Relatrio

Hematologia ClnicoEscola Superior de Tecnologias da Sade de Coimbra

- Laboratorial Eritrcito & Plaqueta

Ana Vieira Turma B ACSP 2 ano 2008/2009

Fundamentos tericos Constituio do sangue . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 3 Medies em Hematologia . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 5 Glbulo vermelho Eritropoiese. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .6 Eritrcitos Malria. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .8 Membrana do eritrcito . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 9 Hemoglobina. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .10 Talassmias. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 11 Drepanocitose. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .15 Amenias. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 16 Normoctica Microctica Macroctica Hereditrias Plaqueta Megacariocitopoiese . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 18 Hemostase. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 20 Patologias plaquetares. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 21 Fundamentos Terico-Prticos Glbulo vermelho Esfregao de sangue perifrico. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .23 Coloraes. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .24 May-Grunwald Giemsa Colorao de Perls Colorao de Wright. Morfologia do sangue perifrico. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 27 Hemograma. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 32 Caso clnico . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .36 Micro-hematcrito. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 38 Plaqueta Testes de funo hemosttica. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 39 Tcnicas de coagulao. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 40 Tempo de Protrombina (TP) Tempo de Tromboplastina Parcial Activada (TTPA) Buffy-Coat . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 41 Bibliografia. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .42
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Constituintes do sangue

O sangue constitudo por eritrcitos, leuccitos e plaquetas que se encontram suspensas num lquido, o plasma. Plasma: - constitui 55% do volume sanguneo; - composto por 90% de gua, sendo o resto constitudo por sais minerais, glcidos, lpidos, protenas, vitaminas e hormonas; - o meio de armazenamento e transporte dos factores de coagulao. Eritrcitos: - forma de um disco bicncavo com 7-9m de dimetro; - especializados para transporte de oxignio; - tm origem na medula vermelha; - sem ncleo; - actividade metablica apenas para assegurar o bom funcionamento da hemoglobina e da plasticidade da membrana; - morre aps 65-120 dias da sua formao. Leuccitos: - devido ao facto de serem muito elsticos conseguem atravessar as paredes dos capilares sanguneos atravs do processo denominado diapedese;
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- envolvem as bactrias e outros corpos estranhos ao organismo atravs da fagocitose (processo que consiste na produo de pseudpodes para englobar as bactrias); - origem na medula vermelha dos ossos, rgos linfticos (timo e bao) e gnglios linfticos; - apresentam ncleo com forma diversificada; - classificados quanto presena de estruturas granulares ou no. Neutrfilo: possui um ncleo denso e lobado (3-5 lbulos). No tem nuclolos aparentes. Caracterizado por ter um citoplasma abundante ligeiramente acidfilo com grnulos pequenos, de cor rosada. Tem a capacidade de fazer diapedese e fagocitose. Eosinfilo: mesmo tamanho do neutrfilo. Possui um ncleo com 1-2 lbulos. No citoplasma tem grnulos de cor alaranjada. Tambm tem a capacidade de fazer diapedese. Basfilo: mais pequeno que os apresentados anteriormente. Possui grnulos azuis-escuros que ofuscam o detalhe do ncleo. Tem a capacidade de libertar mediadores qumicos, como a histamina, por exemplo. Moncito: possui apenas um ncleo, plido, com a cromatina condensada, em forma de rim. O citoplasma abundante com cor cinzenta. Tem propriedades fagocticas.

Linfcitos: tm um tamanho varivel, mas so mais pequenos que todas as clulas anteriores. Possuem um ncleo redondo com estrutura irregular. O citoplasma pouco abundante e basoflico.

Nota: todas as fotografias apresentadas anteriormente so esfregaos de sangue perifrico corados por colorao de MayGrnwald Giemsa

Plaquetas: - constitudas essencialmente por protenas; - desempenham um papel muito importante na coagulao do sangue; - forma de disco convexo - so anucleadas.

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Medies em Hematologia O Hemograma um exame que avalia as clulas sanguneas de um paciente no que respeita ao seu nmero e morfologia. O exame requerido pelo mdico para diagnosticar ou controlar a evoluo de uma doena. Relativamente avaliao quantitativa esta pode ser realizada por contadores automticos que se baseiam nos seguintes mtodos: impedncia (principal), ptica,
Contador de clulas automtico

espectrofotometria e fluorescncia. Os contadores automticos por impedncia possuem uma cmara de pr-anlise, uma abertura de impedncia, um elctrodo e uma cmara ps-anlise. Esta metodologia permite diferenciar os constituintes pela diferena de intensidade do impulso elctrico, isto , as plaquetas sero as que tm um menor impulso elctrico, enquanto que os leuccitos so o que tm maior. Sendo assim, possvel diferenciar os constituintes slidos do sangue atravs do seu tamanho, uma vez que o nmero de impulsos indica a quantidade de partculas que passam atravs da abertura, e a amplitude dos impulsos proporcional ao volume das mesmas partculas. Este mtodo no consegue fazer a distino entre, por exemplo, plaquetas grandes e eritrcitos pequenos, uma vez que se baseia apenas no volume celular. Para ultrapassar esta questo utiliza-se em simultneo o mtodo ptico. Os contadores automticos que utilizam o mtodo ptico baseiam-se na disperso de luz do raio laser que cada clula provoca quando passa por este. Para tal, possuem uma fonte laser, um injector de amostra e uma lente que avalia a disperso da luz laser. Esta disperso vai estar relacionada com a morfologia das clulas, ou seja, os leuccitos vo apresentar uma menor disperso da luz relativamente s outras clulas. Atravs deste mtodo pode-se comparar complexidade com o tamanho da clula. Os leuccitos apenas so contados depois da lise dos eritcitos, enquanto que a hemoglobina quantificada por espectrofotometria. A metodologia de fluorescncia baseia-se no mesmo fundamento do sistema ptico, mas acrescenta um marcador de fluorescncia.

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Glbulo vermelho Eritropoiese Normoblstica Formao de eritrcitos na medula ssea, que inclui um conjunto de transformaes das clulas da srie eritrocitria, por fases sucessivas, desde a clula-me (proeritroblasto), passando pelo eritroblasto at ao eritrcito adulto, com diminuio do volume celular. Especificamente, ocorre a partir dos Proeritroblastos, que so grandes clulas com nuclolos. A partir desta clula origina-se por reproduo celular o Eritroblasto basfilo, que se transforma em Eritroblasto policromtico. Esta clula diferencia-se em Eritroblasto ortocromtico ou picntico que perde o ncleo e d origem ao reticulcito. O reticulcito um eritrcito grande e imaturo. Possui RNA ribossmico no citoplasma, tendo um perodo de vida mdio de 3 dias, aps o qual se transforma em eritrcito. Este libertado da medula ssea para o sangue circulante. Aps um perodo mdio de 120 dias o eritrcito aprisionado e destrudo pelo bao. Proeritroblasto: - clula oval ou arredondada com 20 a 25m de dimetro; - citoplasma reduzido, com basofilia atribuda ao RNA citoplasmtico dos ribossomas (persistem at ao reticulcito); - ncleo ocupa cerca de 8/10 da clula; - cromatina delicada; - 1 a 2 nuclolos. Eritroblasto basoflico: - clula com 16 a 18m de dimetro; - citoplasma intensamente basfilo; - ncleo j no apresenta nuclolos visveis; - cromatina densa, mas com tonalidade mais acinzentada.

