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Campus de So Jos do Rio Preto

MANUAL DE BIOSSEGURANA

I. INTRODUO

As atividades a serem desenvolvidas no PROGRAMA DE BIOSSEGURANA devem permitir o aprendizado e o crescimento do estudante na sua rea profissional. Os lquidos biolgicos e os slidos, os quais manuseamos nos laboratrios, so, quase sempre, fontes de contaminao. Os cuidados que devemos ter para no haver contaminao cruzada dos materiais, no contaminar o pessoal do laboratrio, da limpeza, os equipamentos, o meio ambiente atravs de aerossis e os cuidados com o descarte destes materiais fazem parte das Boas Prticas em Laboratrio Clnico (BPLC), seguindo as regras da Biossegurana. Para cada procedimento h uma regra j definida em Manuais, Resolues, Normas ou Instrues Normativas.

1. O local de trabalho deve ser mantido sempre em ordem. 2. Aos chefes de grupo cabe a responsabilidade de orientar seu pessoal e exigir o cumprimento das regras, sendo os mesmos, responsveis diretos por abusos e falta de capacitao profissional para utilizar os equipamentos, reagentes e infra-estrutura. 3. Antes de utilizar qualquer dependncia que no seja a do laboratrio em que se encontra trabalhando, o estagirio dever pedir permisso ao responsvel direto pelo mesmo. 4. Para sua segurana, procure conhecer os perigos oferecidos pelos produtos qumicos utilizados no seu trabalho. 5. Procure inteirar-se das tcnicas que voc utiliza. Cincia no mgica. O conhecimento dos porqus pode ser muito til na soluo de problemas tcnicos. 6. Na dvida, pergunte. 7. Ao perceber que um aparelho est quebrado, comunique imediatamente ao chefe do setor para que o reparo possa ser providenciado. 8. Ao perceber algo fora do lugar, coloque-o no devido lugar. A iniciativa prpria para manter a ordem muito bem-vinda e antecipadamente agradecida. 9. Planeje bem os seus protocolos e realize os procedimentos operacionais dos mesmos. Idealmente, antes de comear um experimento, voc deve saber exatamente o que ser consumido, sobretudo no tocante ao uso de material importado.

10. Trabalho com patgenos no deve ser realizado em local movimentado. O acesso ao laboratrio deve ser restrito a pessoas que, realmente, manuseiem o material biolgico. 11. O trnsito pelos corredores com material patognico deve ser evitado ao mximo. Quando necessrio, utilize bandejas. Aquele que nunca trabalhou com patgenos, antes de comear a manuse-los, deve: Estar familiarizado com estas normas; Ter recebido informaes e um treinamento adequado em tcnicas e conduta geral de trabalho em laboratrio (pipetagem, necessidade de manter-se a rea de trabalho sempre limpa, etc.) 13. Ao iniciar o trabalho com patgenos, o estagirio dever ficar sob a superviso de um pesquisador experimentado, antes de estar completamente capacitado para o trabalho em questo. 14. Sada da rea de trabalho, mesmo que temporariamente, usando luvas (mesmo que o pesquisador tenha certeza de que no esto contaminadas), mscara ou avental, estritamente proibida. No se deve tocar com as luvas em maanetas, interruptores, telefone, etc. (S se deve tocar com as luvas o material estritamente necessrio ao trabalho). 15. Seja particularmente cuidadoso para no contaminar aparelhos dentro ou fora da sala (use aparelhos extras, apenas em caso de extrema necessidade). 16. Em caso de acidente: A rea afetada deve ser lavada com gua corrente em abundncia; lcool iodado deve ser passado na rea afetada (com exceo dos olhos, que devem ser lavados exaustivamente com gua destilada); Em caso de ferida, deve ser lavada com gua corrente e comprimida de forma a sair sangue (cuidado para no aumentar as dimenses da ferida deve ser tomado); Os acidentes devem ser comunicados, imediatamente, ao responsvel pelo setor e a direo do Instituto para discusso das medidas a serem adotadas; 17. As normas de trabalho com material radioativo e com material patognico devem ser lidas com ateno antes de se comear a trabalhar com os mesmos. 18. Recomendao final para minimizar o risco de acidentes: no trabalhe sob tenso.

II BIOSSEGURANA DEFINIO Biossegurana um conjunto de procedimentos, aes, tcnicas, metodologias, equipamentos e dispositivos capazes de eliminar ou minimizar riscos inerentes as atividades de pesquisa, produo, ensino, desenvolvimento tecnolgico e prestao de servios, que podem comprometer a sade do homem, dos animais, do meio ambiente ou a qualidade dos trabalhos desenvolvidos. TIPOS DE RISCO (Portaria do Ministrio do Trabalho, MT no. 3214, de 08/06/78) 1. Riscos de Acidentes 2. Riscos Ergonmicos 3. Riscos Fsicos 4. Riscos Qumicos 5. Riscos Biolgicos 1. RISCOS DE ACIDENTES Considera-se risco de acidente qualquer fator que coloque o trabalhador em situao de perigo e possa afetar sua integridade, bem estar fsico e moral. So exemplos de risco de acidente: as mquinas e equipamentos sem proteo, probabilidade de incndio e exploso, arranjo fsico inadequado, armazenamento inadequado, etc. 2. RISCOS ERGONMICOS Considera-se risco ergonmico qualquer fator que possa interferir nas caractersticas psicofisiolgicas do trabalhador causando desconforto ou afetando sua sade. So exemplos de risco ergonmico: o levantamento e transporte manual de peso, o ritmo excessivo de trabalho, a monotonia, a repetitividade, a responsabilidade excessiva, a postura inadequada de trabalho, o trabalho em turnos, etc. 3. RISCOS FSICOS Consideram-se agentes de risco fsico as diversas formas de energia a que possam estar expostos os trabalhadores, tais como: rudo, vibraes, presses anormais, temperaturas extremas, radiaes ionizantes, radiaes no ionizantes, ultra-som, materiais cortantes e ponteagudos, etc.

