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Curso de Toxicologia

ANVISA - RENACIAT - OPAS NUTES/UFRJ - ABRACIT

MDULO III Fundamentos de Toxicologia


Autores Conceio Aparecida Turini (CCI - Londrina) Tutor Sayonara Maria Lia Fook (CEATOX - Campina Grande)

Introduo
A intoxicao humana abrange uma ampla variedade de processos fisiopatolgicos relacionados com a interao entre um agente de natureza qumica ou biolgica e o organismo. A condio primria para que a intoxicao acontea consiste na exposio ao agente txico o qual, dever alcanar o stio-alvo, aps vencer as barreiras impostas pelo organismo. Portanto, a expresso da toxicidade de uma substncia sobre um sistema biolgico depender de inmeros fatores que incluem as propriedades fsicoqumicas do agente txico, as condies de exposio e, fundamentalmente, de uma srie de eventos que ocorrem dentro do organismo, ou seja, de seu comportamento toxicocintico e toxicodinmico. Este mdulo tem por objetivo fornecer elementos tericos para a compreenso da intoxicao como fenmeno biolgico. Para isso, sero abordados os processos que se sucedem desde que o agente txico penetra no organismo, a partir da superfcie de contato com o meio externo, at alcanar o stio de ao, com discusso das variveis que afetam a introduo e o transporte do toxicante, as modificaes causadas no seu metabolismo e os mecanismos atravs dos quais ele exerce sua ao txica. Ao mesmo tempo, o enfoque clssico dos tpicos fundamentais de Toxicologia, adotado nesta apresentao, propiciar a normalizao de termos e conceitos bsicos empregados em Toxicologia.

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reas e conceitos bsicos


A Toxicologia a cincia que tem como objeto de estudo o efeito nocivo decorrente da interao entre um agente txico e um sistema biolgico, com a finalidade principal de prevenir o aparecimento desse efeito, ou seja, estabelecer condies seguras de exposio a essas substncias e assim, permitir que o homem se beneficie das conquistas tecnolgicas da era atual. A toxicologia apia-se, ento, em trs elementos bsicos: 1. a existncia de uma substncia (agente txico) capaz de interagir com um sistema biolgico e produzir uma resposta; 2. o sistema biolgico com o qual o agente txico interage para produzir o efeito; 3. a resposta (efeito) que dever ser considerada nociva ao sistema biolgico com o qual interage. reas da Toxicologia A toxicologia uma cincia multidisciplinar que compreende um vasto campo de conhecimentos bsicos e aplicados, relacionando-se estritamente com diversas outras cincias. desenvolvida por especialistas com diferentes formaes profissionais que oferecem contribuies especficas em uma ou mais reas de atividade permitindo assim, o aperfeioamento dos conhecimentos e o desenvolvimento de cinco reas de atuao, de acordo com a natureza do agente txico ou a maneira pela qual este alcana o sistema biolgico. Toxicologia de Alimentos: rea relacionada ao estudo da toxicidade das substncias veiculadas pelos alimentos, ou seja, a rea da toxicologia que estabelece ndices de segurana para que os alimentos, de origem natural ou industrial, possam ser ingeridos sem causar danos sade, tanto no que se refere sua obteno quanto ao seu armazenamento. Toxicologia Ambiental e Ecotoxicologia: essa rea do conhecimento toxicolgico preocupa-se com o estudo das aes e dos efeitos nocivos de substncias qumicas, quase sempre de origem antropognica, sobre os organismos vivos. Em geral, empregam-se os termos Toxicologia Ambiental para os estudos dos efeitos diretos causados pela interao desses agentes contaminantes do ambiente (ar, gua, solo) com o organismo humano e, Ecotoxicologia, para os estudos dos efeitos txicos desses compostos sobre os ecossistemas e seus componentes no humanos. Como o homem se encontra no topo de muitas cadeias alimentares e existem poucos ecossistemas nos quais os seres humanos no participam, essa distino , portanto, bastante frgil. Toxicologia de Medicamentos e Cosmticos: nessa rea estudam-se os efeitos nocivos produzidos pela interao dos medicamentos e cosmticos com o organismo, decorrentes do uso inadequado ou da suscetibilidade individual. Toxicologia Ocupacional: a rea que se ocupa do estudo das aes e efeitos nocivos de substncias usadas no ambiente de trabalho sobre o organismo do indivduo exposto. Nessa rea, busca-se, principalmente, a obteno de conhecimentos que permitam estabelecer critrios seguros de exposio ocupacional. Toxicologia Social: embora no mundo contemporneo a Toxicologia seja uma cincia de carter social em sua natureza, o termo Toxicologia Social designado para a rea

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que estuda os efeitos nocivos decorrentes do uso no mdico de drogas ou frmacos, com prejuzos ao prprio usurio e sociedade. Trata do estudo das chamadas drogas de abuso, lcitas ou no, cujo uso, sempre voluntrio, visa modificar o estado de conscincia ou evitar o desconforto ocasionado pela interrupo do uso da substncia, mesmo que por um curto perodo de tempo. No mbito de cada uma dessas reas, podem ser abordadas questes relacionadas a aspectos analticos, clnicos, mdico-legais, regulatrios, entre outros. Como conseqncia da ampliao das reas de aplicao da Toxicologia, imposta pela sua abrangncia multidisciplinar e multiprofissional, essa cincia pode ser dividida, de acordo com os diferentes campos de trabalho, em trs reas ou ramos fundamentais. A Toxicologia Clnica ou Mdica trata do atendimento do paciente exposto ao agente txico ou intoxicado, com a finalidade de prevenir, diagnosticar a intoxicao ou aplicar, se necessrio, uma medida teraputica especfica. A Toxicologia Analtica ocupa-se da deteco do agente txico ou de algum parmetro bioqumico relacionado com a exposio a ele em fluidos biolgicos, alimentos, ar, gua e solo, com o propsito de diagnosticar ou prevenir as intoxicaes. No exerccio dessa modalidade, de fundamental importncia o domnio de qumica analtica e de instrumentao, pois ela busca mtodos com preciso, exatido e sensibilidade adequadas para a identificao e/ou quantificao inequvocas do toxicante ou para a avaliao de alteraes bioqumicas funcionais do organismo. As anlises toxicolgicas so empregadas com as mais variadas finalidades: no aspecto forense ou mdicolegal, na monitorizao teraputica ou acompanhamento do paciente submetido a tratamento prolongado com medicamentos, na monitorizao biolgica da exposio ocupacional s substncias qumicas, no controle antidopagem em competies esportivas, no diagnstico da intoxicao aguda ou crnica em emergncias mdicas, entre outras. E, por fim, a Toxicologia Experimental, que desenvolve estudos para elucidar os mecanismos de ao dos toxicantes sobre os sistemas biolgicos e avaliar os efeitos decorrentes dessa ao. A avaliao de toxicidade das substncias feita atravs de estudos conduzidos em diferentes espcies animais, seguindo rigorosas normas preconizadas pelos rgos reguladores nacionais e internacionais. Conceitos Bsicos Considerando-se o carter multidisciplinar e o fato de que muitas pessoas com diferentes formaes acadmicas se interessam em estudar e trabalhar com Toxicologia, torna-se necessria a observao do uso apropriado de termos empregados em toxicologia e apresentados a seguir. Agente txico, toxicante ou xenobitico uma substncia qumica ou agente fsico capaz de causar dano a um sistema biolgico, alterando seriamente uma funo ou levando-o morte, sob certas condies de exposio. A maioria das substncias consideradas como agente txico so exgenas, sem papel fisiolgico conhecido e denominadas xenobiticos. Outros termos que merecem ser mencionados so apresentados abaixo.

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Toxina: referese substncia txica produzida por um organismo vivo (microrganismo, animal ou planta). Existe um campo de estudo especfico, denominado Toxinologia, que estuda os efeitos nocivos dessas substncias. Veneno: termo de uso popular que, embora em princpio, possa ser utilizado como sinnimo de agente txico, reservado especificamente para designar substncias de origem animal ou vegetal, utilizadas para autodefesa ou predao, como o caso dos venenos ofdicos, de abelhas, entre outros. Frmaco: toda substncia de estrutura qumica definida, capaz de modificar ou explorar o sistema fisiolgico ou estado patolgico, em benefcio do organismo receptor. Droga: toda substncia capaz de modificar ou explorar o sistema fisiolgico ou estado patolgico, utilizada com ou sem inteno de benefcio do organismo receptor. A palavra droga, tem aceitao popular para designar frmacos, medicamentos, matria prima de medicamentos, alucingenos e agentes txicos. Qualquer substncia pode atuar como toxicante. Tanto os produtos exgenos como os prprios constituintes do organismo, quando se encontram em propores excessivas, podem produzir efeitos nocivos. Os agentes txicos apresentam estruturas qumicas variadas e podem ser classificados utilizando-se diferentes critrios, conforme a finalidade de seu estudo. Assim, o toxicante pode ser classificado segudo: 1. estruturas qumicas gerais: aminas aromticas, hidrocarbonetos alifticos, hidrocarbonetos aromticos, metais, etc. 2. estado fsico: slidos ou lquidos; 3. gases: so fludos sem forma que permanecem no estado gasoso em condies normais de presso e temperatura. Ex.: CO, NO e NO2, O3, etc. 4. vapores: so as formas gasosas de substncias normalmente slidas ou lquidas nas condies ambientais. Ex: vapores resultantes da volatilizao de solventes orgnicos como benzeno, tolueno, xileno, entre outros; 5. partculas ou aerodispersides: partculas de tamanho microscpico, em estado slido ou lquido. Ex: poeiras e fumos; neblinas e nvoas. 6. estabilidade ou reatividade qumica: explosivo, inflamvel, oxidante, radioativo. 7. rgos-alvo: rim, fgado, sistema nervoso central, sistema hematopoitico, outros. 8. ao txica: local ou sistmica. 9. efeitos txicos: carcinognicos, mutagnicos, neurotxicos, nefrotxicos, hepatotxicos, . 10. usos: agrotxicos, solventes, aditivos alimentares. 11. mecanismo de toxicidade: anticolinestersico, metemoglobinizante, entre outros. 12. potencial de toxicidade: extremamente txicos, moderadamente txicos, levemente txicos, pouco txicos. Toxicidade a capacidade inerente a uma substncia de produzir danos aos organismos vivos, ou seja, a medida relativa do potencial txico da substncia sob certas condies controladas de exposio. Uma substncia muito txica causar dano a um organismo se for administrada em quantidades muito pequenas, enquanto uma substncia de baixa toxicidade somente produzir efeito quando a quantidade administrada for muito grande. O conhecimento da toxicidade das substncias qumicas se obtm atravs de experimentos em laboratrio utilizando animais. Os mtodos so empregados com todo rigor cientfico com a finalidade de fornecer informaes relativas aos efeitos

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txicos e, principalmente, para avaliar riscos que possam ser extrapolados para o homem. Risco e segurana O termo risco traduz a probabilidade estatstica de que se produzam efeitos adversos ou danos por exposio a um agente txico, em virtude das propriedades inerentes ao mesmo, bem como das condies de exposio. Nem sempre a substncia de maior toxicidade a que oferece maior risco para o homem. Dependendo das condies de uso ou exposio, uma substncia classificada como muito txica (elevada toxicidade intrnseca) pode ser menos apresentar menor risco do que uma pouco txica. Por exemplo, embora o tolueno seja um solvente carcinognico, no oferece risco se estiver adequadamente armazenado. A existncia de risco associado ao uso de uma substncia qumica, torna necessrio o estabelecimento de condies de segurana. Portanto, define-se como segurana, a certeza de que no haver efeitos adversos para um indivduo exposto a uma determinada substncia, em quantidade e forma recomendada de uso. Ou seja, quando se fala em risco e segurana, significa a possibilidade ou no da ocorrncia de uma situao adversa. No entanto, no fcil estabelecer o que um risco aceitvel no uso de substncia qumica. Esta deciso bastante complexa e envolve o binmio risco-benefcio. Na utilizao das substncias qumicas para diversos fins, alguns fatores devem ser considerados na determinao de um risco aceitvel: a necessidade do uso da substncia; a disponibilidade e a adequao de outras substncias alternativas para o uso correspondente; os efeitos sobre a qualidade do ambiente e conservao dos recursos naturais; as consideraes sobre o trabalho (no caso de ser usada em ambiente de trabalho); a avaliao antecipada de seu uso pblico (ou seja, o que ela poder causar sobre a populao em geral) e consideraes econmicas. Efeito txico, adverso ou deletrio uma alterao anormal, indesejvel ou nociva decorrente da exposio a substncias potencialmente txicas. Todo efeito txico indesejvel e nocivo, mas, nem todos os efeitos indesejveis so txicos. A morte o efeito adverso mais drstico que pode ocorrer. No caso de medicamentos, em particular, devem-se distinguir os efeitos colaterais e a toxicidade propriamente dita. Portanto, os efeitos colaterais de agentes teraputicos so aqueles indesejveis, mas, muitas vezes tolerveis, que aparecem durante a farmacoterapia, enquanto a toxicidade representa a manifestao de efeitos lesivos de maior gravidade, podendo levar at morte. Alvo o termo usado com freqncia para designar o stio ou local do organismo que interage com o agente txico e apresenta a resposta biolgica correspondente. Pode ser referido como uma molcula (DNA, protena, etc.), um receptor ou um rgo (fgado, rim, crebro, etc.). Destoxificao o processo de transformao qumica que converte uma substncia em formas mais facilmente excretveis (menos txica), geralmente atravs de reaes de biotransformao. Antdoto e antagonista

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So substncias capazes de neutralizar ou reduzir os efeitos de uma substncia potencialmente txica. O antdoto a substncia que se ope ao efeito txico atuando sobre o toxicante, enquanto o antagonista impede o toxicante de se ligar a seu alvo ou exerce ao oposta do agente txico (agonista). Intoxicao o conjunto de efeitos nocivos representados por manifestaes clnicas (sinais e sintomas) ou laboratoriais que revelam o desequilbrio orgnico produzido pela interao entre o agente txico com o sistema biolgico. Por envenenamento, entendese o transtorno produzido por toxinas.

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Fases da intoxicao
A intoxicao humana compreende uma ampla variedade de processos fisiopatolgicos resultantes da interao de um agente txico com o organismo. Porm, para que o efeito txico ou adverso sobre o sistema biolgico seja produzido, necessrio que o toxicante ou seus produtos de biotransformao (metablitos) alcancem stios especficos (alvo) no organismo e permaneam em contato com os mesmos por um perodo de tempo suficiente para produzir a ao txica. Dessa forma, a intoxicao inicia-se com a exposio do organismo ao agente txico que, aps vencer as defesas do organismo, chega ao local de ao na forma ativa. Essas defesas consistem, fundamentalmente, em mecanismos que restringem a sua mobilidade e diminuem o perodo de exposio do tecido alvo, ou seja, o organismo atua impondo barreiras distribuio do toxicante para determinados tecidos, diminuindo sua difusibilidade atravs das membranas celulares e/ou facilitando sua excreo. Os processos de transporte e as transformaes que o agente txico sofre, desde a superfcie epitelial de contato, at alcanar os rgos nos quais se armazena ou causa leses, so muito complexos. Por convenincia, para facilitar o estudo dos complexos eventos envolvidos desde a exposio do organismo ao agente txico at o aparecimento de manifestaes clnicas e/ou laboratoriais, a intoxicao pode ser desdobrada em quatro fases: Fase I Exposio: corresponde ao contato do agente txico com o organismo. Representa a disponibilidade qumica das substncias e passveis de serem introduzidas no organismo. Fase II Toxicocintica: consiste no movimento do agente txico dentro do organismo. composta pelos processos de absoro, distribuio, biotransformao e excreo. Todos esses processos envolvem reaes mtuas entre o agente txico e o organismo, conduzindo disponibilidade biolgica (biodisponibilidade). Fase III Toxicodinmica: corresponde ao do agente txico no organismo. Atingindo o alvo, o toxicante ou o seu produto de biotransformao interage biologicamente causando alteraes morfolgicas e/ou funcionais, produzindo danos. Fase IV Clnica: caracterizada pelas manifestaes clnicas e/ou laboratoriais resultantes da ao txica.

