Aragão

Cryptosporidium sp

Hendor Neves Marcos Bernardo Janlesi Borges

Salvador/2011

o uso de técnicas moleculares .parvum. . ma s estudo sobre biologia e a baixa especificidade que este coccídio apresenta em relação aos hospedeiros levaram a maioria dos pesquisadores a considerá -las como sinônimos de C.porém com grande diversidade genética que o pode caracteriza -lá.muris.Introdução Cryptosporidium foi criado em 1907 .que recebeu o nome especifico de C.em 1911 o mesmo autor encontrou outra espécie . Recentemente .localizada no intestino delgado de camundongo .e a descreveu como C. Outras espécies foram descritas de vários animais e homem.muirs e C parvum.por tezzer para designar um pequeno coccídio .como Reação em Cadeia da polimerase foi possível demonstrar que o cryptosporidium sp são espécies geneticamente complexas composta de populações morfologicamente indistinguíveis .menor do que a primeira . Posteriormente .encontrado nas galndulâs gástricas de camundongo .

Os esporozoítos então se diferenciam em trofozoítos (C). os esporozoítos são liberados dos oocistos e infectam as células epiteliais da mucosa intestinal (B). capazes de parasitar as microvilosidades das células epiteliais do trato gastrintestinal de hospedeiros vertebrados. No intestino. com conseqüentes danos na eficiência da absorção dos nutrientes.Em áreas rurais. Os protozoários do gênero Cryptosporidium são parasitas intracelulares obrigatórios que pertencem ao filo Apicomplexa. a transmissão antroponótica provavelmente desenvolve o papel principal na disseminação da infecção. Células epiteliais do pulmão também podem ser infectadas. Muitas espécies não possuem especificidade por hospedeiros e a transmissão entre eles pode ocorrer facilmente.Parasitismo por Cryptosporidium sp. via contato direto com animais de fazenda. O gênero Cryptosporidium tem sido descrito em várias espécies de animais. Os oocistos de Cryptosporidium spp variam em tamanho. incluindo humanos. envolve uma fase assexuada e outra sexuada. Esses . apresentam-se de conformação esférica. com pouca ou nenhuma diferença morfométrica capaz de distinguir as inúmeras espécies do gênero que são infectantes para os animais e para o homem.O ciclo de vida de Cryptosporidium spp. podendo ocasionar quadro clínico de diarréia. inicializando um novo ciclo de reprodução assexuada (E). mas a importância relativa desse tipo de transmissão não está inteiramente esclarecida. A presença de ooci stos deste coccídeo no ambiente faz sugere que humanos e animais podem adquirir a infecção através de diversas rotas de transmissão Em crianças e idosos. especialmente em creches. o ciclo de vida de Cryptosporidium inicia-se após a ingestão do oocisto esporulado pelo hospedeiro (A). que se diferenciam por sua vez em merontes tipo I (D). possuindo estruturas internas de difícil visualização a microscopia óptica. têm sido muitas vezes descritas. O protozoário causa danos aos microvilos das células da superfície da mucosa intestinal. Merozoítos produzidos por merontes do tipo I são liberados da célula do hospedeiro e podem infectar novas células. as infecções zoonóticas. com a formação de oocistos infectantes que são lançados no ambiente através das fezes.

e oocistos de camada fina K ospedeiro.com/trabajos65/actualizacion-cryptosporidium/actualizacion-cryptosporidium_image003.merozoítos odem i i i r F. ue são as formas infectantes encontradas no am biente. realizando a reprodução sexuada I . microgamontes li eram microgametas ue irão fundir-se aos macrogamontes s oocistos são produzidos após reprodução sexuada. ois tipos de oocistos podem ser produzidos: oocistos de camada delgada J . ue são capazes de causar auto -infecção no www.monografias. reprodução sexuada pela difer enciação em trofozóitos ou iniciar o ciclo sexual pela diferenciação em merontes do tipo II s merozoítos ori inados dos meronte do tipo II irão resultar em um s microgamonte masculino G e um macrogamonte feminino H .jpg .

