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INTRODUCCION
Las biopelculas de las cuevas son ms simples que la poblacin microbiana presente en muchos suelos, que puede ascender a cientos de miles de especies. Algunas biopelculas de las cavernas tienen muy pocas especies, entre diez y veinte. Las ms complejas tienen de 100 a 1000. Los investigadores estudiaron el sistema de cuevas de Frasassi, en Italia. La existencia de azufre en el ambiente permite a estas biopelculas crecer. La mayora de las cuevas crsticas (a base de caliza moldeada por el agua) se forman cuando las aguas de lluvia y de escorrenta permean las cavernas desde arriba. El agua y el dixido de carbono se mezclan para formar pequeas cantidades de cido carbnico, un cido muy dbil, que erosiona las paredes de caliza de las cuevas. En las cavernas sulfurosas, el agua entra desde abajo, arrastrando sulfuro de hidrgeno. Los microbios en las biopelculas usan el azufre como fuente de energa y producen como desecho metablico cido sulfrico, un cido muy fuerte.

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BIOPELICULAS
Las biopelculas son organizaciones

microbianas compuestas por microorganismos que se adhieren a las superficies gracias a la secrecin de un exopolmero. Estas

conformaciones caractersticas

microbianas como

presentan

heterogeneidad,

diversidad de microambientes, resistencia a antimicrobianos y capacidad de comunicacin intercelular que las convierten en complejos difciles de erradicar de los ambientes donde se establecen. En el hombre las biopelculas se asocian con un gran nmero de procesos infecciosos que por lo general son de transcurso lento, ocasionando que su control sea dispendioso. En el rea industrial y del medio ambiente el papel de las biopelculas se centra en el biofouling y la bioremediacin.

El biofouling es la contaminacin de un sistema producido por la actividad microbiana de la biopelcula, mientras que la bioremediacin utiliza las biopelculas para mejorar las condiciones de un sistema contaminado. El estudio de las biopelculas es un rea excitante en continua evolucin; tienen repercusiones importantes para la humanidad las implicaciones que presentan estas asociaciones en los diversos mbitos de la medicina y la industria. Palabras clave: Biopelcula. Quorum sensing. Enfermedad periodontal. Biofouling.

Bioremediacin.
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La unin hace la fuerza una frase que muy probablemente todos han odo nombrar y que es fcilmente aplicable al contexto de este artculo. Los microorganismos por si solos, salvo en algunas ocasiones, no son capaces de generar daos importantes en un organismo viviente porque son susceptibles a los factores adversos del medio en que se encuentran. Sin embargo, estos seres microscpicos han evolucionado de tal forma que logran organizarse y convivir con especies diferentes, aprovechando los productos que se ofrecen dentro de su comunidad ecolgica denominada biopelcula En muchas formas la biopelcula representa una estrategia una de supervivencia, contra pues las

proporciona

proteccin

defensas y mecanismos de erradicacin microbiana y cuenta con un sistema de canales que le permite establecer un vnculo con el medio externo para hacer intercambio de nutrientes y eliminar metabolitos de desecho. La importancia de las biopelculas se comenz a estudiar desde mediados de la dcada de 1970, cuando se hablaba de los efectos en los diversos ambientes naturales de estas organizaciones no muy bien comprendidas. Dos dcadas despus con el desarrollo de tcnicas microscpicas ms avanzadas que permitieron entender la ultraestructura y dinmica de estas asociaciones, se pudo constatar este hecho y se comenzaron a involucrar en mltiples y distintos eventos que tienen impacto sobre el bienestar del hombre y su entorno. Hoy en da el estudio de la
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biopelculas se hace cada vez ms extenso y complejo en cada una de las reas donde se trabaja, es por esto que en este artculo se hace una revisin del papel que cumplen las biopelculas en diferentes reas de inters como la medicina, la industria, el medio ambiente y de la perspectiva que tienen en cada uno de estos campos.

