UNIVERSIDAD CENTRAL DE VENEZUELA FACULTAD DE CIENCIAS ESCUELA DE QUMICA

MANUAL DE CONSULTA RAPIDA DE LOS INSTRUMENTENTOS DEL LABORATORIO

Caracas Septiembre 2003

Tabla de Contenidos

CROMATGRAFO DE GASES PERKIN ELMER AUTO SYSTEM. (FIGURA 1) .................................. 4 Figura 1.- Cromatgrafo de gases Perkin Elmer Auto System .............................................................. 4 Instrucciones para el manejo del Cromatgrafo. ............................................................................................ 5 Figura 2.- Panel de Control del CG Perkin Elmer Auto System ................................................................ 6 CROMATGRAFO DE GASES CHROMPACK-9001. .................................................................................. 6 Figura 3.- Cromatgrafo de gases Chrompack-9001................................................................................. 6 Instrucciones para el manejo del Cromatgrafo. ............................................................................................ 6 INTEGRADOR .................................................................................................................................................. 7 Instrucciones para el manejo del Integrador................................................................................................... 7 Figura 4.- Integrador HP ........................................................................................................................... 8 ESPECTROFOTMETRO DE DOBLE HAZ PERKIN ELMER LAMBDA 3B. ........................................... 8 Instrucciones para el manejo del Integrador................................................................................................... 8 Figura 5.- Panel de Control del UV-Visible Perkin Elmer Lambda 3B ..................................................... 8 Figura 6.- Seccin donde se coloca las celdas de muestra y referencia .................................................... 9 ESPECTROFOTMETRO DE ABSORCIN Y EMISIN ATMICA PERKIN ELMER MODELO 3100. .......................................................................................................................................................................... 10 Figura 7. Espectrofotmetro de Absorcin y Emisin Atmica Perkin Elmer modelo 3100 ................... 10 Instrucciones para el manejo ........................................................................................................................ 10 ESPECTROFOTMETRO DE ABSORCIN Y EMISIN ATMICA VARIAN TECHTRON MODELO AA6. ................................................................................................................................................................. 12 Instrucciones para el manejo ........................................................................................................................ 12 Figura 8. Espectrofotmetro de Absorcin y Emisin Atmica Varian Techtron Modelo AA6 ............... 14 ESPECTROFOTMETRO DE INFRARROJO PERKIN ELMER MODELO 1310 . ................................... 14 Instrucciones para el manejo ........................................................................................................................ 14 Figura 9. Espectrofotmetro de Infrarrojo Perkin Elmer Modelo 1310 .................................................. 15 Figura 10.- Celdas desmontables de IR ................................................................................................... 21

INTRODUCCION
Este manual fue realizado con la idea de familiarizar y suministrar informacin bsica sobre los equipos disponibles hasta el momento en el laboratorio de instrumental analtico: 1. Cromatografa de Gases. Cromatgrafo de gases Perkin Elmer Auto System. Cromatgrafo de gases Chrompack-9001. 2. Espectroscopa de Absorcin Molcular en el UV-Visible. Espectrofotmetro de UV-Visible de doble haz Perkin Elmer Lambda 3B. 3. Espectroscopa Atmica basada en la Atomizacin con Llama. Espectrofotmetro de Absorcin y Emisin Atmica Varian Techtron Modelo AA6. Espectrofotmetro de Absorcin y Emisin Atmica Perkin Elmer modelo 3100. 4. Espectroscopa de Infrarrojo. Espectrofotmetro de Infrarrojo Perkin Elmer Modelo 1310 .

MANUAL DE CONSULTA RAPIDA

CROMATGRAFO DE GASES PERKIN ELMER AUTO SYSTEM. (FIGURA 1) - Detector de Ionizacin a la Llama ( FID ). - Gas portador: N2 - Columna empacada. Especificaciones de la columna empacada: (variable) Fase estacionaria: Pelcula lquida: 5% Carbowax 20M. Soporte slido: Chromosorb G, AW DMCS 80/100 ALLTECH # 8011/2 La materia prima para la mayora de los soportes de cromatografa de gases es la diatomita, tambin denominada tierra de diatomceas. Chromosorb G: para separar compuestos polares. Por su baja rea superficial y sus caractersticas de dureza y resistencia a la manipulacin es un posible y adecuado sustituto del Chromosorb W. Debido a su menor superficie y densidad elevada, El Chromosorb G se utiliza con una impregnacin ms baja de la fase lquida. Una carga de 5% de fase lquida sobre el Chromosorb G corresponde al 12% en el Chromosorb W.

