Enzimas:

Definición, conceptos generales, clasificación.

Factores que afectan la velocidad de una reacción: pH, temperatura,
concentración de enzima, concentración de sustrato. Enzimas con más de
un sustrato: mecansimo de ping pong y secuencial.
Cinética enzimática: Michaelis Menten, Lineweaver-Burk, definición Km,
Vmáx.
Inhibición enzimática: competitiva, no competitiva, acompetitiva e
irreversible. Mecanismos de regulación enzimática. Enzimas importantes
con aplicación clínica.

Guía:

1. Por definición son todas las enzimas proteínas? Por qué?

2. Cómo aceleran las enzimas la velocidasd de una reacción?
3. Defina : velocidad de reacción, Km, Vmáx, isoenzima, apoenzima, holoenzima,
cofactor, zimógeno, enzima alostérica.
4. Indique las clases de enzimas y explique qué tipo de reacción catalizan.
5. Grafique y explique el efecto del pH y la temperatura sobre la velocidad de
reacción.
6. Presentan todas las enzimas el mismo pH óptimo para su actividad? Por qué?
7. Grafique y explique elefecto de la concentración de enzima sobre la velocidad
de reacción. Es este efecto ilimitado?. Por qué?
8. Grafique y explique el efecto de la concentración de sustrato sobre la velocidad
de reacción. Indique en el gráfico dónde se obtiene Km y la Vmáx.?
9. Si se tienen los siguientes valores de Km para los sustratos de la enzima X:
A: 3 mM, B: 5 mM y C.: 50 mM. Cuál de los tres sustratos presenta menor
afinidad para la enzima X.
10. En el gráfico de Lineweaver Burk Ud. observa que en el eje y, la línea intercepta
a un valor de 3 mM/ min y en el otro cuadrante intercepta el eje x a un valor de
-5 mM. Cuál es el valor de Vmáx y el de Km para la enzima.
11. Qué tipos de inhibiciones reversibles se estudiaron?
12. Represente gráficamente cada una de las inhibiciones reversibles y explique
claramente el efecto de los inhibidores sobre los valores de Km y Vmáx de la
enzima.
13. Mencione dos ejemplos de inhibicipon irreversible.
14. Explique la importancia de enzimas como la creatina kinasa y la lactato
deshidrogenasa en el diagnóstico de infarto al miocardio.
15. Mencione y ezplique 4 tipos de regulación de la actividad enzimática.
16. Grafique el efecto de la concentración de sustrato sobre la velocidad de reacción
para una enzima alostérica.
17. Explique el efecto de un modificador alostérico positivo y uno negativo sobre la
afinidad de la enzima alostérica por su sustrato.
 GUÍA:

1. Por definición son todas las enzimas proteínas? Por qué?

Respuesta: Son en su mayoría proteínas globulares de gran tamaño que
catalizan (aceleran) reacciones de sistemas biológicos. Se habla de que la
mayoría son proteínas, porque existen excepciones, como ciertas moléculas
que actúan como enzimas y no son proteínas. Se habla de proteínas
globulares cuando éstas presentan estructuras secundarias en su estructura
tridimensional, terciaria ó monomérica.
Lo anterior es una característica de las enzimas junto con el gran
tamaño que poseen. Para que una molécula sea catalogada como enzima,
es de suma importancia que tenga la función de catálisis.
2. Cómo aceleran las enzimas la velocidad de una reacción?
Respuesta:Una enzima, por sí misma, no puede llevar a cabo una
reacción, su función es modificar la velocidad de la reacción,
entendiéndose como tal la cantidad de producto formado por
unidad de tiempo. Tal variación se debe a la disminución de la energía
de activación Ea; en una reacción química, la Ea es la energía necesaria
para convertir los reactivos en formas moleculares inestables
denominadas especies en estado de transición, que poseen mayor
energía libre que los reactivos y los productos.
En el diagrama están representados los niveles de energía , durante el
curso de la reacción, de moléculas intervinientes en una reacción tipo: A + B
---> C. La curva azul muestra el curso de la reacción en ausencia de una
enzima que facilite la reacción, mientras que la curva roja la muestra en
presencia de la enzima específica de la reacción. La diferencia en el nivel de
energía entre el estado inicial y la necesaria para iniciar la reacción (picos
de las curvas) es la energía de activación. Tal como se observa la
presencia de enzima baja la energía de activación.
El complejo Enzima- sustrato posee menor energía de activación que las
especies en estado de transición que la correspondiente reacción no
catalizada.