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Eritroblasto policromtico: - cerca de 9 a 12m de dimetro; - comeam a formar-se cadeias de hemoglobina; - os ribossomas ainda persistem e, consequentemente, a colorao do citoplasma varia de azul a cinzento; - ncleo mais reduzido. Eritroblasto picntico: - grande diminuio do dimetro; - fim da capacidade de sintetizar DNA; - incapaz de actividade mittica; - citoplasma saturado de hemoglobina hemoglobinizao total; - o ncleo prepara-se para sair da clula . Reticulcito: - clula anucleada; - eritrcito muito jovem identificvel por colorao dos ribossomas que coram como uma rede granular azul quando corados com corante supravital (Azul de Metileno Novo ou Azul de Brilhante de Cresil). Eritrcito: - Clula anucleada do sangue; - cor rosa-avermelhado por colorao May-Grnwald Giemsa; - forma de disco bicncavo, flexvel e resistente; - contm hemoglobina; - transporta o oxignio necessrio ao organismo; - vida mdia de 120 dias.

A eritropoietina (EPO) uma hormona glicoproteica produzida nos seres humanos pelos rins e pelo fgado que tem como principal funo regular a eritropoiese. Uma vez produzida esta transportada na circulao sangunea at s clulas precursoras dos eritrcitos, na medula ssea, onde vai promover a sua proliferao e diferenciao, na medida em que interage com um receptor especfico superfcie destas clulas, o que vai induzir a sua diferenciao em proeritroblastos. Como estmulo principal para a produo desta hormona tem-se a falta de oxigenao sangunea, que detectada por um sensor ao nvel renal que posteriormente aumenta a produo da EPO, a qual, a nvel da medula ssea, vai activar a diferenciao e proliferao de eritroblastos.

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Malria
uma doena infecciosa, causada por um protozorio unicelular, do gnero Plasmodium. Transmitido de uma pessoa para outra atravs da picada de um mosquito do gnero Anopheles, por transfuso sangunea ou partilha de agulhas e seringas infectadas. As espcies de plasmodium que infectam o ser humano so: - Plasmodium vivax (Grassi & Feletti, 1890); - Plasmodium falciparum (Welch,1897); - Plasmodium malariae (Laveran, 1881); - Plasmodium ovale (Stephens,1922); O conjunto de sintomas e sinais caracteriza-se por intenso calafrio seguido de elevao rpida da temperatura corporal, acompanhada de nuseas e/ou vmitos, dor de cabea, dores musculares e abdominais. medida que a temperatura comea a baixar, o doente apresenta intensa transpirao, que pode durar vrios minutos ou horas de acordo com a espcie do plasmodium. Anemia, falta de apetite, aumento do tamanho do fgado e do bao (hepatoesplenomegalia), fraqueza e distrbios gastrointestinais tambm podem estar presentes. A malria est presente nas regies tropicais e subtropicais do planeta.

Regies Endmicas para Malria

Para o diagnstico laboratorial: - exame parasitolgico de sangue - mtodos imunocromatogrficos (teste em fita: OptiMal)

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Membrana do eritrcito

Membrana do Eritrcito

A membrana do eritrcito contm aproximadamente quantidades iguais de lpidos e protenas. Os lpidos so fosfolpidos ou lpidos neutros, na maior parte colesterol no esterificado, e tm um papel importante na manuteno da flexibilidade celular. O componente proteico da membrana representado por diversas protenas que podem ser divididas em dois ramos: protenas transmembranares (que atravessam a bicamada lipdica) e protenas interiores (situadas na base da bicamada lipdica). As principais protenas transmembranares so a glicoforina A e a protena da banda 3. A glicoforina A possui hidratos de carbono na poro externa da molcula, os quais conferem carga negativa aos eritrcitos, impedindo a aglutinao destes. As glicoforinas (GP) esto relacionadas com os antignios dos eritrcitos. A protena da banda 3 est inserida na bicamada lipdica e funciona como canal transportador de anies e gua para a clula. Esta protena mantm uma ligao importante com as protenas perifricas anquirina e espectrina. As protenas associadas ao citoesqueleto so denominadas de perifricas: a espectrina, a actina (banda 5), a anquirina (protena 2.1), banda ou protena 4.1, protena banda 4.2 e a protena banda 4.9 Alteraes nos componentes da membrana, lpidos ou protenas, podem resultar em mudanas na forma, com consequente diminuio da resistncia e aumento da destruio destas clulas (anemia hemoltica). A bicamada lipdica do eritrcito impermevel maioria das molculas, logo utiliza vrios sistemas de protenas transportadoras de membrana para a movimentao de molculas para fora e para dentro da clula. A protena Banda 3 parece funcionar como um poro ou canal aquoso para o transporte de bicarbonato, cloreto, gua, entre outros.

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Hemoglobina

Heteroprotena

(protena

complexa)

do

grupo

das

cromoprotenas encontrada no sangue dos animais superiores mostra-se como um pigmento vermelho que na estrutura molecular se distingue uma parte estritamente proteica, a globina, e uma parte no proteica, o grupo prosttico, representado por um radical heme, formado por 4 ncleos de ferriporfirina. A hemoglobina, alm de transportar oxignio, exerce um
Hemoglobina

poderoso efeito tampo, impedindo que os ies H+ possam alterar o

pH do sangue. Deste modo, embora haja grande produo de CO2 pelos tecidos, a presena da hemoglobina restringe as variaes de pH a centsimos de unidades, mantendo o sangue e os tecidos em meio com pH constante. A Hb formada na medula ssea vermelha, a partir do nascimento, pois trata-se de um dos componentes principais dos eritrcitos. As hemoglobinas normais presentes no ser humano so: - HbA1 : com 2 cadeias e 2 . a que se apresenta em concentraes mais elevadas: 96,0-98,0%; - HbA2: possui 2 cadeias e 2. Est presente numa concentrao de 2,0-3,5% no sangue; - HbF: tem 2 cadeias e 2 . Concentrao no sangue menor ou igual a 1%. A sntese das globinas requer um rgido controlo gentico do DNA inserido sequencialmente no agrupamento de genes de globina tipo alfa no brao curto do cromossoma 16, e do DNA que faz parte do agrupamento de genes de globina do tipo beta:

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Talassmias A palavra Talassmia deriva de uma combinao das palavras gregas, talassa = mar, e emes = sangue. Com esta palavra os mdicos queriam descrever uma doena do sangue cuja origem est nos pases banhados pelo mar, e mais precisamente o mar Mediterrneo, tanto que a mesma doena chamada de Anemia do Mediterrneo . O conceito de anemia indica um baixo de hemoglobina dentro dos glbulos vermelhos. A Talassmia uma caracterstica do sangue transmitida de pais para filhos. Reduz a quantidade de hemoglobina que o corpo pode fabricar, de modo que pode levar anemia. Nas Talassmias h uma alterao gentica que impede que as cadeias de protenas sejam formadas em quantidade adequada. So, portanto, alteraes quantitativas da formao da hemoglobina. Se o defeito gentico na formao das cadeias alfa, as doenas da derivadas so as talassmias e se na formao das cadeias beta, temos as -talassmias. No que respeita incidncia, o trao talassmico alfa nas pessoas brancas de 4%, enquanto que nos negros de 10%. Relativamente ao trao talassmico beta tem uma percentagem de 3-6% nas pessoas com ascendncia mediterrnea. Sendo assim, a sua distribuio geogrfica a seguinte:

Distribuio Geogrfica Talassmia

O quadro clnico das pessoas que possuem estes genes extremamente varivel dependendo da carga gentica, se homozigtica ou heterozigtica, isto , se h dois genes comprometidos, um vindo do pai e o outro da me, ou apenas um gene, do pai ou da me.

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-Talassmias As -Talassemias so anemias microcticas hereditrias devido reduo da sntese de cadeias polipeptdicas da hemoglobina. A maioria das destas Talassmias decorrente de deleco de gene. Cada pessoa normal herda quatro genes globnicos , podendo-se escrever o seguinte gentipo: /. Na talassmia h formao de 4 cadeias (Hemoglobina de Bart) que o correspondente embrionrio da Hemoglobina H, pela falta de produo de cadeia . Se a formao desses agrupamentos de cadeias 4 for excessivo haver incompatibilidade com a vida. Essa a forma major de talassmia , hidropsis fetal. Aps os 4 meses de vida quando haveria a troca da Hb F pela Hb A, na falta de cadeias as cadeias formam o tetrmero 4 que se precipitam na membrana do eritrcito, levando destruio das mesmas (anemia hemoltica). Tipos de talassmia : Portador Silencioso: ocorre devido a um gene . No existem manifestaes hematolgicas. H microcitose discreta; A Hb A2 e HbF esto normais. H uma leve diminuio da sntese de cadeias alfa, que s notada no perodo neonatal, quando pequenas propores de Hb de Bart ( 4) podem ser vistas na electroforese de hemoglobina, embora a sua ausncia no exclua a doena. Aps o perodo neonatal, esta condio reconhecida mais frequentemente num pai ou numa me de um paciente com Doena de hemoglobina H.

Trao Talassmico: caracteriza-se por uma anemia microctica hipocrmica leve, devido mutao ou deleco de dois genes alfa. Os nveis de HbA2 esto baixos. No perodo neonatal, quantidades significativas de Hb de Bart so notadas (3% a 8%) e h microcitose nos eritrcitos do sangue do cordo.

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Doena da Hb H: uma doena moderadamente grave. Parece-se com a Talassmia intermdia, com alteraes sseas e esplenomegalia. A electroforese de hemoglobina mostra a Hb H, responsvel por 3 a 30% da hemoglobina total. Pode tambm ser vista em lminas frescas de sangue perifrico coradas com azul brilhante de cresil.

Hidropsis Fetal: esta a forma mais grave das Talassmias e est relacionada com a ausncia total da sntese de cadeias . Os fetos afectados geralmente so prematuros e morrem logo aps o nascimento.

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-Talassmias Nesta talassmia as cadeias em excesso vo precipitar depositando-se na membrana dos eritrcitos, levando a uma eritropoiese ineficaz devido hemlise intramedular. A maioria das talassmias devida a mutaes pontuais afectando a transcrio do RNA, o processamento ou a translocao do RNA maduro. Estes diferentes tipos de mutaes tm expresses clnicas que variam de leves (minor) a graves (major). Em todos os casos a sntese da Hb F reduz a gravidade da doena. Talassmia major, tambm conhecida por talassmia homozigtica uma doena grave devido presena de duas mutaes idnticas talassmicas, uma em cada cromossoma 11. Como consequncia, h uma diminuio da sntese de HbA e eritrcitos so pequenos, finos, distorcidos e com diminuda concentrao de hemoglobina. Provoca anemia microctica hipocrmica muito grave.

Talassmia minor, tambm conhecida como trao talassmico ou talassemia heterozigtica, deve-se presena de uma nica mutao para talassmia. Caracteriza-se por anemia microctica hipocrmica.

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Drepanocitose Anomalia hereditria do sangue, caracterizada pela presena de hemoglobina anormal (hemoglobina S) e pelo aspecto de foice dos glbulos vermelhos (drepancito). Prpria da raa negra, pode ser clinicamente no aparente (forma heterozigtica) ou pode provocar uma anemia hemoltica muito grave (forma homozigtica). Isto , as crianas que herdam genes de ambos os pais desenvolvero a drepanocitose; os que herdam o gene apenas de um dos pais sero portadores do trao da drepanocitose. Estes no apresentam sintomas, mas podem transmitir o gene aos seus descendentes. A hemoglobina S faz com que os glbulos vermelhos fiquem duros e com forma de foice, tornando-os frgeis e fceis de destruir. Ao contrrio dos glbulos vermelhos normais, habitualmente macios e elsticos, as clulas falciformes ou drepancitos no conseguem atravessar os vasos pequenos, pelo que provocam bloqueios que privam os rgos do corpo de sangue e, consequentemente, de oxignio. O trao da drepanocitose encontra-se generalizado, atingindo a mxima prevalncia em certas partes da frica e em populaes originrias da frica equatorial, da bacia mediterrnica e da Arbia Saudita. A distribuio geogrfica do trao da drepanocitose muito semelhante do paludismo. O trao da drepanocitose tem um efeito parcialmente protector contra o paludismo.

Esfregao sangue perifrico: drepancitos

Distribuio geogrfica

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Amenia Anemia definida pela Organizao Mundial de Sade (OMS) como a condio na qual o contedo de hemoglobina no sangue est abaixo do normal como resultado da carncia de um ou mais nutrientes essenciais, seja qual for a causa dessa deficincia. Os valores normais para a concentrao de hemoglobina sangunea so de 13gdL para homens, 12 g dL para mulheres. Normoctica Pode ser causada por perda aguda de sangue, doena crnica ou falha na produo de quantidades suficientes de eritrcitos. Os problemas renais crnicos e no fgado tambm causam anemia normoctica. No caso de problemas renais devese diminuio da produo de eritropoietina. Certas deficincias hormonais, como deficincia de testosterona, podem causar anemia normoctica. Microctica

Causada pela deficincia de ferro, o que decorrente de uma dieta ou absoro na qual a presena de ferro insuficiente.