4. RISCOS QUMICOS Consideram-se agentes de risco qumico as substncias, compostas ou produtos que possam penetrar no organismo pela via respiratria, nas formas de poeiras, fumos, nvoas, neblinas, gases ou vapores, ou que, pela natureza da atividade de exposio, possam ter contato ou ser absorvido pelo organismo atravs da pele ou por ingesto. 5. RISCOS BIOLGICOS Consideram-se agentes de risco biolgico as bactrias, fungos, parasitos, vrus, entre outros. Classificao de risco biolgico: Os agentes de risco biolgico podem ser distribudos em quatro classes de 1 a 4 por ordem crescente de risco (anexo 1), classificados segundo os seguintes critrios: Patogenicidade para o homem. Virulncia. Modos de transmisso Disponibilidade de medidas profilticas eficazes. Disponibilidade de tratamento eficaz. Endemicidade.

MTODOS DE CONTROLE DE AGENTE DE RISCO Os elementos bsicos para conteno de agentes de risco: A. - BOAS PRTICAS DE LABORATRIO - GLP Observncia de prticas e tcnicas microbiolgicas padronizadas. Conhecimento prvio dos riscos. Treinamento de segurana apropriado. Manual de biossegurana (identificao dos riscos, especificao das prticas, procedimentos para eliminao de riscos). A.1. - RECOMENDAES GERAIS Nunca pipete com a boca, nem mesmo gua destilada. Use dispositivos de pipetagem mecnica. No coma, beba, fume, masque chiclete ou utilize cosmticos no laboratrio. Evite o hbito de levar as mos boca, nariz, olhos, rosto ou cabelo, no laboratrio.

Lave as mos antes de iniciar o trabalho e aps a manipulao de agentes qumicos, material infeccioso, mesmo que tenha usado luvas de proteo, bem como antes de deixar o laboratrio.

Objetos de uso pessoal no devem ser guardados no laboratrio. Utilize jalecos ou outro tipo de uniforme protetor, de algodo, apenas dentro do laboratrio. No utilize essa roupa fora do laboratrio. No devem ser utilizadas sandlias ou sapatos abertos no laboratrio. Utilize luvas quando manusear material infeccioso. No devem ser usados jias ou outros adornos nas mos, porque podem impedir uma boa limpeza das mesmas. Mantenha a porta do laboratrio fechada. Restrinja e controle o acesso do mesmo. No mantenha plantas, bolsas, roupas ou qualquer outro objeto no relacionado com o trabalho dentro do laboratrio. Use cabine de segurana biolgica para manusear material infeccioso ou materiais que necessitem de proteo contra contaminao. Utilize dispositivos de conteno ou minimize as atividades produtoras de aerossis, tais como operaes com grandes volumes de culturas ou solues concentradas. Essas atividades incluem: centrifugao (utilize sempre copos de segurana), misturadores tipo Vortex (use tubos com tampa), homogeneizadores (use homogeneizadores de segurana com copo metlico), sonicagem, triturao, recipientes abertos de material infeccioso, frascos contendo culturas, inoculao de animais, culturas de material infeccioso e manejo de animais.

Qualquer pessoa com corte recente, com leso na pele ou com ferida aberta (mesmo uma extrao de dente), devem abster-se de trabalhar com patgenos humanos. Coloque as cabines de segurana biolgica em reas de pouco trnsito no laboratrio, minimize as atividades que provoquem turbulncia de ar dentro ou nas proximidades da cabine.

As cabines de segurana biolgica no devem ser usadas em experimentos que envolvam produtos txicos ou compostos carcinognicos. Neste caso utilizam-se capelas qumicas.

Descontamine todas as superfcies de trabalho diariamente e quando houver respingos ou derramamentos. Observe o processo de desinfeco especfico para escolha e utilizao do agente desinfetante adequado.

Coloque todo o material com contaminao biolgica em recipientes com tampa e a prova de vazamento, antes de remov-los do laboratrio para autoclavao. Descontamine por autoclavao ou por desinfeco qumica, todo o material com contaminao biolgica, como: vidraria, caixas de animais, equipamentos de laboratrio, etc..., seguindo as recomendaes para descarte desses materiais.