Como realiza esta acción una enzima?

Orienta a los sustratos: parte de la energía de activación se utiliza para

que los sustratos roten y se enfrenten con los átomos correctos para formar
los enlaces.

Agregan cargas a los sustratos: las cadenas laterales (R) de los

aminoácidos de las enzimas pueden participar directamente haciendo a los
sustratos químicamente más reactivos.

Inducen la deformación en el sustrato: cuando una sustancia se une al

sitio activo, la enzima puede causar que los los enlaces se estiren,
poniéndolo en un estado de transición inestable.

Cambio de forma de la enzima al unirse al sustrato: el modelo de llave-

cerradura de Fisher fue actualizado cuando se descubrió que las enzimas
son flexibles y sus sitios activos pueden cambiar (expandirse) para
acomodarse a sus sustratos. Este cambio de forma causado por la unión al
sustrato se denomina ajuste inducido.
En la Hexoquinasa puede observarse este ajuste inducido, con el sustrato
(glucosa) y sin él. El ajuste inducido alinea las cadenas laterales reactivas
del sitio activo de la enzima con los sustratos.

3. Defina : velocidad de reacción, Km, Vmáx, isoenzima,

apoenzima, holoenzima, cofactor, zimógeno, enzima
alostérica.
 Respuesta:
velocidad de reacción: rapidez con que ocurre la reacción, se puede
observar por medio de lo siguiente:

A. Reacción no catalizada:
S S++ P

Sustrato transición producto

El estado de transición lo que quiere decir es el estado en donde ese
sustrato se esta transformando en producto.