Macroctica Quando se trata de anemia megaloblstica pode ser causada pela deficincia de vitamina B12 ou cido flico, devido ingesto inadequada ou absoro insuficiente, por defeitos na sntese de DNA, quer sejam congnitos ou adquiridos. Se anemia no megaloblstica pode ser despontada por consumo de lcool ou doena heptica.

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Hereditrias So herdadas de ambos os pais. Quando apenas um o transmissor, a criana tem apenas o trao. Se o pai e me tm trao, em cada gravidez h 25% de risco de nascer uma criana portadora na forma grave. Esto relacionadas com: - doenas da hemoglobina: talassmias e variantes de hemoglobina; - doenas da membrana do eritrcito: esferocitose e eliptocitose heriditria, alteraes de permeabilidade; - deficincias enzimticas: piruvato kinase e G-6-P-desidrogenase.

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Plaquetas As plaquetas so fragmentos de megacaricitos (clulas da medula ssea). So anucleadas e medem 1,5-3m de dimetro. Circulam no sangue com o formato de disco achatado quando no esto estimuladas. Tm uma vida mdia de circulao no sangue de 9 - 10 dias. Depois disso, so sequestradas pelo bao e destrudas pelo mesmo. As plaquetas possuem: - superfcie exterior constituda por uma bicamada fosfolipdica e por glicoprotenas da membrana; - citoesqueleto constitudo por filamentos de actina, miosina e tubulina; - grnulos e densos: que contm lisossomas e peroxidases; - sistema tubular denso; - sistema canalicular aberto; - mitocndria, golgi e ribossomas. Megacariocitopoiese

Megacarioblasto: clula com cerca de 30m de dimetro, citoplasma basfilo, relao N/C elevada. A clula pode apresentar-se com 1 ou 2 ncleos de forma irregulares, cromatina frouxa, reticular e geralmente com 2 ou 3 nuclolos. Promegacaricito: a clula aumenta de tamanho, o citoplasma apresenta granulaes e intensa basofila, presena de vrios ncleos, a cromatina condensa-se e, em geral, no se observam nuclolos na microscopia ptica. Megacaricito: a clula apresenta dimetro de cerca de 50m, a relao ncleo/citoplasma diminui. O citoplasma, agora abundante, torna-se acidfilo com inmeras granulaes. O ncleo tornase picntico. As clulas mais maduras apresentam plaquetas na periferia. Geralmente um megacaricito origina cerca de 2.000 plaquetas.
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Plaquetas: so estruturas de forma estrelada, com dimetro de 1,5-3m. Em casos patolgicos podem apresentar 10 a 20m. Tm uma regio central mais escura e uma perifrica mais clara, com muitas granulaes. A principal funo das plaquetas a formao do tampo mecnico durante a resposta hemosttica normal leso vascular. Na ausncia de plaquetas pode ocorrer sada espontnea do sangue pelos pequenos vasos. No centro da funo das plaquetas esto as reaces de: adeso, secreo, agregao, fuso e actividade anticoagulante. A trombopoetina uma hormona produzida pelo fgado, rins e clulas do msculo liso que regula a produo de plaquetas pela medula ssea. Os nveis desta hormona encontram-se aumentados na trombocitopenia e reduzidos na trombocitose. Relativamente ao seu tempo de vida plasmtica, esta hormona dura cerca de 30 horas. As plaquetas e os megacaricitos so as clulas que possuem receptores para a trombopoetina. Quando esta se liga, aumenta a taxa de maturao das plaquetas, aumentando, portanto, a quantidade de citoplasma das clulas.

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Hemostase um mecanismo eficiente e rpido para estancar o sangramento em locais de leso vascular essencial sobrevivncia. No entanto, essa resposta necessita de ser estritamente controlada para evitar o desenvolvimento de cogulos extensos e desfaz-los aps a reparao do dano. Assim, o sistema hemosttico um equilbrio entre os mecanismos coagulantes e anticoagulantes, aliado a um processo de fibrinlise. Os cinco principais componentes envolvidos so: plaquetas, factores de coagulao, inibidores da coagulao, fibrinlise e vasos sanguneos. A resposta hemosttica normal leso vascular depende estritamente da interaco entre a parede do vaso sanguneo, plaquetas circulantes e factores de coagulao. A constrio imediata dos vasos lesados e a constrio reflexa das artrias e arterolas adjacentes so responsveis pela diminuio inicial do fluxo de sangue na regio da leso. A diminuio do fluxo sanguneo permite a activao de plaquetas e factores da coagulao. As aminas vasoactivas e o tromboxano A2 que so libertados pelas plaquetas durante a formao de fibrina tambm tm actividade vasoconstritora. Depois da ruptura do revestimento endotelial h aderncia inicial de plaquetas ao tecido conjuntivo exposto, potenciado a aco do factor de von Willebrand (envolvido na adeso das plaquetas parede vascular e na agregao a outras plaquetas). A exposio ao colagnio e trombina produzida no local da leso faz com que as plaquetas aderentes libertem o contedo dos grnulos e activem a sntese de prostaglandinas, levando formao de tromboxano A2. O ADP libertado provoca a agregao das plaquetas, sendo que mais destas so atradas para o local da leso. Esta agregao contnua promove o crescimento do tampo hemosttico que cobre o tecido conjuntivo exposto. A hemostasia secundria obtida quando a fibrina formada pela coagulao do sangue acrescentada na massa de plaquetas e pela compactao do cogulo induzida pelas mesmas. Aps a leso vascular, d-se activao do factor tecidular que activa o factor VII para se iniciar a cascata da coagulao. A agregao das plaquetas e as reaces de libertao aceleram o processo de coagulao. A trombina gerada no local da leso converte o fibrinognio em fibrina, que potencia a agregao e as secrees das plaquetas, e tambm activa os factores XI, XIII e os co-factores V e VIII. A fibrina aumenta medida que as plaquetas se lisam e, aps algumas horas, todo o tampo hemosttico transformado numa massa slida de fibrina com ligao cruzada. No entanto, devido incorporao do plasminognio, o tampo comea a autodiregir-se ao mesmo tempo.

