Temas Modernos de Nutricin Vegetal

Compilador: Adalberto Benavides Mendoza Departamento de Horticultura Universidad Autnoma Agraria Antonio Narro

Sociedad Mexicana de la Ciencia del Suelo, A.C. Texcoco, Mxico, 2009

ISBN: 978-607-95106-2-6

Temas Modernos de Nutricin Vegetal ISBN: 978-607-95106-2-6 Editor: Sociedad Mexicana de la Ciencia del Suelo, A.C. Compilador: Adalberto Benavides Mendoza Lugar de Edicin: Saltillo, Coah. Fecha de edicin: Julio de 2009 Ejemplares: 250

PRESENTACIN

La presente obra proviene de los temas tratados en dos simposios organizados en el marco de Congresos realizados bajo el auspicio de la Sociedad Mexicana de la Ciencia del Suelo, A.C. El primero de ellos fue el simposio denominado Suelos y Calidad Nutricional de los Cultivos, mismo que se llev a cabo el 19 de septiembre del 2006 en el marco del XXXIII Congreso Nacional de la Ciencia del Suelo en Ciudad Victoria, Tamaulipas. El segundo se llam simplemente Nutricin Vegetal y se realiz el 19 de septiembre del 2007 en Len, Guanajuato, como parte del XVII Congreso Latinoamericano de la Ciencia del Suelo que en esa ocasin estuvo bajo la responsabilidad de la SMCS. En ambos casos agradezco de nuevo a los ponentes la participacin entusiasta que permiti que los dos eventos fuesen un xito y que se contara con una excelente asistencia y participacin en los dos simposios. Igualmente doy las gracias a los autores por la paciencia hacia el compilador y a su trabajo de integrar este volumen. Los trabajos incluidos tienen carcter desde bsico hasta aplicado. Los rubros cubiertos se integran con informacin actualizada en el momento y presentada por expertos en cada tema. En ese sentido espero que los diversos lectores encuentren temas de su inters y su lectura sea til y enriquecedora. Dentro de lo posible se respet el texto original de los autores, pero por razones de facilitar al lector la comprensin se llevaron a cabo cambios pequeos en la redaccin respetando escrupulosamente el fondo del mensaje y el contenido tcnico.

NDICE DE CONTENIDO

EL ESTRS OXIDATIVO EN PLANTAS. Pg. 1

Mara de Lourdes Miranda-Ham* y Lizbeth Castro-Concha Unidad de Bioqumica y Biologa Molecular de Plantas, Centro de Investigacin Cientfica de Yucatn. Calle 43 # 130, Chuburn de Hidalgo, Mrida, Yucatn, Mxico. 97200.

ANTIOXIDANTES EN LAS PLANTAS: ALGUNOS FACTORES EDFICOS Y AMBIENTALES QUE LOS MODIFICAN.. Pg. 13
Adalberto Benavides-Mendoza*, Homero Ramrez, Valentn Robledo-Torres, Laura Olivia FuentesLara Universidad Autnoma Agraria Antonio Narro, Departamento de Horticultura, Buenavista, Saltillo, Coah. 25315. Tel. (844)411-0303, email: abenmen@uaaan.mx

CARACTERIZACIN NUTRIMENTAL DE FRUTOS DE TOMATE HBRIDOS DE CULTIVARES COMERCIALES Y EXPERIMENTALES... Pg. 27

J. Siller Cepeda, M.D. Muy Rangel, M. Bez-Saudo, L. Contreras-Angulo, R. Vlez de la Rocha, R. Contreras-Martnez Centro de Investigacin en Alimentacin y Desarrollo A.C. Unidad Culiacn. Carretera a Eldorado km. 5.5 Campo El Diez, Culiacn, Sinaloa, CP 80110, Mxico

EFECTO DE LA NUTRICIN VEGETAL EN RENDIMIENTO Y VIDA POSCOSECHA EN HORTALIZAS.... Pg. 40

Maritza Arellano Gil y Marco Antonio Gutirrez Coronado* Fisiologa de Cultivos. Instituto Tecnolgico de Sonora

NUTRICIN VEGETAL CON FERTILIZANTES INTELIGENTES: CASO TOMATES Pg. 68

Catalina Mungarro Ibarra y Marco Antonio Gutirrez Coronado* Fisiologa de Cultivos. Instituto Tecnolgico de Sonora

USO DE BIOSOLIDOS Y ESTIRCOLES EN LA NUTRICIN VEGETAL. Pg. 93

Juan Pedro Flores Mrgez Profesor-Investigador en Suelos y Estadstica, Universidad Autnoma de Ciudad Jurez (www.uacj.mx), Instituto de Ciencias Biomdicas, Programa de Biologa, Laboratorio de Ciencias Ambientales (juflores@uacj.mx). Tel.656-285-8592, FAX: 656-688-1886.

FITORREMEDIACIN DE SUELOS CONTAMINADOS CON METALES PESADOS... Pg. 124

Hortensia Ortega-Ortiz 1, Adalberto Benavides-Mendoza2*, Roberto Arteaga Alonso2, Alejandro Zermeo-Gonzlez3
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Centro de Investigacin en Qumica Aplicada, Blvd. Enrique Reyna Hermosillo 140, CP 25253 Saltillo, Coahuila Mxico. Tel. (844) 438 98 30, Fax: 438 98 39. Email: hortega@ciqa.mx

Departamento de Horticultura, Universidad Autnoma Agraria Antonio Narro, Buenavista, CP 25315 Saltillo, Coahuila Mxico.
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Departamento de Riego y Drenaje, UAAAN.

ENFOQUE INTEGRAL DE NUTRICIN EN FRUTALES.. Pg. 148

Jorge B. Retamales Departamento de Horticultura, Facultad de Ciencias Agrarias, Universidad de Talca, Chile

Manejo de la Nutricin y Fertilizacin en el cultivo del Nogal Pecanero.. Pg. 176

Dmaris L. Ojeda Barrios1, Victoria Fernndez Fernndez2, Esteban Snchez Chvez1 y Homero Ramrez Rodrguez3
Facultad de Ciencias Agrotecnolgicas. Universidad Autnoma de Chihuahua Campus 1. Chihuahua, Chih. Mxico. 2Estacin Experimental del Aula Dei. Consejo Superior de Investigaciones Cientficas (CSIC), Apdo, 202, Zaragoza, Espaa. 3Universidad Autnoma Agraria Antonio Narro Departamento de Horticultura. Saltillo, Coah. Mxico. dojeda@uach.mx
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EL HIERRO EN LA NUTRICIN DE CULTIVOS AGRCOLAS. Pg. 200

Ranferi Maldonado Torres, Mara Edna lvarez Snchez, Edmundo Robledo Santoyo, Langen Corlay Chee Departamento de Suelos, Universidad Autnoma Chapingo, Texcoco, Mxico.

EL ESTRS OXIDATIVO EN PLANTAS

Mara de Lourdes Miranda-Ham* y Lizbeth Castro-Concha

Unidad de Bioqumica y Biologa Molecular de Plantas, Centro de Investigacin Cientfica de Yucatn. Calle 43 # 130, Chuburn de Hidalgo, Mrida, Yucatn, Mxico. 97200.

*A quin debe dirigirse la correspondencia. E-mail: mirham@cicy.mx; Telfono: 999 9813943; Fax: 999 9813900 1

RESUMEN El oxgeno apareci en la atmsfera de la Tierra hace 2200 millones de aos y desde entonces, los organismos han evolucionado de manera constante para contrarrestar los efectos dainos de este gas txico y mutagnico. Sin embargo ahora, la mayora de los organismos necesitan del oxgeno para producir eficientemente la energa necesaria para realizar sus funciones vitales. Las especies reactivas de oxgeno engloban tanto a los radicales libres que se forman de la reduccin incompleta de la molcula de oxgeno como a las especies relacionadas como el oxgeno singulete y el perxido de hidrgeno. Las especies reactivas de oxgeno tienen en las plantas, papeles importantes en el crecimiento, desarrollo e interacciones con el medio ambiente, y por tanto, se producen en cantidades significativas durante la fotosntesis y la respiracin. Sin embargo, se mantiene la homeostasis redox mediante mecanismos que controlan su sntesis y depuracin. El desbalance entre la produccin y la eliminacin de las especies reactivas en los organismos conducen a lo que se conoce como estrs oxidativo. Existen dos tipos de mecanismos antioxidantes que mantiene esta homeostasis: los enzimticos y los no enzimticos. Dentro de los enzimticos, podemos citar a la superxido dismutasa, la catalasa, las peroxidasas y entre los no enzimticos, tenemos a compuestos como el ascorbato y el glutatin. Se discutirn los resultados obtenidos por nuestro grupo de investigacin sobre ambos tipos de mecanismos antioxidantes en dos modelos experimentales: Lycopersicon esculentum Mill y Capsicum chinense Jacq. bajo condiciones ambientales biticas y abiticas, que conducen a la formacin de especies reactivas de oxgeno.

PALABRAS CLAVE: Estrs oxidativo, plantas, enzimas antioxidantes, ascorbato, glutatin.

INTRODUCCIN Desde la introduccin del oxgeno molecular en nuestra atmsfera por las cianobacterias capaces de realizar la fotosntesis hace 2700 millones de aos, las especies reactivas de oxgeno (ROS, por sus siglas en ingls - Reactive Oxygen Species) han sido las acompaantes incmodas de la vida aerbica. La necesidad que tienen los organismos por el oxgeno eclipsa el hecho de que puede ser un gas txico y mutagnico; ms an, estos mismos organismos sobreviven ya que han desarrollado mecanismos antioxidantes muy eficientes (Halliwell, 2006). El trmino especies reactivas de oxgeno se refiere, tanto a los radicales libres del oxgeno, como son el anin superxido (O2-), el hidroxilo (OH-) y el peroxilo, as como a otras molculas que no son radicales, como el oxgeno singulete (1O2) y el perxido de 2

hidrgeno (H2O2). Un radical libre es cualquier especie capaz de tener una existencia independiente, que contiene uno o ms electrones desapareados. Un electrn desapareado es aquel que se encuentra solo y ocupando un orbital atmico o molecular. Los radicales pueden formarse a travs de numerosos mecanismos, entre los cuales se incluye la adicin de un electrn a un no-radical. El oxgeno molecular se considera un radical libre, ya que no tiene completamente apareados sus electrones. Sus dos electrones tienen el mismo nmero cuntico de spin, es decir, sus spins son paralelos; de aqu su gran capacidad para reaccionar con la mayora de las molculas que no son radicales (Halliwell, 2006) (Figura 1). Las ROS, que se producen durante los procesos de respiracin y fotosntesis bajo condiciones fisiolgicas normales, son depuradas a travs de una serie de complejos mecanismos enzimticos y no enzimticos. Cuando el equilibrio entre la produccin y la eliminacin de especies reactivas de oxgeno es perturbado por una serie de factores medioambientales adversos, ya sean biticos o abiticos, se produce lo que se conoce como estrs oxidativo. Desde hace algunos aos, se ha empezado a reconocer que las ROS tienen un papel importante en los procesos de sealizacin en plantas, y que controlan procesos fundamentales en las plantas, tales como el crecimiento, el desarrollo, la respuesta a estmulos medio-ambientales y la muerte celular programada (Apel y Hirt, 2004, BaileySerres y Mittler, 2006).

Figura 1. Principales especies reactivas de oxgeno.

ESTRS OXIDATIVO Cada ao el estrs ambiental causa prdidas considerables en la calidad y productividad de los cultivos, incluso bajo condiciones de produccin protegida como invernaderos y tneles. Estas condiciones ambientales desfavorables pueden ser biticas, impuestas por otros organismos, o abiticas, promovidas por un exceso o dficit en el ambiente fsico o qumico que las rodea. Los diferentes tipos de estrs disparan una amplia gama de respuestas en la planta que pueden ocasionar una reduccin en las tasas de crecimiento y productividad como consecuencia de las alteraciones del metabolismo celular y la expresin gentica. La duracin, severidad y velocidad de un estrs al que se ven sometidas las plantas influyen directamente en sus respuestas. Independientemente de su naturaleza, un factor comn en todas las condiciones adversas es la sobreproduccin de especies reactivas de oxgeno (Inz y Van Montagu, 1995). El estrs oxidativo es un estado alterado de la homeostasis de xido-reduccin intracelular, es decir, el balance entre oxidantes y antioxidantes. Dada su gran reactividad y en ausencia de mecanismos que las depuren, las ROS producen daos en la estructura y la funcin de las clulas (Simontacchi et al., 2001). ESTRS ABITICO. En plantas, las ROS se producen continuamente en el cloroplasto, mitocondria y peroxisomas. En condiciones normales, la produccin y remocin de las ROS est estrictamente controlada. Sin embargo, el equilibrio entre la produccin y la depuracin de stas puede ser perturbado por diversos factores fisicoqumicos, como son el dficit hdrico, la salinidad, las temperaturas extremas, la excesiva o insuficiente radiacin luminosa, la anaerobiosis por encharcamiento o inundacin, los factores mecnicos como el viento o la compactacin del suelo y las lesiones. Los factores qumicos incluyen el estrs nutricional, o la presencia de contaminantes inorgnicos (SO2, NOX, O3, o metales pesados) u orgnicos como los CFC (compuestos clorofluorocarbonados), BPC (bifenilos policlorados) o HAP (hidrocarburos aromticos policclicos). Frecuentemente, se presentan combinaciones de dos o ms de estas condiciones (Cabrera, 2006). ESTRS BITICO. Una de las ms rpidas reacciones de defensa al ataque por patgenos es la llamada explosin oxidativa, la cual constituye la produccin de ROS, principalmente O2- y H2O2 en el sitio de invasin. La generacin de O2- ha sido identificada en un amplio rango de interacciones planta-patgeno que involucran bacterias, hongos y virus (Low y Merida, 1996). Este tipo de estrs tambin puede ser provocado por insectos y nematodos, as como tambin por herbvoros. La interaccin planta-patgeno puede ser de tipo compatible, en la cual el patgeno infecta la planta, provocando una enfermedad, o incompatible, en la que los mecanismos de defensa de la planta impiden su entrada o establecimiento. En este ltimo caso, las clulas que estn en contacto con el patgeno pueden enviar seales a las clulas y tejidos vecinos para que se produzcan cambios bioqumicos destinados a evitar la diseminacin del patgeno. Este sistema se denomina resistencia sistmica adquirida (Cabrera, 2006). Numerosas enzimas han sido implicadas en la produccin apoplstica de ROS, despus del reconocimiento exitoso del patgeno. La utilizacin de inhibidores ha permitido involucrar a las NADPH oxidasas de membrana plasmtica y a las peroxidasas de pared celular, como las principales fuentes de ROS (Torres et al., 2006). Las NADPH oxidasas catalizan la produccin de O2- a travs de la reduccin del oxgeno, utilizando NADPH como 4

donador de electrones. El O2- generado por esta enzima sirve como materia prima para la produccin de una gran cantidad de oxidantes (Apel y Hirt, 2004). Las peroxidasas son un complejo grupo de protenas que catalizan la xido reduccin de varios sustratos que utilizan perxido. En particular, las peroxidasas dependientes de pH en la pared celular, pueden llegar a ser una fuente importante de H2O2, si estn en presencia de algn reductor que la clula libere en respuesta a algn estmulo (Torres et al., 2006). MECANISMOS DE DEPURACIN DE LAS ROS Las plantas han desarrollado estrategias para eliminar el exceso de ROS. Estos mecanismos celulares son diversos, y tienen complejas relaciones entre ellos, dependiendo de los compartimentos celulares en los que se encuentran. Existen en las plantas mecanismos de proteccin enzimticos y no enzimticos que atrapan e inactivan eficientemente las ROS. Los principales antioxidantes no-enzimticos incluyen a compuestos como el ascorbato y el glutatin, as como los tocoferoles, los flavonoides, los alcaloides y los carotenoides que se encuentran en las plantas en altas concentraciones y constituyen una primera lnea de defensa. Mutantes que presentan niveles de cido ascrbico muy bajos o un contenido alterado de glutatin son hipersensibles al estrs. ASCORBATO. Es el antioxidante cuantitativamente predominante en las clulas vegetales, se encuentra en todos los compartimentos subcelulares, incluido el apoplasto, en concentraciones que oscilan entre 2-25 mM. El ascorbato es oxidado por el oxgeno, el anin supexido, el oxgeno singulete y el perxido de hidrgeno para dar lugar al radical monodeshidroascorbato, el cual se desproporciona en ascorbato o deshidroascorbato (Smirnoff, 2000) (Figura 2). Desempea un papel fundamental en la fotoproteccin y la regulacin de la fotosntesis, y preserva las actividades de enzimas que tienen iones metlicos de transicin (Cu2+, Fe2+) como grupo prosttico. El ascorbato es tambin un poderoso antioxidante secundario, ya que reduce la forma oxidada del -tocoferol. Adicionalmente, es el reductor utilizado para la hidroxilacin de residuos de prolina de la extensina, una protena de la pared celular. Tambin est implicado en la elongacin de la raz, el funcionamiento de los estomas, y desempea una funcin crtica asociada a los mecanismos a travs de los cuales las plantas sensan los cambios medio ambientales y responden a ellos (Noctor y Foyer, 1998; Foyer y Noctor, 2005). GLUTATIN. Lo que comnmente se conoce como glutatin es el glutatin reducido (GSH glutamil-L-cistenglicina). Este tripptido que existe abundantemente en los cloroplastos es sintetizado en dos pasos, catalizados por la -glutamilcistena sintetasa (-ECS) y la glutatin sintetasa, siendo el primero de ellos el paso limitante de su biosntesis en plantas (Ogawa, 2005). El glutatin se caracteriza por ser el compuesto tilico no-proteico ms abundante, distribuido principalmente en clulas eucariticas. Se encuentra en concentraciones milimolares, y presenta una alta capacidad de donar electrones. El 90% del glutatin se encuentra normalmente en su estado reducido. El glutatin oxidado puede de nuevo ser reducido a GSH por accin de la glutatin reductasa que utiliza NADPH como poder reductor (Figura 2) (Li et al., 2004). 5

Figura 2. Ciclo del ascorbato-glutatin. AA, ascorbato; DHA, deshidroascorbato; DHAR, deshidroascorbato reductasa; GR, glutatin reductasa; GSH, glutatin reducido; GSSG, glutatin oxidado; MDHA, monodeshidroascorbato; MDHAR, monodeshidroascorbato reductasa. Se ha encontrado que el glutatin est involucrado en diferentes procesos en las plantas, entre los que destacan la diferenciacin, la muerte celular programada, la senescencia, la regulacin del ciclo celular, la floracin, la acumulacin de pigmentos, y la destoxificacin de xenobiticos y metales pesados. Recientemente se le ha asignado un papel como regulador del crecimiento y como inductor de genes de defensa (Ogawa, 2005). Poco se conoce del papel que juegan los flavonoides y los carotenoides en la destoxificacin de ROS en las plantas. Sin embargo, se sabe que la sobreexpresin de la caroteno hidroxilasa en Arabidopsis conlleva un aumento en la cantidad de xantofila en el cloroplasto, dando como resultado una mayor tolerancia al estrs producido por alta luminosidad (Apel y Hirt, 2004). Esto podra deberse a los sistemas de dobles enlaces conjugados que se encuentran en estas molculas. Los principales sistemas antioxidantes enzimticos en plantas son la familia de la superxido dismutasa (SOD), la ascorbato peroxidasa (APX), la glutatin peroxidasa (GPX) y la catalasa (CAT) (Figura 3). Las SODs actan como la primera lnea de defensa contra el ataque de las ROS, dismutando el superxido a H2O2 (Figura 3a). La APX, la GPX y la CAT subsecuentemente eliminan al H2O2 formado. En contraste con la CAT (Figura 3b), la ascorbato peroxidasa requiere del ascorbato reducido, e indirectamente de GSH, para regenerar el sistema en el ciclo del ascorbatoglutatin (Figura 3c). La reduccin del H2O2 hasta agua por accin de la APX involucra la oxidacin del ascorbato hasta monodeshidroascorbato (Ecuacin 1 de la figura 3c), el cual puede ser regenerado por accin de la monodeshidroascorbato reductasa (MDAR), utilizando NADPH como poder reductor (Ecuacin 2 en la figura 3c). El monodeshidroascobato puede espontneamente dismutar hasta deshidroascorbato. La regeneracin del ascorbato est mediada por la accin de la deshidroascorbato reductasa (DHAR), utilizando para esto la oxidacin del GSH hasta GSSG (Ecuacin 3 en la figura 3c). Finalmente, la glutatin 6

reductasa (GR) puede regenerar el GSH a partir del GSSG. Al igual que la APX, la GPX tambin reduce el H2O2 hasta agua, pero emplea directamente GSH como agente reductor (Ecuacin 1 en la figura 3d). El ciclo de la GPX se cierra con la regeneracin del GSH, a partir de GSSG por accin de la GR (Ecuacin 2 en la figura 3d). A diferencia de la mayora de los organismos, las plantas poseen mltiples genes que codifican para la SOD y la APX. Diferentes isoformas de estas enzimas se encuentran localizadas en el cloroplasto, mitocondria, peroxisomas, as como en el citosol y el apoplasto. Por otro lado, la GPX es citoslica y la CAT se localiza predominantemente en los peroxisomas (Apel y Hirt, 2004). La asignacin de funciones para las enzimas antioxidantes ha sido explorada por medio de los organismos transgnicos. En el caso de tabaco, la sobreexpresin de la SOD de cloroplasto no alter su tolerancia al estrs oxidativo, lo cual sugiere que otros mecanismos antioxidantes pueden ser los limitantes (Allen, 1995). Por otro lado, la expresin de la SOD de cloroplasto de chcharo en tabaco aumenta su resistencia al dao de membrana provocado por el metil violgeno, un poderoso oxidante utilizado para mimetizar condiciones ambientales adversas (Allen, 1995). En el caso de la CAT, estudios realizados con plantas transgnicas de tabaco han demostrado que resulta ser indispensable para la tolerancia al estrs oxidativo, ya que plantas que no poseen actividad de CAT presentan altos niveles de ROS en respuesta al estrs, tanto bitico como abitico (Willekens et al., 1997).

a)

Superxido dismutasa:

b)

Catalasa:

c)

Ciclo del Ascorbato-glutatin:

1) H2O2 + Ascorbato

APX

H2O + Monodeshidroascorbato (MDHA)

2) MDHA + NADPH

MDHAR

Ascorbato + NADP+

d)

Ciclo de la glutatin peroxidasa:

1) H2O2 + GSH GPX

H2O + GSSG

Figura 3. Principales mecanismos enzimticos de depuracin de las ROS. 7

EL PAPEL DE LAS ROS EN EL CRECIMIENTO Y LA RESPUESTA HORMONAL. Reportes recientes demuestran la importancia de las ROS como reguladores en el desarrollo de las plantas. Existe evidencia que indica que las ROS desempean un papel en el crecimiento y que la regulacin de su produccin en los diferentes compartimentos celulares es un factor importante que regula la morfologa y la formacin de diferentes rganos en la planta (morfognesis) (Carol et al., 2005). Se ha demostrado que las ROS que estn involucradas en el desarrollo de las plantas son producidas por las NADPH oxidasas, las cuales generan O2-, utilizando NADPH como donador de electrones. En Arabidopsis se ha demostrado que tres miembros de esta familia de enzimas estn involucrados en diferentes aspectos del crecimiento de la raz (Gapper y Dolan, 2006). Plantas que presentan mutaciones en el gen RHD2/atrbohC, que codifica para una NADPH oxidasa involucrada en la elongacin de la raz, presentan una disminucin en su produccin de ROS, y son 20% ms bajas que las plantas normales (Foreman et al., 2003). Adems de su papel en la elongacin de la raz, existe evidencia que stas desempean un papel en el crecimiento de otros rganos, como sucede durante la expansin de la hoja en maz o en el control de la dominancia apical y la morfologa de la hoja en Lycopersicon esculentum (Gapper y Dolan, 2006). Las ROS han sido implicadas como segundos mensajeros en respuesta a los fitorreguladores. En el caso de races de maz, estudios realizados demuestran que stas funcionan como un componente que disminuye la respuesta al gravitropismo mediado por auxinas (Joo et al., 2001). Por otro lado, se ha sugerido tambin que el etileno y las ROS son necesarios para el establecimiento y la funcin de los ndulos de raz en leguminosas semiacuticas. Trabajos recientes han demostrado tambin que las ROS son seales indispensables para el cierre estomtico, mediado por ABA. En el caso de las clulas guarda de Arabidopsis, ABA estimula la acumulacin de ROS va la activacin de canales de calcio en la membrana plasmtica. La sntesis de ROS en respuesta a ABA tambin ocurre en Vicia faba, pero la produccin se da en la membrana plasmtica y en el cloroplasto (Apel y Hirt, 2004; Kwak et al., 2006).

