Origeme Irradiaodas Angiospermas

ProfessorAlessandroRapini UniversidadeEstadualdeFeiradeSantana

Origem e Irradiao das Angiospermas - Alessandro Rapini 2003 AULA 1 O curso de ps-graduao de Botnica da UEFS possua duas disciplinas abrangendo as angiospermas de maneira ampla, Dicotiledneas e Monocotiledneas. Essa diviso estabelecida no sculo XVII por John Ray no reflete uma classificao filogentica e por isso se faz inadequada dentro dos princpios modernos de sistemtica. consenso atual que apesar das monocotiledneas formarem um grupo monofiltico (mas veja Aula V), a divergncia entre monos e dicotiledneas no foi a diviso inicial das angiospermas. Uma classificao mais atualizada (e.g. Soltis et al. 1999) vai considerar grupos menores na diversificao inicial das angiospermas. Esses grupos representam clados que juntos formam um grado basal que inclui Chloranthales, Piperales, Magnoliales, Laurales, Winterales e as monocotiledneas. As demais angiospermas se encontram em um clado denominado Eudicotiledneas, definido pelo gro de plen tricolpado ou derivado desse tipo de plen. Surgiu, ento, a idia de ministrar um curso sobre a origem e evoluo inicial das angiospermas, abordando os grupos que teriam divergido no incio da evoluo das plantas com flores, representados por apenas 6% das angiopermas atuais na ausncia das monocotiledneas, dentro de um contexto evolutivo objetivo.

A origem das angiospermas foi considerada por Darwin, em 1879, "um mistrio abominvel". O que causou a estupefao de Darwin foi o aparecimento repentino das angiospermas no registro fssil. De repente, sem um elo aparente com nenhum grupo, as angiospermas teriam aparecido de maneira abundante e diversa. A origem e radiao das angiospermas esto entre os assuntos mais fascinantes da botnica e apesar do enorme progresso nos ltimos anos, muita coisa ainda est em aberto. A compreenso sobre a origem e diversificao do grupo influencia diretamente os sistemas de classificao, assim como as hipteses de evoluo dos caracteres. Alm disso, o tema tem sido explorado por grandes cientistas, oferecendo exemplos excelentes na abordagem de problemas em sistemtica. Um ponto essencial para que se possa investigar a origem das angiospermas que as angiospermas existam, ou mais fundamentalmente, que elas tenham uma nica origem, sejam monofilticas. Geralmente, o grande nmero de sinapomorfias usado para justificar a origem nica das angiospermas, j que seria mais provvel que essas vrias similaridades tenham derivado de um ancestral comum em vez de surgido independentemente em diversos grupos (mas veja Aula V). Angiospermas Como o prprio nome indica, as angiospermas so plantas que possuem vulos em carpelos, ou de maneira mais popular, so as conhecidas plantas com flores. Elas renem ca. 250.000 espcies extremamente diversas morfologicamente, dificultando o estudo comparativo. Ocorrem em todas as regies do planeta, principalmente em formaes terrestres, mas so menos freqentes nas floresta de conferas e nas tundras. As caractersticas que as renem no so apenas reprodutivas e nem sempre exclusivas e/ou universais; convergncia com outros grupos que produzem sementes, assim como

reverses em grupos mais derivados de angiospermas, so freqentes: floema com elementos de tubos crivados e clulas companheiras; elementos de vaso no xilema; folhas com venao reticulada; plen columelado; vulos bitegumentados; ovrio; reduo do gametfito feminino (oito ncleos); reduo do gametfito masculino (trs clulas); endosperma triplide Como possvel investigar a origem das angiospermas? 1. Atravs do registro fssil 2. Atravs de morfologia comparada e investigaes filogenticas, tanto de grupos atuais relacionados evolutivamente, como de grupos fsseis. Outra linha de pesquisa com bastante xito nos ltimos anos a combinao de estudos moleculares e ontogenticos de modo a entender a evoluo do desenvolvimento e assim reavaliar hipteses de homologia. Quais so os problemas encontrados nessa investigao? 1. O registro fssil incompleto. 2. A relao filogentica entre as plantas com semente controversa. Uma das abordagens clssicas para se investigar a origem das angiospermas procurar caractersticas semelhantes em grupos proximamente relacionados evolutivamente. As caractersticas compartilhadas seriam consideradas primitivas e justificadas pela origem comum. Grupos com grande nmero de caractersticas primitivas seriam ento fortes candidatos para representar os grupos basais de angiospermas. Os grupos mais relacionados com angiospermas devem ser procurados dentre as demais espermatfitas. As espermatfitas so as plantas com sementes. Esto divididas tradicionalmente em angiospermas, com vulos includos em um ovrio, e as gimnospermas, com vulos expostos (exceo Benettitales e Gnetales), resultando em sementes nuas. As espermatfitas teriam derivado das progimnospermas. Inicialmente, as plantas com sementes eram divididas em doios grupos: as plantas radiosprmicas (sementes de simetria radial, e.g. Cycadales) e as platisprmicas (sementes de simetria bilateral, e.g. conferas). Atualmente, as plantas com sementes so consideradas incontestavelmente um grupo monofiltico, diferenciando-se das demais porque o ginsporo germina no prprio ginosporngio, que envolto por um tegumento. Consequentemente, o gametfito feminino permanece fixo ao esporfito; nas pteridfitas, por exemplo, o gametfito clorofilado e independente.

GIMNOSPERMAS As gimnospermas, onde as sementes no se encontram inseridas no ovrio, so na maioria das vezes lenhosas e com folhas o ano todo (exceo Ginkgo). As folhas possuem geralmente venao dicotmica (exceo Gnetum), em vez de reticulada como nas angiospermas. Apresentam cmbio e consequentemente crescimento secundrio;

produzem traquedes (exceo s Gnetales que podem apresentar elementos de vaso) no xilema e clulas crivadas no floema. As gimnospermas so heterosporadas; os esporos haplides surgem da meiose do esporcito e so reunidos em esporngios de folhas modificadas denominadas esporofilos, organizados na maioria das vezes em estrbilos ou cones (exceo e.g. Ginkgo). Durante a alternncia de geraes, o esporfito diplide a fase dominante, enquanto o gametfito atua como um parasita alimentando-se das reservas do esporfito (tubo haustorial). O micrsporo uninucleado d origem clula protalial e do meristema. A ltima se divide formando a clula do tubo e a clula generativa, a exina do gro de plen se rompe e o tubo polnico se desenvolve. A clula generativa divide-se em clula estril e clula espermatognica, essa responsvel pela gerao dos gametas. O gro de plen entra pela micrpila e o tubo polnico germina, produzindo enzimas e consumindo o nucelo do megasporngio durante meses. Alcanado a cmara arquegonial entre o nucelo e o gametfito, os anterozides, gametas flagelados ou ciliados, so liberados e seguem at os arquegnio. O vulo composto de um tegumento que envolve o tecido parenquimatoso (nucelo, reserva energtica utilizada pelo gametfito feminino) e um esporcito que d origem ao gametfito feminino atravs de meiose (dos quatro megsporos apenas um funcional, exceo a Gnetum e Welwitshia, onde a inicial do gametfito feminino uma clula tetrasporada) e divises nucleares sucessivas (fase cenoctica), seguidas de formao da parede celular da periferia para o centro (alveolao anticlinal, seguida de paredes periclinais) e dos arquegnios (geralmente at 10, mas alcanam mais de 100 em Microcycas, exceo para Gnetum e Welwitschia, onde no ocorre a formao de parede celular completa do gametfito e formao de um arquegnio), onde se localiza o gameta feminino. O gro de plen (clula protalial, uma clula do tubo e uma generativa que dar origem aos gametas, de acordo com o grupo, o nmero de divises pode variar; Gnetum, Welwitschia e algumas conferas apresentam reduo desse processo) atinge a cmara polnica atravs da micrpila, abertura formada pelo tegumento do esporngio feminino. A fecundao ocorre na ausncia de gua externa, havendo a formao de um tubo polnico que leva o gameta masculino prximo ao gametfito facilitando a fecundao. Em Cycadales e Ginkgo, por exemplo, o gro de plen germina na cmara polinfera, rompe a exina e projeta a intina, formando o tubo polnico. O tubo, nesse caso, consome parte do nucelo durante seu desenvolvimento (ampliando a cmara e formando a cmara arquegonial) e posteriormente lana dois gametas espiraladamente ciliados (anterozides, derivados dos blefaroplastos) e mveis, na cmara arquegonial (zooidogamia). Em grupos mais derivados ocorre a sifonogamia, onde o tubo polnico deixa os gametas dentro do gametfito e portanto a fecundao ocorre na ausncia completa de gua. O tempo entre a polinizao e a fecundao pode levar mais de um ano como em Dioon (Cycadales) at algumas horas nas Gnetales, podendo promover inmeras fecundaes (poliembrionia), mas geralmente apenas um embrio vinga. A maioria dos embries sofre divises nucleares sucessivas (exceo Gnetum e Welwitschia e uma sequia) e esto sujeitos a um perodo de dormncia, onde no se desenvolvem.

A semente verdadeira o vulo fecundado e possui uma testa (derivada do tegumento do vulo), endosperma (derivado do gametfito feminino) e um embrio (resultado da fertilizao do gameta feminino; no caso das gimnospermas no h formao de fruto. Origem e Distribuio As gimnospermas surgiram no Devoniano (Paleozico), ca. 360 Ma, no Carbonfero j estavam diversificadas e atingiram seu auge no Trissico (Mesozico), ca. 200 Ma. Atualmente abrange quatro grupos bem definidos Cycadales, Ginkgo biloba, as coniferas e as Gnetales cuja relao ainda um pouco confusa, 80 gneros e 870 espcies, principalmente nas regies temperadas. Alguns grupos dominam grandes reas florestais como o caso das conferas na taiga, enquanto outros so representados por populaes isoladas nas regies tropical e subtropical, como o caso da maioria das cicas; outros ainda, so extremamente localizados como o caso da Gingko biloba, considerado um fssil vivo, o nico remanescente de uma linhagem, atualmente encontrada apenas em florestas remotas da China, ou Welwitschia mirabilis, espcie pitoresca e encontrada apenas no deserto da Nambia, no sudeste da frica. Progyminospermas Em 1960, Beck baseado em um fssil de Archaeopteris, gnero com fronde de pteridfita em conexo com Callixylon, gnero que apresentava crescimento secundrio caracterstico de gymnospermas, reconheceu um novo grupo denominando o Progymnosperma. Posteriormente, descobriu-se que em vez de folhas compostas, a suposta fronde representava ramos e as folhas eram simples e laminares. A partir desse grupo de plantas do Devoniano, com crescimento secundrio e produo de hetersporos liberados pela planta me, teriam derivado as plantas com semente. A partir de ento a linhagem das espermatfitas sofreu reduo no nmeros de megsporos (at um) e reteno do mesmo num esporngio protegido por um tegumento com micrpila e fixo ao esporfito, dando origem ao "vulo verdadeiro". Pteridospermas (Cycadofilicicales) As primeiras espermatfitas so artificialmente denominadas pteridospermas; so caracterizadas pela fronde de pteridfita e presena de sementes. Apareceram no Devoniano, atingiram o auge no Carbonfero, decaram no Permiano e ressurgiram no Trissico, se extinguindo entre o Jurssico e o Cretceo. At o final do sculo passado, eram conhecidas principalmente pela anatomia com caractersticas intermedirias entre as Cycas e as pteridfitas, e receberam o nome de Cycadofilicicales. As Pteridospermae foram reconhecidas em 1903 a partir de folhas com semente e em pouco tempo perceberam que tratava-se das Cycadofilicicales (nome vlido). Formam um grupo muito heterogneo e definido pela ausncia de estrbilos apesar da presena de sementes. Medullosa noei apresenta o hbito tpico de samambaia, essas plantas viveram no Carbonfero e eram caracterizadas pelo caule manoxlico, onde a medula e o crtex so espessos. As pteridospermas so como pteridfitas com sementes ou gimnospermas com hbito de samambaias. Pareciam Cycas que no desenvolveram estrbilos. Provavelmente, no formam ainda tubo polnico e portanto produziam o "pr-plen". Os

estmatos eram anomocticos e as sementes j produziam trs camadas no tegumento: sarcotesta, esclerotesta, endotesta. As Glossopterides predominaram no Gondwana, durante o Permiano. O caule, ao contrrio eram picnoxlico, ou seja, o tecido vascular ocupa a maior poro, em detrimento dos tecidos parenquimatosos. As folhas eram simples, lanceoladas, espiraladas, com venao reticulada, simples, estmatos anomocticos, os microsporofilos laminares com microsporngios agrupados em "sacos polnicos" e megasporofilos peltados, convoluto. As Caytoniales formam um dos principais candidatos para representar o ancestral das angiospermas. Elas esto registradas entre o Trissico e o Cretceo. As folhas so compostas, palmadas e a venao simples, reticulada. Os vulos so envoltos por uma cpula derivada do dobramento do megasporofilo (ou megasporofililos?), compondo o megasporofilo bilateralmente ramificado. A cpula poderia ser homloga ao tegumento externo de um vulo antropo de angiospermas, considerada condio ancestral em angiospermas por alguns autores. Os microsporngios so agrupados em sinngios polinferos quadriloculares (quatro sacos polinferos com plem alado, bi-auriculados e superfcie alveolada). Alguns consideram as Caytoniales relacionadas a Bennettitales e Gnetales, outros chegaram a consider-las verdadeiras angiospermas por causa dos vulos antropos, que poderiam ter derivado da reduo dos vulos para apenas um por cpula. Outros autores desvinculam essa relao e acreditam num paralelismo. As coristoperma, existiram no Gondwana durante o Trissico. Eram plantas lenhosas caracterizadas por folhas em forma de pteridfitas e megasporofilos bipinados, organizados dorsiventralmente. A reduo do nmero de vulos por cpula para um ajudaria a corroborar a hiptese de que o segundo tegumento dos vulos bitegumentados de angiospermas poderia ter derivado da cpula das pteridospermas. Cycadales Surgem no Carbonfero Superior, provavelmente derivada das pteridospermas (Cycadofilicicales) e atingem o auge no Jurssico. Dominaram a vegetao entre 300-70 MA, e hoje contam com 11 gneros e 190 espcies tropicais e subtropicais. Chamam a ateno pelos glicosdios txicos e de interesse biomdico, pelo carter ornamental e por serem constitudas de representantes raros e remanescentes de uma linhagem antiga e ameaada de extino. Caractersticas vegetativas So plantas com aspecto de palmeiras e denominadas como tal pelos nativos de vrias regies. As razes, eventualmente expostas, so invadidas por algas azuis, formando ndulos de Anabaena, importantes na fixao de nitrognio atmosfrico, o que permite que essas plantas possam se instalar em solos muito pobres. O caule manoxlico; o crtex parenquimatoso (clulas vacuolizadas e no especializadas, que armazenam gua) e grosso possui canais de mucilagem (no de resina) e o tecido vascular pouco desenvolvido, formando um lenho fino ao redor da medula tambm espessa. Esses tecidos parenquimatosos com mucilagem so utilizados como reservatrios de gua e possuem toxinas e critais de oxalato de clcio (?). O tronco areo e colunar, geralmente no ultrapassando 10 m de altura, mas podendo chegar at 18 m em

Lepidozamia hopei, ou subterrneo e tuberoso, ramificando somente quando o pice danificado. Na realidade, o caule formado por um sistema de ramificaes (crescimento simpodial), ou seja, vrios ramos axilares (exceo ao esporfito feminino de Cycas), cada qual forma uma nova coroa depois que o estrbilo terminal se desenvolve (visvel em espcies subterrneas). As folhas so compostas, pinadas (bipinada em Bowenia e uma espcie de Zamia), formando uma coroa no pice do caule, so cobertas por cutcula e os estmatos (anomocticos) se fecham para evitar a perda de gua, permitindo que a planta se estabelea em ambientes secos; so substitudas geralmente anual ou bianualmente e deixam a base no caule quando morrem (exceo a Microcycas e algumas Zamia). O meristema geralmente protegido por catafilos que tambm deixam sua marca. O lenho no forma anis de crescimento e a estimativas da idade da planta feita atravs da base foliar presa no caule. Numa estimativa conservativa de Dioon edule (Mxico), foram calculado cerca de 1000 anos de vida. Os fololos de Cycas possuem apenas a veia central, enquanto o restante possui venao dicotmica, aparentemente paralelinerve (exceo a Stangeria e Chigua que possuem venao central e veias secundrias anastomosadas). Ciclo reprodutivo So plantas diicas de acordo com a relao XY e a reverso sexual s foi registada em rarssimos casos, quando a planta foi submetida a forte stress. Os estrbilos so geralmente solitrios, mas eventualmente pode haver at trs no pice de Macrozamia ou Encephalartos. O masculino possui um eixo central e numerosos esporfilos espiralados com uma at milhares de microsporngios radialmente agrupados em "soros" na face abaxial, os quais liberam os esporos no ar ou so carregados por besouros (entomofilia). O plen cimbiforme (no auriculado), com exina alveolar. O microgametfito possui geralmente cinco clulas. Os megasporofilos femininos formam estrbilos (exceo em Cycas, onde os esporfilos saem do centro da coroa e possuem de um a seis vulos, nos demais gneros so dois) e podem produzir at 500 sementes e chegar a 40 kg, indo de 80 cm em Macrozamia at 2 cm em Zamia. Fssil So registrados fsseis para a Antrtica e Alasca, apontando uma distribuio muito mais ampla para o grupo. Eles permitem estabelecer algumas direes evolutivas e a descoberta de Cycadales com folhas simples sugere que folha composta um estado derivado no grupo. A reconstruo das partes reprodutivas tambm indica uma condensao dos esporofilos na formao dos estrbilos caracterstico dos grupos atuais. Nesse caso, a disposio de esporofilos de maneira pouco organizada como em Cycas seria uma caracterstica primitiva em Cycadales. Polinizao No sculo passado, acreditava-se que a polinizao ocorria pelo vento; hoje, a entomofilia j est confirmada para o grupo. Elas so polinizadas por besouros. Os insetos adultos so atrados pelo odor dos estrbilos masculinos, onde se alimentam de plen e se renem para o cruzamento. Depositam os ovos nos esporofilos ou at mesmo nos esporngios. As larvas nascem e se alimentam de plen. Elas se alojam no tecido do

microsporofilo e, nas ltimas fases larvais, o besouro passa a alimentar-se do parnquima do cone, entrando pelo eixo do estrbilo, chegando ao solo onde passa a pulpa. Depois de quatro a sete dias, o besouro sai a procura de um outro microstrbilo para se acasalar. A polinizao acontece quando indivduos adultos entram por engano num megastrbilo aps visitarem um microstrbilo. As sementes vo de 5 mm at 6 cm de compr. Em Cycas, apresentam camada esponjosa que permite flutuar e se dispersar pelo mar (da a distribuio), mas geralmente so coloridas, atraindo animais, principalmente grandes aves (Dinossauro no Jurssico), que digerem a camada externa carnosa, mas no a camada ptrea intermediria do tegumento. Taxonomia e Distribuio A anlise filogentica de Stevenson (1990) foi baseada em caracteres morfolgicos, que, a partir dela, props uma classificao para as Cycadales, dividindo a ordem em trs famlias. Cycadales sustentada principalmente pelo estrbilo terminal, presena de cicasina e ndulos de Anabaena na raiz. Existe a "tendncia" para o aumento do tronco, que passa a ser subterrneo e tuberoso em vrios gneros e uma universalizao de folhas compostas a partir de um ancestral com folhas simples (?) e uma compactao dos estrbilos femininos. Cycas conta com ca. 45 espcies descritas, mas apenas oito a 20 devem restar aps uma reviso taxonmica; muitas espcies ocorrem em ilhas; no Caribe, ca. 40 nomes foram sinonimizados em Zamia pulmila. Apresenta a mais ampla distribuio, ocorrendo em Madagascar e no litoral africano, sia e ilhas do Pacfico e norte da Austrlia. A ausncia de estrbilos femininos, o nmero de vulos por megasporofilos e o hbito explicam a posio do gnero no cladograma. Zamia ocorre na Flrida, Amrica Central e norte da Amrica do Sul. Abrange 47 espcies, duas ocorrem nos limites do norte do Brasil: Zamia ulei e Z. lecointei. Chigua, foi descrita em 1990 e endmica de florestas midas da Amrica do Sul (Colmbia). A regio neotropical parece ser uma fonte promissora de descobertas no grupo. Em apenas uma viagem pela regio norte da Amrica do Sul, foram encontradas, alem desse gnero, duas espcies novas de Zamia. Ceratozamia (11 spp.) e Dioon (9) so restritos ao Mxico. Mycrocycas representada por apenas uma espcie endmica de Cuba e que apesar do nome uma planta robusta. Bowenia (2), Macrozamia (27), Lepidozamia (2) ocorrem na Austrlia. Stangeria (1), Encephalartos (52) na frica. As plantas do Novo Mundo devem ser de origem Laursica enquanto aquelas do velho mundo devem estar relacionado ao Gondwana, exceo a Cycas. Ecologia e Conservao

Atualmente, ocupam diversos ambientes desde campos at florestas midas, desde as dunas costeiras e mangue at 2500 m s.m. So geralmente resistentes falta de gua. A decadncia demogrfica de populaes desse grupo pode ser avaliada atravs de registros do sculo passado: Em suas viagens Chamberlain citou uma florestas de Dioon para o Mxico, o que hoje no passa de remanescentes esparsos. Algumas espcies so bem restritas como Encephalartos dygerianus, descoberta em 1970 e descrita apenas em 1988, limitada 600 espcimens de um afloramento grantico do Sul da frica. Ou ainda, Encephalartos woodii que possui centenas de espcimens masculinos, todos clones da coleta original de 1895. Nesse ltimo caso esto tentando uma reverso sexual com o uso de hormnios ou hibridao com alguma espcie prxima. Economia e Conservao A goma do tronco no utilizada na produo de sagu como engana o nome vulgar "sago-palm", essa extrada de uma palmeira (Metroxylon). O suco das folhas jovens de C. circcinalis usado contra vmitos e flatulncias e de C. revoluta como tnico, promovendo expectorao. As sementes, folhas e caule so txicos afetando o sistema nervoso, mas algumas espcies produzem sementes comestveis (e.g. C. revoluta). Na Austrlia, elas foram sacrificadas com arsnico pelo governo porque nas regies secas eram ingeridas pelo gado causando paralisia seguida de morte. Depois de lavadas, as sementes de Zamia floridana so utilizadas na fabricao de farinha pelos ndios Seminole, e as de Encephalartos caffer na fabricao do po do Kaffir de Hottentos. As plantas so utilizadas como ornamentais, mas a explorao comercial dificultada pela lentido no crescimento. Uma espcie rara como Zamia neuroparastica pode chegar a valer U$ 1500. Encephalartos latifrons era formada por uma populao com menos de 40 indivduos e um fazendeiro vendeu 14, fazendo com que fossem instalados microships de segurana nas plantas para permitir a localizao dos meliantes. Para os interessados em Cycadales, The Biology of the Cycads" (Nortog & Nicholls 1997) apresenta uma reviso recente do grupo, recheada de ilustraes e fotos. interessante tambm ler o livro de Chamberlain sobre as Cycadales atuais. Escrito quase 80 anos atrs, ele apresenta as primeiras informaes sobre a biologia reprodutiva e ecolgicas dessas plantas, principalmente porque o autor teve possibilidade de ver a maioria das plantas em seu ambiente natural. Bennettitales (Cycadeoidales) O Jurssico foi denominado a "Era dos Dinossauros e das Cicas", mais tarde notou-se que os fsseis dessa poca continham duas linhagens independentes, distintas principalmente por caracteres reprodutivos, mas tambm pela estrutura dos estmatos, anomocticos (clulas subsidirias derivadas da epiderme) nas Cycadales (como em algumas conferas e em Ginkgo e Ephedra) e paracticos (clulas subsidirias teriam a mesma origem das clulas guarda, derivadas da mesma clula inicial, como em Bennettitales, Gnetum, Welwitschia). Como nas Cycadales, esses representantes devem ter derivado de populaes includas nas Pteridospermas e surgem como um ramo divergente em relao quela ordem.

