Universidade Federal da Bahia

Instituto de Ciências da Saúde Departamento de Ciências da Biointeração Curso: Biotecnologia Disciplina: Parasitologia Aplicada a Biotecnologia ± ICS 015 Docente: Prof. Adriano Monte Alegre e Profª Luciana Aragão

Cryptosporidium sp

Hendor Neves Marcos Bernardo Janlesi Borges

Salvador/2011

Introdução Cryptosporidium foi criado em 1907 .e a descreveu como C. ma s estudo sobre biologia e a baixa especificidade que este coccídio apresenta em relação aos hospedeiros levaram a maioria dos pesquisadores a considerá -las como sinônimos de C.como Reação em Cadeia da polimerase foi possível demonstrar que o cryptosporidium sp são espécies geneticamente complexas composta de populações morfologicamente indistinguíveis .em 1911 o mesmo autor encontrou outra espécie . Outras espécies foram descritas de vários animais e homem. Posteriormente .menor do que a primeira .por tezzer para designar um pequeno coccídio .o uso de técnicas moleculares .muris. .parvum.localizada no intestino delgado de camundongo .encontrado nas galndulâs gástricas de camundongo .muirs e C parvum.que recebeu o nome especifico de C. Recentemente .porém com grande diversidade genética que o pode caracteriza -lá.

capazes de parasitar as microvilosidades das células epiteliais do trato gastrintestinal de hospedeiros vertebrados. via contato direto com animais de fazenda. O protozoário causa danos aos microvilos das células da superfície da mucosa intestinal. com pouca ou nenhuma diferença morfométrica capaz de distinguir as inúmeras espécies do gênero que são infectantes para os animais e para o homem. Merozoítos produzidos por merontes do tipo I são liberados da célula do hospedeiro e podem infectar novas células. com conseqüentes danos na eficiência da absorção dos nutrientes. incluindo humanos. Muitas espécies não possuem especificidade por hospedeiros e a transmissão entre eles pode ocorrer facilmente. Os protozoários do gênero Cryptosporidium são parasitas intracelulares obrigatórios que pertencem ao filo Apicomplexa. Esses . mas a importância relativa desse tipo de transmissão não está inteiramente esclarecida. que se diferenciam por sua vez em merontes tipo I (D). podendo ocasionar quadro clínico de diarréia. apresentam-se de conformação esférica. envolve uma fase assexuada e outra sexuada. têm sido muitas vezes descritas.Em áreas rurais. a transmissão antroponótica provavelmente desenvolve o papel principal na disseminação da infecção. possuindo estruturas internas de difícil visualização a microscopia óptica. o ciclo de vida de Cryptosporidium inicia-se após a ingestão do oocisto esporulado pelo hospedeiro (A). Células epiteliais do pulmão também podem ser infectadas. inicializando um novo ciclo de reprodução assexuada (E). com a formação de oocistos infectantes que são lançados no ambiente através das fezes. os esporozoítos são liberados dos oocistos e infectam as células epiteliais da mucosa intestinal (B).O ciclo de vida de Cryptosporidium spp. No intestino. Os esporozoítos então se diferenciam em trofozoítos (C). Os oocistos de Cryptosporidium spp variam em tamanho. as infecções zoonóticas.Parasitismo por Cryptosporidium sp. O gênero Cryptosporidium tem sido descrito em várias espécies de animais. A presença de ooci stos deste coccídeo no ambiente faz sugere que humanos e animais podem adquirir a infecção através de diversas rotas de transmissão Em crianças e idosos. especialmente em creches.

com/trabajos65/actualizacion-cryptosporidium/actualizacion-cryptosporidium_image003. realizando a reprodução sexuada I . ue são as formas infectantes encontradas no am biente.merozoítos odem i i i r F. e oocistos de camada fina K ospedeiro. reprodução sexuada pela difer enciação em trofozóitos ou iniciar o ciclo sexual pela diferenciação em merontes do tipo II s merozoítos ori inados dos meronte do tipo II irão resultar em um s microgamonte masculino G e um macrogamonte feminino H . microgamontes li eram microgametas ue irão fundir-se aos macrogamontes s oocistos são produzidos após reprodução sexuada.monografias. ue são capazes de causar auto -infecção no www.jpg . ois tipos de oocistos podem ser produzidos: oocistos de camada delgada J .