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Fase I Exposio
Esta fase representada pelo perodo em que o ser humano fica exposto substncia txica. o contato do toxicante com as superfcies externas ou internas do organismo. Nessa etapa, de suma importncia a disponibilidade qumica do agente txico, ou seja, a concentrao da substncia em condies de ser introduzida no organismo. Alm da magnitude, deve-se considerar tambm, a durao e a freqncia da exposio, as vias de introduo e a suscetibilidade individual. Dose ou concentrao A dose ou concentrao determina o tipo e a magnitude da resposta biolgica. Por definio, dose a quantidade de um agente administrado para um indivduo e, geralmente, expressa usando-se unidades de massa por massa (ex, mg de agente txico / kg de peso corpreo). O termo concentrao aplica-se exposio do indivduo a uma determinada concentrao de um agente presente em um compartimento (ex, solo, gua, ar). Neste caso, no se sabe exatamente quanto do agente efetivamente penetrou no organismo. A concentrao expressa em unidades de massa por volume do meio (ex, mg de agente txico / m3 de ar; mg de agente txico / litro de gua, mg de agente txico / m3 de solo), mas, tambm pode ser por massa do meio (ex, mg de agente txico / g de solo). A concentrao tambm comumente expressa atravs das unidades ppm (partes por milho) ou ppb (partes por bilho). Para facilitar, ser usado somente o termo dose no resto desse mdulo, mas, no se esqueam de que, se a exposio for ambiental, o termo correto concentrao. Com relao dose deve-se distinguir: Dose efetiva 50 (DE50) Trata-se da quantidade de substncia (em mg, g ou mL por Kg de peso corporal) que, em condies bem determinadas, produz um determinado efeito na metade de um grupo de animais de certa espcie. Dose letal mdia (DL50) a dose calculada estatisticamente, em mg/Kg, de um determinado agente qumico ou fsico, necessria para matar 50% dos organismos vivos de uma populao de animais, sob um conjunto de condies definidas. Os agentes qumicos podem ser classificados, segundo cinco classes de toxicidade, de acordo com os valores de DL50. Tabela 1 - Classificao quanto ao grau de toxicidade Categoria de Toxicidade Extremamente txica Altamente txica Moderadamente txica Levemente txica Praticamente no txica DL50 oral para ratos < ou = 1mg/kg > 1 a 50 mg/kg > 50 a 500 mg/kg > 0,5 a 5 g/kg > 5 g/kg

Esta classificao utilizada para consultas rpidas, qualitativas, com finalidade de obter informaes relativas toxicidade intrnseca das substncias. A falha desta classificao est no fato dela se basear apenas na toxicidade intrnseca da substncia

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que um parmetro extremamente varivel, sendo influenciado por uma srie de fatores, relacionados principalmente ao agente qumico, ao organismo e exposio. Em situaes prticas no se deve conhecer somente a toxicidade das substncias, representadas geralmente pela DL50, pois to importante como conhecer a toxicidade dos agentes qumicos, conhecer e saber avaliar o risco txico de uma substncia qumica. Concentrao efetiva 50 (CE50) e concentrao letal 50 (CL50) Quando se estuda a toxicidade de uma substncia introduzida no organismo por inalao, considera-se sua concentrao no ar e, portanto, fala-se em CE50 e CL50, devendo ser mencionada a durao da exposio do animal ao agente txico. Vias ou locais de exposio As principais vias de introduo dos toxicantes no organismo humano compreendem o trato gastrintestinal (ingesto), os pulmes (inalao) e a pele (cutnea). As vias parenterais (intramuscular e intravenosa) constituem meios normais de introduo de medicamentos que, dependendo da dose e das condies fisiolgicas ou patolgicas do indivduo, podem produzir efeitos adversos acentuados, com leses graves em diversos rgos. A via de introduo pode influenciar na toxicidade da substncia qumica. Por exemplo, espera-se que um agente que destoxificado pelo fgado seja menos txico quando introduzido no organismo por via oral (passagem pela circulao porta) do que por inalao (circulao sistmica). A comparao da dose letal de um toxicante por diferentes vias de exposio tambm fornece informaes teis relacionadas sua absoro. Nos casos em que as doses letais por via oral e drmica so similares quela administrada por via intravenosa, pressupe-se que o agente pronta e rapidamente absorvido por essas vias. Por outro lado, quando a dose letal drmica muito maior que a dose letal oral, significa que a pele constitui uma barreira efetiva absoro do agente txico. As substncias qumicas penetram no organismo humano, a partir das vias de exposio, em velocidades diferentes dependendo de suas propriedades fsico-qumicas e das condies existentes na superfcie de contato como, por exemplo, a rea e permeabilidade da membrana e o fluxo sangneo no local de contato. Assim, a intensidade do efeito txico e a rapidez da resposta em funo da via de exposio apresentam-se na seguinte ordem decrescente de eficincia: endovenosa, respiratria, intraperitoneal, subcutnea, intramuscular, intradrmica, oral e cutnea. Essas vias possuem maior ou menor destaque, de acordo com a rea da Toxicologia em estudo. Assim, as vias pulmonar e cutnea so as mais importantes na Toxicologia Ocupacional e Ambiental e a via gastrintestinal em Toxicologia de Alimentos e de Medicamentos e, tambm, nas intoxicaes intencionais (suicdios e homicdios). As vias parenterais tm importncia na Toxicologia Social e de Medicamentos. Durao e freqncia da exposio O tempo e a freqncia com que o organismo permanece em contato com o toxicante so importantes na determinao e intensidade do efeito txico. Entretanto, em seres humanos, essas condies de exposio no so claramente definidas como nos

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estudos conduzidos em animais. Porm, os mesmos termos so usados para descrevlas: exposio a curto prazo (aguda) quando o contato de curta durao e a absoro do toxicante rpida. A dose administrada pode ser nica ou mltipla num perodo de tempo no superior a 24 horas; exposio a mdio prazo quando as exposies so freqentes ou repetidas num perodo de um ms ou menos (sobreaguda) ou no perodo de um a trs meses (subcrnica); exposio a longo prazo (crnica) quando as exposies se repetem durante um longo perodo de tempo (meses, anos ou toda a vida).

Com relao freqncia, observa-se que, uma simples exposio a um agente txico que produz um efeito drstico, pode determinar manifestaes de menor intensidade ou no produzir efeitos se a mesma dose ou concentrao total for fracionada e o tempo de exposio no for aumentado. importante ressaltar que a reduo do efeito provocado pelo aumento da freqncia (fracionamento da dose) somente acontecer se: a velocidade de eliminao for maior do que a de absoro, de forma que os processos de biotransformao e/ou eliminao ocorram no intervalo entre duas exposies; o efeito txico causado pela substncia for parcial ou totalmente revertido antes da exposio seguinte.

Se no houver nenhumas dessas situaes, o aumento da freqncia poder resultar em efeitos crnicos. Para inmeras substncias, os efeitos txicos observados nas exposies agudas so diferentes daqueles produzidos por exposies repetidas. Por exemplo, a principal manifestao txica aguda do benzeno a depresso do sistema nervoso central, enquanto exposies repetidas, podem resultar em toxicidade para a medula ssea com aumento do risco para o desenvolvimento de leucemia. Nas exposies agudas, as substncias qumicas so rapidamente absorvidas e os efeitos produzidos geralmente so imediatos. Entretanto, algumas vezes, nota-se a ocorrncia de efeitos retardados, similares ou no aos efeitos produzidos nas exposies a longo prazo. Por outro lado, as exposies crnicas a um agente txico podem produzir efeitos imediatos (agudos) aps cada administrao, alm dos efeitos produzidos a longo prazo (crnicos) em baixas concentraes do agente. Suscetibilidade individual A variabilidade da resposta biolgica em funo da suscetibilidade de cada indivduo um outro fator importante em Toxicologia. Existem situaes em que exposies iguais determinam respostas iguais e outras, nas quais se observam respostas diferentes. Por exemplo, para dois trabalhadores que desempenham funes iguais durante 30 anos e, portanto, expostos no mesmo ambiente e nas mesmas condies, possvel que apenas um deles desenvolva uma enfermidade determinada pela exposio aos toxicantes presentes no ambiente de trabalho. Nenhuma pessoa igual outra e, portanto, as respostas txicas podem variar de um indivduo para outro.

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Como so observadas respostas diferentes entre indivduos de uma mesma espcie, espera-se que ocorram diferenas importantes nas respostas entre indivduos de espcies diferentes. Essas diferenas interindividuais e intraespecficas devem-se a diferenas metablicas que podem ser determinadas pelo estado fisiolgico ou pela estrutura gentica do organismo. Portanto, a suscetibilidade do organismo est mais diretamente interligada s fases II e III da intoxicao, ou seja, aos processos toxicocinticos e toxicodinmicos.

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Fase II - Toxicocintica
Nessa fase tem-se a ao do organismo sobre o agente txico, procurando diminuir ou impedir a ao nociva da substncia sobre ele. de grande importncia, porque dela resulta a quantidade de toxicante disponvel para interagir com o stio alvo e, consequentemente, exercer a ao txica. A toxicocintica constituda pelos seguintes passos: Absoro Distribuio Biotransformao Excreo A movimentao do agente txico no organismo, desde a sua entrada at a sua eliminao, envolve a transposio de membranas celulares. Assim, de suma importncia o conhecimento dos fatores que influenciam no transporte das substncias qumicas pelas membranas, os quais podem ser agrupados em duas classes distintas. Fatores relacionados com a membrana As membranas celulares tm espessura de 7 a 9 nm, em mdia e so constitudas por uma camada lipdica bimolecular, contendo em ambos os lados, molculas de protenas que penetram e s vezes transpem esta camada. Os cidos graxos presentes na camada lipdica no possuem uma estrutura cristalina rgida, ao contrrio, em temperatura fisiolgica eles tm caractersticas quase fluidas. Assim, o carter fluido das membranas e, portanto, sua permeabilidade, determinado, principalmente, pela estrutura e proporo relativa de cidos graxos insaturados presentes na regio. Este modelo denominado de mosaico fluido, foi proposto por Singer e Nicolson, em 1972, e continua sendo o mais aceito at hoje.

Considerando-se as caractersticas das membranas celulares, as substncias podem atravess-las por diferentes mecanismos, apresentados a seguir. Transporte passivo Esse mecanismo dividido em dois subtipos:

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- Difuso simples - a maioria dos agentes txicos atravessa as membranas do organismo por difuso simples e o grau de penetrao determinado pelo coeficiente de partio lipdio/gua, pelo gradiente de concentrao na membrana e pelo pKa. A proporo de um composto atravessar a membrana por difuso simples pode ser determinada pela lei de Fick, expressa pela seguinte equao:

p = proporo do composto capaz de atravessar a membrana k = constante de difuso A = rea disponvel para a difuso d = espessura da membrana C1 = concentrao do composto no compartimento extracelular do sistema C2 = concentrao do composto no compartimento intracelular do sistema Desse modo, se os valores de A e d forem constantes, a capacidade de difuso da substncia pode ser determinada pela expresso k (C1 C2). No incio, o processo de difuso bastante rpido porque a diferena entre C1 C2 significativamente alta. Entretanto, com a efetivao do processo, h uma diminuio dos valores de C1 e aumento conseqente de C2, com uma tendncia de equilbrio das concentraes nos dois compartimentos do sistema. O movimento unidirecional do composto atravs da membrana ocorre porque o valor de C2 tende sempre a diminuir em funo da sua distribuio, biotansformao e excreo, de tal forma que C1 ser sempre maior que C2, at que o processo de difuso se complete. - Filtrao - considerando-se o fluxo de gua atravs dos poros da membrana, as substncias polares de baixo peso molecular (at 600 daltons) passaro atravs dos poros aquosos. O processo de filtrao dependente, portanto, alm da hidrossolubilidade da substncia, do tamanho dos poros da membrana que so relativamente grandes nos glomrulos renais (cerca de 40 ) e pequenos na maioria das clulas (8 ). Transportes especializados Existem inmeros compostos, cujo movimento atravs das membranas, no pode ser explicado por difuso simples nem por filtrao. Alguns so muito grandes para passar atravs dos poros ou muito insolveis em lipdios para se difundirem na membrana lipdica. Entretanto, essas substncias so rapidamente transportadas atravs das membranas, mesmo contra gradientes de concentrao. Para explicar esse fenmeno, foram propostos mecanismos de transportes especializados. Esses sistemas so responsveis pelo transporte de muitos nutrientes como acares, aminocidos e cidos nuclicos e tambm de xenobiticos. So eles: transporte ativo - esse processo caracteriza-se pelo consumo de energia, movimento da substncia contra gradiente de concentrao e a existncia de protenas carregadoras de molculas, as quais apresentam seletividade pelas substncias e se saturam em altas concentraes. difuso facilitada - nesse processo, a substncia tambm transportada por um carregador, sem contudo, haver consumo de energia. Outra diferena com o

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processo de transporte ativo que na difuso facilitada a passagem acontece a favor de um gradiente de concentrao. endocitose - um mecanismo especial no qual a membrana celular, sofre um processo de invaginao, devido a variaes na tenso superficial pela presena de macromolculas no fluido extracelular, e engloba partculas lquidas (pinocitose) ou slidas (fagocitose). Esse tipo de transferncia tem se mostrado til na remoo de material particulado dos alvolos pelos fagcitos e do sangue pelo reticulo endoplasmtico do fgado e rim. Fatores relacionados com a substncia qumica A passagem dos toxicantes atravs das membranas celulares, de natureza lipoprotica, ser grandemente determinada por suas propriedades fsico-qumicas. Entre elas destacam-se: Solubilidade Devido constituio lipoprotica das membranas biolgicas, as substncias qumicas lipossolveis, ou seja, apolares, tero capacidade de transp-las facilmente, pelo processo de difuso passiva. J as substncias hidrossolveis no atravessam essas membranas, a no ser que tenham pequeno tamanho molecular e possam ser filtradas, atravs dos poros aquosos. A hidrossolubilidade conferida molcula por grupamentos que permitem a formao de pontes de hidrognio com as molculas de gua em soluo como, por exemplo, os grupos hidroxila (-OH), carboxila (-COOH), amino (-NH2); sulfidrila (-SH) e carbonila (-C=O). A lipossolubilidade dada molcula pela presena de grupos alqulicos, fenlicos, naftlicos, etc. Coeficiente de partio leo/gua o parmetro que permite avaliar o grau de lipossolubilidade das substncias qumicas, ou seja, dado pela relao lipossolubilidade/hidrossolubilidade. Este coeficiente obtido ao se agitar um agente qumico em uma mistura de solvente orgnico e gua (em condies de pH e temperatura controladas). As substncias polares, hidrossolveis, concentram-se na fase aquosa e as apolares, lipossolveis, na fase orgnica. Quanto maior for a concentrao da substncia na fase orgnica, maior ser a sua lipossolubilidade. Ex.: coeficiente de partio n-octanol/gua a 37o C e pH 7,4 de algumas substncias: clorpromazina = 79,7 cido acetil saliclico = 11,7 paracetamol = 1,79 Grau de ionizao ou de dissociao A maioria dos agentes txicos comportam-se como cidos ou bases fracas que possuem um ou mais grupos funcionais capazes de se ionizarem. A extenso desta ionizao depender do pH do meio no qual a substncia se encontra e do seu prprio pKa (logaritimo negativo da constante de dissociao da substncia). importante relembrar que a forma ionizada polar, hidrossolvel e com pouca ou nenhuma capacidade de transpor membranas por difuso passiva pela fase lipdica. O grau de ionizao das substncias, em diferentes pH, poder ser obtido atravs da aplicao da equao de Henderson-Hasselbach, para cidos fracos e bases fracas.

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Para cidos fracos:

Para bases fracas:

[NI] = forma no ionizada [I] = forma ionizada

Tomando-se como exemplo o cido acetilsaliclico (um cido fraco com pKa=3,4), qual ser o seu comportamento no estmago e no plasma? No suco gstrico, com um valor de pH=1,4 tem-se: 3,4 - 1,4 = log NI/I 2 = log NI/I NI/I = 102, ou seja, uma relao de 100 molculas no ionizadas para cada uma que se dissocia. Portanto prevalece a forma molecular, lipossolvel e capaz de vencer a membrana celular. No plasma, onde o valor pH de 7,4 tem-se: 3,4 - 7,4 = log NI/I -4 = log NI/I NI/I = 10-4 nesse caso, a relao de uma molcula no ionizada para cada 10 mil que se dissocia. Portanto, prevalece a forma no ionizada, no lipossolvel e incapaz de transpor a fase lipdica da membrana. Esses dados permitem evidenciar que a difuso no sentido sangue ? estmago praticamente no ocorre, o que resulta na absoro do cido acetilsaliclico no estmago e conseqente distribuio. O contrrio acontecer com uma base fraca. Portanto, as substncias cidas passam as membranas muito mais facilmente em pH cido, enquanto as de natureza alcalina encontro melhores chances em pH alcalino. Quando o pH do meio igual ao pKa de um composto, a metade deste estar na forma ionizada e a outra metade na forma no-ionizada. Importante ressaltar que o pKa sozinho no indica se um composto tem carter cido ou bsico, j que os cidos fracos possuem pKa elevado, mas as bases fortes tambm. Da mesma maneira, os cidos fortes apresentam pKa baixo assim como as bases fracas. Tamanho e carga da partcula (molcula ou on) A existncia de poros na membrana celular permitem a passagem de partculas hidrossolveis menores que 8 . Aquelas com tamanho superior no sofrem esse processo de filtrao. Alguns ctions tambm tm sua passagem dificultada, uma vez que os poros apresentam cargas positivas em razo da presena das protenas e clcio. Os nions passaam com maior facilidade.

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Absoro
A absoro pode ser definida como o processo por meio do qual o agente txico atravessa as membranas celulares para alcanar a circulao sangnea. Vias de absoro Distinguem-se como principais vias de introduo dos agentes txicos no organismo: Via oral, digestiva ou trato gastrintestinal (TGI) Uma vez no TGI, um agente txico poder sofrer absoro desde a boca at o reto, geralmente pelo processo de difuso passiva. Poucas substncias sofrem a absoro na mucosa oral, porque o tempo de contato pequeno nesse local. Estudos feitos experimentalmente, no entanto, mo stram que a cocana, a estricnina, a atropina e vrios opiides podem sofrer absoro na mucosa bucal. Esta absoro dependente, principalmente, do coeficiente de partio leo/gua (quanto maior este coeficiente mais fcil a absoro) e resulta em nveis sangneos elevados, j que as substncias no sofrero a ao dos sucos gastrintestinais. No sendo absorvido na mucosa oral, o toxicante poder sofrer absoro na poro do TGI onde existir a maior quantidade de sua forma no-ionizada (lipossolvel). Para se conhecer a frao da substncia no ionizada, ou aquela apta a sofrer absoro por difuso passiva, importante a utilizao da frmula de Handerson-Hasselbach. Um dos fatores que favorecem a absoro intestinal de nutrientes e xenobiticos a presena de microvilosidades, que proporcionam grande rea de superfcie. Embora a grande maioria dos agentes txicos sofram absoro no TGI por difuso passiva, muitas substncias sero absorvidas por processos especiais, mais precisamente por transporte ativo. Exemplo: o chumbo absorvido por transporte ativo e utiliza o sistema que transporta o clcio; o tlio transportado pelo sistema carregador responsvel pela absoro de ferro, etc. Fatores que interferem na absoro pelo TGI Alm das propriedades fsico-qumicas dos toxicantes, j discutidas, outros fatores podero interferir na absoro: estado de plenitude ou vacuidade gastrintestinal: a absoro ser favorecida se o estmago estiver vazio, devido ao maior contato do toxicante com a mucosa. importante considerar a apresentao do produto (slida ou lquida). Alimentos com elevado teor gorduroso como o leite e o tipo de veculo utilizado na formulao podem facilitar a absoro de substncias lipossolveis; concentrao enzimtica e acidez: estes sucos digestivos, seja por sua acidez inica, seja por ao enzimtica, podem provocar mudanas na atividade ou na estrutura qumica do agente, alterando assim a velocidade de absoro. Ex.: o pH estomacal das crianas possui menor acidez que o dos adultos. Isto implica em um desenvolvimento maior de microrganismos, principalmente a Escherichia coli, bactria que reduz, no estmago, o nitrato a nitrito. Como as crianas possuem dietas ricas em nitratos, estes sero reduzidos a nitritos, que so rapidamente absorvidos pela mucosa estomacal, o que pode ocasionar metemoglobinemia;

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motilidade intestinal: a alterao do tempo de esvaziamento gstrico e da motilidade intestinal (pelo toxicante ou alimentos) poder aumentar ou diminuir o tempo de contato do agente txico com a mucosa e, consequentemente, a absoro nesse local. Deve-se considerar ainda, a capacidade da substncia de provocar irritao e vmito; efeito de primeira passagem pelo fgado: as substncias absorvidas no estmago e duodeno entram na circulao porta e passam pelo fgado, podendo ser biotransformadas de maneira mais ou menos intensa. Este efeito pode ser responsvel pela menor biodisponibilidade de algumas substncias, quando estas so administradas por via oral.

