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Glicose

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Published by: Wilma Gonçalves de Faria on Oct 10, 2011
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SYNERMED™

GLICOSE
Método IR enzimático (N-Sulfopropil) oxidase para determinação de Glicose.

SIGNIFICADO CLÍNICO
A maioria da energia adquirida pelo organismo é proveniente do metabolismo oxidativo da glicose. A glicose entra na dieta como parte dos açúcares sacarose, lactose e em forma de amido. As enzimas liberam glicose a partir dessas combinações e a glicose é metabolizada diretamente ou convertida em forma armazenadora pelo fígado. O fígado é fundamental na distribuição de glicose conforme necessidade imediata de liberação ou para armazenamento ou para propósitos estruturais. Muitos hormônios participam da manutenção adequada dos níveis sangüíneos em condições de equilíbrio ou em resposta ao estresse. A medida da glicose sangüínea indica se a regulação é bem sucedida.
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PREPARAÇÃO DOS REAGENTES:
Código: IR070-X Reagente de Trabalho: Para cada 2,5 ml de R1 acrescentar 1 ml de R2 e homogeneizar. Após a reconstituição, os reagentes são estáveis por um mês, se armazenados sob refrigeração entre 0° a 8°C.

COLETA E PRESERVAÇÃO DA AMOSTRA
Utilizar amostra recente livre de hemólise coletado sob jejum. O soro ou plasma deve ser imediatamente separado das células. Relata-se que em temperatura ambiente a glicólise diminui os níveis séricos glicose em aproximadamente 7 % em uma hora.4 A glicose é considerada estável no soro ou plasma por até 4 dias em temperatura ambiente (20-25 °C).5 Utilizar amostras recentes de urina, líquido ascítico, líquido pleural, líquido sinovial e LCR. .

O uso clínico primário da determinação da glicose está na detecção e controle do diabetes mellitus, o distúrbio mais comum do metabolismo de carboidratos. Quase todas as doenças definidas como associadas a níveis anormais de glicose plasmática e′ o resultado do mau funcionamento da regulação dos hormônios. A causa mais importante da hipoglicemina espontânea é a secreção excessiva e inapropriada da insulina por tumores beta pancreáticos. 2 A metodologia de determinação de glicose pode ser dividida em dois grupos, química e enzimática. A maioria das medidas químicas da glicose depende de suas propriedades redutoras e, portanto, estão sujeitas à interferência de substâncias redutoras endógenas. Os métodos enzimáticos apresentam especificidade máxima para estimar a glicose e são considerados métodos de escolha. 3 Reagente SynermedTM Glicose emprega a enzima glicose oxidase que é altamente específico para beta-D-glicose. A reação atinge uma cor azul que é medida espectrofotometricamente a 670 nm eliminando virtualmente interferências cromáticas da hemoglobina, bilirrubina e turbidez.

APRESENTAÇÃO:
Código :IR070-X R1 Cromógeno glicose R2 Enzima glicose Cód. Nº. IR071-X Cód. Nº. IR072-X 1 X 250 ml 1 X 100 ml

MATERIAIS NESCESSÁRIOS NÃO FORNECIDOS
Espectrofotômetro com capacidade de comprimento de onda de 670 nm (600-700nm), cubetas, pipetas calibradas, relógio, temperatura controlada, calibrador IR CAL II Synermed®.

PRINCÍPIOS DA REAÇÃO:
A glicose oxidase catalisa a conversão da glicose em gliconolactona que forma ácido glicurônico e peróxido de hidrogênio.
glicose H2O β-D-glicose → gliconolactona → oxidase ácido glicurônico + H2O2 O2

CALIBRAÇÃO
Para calibrar esse método deve-se usar material de referência com base protéica para glicose (não usar padrão aquoso). Para melhor performance da calibração, sugere-se uso do calibrador IR Cal II Synermed® pela compatibilidade de metodologia .

CONTROLE DE QUALIDADE
O peróxido de hidrogênio reage com a N-sulfopropil-N-etil-3,5-dimetilanilina e ampirona na presença de peroxidase (POD) para formar um corante azo azul, o qual é quantificado a 670 nm. É uma boa prática de laboratório incluir soros controles na rotina. A Synermed recomenda que um controle normal e um patológico sejam testados com cada grupo de soros desconhecidos para garantir bom desempenho com limites aceitáveis. Material de controle, comercialmente disponível, é adequado e os resultados devem estar dentro de 2 desvios padrão da média, sendo estabelecido por cada laboratório.