ESTRUCTURA Y COMPOSICIN DE LA BIOPELCULA DENTAL

El biofilm o biopelcula , definido de una forma sencilla , es la agrupacin de una serie de bacterias que crean un nicho ecolgico que les es propio para su desarrollo y supervivencia. La biopelcula se forma sobre cualquier superificie slida, no descamable, contenida en un medio acuoso; uno de los biofilms ms estudiados es la placa dental. La formacin de la biopelcula se forma con la adherencia de productos orgnicos e inorgnicos y de algunas bacterias, especialmente cocos grampositivos, a una matriz de polisacridos. Sobre esta capa inicial de microorganismos asociados a la pelcula, estacionaria, hay una pelcula de aspecto irregular, lquida, que permite el movimiento de fluidos al interior de la masa. A medida que progresa la formacin de la biopelcula se van creando gradientes de difusin para el oxgeno, as como una disminucin del potencial de xido reduccin hacia las capas ms profundas, lo que determina la naturaleza anaerbica de los microorganismos que permaneceran ubicados all. Las bacteras producen polmeros extracelulares y dentro del biofilm hacen cada vez ms lento su metabolismo y divisin celular, provocando que la placa resista la accin de sustancias externas, incluyendo los antimicrobianos, razn por la cual el tratamiento de eleccin para las enfermedades periodontales sigue siendo la remocin mecnica de los depsitos de placa CARACTERSTICAS CARACTERISTICAS

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El trmino biopelcula (biofilm) hace referencia a una serie de microorganismos que se

encuentran agregados en un exopolmero compuesto de glicoclix (75%) y que se organizan en forma de colonias adheridas a diferentes superficies, ya sean blandas, animadas e inanimadas. El exopolmero que es producido por los mismos microorganismos, forma una matriz adherente en donde estos quedan atrapados y comienzan a organizarse en colonias con diferentes requerimientos metablicos. resume las caractersticas de las biopelculas. Una de estas caractersticas es la heterogeneidad, lo que las hace organizaciones nicas que pueden estar conformadas por bacterias, hongos y protozoos. Se ha visto entonces, que los microorganismos al ser variados dentro de esta organizacin presentan diferentes microambientes de pH, tensin de oxgeno, concentracin de iones, carbono y nitrgeno. La hidrodinmica juega un papel importante en el desarrollo de la biopelcula pues estas organizaciones se desarrollan en una interfase lquido-slido donde la velocidad del flujo que lo atraviesa influye en el desprendimiento fsico de los microorganismos. Adems, poseen un sistema de canales que les permiten el transporte de nutrientes y desechos; esto resulta de vital importancia cuando se piensa en modificar el ambiente que prive a los microorganismos de las molculas necesarias para su desarrollo. Otra caracterstica de las biopelculas es su resistencia a las defensas del hospedero y agentes antimicrobianos. Mientras que los microorganismos aislados son susceptibles a estos factores de control, las colonias organizadas e incluidas en el exopolmero forman una capa impermeable en donde slo los microorganismos ms superficiales se ven afectados.

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Los anticuerpos, las clulas del sistema inmune y los antimicrobianos no tienen acceso a los microorganismos ms profundos; adicionalmente, se encuentran en un estado metablico reducido lo que los hace menos susceptible a la accin de estos ltimos. Tambin cuando se liberan clulas de la biopelcula, stas pueden viajar y depositarse en nuevos nichos de colonizacin manteniendo las mismas caractersticas de una biopelcula adherida a una superficie. Finalmente, los microorganismos se comunican unos con otros. Esto es lo que se ha denominado quorum sensing e involucra la regulacin y expresin de genes especficos a travs de molculas de sealizacin que median la comunicacin intercelular. Esta caracterstica es dependiente de la densidad celular que exista, as p.e., en biopelculas con una alta densidad celular, se induce la expresin de genes de resistencia que proveen proteccin y supervivencia. Similarmente, los microorganismos pueden producir sustancias para estimular la propagacin de colonias e inhibir el crecimiento de otras dejando a los microorganismos ms patgenos en una posicin favorable dentro de la biopelcula. El conocimiento de la interaccin que existe entre los diferentes microorganismos que componen y habitan una biopelcula, es un rea muy estudiada por el momento pues in vitro se ha visto que al bloquear las molculas involucradas en la adherencia y comunicacin celular se puede inhibir el desarrollo de ellas.