Alguns fatores que interferem na absoro pelo TGI podem variar de acordo com o sexo e, no feminino, entre as gestantes e no gestantes. Este fato importante na avaliao da intensidade de absoro de xenobiticos por essa via. Via cutnea A pele um rgo formado por mltiplas camadas de tecidos e contribui com cerca de 10% de peso corpreo. No estado ntegro, a pele constitui uma barreira efetiva contra a penetrao de substncias qumicas exgenas. No entanto, alguns xenobiticos podem sofrer absoro cutnea, dependendo de fatores tais como a anatomia e as propriedades fisiolgicas da pele e das propriedades fsico-qumicas dos agentes. A pele formada por duas camadas, a epiderme que a camada mais externa da pele a derme, que formada por tecido conjuntivo e onde se encontram vasos sangneos, nervos, folculos pilosos, glndulas sebceas e sudorparas. Estes trs ltimos elementos da derme permitem o contato direto com o meio externo. As substncias qumicas podem ser absorvidas, principalmente, atravs das clulas epidrmicas ou folculos pilosos. Absoro transepidrmica A absoro dos agentes qumicos pela pele tem sua velocidade limitada pela regio crnea da epiderme, mais precisamente pelo extrato crneo contnuo. As substncias lipossolveis penetram por difuso passiva atravs dos lipdios existentes entre os filamentos de queratina, sendo a velocidade desta absoro indiretamente proporcional viscosidade e volatilidade do agente. J as substncias polares, de baixo peso molecular, penetram atravs da superfcie externa do filamento de queratina, no extrato hidratado. A absoro transepidrmica o tipo de absoro cutnea mais freqente, devido ao elevado nmero de clulas epidrmicas existente, embora no seja uma penetrao muito fcil para os toxicantes. Absoro transfolicular A absoro nessa regio menos significativa do que a transepidrmica. Algumas substncias qumicas podem penetrar pelos folculos pilosos, alcanando rapidamente a derme. uma penetrao fcil para os agentes qumicos, uma vez que eles no necessitam cruzar a regio crnea. Qualquer tipo de substncia qumica, seja ela lipo ou hidrossolvel, ionizada ou no, gs ou vapor, cida ou bsica, pode penetrar pelos folculos. uma absoro tambm importante para alguns metais. Fatores que interferem na absoro cutnea Existem vrios fatores que podem interferir na absoro atravs da pele. Geralmente eles so agrupados em quatro classes diferentes.

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1. Fatores relacionados ao organismo superfcie corprea: a superfcie corprea total no homem maior do que na mulher (mdia de 1,70 a 1,77 m2 no homem e de 1,64 a 1,73 m2 na mulher). Este fato pode aumentar a absoro transepidrmica no homem (maior superfcie de contato com o xenobitico); volume total de gua corprea: quanto maior o volume aquoso corpreo, maior a hidratao da pele e consequentemente, a absoro cutnea. Quando comparado mulher, o homem possui maior volume aquoso total, extra e intracelular, o que favorece a absoro cutnea. Este fato deve ser considerado, tambm, quando se compara mulheres grvidas e no grvidas. As gestantes apresentam maior volume aquoso corpreo e, em conseqncia, maior hidratao do extrato crneo. Isto possibilita maior absoro cutnea de xenobiticos; abraso da pele: com a descontinuidade da pele, a penetrao torna-se fcil; fluxo sangneo atravs da pele: deve-se considerar a vascularizao das reas expostas, uma vez que, quanto mais vascularizada a regio, maior o fluxo sangneo no local. Estudos demonstram que, em mdia, 5% do sangue bombeado pelo corao passa pela pele, com fluxo em torno de 120 mL/kg/min. Inflamao ou fatores que levam hiperemia aumentaro a absoro cutnea. Durante a gestao tambm ocorrem aumentos significativos no fluxo sangneo das mos (em at 6 vezes) e ps (at 2 vezes), o que poder influenciar a absoro cutnea de xenobiticos nas gestantes expostas; queimaduras qumicas e/ou trmicas: apenas as leves ou moderadas, j que as severas destroem totalmente o tecido, formando uma crosta de difcil penetrao; pilosidade: nas reas em que existem plos, a absoro cutnea pode ser 3,5 a 13 vezes maior do que nas regies glabras.

2. Fatores relacionados ao agente qumico (j discutidos anteriormente) volatilidade e viscosidade; grau de ionizao; tamanho molecular.

3. Fatores ligados presena de outras substncias na pele vasoconstritores: estes vo reduzir a absoro cutnea, devido diminuio da circulao sangnea; veculos: podem auxiliar na absoro, mas no promovem a penetrao de substncias que, normalmente, no seriam absorvidas pela pele ntegra; gua: a pele tem normalmente 90 g de gua por grama de tecido seco. Isto faz com que a sua permeabilidade seja 10 vezes maior do que aquela do extrato totalmente seco. O contato prolongado com gua pode aumentar a hidratao da pele em 3 a 5 vezes, o que resultar em um aumento na permeabilidade cutnea em at 3 vezes; agentes tensoativos: os sabes e detergentes so substncias bastante nocivas para a pele. Eles provocam alterao na permeabilidade cutnea, mesmo quando presentes em pequenas concentraes. Alteram, principalmente, a

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absoro de substncias hidrossolveis, devido s modificaes que provocam na estrutura do filamento de queratina; solventes orgnicos: estes aumentam a absoro cutnea para qualquer tipo de agente qumico, pois removem lipdios e lipoprotenas presentes no extrato crneo, tornando-o poroso e menos seletivo.

4. Fatores ligados s condies de trabalho (exposio ocupacional) tempo de exposio; temperatura do local de trabalho: pode haver um aumento de 1,4 a 3 vezes na velocidade de penetrao cutnea de agentes qumicos, para cada 10oC de aumento na temperatura.

Como j mencionado, o sexo e o estado gestacional podem alterar parmetros fisiolgicos importantes e, consequentemente, a intensidade da absoro cutnea O contato dos agentes qumicos na pele podem determinar: efeito nocivo local sem ocorrer absoro cutnea. Ex.: cidos e bases fortes. efeito nocivo local e sistmico. Ex.: o arsnio, benzeno, etc. efeito nocivo sistmico, sem causar danos no local de absoro: por exemplo, inseticidas carbamatos (exceo feita ao aldicarbque um carbamato com potente ao local).

Via respiratria, pulmonar ou inalatria A via respiratria de suma importncia para a Toxicologia Ocupacional. Muitas intoxicaes ocupacionais so decorrentes da aspirao de substncias contidas no ar. A superfcie pulmonar total de aproximadamente 90 m2, a superfcie alveolar de 50 a 100 m2 e o total de rea capilar cerca de 140 m2. O fluxo sangneo contnuo exerce uma ao de dissoluo muito boa e muitos agentes qumicos podem ser absorvidos rapidamente a partir dos pulmes. Os agentes passveis de sofrerem absoro pulmonar so os gases e vapores e os aerodispersides. Estas substncias podero ser absorvidas, tanto nas vias areas superiores, quanto nos alvolos. Absoro de gases e vapores Pelas vias areas superiores (VAS) Em geral, no se d muita ateno para a absoro desses compostos nas vias areas superiores. No entanto, muitas vezes, a substncia pode ser absorvida na mucosa nasal, evitando sua penetrao at os alvolos. A reteno parcial ou total dos agentes no trato respiratrio superior, est ligada hidrossolubilidade da substncia. Quanto maior a sua solubilidade em gua, maior ser a tendncia de ser retido no local. Visto sob este ngulo, a umidade constante das mucosas que revestem estas vias, constitui um fator favorvel. H, no entanto, a possibilidade da ocorrncia de hidrlise qumica, originando compostos nocivos, tanto para as vias areas superiores quanto para os alvolos. Ex.: tricloreto de fsforo + H2O HCl + CO2; dixido de enxofre (SO2) + H2O cido sulfrico.

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Os produtos formados, alm dos efeitos irritantes, favorecem tambm a absoro deles ou de outros agentes pela mucosa j lesada. Assim, nem sempre, a reteno de gases e vapores nas vias areas superiores sinnimo de proteo contra eventuais efeitos txicos. Pelos alvolos Nos alvolos pulmonares duas fases esto em contato, uma gasosa formada pelo ar alveolar e outra lquida representada pelo sangue. Essas duas fases so separadas por uma barreira dupla: o epitlio alveolar e o endotlio capilar. Diante de um gs ou de um vapor, o sangue pode se comportar de duas maneiras diferentes: como um veculo inerte, ou como meio reativo. Em outras palavras, o agente txico pode dissolver-se simplesmente por um processo fsico ou, ao contrrio, combinar-se quimicamente com elementos do sangue. No primeiro caso tem-se a dissoluo do toxicante no sangue e no segundo caso, a reao qumica. Dissoluo do toxicante no sangue neste caso, deve-se considerar o agente qumico como o soluto e o sangue como solvente. Em relao ao soluto, o fator que interfere na absoro pulmonar a sua concentrao no ar alveolar (presso parcial). Na verdade, se estabelece uma troca de molculas entre o ar alveolar e o sangue, no sentido do local onde a presso parcial menor. Assim, se a presso parcial no ar alveolar for maior que no sangue, ocorrer absoro e se for maior no sangue do que no ar alveolar, haver excreo. evidente, portanto, a importncia de fatores ambientais, tais como temperatura e presso, j que estes fatores alteram a presso parcial de gases e vapores. Em relao ao solvente, deve-se considerar a constituio do sangue. Este tecido orgnico apresenta tanto uma caracterstica aquosa (3/4 do sangue gua) quanto orgnica (protenas, lipdios, e outros componentes). Sendo assim, mais do que a lipo ou hidrossolubilidade de um agente txico, deve-se aqui, considerar a sua solubilidade no sangue. A importncia deste fator surge de maneira mais evidente, quando se recorda que a durao do contato entre o ar alveolar e o sangue de uma frao de segundo apenas. Ento, para os gases e vapores que no estabelecem combinaes qumicas, apenas suas solubilidades no sangue asseguraro uma boa absoro pulmonar. Uma maneira prtica de se observar a solubilidade de uma substncia no sangue determinar o chamado coeficiente de distribuio (K). Esse coeficiente expresso pela relao entre a concentrao do agente txico no ar alveolar pela concentrao do agente txico no sangue, no momento em que se instala o equilbrio. Alguns autores utilizam a correlao: concentrao do toxicante no sangue por concentrao do toxicante no ar alveolar, para avaliar a solubilidade da substncia. Ento um coeficiente baixo implica em uma boa solubilidade no sangue e isto conduz a uma concentrao elevada do agente neste meio. No entanto, justamente devido a esta alta solubilidade, a saturao sangnea ser lenta, a reteno do agente neste local ser mais longa e a transferncia aos tecidos tardia. Quando o coeficiente de distribuio alto, os fenmenos inversos acontecem. Assim, o K permite avaliar a concentrao do agente no sangue conhecendo-se sua concentrao no ar alveolar. Pode-se observar que dois fatores foram destacados at aqui: a presso parcial do gs ou vapor e sua solubilidade no sangue. No foi considerada a presena das membranas alveolares e capilares interpostas entre o ar e o sangue. Isto porque estas membranas possuem espessura muito pequena (cerca de 1?m) e superfcie muito grande, no representando um obstculo absoro das substncias qumicas. Se o agente txico tem pequeno tamanho molecular e boa solubilidade no sangue, poder ser absorvido pelos pulmes.

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importante considerar tambm fatores fisiolgicos, tais como a freqncia cardaca e respiratria, que podem aumentar ou diminuir a saturao sangnea e, consequentemente, a absoro. A influncia desses fatores difere de acordo com o tipo de substncia analisada. Assim, para substncias com valores de K baixo, ou seja, muito solveis em gua, o aumento da freqncia respiratria favorecer a absoro. J para as substncias de K elevado (pouco solvel no sangue), a absoro ser favorecida pelo aumento na freqncia cardaca. Deve-se ressaltar que, no caso do sexo feminino, o estado gestacional pode alterar esses parmetros fisiolgicos e, em conseqncia, a intensidade da absoro pulmonar. Combinao qumica do agente qumico com o sangue - ao contrrio da dissoluo, que puramente fsica, ocorre aqui uma fixao entre o agente txico e o sangue que depender da afinidade qumica entre estes dois elementos. No caso da combinao qumica, no ocorrer um equilbrio entre agente qumico presente no ar alveolar e no sangue. So vrias as substncias que se ligam quimicamente no sangue como, por exemplo, o monxido de carbono (CO), o chumbo e o mercrio. Absoro de material particulado ou aerodispersides Aerodispersides so partculas slidas ou lquidas de pequeno tamanho molecular, que ficam em suspenso no ar, por um perodo longo de tempo. Geralmente, somente as partculas com dimetro menor ou igual a 1?m atingiro os alvolos e podero sofrer absoro. As partculas que possuem dimetro maior, ficaro retidas nas regies menos profundas do trato respiratrio. A penetrao e reteno dos aerodispersides no trato pulmonar depende de fatores como: dimetro da partcula: este nem sempre indica o seu comportamento no aparelho respiratrio. importante considerar o dimetro aerodinmico que funo do tamanho (dimetro fsico) e da densidade da partcula. Quanto maior o dimetro aerodinmico, menor a penetrao ao longo das vias areas superiores. Assim, se existem duas partculas com o mesmo dimetro fsico, a de maior densidade ter o maior dimetro aerodinmico e penetrar menos ao longo das vias areas superiores (VAS). hidrossolubilidade: devido umidade existente nas VAS, as partculas hidrossolveis tendero a ficar retidas na parte superior do trato pulmonar, sem alcanar os alvolos. condensao: o tamanho das partculas no aparelho respiratrio pode ser alterado pela aglomerao ou por adsorso de gua, originando partculas maiores. Influenciam a condensao, a carga da partcula, as propriedades fsico-qumicas da substncia, o tempo de reteno no trato respiratrio, etc. temperatura: ela pode aumentar o movimento browniano (movimento natural e ao acaso de partculas coloidais pequenas), o que provocar maior coliso das partculas e, consequentemente, sua maior condensao e maior reteno.

Mecanismos de reteno dos aerodispersides As partculas que medem mais de 30m no conseguem penetrar no trato pulmonar, uma vez que, devido fora da gravidade, elas se sedimentaro rapidamente no ambiente. Entretanto, quando a fora de inspirao aumentada (por exemplo em trabalhos pesados), pode ocorrer a penetrao dessas partculas. Aquelas com

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dimetro menor que 30m, entretanto, so capazes de penetrar no trato pulmonar, sendo que o mecanismo de reteno e remoo das mesmas varia de acordo com a regio do trato pulmonar. Regio nasofarngea: nessa regio, as partculas com dimetro aerodinmico entre 30 e 5m depositam-se pelo processo de impactao. Como o dimetro da partcula e a velocidade do ar inspirado so elevados e as vias dessa regio tm uma mudana brusca de direo, as partculas se chocam com as paredes e ficam retidas. Regio traqueobronquial: partculas com dimetro aerodinmico entre 5 e 1m se depositam nessa regio, por sedimentao. Como o ar no tem muita velocidade e nem h mudanas bruscas de direo nesta regio, as partculas ficam mais tempo no local e se sedimentam devido fora de gravidade. Regio alveolar: apenas partculas com dimetro menor de 1m conseguem atingir esta regio, onde se depositam por um processo de difuso. Como a velocidade do ar praticamente nula, e a fora da gravidade pouco influi (as partculas so muito pequenas), os aerodispersides, devido ao movimento browniano, vo se chocando com as partculas dos gases presentes nos alvolos (O2 e CO2) e assim difundem-se at s paredes, onde se depositam. Mecanismos de remoo dos aerodispersides do trato pulmonar Nem todas partculas que se depositam no aparelho pulmonar sero retidas nele. Os mecanismos de remoo dependem do local de deposio. Regio nasofarngea: as partculas so removidas pelo muco, associado ao movimento dos clios, que vibram em direo faringe. o chamado movimento mucociliar. Regio traqueobronquial: o processo de remoo o mesmo anterior (movimento mucociliar), sendo que a tosse, ocasionada pela presena de corpo estranho na regio, pode auxiliar nesta remoo. Algumas substncias tais como o SO2, amnia e tambm a fumaa de cigarro diminuem a velocidade de remoo neste local. Regio alveolar: os epitlios dos bronquolos e dos alvolos so desprovidos de clios. O muco est presente devido secreo das clulas epiteliais. Esse muco se move em direo ao epitlio ciliado, atravs de um processo de migrao, ainda bastante discutido. Sabe-se que este mecanismo capaz de remover as partculas em direo s vias areas superiores e que ele estimulado pela presena das prprias partculas nos alvolos. Outro mecanismo de remoo a fagocitose, realizada pelos macrfagos presentes em grande nmero na regio.