Figura 1.- Cromatgrafo de gases Perkin Elmer Auto System

Instrucciones para el manejo del Cromatgrafo. 1. Abrir las bombonas de gases de aire, hidrgeno y nitrgeno. 2. Encender el aparato en el interruptor N. 3. Colocar la temperatura del detector, 200 C, para ello presionar la tecla (DET TEMP), asignar la temperatura y (ENTER). 4. Asignar la temperatura de trabajo del puerto de inyeccin, tambin 200 C, para ello presionar la tecla (INJ TEMP), asignar la temperatura y (ENTER). 5. Asignar la temperatura de la columna a 60C ( temperatura inicial) para ello presionar la tecla (OVEN TEMP), asignar la temperatura y (ENTER). 6. Despus de asignar las temperaturas, encender el detector. Para ello las vlvulas de H2 y aire deben estar cerradas, luego abrir la vlvula de H2 en el sentido contrario a las agujas del reloj. Encender el detector para ello se observa el voltaje del detector presionando la tecla (AUTOZERO), (1) y (ENTER). Colocar el encendedor sobre la salida del detector y presinalo ligeramente hasta observar un reflejo de luz roja sobre la superficie metlica de la salida del detector. Seguidamente rota en el sentido contrario a las agujas del reloj la vlvula de aire poco a poco hasta que escuches una pequea explosin la cual indica que el detector esta encendido. Para verificar que el detector esta encendido debes observar si existe voltaje en el detector y colocando una pipeta en la salida del mismo (si el vidrio esta empaado de vapor de agua, el detector est encendido). Si no, vuelve a intentar el procedimiento para encenderlo. 7. Si se requiere programacin de temperatura para obtener una mejor resolucin de las bandas cromatogrficas: Asignar la temperatura 1 con la tecla (OVEN TEMP) y luego (ENTER). Asignar el tiempo 1 con la tecla (TIME) y luego (ENTER). Asignar la rampa de calentamiento con la tecla (RATE) a un valor de 42/min y (ENTER). Asignar la temperatura 2 con la tecla (OVEN TEMP) y luego (ENTER). Asignar el tiempo 2 con la tecla (TIME) y luego (ENTER). 8. Para que la programacin de temperatura se ejecute despus de la inyeccin debes presionar la tecla (RUN). 9. Al terminar la jornada de trabajo: Apagar el detector para ello presionar las teclas (AUTOZERO), (0) Y (ENTER). Apagar la temperatura del detector para ello presionar las teclas (DET TEMP), (0) Y (ENTER). Apagar la temperatura del puerto de inyeccin para ello presionar las teclas (INJ TEMP), (0) Y (ENTER). Apagar la temperatura de la columna para ello presionar las teclas (OVEN TEMP), (0) Y (ENTER). Esperar 15 min hasta que la temperatura de la columna halla disminuido hasta 25C. Cerrar las

bombonas de aire, H2, y N2, y aire. Cerrar las perillas P y S de los flujos de gases H2 y aire que entran al detector. Apaga el instrumental en el suiche N.

Figura 2.- Panel de Control del CG Perkin Elmer Auto System

CROMATGRAFO DE GASES CHROMPACK-9001. Posee dos tipos de detectores: Un detector de Ionizacin a la Llama (FID ) y Un detector de Conductividad Trmica (TCD). Gas portador: N2 Columna capilar.

Figura 3.- Cromatgrafo de gases Chrompack-9001 Instrucciones para el manejo del Cromatgrafo.

1. Abrir las bombonas de gases de aire, hidrgeno y nitrgeno. 2. Prender ambos switches. 3. Colocar en pgina 1 las condiciones de operacin tales como temperatura del detector (250C), temperatura del puerto de inyeccin ( 250C) y temperatura de la columna (80C). 4. Cuando se llega a las condiciones establecidas ( se observa en STATUS) y el indicador se coloca en verde, se enciende el detector FID. Para ello se emplean los tres controles de la izquierda : aire, make up e hidrgeno de la siguiente manera: 5. Se abre completamente la llave de aire. Se abre completa la llave de hidrgeno. 6. Se verifica que el make up este cerrado. Se hace la ignicin con el switche de encendido. Se verifica que el detector este prendido observando el voltaje del mismo, esto puede verse en la en la pagina de STATUS dndole a la flecha dos veces. El voltaje debe subir notablemente sobre 0,9 (El detector no necesariamente suena al prenderse) 7. Una vez verificado se abre el make up completamente. Se observa que el voltaje sube a 15 al menos. Dejar estabilizar el voltaje antes de comenzar a trabajar. 8. Para apagar: se cierran los gases en el equipo, se apagan los switches del equipo y luego se cierra el gas de las bombonas. Notas de Inters: El volumen de inyeccin apropiado es de 0,5 uL . El rango permite evitar la saturacin del pico. Se cambia en la pag 2, en la parte del electrmetro y los nmeros pueden ser del 1-20, 2 o 3 es adecuado. INTEGRADOR Instrucciones para el manejo del Integrador 1. 2. 3. 4. 5. 6. Pulsando list list el integrador informa las condiciones de su operacin. La atenuacin del pico se fija en el integrador. Colocando attn x enter. X tpica entre 5-8. A menor atenuacin mayor es el tamao del pico y viceversa. El cero del papel se coloca: cero 0 enter. El ch sp permite modificar la velocidad del papel: 1 indica una velocidad de 1 cm por min. Cuando se desea medir el ancho del pico este parmetro debe modificarse para que la medicin no tenga tanto error. Se modifica colocando en el integrador ch sp x enter. X debe probarse ( 2 o 3). Si el sistema presenta mucho ruido puede disminuirse con el thrh.