Descontamine todo equipamento antes de qualquer servio de manuteno. Cuidados especiais devem ser tomados com agulhas e seringas. Use-as somente quando no houver mtodos alternativos. Seringas com agulhas ao serem descartadas devem ser depositadas em recipientes rgidos, a prova de vazamento e embalados como lixo patolgico. Vidraria quebrada e pipetas descartveis, aps descontaminao, devem ser colocadas em caixa com paredes rgidas rotulada vidro quebrado e descartada como lixo geral.

Saiba a localizao do mais prximo lava olhos, chuveiro de segurana e extintor de incndio. Saiba como us-los. Mantenha preso em local seguro todos os cilindros de gs, fora da rea do laboratrio e longe do fogo. Zele pela limpeza e manuteno de seu laboratrio, cumprindo o programa de limpeza e manuteno estabelecido para cada rea, equipamento e superfcie. Todo novo funcionrio ou estagirio deve ter treinamento e orientao especfica sobre BOAS PRTICAS LABORATORIAIS e PRINCPIOS DE

BIOSSEGURANA aplicados ao trabalho que ir desenvolver. Qualquer acidente deve ser imediatamente comunicado chefia do laboratrio, registrado em formulrio especfico e encaminhado para acompanhamento junto a Comisso de Biossegurana da Instituio. Fique atento qualquer alterao no seu quadro de sade e dos funcionrios sob sua responsabilidade, tais como: gripes, alergias, diarrias, dores de cabea, enxaquecas, tonturas, mal estar em geral, etc... e notifique imediatamente chefia do laboratrio.

B. - BARREIRAS B.1. - BARREIRAS PRIMRIAS B.1.1. EQUIPAMENTO DE PROTEO INDIVIDUAL EPI So empregados para proteger o pessoal da rea de sade do contato com agentes infecciosos, txicos ou corrosivos, calor excessivo, fogo e outros perigos. A roupa e o equipamento servem tambm para evitar a contaminao do material em experimento ou em produo. So exemplos: LUVAS

As luvas so usadas como barreira de proteo prevenindo contra contaminao das mos ao manipular material contaminado, reduzindo a probabilidade de que microrganismos presentes nas mos sejam transmitidos durante procedimentos. O uso de luvas no substitui a necessidade da LAVAGEM DAS MOS porque elas podem ter pequenos orifcios inaparentes ou danificar-se durante o uso, podendo contaminar as mos quando removidas. Usar luvas de ltex SEMPRE que houver CHANCE DE CONTATO com sangue, fludos do corpo, dejetos, trabalho com microrganismos e animais de laboratrio. Usar luvas de PVC para manuseio de citostticos (mais resistentes, porm menos sensibilidade). Lavar instrumentos, roupas, superfcies de trabalho SEMPRE usando luvas. NO usar luvas fora da rea de trabalho, NO abrir portas, NO atender telefone. Luvas (de borracha) usadas para limpeza devem permanecer 12 horas em soluo de Hipoclorito de Sdio a 0,1% (1g/l de cloro livre = 1000 ppm). Verificar a integridade das luvas aps a desinfeco. NUNCA reutilizar as luvas, DESCART-LAS de forma segura.

JALECO Os vrios tipos de jalecos so usados para fornecer uma barreira de proteo e

reduzir a oportunidade de transmisso de microrganismos. Previnem a contaminao das roupas do pessoal, protegendo a pele da exposio a sangue e fluidos corpreos, salpicos e derramamentos de material infectado.

So de uso constante nos laboratrios e constituem uma proteo para o

profissional. Devem sempre ser de mangas longas, confeccionados em algodo ou fibra

sinttica (no inflamvel). Os descartveis devem ser resistentes e impermeveis.

Uso de jaleco PERMITIDO somente nas REAS DE TRABALHO.

NUNCA EM REFEITRIOS, ESCRITRIOS, BIBLIOTECAS, NIBUS, ETC. Jalecos NUNCA devem ser colocados no armrio onde so guardados objetos

pessoais. Devem ser descontaminados antes de serem lavados.

OUTROS EQUIPAMENTOS

culos de Proteo e Protetor Facial (protege contra salpicos, borrifos, gotas,

impacto). Mscara (tecido, fibra sinttica descartvel, com filtro HEPA, filtros para gases,

p, etc.). Avental impermevel.

Uniforme de algodo, composto de cala e blusa.

Luvas de borracha, amianto, couro, algodo e descartveis.

Dispositivos de pipetagem (borracha peras, pipetadores automticos, etc.).

B.1.2. - EQUIPAMENTOS DE PROTEO COLETIVA (EPC) So equipamentos que possibilitam a proteo do pessoal do laboratrio, do meio ambiente e da pesquisa desenvolvida. So exemplos: CABINES DE SEGURANA As Cabines de Segurana Biolgica constituem o principal meio de contenso e so usadas como barreiras primrias para evitar a fuga de aerossis para o ambiente. H trs tipos de cabines de segurana biolgica: Classe I Classe II A, B1, B2, B3.