Apareceram no final do Paleozico com Eremopteris, gnero de classificao duvidosa. Foi descrito baseado no gnero fssil Bennettites, o qual verificou-se ser sinnimo de Cycadeoidea, gnero pr-existente. O primeiro registro seguro remete ao Trissico, atingiu o auge no Jurssico, declinando no Cretceo Superior. O caule globoso (Cycadeoidea ou Bennettite) ou colunar (williansonia), nesse caso o fssil era confundido com coral ou casa de marimbondos; o crtex espesso e o lenho fino (tipicamente manoxlico) e existem registros de vasos no grupo. As folhas so compostas, raramente simples (Nilssoniopteris), atingindo at 3 m e a venao paralela. A semelhana com Cycadales deve ser fruto de convergncias (veja Aula IV). Os estrbilos so uni ou biesporngiados, produzindo esporngios femininos e masculinos no mesmo eixo. Os vulos so orttropos (com dois tegumentos) e numerosos (mais de 100); dispostos em um receptculo e intercalados por escamas interseminais estreis, provavelmente vulos estreis; o tegumento interno forma o tubo da micrpila. Em redor do cone feminino existem verticilos de microsporofilos pinados que formam sinngios (grupos de microsporngios). A estrutura reprodutiva envolta por numerosas brcteas dispostas helicoidalmente ("perianto"). Os esporngios deviam ficar encerrados, sendo eliminado com a deteriorao das estruturas ou atravs de perfurao por besouros. Sua estrutura parece durvel tanto a ao de insetos como de doenas e sua extino pode estar relacionadas a extino de polinizadores especficos. Ginkgo biloba Ginkgoales conhecida desde o Permiano. Atingiu o auge no Jurssico, estando amplamente distribuda no Mesozico, atualmente resta apenas Ginkgo biloba, provavelmente, a espcie de espermatfitas mais antiga, mantida sem modificao por eras. Morfologia So rvores com at 30 m alt. e 0,5 m dim., com mucilagem na raiz e folhas. As folhas so flabeliformes e a venao paralela-dicotmica; tornam-se douradas quando secas. Os estmatos so anomocticos. O caule parcialmente mano (ramos jovens) e parcialmente picnoxlico, produzindo anis de crescimento. So diica, os estrbilos saem das axilas de botes e folhas; o masculino composto de vrios microsporangiforos e o feminino de um pednculo com dois vulos divergentes no pice, geralmente um aborta. O tegumento se desenvolve em trs camadas, incluindo uma capa externa quase livre do restante, envolvendo o nucelo. Essa capa era interpretada inicialmente como derivada do megasporofilo, no entanto, dados ontogenticos contestaram essa hiptese. O gameta mvel e a venao das folhas lembram sua relao com as pteridfitas; a presena de mucilagem e o ciclo reprodutivo assemelha-se ao das Cycadales, com tubo polnico haustorial e gametas ciliados. A anatomia da madeira semelhante a das conferas. O perodo para o tubo polnico se desenvolver at liberar gametas para fertilizao de cinco meses. Posteriormente, o zigoto leva mais de nove meses para iniciar a germinao da semente.

Foi cultivada em templos budistas da China e Japo e utilizada em projetos de urbanizao, mas parece existir populaes viventes em florestas montanhosas da China. As sementes produzem um odor de manteiga ranosa, por causa do cido btrico do tegumento carnoso. Da a preferncia por plantas masculinas ou a utilizao de cido mlico para evitar a produo de sementes, uma vez que difcil distinguir o sexo das plantas quando jovens. A amndoa da semente consumida na China e Japo e o extrato utilizado na cultura oriental h mais de 3000 anos, sendo recomendada para problemas de corao, circulao, asma, toxidade e mal de alzheimar. Sistemtica Em alguns cladogramas Ginkgo aparece prximo das conferas e Cordaites (quando so includos fsseis), mas algumas anlises tambm sugeriram maior proximidade com Cycadales, ou ainda como grupo irmo do clado formado pelas conferas e Gnetales e angiospermas (e.g. Laconte & Stevenson 1990). Cordaitales Plantas extintas que formaram as primeiras florestas extensas e altas, entre o Devoniano e o Trissico. As folhas eram simples e atingiam at 1 m compr., a venao era paralela a dicotomizada e no possuam resina. Os ramos frteis fazem uma aluso do que seria um cone composto de conferas no seu estado primitivo; eram formados de rmulos condensados, inseridos na axila de cada brctea. O plen era auriculato e os gametas deviam ser mveis. Conferas A palavra designa aqueles que possuem cones (exceo feita a alguns gneros como Juniperus, onde os estrbilos so muito modificados assemelhando-se a bagas). Ocorrem desde o Carbonfero e j eram comuns no Permiano e Trissico. Hoje, a maior parte das florestas das regies frias e temperadas so cobertas por conferas. Morfologia So plantas ramificadas, com folhas simples, aciculares ou escamiformes, geralmente espiraladas. O caule picnoxlico, ou seja, o tecido vascular ocupa a maior parte do tronco. O tecido de transfuso geralmente retm taninos no citoplasma de suas clulas parenquimticas e as traquedes so grossas, lignificadas e com pontuaes circulares. O crtex parenquimatoso, geralmente possui canais resinferos, os quais tambm podem estar presentes no xilema, dependendo do grupo. A atividade cambial contnua produz anis de crescimento que permitem estimar a idade da planta. Os anis so decorrentes da flutuao hdrica no crescimento da planta, fator que se apresentou bastante adaptativo em regies frias. Os vasos formados no inverno, quando a gua se transforma em gelo ou neve e torna-se menos disponvel para a planta, so mais numerosos, lignificados e de dimetro menor, promovendo uma conduo mais lenta, porm mais segura do lquido. So mono ou diicas e os estrbilos monoclinos ou diclinos (Podocarpaceae, Araucariaceae e Taxaceae). Os estrbilos femininos so compostos (os rmulos

condensados na axila de ramos frteis do grupo fssil de Cordaianthus, a reduo do nmero de vulos em Lebachia e finalmente o ramo completamente fundido formando a escama ovulfera na axila das brcteas). As escamas ovulferas so ramos laterais contendo megasporngios, reduzidos, condensados e localizados na axila de uma brctea. Segundo a Teoria do Braquiblasto, ento, o cone feminino um conjunto de estrbilos e no homlogo ao masculino; a teoria ligular no reconhece a ausncia da lgula no cone masculino e tratam-nos como homlogos. A brctea e a escama ovulfera apresentam vrios graus de fuso e vascularizaes distintos de acordo com o grupo (basal em Pinaceae at completa em Araucariaceae). O gro de plen pode ser auriculado, apresentando dois alvolos com ar. Essa estrutura parece estar relacionada no apenas a anemofilia, mas talvez esteja envolvida tambm na flutuao do plen pelo lquido da micrpila. Nas conferas ocorre a sifonogamia, ou seja, formao de tubo polnico funcional, onde o tubo libera enzimas, atravessando o nucelo e penetrando no gametfito feminino para liberar os gametas imveis diretamente no arquegnio. O tempo de durao entre a polinizao e a fertilizao de aproximadamente um ano em Pinus, mas poucos meses em outros grupos. Taxonomia As conferas incluem sete famlias, 60-65 gneros, muitos monotpicos, e cerca de 600 espcies. Pinaceae abrange 200 espcies caracteristicamente representada no hemisfrio norte, mas chegando at a Amrica Central e sudeste da China; a maioria das espcies classificada em Pinus, que conta ca. 90 espcies. A famlia apresenta a maioria das caractersticas das conferas e era colocada como a mais derivada, no entanto, estudos cladsticos vm apontando como a famlia que teria divergido inicialmente na linhagem das conferas. Entre seus representantes merece destaque Pinus logaves, cuja idade estimada em quase 5000 anos. As Araucariaceae esto distribudas no hemisfrio sul e englobam 32 espcies dividas em dois gneros, Araucaria e Agathis. A maioria das araucrias so diicas, ao passo que as Agathis so monicas. Existe um vulo por escama ovulfera e esse geralmente transforma-se em uma semente recheada de tecido nutritivo, bastante calrico e geralmente consumido em festas juninas regadas a quento. Podocarpaceae outra famlia naturalmente representada no Brasil. Abrange ca. 105 espcies e sete gneros, mas recentemente vem sendo subdividida em quatro famlias com ca. 18 gneros. As Podocarpaceae apresentam uma ou muitas escamas, cada uma com um vulo, subtendidas por uma brctea. Freqentemenet, apenas um vulo se desenvolve e as escamas podem apresentar vrios graus de fuso e reduo, freqentemente se unindo formando um pednculo basal ou receptculo carnoso e suculento ao redor da semente (epimncio). Nessa famlia, est includa Parasitaxus ustus, uma espcie parasita dee gimnospermas. Taxaceae inclui cinco gneros e 25 espcies, restritas ao hemisfrio norte. Sua classificao duvidosa porque a famlia no apresenta os estrbilos femininos formando um cone como comum nas conferas; os vulos so solitrios e terminais, na axila dos ramos e no existem evidncias de brcteas e ramos reduzidos, as sementes geralmente so envoltas por um arilo provavelmente envolvido na disperso. Alm disso, no existem canais resinferos nas folhas, os estrbilos masculinos so compostos,

diferente das demais gimnospermas, e o gro de plen no auriculado como de costume nas conferas. Dependendo da polarizao que se d para esses caracteres, alguns autores o inserem em Conferas e outros o colocam como grupo externo. As Taxodiaceae geralmente formam populaes localizadas, como as sequias gigantes, protegidas nos parques da California (Serra Nevada), no leste dos EUA, ou ainda Metasequoia que, amplamente distribuda no Cretceo e Mioceno nos EUA, foi localizada no interior da China. Sequoiadendron giganteum a planta mais alta do mundo alcanando mais de 100 m alt., 10 m dim. e ca. 4000 anos. A madeira de uma rvore daria para construir 35 casas de cinco quartos, o equivalente a trs quarteires. Outro representante imponente da famlia cipress mamute (Taxodium mucronatum) do Mxico, com 12 m de dimetro. Em um cladograma a partir de 18S RNA, Pinaceae teria divergido inicialmente, as Podocarpaceae e Araucariaceae aparecem como grupos irmos, provavelmente tendo se diversificado no Gondwana e as Taxodiaceae se apresentam como grupo parafiltico e so includas em Cupressaceae s.l., com exceo de Sciadopitydaceae. Economia So utilizadas para cobrir reas e evitar eroso. Algumas espcies so ornamentais, outras tm a madeira utilizada na construo de mveis, fabricao de papel, lpis, arco e flecha, e construes. Algumas rvores valiosas e de crescimento lento esto ameaadas pois geralmente a recuperao realizada com espcies Pinus com crescimento rapido. So usadas para a extrao de compostos aromticos para perfumes, incenso ou produtos medicinais, tambm na fabricao de tintura, vernizes e nanquim. O tanino da casca pode ser utilizado para curtir couro. O ambar, utilizado na fabricao de jias derivado da resina fossilizada de um pinheiro do Bltico extinto. Gnetales constituda por Ephedra, Welwitschia e Gnetum, gneros muito distintos entre si e distribudos de maneira bastante particular. A deteco de fsseis de Gnetales complicada pelas semelhanas com outros grupos, mas fsseis de plen efedride, entretanto, so documentados para o Trissico, quase desaparecendo durante o Jurassico para ressurgir com as angiospermas no Cretceo Mdio, em regies de baixa paleolatitude. Morfologia Possuem folhas opostas e decussada, ou verticiladas. Alm das traquedes muitos indivduos possuem elementos de vaso no xilema secundrio, o que foi utilizado como argumento para justificar a relao de proximidade com as angiospermas. Os estrbilos so compostos, muitas vezes morfologicamente bissexuais, mas funcionalmente unissexuais e se apresentam como inflorescncias. Em plantas masculinas, o estrbilo feminino estril encontrado no pice secreta uma gota aucarada provavelmente relacionada com a atrao de insetos polinizadores. As brcteas que subentendem os estrbilos so comparadas ao perianto das flores e a escama que forma uma espcie de envelope externo ao vulo, freqentemente associadas evolutivamente ao tegumento externo das sementes de angiospermas. Esse envelope se desenvolve na semente madura,

que se torna alada, forma que ajudaria na disperso. Alguns autores assumiram esse carter como suficiente para isolar o grupo das angiospermas e gimnospermas, denominando-o Chlamidosperma (Chlamido=envelope). O tegumento interno forma no pice o tubo da micrpila extenso e receptivo. O desenvolvimento do gametfito masculino sofre uma reduo na evoluo das Gnetales, em Ephedra o desenvolvimento como em Conferas e Ginkgo, h a formao de duas clulas protaliais, mais uma clula estril, enquanto em Gnetum e Welwitschia, s existe uma clula protalial e no formada a clula estril, formando ento quatro clulas at a formao dos gametas (nas angiospermas o microgametfito ainda mais reduzido com a formao de apenas trs clulas, eliminao da clula protalial). A fecundao geralmente dupla, o tubo polnico libera o gameta binucleado no arquegnio. Em Gnetum e Welwitschia, o gametfito feminino tetrasporado, no h degenerao de trs esporos, nem a formao de parede celular; o gametfito feminino permanece cenoctico, ao menos no pice, no formando arquegnios. Um dos ncleos fecunda o gameta feminino no centro e o outro a clula do canal ventral, que geralmente ruma para o centro. Ephedra Morfologia O gnero conta com ca. 50 espcies, geralmente arbustos cespitosos, raramete volveis ou arvoretas (E. pedunculata do Texas chega a ultrapassar 5 m alt.), encontrados em solos alcalinos de desertos ou montanhas rochosas. As folhas so bem reduzidas, geralmente decussadas ou verticiladas, a venao paralela e os estmatos anomocticos (diferindo dos demais gneros, onde so paracticos, como em Benettitales e angiospermas), a fotossntese em boa parte realizada no caule de ramos jovens em forma de filoclado. A maioria das espcies funcionalmente doica. Os estrbilos masculinos so compostos de esporngios pedunculado (esporangiforos) precedidos de pares de brcteas decusatas. O feminino possui dois vulos no pice. O tempo entre a polinizao e a fertilizao de dez horas, bem menor se comparado a cinco meses em Ginkgo biloba ou quase um ano em Cycadales, por exemplo. O anto feminino se transformam em baga, geralmente vermelha e que pode ser dispersa por aves; mais raramente, seca e anemocrica. Biogeografia Ocorre em regies ridas ou semi-ridas da sia, Norte da frica, Europa, Amrica do Norte e Amrica do Sul, desde o nvel do mar at 5000 metros. No Brasil, ocorre a E. triandra, uma das poucas espcies que chegam a compor uma arvoreta. Utilidade A efedrina, extrada de espcies asiticas, utilizada para asma e resfriado ou antipirtico, mas tambm, graas a ao vasoconstritora estimulante. No Tibet, a raiz de E. gerardiana utilizada como combustvel.

Gnetum Morfologia O gnero abrange ca. 40 espcies tropicais, a maioria de distribuio restrita. So geralmente lianas que se estendem at o dossel de altas florestas, apenas duas espcies so rvores (G. costatum da nova Guin chega a mais de 20 m alt.). As folhas so opostas e de nervao pinada, reticulada. Os estrbilos so compostos, agrupados em anis (derivados da fuso de brcteas) em torno de ramos, formando uma espcie de espiga. Nesse gnero, como em Welwitshia, o gametfito feminino tetrasporado com formao das paredes celulares da zona do calazal para o pice. O ncleo gamtico fica no pice cenoctico at a fecundao, ou seja, no h formao de arquegnios, o gametfito masculino tambm reduzido. O embrio no se inicia com ncleos livres. O gro de plen esfrico e verruculoso ou liso, diferindo dos demais gneros de Gnetales, que possuem gros de plen efedride, ou seja, elipsides e com estrias longitudinais. As sementes continuam envoltas pelas brcteas, que geralmente ajudam na disperso por pssaros, ou gua quando o envelope da semente semelhante a cortia. Utilidade As folhas, frutos e sementes so comestveis (G. gnemon?). A casca utilizada na fabricao de fibras para papel, corda ou rede de pesca. Gnetum ula tem o leo extrado para o cozimento, iluminao. Os compostos qumicos parecem ter se desenvolvido paralelamente aos de angiospermas, assemelhando-se queles encontrados em grupos derivados. Sistemtica Na maioria das anlises, Gnetales aparece como grupo monofiltico, no entanto, no raro encontrarmos uma relao de parafilia para o grupo,estando as angiospermas inseridas em Gnetales. Welwitschia O gnero representado unicamente por W. mirabilis (o nome "incrvel" apropriado). Descoberta em 1860, na Angola. So plantas perenes (at 100 anos) com caule tuberoso, curto e reto, 45 cm no solo arenoso. So produzidas duas folhas carnosas e permanentes, de crescimento contnuo ao longo da vida da planta; a nervao apesar de aparentemente paralela na realidade anastomosada. Depois o meristema apical produz duas escamas e degenera. As folhas crescem 8-15 cm/ano e chegam a alcanar 6,2 m (3,7 m de tecido vivo) compr. e 1,8 larg. A estimativa de vida de algumas plantas chega a 2000 anos. So plantas diicas, com estrbilos terminais. Os masculinos apresentam quatro verticilos decussatos de brcteas, duas bractolas nas axilas e duas escamas fundidas no pice formando o envelope, seguem-se ento seis microsporngios (=estames) e no pice um vulo abortado. Geografia e ecologia

Ocorre basicamente no deserto da Nambia, sudeste da frica, onde a umidade est baseada principalmente na neblina litornea. Apesar disso as plantas aparentemente no apresentam mecanismos especializados para evitar a evaporao e parece que sua vantagem est na absoro da gua. Filogenia Por apresentar gametfito tetrasporado e cenoctico, no apresentando arquegnio definido at o momento da fertilizao, desenvolvimento do gametfito masculino reduzido e estmatos paracticos, Welwitschia inevitavelmente pode ser considerada mais relacionada Gnetum. Conservao Est protegida da extrao e explorao como combustvel. Para os mais interessados em Gnetales, a International Journal of Plant Science 157 (6 Suppl.) de 1996 est repleta de artigos sobre o grupo.

Cpia dos textos pode ser encontrada na pasta 78 (Origem e radiao das angiospermas) no Xerox da Administrao (mdulo 3), ou eletronicamente na internet. Divirtam-se!

Textos para a prxima aula (17.III.2003): Takhtajan, A. 1976. Neoteny and the origin of flowering plants. In Beck, C.B. (ed.) Origin and evolution of angiosperm. Columbia University Press. Pp: 207-219. (pasta 78) E Stebbins, G.L. 1965. The probable growth habit of the earliest flowering plants. Ann. Missouri Bot. Gard. 52(3): 457-468. (pasta 78) OU Stebbins, G.L. 1976. Seed, seedlings and the origin of angiosperms. In Beck, C.B. (ed.) Originand evolution of angiosperm. Columbia University Press. Pp: 300-311. (pasta 78)

Bibliografia complementar: Li, P. & Johnston, M.O. 2000. Heterocrony in plant evolutionary studies through the twientieth century. Bot. Rev. 66: 57-88. (internet)

Tpicos para Stebbins 1965 1) No que se sustenta a hiptese de que as primeiras angiospermas seriam arbreas? 2) No que se baseia o "Princpio de Irreversibilidade"? Como esse princpio refutado em relao ao hbito das angiospermas? 3) Por que o ciclo de vida herbceo seria vantajoso na evoluo das primeiras angiospermas? 4) Que tipo de hbito o registro fssil sugere para as primeiras angiospermas? Qual o argumento contra esse registro? 5) Por que as primeiras angiospermas seriam arbustivas? Em que ambiente elas teriam inicialmente evoludo? 6) Quais exemplos so usados como evidncia da hiptese de que as angiospermas poderiam ter se originado a partir de um ancestral arbustivo e ento se especializado em plantas arbreas e herbceas? Tpicos para Takhtajan 1976 1)O que neotenia? 2) Influncia da Neotenia na evoluo de uma linhagem? 3) Exemplos de linhagens supostamente derivadas de uma neotenia inicial. 4) Evidncias de que as angiospermas podem ter sofrido neotenia. 5) Ambientes que propiciariam o desenvolvimento de neotenia. Tpicos para Stebbins 1976: 1) Custos e benefcios relacionados ao tamanho da semente. 2) Principais caractersticas das angiospermas. 3) Etapas evolutivas para a formao do carpelo. 4) Etapas da transferncia de funo. 5) Caractersticas que encurtaram o tempo da diferenciao floral at a maturao da semente. 6) Qual o paradoxo encontrado em relao ao local de origem das angiospermas? Como ele foi explicado?

