Inhibidores irreversibles Los inhibidores irreversibles normalmente modifican una enzima covalentemente, con lo que la inhibicin no puede ser

invertida. Los inhibidores irreversibles suelen contener grupos funcionales reactivos como mostazas nitrogenadas, aldehdos, haloalcanos o alquenos. Estos grupos electroflicos reaccionan con las cadenas de aminocidos para formar uniones covalentes. Los residuos modificados son aquellos que contienen en sus cadenas laterales nuclefilos como por ejemplo un grupo hidroxilo o un grupo sulfhidrilo. Esto incluye a los aminocidos serina . Tipos de inhibiciones irreversibles La inhibicin irreversible es diferente de la inactivacin enzimtica reversible. Los inhibidores irreversibles son generalmente especficos para un tipo de enzima y no inactivan a todas las protenas. No funcionan destruyendo la estructura protenica, sino alterando especficamente la estructura tridimensional del sitio activo inhabilitndolo. Por ejemplo, el pH y las temperaturas extremas causan la desnaturalizacin de casi todas las protenas, pero este no es un efecto especfico. De forma similar, algunos tratamientos qumicos no especficos destruyen la estructura de la protena: por ejemplo, si son sometidas a una elevada concentracin de cido clorhdrico, el cual hidrolizar los enlaces peptdicos que mantienen unidos los aminocidos de las protenas. Aplicaciones de los inhibidores Los inhibidores enzimticos pueden ser encontrados en la naturaleza, pero tambin son diseados y producidos como parte de la farmacologa y la bioqumica. Los venenos naturales son a menudo inhibidores enzimticos que han evolucionado para defender a una planta o animal contra sus depredadores. Estas toxinas naturales incluyen algunos de los compuestos ms venenosos conocidos hasta hoy. Quimioterapia Los inhibidores enzimticos son utilizados principalmente como frmacos en el tratamiento de diversas enfermedades. Muchos de estos inhibidores son capaces de actuar sobre enzimas humanas y as corregir determinadas patologas. Sin embargo, no todos los frmacos son inhibidores enzimticos. Algunos de ellos, tales como los frmacos anti-epilpticos, alteran la actividad enzimtica de forma indirecta, aumentando o disminuyendo la sntesis de dicha enzima. Estos efectos son denominados induccin e inhibicin enzimtica y consisten en alteraciones en el patrn de expresin gnica, lo cual no est relacionado con el tipo de inhibicin enzimtica discutido aqu. Otras drogas interactan con otras dianas celulares que no son enzimas, como los canales inicos o los receptores de membrana. Otro tipo de inhibidores enzimticos son utilizados con el fin de inhibir aquellas enzimas necesarias para la supervivencia de patgenos. Por ejemplo, las bacterias presentan una gruesa pared celular compuesta principalmente de un polmero denominado peptidoglicano.

Ciertos antibiticos como la penicilina y la vancomicina inhiben a la enzima responsable de la produccin y el entrecruzamiento de las hebras de peptidoglicano, lo cual da lugar a una prdida de fuerza de la pared celular y, por consiguiente, a la lisis de la clula, incapaz ahora de resistir la elevada presin osmtica. En la figura se puede apreciar una molcula de penicilina unida a su diana, la transpeptidasa de la bacteria Streptomyces R61 (la protena se muestra en un formato de cintas y la penicilina en un formato de esferas y barras). Tambin se utilizan otro tipo de toxicidades selectivas mediante antibiticos que aprovechan las diferencias presentes en la estructura de los ribosomas o en la sntesis de cidos grasos. Control metablico Los inhibidores enzimticos son tambin importantes a nivel del control metablico. Muchas de las rutas metablicas que tienen lugar en la clula son inhibidas por metabolitos que controlan la actividad enzimtica mediante procesos de regulacin alostrica o inhibicin por sustrato. A modo de ejemplo cabe destacar la regulacin alostrica de la gluclisis. Esta ruta catablica consume glucosa y produce ATP, NADH y piruvato. Una de las etapas clave en la regulacin de la gluclisis es la reaccin catalizada por la fosfofructoquinasa-1 (PFK1). Cuando los niveles de ATP aumentan, el ATP se une a un sitio alostrico de la PFK1, con lo que se reduce la actividad de la enzima, la glucolisis se inhibe y los niveles de ATP se reducen de nuevo. Este control por retroalimentacin negativa (feedback negativo) ayuda a mantener los niveles de ATP constantes en la clula. Sin embargo, las rutas metablicas no estn nicamente reguladas por medio de la inhibicin, la activacin enzimtica es igualmente importante. La enzima PFK1 presenta activadores alostricos, como son la fructosa 2,6bifosfato y el ADP. La inhibicin enzimtica fisiolgica tambin puede ser producida por inhibidores proteicos especficos. Este mecanismo se puede observar en el pncreas, donde se sintetizan multitud de precursores de enzimas digestivas denominadas zimgenos. Muchos de ellos son activados por la tripsina, una proteasa, por lo que es muy importante inhibir la actividad de la tripsina en el pncreas con el fin de prevenir fenmenos de autodigestin. Uno de los mecanismos para mantener la tripsina inactiva es la produccin de un potente y especfico inhibidor de tripsina en el pncreas. Este inhibidor se une con una alta afinidad a la tripsina, previniendo as su actividad. Aunque el inhibidor de tripsina es una protena, no es hidrolizado por la propia tripsina, ya que elimina las molculas de agua de su centro activo y desestabiliza el estado de transicin. Otros ejemplos de inhibidores enzimticos fisiolgicos son el inhibidor barstar, cuya funcin es inhibir la actividad de una ribonucleasa bacteriana denominada barnasa, y los inhibidores de las proteinfosfatasas. Inhibidores de la acetilcolinesterasa La acetilcolinesterasa (AChE) es una enzima que se encuentra en los animales, desde los insectos hasta los humanos. Es esencial en la actividad que desempean las neuronas, ya que su funcin consiste en la ruptura del neurotransmisor acetilcolina en sus constituyentes, acetato y colina. Es un caso nico entre los neurotransmisores, ya que la mayora de ellos, como la serotonina, la dopamina o la noradrenalina, son