7. 8.

Para registrar el cromatograma despus de hacer la inyeccin pulsar el botn star del integrador. Al terminar el cromatograma, si no necesita la informacin del rea de pico, pulse stop, scape. De lo contrario pulse solo stop.

Figura 4.- Integrador HP ESPECTROFOTMETRO DE DOBLE HAZ PERKIN ELMER LAMBDA 3B. Instrucciones para el manejo del Integrador 1. 2. 3. 4. En la parte de atrs encender el equipo. Encender la lmpara en los botones (UV on) y (Vis on). Permitir 30 min de calentamiento. Hacer la Correccin de Fondo con un blanco de agua y la referencia de agua con la finalidad de calibrar el equipo. 5. Presione la tecla SAFE MEN, hasta que el display indique C. 6. Presione la tecla RUN.

Figura 5.- Panel de Control del UV-Visible Perkin Elmer Lambda 3B

Barrido de Longitudes de Onda. 7. Encender la computadora y el monitor. 8. Teclear la clave PECSS + Enter. 9. Teclear (F10). 10. Teclear SCAN. 11. Se hace un barrido con agua, da una lnea continua en cero absorbancia. 12. Colocar el rango de longitudes de onda 850 a 350nm, teclear enter. 13. Colocar el rango de las absorbancias 0,1 a 0,1, teclear (enter) 14. Luego hacer el barrido de longitudes de onda del patrn, para realizar un nuevo barrido 15. Teclear (ESCAPE) (F10). 16. Colocar el rango de longitudes de onda, dependiendo del color reflejado, teclear (enter) 17. Colocar el rango de las absorbancias, teclear (enter)

Figura 6.- Seccin donde se coloca las celdas de muestra y referencia Visualizacin de la Longitud de Onda Mxima 18. Una vez realizado el barrido, presione las teclas (ESC) (HOME) 19. SI EL ESPECTRO NO QUEDO BIEN PRESIONAR LAS TECLAS 20. (F9), (X) Y (ENTER) Impresin del Espectro. 21. Presionar la tecla ON LINE en la impresora. 22. En la computadora presionar la tecla PRINT SCREN. Salir del Programa . 23. Presionar las teclas (STOP) + (ENTER). 24. Escribir cd..

Medidas de la Longitud de Ondas Fijas. Modo absorbancia. 1. 2. 3. 4. Seleccione ABS oprimiendo la tecla del modo. Seleccione la longitud de onda deseada y oprima la tecla de GOTO . Inserte la muestra del blanco y la referencia apropiada y presione la tecla AUTOZERO. Luego medir la absorbancia del patrn.

ESPECTROFOTMETRO DE ABSORCIN Y EMISIN ATMICA PERKIN ELMER MODELO 3100.

Figura 7. Espectrofotmetro de Absorcin y Emisin Atmica Perkin Elmer modelo 3100 Instrucciones para el manejo
Modo de absorcin.

1. Encender el equipo en el interruptor ON. 2. Colocar la lmpara de ctodo hueco y fijar la longitud de onda de trabajo y el paso del haz en 0,2 o 0,7 3. Abrir la bombona de acetileno y encender el compresor de aire. 4. Teclear (Param Entry). Colocar el valor de la corriente en 10 mA. (enter) y fijar el tiempo de integracin en 0,2 (enter). 5. Hallar el valor de la mxima seal que puede detectar el fotomultiplicador con la radiacin que emite la lmpara para ello se hace lo siguiente: Teclear (AA) (Energy). Variar la perilla de la longitud de onda. Variar las perillas de la lampara. Cuando se satura la seal dar a (ganancia). Verificar que la trayectoria del haz radiacin pase por el centro de un papel de filtro.

6. Luego de optimizada la radiacin encender la llama. Para ello girar la perilla hasta aire Mantener el botn rojo presionado hasta que encienda la llama. Asignar los flujos de aire y acetileno si la llama es reductora u oxidante. Por ejemplo si la llama es oxidante la relacin oxidante/combustible es 7/2. 7. Se halla la posicin de la llama ptima para la atomizacin para ello se utiliza el patrn de menor concentracin. Teclear el botn (AA) (Continuos) de esta manera se mide la absorbancia en modo continuo. Aspirar gua destilada y teclear (A/Z), autozero. Con la manguera de succin sumergida en la solucin del patrn mover las diferentes posiciones de la llama (hacia arriba, lateral, etc) y ver el valor de la absorbancia, la posicin ptima de las perillas debe dar el mayor valor de la absorbancia para el patrn de menor concentracin. Luego variar lentamente los flujos de oxidante y combustible hasta obtener el valor mximo de la absorbancia. Finalmente, hallar la posicin ptima apagar la llama girar el botn en posicin off y verificar el paso del haz de radiacin. 8. Luego de optimizada todas las condiciones medir las absorbancias de todos los patrones y la dilucin de la muestra. Para ello utilizar el modo de integracin de modo que: 9. Teclear (Param Entry), Colocar int time (1) enterData Presionar la tecla Ready para obtener el valor de absorbancia. 10. Apagar el equipo. Para apagar la lampara, teclear: (Param Entry) (0) (enter) Cerrar el gas y apagar el compresor. Sacar y guardar la lmpara.