INVESTIGACIN REALIZADA EN EL GRUPO El trabajo de nuestro grupo de investigacin se ha centrado en los mecanismos que el tomate, Lycopersicon esculentum Mill. utiliza para contender con el exceso de ROS producidas durante la interaccin con Phytophthora infestans. Se utiliz como modelo experimental, cultivos de clulas en suspensin, generados a partir de hojas jvenes de Lycopersicon esculentum Mill. cv. Ro Grande. Los cultivos se han mantenido durante casi diez aos, en el medio MS (Murashige y Skoog, 1962), suplementado con las vitaminas del medio B5 (Gamborg et al. 1968), 2.24 M 2,4-D, 0.049 M cinetina, 3% sacarosa y 0.22% gelrite, pH 5.8. 8

La muerte celular es un aspecto fundamental a monitorear durante las primeras fases de la interaccin planta-patgeno y hay una serie de caractersticas que identifican a esta respuesta inmediata, denominada como respuesta hipersensible, como son cambios en el flujo de iones, cambios en el pH celular, la generacin de especies reactivas de oxgeno, la expresin de genes relacionados con la defensa, el fortalecimiento de paredes celulares y la produccin de compuestos antimicrobianos. Sin embargo, se presentaban contradicciones en lo que se refera a la cuantificacin veraz de la viabilidad de las clulas en respuesta a la infeccin por un patgeno. Por esto se realiz un anlisis de cuatro diferentes mtodos comnmente utilizados para determinar este parmetro: los ensayos con sales de tetrazolio, el ensayo de azul de Evans, el ensayo con acetato de fluorescena y por ltimo, la observacin microscpica. Al comparar estos mtodos, se determin que el utilizar tan slo un mtodo para determinar los cambios fisiolgicos y bioqumicos que se presentan en las primeras horas de la interaccin podra conducir a conclusiones errneas. Es por esto que cuando se adopta algn mtodo para determinar la viabilidad, debe tomarse en cuenta no slo las caractersticas del cultivo celular sino tambin la naturaleza de los mecanismos de entrada del patgeno, puesto que algunas de las limitaciones intrnsecas de las determinaciones podran enmascararlas. Los datos obtenidos indican que el ensayo basado en la reduccin de las sales de tetrazolio es el ms adecuado para monitoreare las respuestas primarias que tienen lugar en las primeras fases de la interaccin (Escobedo y Miranda-Ham, 2003). Se realiz el anlisis bioqumico de la respuesta al estrs en las clulas en suspensin retadas con oligogalacturnidos (OGA), en trminos de cambios en los niveles de ROS, del ascorbato, y en las actividades especficas totales y los perfiles de isoenzimas de las SOD, la CAT, la APX y las peroxidasa de guayacol (g-POX). Los oligogalacturnidos utilizados proviene de Citrus y son pequeos oligosacridos que son capaces de inducir la respuesta hipersensible en clulas en suspensin. En conjunto el anlisis de los resultados permite sugerir que las clulas en suspensin se encuentran normalmente bajo un estrs oxidativo constante, ocasionado posiblemente por la agitacin en la que se encuentran. No obstante, las clulas son competentes para percibir, responder y amplificar la seal en respuesta a los OGA, que se manifest por el rpido e importante incremento en H2O2, as como una continua produccin de O2-. Esto da lugar a una condicin hiper-oxidante, resultado del incremento transitorio en las actividades de las enzimas que producen H2O2, la reduccin en cantidad del ascorbato reducido, y la disminucin en las actividades de las enzimas depuradoras del perxido como la APX, la CAT y las g-POX. Despus de unas horas las clulas testigo, como consecuencia del incremento en la poza de ascorbato, as como de las actividades de las enzimas mencionadas. Estas clulas presentan una segunda explosin oxidativa de ROS, observada por el aumento en la actividad total de SOD y la disminucin de la actividad de la APX despus de 24 h de iniciado el tratamiento (Gracia-Medrano et al., 2005). El uso de los homogeneizados de Phytophthora infestans, as como de los oligogalacturnidos, representan una interaccin de tipo incompatible, en la cual el mantenimiento de la homeostasis de las ROS en los diferentes compartimentos celulares es el resultado de una regulacin muy fina de los sistemas antioxidantes, a travs de la comunicacin concertada entre las actividades de las diferentes enzimas y las fluctuaciones en el estado redox y el tamao de la poza de ascorbato. 9

En resumen, los resultados obtenidos en el sistema de Lycopersicon esculentum apoyan la existencia de interconexiones complejas entre la regulacin secuencial y concertada de las actividades de las enzimas antioxidantes y el status redox intracelular, que a su vez estn mediado el encendido y apagado de la sntesis de otras molculas como el cido saliclico, el cido jasmnico y el xido nitroso, que amplifican y regulan otros mecanismos de defensa. Es de notar que existen variaciones en la poza del cido saliclico, en coordinacin con alteraciones en la acumulacin de ROS que se han detectado en las clulas de tomate durante el estrs (Vicinaiz, 2004). Por lo que respecta a los estudios con clulas de chile habanero, an cuando se encuentran en sus primeras fases, se puede comentar que el glutatin se encuentra principalmente en su estado reducido, tanto en las clulas testigo como en aquellas que han recibo el homogeneizado de Phytophthora capsici. Esto indica que la glutatin reductasa se encuentra activa para transformar al glutatin oxidado a reducido, y as mantener un adecuado equilibrio en el reciclaje de las molculas antioxidantes dentro del ciclo de ascorbato-glutatin para evitar que se pierda la homeostasis celular (Cabrera, 2006). CONCLUSIONES En la ltima dcada, el estudio del estrs oxidativo ha suscitado gran inters, ya sea por el hecho de que se cuenta con un arsenal de tcnicas modernas que permiten obtener respuestas que antes no hubiera sido posible obtener, o porque se ha alcanzado la madurez necesaria para enfrentar la paradoja que constituye vivir en una atmsfera oxidante. Sin lugar a dudas, en los aos venideros, la cantidad de informacin que estar disponible redundar en mejores y ms eficientes maneras de aumentar la productividad en los cultivos. LITERATURA CITADA Allen R.D., 1995. Dissection of oxidative stress tolerance using transgenic plants. Plant Physiol. 107: 1049-1054. Apel K. and H. Hirt, 2004. Reactive oxygen species: Metabolism, oxidative stress and signal transduction. Annu. Rev. Plant Biol. 55: 373-399. Bailey-Serres J. and R. Mittler, 2006. The roles of reactive oxygen species in plant cells. Plant Physiol. 141: 131. Cabrera, Y.A., 2006. Efecto de Phythopthora capsici sobre el metabolismo del glutatin en suspensiones celulares de chile habanero (Capsicum chinense Jacq.). Univ. Autnoma de Yucatn. Mrida, Mxico. Tesis de Licenciatura. Carol R.J., S. Takeda, P. Linstead, M.C. Durrant , H. Kakesova, P. Derbyshire, S. Drea, V. Zarsky and L. Dolan, 2005. A RhoGDP dissociation inhibitor spatially regulates growth in root hair cells. Nature 438: 1013-1016. Escobedo G-M. R.M. and M.L. Miranda-Ham, 2003. Analysis of elicitor-induced cell viability changes in Lycopersicon esculentum Mill. Suspension culture by different methods. In vitro Cel.. Dev. Biol. 39: 236-239.

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ANTIOXIDANTES EN LAS PLANTAS: ALGUNOS FACTORES EDFICOS Y AMBIENTALES QUE LOS MODIFICAN

Adalberto Benavides-Mendoza*, Homero Ramrez, Valentn Robledo-Torres, Laura Olivia Fuentes-Lara

Universidad Autnoma Agraria Antonio Narro, Departamento de Horticultura, Buenavista, Saltillo, Coah. 25315. Tel. (844)411-0303, email: abenmen@uaaan.mx

*Correspondencia abenmen@uaaan.mx

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RESUMEN Los antioxidantes son compuestos que permiten la vida celular en un ambiente oxidante. Su presencia es ubicua en los organismos aerobios, que son los responsables de la eliminacin de los radicales libres los cuales se producen, de manera natural, en los sitios de actividad energtica celular. Los perfiles relativos y la cantidad de antioxidantes son variables frente a los estmulos ambientales ya que dependen, para su sntesis, de grupos de genes cuya expresin se induce diferencialmente. Los antioxidantes son componentes importantes en la dieta de los humanos, de all la importancia de aumentar su cantidad en los alimentos. Se enumeran algunos resultados que evidencian la forma como los caracteres del suelo modifican la calidad nutricional de las plantas, en particular respecto a su contenido de antioxidantes.

PALABRAS CLAVE: calidad nutricional, radicales libres, fitoqumicos.

INTRODUCCIN En el transcurso de la evolucin, las plantas desarrollaron mecanismos que permiten la induccin de respuestas frente a los estmulos diversos del ambiente. Una parte de tales respuestas, como la morfologa de los estomas, la constitucin de los tallos, el tipo de metabolismo C3, C4 CAM, entre otras, son constitutivas, pues dependen de su patrimonio gentico particular; otras, en cambio, se manifiestan slo bajo alguna condicin inductiva particular. Estas ltimas respuestas son las que se observan, en el corto plazo, durante la adaptacin de las plantas al ambiente. Las citadas respuestas; se desencadenan por factores bitico tales como patgenos, plagas y simbiontes, o por factores abiticos como alta o baja temperatura, radiacin, salinidad, entre otros, y no necesariamente en condiciones que originan estrs. Las respuestas inducidas tambin pueden ser de largo plazo; son las responsables de la conocida plasticidad fenotpica de las plantas, que resulta de la alteracin en los programas de desarrollo. El ambiente de crecimiento es una fuente constante de informacin y recursos para las plantas, las cuales se encuentran en un estado dinmico de cambio fisiolgico y metablico, que resulta, a su vez, de recurrentes modificaciones en la expresin gnica. Los fenotipos, ms que inmutables, son entonces dinmicos y cambiantes en escalas de tiempo que van de unos pocos segundos a das o meses. Las respuestas adaptativas que ocurren frente a cualquier factor ambiental dependen de la accin de sealizadores (o inductores) que interaccionan con receptores especficos, ubicados normalmente en las membranas que rodean al citoplasma, al tonoplasto, as como a otros organelos. Normalmente, el receptor activado por el sealizador modifica la expresin gnica, e induce la sntesis y acumulacin de ciertos metabolitos secundarios, fitoalexinas protenas u otros compuestos relacionados con las respuestas al estrs. Asimismo, los sealizadores pueden inducir cambios modulatorios de corto plazo en las propiedades de la membrana celular, o bien determinar modificaciones pos-traduccin en ciertas protenas, lo que da lugar a una cadena de sealizacin o cascada de transduccin de seales ambientales (Benavides-Mendoza, 2002). 14

Entre los sistemas de respuesta mencionados, se encuentra la sntesis de fitoqumicos y antioxidantes. Estos compuestos cumplen funciones importantes como atrapadores de radicales libres, estabilizadores y protectores del DNA y protenas frente al estrs por oxidacin (Inz y Van Montagu, 1995) en todos los seres vivos aerobios. Queda por definir si tales fitoqumicos y antioxidantes cumplen funciones adicionales a la resistencia al estrs (Roitsch, 1999). Al respecto, se sabe que muchos fitoqumicos no muestran expresin constitutiva, sino que dependen del trasfondo ambiental especfico, probablemente porque modifican la expresin gnica al cambiar los programas de desarrollo de la planta y generar patrones especiales de metabolismo y morfognesis (Allen et al., 1995; Bohnert y Sheveleva, 1998). Vase la Figura 1.

ANTIOXIDANTES EN LAS PLANTAS La funcin qumica de los antioxidantes es ceder potencial reductor a los compuestos oxidantes capaces de daar a los componentes celulares. Los productos finales de esta reaccin de disipacin energtica antioxidante-oxidante son comnmente el O2 y el H2O, acompaados de liberacin de calor. Los compuestos oxidantes ms abundantes en las clulas vegetales se derivan de la activacin de la molcula de dioxgeno (O2), lo que da lugar a especies qumicas parcialmente reducidas, como el oxgeno singlete O21 y el radical superxido (O2-), que constituyen las especies activas (o reactivas) de oxgeno (ROS) primarias. Las reacciones posteriores de las especies activas de oxgeno primarias con los componentes celulares, forman otros radicales libres (como el radical hidroxilo HO-) u otros compuestos oxidantes como el perxido de hidrgeno, H2O2, que tienen carcter oxidante pero no son radicales libres (Mittler, 2002).

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Figura 1. Resumen esquematizado del sistema de regulacin ambiental de los programas de desarrollo de las plantas. La accin de estos procesos da lugar a una planta con un fenotipo particular.

Las ROS, en general, son producto de reacciones del metabolismo energtico como la fotosntesis, la respiracin y la fotorespiracin. Otras reacciones de sntesis de ROS ms especficas y sujetas a control celular sobrevienen por la accin de enzimas como la NADPH oxidasa, amino oxidasas y peroxidasas de la pared celular. La funcin de estas ltimas enzimas es producir ROS involucradas en la muerte celular programada y en la defensa contra patgenos (Mittler, 2002). El nivel normal de produccin de ROS en las clulas vegetales de 240 M s1 O2 con un nivel estacionario de 0.5 M H2O2 en los cloroplastos, aumenta hasta 720 M s1 O2, con un nivel estacionario de 15 M H2O2 en los cloroplastos por los factores ambientales que inducen estrs osmtico, como el dficit hdrico, la salinidad y la baja temperatura, o bien por el dao mecnico. Tanto en el caso de factores biticos como abiticos, la sobreproduccin de las ROS causan estrs oxidativo celular, aunque tales compuestos tambin parecen cumplir con la importante funcin de indicadores del estrs y segundos mensajeros en las cadenas de transduccin de seales de respuesta al estrs (Mittler, 2002). 16

La mencionada funcin dual de las ROS, por una parte como sealizadores del estrs, por otra, como compuestos que causan la muerte celular, indica que el control de su concentracin por medio de sustancias antioxidantes, parece ocurrir debido, cuando menos, a dos mecanismos: (i) uno que lleva a cabo el control fino de los niveles de los ROS para propsitos de sealizacin y (ii) otro que se encarga de la desintoxicacin de las ROS producidas en exceso durante los eventos de estrs. Para el caso de la sealizacin parece ser que tanto la concentracin de una ROS especfica, como la concentracin relativa de diferentes ROS, es determinante en la determinacin de la respuesta celular. El cuadro 1 contiene un resumen de los principales sistemas bioqumicos que produce, elimina o disminuye la produccin de ROS.

Cuadro 1. Procesos de produccin, eliminacin y disminucin de especies activas de oxgeno en plantas. MECANISMO Produccin O2 en fotosntesis (transporte de electrones y PSI y PSII) O2 en respiracin (transporte de electrones) H2O2 por la glicolato oxidasa O21 por clorofila excitada O2 por la NADPH oxidasa H2O2 por la -oxidacin de cidos grasos H2O2 por la oxalato oxidasa O2 por la xantina oxidasa H2O2 y O2 por peroxidasas, Mn2+ y NADH Eliminacin LOCALIZACIN

Cloroplasto

Mitocondria

Peroxisoma Cloroplasto Membrana plasmtica Peroxisoma Apoplasto Peroxisoma Pared celular

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O2 por superxido dismutasa

Cloroplasto, mitocondria, citoplasma, peroxisoma, apoplasto Cloroplasto, mitocondria, citoplasma, peroxisoma, apoplasto Peroxisoma Citoplasma Pared celular, citoplasma, vacuola Cloroplasto, citoplasma, mitocondria Cloroplasto, citoplasma, mitocondria, peroxisoma, apoplasto Cloroplasto, citoplasma, mitocondria, peroxisoma, apoplasto Membranas Cloroplasto

H2O2 por la ascorbato peroxidasa H2O2 por la catalasa H2O2 y ROOH por la glutatin peroxidasa H2O2 por peroxidasas H2O2 por tioredoxina peroxidasa H2O2 y O2 por cido ascrbico

H2O2 por el glutatin ROOH y O2 por el -tocoferol O21 por carotenoides Disminucin o Prevencin Adaptaciones anatmicas para disminuir la produccin de H2O2 , O21 y O2 Metabolismo C4 CAM para disminuir la produccin de H2O2 y O2 Migracin de clorofila para disminuir la produccin de H2O2 , O21 y O2 Disminucin o supresin de la fotosntesis para disminuir la produccin de H2O2 y O2

Epidermis foliar y mesfilo

Cloroplasto, citoplasma, vacuola

Citoplasma

Cloroplasto

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Modulacin de los fotosistemas y pigmentos antena para disminuir la produccin de O21 y O2 Oxidasas alternativas para disminuir la produccin de O2

Cloroplasto

Cloroplasto, mitocondria

Modificado de Mittler (2002). Mullineaux y Karpinski (2002).

Los principales sistemas de eliminacin de ROS en las plantas incluyen a las enzimas antioxidantes superxido dismutasa (SOD), ascorbato peroxidasa (APX) y a la catalasa (CAT), as como la actividad de quelatacin y secuestro de iones de metales, la cuales disminuye o previene la formacin de radicales hidroxilo, resultantes de reacciones HaberWeiss o reacciones Fenton. El balance de la actividad de los tres sistemas enzimticos: SOD, APX y CAT es crucial para determinar la concentracin relativa estacionaria de radicales superxido y de perxido de hidrgeno, lo cual, a su vez, controla la produccin de radicales hidroxilo. Tal parece que las diferencias en la afinidad al H2O2 de las enzimas APX (afinidad en concentracin de M) y CAT (afinidad en concentracin de mM), son resultado de que las diferentes enzimas pertenecen a dos clases de sistemas de eliminacin de ROS: uno de control fino y otro de eliminacin de exceso en condiciones de estrs (Mittler, 2002). La disminucin de produccin de ROS, es un mecanismo preventivo para evitar el dao oxidativo tan importante, como el de eliminacin de ROS. Dado que muchos factores abiticos inducen estrs y el consiguiente aumento en la concentracin de ROS, cualquier factor anatmico, morfolgico, bioqumico o fisiolgico que disminuya la intensidad del estrs, ser valioso desde el punto de vista de que reduce la produccin de ROS. En la naturaleza, el factor inductor de estrs ms comn es el exceso de captura de radiacin (que genera gran cantidad de poder reductor), versus la poca capacidad de utilizacin del potencial reductor, dependiendo este ltimo en gran cuanta de la -1 concentracin de CO2. En otras palabras, el nivel actual de CO2 (390 L L ) permite que las plantas C3 utilicen adecuadamente la radiacin solo hasta en un tercio o la mitad de la irradiancia normalmente alcanzada en muchas regiones del planeta. Cuando se rebasa este nivel de saturacin de la radiacin electromagntica (ubicado para plantas C3 entre 500 y 900 mol de fotones m-2 s-1), entonces se presenta un exceso de poder reductor que genera radicales libres, como resultado de la reduccin parcial del O2. En ese sentido, cualquier cambio en la planta que le permita disminuir la captura de radiacin, disminuir, a su vez, el estrs por saturacin de radiacin electromagntica. Ejemplos de lo anterior son las adaptaciones fisiolgicas observadas en plantas C4 y CAM, o bien los movimientos nsticos o de enrollamiento foliar que surgen en algunas especies C3. Otras adaptaciones son: la acumulacin de estructuras reflejantes en la superficie foliar o el 19

acomodo de los estomas en cavidades de la epidermis. Todo lo anterior provoca la disminucin de la captura de radiacin electromagntica y la disminucin de la transpiracin. Otro ejemplo lo constituye la disminucin reversible de la densidad de pigmentos antena de los centros fotosintticos, respuesta que se traduce en una menor captura efectiva de radiacin.

FITOQUMICOS Y ALIMENTACIN HUMANA Son importantes los compuestos antioxidantes en la alimentacin humana? La respuesta es positiva, ya que el estrs oxidativo se encuentra presente en todos los organismos aerobios, y los humanos no son excepcin. Los mismos compuestos fitoqumicos y antioxidantes que se encuentran en las plantas, cumplen en nuestra especie importantes funciones de proteccin y estabilizacin frente a las especies activas de oxgeno (Youdim y Joseph, 2001). Se sabe que la ingesta de alimentos con altos niveles de compuestos antioxidantes y fitoqumicos se relaciona con mayores niveles de los mismos compuestos en el cuerpo humano. Del mismo modo, hay gran cantidad de reportes acerca de los diferentes efectos de diversos fitoqumicos y antioxidantes vegetales sobre la capacidad antioxidante de los rganos y tejidos del cuerpo humano (Cao et al., 1998), la resistencia a las enfermedades (Gate et al., 1999), la prevencin de accidentes vasculares, as como en algunos males degenerativos (Youdim y Joseph, 2001). La ingesta de 400 a 600 g da-1 de frutas y vegetales se asocia con la reduccin de la incidencia de muchas formas comunes de cncer y enfermedades degenerativas. Los compuestos responsables de este efecto benfico son los compuestos fitoqumicos, que al igual que modulan la expresin gnica en las plantas, lo hacen en los humanos al inhibir carcinognesis de diversas formas (Heber y Bowerman, 2001). Los siguientes mecanismos de accin de los compuestos fitoqumicos y antioxidantes los describi Ferrari (2004): 1. Estabilizadores de membranas mitocondriales y promotores de la funcin mitocondrial, esto es, agentes que disminuyen la muerte celular por apoptosis (muerte celular programada) o necrosis. 2. Agentes quelatantes que disminuyen el dao oxidativo causado por metales libres en forma inica, los cuales son promotores de reacciones Fenton. 3. Antioxidantes que disminuyen el dao celular, estimulan la actividad antioxidante intrnseca, protegen el DNA de la oxidacin e inhiben la muerte celular en rganos clave. 4. Inductores de apoptosis en clulas prenoeplsicas o neoplsicas y agentes promotores de necrosis de tumores.

Una forma prctica de reconocer la presencia de los fitoqumicos es el color. Los frutos y vegetales de color rojo contienen licopeno (el pigmento precursor de los carotenoides, que se encuentran en gran cantidad en los tomates), que se asocia con la salud de la prstata. Los de color amarillo y verde-amarillo, como el maz y varios vegetales de hoja, contienen lutena 20

y zeaxantina, pigmentos que se localizan en la retina y disminuyen el riesgo de degeneracin macular. Los frutos de color rojo y morado contienen antocianinas, antioxidantes potentes que se encuentran en las manzanas rojas, las uvas, las fresas, las frambuesas, las cerezas y en el vino de uva. Los alimentos vegetales de color naranja, como el mango, la zanahoria, la calabaza y el durazno contienen beta-caroteno. El color amarillo-naranja como el encontrado en naranjas, mandarinas y limones se asocia con los flavonoides. Los alimentos blancos del tipo de la cebolla y el ajo contienen compuestos de sulfuro con gran actividad germicida y antioxidante (Heber y Bowerman, 2001). Los vegetales de la familia de las crucferas como el brcoli, la col de Bruselas y el kale contienen glucosinolatos (Heber y Bowerman, 2001); estos compuestos son convertidos en isotiocianatos por una myrosinasa vegetal y por la microflora gastrointestinal. Los isotiocianatos y algunos glucosinolatos bloquean de forma muy efectiva la carcinognesis inducida qumicamente en animales. Los isotiocianatos tambin son inductores de las protenas de fase 2, un grupo de protenas antioxidantes asociadas a la reduccin de la susceptibilidad a la carcinognesis en los mamferos, modelo para el estudio del cncer (Talalay y Fahey, 2001). En la actualidad, gran cantidad de textos, productos y sistemas se proponen para que los humanos aumenten la ingesta de fotoqumicos. Ocasionalmente ocurre confusin al hablar del efecto de ciertos alimentos; para evitarla, Bloch y Thomson (1995) presentan los siguientes conceptos de diversos compuestos y su modo de accin en la salud humana:

1. Agente quimiopreventivo: componente de los alimentos de carcter nutritivo o no nutritivo que, de acuerdo a resultados cientficos, ha demostrado inhibir la carcinognesis. Ejemplo: los polifenoles del t (Camelia sinensis), el resveratrol de las uvas o el vino, los isoflavonoides de la soya, la curcumina de la hierba Curcuma longa. 2. Alimento funcional: cualquier alimento o ingrediente alterado del mismo que produce un efecto benfico, ms all del que proveen los nutrimentos considerados tradicionalmente como lo son las vitaminas, protenas, etc.. Ejemplo, soya por su asociacin con la disminucin de ciertos tipos de cncer, t verde como antioxidante, nueces por la disminucin de accidentes vasculares, ajo por sus propiedades antioxidantes y de quimioprevencin, etc. 3. Fitoqumicos: sustancias que se encuentran en los frutos y vegetales comestibles que pueden ingerirse diariamente en cantidades pequeas. Tienen el potencial de modular favorablemente el metabolismo humano y prevenir el cncer, adems de otras enfermedades de tipo degenerativo. Ejemplos: isoflavonoides, resveratrol, licopeno, quercetina, alil-sulfuros, etc. 4. Nutracutico: cualquier sustancia considerada como alimento o parte de este, que ofrece beneficios mdicos o para la salud, y es til para la prevencin y el tratamiento de enfermedades. Pueden ser extractos de alimentos o el alimento en s considerando su contenido de cierto compuesto activo. Ejemplos: las vitaminas como el cido flico, los minerales (selenio), los extractos de plantas (ajo, Ginko biloba, jengibre) y los extractos de origen animal (carosina, carnitina, quitosano).