reabsorbidos en la brecha sinptica. Existe un amplio nmero de inhibidores de la AChE que son utilizados tanto en el campo de la medicina como en el campo de la agricultura. Algunos de estos inhibidores son reversibles, como el edrofonio, la fisostigmina, y la neostigmina, los cuales son utilizados en el tratamiento de la miastenia gravis y en la aplicacin de anestesia. Los pesticidas del tipo carbamato son otro ejemplo de inhibidores reversibles de la AChE. Como ejemplo de inhibidores irreversibles de la AChE caben destacar los insecticidas organofosforados, como el malathion, el paratin y el clorpirifs. Venenos naturales Tanto algunos animales como algunas plantas son capaces de sintetizar una amplia gama de sustancias venenosas de diverso origen: metabolitos secundarios, pptidos y protenas, que pueden actuar como inhibidores enzimticos. Las toxinas naturales suelen ser pequeas molculas orgnicas con tanta diversidad que probablemente existan inhibidores para la mayora de los procesos metablicos. Dicha inhibicin puede producirse a diferentes niveles en la clula: inhibicin de receptores de membrana, de canales inicos o de protenas estructurales. Por ejemplo, el paclitaxel (taxol), una molcula orgnica obtenida del tejo (Taxus), se une con una elevada afinidad a los dmeros de tubulina, impidiendo as el proceso de polimerizacin de los microtbulos, crucial, entre otras cosas, en la divisin celular. Muchos de estos venenos naturales actan como neurotoxinas capaces de causar parlisis que pueden llevar a la muerte, pudiendo ser utilizados como estrategia defensiva frente a los depredadores o como sistema de caza en la captura de presas. Algunos de estos inhibidores naturales, a pesar de sus caractersticas txicas, son muy valorados por sus potenciales usos teraputicos cuando son administrados en dosis adecuadas. Como ejemplo de neurotoxina cabe destacar los glicoalcaloides, obtenidos a partir de las plantas pertenecientes a la familia Solanaceae (entre las que se incluyen la patata, el tomate y la berenjena), que son inhibidores de la acetilcolinesterasa. La inhibicin de esta enzima causa un aumento descontrolado de los niveles del neurotransmisor acetilcolina, lo que conlleva parlisis muscular y muerte. La neurotoxicidad tambin puede ser el resultado de la inhibicin de receptores, como en el caso de la atropina, obtenida a partir de la especie Atropa belladonna, que funciona como un antagonista competitivo de los receptores muscarnicos de acetilcolina. Aunque muchas de las toxinas naturales son metabolitos secundarios, algunas son pptidos o protenas. Como ejemplo cabe destacar a la toxina peptdica alfa-amanitina, encontrada en los hongos de la especie Amanita phalloides, que es un potente inhibidor enzimtico capaz de impedir la actividad de la ARN polimerasa II en la transcripcin del ADN, Otra toxina peptdica es la microcistina, encontrada en ciertas algas y capaz de inhibir ciertas protein-fosfatasas. Esta toxina puede contaminar las reservas de agua si las algas que la producen alcanzan determinados niveles de concentracin. Se ha demostrado su alto potencial carcinognico y su capacidad de causar hemorragia heptica aguda y muerte tras una exposicin a altas dosis. Las protenas tambin pueden llegar a ser venenos naturales, como es el caso del inhibidor de tripsina (discutido anteriormente) encontrado en algunas legumbres.