Esquema resumen.
HALLAR LA MAXIMA SEAL QUE EL FOTOMULTIPLICADOR DETECTA POR LA RADIACION EMITIDA POR LA LAMPARA

PRENDER LA LAMPARA

ENCENDER LA LLAMA

MEDIR LAS ABSORBANCIAS

HALLAR LA POSICIN OPTIMA DE LA LLAMA HASTA OBTENER LA ATOMIZACIN MS EFECTIVA UTILIZAR PREFERIBLEMENTE EL PATRON DE MENOR CONCENTRACIN.

Modo de emisin.

1. 2. 3. 4.

Colocar la longitud de onda de trabajo. Teclear el botn (Em). Encender la llama. Colocar el vaso con agua y teclear (A/Z), autozero.

5. 6. 7. 8. 9. 10.

Con el patrn de mayor concentracin hallar el mximo valor de emisin el cual debe ser cercano a 1. Teclear (Em) (Energy).Si no se observa seal teclear el botn (Gain). Medir el valor de Emisin en modo continuo del patrn de mayor concentracin para ello teclear (Em) (Continuos). Variar la perilla de la longitud de onda hasta que el valor de la emisin aumente. Medir el valor de emisin de todos los patrones y la dilucin de la muestra. Para ello utilizar el modo de integracin como se explico anteriormente.

Medidas para la construccin de la curva de calibracin. 1. 2. 3. 4. Luego de optimizada las condiciones se mide el valor de la seal (absorbancia o emisin) del patrn de mayor concentracin y el patrn de menor concentracin. Se mide la seal (absorbancia o emisin) de la muestra. Se busca la dilucin ptima de la muestra hasta que la seal este aproximadamente cercana al valor promedio de los patrones de mayor y menor concentracin. Luego de obtenida la dilucin ptima de la muestra medir simultneamente bajo las mismas condiciones la seal ( absorbancia o emisin) de todos los patrones y la dilucin ptima de la muestra por triplicado en modo integracin para ello presionar la tecla (READ) tres veces.

Nota: Es conveniente cuando se mide la seal de otra solucin de diferente concentracin medir antes el blanco del agua el cual debe dar cero seal, si este valor esta desajustado ajustar con la tecla (ZERO). ESPECTROFOTMETRO DE ABSORCIN Y EMISIN ATMICA VARIAN TECHTRON MODELO AA6. Instrucciones para el manejo
Modo de absorcin

1. 2. 3. 4. 5. 6.

Encender el equipo para ello pulsar los 3 teclas rojas denotadas como POWER. Colocar la lmpara de ctodo hueco en cualquiera de los 4 mdulos disponibles para la lmpara. Asignar el valor de la corriente para ello girar la perilla hasta el valor indicado. Colocar la longitud de onda de trabajo. Colocar el paso de la banda espectral. Abrir la bombona de acetileno y encender el compresor de aire. Hallar el valor de la mxima seal que puede detectar el fotomultiplicador con la radiacin que emite la lmpara para ello se hace lo siguiente: Teclear (TRANS) y la tecla DAMP en el modo (A). Verificar que el voltaje del fotomultiplicador este entre