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Los antioxidantes se encuentran dentro de las categoras de agentes quimiopreventivos y fitoqumicos.

MANIPULACIN DEL AMBIENTE Y CALIDAD NUTRICIONAL DE LAS PLANTAS Trabajos recientes han demostrado que es posible manipular los mecanismos de defensa de las plantas y los niveles de antioxidantes y fitoqumicos especficos, por medio de la ingeniera de genes (Inz y Van Montagu, 1995), con la manipulacin ambiental (Pastori et al., 2000), con la aplicacin de fertilizantes qumicos u orgnicos, o con inductores qumicos naturales o artificiales que funcionan como sealizadores, antioxidantes y promotores de oxidacin controlada (Beligni y Lamattina, 1999; Dietrich et al., 1999; Kocsy et al., 2001; Benavides-Mendoza, 2002). En otras palabras, el propio sistema de sealizacin y de regulacin de la adaptacin ambiental es potencialmente til para, en cierta forma, dirigir la respuesta de las plantas hacia los fenotipos que se consideran adecuados, es decir, a aquellos que tienen altos niveles de antioxidantes. Surge entonces la pregunta de si el incremento en la cantidad de antioxidantes traer consecuencias indeseables sobre los consumidores humanos o sobre la misma planta. A la fecha no se conocen efectos indeseables en los humanos asociados con un alto consumo de antioxidantes naturales. En cuanto a las plantas, la informacin actual sobre el cambio en el ttulo de antioxidantes totales, no indica que su aumento cause cambios negativos sobre el crecimiento, el desarrollo o la calidad de las plantas. Un tema diferente es el cambio del perfil particular de uno o ms de los antioxidantes de las plantas. En efecto, si los antioxidantes cumplen funciones como sealizadores o promotores de la actividad de ciertos genes, su presencia en mayor o menor concentracin podra cambiar el programa de desarrollo de la planta, lo que dara lugar a cambios fenotpicos diversos. Algo parecido ocurre en las semillas cuando se busca cambiar la calidad o composicin de las protenas que se almacenan en ellas. Surge el problema de que algunas protenas no se almacenan simplemente como fuente de N, sino que tienen papeles activos en la defensa o en la adaptacin al estrs (Wang et al., 2003). Algunos trabajos recientes parecen indicar que es posible manipular algunos factores del entorno de crecimiento de las plantas, de tal forma que se logre aumentar la capacidad antioxidante total, sin que este cambio se relacione con respuestas negativas en el crecimiento o desarrollo de las plantas. Ejemplo de ello es el uso de soluciones nutritivas con un aumento moderado en los niveles de salinidad, con el propsito de producir frutos de tomate con mayor cantidad de antioxidantes (De Pascale et al., 2001; DAmico et al., 2003; Sgherri et al., 2007). Otro ejemplo lo constituye el uso de pequeas cantidades de elementos traza como el selenio, la plata, etc. que al ser absorbidos por la planta, desencadenan una respuesta oxidativa que, a su vez, se traduce en un incremento en la cantidad total de antioxidantes en las plantas (Cabrera de la Fuente et al., 2006; Rosales-Velzquez et al., 2006). 22

Obviamente, un factor ambiental tan importante como la radiacin electromagntica, en sus componentes de calidad e irradiancia, cambiar la calidad nutricional de las plantas. En efecto, se sabe que Brassica juncea acumula diferentes perfiles de vitaminas si crece en ambientes con luz solar completa o con slo el 50%, resultante del uso de mallas sombra. La disminucin de la radiacin causa disminucin en el ascorbato (seguramente como resultado de la menor disponibilidad de glucosa) y aumento en los carotenoides y en la clorofila, sin modificar el cido flico (Lester, 2006). La respuesta anterior es un ajuste a la capacidad de captura de radiacin que da lugar a cambios en los componentes nutricionalmente importantes de las hojas. Otros efectos descritos en varias especies hortcolas son: el aumento de la concentracin de ascorbato al utilizar fuentes de luz enriquecidas en la banda del azul, el aumento en la cantidad de licopeno en tomate expuesto a radiacin enriquecida en el rojo y la respuesta contraria al enriquecer la radiacin con rojo lejano. Del mismo modo, la exposicin a la radiacin UV-B se asocia con la disminucin de la concentracin celular de ascorbato y carotenoides (Lester, 2006). Esta ltima respuesta seguramente resulta del aumento de la cantidad de radicales libres, resultado de la exposicin a este tipo de radiacin electromagntica. Las respuestas de las plantas a la radiacin electromagntica ocurren en un contexto de concentracin celular de elementos minerales relacionados con las reacciones redox de transferencia de electrones. En este sentido, el Fe, Zn, Cu, Mn, Ca y Mg son determinantes. En general, la mayor disponibilidad de minerales en la matriz de intercambio del suelo resultar en frutas y hortalizas con mayor concentracin de ascorbato, cido flico y carotenoides, a excepcin del nitrgeno cuya concentracin se asocia de forma negativa con la cido ascrbico (Lester, 2006). El cultivo en suelos arenosos dar lugar a frutas y hortalizas con menor cantidad de vitaminas (Lester y Crosby, 2002). Los elementos P, K, Mn, Cu, B y Zn presentan un efecto positivo sobre el ascorbato; los elementos N, K, Mg, Mn, Cu, B y Zn se correlacionan con valores ms altos de -caroteno. Por su parte, al disponerse de niveles adecuados de N, P y B, la concentracin de vitaminas del complejo aumenta (Lester, 2006). Algo parecido sucede con el pH del suelo, ya que este factor causa diferencias en la disponibilidad de nutrimentos minerales. Los extremos de pH disminuyen la concentracin de vitaminas: al aumentar el pH disminuye el ascorbato, mientras que los valores bajos de pH dan lugar a cosechas con escaso contenido de carotenoides (Lester, 2006). Un punto interesante a estudiar es si existe algn efecto sobre la calidad nutricional de los frutos cuando los elementos minerales se aportan en forma sinttica u orgnica. Los pocos estudios rigurosos que se han realizado, indican que existe una diferencia real y que el mayor contenido de vitaminas se obtiene con los fertilizantes orgnicos (Lester, 2006). Es posible que tal diferencia se encuentre en la mayor disponibilidad de elementos minerales al aportar diversos cidos orgnicos, hmicos y flvicos, as como por la conocida capacidad de la materia orgnica de disminuir el potencial redox del suelo y de aumentar la disponibilidad de metales.

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CONCLUSIONES Los antioxidantes naturales encontrados en las plantas responden a seales ambientales. Los factores ambientales mencionados son manipulables, en mayor o menor medida, en los sistemas de produccin comerciales, lo cual significa que se encuentra al alcance la posibilidad de mejorar la calidad nutritiva de los productos vegetales que consumimos, respecto al contenido de antioxidantes. Sin embargo, actualmente no existe un consenso en el sentido de que la mayor calidad nutricional implique mayor valor comercial, lo que hace difcil convencer a los productores de que eleven sus costos de manejo en campo para conseguir mayor cantidad de antioxidantes. Es necesaria una estrategia conjunta que abarque el manejo de los suelos, las variedades, el manejo del producto, el almacenamiento, la comercializacin y el consumo, para lograr que la poblacin aumente su ingesta de antioxidantes y vitaminas provenientes de fuentes naturales vegetales.

LITERATURA CITADA Allen, J.F., K. Alexciev, and G.H. Kansson. 1995. Regulation by redox signalling. Curr. Biol. 5:869-872. Beligni, M.V., and L. Lamattina. 1999. Nitric oxide protects against cellular damage produced by methylviologen herbicides in potato plants. Nitric Oxide 3:199-208. Benavides-Mendoza, A. (Compilador). 2002. Ecofisiologa y Bioqumica del Estrs en Plantas. Universidad Autnoma Agraria Antonio Narro, Departamento de Horticultura, Buenavista, Saltillo, Coah. Mxico. 287 pginas. Bloch, A. and C.A. Thomson. 1995. Position of the American dietetic association: phytochemicals and functional foods. J. Am. Dietet. Assoc. 95: 49396. Bohnert, H.J., and E. Sheveleva. 1998. Plant stress adaptations - making metabolism move. Curr. Opin. Plant Biol. 1:267-274. Cabrera-De la Fuente., M., A. Benavides-Mendoza, L.O. Fuentes-Lara, H. Ortega-Ortz, H. Ramrez, J.L. Rosales-Velzquez. 2006. Acumulacin de plata por semillas de sanda expuestas a diferentes concentraciones de nitrato de plata. Memoria del Simposio Internacional Alternativas para la Rehabilitacin de Suelos Contaminados con Metales Pesados y Metaloides. Colegio de Posgraduados y Universidad Autnoma Chapingo. Texcoco, Mxico. ISBN 970-92068-2-2. Cao, G., R.M. Russell, N. Lischner and R.L. Prior. 1998. Serum antioxidant capacity is increased by consumption of strawberries, spinach, red wine or vitamin C in elderly women. J. Nutr. 128:2383-2390. DAmico, M. L.; R. Izzo, F. Tognoni, A. Paradossi, F. Navari-Izzo. 2003. Sea water irrigation: antioxidants and quality of tomato berries (Lycopersicon esculentum Mill.). Acta Hortic. 609:59-65. De Pascale, S., A. Maggio, V. Fogliano, P. Ambrosino, A. Ritieni. 2001. Irrigation with saline water improves carotenoids content and antioxidant activity of tomato. J. Hortic. Sci. Biotechnol. 76:447-453. 24

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CARACTERIZACIN NUTRIMENTAL DE FRUTOS DE TOMATE HBRIDOS DE CULTIVARES COMERCIALES Y EXPERIMENTALES

J. Siller Cepeda, M.D. Muy Rangel, M. Bez-Saudo, L. ContrerasAngulo, R. Vlez de la Rocha, R. Contreras-Martnez
Centro de Investigacin en Alimentacin y Desarrollo A.C. Unidad Culiacn. Carretera a Eldorado km. 5.5 Campo El Diez, Culiacn, Sinaloa, CP 80110, Mxico

Correspondencia: jsiller@ciad.edu.mx

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RESUMEN En el estado de Sinaloa se evalan anualmente ms de 100 hbridos de tomate producidas por 22 compaas trasnacionales. Estos materiales experimentales son evaluados y comparados con los materiales comerciales para encontrar los de mayor rendimiento y productividad. A pesar de que los frutos de tomate son una fuente importante de vitamina C, potasio, cido flico, licopeno y -caroteno y de que numerosos estudios epidemiolgicos han demostrado la importancia de consumir este fruto para reducir la aparicin de enfermedades cardiovasculares y diversas formas de cncer, no existe informacin sobre el contenido nutrimental tanto de los materiales de tomate que se cultivan actualmente en Sinaloa, como de los nuevos hbridos en etapa experimental. El objetivo del presente trabajo consisti en caracterizar la calidad nutrimental de los frutos de tomate rojo maduro de cultivares comerciales y experimentales y determinar si existen diferencias en el contenido nutrimental de stas. Se seleccionaron frutos de tomate bola en estado de madurez comercial de 28 materiales hbridos, 14 de hbito de crecimiento determinado y 14 de indeterminado. Se evalu el contenido proximal (protenas, grasas, carbohidratos y minerales) utilizando la metodologa recomendada por el AOAC (1990). Se cuantificaron vitamina C y -caroteno por HPLC y licopeno por espectrofotometra. El mayor contenido de licopeno lo present la variedad Sharon con ms de 60 g/g. Las variedades con mayor contenido de Vitamina C fueron R-494, GVS-51993, XP-12302 y TX9960, las cuales presentaron alrededor de 16 mg/100g. Estas cantidades cubren el 26% de la ingesta diaria recomendada. Los minerales ms importantes en todas las variedades fueron calcio, fsforo y potasio. Se observaron diferencias marcadas entre variedades, principalmente en el contenido de minerales, vitamina C, licopeno y -caroteno. Los resultados obtenidos sern tiles a los productores para seleccionar los materiales a cultivar y comercializar en mercados que demandan productos con alto valor nutritivo.

Palabras Clave: Tomate, proximal, vitamina, licopeno, -caroteno

INTRODUCCIN La mayora de las exportaciones de hortalizas mexicanas son encaminadas a abastecer la demanda de los mercados estadounidenses y en menor proporcin los de Canad. Sin embargo, la bsqueda de nuevos mercados de exportacin ha dado en los ltimos aos resultados positivos hacia algunos pases de Europa y Japn. Estos acontecimientos han mostrado que para competir en esos mercados es necesario llegar con productos de excelente calidad que permitan sobresalir en estos mercados. Ante la globalizacin de los mercados, el contenido nutrimental es una herramienta que permitir continuar siendo competitivo en los mercados internacionales. La calidad nutrimental, definida por el contenido de nutrientes, vitaminas, minerales y antioxidantes tiene desde este punto de vista, un importante significado en la comercializacin, dado que su conocimiento impacta en las preferencias del consumidor y ayuda a conseguir un mejor precio. Aunado a esto, la evidencia clnica acumulada hasta el momento contina mostrando 28

que el contenido de algunos nutrientes del tomate esta asociado con un menor riesgo de desarrollar ciertas enfermedades crnicas y cncer, lo cual ha incrementado su consumo e inters por conocer su valor nutrimental. Esto demand, que un punto central en la investigacin fuera estudiar el contenido nutrimental de los frutos de tomate para determinar si existen diferencias entre variedades. Aquellos materiales que presenten frutos con alto valor nutrimental, podrn ser promocionados en el mercado con una calidad distintiva y llegar a ser ms competitivos.

MATERIALES Y MTODOS Se seleccionaron frutos de tomate bola en estado de madurez comercial de 28 materiales, 14 de hbito de crecimiento determinado y 14 de hbito de crecimiento indeterminado (Cuadro 1). Los frutos fueron cosechados en estado rojo maduro del campo experimental del INIFAP en Enero de 2004. Los materiales se seleccionaron en base a la informacin de rendimiento y calidad fsica y qumica generada en el ciclo pasado por Valenzuela (2003) y Siller et al. (2003). Una vez cosechados los frutos se trasladaron a los laboratorios del CIAD Unidad Culiacn donde fueron seleccionados para obtener homogeneidad en el tamao, forma, color y en cuanto a que estuvieran libres de defectos, plagas y enfermedades. El diseo experimental fue en 2 bloques (hbito de crecimiento) y un factor totalmente al azar con 14 niveles (variedad). Los anlisis se hicieron por triplicado. Para el anlisis de varianza se utiliz el paquete estadstico MINITAB 13.1. En los casos donde se encontraron diferencias significativas se emple la prueba de Tukey para la comparacin de medias, con un nivel de confianza del 95%.

Anlisis proximal y de minerales. El anlisis de la composicin nutrimental de los frutos de tomate se realiz de acuerdo a las tcnicas recomendadas por el AOAC (1990). Las determinaciones realizadas fueron contenido de humedad (920.39), protena (988.05), grasas, (920.39), fibra (962.09) y cenizas (942.05). El porcentaje de carbohidratos se determin por diferencia, substrayendo del contenido de humedad el resto de los componentes. Se cuantificaron los minerales siguiendo la metodologa oficial No. 955.06 del AOAC (1990). Despus de la digestin cida de las cenizas, la muestra se filtr y se llev a 100 ml con agua deionizada. Se utiliz un espectrofotmetro de absorcin atmica Varian Mod. AA220 para medir la absorbancia a la longitud de onda especfica para cada mineral: Ca (422.7nm), Na (589.6nm), K (769.9nm), Mg (285.2nm), Mn (279.5nm), Fe (248.3nm), Cu (324.7nm) y Zn (213.9nm). Para cada mineral se construy una curva de calibracin con estndares de referencia de concentracin conocida.

Vitamina C. La extraccin se llev a cabo tomando 10 g de muestra homogenizada con 40

ml de agua HPLC filtrada y fra. La mezcla fue homogenizada usando una licuadora convencional Osterizer a velocidad media por 2 minutos. La mezcla fue filtrada a travs de una malla de organza y posteriormente con papel filtro Whatman No. 41, el sobrenadante clarificado se hizo pasar por un cartucho Sep-Pak C18. Del extracto obtenido se tom una alcuota de 1 ml a la cual se le adicion 1 mg de Dithiothreitol, se mantuvo en reposo por 2 horas en la oscuridad, y se filtr finalmente a travs de una membrana de Nylon de 0.45 m 29

de tamao de poro, para inyectase al sistema cromatogrfico. Se utiliz un cromatgrafo de lquidos Varian equipado con una bomba terciaria ProStar 230 y un detector de arreglo de diodos ProStar330. Se emple una columna Varian C18 de 5 m 150 X 4.60 mm, operada a temperatura ambiente y un inyector con capacidad de 20 l. La fase mvil fue KH2PO4 0.2 M y un flujo de 0.5 ml/min. La deteccin se determin a una longitud de onda de 254 nm aunque se registr el espectro de absorbancia en el rango de 200 a 400 nm. Para el anlisis de resultados se construy una curva de calibracin (R = 99.7%) con soluciones de estndar de cido ascrbico (Sigma-Aldrich) de concentraciones conocidas 0, 10, 20, 30, 40, 50, 60 y 70 ppm (Gkmen et al., 2000). -caroteno. Se utiliz la tcnica descrita por Bushway y Wilson (1982). Cinco g de muestra homogenizada se mezcl con 5 g de Na2SO4 y 0.5 g de MgCO3 y se someti a tres extracciones sucesivas con 30 ml de una mezcla de metanol-tetrahidrofurano 50:50 con 0.01% de BHT. Utilizando un homogenizador de tejidos Ultra Turrax T25 y filtrando a vaco entre cada extraccin; los tres filtrados se colocaron en un matraz volumtrico de 100 ml y se utiliz la misma mezcla extractora para aforar. Se tom una porcin de esta solucin y se hizo pasar por una membrana de Nylon de 0.45 m de poro y 25 mm de dimetro. El equipo cromatogrfico y la columna fueron los mismos que para vitamina C, la diferencia fue que se utiliz como fase mvil una mezcla de Acetonitrilo:Metanol:Tetrahidrofurano en proporcin 53:35:7, con una velocidad de flujo de 1.5 ml/min. La deteccin se realiz a 460 nm y la cuantificacin mediante una curva de calibracin (R= 98.5%) construida con soluciones de concentracin conocida de un estndar de -caroteno (Sigma-Aldrich). Licopeno. El licopeno se cuantific por medio de la tcnica espectrofotomtrica recomendada por LycoRed (1995). La muestra se homogeniz y se tomaron 1.25 g dentro de un tubo para centrfuga, se adicionaron 25 ml de mezcla extractora (ter de petrleo:etanol:acetona 50:25:25 con 0.5 g/L de BHT). Se centrifugaron los tubos a 10000 rpm por 16 min, se adicionaron 6.25 ml de agua destilada fra y se centrifugo por 6 min ms. Se dej en reposo para la separacin de fases. En un matraz volumtrico se colocaron 5 ml de la fase superior del tubo y 13 ml de una solucin de BHT al 0.4% en ter, finalmente se llev el volumen hasta el aforo con ter de petrleo. Inmediatamente se midi la absorbancia en un espectrofotmetro UV-Vis Cary 1E Varian a una longitud de onda de 472 nm. Los resultados se calcularon considerando un coeficiente de extincin molar de 3 450. Todo el proceso se llev a cabo a baja temperatura y al abrigo de la luz blanca.

RESULTADOS Y DISCUSIN Antes de discutir los resultados es necesario resaltar que la variedad comercial con hbito de crecimiento determinado es la R-494, mientras que para las variedades con hbito de crecimiento indeterminado fueron las variedades comerciales Attention y Gironda. Anlisis Proximal. En el Cuadro 2 y Cuadro 3 se presentan los valores promedio del porcentaje de cada uno de los componentes de los frutos de hbito de crecimiento determinado e indeterminado respectivamente. Aunque los valores para cada variedad son muy cercanos entre s, se presentaron diferencias significativas en cuanto al contenido de 30

protena y grasa entre algunas variedades; sin embargo, el aporte por racin de stos componentes no es muy importante, por lo que no se sealan. La utilidad de estos resultados se debe a que con ellos se elabor la etiqueta nutrimental de cada una de las variedades estudiadas (datos no mostrados). Vitamina C. En la Figura 1a se presentan los valores del contenido de Vitamina C (cido ascrbico) en frutos de tomate de hbito determinado. Las variedades con mayor contenido de Vitamina C fueron R-494, GVS-51993, XP-12302 y TX-9960, presentando entre 14 y 17.2 mg/100 g, estas cantidades cubren entre el 23 y 28 % de la ingesta diaria recomendada de vitamina C en Mxico (NOM-051-SCFI-1994). Aunque la variedad comercial result con el mayor contenido de vitamina C, no present diferencias significativas (p<0.05) con las otras 3 variedades experimentales. Por otro lado, los frutos con menor contenido de vitamina C fueron los de las variedades L-219 y HMX-3824, las cuales presentaron diferencias significativas con respecto a las variedades de mayores niveles de esta vitamina. En la Figura 1b se ilustran los resultados de vitamina C en frutos de tomate de hbito de crecimiento indeterminado. Los frutos con la mayor cantidad de esta vitamina fueron los de la variedad Miramar con 18 mg/100g, Gironda (comercial), CLX 37125 y GVS 1025 tambin presentaron valores similares. Con base en esos resultados, estas variedades experimentales pueden ser elegidas como altas en vitamina C, ya que una porcin de 100 g de estos frutos cubren entre el 25 y 30% del requerimiento diario (NOM-051-SCFI-1994). Aunque la variedad Atenttion es comercial, no present niveles de vitamina C importantes, al igual que los frutos de las variedades Charleston, Badro y GC-42031 que slo alcanzaron niveles entre 10 y 12 mg/100g. Algunos autores reportan en promedio 20 mg/100g de vitamina C para los distintos tipos de tomate, siendo los de tipo cherry los ms ricos en esta vitamina. Los valores encontrados en este estudio coinciden con otros autores los cuales reportan distintas cantidades en un rango de 12.5 hasta 24 mg/100g (Schewfelt, 1986; Lee y Kader, 2000; Binoy et al., 2004). Licopeno. En la Figura 2a se muestran los resultados del contenido de licopeno de los frutos de tomate de las diferentes variedades evaluadas. Existen diferencias marcadas entre variedades, sobresaliendo por su mayor contenido de licopeno la variedad Sharon con ms de 60 /g, seguida por la variedad GVS-51992, Soraya y TX-99960. Las variedades con menor contenido de licopeno fueron la GVS-51993 y la PR-461, sobrepasando apenas los 30 g/g. En este grupo se encontr la variedad comercial R-494 con 35 g/g. El mayor contenido de licopeno de las variedades experimentales mencionadas se puede explotar como una mejor caracterstica de comercializacin. Con respecto a los resultados de licopeno en frutos de tomate indeterminado (Figura 2b), los ms altos niveles los present la variedad FA-1912 con cerca de 50 g/g; pero en general todas las variedades presentaron valores cercanos a 40 g/g, slo la GVS-51994 alcanz apenas los 30 g/g. En comparacin con los frutos de hbito determinado, todas las variedades de tomate indeterminado mostraron un menor contenido de licopeno. El contenido de licopeno para tomate rojo maduro vara entre 30 y 77.4 g/g, segn lo que se ha reportado en otros estudios. Los frutos de las variedades evaluadas se encuentran en el promedio de stos valores (Gross, 1991; USDA, 1998; Nguyen y Schwartz, 1999). Beta-caroteno. El -caroteno es el pigmento carotenoide con mayor actividad como provitamina A, por lo que es muy importante para la dieta humana. Los frutos de tomate 31

evaluados en ste trabajo presentaron cantidades importantes de ste pigmento. Los resultados se ilustran en la Figura 3a; en donde sobresalen por su mayor contenido de caroteno los frutos de la variedad HMX-3824 con 2.7 g/g, siendo sta diferente estadsticamente, aunque los frutos de las dems variedades alcanzaron valores de caroteno entre 2.3 y 2.5 g/g. Los frutos de hbito de crecimiento indeterminado se comportaron de manera muy similar, ya que todas las variedades tuvieron niveles de -caroteno alrededor de 2.5 g/g (Figura 3b). El contenido de -caroteno de ambos grupos de frutos es muy similar y concuerda con lo reportado en la literatura, con valores para tomate entre 1.7 y 5.6 g/g (Azcon-Bieto y Talon, 1993; Tanamachi, 2002).