Atualizado 10.III.2003 AULA 2 As caractersticas que definem as angiospermas esto relacionadas principalmente s estruturas reprodutivas. Destacam-se nesse aspecto a incluso dos vulos bitegumentados (geralmente antropos, i.e. com a micrpila direcionada para o funculo), no carpelo, o qual pode ser ascidiado ou convoluto. Nas angiospermas, o megasporcito aps uma meiose, se divide formando megsporos. O desenvolvimento do gametfito bastante varivel. De modo geral, oito ncleos se arranjam de modo a ficar duas sinrgides junto ao gameta feminino prximo a micrpila, trs clulas antipodais no outro extremo e dois ncleos polares centrais. o microsporcito, ou clula-me do plen, sofre uma meiose, originando quatro micrsporos. O micrsporo se divide formando uma clula generativa menor e uma clula vegetativa (clula do tubo) bem maior. Ao entrar em contato com a regio receptiva, o estigma nas angiospermas, o tubo polnico germina e a clula generativa se divide formando dois gametas. Por vezes essa diviso pode ocorrer antes da liberao do plen e portanto formao do tubo polnico, formando assim gros de plen tricelulares. Uma das clulas ir fertilizar o gameta feminino enquanto a outra dever fertilizar os ncleos centrais, dando origem ao endosperma triplide responsvel pelos recursos energticos do zigoto. O endosperma triplide pode ser apenas o tecido nutritivo do gametfito que se desenvolve tardiamente ou um outro embrio modificado. Os recursos sero consumidos durante a embriognese de modo a formar os cotildones responsveis pelo desenvolvimento do embrio. De modo geral, essa reduo dos gametfitos associada a produo do endosperma triplide possibilitou reduzir sensivelmente o tempo entre a polinizao e a maturao da semente e evitar o desperdcio na produo de tecidos de reserva na incerteza de uma fertilizao do vulo. Outra caracterstica considerada importante a presena de vasos, mas eles podem estar ausentes, principalmente em grupos basais, sugerindo que esse carter possa ter evoludo dentro das angiospermas. As primeiras angiospermas teriam, ento, vasos semelhantes a traquedes, com perfuraes escalariformes, da onde teriam derivado as fibras para sustentao e os vasos para conduo. Os vasos teriam sofrido um encurtamento do comprimento associado ao alargamento do dimetro. As terminaes passariam a formar uma placa, inicialmente angulada e com numerosas perfuraes escalariformes, as quais diminuiriam em nmero at formar um nico poro transversal. Enquanto os vasos favorecem a conduo de fludos, eles so menos eficientes na sustentao, o que teria pressionado a evoluo simultnea de fibras tambm derivadas das traquedes. Os elementos de tubo crivado e as clulas companheiras tambm caracterizam as angiospermas. Teorias Concorrentes Existem duas linhas gerais para a origem das angiospermas. Teoria Antostrobilar ou Euantial (Arber & Parkins 1907) Reflete uma extenso de sistemas de classificao pr-darwinianos, como os de De Candolle ou de Bentham & Hooker, sendo porm corroborada por evidncias fsseis de

folha e plen. Essa teoria tem sido desenvolvida desde o sculo XIX por Delpino e Bessey e defendida por Takhtajan e Cronquist na segunda metade do sculo passado. Ela est baseada na hiptese de homologia entre as flores de angiospermas e os estrbilos bissexuais no-ramificados semelhantes aos encontrados nas Bennettitales do Mesozico. As primeiras flores seriam grandes, radialmente simtricas, com estruturas reprodutivas e vegetativas numerosas, livres, dispostas espiraladamente, estames laminares, carpelos com muitos vulos antropos, bitegumentados e polinizadas por besouros. Segundo essa teoria, as flores de Magnoliaceae e Winteraceae representariam o estado floral mais primitivo em plantas atuais. Teoria Pseudantial (Wettstein 1907) Sugere que as Piperales, Chloranthales e as antigas amentferas (Fagales, Juglandales, Myricales, Casuarinales Hamamelidae - reunidas pelas inflorescncias em forma de espigas ou ramos pendentes do tipo amentilho), teriam flores semelhantes s primeiras angiospermas, i.e. flores unissexuais que seriam homlogas aos estrbilos das Gnetales e flores bissexuais homlogas a pseudantos derivados da unio de flores unissexuais e simples, representando estrbilos compostos condensados. As flores seriam pequenas, simples, simetria bilateral, carpelo com um ou poucos vulos e polinizao pelo vento. De acordo com essa teoria adotada pela escola de Engler, as Gnetales formariam o grupo irmo das angiospermas e as Chloranthaceae representariam um grupo chave na origem das angiospermas o que corroborado pelo registro fssil muito antigo de plen clorantide. As angiospermas primitivas Para Cronquist (1988), era claro que as angiospermas teriam derivado de algum grupo de gimnospermas, provavelmente de "Cycadicae" (Pteridospermas Lyginopterys, Glossopterys e Caytonia - Bennetitales e Cycadales). Elas seriam lenhosas, com lenho manoxlico, onde as traquedes so grandes com pontuaes circulares ou escaliformes e raios multi-seriados, altos (vs. picnoxlico, raios estreitos, com traquedes pequenas e pontuaes circulares). Como alguns grupos de angiospermas basais, como Winteraceae, no possuem vasos, ele considerou os vasos uma caracterstica secundria. As folhas seriam inteiras, simples, alternas, com venao pinada, reticulada, estmatos paracticos (com clulas subsidirias diferenciadas), sem estpulas (elas teriam surgido em algum grupo de Magnoliidae). As flores nasceriam na poro terminal dos ramos, seriam grandes, actinomorfas, com muitas peas florais dispostas espiraladamente. O perianto seria composto apenas por spalas derivadas da reduo de modificaes de folhas. As ptalas teriam surgido mais tarde e teriam derivado de estames. Os estames eram laminares, sem diferenciao entre filetes e anteras. O plen monossulcado teria originado o triaperturado a apartir de ornamentao em V ou Y, como em Cannelaceae. O gineceu seria apocrpico, com muitos carpelos. O ovrio, derivado da conduplicao do megasporofilo, seria estipitado e estaria unido na margem, mas no fundido, o estilete no estaria diferenciado. Os vulos seriam bitegumentados, muitos por carpelos, de placentao ventral, dispostos na regio da sutura, resultado da posio marginal ancestral. O ovrio estipitado. O fruto primitivo seria um folculo, com frutculos estipitados se abrindo ventralmente para a liberao das sementes. A polinizao seria por besouros, que visitariam as flores em busca de plen.

Dentre as adaptaes mais importantes na evoluo inicial das angiospermas destacamse: a especializao do sistema vascular, que tornou a conduo mais eficiente (mas Gnetales no se encontra diversificada, apesar de possuir vasos) e a entomofilia, que aumentou a eficincia da polinizao cruzada (mas a entomofilia j ocorria em algumas gimnospermas e, por outro lado, em alguns grupos com flores, a anemofilia parece bem sucedida). As caractersticas que me parecem mais importantes so a reduo dos gametfitos e formao do endosperma triplide associada. GRUPOS BASAIS Classificao A teoria antostrobilar foi em grande parte influenciada pela classificao pr-evolutiva. De Candolle, considerou Magnoliales (incluindo Annonaceae, Illicium e Drymis), Nymphaeales e Ranuculales-Papaverales na base de sua classificao e em seqncia, sugerindo assim uma relao entre esses grupos. Mais tarde Bentham e Hooker (1862), adicionaram Lauraceae em Ranales. Eichler (1890) e Engler & Prantl (1891), apesar de defenderem a teoria das amentiferas como grupo basal das angiospermas, contriburam com o conceito de Ranales acrescentando Hernandinaceae, Monimiaceae e outras famlias. Finalmente, Bessey (1915) construiu a primeira classificao de plantas supostamente filogentica, acrescentando Piperaceae, Sauraceae e Chloranthaceae, estabelecendo Magnoliidae com cinco linhagens: Magnoliales, Laurales, Piperales, Nymphaeales e Ranunculales-Papaverales. Takhtajan, Cronquist e Dahlgren, os considerados taxonomistas modernos, seguiram Bessey com poucas inovaes. Takhtajan (1982), por exemplo, considerou duas linhagens, com plen monossulcado e plen trissulcado, enquanto Dahlgren colocou Piperaceae em Nymphaeales, em vez de em Laurales. Independentemente da teoria adotada, os grupos que teriam divergido no nicio da evoluo das angiospermas estariam includos em Magnoliidae. As amentferas foram rechaadas por causa do plen triporado, que aparece no registro fssil bem depois do surgimento das angiospermas e que em anlises filogenticas definem as eudicotiledneas. em Magnoliidae que encontramos a maioria das caractersticas consideradas primitivas, como apocarpia, plen monossulcado, estames numerosos, etc. O sistema de Cronquist (1981, 1988), uma adaptao dos sistemas de Bessey (1915) e Takhtajan (1964, 1966), considera seis subclasses de dicotiledneas, incluindo Nymphaelidae e Ranunculidae em Magnoliidae. Ele deixa explicito que Magnoliidae um grupo parafiltico, de onde teriam evoludo as demais subclasses. A subclasse inclua oito ordens, tendo como grupo ancestral as Magnoliales. As demais ordens teriam, ento, derivado de Magnoliales, exceo feita a Ranunculales e Papaverales, que estariam relacionadas com Illiciales. As duas ordens estariam includas em Magnoliidae por causa do gineceu apocrpico e elementos florais espiralados em Ranunculales e numerosos alcalides benzil-isoquinolnicos caractersticos da subclasse em Papaverales. A relao delas com Illiciales era sustentada pelo plen triaperturado nas trs ordens. Entretanto, enquanto Ranunculales e Papaverales possuem plen tricolpado, em Illiciales ele tricotomonossulcado, uma modificao do monossulcado. Dessa maneira, Ranunculales e Papaverales esto atualmente classificadas nas eudicotiledneas. A posio de algumas famlias como Ceratophyllaceae, Lactoridaceae, Nelumbonaceae e Austrobaileyaceae continuava controversa.

No nosso curso, os grupos basais se referem a todas as angiospermas, com exceo das eudicotiledneas, o que de modo grosseiro podem ser definidas como as Magnoliidae mais as monocotiledneas. As Magnoliidae so conhecidas por apresentarem o grupo mais conservativo entre as gimnospermas. O nmero e a filotaxia dos carpelos e das demais partes florais so bastante variados. Ao longo da evoluo, entretanto, houve uma tendncia fixao do nmero floral em 3, 4 e 5 e o padro verticilado das peas (a seleo do padro verticilado deve ter facilitado a formao de um cmpito interno em gineceus sincpicos). Os estames so caracterizados em alguns grupos pela quantidade elevada de tecidos ao redor dos sacos polnicos e falta de uma diferenciao entre anteras e filetes. Esses estames laminares so supostamente primitivos, mas como as plantas desse grupo so em muitos casos protognicas e polinizadas por besouros, mudanas para esse estado poderiam ser justificadas pela maior proteo dos sacos polnicos. Num segundo momento, eles poderiam ajudar tambm na atrao de polinizadores, tornando-se vistosos e produzindo odores. Com a diminuio do tecido, passou a haver uma diferenciao entre estilete e anteras e a forma ficou mais conservativa. O gineceu geralmente apocrpico (como tambm o nas primeiras angiospermas fsseis) ou unicarperlar, mas no raro a presena de um cmpito, regio que permite a distribuio dos tubos polnicos entre os carpelos. Nos grupos basais o cmpito geralmente extra-ginoecial, composto por um trato comum secretado pela regio estigmtica e que forma uma camada sobre o gineceu. Ele funciona, ento, como um hiperestigma. A sutura do carpelo a regio por onde o tubo polnico germina para penetrar no ovrio e responsvel pelas reaes de incompatibilidade. As superfcies internas dos carpelos so geralmente fundidas ps-genitalmente, mas em alguns casos a abertura no obstruda e sim preenchidas por uma secreo (como em Nymphaeales). Os vulos so geralmente crassinucelados, bitegumentados (os unitegumentados parecem ser derivados) e antropos (os orttropos parecem ter surgido diversas vezes, geralmente em carpelos uniovulados), de um a muitos por carpelos. A micrpila fechada pelos tegumentos (exceo em Myristicaceae, fechada por secreo. Nesses grupos, a polinizao realizada por besouros e moscas. A corola resultou da modificao de estamindios perifricos. As flores bissexuais nas Magnoliales so sempre protognicas. (para morfologia e anatomia floral das angiospermas basais veja Endress 1986, Endress & Hufford 1989, Endress & Igershein 1997, Igershein & Endress, 1997, Igershein & Endress 1998). Enquanto em gimnosperma existe um investimento macio em lignina e taninos, oferecendo proteo mecnica e repelncia genrica, respectivamente, as angiospermas passaram a produzir toxinas mais especficas. A produo desses compostos surgiu com a reduo da cadeia metablica que leva ao alcool cinamlico envolvido na produo de lignina e tambm na produo de taninos atravs do cido cinmico. A interrupo da cadeia em fenilalanina implicou a diminuio de lignina e permitiu a diversificao de uma srie de compostos qumicos. Como alcalides derivados de fenilalanina geralmente no retm terpenides, esses componentes volteis passaram a desempenhar papel importante na atrao de polinizadores pelo odor (Gomes & Gottlieb 1979). Em Magnoliidae, so comuns os alcalides benzil-isoquinolnicos. Em Ranunculales e Papaverales, eles aparecem extremamente diversificados, caracterstica que foi usada para justificar a posio dessas ordens em Magnoliidae.

Para uma caracterizao das angiospermas de acordo com a classificao atual visite o Angiosperm Phylogeny Website, para descries de famlias o Advanced Plant Taxonomy e para figuras de angio e gimnosperms veja o Vascular Plant Family access Page (endereos na minha pgina). Magnoliaceae As folhas so espiraladas, com estpulas. Podem ter perianto trmero ou com muitas partes. Possui 1-222 carpelos, arranjados de maneira espiralada ou irregular, livres mas em alguns casos unidos pos-genitalmente no fruto ou j na flor. O estigma uma crista na poro apical do carpelo, quase seco. vulos, geralmente de 2-12 por carpelo, so bitegumentado, antropos. Em Michelia so dois vulos por carpelo e o fruto apresenta os carpelos bem separados, como frutculos. Ocorre nas Amricas e sudeste Asitico at a Malsia, contando com ca. 225 espcies. Talauma o nico gnero, mas Magnolia e Michelia so utilizadas na urbanizao. Annonaceae As flores so geralmente trmeras, com diferenciao entre clice e corola. Plen inaperturado, em ttrades. Possui de 1-400 carpelos, geralmente livres e arranjados de maneira verticilar ou irregular. O estigma papilar e bastante secretor, a secreo forma uma camada naqueles gneros com numerosos carpelos. Essa camada secretora se estende at a placenta, e envolta dos funculos dos vulos. So de 1-30 vulos bi(tri)tegmentados e antropos por carpelo. Uma das maiores famlias de Magnoliidae com ca. 128 gneros e 2300 espcies, de distribuio pantropical. No Brasil, so relacionados 26 gneros (seis endmicos) e 260 espcies (Maas et al. 2002), destacando-se Guateria com 250 espcies e Annona (graviola e fruta-do-conde). So geralmente espcies florestais, mas tambm podem ocorrer em reas abertas. Myristicaceae Facilmente reconhecida pela produo de exudado avermelhado. As folhas so espiraladas, as flores monoclmideas com arranjo do perianto verticilado, geralmente trmero. Apenas um carpelo uniovulado, completamente ou quase plicado, o vulo antropo, sub-basal. O estgma unicelular, papilado, bastante secretor. Inclui 300-475 espcies e tem distribuio pantropical. No Brasil, destaca-se a Virola, utilizada por ndios como alucingeno em rituais religiosos. Winteraceae considerada entre os grupos mais antigas, possui plen registrado para o Incio do Cretceo e ausncia de vasos. As folhas so espiraladas. Possui 2-4 lobos no clice e de 2 a muitas ptalas. So geralmente muitos estames espiralados e o plen est arranjado em ttrades. Possui de 1 a 50 carpelos, livres ou sincrpicos ps-genitalmente. O estigma uma crista curta ou longa e o transmissor de tubos polnicos se estende at a

regio placental. Os vulos, 5-60 por carpelos, so bitegumentados e antropos. A filotaxia floral variada (verticilada, irregular ou espiralada), especialmente o androceu, e o tamanho e nmero das partes tambm podem variar consideravelmente at mesmo em uma mesma espcie. Atualmente includa em Canellales, inclui 4-9 gneros e 60-100 espcies, geralmente de regies tropicais montanas. No Brasil, o nico representante Drymis. Lauraceae Com exceo de Cassytha (parasita), so lenhosas. As flores so bissexuais (raramente unissexuais), reduzidas, trmeras, poucos verticilos de estames com aberturas valvares e freqentemente um par de glndulas basais, estamindios freqentes. O gineceu unicarpelar, com um vulo bitegumentado, antropo, de placentao apical (pendente). O ovrio geralmente superior, mas est includo em um receptculo, raramente nfero. O estigma capitado. O plen geralmente inaperturado e esferoidal. A produo de frutos relativamente pequena, ca. de um a cada 1000 flores, e a maturao lenta, podendo chegar a mais de um ano. A disperso feita principalmente por pssaros e secundariamente por roedores. A famlia pantropical contando com 2000 espcies e 50 gneros no muito bem definidos. Os gneros mais representativos no Novo Mundo so Ocotea (300-500 spp.) espcies e Nectandra (114 spp.). So importantes economicamente a canela (cinnamomum), o abacate (Persea americana). O louro (Lauro), de origem mediterrnea, era usado na coroa de heris e atletas na Grcia, tradio que se estendeu at o tempo dos Csares, em Roma. Monimiaceae rvores ou arbustos, com folhas opostas e flores em muitos gneros unissexuais. O diocismo parece ter surgido diversas vezes no grupo. Perianto com 4-6 spalas, mas geralmente tetrmero, oito a muitos estames. Os carpelos podem chegar a 2000 (perde para Ranunculaceae que podem ter at 10.000), verticilados, espiralados ou irregularmente arranjados Eles so livres e expostos ou podem estar includos em uma taa floral (receptculo), tendo apenas a regio receptiva exposta por um poro estreito, formando assim um hiperestigma. O vulo 1 a muitos, antropo, bitegumentado (raramente unitegumentado). A famlia apresenta uma reduo do tamanho e dos nmeros de partes florais, uma reestruturao da disposio espiralada para radial e finalmente decussada, uma transio de carpelos livres para sincrpicos e nferos, progresso de monoecia para dioecia (Santos & Peixoto 2001). A famlia compreende 30 gneros e 400-450 espcies. Ocorrem nas regies tropicais e subtropicais do mundo, especialmente do hemisfrio sul (SE do Brasil e arquiplago malaio). No Brasil, ocorrem seis gneros, destacando-se Mollinedia (ca. 90 que podem ser reduzidas a 20 espcies) e Siparuna (74 espcie, Amrica tropical, parece que o dioicismo surgiu diversas vezes no grupo). A abrangncia da famlia inclui um grupo polifiltico e a separao do grupo de Siparuna deve ser considerada. Possui aplicao para extrao de leos aromticos e o boldo-do-chile amplamente empregado no tratamentos hepticos e anti-inflamatrios.

Piperaceae As flores so bissexuais. Geralmente dois a trs estames, mas at 10, e com geralmente at quatro carpelos. O carpelo possui apenas um vulo basal, ereto, orttropo e bitegmentado (exceo Peperomia, que unitegmentado, mas com evidncias de reduo) e de 1-7 estigmas, sugerindo uma sincarpia original para os carpelos com mais de um estgma. O vulo. A polinizao pouco estudada, mas deve ser realizada principalmente por abelhas, besouros e moscas; em espcies brasileiras de Piper foi detectada a ambofilia (Figueiredo & Sazima 2000). A distribuio pantropical. No Brasil, esto presentes os dois maiores gneros, Piper (ca. 1000 spp.) e Peperomia (flores bastante reduzidas, com um ovrio e dois estames, subtendidos por uma brcteas. Pimenta-do-reino (Piper nigrum) a planta mais famosa da famlia, que tambm inclui algumas espcies medicinais como a pariparoba. Peperomia utilizada como ornamental. Chloranthaceae Chloranthaceae uma famlia pantropical, com quatro gneros, apenas Hedyosmum (40 spp.) ocorrendo na regio Neotropical. As folhas so opostas e serreadas. O ovrio unicarpelar, uniovular, geralmente superior. O vulo pendente, orttropo, bitegumentado. Em Ascarina e Hedyosmum as flores so geralmente unissexuais. Em Ascarina (Malsia, Polinsia, Nova Zelndia), as flores so extremamente simples, as masculinas (em amentilho) possuem apenas um estame (como em Hedyosmum) e as femininas exclusivamente um carpelo (em Hedyosmum, a flor subtendida por uma brctea e possui um discreto perianto trilobado). Nesses dois gneros, o conectivo das anteras elongado, a quantidade de plen produzida grande e o estgma seco e amplo, sugerindo a polinizao pelo vento. Em Sacandra e Chloranthus (ambos do leste Asitico e Indomalsia), as flores so bissexuais, com um ou trs estames (sinngios). Nesses gneros, pela mudana de cor durante a maturao da parte reprodutiva e produo de odor, parece que a polinizao feita por besouros. A simplicidade contrasta com o arqutipo de flores primitivas, com muitas peas florais. Alguns autores interpretaram as flores bissexuais de Sacandra e Chlorantus como pseudanto, formado pela fuso de duas flores unissexuais. A estrutura reprodutiva bastante particular dificulta o estabelecimento das relaes com outros grupo e Chloranthus j foi includo em Loranthaceae e Caprifoliaceae, assim como Chloranthaceae nas ordens Piperales, Magnoliales, laurales e Annonales, at finalmente na dcada de 80 ser considerada em uma ordem a parte. O plen columelado, reticulado, principalmente de Ascarina, muito semelhante aos primeiro gros de plen do registro de angiosperma e a ausncia de vasos em Sacandra indicam a antiguidade do grupo. A famlia inclui ca. 75 espcies, distribudas na regio tropical e subtropical. No Brasil, ocorre principalmente H. brasiliense, cuja as folhas so utilizadas em infuso para o tratamento de febres e reumatismos, como diurtico, etc. Nymphaeaceae

So plantas aquticas com folhas flutuantes. As flores grandes, bissexuais, com 3-5 (ou muitas) spalas e 4 a muitas ptalas, petaloides ou no. So muitos estames laminares, espiralados, estamindios geralmente presentes, 3-47 carpelos ps-genitalmente sincrpicos e sem um cmpito interno, o ovrio pode ser spero ou nfero. So muitas as peas florais. Victoria, possui rgos estreis entre os estames e os carpelos (interpretados como paracarpelos ou inter-estamindios) e flores termognicas, com calor gerado nos apndices dos carpelos. O estilete no distinto e existe um corpo de alimento no pice do estigma. Existe um cmpito extra-ginoecial devido a presena de secreo. Os vulos podem ser 3 at mais de 400, crassinucelados, bitegumentados e antropos (raramente orttropos); em Nymphaea a placentao parietal (laminar). Ocorrem no mundo todo, Nymphaea (40 spp.) e Victoria (vitria-rgia) Aristolochiaceae So plantas volveis, lenhosas ou no, raramente eretas, com folhas cordadas e venao palmatinrvea. Flores hipo ou epgenas, bissexuais, com clice tubular ampliado e corola reduzida ou ausente. Possuem 5-12 estames, parcialmente conados, plen inaperturado (?), 3-6 carpelos, basal at completamente sincrpico. Em Aristolochia o gineceu fundido congenitalmente com os estames, formando um ginostmio. O estigma comum a todos os carpelos (cmpito interno); em alguns casos parece que houve um aumento na quantidade de estgmas, que so mais numerosos que os carpelos. Pode ter de 2 a150 vulos por carpelo. Eles so crassinucelados, bitegumentado e antropos. Saruma representa uma ligao interessante entre Aristolochiales e as demais Magnoliidae, graas ao plen monossulcado e gineceu multicarpelar, apocrpico, unidos apenas na base, mesmo o cido aristolquico parece derivar de alcalides aporfnicos caractersticos da subclasse. Conta com ca. 410 espcies MONOCOTILEDNEAS As monocotiledneas diferenciam-se pela presena de um cotildone apenas, sistema radicular adventcio, folhas com venao paralelinrveas, cmbio ausente, de modo que os feixes vasculares encontram-se dispersos, i.e. actostlico. As flores so geralmente trmeras. Entretanto, essas caractersticas no so universais nem exclusivas. Aparentemente, a nica caracterstica exclusiva do grupo o acmulo de corpos proticos triangulares na culas do tubo crivado. So aceitas como um grupo monofiltico, inserido nas demais dicotiledneas. Os registros de monocotiledneas so antigos entre o Cretceo Inferior e Superior. Caractersticas, principalmente vegetativas, indicam que as primeiras monocotiledneas possam ter hbito aqutico, sendo o grupo mais relacionado supostamente com Nymphaeales e o basal em monocotiledneas representado pelas alismatidae. Os registros fsseis mais antigos, entretanto, apontam para Araceae, famlia que incluia Acorus, gnero que nos estudos filogenticos aparece como grupo irmo das demais monocotiledneas. 1

Textos para as palestras da aula seguinte: Azuma, H., Thien, L.B. & Kawano, S. 1999. Floral scents, leaf volatiles and thermogenic in Magnoliaceae. Pl. Sp. Biol. 14: 121-127.

