Colorao de Gram

A colorao de Gram foi desenvolvida em 1884 por Hans Christian Joachim Gram, m dico bacteriologista dinamarqus. Esta tcnica permite distinguir clulas bacterianas quanto composio das suas paredes celulares em dois grupos: Grampositivas e Gram-negativas, facilitando a observao morfolgica das prprias clulas, que pode ser entre: bacilos, cocos ou espirilos. Consiste no tratamento sucessivo do esfregao bacteriano, fixado pelo calor, com os reagentes cristal violeta, lugol, Etercetona e fucsina. As bactrias Gram-positivas possuem uma expressa camada de peptdeoglicano, enquanto a Gram-negativa possui uma membrana plasmtica e uma membrana externa, no meio delas est localizada um fina camada de peptdeoglicanos. E, por esse motivo, os diferentes tipos de bactrias reagem de modo diferente colorao de Gram. Como? O cristal violeta absorvido por todas essas duas classes de bactrias, o lugol age de forma a fix-lo nelas, deixandoas com a colorao azulada/roxa, acarretando na formao de um complexo violeta-iodo, onde forma-se uma molcula grande que se precipita dentro da clula. Posteriormente, acrescentado o tercetona que descolore todas as bactrias negativas. Nas bacterias Gram-positivas, promove a desidratao do peptideoglicano, diminuindo o espao dentro da clula. Nas Gram-negativas (que antes estavam coradas pelo cristal violeta), esse solvente dissolve a camada lipdica das membranas externas das bactrias gramnegativas, deixando tambm pequenos buracos na fina camada de peptideoglicana. Na fase final, aplica-se a Fuccina, que um corante bsico que atua nas bactrias Gram-negativas deixandoas com colorao avermelhada.