CONCLUSIONES La informacin generada en este estudio permite clasificar en rangos las distintas variedades en funcin de sus caractersticas nutrimentales. Esta informacin puede ser explotada para promocionar su valor nutracutico en la comercializacin. Las caractersticas que principalmente pueden resaltarse incluyen los contenidos de vitamina C, licopeno y caroteno. El anlisis proximal y de minerales realizado marca pequeas diferencias entre variedades y es til para identificar cada variedad con su etiqueta nutrimental y cubrir as en un futuro inmediato los nuevos requisitos exigidos en los mercados internacionales.

LITERATURA CITADA AOAC, 1990. Official Methods of Analysis. 15th Edition Asociation of Official Analytical Chemists. AOAC International. Washington, D. C., USA. Azcon-Bieto, J., Talon, M., 1993. Fisiologa y bioqumica vegetal. Ed. InteramericanaMcGraw-Hill. Espaa. Binoy, G., Kaur, C., Khurdiya, D. S., Kapoor, H. C., 2004. Antioxidants in tomato (Lycopersicum esculentum) as a function of genotype. Food Chemistry 84:45-51. Bushway, R. J., Wilson, A. M., 1982. Determination of y -carotene in fruit and vegetables by high performance liquid chromatography. Can. Inst. Food Sci. Technol. 15(1) 165-168. Gkmen, V., Kahraman, N., Demir, N., Acar, J., 2000. Enzimatically validated liquid chromatograpic method for the determination of ascorbic and dehydroascorbic acids in fruits and vegetables. J. of Chromatography A, 881 309-316. Gross, J., 1991. Pigments in vegetables. Chlorophylls and Carotenoids. Avi Book. NY, USA.

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Cuadro 1. Materiales de tomate bola evaluados y compaa proveedora de semillas. V COMPAA DETERMINADOS INDETERMINADOS COMPAA

Golden Valley Golden Valley LSL Biotechnologies LSL Biotechnologies LSL Biotechnologies Zeraim Gedera Seminis Seminis H - Test Sakata Harris Moran Harris Moran Syngenta Syngenta

GVS-51993 GVS-51992 R-449N

GVS-1025 GVS-51994 FA-1912

Golden Valley Golden Valley Zeraim Gedera Zeraim Gedera Seminis Seminis Enza Zaden Enza Zaden Syngenta Syngenta Syngenta Enza Zaden Enza Zaiden Harris Moran

R-494*

TROFEO

L-219* SHARON XP-12302 PR-461 H-116 XTM-0225 HMX-3824 TX-99960 SORAYA SEBRING

PS-151052 MIRAMAR ATTENTION* GIRONDA* GC-42031 ZUNI CHARLESTON BADRO CAIMAN CLX-37125

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Cuadro 2. Composicin Proximal de Frutos de Tomate de Diferentes Materiales Hbridos de Hbito de Crecimiento Determinado.

HUMEDAD PROTEINA GRASA VARIEDAD % GVS-51993 94.70 GVS-51992 95.36 R-449N R-494 L-219 SHARON XP-12302 PR-461 H-116 XTM-0225 HMX-3824 TX-99960 SORAYA SEBRING 94.63 95.10 94.62 95.36 94.65 94.85 95.60 94.70 94.69 95.17 95.15 94.96 % 0.82 0.73 0.87 0.68 0.96 0.69 0.91 0.86 0.73 0.85 0.84 0.84 0.80 0.78 % 0.04 0.03 0.05 0.01 0.03 0.02 0.03 0.04 0.03 0.02 0.03 0.03 0.03 0.01

CENIZAS FIBRA % 0.51 0.55 0.61 0.47 0.59 0.50 0.51 0.53 0.49 0.58 0.54 0.60 0.49 0.50 % 0.91 0.35 0.57 0.69 0.74 0.72 0.79 0.74 0.72 0.70 0.65 0.72 0.73 0.60

CARBOHIDRATOS % 3.02 2.98 3.27 3.05 3.05 2.70 3.11 2.97 2.43 3.15 3.26 2.63 2.80 3.15

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Cuadro 3. Composicin Proximal de Frutos de Tomate de Diferentes Materiales Hbridos de Hbito de Crecimiento Indeterminado. HUMEDAD VARIEDAD % GVS-1025 GVS-51994 FA-1912 TROFEO PS-151050 MIRAMAR ATTENTION GIRONDA GC-42031 ZUNI 95.04 96.20 95.52 94.37 95.48 95.08 94.67 94.40 94.97 95.20 % 0.58 0.43 0.46 0.59 0.52 0.53 0.60 0.61 0.53 0.54 0.50 0.59 0.52 0.48 % 0.02 0.01 0.02 0.04 0.02 0.04 0.03 0.02 0.02 0.03 0.03 0.03 0.02 0.02 % 0.47 0 .3 4 0.59 0.82 0.52 0.65 1 .6 5 0.73 0.59 0.55 0.72 0.63 0.60 0.51 % 0.94 0 .5 6 0.69 0 .9 1 0.91 0.99 0.94 1 .0 2 0.82 0.87 0.81 0.93 0.67 0.75 % 2.94 2.44 3 .7 2 3.26 2.55 2.71 2 .1 1 3.22 3.07 2.81 2.94 3.06 2.77 2.96 PROTEINA GRASA CENIZAS FIBRA CARBOHIDRATOS

CHARLESTON94.98 BADRO CAIMAN CLX-37125 94.75 95.42 95.27

36

a)

b)
Contenido de Vitamina C (mg/100g)

Contenido de Vitamina C (mg/100g)

10.0

12.0

14.0

16.0

18.0

20.0

0.0

2.0

4.0

6.0

8.0

10

12

14

16

18

20

GVS-1025
GVS-51992 R-449N R-494 L-219 SHARON XP-12302 PR-461 H-116 XTM-0225 HMX-3824 TX-99960 SORAYA SEBRING

GVS-51994

FA-1912

TROFEO

PS-151052

MIRAMAR

ATTENTION

GIRONDA

GC-42031

ZUNI

CHARLESTON

BADRO

CAIMAN

Figura 1. Contenido de Vitamina C en Frutos de Tomate de Diferentes Materiales Hbridos. a) hbito de crecimiento determinado; b) hbito de crecimiento indeterminado

CLX-37125

0
GVS-51993

37

a)

b)

Contenido de Licopeno ( g/g)

Contenido de Licopeno ( g/g)

10
10 20 30 40 50 60 0

20

30

40

50

60

G VS-1025

G VS-51994

FA-1912

TRO FEO

PS-151052

MIRAMAR

ATTENTIO N

G IRO NDA

GC-42031

ZUNI

CHARLESTON

BADRO

CAIMAN

Figura 2. Contenido de Licopeno en Frutos de Tomate de Diferentes Materiales Hbridos. a) hbito de crecimiento determinado; b) hbito de crecimiento indeterminado

CLX-37125

0
GVS-51993 GVS-51992 R-449N R-494 L-219 SHARON XP-12302 PR-461 H-116 XTM-0225 HMX-3824 TX-99960 SORAYA SEBRING

38

b) a)
Contenido de -caroteno ( g/g)

Contenido de -caroteno (g/g) 0.5 1 2 3 1.5 2.5 0

3

0.5 1 2
GVS-51993 GVS-51992 R-449N R-494 L-219 SHARON XP-12302 PR-461 H-116 XTM-0225 HMX-3824 TX-99960 SORAYA SEBRING

1.5

2.5

GVS-1025

GVS-51994

FA-1912

TROFEO

PS-151052

MIRAMAR

ATTENTION

GIRONDA

GC-42031

ZUNI

CHARLESTON

BADRO

CAIMAN

Figura 3. Contenido de -caroteno en Frutos de Tomate de Diferentes Materiales Hbridos. a) hbito de crecimiento determinado; b) hbito de crecimiento indeterminado

CLX-37125

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EFECTO DE LA NUTRICIN VEGETAL EN RENDIMIENTO Y VIDA POSCOSECHA EN HORTALIZAS

Maritza Arellano Gil y Marco Antonio Gutirrez Coronado*

Fisiologa de Cultivos. Instituto Tecnolgico de Sonora

*Correspondencia: totono@itson.mx

40

RESUMEN
La produccin de hortalizas en el sur de Sonora, se ha incrementado de manera significativa en los ltimos quince aos, de manejarse un rea de alrededor de 800 ha a mas de 15 mil ha a la fecha, sobresaliendo en la diversidad de cultivos, los miembros de las solanceas, tales como el chile, el tomate y la papa y de las cucurbitceas, la sanda, calabacita, meln y pepino, adems de reas constantes de cebollas, brcoli y esprrago entre otras, liderando en reas de produccin chile, papa y sanda a nivel Valle del Yaqui, Sonora. Dentro de los factores de produccin que inciden en el manejo de hortalizas en el sur de Sonora, la nutricin vegetal y uso de fertilizantes juega un papel decisivo, sobre todo en el orden de las relaciones entre los nutrimentos, el abuso de alguno de ellos, el desabasto de otros y la influencia directa dentro de la fisiologa y bioqumica poscosecha de los diversos productos que se obtienen de ellas. Ya que al alterar en cualquier momento del desarrollo de este tipo de cultivos, la cual es muy breve, sobre todo el perodo de emergencia a primeros frutos, el aporte de nutrimentos debe ser de manera rpida y segura, cuidando estn los que se necesiten en cada fase de su crecimiento, dentro de estos tenemos al nitrgeno, fsforo, potasio, calcio, magnesio, fierro, cobre, zinc entre otros. Palabras claves: Fertilizantes, relaciones nutrimentales, produccin, calidad

NUTRICIN VEGETAL La nutricin vegetal estudia y concilia las demandas nutrimentales y propiedades del medio con mtodos de mejoramiento en nutricin, su objetivo primordial, es analizar los factores y procesos involucrados en la nutricin de los cultivos en relacin con la produccin en cantidad y en calidad, sin afectar el ambiente y cuidando una buena relacin costo beneficio; esto comprende aspectos fisiolgicos, ecolgicos y bioqumicos. La fertilizacin como parte de la nutricin vegetal tiene como fin el lograr que la alimentacin de la planta satisfaga las expectativas de su cultivo, se le considera como el factor de produccin ms importante despus de la disponibilidad de agua y que junto con la temperatura y las propiedades fisicoqumicas del suelo son los factores primarios que determinan la productividad de stas (Gutirrez, 1995; Uvalle y Osorio, 1998).

Diagnstico nutrimental. La prctica actual de decidir sobre la dosis de fertilizacin, muchas veces se basa en amplias experiencias locales, lo cual ha sido til para obtener rendimientos aceptables, pero a veces no llega a ser efectiva ni econmica. Los suelos difieren ampliamente en su capacidad de suministro, lo cual depende de su reserva total, movilizacin y/o dinmica de fijacin, accesibilidad de la raz a algn nutrimento, o cuando uno o varios elementos se encuentran en cantidades excesivas (niveles txicos); por lo anterior, es necesario utilizar diferentes mtodos de diagnstico en suelos y plantas, que sean una herramienta efectiva para hacer un uso ms adecuado de los fertilizantes; el diagnstico nutrimental tiene como finalidad predecir la deficiencia de un elemento dado y adquiere su mayor valor cuando se emplea en forma preventiva, ya que la aparicin de un problema nutricional significa una disminucin en el rendimiento (Etchevers, 1987; Alcntar y Sandoval, 1999). 41

Los diferentes tipos de anlisis que se pueden utilizar para llevar a cabo un diagnstico nutrimental son: sintomatologa visual, anlisis de suelo, de salinidad, de fertilidad, de extracto de pasta saturada y anlisis vegetal (Grageda, 1999). El anlisis de extracto de pasta nos indica la concentracin de iones de elementos nutritivos disponibles en el suelo, que nos ayuda en el ajuste de la solucin nutritiva que se est utilizando (Burgueo, 1997). El anlisis vegetal denominado tambin anlisis foliar de tejidos vegetales anlisis mineral de plantas, se ha convertido en una gran herramienta para identificar y/o confirmar desrdenes nutricionales, ya que correlaciona el contenido de un nutrimento dado, con la apariencia de la planta, rendimiento y/o calidad del producto cosechado. Su objetivo principal es detectar con oportunidad el status de algn elemento con el fin de hacer las correcciones pertinentes al programa inicial de fertilizacin (Grageda, 1999; Castellanos et al., 2000). En los Cuadros 1 y 2 se indica una gua de niveles crticos de concentracin en los principales macro y micronutrimentos en tomate y para cultivos en general. An cuando el objetivo principal del anlisis vegetal es diagnosticar anomalas nutrimentales, tambin sirve para ratificar un diagnstico de sntomas visuales a travs del estudio de la movilidad de los nutrimentos, variaciones en forma, color, hbito y estado general de la planta sin olvidar los factores suelo, clima, manejo e incidencia de plagas y enfermedades; identifica deficiencias latentes en cultivos que aunque no presentan ninguna anomala visual, sus rendimientos son bajos y su calidad deficiente; proporciona evidencia de que los nutrimentos aplicados como correctivos han sido absorbidos por la planta; provee una idea clara de la absorcin y acumulacin de algunos nutrimentos que ayudan a interpretar los resultados de la experimentacin agrcola; adems de reconocer una anomala, ayuda en la identificacin de las causas; al analizar diferentes rganos u organelos celulares, colabora en el entendimiento de los mecanismos de acumulacin y movimiento de nutrimentos, as como su participacin en diversos procesos fisiolgicos de los cultivos; por ltimo, identifica deficiencias cuando se presentan por efectos antagnicos o competencias nutrimentales no especficas, tal es el caso de la deficiencia de fierro inducida por una absorcin excesiva de manganeso, la alta fertilizacin con fsforo que suele afectar la absorcin de zinc o bien cuando la asimilacin de potasio se ve restringida por una aplicacin de altas cantidades de hidrxido de sodio (Alcntar y Sandoval, 1999; Castellanos et al., 2000; Salisbury y Ross, 2000).

42

Cuadro 1. Tabla de valores para interpretacin del anlisis vegetal en tomate en la etapa de floracin. CULTIVO ELEMENTO N P K Ca Mg Tomate B Cu Fe Mn Zn Benton et al., 1991. 23-24 3-4 50-59 40-49 18-19 BAJO 1.50-1.79 0.16-0.17 3.00-3.49 1.20-1.49 0.28-0.32 SUFICIENTE % 1.80-2.5 0.18-0.6 3.50-6.0 1.50-2.5 0.33-0.9 ppm 25-75 5-50 60-300 50-250 20-250 >75 >50 >300 >250 >250 ALTO >2.5 >0.7 >6.0 >2.5 >0.9

Cuadro 2. Niveles crticos de micronutrimentos (ppm) en el anlisis vegetal para cultivos en general. MICRONUTRIMENTO Boro Cobre Fierro Manganeso Molibdeno Zinc DEFICIENTE <15 <4 <50 <20 <0.1 <20 SUFICIENTE 20 - 100 5 - 20 50 - 250 20 - 500 0.5 - ? 25 150 TOXICO >200 >20 no conocido >500 no conocido >400

(Jones, 1983 citado por Grageda, 1999). 43

Relaciones nutrimentales. Uno de los aspectos ms importantes a considerar en la interpretacin de resultados del anlisis vegetal, se refiere a las relaciones nutrimentales, pues es comn que se presenten sntomas de deficiencia de algn nutrimento por un desbalance, en cuanto a su concentracin relativa con los dems. Esta relacin es importante, tanto en el sustrato donde crecen las plantas (suelo o soluciones nutritivas) como dentro de la planta misma, ya que muchas veces altas concentraciones de algn elemento pueden reducir la porcin absorbida de otro causando as una deficiencia de forma indirecta o inducida (Fageria et al., 1997; Alcntar y Sandoval, 1999). Por lo anterior, son frecuentes las interpretaciones errneas cuando se evala solamente la concentracin de un nutrimento, sin considerar su balance con otros que puedan ser antagnicos entre s. Por ejemplo una alta relacin entre Mn/Fe en el medio nutritivo favorece la deficiencia de fierro; esto indica que si, por ejemplo en manzana el anlisis foliar nos reporta una concentracin de 150 ppm de fierro, no podemos con ste ltimo dato inferir si el cultivo est, o no, bien abastecido, ya que la suficiencia de fierro estar determinada, en parte por la concentracin de Mn; as el fierro ser suficiente adecuado si el rango de Mn oscila entre 60 y 80 ppm, pero si el nivel de ste se encuentra entre 100 y 200 ppm, es de esperarse competencia de Mn en algunos sitios activos de fierro. Finalmente si al manganeso tiene valores arriba de 250 ppm, es casi seguro que el exceso de ste lmite de forma significativa la absorcin y actividad del fierro. Tanto en ste caso especfico, como en otros balances nutrimentales, adems de considerar la relacin Mn/Fe, habrn de considerarse los aspectos antes descritos para la interpretacin del anlisis. De igual manera es muy importante considerar algunas otras interacciones que pueden originar desbalances entre pares inicos: Zn/P, Zn/N, Cu/P, Fe/P, Mo/S, B/Ca, Zn/Fe, Fe/Mo, Cu/Fe, Cu/Mo, Cu/Zn, Ca/Mg, K/Mg, y K/Ca (Mortvedt et al., 1972; Fageria, 2001). Grageda (1999), seala que los resultados del anlisis de suelo generan valores en los nutrimentos que es conveniente relacionar, debido a que actan muy ligados entre s, y pueden llegar a competir por sitios de intercambio en el suelo, lo cual define fuertemente su disponibilidad y su desbalance influir en la decisin de aplicar o no algn nutrimento. En general para calcio es conveniente que el anlisis de suelo arroje valores equivalentes al 6585% de la capacidad de intercambio catinico (CIC) y para magnesio que ocupe el 10-15% y que la relacin Ca/Mg no sea menor a 2 ni mayor que 20 porque podran ocurrir deficiencias. La relacin de potasio y magnesio (K2O/MgO) se aconseja que sea de 1, si supera 4 hay riesgos de carencia inducida de magnesio (Burgueo, 1997; Fageria et al., 1997; Grajeda, 1999). La interaccin entre nutrientes en las plantas cultivadas ocurre cuando al abastecimiento de uno de los nutrientes afecta la absorcin y utilizacin de otros nutrientes, este tipo de interaccin es muy comn cuando un nutriente tiene un exceso de concentracin en el medio de cultivo y pueden ocurrir en la superficie de la raz o dentro de la planta. Las interacciones pueden ser clasificadas en dos categoras principales; en la primera estn los precipitados o complejos que ocurren entre iones por su capacidad de formar vnculos qumicos; y la segunda es entre iones con propiedades tan similares que compiten por el sitio de adsorcin, absorcin, transporte y funcin en la raz de las plantas o dentro de sus tejidos; ste ltimo tipo de interaccin es frecuente entre nutrientes de similar tamao, carga, geometra de coordinacin y configuracin electrnica, y ocurre comnmente entre Ca2+, Mg2+, K+, y Na+. (Benton et al., 1991; Fageria, 2001; Marschner, 2003). 44

Los balances adecuados entre nutrimentos varan con la etapa fenolgica de la planta; as lo que fue ptimo para el desarrollo de la plntula puede no serlo ya para el desarrollo y cuajado de fruto, de ah la importancia de conocer los equilibrios crticos para cada etapa fenolgica (Uvalle y Osorio, 1998; Grageda, 1999). Las relaciones entre nutrimentos pueden ser positivas o negativas o bien que no haya interaccin. Cuando la respuesta del cultivo a la combinacin de nutrientes es ms grande que la suma de sus efectos individuales, la interaccin es positiva; cuando el efecto de la combinacin es ms pequeo, la interaccin es negativa; en el primer caso los nutrientes presentan sinergismo y en el ltimo caso es antagonismo. Si no hay diferencia de la respuesta en la combinacin con respecto a su aplicacin separadamente, hay ausencia de interaccin. En la mayora de los experimentos de nutricin en plantas es estudiado el efecto de un solo nutriente en el crecimiento de las plantas, sin embargo las investigaciones que analizan el efecto de ms de un nutriente en el mismo experimento son limitadas; bajo sta situacin, las interacciones entre los nutrientes pueden ser identificadas tomando en consideracin los efectos de incrementar concentraciones de nutrientes en la toma o absorcin de otro nutriente y su correspondiente respuesta del cultivo (Benton et al., 1991; Fageria et al., 1997; Fageria, 2001). La importancia de las interacciones nutrimentales en la produccin de cultivos, es un reflejo indirecto de su contribucin al rendimiento, investigaciones al respecto muestran que los ms altos rendimientos han sido obtenidos donde los nutrientes y otros factores del crecimiento estn favorablemente balanceados, cuando uno se aleja de ese estado los antagonismos se reflejan en reduccin del rendimiento. Las interacciones antagnicas y sinrgicas estn determinadas por el nivel de cada nutriente en el suelo y la especie de la planta y algunas veces entre cultivares de la misma especie, en suma, la fsica, qumica y las propiedades biolgicas del suelo tambin cambian los patrones de las interacciones de nutrientes en las plantas. El mejor entendimiento de sas propiedades del suelo nos puede conducir a reducir las interacciones negativas y a hacer ms eficiente la produccin de los cultivos. Aunque han sido reportados muchos estudios, las interacciones no estn completamente caracterizadas. Las interacciones entre macro y micro nutrientes necesitan mas estudio y caracterizacin, especialmente bajo condiciones de campo (Salisbury y Ross, 2000; Fageria, 2001; Marschner, 2003). Mortvedt et al., (1972), hacen nfasis en la compleja naturaleza de las relaciones entre crecimiento de la planta, la concentracin de nutrimentos en solucin y la concentracin de los mismos dentro de la planta; el crecimiento depende de varios factores que interactan entre s, tales como: el abastecimiento de nutrimentos, el rango de absorcin de los nutrimentos, la distribucin de stos hacia sitios funcionales y la movilidad de los mismos. Grandes progresos se han logrado a ste respecto, principalmente en lo relativo a los problemas en los puntos de conexin entre factores interactuantes. Los futuros enfoques de la nutricin vegetal probablemente estarn dirigidos a dilucidar los mecanismos de las relaciones entre micronutrimentos a nivel celular y molecular. Por ejemplo existe la necesidad de identificar los sitios de la planta en donde el fierro y el zinc son metablicamente activos y donde las concentraciones excesivas de fsforo pueden interferir con la mxima actividad de sos nutrimentos. Por sta razn, un simple anlisis de fierro y zinc, en hojas, tallos y races, probablemente no ser suficiente para interpretar sus interacciones con fsforo (Alcntar y Sandoval, 1999; Castellanos et al., 2000). 45