As 29 amostras foram submetidas ao teste parasitológico com a técnica de coloração de Kinyoun concentradas pelo método de formol-éter. pois tem uma alta sensibilidade e espe cificidade. amplificando uma região muito maior que a seqüência desejada. Os resultados positivos do teste parasitológico foram submetidas ao teste de ELISA para a detecção de coproantígenos. obtidos a partir de pacientes IV positivos a partir da técnica de Nested-PCR. Dentre as diversas técnicas de PCR. O objetivo do estudo foi realizar a identificação genotípica de isolados de Cryptosporidium sp. onde a primeira amplificação será mais abrangente. Ela se diferencia das demais técnicas por utilizar dois pares de primers. Serão escolhido cinco amplificados de amostras com resultados positivo para Cryptosporidium sp para a caracterização genotípica utilizando a endonuclease Rsal para analise do segmento do gene COWP. já na segunda amplificação será da real seqüência -alvo. foi escolhida a técnica de Nested-PCR . Por fim todas as 29 amostras foram submetidas à amplificação do DNA pelo Nested-PCR após a extração e purificação. . Metodologia As amostras coletadas de 29 portadores de IV e com AIDS.Artigo Detecção de Cryptosporidium meleagridis em amostras fecais de pacientes HIV positivos no Brasil. O artigo faz uma comparação entre testes moleculares e o teste parasitológico tradicional para a detecção de Cryptosporidium sp ampliando o conhecimento a cerca da detecção e distribuição do parasito.

(6) C. (1) adder 100 pb.Resul s s resultados obtidos foram: l Ki y un 15/ 9 Elisa 13/15 Nested-P R 16/ 9 as amostras o teste parasitológico 5 foram positi os ue foram submetidas ao teste de E ISA em ue 3 foram positi as. obtidos a artir de isolados de Cryptospori i m spp detectados em cinco amostras oriundas de Sorocaba. Em uma comparação entre o teste parasitológico por coloração e o teste de amplificação de A 5 resultados foram discordante. meleagri is (Cm). SP.5) C. parvum (Cp). a caracterização genotípica foram detectado s dois Crypt pori i homi i . o teste de ested 6 foram positi as e delas 5 foram escol idas aleatoriamente para a P caracterização genotípica. (4. (2) produto amplificado não digerido. um Cryptospori i m parvum e dois Cryptospori ium meleagri is Perfil eletroforéti o de rodutos am lifi ados or Nested-P R e di eridos o m a enzima RsaI. ¢ ¨ § § ¦ § £ ¢  §  ¦   ¦ ¥  ¤£ © ¢ ¢ ¡  . homi is (Ch). ) C. (3.

é o primeiro relato no Brasil. mas o fato de 5 resultados entre o teste parasitológico e de Nested -PCR mostra que os métodos de concentração não tenham sido eficazes.   . A detecção de dois Cryptosporidium meleagridis de cinco amostras na caracterização genotípica é relevante. pois falhou em 2 resultados já confirmados como positivo. pois é uma espécies que naturalmente infecta aves. A utilização de técnicas moleculares nos permite a caracterização genotípica e assim conhecer a distribuição geográfica desse parasita que é necessária pois o Cryptosporidium acomete umanos e animais e espécies q antes se pensava que só infectava animais agora se sabe que elas p odem infectar umanos graça as técnicas moleculares como PCR.Discussão e Conclusão Os resultados não mostraram uma discrepância relevante. Os resultados com o teste de ELISA não foram surpreendente. mas já houve relatos dessa espécie no mundo.

ARAÚ O. A. 38-40. p.br/cbb/professores/19/Enfermagem/Cryptosporidiumparvu m..Referencias ‡ ULIA.ucg. S. Detecção de Cryptosporidium meleagridis em amostras fecais de pacientes IV positivos no Brasil Detection of Cryptosporidium meleagridis in fecal samples of IV-infected patients from Brazil. S.Acessado em 01/06/2011 ‡ . Science . PAULO. 9.. 2007. http://www2. 2. n. v.pdf .

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