Classe III Procedimento correto para uso da Cabine de Segurana Biolgica encontra-se no anexo 2. FLUXO LAMINAR DE AR Massa de ar dentro de uma rea confinada movendo-se com velocidade uniforme ao longo de linhas paralelas. CAPELA QUMICA NB Cabine construda de forma aerodinmica cujo fluxo de ar ambiental no causa turbulncias e correntes, assim reduzindo o perigo de inalao e contaminao do operador e ambiente. CHUVEIRO DE EMERGNCIA Chuveiro de aproximadamente 30 cm de dimetro, acionado por alavancas de mo, cotovelos ou joelhos. Deve estar localizado em local de fcil acesso. LAVA OLHOS Dispositivo formado por dois pequenos chuveiros de mdia presso, acoplados a uma bacia metlica, cujo ngulo permite direcionamento correto do jato de gua. Pode fazer parte do chuveiro de emergncia ou ser do tipo frasco de lavagem ocular. MANTA OU COBERTOR Confeccionado em l ou algodo grosso, no podendo ter fibras sintticas. Utilizado para abafar ou envolver vtima de incndio. VASO DE AREIA Tambm chamado de balde de areia, utilizado sobre derramamento de lcalis para neutraliz-lo. EXTINTOR DE INCNDIO A BASE DE GUA Utiliza o CO2 como propulsor. usado em papel, tecido e madeira. No usar em eletricidade, lquidos inflamveis, metais em ignio. EXTINTOR DE INCNDIO DE CO2 EM P Utiliza o CO2 em p como base. A fora de seu jato capaz de disseminar os materiais incendiados. usado em lquidos e gases inflamveis, fogo de origem eltrica. No usar em metais alcalinos e papel.

EXTINTOR DE INCNDIO DE P SECO Usado em lquidos e gases inflamveis, metais do grupo dos lcalis, fogo de origem eltrica. EXTINTOR DE INCNDIO DE ESPUMA Usado para lquidos inflamveis. No usar para fogo causado por eletricidade. EXTINTOR DE INCNDIO DE BCF Utiliza o bromoclorodifluorometano. usado em lquidos inflamveis, incndio de origem eltrica. O ambiente precisa ser cuidadosamente ventilado aps seu uso. MANGUEIRA DE INCNDIO Modelo padro, comprimento e localizao so fornecidos pelo Corpo de Bombeiros.

PROCEDIMENTOS PARA DESCARTE DOS RESDUOS GERADOS EM LABORATRIO 1 - RESDUOS INFECTANTES Estes resduos podem ser divididos em quatro grupos a saber: MATERIAL PROVENIENTE DE REAS DE ISOLAMENTO Incluem-se aqui, sangue e secrees de pacientes que apresentam doenas transmissveis. MATERIAL BIOLGICO Composto por culturas ou estoques de microrganismos provenientes de laboratrios clnicos ou de pesquisa, meios de cultura, placas de Petri, instrumentos usados para manipular, misturar ou inocular microrganismos, vacinas vencidas ou inutilizadas, filtros e gases aspiradas de reas contaminadas. SANGUE HUMANO E HEMODERIVADOS Composto por bolsas de sangue com prazo de utilizao vencida, inutilizada ou com sorologia positiva, amostras de sangue para anlise, soro, plasma, e outros subprodutos. PROCEDIMENTOS RECOMENDADOS PARA O DESCARTE As disposies inadequadas dos resduos gerados em laboratrio podero constituir

focos de doenas infecto-contagiosas se, no forem observados os procedimentos para seu tratamento.

Lixo contaminado deve ser embalado em sacos plsticos para o lixo tipo 1, de

capacidade mxima de 100 litros, indicados pela NBR 9190 da ABNT. Os sacos devem ser totalmente fechados, de forma a no permitir o derramamento

de seu contedo, mesmo se virados para baixo. Uma vez fechados, precisam ser mantidos ntegros at o processamento ou destinao final do resduo. Caso ocorram rompimentos freqentes dos sacos, devero ser verificados, a qualidade do produto ou os mtodos de transporte utilizados. No se admite abertura ou rompimento de saco contendo resduo infectante sem tratamento prvio. Havendo derramamento do contedo, cobrir o material derramado com uma soluo

desinfetante (por exemplo, hipoclorito de sdio a 10.000 ppm), recolhendo-se em seguida. Proceder, depois, a lavagem do local. Usar os equipamentos de proteo necessrios. Todos os utenslios que entrarem em contato direto com o material devero passar

por desinfeco posterior. Os sacos plsticos devero ser identificados com o nome do laboratrio de origem,

sala, tcnica responsvel e data do descarte. Autoclavar a 121 C (125F), presso de 1 atmosfera (101kPa, 151 lb/in acima da

presso atmosfrica) durante pelo menos 20 minutos. As lixeiras para resduos desse tipo devem ser providas de tampas.

Estas lixeiras devem ser lavadas, pelo menos uma vez por semana, ou sempre que

houver vazamento do saco. 2 - RESDUOS PERFUROCORTANTES Os resduos perfurocortantes constituem a principal fonte potencial de riscos, tanto de acidentes fsicos como de doenas infecciosas. So compostos por: agulhas, ampolas, pipetas, lminas de bisturi, lminas de barbear e qualquer vidraria quebrada ou que se quebre facilmente. PROCEDIMENTOS RECOMENDADOS PARA O DESCARTE Os resduos perfurocortantes devem ser descartados em recipientes de paredes rgidas, com tampa e resistentes autoclavao. Estes recipientes devem estar localizados to prximo quanto possveis da rea de uso dos materiais.