COMPOSIÇÃO DOS REAGENTES:
Código: IR070-X R1 Cromógeno glicose Cód. Nº. IR071-X Contém 280 μmol/l de N-sulfopropil-N-etil-3,5-dimetilanilina na mistura final da reação R2 Reagente glicose Cód. Nº. IR072-X Contém 280 μmol/l de ampirona, 1400 U/l de peroxidase (rábano silvestre) e 18.000 U/l de glicose oxidase (microbiana) na mistura final da reação. Uma leve variação nas concentrações dos componentes pode ocorrer de um lote para outro, mas isso não irá alterar os resultados do ensaio.

PARAMETROS DA REAÇÃO:
Comprimento de onda Primário.............670nm (600-700 nm) Comprimento de onda secundário..........NA Tipo de reação........................................Ponto final Direção da reação...................................Crescente Temperatura de reação...........................37°C Relação amostra/reagente.......................1:100 Linearidade.............................................900 mg/dl Tempo de incubação...............................10 minutos (600 seg) Para programação de analisadores consultar assessoria científica.

ADVERTÊNCIAS E PRECAUÇÕES:
1. 2.

Os reagentes SynermedTM são exclusivamente para uso diagnóstico in vitro. Como precaução normal de laboratório, não pipete os reagentes com a boca e evite contato com os olhos e pele.

PROCEDIMENTO MANUAL:
1. Pipetar Branco Calibrador Desconhecido Reativo de Trabalho 1000 μl 1000 μl 1000 μl Calibrador 10 μl Amostra 10 μl 2. Incubar a 37ºC por 10 minutos. 3. Ler no espectrofotômetro a 670 nm contra o Branco de reagente. As leituras devem ser realizadas dentro de 10 minutos. Urina, Líquidos ascítico, pleural ,sinovial e LCR: Tomar uma alíquota e dosar utilizando o mesmo procedimento acima.

ARMAZENAGEM E ESTABILIDADE DOS REAGENTES:
R1-Cromógeno Glicose deve ser armazenado refrigerado, entre 0° e 8°C, firmemente tampado e protegido da luz. R2-Reagente Glicose deve ser armazenado refrigerado, entre 0° a 8°C. Nessas condições, e no frasco original, o reagente é estável até a data de validade indicada no rótulo do produto.

_______________________________________________________________________________________________________________________________________________ Synermed International Inc. 17435 Tiller Court, Suíte 100, Westfield, IN, USA, 46074, Telephone: 317-896-1565 Fax: 317-896-1566

