TITULO :

DETERMINACIN DE LA DEMANDA BIOQUMICA DE OXGENO (DBO5)

1.

OBJETO

Este mtodo tiene por objeto determinar la Demanda Bioqumica de Oxgeno (DB0 5) en aguas naturales y residuales, mediante volumetra. 2. ALCANCE

El mtodo es utilizable en aguas naturales y residuales, as como en el sistema de depuracin de estas aguas residuales. 3. REFERENCIAS

Este Procedimiento se ha elaborado tomando como referencia los siguientes documentos:

4.

STANDARD METHODS FOR THE EXAMINATION OF WATER AND SEWAGE. American Public Health Association. New York 1960. Rodier, J: L'ANALYSE CHIMIQUE ET PHISICO - CHIMIQUE DE L'EAU. Dunod. Pars. ANEXO VIII - AGUAS del B.O.E. n 208 del 30 de Agosto 1979. FUNDAMENTOS

La Demanda Bioqumica de Oxgeno (DBO) es la cantidad de oxgeno eventualmente consumida por los grmenes aerobios para asegurar la descomposicin, en condiciones normalizadas de incubacin, de las materias orgnicas contenidas en el agua analizada. La incubacin se efecta en oscuridad, durante cinco das, y a una temperatura de 20 C. 5. 5.1 DESCRIPCION Equipo de medida y ensayos 2 Frascos de incubacin, de 250-300 ml de capacidad, aforados y con tapn esmerilado y biselado.

5.2

Estufa de cultivos con control termosttico a 20 C. 2 matraces Erlenmeyer de 500 ml. Bureta de 25 ml. Probeta de 1000 a 2000 ml. 7 pipetas aforadas de 1 ml. Pipeta graduada de 5 ml. Reactivos Disolucin tampn de fosfato: Disolver 8,5 g de fosfato monopotsico (PO 4H2K), 25,75 g de fosfato dipotsico (PO4HK2), 33,4 g de fosfato disdico (PO 4HNa2.7H2O) y 1,7 g de cloruro amnico
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(ClNH4) en unos 500 ml de agua desmineralizada y diluir a 1 litro. El pH de esta disolucin tampn debe ser de 7,2 sin ajuste alguno.

Disolucin de sulfato magnsico: Disolver 22,5 g de sulfato de magnesio (SO4Mg.7H2O) en agua desmineralizada y diluir a 1 litro. Disolucin de cloruro clcico: Disolver 27,5 g de cloruro clcico (Cl2Ca) anhidro en agua desmineralizada y diluir a 1 litro. Disolucin de cloruro frrico: Disolver 0,25 g de cloruro frrico (CIFe.6H2O) en agua desmineralizada y diluir a 1 litro. Disolucin de sulfito de sodio 0,025 N. Disolver 1,575 g de sulfito sdico anhidro (SO 3Na2) en 1 litro de agua desmineralizada. Esta disolucin no es estable y debe prepararse el da que vaya a emplearse.

Disolucin de sulfato manganoso: Disolver 400 g de sulfato manganoso (SO 4Mn.2H2O) en agua desmineralizada, filtrar y diluir a 1 litro. Esta disolucin no debe liberar ms que trazas de yodo cuando se aade a una disolucin acidificada de yoduro potsico.

Reactivo de lcali-yoduro nitruro: Disolver 500 g de hidrxido sdico (NaOH) y 135 g de yoduro sdico (INa) en 800 ml de agua desmineralizada. Disolver 10 g de nitruro de sodio (N 3Na) en 40 ml de agua desmineralizada. Mezclar ambas disoluciones y diluir a 1 litro. Este reactivo no debe producir coloracin con el almidn cuando se diluye y acidifica.

Acido dorhdrico concentrado (d=1,18) Disolucin de almidn: Triturar 5 g de almidn soluble y 5 mg de yoduro de mercurio (II) (I 2Hg) con un poco de agua desmineralizada y aadir lentamente la emulsin a un litro de agua desmineralizada hirviendo, manteniendo la ebullicin unos minutos hasta que la disolucin quede clara. Dejar enfriar y guardar la disolucin en un frasco de color topacio con tapn esmerilado.

Disolucin patrn de tiosulfato sdico 0,10 N: Disolver 24,82 g de tiosulfato sdico (S2O3Na2.5H2O) en agua desmineralizada recin hervida y enfriada, diluir a 1 litro. Para conservar la disolucin aadir 1 g de hidrxido sdico (NaOH).

Disolucin de dicromato potsico 0,025 N: Pesar 1,226 g de dicromato potsico (Cr 2O7K2), previamente secados durante dos horas a 105 C, y diluir a 1 litro en un matraz aforado con agua desmineralizada.