B. Reacción catalizada:

S+E ES E+P
Sustrato+ enzima complejo enzimasustrato enzima + producto

El complejo enzimasustrato puede desasociarse en dos direcciones,

se puede devolver porque dicha unión puede ser no muy buena o seguir
haciendo que el sustrato se convierta en producto y luego se separen. La
enzima no se transforma no se vuelve parte del producto, ésta se vuelve a
recuperar luego de que finalice la reacción.
Km: es la constante de Michaelis- Menten. NOS INDICA LA AFINIDAD DE LA
ENZIMA POR ESE SUSTRATO. CANTIDAD DE SUSTRATO NECESARIA PARA
ALCANZAR LA MITAD DE LA VELOCIDAD MAXIMA.
Vmáx: es la obtenida en condiciones de saturación de enzima por el
sustrato en condiciones determinadas de pH, temperatura y fuerza iónica.
NOS INDICA EFICIENCIA DE LA ENZIMA
Isoenzima: son distintas formas moleculares de una misma enzima que
presentan o muestran especificidad por el mismo sustrato.Por ejemplo:las
distintas formas moleculares de alcohol deshidrogenasa (ADH) se
diferencian en la carga eléctrica neta, en el peso molecular o en ambas
simultáneamente, pero todas ellas deshidrogenan el alcohol (sustrato)
convirtiéndolo en aldehído. La principal característica de las isoenzimas es
que deben tener la misma especificidad de sustrato.
Apoenzima: es la parte proteica de una enzima, desprovista de los
cofactores o coenzimas que puedan ser necesarios para que la enzima sea
funcionalmente activa. La apoenzima es catalíticamente inactiva; cuando se
la une la coenzima o cofactor adecuados, constituye la holoenzima, o
enzima activa.
Holoenzima: es una enzima que está formada por una proteína
(apoenzima) y un cofactor o una coenzima. Es una enzima completa y
catalíticamente activa.
Cofactor: es un ion metálico, termoestable y de baja masa molecular,
necesario para la acción de una enzima. El cofactor se une a una estructura
proteica denominada apoenzima, y a este complejo se le denomina
holoenzima. Entre los cofactores mencionables se encuentran: Fe, Cu, K, Mn,
Mg, entre otros. Los enzimas que precisan de iones metálicos se llaman a
veces metaloenzimas.
Zimógeno: Los zimógenos son enzimas inactivas que se sintetizan con un
aminoácido extra NO NECESARIAMENTE UNO SINO VARIOS. Al formar la
estructura tridimensional no se forma sitio catalítico. Son llamados pro
enzimas o enzimas inactivas.
Enzima alostérica: una enzima cuya actividad está regulada mediante un
sitio alostérico, que es un sitio, distinto del sitio activo de la enzima, al que
se une un regulador (llamado "regulador alostérico") de manera reversible y
no covalente. La unión de este regulador modifica la estructura
tridimensional de la enzima y llega a afectar la configuración del sitio activo,
por lo que aumenta o disminuye su actividad, según el caso. El alosterismo
es una de las principales formas de regulación en la célula debido a que
puede producir cambios rápidos y fácilmente reversibles en la actividad de
las enzimas (y, por lo tanto, en el metabolismo) sin depender de que el
regulador tenga una estructura similar al sustrato de la enzima (lo que
puede ayudar a conectar vías metabólicas).
4. Indique las clases de enzimas y explique qué tipo de reacción
catalizan.
Respuesta:
Oxido-reductasas: Enzimas que catalizan reacciones de oxido-reducción
(transferencia de e-, uno se oxida y el otro se reduce).se conocen tres tipos
de oxido- reductasas: Oxidasas, Deshidrogenasas y Reductasas. Cuando un
sustrato se oxida incorpora oxígeno estas se conocen como Oxidasas;
cuando se da una pérdida de Hidrógeno o pérdida de electrones (e-) se
conocen como Deshidrogenasas. Estas dos son de oxidación. Ej:
 -citocromooxidasa es una enzima que cataliza la oxidación de
citocromo.
-glucosaoxidasa es una enzima que cataliza la oxidación de glucosa.
Cuando se da la incorporación de electrones o de hidrógenos, este
tipo de enzimas se conocen como Reductasas.
Este grupo requiere cofactores los cuales generalmente son
coenzimas como el NAD, FAD y FMN; este tipo de cofactores son capaces de
sufrir la reacción inversa, esto quiere decir que si el sustrato se esta
oxidando esta perdiendo hidrógenos y el cofactor captura esos hidrógenos y
se reduce.
Las enzimas utilizan un cofactor en particular, ej: la deshidrogenada sólo
utiliza FAD, si uno la pusiera a trabajar con NAD su actividad sería muy
baja, a nivel de laboratorio, pero biológicamente la actividad de algunas
enzimas se va a ver bloqueada por la ausencia de un cofactor y es
posible que tomen otra ruta alterna porque no tienen el cofactor
apropiado.
Ej.: alcohol deshidrogenasa transforma el etanol en acetaldehído,
ocurre una oxidación de etanol y una reducción del cofactor que en este
caso es el NAD, este pasa a reducirse a NADH.
Transferasas: Transfieren un grupo en particular como un fosfato de la
molécula de ATP ó de alguna otra molécula que esté fosforilada que va a
transferir ese fosfato al sustrato de la reacción. Puede darse la transferencia
de grupos metilo, etilo, entre otros.
Su nombre real debería ir de la siguiente manera: Nombre del
sustrato y lo que transfiere por lo que la enzima que transfiere fosfato a la
glucosa debería llamarse Glucosa ATP fosforilasa, peor esto no es así porque
existe una nomenclatura común en la cual las nombran como Quinasas:
grupo de enzimas que transfiere únicamente fosfato, Ej.:
proteínquinasas, fosforilan proteínas o glucoquinasas, que fosforilan
glucosas. También está Hexoquinasa que fosforila hexosas, un ejemplo de
ello es la fosforilación de glucosa la cuál es una hexosa, ésta toma un
fosfato del ATP y éste se convierte en ADP; la molécula de ATP se convierte
en un cosustrato porque está donando el fosfato, no es un cofactor. Como se
puede notar la fosforilación de la glucosa se puede nombrar como una
hexoquinasa o como una glucoquinasa. En este grupo no sólo existen las
quinasas pero estas son las más comunes en los procesos biológicos.
Hidrolasas: Este grupo de enzimas son aquellas que rompen enlaces que
se hayan hecho por la eliminación de una molécula de agua porque lo que
hace es introducir moléculas de agua, algunos tipos de enlaces que rompen
este tipo de enzimas son los enlaces éster, fosfodiéster, glicosídicos,
peptídicos. Todas las enzimas que se encuentran en el grupo de enzimas
digestivas son del grupo de las hidrolasas, porque son las encargadas de
romper todas las macromoléculas que nosotros comemos y luego
convertirlas en moléculas muy pequeñas para luego poderlas absorber. Un
ejemplo es la apoxipeptidasa a es un grupo de enzimas que participan en el
proceso digestivo rompiendo enlaces peptídicos y dividiendo aminoácidos.
Este grupo se nombra de la siguiente manera: se debería poner el
nombre hidrolasa al final de la enzima sin embargo algunas enzimas que
participan en procesos característicos como lo es el digestivo son enzimas
que se estudiaron hace muchísimo tiempo por lo que tienen nombres
particulares como Tripsina, quimotripsina, pepsina y la amilasa.

