Universidade Federal da Bahia

Instituto de Ciências da Saúde Departamento de Ciências da Biointeração Curso: Biotecnologia Disciplina: Parasitologia Aplicada a Biotecnologia ± ICS 015 Docente: Prof. Adriano Monte Alegre e Profª Luciana Aragão

Cryptosporidium sp

Hendor Neves Marcos Bernardo Janlesi Borges

Salvador/2011

e a descreveu como C.Introdução Cryptosporidium foi criado em 1907 .muris.parvum.que recebeu o nome especifico de C.porém com grande diversidade genética que o pode caracteriza -lá. Outras espécies foram descritas de vários animais e homem.encontrado nas galndulâs gástricas de camundongo . Posteriormente .o uso de técnicas moleculares . ma s estudo sobre biologia e a baixa especificidade que este coccídio apresenta em relação aos hospedeiros levaram a maioria dos pesquisadores a considerá -las como sinônimos de C. Recentemente .como Reação em Cadeia da polimerase foi possível demonstrar que o cryptosporidium sp são espécies geneticamente complexas composta de populações morfologicamente indistinguíveis . .por tezzer para designar um pequeno coccídio .em 1911 o mesmo autor encontrou outra espécie .menor do que a primeira .localizada no intestino delgado de camundongo .muirs e C parvum.

com a formação de oocistos infectantes que são lançados no ambiente através das fezes. apresentam-se de conformação esférica. mas a importância relativa desse tipo de transmissão não está inteiramente esclarecida. podendo ocasionar quadro clínico de diarréia. No intestino. especialmente em creches.Em áreas rurais. capazes de parasitar as microvilosidades das células epiteliais do trato gastrintestinal de hospedeiros vertebrados. via contato direto com animais de fazenda. que se diferenciam por sua vez em merontes tipo I (D). a transmissão antroponótica provavelmente desenvolve o papel principal na disseminação da infecção. Muitas espécies não possuem especificidade por hospedeiros e a transmissão entre eles pode ocorrer facilmente. os esporozoítos são liberados dos oocistos e infectam as células epiteliais da mucosa intestinal (B). Os esporozoítos então se diferenciam em trofozoítos (C). O protozoário causa danos aos microvilos das células da superfície da mucosa intestinal. incluindo humanos. possuindo estruturas internas de difícil visualização a microscopia óptica. Células epiteliais do pulmão também podem ser infectadas. inicializando um novo ciclo de reprodução assexuada (E). envolve uma fase assexuada e outra sexuada. as infecções zoonóticas. têm sido muitas vezes descritas.O ciclo de vida de Cryptosporidium spp. o ciclo de vida de Cryptosporidium inicia-se após a ingestão do oocisto esporulado pelo hospedeiro (A). A presença de ooci stos deste coccídeo no ambiente faz sugere que humanos e animais podem adquirir a infecção através de diversas rotas de transmissão Em crianças e idosos. Esses . com conseqüentes danos na eficiência da absorção dos nutrientes. com pouca ou nenhuma diferença morfométrica capaz de distinguir as inúmeras espécies do gênero que são infectantes para os animais e para o homem. Merozoítos produzidos por merontes do tipo I são liberados da célula do hospedeiro e podem infectar novas células. O gênero Cryptosporidium tem sido descrito em várias espécies de animais. Os protozoários do gênero Cryptosporidium são parasitas intracelulares obrigatórios que pertencem ao filo Apicomplexa. Os oocistos de Cryptosporidium spp variam em tamanho.Parasitismo por Cryptosporidium sp.

ois tipos de oocistos podem ser produzidos: oocistos de camada delgada J .jpg .monografias.com/trabajos65/actualizacion-cryptosporidium/actualizacion-cryptosporidium_image003. realizando a reprodução sexuada I . ue são as formas infectantes encontradas no am biente. microgamontes li eram microgametas ue irão fundir-se aos macrogamontes s oocistos são produzidos após reprodução sexuada. ue são capazes de causar auto -infecção no www.merozoítos odem i i i r F. reprodução sexuada pela difer enciação em trofozóitos ou iniciar o ciclo sexual pela diferenciação em merontes do tipo II s merozoítos ori inados dos meronte do tipo II irão resultar em um s microgamonte masculino G e um macrogamonte feminino H . e oocistos de camada fina K ospedeiro.

