TÉCNICAS DE CULTURA EM MICOLOGIA

Prof. Carlos Fernando dos Santos CRBM 3158

TÉCNICAS DE CULTURA
PREPARO DE MEIOS DE CULTURA

Ágar Sabouraud Clorafenicol (SAB)
Meio de enriquecimento - Semeia vários tipos de fungos. Na microbiologia – meio seletivo

Água destilada.......1000ml
(isentas de elementos nutricionais)

  

Peptona................10g
carne degradados)

(Peptona de carne pedaços de

Dextrose...............40g (Carboidratos) Ágar-Ágar.............20g (15 a 20g, por litro) Clorafenicol...........50mg* pH.......................4,0 a 5,0

(Antibiótico que inibe o crescimento bacteriano ou gentamicina 60mg)

TÉCNICAS DE CULTURA
PREPARO DE MEIOS DE CULTURA

Ágar Sabouraud Clorafenicol (SAB)

...........4....50mg* (Inibir o crescimento bacteriano) pH....15g (Dar consistência) Clorafenicol... infusão da batata...TÉCNICAS DE CULTURA PREPARO DE MEIOS DE CULTURA Ágar Batata Dextrose (BDA) (Meio de enriquecimento.......... não é bom usar quando se quer crescimento de microorganismo)       Água destilada.....0 (pH ácido) .....500ml Glicose..............................10g (Fonte de carboidrato) Ágar-Ágar....500ml Infusão de batata...0 a 5....

TÉCNICAS DE CULTURA PREPARO DE MEIOS DE CULTURA  Ágar Batata Dextrose (BDA) .

......5g Cloreto de potássio.................5g Sulfato de ferro................0.....15g Clorafenicol......................................0 ...................................................4..........0g Sulfato de magnésio..........................................01g Ágar-Ágar......0 a 5.......TÉCNICAS DE CULTURA PREPARO DE MEIOS DE CULTURA Ágar Czapek (CZK) (Enriquecimento..................1000ml Sacarose....30g (fonte de carboidrato) Nitrato de sódio....1.........0.................0.............3g Fosfato dibásico de potássio... quando quer crescer fungos geofílico(afinidade com a terra))           Água destilada.......... para fungos presentes no solo e diferencial........50mg/L* pH.............

TÉCNICAS DE CULTURA PREPARO DE MEIOS DE CULTURA  Ágar Czapek (CZK) .

10g Ágar-Ágar.....0 (ácido) ..................4................05g pH..................TÉCNICAS DE CULTURA PREPARO DE MEIOS DE CULTURA Ágar Mycosel (MYC) (Seletivo para dermatófilos)        Água destilada.........4g (Inibe o crescimento de fungos saprofitos) Clorafenicol.......10g Glicose....................0 a 5..................................1000ml Peptona..................................0.................0..........15g Ciclo-heximida.

TÉCNICAS DE CULTURA PREPARO DE MEIOS DE CULTURA  Ágar Mycosel (MYC) .

..................4 (pH básico) ................................. para fungos que crescem em tecidos profuntos)      Água destilada...........20g Clorafenicol..TÉCNICAS DE CULTURA PREPARO DE MEIOS DE CULTURA Ágar Infusão de Cérebro e Coração Bovino (BHI) (Meio seletivo.................................1000ml Infusão de Cérebro e Coração(Difco)..........37g Ágar-Ágar.....0.......7.............................................05g pH...........

TÉCNICAS DE CULTURA PREPARO DE MEIOS DE CULTURA  Ágar Infusão de Cérebro e Coração Bovino (BHI) IMPORTANTE Incubação a 35ºC! .

TÉCNICAS DE CULTURA PREPARO DE MEIOS DE CULTURA   Meios Semi-sólidos Caldos Semi-sólidos Caldos .

Desprezar meios que queimarem Autoclavação ideal =121ºC por 20 min. .TÉCNICAS DE CULTURA PREPARO DE MEIOS DE CULTURA    Observações Importantes   Ferver meios que contém ágar-ágar Adicionar o antibiótico somente após fervura do meio.