Liasas: adicionan grupos funcionales a los dobles enlaces. Estas reacciones

son las conocidas como descarboxilaciones Ej.: el piruvato es un sustrato en
donde hay una unión entre el carbono del ceto y el carbono del carboxilo,
entonces al romperse este enlace hay liberación de CO2.
Isomerasas: Son aquellas que catalizan reacciones de isomerización,
dichas reacciones por lo general son reversibles porque los isómeros son
reversibles, Ejs. de isómeros: anómero alfa y beta, cis o trans, L o D. Este
tipo de enzimas catalizan la transformación de un isómero en otro, como
pasar de un isómero cis a uno trans o viceversa.
Ligasas Osintetasas LAS SINTASAS SON LIASAS: Estas enzimas unen dos
sustratos para formar un producto; puede ser que el 2º sustrato no sea muy
evidente que salga de otro compuesto por ejemplo las reacciones de
carboxilación son catalizadas por ligasas. Lo que hacen es unir una molécula
de CO2 al sustrato y transformarlo en un sustrato carboxilado. REQUIEREN
ENERGÍA

5. Grafique y explique el efecto del pH y la temperatura sobre la

velocidad de reacción.
Respuesta:
pH
 Los enzimas poseen grupos químicos ionizables (carboxilos -COOH;
amino -NH2; tiol -SH; imidazol, etc.) en las cadenas laterales de sus
aminoácidos. Según el pH del medio, estos grupos pueden tener carga
eléctrica positiva, negativa o neutra. Como la conformación de las
proteínas depende, en parte, de sus cargas eléctricas, habrá un pH en el
cual la conformación será la más adecuada para la actividad catalítica.
Este es el llamado pH óptimo. La mayoría de los enzimas son muy
sensibles a los cambios de pH. Desviaciones de pocas décimas por
encima o por debajo del pH óptimo pueden afectar drásticamente su
actividad. Así, la pepsina gástrica tiene un pH óptimo de 2, la ureasa lo
tiene a pH 7 y la arginasa lo tiene a pH 10 (Figura de la izquierda). Como
ligeros cambios del pH pueden provocar la desnaturalización de la
proteína, los seres vivos han desarrollado sistemas más o menos
complejos para mantener estable el pH intracelular: Los
amortiguadores fisiológicos.

Temperatura: La elevación de la temperatura incrementa la velocidad de

una reacción catalizada por enzimas. Al principio la velocidad de reacción
aumenta cuando la temperatura se eleva debido al incremento de la energía
cinética de la energía de las moléculas reactantes.Sin embargo, al final, la
energía cinética de la enzima excede a la barrera energética para romper
los enlaces débiles de hidrogeno que conservan su estructura secundaria y
terciaria.
A esta temperatura predomina la desnaturalización con pérdida precipitada
de la actividad catalítica. Por tanto las enzimas muestran una temperatura
óptima de acción. Los limites de actividad para la mayor parte de las
enzimas tiene lugar entre los 10°C y 50°C; la temperatura optima para las
enzimas en el cuerpo se halla alrededor de 37°C.