EL DESAFIO MICROBIANO Y EL DESAFO MICROBIANO Y LA ENFERMEDAD LA ENFERMEDAD

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Un gran nmero de infecciones en el humano son causadas por biopelculas incluyendo la caries dental, la enfermedad periodontal, otitis media, infecciones msculo-esquelticas, infeccin del tracto biliar, endocarditis bacteriana y neumona en pacientes con fibrosis qustica. Estas enfermedades a diferencia de infecciones en donde se conoce el agente causal especfico, son de transcurso crnico y persistente, lo que hace difcil su erradicacin. P.e., Pseudomonas aeruginosa se ha encontrado en pulmones de personas con fibrosis qustica produciendo infecciones frecuentes, lo que genera dificultades en la recuperacin de estos pacientes. Con el desarrollo de la tecnologa mdica, aparecieron materiales que permitan ser implantados en el organismo sin causar reacciones adversas como los implantes de vlvulas cardacas, de cadera, marcapasos e incluso implantes dentales de oseointegracin. Tambin estn incluidos aparatos de implantacin temporal o parcial como catteres. A pesar del gran avance de la medicina, la introduccin de un material nuevo al organismo, simplemente genera un nicho ptimo para la formacin de una biopelcula. Staphylococcus epidermidis con frecuencia se encuentra relacionado con infecciones crnicas o tardas en aparatos implantados gracias a su bajo potencial patognico mientras que S. aureus, P. aeruginosa y otros microorganismos Gram negativos por lo general se encuentran asociados con la colonizacin y generacin de infecciones agudas. Las vlvulas cardacas son
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con frecuencia colonizadas por microorganismos orales que se desprenden de la placa bacteriana, entre ellos el Actinobacillus actinomycetemcomitans, una bacteria Gram negativa implicada en la etiopatognesis de la enfermedad periodontal. En ms de 50% de los implantes de cadera removidos por infeccin se ha aislado Propionibacterium acnes mientras que especies de Candida se han encontrado en la prtesis de voz. Pero no slo los microorganismos tienen la capacidad de colonizar superficies de implantes, tambin lo hacen sobre superficies animadas como epitelios. La enfermedad periodontal de gran incidencia en el ser humano se caracteriza por un proceso inflamatorio que resulta en la prdida del soporte del diente. Todo comienza con la formacin de una pelcula de origen glandular (saliva, moco) que recubre las mucosas, las superficies dentales y epiteliales de la enca; luego llegan los primeros colonizadores que ofrecen medios para la retencin de otros microorganismos dando origen a una comunidad celular diversa. Con el crecimiento de la biopelcula aumenta la liberacin de productos microbianos , como el lipopolisacrido, factor de virulencia responsable de desencadenar una respuesta inflamatoria e inmune de tipo local que puede llegar a ser sistmica, ocasionando procesos inflamatorios en lugares diferentes al desafo microbiano. Al igual que los dientes y la enca, los tejidos pulmonares, arteriales y gstricos son lugares de preferencia para los microorganismos habitantes de las biopelculas. Uno de los factores que promueve la patogenicidad y cronicidad de estas agrupaciones microbianas es su resistencia al sistema inmune y a los antibiticos. En muchas ocasiones, los aparatos implantados en el cuerpo fracasan por la imposibilidad de controlar la infeccin generada por los microorganismos de la biopelcula, requiriendo una remocin mecnica del dispositivo. A diferencia de microorganismos libres, los microrganismos que componen una
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biopelcula en las capas ms profundas, se encuentran en un estado metablico mnimo, impidiendo la accin de antibiticos que actan a nivel de la sntesis de la pared bacteriana o produccin de protenas. Como si eso no fuera suficiente, es importante tener en cuenta la heterogeneidad de las comunidades celulares que componen la biopelcula indicando que un antibitico no necesariamente afectar a todas las colonias. Adems, la falta de permeabilidad y el flujo constante de sustancias de desecho hacia el exterior impide el ingreso de clulas y productos del sistema inmune. De esta forma, las biopelculas que representan una forma nica de organizacin bacteriana tienen la capacidad de autoperpetuarse y generar infeccin en el organismo; gracias a todas sus caractersticas, se hace difcil el tratamiento teraputico con los medios convencionales. CLULAS PERSISTENTES