TÉCNICAS DE CULTURA     ASSEPSIA E ESTERILIZAÇÃO Vidrarias  Detergentes neutros  Autoclave 121ºC/20min Meios de cultura  Autoclave 121ºC/20min Bancadas  Álcool 70%  Hipoclorito de sódio Câmara de fluxo laminar  Álcool 70%.  Luz UV 20 min.  Filtro de ar milipore* .

TÉCNICAS DE CULTURA ASSEPSIA E ESTERILIZAÇÃO Hipoclorito de Sódio Desinfecção Perévia da Bancada Bico de Bunsein .

TÉCNICAS DE CULTURA DESINFECÇÃO     Vidrarias Meios de cultura utilizados Filtro milipore Caixas de descarte (Descarpack)*  Autoclave 121ºC durante 20 minutos. .

TÉCNICAS DE CULTURA DESINFECÇÃO E ESTERILIZAÇÃO  Autoclave 121ºC durante 20 minutos Interior do Autoclave Termômetro Barômetro Autoclave Vertical .

TÉCNICAS DE CULTURA CINÉTICA DO CRESCIMENTO FÚNGICO  Leveduras Fissão binária / Gemulação  Colônias circulares com bordas variáveis  Cicatriz gemular Bordos Diferencialdos Fissão binária / Gemulação .

TÉCNICAS DE CULTURA CINÉTICA DO CRESCIMENTO FÚNGICO  Fungos Filamentosos de maturação distintas  Centrífugo  Zonas .

TÉCNICAS DE CULTURA ENRIQUECIMENTO PARA ISOLAMENTO DE FUNGOS A PARTIR DE AMOSTRAS SÓLIDAS        Caldo YG 25ml Balão de 250ml Rolha de gaze + algodão 25g da amostra a ser analisada Crescimento de 5-7 dias Agitação constante(*) Temperatura ambiente(*) .

TÉCNICAS DE CULTURA ENRIQUECIMENTO PARA ISOLAMENTO DE FUNGOS A PARTIR DE AMOSTRAS SÓLIDAS .

Técnica de estrias em tubo com meio inclinado .TÉCNICAS DE CULTURA SEMEIO DE FUNGOS FILAMENTOSOS    Técnica de pique central em placa de petri Técnica de piques em gradiente em PP.

TÉCNICAS DE CULTURA SEMEIO DE FUNGOS FILAMENTOSOS Pique Central .

TÉCNICAS DE CULTURA SEMEIO DE FUNGOS FILAMENTOSOS .

  Piques em gradiente na placa de petri .TÉCNICAS DE CULTURA ISOLAMENTO DE FUNGOS PÓS-CRESCIMENTO EM CALDO ENRIQUECIDO    Placas de petri com Ágar SAB ou BDA Alça de platina em alíquota Câmara de fluxo laminar esterilizada Álcool 70%  Luz UV 20 min.

TÉCNICAS DE CULTURA SEMEIO DE FUNGOS FILAMENTOSOS Piques em Gradiente .

TÉCNICAS DE CULTURA SEMEIO DE FUNGOS FILAMENTOSOS Pique em Meio Inclinado .

TÉCNICAS DE CULTURA SEMEIO DE LEVEDURAS   Técnica de estrias em placa de petri Técnica de estrias em tubo com meio inclinado .

TÉCNICAS DE CULTURA SEMEIO DE LEVEDURAS   Técnica de estrias em placa de petri Técnica de estrias em tubo com meio inclinado .

TÉCNICAS DE CULTURA ISOLAMENTO DE FUNGOS PÓS-CRESCIMENTO EM CALDO ENRIQUECIDO  Câmara de fluxo laminar esterilizada   Álcool 70% Luz UV 20 min. .

com Prof:. .OBRIGADO! fernandoupa@gmail. Carlos Fernando dos Santos CRBM: 3158 Todos os direitos reservados.

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