El metabolismo del nitrgeno en las plantas requiere un contenido adecuado de potasio en el citoplasma, sin embargo la influencia de NH4+ en la solucin nutritiva y la toma de potasio por la planta es controversial, bajo este contexto se llev a cabo un estudio para identificar el efecto de la forma del nitrgeno en la toma de potasio en chile bell pepper; se evaluaron cuatro proporciones de NH4+ - N a NO3- -N: 0:6, 0.9:5.1, 1.8:4.2, y 3:3, y se concluy que cuando NH4+ - N ocupa entre el 15 a 30% del total del nitrgeno en la solucin nutriente, el rendimiento total del fruto se incrementa, junto con la eficiencia de la fertilizacin de potasio en bell pepper (Gohua, 2002). La aparicin de necrosis apical o blossom-end rot (BER) en tomate est relacionada con una disminucin en la absorcin y translocacin del Ca debida, no solo a las condiciones ambientales, sino tambin a su interaccin con el potasio, nitrgeno, fsforo y boro contenidos en la membrana permeable de la clula y en la estructura de la pared celular, esto se pone de manifiesto cuando el BER se presenta incluso cuando se aportan las necesidades totales de Ca2+, debido a la limitada capacidad de las plantas para regular su distribucin interna, fundamentalmente hacia los rganos de baja transpiracin y rpido crecimiento, como los frutos, esto puede ser potenciado por la inhibicin de la absorcin del Ca en presencia de una elevada concentracin de Mg (Zhu and Shu, 1991; Willumsen et al., 1996; Sams and Conway, 2003). La relacin existente entre la absorcin de Ca2+ y de agua por parte de la planta, tiene gran influencia en la nutricin de las plantas; en tomate, al aumentar la presin de vapor en la atmsfera, disminuye el flujo de transpiracin, y por ende, la absorcin de Ca2+, si adems se presenta una relacin Ca2+ : (K+ + Mg2+ + NH4+) baja, es decir menor de 40 : 60 es muy probable que se manifiesten algunos problemas fisiolgicos derivados de un desbalance nutrimental, como es el caso de la pudricin apical. Con base en la demanda de cationes por parte de la planta de tomate, Lara (1999), expresa dicha relacin, en porcentaje de mol cm-3, y menciona que sta disminuye al pasar de una etapa fenolgica a otra, en la etapa vegetativa el mayor desarrollo se present con la relacin 42 : 58, al pasar a la etapa reproductiva esta relacin cambi a 35 : 65, y en la etapa de desarrollo de fruto la relacin que proyect un incremento en el desarrollo de la planta fue 28:72. Extraccin de nutrientes. Las hortalizas son generalmente de crecimiento rpido y produccin intensiva, adems, las exigencias de calidad (tamao, color, textura, firmeza, sabor, etc.), son mayores, por lo que tienen una demanda intensiva de la mayora de los nutrimentos en un perodo muy corto de tiempo, ya que la mayora de las especies hortcolas son de ciclo corto, completando su ciclo productivo entre 8 y 16 semanas. El estado nutricional de ellas est relacionado con el rendimiento y calidad de la cosecha y se ve afectado, por diversos factores como las propiedades fsicas y qumicas del suelo, la fertilizacin aplicada, la precipitacin y el riego, la demanda per se del cultivo y sus interacciones con otros factores presentes en el suelo (Grageda, 1999; Maroto, 1992). Conocer la cantidad ptima de un nutrimento de inters consumido diariamente durante la estacin de desarrollo de un cultivo, que resulte en un rendimiento ptimo y de calidad, permitira definir la cantidad mnima de este nutrimento por aplicar diariamente y que es requerido para mantener una concentracin estable del mismo, en el medio correspondiente, que conjuntamente con la cantidad ptima de races y su distribucin en el sistema, nos asegurara que las plantas absorben agua y nutrimentos de acuerdo a sus demandas (Ho and Adams, 1995; Hochmuth, 1998). 46

La demanda nutrimental de cada cultivo, est basada en la habilidad de absorber una cantidad de nutrimentos necesarios para alcanzar una meta de produccin y se contabilizan por la concentracin en la materia seca de los productos cosechados, es decir frutos y follaje. Las plantas contienen prcticamente los 92 elementos naturales, pero slo necesitan 16 para un ptimo crecimiento. El contenido crtico de los macronutrimentos en la planta oscila en el rango de 2 - 30 g kg-1 de materia seca, mientras que los micronutrimentos oscilan de 0.3 - 50 mg kg-1 de materia seca (Gutirrez, 1995; Finck, 1998). En condiciones de campo, en el Valle de Culiacn, Sinaloa, al analizar el efecto de tres dosis de nitrgeno (250, 350 y 450), potasio y lminas de riego por goteo (LR), sobre la produccin de frutos de tomate, se midi la tasa de absorcin (en mg planta-1 da-1) mxima y acumulacin de nitrgeno en hojas, tallo y raz, y sta ocurri en el perodo de 30 a 70 das despus del transplante (ddt), posteriormente descendi debido a la demanda de frutos en crecimiento; la acumulacin fue mayor en hojas que en tallos, sin embargo a partir de los 70 ddt ocurri un fuerte transporte de stos hacia los frutos, el cual fue mayor en la dosis mas baja del elemento. Dosis de nitrgeno superiores a 250 k ha-1 no mejoraron la produccin del fruto, y su contenido de slidos solubles totales (grados Brix) y acidez tampoco se incrementaron significativamente, adems la firmeza, color y prdida de peso se vieron disminuidos significativamente. La dosis alta de potasio no increment la produccin, ni los parmetros de calidad arriba mencionados, excepto el color del fruto que si se mejor. El tratamiento que mostr alta produccin del fruto, sin afectar la calidad del mismo fue el de 250 kg ha-1 de N + 150 kg ha-1 de K2O + 304 mm de lmina de riego (Villarreal et al., 1999). En las especies de fruto y flor, la extraccin de N, P y K es muy lenta en el primer mes de desarrollo de los cultivos, pero a partir del segundo mes se incrementa drsticamente (floracin, amarre y desarrollo del fruto). En tomates y chiles los elementos extrados se localizan principalmente en los frutos para el caso del N y P, mientras que el K, en tallos y hojas. Para obtener un rendimiento de 50 ton ha-1 el tomate requiere 180, 50 y 200 kg ha-1 de N, P2O5 y K2O, respectivamente (Domnguez, 1997; Grageda, 1999). Programas de fertilizacin. Para el cultivo de tomate en el Valle del Yaqui se recomienda de 200 a 250 kg/ha de nitrgeno, y de 60 a 100 k ha-1 de fsforo. Con relacin a potasio, no se ha encontrado respuesta a su aplicacin en rendimiento de fruto; sin embargo, para mejorar las caractersticas de calidad, y previo anlisis de laboratorio, se puede suplementar con 100 k ha-1 de este elemento. El fsforo y el potasio, as como la mitad del nitrgeno deben ser aplicados antes del transplante, y el resto del nitrgeno antes o durante los dos siguientes riegos, depositando al fertilizante en banda a un lado de las plantas. En riegos por goteo, es conveniente aplicar el 40% de la dosis como fertilizacin base antes del transplante, y el resto deber dosificarse de acuerdo a un calendario de aplicacin durante el ciclo del cultivo (INIFAP, 2001). En las recomendaciones generales de fertilizacin para riego por goteo y gravedad se recomienda aplicar el fsforo en su totalidad en presiembra por sus caractersticas de disponibilidad, en el mismo sentido, el nitrgeno debe fraccionarse a lo largo del ciclo, pero reduciendo su aplicacin en la etapa de amarre de frutos, en cucurbitceas y en chiles es recomendable aplicar la mayor parte antes de floracin con el fin de tener una planta con buen anclaje y desarrollo vegetativo para proteger los frutos de daos por radicacin solar principalmente (Grageda, 1999; INIFAP, 2001). En sistemas de riego rodado la sugerencia de fertilizacin es 150 N, 80 P2O5 y 0 K2O. Para riego por goteo, el programa se basa en 47

recomendaciones para Florida Estados Unidos, realizadas por Hochmuth (1998); suponiendo transplante como mtodo de siembra y un espacio entre camas de 1.8 m, se propone la distribucin que se presenta en el Cuadro 3 de acuerdo al desarrollo del cultivo. Con el objetivo de determinar la fertilizacin ptima en tomate, Gretchen y Barker (2002), llevaron a cabo un estudio, donde evaluaron concentraciones de nitrgeno de 0 a 200 mg l-1 acompaado de incrementos proporcionales de otros macro nutrientes como: fsforo (0 a 44 mg l-1), potasio (0 a 160 mg l-1), calcio (0 a 200 mg l-1) y Mg (0 a 48 mg l-1). La concentracin de nutrientes extrables en el medio se increment linealmente con el incremento de nutrientes en la solucin, sin embargo al pasar el tiempo, subieron las concentraciones de nitrgeno en el medio, pero fsforo, potasio, calcio y magnesio disminuyeron. La concentracin de nitrgeno, fsforo y potasio en las hojas se increment al aumentar las cantidades de sos nutrientes en la fertilizacin, pero magnesio y calcio no tuvieron cambios significativos en hojas con el incremento en el abasto de nutrientes; con el tiempo las concentraciones de nitrgeno, fsforo, calcio y magnesio en los tejidos disminuy, pero potasio ascendi. El mximo crecimiento, se dio con las siguientes concentraciones crticas en la solucin nutritiva (en mg kg-1): 30 NO3-N, 30 P, 300 K, 2600 Ca y 800 Mg y en hojas: (en g kg-1): 35 NO3-N, 10 P, 70 K, 35 Ca y 20 Mg. En condiciones de campo se evaluaron diferentes tratamientos de ferti riego para determinar su efecto sobre el crecimiento, rendimiento y calidad del chile jalapeo. Los factores de estudio fueron 3 con cuatro niveles cada factor: carga de tensin de humedad del suelo (30, 60, 90 y 120 kPa), fertilizacin nitrogenada (290, 340 390 y 440 kg ha-1) y potsica (10, 50, 90 y 130 kg ha-1). Los nutrimentos se aplicaron proporcionalmente a los requerimientos hdricos del cultivo a travs de su ciclo. Las variables de estudio fueron: tasa de crecimiento y variables fisiotcnicas, rendimiento acumulado de 3 cosechas y calidad del fruto evaluada con una escala de 1 a 10. Los anlisis arrojaron diferencias altamente significativas y se concluy que el mximo crecimiento, se present con una carga de humedad del suelo de 90 kPa, 390 kg ha-1 de nitrgeno y 90 kg ha-1 de potasio; el rendimiento mximo de 5289.7 kg ha-1 se obtuvo con: 120 kPa, 341.6 kg ha-1 de nitrgeno y 130 k ha-1 de potasio; la mxima calidad del fruto con calificacin de 10 se present en el tratamiento de 114.31 kPa, 435 kg ha-1 de nitrgeno y 10 kg ha-1 de potasio (Bez et al., 2002). La fertilizacin con micronutrimentos para hortalizas, se ha vuelto muy compleja debido a la introduccin de nuevas fuentes y al uso de nuevos mtodos de aplicacin. Generalmente, son mas convenientes las aplicaciones foliares, debido a que se evitan reacciones de fijacin o bloqueo en suelos alcalinos, sin embargo el uso de quelatos a base de EDDHA en nutrimentos como el fierro y zinc, dan excelentes resultados. En el Cuadro 4 se presentan dosis generales de micronutrimentos para aplicaciones al suelo y foliares; en stas ltimas normalmente se aplican de 200 a 400 l ha-1 de solucin (Grageda, 1999). Las aportaciones de micro elementos son de 100 a 1000 veces menores que las de macro elementos y se hacen con soluciones madres de fabricacin comercial, lo cual es muy comn, ya que evita pesar cantidades muy pequeas de sales, lo cual es difcil de realizar y representa un riesgo de error que puede convertirse en toxicidad (Burgueo, 1997).

Cuadro 3. Programa de inyeccin de fertilizantes a travs del sistema de riego por goteo para tomate. 48

DOSIS DE INYECCIN (kg ha-1 DESARROLLO DEL CULTIVO: ETAPA(SEMANAS) N Transplante - primeros brotes (2) Primeros brotes - primeros racimos florales (3) Primeros racimos florales - primer corte (7) Primer corte - 3 corte (1) 3 corte en adelante (3) (Hochmuth, 1998). 1.1 1.7 2.2 1.7 1.1 K 0.9 1.4 1.8 1.4 0.9 dia-1)

RESULTADOS IMPORTANTES DE NUTRICIN VEGETAL EN EL ITSON Dentro de los trabajos conducidos por el equipo de trabajo de fisiologa poscosecha del ITSON, se presentan algunos resultados.

49

Tratamientos y Diseo Experimental. Los tratamientos estudiados provienen de una matriz San Cristbal, estos tratamientos se detallan en el Cuadro 5, donde la dosis 4 se ubic como el testigo recomendado para la regin. Las dosis de fertilizacin fueron diversas combinaciones de N, P (P2O5), K (K2O) y 25 kg ha1 de Ca (CaO) y Mg (MgO). Cuadro 4. Dosis generales de micro nutrimentos para aplicaciones al suelo y follaje de cultivos hortcolas. DOSIS NUTRIMENTO PRODUCTO Suelo (kg ha- Foliar (kg 100 lt-1
1

agua) 1.25 1.00 1.25 0.005 - 0.008 1.25 0.25 - 0.625

Fierro Manganeso Zinc Molibdeno Cobre Boro

Sulfato ferroso (FeSO4 7H2O) Sulfato de manganeso (MnSO4) Sulfato de zinc (ZnSO4 7H2O) Molibdato de amonio ((NH4)6Mo7O24 4H2O) Sulfato de cobre (CuSO4 5HO) Tetraborato de sodio (Na2B4O7 10H2O)

15 - 50 15 - 35 5 - 50 0.07 - 2.25 3 - 55 22 - 55

(Grageda, 1999).

La adicin de fertilizantes se realiz en tres etapas: pre trasplante (1/3 de N y 1/2 de P), primeras flores (1/3 de N, 1/2 de P, K, Ca y Mg) y cuajado de frutos (1/3 de N, 1/2 de K, Ca y Mg). Los fertilizantes usados fueron: urea, fosfato mono amnico, sulfato de potasio, nitrato de calcio y sulfato de magnesio. El diseo experimental fue bloques al azar con cuatro repeticiones; cada unidad experimental const de cuatro surcos de 10 m de largo. Se sembraron las siguientes hortalizas: tomate (Cv Tequila), chile caribe (Cv Santa Fe), pepino (Cv Indio) y calabaza (Cv Robers), el primero a 2 metros y el resto a un metro de separacin entre surcos, la segunda semana de noviembre del 2004, as como papa (Cv Atlantic) bajo condiciones de invernadero. Aqu se presentarn avances de investigacin slo en tomate, pepino y papa.

50

Cuadro 5. Descripcin de los tratamientos de fertilizacin. Tratamiento N P K Ca Mg

Dosis de nutrimentos - - - - - - - - - - - - - kg ha-1- - - - - - - - 1 2 3 4 5 6 7 8 9 50 100 150 200 250 300 350 400 450 50 50 100 150 150 150 200 200 250 50 100 100 150 200 300 300 400 300 25 00 25 00 00 25 00 00 25 25 00 25 00 00 25 00 00 25

Variables evaluadas. Nmero y peso de frutos, Clorofila total con Spad (Soil Plant Analysis Development 502 de Minolta) (Kantety et al., 1996; Rodrguez et al., 1998 y Swiader y Moore, 2002); Acidez titulable (% de cido ctrico por titulacin con NaOH), grados brix (slidos solubles en grados brix con refractmetro RHB-32), resistencia a la penetracin (en kgf con penetrmetro Fruti Pressure Tester FT-327 (slo en tomate) y prdida de peso por diez das.

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RESULTADOS Y DISCUSIN

TOMATE

Nmero de frutos total. En el nmero de frutos total, es decir la suma de los once cortes, se presentaron diferencias significativas, (Cuadro 6), y sobresalen los tratamientos 4 y 6 que representan las dosis intermedias de las dosis de fertilizacin evaluadas, lo cual establece un lmite mximo de 300 kg ha-1 para la fertilizacin nitrogenada, resultados similares reportan Elamin y Al-Wehaibi (2005) en el rendimiento del tomate con la dosis 368-70-175 bajo condiciones de campo; Colla et al., (2001) no encontraron diferencias en rendimiento en dosis de 80 a 160 kg ha-1 en tomate cultivado en suelo arenoso. Respecto a las dosis de potasio aplicadas podemos observar que los tratamientos 1, 5 y 9 con 50, 200 y 300 kg ha-1 se comportaron de manera similar, por lo tanto se recomienda hacer un manejo racional de este mineral para evitar posibles desbalances nutrimentales y adversos efectos ambientales (Ho y Adams, 1995; Mulholland et al., 2001; Burgarn et al., 2002). Peso de frutos total. Al analizar los frutos, se presentaron diferencias significativas (Figura 1) en el peso, y destacan los tratamientos 4 y 6 los cuales corresponden tambin al mayor nmero de frutos; resultados similares en rendimiento de tomate reportaron Villarreal et al., (2002), con las dosis de 250 a 450 kg ha-1 de nitrgeno a campo abierto y suelo Pellustert de Culiacn, Sin.; se han presentado evidencias del efecto benfico del potasio en el rendimiento (Valencia, 2003), pero en este estudio no se obtuvo respuesta, ya que no fue requerido un alto abastecimiento de este nutriente para lograr altos rendimientos (Ho y Adams, 1995), sin embargo Castellanos et al. (2000), recomiendan aplicaciones hasta de 150 kg ha-1 en suelos con muy altos contenidos de ste elemento en forma intercambiable (Cuadro 1). Alrededor del 30% de los frutos se clasificaron como rezaga, donde uno de los principales problemas fue pudricin apical, debida tal vez a que las plantas fueron expuestas a alta temperatura durante la floracin y llenado del fruto, lo cual se asocia con disminucin en el transporte de calcio, de tal manera que el problema de pudricin apical se observ por igual en los tratamientos con y sin calcio en el estudio aqu presentado. Investigaciones previas realizadas por Ho et al. (1999), sobre efectos de altas temperaturas, demostraron que el polen muere, se bloquea la fotosntesis y por ende el crecimiento general de las plantas expuestas, adems el proceso de maduracin se interrumpe y puede promover determinismo.

52

Cuadro 6. Nmero promedio de frutos de tomate en respuesta a la adicin al suelo de N, P, K, Ca y Mg. Trat N P K Ca Mg Num. frutos en 4m2

Dosis de nutrimentos - - - - - - -kg ha-1- - - - - - 1 2 3 4 5 6 7 8 9 50 100 150 200 250 300 350 400 450 50 50 100 150 150 150 200 200 250 50 100 100 150 200 300 300 400 300 25 00 25 00 00 25 00 00 25 25 00 25 00 00 25 00 00 25

164.75 163.25 160.00 180.25 155.25 174.5 156.5 154.00 160.25 4.53 163.19 14.61 5.793

bc bc bc a c ab c c bc

C. V. (%) Media DMS F Trat.

Medias con la misma letra dentro de cada columna no presentan diferencias significativas segn DMS (P<0.05)

Clorofila. Las unidades SPAD medidas despus de las dos primeras aplicaciones de los tratamientos de fertilizacin al suelo (Cuadro 7) presentaron diferencias estadsticamente significativas para el tratamiento 6, el cual present tambin los mayores rendimientos, y por lo tanto la mayor eficiencia para el traslado de los fotosintatos hacia los frutos, aunque no se presentaran diferencias en la tasa relativa de crecimiento (Ho, 1996 y 1999). Los niveles de nitrgeno del tratamiento 6 coinciden con los recomendados por Villarreal et al. (2002) bajo condiciones climticas de la regin de Culiacn, Sinaloa. Los valores de las unidades SPAD 53

encontradas se encuentran dentro de los rangos normales que oscilan de 40 a 60 (Rodrguez, et al., 1998), por lo que se deduce que no se vio afectado el transporte y/o utilizacin de asimilados por limitacin de fsforo, que al agudizarse, se ven afectadas la respiracin y fotosntesis (De Groot et al., 2001).

18 16

REZAGA
ab

CHICO
a

MEDIANO
a

GRANDE

14 12

ab bc ba

abc

bc

kg 4m-2

10 8 6 4 2 0 1 2 3 4 5 6 7 8 9

Tratamientos

Figura 1. Peso total de fruto de tomate en respuesta a la adicin al suelo de N, P, K, Ca y Mg. La media total fue 13.365 kg 4m-2, C.V. 10.6%, DMS = 2.06. Medias con la misma letra dentro de cada barra no presentan diferencias significativas segn DMS (P<0.05). Cuadro 7. Unidades Spad en plantas de tomate en respuesta a la adicin al suelo de N, P, K, Ca y Mg. Dosis de nutrimentos Clorofila (uc) Tratamiento N P K Ca Mg Pre transplante Primeras flores Cuajado de frutos - - - - - - - kg ha - - - - - 1 2 50 100 50 50 50 25 25 54.52 ab 52.17 cd 59.95 bc 61.55 abc 58.52 58.15
-1

100 00 00

54

3 4 5 6 7 8 9

150 100 100 25 25 200 150 150 00 00 250 150 200 00 00 300 150 300 25 25 350 200 300 00 00 400 200 400 00 00 450 250 300 25 25 C. V. (%) Media DMS F Trat.

52.70 abcd 52.65 bcd 54.70 ab 54.95 a 53.35 abcd 51.52 d 53.82 abc 2.92 53.37 2.27 2.3904

62.65 ab 60.15 bc 56.85 d 63.20 a 61.25 abc 59.62 cd 56.85 abc 3.31 60.23 2.93 3.7033

57.90 57.79 57.75 56.20 57.34 56.42 57.62 5.08 57.52 2.58 0.2727

Medias con la misma letra dentro de cada columna no presentan diferencias significativas segn DMS (P<0.05)

Acidez titulable. Se encontraron diferencias estadsticamente significativas en la acidez determinada al momento del corte, los tratamientos evaluados presentaron valores que promediaron entre 0.3 y 0.6% de acidez (Cuadro 8), pero para efectos del anlisis estadstico se transformaron a arcsen. Zambrano et al. (1996) no pudieron identificar una tendencia en el porcentaje de cido ctrico en frutos de tomate con diferentes estados de madurez desde la fisiolgica y completamente maduro y oscilaron de 0.39 a 0.46 % de acidez. En relacin al potasio, se observa una ligera tendencia entre la cantidad de fertilizante aplicado y el porcentaje de cido ctrico en cultivo de tomate, respecto a esto, Ho y Adams (1995), encontraron que la acumulacin de cido ctrico, al igual que otros cidos orgnicos, se debe al mecanismo de balance de carga catin-anin que tiene lugar cuando el potasio es transportado sin un anin acompaante hacia el interior del citoplasma (Marschner, 2003); sin embargo, los tratamientos de fertilizacin nitrogenada y potsica evaluados en tomate a nivel de campo por Villarreal et al., (2002), en Culiacn, Sinaloa, y bajo condiciones de invernadero por Burgarn et al., (2002), no presentaron diferencias estadsticas en los valores de acidez determinados por titulacin; aunque ste ltimo encontr una tendencia a la alza en la acidez en un pequeo intervalo de incremento en las concentraciones de potasio. Es importante denotar que ninguno de los tratamientos evaluados perturbaron la acidez de los frutos, la cual es un componente clave en la calidad de la fruta de tomate y por lo tanto se puede afirmar que esta no es afectada por las dosis de fertilizacin aqu estudiadas. 55

Slidos solubles totales. En el Cuadro 8 se observa que todos los tratamientos promediaron 5.5 grados brix, por lo que no fueron estadsticamente diferentes; Zambrano et al. (1996), al analizar frutos con muy diferentes estados de madurez encontraron un rango pequeo que oscilaba de 4.47 a 4.9 % de slidos solubles. La concentracin de azcar es determinada por el transporte de foto asimilados a los frutos y puede ser manipulada al alterar las relaciones de agua en la planta a travs del riego, adems de la temperatura y la cantidad de luz, sin embargo, sta ltima no tiene limitaciones en la regin del Valle del Yaqui, Sonora; se ha relacionado directamente al potasio con la calidad y mas especficamente con la migracin de los glcidos hacia los frutos y su condensacin al estado de azcares (Ho, 1999; Marschner, 2003). En un estudio llevado a cabo en tomate saladette de crecimiento determinado en 5 localidades del centro de California, no se encontraron diferencias significativas entre las aplicaciones de hasta 370 kg ha-1 de potasio, ya que los frutos promediaron 4 grados brix (Hartz et al., 1999), sin embargo Valencia (2003), vio incrementados los slidos solubles al combinar potasio con fertilizantes nitrogenados de lenta liberacin, en suelos pobres con bajos niveles nutrimentales. Las pequeas variaciones en los slidos solubles observadas pueden estar relacionadas adems de la disponibilidad de potasio y magnesio, con las caractersticas del cultivar, los fertilizantes el manejo del riego ya que es conocido que el potasio regula el potencial osmtico del fruto y la apertura de estomas, lo cual influye en el intercambio de gases y la respiracin; cuando se encuentran altas concentraciones de potasio en frutos puede deberse a un dficit de agua y no al incremento de la importacin de potasio al fruto en si (Aydin y Yoltas, 2003; Burgarn et al., 2002 y Ho et al., 1987). Resistencia a la penetracin. La resistencia a la penetracin arroj diferencias estadsticas (Cuadro 8), los frutos de los tratamientos evaluados mostraron una firmeza promedio de 5 a 6 Kgf, los cuales son similares a los reportados por Araiza et al. (1997) en hbridos de tomate con larga vida de anaquel, cosechados en el valle de Culiacn, Sinaloa; est firmemente documentado que el calcio mejora este parmetro al proporcionar mayor rigidez a la pared celular, adems de proteccin contra el estrs hdrico y retardar la maduracin del fruto (Marschner, 2003; Hirschi, 2004), esto se comprueba al identificar los frutos de los tratamientos 1, 3, 6 y 9 que contienen calcio en la misma cantidad con los valores ms altos de firmeza. Lozano et al., (1995), Braas et al., (2001) y Villarreal et al., (2002) no hallaron respuesta en la firmeza de los frutos de tomate, al variar grandemente las cantidades de calcio aplicadas.