Algunos estudios han demostrado que en la etapa de dispersin, en donde las clulas vuelven al estado planctnico, la poblacin celular muestra de nuevo susceptibilidad antibitica. Esto sugiere que la resistencia adquirida en el proceso de formacin de biopelculas no se obtiene por medio de mutaciones o elementos genticos mviles, sino que involucra una adaptacin metablica o fsico-qumica. Un factor importante es que estas biopelculas no crecen en condiciones con altas concentraciones de antibiticos, lo cual sugiere que la biopelcula no presenta una generalizada resistencia antibitica4. Estudios sealan que posiblemente existe una subpoblacin dentro de la biopelcula que forma un nico y altamente protegido estado fenotpico5. Esta poblacin recibe el nombre de persister cells o clulas persistentes al insulto antibitico6. Experimentos llevados a cabo por Lewis (2004)7, han comparado poblaciones en estado logartmico, estacionario y en biopelcula. Como resultado encontraron que en la fase estacionaria, hay ms produccin de clulas persistentes, contrario a lo que se hubiera pensado, debido a la alta resistencia que presentan las biopelculas. Estos resultados han llevado a la conclusin que, dado que durante la fase estacionaria no hay crecimiento, la formacin de clulas persistentes, es de hecho, dependiente del estado de crecimiento; en
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ETAPAS DEL CRECIMIENTO

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estado logartmico, se presenta poca o nula formacin de clulas persistentes. Se presume que esta dependencia del estado de crecimiento, es un fenmeno denominado quorum sensing8.

Se han propuesto 5 etapas para la formacin de biopelculas. En la primera y segunda etapa, las clulas planctnicas presentan una asociacin leve y dbil al sustrato seguida por una fuerte adhesin. La tercera y cuarta etapa se caracteriza por la agregacin celular en microcolonias seguido por la maduracin de la biopelcula. En la quinta y ltima etapa, las clulas que conforman la biopelcula se desprenden de la colonia y retornan a la vida planctnica transitoriamente y se dispersan. FACTORES INVOLUCRADOS EN FORMACIN DE BIOPELCULAS

El circuito quorum sensing coordina una gran variedad de funciones fisiolgicas, entre estas, interviene en la induccin y formacin de biopelculas maduras. Por ejemplo en Vibrio cholerae, a bajas densidades celulares, para una adecuada formacin de biopelcula, es necesario el movimiento de pilis flagelos, as como la biosntesis y expresin de exopolisacridos. Tambin se ha demostrado que FosfoLuxO y HapR funcionan para activar vps, el cual tambin es requerido para la formacin de biopelcula10. PERSPECTIVA PERSPECTIVA El impacto que tienen las biopelculas en los diversos mbitos del hombre, hace que ste se preocupe por trabajar continuamente en ellas. Muchas de las investigaciones a nivel mundial buscan descifrar por completo la naturaleza de este tipo de conformacin, de

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manera que se diseen metodologas que permitan aprovechar o combatir su presencia.