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Patologias plaquetares As doenas relacionadas com as plaquetas so as causas mais comuns de hemorragias, sendo que se podem dever a alteraes quantitativas e/ou quantitativas das plaquetas. Podem-se dividir em 3 grandes grupos: trombocitopatias, trombocitopenias e trombocitoses. Trombocitopatias Caracterizadas por alteraes nas funes das plaquetas. Podem ser hereditrias (Trombastenia de Galzman, Sndrome Bernard Soulier) ou adquiridas (secundrias a outras patologias) Trombastenia de Galzman causado por mutaes nos genes que codificam as glicoproteinas IIb ou IIIa, de que resultam alteraes qualitativas ou quantitativas das mesmas. Os doentes apresentam a incapacidade de agregao plaquetar. Diagnstico laboratorial: contagem e morfologia plaquetar normais, sem agregados plaquetares no esfregao se sangue perifrico. A agregao das plaquetas encontra-se diminuda com todos os agentes, excepto com a ristocetina. Por citometria de fluxo notvel diminuio de IIb e IIIa. Sndrome Bernard-Soulier Trata-se de uma patologia autossmica recessiva, caracterizada por trombocitopenia moderada a severa, plaquetas gigantes e hemorragia espontnea. A sua origem deriva de uma deficincia ou disfuno no complexo GP Ib-V-IX, o que leva a uma diminuio da agregao plaquetar ao subendotlio, atravs da ligao ao factor de vW. Diagnstico laboratorail: tempo de sangria prolongado, trombocitopenia e plaquetas gigantes em esfregao de sangue perifrico. Por citometria de fluxo, de notar a diminuio de GPIb-VIX. A agregao plaquetria normal com todos os agonistas, excepto com a ristocetina. Trombocitopenias Tambm pode ser hereditria ou adquirida, sendo que nesta ltima se encontram a PTI, PTT e CID.

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PTT A prpura trombocitopnica trombtica ocorre nas formas hereditrias e adquirida. Os multmeros de alto peso molecular do vWF no plasma induzem a agregao das plaquetas, com formao de microtrombos nos pequenos vasos A PTT caracterizada por febre, trombocitopenia intensa, anemia hemoltica microangioptica e sintomas neurolgicos. O tratamento efectuado com troca de plasma fresco congelado PTI definida como trombocitopenia isolada, sem condies clnicas aparentes associadas ou outras causas de trombocitopenia. Pode ocorrer epistaxe, prpura da pele e menorragia. Verifica-se uma destruio aumentada das plaquetas, sendo que esta provocada por anticorpos antiplaquetares. Deste modo, h perda da resposta compensatria dos megacaricitos devido aos efeitos destes mesmos anticorpos. Diagnstico laboratorial: trombocitopenia com plaquetas normais ou ligeiramente aumentadas, eritrcitos com morfologia e contagem normais e glbulos brancos normais. CID A trombocitopenia pode resultar do aumento do ritmo de destruio de plaquetas por consumo devido sua utilizao da coagulao intravascular disseminada (CID). Ocorre deposio disseminada intravascular de fibrina com consumo de factores de coagulao e plaquetas. Verifica-se como consequncia de muitas doenas que libertam coagulantes na circulao ou causam leso endotelial disseminada ou agregao de plaquetas. Pode associar-se com hemorragia fulminante ou sndrome trombtico ou ter evoluo menos grave e mais crnica.

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Fundamentos Terico-Prticos Glbulo vermelho Esfregao de sangue perifrico

A realizao do esfregao se sangue perifrico muito importante para a realizao de um hemograma confivel. O esfregao ideal deve ser livre de falhas e paradas, no muito espesso, nem fino demais, e sem falhas na cauda. Na observao ao microscpio as duas extremidades onde so realizadas as contagens devem apresentar os eritrcitos mais separados e os leuccitos bem distribudos. Diversos corantes podem ser usados para evidenciar alteraes celulares importantes como o May-Grunwald Giemsa (MGG). Tcnica: - homogeneizar o sangue para que as clulas estejam bem distribudas; - deixar fluir o sangue, por capilaridade, para um tubo de microhematcrito; - colocar uma gota de sangue na extremidade de uma lmina de vidro; - posicionar a extremidade do espalhador com um ngulo de 45 sobre a lmina; - arrastar o espalhador no sentido da gota de sangue at que esta disperse; - realizar um movimento rpido e uniforme para a outra extremidade da lmina. O esfregao deve ter uma extremidade fina e irregular. Aps secagem do esfregao a lmina deve ser identificada numa das extremidades. Corar pelo mtodo de May-Grunwald-Giemsa.

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Coloraes May-Grunwald Giemsa um processo de colorao das clulas sanguneas por meio de dois corantes contendo eosina e derivados do azul-de-metileno, aplicados sucessivamente. chamada colorao panptica de Pappenheim e de todos os mtodos a que d resultados mais completos, e com cores mais brilhantes. May-Grnwald - uma simples soluo de eosina e de azul de metileno em lcool metlico Giemsa - uma combinao de eosina e de derivados de azul de metileno, principalmente Azul I e II de metileno Procedimentos: 1. Fixar o ESP em metanol durante 8 a 10 minutos; 2. De seguida corar com May-Grunwald diludo a 1/2 com gua destilada, durante 5 min; 3. Passar depois para o segundo corante, Giemsa, previamente diludo a 1/10 com gua destilada e deixar actuar durante 10 minutos; 4. Retirar os esfregaos da soluo e lavar em gua corrente; 5. Deixar secar. Resultados: Eritrcitos: rosa. Plaquetas: azul Leuccitos: ncleo azul e citoplasma azul muito claro ou incolor

Esfregao de sangue perifrico corado por May-Grunwald Giemsa

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Colorao de Perls utilizada para identificao do ferro celular na forma de ferritina ou hemossiderina. A reaco processa-se na interaco de ies ferrocianeto com ies frricos no interior da clula, resultando um produto de cor esverdeada, o ferrocianeto de ferro. Baseia-se, portanto, numa reaco em meio cido, utilizando-se HCl e ferrocianeto em partes iguais. O pico alto do seu uso em aspirados de medula ssea, na identificao de depsitos de ferro sideroblstico, podendo tambm ser utilizando em urina. Procedimentos: Fixar a amostra com metanol durante 10 minutos; Misturar na altura e em partes iguais as solues de ferrocianeto de potssio e de cido clordrico, numa jarra de Copplin;
3. 4. 5. 6.

1. 2.

Mergulhar as lminas na mistura e incubar 1h, no mnimo, temperatura ambiente; Lavar com gua corrente; Contrastar com safranina diluda durante 1 minuto; Lavar muito bem com gua corrente. Resultados:

Esfregaos de medula ssea corados por colorao de Perls

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Colorao de Wright um processo de colorao das clulas sanguneas por meio de dois corantes contendo eosina (corante cido - cora de vermelho) e azul de metileno (corante bsico cora em tons de azul). til para esfregaos de sangue perifrico, aspirados de medula ssea e para contagem de reticulcitos. Procedimentos: 1. Cobrir o esfregao com o corante de Wright; 2. Aps 4min adicionar a mesma quantidade de gua que de corante;

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Morfologia do sangue perifrico A srie eritrocitria frequentemente estudada devido a: - contagem de eritrocitos, dosagem de hemoglobina e determinao do volume hematcrito; - estudo do aspecto morfolgico dos eritrcitos, realizado por observao microscpica; - determinao da presena de eventuais eritroblastos no sangue perifrico; - contagem de reticulcitos. A observao da morfologia dos eritrcitos de grande importncia para o diagnstico do tipo de anemia. As alteraes morfolgicas dos eritrcitos podem ser agrupadas segundo as variaes de tamanho (anisocitose), de forma (poiquilocitose) e de cor (anisocromia) Anisocitose Os eritrcitos de tamanho normal so chamados normocticos e apresentam dimetro com cerca de 6,5 8,5m (mdia 7,5m). Quando alterados em relao ao tamanho so denominados: Microcticos: so menores que o normal, com dimetro abaixo de 6m; tm origem nos microeritroblastos. a forma alterada mais comum. Geralmente ocorre nas deficincias de ferro e nas talassmias.