Os recipientes devem ser identificados com etiquetas autocolantes, contendo informaes sobre o laboratrio de origem, tcnico responsvel pelo descarte e data do descarte.

Embalar os recipientes, aps tratamento para descontaminao, em sacos adequados para descarte identificados como material perfurocortantes e descartar como lixo comum, caso no sejam incinerados.

A agulha no deve ser retirada da seringa aps o uso. No caso de seringa de vidro, lev-la juntamente com a agulha para efetuar o processo de descontaminao. No quebrar, entortar ou recapear as agulhas.

3 - RESDUOS RADIOATIVOS Compostos por materiais radioativos ou contaminados com radionucldeos com baixa atividade provenientes de laboratrios de pesquisa em qumica e biologia, laboratrios de anlises clnicas e servios de Medicina Nuclear. So normalmente, slidos ou lquidos (seringas, papel absorvente, frascos, lquidos derramados, urina, fezes, etc.). Resduos radioativos, com atividade superior s recomendadas pela Comisso Nacional de Energia Nuclear (CNEN), devero ser acondicionados em depsitos de decaimento (at que suas atividades se encontrem dentro do limite permitido para sua eliminao). PROCEDIMENTOS ESPECFICOS PARA O DESCARTE No misturar rejeitos radioativos lquidos com slidos. Preveja o uso de recipientes especiais, etiquetados e apropriados natureza do produto radioativo em questo. Coletar materiais como agulhas, ponteiras de pipetas e outros objetos afiados, contaminados por radiao, em recipientes especficos, com sinalizao de radioatividade. Os containers devem ser identificados com: Istopo presente, tipo de produto qumico e concentrao, volume do contedo, laboratrio de origem, tcnico responsvel pelo descarte e a data do descarte. Os rejeitos no devem ser armazenados no laboratrio, mas sim em um local previamente adaptado para isto, aguardando o recolhimento.

Considerar como de dez meias vidas o tempo necessrio para obter um decrscimo quase total para a atividade dos materiais (fontes no seladas) empregadas na rea biomdica.

Pessoal responsvel pela coleta de resduos radioativos devem utilizar vestimentas protetoras e luvas descartveis. Estas sero eliminadas aps o uso, tambm, como resduo radioativo.

Em caso de derramamento de lquidos radioativos, podero ser usados papis absorventes ou areia, dependendo da quantidade derramada. Isto impedir seu espalhamento. Estes devero ser eliminados juntos com outros resduos radioativos.

OBSERVAES IMPORTANTES: Os Procedimentos estabelecidos para a eliminao de rejeitos radioativos foram padronizados pela Norma CNEN-NE-6.05 (CNEN, 1985). O pessoal envolvido na manipulao desses rejeitos devem receber treinamento especfico para realizao dessa atividade, alm de uma regular vigilncia mdico sanitria. 4 - RESDUOS QUMICOS Os resduos qumicos apresentam riscos potenciais de acidentes inerentes s suas propriedades especficas. Devem ser consideradas todas as etapas de seu descarte com a finalidade, de minimizar, no s acidentes decorrentes dos efeitos agressivos imediatos (corrosivos e toxicolgicos), como os riscos cujos efeitos venham a se manifestar a mais longo prazo, tais como os teratognicos, carcinognicos e mutagnicos. So compostos por resduos orgnicos ou inorgnicos txicos, corrosivos, inflamveis, explosivos, teratognicos, etc. Para a realizao dos procedimentos adequados de descarte, importante a observncia do grau de toxicidade e do procedimento de no mistura de resduos de diferentes naturezas e composies. Com isto, evitado o risco de combinao qumica e combusto, alm de danos ao ambiente de trabalho e ao meio ambiente. Para tanto, necessrio que a coleta desses tipos de resduos seja peridica. Os resduos qumicos devem ser tratados antes de descartados. Os que no puderem ser recuperados, devem ser armazenados em recipientes prprios para posterior descarte. No armazenamento de resduos qumicos devem ser considerados a compatibilidade dos produtos envolvidos, a natureza do mesmo e o volume.

PROCEDIMENTOS GERAIS DE DESCARTE Cada uma das categorias de resduos orgnicos ou inorgnicos relacionados deve

ser separada, acondicionada, de acordo com procedimentos e formas especficas e adequadas a cada categoria. Na fonte produtora do rejeito e em sua embalagem devero existir os smbolos internacionais estabelecidos pela Organizao Internacional de Normalizao (ISO) e pelo Comit de Especialistas em Transporte de Produtos Perigosos, ambos da Organizao das Naes Unidas, adequados a cada caso. Alm do smbolo identificador da substncia, na embalagem contendo esses resduos deve ser afixada uma etiqueta autoadesiva, preenchida em grafite contendo as seguintes informaes: Laboratrio de origem, contedo qualitativo, classificao quanto natureza e advertncias. Os rejeitos orgnicos ou inorgnicos sem possibilidade de descarte imediato devem ser armazenados em condies adequadas especficas. Os resduos orgnicos ou inorgnicos devero ser desativados com o intuito de transformar pequenas quantidades de produtos qumicos reativos em produtos derivados incuos, permitindo sua eliminao sem riscos. Este trabalho deve ser executado com cuidado, por pessoas especializadas. Os resduos que sero armazenados para posterior recolhimento e