450-500 Volts para ello presionar la tecla (GAIN). Variar la perilla de la longitud de onda hasta alcanzar el mximo valor de seal. Variar las perillas de la lmpara hasta alcanzar el mximo valor de seal. Cuando se satura la seal es decir cuando esta por encima de un valor de 100%T presionar la tecla (ZERO). Verificar que la trayectoria del haz radiacin pase por el centro de un papel de filtro. Luego de optimizada la radiacin encender la llama. Para encender la llama teclear el botn aire/acetileno y simultneamente presionar los botones (TEST FLOW) y (IGNITION). Asignar los flujos de aire y acetileno si la llama es reductora u oxidante. Por ejemplo si la llama es oxidante la relacin oxidante/combustible es 7/2. Se halla la posicin de la llama ptima para la atomizacin para ello se utiliza el patrn de menor concentracin. Pulsar los botones (ABS) y (A) de esta manera se mide la absorbancia en modo continuo. Colocar el vaso con agua y teclear (A/Z), autozero. Con la manguera de succin sumergida en la solucin del patrn mover las diferentes posiciones de la llama (hacia arriba, lateral, etc) y ver el valor de la absorbancia, la posicin ptima de las perillas debe dar el mayor valor de la absorbancia para el patrn de menor concentracin. Por ejemplo cuando se vara la posicin de la llama hacia arriba se observa que la absorbancia aumenta hasta que llega un momento que la absorbancia disminuye en ese instante se tiene la zona de la llama donde la atomizacin es ms efectiva de modo que se gira la perilla hasta obtener de nuevo el mximo valor de absorbancia. Luego variar lentamente los flujos de oxidante y combustible hasta obtener con el patrn el valor mximo de la absorbancia. Luego de hallar la posicin ptima apagar la llama para ello presionar el botn en posicin off y verificar el paso del haz de radiacin. Luego de optimizada todas las condiciones medir las absorbancias de todos los patrones y la dilucin de la muestra . Para ello utilizar el modo de integracin de modo que: Presionar la tecla (3) del modo integracin. Presionar la tecla Ready para obtener el valor de absorbancia.Para apagar la lampara, teclear: Girar la perilla del modulo de corriente en posicin off. Apagar el equipo para ello pulsar los botones rojos. Cerrar el gas y apagar el compresor. Sacar y guardar la lmpara.

7.

8.

9.

Modo de emisin.

11. 12. 13. 14. 15. 16. 17. 18.

Colocar la longitud de onda de trabajo. Teclear el botn (Emiss) y el botn (A) de modo continuo. Encender la llama. Colocar el vaso con agua y ajustar a cero emisin con la perilla (Curve Correct). Con el patrn de mayor concentracin hallar el mximo valor de emisin el cual debe ser cercano a 1. Medir el valor de Emisin en modo continuo del patrn de mayor concentracin con las teclas (Emiss) (A). Variar la perilla de la longitud de onda hasta que el valor de la emisin aumente. Medir el valor de emisin de todos los patrones y la dilucin de la muestra. Para ello utilizar el modo de integracin como se explico anteriormente.

IMPORTANTE: para ajustar a cero emisin con el agua no se utiliza la tecla (ZERO) sino la Perilla (Curve Correct). De modo que no utilizar la tecla ZERO.

Figura 8. Espectrofotmetro de Absorcin y Emisin Atmica Varian Techtron Modelo AA6

ESPECTROFOTMETRO DE INFRARROJO PERKIN ELMER MODELO 1310 . La fuente es un alambre de Ni/Cr Este instrumento es dispersivo de doble haz. El tipo de detector es piroelctrico. Instrucciones para el manejo a) Lo primero que se hace es una calibracin del espectrmetro con una lmina de poliestireno (compuesto con un espectro conocido), para ello se toma un espectro de dicho compuesto y se hace una correccin de las frecuencias de los espectros de la muestra. b) El manejo con el equipo es el siguiente: c) Presionar el botn Chart para ajustar el papel, luego se le da a los botones:

d) Presionar el botn de tiempo de corrida del espectro, hay dos opciones 3min o 12 min. e) Presionar el botn de expansin del espectro en el papel, hay dos opciones 1 (papel completo) o 0,5 (mitad del papel).

f) Presionar el botn Scan para empezar a correr el espectro, el nmero de ondas empieza en 4000 cm-1 automticamente. g) Si se quiere parar la corrida del espectro antes de que termine se hace lo siguiente: Presionar Scan. Presionar el botn Wave Number hasta 4000 cm-1 Presionar los botones:

h) Se varia la atenuacin (con un dispositivo llamado atenuador) y la ganancia ( tecla Gain Check) hasta obtener el mejor espectro, es decir con mayor resolucin. Por ejemplo las condiciones ptimas del equipo cuando se toma el espectro del poliestireno son las siguientes: atenuacin 1 y ganancia 62.

Figura 9. Espectrofotmetro de Infrarrojo Perkin Elmer Modelo 1310 Preparacin de muestras para su estudio por infrarrojo. La mayora de las tcnicas de preparacin de muestras para estudios por espectroscopia infrarroja, requieren la contencin del espcimen en una celda o su depsito sobre una placa plana (frecuentemente denominada placa salina o ventana). En ambos casos, es necesario que los materiales utilizados sean transparentes en el intervalo espectral donde se va a trabajar. Muchos materiales transmiten la radiacin infrarroja. El grado de transparencia y su rango espectral (el intervalo de frecuencias para el cual son transparentes) determinan la utilidad de un material para una aplicacin dada. Los materiales comerciales ms utilizados son KBr, KCl, NaCl y CsI. Estos materiales en particular son usados debido a su amplio rango de transmisin y precio moderado. Todos son higroscpicos y deben almacenarse en desecadores cuando no estn en uso. Un material similar, pero insensible al agua, es el AgBr el cual, no obstante, es sensible a la luz y debe resguardarse de ella tanto como sea posible.