6. Presentan todas las enzimas el mismo pH óptimo para su

actividad? Por qué?
Respuesta:No, el ph óptimo va a depender de las enzimas de donde se
encuentren y cual sea su medio ambiente.
7. Grafique y explique el efecto de la concentración de enzima
sobre la velocidad de reacción. Es este efecto ilimitado?. Por
qué?
Respuesta: Efecto de la concentración de enzimas: si yo mido
con la formación de producto la velocidad de la reacción va a depender de
la cantidad de enzimas que tenga para formar dicho producto, se puede ver
en una célula porque las enzimas son ante todo proteínas, y éstas tienen un
recambio proteico en el organismo. Esto quiere decir . Conforme aumenta la
concentración, aumenta la velocidad de reacción hasta que no tenga
sustrato. Conforme se aumenta la concentración de enzima, se aumenta la
velocidad de reacción, siempre y cuando la concentración de sustrato no
sea limitante. Que tenga muchísimo sustrato. Puedo seguir agregando
enzima porque tengo un estañón y todavía tengo 10 estañones más de
sustrato, entonces puedo seguir degradando sustrato, mientras el sustrato
no me este limitando. En el momento en el que ya no tengo sustrato, esa
linealidad se pierde.

8. Grafique y explique el efecto de la concentración de sustrato

sobre la velocidad de reacción. Indique en el gráfico dónde se
obtiene Km y la Vmáx.?
Respuesta:
Permanece constante la concentración de enzima y lo que se cambia es la
concentración de sustrato. Entonces la velocidad inicial de una reacción
catalizada por una enzima depende de la concentración de sustrato. A
medida que aumenta la concentración de sustrato, la velocidad inicial
aumenta hasta que la enzima esta completamente saturada por el sustrato.
Si se representa las velocidades iniciales obtenidas contra varias
concentraciones de sustrato, se obtiene una hipérbole rectangular. La
velocidad de la reacción alcanza un límite máximo en el punto en que todos
los centros accesibles están saturados. La enzima y el sustrato han de
interaccionar de alguna forma para que el sustrato pueda ser convertido en
productos. Inicialmente se forma un complejo entre la enzima y el sustrato.
9. Si se tienen los siguientes valores de Km para los sustratos
de la enzima X: A: 3 mM, B: 5 mM y C.: 50 mM. Cuál de los
tres sustratos presenta menor afinidad para la enzima X.?
Respuesta: El sustrato C ya que entre mas grande la Km presenta
menor afinidad.
10.En el gráfico de Lineweaver Burk Ud. observa que en el eje y,
la línea intercepta a un valor de 3 mM/ min y en el otro
cuadrante intercepta el eje x a un valor de -5 mM. Cuál es el
valor de Vmáx y el de Km para la enzima.
Respuesta:

El valor de Vmáx en 3mM/min y la km es de -5Mm NO!!!!!!! RECUERDE

QUE SON INVERSOS LOS VALORES SON 1/3 Mm/min Y 1/5 Mm/min
11. Qué tipos de inhibiciones reversibles se estudiaron?
Respuesta: Las inhibiciones reversibles pueden dividirse en tres tipos
distintos: competitiva, no competitiva y acompetitiva.
 12.Represente gráficamente cada una de las inhibiciones
reversibles y explique claramente el efecto de los inhibidores
sobre los valores de Km y Vmáx de la enzima.
Respuesta:
Inhibición competitiva
Hay competencia entre el sustrato y el inhibidor, porque son muy
similares. El inhibidor se une a la enzima en el sitio catalítico, recordemos
que las enzimas tienen
muchos sitios activos
(pueden modificar la
actividad de la enzima)
pero únicamente hay un
sitio activo en el que se
une el sustrato, el sitio
catalítico; esto impide
la formación del
complejo ES y se forma
el complejo enzima-inhibidor EI, el cual puede separarse y después formarse
el complejo ES.
La acción del inhibidor depende de la concentración tanto del sustrato
como del inhibidor. A igual concentración o a mayor concentración de
inhibidor se va a mantener la competencia, sin embargo, si se aumenta
exponencialmente la concentración de sustrato, la actividad del inhibidor
puede llegar a ser nula debido a la competencia desleal (hay demasiado
sustrato y muy poco inhibidor).
Por ejemplo, al agregar en varios tubos la misma cantidad de
inhibidor y enzima, y aumentar la cantidad de sustrato en cada tubo,
cunado se traza una curva con y sin inhibidor, encontramos que al graficar
la curva con inhibidor la velocidad máxima se mantiene igual pero la Km
aumenta, es decir, se requiere de una mayor cantidad de sustrato para
alcanzar el punto de saturación de la mitad de las enzimas. Recordar que en
la curva se grafican los inversos.
No se puede decir por lo tanto que un inhibidor aumenta la velocidad
máxima, porque si fuera así no seria un inhibidor. Un inhibidor disminuye o
no afecta la velocidad máxima.
 Inhibición No Competitiva (pura) En este tipo de inhibición, el
inhibidor no tiene semejanza estructural con el sustrato y se une a un si tio
activo diferente al sitio catalítico. Esto permite que se acople el sustrato,
pero no se puede dar la transformación del sustrato en producto. Como
esta es una inhibición no competitiva pura no se
da un cambio conformacional
en la estructura del sitio
catalítico, sino que simplemente
se inhibe la formación del
producto. Se puede dar de dos
maneras:
a. Primero se da la
formación del
complejo ES y
posteriormente
se une el inhibidor para formar un complejo EIS que impide
la formación del producto.
b. Se da la formación del complejo EI y posteriormente se da la
unión del sustrato para formar el complejo EIS.
En ninguno de los dos tipos se ve afectada la unión ni del sustrato ni
del inhibidor. En cualquiera de los casos siempre se da la formación del
complejo EIS. Es por esto que este tipo de inhibición se conoce como no
competitiva pura.
Como la unión EI no impide
que se una el sustrato, la velocidad
máxima de reacción siempre va a
disminuir, sin importar la cantidad de
sustrato que se tenga en la solución,
porque no se puede dar la formación del producto. Debido a que como el
inhibidor se une en otro sitio distinto al activo, la afinidad de la enzima por
el sustrato no se va a ver afectada, porque no se afecta la formación del
complejo ES. Esto implica que concentración que se requiere para alcanzar
la mitad de la velocidad máxima (Km) no varia con respecto a la que se
tiene en ausencia de inhibidor, porque sin importar si hay o no inhibidor, a
esa concentración el 50% de la enzimas tienen unido el sustrato.
Inhibición Acompetitiva
En estas el
inhibidor se une
también a un sitio
activo diferente al sitio
catalítico. Sin embargo,
en estos casos es
necesaria la presencia
del complejo ES, es
decir, el inhibidor
únicamente se puede
unir después de que se
forme el complejo ES. Se puede llegar a pensar que el inhibidor aumenta la
afinidad de la enzima por el sustrato, pero esto no es cierto!! El complejo
EIS se forma solo cuando el ES ya estaba listo. A la hora de ver la grafica se
observan líneas paralelas, esto se debe a que como esta actuando el
inhibidor, disminuye la velocidad máxima de la reacción, pero a su vez
pareciera que varia la Km de la reacción, pero esto es porque el inhibidor
puede unirse únicamente cuando ya se formo el complejo ES, la afinidad de
la enzima por el sustrato siempre va a ser la misma, porque en el momento
en el que se va el inhibidor, la reacción se puede dar.
 13.Mencione dos ejemplos de inhibición irreversible.
Respuesta: 1.Fijación covalente del inhibidor a la enzima: Ejemplo:
la ciclooxigenasa (COX) va a intervenir en la producción de Eicosanoides
(prostaglandinas y tromboxanos) a partir de Ácido araquidonico. Las
prostaglandinas son importantes en procesos inflamatorios. Existen dos
tipos de COX, la COX 1 que es importante en la formación constante de la
mucosa gástrica, la cual protege del ácido clorhídrico; y la COX 2 que
interviene en la formación de prostaglandinas y que participan en procesos
inflamatorios. La COX 2 puede ser bloqueada por acción de medicamentos
antiinflamatorios, para controlar la formación de prostaglandinas y disminuir
el proceso inflamatorio. El Ácido acetilsalicílico (aspirina) es capaz de inhibir
a la COX por medio de una reacción que produce acetilación de la COX por
una union covalente y la formación de un Ácido salicílico. La aspirina es
capaz de bloquear ambas COX, por lo que puede llegar a producir gastritis.