Os fagcitos contendo as partculas podem migrar em duas direes: - at aos brnquios onde so eliminados pelo movimento mucociliar (que o mais comum); - at ao sistema linftico, atravs da penetrao pelas paredes dos alvolos. A fagocitose pode remover at 80% das partculas presentes nos alvolos. A velocidade do clearence no trato pulmonar pode variar tambm de acordo com a regio. Na regio

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nasofarngea a velocidade muito rpida. A remoo ocorre em minutos. Na regio traquebronquial a velocidade rpida e a remoo ocorre em minutos ou horas. Em regies mais profundas dos brnquios esta velocidade de remoo moderada (cerca de horas). E na regio alveolar a velocidade de clearence lenta, podendo levar de dias at anos para ocorrer. Ela vai depender do tipo de partcula e do mecanismo de remoo. As partculas presentes nos alvolos, que no foram removidas ou absorvidas, podem ficar retidas na regio, causando as chamadas pneumoconioses.

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Distribuio
Entende-se por distribuio de um agente txico, sua localizao e concentrao em diferentes tecidos do organismo. Portanto, a distribuio no a ao de transportar o toxicante. Por exemplo, quando se diz que uma substncia se distribui nos rgos A, B e C, no se quer dizer como ela se deslocou da superfcie de contato at esses rgos, mas sim que essa substncia aparece nesses rgos com uma concentrao a, b e c, respectivamente. Aps a entrada do agente txico na corrente sangnea, atravs da absoro ou por administrao direta, ele estar disponvel para ser transportado pelo organismo com diferentes destinos: stio de ao um ou vrios stios de armazenamento locais onde o composto pode ser armazenado e que, para a maioria dos agentes txicos, no corresponde ao seu stio de ao diversos rgos para sua biotransformao

Fatores que afetam a distribuio Normalmente a distribuio ocorre rapidamente e a velocidade e extenso desta, depender do fluxo sangneo, da velocidade de difuso nas interfaces sangue-tecido a qual dependente do coeficiente de partio e do grau de ionizao, da permeabilidade da membrana e da afinidade do tecido pelo composto. Esses fatores so agrupados em duas categorias. Fatores ligados substncia lipossolubilidade e grau de ionizao (j discutidos) afinidade qumica do agente durante a distribuio, o agente alcanar o seu stio alvo, que o rgo ou tecido onde exercer sua ao txica, mas, poder, tambm, se ligar a outros constituintes do organismo, concentrando-se em algumas partes do corpo. Em alguns casos, estes locais de maior concentrao so tambm os stios de ao e disto resulta efeitos altamente prejudiciais. o caso do monxido de carbono para o qual o sangue representa, tanto o local de concentrao quanto o de ao txica. Felizmente para o homem, a maioria dos toxicantes atingem seus maiores nveis em locais diferentes do stio alvo (exemplo: Pb armazenado nos ossos e atua nos tecidos moles). Este acmulo do agente txico em outros locais que no o de ao, funciona como uma proteo ao organismo, uma vez que previne uma elevada concentrao no stio alvo. Os agentes txicos nos locais de concentrao esto em equilbrio com sua forma livre no sangue e, quando a concentrao sangnea diminui, o agente que est concentrado em outro tecido liberado para a circulao e da pode atingir o stio de ao. Fatores ligados ao organismo: fluxo sangneo quanto maior a irrigao de um rgo, maior ser o contato do toxicante com o mesmo. Dessa forma, rgos como o fgado, os rins e bao, que recebem cerca de do fluxo sangneo do organismo, tendem a acumular os agentes txicos. Nesse aspect, os rins merecem destaque porque,

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embora representem menos de 1% do peso corporal, recebem de 20 a 25% do dbito cardaco. contedo de gua ou lipdio de rgos e tecidos os agentes txicos se fixaro em rgos ou tecidos de acordo com sua afinidade por esses contedos. Por exemplo, substncias lipossolveis como solventes orgnicos e compostos organomercuriais, tero preferncia por tecidos ricos em gordura como o SNC e, nesse caso, os efeitos de suas aes txicas sero decorrentes dessa localizao. Por outro lado, compostos inorgnicos ionizveis e solveis em gua fixam-se, preferencialmente, nos rins como, por exemplo, o mercrio inorgnico, que lesa o parnquima desse rgo. biotransformao do agente txico o organismo tem capacidade de biotransformar a molcula de alguns agentes txicos transformando-as em derivados de maior lipossolubilidade, o que dificulta sua eliminao renal e facilita sua acumulao. Como exemplo, tem-se o caso do DDE (diclorodifenileteno), produto de biotransformao do DDT (diclorodifeniletano), um inseticida organoclorado. integridade do rgo a leso de um rgo pode determinar a acumulao do toxicante. O mercrio inorgnico, por exemplo, tem afinidade pelo tecido renal, porm, danifica o nfron, o que pode causar oligria ou anria, o que dificulta sua eliminao e aumenta ainda mais sua deposio renal. O sangue tem grande importncia no estudo da distribuio, no s porque o principal fluido de distribuio dos agentes txicos, mas, tambm por ser o nico tecido que pode ser colhido repetidamente sem distrbios fisiolgicos ou traumas orgnicos. Alm disto, como o sangue circula por todos os tecidos, algum equilbrio pode ser esperado entre a concentrao do agente no sangue (dose interna) e nos tecidos, inclusive no stio de ao (dose efetiva). Assim, a concentrao plasmtica fornece melhor avaliao da ao txica do que a dose (a no ser quando a concentrao plasmtica muito baixa em relao concentrao nos tecidos). Stios de armazenamento no organismo A distribuio do toxicante, atravs do organismo ocorre de maneira no uniforme, devido a uma srie de fatores que podem ser reunidos em dois grupos: afinidade por diferentes tecidos e presena de membranas. O papel da ligao s protenas plasmticas na distribuio desigual dos xenobiticos o fator mais estudado. Os principais locais de depsito so discutidos a seguir. Afinidade por diferentes tecidos Ligao s protenas plasmticas Vrias protenas do plasma podem se ligar a constituintes endgenos (ex.: cidos graxos, triptofano, hormnios, bilirrubinas, etc.) e tambm aos xenobiticos. A principal protena, sob o ponto de vista da ligao a xenobiticos, a albumina. Algumas globulinas tambm apresentam papel relevante na ligao aos agentes exgenos, especialmente queles de carter bsico. Destaca-se aqui a 1 glicoprotena cida. Com exceo das substncias lipossolveis de carter neutro que, geralmente, se solubilizam na poro lipdica das lipoprotenas, a ligao de frmacos s protenas plasmticas feita, usualmente, pela interao de grupos polares ou no polares dos

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toxicantes com o(s) grupamento(s) protico(s). Ex.: os frmacos de carter cido, ligamse em um nico stio de albumina, possivelmente, ao nitrognio do aminocido terminal, que , no homem, o cido asprtico. O elevado peso molecular das protenas plasmticas impede que o complexo toxicante protena plasmtica atravesse as membranas dos capilares restringindo-o ao espao intravascular. Assim, enquanto ligado s protenas plasmticas, o agente txico no estar disponvel para a distribuio no espao extravascular. Deve-se observar, no entanto, que esta ligao reversvel (geralmente feita por pontes de hidrognio, foras de van der Waals, ligao inica) e, medida que o agente livre se difunde atravs da membrana capilar, a frao ligada se dissocia das protenas tornando-se apta para ser distribuda. Esta ligao atua, portanto, graduando a distribuio dos xenobiticos e, consequentemente, a chegada ao stio de ao. Efeitos txicos severos podem aparecer quando h um deslocamento anormal dos xenobiticos de seus stios de ligao protica. Entre os fatores que afetam esta ligao destacam-se: competio entre toxicantes - as protenas plasmticas no possuem stios especficos de ligao e duas ou mais substncias que se ligam ao mesmo stio protico, iro competir entre si por esta ligao. Esta competio pode ocorrer entre dois ou mais xenobiticos ou entre xenobiticos e substratos endgenos. Como conseqncia ocorrer um aumento na concentrao livre de uma das substncias e, portanto, o risco de intoxicao. Ex.: sulfonamidas e bilirrubina competem pelo mesmo stio da albumina; a varfarina (anticoagulante) geralmente deslocado pelo AAS. condies patolgicas - algumas doenas alteram a conformao do stio de ligao na protena, outras alteram o pH do plasma e podem provocar a ionizao do complexo agente-protena e outras, ainda, modificam a quantidade de protenas plasmticas. Ex.: a sndrome nefrtica, que permite a eliminao da albumina atravs da urina, causando hipoalbuminemia. concentrao do agente - quanto maior a concentrao do frmaco no plasma, maior a ligao protica. Ex.: fenitona. Se a concentrao deste anticonvulsivante for muito elevada no plasma a ligao protica aumenta mais do que o esperado e a frao livre disponvel para a distribuio e ao pequena. Neste caso o efeito teraputico pode no ser alcanado. concentrao protica - o aumento das protenas plasmticas resulta em maior ligao dos xenobiticos. Ex.: aumento de lipoprotena implica em maior ligao da imipramina. pH - para alguns toxicantes o pH do plasma altera a ligao s protenas. Ex.: a teofilina ter uma maior ligao s protenas plasmticas quando o pH do sangue est aumentado. idade - a concentrao de algumas protenas plasmticas alterada com a idade. Ex.: as crianas possuem quantidade de albumina menor do que o adulto. Conseqentemente, os toxicantes que se ligam essencialmente albumina estaro mais livres e sero mais rapidamente distribudos, causando efeitos txicos mais severos, mesmo com doses no muito grandes.

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Ligaes celulares Embora menos estudado que a ligao s protenas plasmticas, a ligao a outros tecidos exerce um papel muito importante na distribuio desigual dos agentes pelo organismo. A ligao de toxicantes a componentes teciduais poder alterar significativamente a distribuio dos xenobiticos, j que a frao destes ligada aos tecidos ser inclusive maior do que a ligada s protenas plasmticas. Sob o aspecto de ligao a xenobiticos, o tecido heptico e o renal tm um papel especial. Esses rgos possuem elevada capacidade de se ligarem aos agentes qumicos e apresentam as maiores concentraes destes (e tambm de substncias endgenas), quando comparados com outros rgos. Os mecanismos atravs dos quais estes rgos removem os agentes do sangue no esto bem estabelecidos, no entanto, sabe-se que as protenas intracelulares so componentes fundamentais na ligao dos agentes txicos ao tecido heptico e renal. Por exemplo, a protena Y ou ligandina, presente no citoplasma das clulas hepticas, tem alta afinidade pela maioria dos cidos orgnicos e parece ter importante papel na transferncia de nions orgnicos do plasma para o fgado. A metalotinena, outra protena tecidual, tem sido encontrada no fgado e rins ligada ao cdmio, cobre e zinco. A rapidez com que o fgado se liga a xenobiticos pode ser exemplificada pelo chumbo que, 30 minutos aps a administrao, tem sua concentrao heptica 50 vezes maior do que a plasmtica. Tecido adiposo Como a lipossolubilidade uma caracterstica fundamental para o transporte por membranas, lgico imaginar que os agentes txicos lipossolveis, de uma maneira geral, podero se concentrar no tecido adiposo. Os xenobiticos armazenam-se nesse local atravs da simples dissoluo fsica nas gorduras neutras do tecido. Assim, um agente txico, com elevado coeficiente de partio leo/gua, pode ser armazenado no tecido adiposo em grande extenso e isto diminuir a sua biodisponibilidade (concentrao disponvel para atingir o stio alvo). O tecido adiposo constitui 50% do peso de um indivduo obeso e 20% de um magro. Sendo o armazenamento um mecanismo de defesa, pode-se pensar que a toxicidade de uma agente qumico ser menor para a pessoa obesa como para uma pessoa magra. Mais real, no entanto, pensar na possibilidade de um aumento sbito da concentrao do agente txico no sangue e no stio de ao, devido a uma rpida mobilizao das gorduras. Tecido sseo Um tecido relativamente inerte como o sseo pode tambm servir como local de armazenamento de agentes qumicos inorgnicos, tais como flor, chumbo e estrncio. O fenmeno de captura dos xenobiticos pelos ossos pode ser considerado essencialmente um fenmeno qumico, no qual as mudanas ocorrem entre a superfcie ssea e o lquido que est em contato com ela. O lquido o fluido extracelular e a superfcie envolvida a matriz inorgnica do osso. Recordando: a superfcie ssea possui uma matriz orgnica e outra inorgnica, esta sendo formada pelos cristais de hidroxiapatita [3Ca3(PO4)2Ca(OH)2]. Aps ser trazido at o cristal sseo atravs do fluido extracelular, o toxicante poder penetrar na superfcie do cristal, de acordo com o seu tamanho e sua carga molecular. Assim, por exemplo, o fluoreto (F-) pode ser facilmente colocado no lugar da hidroxila (OH-) e o chumbo e estrncio no lugar do clcio.

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O armazenamento de xenobiticos no tecido sseo poder, ou no, provocar efeitos txicos no local. O chumbo no nocivo para os ossos, mas o flor pode provocar fluorose ssea e o estrncio radioativo, osteossarcoma e outras neoplasias. Esse armazenamento no irreversvel. O agente txico pode ser liberado dos ossos por dissoluo da hidroxiapatita pela atividade osteoclstica (destruio do tecido sseo provocado pela ao dos osteoclastos, clulas do prprio tecido sseo que tm tal funo); aumento da atividade osteoltica (destruio do tecido sseo provocada por substncias qumicas, enzimas, etc) pela ao do paratormnio, hormnio da paratireide, que tem ao descalcificante ssea pois, se no lugar do clcio o osso contiver um toxicante, este ser deslocado para a corrente sangnea, aumentando a sua concentrao plasmtica e por troca inica. Leite materno A mulher que amamenta e se expe a agentes txicos poder pass-los para o leite com conseqentes prejuzos para o lactente. Por ser mais cido que o plasma, os compostos bsicos podem se concentrar no leite. Ao contrrio, a concentrao de substncias cidas no leite menor que a do plasma. No eletrlitos como etanol, por exemplo, distribuem-se prontamente no leite e atingem concentraes similares do plasma, independente do pH deste lquido. Presena de membranas ou barreiras de excluso As substncias qumicas, como foi visto, podem se acumular em determinados stios, mas, podem tambm ser excludas de outros. Barreira Hematoenceflica A chamada barreira hematoenceflica, que protege o crebro da entrada de substncias qumicas, um local menos permevel do que a maioria de outras reas do corpo. A barreira do sistema nervoso central (SNC) possui trs mecanismos de excluso: - as clulas endoteliais dos capilares do SNC so muito finas e encontram-se intimamente unidas e no deixam poros aquosos entre elas. Isto impede a difuso de substncias polares de baixo peso molecular; - os capilares do SNC so circundados pelos astrcitos (tecido conectivo glial), o que impe uma pelcula a mais a ser transposta; - a concentrao protica no fluido intersticial do SNC a mais baixa de todo o organismo. Assim, em contraste com outros tecidos, o toxicante tem dificuldade em se mover entre os capilares, tendo que atravessar no somente o endotlio capilar, mas tambm a membrana das clulas gliais, para alcanar o fluido intersticial. Como este fluido pobre em protenas, o agente txico no pode usar a ligao protica para aumentar a distribuio dentro do SNC. Estes fatos juntos atuam como um mecanismo de proteo, que diminui a distribuio e ao dos toxicantes no SNC, j que eles no entram no crebro em quantidades significativas. A eficincia da barreira hematoenceflica varia de uma rea do crebro para outra. Ex.: o crtex, o nucleopineal e o lbulo posterior da hipfise so mais permeveis do que outras reas cerebrais. No est claro se a maior permeabilidade destas reas decorre de um suprimento maior sangneo ou de uma permeabilidade mais adequada da barreira ou dos dois fatores juntos. Os princpios que regem o transporte das substncias atravs de membranas so tambm os que comandam a entrada de xenobiticos no crebro. Assim, somente a

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forma livre estar apta para entrar no crebro, desde que seja lipossolvel. A lipossolubilidade um fator preponderante na velocidade e quantidade de toxicante que entra no SNC, ou seja, a velocidade de entrada no SNC proporcional ao coeficiente de partio leo/gua da substncia. A barreira hematoenceflica no est totalmente desenvolvida por ocasio do nascimento e esta seria uma das razes para a maior toxicidade de substncias qumicas em recm-nascidos. Barreira Placentria Durante anos, o termo barreira placentria demonstrou o conceito que a principal funo da placenta era proteger o feto contra a passagem de substncias nocivas provenientes do organismo materno. Sabe-se hoje, que ela possui funes mais importantes, tais como a troca de nutrientes (O2, CO2, etc.). Esse material vital, necessrio para o desenvolvimento do feto, transportado por processo ativo, com gasto de energia. J a maioria dos xenobiticos que se difundem atravs da placenta o fazem por difuso passiva. Na verdade, a placenta no representa uma barreira protetora efetiva contra a entrada de substncias estranhas na circulao fetal. Anatomicamente a placenta o resultado de vrias camadas celulares interpostas entre a circulao fetal e materna. O nmero de camadas varia com a espcie e com o perodo de gestao e isto, provavelmente, afeta a sua permeabilidade. Na espcie humana ela possui ao todo seis camadas, trs de origem materna e trs de origem fetal. Poderia se pensar que as espcies que apresentam placenta com maior nmero de camadas so mais protegidas contra agentes txicos durante a gestao. Entretanto, a relao entre o nmero de camadas e a permeabilidade placentria no est suficientemente estudada. Embora no totalmente efetiva na proteo do feto contra a entrada de xenobiticos, existem alguns mecanismos de biotransformao, que podem prevenir a passagem placentria dessas substncias. Volume aparente de distribuio (VD) O volume aparente de distribuio (VD) uma forma de relacionar a quantidade de agente txico presente no organismo com a sua concentrao plasmtica, ou seja, um parmetro toxicocintico que indica a extenso de sua distribuio. calculado, dividindo-se a dose administrada pela concentrao plasmtica e expresso em litros. VD = dose (mg) / concentrao plasmtica (mg/L) Os compostos que se ligam fortemente com as protenas ou que so muito lipoflicos, apresentam-se em concentraes muito baixas no plasma, fazendo com que sejam estimados volumes aparentes de distribuio muito grandes, 100 litros ou mais, o que indica que o xenobitico distribui-se a vrios compartimentos do organismo e encontrase em baixa concentrao no plasma. Ao contrrio, para uma substncia com VD relativamente pequeno, a maior frao permanece no plasma, provavelmente, como resultado da fixao protica. Assim, a toxicidade do xenobitico depende de seu VD, mas, nem sempre o local que contm a maior frao do toxicante o mais lesado. Muitas vezes, esse stio funciona como um simples depsito. Entretanto, a reduo do VD pode determinar um aumento nas concentraes plasmticas com risco de ocasionar intoxicao. Redistribuio

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O trmino do efeito txico de uma substncia costuma ocorrer por biotransformao ou excreo, mas, tambm pode resultar da redistribuio da substncia do seu stio de ao para outros tecidos. Entretanto, ela ainda estar armazenada nestes locais na forma ativa e sua sada definitiva depender de biotransformao e excreo. Se houver saturao do local de armazenamento com a dose inicial, uma dose subseqente pode produzir efeito prolongado. Um exemplo clssico o uso endovenoso do anestsico tiopental, um frmaco altamente lipossolvel. Como o fluxo sangneo cerebral muito alto, o frmaco alcana sua concetrao mxima no crebro, cerca de um minuto aps sua administrao. Aps o trmino da injeo, a concentrao plasmtica do tiopental cai, medida que ele se difunde para outros tecidos como os msculos. A concentrao do frmaco no crebro segue a do plasma, porque h pouca ligao com componentes cerebrais. Desse modo, o incio da anestesia rpido e o trmino tambm, pois ambos esto diretamente relacionados com a concentrao da substncia no crebro.