Figueiredo, R.A. & Sazima, M. 2000. Pollination biology of Piperaceae species in southern Brazil. Ann. Bot. 85: 455-460. Gottsberger, G. 1999. Pollination and evolution in neotropical Annonaceae. Pl. Sp. Biol. 14: 143-152. Prance, G.T. & Anderson, A.B. 1976. Studies of the floral biology of neotropical Nymphaeaceae. Acta Amazonica 6(2): 163-170. Texto complementar: Culley, T.M., Weller, S.G., Weller, G & Sakai, A.K. 2002. The evolution of wind pollination in angiosperms. Trend in Ecol. Evol. 17: 361-369.

Tpicos para Azuma et al. 1999 Surgimento das caractersticas atrativas para insetos na polinizao. Distribuio e importncia das flores termognicas. Importncia do odor.

Tpicos para Figueiredo & Sazima 2000: Qual o objetivo do trabalho? Descreva as observaes. Quais a concluso principal? Tpicos para Gottsberger 19997 Tipos de polinizao em Annonaceae. Variao da polinizao entre as espcies de Annona. Possveis mecanismos que ajudam evitar a hibridao em espcies de Indianpolis, Minas Gerais. Caractersticas relacionadas a polinizao por besouros. Tpicos para Prance & Anderson 1976. Como a polinizao nas suas espcies de Nymphaeae e como elas diferem de Victoria amazonica?

Qual a correlao entre eficincia da polinizao cruzada e o tempo de florao inferida? 1

AULA 3 O aparecimento repentino das angiospermas no registro fssil assustou Darwin principalmente porque ia de encontro a evoluo gradualista que ele pregava. Uma alternativa para a apario repentina das angiospermas seria uma origem anterior aquela sugerida pelos fsseis. At a dcada de 50, muitos botnicos imaginavam ento que as angiospermas teriam surgido no Paleozico e que estariam restritas a ambientes onde a fossilizao seria mais rara, como em regies montanhosas. Outra possibilidade que poderia estar dificultando o encontro de fsseis de angiospermas pr-cretcicas seria a ausncia de caractersticas diagnsticas para distingui-los dos de gimnospermas. Estudos paleontolgicos j indicavam fsseis de angiospermas antes do Cretceo. Nem sempre, entretanto, simples classificar e datar os fsseis. Estudos nas dcadas de 60 e 70 notaram que vrios registros considerados angiosprmicos representavam de fato pr-angiospermas ou gimnospermas. O poln de Eucommiidites, por exemplo, virtualmente tricolpado, foi diferenciado das angiospermas pela endexina laminada. A hiptese de que o txon pertenceria a uma gimnosperma foi confirmado quando esse tipo de plen foi encontrado em uma cmara polnica na base de um longo tubo micropilar. Em outros casos, fsseis angiosprmicos considerados anteriores ao Barremiano foram re-datados para um perodo mais recente. Palmeiras fsseis descritas para o Trissico em Utah (EUA) pertenciam ao Tercirio. Na dcada de 70, j era consenso que as angiospermas teriam surgido no Cretceo Inferior, entre o Barremiano e o Aptiano, e se diversificado entre o Albiano e o Cenomaniano. Apesar de seqncias de aminocidos de citocromo c (e outras evidncias moleculares) indicarem uma origem mais antigas (entre 400-500 Ma, Siluriano ou Orduviciano) para as angiospermas, no existem evidencias fsseis que indiquem uma origem anterior ao Cretceo (e.g. Hughe 1976, Crane 1993). Em 1977, foi publicado na Botanical Review uma srie de artigos abordando de maneira detalhada a origem das angiospermas, com nfase na investigao fossilfera principalmente do Grupo Potomac (Hickey & Doyle 1977, ampliado de Doyle & Hickey 1976), localizado no Leste dos EUA, e famoso pela excelente e intensa seqncia palinolgica e a mais completa sucesso de megafsseis conhecida at ento. Mais recentemente, foi feita uma reviso sobre as flores das primeiras angiospermas baseada nos mesofsseis da Flora do Cretceo Inferior de Portugal (Friis et al. 2000). Outros stios de destaque esto em Israel, e, no Brasil, a formao Santana, altamente ameaada pela explorao de mineradoras. Como flores e frutos (fsseis de frutos e madeira geralmente so do tipo petrificados, e esse tipo de fssil no comum no Cretceo, Hughes 1976, 1977) esto pouco representados, o registro das angiospermas determinado basicamente pelo plen (micro-fsseis, ca. 25 micrometros dim.) e por folhas ou parte de folhas (mega-fsseis). As folhas de angiospermas (dicotiledneas modernas) possuem tipicamente vrias ordens de venao, progressivamente mais finas, e uma rede anastomosada de vnulas

com terminaes livres entre as veias. Isso facilitaria a difuso rpida de fludos das margens para o centro e vice-versa. Apesar das angiospermas mais antigas possurem uma venao menos organizada que as mais modernas, esse padro pinado, reticulado, hierarquicamente ordenado, permitiria diferenciar as folhas de angiospermas daquelas pertencentes a outros grupos do Mesozico. Aparentemente, a venao reticulada apareceu inmeras vezes em grupos pouco relacionados. As gimnospermas, hoje representadas principalmente por folhas aciculares, no passado, possuam muitos representantes com venao reticulada, entre eles, vrias pteridospermas, Bennettitales e Cycadales. Ainda assim, a hierarquia e o padro da venao podem ser diferenciados daqueles encontrados em angiospermas. A venao de Gnetum a que mais se assemelha, mas provavelmente essa no era a venao encontrada nos precursores do gnero. O registro megafssil mais antigo definitivamente pertencente a uma angiosperma de uma folha simples de venao pinada, ca. 23 mm, encontrada na Sibria (Rssia) e datada do Neocomiano (Hauteriviano) e uma srie de folhas do grupo Potomac datadas do Barremiano-Aptiano. Durante o perodo Aptiano e Albiano, essas folhas j se encontravam bastante diversas em Potomac. Linhagens, eventualmente consideradas representativas de famlias modernas de angiospermas que seriam classificadas em Magnoliidae, Hamameliidae e Rosidae no sistema de Cronquist e Takhtajan, estavam presentes j no Cretceo, indicando quo rpida foi a radiao do grupo. A percepo da evoluo no registro fssil como apresentado em Potomac sugere uma diversificao local das angiospermas e no migrao (Hickey & Doyle 1977). Em Portugal, durante o Barremiano e o Aptiano, foram encontrados ca. 150 taxa, 85% dos gros de plen de angiospermas eram monoaperturados, associados com Magnoliidae ou monocotiledneas basais, enquanto 15% com eudicotiledneas. As flores eram pequenas (ca. 3,5 mm compr.), predominando as unissexuais, com poucas peas florais. Os estames eram geralmente laminares, sem diferenciao entre antera e filete. O gineceu apocrpico, ovrio spero, sem diferenciao de estilete e estigma discreto. Os vulos eram poucos por carpelo e na maioria antropos. Um quarto dos fruto eram drupas e bagas carnosas e o restante frutos secos. A polinizao parece ter sido tanto por insetos como pelo vento. A reconstruo completa dos mesofsseis de Portugal, entretanto, s possvel para 10% da flora. Muitas flores esto sem ptalas e/ou spalas preservadas, que nem sempre deixam cicatrizes; tambm difcil distinguir gineceus multicarpelados e unicarpelados, ou a quantidade de vulos, que geralmente est baseada nas sementes. As plantas se assemelhavam com as Amborellaceae, Nymphaeales, Schisandraceae e illiciales, mas o nico txon com correspondncia a grupos atuais pertenciam as Chloranthaceae e Winteraceae. Enquanto no Cretceo inferior a maioria das Magnoliidae esto representadas por txons instintos, no Cretceo Mdio (Albiano, Cenomaniano e Turoniano), as Magnoliidae j esto representadas em sua maioria por txons que podem ser classificados em famlias atuais (Friis et al. 2000). O plen possui na parede um dos biopolmeros mais resistentes que se conhece, permitindo que sua extrao seja realizada com a aplicao de cidos extremamente corrosivos na rocha sem que no entanto os gros de plen sejam danificados. Os fsseis das primeiras angiospermas eram reconhecidos por duas caractersticas principais: serem monossulcados e terem exina columelada-reticulada. O registro mais antigo das angiospermas at a dcada de 90 era de um plen encontrado em 1958, na Inglaterra, datado de 120 Ma (Barremiano, Cretceo Inferior; Krassilov 1977). O plen

caracterstico das primeiras angiospermas, foi denominado Clavatipollenites, era pequeno (o esperado seria grande), globoso (o esperado seria cimbiforme, do tipo magnoliceo), monosulcado (como em muitas angiospermas) e provavelmente teria dado origem aos gros monossulcados mais especializado das monocotiledneas, assim como o plen tricolpado que derivou nos tipos tricolporado e triporado (nessa ordem). O plen Clavatipollenites assemelha-se bastante ao de Ascarina (Chloranthaceae), assim como outros gros de plen encontrados na mesma poca se assemelham outros membros de Chloranthaceae. Apesar do plen monossulcado no ser uma caracterstica universal das angiospermas, a estrutura da exina columelada ou ento o teto finamente reticulado, permitia diferenci-lo dos gimnosprmicos, cuja exina pode ser esponjosa ou alveolar (Cycadales e algumas conferas) ou granular (Gnetales, algumas conferas e algumas angiospermas, como "Amentiferae" e algumas Magnoliidae). Essa estrutura reticulada da exina parece que facilitaria a adeso dos gros de plen entre si e ao inseto, indicando a presena de entomofilia nos grupo maios antigos. As cavidades no teto relacionadas ao armazenamento e liberao de protenas envolvidas em processos de incompatibilidade e reconhecimento pelo estigma poderia significar um avano importante nos mecanismos de isolamento reprodutivo. Existem, entretanto, Magnoliales e Nymphaeales modernas cujos gros de plen no apresentam as caracterstica da exina facilmente diagnosticveis como de angiospermas e portanto seriam dificilmente distinguidas das gimnospermas no registro fssil (Hickey & Doyley 1977). Ainda assim, com o auxlio de microscopia de varredura possvel detectar diferenas na endexina, laminada em gimnospermas e delgada em angiospermas Exploraes mais recentes na formao Helez, em Israel (Brenner 1996), detectaram gros de plen columelados, com teto reticulado, inaperturados, to ou mais antigos que os monossulcados. Esse achado empurrou a datao mnima das angiospermas para o Valanginiano-Hauteriviano, ca. 130 M.a. Todavia, existem os que insistem numa origem mais antiga para as angiospermas (veja Cornet), apresentando inmeras evidncias de fsseis "semelhantes com os de angiospermas" no Trissico. Esses registros palinolgicos representam at 2% de algumas palinofloras do Trissico, so de diversos tipos e includos em um grupo denominado Crinopolles. Nesse grupo, o nmero de abertura pode variar e os monossulcados (Monocrinopolles) devem ter derivado de gros multi-aperturados atravs da coalescncia das aperturas. Para compreender o surgimento das angiospermas necessrio entender como estava o clima e a geografia da Terra durante o final do Jurssico e o Incio do Cretceo e como estava o desenvolvimento dos outros grupos de organismos que estabeleciam algum tipo de relao com as angiospermas. Infelizmente, porm, uma reconstruo detalhada do paleoclima e da paisagem do passado s existe para o Tercirio e o Quartenrio. Ainda assim, est claro que o perodo de surgimento e radiao inicial das angiospermas foi quase concomitante com o fim da Pangea Paleozica, o desaparecimento dos dinossauros e a diversificao dos mamferos e insetos. O aparecimento das primeiras angiospermas teria acontecido no norte do Gondwana (Israel), durante o Neocomiano e seria evidenciado por gros de plen pequenos, inaperturados e circulares, mas apresentando sexina com teto e columela tpicos de angiospermas. Esse tipo de plen assemelha-se ao encontrados em Chloranthaceae (especialmente Sarcandra), Piperaceae e Sauraceae. A proporo dos gros de plen de angiospermas nesse perodo muito baixa, ca. de dois para cada mil palinomorfos. No final do Hauteriviano, a proporo j era maior, e podem ser encontrados tanto gros

inaperturados, como monoaperturados (o surgimento da endexina parece estar associado ao aparecimento da apertura). Os gros de plen monossulcados (Clavatipollenites, Retimonocolpites e Stellatopolis) j estavam presentes em vrias flora do Barremiano: no Grupo Potomac (EUA), na Inglaterra e em Israel, mas no no Canad ou em reas rticas, sugerindo um cinturo em volta do mar de Tethys, em uma regio de clima relativamente msico. Durante o Aptiano-Albiano, o Norte do Gondwana se apresentava mais quente e seco que o Sul da Laursia, e o registro palinolgico menos diverso. Plantas com plen tricolpado (com superfcie lisa ou reticulada, mas indubitavelmente angiosprmico) aparecem inicialmente nessa regio que incluiu o Gabo e o Congo, e talvez o Nordeste do Brasil (Alagoas-Sergipe), no incio do Aptiano, migrando para paleolatitudes maiores e atingindo a Laurasia e Australsia, no incio-meio do Albiano. Os gros de plen monossulcados de angiospermas e os tricolpados aparecem no norte da Laursia apenas no meio-final da Era Albiana e na Austrlia e Nova Zelndia, o surgimento dos dois tipos de plen ocorre quase simultaneamente nesse mesmo perodo. No Albiano, as angiospermas j ocupavam 40-50% da flora e a proporo de gros de plen tricolpados j alcanava at 70% em algumas localidades. Esse incremento das angiospermas foi proporcional queda de importncia dos outros grupos. Muitos, como as pteridospermas e as Bennettitales, se extinguiram, outros como Cycadales e Gnetales ficaram reduzidos a grupos relictuais, e as pteridfitas e conferas passaram a ficar mais restritas a regies temperadas. No fim do cretceo, o plen de angiospermas representava 60-80% da palinoflora em baixas latitudes, mas apenas 30-50% na altas latitudes. O plen inaperturado parece ter sido a condio inicial nas angiospermas a partir da qual teria derivado o monossulcado e talvez at mesmo o trissulcado. O plen tricolpado pode ter se originado tambm gradualmente a partir do poln monossulcado, tendo como intermedirio o tipo tricotomossulcado, aberrao espordica no registro fssil, ou ento, a partir de um rearranjo das ttrades (?). Ele surgiu logo aps o tipo monossulcado e rapidamente se diversificou e dispersou. Enquanto a presena de mais de uma apertura pode no ser to importante nas gimnospermas, onde o gro de plen germina lentamente dentro de uma cmara protetora mida do vulo, nas angiospermas, onde a germinao rpida e a competio intra-especfica intensa, a possibilidade de germinao por mais de uma apertura bastante vantajosa (uma nica apertura poderia estar voltada para o lado externo). Dessa maneira, o aparecimento do plen tricolpado logo aps o Barremiano sugere que as primeiras angiospermas j possuam carpelos fechados e outras adaptaes reprodutivas angiosprmicas bsicas. Podemos concluir, ento, que o plen inaperturado precede o monocolpado que por sua vez antecede o tricolpado e derivados. As Amentferas, com plen triporado, originado no Cretceo Superior, representariam portanto grupos especializados, e as flores unissexuais, nesse caso, seriam decorrentes de reduo secundria, selecionadas para anemofilia. As floras do Cretceo Inferior (at o Aptiano) apresentavam-se similares nos Estados Unidos, Europa e sia Central, incluindo uma grande diversidade de pteridfitas (Schizaeazeae, Cyatheaceae-Dicksoniaceae e Gleicheniaceae) e gimnospermas, tanto de grupos modernos (Cupressaceae-Taxodiaceae, Pinaceae, Araucariaceae, Cycadales e provavelmente precursores de Ephedraceae), quanto extintos (Cheirolepiadaceae, Caytoniaceae e Bennettitales). As pteridfitas compunham ca. 30% da vegetao, geralmente ocupando o sub-bosque de matas, reas inundadas e regies de vegetao

aberta que hoje estariam ocupadas por angiospermas herbceas. As "Cycadicae", incluindo as Cycadales, as Bennettitales e vrios tipos de pteridospermas incluam outros 30%. As Bennettitales com suas folhas compostas, menores do que nas Cycas atuais, retratam o clima mais seco do incio do Cretceo e as sementes de tamanho pequeno eram dispersadas por animais ou liberadas pelo fogo, sugerindo que as Bennettitales poderiam ser plantas colonizadoras de regies abertas. As conferas representavam ca. 20% da flora e muitas famlias atuais j estariam representadas. O restante das plantas como Ginkgo, Gnetales, etc. representavam 10-15% da diversidade. O incio da desintegrao da Pangea abriu um caminho ocenico equatorial (Mar Tethys) que dividiu a Laurasia (Amrica do Norte, Europa e sia, com exceo da ndia) e o Gondwana, formado, no Oeste, pela Amrica do Sul e frica, contando com Madagascar e ndia e, no Leste, pela antrtica e Austrlia. A ligao gondwnica permaneceu ntegra at cerca de 135 Ma. O Atlntico Sul surgiu lentamente por volta de 125 Ma, mas os continentes permaneceram conectados na regio equatorial at pelo menos 115 Ma. Algumas reas permaneceram unidas por muito mais tempo (Antrtica e Amrica do Sul, 65 Ma, e Antrtica e Austrlia, 45-50 Ma). A ndia se segregou por volta de 80 Ma, se chocando com a sia no Eoceno (53 Ma, numa velocidade de 180 km Ma., mais de quatro vezes mais rpido do que a separao da frica e da Amrica do Sul). Apesar de separados, os dois supercontinentes, um em cada hemisfrio, provavelmente possuam corredores ligando a Amrica do Sul com a do Norte e a frica com a Laursia. Isso pode ter contribudo para uma migrao (talvez seletiva) das angiospermas entre essas regies, favorecendo um certo grau de cosmopolitanismo durante todo o Cretceo, quando as angiospermas j se encontravam diversificadas (Schuster 1976). O paleoclima est geralmente baseado em evidncias da flora, como por exemplo, forma das folhas. Ento, folhas grandes sugerem um ambiente mido, geralmente florestas sempre-verdes e sua diminuio indica queda de umidade ou temperatura. Folhas grandes tambm podem indicar pouca luminosidade e temperaturas moderadas em latitudes maiores. Folhas com margem serreadas tambm so indicadores de precipitao e temperatura: uma grande proporo de folhas serreadas indicam um clima mido e microtermal, com temperaturas mdias anuais inferiores a 13oC, diminuindo em abundncia com o aumento de temperatura. Outras caractersticas so: a textura das folhas, pice, a organizao (e.g. folhas compostas so caractersticas de ambientes sucessionais ou perturbadas). A anatomia da madeira outra fonte de informao indicando a sazonalidade atravs da formao ou no de anis de crescimento. Aquelas que formam anis de crescimento sugerem um clima sazonal, com perodos de baixa temperatura e pouca precipitao. O conjunto de folhas do Aptiano ao Cenomaniano Inferior apresenta no incio principalmente folhas pequenas com margem inteira aumentando gradualmente a proporo de folhas compostas e com margem serreada. Essa progresso na fisionomia corroboraria a correlao entre vegetao perturbada e diversificao das angiospermas como plantas sucessionais e colonizadoras (Stebbins 1965). Segundo Doyle & Hickey (1976), as angiospermas teriam aparecido a partir de ancestrais que viviam em ambientes semi-ridos e instveis, se diversificando inicialmente em regies riprias, colonizando regies alagadas at ocupar ambientes aquticos e regies secas, tanto como plantas pioneiras, sucessionais, como sub-bosque de matas, at que por fim dominasse o dossel das florestas. As angiospermas teriam surgido ento como arbustiva

ou herbcea e se diversificado rapidamente at o domnio no Cretceo Superior. Durante todo o Cretceo o clima foi mais seco do que no Tercirio, quando novas situaes permitiram uma outra diversificao das angiospermas. Aparentemente, as flores de Chloranthaceae surgiram cedo e co-existiram com flores do tipo magnoliceo durante o Cretceo Inferior. Registros de flores tornam-se mais freqentes apenas a partir do Albino. Carpelos livres (gineceu apocrpico) eram comuns e diversos at o Cretceo Superior, mas o gineceu sincrpico conhecido a partir do Albiano, e mais recentemente registrado para o Barremiano-Aptiano. Inicialmente os lculos correspondiam ao nmero de carpelos, mas entre o Santoniano Campaino, surgiram flores com gineceus uniloculares; a diviso secundria de lculos ocorreria mais tarde, no Maastrichtiano. No Cenomaniano, plantas com flores platanides e outras menores, provavelmente unissexuais, arranjadas em amentilhos j existiam. As flores apresentavam inicialmente arranjo espiralado, mas no incio do Cenomiano (incio do Cretceo superior), entretanto, j existiam os trs tipo de filotaxia (acclico, hemicclico e cclico); as flores cclicas comearam a dominar no fim desse perodo. O nmero de vulos/carpelos variava de poucos a muitos e o nmeros de estames podia ser trs ou cinco. As flores eram inicialmente ismeras, actinomorfas, hipginas a reduo relativa do nmero de carpelos ocorreu no meio do Cenomiano. No Santoniano-Campaniano, as flores hetermeras dominavam (o padro mais comum eram verticilos de cinco no perianto e no androceu e de dois ou trs no gineceu), apareceu a simetria bilateral, as primeiras flores simptalas e as flores epgenas que apareceram no meio do Cenomiano, j representavam 2/3 do total (essa proporo foi reduzida no Tericrio Inferior); a trimeria passou a ser comum no Maastrichtiano. As flores heteroclamdes apareceram no incio do Cenomiano e no Santoniano Campaniano, flores sem perianto ou homoclamdes passaram a ser conhecidas. O estilete apareceu no Santoniano Campaniano, mas s mais tarde dominou. Androceu com muitos estames espiralados e com poucos verticilados j eram encontrados no incio do Cenomiano. Os frutos do Albiano eram folculos alongados com deiscncia ventral aparente, as sementes eram pequenas, aparentemente antropas e variavam de uma a vrias por frutculo. As sementres eram geralmente pequenas and com parede delgada, antropas Os frutos eram inicialmente cpsulas separadas, mas no Santoniano Campaniano outros tipos apareceram. Um dos fatores considerados mais importantes no surgimento das angiospermas foi o surgimento de mecanismo de incompatibilidade e a co-relao com os insetos, mecanismos adaptativos para a polinizao cruzada. A partir do Carbonfero Superior e do Incio do Mesozico, os insetos comeam a apresentar caractersticas que indicam uma especializaes que permitiriam que eles se alimentassem das estruturas reprodutivas de plantas. A polinizao por insetos parece ter evoludo nas pteridospermas do Carbonfero Superior, sendo um importante mecanismo j nas Bennettitales do Jurssico. As estruturas de Bennettitales sugerem polinizao por besouros: o plen era relativamente grande, eventualmente com escultura na exina; os vulos distribudos sobre um receptculo e envoltos por escamas interseminais estreis evidenciam a proteo contra esses insetos. A presena de besouros desde o incio do Mesozico, assim como de dpteras j no jurssico e mesmo de heminpteras, que atualmente so os mais importantes polinizadores de angiospermas, sugerem que a entomofilia estava presente antes do surgimento das angiospermas.