En el rea de las ciencias mdicas, las metodologas van encaminadas a erradicar la formacin de biopelculas en el esmalte dental, prtesis, dispositivos mdicos, lentes de contacto, etc., principalmente con el desarrollo de nuevos y mejores antibiticos. Zhang et al. publicaron la estructura molecular de una protena fundamental encargada de la comunicacin entre bacterias llamada el autoinductor; ms adelante Smith et al. sintetizaron varias molculas con actividad antagnica sobre el autoinductor usado por Pseudomonas aeruginosa para la comunicacin celular. Este nuevo descubrimiento permitir el diseo de nuevos y mejores medicamentos capaces de inhibir la formacin de biopelculas. En el rea industrial el biofouling ha llevado a los investigadores a elaborar diversas propuestas que permitan acabar con el problema de la biocorrosin. Dentro de estas se menciona el disponer de mejores superficies que impidan la colonizacin de las biopelculas; de nuevos recubrimientos o pinturas en los cascos de las embarcaciones para minimizar la adherencia de los microorganismos siendo estos a la vez seguros para el ecosistema marino. Otra investigacin adelantada por microbilogos de la Universidad Antofagasta de Chile busca productos de origen microbiano que minimicen la colonizacin y desarrollo del biofouling sobre las estructuras sumergidas, porque se ha visto que hay grmenes capaces de impedir el asentamiento de microorganismos formadores de biopelculas. Para la industria alimenticia la formacin de biopelculas en la maquinaria puede traer la contaminacin del producto con patgenos; es por eso que se necesitan mejores tratamientos en su elaboracin de modo que sean ms seguros al consumo humano. En la produccin de
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salchichas despus de que el producto ha sido procesado si este sufre alguna contaminacin externa, la refrigeracin posterior puede permitir el crecimiento de biopelculas con Listeria monocytogenes un importante patgeno humano. Investigadores han encontrado que al tratar la salchicha con sulfato de calcio acidificado las bacterias no se pueden adherir. Compaas productoras de artculos de limpieza para el hogar tambin se han interesado en el fenmeno de las biopelculas porque estos microorganismos son mucho ms resistentes a los desinfectantes. Se sabe que un microorganismo en una biopelcula es 100 a 1,000 veces ms resistente a los desinfectantes que las formas libres o planctnicas. Los investigadores de estas compaas adems de desarrollar mejores mtodos analticos para la evaluacin de los desinfectantes, evalan el impacto de las biopelculas y su control en diversos mbitos domsticos y externos como baos, fregaderos, saunas, piscinas, etc. Sin embargo, como se dijo en un principio, tambin se pueden desarrollar metodologas que aprovechen la funcin de bioremediar de las biopelculas. En los cultivos artificiales de peces, la presencia de biopelculas en los sitios de asentamiento de las larvas permite una mayor sobreviva del invertebrado, aumentando la productividad de estos. El Centro Especializado de la NASA para la Investigacin y la Capacitacin en el Sostn Avanzado de la Vida (NSCORT) buscar durante los prximos aos crear un modelo de ambiente autosustentable desarrollando hbitats bioregenerativos en los cuales los productos derivados de un sistema sean utilizados y procesados por otro. Para lograr esto trabajan con biopelculas que tratan y limpian el aire y el agua gris, es decir, el agua utilizada
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para baarse y limpiar el hogar. Las biopelculas crecen en las superficies plsticas a travs de las cuales pasa el agua y el aire, de modo que la creacin de este ambiente bioregenerativo no est muy lejos de lograrse.

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CONCLUSIONES
Por las caractersticas tan especiales que presentan los microorganismos al conformar

una biopelcula, se ha aumentado el inters por investigar sobre ellas. En los diversos escenarios donde se han descrito, el conocer los detalles de su organizacin ha permitido al hombre elaborar estrategias adecuadas a sus necesidades. Las infecciones y el biofouling son dos de las ms grandes consecuencias desfavorables que tiene el desarrollo de biopelculas sobre superficies animadas e inanimadas y es en este campo que el hombre busca soluciones definitivas. En el campo de la medicina representara una estrategia novedosa el poder controlar la comunicacin microbiana de manera que se altere la funcin de la biopelcula por medio de anlogos de molculas reguladoras del crecimiento y proliferacin bacteriana. Convencionalmente se tratan las infecciones por medio de antibiticos que destruyen selectivamente las clulas. Como ejemplo, la enfermedad periodontal que es causada por una biopelcula que se acumula sobre la superficie dura de los dientes en cercana a la enca. En este caso la terapia consiste en eliminar mecnicamente la placa bacteria y en casos especiales, uso de antibiticos. Pero cabe recordar que las biopelculas son comunidades heterogneas y solo una pequea parte de los microorganismos causan la enfermedad.

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BIBLIOFRAFIA

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