2. El cloromercuribenzoato tiene una estructura similar a la del

cloruro de mercurio, que se va a utilizar en el laboratorio, este va a actuar
sobre grupos SH parte de la Cisteina, los cuales en muchas son importantes
para en el sitio catalítico y por lo tanto para la función de la enzima y
pueden ser bloqueados por los compuestos anteriores por inhibición
irreversible. El cloruro de mercurio no actúa por un mecanismo de inhibición
no competitiva, sino que actúa por un mecanismo de inhibición irreversible.
 14.Explique la importancia de enzimas como la creatina kinasa y
la lactato deshidrogenasa en el diagnóstico de infarto al
miocardio.
Respuesta:
Existen enzimas conocidas como marcadores enzimáticos que son
liberadas al plasma
cuando un órgano o
tejido sufre un trauma.
No tienen un efecto
dañino en la persona,
pero son de utilidad
para el medico como
indicación de que hay
algo mal en el paciente
y poder brindar un
tratamiento adecuado.
Ejemplo, en caso de un infarto al miocardio se liberan enzimas al plasma,
las cuales normalmente tienen una baja actividad en plasma (no es que
en condiciones normales no haya presencia de estas enzimas en plasma,
pero es muy baja). En miocardio principalmente hay dos enzimas que se
liberan al plasma luego de un infarto: la lactato deshidrogenasa (LDH) y
la Creatina Kinasa (CPK). Estas son importantes en la clínica para
determinar si el paciente sufrió un infarto al miocardio. En la figura se
puede ver como durante las primeras 24 horas después de sufrir el
infarto, la cantidad de CPK en sangre aumenta hasta casi 6 veces lo
normal y disminuye rápidamente. La LDH también aumenta durante los
primeros 3 días y posteriormente va disminuyendo lentamente.