A grande variao na polinizao das angiospermas se deu logo aps o surgimento do plen tricolpado no Aptiano, quando a polinizao passou a estar bem adaptada para a entomofilia e anemofilia. Esta relao pode ser bem visualizada em Chloranthaceae, que possui grupos polinizados por insetos e pelo vento, assim como gro de polen inaperturado at multiaperturado. No SantonianoCampaniano, passa a dominar a sincarpia, com um estilete comum diferenciado, o nmero de peas florais comea a se estabilizar e o arranjo verticilado torna-se mais comum, surgem as flores gamoptalas associadas a produo de nctar e a simetria bilateral sugerindo uma intensificao da competio gametoftica e uma polinizao mais eficiente, agora por lepidpteras e heminpteras, o que contribuiu para a radiao posterior do grupo. No fim do Cretceo incio do Tercirio, as abelhas j esto presentes e a polinizao atinge graus de evoluo modernos. Outro evento que coincidiu com a diversificao das angiospermas foi o desaparecimento dos dinossauros. Apesar dos dinossauros e as angiospermas terem interagido, todas a inferncias so meramente circunstancias, baseadas principalmente na morfologia fssil dos animais, tipo de dente, crnio, etc.; mesmo coprlitos no apresentam sinais de angiospermas. Durante o Jurssico Superior e o Cretceo Inferior, a fauna de herbvoros de grande porte, com mais de uma tonelada, representava 95% de toda a biomassa de vertebrados. No fim do Jurssico, eram comuns os saurpdes gigantes. Eles viviam em regies abertas, e com pescoos longos eles podiam alcanar at 15 metros de altura. Eles se alimentavam de folhagem (ca. 200 kg/dia), a comida era engolida e processada pelo suco gstrico. Durante o Cretceo, ainda existia uma grande diversidade desses grandes herbvoros, mas os saurpodes comearam a diminuir e os ornitpodes a aumentar, a quantidade de herbvoros mamferos de pequeno porte tambm aumentou bastante, principalmente de marsupiais, e no final do Cretceo a proporo eram quase a mesma. Os ornitpodes deveriam ter uma taxa metablica maior que os saurpodes, mas ainda assim deviam ser generalistas. O metabolismo dos pequenos mamferos, entretanto, exigiria mais energia e eles deveriam se alimentar de produtos com alta taxa energtica, como frutas e sementes. Seriam por isso mais seletivos do que os grandes herbvoros que teriam baixa taxa metablica e poderiam retirar energia de celulose atravs da fermentao microbiana. O endosperma das sementes representa uma grande fonte de energia. A semente das primeiras angiospermas, entretanto, eram pequenas, provavelmente adaptadas a ambientes abertos. Sementes e frutos pequenos poderiam ser dispersos por animais especializados (raros na poca) ou abioticamente (vento ou gua) e dominaram o registro fssil at o incio do Tercirio. Apesar dos saurpodes gigantes eventualmente ingerirem sementes ou frutos, a disperso seria casual e eles dificilmente significariam uma fora seletiva que favorecesse disporos grandes. Por outro lado, a atividade dos dinossauros significava uma perturbao constante do ambiente, favorecendo plantas de desenvolvimento rpido, caractersticas de ambientes sucessionais e que tipicamente possuem sementes pequenas. Disporos grandes j estavam presentes no fim do Cretceo, tipicamente dispersos por animais, mas foi apenas no Tercirio que surgiram adaptaes claras para a disperso por animais, como parede carnosa e atrativa. No limite entre o Cretceo e o Tercirio, houve uma grande extino, e cerca de 60% da diversidade da Terra desapareceu, incluindo principalmente animais marinhos, como foraminferos, equinodermatas e moluscos. Extines em massa foram freqentes em tempo geolgico, entre o Permiano e o Trissico (na mudana entre o Paleozico e o

Mesozico), cerca de 90% da vida na terra sumiu. difcil entender porque os dinossauros se extinguiram, e at mesmo as angiospermas foram includas como possveis vils por causa de seus componentes qumicos. Outros possveis culpados, seriam os mamferos que poderiam estar se alimentando dos ovos de dinossauros. Ambos os casos so desprovidos de evidncias e no explicariam a extino marinha, nem a extino seletiva, afinal vrios rpteis de pequeno porte sobreviveram. Uma hiptese mais bem fundamentada seria a mudana climtica nesse perodo. O Cretceo foi marcado por um clima mais quente e regular, enquanto o Tercirio passou a ser caracterizado por um clima mais frio e variado. Essa mudana teria provocado a retrao dos mares e um efeito estufa, diminuindo a irradiao solar e levando a extino gradual dos dinossauros. Outra hiptese seria o aumento do vulcanismo, o que deve ser levado em considerao devido a intensa atividade tectnica e a camada de irdium nessa faixa geolgica. Outra possibilidade seria o choque com objetos extraterrestres. Em 1980, surgiu a hiptese de Alvarez, que predizia o choque da terra com um asteride de certas dimenses. A camada de irdium tambm justificaria essa hiptese, e recentemente, foi encontrada em Yucatan, no Mxico, uma cratera que se adequa hiptese. Esses fatores so usados de diversas maneiras para justificar outras razes como, problemas cardacos causados pelo excesso de calor decorrente do efeito estufa, ou irradiao ionizante que levaria a mutaes relacionadas a fixao de clcio, da a extino seletiva de dinossauros, que teriam m formao ssea e de animais marinhos, que necessitariam de clcio para formao de concha por exemplo. A extino dos dinossauros no limiar do Cretceo e do Tercirio teria acabado com todos os herbvoros com mais de 10 kg e provocado uma mudana drstica nos padres da poca. Durante o Paleoceno, os mamferos se irradiaram nos mais variados nichos, mas a fauna de herbvoros com mais de 100 kg s voltaria a aparecer no Eoceno ou comeo do Oligoceno. Com a diminuio de ambientes perturbados, as angiospermas passaram a se distribuir em ambientes mais fechados, onde a luz era mais escassa e plantas de estratgia K passaram a ser selecionadas. 1

Texto para a prxima aula: Crane, P.R. 1993. Time for the angiosperm. Nature 366: 631-632. Friis, E.M., Crane, P.R. & Pedersen, K.R. 1986. Floral evidence for Cretaceous chloranthoid angiosperm. Nature 320: 163-164. Farrel, B.D. 1998. "Inordinate fondness" explained: why are there so many bettles? Science 281: 555-559. (texto na pgina do grupo da disciplina) Texto complementar: Cornet, B. 2003. Why do Paleobotanists Believe in a Cretaceous Origin of Angiosperms?

Tpicos para Crane 1993: Qual o dogma da origem das angiospermas? Quais os problemas? Quais a justificativas?

Tpicos Friis et al. 1986: Qual a relao entre as Chloranthaceae e as angiospermas do Cretceo Inferior de acordo com o registro fssil? Qual a novidade do artigo? Como so as estruturas florais fsseis descritas? Como esto caracterizadas as Chloranthaceae atuais (incluir polinizao)? Onde se encaixaria os espcimes fsseis? Por que? Quais so as concluses derivadas da observao desse fsseis?

Tpicos Farrel 1998: Relao histrica de diversidade entre besouros e angiospermas. Como foi testada a importncia das angiospermas na diversificao dos besouros. 1 CLADSTICA DE ESPERMATFITAS Estudos cladsticos Durante muitos anos o conceito evolutivo foi incorporado de maneira arbitrria no sistema de classificao dos organismos. A reunio de grupos de organismos em um txon era geralmente justificada pelo compartilhamento de caracteres que, para o autor. Na dcada de 50, entretanto, Hennig estruturou de modo consistente os princpios da sistemtica filogentica. Ele deixou claro a diferena entre similaridades e similaridades derivada a partir de modificaes de um ancestral comum exclusivo, ou seja, sinapomorfias. Um sistema filogentico um sistema baseado na ancestralidade. Estabeleceu-se, ento, um critrio universal para classificao dos organismos. Hennig no estabeleceu um critrio para se obter a filogenia de um grupo, mas sugeriu que diante de uma filogenia obtida a partir da comunho do maior nmero de informaes, deveriam ser considerados evolutivamente significativos apenas aqueles grupos monofilticos, ou seja, grupos definidos a partir de sinapomorfias. A difuso do trabalho de Hennig aconteceu apenas 11 anos mais tarde, com a traduo do seu trabalho em ingls. A partir dai, a prioridade da classificao na sistemtica foi transferida para a busca de hipteses filogenticas. Uma filogenia pode ser apenas emprica, como a de Cronquist. O autor, tem uma idia preconcebida da evoluo dos caracteres. Essas idias podem ser inferidas atravs da gradao de caracteres entre grupos relacionados, por exemplo. Cronquist adotava a hiptese Antostrobilar para

origem das Angiospermas e assim, as angiospermas primitivas seriam semelhantes ao que encontramos em Magnoliidae, mais especificamente nas arbreas, como Winteraceae (Veja Aula 2). Entretanto, essas hipteses empricas passaram a ser substitudas por hipteses sustentadas por mtodos mais objetivos, capazes de serem criticados de maneira mais clara. Mtodos numricos mais objetivos para elaborao de hipteses filogenticas surgiram por volta da dcada de 60. Na botnica, elas se estabeleceram cerca de 20 anos mais tarde. A sistemtica filogentica passou a estar baseada em uma srie de procedimentos que procuram reconstruir a histria evolutiva de um grupo. O primeiro passo desse procedimento a composio de uma matriz, com terminais (txons cuja relao se quer verificar) e caracteres (propriedades dos txons, que podem ser morfolgicas ou moleculares). A matriz analizada, ento, segundo alguns critrios. Em morfologia, o principal critrio a parcimnia, princpio baseados na simplicidade de hipteses. A rvore mais parcimoniosa aquela que contm menos passos, ou seja, que possuem o menor nmero de transformaes de estados de caracteres. A base do princpio est em encontrar uma hiptese que assuma o menor nmero de hipteses independentes, aumentando seu poder de explanao e minimizando a probabilidade de erros. Uma hiptese mais parcimoniosa mais facilmente refutvel, critrio adotado por Popper e seguido pelos seguidores de sua lgica dedutiva. Diferente de morfologia, dados moleculares permitem que assumamos algumas premissas evolutivas. Por exemplo, se sabe que algumas regies so ricas em C e T e portanto as chances de uma substituio por esses nucleotdeos maior; pela forma das molculas sabemos que a taxas de transverso e transio so diferentes por causa da morfologia estrutural entre as molculas. Dessa maneira, possvel utilizar conhecimentos evolutivos prvios na anlise de hipteses filogenticas. Assim, surgiu a idia de se avaliar uma hiptese atravs da mxima verossimilhana. A mxima verossimilhana estima a probabilidade dos nossos dados frente uma determinada hiptese. Nossa hiptese a rvore e o conjunto de premissas evolutivas que assumimos. Assim, essa avaliao deve estimar a probabilidade de todas as rvores possveis de acordo com nossas premissas. A rvore que indicar a maior probabilidade para os nossos dados a mais provvel. Como necessrio uma busca exaustiva, esse procedimento computacionalmente invivel mesmo para um nmero no muito grande de txons. Alguns atalhos foram ento utilizados, o mais comum estimar a distncia molecular entre os terminais, incluindo correes. Num cladograma, conceitos bsicos so importantes, como sinapomorfia ou plesiomorfia, grupo irmo, raiz, etc. A idia de clados basais, por exemplo, equivocada. Um clado com cinco terminais basal em relao a um com 500? No, eles so irmos, tendo surgido na mesma poca. Mas a classificao nem sempre reflete a filogenia e nem sempre uma famlia grupo irmo de outra famlia. Diante de uma filogenia, existem inmeras possibilidades de arranjos, e txons de mesmo nvel taxonmico no podem ser confundidos com grupos evolutivamente equivalentes. Clados tambm possuem suas propriedades particulares internas. Dois clados aparentemente desiguais, com 5 e 500 terminais podem esconder algumas peculiaridades. Clados diversos podem levar a crena de que sua sinapomorfia uma condio chave para a diversificao do clado. Na realidade, no entanto, essa diversificao pode ter sido muito mais intensa internamente, num subgrupo especfico. Outro conceito importante de clado com base no ramo ou com base no grupo atual. O

clado que inclui os grupos atuais pode ter surgido h 100 Ma, mas a divergncia do ramo que levou a esse clado pode ter iniciado muito antes, h 200 Ma, quando tambm teria surgido seu grupo irmo. No clado do ramo, muitos representantes podem estar extintos e no possurem todas as caractersticas do grrupo atual (Doyle & Donoughue 1993).

Crane 1985 Os primeiros trabalhos morfolgicos tentando reconstruir a filogenia das espermatfitas foram realizados no incio dos anos 80 por Parenti. Um dos estudos filogenticos pioneiros abordando espermatfitas em geral foi feito por Hill & Crane (1982) e refeito por Crane (1985), que incluiu fsseis e corrigiu muitos problemas na anlise dos caracteres. Os grupos de angiospermas em vez de ramos de uma nica rvore filogentica pareciam eles mesmos rvores enraizadas em um lugar desconhecido. A incluso dos vulos em carpelos a caracterstica-chave na definio das angiospermas, entretanto a origem dos ovrios das angiospermas ainda um mistrio. Ele poderia ter derivado da brctea de um esporofilo ou da expanso do ramo ovulfero. No se sabe nem se a origem do carpelo plicada (involuta) ou ascidiada (convoluta). Detectar o estado plesiomrfico dessa estrutura em grupos extintos ou atuais seria fundamental na investigao da origem das angiospermas. Em 1985, Peter Crane, caracterizou os grupos de espermatfitas atuais e as fsseis melhor conhecidas, elaborando uma matriz morfolgica de modo a estabelecer o grupo que possivelmente estaria mais relacionado com as angiospermas. A matriz conta com 39 caracteres e 19 terminais. A polarizao dos caracteres foi estabelecida atravs de sua suposta evoluo. Por se tratar de uma matriz morfolgica com grupos muito divergentes evolutivamente, inmeros caracteres no puderam ser aplicados em todos os terminais e, por incluir grupos fsseis, muitas foram as incertezas, principalmente em relao a estados de caracteres reprodutivos essenciais, como dupla fecundao ou nmero de ncleos no gametfito feminino. Uma questo crucial, por exemplo, a homologia entre as cpulas das pteridospermas e os vulos de Bennettitales e angiospermas. Para discutir esse caracter mais especificamente ele construiu duas rvores, uma considerando essas estruturas homlogas e outra no homlogas, alterando para isso o estado de trs caracteres relacionados. Ele concluiu que as espermatfitas so definidas pela presena de um tegumento com uma micrpila diferenciada envolvendo o megasporngio, que contm uma nica clula-me do megsporo funcional e cuja embriognese tem fase nuclear livre (revertida secundariamente em Welwitschia e angiospermas). Em ambos os cladogramas, as pteridosmermas, um grupo bastante variado, aparecem relacionadas com grupos distintos, no formando um clado. As Cycadales divergiram na base, representando o grupo irmo vivo das demais espermatfitas atuais. As conferas esto mais relacionadas com as Cordaitales e aparecem num clado que tambm inclui as Ginkgo. As Gnetales formam um clado com as angiospermas, mas suportado exclusivamente pela sifonogamia, que tambm existe nas conferas e no pode ser

codificada para os grupos fsseis. Nesse caso, as gimnospermas atuais formam um grupo parafiltico. As Bennettitales apresentam-se relacionadas com o clado que engloba as Gnetales e as angiospermas. As Caytoniales, por outro lado, aparecem num outro clado distinto quando a cpula no considerada homloga aos vulos bitegumentados ou como grupo irmo (incluindo no clado tambm as coritospermas) quando a homologia considerada. No primeiro caso, a cpula das pteridospermas no seria homloga ao vulo das Bennettitales e das angiospermas; no segundo, entretanto, o megasporofilo com muitas cpula de Caytoniales teria reduzido o nmero de cpulas para poucas e de vulos para um como nas coritospermas (mas na descrio, as coritospermas so caracterizadas por megasporofilos ramificados, cada qual com numerosas cpulas). Uma inverso da cpula para o vulo orttropo associada a uma extrema reduo do nmeros de cpulas para uma por megasporofilo poderia ter derivado em Pentoxylon, e a degenerao de alguns vulos pode ter resultado na cabea frtil de Bennettitales, onde o vulo representaria um megasporofilo reduzido. A reduo do tegumento externo em Gnetales e a manuteno de vulos antropos nas angiospermas explicaria essas condies nos dois grupos. O carpelo da angiospermas seria, ento, uma folha conduplicada (ou derivada da expanso e soldadura da raque do megasporofilo bastante reduzido das coritosperma) incluindo no estado primitivo numerosas cpulas uniovuladas (entretanto alguns grupos antigos possuem apenas um vulo, como Chloranthaceae). Dentre os problemas nessa suposta evoluo, Crane considerou a inverso do vulo no clado Bennettitales-Pentoxylon. Entretanto, essa hiptese evolutiva pressupoe uma nova inverso para vulos orttropos em Gnetales e uma reverso para vulos orttropos dentro das angiospermas.

Hori 1985 No mesmo ano, Hori et al. (1985) publicaram um cladograma com dados moleculares, incluindo 28 seqncias de 5S rRNA para investigar a relao das plantas clorofiladas. Eles incluram seis algas verdes (Chlorophytas) e uma Charophyta, quatro brifitas, quatro pteridfitas, trs gymnospermas e dez angiospermas. O cladograma realizado atravs das distncias entre as seqncias corrigidas segundo um modelo evolutivo seguida de anlise de agrupamento (WPGMA e UPGMA), mtodo fentico. 1. As pteridfitas e as espermatfitas so plantas vasculares. A idia tradicional que as plantas vasculares teriam derivado das brifitas. Nesse cladograma, no entanto, as espermatfitas divergiram antes da origem das brifitas, que aparecem mais relacionadas com as pteridfitas, favorecendo a idia de uma evoluo por degenerao. 2. As gimnospermas formam um grupo monofiltico; no foram includos representantes de Gnetales.

Doyle & Donoghue 1987

Um ano depois, Doyle & Donoghue apresentaram estudos morfolgicos investigando a relao das angiospermas, um deles revisado posteriormente (Doyle & Donoghue 1987). Seguros que as angiospermas e as conferas so grupos monofilticos, elas foram includas como terminais. Eles usaram 20 terminais e 62 caracteres e em vez de polarizao por suposta evoluo de caracteres, ele selecionaram Aneurophyton (progimnosperma) para ser usado como grupos externo. Dentre os grupos atuais, as Gnetales so o grupo mais relacionados com as angiospermas e foram denominadas antfitas. Os resultados, entretanto, diferem dos obtidos por Crane (1985). As Bennettitales formam um grupo com Gnetales, e juntas formam o grupo irmo das angiospermas. Assim, apesar da relao de proximidade com Gnetales, em vez de sustentar a teoria do pseudanto, o cladograma sustenta a teoria antostrobilar, segundo a qual as angiospermas teriam derivado de um ancestral comum com flores bissexuais e megasporofilos e microsporofilos pinados. As flores de Gnetales teriam derivado a partir de uma reduo secundria e agregao associados polinizao pelo vento. Enquanto o carpelo seria uma caracterstica foliar primitiva, os estames teriam derivado da reduo dos sinngios de Caytonia. As Bennetitales teriam mantido os microsporofilos pinados, mas o ancestral comum de Bennettitales e Gnetales teria sofrido reduo do megasporofilo para um vulo, simplificao do microsporofilo teria ocorrido tambm em Gnetales. Nesse caso, a origem das angiospermas teria que ser empurrada para a mesma poca das Bennettitales, ou seja, Trissico superior e evidncias seguras de angiospermas s so conhecidas a partir do Cretceo Inferior. A rvore, no entanto, possui um grande nmero de homoplasias, tornando os resultados muito sensveis a qualquer alterao, permitindo inmeras alternativas. Por exemplo, apenas quatro passos a mais colocariam Gnetales como grupo irmo de conferas. Troistky et al. 1991 Uma anlise molecular usando cinco regies de RNAs, 5.8S e 5S RNAs do citosol, o 4.5S e 5S RNAs do cloroplasto, a seqncia parcial do 18S RNA do citosol, totalizando 760 posies. As anlise foram feitas utilizando compatibildade (a partir da probabilidade de subrvores com quatro terminais) e parcimnia. Os cladogramas obtidos a partir de terminais e regies distintas apresentaram topologias distintas, entretanto alguns padres podem ser observados. 1) As gimnospermas aparecem em todos os cladogramas como grupo monofiltio. Como alguns grupos de gimnospermas j apareciam distintos no Carbonfero, essa topologia implica uma divergncia entre gimno e angiospermas ainda mais antiga, talvez no Devoniano (ca. 360 Ma.). Dois fatores explicariam a ausncia de angiospermas anteriores ao Cretceo: Elas no teriam adquirido as caractersticas de angiospermas e estariam sendo confundidas com gimnospermas, ou elas estariam restritas a ambientes onde a preservao de fsseis seria rara. 2) As monocotiledneas aparecem em alguns cladogramas como grupo parafiltico, onde estariam includas as dicotiledneas. Isso poderia ser corroborado pela presena antiga das monocotiledneas no registro fssil e por algumas hipteses de evoluo morfolgicas.