NEGA QUALQUER GARANTIA DE COMERCIALIZAÇÃO OU PROPRIEDADE PARA QUALQUER OUTRO PROPÓSITO E. ser multiplicado pelo fator de diluição utilizado.1288. veja as notas de aplicação do equipamento. Clinical Interpretation of Laboratory Tests. pp.3 1.SP Telefone (011)3266 3268 Fax (011)3141 9975 C.. Lexi-Cop Inc .Térreo-Bela Vista 01333-011 . Para dados específicos de aplicações individuais. EM NENHUM CASO. V. n° 59-CJ A2. J.H.Cleveland.99X . A interferência da hemoglobina. do Desconhecido = Fator x Absor. Jacobs. A interferência da lipemia é minimizada pela leitura bicromática com um filtro secundário de 650nm Para uma listagem completa das possíveis fontes fisiológicas e metodológicas de interferência.. do comprimento de onda e da relação amostra/reagente usado.J.. 1. ed.822/0001-84 INSC.3 % 287. SERÁ RESPONSABILIZADA POR QUALQUER DADO INCIDENTAL OU CONSEQÜENTE ADVINDO DE UMA TRANSGRESSÃO DA GARANTIA EXPRESSA ACIMA CITADA Synermed® é marca comercial da Synermed. A SYNERMED. 6. RRIR070-1 08/04/03 2. ed. 7. Soro/plasma RN 40 . Ibid. LINEARIDADE A reação é linear até 900 mg/dl para glicose.36 mg/dl (0.360A670nm Concentração do calibrador = 300 mg/dl ou (16 mmol/l) Absorbância do calibrador = 0.EST. 4. Sabe-se que a bilirrubina interfere em reações com peroxidase.72 mg/dL Urina: Negativo. então. 1983.C’s of Interpretive Laboratory Data.Laboratory Test Handbook.715.B.54 0.459. Clinical Chemistry Principles and Thecnics (Henry. LIMITAÇÕES DO PROCEDIMENTO 1.A . Philadelphia. A. Pestaner.1996.5 % INFORMAÇÕES ADICIONAIS BIBLIOGRAFIA: 1. do Calibrador (Valor na Bula) Absor. 1974.SÃO PAULO .9 1.158 Pileggi. V. Young. do desconhecido = 500 x 0. sexo e dieta. 3. foi determinada a partir de valores obtidos de 5 análises similares de material de controle de qualidade ensaiado durante um período de 22 lotes. and Gibberman. 1979. A regressão linear calculada em 40 amostras. Clinical Diagnosis and Management by Laboratory Methods (Henry.283.J 02. Recomenda-se que cada laboratório estabeleça uma faixa esperada para a população local. do Calibrador Conc.116 Responsável Técnico: Carolina Pasin Vicari CRF-SP n° 29652-4 Número Registro ANVISA: 10438910019 . 6 Essa interferência é minimizada pela leitura da absorbância a 578nm. NC. Líquidos Ascítico.72 % O coeficiente de variação obtido usando-se um pool de soro testado nas mesmas condições que o material controle usado para uma precisão de corrida foi de 0.81 0. F. 8.C. Para valores superiores repetir a determinação diluindo a amostra em água deionizada.. W. A sensibilidade do método é tal que uma alteração na absorbância de 0. Sinovial e Pleural: Acompanham os níveis plasmáticos.93 % 252. 600A670nm Então: Fator= 300 mg/dl = 500 0. Os seguintes resultados foram obtidos: Média DP VC 74. J. Saunders Co. Clin Chem.5 mg/dl (0.S.. p. p. Frances K. USA KIT DISTRIBUIDO POR: SYNERMED DO BRASIL Rua Cincinato Braga. INC. R. P.155..137. Davis Company.360 = 180 mg/dl ou 9. Philadelphia.9997.158 Ibid. Inc.173. D.B.S et al .8 mg/dl 4. L. Harper & Row. Hagerstown MD.J. INC. similar à do analisador Hitachi 705.2. et Esse produto é garantido pela Synermed.65 mg/dL adulto 65 .001 detectará tão pouco quanto 0. O valor obtido deve. ©1992.6 mmol/l 4.N. p.2 mg/dl 0. Bekerman.B.p. Widmann.and Szustkiewicz. p.RESULTADOS A absorbância líquida é usada para calcular os valores de glicose utilizando a seguinte fórmula: Cálculos: Fator = Conc. Greenville. p.: 115. A reprodutibilidade corrida a corrida do método. Inc desde que usado como descrito nessa bula e na literatura da Synermed. 2.72 % em um nível de 116. bilirrubina e lipemia dependem do tipo de instrumento.3 mg/dl 0. 3. do desconhecido Exemplo: Absorbância do desconhecido = 0. ESTUDO DO DESEMPENHO PRODUZIDO POR: SYNERMED International Inc. Inc. 1975. S. A metodologia SynermedTM glicose foi correlacionada a um método enzimático de glicose amplamente aceito.). and Howanitz. D.600 Conc. A precisão do método foi determinada através do ensaio de 36 amostras de material de controle de qualidade a dois níveis de concentração de glicose. Howanitz. VALORES DE REFERÊNCIA Os valores de referência de glicose variam de acordo com a idade. veja a publicação de Young.6 mg/dl. 2.1 mg/dl 1.02 mmol/l) de glicose..14 mmol/l) com um coeficiente de correlação de 0. Inc. 237-239. SYNERMED. 21: 278D281D.).P. onde se obteve os seguintes resultados: Média DP CV 65. Synermed. variando entre 36 a 435 mg/dl (2 a 24 mmol/l) com resultados Synermed no eixo Y foi: Y = 0.120 mg/dL LCR: 47 .. 5.

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