Serão escolhido cinco amplificados de amostras com resultados positivo para Cryptosporidium sp para a caracterização genotípica utilizando a endonuclease Rsal para analise do segmento do gene COWP.Artigo Detecção de Cryptosporidium meleagridis em amostras fecais de pacientes HIV positivos no Brasil. onde a primeira amplificação será mais abrangente. Os resultados positivos do teste parasitológico foram submetidas ao teste de ELISA para a detecção de coproantígenos. . já na segunda amplificação será da real seqüência -alvo. O objetivo do estudo foi realizar a identificação genotípica de isolados de Cryptosporidium sp. foi escolhida a técnica de Nested-PCR . As 29 amostras foram submetidas ao teste parasitológico com a técnica de coloração de Kinyoun concentradas pelo método de formol-éter. Dentre as diversas técnicas de PCR. obtidos a partir de pacientes IV positivos a partir da técnica de Nested-PCR. Ela se diferencia das demais técnicas por utilizar dois pares de primers. O artigo faz uma comparação entre testes moleculares e o teste parasitológico tradicional para a detecção de Cryptosporidium sp ampliando o conhecimento a cerca da detecção e distribuição do parasito. Por fim todas as 29 amostras foram submetidas à amplificação do DNA pelo Nested-PCR após a extração e purificação. Metodologia As amostras coletadas de 29 portadores de IV e com AIDS. amplificando uma região muito maior que a seqüência desejada. pois tem uma alta sensibilidade e espe cificidade.

obtidos a artir de isolados de Cryptospori i m spp detectados em cinco amostras oriundas de Sorocaba. (4. Em uma comparação entre o teste parasitológico por coloração e o teste de amplificação de A 5 resultados foram discordante. um Cryptospori i m parvum e dois Cryptospori ium meleagri is Perfil eletroforéti o de rodutos am lifi ados or Nested-P R e di eridos o m a enzima RsaI.Resul s s resultados obtidos foram: l Ki y un 15/ 9 Elisa 13/15 Nested-P R 16/ 9 as amostras o teste parasitológico 5 foram positi os ue foram submetidas ao teste de E ISA em ue 3 foram positi as. meleagri is (Cm).5) C. ) C. o teste de ested 6 foram positi as e delas 5 foram escol idas aleatoriamente para a P caracterização genotípica. (1) adder 100 pb. parvum (Cp). (6) C. homi is (Ch). (2) produto amplificado não digerido. a caracterização genotípica foram detectado s dois Crypt pori i homi i . ¢ ¨ § § ¦ § £ ¢  §  ¦   ¦ ¥  ¤£ © ¢ ¢ ¡  . SP. (3.

Os resultados com o teste de ELISA não foram surpreendente. é o primeiro relato no Brasil. pois é uma espécies que naturalmente infecta aves. mas o fato de 5 resultados entre o teste parasitológico e de Nested -PCR mostra que os métodos de concentração não tenham sido eficazes.Discussão e Conclusão Os resultados não mostraram uma discrepância relevante. A detecção de dois Cryptosporidium meleagridis de cinco amostras na caracterização genotípica é relevante.   . A utilização de técnicas moleculares nos permite a caracterização genotípica e assim conhecer a distribuição geográfica desse parasita que é necessária pois o Cryptosporidium acomete umanos e animais e espécies q antes se pensava que só infectava animais agora se sabe que elas p odem infectar umanos graça as técnicas moleculares como PCR. pois falhou em 2 resultados já confirmados como positivo. mas já houve relatos dessa espécie no mundo.

PAULO. http://www2.Referencias ‡ ULIA.Acessado em 01/06/2011 ‡ . Detecção de Cryptosporidium meleagridis em amostras fecais de pacientes IV positivos no Brasil Detection of Cryptosporidium meleagridis in fecal samples of IV-infected patients from Brazil..ucg. 38-40.pdf . S. 9. S. A. 2007. v.br/cbb/professores/19/Enfermagem/Cryptosporidiumparvu m. Science . n. ARAÚ O. 2. p..

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