15.Mencione y explique 4 tipos de regulación de la actividad

enzimática.
Respuesta: Zimógenos
Los zimógenos son enzimas inactivas que se sintetizan con un
aminoácido extra NO GENERALMENTE CON MÁS DE UN AMINOÁCIDO
EXTRA. Al formar la estructura tridimensional no se forma sitio catalítico.
Son llamados pro enzimas o enzimas inactivas. Ejemplos de estas son las
enzimas digestivas y pancreáticas (Tripsinogeno, Quimiotripsinogeno) que
se sintetizan de forma inactiva y únicamente se activan cuando llegan al
lugar donde son necesarias. Se activan por medio de una enzima
proteolítica que separa el péptido extra y convierte el Tripsinogeno en
Tripsina, el Quimiotripsinogeno en Quimiotripsina, etc. La activación ocurre
en intestino, porque estas enzimas son proteolíticas y se sintetizan inactivas
para que no degraden las cosas que se encuentran de camino desde el
páncreas, sino, que actúen únicamente sobre las proteínas provenientes de
la dieta. ALGUNOS Los factores de la coagulación también son zimógenos,
circulan en el torrente sanguíneo de manera inactiva y en el momento y
lugar que son necesarios es donde se activan.
Inducción o Represión enzimática.
Esto se da a nivel de gen. Es una represión o inducción de la síntesis
enzimática. Es muy importante pero es un mecanismo muy lento pues para
estimular la síntesis de la enzima hay que hacer todo el mecanismo de
transcripción y traducción para que este lista. Este tipo de regulación se da
aunque sea lento. La inducción aumenta la síntesis y la represión la
disminuye.
Modificación Covalente
Es muy importante porque se da mucho, principalmente porque las
proteinkinasas A (PKA) producen una modificación covalente uniendo un
fosfato, por fosforilación, a otras enzimas. Siempre que se hable de
fosforilación, esta va a ser llevada a cabo por Kinasas y la
desfosforilación va a ser realizada por Fosfatasas. Para poder fosforilar
una enzima se requiere de aminoácidos que tengan en su estructura un
grupo hidroxilo (serina, treonina y tirosina). Cuando se fosforila la
enzima puede activarse o inactivarse, no existe una regla general. Las
proteinfosfatasas tienen la función opuesta a la de las proteinkinasas, es
decir, quitan grupos fosfatos y si una enzima estaba activa la inactivan y
viceversa. Es un proceso muy rápido.
Fijación no covalente de ligandos.
Es un ejemplo clásico de cuando se pueden unir sustancias a la
enzima y me modifican su acción pero posteriormente se pueden separar y
vuelve a quedar la enzima inactiva. Ejemplo: las proteinkinasas,
encargadas de fosforilar, tienen dos unidades represoras y dos unidades
catalíticas que cuando se encuentran unidas, la enzima esta inactiva.
Cuatro unidades de AMPc se unen a las unidades reguladoras, dos a cada
una, ocasionan un cambio conformacional y se liberan las unidades
catalíticas que pueden ir a realizar la función de fosforilar a otras enzimas y
proteínas. En el momento en el que el AMPc se separa de las partes
reguladoras, las partes catalíticas se vuelven a unir y la enzima vuelve a
quedar nuevamente inactiva. La unión entre el AMPc y las unidades
represoras es de tipo no covalente, por lo cual puede separarse casi en
cualquier momento.

16.Grafique el efecto de la concentración de sustrato sobre la

velocidad de reacción para una enzima alostérica.
Respuesta:

17.Explique el efecto de un modificador alostérico positivo y uno

negativo sobre la afinidad de la enzima alostérica por su
sustrato.
Respuesta:

Mecanismos Alostéricos:
Estas enzimas son diferentes a las de M y M porque tienen muchos
sitios activos en los cuales pueden actuar una serie de sustancias y pueden
modificar su actividad, es decir, pueden ser inhibidores o estimuladores.
 Cuando se grafica la
actividad de estas enzimas
sin los modificadores, la
curva que se obtiene es de
tipo sigmoideo (una S), lo
cual es muy diferente a la
curva de una de M y M. Es
una cinética de cooperación
en el sentido de que si hay
un compuesto que la
estimule, la presencia del
mismo, ocasiona un
aumento en la afinidad
enzima-sustrato.
Se habla de modificadores alostéricos positivos, si estimula la
actividad; y el modificador negativo, si la inhibe. La unión del modificador a
la enzima produce un cambio conformacional y aumenta la afinidad por un
determinado sustrato. En muchos casos se habla de que existen dos
estados conformacionales: uno estado R o relajado en el cual la enzima está
activa y un estado T o tenso que es cuando la enzima se encuentra inactiva.
Se dice que estos dos estados se encuentran en equilibrio, normalmente
una cierta cantidad de moléculas está en cada estado. La variación entre
estados se debe a la unión de los modificadores. El estado T es afín por los
modificadores negativos, y el R por los positivos, esto favorece la unión del
sustrato y la formación del producto; esto desplaza el equilibrio.
A bajas concentraciones de sustrato va a haber variaciones
considerables en la velocidad de reacción. También en este tipo de enzimas
se puede hablar de una Km. Entonces el modificador alostérico negativo va
a aumentar la Km, es decir, se necesita una mayor concentración para
llegar a la mitad de la velocidad máxima, y el modificador positivo la va
disminuir. Los modificadores se unen en sitios diferentes al catalítico. La
regulación que se da por medio de ATP y NADH es de este tipo, ya que el
ATP regula ciertas enzimas de vías metabólicas en las que se obtiene mucha
energía, la cual no es necesaria porque ya se tiene suficiente ATP. Este tipo
de modificación es reversible, los modificadores pueden unirse y separarse
dependiendo de las necesidades del organismo.