descarte/incinerao, devem ser recolhidos separadamente em recipientes coletores impermeveis a lquidos, resistentes, com tampas rosqueadas para evitar derramamentos e fechados para evitar evaporao de gases. Resduos inorgnicos txicos e suas solues aquosas Sais inorgnicos de metais txicos e suas solues aquosas devem ser previamente diludos a nveis de concentrao que permitam o descarte direto na pia em gua corrente. Concentraes mximas permitidas ao descarte direto na pia para cada metal: Cdmio - no mximo 1 mg/L Chumbo- no mximo 10 mg/L Zinco- no mximo 5 mg/L Cobre- no mximo 5 mg/L Cromo- no mximo 10 mg/L

Prata- no mximo 1 mg/L Resduos inorgnicos cidos e suas solues aquosas Diluir com gua, neutralizar

com bases diludas e, descartar na pia em gua corrente. Resduos inorgnicos bsicos e suas solues aquosas Diluir com gua, neutralizar com cidos diludos e descartar na pia em gua corrente. Resduos inorgnicos neutros e suas solues aquosas Diluir com gua e descartar na pia em gua corrente. Resduos inorgnicos insolveis em gua: Com risco de contaminao ao meio ambiente armazenar em frascos etiquetados e de contedo similar, para posterior recolhimento. Sem risco de contaminao ao meio ambiente coletar em saco plstico e descartar como lixo comum. Resduos orgnicos e suas solues aquosas txicas coletar em frascos etiquetados e de contedo similar para posterior recolhimento. Resduos orgnicos cidos e suas solues aquosas diluir com gua, neutralizar com cidos diludos e descartar na pia em gua corrente. Resduos orgnicos bsicos e suas solues aquosas diluir com gua, neutralizar com cidos diludos e descartar na pia em gua corrente. Resduos orgnicos neutros e suas solues aquosas diluir com gua e descartar na pia em gua corrente. Resduos orgnicos slidos insolveis em gua: Com risco de contaminao ao meio ambiente armazenar em frascos etiquetados e de contedo similar para posterior recolhimento. Sem risco de contaminao ao meio ambiente coletar em sacos plsticos e descartar em lixo comum. Resduos de solventes orgnicos: Solventes halogenados puros ou em mistura armazenar em frascos etiquetados e de contedo similar para posterior recolhimento. Solventes isentos de halogenados, puros ou em mistura coletar em frascos etiquetados e de contedo similar, para posterior incinerao.

Solventes isentos de toxicidade, puros ou em soluo aquosa, utilizados em grande


volume coletar em frascos etiquetados e de contedo similar para posterior recuperao. Solventes que formam perxidos e suas misturas coletar em frascos, adicionar substncias que impeam a formao de perxidos, etiquetar, para posterior incinerao. 5 - RESDUOS COMUNS Composto por todos os resduos que no se enquadram em nenhuma das categorias anteriores e que, por sua semelhana com os resduos domsticos comuns, podem ser considerados como tais. ROTINAS DE ESTERILIZAO Vidraria a ser autoclavada de rotina: A vidraria deve ser autoclavada a 120O C por 20 minutos e postas para secar em estufa. A vidraria com tampa de poliestireno no deve ser submetida a temperatura acima de 50O C no forno. Os demais materiais a serem esterilizados devem ser solicitados, diretamente, ao pessoal da esterilizao, pelos prprios usurios. 1. Tubos de ensaio, frascos e pipetas: a) Contaminados ou sujos com material proteico: Aps o uso imerg-los em soluo de hipoclorito de sdio a 1% em vasilhames apropriados (pipetas Pasteur e demais separadamente) por, no mnimo, 12 horas. b) Vidraria suja com material aderente (Nujol, Percoll, Adjuvantes oleosos, etc.): Lavar em gua de torneira e coloc-los em soluo de Extran a 2% prximos a pia das salas dos laboratrios por um perodo mnimo de 04 horas (Pipetas Pasteur e demais separadamente). Observao: A vidraria maior que no couber dentro dos vasilhames deve ser tratada colocando-se a soluo desinfetante ou detergente dentro da mesma. c) Vidrarias utilizadas com gua ou solues tampes sem protenas: Os frascos devero ser lavados pelo prprio usurio, em gua corrente e, em seguida, trs vezes em gua destilada, colocados para secar deixando-os emborcados sobre papel toalha no laboratrio, prximo a pia. Aps secarem, devero ser tampados com papel