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Biotransformao
Para reduzir a possibilidade de uma substncia desencadear uma resposta txica, o organismo apresenta mecanismos de defesa que buscam diminuir a quantidade da mesma, que chega de forma ativa ao tecido alvo assim como, diminuir o tempo de permanncia desta em seu stio de ao. Para isso, necessrio diminuir a difusibilidade do toxicante e aumentar a velocidade de sua excreo. A propriedade fsica que facilita a absoro de muitos xenobiticos atravs da pele, pulmes e trato gastrintestinal denominada lipofilicidade - constitui um obstculo sua eliminao, porque as substncias lipoflicas podem ser reabsorvidas e tendem a se acumular no organismo. Os compostos hidroflicos, por sua vez, apresentam absoro mais precria, porm, so facilmente excretados pelos rins. Conseqentemente, a eliminao de um xenobitico, freqentemente, depende de sua converso para compostos hidrossolveis atravs de um processo conhecido como biotransformao, o qual catalisado por enzimas presentes no fgado e em outros tecidos. Assim, se uma substncia lipoflica, que se difunde rapidamente, for transformada em um composto mais polar, tem-se uma reduo na velocidade de difuso e um aumento da solubilidade em gua, o que facilita sua excreo urinria. Por exemplo, a destoxificao do benzeno, que apresenta uma solubilidade de 1g em 1.500 mL de gua, consiste em sua oxidao a fenol, que 100 vezes mais hidrossolvel. A posterior sulfatao do fenol produz um composto que possui uma solubilidade em gua de 1g em 3 mL. Como resultado dessas duas reaes, obtm-se uma substncia que 500 vezes mais hidrossolvel do que o xenobitico original (benzeno) e que, portanto, ser muito mais facilmente excretada pela urina. A biotransformao pode ser, ento, compreendida como um conjunto de alteraes qumicas (ou estruturais) que as substncias sofrem no organismo, geralmente, ocasionadas por processos enzimticos, com o objetivo de formar derivados mais polares e mais hidrossolveis. Embora existam autores que consideram a biotransformao como um dos processos de eliminao, esse passo da toxicocintica ser abordado, aqui, separadamente. Mecanismos de biotransformao A biotransformao pode ocorrer atravs de dois mecanismos: a) mecanismo de ativao ou bioativao - que produz metablitos com atividade igual ou maior do que o precursor. Ex.: a piridina biotransformada no on N-metil piridnico que tem toxicidade cinco vezes maior que o precursor. O mesmo ocorre com o inseticida paration que biotransformado em paraoxon, composto responsvel pela ao txica do praguicida; b) mecanismo de desativao - quando o produto resultante menos txico que o precursor. comum encontrar-se na literatura cientfica, os termos metabolizao e destoxificao como sinnimos de biotransformao. Hoje, no entanto, utiliza-se o termo metabolismo para descrever o comportamento geral das substncias (endgenas e exgenas) no organismo, o que inclui absoro, distribuio, biotransformao e eliminao. Esse termo comumente usado para se referir biotransformao o que compreensvel, visto que os produtos da biotransformao de xenobiticos so conhecidos metablitos. Entretanto, a destoxificao no sinnimo de biotransformao. Isto porque, destoxificao significa diminuio de toxicidade e nem todas as reaes de

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biotransformao, como citado acima, produziro metablitos menos txicos ou ativos que o seu precursor. Stios de biotransformao A biotransformao pode ocorrer em qualquer rgo ou tecido orgnico como, por exemplo, no intestino, rins, pulmes, pele, testculos, placenta, etc. No entanto, a grande maioria das substncias, sejam elas endgenas ou exgenas so biotransformadas no fgado. O fgado o maior rgo do corpo humano com diversas e vitais funes, destacandose entre elas, as transformaes de xenobiticos e nutrientes. Por ser o stio primrio para a biotransformao, o fgado potencialmente vulnervel ao txica de um xenobitico que sofre bioativao. A biotransformao efetuada, geralmente por enzimas, principalmente, aquelas existentes nos chamados microssomas hepticos (pequenas vesculas presentes no retculo endoplasmtico) e na frao solvel do citoplasma (citosol). As mitocndrias, ncleos e lisossomas possuem menor capacidade de biotransformao. Assim, as reaes de biotransformao so referidas, freqentemente, como microssmicas ou citoslicas, de acordo com as localizaes subcelulares das enzimas envolvidas. Fases da biotransformao As reaes de biotransformao so categorizadas, no somente pela natureza da reao envolvida (oxidao, reduo, etc.), mas, tambm pela seqncia normal com que elas ocorrem. Essas reaes catalizadas pelas enzimas biotransformadoras de xenobiticos so classificadas em reaes de fase I (ou pr-sintticas) e reaes de fase II (sintticas ou de conjugao). A fase I compreende um conjunto de reaes de oxidao, reduo e hidrlise que preparam os toxicantes para as reaes da fase II. Essas reaes, geralmente, modificam a estrutura qumica da substncia mediante adio de um grupo funcional (-OH, -NH2, -SH, ou -COOH), o que resulta em um pequeno aumento de hidrofilicidade. As reaes de biotransformao de fase II, tambm chamadas de reaes de conjugao, incluem glicuronidao, sulfonao (mais conhecida como sulfatao), acetilao, metilao, conjugao com glutationa e conjugao com aminocidos. Os substratos endgenos dessas reaes interagem com grupos funcionais presentes na molcula do xenobitico ou que foram introduzidos ou expostos durante a fase I. Na maioria das reaes de conjugao formam-se compostos altamente polarizados e hidrossolveis que so prontamente excretados pelos rins. As substncias que possuem grupos funcionais hidroflicos sofrem conjugao direta, com formao de produtos facilmente excretveis. Entretanto, para os compostos lipossolveis, pouco polares, tem-se sempre as reaes pr-sintticas como condio para posterior conjugao. Portanto, a velocidade de excreo do agente txico est relacionada com sua estrutura qumica. Um bom exemplo o fenol que excretado aps conjugao direta, enquanto a biotransformao do benzeno requer ambas as reaes, ou seja, ele inicialmente biotransformado em fenol pela introduo de um grupo hidroxila (-OH) durante a fase I (oxidao) e, o fenol formado, ento conjugado por uma reao de fase II (sulfatao) em fenil sulfato.

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Reaes de fase I Oxidao A oxidao uma reao qumica na qual o substrato perde eltrons. A reao por adio de oxignio foi a primeira a ser descoberta e, por essa razo, recebeu essa denominao. Como exemplo de reaes por adio de oxignio destacam-se a hidroxilao, epoxidao e sulfoxidao. Entretanto, muitas reaes de oxidao no envolvem oxignio. A mais simples delas a desidrogenao que consiste na remoo de hidrognio da molcula. A maioria dessas reaes so evidenciadas pelo nome da reao ou enzima envolvida. Por exemplo: desidrogenao alcolica, hidroxilao aromtica, desaminao, desalquilao, dessulfurao, entre outras. O principal sistema enzimtico responsvel pela oxidao de xenobiticos o Citocromo P4501. Esta enzima uma hemoprotena, com o tomo de ferro em seu ncleo, chamado de P450 porque, em sua forma reduzida est ligado ao monxido de carbono, e tem um pico de absorbncia no comprimento de onda de 450nm. O Cit P450 parece estar localizado nas camadas profundas na membrana do retculo endotelial liso, mais especificamente, nos microssomos hepticos. Esta enzima a oxidase terminal do sistema de oxidases mistas que recebe os eltrons provenientes de outras fases da reao, se reduz e se liga ao oxignio e ao toxicante, promovendo de fato a oxidao do composto. Outras enzimas esto presentes nos microssomos hepticos e, embora menos conhecidas e importantes que o Cit P450 podem tambm biotransformar xenobiticos. o caso, por exemplo, do citocromo b5, que est localizado fora das membranas do retculo endoplasmtico. Reduo Essa uma reao qumica atravs da qual o substrato ganha eltrons. So catalisadas por redutases microssmicas e citoslicas e pelas bactrias intestinais. As reaes de reduo podem ocorrer atravs da formao de duplas ligaes nitrognio-nitrognio (azo-reduo) em grupos nitro (NO2). Nesses casos, os compostos amino formados so oxidados e formam metablitos txicos. Assim, as reaes de reduo, freqentemente resultam na ativao do xenobitico em vez de destoxificao. A natureza dessas reaes tambm evidenciada pela sua denominao, como por exemplo, azoreduo, desalogenao redutora, reduo de carbonila entre outras. A reduo pode ser efetuada enzimaticamente, envolvendo enzimas microssmicas ou no. A enzima Cit P450 redutase, NADPH dependente, localizada fora da membrana do REL, responsvel pela reduo de uma srie de produtos. Hidrlise uma reao na qual a adio de uma molcula de gua separa o toxicante em dois fragmentos ou molculas menores. O grupo hidroxila (-OH) incorporado em um fragmento e o hidrognio no outro. Certos xenobiticos so lisados antes de sofrerem outras reaes de biotransformao. A mais comum destas reaes a hidrlise de steres, embora amidas, nitrilas e hidrazidas, tambm possam ser hidrolizadas. A hidrlise de steres (R-COOR) feita pelas enzimas denominadas esterases, que podem ser de origem microssmica ou no.
1

O citocromo P450 um sistema de enzimas microsomiais da famlia das hemoprotenas, compostas de uma parte protica (apoprotena) e um grupo hemoprosttico. Localizam-se nas membranas do retculo endoplasmtico dos hepatcitos, onde catalisam reaes de oxidao de numerosas substncias, graas sua capacidade de transferncia de eltrons. tambm encontrado nas glndulas, nos testculos, no aparelho digestivo, e nas supra-renais, tanto nas mitocndrias destas clulas, como no retculo endoplasmtico liso encarregado da sntese de esterides. O citocromo P450 2D6 ou CYP2D6 uma das enzimas hepticas mais importantes desse sistema complexo.

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Geralmente essas esterases no possuem uma boa especificidade, ou seja, uma esterase pode, alm de hidrolisar steres, provocar a quebra de acetanilidas, amidas e outros derivados da anilina. Reaes de fase II Um fator importante na toxicidade de um xenobitico a sua capacidade de ser excretado, e parece que os rins dos vertebrados constitudo de maneira e excretar eletrlitos mais facilmente que no eletrlitos. Assim, quanto mais ionizado estiver um cido orgnico no pH do meio, mais rapidamente ele ser excretado pelos rins. A ionizao, por sua vez, depende do chamado momento dipolo (ou grau de polaridade), ou seja, da distncia entre o centro geomtrico de todas as cargas positivas e de todas as cargas negativas. claro que molculas com momento dipolo baixo (carga positiva perto da carga negativa) tero uma simetria maior e, portanto, uma ionizao mais difcil. J molculas com grandes dipolos (ou seja, molculas onde as cargas positivas e negativas esto distantes) tero uma menor simetria e, conseqentemente, maior ionizao. Nas reaes de conjugao, os xenobiticos, provenientes ou no da fase pr-sinttica, ligam-se a substratos endgenos do organismo formando metablitos com tamanho molecular elevado e, conseqentemente, mais excretveis e menos txicos. Ou seja, na conjugao observa-se: aumento do tamanho maior polaridade maior ionizao maior excreo menor toxicidade. Os principais compostos endgenos envolvidos nas reaes de conjugao so: Aminocidos2 e seus derivados, tais como a glicina e cistena Carboidratos e seus derivados, especialmente o cido glicurnico Conjugao com compostos simples como, por exemplo, sulfato e acetato

O composto endgeno envolvido na conjugao est, geralmente, na sua forma ativa, ou seja, ligado a uma coenzima da qual transferido para o xenobitico. As enzimas envolvidas incluem a coenzima A, onde est ligado o acetato ou outros cidos graxos de cadeia curta, a adenosina ou fosfoadenosina fosfato (PAP) onde est ligado o sulfato, metionina e etionina e a Uridina difosfato (UDP) onde se liga o cido glicurnico e a glicose. As conjugaes mais freqentes so aquelas feitas com cido glicurnico e com o sulfato. Conjugao com cido glicurnico - o cido glicurnico um derivado 6-carboxil da glicose, formado durante o metabolismo desse acar. Sua forma forma ativa, o cido uridino difosfato glicurnico (UDPGA) formado enzimaticamente na frao solvel do fgado. Esta forma ativa doa o cido glicurnico para se conjugar com o xenobitico e esta reao catalisada pela transglicuronilase ou glicuroniltransferase, presente na frao microssmica heptica. Os conjugados glicurnicos ou glicurondios so muito polares e, portanto, facilmente excretados do organismo. Em relao s substncias endgenas, so poucas aquelas capazes de sofrerem conjugao glicurnica. Exemplo:

Os aminocidos so cidos orgnicos que encerram um ou mais grupamentos amina (-NH2) em sua molcula. Eles constituem as estruturas fundamentais das protenas e dos cidos nuclicos, formam parte de enzimas e anticorpos e transportam oxignio. Vinte tipos de aminocidos existem no corpo humano, dos quais dez so essenciais (sublinhados): cido asprtico, cido glutmico, alanina, arginina, asparagina, cistena, fenilalanina, glicina, glutamina, histidina, isoleucina, leucina, lisina, metionina, prolina, serina, tirosina, treonina, triptofano e valina.

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tiroxina e bilirrubina. como se o organismo tivesse guardado este tipo de conjugao para a biotransformao de xenobiticos. Conjugao com sulfato - este tipo de conjugao quase to comum quanto a anterior. Os produtos da conjugao com sulfatos so sais de sulfatos cidos (SO3) ou de sulfamatos (NHSO3), que, em pH fisiolgico so totalmente ionizados e rapidamente excretados pelos rins. Os ons sulfatos presentes no organismo tambm tero que ser ativados para se conjugarem com os xenobiticos. Esta ativao envolve o uso de ATP e feita pelas enzimas ATP-sulfato-adenil-transferase e ATP-adenil-sulfato-3fosfotransferase. Forma-se, ento, o PAPS (3-fosfoadenosina-5-fosfossulfato), que a forma ativa do sulfato, presente na frao microssmica heptica e que sob ao da sulfoquinase cede o sulfato ao xenobitico, formando o conjugado. Conjugao com aminocidos a reao consiste na formao de uma ligao peptdica entre o grupo amino de um aminocido, geralmente, a glicina, e o grupo carbonila do xenobitico. Para que essa reao ocorra, indispensvel que o toxicante possua um grupo carboxila. Os compostos formados so excretado na urina porque o sistema de transporte do rim reconhece o aminocido. Conjugao com glutationa nessa reao, a glutationa (GSH), atravs de seu grupo sulfidrila (nucleoflico), une-se a um carbono eletroflico do toxicante. A reao catalisada pela enzima glutationa-S-transferase que tem como cofator o prpio glutation. A glutationa um tripeptdio (cido glutmico-glicina-cistena). O conjugado formado se rompe nos rins produzindo o Cis-derivado, que se acetila para produzir um conjugado do cido mercaptrico que excretado pela urina. Essa reao importante na destoxificao de epxidos e perxidos. A glutationa-S-transferase encontra-se em clulas de muitos tecidos do organismo. Se essa reao diminui significativamente os nveis celulares de glutationa, o organismo pode sofrer danos considerveis devido peroxidao lipdica ou por outros tipos de agresso qumica. Metilao tem papel de menor importncia na biotransformao de xenobiticos, exceto na destoxificao do arsnico. Os compostos inorgnicos do arsnico transformam-se em metablitos mono e dimetilados, que so menos txicos. A reao consiste na transferncia de um grupo metila (-CH3) a um grupo funcional hidroxila, amina ou sulfidrila, catalisada pelas metiltransferases e o composto doador de grupos metila a SAM (S-adenosil-metionina). A metilao uma reao importante na transformao de compostos endgenos e participa da biossntese de vrios aminocidos e esterides, assim com na metilao do DNA. Enquanto as reaes de fase I ativam grupos funcionais, a metilao os mascara, impedindo que participem das reaes de fase II e, portanto, se o xenobitico metilado, sua taxa de eliminao diminui. Fatores que modificam a biotransformao A eficincia dos processos de biotransformao depende de vrios fatores que incluem dose e freqncia de exposio, espcie, idade, gnero, variabilidade gentica, estado nutricional, estado patolgico e a exposio a outros agentes que podem inibir ou induzir as enzimas biotransformadoras de xenobiticos. Dose e freqncia da exposio - a dose geralmente altera a via de biotransformao. Certas enzimas possuem elevada afinidade, mas baixa capacidade para biotransformar

