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fluorescncia
refrao absoro
LUZ
reflexo
Positivo: 1) Positivo: amostra mais escura do que o plano de fundo; 2) Negativo: amostra mais clara do que o plano de fundo. Negativo:
Equao
Contraste = (If - Ia) x 100 If
Tipos de amostra
Amplitude: 1) Amplitude: alteram a intensidade da luz transmitida. Amostras transparentes coradas causam o mesmo efeito. 2) Fase: no absorvem luz, mas causam mudana de fase Fase: nos comprimentos de onda que a atravessam.
Amostra transparente Amostra tipo amplitude Amostra tipo fase
ocular
- Os raios no desviados so retardados cerca de de l em relao aos raios no desviados; Lente do tubo - a diferena de intensidade de luz no percebida pelo olho humano objetiva (no d contraste).
Raios desviados Raios no desviados Distncia focal amostra condensador
1) Contraste de fase positivo - Acelera os raios no desviados em de P elevando a diferena de fase total para de P; - a amostra fica escura, circundada por halo claro, sobre um fundo mais claro (menos claro que o halo). D contraste. 2) Contraste de fase negativo - Retarda os raios no desviados em de P elevando a diferena de fase total para de P; - a amostra fica clara, circundada por halo escuro, sobre um fundo mais escuro (menos escuro que o halo). D contraste.
Configurao
no desviados + 90 No desviados objetiva amostra
Raios desviados 180 fora de fase Anel de fase Raios desviados 90 fora de fase
condensador
Anel de fase
Configurao
Parte central do anel mais fina que a periferia Contraste positivo
Contraste negativo
extra: 2) Acessrio extra: filtro verde. Isto porque os o sistema projetado para funcionar melhor no centro do espectro visvel (cor verde).
Tcnicas e contraste
Amostra Transparente Corada Transparente Transparente Transparente Transparente Tcnica Campo claro Campo claro Contraste de fase Contraste diferencial de interferncia Campo escuro Fluorescncia Contraste 2-5% 25% 15-20% 15-20% 60-75% 60-75%
Anis no alinhados
Anis alinhados
Indicaes
- Amostras vivas ou fixadas no coradas; - Melhorar contraste para visualizao de detalhes em amostras coradas (ex.: estriaes transversais de msculos)
Limitaes
os halos podem obscurecer os detalhes que circundam a amostra; os anis de fase reduzem a resoluo da objetiva; no adequada para amostras espessas.
Imagens
Osso de dinossauro fossilizado com quartzo no canal de Havers Preparo por desgaste