alumnio e guardados nos armrios. Tubos e pipetas devero ser processados como se estivessem contaminados. d) Pipetas sujas com gel: Colocar em vasilhames separados e ferver antes de juntar as demais pipetas. 2. Lminas e Lamnulas Colocar nos vasilhames apropriados e rotulados para as mesmas com soluo de hipoclorito a 1%. Aps o trabalho, colocar as lminas e lamnulas em vasilhames separados. Lavar as lamnulas no laboratrio e colocar em vasilhames contendo lcool, na mesa de apoio do fluxo. 3 - Cmara e Lamnula de Neubauer e Homogeneizadores de Vidro: Aps uso, colocar em vasilhame imergindo em hipoclorito a 1%. Aps 1 hora, lavar em gua corrente, secar e guardar. MATERIAL PLSTICO 1) Frasco, tubos de ensaio, seringas, ponteiras e tampas a) Contaminados: Imergir em hipoclorito de sdio a 1% no mesmo vasilhame utilizado para as vidrarias, com exceo das ponteiras, que devero ser colocadas em recipientes menores, separados. Observao: Encher as ponteiras com a soluo de hipoclorito ao desprez-las. b) No contaminados, porm sujos com material aderente (adjuvante oleoso, Nujol, Percoll,etc): Lavar em gua corrente e imergir em Extran a 2% por tempo mnimo de 04 horas em vasilhame apropriado. 2) Pipetas Descartveis a) Contaminadas: Colocar no vasilhame para pipeta de vidro. b) Sujas com material aderente: Lavar em gua corrente e colocar no vasilhame para pipeta de vidro.

3) Tampas pretas de poliestireno: Imergir em formol a 10% ou glutaraldedo a 2% por um mnimo de 24 horas ou 02 horas respectivamente. OUTROS MATERIAIS: 1) Agulhas descartveis a) Contaminadas: Aps o uso imergir no vasilhame de paredes duras contendo formol a 10%, para isso destinado, pelo menos 24 horas. Observao: DESPREZ-LAS SEM USAR O PROTETOR a fim de se evitar o risco de acidentes (puno acidental do dedo). b) Sujas com material aderente: Desprez-las com o respectivo protetor bem preso. Aps a descontaminao dever ser incinerado 2) Material Cirrgico a) Contaminado: Imergir em soluo de glutaraldeido a 2% por 02 horas para desinfectar. Aps lavar em gua corrente e destilada, secar com gase e guardar. Se desejar esterilizar o material, submeter a glutaraldeido a 2% durante 10 horas, lavar e secar com gua e gaze estreis dentro do fluxo laminar. Alternativamente. 3) Tampes de Gaze a) Molhados com cultura Colocar no vasilhame com hipoclorito de sdio a 1% para ser desprezado aps desinfeco. b) Secos Deixar em vasilhame reservado por, no mnimo, 48 horas e em seguida reutiliz-los. 4) Filtros Millipore Pequenos Devem ser desmontados pelo operador, colocados dentro de um frasco com hipoclorito e entregues esterilizao (at s 16 horas). 5) Culturas de parasitos no utilizados Colocar um volume duas vezes maior de hipoclorito dentro dos frascos e em seguida desprezar dentro do vasilhame para vidrarias ou plsticos.

6) Ims para agitadores magnticos Aps uso, lavar com gua corrente e destilada, secar e guardar. 7) Placas de gel de poliacrilamida Aps o uso, lavar em gua corrente, gua destilada e lcool, secar e guardar. EQUIPAMENTOS, BANCADAS E PIAS 1) Cada usurio dever limpar e arrumar as bancadas e equipamentos aps o uso. 2) No final do expediente as bancadas devero ser limpas com hipoclorito a 0,5% e, na sexta-feira, tarde, no caso, na sala de cultura, fazer a mesma limpeza com fenol semisinttico (Germipol 50 mL/L), utilizando mscara. 3) As pias devero ser limpas no incio do expediente, quando forem removidos os materiais a serem lavados. 4) Verificar se os refrigeradores e freezeres precisam ser descongelados e limpos, semanalmente, e executar a limpeza, se necessrio. ALGUMAS NORMAS DA SALA DE ESTERILIZAO A) - LAVAGEM: 1) Retirar, os vasilhames com materiais a serem lavados, da sala, no incio do expediente. 2) Lavar o material que estava com hipoclorito de sdio, fenol ou glutaraldedo em gua corrente. 3) Mergulhar o material em Extran em vasilhames especficos para cada tipo de material, pelo perodo mnimo de 04 horas. 4) Retirar o Extran do material aps escov-los (quando necessrio), rinsando-os , repetidas vezes, com gua de torneira seguido por gua destilada. 5) Fazer a rinsagem das pipetas graduadas dentro do lavador de pipetas. 6) Secar o material em estufa. Colocar papel alumnio para cobrir a vidraria no autoclavvel e devolver ao laboratrio. B) ESTERILIZAO: 1) PIPETAS Colocar chumao de algodo, empacotar em papel pardo ou porta-pipetas e esterilizar em forno (170O C 180O C) por 01 hora.