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substncias exgenas. Por isso, sero rapidamente saturadas quando doses elevadas do agente txico so administradas e outras vias secundrias passam a ter um papel mais importante. Exemplo: cerca de 90% do acetaminofeno (paracetamol), em doses baixas (15 mg/Kg), biotransformado atravs da conjugao com sulfato. Em doses elevadas (300 mg/kg), apenas 43% ser excretado como tal, passando a ser significativa as excrees como glicurondio e cido mercaptrico (conjugao com glutationa). Em relao freqncia, esta pode levar a uma sensibilizao ou induo de receptores enzimticos, aumentando a biotransformao. Espcie as diferenas interespecficas na capacidade de biotransformao de substncias qumicas so bem conhecidas e constituem, normalmente, a base da toxicidade seletiva, utilizada para o desenvolvimento dos testes de segurana de medicamentos realizados em animais. Variabilidade gentica a capacidade biotransformadora varia amplamente de um indivduo para outro em funo de diferenas genticas. Por exemplo, a reao de acetilao da isoniazida em humanos particularmente influenciada por fatores genticos. Algumas pessoas conseguem acetilar essa substncia rapidamente, enquanto outras, o fazem lentamente. Gnero - para algumas substncias, existem diferenas entre as respostas txicas em animais machos e fmeas. Estudos realizados em ratos demonstraram que as fmeas so mais suscetveis a uma dose de hexobarbital do que os machos (elas dormem por um tempo maior). Esse fato explicado pela menor capacidade do fgado das fmeas de biotransformar xenobiticos, tornando-as mais suscetveis ao da maioria dos agentes txicos. A menor atividade heptica em fmeas, no entanto, diminuir a ao de substncias que so biotransformadas pelo mecanismo de bioativao (ex.: o tetracloreto de carbono e halotano). Acredita-se que as diferenas entre os gneros sejam causadas pelos hormnios sexuais, tendo em vista que, ao se administrar testosterona s fmeas, ocorre aumento na capacidade de biotransformao e com a castrao de machos h uma diminuio dessa capacidade. A influncia do sexo sobre a biotransformao tambm pode ser observada em processos que ocorrem em outros rgos como, por exemplo, nos rins. Ex.: animais machos so mais suscetveis ao txica do clorofrmio, provavelmente, por biotransformar mais rapidamente este solvente, originando o fosgnio, metablito intermedirio ativo. Embora essas diferenas sejam mais pronunciadas em ratos, outras espcies, entre elas o homem, tambm apresentam estas modificaes (ex.: nicotina, cido acetilsaliclico, heparina, etc.). Idade - com relao idade, tanto os animais jovens, quanto os velhos, apresentam menor capacidade de biotransformar xenobiticos e, conseqentemente, so mais suscetveis aos seus efeitos txicos. Geralmente, o Cit P450 dos recm-nascidos tem apenas 20% a 50% da atividade observada em adultos. Em relao aos idosos, no s a atividade diminuda do Cit P450, mas tambm outros fatores, tais como menor fluxo sangneo e menor eficincia no sistema da excreo renal e biliar, contribuem para a menor biotransformao dos xenobiticos. Dieta e estado nutricional - o estado nutricional bastante importante para a biotransformao pois pode alterar a atividade do Cit P450 (oxidase ou redutase). As deficincias em vitaminas, especialmente, a C, E e do complexo B, reduzem a velocidade de biotransformao. Elas esto direta ou indiretamente envolvidas na regulao do Cit P450. Alm disso, suas deficincias podem alterar a energia e o estado

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redox das clulas, diminuindo a produo de cofatores necessrios para a fase de conjugao. Dietas pobres em protenas diminuem a sntese enzimtica e, conseqentemente, a biotransformao e, dessa forma, podem aumentar a toxicidade de substncias ativas, mas, podem tambm reduzir o potencial txico daqueles agentes que necessitam de biotransformao prvia para se tornarem ativos. Estado patolgico muitas patologias podem alterar a capacidade individual de biotransformao de xenobiticos, em particular, as doenas hepticas como cirrose, ictercia obstrutiva, carcinomas e hepatite, devido a uma reduo drstica das atividades enzimticas do fgado. Distrbios cardiovasculares, que acarretam diminuio do fluxo sangneo, modificam igualmente a biotransformao e a depurao dos agentes txicos. Inibio e induo enzimtica - o sistema enzimtico Cit P450 influenciado por uma srie de substncias, que podem induzir ou inibir a sua atividade, alterando a biotransformao de determinados compostos. Por exemplo, a fenilbutazona (antiinflamatrio e antireumtico) e o cloranfenicol podem inibir a biotransformao enzimtica da tolbutamida, medicamento hipoglicemiante. Com isto, uma dose teraputica desse medicamento poder causar graves crises de hipoglicemia, devido diminuio excessiva de glicose no sangue. A inibio enzimtica envolve mecanismos diversos, desde a inibio da sntese protica at a competio entre os substratos pelos centros ativos comuns das enzimas. Ao contrrio, o fenobarbital e o lcool so exemplos de indutores enzimticos, que aumentam a concentrao do Cit P450 e, conseqentemente, a biotransformao de vrias substncias e a sua prpria, o que pode resultar em tolerncia farmacocintica.

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Excreo
Os xenobiticos que penetram no organismo so, posteriormente, excretados atravs da urina, bile, fezes, ar expirado, leite, suor e outras secrees, sob forma inalterada ou modificada quimicamente. Este processo , muitas vezes, denominado "Eliminao", embora pelo conceito atual a eliminao envolve o processo de biotransformao. A excreo pode ser vista como um processo inverso ao da absoro, uma vez que os fatores que interferem na entrada do xenobitico no organismo, podem dificultar a sua sada. Basicamente existem trs classes de excreo: eliminao atravs das secrees, tais como a biliar, sudorpara, lacrimal, gstrica, salivar, lctea; eliminao atravs das excrees, tais como urina, fezes e catarro; eliminao pelo ar expirado.

O processo mais importante para a Toxicologia a excreo urinria. Excreo urinria A capacidade de um rgo realizar uma determinada funo est intimamente relacionada com a sua anatomia, e os rins possuem um elevado desenvolvimento anatmico, voltado para a excreo de substncias qumicas. Os glomrulos renais filtram cerca de 20% do fluxo cardaco (os rins recebem 25% deste fluxo) e apresentam poros bastantes largos (cerca de 40 enquanto o de outros tecidos medem cerca de 4 ). Assim, os glomrulos filtram substncias lipossolveis ou hidrossolveis, cidas ou bsicas, desde que tenham peso molecular menor do que 60.000 daltons3. A filtrao glomerular um dos principais processos de eliminao renal e est intimamente ligado a um outro processo que a reabsoro tubular. As substncias, aps serem filtradas pelos glomrulos, podem permanecer no lmem do tbulo e serem eliminadas, ou ento, podem sofrer reabsoro passiva atravs da membrana tubular. Isto depender de alguns fatores, tais como o coeficiente de partio leo/gua; o pKa4 da substncia e o pH do meio. De modo geral, as substncias de carter alcalino so eliminadas na urina cida e as substncias cidas na urina alcalina. Isto porque nestas condies, as substncias se ionizaro, tornando-se hidrossolveis e a urina , em sua maior parte, formada de gua. Outro processo de excreo renal a difuso tubular passiva. Substncias lipossolveis, cidas ou bsicas, que estejam presentes nos capilares que circundam os tbulos renais, podem atravessar a membrana por difuso passiva e carem no lmem tubular. Dependendo do seu pKa e do pH do meio, elas podem, ou no, se ionizarem e, conseqentemente, serem excretadas ou reabsorvidas.

O dalton uma unidade de massa que corresponde a 1/12 da massa do istopo 12 do carbono (12C), utilizado para medir a massa atmica e molecular e representado pela letra grega : 1 dalton ou 1 = 1.66 1024 gramas. 4 Ele corresponde ao pH onde um determinado frmaco encontra-se 50% em sua forma ionizada e 50% em sua forma no ionizada. A maioria das drogas tem seu pKa entre 2,5 e 11. Para drogas cidas, quanto menor o pKa e maior o pH, mais molculas esto ionizadas e mais facilmente elas sero eliminadas; para drogas bsicas quanto maior o pKa e menor o pH, mais molculas esto ionizadas. Para drogas bsicas, a acidificao da urina representa um risco de alcalose metablica difcil de controlar, tornando este mtodo pouco utilizado.

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O terceiro processo de excreo renal a secreo tubular ativa. Existem dois processos de secreo tubular renal, um para substncias cidas e outro para as bsicas. Estes sistemas esto localizados, provavelmente, no tbulo proximal. A secreo tubular tem as caractersticas do transporte ativo, ou seja, exige um carregador qumico, gasta energia, um mecanismo competitivo e pode ocorrer contra um gradiente de concentrao. Algumas substncias endgenas, tais como o cido rico, so excretadas por este mecanismo e a presena de xenobiticos excretados ativamente, pode interferir com a eliminao de substratos endgenos. A Penicilina um exemplo de xenobitico secretado ativamente pelos tbulos. O uso de Probenecid (frmaco excretado pelo mesmo sistema) evita que este antibitico seja secretado muito rapidamente do organismo. Geralmente, o que ocorre no organismo uma combinao dos trs processos de excreo renal, para permitir uma maior eficcia na eliminao dos xenobiticos. Excreo pelas fezes e catarro No so processos muito importantes para a Toxicologia. Os toxicantes encontrados nas fezes correspondem frao ingerida e no absorvida ou ento ao agente txico que sofreu secreo salivar, biliar ou gstrica. As partculas que penetram pelo trato pulmonar podem ser eliminadas pela expectorao no trato gastrintestinal e, se no forem reabsorvidas, sero, tambm, excretadas pelas fezes. Excreo pela bile Dentre as secrees orgnicas, a mais significativa para a excreo de xenobiticos a biliar. O fgado tem uma posio vantajosa na remoo de substncias exgenas do sangue, principalmente, daquelas absorvidas pelo trato gastrintestinal. Isto porque, o sangue proveniente do trato gastrintestinal, atravs da circulao porta, passa inicialmente pelo fgado, e somente depois entra na circulao sistmica. No fgado parte do xenobitico pode ser biotransformado e os metablitos ou mesmo o produto inalterado podem ser secretados pela bile no intestino. Existem trs sistemas de transporte ativo para a secreo de substncias orgnicas na bile: para substncias cidas, bsicas e neutras. quase certa a existncia de um outro sistema para os metais. Uma vez secretado no intestino, os xenobiticos podem sofrer reabsoro ou excreo pelas fezes. No se conhece o mecanismo que determina se a excreo ser urinria ou biliar. Esquematicamente tem-se:

o chamado ciclo entero-heptico, e a morfina um exemplo tpico de xenobitico que apresenta esse ciclo. Ela conjugada com cido glicurnico no fgado e o glicurondio de morfina secretado pela bile no intestino. Neste local, pela ao da enzima glicuronidase, a morfina liberada e reabsorvida. O glicorondio que no for lisado ser excretado pelas fezes. importante observa que os agentes txicos que apresentam recirculao entero-heptica, podem ter sua ao prolongada.

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Excreo pelo ar expirado Gases e vapores inalados ou produzidos no organismo so parcialmente eliminados pelo ar expirado. O processo envolvido a difuso pelas membranas que, para substncias que no se ligam quimicamente ao sangue, depender da solubilidade no sangue e da presso de vapor. Estes xenobiticos so eliminados em velocidade inversamente proporcional reteno no sangue, assim, gases e vapores com coeficiente de distribuio K5 elevado (pouco solveis no sangue) so rapidamente eliminados, enquanto os de K baixo (muito solvel no sangue) so lentamente excretados pelo ar expirado. A freqncia cardaca e respiratria afetam a excreo destes agentes: a primeira nos de K alto e a segunda nos de K baixo. Em relao presso de vapor, os lquidos mais volteis sero, quase exclusivamente, excretados pelo ar expirado. Excreo por outras vias A eliminao atravs da secreo sudorpara j conhecida h alguns anos. Desde 1911 sabe-se que substncias tais como iodo, bromo, cido benzico, cido saliclico, chumbo, arsnio, lcool, etc., so excretadas pelo suor. O processo parece ser o de difuso passiva e pode ocorrer dermatites em indivduos suscetveis, especialmente quando se promove a sudorese para aumentar a excreo pela pele. A secreo salivar significativa para alguns xenobiticos. Os lipossolveis podem atingir a saliva por difuso passiva e os no lipossolveis podem ser eliminados na saliva, em velocidade proporcional ao seu peso molecular, atravs de filtrao.

O coeficiente de distribuio (K) expresso pela relao entre a concentrao do agente txico no ar alveolar/sua concentrao no sangue, no momento em que se instala o equilbrio. Alguns autores utilizam a correlao: concentrao do agente txico no sangue/concentrao do agente txico no ar alveolar, para avaliar a solubilidade da substncia.

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Geralmente as substncias secretadas com a saliva sofrem reabsoro no trato gastrintestinal. Existe interesse em relao secreo de xenobiticos no leite, pois este acaba sendo ingerido por recm-nascidos. Geralmente as substncias apolares sofrem difuso passiva do sangue para o leite e como esta secreo mais cida (pH = 6,5) do que o sangue, os compostos bsicos tendem a se concentrarem nesse lquido. J os compostos cidos apresentam concentrao lctea menor que a sangnea. Vrias substncias so, sabidamente, eliminadas pelo leite: DDT, PCB (bifenil policlorados), chumbo, mercrio, arsnio, morfina, lcool, entre outros. Fatores que interferem na velocidade e via de excreo Via de introduo: a via de introduo interfere na velocidade de absoro, de biotransformao e, tambm, na excreo; Afinidade por elementos do sangue e outros tecidos: geralmente o agente txico na sua forma livre est disponvel eliminao; Facilidade de ser biotransformada: com o aumento da polaridade a secreo urinria est facilitada; Freqncia respiratria: em se tratando de excreo pulmonar, uma vez que, aumentando-se a freqncia respiratria, as trocas gasosas ocorrero mais rapidamente. Funo renal: sendo a via renal a principal via de excreo dos xenobiticos, qualquer disfuno destes rgos interferir na velocidade e proporo de excreo.

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Fase III Toxicodinmica


Uma vez que o agente txico alcana o seu alvo em concentrao adequada, ele desencadear alteraes bioqumicas e fisiolgicas que sero responsveis pelo seu efeito deletrio. Algumas substncias precisam, antes, passar pela bioativao para ento desencadearem os efeitos txicos. A bioativao envolve a biotransformao da molcula original levando formao de um metablito txico. Assim sendo, os desencadeadores do efeito txico podem ser: Agente txico original: ex. chumbo, tetrodotoxina, cianeto; Metablito do agente txico: ex. fluorocitrato (metablito do fluoroacetato), cido oxlico (metablito do etilenoglicol); Espcies reativas de oxignio ou de nitrognio: formao do radical hidroxila desencadeada pelo herbicida paraquate; Compostos endgenos: ex. bilirrubina deslocada da albumina pela sulfonamida.

Quanto ao modo de ao, os agentes txicos podem ser: Inespecficos: ex. cidos ou bases que atuam indistintamente sobre qualquer tecido, causando irritao e corroso nos tecidos de contato; Especficos: so mais seletivos e causam injrias em determinado(s) tecido(s), sem lesar outros. A suscetibilidade de determinado(s) tecido(s) deve-se presena de molculas nas quais o agente txico se liga. Essas molculas-alvo exercem importantes funes no organismo e podem ser enzimas, molculas transportadoras, canais inicos, protenas reguladoras, cidos nuclicos, etc.

Logicamente, quanto menor for a distribuio da molcula-alvo pelo organismo, mais seletiva ser a ao do agente txico. Entretanto, no s a presena da molcula-alvo entre os diferentes tecidos que confere seletividade de ao aos agentes txicos. s vezes, um agente pode ser potencialmente txico para vrios tecidos, mas como ele se distribui em maior concentrao para determinados tecidos, esses se tornam os alvos. Essa distribuio seletiva pode ser devido a: porosidade do endotlio capilar: clulas endoteliais dos sinusides hepticos e capilares peritubulares renais tm fenestras maiores que as de outras clulas. Isto favorece acmulo de agentes txicos nos rins e fgado, fazendo destes rgos alvos freqentes; transporte de membrana especializado: por exemplo, no pneumcito existe um carreador de membrana que captura o herbicida paraquate e, assim, a concentrao deste herbicida no pneumcito pode ser at 50 vezes maior do que nas outras clulas. Isto faz do pneumcito o principal alvo da intoxicao com paraquate; ligao a compostos intracelulares: como exemplo, podemos citar a ligao da neurotoxina MPTP (1-metil-4-fenil-1,2,3,6-tetrahidropiridina) ao pigmento melanina presente em grande quantidade na substncia negra enceflica. Devido essa afinidade, a MPTP acumula-se nesta estrutura e, quando metabolizada pela enzima monoaminooxidase-B, presente nos astrcitos, gera

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o metablito MPP+ (1-metil-4-fenilpiridina) que lesar seletivamente os neurnios dopaminrgicos da substncia negra. Relao dose-resposta ou concentrao-resposta Um conceito fundamental na Toxicologia o da relao dose-resposta proposta por Paracelsus: Somente a dose correta diferencia o veneno do remdio." Ela correlaciona a exposio e a intensidade dos efeitos txicos produzidos. As curvas dose-resposta so construdas a partir de observaes feitas em estudos experimentais com animais ou clulas isoladas, bem como observao clnica ou epidemiolgica de humanos. Acredita-se que, quanto maior a dose, maior e mais intensos (quanti e/ou qualitativamente) sero os efeitos e que deve existir uma condio de exposio que seja segura para a sade humana, com exceo das substncias mutagnicas. Dependendo da varivel que estiver sendo avaliada, existem dois tipos de relaes possveis: Quantitativa: para variveis que podem ser mensuradas em intensidade. Neste caso, quanto maior a dose do agente, mais intenso o efeito. Alguns toxicologistas chamam a relao quantitativa de relao dose-efeito. Ex: hipertrofia heptica; Quantal: para variveis do tipo tudo ou nada, como por exemplo, morte, convulso. Nesse caso, quanto maior a dose, maior o nmero de indivduos que apresentam tal efeito. Sempre ser expressa em porcentagem de indivduos que respondem a determinado efeito e s pode ser avaliada quando uma populao de indivduos estudada, ao contrrio da quantitativa, que pode ser avaliada em um indivduo.