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Cuadro 8. Parmetros de calidad y vida poscosecha de tomate en respuesta a la adicin al suelo de N, P, K, Ca y Mg. Trat Dosis de nutrimentos N P K Ca Mg Acidez (%) Brix Resistencia Prdida de peso (Kgf) (%)

- - - - - - kg ha-1- - - - - 1 2 3 4 5 6 7 8 9 50 50 50 25 25 0.55 c 0.62 abc 0.62 abc 0.57 bc 0.59 abc 0.65 abc 0.67 ab 0.60 abc 0.69 a 0.05% 0.62 0.02 9 1.74 5.5 5.6 5.5 5.5 5.6 5.4 5.5 5.4 5.6 3.1 5.5 6.47 a 5.70 d 6.30 ab 6.05 bc 5.87 cd 6.32 ab 5.37 e 5.82 cd 6.30 ab 3.58 5.88 0.30 17.94 10.06 ab 12.05 bc 11.05 bc 9.06 a 10.06 ab 12.05 c 9.06 a 13.04 c 12.05 c 0.83 10.94 0.01 5.62

100 50 100 00 00 150 100 100 25 25 200 150 150 00 00 250 150 200 00 00 300 150 300 25 25 350 200 300 00 00 400 200 400 00 00 450 250 300 25 25 C. V. (%) Media DMS F Trat.

Medias con la misma letra dentro de cada columna no presentan diferencias significativas segn DMS (P<0.05)

Prdida de peso. Los tratamientos de fertilizacin disminuyeron entre el 6 y 7% de su peso inicial y hubo diferencia estadstica entre los tratamientos (Cuadro 8), aun cuando se utiliz un cultivar con larga vida de anaquel (Tequila), valores similares de prdida de peso se encontraron en un estudio de calidad poscosecha realizado por Araiza et al. (1997) en el valle de Culiacn. El tratamiento 7 (350-200-300-00-00) y 4 (200-150-150-00-00) fueron los 57

que perdieron menos peso, sin embargo no se puede observar una tendencia respecto a la cantidad de nitrgeno y potasio, ya que el 7 tuvo la mayor prdida y el nueve al igual que el 1 tuvieron un comportamiento intermedio; de tal forma que no se tuvo un efecto marcado de la nutricin en este parmetro de calidad, aunque hubo tratamientos a los que se aplic hasta 450 kg ha-1 de nitrgeno, lo cual podra generar frutos muy suculentos con ms probabilidades de perder el peso de sa agua durante el perodo inmediato de poscosecha (Tatabei et al., 2003). Por otra parte, Villarreal et al., (2002), no pudieron establecer una relacin clara entre la dosificacin de nitrgeno y potasio con el comportamiento del peso de los frutos en poscosecha, an cuando esta comprobado que el potasio tiene un efecto hidratante en la clula lo que disminuira la prdida de agua en poscosecha (Marschner, 2003). Respecto del calcio, no se revel un efecto favorable hacia los tratamientos 1, 3, 6 y 9, los cuales perdieron un porcentaje de agua intermedio o bajo.

PEPINO

Nmero de frutos. Present diferencia significativa (Tukey, p<0.05). Los tratamientos con las mayores cantidades de frutos fueron el 2 y el 8 con casi 50 %, mas que el testigo (Cuadro 9), esto se atribuye a que la planta de pepino responde favorablemente a distintas dosis de nutrimentos, pero en particular a una relacin 2:1:2 de N P K. Baez et al., 2002, reporta resultados favorables con dosis de N desde 290 a 440 y K de 10 a 130, lo cual es importante para disear el esquema de fertilizacin que permita el adecuado balance de nutrimentos que de como resultado un ptimo rendimiento (Salisbury y Ross, 2000). No hubo una respuesta favorable en los tratamientos con Ca y Mg. Peso de frutos. Los tratamientos 8 y 2 tuvieron estadsticamente los pesos ms altos, al igual que en nmero de frutos, mejorando en casi 60% el peso del tratamiento 4 designado como testigo (Cuadro 9). En los tratamientos con Ca y Mg, y en aquellos donde las concentraciones de N, P y K fueron pequeas, se present un peso bajo, comportamiento que se ha reportado en sanda (Murakami y Araki, 2001) cuando se utilizan entre 140 y 200 kg ha-1, sin embargo cuando se excede el nivel de N (tratamiento 9), se genera una condicin de exceso que se manifiesta con daos en el tejido vascular, restriccin en la recepcin de agua y finalmente rendimientos bajos (Jones et al., 1991).

Peso seco. Se present una relacin directa entre el peso seco y los tratamientos con las mas altas cantidades de nutrimentos; la mayor diferencia estadstica la marc el tratamiento 8 con 47 % mas peso que el testigo, seguido de los tratamientos 6, 7 y 9 (Cuadro 9), situacin que se atribuye a los altos niveles de N, P y K suministrados, lo cual favorece la multiplicacin celular y el contenido proteico, manifestados en el desarrollo vegetativo de la planta; esto debido a que N y el P son parte estructural de las molculas de protenas (Rodrguez, 1989); sin embargo, las plantas que crecen con exceso de nitrgeno, muestran un crecimiento excesivo de la zona area, pero frutos pequeos (Salisbury y Ross, 2000).

58

Resistencia a la penetracin. No se obtuvo diferencia significativa, pero se presenta una tendencia de aumento en los tratamientos que contienen calcio, magnesio y bajas cantidades de nitrgeno, a excepcin del 9, debido a que ste contiene cantidades elevadas de N y K (Cuadro 10); el N promueve la existencia de frutos ms suculentos y por lo tanto poco firmes y el K genera problemas en la toma y asimilacin de calcio, el cual contribuye a la integridad de la membrana por lo tanto a la firmeza de los frutos. Al evaluar la textura del pepino, Sajnn et al. (2003) comentan que los puentes de calcio entre los polmeros ppticos han demostrado ser los responsables de la adherencia clulaclula y de la integridad del tejido fino del mesocarpio del pepino.

Prdida de peso. A pesar de no haber encontrado diferencias significativas, los tratamientos que contienen calcio como el 3, 6 y 9 resultaron ser los mas consistentes en su comportamiento bajo condiciones de almacenamiento, con 14, 10 y 11% menos prdida de peso que el testigo (Cuadro 10), situacin que Marschner (2003), atribuye a que el contenido adecuado de calcio es esencial para consolidar las paredes de la clula y los tejidos finos de la planta, ya que al ser utilizado como pectato fortalece la lamina media de la pared celular. Cuadro 9. Componentes de rendimiento en respuesta a la fertilizacin al suelo con N, P, K, Ca y Mg en pepino. Tratamiento Nmero de Peso de Frutos Peso seco N P K Ca Mg Frutos g 2m-2 g 0.5m-2

- - - - - - - - kg ha-1- - ---50 50 50 25 25 13.00 bcde 16.60 a 13.60 abcd 10.60 de 12.40 bcde 11.20 cde 14.40 abc 15.20 ab 10.00 de

4152.63 ab 4792.31 a 4391.24 ab 3018.84 c 3538.10 bc 3468.30 bc 4706.32 a 4926.23 a 2991.56 c

87.69 108.79 95.89 89.12 93.97 101.55 96.65 105.77 87.27 59

100 50 100 00 00 150 100 100 25 25 200 120 120 00 00 250 150 200 00 00 300 150 300 25 25 350 200 300 00 00 400 200 400 00 00 450 250 300 25 25

F Tratamientos CV % Media

3.73 19.52 13.00

4.42 20.23 3998.39

0.51 22.53 95.52

CV = coeficiente de variacin. En la columna medias con la misma letra son

estadsticamente iguales (Tukey, 0.05).

Cuadro 10. Componentes de calidad y clorofila en respuesta a la fertilizacin al suelo con N, P, K, Ca y Mg en pepino. Clorofila Tratamiento Resistencia Prdida a la penetracin N P K Ca Mg de peso 1 2 3 Aplicacin de fertilizante

- - - - - - - - kg ha-1- - ---50 50 50 25 25

Kgf 9.82 8.92 9.10 2.10 4.22 8.25 8.72

g 15.95 16.89 13.40 15.65 17.57 14.04 13.34

- - - - - - - - - - - - - uc- -----------34.21 ab 42.02 42.87 33.61 ab 43.23 44.39 32.46 b 42.29 45.90 30.21 ab 42.37 43.40 31.35 ab 44.13 47.73 34.76 a 42.21 42.08 34.67 a 44.25 42.04

100 50 100 00 00 150 100 100 25 25 200 120 120 00 00 250 150 200 00 00 300 150 300 25 25 350 200 300 00 00

60

400 200 400 00 00 450 250 300 25 25 F Tratamientos CV % Media

8.60 4.20 3.92 39.76 7.10

15.72 13.88 1.27 20.29 16.82

35.29 a 43.91 42.70 32.15 ab 43.57 46.43 2.41 6.74 33.19 1.16 0.84

3.84 10.18 43.10 44.17

uc = unidades clorofila. CV = coeficiente de variacin. En la columna medias con la misma letra son estadsticamente iguales (Tukey, 0.05).

Clorofila total. En las mediciones llevadas a cabo despus de la primera aplicacin de fertilizantes, se encontr diferencia significativa, donde la respuesta a los nutrimentos aplicados muestra rangos de 30.21 a 35.29 unidades de clorofila (uc), siendo los tratamientos 8, 6 y 7 los mejores, superando al testigo con 17%, 15% y 14% respectivamente, estos tratamientos manejan hasta 400 kg ha-1 de N, con excepcin del 9, por lo que se denota el estmulo en la molcula de clorofila, condicin no alcanzada por el testigo (Tratamiento 4). Despus de la segunda aplicacin de fertilizantes no se encontr diferencia significativa, sin embargo se registraron mas de 10 uc que en la primera aplicacin, lo que demuestra que los nutrimentos fueron asimilados con el paso del tiempo. En la tercera aplicacin tampoco se observa diferencia estadstica, debido a una posible estabilizacin de la molcula de clorofila al no haber mas adiciones de nitrgeno (Cuadro 10). El medidor SPAD ha sido ratificado como un mtodo confiable para estimar con precisin la relacin entre las dosis ascendentes de fertilizacin nitrogenada y el nivel de clorofila, en cultivares de meln y calabaza en diferentes tipos de suelo (Stewart, 2001; Swiader y Moore, 2002).

PAPA

Nmero de tubrculos. Los resultados obtenidos en el nmero de tubrculos se pueden observar en el Cuadro 11, mostrando una diferencia estadsticamente significativa, en donde el tratamiento 8 supera al testigo con un 15%, teniendo dosis altas en N, P y K, pero careciendo de Ca y Mg. En el tratamiento 6 se puede observar un aumento en un 10% con respecto al testigo, siendo las dosis de nutrientes similares al testigo pero con porcentajes de Ca y Mg. El tratamiento 9 fue igual de efectivo que el testigo, con ms del doble de concentracin en las dosis de N, P y K, e iguales dosis de Ca y Mg. Mientras que el tratamiento 5 fue el ms deficiente con un 55% por debajo del testigo en el nmero de tubrculos, seguido del tratamiento 3 y 2, esto debido a que las dosis de nutrientes eran las 61

ms bajas, siendo que durante las primeras etapas de tuberizacin es cuando se requiere la mayor absorcin de nutrientes. Con un exceso de nitrgeno, la riqueza en fcula puede verse disminuida la podredumbre encuentra un medio ms favorable para su desarrollo y la madurez se retrasa. En general en las dosis de nitrgeno se debe de tener especial cuidado, el rendimiento del cultivo se ve muy afectado, aun antes de que aparezcan sntomas visibles de su deficiencia, no debe aadirse ni en exceso, ni demasiado tarde para que no halla una vegetacin demasiado desarrollada en la ltima fase del ciclo vegetativo que impida o disminuya la tuberizacin (Guerrero, 1990; Domnguez 1990).

Peso fresco. En el cuadro 11 se puede apreciar una diferencia significativa en el peso total de los tubrculos por tratamiento. El tratamiento 7 el cual carece de Ca y Mg, super a los dems tratamientos en un 47.47% ms con respecto al testigo, seguido por el tratamiento 8 el cual super al testigo en un 24.21%, al igual que el tratamiento anterior carece de Ca y Mg, pero con dosis ms altas en N y K. Mientras que el tratamiento 6 super al testigo en un 9.53% teniendo dosis similares a las anteriores pero con Ca y Mg. Los tratamientos 9 y 5 se mantuvieron con resultados similares al testigo y los tratamientos 3, 2 y 1 obtuvieron resultados por debajo del testigo, siendo el ms deficiente este ltimo con un 34.92% menos que el testigo, con dosis bajas en N, P, y K, pero adicionado con Ca y Mg. Los macronutrientes, sobre todo el nitrgeno es un factor determinante en el rendimiento, ya que favorece el desarrollo de la parte area y la formacin y engrosamiento de los tubrculos, por lo que es de esperarse que dosis altas y balanceadas den como resultado mayor consistencia y crecimiento del tubrculo. En muchas especies, el fsforo y el nitrgeno interactan estrechamente afectando a la madurez, de modo que el exceso de nitrgeno la retarda y la abundancia de fsforo la acelera (Salisbury y Ross, 2000).

Peso volumtrico. Los resultados en cuando a esta variable mostraron una diferencia estadsticamente significativa. El tratamiento 7 super al testigo con un 46.49%, seguido por el tratamiento 8 con un 23.56% y el tratamiento 6 con un 6.36%. Estos tratamientos contenan dosis altas de nitrgeno, fsforo y potasio, y slo el tratamiento 6 contena dosis de calcio y magnesio. Los tratamientos restantes estuvieron por debajo del testigo regional, siendo el tratamiento 9 y el tratamiento 5 los ms cercanos al testigo. Los tratamientos 3, 2 y 1 fueron en descenso, siendo este ltimo el ms deficiente en un 38.85% menos que el testigo (Cuadro 11).

62

Cuadro 11. Componentes de rendimiento en respuesta a la fertilizacin al suelo con N, P, K, Ca y Mg en papa en invernadero. Nmero de Tratamiento tubrculos totales N P K Ca Mg g m-2 4.25 abc 3.5 bc 2.5 c 5.0 ab 2.25 c 5.5 ab 4.0 abc 5.75 a 5.0 ab 105.7 c 113.1 bc 136.7 cde 162.3 bcd 147.6 bcde 177.8 bc 239.9 a 201.6 ab 159.6 bcde Peso de tubrculos Totales Peso volumtrico de tubrculos cc 96 c 106abc 130 bcd 157 bcd 141 bcde 167 bc 230a 194ab 151 bcde

- - - - - - - - kg ha-1- - - - - - 50 100 150 200 250 300 350 400 450 50 50 100 120 150 150 200 200 250 50 100 100 120 200 300 300 400 300 25 00 25 00 00 25 00 00 25 25 00 25 00 00 25 00 00 25

CV = coeficiente de variacin. En la columna medias con la misma letra son

estadsticamente iguales (Tukey, 0.05).

Algunas veces la planta de papa puede mostrar sntomas de deficiencia de magnesio, sobre todo cuando los abonos son ricos en potasio, ya que el antagonista del magnesio es este ltimo, que al encontrarse en abundancia detiene la absorcin magnsica (Garca y Garcia, 1982). Domnguez (1990), reitera esto al decirnos que el exceso de otros elementos como el calcio y el potasio puede producir deficiencias en magnesio.

63

CONCLUSIONES El reconocer la accin directa de cada nutrimento en el desarrollo de las hortalizas, sobre todo en el rendimiento y fisiologa poscosecha de sus frutos, es de vital importancia, ya que ah radica mucho del xito en la produccin de stas.

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NUTRICIN VEGETAL CON FERTILIZANTES INTELIGENTES: CASO TOMATES

Catalina Mungarro Ibarra y Marco Antonio Gutirrez Coronado*

Fisiologa de Cultivos. Instituto Tecnolgico de Sonora

*Correspondencia: totono@itson.mx

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RESUMEN A nivel mundial las hortalizas, junto con las frutas ocupan actualmente el segundo lugar de los productos agropecuarios apenas aventajados por los cereales y se estima que tan solo dos hortalizas contribuyen con el 50% de la produccin mundial: la papa y el tomate, lo cual nos indica el enorme valor que representa ste ltimo, no solo en el comercio, sino tambin en el sistema alimentario. A nivel nacional, el tomate es el principal producto hortcola de exportacin, ya que representa el 37% del valor total de las exportaciones de legumbres y hortalizas y el 16% del valor total de las exportaciones agropecuarias. Debido a la gran demanda que se tiene de hortalizas, se ha visto la necesidad de buscar nuevas opciones para el mejoramiento de las mismas, a fin de obtener mayor produccin con calidad para hacerlas ms competentes en el mercado. Por otro lado, los elementos nutritivos de los fertilizantes utilizados tradicionalmente, en gran parte pueden no estar disponibles para planta reduciendo as su eficiencia. As mismo, se conoce que en las plantas existe una relacin estrecha entre la presencia de cidos orgnicos en la raz y un aumento en la absorcin de iones, dando con ello una mejor eficiencia en la toma y distribucin de los nutrimentos. Un caso particular es en tomates, por lo tanto, la presente investigacin est enfocada a la evaluacin del efecto de la adicin del cido polihidroxicarboxlico(PHCA), un fitoestimulador que ha dado respuestas satisfactorias en rendimiento agronmico y calidad de los cultivos, a frmulas fertilizantes puras sobre la nutricin, desarrollo y rendimiento de tomate (Lycopersicum esculentum Mill) de la variedad Quest. El trabajo se llev a cabo en el invernadero del Instituto Tecnolgico de Sonora, unidad Nainari de ciudad Obregn. El da 29 de Septiembre de 2004 se sembr en charolas de hielo seco, utilizando una semilla de la variedad Quest de tomate Saladette. Se transplanto a los 30 das en bolsas de plstico con drenaje, colocndolas completamente al azar dentro del invernadero, bajo un diseo simple. Habiendo 10 repeticiones para cada uno de los tratamientos efectuados en cada uno de los cultivos, stos fueron: T1: Aporte de nutrientes mediante programa estndar de fertilizacin; T2: Aporte de nutrientes mediante programa estndar de fertilizacin enriquecidas con cidos polihidroxicarboxilicos; T3: Aporte de nutrientes mediante programa estndar de fertilizacin enriquecidas con cidos polihidroxicarboxilicos ms sustrato adicionado con ensolve. Adems se aplicaron micronutrientes a razn de 50, 100 y 200 g/ha por da en el primer, segundo y meses subsecuentes respectivamente. Las variables evaluadas fueron: Desarrollo vegetativo, extraccin de nutrientes y variables de rendimiento. Los resultados obtenidos ms sobresalientes fueron: la tasa relativa de crecimiento, se vio favorecida con el tratamiento 3 con ms de 2 cm por da; en cuanto a grosor del tallo el tratamiento 2 se mostr por encima de los dems tratamientos, con una diferencia altamente significativa a los 75 das con ms de 0.1 cm; el peso seco total a partir de los 120 das despus del transplante, el tratamiento con cidos polihidroxicarboxilicos, despunto hasta llegar a los 900 g a los 160 das; el peso seco de hojas se vio favorecido mayormente a los 160 das en el tratamiento con PHCA y ensolve; la extraccin de nutrimentos fue de ms del 60% en los tratamientos 2 y 3 en el caso de Nitrgeno, Fsforo, Potasio y Calcio, tanto a los 80, 120 y 160 das de monitoreo; tanto el nmero y peso de frutos aumentaron en mas del 35% en los tratamientos 2 y 3 en
comparacin con el 1.

Palabras clave: pH, nutrimento, disponibilidad, absorcin.

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INTRODUCCIN De todos es conocida la importancia que representan las hortalizas para el hombre; aportan divisas, son usadas como alimento, proporcionan vitaminas, cidos orgnicos fcilmente asimilables, sales minerales y aceites esenciales, entre otros; contribuyen al mejoramiento del sabor de la comida, al aumento de la secrecin de las glndulas digestivas y, con todo ello, a la mejor digestin y asimilacin de las sustancias nutritivas (Staub et al., 1996). A nivel mundial las hortalizas, junto con las frutas ocupan actualmente el segundo lugar de los productos agropecuarios apenas aventajados por los cereales y se estima que tan solo dos hortalizas contribuyen con el 50% de la produccin mundial: la papa y el tomate, lo cual nos indica el enorme valor que representa ste ltimo, no solo en el comercio, sino tambin en el sistema alimentario (Rodrguez, 2000). Debido a la gran demanda que se tiene de hortalizas, se ha visto la necesidad de buscar nuevas opciones para el mejoramiento de las mismas, a fin de obtener mayor produccin con calidad para hacerlas ms competentes en el mercado (Staub et al., 1996). Por otro lado, los elementos nutritivos de los fertilizantes utilizados tradicionalmente, en gran parte pueden no estar disponibles para planta reduciendo as su eficiencia. As mismo, se conoce que en las plantas existe una relacin estrecha entre la presencia de cidos orgnicos en la raz y un aumento en la absorcin de iones (Meja, 2003). Por lo tanto, la presente investigacin est enfocada a la evaluacin del efecto de la adicin del cido polihidroxicarboxlico (PHCA), un fitoestimulador que ha dado respuestas satisfactorias en rendimiento agronmico y calidad de los cultivos, a frmulas fertilizantes puras sobre la nutricin, desarrollo y rendimiento de tomate (Lycopersicon esculentum Mill).