Anexo 1

Classes de risco biolgico: Classe de Risco I - Escasso risco individual e comunitrio. O Microrganismo tem pouca probabilidade de provocar enfermidades humanas ou enfermidades de importncia veterinria. Ex: Bacillus subtilis Classe de Risco II - Risco individual moderado, risco comunitrio limitado. A exposio ao agente patognico pode provocar infeco, porm, se dispe de medidas eficazes de tratamento e preveno, sendo o risco de propagao limitado. Ex: Schistosoma mansoni Classe de Risco III - Risco individual elevado, baixo risco comunitrio. O agente patognico pode provocar enfermidades humanas graves, podendo propagar-se de uma pessoa infectada para outra, entretanto, existe profilaxia e/ou tratamento. Ex: Mycobacterium tuberculosis Classe de Risco IV - Elevado risco individual e comunitrio. Os agentes patognicos representam grande ameaa para as pessoas e animais, com fcil propagao de um indivduo ao outro, direta ou indiretamente, no existindo profilaxia nem tratamento. Ex: Vrus Ebola Nveis de conteno fsica para riscos biolgicos: Para manipulao dos microrganismos pertencentes a cada um das quatro classes de risco devem ser atendidos alguns requisitos de segurana, conforme o nvel de conteno necessrio. O nvel 1 de conteno se aplica aos laboratrios de ensino bsico, nos quais so manipulados os microrganismos pertencentes a classe de risco I. No requerida nenhuma caracterstica de desenho, alm de um bom planejamento espacial, funcional e a adoo de boas prticas laboratoriais. O nvel 2 de conteno destinado ao trabalho com microrganismos da classe de risco II, se aplica aos laboratrios clnicos ou hospitalares de nveis primrios de diagnstico, sendo necessrio, alm da adoo das boas prticas, o uso de barreiras fsicas primrias

(cabine de segurana biolgica e equipamentos de proteo individual) e secundrias (desenho e organizao do laboratrio). O nvel 3 de conteno destinado ao trabalho com microrganismos da classe de risco III ou para manipulao de grandes volumes e altas concentraes de microrganismos da classe de risco II. Para este nvel de conteno so requeridos alm dos itens referidos no nvel 2, desenho e construo laboratoriais especiais. Devem ser mantidos controles rgidos quanto operao, inspeo e manuteno das instalaes e equipamentos. O pessoal tcnico deve receber treinamento especfico sobre procedimentos de segurana para a manipulao desses microrganismos. nvel 4 ou conteno mxima destina-se a manipulao de microrganismos da classe de risco IV, o laboratrio com maior nvel de conteno e representa uma unidade geogrfica e funcionalmente independente de outras reas. Esses laboratrios requerem, alm dos requisitos fsicos e operacionais dos nveis de conteno 1, 2 e 3, barreiras de conteno (instalaes, desenho, equipamentos de proteo) e procedimentos especiais de segurana.

Anexo 2

Fechar as portas do laboratrio. Evitar circulao de pessoas no laboratrio durante o uso da cabine. Ligar a cabine e a luz UV de 15 a 20 minutos antes de seu uso. Descontaminar a superfcie interior com gaze estril embebida em lcool etlico ou isoproplico a 70%. Lavar as mos e antebraos com gua e sabo e secar com toalha ou papel toalha descartvel. Passar lcool etlico ou isoproplico a 70% nas mos e antebraos. Usar jaleco de manga longa, luvas, mscara, gorro e pr-p quando necessrio. Colocar os equipamentos, meios, vidraria, etc. no plano de atividade da rea de trabalho. Limpar todos os objetos antes de introduzi-los na cabine. Organizar os materiais de modo que os itens limpos e contaminados no se misturem. Minimizar os movimentos dentro da cabine. Colocar os recipientes para descarte de material no fundo da rea de trabalho ou lateralmente (cmaras laterais, tambm, so usadas). Usar incinerador eltrico ou microqueimador automtico (o uso de chama do bico de Bunhsen pode acarretar danos no filtro HEPA e interromper o fluxo de ar causando turbulncia).

Usar pipetador automtico. Conduzir as manipulaes no centro da rea de trabalho. Interromper as atividades dentro da cabine enquanto equipamentos como centrfugas, misturadores, ou outros equipamentos estiverem sendo operados. Limpar a cabine, ao trmino do trabalho, com gaze estril embebida com lcool etlico ou isoproplico a 70%. Descontaminar a cabine (a descontaminao poder ser feita com formalina fervente; aquecimento de paraformaldedo (10,5g/m3) ou mistura de formalina, paraformaldedo e gua com permanganato de potssio. (35 mL de formalina e 7,5 g de permanganato de potssio).

Deixar a cabine ligada de 15 a 20 minutos antes de deslig-la.

No introduzir na cabine objetos que causem turbulncia. No colocar na cabine materiais poluentes como madeira, papelo, papel, lpis, borracha. Evitar espirrar ou tossir na direo da zona estril (usar mscara). A cabine no um depsito, evite guardar equipamentos ou quaisquer outras coisas no seu interior, mantendo as grelhas anteriores e posteriores desobstrudas. No efetue movimentos rpidos ou gestos bruscos na rea de trabalho. Evite fontes de calor no interior da cabine, utilize microqueimadores eltricos. Emprego de chama, s quando absolutamente necessrio. Jamais introduzir a cabea na zona estril. A projeo de lquidos e slidos contra o filtro deve ser evitada. As lmpadas UV no devem ser usadas enquanto a cabine de segurana estiver sendo utilizada. Seu uso prolongado no necessrio para uma boa esterilizao e provoca deteriorao do material e da estrutura da cabine. As lmpadas UV devem ter controle de contagem de tempo de uso.

Os recipientes para descarte de material devem estar sobre o cho, carrinhos ou mesas ao lado da cabine de segurana. Papis presos no painel de vidro ou acrlico da cabine limitar o campo de viso do usurio e diminuir a intensidade de luz podendo causar acidentes.

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