Existem dois tipos de curvas dose-resposta: 1. Para efeitos que apresentam limiar de segurana (threshold): a curva geralmente tem a forma de uma curva sigmide e baixas doses no so txicas, j que o organismo tem capacidade para biotransformar o agente txico, bem como reparar eventuais injrias que tenham sido causadas. O ponto no qual a toxicidade comea a se manifestar conhecido como limite de segurana (threshold).

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2. Para efeitos que no apresentam limiar de segurana (threshold): a curva linear, pois se assume que qualquer dose produzir um efeito deletrio. Esse tipo de curva usada para agentes mutagnicos.

Mecanismos de toxicidade Os mecanismos pelos quais os diferentes agentes txicos especficos produzem seus efeitos deletrios podem ser agrupados em: 1. 2. 3. 4. 5. 6. Alterao da expresso gnica; Alterao qumica de protenas especficas; Alterao do funcionamento de clulas excitveis; Prejuzo da sntese de ATP; Aumento de clcio intracelular; Induo de estresse oxidativo.

Alterao da expresso gnica O DNA6 composto por genes que codificam a sntese de protenas estruturais e regulatrias. No processo de transcrio, uma das fitas do DNA lida, gerando o RNA mensageiro. Uma vez formado, o RNA7 mensageiro levar sntese de protenas, processo chamado de transduo.
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DNA a abreviatura de cido desoxirribonuclico, molcula orgnica que contm a "informao" que instrui o desenvolvimento e funcionamento de todos os organismos vivos. Ele se estrutura, geralmente, em uma dupla hlice, e forma os cromossomos. Os segmentos de DNA que carregam a informao gentica so denominados genes. O restante da seqncia tem importncia estrutural ou est envolvido na regulao do uso da informao gentica. 7 RNA a sigla que designa o cido ribonuclico, composto por um polmero de nucletidos, geralmente em cadeia simples, formado por molculas de dimenses muito inferiores s do DNA. O RNA forma-se no ncleo por transcrio (cpia complementar) das seqncias definidas no DNA e migra para o citoplasma. Ele pode ser de quatro tipos: ARN Mensageiro (ARNm): transporta as informaes do cdigo gentico do ADN para o citoplasma, ou seja, determina as seqncias dos aminocidos na construo das protenas. ARN transportador (ARNt): encaminha os aminocidos dispersos no citoplasma ao local onde ocorrer a sntese das protenas.

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Muitos so os mecanismos pelos quais um agente txico pode influenciar a expresso gnica. Lembrem-se de que expresso gnica inadequada pode levar a alterao do nmero ou da estrutura da protena que est sendo sintetizada. Alterao na expresso gnica pode levar a efeitos txicos como carcinognese, teratognese, etc. Abaixo esto dois exemplos de agentes txicos que desencadeiam seus efeitos por alterar a expresso gnica: Herbicida amitrole: hormnios da hipfise anterior exercem efeitos mitognicos sobre glndulas perifricas agindo em receptores na membrana plasmtica. A produo dos hormnios pela hipfise controlada por retroalimentao negativa dos hormnios produzidos pelas glndulas perifricas. O herbicida amitrole, ao inibir a produo de hormnios tireoideanos estimula a secreo do hormnio tireo-estimulante (TSH) pela hipfise. Isso estimular a diviso celular na tireide levando neoplasia tireoideana. Arsenito: este composto promove uma ativao sustentada do fator de crescimento epidrmico, aumentando a transcrio do DNA e, conseqentemente, promovendo mitose. Sugere-se que esse seja o mecanismo envolvido na formao de neoplasias de pele pelo arsenito. Alterao qumica de protenas especficas Alguns agentes txicos so capazes de se complexar com protenas especficas, ativando ou inibindo-as. Metais, complexam-se com o grupamento sulfidrila de protenas e inibem a funo das mesmas. Os praguicidas organofosforados inibem a funo da enzima acetilcolinesterase, responsvel pela degradao do neurotransmissor acetilcolina, porque se ligam e fosforilam tal enzima. Alterao do funcionamento de clulas excitveis O funcionamento das clulas excitveis (neurnios, msculo cardaco, msculo liso e msculo esqueltico) regulado por molculas sinalizadoras (neurotransmissores) que agem em receptores de membrana. A ligao dos neurotransmissores aos receptores levar manifestao do efeito biolgico por aumento dos nveis de clcio intracelular, fosforilao protica ou alteraes do potencial de membrana (potencial de repouso). Os agentes txicos podem alterar o funcionamento de clulas excitveis agindo em diferentes estgios da neurotransmisso. A seguir esto relacionados os principais estgios que podem ser alterados e exemplos de agentes txicos que atuam nos mesmos. Alterao da disponibilidade do neurotransmissor Para alterar a disponibilidade do neurotransmissor, um agente txico pode alterar a sntese, a liberao, a recaptura ou a metabolizao do mesmo. So exemplos: a toxina botulnica, que promove paralisia flcida por clivar os microfilamentos que ancoram as vesculas de armazenamento da acetilcolina, impedindo a

ARN ribossmico (ARNr): faz parte da estrutura dos ribossomos (organelas citoplasmticas) onde a sntese de protenas ocorre.O ARN, ao ser sintetizado pelo ADN, liga-se a protenas e em seguida forma o nuclolo, que um corpo denso que fabrica os ribossomos. ARN polimerase: enzima que catalisa a sntese de seqncias genticas a partir de moldes.

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exocitose do neurotransmissor decorrente do desencadeamento de um potencial de ao; a cocana, que bloqueia a bomba de recaptura de noradrenalina, dopamina e serotonina aumentando a concentrao dessas monoaminas na fenda sinptica e, conseqentemente, os efeitos mediados pelas mesmas.

Interao com o receptor Os agentes txicos podem se ligar a receptores e ativ-los ou no. Se o agente ativar o receptor, ele ser chamado de agonista e, se no ativ-lo, de antagonista. O efeito do antagonista decorrer da preveno da ligao do neurotransmissor ao seu receptor. Como exemplos, pode-se citar: o alucingeno cido lisrgico (LSD) agonista do receptor 5-HT2A da serotonina, envolvido no controle da percepo e humor; o relaxante muscular curare antagonista do receptor nicotnico da acetilcolina, presente nas fibras musculares esquelticas e responsvel pela contrao muscular.

Interao com canais inicos A ao em canais inicos influenciar diretamente o potencial de membrana e, conseqentemente, a probabilidade de um potencial de ao ser deflagrado e estimular a clula. Os agentes txicos podem tanto bloquear quanto abrir canais inicos. Alguns exemplos: a tetrodotoxina, uma toxina presente em algumas espcies de peixe comuns no Japo (no Brasil, encontrada no baiacu), bloqueia canais de sdio do msculo esqueltico induzindo paralisia flcida; os antidepressivos tricclicos bloqueiam canais de sdio na musculatura cardaca promovendo arritmias; os praguicidas piretrides bloqueiam canais de cloro no sistema nervoso central levando hiperexcitabilidade neuronal; a batracotoxina, uma toxina encontrada na pele de algumas espcies sulamericanas de sapo, e os praguicidas organoclorados prolongam o tempo de abertura do canal de sdio promovendo hiperexcitabilidade celular.

Alterao da fluidez das membranas Acredita-se que compostos muito lipoflicos, como os solventes orgnicos, possam se intercalar na fase lipdica da membrana plasmtica desestruturando-a e prejudicando seu funcionamento. Prejuzo da sntese de ATP Em condies aerbias, a sntese de ATP8 ocorre em trs estgios: produo de acetil-coenzima A (acetil CoA) a partir de aminocidos, cidos graxos ou piruvato (produzido na gliclise);

A adenosina difosfato (ADP) se compe de uma molcula de adenosina ligada a dois grupamentos de fosfato, e tem que ser convertida em adenosina trifosfato para armazenar energia. A adenosina trifosfato (ATP) formada por uma molcula de adenosina difosfato qual se fixou um grupamento de fosfato suplementar. Tem funo de coenzima e constitui um dos compostos mais importantes do metabolismo dos organismos vivos, pois representa a grande reserva de energia celular. A liberao dessa energia se faz durante a liberao dos grupamentos de fosfato.

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ciclo do cido ctrico (Krebs ): acetil CoA oxidada enzimaticamente na matriz mitocondrial at CO2 e a energia liberada conservada nos transportadores de eltrons reduzidos; fosforilao oxidativa: nas cristas mitocondriais, os transportadores so oxidados, desfazendo-se de prtons (H+) e eltrons. Os eltrons so conduzidos ao longo da cadeia respiratria (protenas integrais da membrana capazes de aceitar ou doar eltrons) at uma molcula de oxignio (O2), o qual eles reduzem para formar gua. A transferncia de eltrons acompanhada pelo bombeamento de prtons para fora da membrana mitocondrial interna, o que leva a uma diferena transmembrana na concentrao de prtons, j que a membrana interna impermevel aos mesmos. Essa diferena de concentrao de prtons gera energia eletroqumica, chamada de fora prton-motora. Entretanto, na membrana, existem transportadores para os prtons representados pela enzima ATP-sintase. medida que os prtons fluem passivamente de volta para a matriz atravs dos poros formados por esta enzima, a energia eletroqumica impulsiona a ATP-sintase a catalisar a incorporao de um fosfato ao ADP formando um ATP. Esse processo chamado de fosforilao oxidativa e notem que a fosforilao do ADP acoplada transferncia de eltrons e uma etapa no ocorre sem a outra.

Os agentes txicos podem interferir com a formao de ATP: inibindo a formao de acetil-CoA: como exemplo, temos o etanol que reduz a formao de coenzima A; o arsenito que inibe a piruvato desidrogenase;

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inibindo o ciclo do cido ctrico: como exemplo, o fluoracetato que inibe a aconitase; o etanol que inibe a -cetoglutarato; a diclorovinilcistena que inibe a succinato desidrogenase; inibindo o transporte de eltrons: pode-se ter tanto compostos que funcionam como aceptores de eltrons (tetracloreto de carbono, doxorrubicina) quanto compostos que inibam as protenas da cadeia respiratria (rotenona, cianeto, CO); inibindo a chegada de oxignio cadeia transportadora: agentes que causam paralisia respiratria (depressores do sistema nervoso central, agentes convulsivantes); agentes que causam isquemia (alcalides do ergot, cocana); agentes que inibem o transporte de oxignio pela hemoglobina (monxido de carbono, agentes metahemoglobinizantes); inibindo a fosforilao do ADP tem-se dois grupos: os inibidores da ATP-sintase, representados pela oligomicina, DDT, clordecona e os agentes chamados desacopladores da fosforilao oxidativa. Estes agentes prejudicam a formao da fora prton-motora por serem ionforos, ou seja, formam poros na membrana levando dissipao do gradiente eletroqumico. Como exemplos, destaca-se o fungicida pentaclorofenol, vrios herbicidas e a amiodarona.

Logicamente, a depleo de ATP, por qualquer um dos mecanismos citados acima, ter conseqncias importantes na clula, pois interferir com a integridade da membrana, funcionamento de bombas inicas, sntese protica, enfim, todos os processos ATPdependentes. Se for intensa, levar perda das funes celulares e morte celular. Aumento de clcio intracelular O clcio essencial para vrias funes celulares, como exocitose, contrao muscular, ativao de algumas enzimas, etc. Entretanto, em excesso, ele citotxico. Assim, a clula dispe de vrios mecanismos para manter os nveis intracelulares de clcio dentro de uma faixa adequada de concentrao, como por exemplo, as bombas de clcio e de clcio-sdio (responsveis pela extruso de clcio da clula); seqestro de clcio no retculo endoplasmtico e na mitocndria. interessante notar que, como o transportador presente na mitocndria tem menor afinidade para o clcio do que o transportador presente no retculo endoplasmtico, o seqestro pela mitocndria importante em elevadas concentraes citoplasmticas de clcio. Os agentes txicos podem aumentar o clcio intracelular atravs dos seguintes mecanismos: Aumento do influxo (entrada) de clcio: pode ocorrer por abertura de canais inicos de clcio operados por ligante (ex, glutamato) ou dano membrana plasmtica. Os agentes que danificam podem ser ionforos (clordecona, metilmercrio), enzimas hidrolticas (fosfolipases ofdicas), indutores de peroxidao lipdica (tetracloreto de carbono). Diminuio do efluxo (sada): ocorre quando o funcionamento dos transportadores responsveis pela sada do clcio da clula ou pela captura do mesmo pelo retculo endoplasmtico ou mitocndria prejudicado. Isso pode ocorrer quando os agentes se ligam ao carreador prejudicando sua funo (ex, paracetamol, clorofrmio, tetracloreto de carbono, DDT) ou por diminuio dos nveis de ATP, j que tais transportadores so ATP-dependentes. Mobilizao de reservatrios intracelulares: pode ocorrer com agentes que lesem a membrana mitocondrial ou do retculo endoplasmtico ou que sejam agonistas do receptor para inositol trifosfato (IP3), o qual est acoplado a canais de clcio na membrana do retculo endoplasmtico e cujo estmulo promove

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abertura desses canais com conseqente sada do clcio. O praguicida lindano possui tal atividade. O aumento de clcio intracelular pode trazer, como conseqncias: Depleo das reservas de ATP: com a elevao dos nveis citoplasmticos de clcio, ocorre uma diminuio da sntese do ATP, bem como aumento do seu consumo. A diminuio da sntese ocorre tanto porque a captura do clcio pela mitocndria dissipa a fora prton-motora da membrana quanto porque o clcio ativa enzimas oxidativas que produzem espcies reativas lesivas membrana. J o aumento do consumo provocado pelo aumento do trabalho dos transportadores de clcio na tentativa de reduzir seus nveis citoslicos. Dissociao dos microfilamentos: filamentos de actina mantm a morfologia celular por ancoramento a protenas presentes na membrana plasmtica. O aumento do clcio citoplasmtico dissocia a actina dessas protenas levando formao de bolhas na membrana (blebbing) e predispondo-a a rupturas. Ativao de enzimas hidrolticas: existem proteases, fosfolipases, DNAses e RNAses clcio-dependentes. A ativao sustentada dessas enzimas levar citotoxicidade. Gerao de espcies reativas de oxignio e nitrognio: o clcio ativa enzimas envolvidas na gerao de espcies reativas, como desidrogenases, xantina oxidase, etc. Induo de estresse oxidativo Radicais livres so tomos, ons ou molculas que tm um eltron no pareado no orbital externo. Caracterizam-se por uma grande instabilidade e, conseqentemente, elevada reatividade por tenderem a acoplar o eltron no pareado a um outro presente em estruturas prximas sua formao (pois tm meia-vida curta), como protenas, lipdios, carboidratos. Eles tambm iniciam reaes autocatalticas, ou seja, as molculas com as quais eles reagem so convertidas em radicais livres, ocorrendo leso em cadeia. Vrias reaes do metabolismo celular levam formao de radicais livres e, portanto, nosso organismo possui um sistema de defesa antioxidante para remover radicais livres conforme eles vo sendo formados. Esse sistema composto por enzimas (superxido dismutase, catalase, glutationa peroxidase) e pequenas molculas sem atividade enzimtica (cido ascrbico, tocoferol, glutationa). Em condies normais, existe um equilbrio entre a formao e a remoo de radicais livres no organismo e agentes txicos podem desequilibrar esse sistema aumentando a formao de radicais livres (ex, tetracloreto de carbono, paraquate, paracetamol, cromo) e/ou diminuindo a funo do sistema de defesa antioxidante (chumbo, mercrio). Nesta situao de desequilbrio, temos o chamado estresse oxidativo, que pode levar a injria celular. Trs reaes so importantes para a injria celular decorrente de estresse oxidativo: Peroxidao lipdica das membranas: o dano oxidativo comea quando a ligao dupla de cidos graxos insaturados atacada por radicais livres, especialmente radical hidroxila. Isso leva formao de perxidos que tambm so instveis e reativos e uma reao autocataltica em cadeia iniciada (propagao), que pode resultar em dano extenso membrana plasmtica;

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Peroxidao protica: radicais livres oxidam resduos de aminocidos de cadeias laterais, formam ligao cruzada entre protenas e alteram a estrutura protica. Com isso, podem levar fragmentao da protena e/ou perda de funo; Leses ao DNA: radicais livres podem interagir com o DNA, modificando bases e produzindo mutaes.

