Universidade Federal da Bahia

Instituto de Ciências da Saúde Departamento de Ciências da Biointeração Curso: Biotecnologia Disciplina: Parasitologia Aplicada a Biotecnologia ± ICS 015 Docente: Prof. Adriano Monte Alegre e Profª Luciana Aragão

Cryptosporidium sp

Hendor Neves Marcos Bernardo Janlesi Borges

Salvador/2011

localizada no intestino delgado de camundongo . Outras espécies foram descritas de vários animais e homem. .em 1911 o mesmo autor encontrou outra espécie .por tezzer para designar um pequeno coccídio .muirs e C parvum.parvum.encontrado nas galndulâs gástricas de camundongo .o uso de técnicas moleculares . Posteriormente .menor do que a primeira . ma s estudo sobre biologia e a baixa especificidade que este coccídio apresenta em relação aos hospedeiros levaram a maioria dos pesquisadores a considerá -las como sinônimos de C.muris.como Reação em Cadeia da polimerase foi possível demonstrar que o cryptosporidium sp são espécies geneticamente complexas composta de populações morfologicamente indistinguíveis .e a descreveu como C.Introdução Cryptosporidium foi criado em 1907 . Recentemente .que recebeu o nome especifico de C.porém com grande diversidade genética que o pode caracteriza -lá.

capazes de parasitar as microvilosidades das células epiteliais do trato gastrintestinal de hospedeiros vertebrados. O gênero Cryptosporidium tem sido descrito em várias espécies de animais.Parasitismo por Cryptosporidium sp. Células epiteliais do pulmão também podem ser infectadas.Em áreas rurais. com conseqüentes danos na eficiência da absorção dos nutrientes. Muitas espécies não possuem especificidade por hospedeiros e a transmissão entre eles pode ocorrer facilmente. O protozoário causa danos aos microvilos das células da superfície da mucosa intestinal. os esporozoítos são liberados dos oocistos e infectam as células epiteliais da mucosa intestinal (B). que se diferenciam por sua vez em merontes tipo I (D). Esses . apresentam-se de conformação esférica. as infecções zoonóticas. incluindo humanos. inicializando um novo ciclo de reprodução assexuada (E). No intestino. o ciclo de vida de Cryptosporidium inicia-se após a ingestão do oocisto esporulado pelo hospedeiro (A). possuindo estruturas internas de difícil visualização a microscopia óptica. podendo ocasionar quadro clínico de diarréia. Os protozoários do gênero Cryptosporidium são parasitas intracelulares obrigatórios que pertencem ao filo Apicomplexa. A presença de ooci stos deste coccídeo no ambiente faz sugere que humanos e animais podem adquirir a infecção através de diversas rotas de transmissão Em crianças e idosos. via contato direto com animais de fazenda. com a formação de oocistos infectantes que são lançados no ambiente através das fezes. a transmissão antroponótica provavelmente desenvolve o papel principal na disseminação da infecção. envolve uma fase assexuada e outra sexuada. Os esporozoítos então se diferenciam em trofozoítos (C). Os oocistos de Cryptosporidium spp variam em tamanho.O ciclo de vida de Cryptosporidium spp. mas a importância relativa desse tipo de transmissão não está inteiramente esclarecida. especialmente em creches. com pouca ou nenhuma diferença morfométrica capaz de distinguir as inúmeras espécies do gênero que são infectantes para os animais e para o homem. têm sido muitas vezes descritas. Merozoítos produzidos por merontes do tipo I são liberados da célula do hospedeiro e podem infectar novas células.

reprodução sexuada pela difer enciação em trofozóitos ou iniciar o ciclo sexual pela diferenciação em merontes do tipo II s merozoítos ori inados dos meronte do tipo II irão resultar em um s microgamonte masculino G e um macrogamonte feminino H . e oocistos de camada fina K ospedeiro.merozoítos odem i i i r F. microgamontes li eram microgametas ue irão fundir-se aos macrogamontes s oocistos são produzidos após reprodução sexuada.monografias. realizando a reprodução sexuada I . ue são capazes de causar auto -infecção no www.com/trabajos65/actualizacion-cryptosporidium/actualizacion-cryptosporidium_image003. ue são as formas infectantes encontradas no am biente. ois tipos de oocistos podem ser produzidos: oocistos de camada delgada J .jpg .