Loconte & Stevenson 1990 Nos cladogramas de Parenti (1980), Hill & Crane (1982), Crane (1985) e Doyle & Donoghue (1986), as angiospermas aparecem invariavelmente inseridas nas atuais gimnospermas rendedo quelas a condio de parafilticas. As Gnetales aparecem geralmente como grupo-irmo das angiospermas, mas o arranjo dos componentes de espermatfitas vria de acordo com o estudo. Ento Loconte & Stevenson (1990) realizaram uma nova anlise, utilizando 11 terminais e 39 caracteres reavaliados a partir principalmente de Crane (1985) e Doyle e Donoghue (1986). Eles usaram as verses novas do PAUP e do MacClade, o que entre outras coisas permitia a incluso de caracteres polimrficos. A rvore mais parcimoniosa (uma nica) indicou 11 autapomorfias para as angiospermas e confirmou Gnetales como seu grupo-irmo vivo. Algumas supostas homologias entre angiospermas e Gnetales foram discutidas e apesar do clado Anaspermae ser sustentado por algumas sinapomorfias, so inmeros os casos de homoplasias entre angiospermas e Gnetales. As gimnospermas aparecem mais uma vez como grupo parafiltico; um cladograma que forasse as gimnospermas formarem um grupo monofiltico, seria seis passos mais longa. 1 Leitura para a prxima aula: Doyle, J.A. & Donoghue, M.J. 1992. Fossil and seed plant phylogeny reanalyzed. Brittonia 44(2): 89-106. Hasebe, M. & 5 autores. 1992. Phylogeny of Gymnosperms inferred from rbcL gene sequence. Bot. Mag. Tokyo 105: 673-679.

Texto complementar: Hennig, W. 1965. Phylogenetic Systematics. Ann. Rev. Entom. 10: 97-116. Loconte, H. & Stevenson, D.W. 1990. Cladistic of the Spermatophyta. Brittonia 42(3): 197-211.

Tpicos para Doyle & Donoghue 1992: Quais os objetivos do trabalho? Quais os resultados e como esto relacionados com estudos prvios? Qual a importncia dos fsseis em anlises cladsticas?

Tpicos para Hasebe et al. 1992: Quais os problemas envolvendo as anlise moleculares anteriores? Como foram as anlises. Quais os principais resultados. 1 Textos para a prxima aula: Endress, P.K. 1986. Reproductive structures and phylogenetic significance of extant primitive angiosperms. Pl. Syst. Evol. 152: 1-28. Krassilov, V.A. 1991. The origin of angiosperms: new and old Problems. Trends Ecol. Evol. 6(7): 215-220. Tpicos para Endress 1986: Caracterize as antigas angiospermas com relao ao plen, a filotaxia das estruturas florais, ao perianto, androceu, gineceu e polinizadores e algumas implicaes dessas caractersticas. Caracterize os grupos de angiospermas antigas. Resuma as idias sobre a evoluo das angiospermas. Tpicos para Krassilov 1991: Quais os grupos bsicos de possveis ancestrais de angiospermas no Mesozico e como estavam representada as angiospermas no Cretceo Inferior e Superior? Qual a soluo para incorporar as duas hipteses antagnicas para origem das angiospermas? 1 AULA 6 A idia de se usar dados moleculares na inferncia de filogenias surgiu com Zuckerkandl & Paulin (1965). Eles sugeriram detectar mutaes de nucleotdeos atravs das protenas. Desde ento, houve um crescimento progressivo nos estudos filogenticos com dados moleculares. Em 79 revistas entre 1989-1991, foram relacionados 1140 artigos que incluam rvores filogenticas, sendo 77% desses estudos baseados em dados filogenticos, incluindo parcimnia ou distncia, mas no UPGMA, e 53% dos estudos j usavam evidncias moleculares. Morfologicamente, parecia consenso que as angiospermas eram monofilticas e que seu grupo irmo estaria nas Gnetales. Entretanto, as topologias variavam de modo geral conforme dos dados morfolgicos e dependendo dos dados moleculares, assim como entre dados

morfolgicos e moleculares (Donoghue 1994). As principais justificativas para explicar tantas contradies eram o excesso de homoplasias, dificuldade na seleo do grupo externo, na codificao dos estados de caracteres e na pequena amostragem. Os primeiros estudos moleculares em planta se concentraram no genoma de plastdeos, como o cloroplasto. Isso porque, esse genoma circular pequeno e, abundante na clula, ele representa poro significativa do DNA total. Estudos preliminares na dcada de 80 descobriram que a quantidade de variao no gene codificante da enzima ribulose 1,5bifosfato carboxilase (rbcL), que fixa o gs carbnico na fotossntese, era pequena entre monocotiledneas e dicotiledneas e que, portanto, essa regio poderia ser til na investigao das relaes filogenticas das angiospermas em um nvel profundo (Zarawski & Clegg 1993). Entre 1991 e 1992, Douglas Soltis e Mark Chase iniciaram um grande projeto na investigao das relaes filogentica entre as angiospermas. Em pouco tempo, se juntaram mais 42 pesquisadores, e juntos eles publicaram o primeiro trabalho relevante e compreensvel em sistemtica molecular de angiospermas (Chase et al. 1993). O artigo foi acompanhado por mais 13 artigos em subgrupos de angiospermas no Annals of Missouri Botanical Garden. A anlise incluiu at 499 seqncias de rbcL, cuja variao adequada para relaes at o nvel de famlia ou ordem. Pouco depois, com a advento do PCR (polymerase chain reaction), o seqenciamento passou a ser muito mais eficiente. Hoje, com uma pequena quantidade de DNA simples e relativamente barato ampliar a regio desejada. O PCR foi o impulso que a sistemtica molecular precisava. A partir da, muitas regies foram exploradas filogenticamente e muitos grupos avaliados mais detalhadamente. Essa revoluo laboratorial foi acompanhada de perto por progressos computacionais que permitiriam avaliar um grande nmero de seqncias de maneira mais eficiente, assim como utilizar algortimos mais complexos tanto para busca de rvores como para avaliao estatstica dos resultados. Quatro anos mais tarde Douglas Soltis e 19 pesquisadores (Soltis et al. 1997) publicaram resultados com 18S rDNA (nuclear) e logo depois Pamela Soltis e Douglas Soltis publicaram resultados usando regies dos trs genomas (atp de mitocondrias, rbcL do cloroplasto e 18S rDNA nuclear; Soltis et al. 1999 e Soltis et al. 2000). Esses resultados foram incorporados na classificao taxonmica por uma equipe internacional composta de 29 taxonomistas denominada Angiosperm Phylogeny Group (APG 1998), encabeada por Kre Bremer, Mark Chase e Peter Stevens, caracterizando um dos maiores trabalhos cooperativos em sistemtica e pondo os estudos em plantas frente dos em animais na rea pela primeira vez na histria. Mais recentemente foram publicados trabalhos com cinco, seis e dez regies. Ainda assim, dificuldades para se detectar a raiz das angiospermas estimularam a elaborao de uma anlise com 17 regies do cloroplasto (plastdeos; Graham 2000). Estudos moleculares esto sendo tambm altamente relevantes na datao de eventos evolutivos e no desenvolvimento ontogentico de caractersticas evolutivamente relevantes como as estruturas florais. O cladograma de Chase et al. (1993), com 375 e 499 txons, no teve a pretenso de estabelecer relao para todos os grupos de angiospermas, mas sim de fornecer um panorama preliminar para investigaes futuras mais detalhadas e rigorosas. O tamanho da matriz foi a maior dificuldade do estudo, e alguns anos mais tarde mtodos de busca mais eficientes foram capazes de encontrar rvores mais parcimoniosas (Rice 1997),

ainda que no alterando as concluses gerais. A rvore foi enraizada em Cycadales e assim no pode ser usada para estabelecer relaes entre os grupos de espermatfitas de maneira abrangente. Os grupos de Magnoliidae, que incluiriam supostamente os grupos basais de angiospermas foram discutidos num artigo no mesmo volume (Qiu et al. 1993). Esses dados de rbcL apresentaram Gnetales como grupo-irmo das angiospermas e Ceratophyllum como ramo que divergiu inicialmente (raiz das angiospermas), sendo grupo-irmo das demais angiospermas. Vale notar, entretanto, que a regio do cladograma onde se resolve esses padres possuem ramos muito longos em relao aos demais ramos da rvore, o que pode levar a interpretaes equivocadas devido a atrao de longos ramos, quando a probabilidade de similaridades por convergncia passa a ser maior do que a similaridade por ancestralidade em ramos curtos. Ceratophyllum parte, as angiospermas se dividiriam em dois grupos reconhecidos pelo plen monossulcado e trissulcado, exceo feita a Illiciaceae e Schisandraceae que possuem plen tricolpado, mas que teria evoludo independentemente das eudicotledneas. As Magnoliidae aparecem divididas em cinco clados: Magnoliales, Laurales, Piperales (incluindo Aristolochiaceae e Lactodoriaceae), Nymphaeales (excluindo Nelumbonaceae, mas incluindo Amborelaceae, Austrobaileyaceae, Chloranthaceae e Illiciaceae) e Ranunculales. Esta ltima sendo grupo irmo das eudicotiledneas. As Piperales aparecem como grupo irmo dos demais clados do grupo com plen monossulcado, que incluem as monocotiledneas como grupo monofiltico bem sustentado. Procurando verificar com mais detalhes o padro de diversificao inicial das angiospermas, Qiu et al. (1993) realizaram anlises com apenas 82 terminais, mantendo a representatividade de Magnoliidae, mas apenas amostras dos demais grupos. Essas anlises foram realizadas com e sem grupo externo para verificar a influncia de ramos longos; nesse ltimo caso, a rvore foi enraizada entre txons com plen mono e tricolpados (padro detectado nas demais anlises de rbcL). Foram encontradas duas ilhas, grupo de rvores com mesmo nmero de passos, mas encontradas a parti de incios independentes da buscas. A posio de Ceratophyllum ficou ento a ser controversa, aparecendo como grupo-irmo das demais angiospermas na maior ilha (89 rvores) e inserido em Magnoliales na menor ilha (3 rvores). Uma rvore com Nymphaeales na raiz das angiospermas seria apenas 11 passos mais longa que a mais parcimoniosa, com 3414 passos. Os Anais do Missouri continuaram publicando uma srie de artigos relacionados filogenia das angiospermas nos anos subsequentes. Doyle et al. (1994) fizeram um exerccio para verificar a origem das angiospermas. Eles incluram grupos fsseis e utilizaram apenas um representante de angiosperma por anlise. A posio das angiospermas se mostrou instvel, variando conforme o grupo de angiosperma utilizado, o que influencia a interpretao para a evoluo dos caracteres. Isso poderia sugerir eventualmente que as angiospermas teriam se originado mais de uma vez a partir de grupos fsseis distintos. Quando utilizado apenas txons vivos, incluindo nove txons de angiospermas, as Gnetales apareceram como grupo-irmo das plantas com flores. Os nicos clados bem sustentados so as antfitas, as Gnetales e as angiospermas. Apesar das paleoervas aparecerem na raiz das angiospermas, apenas um passo a mais poderia modificar a topologia do cladograma de modo que as paleorvores estivessem na raiz das angiospermas. Utilizando dados de rRNA, eles encontraram uma rvores que tambm sugere as paleoervas na raiz das angiospermas (como em Hamby & Zimmer 1992), sendo a

hiptese das paleorvores 13 passos mais longas. A sustentao para os clados melhor, mas ainda baixa para maiores inferncias. A anlise combinada entre dados moleculares e morfolgicos no oferece grandes mudanas. Nixon et al. (1994), incluindo ou no fsseis, exploraram dados morfolgicos e moleculares. A anlise completa incluiu 46 txons e 103 caracteres. Na anlise II, no foram includos os fsseis, diminuindo os txons para 31 e os caracteres para 97. Na anlise III, as angiospermas foram condensadas em um nico terminal, na IV, as angiospermas foram consideradas um terminal e na V, tambm sem fsseis, as angiospermas e as conferas foram condensadas como um nico terminal cada. A anlise completa foi feita tambm combinada com rbcL; os fsseis foram codificados como informao perdida. A anlise completa indicou um grande nmero de politomias. As Gnetales aparecem como grupo parafiltico, incluindo as angiospermas, em todas as anlises. A anlise sem fsseis, no entanto, foi mais informativa, revelando Chloranthaceae como grupo que primeiro divergiu entre as angiospermas. Os dados de Nixon et al. (1994) foram reanalisados por Doyle (1996) que voltou a defender uma origem exclusiva para as Gnetales, e reafirmar a origem nica das angiospermas, assim como Nymphaeales na raiz das plantas com flores. As Caytonia seriam o grupo irmo das angiospermas, mas entre os grupos atuais o grupo irmo so as Gnetales. Ele explorou a evoluo de vrios caracteres baseado na topologia obtida e sugeriu que a origem das Gnetales e angiospermas teria ocorrido a partir de Glossopterides, grupo que desapareceu durante a grande extino do Permiano. A relao com Bennettitales e Caytoniales, sugere que os dois grupos teriam surgido por volta do Trissico, e caso eles tenham derivado diretamente das Glossopterdes essa data pode ser expandida para o Permiano ou at mesmo o Carbonfero. Como rbcL no capaz de resolver padres na base das angiospermas, uma forma de solucionar o problema acrescentar mais caracteres, o que em sistemtica molecular significa adicionar outras regies na tentativa de aumentar a resoluo do cladograma e a sustentao dos clado. Assim, Nickrent & Soltis (1995) utilizaram as angiospermas como estudo de caso para avaliar a utilidade do gene ribossomal 18S DNAr na reconstruo de filogenias. Diferente do rbcL, que uma regio do cloroplasto, o 18S uma regio do genoma nuclear. Os ribossomos so formados por pedaos de RNAr associados a protenas. Esses pedaos, 18S, 5.8.S e 26S, esto separados no DNA por espaadores, formando uma unidade. Vrias repeties dessas unidades esto organizadas em seqncia no genoma nuclear. Antes de 1990, era comum seqenciar o RNAr, mas com o advento do PCR, passaram a seqenciar o DNA diretamente. Eles utilizaram 62 txons que possuam seqncias para rbcL e 18S. No consenso estrito a partir de rbcL as paleoervas aparecem na base da rvore e as monocotiledneas na raiz das angiospermas. Com 18S rDNA, a rvore muito pouco informativa, e o consenso estrito gera uma enorme politomia. A comparao entre as duas regies indicou que o 18S tem uma taxa de evoluo trs vezes menor que o rbcL, o que apesar de ser em parte compensado pelo maior nmero de caracteres, no suficiente para adicionar informaes relevantes ao padro filogentico nesse nvel de anlise, sendo provavelmente mais teis em problemas hierarquicamente mais antigos. Ambas as anlise revelaram as Gnetales como grupo-irmo das angiospermas. Dois anos mais tarde, Soltis et al. (1997) reavaliaram a importncia do DNAr 18S na reconstruo da filogenia das angiospermas. Dessa vez, foram usadas 223 seqncias, incluindo ou no os indels e retirando parte dos terminais que possuam seqncia

parcial ou ramos longos. Como eles seqenciaram novamente alguns terminais, alguns com a mesma amostra, notaram que existiam vrios equvocos que poderiam ter prejudicado anlises anteriores. Nessa anlise, curiosamente, diversos grupos com plen monossulcado apareceram inseridos nas eudicotiledneas. Na anlise com 194 terminais, Amborellaceae aparece como grupo irmo das outras angiospermas, seguidas por um clado composto de Illiciaceae, Austrobaileyaceae e Schisandraceae, e Nymphaeaceae. Apesar de resultados esprios no restante da rvore, os grupos basais foram confirmado em estudos posteriores, apesar da ordem do clado ter variado de acordo com a anlise. No comeo do sculo passado, Arber & Parkin (1908), o criadores da teoria do antostrobilar, j tinham concludo que: 1) as Gnetales formavam um grupo monofiltico; 2) as Gnetales estavam mais relacionadas com as angiospermas do que qualquer outro grupo vivente. Essas duas concluses parecem ter sido amplamente corroborada por anlises filogenticas utilizando tcnicas cladsticas (Crane 1996). Dessa maneira, as gimnospermas, definidas pela ausncia do carpelo, formam um grupo parafiltico na ausncia das angiospermas. Dentre as tendncias e semelhanas que corroboram essa relao entre Gnetales e as angiospermas esto: 1) a presena de vasos; 2) a reduo do nmero de clulas do microgametfito em Gnetum, Welwitschia e angiospermas (ainda mais reduzido, pela ausncia da clula protalial); 3) a ausncia de arquegnios tanto em angiospermas como em Gnetum e Welwitschia; 4) dupla fecundao e; 5) ausncia de fase cenoctica no desenvolvimento do embrio de Gnetum, Welwitschia e angiospermas. 1 Texto para prxima aula: Carlquist, S. 1996. Wood, bark, and seed anatomy of Gnetales: a sumary. Int. J. Plant Sci. 157(6 Suppl.): S58-S76. (ler phylogenetic conclusions S67-S74) Friedman, W.E. & Carmichel, J.S. 1996. Double fertilization in Gnetales: implications for understand reproductive diversification among seed plants. Int. J. Plant Sci. 157(6 Suppl.): S77-S94. Texto complementar: Friedman, W.E. 1990. Sexual reproduction in Ephedra nevadensis (Ephedraceae): further evidence of duble fertilization in a nonflowering seed plant. Am. J. Bot. 77: 1582-1598. Endress, P.K. 1994. Floral structures and evolution of primitive angiosperms: recent advances. Pl. Syst. Evol. 192: 79-97. Tpicos para Carlquist 1996: No que est baseado a hiptese de Thompson-Bailey para a relao entre os vasos de Gnetales e angiospermas?

Tpicos para Friedman & Carmichel 1996:]

Compare o desenvolvimento do gametfito feminino e a dupla fecundao em Ephedra e Gnetum. Qual a correspondncia entre a dupla fecundao em Gnetales e as angiospermas? 1 AULA 7 At meados da dcada de 90, os dados morfolgicos colocavam indubitavelmente as Gnetales como grupo vivo evolutivamente mais relacionado com as angiospermas. As anlises moleculares, no entanto, continuavam contraditrias. Enquanto alguns estudos apontavam as gimnospermas atuais como grupo monofiltico, irmo das angiospermas, outros estudos moleculares, combinados ou no com morfologia, corroboravam a relao de proximidade com as Gnetales, muitas vezes fortemente sustentada estatisticamente (e.g. Doyle et al. 1996). O aparente consenso de que as Gnetales representavam o grupo irmo das angiospermas fez com que alguns estudos (e.g. Soltis et al. 1997) passassem a utiliz-lo como grupo externo na busca de padres filogenticos em angiospermas. As antfitas (clado composto pelas Gnetales e pelas angiospermas, mais Bennettitales e Pentoxylales), no entanto, pode ter sido apenas resultado do tipo de dados, do tipo de anlise, ou enraizamento que os autores assumiram como mais adequados. A maioria dos estudos morfolgicos, assim como estudos moleculares utilizando parcimnia como critrio na escolha entre as rvores alternativas eram realizados pela escola americana e geralmente resultavam em gimnospermas formando um grupo parafiltico. Na Europa e sia, os estudos moleculares eram analisados principalmente atravs de distncia e mxima verossimilhana, e as rvores freqentemente indicavam as gimnospermas como grupo monofiltico, ou, pelo menos, no sustentavam as antfitas. Dessa maneira, pode ser que a diferena nos resultados seja fruto de metodologias contrastantes e o aparente consenso, a crena na suposta supremacia da parcimnia como critrio de escolha mais apropriada. A idia de que os dados moleculares corroboravam as hipteses morfolgicas vieram principalmente de anlises de rbcL. Entretanto, fcil notar que o clado das angiospermas, das Gnetales, assim como das Antfitas, so constitudos por ramos longos (com muitas substituies; veja Chase et al. 1993). A problemtica de ramos longos que nesses casos homoplasias podem se tornar mais comuns do que sinapomorfias. Ramos longos, causados por taxa evolutivas muito desiguais ou pelo longo tempo de divergncia, podem ento ser aproximados em uma anlise porque as chances de substituies paralelas passam a ser maiores do que substituies nicas em ramos curtos, levando conhecida atrao de ramos longos. Ramos longos so especialmente provveis em radiaes rpidas e antigas, como parece ter sido o caso das espermatfitas e mais especificamente com as angiospermas. Nesses casos, a parcimnia passa a ser inconsistente, ou seja, quanto mais dados se utiliza, mais suporte ela dar para uma hiptese equivocada. Alm do mais, o enraizamento tambm pode ter influenciado a topologia apresentada na anlise de rbcL. Em rbcL, existe uma desigualdade nas taxas evolutivas entre as trs posies de um cdon. A terceira posio, cuja mutao geralmente sionnima, ou seja, no altera o

aminocido codificado e portanto no est sobre efeito de uma seleo restritiva, possui em rbcL uma taxa evolutivamente muito maior do que os primeiro e os segundo nucleotdeos. Para verificar possveis desvios nos estudos de rbcL, Goremink et al. (1996) decidiram analisar tambm uma regio no codificante. Essa regio por no estar sobre forte restrio funcional supostamente possuiria taxas de mutao similares entre as trs posies do cdon. Eles usaram 43 seqncias de ITS (DNA do cloroplasto) e notaram que, por exemplo, a taxa de transies era maior que a de transverses. Eles compararam as distncias entre a regio no codificante e codificante do DNAr e comprovaram que a taxa de mutao na regio codificante realmente menor do que na no codificante. Uma comparao entre a taxa de substiuies sinnimas tambm comprovou que o nmero as substituies sinnimas so significativamente mais comuns em rbcL do que as no sionnimas. Utilizando Neighbour-Join (NJ), um mtodo de distncia, numa anlise de ITS de cloroplasto para as 43 plantas terrestres, Goremynkin et al. (1996) obtiveram as gimnospermas como grupo monofiltico. As Gnetales saram relacionadas com Pinus e a famlia que diverge inicialmente na evoluo das angiospermas seria as Nymphaeales. Como o grande nmero de mutaes sinnimas em rbcL, geralmente relacionadas a mudanas na terceira base tornaria essa posio saturada, eles incluram apenas as primeiras e segundas bases na anlise. Retirando a terceira base, eles removeram de 810% de posies no sinnimas e mantiveram 5% de sinnimas referentes s primeiras e segundas bases, o que ainda assim deveria ampliar a confiana dos resultados. Essa anlise de rbcL no resolveu a relao entre as espermatfitas pois tambm na terceira base que se concentra a maior parte da informao filogentica em rbcL (Kllersj et al. 1998). A combinao das primeiras duas posies dos cdons de rbcL com ITS indicou que as angiospermas formam um grupo monofiltico, assim como as gimnospermas, apesar do baixo suporte para essa hiptese. Esse trabalho serviu, ento, para atentar para o fato de que os dados moleculares que sustentam a relao entre Gnetales e angiospermas so fracos. No ano seguinte, Chaw et al. (1997) utilizaram 65 amostras de 18S RNAr representando todas as ordens de gimnospermas e as subclasses de angiospermas. Eles utilizaram as Licopodiaceae como grupo externo e analisaram com NJ (40% para transies e 60% para transverses), alm de mxima parcimnia. Nesse estudo, ao contrrio do realizado por Soltis et al. (1997), foi dada maior ateno para resolver as relaes entre as espermatfitas e no entre as angiospermas mais especificamente. No cladograma de NJ, as gimnospermas aparecem como grupo monofiltico, tendo Ginkgo prximo das Cycadales e Gnetales como grupo irmo das conferas, que aparecem como grupo monofiltico fortemente sustentado. Dentre as angiospermas, as paleoervas teriam se diferenciado primeiramente, sendo Nymphaeales a ordem basal das angiospermas, seguida pelas Chloranthaceae e Piperales. Nessa topologia as eudicotiledneas no aparecem como grupo monofiltico, mas tambm a alternativa no recebe sustentao atravs do bootstrap. No cladograma de mxima parcimnia, apesar de pouco sustentada, as gimnospermas tambm aparecem como grupo monofiltico, no entanto, Ginkgo teria divergido inicialmente, hiptese pouco sustentvel, seguida das Cycadales. A relao entre Gnetales e as coniferas bem sustentada. As monocotiledneas aparecem como monofiltica, mas no existe uma resoluo confivel para a maioria dos ramos internos de angiospermas.