Existen muchos materiales que pueden emplearse cuando existen problemas de ataque qumico por parte de la muestra. El CaF2, BaF2, presentan alta resistencia mecnica, insensibilidad al agua y resistencia a los cidos y a las bases, si bien su rango de transmisin es algo limitado. El ZnS, ZnSe y el CdTe presentan propiedades similares y rangos espectrales algo ms amplios, pero tiene ndices de refraccin elevados ocasionando prdidas considerables de radiacin por reflexin y ciertos artificios espectrales (franjas de interferencia) lo cual restringe su empleo.

Tcnicas para muestras slidas. Pastillas. La muestra, finamente dividida, se mezcla con un material adecuado denominado matriz (usualmente bromuro de potasio) y se somete a presin dentro de un troquel de metal. El resultado es una pastilla slida en la cual las partculas de la muestra permanecen en suspensin. Tpicamente, se requieren entre 0,5 mg y 2,0 mg de muestra. Esta tcnica es adecuada para mediciones cuantitativas ya que se puede controlar en gran medida la preparacin de la pastilla (peso de la muestra, peso de la matriz, presin aplicada y tiempo de compresin). En el comercio se encuentran disponibles troqueles de varios tamaos, adecuados para preparar pastillas con dimetro de 13 a 0,5 mm. Usualmente, la compresin de la muestra se realiza mediante una prensa hidrulica, aunque existen algunos dispositivos manuales ms econmicos. El KBr es el material ms frecuente utilizado para la matriz si bien estn disponibles otros haluros como KCl, CsI y AgI. L aescogencia del material depende de la regin espectral de inters, el ndice de refraccin de la muestra y la posible interaccin de la muestra con la matriz. El KBr y el KCl no pueden utilizarse si la muestra contiene cantidades apreciables de agua ya que estas sales son solubles en agua, por ello se debe de guardar en el desecador y colocar una porcin en la estufa a 100C antes de usar. Para obtener una pastilla con una buena transmisin de radiacin se requiere que la muestra y la matriz presentan ndices de refraccin muy similares. Tanto el KCl como el KBr tienen un ndice de refraccin adecuado para muestras orgnicas. Si el ndice de refraccin de la muestra y la matriz difieren sensiblemente aparecen distorsiones en el espectro. Cuando en el laboratorio se obtiene un espectro distorsionado y no se puede encontrar causa aparente, debe sospecharse de los ndices de refraccin y tratar con otra matriz. Preparacin. El primer paso consiste en moler la muestra hasta obtener un polvo muy fino. Idealmente, el tamao de las partculas de la muestra deben ser menor que la mas corta longitud de onda que vaya a utilizar (aproximadamente 2 micrmetros). Si la muestra no logra molerse lo suficiente, el espectro presentar poca resolucin y bandas distorsionadas.

Molienda seca de muestras mortero: Se colocan 10 a 15 mg de muestra en un mortero de gata y se muelen mediante un vigoroso movimiento de rotacin. Se contina la molienda hasta lograr una apariencia muy fina (similar al talco). Si la muestra est sujeta a degradacin por efecto del calor es recomendable interrumpir la molienda varias veces para evitar el exceso de calentamiento. Debe recordarse que al molerse un material se incrementa su superficie y se favorece la absorcin de agua atmosfrica lo cual puede forzar a desecar la muestra despus de su molienda. Molienda hmeda mediante mortero: Algunas muestras muy duras o difciles de manejar pueden molerse mejor si se humedecen con un solvente adecuado. Este solvente debe ser fcil de evaporar e incapaz de reaccionar o de alguna manera alterar a la muestra. Frecuentemente se utiliza etanol absoluto grado analtico o espectroscopio. El procedimiento es similar al ya descrito pero la muestra se le agregan varias gotas de solvente directamente en el mortero previo a su molienda. A veces puede ser necesario repetir las adiciones de solvente durante la molienda hasta lograr el tamao de partculas deseado. Debe permitirse la evaporacin total del solvente antes de preparar la pastilla. El material para la matriz de la pastilla se muele por separado y se deseca en estufa con anterioridad a su uso. La cantidad de matriz para una pastilla depende del tamao de la misma, usualmente se utiliza ente 150 y 200 mg para un troquel 11-13 mm. El contenido de muestra es de 1% a 2%, variando un poco dependiendo de de su naturaleza. Para garantizar la homogeneidad de la mezcla de la muestra y la matriz se recomienda el siguiente procedimiento: se coloca la cantidad de muestra requerida en un mortero y se agrega la matriz en porciones de unos 10 a 20 mg, usando la mano de mortero para mezclar mediante un movimiento circular. Se siguen agregando porciones de matriz y mezclando hasta completar el peso total deseado. Este mtodo favorece la formacin de una mezcla homognea relativamente poco hmeda. Si la muestra soporta el calentamiento, se puede desecar la mezcla en la estufa por una hora antes de preparar la pastilla. La compresin es el paso final para completar la pastilla. Para ello se usa un troquel ( Fig 3.14) en el cual se deposita la muestra tratando de formar una masa pareja y sin aglomeraciones. Esto se consigue colocando el mbolo de compresin y, con la mano, haciendo presin moderada sobre la muestra a la vez que se imprime un movimiento de rotacin. Posteriormente, se aplica la presin necesaria para la formacin de pastilla (unas 5-8 ton) durante unos 5-10 min. Si se dispone de una lnea de vaco es recomendable evacuar la mezcla dentro del troquel por 20-30 segundos antes de aplicar presin.