Macrocticos: so maiores que o normal com dimetro de 8,5-10m. Tm origem dos macroeritoblastos e geralmente ocorre por deficincia de Vitamina B12 e cido flico

Megalcitos: bem maior que o normal, com dimetro acima de 10m. Apresenta forma ovalada e origina-se de megaloblastos, estando presente nas anemias megaloblsticas.

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Poiquilocitose O eritrcito normalmente possui a forma de um disco bicncavo. Quando visto de frente apresenta uma regio central mais clara (halo) do que a da zona perifrica. Este facto deriva da distribuio da hemoglobina no interior do disco. Quanto s alteraes de forma os eritrcitos podem ser: Eritrcito em Alvo (target cell): o GV tem dupla biconcavidade, de tal forma que, quando projectado num plano, a hemoglobina visualizada numa pequena faixa perifrica e, geralmente, na parte central, o que lhe d o aspecto em alvo. Ocorre em alta percentagem na talassmia Major (Talassemia onde ocorre um aumento da Hemoglobina fetal); em menor quantidade na talassmia Minor, embora tambm possa ser encontrada noutras Anemias Hemolticas. Eritcito esfercito: forma esfrica (a protena da membrana alterada a ponto de no manter a biconcavidade). A hemoglobina distribui-se uniformemente, parecendo a clula estar mais corada que o normal. Apresenta-se na forma de microesfercito. Pode haver diminuio de espectrinas, de anquirina na membrana. Ocorre nas Anemias Hemolticas Esferocticas Hereditrias e Adquiridas.

Eritrcito elptico: apresentam formas elpticas, ocorrendo em aprecivel quantidade na Anemia Hemoltica Hereditria Eliptoctica. Pode ocorrer por diminuio de espectrina, glicoforina C, etc.

Drepancito: apresenta-se com a forma de foice ou de meialua. Usualmente adquire esta forma quando submetido a condies de hipoxia. A visualizao destas clulas caracteriza a hemoglobinopatia S.

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Estomatcitos: geralmente apresenta a hemoglobina distribuda de tal forma que o halo claro central toma um aspecto elptico, assemelhando-se a uma boca. Caracteriza um tipo de anemia hemoltica hereditria rara, onde h extrema hipermeabilidade da membrana a caties.

Acantcitos

(akantha=

espinho):

apresentam

formas

geralmente arrendondadas, com proeminncias ponteagudas. Presentes em anomalias hereditrias caracterizadas por alterao do metabolismo dos fosfolpidos. Podem ser observadas formas semelhantes em pacientes portadores de cirrose e em pacientes submetidos medicao com heparina.

Anisocromia Quando os eritrcitos so corados por Giemsa, normalmente, apresentam uma cor rosa e um halo central mais claro, quando normais. Quanto s alteraes de cor, os GV podem ser: Hipocrmicos: o halo central maior que o normal, o eritrcito contm menor quantidade de hemoglobina, devido ao achatamento da clula. Geralmente microctica, ocorrendo nas anemias ferropnicas e talassmias.

Policromticos: GV que, quando corados por Giemsa, apresentam uma basofila (devido presena de RNA ribossmico) e uma acidofilia (devido presena de hemoglobina). Em geral, ocorre nas clulas que perderam o ncleo antes da hemoglobinizao completa no citoplasma e que ainda no perderam os ribossomas. Presente em casos de anemias hemolticas.

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Incluses eritrocitrias GV com Ponteado Basfilo: a clula, quando corada por corantes vitais, apresenta grnulos basfilos, de tamanhos diferentes e cuja composio a de RNA ribossmico e mitocondrial; estes grnulos precipitam normalmente nos reticulcitos patolgicos, sem que haja a necessidade do emprego de uma Colorao Vital. Pode ocorrer nas intoxicaes por chumbo. Corpsculos de Howell-Jolly: geralmente apresenta 1 a 2 corpsculos esfricos, com cerca de 0,5m de dimetro, constitudos por DNA. Apresenta uma colorao basfila, semelhante ao ncleo dos eritroblastos Podem ocorrer aps uma esplenectomia, nas anemias hemolticas.

Corpsculos de Heinz: a clula apresenta pequenas incluses citoplasmticas arredondadas, ovais ou angulares. Geralmente so nicas, excntricas e quase no so evidenciadas na Colorao de Giemsa, mas sim na Vital. So constitudos por hemoglobina desnaturada que est presente nos GV e nos reticulcitos, quando h deficincia de Glicose-6-Fosfato Desidrogenase.

Malria: os eritrcitos contm hematozorios da malria. Esfregao de sangue perifrico: por observao do esfregao de sangue perifrico corado por Giemsa visvel a existncia de parasitas no interior dos glbulos vermelhos. Este deve ser, pois, o primeiro passo para o diagnstico de malria. Teste optimal: O DiaMed OptiMAL-IT Malria um teste especfico que detecta a presena da desidrogenase lctica do Plasmodium, enzima produzida pelas formas sexuada e assexuada do parasita. Detecta nveis de parasitmia perifrica de 50 a 100 parasitas/L de sangue (correspondente a uma parasitmia de 0,001- 0,002%). O teste indica a presena ou ausncia de Plasmodium sp e possibilita o diagnstico diferencial entre P. falciparum e as demais espcies: P.vivax, P.malariae e P.ovale.
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Cada fita do kit possui 3 bandas: a banda do controlo, a banda para as espcies Plasmodium vivax, malariae e ovale e outra banda especfica para o Plasmodium falciparum. As fitas possuem anticorpos das diferentes espcies do plasmodium. adicionado um anticorpo especfico para a enzima produzida pelas espcies que se vai ligar a esta. Este complexo vai interagir com os anticorpos da fita, havendo alterao de cor da banda correspondente.

