IMOBILIZAO DA ENZIMA -GALACTOSIDASE DE Kluyveromyces fragilis EM AGAROSE E QUITOSANA UTILIZANDO DIFERENTES PROTOCOLOS DE ATIVAO Colocar nome da univers, nome

do projeto o seu e o orientador e tirar esse fundo ai

Lactose

Soluo: hidrlise enzimtica ou cida

cida: problemas: Ex: reaes paralelas

50g/L no soro de queijo descarte gera problemas Ambientais Propriedades fsico-qumicas e Intolerncia populacional Restries na Aplicao Industrial

Enzimtica: potente, especfica, mas enzima solvel (invivel a recuperao) e baixa estabilidade alto custo

Aplicaes Nutracuticas Produo de Etanol Produo de Galacto-oligossacardeos

Imobilizao em suportes insolveis e Estabilizao

HIDRLISE ENZIMTICA DE LACTOSE

Enzima: catalisador potente, especfico e opera em condies suaves

mas, solvel, frgil e alto custo Requer imobilizao e estabilizao

Fcil separao do produto; Permite economicamente alta concentrao de enzima no reator; Permite uso em processo contnuo ou reuso Reduz custos de Produo do processo enzimatico

Objetivo

Objetivos Imobilizar e Estabilizar a -galactosidase de microrganismo?? Utilizar suportes de baixo custo quitosana e fibra de coco Ver outros objetivos do

Materiais

Enzima: -galactosidase de Kluyveromyces lactis 96 mg P/mL extrato; AE = 470 Ulactose/mg P Suportes: Quitosana, fibra de coco

Sigma Aldrich

  

Agentes ativantes: Glutaraldedo, Glicidol e Epicloridrina Substratos: Lactose

Mtodos


Preparao das partculas de quitosana e ativao do suporte utilizando glutaraldedo (Budriene et al, 2005)

Soluo 2% de quitosana em cido actico (2% v/v)

T=50C

Soluo 0,5 + M KOH

30 min

Glutaraldedo 25%

30 min T=50C

+ filtro

Lavagem com gua destilada

Gel de Quitosana Ativado

Determinao da atividade hidroltica da -galactosidase em lactose

20 L 10 L de enzima solvel ou 0,1 g do derivado 10 min 20 L amostra +20 L soluo NaOH 0,1 M 2 mL Kit enzimtico glicose

T=37C Soluo A*

C Gli cos e ( mg / mL ) v VT ( mL ) U / mL ! T H v 0,18 v V E ( mL )

Soluo A* = 5 mL soluo de lactose 5% (m/v) em tampo fosfato de potssio 100 mM pH 7,5 + 0,1 mM MnCl2 + 2 mM MgCl2

Resultados


Resultados

Tabela do doc word colocar nesse slide

Concluses parciais

Cronograma q vc tem q fazer ainda no projeto, use o do projeto

Agradecimentos