GENERALIDADES DE LA FERTILIZACIN El crecimiento y desarrollo normal de los vegetales esta determinado por la disponibilidad de ciertos elementos qumicos esenciales para el metabolismo de sus organismos, los cuales son: Nitrgeno, Fsforo, Potasio, Calcio, Magnesio, Azufre, Hierro, Cloro, Boro, Cobre, Manganeso, Molibdeno y Zinc (Rodrguez, 1989). En las prcticas agrcolas eficientes, el agricultor escoge la cantidad y el momento adecuado, de manera que las plantas absorban los nutrientes tanto como sea posible. La cantidad y la regulacin de la absorcin dependen de varios factores, tales como: La variedad del cultivo, la fecha de siembra, la rotacin de cultivos, las condiciones del suelo y el tiempo (Muoz y Castellanos, 2003). Al momento de decidir que fuente de fertilizante conviene utilizar es necesario considerar, entre otras cosas, las caractersticas del suelo, y las reacciones y transformaciones de los productos. Algunas fuentes de fertilizantes nitrogenados como las amoniacales generan un residuo que provoca cierta acidez al suelo (Hinsinger, 1998). Es conocido el mayor efecto acidificante del sulfato de amonio respecto del nitrato de amonio y la urea. Sin embargo, no se puede generalizar sobre este efecto en todos los suelos, normalmente la capacidad amortiguadora de los suelos arcillosos hace que la acidez inducida por estos tres fuentes sea menor, particularmente en el caso del sulfato de amonio (Rodrguez, 1989). 70

Para un aprovechamiento ptimo del cultivo y un potencial mnimo de contaminacin del medio ambiente, el agricultor debe suministrar los nutrientes en el momento preciso que el cultivo los necesita. Esto es de gran relevancia para los nutrientes mviles como el nitrgeno, que pueden ser fcilmente lixiviados del perfil del suelo, si no es absorbido por las races de las plantas (Hofer, 1991). En los casos de aplicacin de urea y de fosfato diamnico, las prdidas pueden darse a travs de la emisin de amonaco en el aire. Ambos fertilizantes deben ser incorporados en el suelo inmediatamente despus de la aplicacin, si no hay una lluvia inmediata o riego para incorporarlos en el suelo (Kirby y Mengel, 1967). Es de importancia particular en los suelos alcalinos (calcreos). Todos los nutrientes primarios y secundarios deberan ser incorporados inmediatamente despus de la aplicacin en las regiones en las que se esperan lluvias abundantes, para evitar prdidas debidas al escurrimiento y a la erosin (Hinsinger, 1998). La acidificacin de las soluciones nutritivas en fertirrigacin es una prctica comn y ventajosa desde numerosos puntos de vista, como veremos a continuacin. Aunque existe la posibilidad de utilizar otro tipo de sustancias, en general, la acidificacin de las soluciones hasta alcanzar el pH deseado se efecta mediante la aplicacin de cidos minerales (Marschner, 2003). De acuerdo con la composicin qumica de las aguas de riego normalmente empleadas, el poder tampn o amortiguador de stas ante la adicin de un compuesto cido, depende casi exclusivamente de la presencia de ion bicarbonato (HCO3-) (Wohanka, 2002). Este anin es la especie predominante del equilibrio del cido carbnico en disolucin entre pH 4 y pH 8.3, y es determinante en el valor de pH de la solucin. Al adicionar un cido, es decir, cualquier sustancia capaz de aportar iones hidrgeno (H+), se produce la siguiente reaccin de neutralizacin: HCO3- + H+ -- H2O + CO2 Con lo que eliminamos los iones bicarbonato, para obtener agua y dixido de carbono gas. Esta es la principal reaccin que nos va a gobernar el pH de una solucin nutritiva cuyo pH pretendemos controlar (Urrestarazu, 2005). La aplicacin de fertilizantes en terrenos cultivables, debe estar orientada al uso racional de stos, disminuyendo el impacto econmico y al medio ambiente (Harrison, 1998). El manejo de la fertilizacin debe ser cuidadoso, evitando la contaminacin del suelo y del agua. Los cuidados en el uso de fertilizantes abarcan desde el manejo en bodegas, la calibracin de los equipos, hasta la aplicacin de fertilizantes en s. Especficamente el tomate es una hortaliza tolerante a la acidez, con valores de pH 6.8-5.0. En lo referente a la salinidad es medianamente tolerante. Con respecto a la textura del suelo, el tomate se desarrolla en suelos livianos (arenosos) y en suelos pesados (arcillosos), siendo los mejores los arenosos y limo-arenosos con buen drenaje (Rodrguez, 1989). La disponibilidad limitada de tierra adicional para la produccin agrcola, junto con el descenso del crecimiento de la produccin de los principales cultivos, ha aumentado la preocupacin sobre la capacidad de la agricultura para alimentar a una poblacin mundial que, segn se prev, superar los 7.500 millones de habitantes en el 2020 (Araya et al., 1995). La disminucin de la fertilidad del suelo ha planteado asimismo la preocupacin sobre la sostenibilidad de la productividad agrcola al nivel actual. Las estrategias futuras para el aumento de la productividad agrcola tendrn que concentrarse en un empleo ms eficiente, eficaz y sostenible que en el pasado de los recursos de nutrientes disponibles (Kuhn, 2002). El manejo integrado de los nutrientes necesarios para el crecimiento adecuado de las 71

plantas, junto con la gestin eficaz de los cultivos, el agua, el suelo y la tierra, sern crticos para el sostenimiento a largo plazo de la agricultura (Shainberg y Shalhevet, 1984). El manejo integrado de los nutrientes (MIN) es una tcnica que busca tanto el aumento de la produccin agrcola como la proteccin del medio ambiente para las futuras generaciones. Se trata de una estrategia que incorpora nutrientes tanto orgnicos como inorgnicos de las plantas para lograr una mayor productividad de los cultivos, prevenir la degradacin del suelo y ayudar por lo tanto a cubrir las necesidades futuras de provisin de alimentos. Se basa en la aplicacin y la conservacin de nutrientes, las nuevas tecnologas para el incremento de la disponibilidad de nutrientes para las plantas y la divulgacin de conocimientos entre agricultores e investigadores (Lindsey y Jones, 1992). El xito del manejo integrado de nutrientes depender de los esfuerzos combinados de los agricultores, los investigadores, los agentes de extensin agrcola, los gobiernos y las organizaciones no gubernamentales (Araya et al., 1995). pH Y DISPONIBILIDAD DE NUTRIMENTOS La mayora de la gente del medio agronmico sabe que el pH es un valor variable entre 0 y 14 que indica la acidez o la alcalinidad de una solucin. Y, adems, conoce que el mantenimiento del pH apropiado en el flujo del riego ayuda a prevenir reacciones qumicas de fertilizantes en las lneas, que un valor de pH elevado puede causar obstrucciones en los diferentes componentes de un sistema de fertirrigacin debidas a la formacin de precipitados, que un adecuado pH asegura una mejor asimilabilidad de los diferentes nutrientes, especialmente fsforo y micronutrientes, etc. Partiendo de esto podemos afirmar que uno de los factores de mayor importancia que afectan la disponibilidad de los nutrientes es el pH del suelo. El valor de pH de los suelos puede variar ampliamente; valores normales son de 5 a 7 para zonas hmedas, y de 7.5 a 8 para zonas ridas como es el caso de nuestra regin (Primo y Carrasco, 1981). El pH puede afectar la disponibilidad de los nutrientes ya que para que el aparato radical pueda absorber los distintos nutrientes, stos obviamente deben estar disueltos. Valores extremos de pH pueden provocar la precipitacin de ciertos nutrientes con lo que permanecen en forma no disponible para las plantas adems de que todas las especies vegetales presentan unos rangos caractersticos de pH en los que su absorcin es idnea (Navarro y Navarro. 2003). Fuera de este rango la absorcin radicular se ve dificultada y si la desviacin en los valores de pH es extrema, puede verse deteriorado el sistema radical o presentarse toxicidades debidas a la excesiva absorcin de elementos fototxicos (Rojas, 1991). Por ejemplo, con pH de suelos superiores a 7.5, se ve afectada la correcta asimilabilidad de nutrientes como fsforo, hierro y manganeso. Las distintas especies de cultivo muestran distinta adaptabilidad para su desarrollo en funcin del pH del terreno, existen especies ms acidfilas que otras y cada una presenta un rango de pH del suelo ideal para su crecimiento. En la tabla 1 se muestran los valores ptimos para los cultivos ms ampliamente difundidos, conviene tener en cuenta que estos valores son meramente aclaratorios, y que la mayora de las especies presentan una notable adaptabilidad a un amplio rango de pH, siendo este factor mucho ms crtico respecto a la influencia que ejerce sobre la dinmica de los nutrientes que han de ser absorbidos por las plantas (Tan, 1992). De este modo, el hierro, que es el elemento esencial cuya solubilidad resulta ms afectada por el pH, a menos que se adicione diariamente o en forma quelatada, se encentra en forma inica disponible para la planta en menos del 50% por encima de pH 7, mientras que a pH 8 72

no queda nada disponible debido a su precipitacin en forma de hidrxido frrico. Por el contrario, por debajo de pH 6.5, ms del 90% del hierro permanece disuelto y disponible para las plantas. El manganeso sigue una dinmica similar al hierro (Rodrguez, 1989). De forma anloga, por encima de pH 6.5, la disponibilidad del fsforo y el calcio pueden decrecer considerablemente debido al predominio de la forma HPO4-2 (que forma precipitados insolubles en contacto con el calcio) sobre la forma H2PO4- (que forma compuestos muy solubles con el calcio). Y por encima de pH 7 el riesgo de precipitacin de calcio y magnesio en forma de carbonatos, CaCO3 y MgCO3, es muy alto (Fuentes, 2006). En resumen, en el rango de pH 5.0-6.5, la prctica totalidad de los nutrientes est en forma directamente asimilable para las plantas, por encima de pH 6.5 la formacin de precipitados puede causar importantes problemas y por debajo de pH 5 puede verse deteriorado el sistema radical, sobre todo en cultivo hidropnico, donde el poder tamponador del sustrato suele ser muy pequeo (Muoz, 2003). El pH de la solucin nutriente en contacto con las races puede afectar el crecimiento vegetal de dos formas principalmente: La primera es la disponibilidad de los nutrientes: para que el aparato radical pueda absorber los distintos nutrientes, stos obviamente deben estar disueltos. Valores extremos de pH pueden provocar la precipitacin de ciertos nutrientes con lo que permanecen en forma no disponible para las plantas (Marschner, 2003). Por otro lado, puede afectar al proceso fisiolgico de absorcin de los nutrientes por parte de las races: todas las especies vegetales presentan unos rangos caractersticos de pH en los que su absorcin es idnea. Fuera de este rango la absorcin radicular se ve dificultada y si la desviacin en los valores de pH es extrema, puede verse deteriorado el sistema radical o presentarse toxicidades debidas a la excesiva absorcin de elementos fitotxicos (aluminio) (Hofer, 1991). El pH en las soluciones de fertirrigacin, tanto en cultivo en suelo como en hidropona, debe ser tal que permita estar disueltos a la totalidad de los nutrientes sin daar las races, evitando de este modo la formacin de precipitados (algunos de los cuales pueden presentarse en forma de finsima suspensin invisible al ojo humano) que pudieran causar obturaciones en los sistemas de riego e indisponibilidad para la absorcin radical de dichos nutrientes (Wohanka, 2002). De este modo, el hierro, que es el elemento esencial cuya solubilidad resulta ms afectada por el pH, a menos que se adicione diariamente o en forma quelatada, se encuentra en forma inica disponible para la planta en menos del 50% por encima de pH 7, mientras que a pH 8 no queda nada disponible debido a su precipitacin en forma de hidrxido frrico Fe(OH)3 (xido, robn o herrumbre). Por el contrario, por debajo de pH 6.5, ms del 90% del hierro permanece disuelto y disponible para las plantas. El manganeso sigue una dinmica similar al hierro (Hinsinger, 1998). De forma anloga, por encima de pH 6.5, la disponibilidad del fsforo y el calcio pueden decrecer considerablemente debido al predominio de la forma HPO4-2 (que forma precipitados insolubles en contacto con el calcio) sobre la forma H2PO4- (que forma compuestos muy solubles con el calcio). Y por encima de pH 7 el riesgo de precipitacin de calcio y magnesio en forma de carbonatos, CaCO3 y MgCO3, es muy alto, lo que puede 73

provocar importantes obturaciones de emisores y otros componentes en los sistemas de fertirriego. En resumen, en el rango de pH 5.0-6.5, la prctica totalidad de los nutrientes est en forma directamente asimilable para las plantas, por encima de pH 6.5 la formacin de precipitados puede causar importantes problemas y por debajo de pH 5 puede verse deteriorado el sistema radical, sobre todo en cultivo hidropnico, donde el poder tamponador del sustrato suele ser muy pequeo (Ascencio y Lazo, 2001). Dentro de los factores ms importantes que afectan la disponibilidad de P se han identificado: el pH, reacciones de adsorcin, contenidos de materia orgnica y la presencia de agentes biolgicos como actividad fosfatasa y cidos orgnicos de bajo peso molecular (Fuentes, 2006). Los cambios en el pH inducido por las races estn relacionados con la excrecin de cidos orgnicos de bajo peso molecular y con la absorcin diferencial de aniones y cationes. Ambos mecanismos estn asociados con la respuesta a la deficiencia de fsforo que conduce a diferentes rangos de tolerancia en diversas especies (Ascencio y Lazo, 2001). Otro mecanismo por medio del cual las plantas extraen el fsforo es a travs del dixido de carbono desprendido por las races, el cual al reaccionar con el agua forma el cido carbnico, siendo una fuente de iones H+, que acidifican el medio, este proceso favorece la disolucin de los fosfatos insolubles en el suelo. Por eso al exponer a condiciones externas idnticas pueden comportarse de manera diferente evidenciando procesos localizados de alcalinizacin y acidificacin (Hinsinger, 1998). Por todo lo anteriormente expuesto, resulta imprescindible control del pH de la solucin, de esta forma se evitar la formacin de precipitados y, sobre todo, se lograr un estado ptimo para la nutricin mineral de los cultivos que se traducir en un aumento de la productividad y calidad de las cosechas (Navarro y Navarro, 2003).

Por qu acidifican los fertilizantes nitrogenados? Numerosos estudios han demostrado la bondad de las tcnicas nucleares (15N) para poder evaluar con precisin y rapidez, el aporte de nitrgeno proveniente de fertilizantes qumicos (poca, fuente y forma), abonos verdes, lodos y estircoles, en los cultivos de importancia agrcola, pues permiten medir la cantidad de nutrimento que la planta est tomando de las diferentes fuentes evaluadas (Bowen y Zapata, 1990; Zapata, 1990). Durante el proceso de nitrificacin del NH4 del fertilizante a NO3 se liberan iones H+ que pueden producir acidez en el suelo. El grado de acidez que induce depende de la fuente de N que se utiliza. Entre los fertilizantes nitrogenados de uso mas frecuente se encuentran la urea, el nitrato de amonio y el sulfato de amonio (Kirby y Mengel 1967). Durante su transformacin en el suelo, la reaccin da como resultado la produccin de igual cantidad de nitrgeno con las tres fuentes, pero los protones liberados son mayores para el sulfato de amonio. As, tenemos que por cada mol de sulfato de amonio se liberan 4 unidades (moles) de H+, mientras que cada unidad (mol) de urea y NA produce solo 2 moles de H+. Por lo tanto, si a un suelo le agregamos una cantidad determinada de nitrgeno / ha con cada una de estas tres fuentes, la acidez inducida por la nitrificacin del producto debera seguir el siguiente orden sulfato de amonio > urea = nitrato de amonio (Marschner, 2003).

74

(NH4)2SO4 + 4O2 (NH2)2CO + 4O2 NH4NO3 + 2O2

4H+ + 2NO3- + 2H2O 2H+ + 2NO3- + CO2 + H2O 2H+ + 2NO3- + H2O

cidos orgnicos. En suelos cultivables, la adicin de enmiendas orgnicas se utiliza entre otras cosas, para mejorar la fertilidad y propiedades del suelo, tales como la agregacin, capacidad de retencin de agua y efecto residual de herbicidas y productos fitosanitarios(Pagliai et al., 2004). En la agricultura orgnica, el mejoramiento de las condiciones fsicas y qumicas del suelo promueve un incremento en la diversidad, desarrollo y actividad de microorganismos benficos, los cuales forman asociaciones simbiticas con las races de la mayora de las plantas de inters agrcola (Schssler et al., 2001). Dicha simbiosis promueve una mayor eficiencia en la absorcin radical de nutrientes como N (Tobar et al., 1999) y especialmente aqullos de lenta movilidad en el suelo como P (Smith y Read, 1997), Cu y Zn (Tarafdar y Marschner, 1994). Esto permitiendo adems, un mejoramiento en la resistencia de las plantas a las enfermedades radicales (Pozo et al., 2002). En numerosos estudios se ha encontrado en las plantas una relacin estrecha entre la presencia de cidos orgnicos en la raz y la absorcin de iones. As cuando hay un alto contenido de los cidos hay una alta toma de cationes, mientras que en condiciones de baja concentracin de cidos hay una toma de aniones (Gupta, 1997; Jackson y Coleman, 1959; Kirby y Mengel, 1967; Sutcliffe, 1962). La influencia de los cidos orgnicos en la absorcin de nutrientes, tambin ha sido estudiada haciendo aplicaciones de cidos orgnicos a la raz. En cebada, la aplicacin de algunos cidos incrementa la permeabilidad de las races a iones (Jackson et al., 1970). Una de las funciones importantes de los cidos orgnicos est en su relacin con el metabolismo del nitrgeno. Una vez absorbido el amonio del suelo, o producido por nitrato en la raz, reacciona con el cido cetoglutrico para formar el primer aminocido, el glutmico (Salisbury y Ross, 1994). Considerando lo anterior sera deseable modificar artificialmente la concentracin de cidos orgnicos presentes en la solucin del suelo mediante la aplicacin exgena de cidos orgnicos. cidos carboxlicos. Los cidos carboxlicos se caracterizan por la existencia de uno o ms grupos carboxilos (-COOH) en su molcula. El tomo de hidrgeno de este grupo es activo y puede aparecer como in hidrgeno libre (hidronio), lo que justifica la calificacin de cido. Los cidos carboxlicos orgnicos, RCOOH, se dividen en alifticos, alicclicos, aromticos y heterocclicos; saturados y no saturados; no sustituidos y sustituidos; monocarboxlicos, dicarboxlicos, etc. (Luna, 2003). Estructuralmente, los cidos polihidroxicarboxlicos se consideran formados por sustitucin de los tres tomos de hidrgeno de un carbono terminal por un tomo de oxgeno y un grupo hidroxilo (Wood y Keenan, 1974). Roman y Gutirrez (1993), encontraron que las adiciones de los diferentes productos a base de PHCA provocaron incrementos en rendimiento, calidad y vida poscosecha en tres tipos de meln de manera significativa. La variedad Honey Dew present 176% de peso, 100.5% en nmeros de frutos y vida de anaquel de 33.3% ms con respecto al testigo, en tanto que las 75

variedades Cantaloupe y Crenshaw presentaron tambin un aumento con respecto al testigo del 72.3% y 36.7% ms en peso, 117.7% y 79.9% ms en nmeros de frutos, 83.3% y 88.8% ms en vida de anaquel respectivamente. Meja et al., (2003), realizaron un estudio de los PHCL e HBA en el desarrollo vegetal de granos, oleaginosas y hortalizas, obteniendo los siguientes resultados al aplicar solo PHCL: La aplicacin de PHCL en maz, chile y tomate, incrementaron la clorofila en relacin al testigo con un 26.54%, 26.92% y 15.57% respectivamente. Tambin estimularon la longitud de la raz del trigo con un 45.9%, garbanzo 73.37%, chile 53%, cebolla 79% ms que el testigo.

CASO TOMATE El objetivo fue evaluar el efecto de la adicin de cidos polihidroxicarboxlicos (PHCA) a frmulas fertilizantes puras sobre la nutricin, desarrollo y rendimiento de tomate crecido en sustrato inerte y con adicin de suelo orgnico bajo condiciones de invernadero. Ubicacin del experimento. El trabajo se llev a cabo en el invernadero del Instituto Tecnolgico de Sonora, unidad Nainari de Ciudad Obregn. La siembra se realiz en bolsas de plstico con drenaje, colocndolas completamente al azar dentro del invernadero, bajo un diseo simple al azar. Habiendo 10 repeticiones para cada uno de los tratamientos efectuados en cada uno de los cultivos. Tratamientos. T1: Aporte de nutrientes mediante programa estndar de fertilizacin. T2: Aporte de nutrientes mediante programa estndar de fertilizacin enriquecidas con cidos polihidroxicarboxlicos. T3: Aporte de nutrientes mediante programa estndar de fertilizacin enriquecidas con cidos polihidroxicarboxlicos. Sustrato adicionado con ensolve. Las fertilizaciones previstas para cada tratamiento y etapa se especifican en el Cuadro 1: Cuadro 1. Tratamientos aplicados a tomate bajo condiciones de invernadero. Tratamiento Etapa 1 0-30das trasplante T1 T2 15-30-15 (standard) 15-30-15 + 1.5 Etapa 2 post 30-60 trasplante FEP (standard) % FEP +1.0% PHCA das Etapa 3 post 60-120daspost trasplante FEP (standard) FEP + 0.5% PHCA 76

PHCA T3 Ensolve 15-30-15 PHCA FEP = Frmula especial a pedido para etapa 2 para tomate + 1.5 % FEP + 1.0% PHCA FEP + 0.5% PHCA

Adems se aplicaron micronutrientes a razn de 50,100 y 200 g/Ha por da en el primer, segundo y meses subsecuentes respectivamente. Variables evaluadas. 1. Desarrollo vegetativo a) Altura de planta: Con cinta mtrica se midi la altura de la planta desde la base del tallo hasta el punto de crecimiento ms alto, cada cinco das desde el trasplante. b) Grosor de tallo: Con vernier se tomo la lectura en la parte media del tallo de la planta, quincenalmente desde el trasplante. 2. Extraccin de Nutrientes: Para evaluar estas variables se extrajo una planta completa por unidad experimental a los 40, 80 y 120 das despus del trasplante. a) Peso de materia seca: Cada planta se secciono en hojas, tallos, raz y fructificaciones y se colocaron en bolsas de papel, independientes y etiquetadas posteriormente se secaron en la estufa a 60C hasta peso constante. Finalmente se procedi a pesar cada rgano en balanza analtica. b) Contenido nutricional: A la muestra seca compuesta de cada planta (homogenizada de los diversos rganos) se le realizo un anlisis nutricional completo de acuerdo a la tcnica instrumental aceptada para cada nutriente. 3. Variables de rendimiento: Para evaluar esta variable se cosecharan las plantas de cada unidad experimental registrndose
a) Rendimiento total: Se contar el nmero de frutos y se obtendr el peso de la produccin de cada unidad experimental.

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RESULTADOS Y DISCUSIN

Tasa Relativa de Crecimiento. Se evalu la tasa relativa de crecimiento, aunque no presento diferencia significativa estadsticamente, la parte area de la planta se vio favorecida en tamao con el tratamiento 3, que corresponde a la adicin de cidos polihidroxicarboxilicos y el ensolve con una tasa relativa de crecimiento de ms de 2 cm por da (Figura 1), seguido este, por el tratamiento 2. Ambos tratamientos estn por encima del testigo el cual apenas rebasa el 1.5 cm por da.

2,5

Tasa Relativa de Crecimiento (cm d-1)

1,5

0,5

0 1 2 3

Tratamientos

Figura 1. Tasa relativa de crecimiento de tomate en respuesta a la aplicacin de los 3 diferentes tratamientos a los 100 das.

Esto corresponde a lo reportado en otros trabajos realizados con cidos polihidroxicarboxilicos, los cuales muestran una mayor cantidad de biomasa generada con este tratamiento. Romn et al., 1998, encontraron resultados similares en meln, en donde el tratamiento con cidos polihidroxicarboxilicos, presento una tasa relativa de crecimiento por encima del testigo. Grosor de Tallo. Con respecto a este parmetro el tratamiento 2, correspondiente a la adicin de cido polihidroxicarboxilico, se mostr por encima de los dems tratamientos, con una diferencia altamente significativa a los 75 das, mientras que el testigo y tratamiento 3 78

presentaron valores estadsticamente iguales. No obstante, en los primeros 60 das despus del transplante, el tratamiento con una fertilizacin estndar (testigo) mostr diferencia altamente significativa, con ms de 0.1 cm que los otros tratamientos (Figura 2).

1,4

a b b

1,2

Grosor de Tallo (cm)

a
1

b b
45 dias 60 dias 75 dias

0,8

0,6

113 dias 128 dias

0,4

0,2

0 1 2 3

Tratamientos

Figura 2. Medicin de grosor de tallo de tomate en respuesta a la aplicacin en los tres tratamientos.

Peso de materia seca. Aunque a los 60 das el tratamiento con la fertilizacin estndar (testigo) se presento levemente por encima de los dems, a partir de los 120 das despus del transplante, el tratamiento con cidos polihidroxicarboxilicos, despunto hasta llegar a los 900 g a los 160 das. Esto puede atribuirse a que en el arranque del cultivo, la planta no requiere de gran cantidad de elementos, sin embargo, a partir del inicio de la floracin se requiere de un extra de nutrientes, para poder alcanzar el potencial gentico del material. Segn lo reportado en investigaciones anteriores por Luna (2003), reportan que la adicin de PHCA, favorece la absorcin de una mayor cantidad de nutrientes, y esto se traduce por lo tanto en plantas con mayor material vegetal (Figura 3).

79

1000

900

800

Peso Seco (g)

700

600

80 dias 120 dias 160 dias

500

400

300

200

100

0 1 2 3

Tratamientos Figura 3. Influencia de la adicin de PHCA y ensolve en el peso seco total de tomate en respuesta a la aplicacin de cada tratamiento.

Peso Seco de Hoja. Este parmetro se vio favorecido mayormente a los 160 das en el tratamiento con PHCA y ensolve, aunque, el tratamiento que contena solo PHCA, tambin se mostr pro encima del testigo (Fig. 4). La adicin de mejoradores y cidos orgnicos favorece la mayor absorcin de nutrientes por las races y esto lleva a una mayor cantidad de fotosintatos por parte de la planta, lo cual se ve reflejado en el rea foliar. Esto corresponde con lo reportado por Meja (2003). El rea foliar, se ve incrementada en un 88.18% en trigo, 48.68% en maz, 196.13% en garbanzo 15% en chile, 20% en tomate y un 68% en cebolla comparado con el testigo.