amplificando uma região muito maior que a seqüência desejada. O objetivo do estudo foi realizar a identificação genotípica de isolados de Cryptosporidium sp. Dentre as diversas técnicas de PCR.Artigo Detecção de Cryptosporidium meleagridis em amostras fecais de pacientes HIV positivos no Brasil. já na segunda amplificação será da real seqüência -alvo. Os resultados positivos do teste parasitológico foram submetidas ao teste de ELISA para a detecção de coproantígenos. Serão escolhido cinco amplificados de amostras com resultados positivo para Cryptosporidium sp para a caracterização genotípica utilizando a endonuclease Rsal para analise do segmento do gene COWP. Por fim todas as 29 amostras foram submetidas à amplificação do DNA pelo Nested-PCR após a extração e purificação. . foi escolhida a técnica de Nested-PCR . O artigo faz uma comparação entre testes moleculares e o teste parasitológico tradicional para a detecção de Cryptosporidium sp ampliando o conhecimento a cerca da detecção e distribuição do parasito. Metodologia As amostras coletadas de 29 portadores de IV e com AIDS. Ela se diferencia das demais técnicas por utilizar dois pares de primers. pois tem uma alta sensibilidade e espe cificidade. As 29 amostras foram submetidas ao teste parasitológico com a técnica de coloração de Kinyoun concentradas pelo método de formol-éter. obtidos a partir de pacientes IV positivos a partir da técnica de Nested-PCR. onde a primeira amplificação será mais abrangente.

(4. Em uma comparação entre o teste parasitológico por coloração e o teste de amplificação de A 5 resultados foram discordante. meleagri is (Cm). ) C. obtidos a artir de isolados de Cryptospori i m spp detectados em cinco amostras oriundas de Sorocaba. (6) C. homi is (Ch).Resul s s resultados obtidos foram: l Ki y un 15/ 9 Elisa 13/15 Nested-P R 16/ 9 as amostras o teste parasitológico 5 foram positi os ue foram submetidas ao teste de E ISA em ue 3 foram positi as. parvum (Cp). o teste de ested 6 foram positi as e delas 5 foram escol idas aleatoriamente para a P caracterização genotípica. um Cryptospori i m parvum e dois Cryptospori ium meleagri is Perfil eletroforéti o de rodutos am lifi ados or Nested-P R e di eridos o m a enzima RsaI. (3. ¢ ¨ § § ¦ § £ ¢  §  ¦   ¦ ¥  ¤£ © ¢ ¢ ¡  . SP. a caracterização genotípica foram detectado s dois Crypt pori i homi i . (2) produto amplificado não digerido. (1) adder 100 pb.5) C.

  .Discussão e Conclusão Os resultados não mostraram uma discrepância relevante. mas o fato de 5 resultados entre o teste parasitológico e de Nested -PCR mostra que os métodos de concentração não tenham sido eficazes. A utilização de técnicas moleculares nos permite a caracterização genotípica e assim conhecer a distribuição geográfica desse parasita que é necessária pois o Cryptosporidium acomete umanos e animais e espécies q antes se pensava que só infectava animais agora se sabe que elas p odem infectar umanos graça as técnicas moleculares como PCR. é o primeiro relato no Brasil. pois falhou em 2 resultados já confirmados como positivo. mas já houve relatos dessa espécie no mundo. A detecção de dois Cryptosporidium meleagridis de cinco amostras na caracterização genotípica é relevante. pois é uma espécies que naturalmente infecta aves. Os resultados com o teste de ELISA não foram surpreendente.

S. A.. n. p. Science . Detecção de Cryptosporidium meleagridis em amostras fecais de pacientes IV positivos no Brasil Detection of Cryptosporidium meleagridis in fecal samples of IV-infected patients from Brazil.pdf . 38-40.. v. ARAÚ O.ucg. http://www2. S.br/cbb/professores/19/Enfermagem/Cryptosporidiumparvu m. PAULO. 2007. 9.Acessado em 01/06/2011 ‡ . 2.Referencias ‡ ULIA.

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