Consideraes finais Como pde-se observar, muitos so os mecanismos de toxicidade. O objetivo desta seo foi familiarizar os leitores com os principais mecanismos existentes. importante reconhecer: Mais de um mecanismo pode ser responsvel pela toxicidade de um agente e eles podem ocorrer concomitantemente ou seqencialmente. O chumbo altera protenas especficas, mobiliza clcio e gera estresse oxidativo ao mesmo tempo. J a toxicidade do herbicida paraquate inicia-se com a gerao de radical livre no pneumcito o que lesa a membrana e leva, secundariamente, ao aumento de clcio intracelular. Alguns agentes txicos tm mecanismos mais seletivos enquanto outros tm mltiplos mecanismos e induzem mltiplos efeitos. Como exemplo de agente mais seletivo temos o curare que um antagonista do receptor nicotnico da acetilcolina e produz, na sua intoxicao, paralisia flcida. J o chumbo leva a: efeitos hematolgicos por inibir enzimas com grupamento sulfidrila; efeitos neurotxicos por alterar a neurotransmisso; hipertenso por induzir estresse oxidativo e alterar os nveis de clcio. Alguns efeitos txicos resultam de mltiplos mecanismos. Assim, a hipertenso induzida pelo chumbo origina-se da gerao de espcies reativas de oxignio que so vasoconstrictoras; da inibio da enzima oxido ntrico-sintase que produz o xido ntrico, importante vasodilatador endgeno; do aumento de tnus vascular promovido pelo aumento de clcio na musculatura lisa; da liberao de renina provocada pelo aumento de clcio nas clulas justaglomerulares. Interaes Geralmente, estamos expostos a uma mistura de substncias qumicas e no a uma substncia qumica isolada. Por exemplo, na gua de beber podemos encontrar pequenas quantidades de praguicidas, metais, solventes, produtos formados durante a clorao, etc. Logicamente, essas diferentes substncias qumicas podem interferir nos efeitos umas das outras, tanto os aumentando quanto os diminuindo. Esta interferncia chamada de interao. Apesar da comunidade cientfica reconhecer a existncia e a importncia deste fenmeno, a compreenso da toxicologia de misturas ainda est longe de ser atingida devido dificuldade de se prever quali e quantitativamente as combinaes possveis. Existem trs mecanismos de interaes:

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Toxicocintica Ocorre quando um agente txico modifica a toxicocintica (absoro, distribuio, biotransformao ou a excreo) do outro. Como exemplo de uma interao toxicocintica que resulta em aumento de efeito, podemos citar a interao entre o anticoagulante varfarina e o antiinflamatrio fenilbutazona. A taxa de ligao da varfarina albumina de, aproximadamente, 98%, o que significa que somente 2% fica na forma livre (farmacologicamente ativa). Como a fenilbutazona tambm se liga albumina, na presena dela h um aumento da frao livre da varfarina, o que pode causar hemorragia fatal. Como exemplo de uma interao toxicocintica que resulta em diminuio de efeito, podemos citar a alcalinizao da urina com bicarbonato feita em pacientes intoxicados agudamente com barbituratos. Como o barbiturato um cido fraco, a elevao do pH urinrio pelo bicarbonato aumenta a frao do barbiturato na forma inica (polar) e, portanto, aumenta a taxa de eliminao do mesmo. Toxicodinmica Ocorre quando um agente modifica o efeito do outro por ligao aos seus receptores ou estruturas-alvo. O lcool produz depresso do sistema nervoso central por aumentar a ligao do neurotransmissor inibitrio acido gama-aminobutrico (GABA) no receptor GABAA e por diminuir a ligao do neurotransmissor excitatrio glutamato no receptor NMDA. Os benzodiazepnicos tambm so drogas depressoras do sistema nervoso central que atuam aumentando a ligao do GABA no receptor GABAA. Assim, dizemos que a interao entre lcool e benzodiazepnicos toxicodinmica e resulta em um aumento do efeito dos dois compostos. Um outro exemplo de interao toxicodinmica a que ocorre entre opiides (morfina, herona) e a naloxona (Narcan). Os opiides produzem seus efeitos ligando-se a receptores opioidrgicos presentes no organismo. A naloxona um antagonista destes receptores, ou seja, liga-se a eles, no os estimula, mas impede os agonistas (morfina, herona) de se ligarem. Neste exemplo temos uma interao toxicodinmica que resulta em diminuio do efeito do agente txico. Qumico Envolve uma interao qumica direta entre os dois agentes txicos. O exemplo clssico deste tipo de interao a que ocorre entre metais e agentes quelantes (dimercaprol, EDTA9, etc). Devido grande afinidade que os metais tm por alguns grupos funcionais dos quelantes, quando uma pessoa intoxicada com metais tratada com um quelante, o metal liga-se ao agente quelante e deixa de produzir seus efeitos txicos, pois o complexo metal-quelante desprovido de atividade txica. Como visto, uma vez que uma interao tenha ocorrido, o efeito resultante poder ser maior ou menor. As interaes do tipo adio, sinergismo e potenciao resultam em aumento de efeito, enquanto o antagnismo resulta em diminuio de efeito. Esses tipos de interao so discutidos a seguir.

O cido etileno-diamino-tetractico um poderoso reagente, que complexa com vrios ons, incluindo metais pesados e alcalino-terrosos, formando estruturas estveis.

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Adio um tipo bastante comum de interao caracterizada quando o efeito induzido por dois ou mais compostos juntos, igual soma dos efeitos de cada agente em separado. Assim, quando dois praguicidas organofosforados esto presentes, observa-se um prejuzo da conduo nervosa igual ao que se observaria se fossem somados o efeito de cada um deles separadamente. Sinergismo - o tipo de interao na qual o efeito induzido por dois ou mais compostos juntos maior do que a soma dos efeitos de cada agente em separado. Quando os agentes so sinrgicos, a toxicidade dos mesmos deve ser reavaliada considerando suas propriedades sinergsticas, pois o sinergismo pode ter srios efeitos sobre a sade. Como exemplo, podemos citar a interao entre cigarro e exposio a asbesto. Sabe-se que a exposio a esses dois compostos produz um risco de desenvolvimento de cncer de pulmo muito maior do que a soma dos riscos de cada composto em separado. Potenciao - este tipo de interao ocorre quando um agente desprovido de atividade txica aumenta a toxicidade de um agente txico. Um exemplo a interao entre o tetracloreto de carbono e isopropanol. Embora o isopropanol no seja hepatotxico, ele aumenta a hepatotoxicidade desencadeada pelo tetracloreto de carbono. Um outro exemplo o que ocorre entre os componentes do ch de Santo Daime, usado em seitas religiosas. Este ch feito com um cip (Banisteriopsis caapi - mariri) e folhas de (Psychotria Viridis chacrona). Quando administradas individualmente, nenhuma das duas plantas produz alucinao. Entretanto, quando administradas em conjunto, observa-se alucinao e isso ocorre porque o mariri impede o metabolismo de primeira passagem do princpio ativo alucingeno dimetiltriptamina, encontrado na chacrona. Antagonismo - no antagonismo, um agente leva diminuio do efeito de um outro agente. Na Toxicologia, este efeito sempre desejado, j que resulta em uma diminuio da toxicidade e o modo de ao de muitos antdotos usados no tratamento de diferentes intoxicaes. Os diferentes livros de Farmacologia apresentam diferentes classificaes dos tipos de antagonismo. Nesta seo, optou-se pela mais simplificada para facilitar a compreenso. Assim sendo, de uma maneira geral, existem trs tipos principais de antagonismo: Antagonismo farmacolgico: aquele no qual um agente diminui a ao do outro evitando sua ligao no receptor. Existem dois tipos de antagonismo farmacolgico: Competitivo: o antagonista combina-se com o mesmo stio do receptor que o agonista mas no induz nenhuma resposta. O antagonista compete com o agonista pelo stio de ligao do receptor. Liga-se ao receptor aquele composto que estiver em maior concentrao na biofase e, portanto, o antagonismo reversvel. Como exemplos, cita-se o antagonismo entre naloxona e opiides; atropina e acetilcolina; curare e acetilcolina, etc. No competitivo: o antagonista liga-se no receptor ou em um stio fora do receptor do agonista alterando estruturalmente o receptor. Assim, o antagonismo irreversvel pois no adianta aumentar a quantidade de agonista na biofase, uma vez que no haver receptor para ele se ligar. Como exemplo,

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pode-se citar a fenoxibenzamina que forma ligaes covalentes com adrenoceptores. Antagonismo funcional: aquele no qual dois agentes txicos atuam em receptores diferentes produzindo efeitos opostos. Assim, indiretamente, cada um deles ir anular ou reduzir o efeito do outro. Como exemplo, podemos citar a interao entre DDT e benzodiazepnicos. O DDT promove hiperexcitabilidade neuronal por lentificar o fechamento dos canais de sdio, deixando a membrana parcialmente despolarizada. Os benzodiazepnicos promovem hiperpolarizao da membrana por aumentarem a ao do neurotransmissor inibitrio GABA, que abre canais de cloreto. Por isso, uma pessoa intoxicada com DDT que apresenta convulso tratada com benzodiazepnico. Antagonismo qumico: j descrito acima na interao medicamentosa do tipo qumica. O quadro abaixo, retirado do site do NIH (National Institutes of Health), ilustra qualitativamente a porcentagem da populao afetada pela exposio aos agentes A e B em separado, bem como a uma combinao dos dois, simulando os diferentes tipos de exposio. Tipo de interao Adio Sinergismo Potenciao Antagonismo Efeito txico agente A 20% 5% 0% 20% do Efeito txico agente B 30% 10% 20% 30% do Efeito combinado de A+B 50% 100% 50% 5%

interessante notar que diferentes tipos de interaes podem ocorrer em diferentes sistemas com a mesma combinao de agentes. Por exemplo, inseticidas clorados e solventes halogenados (presentes nas formulaes), podem produzir uma interao do tipo adio quanto hepatotoxicidade e uma interao do tipo antagonismo funcional no sistema nervoso central, j que os inseticidas so estimulantes e os solventes, depressores do sistema nervoso central.

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Fase IV Clnica
Essa fase caracterizada pela exteriorizao dos efeitos do agente txico, ou seja, o aparecimento de sinais e sintomas da intoxicao ou alteraes laboratoriais causadas pela substncia qumica. No diagnstico das intoxicaes, deve-se lembrar que um mesmo rgo pode ser afetado por uma grande variedade de toxicantes e que uma nica substncia qumica pode atingir vrios rgos ou produzir diferentes efeitos relacionados a um mesmo rgo. Nesse amplo espectro de efeitos txicos, distinguemse: Efeito imediato, crnico e retardado efeitos imediatos ou agudos - so aqueles que aparecem imediatamente aps uma exposio aguda, ou seja, exposio nica ou que ocorre, no mximo, em 24 horas. Em geral so efeitos intensamente graves e a evoluo pode levar o paciente morte, ou a uma recuperao total ou parcial com seqelas ou leses persistentes. efeitos crefeitos crnicos - so aqueles resultantes de uma exposio crnica, ou seja, exposio a pequenas doses, durante vrios meses ou anos. Nas intoxicaes crnicas, os sinais clnicos podem advir de dois mecanismos: o somatria ou acmulo do agente txico no organismo: a velocidade de eliminao menor que a de absoro, assim, ao longo da exposio o toxicante vai sendo somado no organismo, at alcanar um nvel txico. Como exemplo, destaca-se o saturnismo (intoxicao crnica pelo chumbo); o somatria de efeitos: ocorre quando o dano causado irreversvel e, portanto, vai sendo aumentado a cada exposio, at atingir um nvel detectvel ou, ento, quando o dano reversvel, mas o tempo entre cada exposio insuficiente para que o organismo se recupere totalmente. esse tipo de efeito exemplificado pela exposio crnica ao dissulfeto de carbono (CS2). As alteraes bioqumicas ou fisiolgicas se acentuam aps cada exposio ao agente at o surgimento dos sintomas clnicos. Quando o efeito apresenta um quadro intermedirio classificado como sobreagudo. As intoxicaes por exposies repetidas podem conduzir o indivduo a estados progressivos de deficincia biolgica que impedem a sua recuperao e tornam sua reabilitao deficiente. efeitos retardados - so aqueles que s ocorrem aps um perodo de latncia, mesmo quando j no mais existe a exposio. Exemplo: efeitos carcinognicos que tm uma latncia de 20-30 anos.

Deve-se, no entanto, fazer distino entre exposio a curto prazo (aguda) ou a longo prazo (crnica) e os efeitos agudos e crnicos. Por exemplo, uma exposio a curto prazo (aguda) pode determinar um efeito crnico, ou seja, a exposio a uma nica dose de triortocresilfosfato (TOCP) pode produzir, no homem, leso persistente no SNC. Em certos casos, como nas exposies agudas ao tlio, paraquate e derivados cumarnicos, a intoxicao se manifesta no decorrer de alguns dias (efeito sobreagudo). Efeito local ou sistmico O efeito local refere-se quele que ocorre onde acontece o primeiro contato entre o agente txico e o organismo. Os xenobiticos que possuem ao irritante direta sobre os tecidos, reagem quimicamente, no local de contato, com componentes destes tecidos. Dependendo da intensidade da ao pode ocorrer irritao, efeitos custicos

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ou necrosantes. Os sistemas mais afetados so pele e mucosas do nariz, boca, olhos, garganta e trato pulmonar. Destacam-se nesse grupo, a ao dos gases irritantes (fosgnio, gs mostarda, NO2, cloro) e lacrimognicos (acrolena, bromo, cloro). Outra ao irritante de tecidos a dermatite qumica. Os xenobiticos que apresentam esta ao txica (substncias vesicantes como as mostardas nitrogenadas ou agentes queratolticos como o fenol), lesam a pele e facilitam a penetrao subseqente de outras substncias qumicas. O efeito sistmico, de ocorrncia mais comum, produzido em local distante do stio de penetrao do toxicante, portanto, exige uma absoro e distribuio da substncia, de modo a atingir o stio de ao, onde se encontra o receptor biolgico. Existem substncias que apresentam os dois tipos de efeitos. (ex.: benzeno, chumbo tetraetila, etc.). Efeito reversvel ou irreversvel O efeito reversvel desaparece quando cessa a exposio, enquanto o irreversvel persiste mesmo aps o trmino da exposio. So exemplos de efeitos irreversveis os carcinomas, as mutaes e cirrose heptica. A manifestao de um ou outro efeito depende, principalmente, da capacidade do tecido lesado em se recuperar. Assim, leses hepticas so geralmente reversveis, j que este tecido tem grande capacidade de regenerao, enquanto as leses no SNC so, geralmente, irreversveis, uma vez que as clulas nervosas so pouco renovadas. Reaes idiossincrsicas As reaes idiossincrsicas correspondem s respostas anormais a certos agentes txicos, provocados por alteraes genticas. O indivduo pode ter uma resposta adversa com doses baixas (no-txicas) ou ento ter uma resposta extremamente intensa com doses mais elevadas. Exemplo: sensibilidade anormal aos nitritos e outros agentes metemoglobinizantes, devido deficincia, de origem gentica, na NADHmetemoglobina redutase. Reaes de hipersensibilidade ou sensibilizao Corresponde ao aumento na suscetibilidade do organismo. Aparece aps exposio nica ou aps meses/anos de exposio. Os principais tipos de reaes de hipersensibilidade so: alergia qumica - esse tipo de ao txica s desenvolvida aps absoro do xenobitico pelo organismo e ligao com a protena formando o antgeno (o agente txico funciona como hapteno). Com a formao do antgeno, ocorre, conseqentemente, o desenvolvimento de anticorpos e do complexo antgeno/anticorpo. Este complexo se liga s clulas teciduais ou basfilos circulantes, sensibilizando-as, ou seja, desenvolvendo grnulos internos, contendo histamina, bradicinina, entre outros. Quando ocorre uma segunda exposio do organismo ao mesmo xenobitico, os anticorpos previamente desenvolvidos promovem a alterao da superfcie celular com conseqente degranulizao celular. Estes grnulos secretam na corrente sangnea histamina e bradicinina, que so os responsveis pela sintomatologia alrgica. Essa sintomatolgia bastante semelhante, independente do tipo de xenobitico que a desencadeou. Os rgos mais afetados so pulmes e pele. As reaes alrgicas ou alergia qumica, tambm conhecidas como de hipersensibilidade ou sensibilizao, so reaes adversas que ocorrem somente aps uma prvia

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sensibilizao do organismo ao agente txico, ou a um produto quimicamente semelhante. Alguns autores no concordam que as alergias qumicas sejam efeitos txicos, j que elas no obedecem ou apresentam uma relao dose-resposta (elas no so dose-dependente). Entretanto, como a alergia qumica um efeito indesejvel e adverso ao organismo, pode ser reconhecido como efeito txico. fotoarlegia (prometazina, sabes, desodorante, hexaclorofeno): as caractersticas deste tipo de ao txica so bastante semelhantes s da alergia qumica. A diferena primordial entre as duas que, na fotoalergia, o xenobitico necessita reagir com a luz solar (reao fotoqumica), para formar um produto que funciona como hapteno. Aps a sensibilizao, sempre que houver exposio ao sol, na presena do xenobitico, haver o aparecimento dos sintomas alrgicos. importante ressaltar que a fotoalergia s aparece aps repetidas exposies. fotossensiblizao (agentes branqueadores, furocumarinas): esses xenobiticos, quando em contato com a luz solar, formam radicais altamente reativos que produzem leses na pele, muito semelhante s queimaduras de sol. Essa reao pode aparecer logo na primeira exposio. As leses resultantes da fotossensibilizao podem persistir sempre que houver contato com o sol, mesmo sem nova exposio ao agente qumico.

Efeitos morfolgicos, funcionais e bioqumicos Efeitos morfolgicos - os efeitos morfolgicos referem-se s mudanas micro e macroscpicas na morfologias dos tecidos afetados. Muitos desses efeitos so irreversveis como, por exemplo, a necrose e a neoplasia. Efeitos funcionais - em geral, representam mudanas reversveis nas funes dos rgos-alvo. Essas mudanas geralmente so detectadas antes ou em exposies a baixas doses quando comparadas s alteraes morfolgicas. Efeitos bioqumicos apesar de todos os efeitos txicos estarem associados a alteraes bioqumicas, quando se faz referncia a efeitos bioqumicos, significa que os efeitos manifestam-se sem modificaes morfolgicas aparentes. Por exemplo, a inibio da acetilcolinesterase decorrente da exposio a inseticidas organofosforados ou carbamatos.

Efeitos somticos ou germinativos Os efeitos somticos so aqueles que afetam uma ou mais funes vegetativas e os efeitos germinais correspondem s perturbaes determinadas nas funes de reproduo, sobre a integridade dos descendentes e desenvolvimento de tumores.

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