. Por fim todas as 29 amostras foram submetidas à amplificação do DNA pelo Nested-PCR após a extração e purificação. Metodologia As amostras coletadas de 29 portadores de IV e com AIDS. amplificando uma região muito maior que a seqüência desejada. Os resultados positivos do teste parasitológico foram submetidas ao teste de ELISA para a detecção de coproantígenos. foi escolhida a técnica de Nested-PCR . Dentre as diversas técnicas de PCR. As 29 amostras foram submetidas ao teste parasitológico com a técnica de coloração de Kinyoun concentradas pelo método de formol-éter. O objetivo do estudo foi realizar a identificação genotípica de isolados de Cryptosporidium sp. Ela se diferencia das demais técnicas por utilizar dois pares de primers. O artigo faz uma comparação entre testes moleculares e o teste parasitológico tradicional para a detecção de Cryptosporidium sp ampliando o conhecimento a cerca da detecção e distribuição do parasito. Serão escolhido cinco amplificados de amostras com resultados positivo para Cryptosporidium sp para a caracterização genotípica utilizando a endonuclease Rsal para analise do segmento do gene COWP. já na segunda amplificação será da real seqüência -alvo.Artigo Detecção de Cryptosporidium meleagridis em amostras fecais de pacientes HIV positivos no Brasil. obtidos a partir de pacientes IV positivos a partir da técnica de Nested-PCR. onde a primeira amplificação será mais abrangente. pois tem uma alta sensibilidade e espe cificidade.

homi is (Ch). (1) adder 100 pb. SP.5) C. ) C. Em uma comparação entre o teste parasitológico por coloração e o teste de amplificação de A 5 resultados foram discordante. (3.Resul s s resultados obtidos foram: l Ki y un 15/ 9 Elisa 13/15 Nested-P R 16/ 9 as amostras o teste parasitológico 5 foram positi os ue foram submetidas ao teste de E ISA em ue 3 foram positi as. obtidos a artir de isolados de Cryptospori i m spp detectados em cinco amostras oriundas de Sorocaba. a caracterização genotípica foram detectado s dois Crypt pori i homi i . parvum (Cp). (4. (6) C. (2) produto amplificado não digerido. ¢ ¨ § § ¦ § £ ¢  §  ¦   ¦ ¥  ¤£ © ¢ ¢ ¡  . meleagri is (Cm). um Cryptospori i m parvum e dois Cryptospori ium meleagri is Perfil eletroforéti o de rodutos am lifi ados or Nested-P R e di eridos o m a enzima RsaI. o teste de ested 6 foram positi as e delas 5 foram escol idas aleatoriamente para a P caracterização genotípica.

mas o fato de 5 resultados entre o teste parasitológico e de Nested -PCR mostra que os métodos de concentração não tenham sido eficazes.Discussão e Conclusão Os resultados não mostraram uma discrepância relevante. A detecção de dois Cryptosporidium meleagridis de cinco amostras na caracterização genotípica é relevante. mas já houve relatos dessa espécie no mundo. é o primeiro relato no Brasil. pois é uma espécies que naturalmente infecta aves.   . pois falhou em 2 resultados já confirmados como positivo. A utilização de técnicas moleculares nos permite a caracterização genotípica e assim conhecer a distribuição geográfica desse parasita que é necessária pois o Cryptosporidium acomete umanos e animais e espécies q antes se pensava que só infectava animais agora se sabe que elas p odem infectar umanos graça as técnicas moleculares como PCR. Os resultados com o teste de ELISA não foram surpreendente.

9.Acessado em 01/06/2011 ‡ . n.. http://www2. Detecção de Cryptosporidium meleagridis em amostras fecais de pacientes IV positivos no Brasil Detection of Cryptosporidium meleagridis in fecal samples of IV-infected patients from Brazil. S.. Science . v. ARAÚ O.pdf . S.ucg.br/cbb/professores/19/Enfermagem/Cryptosporidiumparvu m. A.Referencias ‡ ULIA. 2007. 38-40. 2. PAULO. p.