PROTOCOLO MINI-PREP 1. Centrifugar 1mL da cultura por 1min., desprezar todo o sobrenadante. Obs.: Todas centrifugaes so realizadas a 12.

000xg; 2. Suspender muito bem o pellet em 200mL de TE pH 8,0; 3. Adicionar 200mL de soluo SDS/NaOH, e homogeneizar pipetando algumas vezes; 4. Incubar a 37C por 5min (opcional). A suspenso fica transparente; 5. Adicionar 150mL de NaAc 3M, pH4,8. Misturar vrias vezes por inverso (at formar "grumos"); 6. Centrifugar por 6min; 7. Transferir o sobrenadante para outro tubo e adicionar 1mL de isopropanol. Misturar por inverso; 8. Incubar a 37oC por 5 minutos (opcional); 9. Centrifugar por 10min. Descartar o sobrenadante e lavar o pellet 2 vezes com 1mL de etanol 75% gelado. Se o pellet se soltar da parede do tubo, centrifugar 2 min e descartar o sobrenadante em seguida; 10. Secar o pellet e suspender em 50mL de TE