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Disolucin de tiosulfato sdico 0,025 N: Diluir 250 ml de la disolucin patrn de tiosulfato sdico 0,10 N a 1 litro con agua desmineralizada recientemente hervida y enfriada. Valorar esta disolucin mediante la disolucin de dicromato potsico 0,025 N.

5.3

Realizacin del ensayo Preparacin de la muestra a) Preparacin del agua de dilucin. Tomar dos litros de agua desmineralizada y oxigenarla mediante aire comprimido hasta que la tensin del oxgeno disuelto est prxima a su saturacin. Aadir a dicha agua 1 ml de disolucin tampn de fosfato, 1 ml de disolucin de sulfato magnsico, 1 ml de disolucin de cloruro clcico y 1 ml de disolucin de cloruro frrico. Conservar este agua a 20 C, tapando el frasco con tapn de algodn. b) Acondicionamiento del agua de muestra. Neutralizar el agua de muestra hasta pH prximo a 7 mediante CIH o NaOH 1N. Eliminar el cloro libre, si lo hubiese, mediante la adicin de disolucin de sulfito sdico 0,025 N. Saturar de oxgeno agitando fuertemente la muestra o bien mediante burbujeo de aire comprimido, siempre a 20 C. c) Dilucin del agua de muestra. Sifonar el agua de dilucin a una probeta graduada de 1000-2000 ml de capacidad, llenndola hasta la mitad sin arrastrar el aire. Agregar el agua de muestra en la cantidad necesaria para obtener la dilucin que se desee y terminar de diluir hasta el nivel apropiado con agua de dilucin. Mezclar bien con un agitador, evitando la formacin de burbujas. Se aconseja las siguientes diluciones:

Efluentes depurados: de 5 a 25 por 100. Aguas fluviales: de 25 a 100 por 100.

Sifonar la dilucin mezclada a dos frascos de incubacin, llenndolos completamente y cerrndolos hermticamente. Determinar el oxgeno inicial en uno de los dos frascos de forma inmediata y conservar el otro frasco en incubacin durante 5 das en oscuridad y a una temperatura de 20 C, para despus de en l el oxgeno disuelto no consumido.

Determinacin del oxgeno disuelto:

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a)

Agregar al frasco de incubacin 1 ml de disolucin de sulfato manganoso y despus 1 ml de reactivo de lcali-yoduro nitruro, haciendo ambas adiciones en el fondo del frasco. Tapar de nuevo el frasco procurando excluir las burbujas, con lo que se derramar una pequea cantidad de lquido.

b) c)

Mezclar por inversin varias veces y esperar que se sedimente el precipitado que se forma. Destapar el frasco y aadir, mediante pipeta, haciendo llegar el cido hasta el fondo, 5 ml de CIH concentrado. Cerrar de nuevo el frasco y agitar hasta que se disuelva el precipitado.

d)

Pasar todo el lquido a un matraz Erlenmeyer de 500 ml, lavando frasco y tapn con agua desmineralizada.

e)

Aadir gota a gota, con rapidez y agitando el matraz, disolucin de tiosulfato sdico 0,025 N hasta que el lquido tome una coloracin pajiza.

f)

Agregar 1 2 ml de disolucin de almidn, con lo que el lquido tomar un color azul, continuar la valoracin con la disolucin de tiosulfato sdico 0,025 N, gota a gota, hasta que el lquido se tome incoloro o gris blanquecino.

5.4

Clculo

El oxgeno disuelto expresado en mg/l, se calcula mediante la siguiente frmula:

mg/l de O 2 disuelto =
Siendo: V= F=

V . 0,025 . f . 8 . 1000 A-2

ml de disolucin de tiosulfato sdico 0,025 N gastados. Factor de correccin de la normalidad del tiosulfato sdico 0,025 N hallado mediante la valoracin con la disolucin de dicromato potsico 0,025 N.

A=

Volumen, en ml, del frasco de incubacin utilizado.

La Demanda Bioqumica de Oxgeno (DBO 5), expresada en mg/l, se calcula mediante la siguiente frmula:

D B O 5 mg/l =
Siendo:

(D

- D 2 ) . 100 C

D1 = mg/l de O2 disuelto en el frasco no sometido a incubacin. D2 = mg/l de O2 disuelto en el frasco sometido a incubacin de 5 das. C= Tanto por ciento de dilucin del agua de muestra.

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6.

OBSERVACIONES

Este mtodo no es aplicable a aguas negras o desechos Industriales concentrados que exigen diluciones muy elevadas y obligan a sembrar el agua de dilucin con un inoculo. En estos casos se precisan comprobaciones de la DBO 5 del inoculo y los mtodos y clculos requieren tcnicas laboriosas slo propias de los laboratorios especializados.

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