Stephanovic et al. (1998), por outro lado, utilizando outra regio do RNAr (28S), detectaram novamente as antfitas. A proporo de transies era muito mais alta que a de transveres e, podendo estar saturadas, foram desconsideradas na anlise. Ou seja, a taxa muito alta de transies tornaria esse tipo de mutao pouco significativa filogeneticamente e poderia levar a resultados esprios. Apesar das Gnetales aparecerem como grupo-irmo das angiospermas, a amostragem pouco representativa e o clado pouco sustentado. Nessa poca, aumentaram as anlises combinadas de regies dos trs genomas em busca de uma alternativa que significasse a convergncia de vrios resultados. Bowe & DePamphilis (1997) utilizaram regies do genoma do cloroplasto (rbcL), nuclear (18S) e mitocondrial (cox 1), reafirmando as gimnospermas como grupo irmo das angiospermas. Ainda assim, as relaes entre as plantas com semente continuaram controvertidas. Em 2000, Bowe et al. (2000) e Chaw et al. (2000) obtiveram resultados confiveis para sustentar as gimnospermas, rejeitando as antfitas como grupo monofiltico. Chaw et al. analisaram 35 seqncias do DNAr mitocondrial (mtSSU) e nuclear (nuSSU) e do cloroplasto (rbcL), de acordo com mxima parcimnia e mxima verossimilhana. A anlise de mtSSU indicou as gimnospermas como grupo irmo das angiospermas, as variaes na topologia ficaram restritas internamente s angiospermas. As Gnetales aparecem relacionadas com Pinaceae (Ephedra e Welwitschia com ramos longos) e as conferas formaram um grupo bifiltico. As topologias obtidas com nuSSU atravs de mxima parcimnia e mxima verossimilhana diferiram na posio de Ginkgo, formando um clado (mxima verossimilhana) ou um grado (mxima parcimnia) com Cycadales. Nessa rvore, as Gnetales aparecem como grupo irmo das conferas. Em rbcL, as Gnetales apareceram como grupo irmo das angiospermas quando utilizado parcimnia. Com verossimilhana, as Gnetales apareceram como grupo irmo das demais plantas com sementes, porm quando a taxa de mutao ajustada, elas aparecem relacionadas com as Pinaceae, como nas anlises com DNA mitocondrial. As transies na terceira posio apareceram saturadas quando comparadas com uma taxa corrigida de evoluo. A excluso das transies da terceira posio resultam em uma rvore semelhante obtida atravs da taxa corrigida, i.e. com Gnetales aparecendo prximo de Pinaceae. Cientes da influncia de ramos longos em anlises envolvendo as espermatfitas, Bowe et al. (2000) reavaliaram as regies dos genomas do cloroplasto (rbcL), nuclear (18S) e mitocondrial (cox 1), adicionando atpA (mitocondrial) na discusso. rvores no enraizadas indicaram atravs do RASA (Relative apparent synapomorphy analysis) que a melhor posio para a raiz dividiria angiospermas e gimnospermas. Apesar de Ephedra apresentar ramos longos em cox 1, sua excluso no alterou os resultados. A rvore resultante da anlise combinada das quatro regies coincidiu com os resultados de Chaw et al. (2000). As gimnospermas atuais formam um grupo monofiltico, tendo as Cicadales divergido inicialmente, seguidas por Ginkgo. As Gnetales, grupo monofiltico, aparecem includas nas conferas, mais especificamente relacionadas com Pinaceae. De grupo irmo das angiospermas, as Gnetales passaram a ter posio indefinida. Elas estariam includas nas conferas, como grupo irmo das Pinaceae, o que fortemente sustentado por dados de DNA mitocondrial, por exemplo. Todavia, a posio de Gnetales varia conforme a regio analisada, ou mesmo parte de uma regio. Por exemplo, enquanto psaA e psaB sustentam a relao entre Gnetales e Pinaceae, uma

anlise com apenas a terceira base do cdon dessas regies, coloca as Gnetales como grupo irmo das demais espermatfitas. O tipo de anlise (MP, NJ, MV) tambm influencia os resultados, assim como a amostragem (veja Magalln & Sanderson et al. 2002 para um resumo das anlises em espermatfitas). Uma anlise com oito regies dos trs genomas (Soltis et al. 2002) confirmou as Gnetales includas nas conferas. Mas a posio de Ginkgo incerta, aparecendo com Cycadales atravs de MP ou grupo irmo das conferas, incluindo as Gnetales atravs de inferncia bayesiana. A incluso de Gnetales nas conferas no est todavia completamente aceita e as diferenas morfolgicas num primeiro momento rejeitariam essa hiptese. No entanto, se compararmos a divergncia encontrada em Taxaceae, as Gnetales poderiam ser encaradas como conferas altamente modificadas. Ainda assim, as conferas so desprovidas de uma repetio invertida no cloroplasto, perda que parece ter sido fruto de um nico evento. As Gnetales por sua vez possuem a repetio e sua incluso em conferas sugere que a repetio invertida tenha sido perdida duas vezes ou que uma nova repetio tenha aparecido em Gnetales (Raubenson & Jansen 1992). As duas possibilidade so pouco provveis. No estando, as angiospermas relacionadas com as Gnetales, sua divergncia das demais plantas vivas passa a datar pelo menos do surgimento das gimnospermas, i.e. ca. 320 Ma, provavelmente a partir das progimnospermas. A confirmao da dicotomia entre angiospermas e gimnospermas portanto conflitante com a ausncia de fsseis de angiospermas anteriores a 130 Ma. De acordo com esses resultados moleculares, as Gnetales formam um clado muito modificado e filogeneticamente pouco relacionado com as angiospermas, sendo as similaridades fruto de convergncias. O uso das Gnetales como grupo externo exclusivo na investigao de padres filogenticos em angiospermas por causa de ramos longos pode implicar em resultados equivocados. O que existe entre as angiospermas e as demais plantas com semente um ramo longo que dificulta estudos comparativos e talvez solues para desvendar a origem e diversificao inicial das angiospermas devam ser encontradas nos fsseis. 1 Leituras para a prxima aula: Doyle, J.A. 1996. Seed plant phylogeny and the relatioship of Gnetales, Int. J. Plant Sci. 157(6 Suppl.): S3-S39. (at p. 24, principalmente 3-10 e 21-24) (Xerx) E Donoghue, M.J. & Doyle, J.A. 2000 Seed plant phylogeny: Demise of the anthophyte hypothesis? Current Biology 10: 106-109. (internet) OU Hansen, A. & 4 autores. 1999. Gnetum and the angiosperms: molecular evidence that their shared morphological characters are convergent, rather than homologous. Mol. Biol. Evol. 16: 1006-1009. (internet - fora do portal CAPES) E

Soltis, D.E., Soltis, P.S. & Zanis, M. 2002. Phylogeny of seed plants based on evidence from eight genes. Am. J. Bot. 89:1670-1681. (pgina do grupo da disciplina) Texto complementar: Magalln, S. & Sanderson, M. 2002. Relationships among seed plants inferred from highly conserved genes: sorting conflicting phylogenetic signals among ancient lineages. Am. J. Bot. 89: 1991-2006. (pgina do grupo da disciplina) Tpicos para Doyle 1996 e Donoghue & Doyle 2000 A posio taxonmica de Gnetales ao longo da histria. Problemas e solues dos estudos moleculares. Que rea poder trazer luz a origem das angiospermas? Tpicos para Hansem et al. 1999 e Soltis et al. 2002 Hiptese de relao entre Gnetales e Angiospermas Mtodo Resultados Concluso 1 AULA 8 Raiz das Angiospermas Caracterizar as primeiras angiospermas poderia resolver alguns mistrios sobre sua origem e diversificao. O perfil das primeiras angiospermas, entretanto, continuava controverso. De acordo com a teoria antostrobilar dominante no sculo passado e amplamente difundida pelo sistema de classificao de Cronquist (1988), as primeiras angiospermas seriam arbreas. Por outro lado, baseado principalmente na vantagem adaptativa de um desenvolvimento rpido em ambientes instveis, Stebbins (1965) sugeriu que as primeiras angiospermas seriam arbustivas. Com o desenvolvimento dos estudos cladsticos, surgiram hipteses filogenticas contrastantes. Enquanto, algumas anlises sustentavam que as primeiras angiospermas seriam realmente arbreas com flores grande e bissexuais, semelhantes aos grupos de Magnoliaceae e Winteraceae, outros estudos defendiam que as primeiras angiospermas seriam arbustivo-herbceas, com flores reduzidas e unissexuais, semelhantes s Chloranthaceae. Essas duas hipteses rivais indicavam portanto situaes evolutivas concorrentes (veja Doyle & Donoghue 1992). Como demonstrado atravs de vrios estudos cladsticos no final da dcada de 90, no existe nenhuma gimnosperma viva que possa ser considerada mais relacionada com as angiospermas e que portanto pudesse ser usada com confiana na polarizao de caracteres em anlise morfolgicas (dificuldade na deteco de homologias) ou no enraizamento de anlises moleculares (risco de atrao de ramos longos, mas veja Qiu

et al. 2001). Existe uma enorme lacuna entre a origem da linhagem das angiospermas e o surgimento das angiospermas atuais. A linhagem das angiospermas teria aparecido prximo ao Devoniano (ca. 320 Ma), juntamente com o surgimento da linhagem das gimnospermas atuais, enquanto fsseis registram as primeiras angiospermas seguramente apenas a partir do Neocomiano (ca. 130 Ma). As gimnospermas representam o grupo mais relacionado com as angiospermas, ainda assim essa relao muito antiga e a incluso das gimnosperma como grupo externo poderia levar a desvios na anlise das relaes dentre as angiospermas. Descobrir os grupos que teriam divergido inicialmente na diversificao das angiospermas seria um passo importante na caracterizao das primeiras linhagens. Entretanto, a distncia evolutiva entre as angiospermas e os demais grupos de espermatfitas vivas dificultava essa tarefa, colocando em dvida os resultados. Mathews & Donoghue (1999) tentaram, ento, uma abordagem inteligente para tentar detectar as angiospermas que teriam divergido no incio da evoluo do grupo, sem que para isso tivessem que usar grupos externos na polarizao de sua rvore. Eles usaram um do par de genes parlogos do fitocromo, PHYA e PHYC. Esse par de genes exclusivo das angiospermas; nas demais plantas com sementes existe apenas uma copia do gene. Assim, a divergncia entre esse parlogos teria acontecido durante a evoluo das angiospermas e o esperado seria uma rvore com duas subrvores semelhantes para cada um dos genes, conectadas por um ramo que representaria a raiz das angiospermas. Eles usaram 26 espcies abrangendo os grupos tidos como os mais provveis de representar as linhagens que primeiro divergiram. O resultado foi apenas uma rvore mais parcimoniosa apontando Amborella (Nova Calednia) como a primeira linhagem divergente em angiospermas; as subrvores foram em grande parte congruentes. Eles, ento, combinaram a informao dos dois genes e enraizaram em Amborella obtendo duas rvores mais parcimoniosas, onde Nymphaeaceae (Nymphaea e Cabomba) seria a prxima linhagem divergente seguida de Austrobaileya. Esse estudo era consistente com outros que vinham sendo produzidos na mesma poca a partir de anlise multignicas (e.g. Parkinson et al. 1999. Qiu et al. 1999, Soltis et al. 1999). As primeiras angiospermas seriam, portanto, diicas e teriam o carpelos soldados por secreo, mas que essa condio teria aparecido secundariamente em Chloranthaceae e Nelumbonaceae. As flores no seriam grandes, nem pequenas, mas intermedirias, a partir da qual teriam derivado os extremos. Elas no teriam vasos, sendo a ausncia de vasos em Winteraceae uma caracterstica tambm secundria, e nem leos essenciais. Outra concluso aparente que a diversificao das angiospermas no foi to rpida no incio e no esteve relacionada com o surgimento das flores, uma vez que a diversidade desses grupos prximos da raz pequena. Essa diversificao teria ocorrido em grupos mais deroivados que teriam adquirido hbito herbceo. Os primeiros estudos moleculares no eram convincentes na deteco dos padres filogenticos para o incio da diversificao das angiospermas porque a sustentao dos clados era geralmente fraca e eventualmente contraditria. Um exemplo a formao de dois clados basais em angiospermas conforme rbcL (no-eudictotiledneas e eudicotiledneas; Chase et al. 1993) incongruente com o grado das noeudicotiledneas conforme 18S DNAr (Soltis et al. 1997) e atpB (Savolainen et al. 2000). A incluso de mais genes numa anlise combinada poderia aumentar a resoluo assim como o suporte de alguns clados. Qiu et al. (1999, 2000) apresentaram resultados da combinao de cinco regies representando os trs genomas: atp1 e matR

(mitocndria), atpB e rbcL (cloroplasto) e 18S DNAr (nuclear). Eles analisaram 97 espcies (8741 caracteres) e detectaram na base das angiospermas um grado (ANITA) composto por Amborella, seguido de Nymphaeales e um clado constitudo de Illiciales (Am. N.), Trimeniaceae (S. sia) e Austrobaileyaceae (S. sia). ANITA foi obtida tambm em todas as anlise individuais, exceto em atp1, onde Amborella aparece entre as eudicotiledneas. Esse disparate est relacionado ao seqenciamento de um pseudogene (Barkman et al. 2000). Ainda assim, enquanto o critrio de parcimnia sustenta Amborella como linhagem mais basal das angiospermas, o uso de mxima verossimilhana favorece o clado formado por Amborella e Nymphaeales. Parkinson et al. (1999) tambm usaram cinco genes dos trs genomas: incluindo mtSSU DNAr, cox1 e rps2 (mitocndria), rbcL (cloroplasto) e nuSSU DNAr (nuclear). Apesar das anlises individuais no serem muito informativas, a combinada confirmou ANITA como grado basal. Os resultados, entretanto, no apresentaram diferenas significativas entre uma topologia considerando Amborella ou um clado com Amborella e Nymphaeales como grupo que primeiro divergiu. Barkman et al. (2000) realizaram anlises com 33 txons e seis genes e com 15 txons e nove genes. Eles utilizaram parcimnia sem e com pesagem para transverso, NJ com vrios modelos evolutivos de substituio e mxima verossimilhana com dois modelos evolutivos. A idia que os resultados de alguns estudos eram dependentes do mtodo de anlise e que a convergncia dos resultados de vrios genes atravs de vrios mtodos ofereceria grande sustentao para o padro hierrquico basal das angiospermas. Eles utilizaram o RASA, programa que avalia o sinal de modo a indicar o melhor local para enraizar a rvore e minimiza barulhos e efeitos de ramos longos. Eles detectaram um par de genes de atpA em amborella, o que teria desviado os resultados de Qiu (2000). As cpias eram bem distintas, uma indicando sua relao com as eudicotiledneas e outra sugerindo sua posio na base das angiospermas, concordando com as demais regies. Mais uma vez, as anlises apontaram tanto Amborella como o clado de Amborella e Nymphaeales como mais provveis candidatos a representarem as primeiras linhagens de angiospermas. Entretanto, existe mais suporte para a segunda opo, principalmente com a reduo do barulho atravs do RASA, o qual tambm diminui o conflito entre as regies e mtodos. Os resultados no dependem s dos mtodos e das regies, mas tambm da amostragem. Um exemplo, o estudo com 17 genes de cloroplasto (13,4 Kb; Graham & Olmstead 2000). A incluso de Cabomba como representante exclusivo de Nymphaeales indica que Amborella no seria a primeira linhagem a divergir nas angiospermas, mas sim Cabomba, hiptese bem sustentada. Por outro lado, a incluso de Nymphaea, empurra Amborella para a base das angiospermas, seguida por Nymphaeales, hiptese com suporte regular. Esse estudo foi seguido por outro com 11 genes, mas incluindo mais de 15Kb analisados de acordo com MP, MV e Bayesiana (Zanis et al. 2002). A maioria dos resultados sustentaram a posio de Amborella na raiz das angiospermas; porm, parte dos dados eventualmente sustentou fracamente uma raiz alternativa a partir de Amborella e Nymphaeales. 1

Para a prxima aula: Idias fundamentadas (literatura) sobre Radiao: o que e como estudar radiao.

Leitura para a proxima aula: Friedman, W.E. & Floyd, S.K. 2001. Perspective: the origin of flowering plants and their reproductive biology -a tale of two phylogenies. Evolution 55(2): 217-231. (pgina do grupo) Kuzoff, R.K. & Gasser, C.S. 2000. Recent progress in reconstructing angiosperm phylogeny. Trends Plant Sci. 5(8): 330-336 (internet) Leitura complementar: Zanis, M.J. et al. 2002. The root of the angiosperms revisited. Proc. Natl. Acad. Sci. USA 99(10): 6848-6853. (internet) Qiu, Y.-L. & 9 autores. 1999. The earliest angiosperms: evidence from mitochindrial, plastid and nuclear genomes. Nature 402: 404-407. (Internet) Endress, P.K. & Igershein, A. 2000. Ginoiecium structure and evolution in basal angiosperms. Int. J. Plant Sci. (6Suppl.): S211-S233. (pegar comigo) 1 Aula 10 Irradiao e Datao das angiospermas

Irradiao Irradiao um conceito controverso. Alguns associam irradiao com o nmero de espcies, outros com a disparidade entre elas. De maneira geral, entretanto, o conceito est associado ao tempo. Irradiao pode ser entendida como uma grande diversificao em um curto espao de tempo (Sanderson 1998). Essa diversificao pode no resultar necessariamente em um grande nmero de espcies, mas em poucas espcies muito distintas entre si. As justificativas mais comuns para explicar a irradiao de um grupo so novidades evolutivas intrnsecas ao organismo capazes de oferecer maior adaptao a determinadas condies ou mudanas ambientais (extrnsecas) que acabam por tornar adaptativas caractersticas at ento no relevantes (exaptido) e assim favorecer a evoluo de determinados grupos que j apresentavam essas caractersticas. A deteco de caractersticas-chave para a diversificao de um grupo tornaria a evoluo previsvel. Todavia, tal caracterstica depende de determinadas condies, tornando a evoluo imprevisvel (Queiroz 2002). Geralmente, o organismo possui um potencial genotpico que permite a explorao de uma poro do ambiente, assim como o ambiente determina a variao fenotpica a ser realizada pelo organismo. Uma das principais inovaes chaves a ampliao da capacidade fenotpica. Em muitos casos, o aumento da adaptabilidade uma adaptao importante na irradiao dos seres vivos pois permite a explorao de mais tipos de ambientes e torna o grupo menos suscetvel a mudanas ambientais. Toda adaptao surge, portanto, de uma pr-adaptao intrnseca,

ou seja, de um potencial genotpico. A irradiao adaptativa, dessa maneira, leva ao aumento na diversidade de formas interpretadas como txons (Foote 1997). Exerccios prvios (Doyle & Donoghue 1993, Sanderson & Donoghue 1994) demonstraram que estimativas da taxa de diversificao inicial das angiospermas est diretamente relacionada com a topologia da rvore, mais especificamente com a raiz das angiospermas. Atualmente, Amborella considerada a raiz das plantas com flores, indicando que a inovao-chave que teria levado grande diversificao das angiospermas no teria ocorrido concomitantemente com sua origem. Uma alternativa para essa hiptese seria uma intensa extino nos grupos basais, pouco diversos, o que, baseado em dados fsseis, no parece ter sido o caso. Irradiao um termo relativo. No existe um critrio absoluto para definir se um grupo sofreu ou est sob irradiao evolutiva. Esse conceito est relacionado com a taxa evolutiva mdia dos grupos relacionados. Assim, para entender os padres de diversificao das angiospermas essencial saber as taxas evolutivas dos grupos para compar-las. A estimativa das taxas evolutivas realizada a partir de duas variveis: o tempo de existncia e o grau de evoluo do grupo. Essa estimativa integra informaes morfolgicas e moleculares. A morfologia permite estabelecer uma correspondncia entre fsseis e grupos atuais para a datao de clados, assim como estimatar a diversidade traduzida em nmero de espcies. Os dados moleculares auxiliam na estimativa das relaes filogenticas, na estimativa da idade de clados sem registros fsseis conclusivos (veja a seguir) e eventualmente na deteco dos graus de evoluo a partir de substituies de pares de base em seqncias de DNA. Datao das angiospermas Os fsseis so amplamente utilizados para se estabelecer a idade mnima de um grupo, mas nem todos os grupos possuem fsseis informativos. Assim, grupos cujo registro fssil suficiente para a datao so utilizados para estimar a taxa evolutiva, a qual ento extrapolada para os demais grupos, baseado na premissa do relgio molecular. Essa premissa, sustentada pela teoria de neutralidade, segundo a qual a maioria das mutaes so neutras e a deriva gentica, o principal processo evolutivo, sugere que a taxa mdia de substituio constante ao longo da evoluo. Assim, a taxa evolutiva de um grupo pode ser obtida pela razo entre o comprimento do ramo e sua idade. A apario repentina das angiospermas no registro fssil a partir do Cretceo Inferior (130-140 Ma), assim como a presena de fsseis pr-cretcicos cuja classificao controversa estimulou a tentativa para se estimar a origem do grupo com dados moleculares. O primeiro estudo (Ramshaw et al. 1972) nesse sentido foi realizado com aminocidos do citocromo c e revelou que as angiospermas teriam surgido por volta do Siluriano (350-420 Ma). Martin et al. (1989), calibrando a rvore a partir da divergncia de plantas, animais e fungos em 1000 Ma, estimou a separao entre mono e dicots para o Carbonfero (ca. 319 Ma). No mesmo ano, Wolfe et al. (1989) baseados em RNAr e outros genes de plastdeos, e usando dois pontos de calibragem, separao dos musgos das outras plantas terrestres (400, o adequado seria 450 Ma) e a divergncia das gramneas (60Ma), estimaram a origem das angiospermas em 200 Ma. Corrigindo a datao para separao das brifitas (450 Ma) e incluindo uma calibragem para conferas (330 Ma), Martin et al. (1993), baseados em gapC e rbcL, verificaram que a taxa de substituio dessas regies no variava significativamente e poderia ser usada