Suspensiones. Una alternativa a la preparacin de pastillas es la suspensin de la muestra, finamente dividida, en un aceite transparente en el infrarrojo. Esta tcnica puede remplazar a las pastillas para muestras cerosas difciles de moler o cuando existe interaccin de la muestra con la matriz del haluro. Los aceites empleados usualmente son el aceite mineral ( Nujol) y el perfluorokeroseno (Fluoroluble). Debido a que estos productos Absorben en el infrarrojo los espectros de las

muestras quedan afectados presentando bandas adicionales correspondientes a la matriz. Siempre es necesario indicar cuando una muestra se tom mediante la tcnica de suspensiones ya que las bandas adicionales pueden ser mal interpretadas como pertenecientes a la muestra. Preparacin de la suspensin. a) b) Moler una pequea cantidad de muestra como se indico anteriormente para la preparacin de pastillas. Colocarla en un mortero Agregar una gota del agente seleccionado para la suspensin ( Nujol, Fluorolube, etc) y mezclar usando la mano de mortero. Agregar una segunda gota y mezclar de nuevo. Continuar hasta obtener una suspensin con apariencia y consistencia de crema. Con una esptula plstica transferir la suspensin a una placa de KBr o de otro material adecuado para la toma del espectro infrarrojo. Con una segunda placa del material seleccionado, se presiona la suspensin y mediante rotacin de las placas se dispersa hasta formar una pelcula plana. Se colocan las placas en un portamuestra y se toma el espectro infrarrojo. Pelculas de evaporacin. En esta tcnica la muestra se disuelve o suspende en un solvente voltil para luego depositarla sobre una placa de KBr o similar. Despus de la evaporacin del solvente se obtiene una pelcula delgada que puede ser usada para su estudio por infrarrojo. La calidad del espectro obtenido por esta va es variable. Como ya se indic para las tcnicas precedentes el tamao de la partcula de la muestra debe ser igual o menor que las longitudes de onda aplicada. Ya que es imposible controlar el tamao de los cristales que se forman al evaporar el solvente, las muestras cristalinas no suelen dar buenos espectros por esta tcnica. Contrariamente, los plsticos, gomas y resinas suelen dar excelentes espectros. Preparacin de la pelcula. a) Seleccionar un solvente adecuado ( capaz de disolver la muestra y fcil de evaporar) y disolver una pequea cantidad de muestra cuidando de no preparar una solucin muy diluida. Se coloca una gota de solucin en una placa de KBr o similar tratando de esparcirla sobre una superficie. Permitir secar y colocar otra gota. Repetir el procedimiento hasta formar una pelcula apreciable. Evaporar totalmente los rastros de solvente, bien sea con estufa, pistola de aire o vaco antes de tomar el espectro infrarrojo.

c) d) e)

b)

c)

d)

El proceso de evaporacin del solvente juega un papel decisivo sobre la calidad de la pelcula que se forma. En este sentido, es preferible una evaporacin lenta ya que suele formar depsitos ms homogneos. La aparicin de pelculas con anillos concntricos es una caracterstica de una evaporacin acelerada. Tcnicas para muestras lquidas.