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Hemograma O hemograma um exame que avalia as clulas sanguneas de um paciente, quantitativa e qualitativamente. Sendo assim, composto de anlise da srie plaquetar, eritride e leucocitria. Actualmente os laboratrios de hematologia esto dotados de uma srie de instrumentos que permitem, de modo automtico, a enumerao das clulas sanguneas e o diferencial dos leuccitos. Quando os resultados automticos se apresentem como duvidosos ou quando existe uma suspeita clnica ou biolgica mesmo que os aparelhos no os detectem, imprescindvel a observao do esfregao de sangue perifrico (ESP). Anlise da srie eritride Avaliao quantitativa: Contagem de eritrcitos: Pode ser realizada na cmara de Nubauer, mas um mtodo pouco preciso. Para tal, utilizamse os contadores automticos que seguem o princpio de Coulter (contagem de impulsos de impedncia), a disperso da luz laser ou a imunofluorescncia. Tambm estes contadores podem causar erros que, normalmente, so devido crioaglutinao e rouleaux (GV empilhados). Os valores normais encontram-se entre 4,5-5,5 (x102/L) para os homens e 3,8-4-8 (x102/L) para as mulheres. Uma diminuio da contagem pode indicar anemia, quando esta diminuio acompanhada da diminuio de hemoglobina. Um aumento da contagem indica eritrocitose. Quando este aumento acompanhado com aumento do hematcrito e hemoglobina indica poliglobulia. Concentrao da hemoglobina (HB): realizada por espectrofotometria aps converso da hemoglobina em cianometahemoglobina. Actualmente existe um mtodo livre de cianeto, sendo mais ecolgico. Neste parmetro tambm podem ocorrer erros devido a lipidmia e a leucocitose elevada. No primeiro os lpidos tornam a amostra muito turva, aumentado a absorvncia lida pelo aparelho. No caso de leucocitose elevada deve-se centrifugar a amostra e retirar os GB. Os valores de referncia so: 13-17 g/dl para o homem e 12-15g/dl para a mulher. Hematcrito: Hematocrito (Htc) o volume que os eritrcitos ocupam num determinado volume de sangue, expresso em % ou L/L.
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Os contadores electrnicos determinam este parmetro atravs da multiplicao do VCM (volume globular mdio) pelo nmero de eritrcitos. Os valores normais situam-se entre 40-50 para os homens e 36-46 para as mulheres. Relao entre GV, HB, Htc e volmia: Quando se verifica um aumento da volmia h uma hemodiluio, o que detectado como uma falsa anemia. Pode ocorrer quando o doente est a soro ou em doentes com insuficincia renal crnica. Uma diminuio da volmia causa uma hemoconcentrao, o que tem como resultado uma falsa poliglobulia. Pode ocorrer em situaes em que os doentes estejam a usar diurticos, em queimados ou em casos de diarreia. ndices Hematimtricos: VGM: volume globular mdio que determina o volume de cada eritrcito. igual ao Htc x 10 /n eritrcitos. Deste modo, correlaciona-se inversamente com o nmero de GV. Os valores de referncia situam-se entre 80-100 fL para o homem e mulher. As causas mais comuns de erro so: crioaglutinao, rouleaux, conservao prolongada in vitro (aumento) e excesso de EDTA (diminudo). O VGM permite classificar as anemias em macrocticas, normocticas ou microcticas. HGM: o contedo mdio de hemoglobina por eritrcito. Determina-se por: Hb x 10 / n eritrcitos. Os valores normais so: 27-32 pg para homem e mulher. CHGM: a % de Hb em 100ml de eritrcitos, ou seja, Hb /Htc x 100. Os valores normais esto entre 32-35 % ou g/dl para homem e mulher. Estes dois ltimos parmetros classificam as anemias quanto concentrao de Hb, o que corresponde cor do GV, podem ser normocrmicas ou hipocrmicas. RDW: a expresso numrica dos diferentes tamanhos dos eritrcitos. Sendo assim, permite saber se h anisocitose. Os valores normais situam-se entre 12-14 (x109/L) para homem e mulher. Histograma uma curva de frequncia da distribuio e tamanho dos GV, com o volume na abcissa e a frequncia na ordenada. Quando a curva se situa esquerda h microcitose, e quando se situa h direita h macrocitose. Quando existe dupla populao de GV h duas curvas, o que se pode dever a transfuses sanguneas. Tcnica Manual - Avaliao Quantitativa e Qualitativa de Hemogramas Os esfregaos devem estar bem realizados e bem corados em lminas de vidro bem limpas e desengorduradas.
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Um esfregao de qualidade deve ser fino. Se espesso no tem zonas de leitura alternante e invlido para uma boa observao. Em primeiro lugar h que realizar uma inspeco visual de todo o esfregao com pequenas ampliaes para avaliar: qualidade do esfregao e da colorao; ausncia de precipitados; nmero de leuccitos; possveis agregados plaquetares; acumulao de leuccitos na cauda da preparao; glbulos vermelhos aglutinados (aglutininas a frio), que pe em causa as contagens (corrigidas a 37 C); eritrcitos empilhados ("rouleaux") por paraproteinmias; arregimentao de leuccitos por anticoagulantes ou aglutininas (pseudoleucopenias) que podem corrigir-se juntando amostra hialuronidase (2 gotas/ml). Com pequenos aumentos tambm se deve eleger a zona do esfregao onde haja uma distribuio uniforme das clulas e que estejam bem separadas e espalhadas, para posterior exame mais detalhado. O exame dos eritrcitos realiza-se com objectivas de 40x ou de 100x. O exame das plaquetas realiza-se tambm com a objectiva de 40x. Reticulcitos So eritrcitos jovens aps a perda do ncleo, sendo ricos em RNA ribossmico que lhes atribui uma cor acinzentada, configurando policromasia. Os valores de referncia situam-se entre 1-2%. Contagem manual de reticulcitos: a contagem de reticulcitos usase para avaliar a actividade eritropoitica da medula ssea. Misturar o sangue e corante azul brilhante de cresil (ou azul metileno novo) consoante os valores de hematcrito da amostra. Numa zona em que as clulas no estejam agrupadas, contar 1000 gvs. com objectiva de imerso. Os reticulcitos incluem-se na contagem total de gvs. (isto , um reticulcito conta-se como glbulo vermelho e como reticulcito). Avaliao qualitativa: Tamanho O tamanho dos GV permite avaliar se h normocitose, microcitose ou macrocitose. Tambm possibilita a avaliao da homogeneidade do tamanho expressa pelo RDW. Distribuio Permite avaliar se h distribuio eritrocitria homognea ou se h aglutinaes como crioaglutinao e rouleaux.

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Cor Possibilita inferir sobre o contedo hemoglobnico atravs da colorao do GV, permitindo classific-lo em hipocrmico ou normocrmico. Forma Um GV normal uma clula anucleada, rosa com palidez central, ocupando cerca de 1/3 da clula com dimenses de 7-7,5m. As formas anormais dos GV so os chamados poiquilcitos. Assim, a poiquilocitose a presena de formas anormais de GV. Est presente em anemias ferropnicas severas e anemia megaloblstica.

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Caso clnico A imagem abaixo representa um hemograma analisado durante uma aula prtica. As concluses apresentam-se de seguida.