atravs do relgio molecular para estimar a idade das angiospermas. Eles obtiveram ento 300 +/- 40 Ma. Assim, as plantas com flores teriam surgido no Carbonfero superior. Goremink et al. (1997), em uma anlise incluindo 14295 aminocidos de 58 proteinas referentes ao genoma completo do cloroplasto de seis espcies e calibrando a rvore em Musgos (450 Ma), estimaram a divergncia entre conferas e angiospermas em 340 Ma e de Nicotiana (Eudicot) e Zea-Oryza (Monocot) em 160 Ma. Dados mais compatveis com os registros fsseis. A observao de vrios pares de clados irmos, e portanto, grupos de mesma idade, com diferenas significativas no nmero de espcies e/ou comprimento dos ramos indicam que existem desigualdades na taxa de diversificao entre grupos. Assim, a utilizao de taxas de evoluo constantes na estimativa da idade dos grupos pode levar a erros grosseiros. Bremer (2000) utilizou, ento, oito pontos de calibragem para datar os clados de monocotiledneas. Ele obteve diferentes taxas evolutivas para cada parte da rvore, mas ramos significativamente mais longos estavam restritos a apenas dois clados (Commelinaceae + Zingiberaceae e Poales). Supondo que as diferenas entre as taxas evolutivas seriam derivados de erros na calibragem, ele assumiu uma taxa de evoluo mdia para a rvore toda, com exceo dos ramos mais longos. Os dados de Bremer indicaram que as monocotiledneas j estavam bem diversificadas no Cretceo Inferior. Catorze linhagens de monocotiledneas atuais existem h mais de 100 Ma, a maioria dessas linhagens possuem mais de 1000 espcies e uma distribuio pantropical. Aparentemente, o nmero de linhagens de eudicotiledneas nesse perodo era cerca de duas vezes maior do que o das monocot. Existe uma discordncia entre a datao para a origem das angiospermas obtida a partir de dados moleculares e a datao mnima determinada por registros fsseis seguros. Entretanto, so inmeros as possveis fontes de erro ao se estimar a idade do grupo a partir de dados moleculares. Inicialmente, preciso distinguir a idade do ramo, ou seja, quando as angiospermas divergiram das gimnospermas, e o surgimento das angiospermas atuais. A calibragem pode estar errada, seja em relao a datao do fssil (idade mnima), seja em relao a sua classificao (posio na rvore). Uma topologia errada possivelmente resultar em uma idade errada para os grupos. Modelos evolutivos distintos ou rudos podem influenciar o comprimento dos ramos e assim gerar idades diferentes para um mesmo clado. Finalmente, variaes na taxa de evoluo entre grupos e entre genes tambm podem levar a erros grosseiros na datao de eventos filogenticos (Sanderson & Doyle 2001). Duas de doze rvores igualmente parcimoniosas obtidas a partir de rbcL, uma com Oriza e outra com amborella na raiz das angiospermas resultam implicam em idades muito contrastantes para a idade das angiospermas, 214 e 124, respectivamente. Por outro lado, alteraes fora das angiospermas, como assumir as antfitas ou as gimnospermas como grupos monofilticos, no implicam mudanas considerveis na idade das angiospermas. Todavia, uma anlise de rbcL forando Lycopodium com o grupo irmo das demais plantas com semente e as conferas como grupo monofiltico resulta em 139 Ma para a idade das angiospermas. A amostragem tambm influencia a datao dos clados. A utilizao apenas de grupos herbceos resulta um idade mais avanada para as angiospermas. Uma anlise de bootstrap (freqncia das rvores obtidas em replicagens assumidas na confiana da idade das angiospermas) indicou que existe uma diferena na confiana da idade das angiospermas de acordo com a posio do cdon utilizada nas seqencias de rbcL. A influncia de modelos maior na terceira

posio, o que deve estar relacionado com a maior necessidade de correes para a estimativa dos comprimentos de ramos, j que nmero de homoplasias nessa posio maior. Dessa forma, talvez a discrepncia entre a idade das angiospermas indicada pelo registro fssil e a estimada pelas anlises moleculares seja resultado de erros como a utilizao de poucos terminais, geralmente herbceos, taxa de evoluo constante para os grupos e regies distintas (Sanderson & Doyle 2001). O suavizamento no paramtrico da taxa evolutiva (non parametric rate smoth, NPRS) foi proposto por Sanderson (1997) como alternativa para o relgio molecular. Esse mtodo permite a variaes de taxas evolutivas entre clados, assumindo que essas mudanas, por serem herdadas, esto auto-correlacionadas. Esse mtodo foi usado por Wikstrom et al. (2001) para estimar idade para os clados de angiospermas em geral. Eles utilizaram uma das 8000 rvores mais parcimoniosas obtidas com rbcL, atp e 18 DNAr (Soltis et al. 1999). A topologia das 8000 rvores, entretanto, no diferem em relao aos clados de maior interesse, angiospermas e eudicotiledneas. Eles estimaram o comprimento dos ramos a partir de mxima parcimnia e verossimilhana e a idade relativa entre os clados utilizando o NPRS. A calibragem foi estabelecida a partir de um fssil supostamente confivel, a divergncia entre Fagales e Curcubitales, no Santoniano (84 Ma). A estimativa para a idade das angiospermas foi entre 179-158 Ma e das eudicotiledneas entre 147- 131 Ma (variao encontrada conforme o critrio usado para obter o comprimento dos ramos). Os resultados indicam que a origem desse grupos seria anterior ao seu aparecimento no registro fssil. Os possveis erros nessa anlise podem estar na calibragem j que os fsseis indicam apenas a idade mnima, na taxa de evoluo, j que no existe comprovao de que essas taxas sejam correlacionadas, e na topologia, j que foi usada uma de 8000 rvores. Taxa de diversificao Uma vez que grupos irmos possuem freqentemente nmero de espcies diferentes, essa disparidade no pode estar relacionada com a idade desses grupos, mas sim com diferentes taxas de diversificao. Exemplos desse tipo representam excelentes estudos de caso na investigao de fatores, mecanismos e condies relevantes para o aumento na taxa de diversificao, e que portanto, favoreceriam processos de especiao. Em um modelo simples, diversificao seria igualado a especiao, mas num modelo mais complexo de nascimento e morte, a taxa de diversificao passa a estar relacionada com a taxa de especiao e a taxa de extino. Uma diminuio na taxa de extino em um modelo simples poderia refletir erroneamente um aumento na taxa de especiao, por exemplo. A extino no aleatria e parece influenciar mais nitidamente ramos mais velhos (Purvis & Agapow 2002) O formato e as medidas de uma rvore filogentica podem tambm elucidar algumas caractersticas relacionadas ao processo de diversificao. Estudos recentes procuram desvendar as causas que levariam ao aumento na especiao de um grupo. At a dcada de 70, inovaes evolutivas eram consideradas as principais causas para um aumento na diversificao. Entretanto, o surgimento de teorias de especiao aleatria e a falta de comprovao de inovaes-chave sugeriam que as variaes na diversidade dos grupos seria ao acaso (Queiroz 2002). As discrepncias no nmero de espcies ao longo da rvore indica a presena de uma causa para taxas de diversificao distintas, j que as diferenas so maiores que aquelas esperadas por uma variao aleatria (Chan & Moore 2002).

Duas abordagens principais so utilizadas para explorar o tema: a temporal, baseada no comprimento dos ramos, e a topolgica, baseada no uso de grupos-irmos e no nmero de espcies. Estudos recentes (Savolainen et al. 2002), por exemplo, sugerem uma relao entre os tamanhos de ramos. Um n precedido de um ramo mais curto em relao ao clado irmo tenderia a produzir ramos mais curtos tambm. Ou seja, a taxa de diversificao seria hereditria. Plantas monicas, as quais possuem uma taxa de diversificao mais alta que as diicas, tendem a gerar plantas monicas e portanto manter a taxa de diversificao mais alta. Entretanto, o registro fssil indica que linhagens previamente depauperadas radiaram, ou seja, tiveram um enorme aumento na taxa de diversificao (Purvis & Agapow 2002). A assimetria de uma rvore mais acentuada em nveis mais distantes dos terminais e txons basais tendem a ser mais numerosos (exceo nas angiospermas). Dentre as possveis explicaes para esse fenmeno est a anagnese mais curta o que faria com que seu reconhecimento fosse mais difcil, induzindo unio de mais espcies, e conseqentemente formao de grupos maiores. Entretanto, a comparao legtima entre grupos taxonmicos fica restrita a grupos irmo. Pares de clados irmos so freqentemente utilizados para estudos macro-evolutivos. Existiria razo para que um clado se diversifique mais que outro? Magalln & Sanderson (2001) incorporaram, ento, novas descobertas fsseis e resultados filogenticos recentes expressados na classificao (APG 1998) na tentativa de comparar as taxas de diversificao entre as angiospermas. Fsseis com apenas algumas sinapomorfias foram considerados representantes do ramo do clado ao passo que aqueles com todas as sinapomorfias do clado atual do respectivo grupo. Eles estabeleceram uma estimativa mnima para a taxa de diversificao na ausncia de extino, e uma mxima, considerando uma alta taxa de extino, onde a probabilidade do grupo no se extinguir de ca. de 10%. Para essas duas estimativas foi estabelecido um valor de confiana de 95%, fora do qual os grupos passariam a ser considerados extremamente ricos ou pobres em nmero de espcie. Os resultados obtidos sugerem que alguns grupos so relativamente muito ricos, entre eles destacando-se Asterales, Lamiales e Gentianales. Esses grupos possuem um grande nmero de espcies apesar de sua origem recente. Por outro lado, alguns clados como Nymphaeales e Chloranthaceae so muito probres, ou seja, possuem uma taxa de diversificao muito lenta. Os clados com taxa de diversificao excessivamente alta pertencem principalmente as Asteridae. Essa relao sugere que a taxa alta de diversificao pode ser um caracter surgido no ancestral das Asteridae. Aparentemente, essa taxa de diversificao alta pode ter sido herdada no clado como um todo, tendo revertido em alguns grupos internos, como em plantas diicos. 1 Leitura para aula 10 (2/VI/2003) Gorelick, R. 2001. Dis insect pollination cause increased seed plant diversity. Biol. J. Linn. Soc. 74: 407-427. Sun, G., Ji, Q., Dilcher, D.L., Zheng, S., Nixon, K.C., Wang, X. 2002. Archaefructaceae, a new basal angiosperm family. Science 296: 899-905. 1

AULA 10 DESENVOLVIMENTO FLORAL Genes MADS-box No sculo XIX, Haeckel elaborou a lei biogentica: a ontogenia recapitula a filogenia. Essa lei foi desmistificada no incio do sculo XX com a descoberta de inmeros casos em que ela no se aplicava. Atualmente, grande ateno tem sido voltada para a relao entre o desenvolvimento e a evoluo atravs de bases genticas. Os controladores-chave do desenvolvimento so geralmente genes hometicos (reguladores) pertencentes a um pequeno nmero de famlias multignicas. No desenvolvimento floral, destaca-se a famlia de genes MADS-box. A protena desses genes so modulares, compostas pelos domnios MADS (M), intercalar (I), queratinide (K) e terminal-C (C), formando a estrutura MIKC. O domnio M o mais conservativo. Com cerca de 57 aminocidos (180 pares de base), ele determina a ligao do DNA, a dimerizao e a ligao entre funes. Genes MADS-box so encontrados em animais, fungos e plantas e a sigla faz referncia s protenas MCM1 (Saccharomyces cerevisiae), AGAMOUS (Arabidopsis thaliana), DEFICIENS (Antirrhinum majus) e SRF (Homo sapiens). As protenas codificadas pelos genes MADS-box desempenham muitas funes, entre elas a regulao do desenvolvimento e da diferenciao celular. Em plantas, elas agem de maneira combinada na identidade meristemtica ou de rgos, i.e. controlam a transio de um tipo de meristema em outro. Em Arabidopsis existem cerca de 80 genes da famlia MADS dispersos no genoma da planta, 40 desses relacionados com a identidade de meristemas e rgos, mas apenas um quinto tem sua funo conhecida. A famlia MADS pode ser dividida em subfamlias de acordo com a funo, estrutura e expresso. Essas subfamlias representam clados de genes que podem ser ortlogos extremamente conservativos ou parlogos recentes originados a partir de duplicao. Enquanto alguns genes MADS de angiospermas e gimnospermas formam clados, a maioria dos genes de pteridfitas ocorre separadamente, indicando que a maioria das subfamlias teria surgido antes da separao das angiospermas e gimnospermas atuais, ca. 300 Ma, mas depois da separao das pteridfitas. Esse perodo entre o Devoniano Mdio (ca. 395 Ma) e o Carbonfero Inferior (ca. 320 Ma.) marcado pela presena das progimnospermas, plantas com estrutura vascular de gimnosperma, mas com esporos livres, i.e. sem formao de vulos (Mnster 1997, Hasebe 1999, Becker et al. 2000). Modelo ABC A transio de um meristema vegetativo apical para um meristema reprodutivo de uma inflorescncia promovida por genes responsveis pela identidade meristemtica floral (FMI). Entre eles destacam-se os da famlia MADS-box, APETALLA1 (AP1; SQUAMOSA-SQUA, em Antirrhinum), CAULIFLORA (CAL) ou FLORICAULA (FLO) e FRUITFULL (FUL), que agem juntos com o gene LEAFY (LFY), induzindo a expresso dos genes das funes A B C (veja abaixo). Aparentemente, AP1 e LFY agem combinados, mas so parcialmente redundantes de modo que a ausncia deles aumenta o defeito da expresso (flores so transformadas em ramos da inflorescncia). FUL e CAL parecem agir apenas em combinao com AP1 e LFY. Quando ativados por algum sinal, como fotoperodo ou giberilina, o FMI inibe a ao do gene TLF1

(TERMINAL FLOWER 1), responsvel pela manuteno do meristema apical da inflorescncia e tambm pela inativao dos genes FMI. O modelo ABC foi elaborado no incio da dcada de 90 a partir de Arabidopsis (Brassicaceae) e Antirrhinum (Scrophulariaceae) (Coen & Meyerowitz 1991) para explicar como a expresso das estruturas florais. Esse modelo est baseado em trs grupos de genes hometicos - A, B e C responsveis por desencadear a identidade das estruturas florais. Genes com estrutura e padro de expresso similares foram encontrados em vrias angiospermas, como tomate, batata, tabaco e monocotiledneas, formando uma rede ortloga de fatores controladores. Mutantes para a funo A produzem carpelos no 1o verticilo e estames no 2o verticilo; para a funo B produzem spalas no 2o verticilo e carpelos no 3o verticilo; para a funo C, produzem ptalas no 3o vertcilo e spalas no 4o. Portanto, a expresso de genes do tipo A resulta em spalas, a expresso das funes AB em ptalas, BC em estames e C em carpelos (D nos vulos). Antes (Haughn 1988), o modelo para o desenvolvimento floral consistia em um sistema de ativao de trs genes, a, b e c; ativado-desativado-desativado para spalas, A-A-D para ptalas, D-A-A para estames e D-D-A para carpelos. A funo hometica A realizada pelos genes APETALA2 (AP2), que no pertence a famlia MADS, e APETALA1 (AP1), que pertence. AP2 responsvel tambm pela inibio de AGAMOUS (AG; PLENA-PLE, em Antirrhinum) no 1o e 2o verticilos, ao passo que o AG inibe a ao da AP1 nos 3o e 4o. As funes A e C portanto so antagonistas. Assim, na ausncia da expresso de AG, prevalece a expresso AP1 nos verticilos 3 e 4, que passam a produzir spalas e ptalas. A classe B expressa pelos genes APETALLA3 (AP3; DEFICIENS-DEF, em Antirrhinum) e PISTILLATA (PI; GLOBOSA-GLO, em Antirrhinum). Esses genes so derivados da duplicao do ancestral AP3/PI, a qual deve ter ocorrido antes da separao entre as angiospermas e as gimnospermas atuais (Kramer & Irish 2000). O mutante de AG, no entanto, capaz de produzir carpelos, sugerindo que existem outros genes, como SPATULA (SPT), envolvidos na expresso do gineceu A aplicao ectpica dos produtos de ABC no capaz de transformar folhas em flor, indicando a necessidade que outros fatores para a expresso desses genes no 2o verticilo. Os genes (AGAMOUS LIKE) AGL2, AGL4 e AGL9 quando mutados individualmente no produzem grandes alteraes fenotpicas, mas o triplo mutante produz apenas spalas. Por isso, esses genes foram renomeados como SEPALLATA, dai SEP1, SEP2 e SEP3. Esse fentipo o mesmo de um mutante para as funes B e C. A expresso das funes B e C exige, portanto, a expresso de pelo menos um desses trs genes SEP1/2/3. A mutao dos genes responsveis pelas funes ABC gera estruturas similares com folhas corroborando a hiptese de que as flores so composta por estruturas derivadas de folhas modificadas (Pelaz et al. 2000a). A ao combinada da expresso das funes A e B e SEP3 capaz de converter folhas em ptalas (Pelaz et al. 2000b). A SEP3 interage com AP3-PI (B) e AG (C) e tambm com AP1 (A). No 2o verticilo a combinao parece ser AP1-PI-AP3-SEP3 e no e 3o PI-AP3-SEP3-AG. AP1 e SEP3 pertencem ao mesmo super clado e so quase redundantes, pois folhas so transformadas em ptalas com a presena de apenas um deles. SEP3 tambm pode ser

substitudo por SEP1 e SEP2. Assim, AP1+AP3+PI+SEP1+SEP2 tambm irar gerar ptalas. Os genes SEP1 e SEP2 agem em todos os verticilos enquanto o SEP3 apenas do 2o ao 4o. Como j existia a classe D, foi reservado aos genes hometicos SEP a letra E, tornando o modelo ABC em A-E. Enquanto a ligao entre as protenas de SEP e AG parece antiga, a ligao entre genes de funes hometicas distintas no parece ocorrer, mas podem eventualmente formar um complexo a partir da combinao de quatro protenas. Uma das hiptese o modelo de quartetos (tetrmeros ou dois dmeros) para a identidade floral (Thiessen 2001): AP1-AP1 e ? - ? : spala AP3-PI e AP1-SEP3: ptalas AP3-PI e AG-SEP3: estames AG-AG e SEP3-SEP3: gineceu O desenvolvimento floral no controlado exclusivamente por genes da famlia MADS, mas esses genes desempenham uma funo muito importante no sistema, agindo de maneira reguladora, em alguns casos sinrgica ou antagnicas. Os genes envolvidos no processo de diferenciao floral vo agir em uma rede hierrquica de funes, e a influncia de mudanas nesses genes ser to maior quanto mais funes forem afetadas. O gene PERIANTHA parece estar relacionado com o nmero de peas do perianto. Sua mutao produz flores pentmeras em Arabidopsis, originalmente tetrmera. O gene SUPERMAN deve estar associado com o limite entre os verticlos 3 e 4 porque seu mutante produz primdios estaminais no lugar de carpelos. CYCLOIDEAE e DICHOTOMA parecem estar relacionados com a simetria floral em Anthirrinum (Smith 200). O perianto petalide deve ter surgido inmeras vezes na evoluo das angiospermas, em alguns casos derivado de brcteas (bracteoptala), e em outros de estames (androptala). No primeiro caso, as tpalas so formadas antes dos estames, esto arranjadas como brcteas, possuem trs traos vasculares e se assemelham com folhas. No segundo caso, os rgos petalides esto arranjados como estames, sua maturao tardia, possuem apenas um trao vascular e em alguns casos possuem nectrios. Nem sempre a derivao est clara e, em monocotiledneas, as tpalas apesar de iniciarem e maturarem antes dos estames, possuem caractersticas associadas com androptalas. Os estudos de desenvolvimento floral esto restritos a um pequeno grupo de plantas, mas aparentemente o padro o mesmo em monocotildones, e supe-se que a lodcula homloga ptala (Goto et al. 2001). Os grupos mais basais de angiospermas, que apresentam uma variao floral mais acentuada na morfologia floral, no entanto, podem possuir um sistema um pouco distinto. O gene ancestral AP3/PI se dividiu em AP3 e PI antes da separao entre angiospermas e gimnospermas. No incio da evoluo das eudicotiledneas, houve uma duplicao de um dos parlogos, de maneira que o gene paleo-AP3 presente nos grupos basais originou o eu-AP3 e o TM6. Esses genes esto relacionados com a funo B, responsvel pela formao das ptalas e essa duplicao pode ter sido responsvel pela canalizao da morfologia floral caracterstica das

eudicotiledneas mais derivadas. Todavia, no se sabe ao certo aonde teria ocorrido a duplicao do AP3 e nem o papel da TM6 na identidade floral (Krame & Irish 2000). Estabelecer relao entre as funes genticas desses genes reguladores em angiospermas e gimnospermas, pode indicar homologias entre estruturas florais e estruturas reprodutivas nas demais plantas vasculares. Genes responsveis pela funo A, B e C j estariam presentes antes da separao entre angio e gimnospermas (400 Ma), o que concorda com o relgio molecular para a divergncia entre os genes para funo A e C 480 Ma. Parte dos genes para funo A, no entanto, foram perdidos na linhagem das gimnospermas. Na ausncia de um ortlogo do AP1, gene da funo A, no esperado encontrar nenhuma estrutura em gimnospermas homologa ao perianto das angiospermas, inviabilizando a associao entre o envelope e as brcteas de Gnetales com as spalas e as ptalas de angiospermas. Ainda assim, a funo A poderia estar presente nas Bennettitales, dessa maneira o perianto daquele grupo j era determinado por genes ortlogos aos das angiospermas atuais. A funo C estabelecida antes da divergncia entre as gimnospermas atuais e as angiospermas, mas a o padro espacial e temporal da expresso de genes das funes ABC estabelecido apenas na linhagem das angiospermas (Hasebe 1999). As presenas de ortlogos de genes das funes B e C em gimnospermas sugere que a especificao dos rgos reprodutivos j estava presente no ancestral das espermatifitas atuais. A funo C, responsvel pela diferenciao dos carpelos em angiospermas, deveria ser responsvel pela diferenciao da unidade reprodutiva, e a funo B, expressada apenas nas unidades masculinas de gimnospermas e responsvel pela diferenciao dos estames em angiospermas, seria responsvel pela diferenciao entre unidades femininas (desativado) ou masculinas (ativado; Winter et al. 1999). Talvez a funo B tenha, portanto, funcionado inicialmente na determinao sexual das espermatfitas A regulao das funes ABC pelo LFY surge antes da divergncia entre gimno e angiospermas. Todavia, enquanto existem dois parlogos de LFY (masculino e feminino) nas gimnospermas, existe apenas um LFY em gimnospermas. O parlogo presente em angiospermas seria homlogo quele predominantemente masculino em gimnospermas. Isso levou a teria da flor predominantemente masculina (Frohlich & Parker 2000), segundo a qual as flores bissexuais teriam surgido a partir de uma estrutura reprodutiva masculina com vulos ectpicos. Esses vulos seriam posteriormente envolvidos por microsporofilos laminares que passariam a formar os carpelos. Essa poro predominantemente masculina passaria a ser a principal produtora de sementes, permitindo a degenerao da poro feminina. Segundo outra hiptese, a aproximao e condensao das pores masculina e feminina teria selecionado a regulao e identidade dos meristemas reprodutivos por apenas um gene, evitando redundncia. Dessa maneira, em angiospermas o gene LFYm passou a controlar a identidade dos rgos florais sozinho atravs do sistema ABC (Albert et al. 2002). 1