Pelculas capilares. Cuando es suficiente o necesario que el paso de radiacin a travs de la muestra sea pequeo este es un mtodo adecuado. Tpicamente este es el caso de muestras puras (no en solucin). Dado que es imposible controlar el grosor de la pelcula que se forma, esta tcnica es adecuada solamente para estudios cualitativos. Igualmente, est restringida a lquidos con una volatilidad moderada. Preparacin de la pelcula. Se requiere seleccionar dos placas de un material adecuado, tanto por su estabilidad qumica frente a la muestra como por su intervalo de transmisin espectral. Con un gotero se coloca una o dos gotas sobre una de las placas y la segunda placa se coloca encima imprimindose un movimiento de rotacin a la vez que se presiona tratando de que la pelcula liquida se extienda y quede libre de burbujas. Posteriormente, se toma el espectro colocando el montaje de las dos placas en un portamuestra adecuado (Debe tenerse precaucin al aplicar presin ya que los materiales usados en la confeccin de las placas para infrarrojo son bastante frgiles). Alternativamente, si el espectro muestra seales muy dbiles se debe preparar la muestra de nuevo utilizando mayor cantidad y tratando de no reducir mucho el grosor de la pelcula. En el caso de lquidos viscosos puede utilizarse una sola placa para su preparacin. En este caso se usa un tubo capilar o una barra de vidrio para esparcir la muestra y formar la capa. Generalmente, si se deja reposar la pelcula se alisa bastante, lo cual es necesario para obtener un buen espectro. Este procedimiento es adecuado cuando se requiere desecar un poco la pelcula o se debe eliminar solvente ya que al no estar aprisionado entre dos placas se facilita la evaporacin de voltiles. Celdas para lquidos. Cuando se requiere trabajar con lquidos voltiles o soluciones, o es necesario controlar el paso de radiacin a travs de la muestra se utilizan celdas como portamuestras. En una forma muy simplificada se pueden considerar estas celdas como dos placas paralelas transparentes en el infrarrojo con un espaciador entre ellas. Existen en el mercado dos versiones: las celdas desmontables y las celdas selladas. Celdas desmontables. Como su nombre lo indica este tipo de contenedores, pueden ser totalmente desarmado en sus componentes individuales, lo cual lo hace muy flexibles ya que con un juego de placas de diferentes materiales adecuados para trabajar en el infrarrojo y un juego de espaciadores, es posible trabajar con prcticamente cualquier muestra lquida. Son adecuadas para trabajar tanto cualitativa como cuantitativamente y preferibles a las celdas selladas para lquidos viscosos o materiales corrosivos. En la Figura 10 se muestra un

diagrama de una celda comercial desmontable. El llenado de estas celdas se realiza mediante una jeringa. Modo de limpiar las placas de KCl o NaCl. Las placas de KCl o NaCl se limpiaran antes y despus de aplicarle la muestra para ello se aplicara el siguiente procedimiento: a) Colocar una servilleta limpia en el mesn y ubicar sobre ella una de las placas de KCl o NaCl. b) Se agrega acetona encima de la placa, se sujeta la placa por los extremos con el dedo pulgar e ndice y se frota de una manera suave con movimientos circulares sobre la superficie de la servilleta . Este procedimiento se repite para ambas caras y ambas placas. c) Remover la muestra con una servilleta una vez aplicada Entonces se limpiara siguiendo el procedimiento indicado en la parte superior.

Modo de atornillar la celda de Ir para lquidos. a) Se introduce uno de los tornillos parcialmente en la celda, luego los otros dos de la misma forma. b) Posteriormente se ajustan suavemente los tres tornillos sin ejercer presin. c) Nota: cuidar no ejercer presin, ni atornillar demasiado : de lo contrario las placas se rompern. Celdas selladas. Este tipo de celdas es muy parecida en su forma y operacin a la celda desmontable con la diferencia de que las ventanas y el separador estn sellados formando una sola pieza. Esto presenta la ventaja de permitir manejar muestras muy voltiles que tenderan a escurrir en una celda desmontable. Igualmente la solidez del montaje mantiene constante e invariable el paso de la celda, lo cual la hace adecuada para el trabajo cuantitativo de la ms alta precisin y repetibilidad. Sin embargo, son muy difciles de lavar y muy costosas por lo cual no se recomiendan para muestras corrosivas que puedan atacarlas ni para muestras viscosas que seran muy difciles de evacuar. En resumen el procedimiento de preparacin de muestras slidas y lquidas en el Laboratorio de Instrumental Analtico es el siguiente: Preparacin de muestras lquidas para su estudio por IR. Tcnica de la pelcula capilar. Procedimiento: a) Seleccionar las dos placas de KBr y limpiar con acetona como se explico anteriormente. b) Con un gotero se coloca una o dos gotas sobre una de las placas. c) Se coloca la segunda placa sobre la muestra y apretando suavemente se le imprime un ligero movimiento de rotacin tratando de aplanar la pelcula y de que no queden burbujas de aire atrapadas en la muestra.

d) Se colocan las dos placas en un portamuestra adecuado y se toma el espectro IR . Si el espectro muestra seales muy dbiles se debe preparar la muestra de nuevo utilizando mayor cantidad y tratando de no reducir mucho el grosor de la pelcula. Preparacin de muestras slidas para su estudio por IR. Tcnica de la Pastilla. Procedimiento: a) Se coloca el KBr previamente pulverizado en la estufa a 100C por aproximadamente hora para eliminarle el agua absorbida. b) En un mortero de agata se colocan 2-3 mg de muestra molida y se agrega una porcin de unos 20 mg de KBr y usando la mano de mortero se mezclan ntimamente hasta lograr una apariencia muy fina (similar al talco). Se repite el procedimiento hasta agregar 200 mg de KBr. c) Se prepara la pastilla en un troquel luego se coloca el troquel en la prensa hidrulica y se aplica la presin necesaria para la formacin de la pastilla (unas 5-8 ton) por 2 minutos. d) Se libera presin y se desmonta la pastilla. e) Se monta la pastilla en un soporte adecuado y se toma el espectro IR.

Figura 10.- Celdas desmontables de IR