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Trata-se de um adulto do sexo masculino. Esta informao importante na medida em que os valores de referncia para cada parmetro analisado variam de acordo com sexo e idade. Para o paciente em questo os valores de referncia esto enunciados na tabela abaixo: RBC HGB HCT MCV MCH MCHC RDW RETC 4,5 - 5,5 x 1012/L 13,0 -17,0 g/dl 40 50 % 80-100 fL 27 32 pg 32 35 g/dl 11,6 14 % 1-2 %

Antes de mais deve-se verificar quais os parmetros que no esto dentro dos valores de referncia de modo a poder concluir-se acerca do apresentado. O nmero de eritrcitos encontra-se um pouco abaixo dos valores de referncia. A hemoglobina est bastante diminuda, o que indica que existe uma anemia. Como a hemoglobina globular mdia est diminuda, pode-se concluir que os eritrcitos so hipocrmicos, ou seja, contm pouca hemoglobina no seu interior. Avaliando o histograma da distribuio dos eritrcitos por tamanhos, o RDW e volume globular mdio, verifica-se que os eritrcitos so pequenos mas, como o RDW est aumentado (indica o grau de anisocitose diferentes tamanhos dos eritrcitos) significa que existem mais glbulos vermelhos pequenos do que normais, pois o tamanho menor o que predomina. Quanto ao nmero de reticulcitos, este encontra-se aumentado, o que indica que existem mais eritrcitos jovens aps a perda do ncleo que o que seria esperado. Do atrs exposto de pode concluir que o paciente apresente uma anemia microctica hipocrmica (MCV < 80fL e MCH 27pg). Para saber se se trata de uma anemia sideropnica ou de uma talassmia, devemo-nos centrar nos valores de RDW. A anemia sideropnica apresenta um RDW elevado, responde ao tratamento com ferro e no apresenta eritroblastos, enquanto que as talassmias tm um RDW normal No paciente em causa o RDW encontra-se aumentado, logo pode-se concluir que se trata de uma anemia sideropnica. Como se pode observar no hemograma, existem glbulos vermelhos que so mais resistentes lise, logo podem interferir com a contagem dos leuccitos, que feita aps lise dos eritrcitos. Deste modo, deve-se voltar a fazer o hemograma mas, desta vez, com uma lise mais drstica dos eritrcitos, de modo a fazer uma contagem vlida de leuccitos. De notar que se deve sempre proceder realizao do esfregao de sangue perifrico, cuja observao deve ser feita de modo a confirmar ou corrigir os resultados expressos no hemograma.
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Micro-hematcrito uma tcnica extremamente til quando se possui uma amostra muito pequena de sangue. Deve-se colocar o tubo capilar no interior do tubo que contm a amostra ou pode-se mesmo fazer uma picada num dedo do paciente recolhendo-se a amostra directamente para o tubo capilar. Encher o tubo capilar at 2/3 do seu volume e selar uma das extremidades do tubo chama, com movimentos rotativos, de modo a no hemolisar. Aps este procedimento colocar o tubo capilar a centrifugar durante 5 minutos a 1500rpm numa centrfuga especfica para microhematcrito. Com uma rgua medir o comprimento dos GV sedimentados (L2) e o total da amostra (L1), como indica na figura. O hematcrito vai ser igual a L2/L1 x 100.

Centrfuga para microhematcrito

Microhematcrito

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Plaqueta Testes de funo hemosttica A hemostasia defeituosa com sangramento anormal pode resultar de doena vascular, trombocitopenia ou distrbio da funo plaquetar ou de defeito de coagulao do sangue. Hemograma e observao de esfregao de sangue perifrico: Dado que a trombocitopenia causa comum de sangramento anormal, os pacientes com suspeita de doena hemorrgica devem fazer hemograma com contagem de plaquetas e esfregao de sangue perifrico. Exames de triagem da coagulao do sangue: Fornecem avaliao dos sistemas extrnseco e intrnseco da coagulao do sangue e da converso central de fibrinognio em fibrina. O tempo de protrombina (TP) mede os factores VII, X V, protrombina e fibrinognio. So acrescentados tromboplastina tecidular e clcio ao plasma com citrato. O tempo normal para a coagulao pode ser expresso como relao internacional normalizada (INR). O tempo de tromboplastina parcial activada (TTPA) mede os factores VIII, IX, XI, XII, V, X, protrombina e fibrinognio. So acrescentados ao plasma com citrato fosfolpidos, activador de superfcie e clcio. O prolongamento nos tempos de coagulao em PT e TTPA devido deficincia de factores corrigido por adio de plasma normal ao plasma em exame. Se no houver correco ou se esta for incompleta, suspeita-se da presena de um inibidor da coagulao. O tempo de coagulao de trombina (TT) sensvel deficincia de fibrinognio ou inibio da trombina.

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Tcnicas de coagulao Tempo de Protrombina (TP) O tempo da protrombina (TP) um teste de avaliao da via extrnseca. Um TP normal indica uma diminuio do nvel de um ou mais factores da via extrnseca da coagulao. Tal facto pode ser provocado por: - alteraes hereditrias dos factores II, V, VII e X; - dfice de vitamina K; - insuficincia heptica ou administrao de drogas. O TP est indicado para a monitorizao da teraputica anticoagulante oral. Tempo de Tromboplastina Parcial Activada (TTPA) O tempo de tromboplastina parcial activada um teste de avaliao da via intrnseca. O teste do TTPA utiliza um activador de contacto (slica) que vai estimular a produo de factor XIIa. A slica proporciona uma superfcie de contacto que permite a actividade funcional do sistema de contacto: quiminognio, calicrea e factor XIIa. Quando o cloreto de clcio adicionado desencadeia as reaces posteriores que levam formao do cogulo. Os fosfolpidos so necessrios para a formao dos complexos que vo activar o factor X e a protrombina. Um aumento de TTPA pode dever-se a: - deficincia dos factores II, V, VIII, X, XI, XII ou fibrinognio; - insuficincia heptica; - dfice de vitamina K; - presena de heparina, anticoagulante lpico ou outros inibidores.

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Buffy-Coat Esta tcnica utiliza-se na concentrao de leuccitos ou clulas anormais quando se encontram presentes em pequenas quantidades no sangue perifrico, como o caso de doentes com leucopenias severas. Procedimento: Depois da amostra devidamente homogeneizada, preparam-se vrios tubos de microhematcrito, com a amostra Centrifugar durante 3-4 min a 1500rpm Cortar os tubos capilares pela parte inferior da camada de leuccitos Colocar numa lmina de vidro, drena-se o excesso do plasma e mistura-se suavemente este concentrado Executa-se o esfregao e cora-se pela tcnica May-Grunwald Giemsa.

Glbulos vermelhos

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Bibliografia Apontamentos do professor Apontamentos das aulas www.anossaescola.com/idanha/ficheiros/recursos/O%20SANGUE.ppt http://www.cives.ufrj.br/informacao/malaria/mal-iv.html http://pt.wikipedia.org/wiki/Eritropoiese http://www.labcdl.com.br/informe_medico/hematologia/Talassemia.pdf http://pt.wikipedia.org/wiki/Talassemia http://pt.wikipedia.org/wiki/Anemia www.bioclin.com.br/POP/May%20Gr%FCnwald%20-%20Giemsa.doc

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