80

160

140

Peso Seco Hoja (Gm)

120

100

80 dias
80

120 dias 160 dias

60

40

20

0 1 2 3

Tratamientos Figura 4. Influencia de la adicin de PHCA y ensolve, sobre el peso seco de la hoja a los 80, 120 y 160 das despus del transplante del tomate.

140

120

Peso Seco Tallo (g)

100

80

80 dias 120 dias 160 dias

60

40

20

0 1 2 3

Tratamientos

Figura 5. Influencia de la adicin de PHCA y ensolve, sobre el peso seco de la tallo, a los 80, 120 y 160 das despus del trasplante del tomate.

Peso Seco Tallo. En esta variable no se mostr diferencias significativas entre tratamientos, sin embargo, hay que mencionar que a los 120 das el tratamiento 1 se presento por encima del tratamiento 2 y 3, sin embargo las mediciones a los 160 das, los tres tratamientos, dieron 81

valores similares, lo que se traduce en que hasta en la etapa de produccin de fruto, las plantas tratadas con ensolve y cidos polihidroxicarboxilicos, engrosaron sus tallos, y el testigo mantuvo un engrosamiento paulatino. Peso Seco Raz. La raz report un mayor peso seco en los tratamientos a los cuales se les adicion PHCA, esto coincide con lo reportado por Meja, 2003: La absorcin de nutrimentos por la raz se incrementa al aportar fuentes proveedoras de H+ que exudan y se intercambian con los cationes de la solucin del suelo y se enlazan con los radicales carboxlicos, que a su vez alteran la estructura de las membrana ocasionando una mayor apertura de la misma y facilitndose su entrada (Fig. 6). En las plantas tratadas con cidos orgnicos y ensolve, se generaron races de mayor tamao, aunque esto se marco notoriamente en las etapas maduras de la planta, lo cual sugiere que la adicin de estos tratamientos produjo la absorcin de nutrientes en mayor escala en la edad adulta de la plantas (Fig. 6).

450

400

Peso Seco Raiz (g)

350

300

250

80 dias 120 dias

200

160 dias
150

100

50

0 1 2 3

Tratamientos

Figura 6. Influencia de la adicin de PHCA y ensolve en el peso seco de la raz, a los 80, 120 y 160 das despus del transplante del tomate.

Contenido Nutrimental a los 80 das. Con respecto a los macro nutrimentos, estos se reportan en porcentaje en peso y los micro nutrimentos, se reportan en mg/Kg.El contenido de nitrgeno para el tratamiento 3 que corresponde a la adicin de cidos polihidroxicarboxilicos y ensolve present un nivel mayor, seguido por el tratamiento 1 y finalmente el tratamiento 2. En cuanto al de fsforo el tratamiento 2 y 3 presentaron mayor

82

cantidad que el testigo. Esto se explica porque los cidos polihidroxicarboxilicos regulan el pH de la rizosfera, en condiciones adecuadas para la absorcin de este elemento (Fg. 7).

Macronutrimentos 80 dias (%)

Nitrogeno (N) fosforo (P) Potasio (K) Calcio (Ca) Magnesio (Mg)

0 1 2 3

Tratamientos

Figura 7. Contenido de macro elementos, a los 80 das despus del transplante del tomate.

El caso similar con el fsforo lo presenta el potasio, ya que tratamiento 3 y tratamiento 2 encuentran muy por encima del testigo con valores de 4.5 % y 4.9 % respectivamente. Mientras que el tratamiento 1 pasa ligeramente el 3% (Fg. 7). Aunque el nivel de calcio en los tres tramientos no muestras mucha diferencia es importante mencionar que el tratamiento 3, esta por encima, seguido por el tratamiento 2 y finalmente el testigo (Fg. 7). El contenido de microelementos a los 80 das despus del transplante tuvo un comportamiento muy parecido en todos los elementos, siendo el tratamiento 3 el de mayores valores en fierro, cobre, manganeso y zinc, el segundo mejor tratamiento fue el 2, y finalmente el tratamiento1 (testigo) (Fg. 8).

83

Micronutrimentos 80 dias (ppm)

200

180

160

140

120

Fierro (Fe) Cobre (Cu)

100

Manganeso (Zn)
80

Zinc (Zn)
60

40

20

0 1 2 3

Tratamientos

Figura 8. Contenido de micro elementos, a los 80 das despus del transplante del tomate.

Contenido Nutrimental a los 120 das. En esta etapa que corresponde a la produccin el testigo mostr un mayor nivel de nitrgeno con 4% de este nutriente, mientras que el tratamiento 2 y 3 pasaron ligeramente el 3% (Fig. 9). Bowen y Zapata (1990), encontraron que la eficiencia del uso de nitrgeno en las plantas vara de acuerdo a los tratamientos que se le den a la misma. De este modo, los cidos carboxlicos aadidos, ayudaron a la planta a utilizar el nitrgeno para una mayor produccin, caso contrario se observ en el testigo en donde el nutriente estaba presente ms no la cantidad de fruta producida. Como era de esperarse y al igual que en el anlisis para fsforo y potasio de los 80 das despus del transplante, aqu la absorcin de fsforo fue mayor en el tratamiento 3 y 2, esto se debe como ya se explico a la adicin de cidos polihidroxicarboxilicos. (Fig. 9). Marschner (2003), explica que an cuando el fsforo y el calcio sean minerales de poca movilidad, con la acidificacin, la rizosfera alcanza un pH justo para la absorcin de estos. En el anlisis de micro nutrimentos, no se encontr amplia diferencia entre los tratamientos, sin embargo hay que comentar que al igual que el la etapa de 80 das despus del transplante, el de mayor absorcin de fierro (Fe), manganeso (Mn), cobre (Cu) y zinc (Zn), fue el tratamiento 3, seguido por el 2 y finalmente el 1 (fig. 10).

84

Macronutrimentos 120 dias (%)

Nitrogeno (N)
4

fosforo (P) Potasio (K)

Calcio (Ca) Magnesio (Mg)

0 1 2 3

Tratamientos

Figura 9. Contenido de macro elementos, a los 120 das despus del transplante del tomate.

Micronutrimentos 120 dias (ppm)

200

180

160

140

120

Fierro (Fe) Cobre (Cu)

100

Manganeso (Zn)
80

Zinc (Zn)

60

40

20

0 1 2 3

Tratamientos

Figura 10. Contenido de micro elementos, a los 120 das despus del transplante del tomate.

85

Contenido Nutrimental a los 160 das. En esta etapa el contenido de nitrgeno, fsforo y potasio en los tratamientos 3 y 2, se presentaron con valores superiores al testigo, esto puede explicarse por que de manera visual, las plantas correspondientes al tratamiento 1 mostraban signos de envejecimiento, mientras que las tratadas con cidos polihidroxicarboxilicos, se observaban vigorosas y con una produccin en nmero de frutos, mayor que el testigo (Fg. 11). Esto corresponde a lo reportado por Hofer (1991), en donde la acidificacin, mantuvo a la planta absorbiendo nutrientes por ms tiempo que el testigo, presentando de esta manera, races y plantas en general ms vigorosas y productivas, por ms tiempo. Respecto a calcio y magnesio, los tratamientos se comportaron de igual manera que en los 80 y 120 das despus del trasplante, esto es, sin diferencia significativa, pero con mayor cantidad en el tratamiento 3, seguido por el 2 y finalmente el tratamiento 1 (Fig. 11).

Macronutrimentos 160 dias (%)

Nitrogeno (N)
4

fosforo (P) Potasio (K)

Calcio (Ca) Magnesio (Mg)

0 1 2 3

Tratamientos

Figura 11. Contenido de macro elementos, a los 160 das despus del transplante del tomate.

Como puede observarse en la fg. 12, el tratamiento 3 presento mayor acumulacin de manganeso (Mn) y zinc (Zn), con respecto al testigo. Mientras que el testigo no llego a los 100 ppm de manganeso y zinc, el tratamiento 2 y 3 lo sobrepasaron. En el caso del cobre los tres tratamientos mostraron la misma cantidad del metal. Cabe mencionar en este apartado que no hubo referencias bibliografas para comparar los niveles de nutricin, debido a que en este estudio se analiz, todas las partes de la planta (hojas, tallos, raz y fructificaciones) y los datos existentes son nicamente para el anlisis de hoja, pecolo o savia. 86

250

Micronutrimentos 160 dias (ppm)

200

150

Fierro (Fe) Cobre (Cu) Manganeso (Zn)

100

Zinc (Zn)

50

0 1 2 3

Tratamientos

Figura 12. Contenido de micro elementos, a los 160 das despus del transplante del tomate.

Nmero de Frutos. Con respecto al nmero de frutos en cada corte, aunque en los primeros cortes, el tratamiento con la fertilizacin estndar arroj un mayor nmero de frutos, los tratamientos con PHCA, se mostraron muy por encima del primer tratamiento en los cortes subsiguientes (Fig. 13). Esto demuestra que solo la fertilizacin mineral no explota al cien por ciento el potencial de produccin de la planta de tomate. A partir del corte nmero 4 las plantas adicionadas con cidos polihidroxicarboxilicos se presentaron hasta en 100 % por encima de testigo en el nmero de frutos producidos. Segn lo reportado por Luna (2003), al aplicar PHCA en tomate en campo, favoreci el amarre de frutos, puesto que los tratamientos con fertilizacin estndar tuvieron una perdida considerable de frutos a la cosecha.

87

60

50

corte 1 Corte 2

Numero de Frutos

40

corte 3 corte 4 corte 5

30

corte 6 corte 7
20

corte 8 corte 9
10

corte 10

0 1 2 3

Tratamientos

Figura 13. Influencia de la adicin de PHCA y ensolve en el nmero de frutos de tomate por corte.

300

250

Numero de Frutos

200

150

Total

100

50

0 1 2 3

Tratamientos

Figura 14. Influencia de la adicin de PHCA y ensolve en el nmero de frutos total de tomate por tratamiento. 88

Roman y Gutirrez (1993), encontraron que las adiciones de los diferentes productos a base de PHCA provocaron incrementos en rendimiento, calidad y vida poscosecha en tres tipos de meln de manera significativa. En el nmero total de frutos por tratamiento puede verse reflejado este efecto de manera significativa (Fig. 14).

Peso de Frutos. En las siguientes figuras se muestra el peso de frutos en cada uno de los cortes (fig. 15) y el peso de frutos en cada tratamiento (Fig. 16). Al igual que en el nmero de frutos, el peso se mostr mayor en los primeros dos cortes para el tratamiento con la fertilizacin estndar, pero despus los otros tratamientos superaron por mucho a este (Figura 15).

6000

5000

corte 1 corte 2

Peso de Frutos (g)

4000

corte 3 corte 4 corte 5

3000

corte 6 corte 7
2000

corte 8 corte 9
1000

corte 10

0 1 2 3

Tratamientos

Figura 15. Influencia de la adicin de PHCA y ensolve en el peso de frutos de tomate por corte.

Hay que hacer notar que en los cortes 7,9 y 10, cuando el testigo haba bajado se sobre manera su productividad las plantas tratadas, estuvieron en su carga mxima de fruta, mismo patrn que mostraron fsicamente cuando la plantas tratadas tenan an mucho vigor y las de testigo, presentaban signos de envejecimiento. En investigaciones anteriores se ha reportado, que la adicin de cidos polihidroxicarboxilicos promueve un mayor transporte de nutrientes en la planta, por lo tanto esto se ve reflejado en mayor nmero de frutos y ms peso en estos. 89

30000

25000

Peso de Frutos (g)

20000

15000

Total

10000

5000

0 1 2 3

Tratamientos

Figura 16. Influencia de la adicin de PHCA y ensolve en el peso de frutos de tomate total por tratamiento.

En la figura 16, se puede observar que mientras que el testigo no llego a los 2000gr en el tratamiento 3 casi alcanzo los 3000 gr y el tratamiento 2 estuvo en 2500 gr. Marschner (2003) escribi que una alta nutricin mineral, ayudada por la acidificacin del suelo, ayudara a las plantas a su mxima expresin productiva, segn las caractersticas de la variedad.

CONCLUSIONES El manejo eficiente de las diferentes fuentes de fertilizantes qumicos y el adecuado control del medio circundante de la solucin del suelo, traer por consecuencia una mejor toma y distribucin de los nutrimentos por las plantas y por ende una mejor productividad y cosecha de sus productos.

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Bowen, G.D. y F. Zapata. 1990. Efficiency in uptake and use of nitrogen by plants. In: IAEA (ed.). International symposium on the use of stable isotopes in plant nutrition, soil fertility and environmental studies. Viena, Austria. Fuentes, B., N. Bolan, R. Naidu, M.L Mora. 2006. Phosphorus in organic waste-soil systems. J. Soil Sc. Plant. Nut. 6 (2):64-83. Gupta, U., 1997. Prysiological aspect of crop nutrition and resstanse. Plant Physiol. 11:6-9. Higuera, C, G. 2003. Estudio de cido polihidroxicarboxilico en el desarrollo vital integrado en cucurbitceas en invernadero. Instituto Tecnolgico de Sonora. Mxico. Hinsinger, P. 1998. How do plant roots acquire mineral nutrients? Chemical processes involved in the rhizosphere. Adv Agr. 64: 225-265. Hofer, R.M., 1991. Root Hairs. In Plant Roots: The hidden half. Edited by Y. Waisel, A. Eshel, and U. Kafkafi. Marcel Dekker. New York. Kirby, E., Mengel K. 1967. Ionic Balance in diferente tissues of the tomatoe plant in relation to nitrate, urea or ammonium nutrition. Journal Plant Physiology. 42: 6-10 Kuhn, S. W. 2002. The kinematics of primary growth. In Plant Roots: The hidden half. Edited by Y. Waisel, A. Eshel, and U. Kafkafi. Marcel Dekker. New York. Lindsey, K. y Jones, M. 1992. Biotecnologa vegetal Agrcola. Editorial Acribia. Espaa. Luna, F, D. 2003. Evaluacin del cido saliclico y cidos polihidroxicarboxilicos sobre rendimiento y calidad poscosecha en cultiv de campo de tomate. Instituto Tecnolgico de Sonora. Mxico. Marschner, H. 2003. Mineral nutrition to higher plants. Second edition. Institute of plant nutrition. Germany. Marschner, H., Rmheld, V., y Ossenber, N. 1982. Rapid method for measuring changes in pH and reducing processes along roots of intact plants. Z. Pflanzenphysiol Bd. 105: 407416. Meja, A. I. E. 2003. Estudio de los cidos polihidroxicarboxlicos e hidroxibenzico en el desarrollo vegetal integrado de granos, oleaginosas y hortalizas. Instituto Tecnologico de Sonora. Mxico. Muoz, J. y J. Castellanos. 2003 Manual de Produccin hortcola en invernadero. Impresiones profesionales del centro s. A de C.V. Guanajuato, Mxico. Navarro, S. y Navarro, G. 2003. Qumica Agrcola. Ed. Mundi-Prensa. Madrid. Pagliai, M., Vignozzi, N., Pellegrini, S., 2004. Soil structure and the effect of management practices. Soil Till. 79:131-143. Pozo, M.J., Cordier, C., Dumas-Gaudot, E., Gianinazzi, S., Barea, J.M., Azcn-Aguilar, C., 2002. Localized versus systemic effect of arbuscular mycorrhizal fungi on defence responses to Phytophthora infection in tomato plants. J.Exp. 53: 525-534.

91

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USO DE BIOSOLIDOS Y ESTIRCOLES EN LA NUTRICIN VEGETAL

Juan Pedro Flores Mrgez

Profesor-Investigador en Suelos y Estadstica, Universidad Autnoma de Ciudad Jurez (www.uacj.mx), Instituto de Ciencias Biomdicas, Programa de Biologa, Laboratorio de Ciencias Ambientales (juflores@uacj.mx). Tel.656-285-8592, FAX: 656688-1886.

93

RESUMEN Los abonos orgnicos como bioslidos y estircoles aportan macro y micronutrimentos al suelo que adems de contribuir sustancialmente a la nutricin de cultivos agrcolas, tambin pueden mejorar las propiedades del suelo cuando se aplican en dosis apropiadas. En Mxico existe un potencial de produccin de estos abonos para beneficiar la superficie cultivable con estircoles y biosolidos. El problema radica en que los abonos orgnicos son aplicados al suelo sin conocimiento de sus contenidos nutrimentales y dems factores que influyen en el clculo de una dosis que permita suministrar las necesidades nutrimentales sin contaminacin por nitratos las aguas superficiales y profundas. La mayora de las investigaciones se han enfocado a N y se ha desarrollado la metodologa de resinas de intercambio inico para el clculo de la tasa de mineralizacin de N orgnico. El objetivo de este documento consiste en describir la metodologa de resinas sintticas y el modelo de clculo para determinar la tasa de mineralizacin de N orgnico de estircol y bioslidos para una nutricin de cultivos adecuada. El mtodo de resinas consiste en el uso de cilindros de aluminio de 5 x 15 cm los cuales se llenan con la mezcla de suelo y estircol biosolidos de acuerdo a la dosis a evaluar. Las resinas utilizadas son: aninica (ASB-1) y catinica (C-249) (www.ionac.com/ionexchange/tables.htm). Las bolsas con resinas son repuestas por bolsas con resina nueva antes de cada riego y los tubos se colocan de nuevo en el mismo orificio del suelo para medir in situ el N mineralizado en condiciones de campo. Los tubos permanecen abiertos de la parte superior para permitir el flujo libre de agua y gases, de sta manera los productos de la mineralizacin se movern a travs de la columna de suelo y son retenidos en las resinas. El N inorgnico se extrae con KCl 2 N y se puede determinar por la tcnica de arrastre de vapor. Una vez con los datos de tiempo (semanas) y concentracin de N inorgnico (mg/kg) se calculan los parmetros de una ecuacin exponencial: N m = N o (1 e kt ) . La tasa constante de mineralizacin (k) es proporcional a la cantidad de N potencialmente mineralizable ( No ) para un perodo especfico de tiempo (t). La solucin de la ecuacin se logra utilizando un mtodo iterativos de mnimos cuadrados no lineal, de acuerdo a una iteracin computacional de Gauss-Newton, as se estiman los parmetros para el modelo de regresin no lineal, Proc NLIN, SAS Institute Inc. Los avances de investigacin en el Norte de Chihuahua, Mxico, indican que la combinacin de las tcnicas de resinas sintticas y mtodo de la diferencia son promisorios para determinar el porcentaje de mineralizacin de N orgnico, el cul de manera general en biosolidos estabilizados con cal y estircol de bovino lechero ha variado de 28 a 32% durante el ciclo agrcola primaveraverano. La comparacin de los resultados del mtodo de las resinas y de la diferencia permite obtener una mejor estimacin del porcentaje de N orgnico mineralizado durante el ciclo de cultivo, principalmente en suelos irrigados con aguas negras. La aplicacin de dosis apropiadas de estircoles y biosolidos en suelos agrcolas requiere del conocimiento de la tasa de descomposicin de N durante el ciclo de cultivo para las condiciones edafoclimticas, tipos de abonos orgnicos y calidad del agua de riego Palabras clave: Estircol, Bioslido, Nitrgeno, Mineralizacin, Modelo Exponencial.

94

INTRODUCCIN La produccin de abonos orgnicos en Mxico se ha incrementado como resultado del crecimiento poblacional y de la ganadera. La produccin estimada de biosolidos es de 2.6 millones de toneladas por ao en peso hmedo (70%) con base en la capacidad instalada de tratamiento de agua residual a nivel nacional, lo cual podra beneficiar 52 mil ha de suelos agrcolas por ao (Flores, 2003). Mientras que la estimacin de estircol de ganado bovino de leche y carne es de 3.8 millones de toneladas por ao, con base en 34 kg de estircol por da (Salazar et al., 2003) y una poblacin de 30 millones de vientres (SAGARPA, 2007). El problema potencial que se tiene con estos abonos orgnicos es que una aplicacin excesiva puede causar contaminacin por nitratos (NO3) en aguas superficiales y profundas, aunado a esto el uso de agua residuales en agricultura ha ocasionado altas aportaciones de Nitrgeno (N), de tal manera que este nutriente ha sido el factor problema que ha llevado a establecer legislacin para ambos abonos (Ritter y Shirmohammadi, 2001). La utilizacin de estircol bovino, compostas y biosolidos, entre otros, es una prctica comn en los sistemas de produccin agrcola que tienen la posibilidad de disponer de estos, sin embargo los agricultores carecen de informacin adecuada para su aplicacin ptima, es decir la problemtica se enfoca a que los estircoles siguen aplicndose al tanteo, mientras que los biosolidos tienen restricciones legales y tampoco se cuenta con las tecnologas para su aplicacin apropiada en suelos agrcolas. La Figura 1 muestra una de las principales plantas de tratamiento de agua residual (PTAR) en Ciudad Jurez, Chihuahua, con una capacidad de 2 m3 s-1 y en la Figura 2 se indican los biosolidos estabilizados con cal, los cuales son enviados a un terreno para su secado y posteriormente al relleno sanitario municipal. Aunque en algunas ciudades de Mxico como este caso el destino actual de los bioslidos es el confinamiento en rellenos sanitarios (Flores, 2003), sin embargo en otros Pases es comn su aplicacin en suelos agrcolas, pastizales, bosques o elaboracin de compostas (USEPA, 1999). Por ejemplo, 98% de los estircoles y 75% de los bioslidos generados en los Estados Unidos son aplicados en suelos agrcolas (Lindemann, 2004), mientras que los materiales orgnicos ocupan el 40% del nitrgeno (N) utilizado en la produccin agrcola. La aplicacin apropiada de abonos orgnicos en suelos agrcolas aumenta como medio de disposicin, reciclaje de nutrientes y conservacin del agua. Aunque los bioslidos y estircoles son materiales muy distintos qumica y fsicamente, tienen en comn que su utilizacin apropiada como fertilizantes orgnicos y mejoradores de suelos depende del porcentaje de descomposicin de sus estructuras orgnicas (Jarvis et al., 1996; Flores, 2001; Flores et al., 2002). Es decir, la tasa de mineralizacin del N orgnico es la clave para el clculo de dosis apropiadas sin afectar el ambiente (Stanford y Smith, 1972).

95

Figura 1. Planta de tratamiento de agua residual Norte de Ciudad Jurez, Chihuahua, Mxico, con tratamiento primario avanzado.

Figura 2. Biosolidos estabilizados con cal (20%) generados en el tratamiento de agua domstica e industrial.

96

Los biosolidos son los residuos slidos generados en el tratamiento de agua negra o residual, de tal manera que el aumento en el consumo de agua y la reduccin de su disponibilidad en las principales zonas urbanas y rurales del Pas hacen patente la necesidad de tratar el agua negra o residual para lograr su reso y reducir la contaminacin ambiental. En la Repblica Mexicana se cuenta con 1132 plantas de tratamiento de aguas residuales (PTAR) municipales hasta el ao 2001, con una capacidad instalada total de 80,622 litros por segundo (L/s) y un caudal tratado de 50,809 L/s, mientras que la capacidad instalada de PTAR industriales es de 41,909 L/s y un caudal tratado de 25,352 L/s (CNA, 2003). El total de agua tratada es de 2,400 millones de m3 anuales a nivel nacional, lo cul muestra que este recurso hdrico y los slidos generados en su tratamiento adquieren relevancia social y econmica principalmente para el sector agropecuario y forestal. Con base en el volumen de agua anterior y asumiendo 0.2 g de material slido seco por litro de agua tratada (Jimnez, et al., 1998), la produccin estimada de slidos residuales es de 480,363 toneladas por ao, bien en base hmedo (70%) es de 1.6 millones de toneladas. De acuerdo con Flores (2003), una dosis promedio de 50 t ha-1 alcanzara para aplicarse en 32,280 ha, bien para 51,981 ha si se considera la capacidad instalada de tratamiento de agua nacional que generara 2.6 millones de toneladas de slidos en base hmedo. El problema potencial que se tiene tanto con los biosolidos como con los estircoles es que una aplicacin excesiva puede causar contaminacin de aguas superficiales y profundas, aunado a esto el uso de agua residuales en agricultura ha ocasionado altas aportaciones de N (Flores, 2006), de tal manera que este nutriente ha sido el factor problema que ha llevado a establecer legislacin para ambos abonos orgnicos en Los Estados Unidos (Ritter y Shirmohammadi, 2001). El destino actual generalizado de los bioslidos en algunas ciudades de Mxico es el confinamiento en rellenos sanitarios, tal es el caso de Ciudad Jurez, Chihuahua, donde se generan 28,000 t por ao en base a peso seco, lo cual representa el 5.8% de la produccin nacional (Flores et al., 2006). Sin embargo, la aplicacin de biosolidos en suelos agrcolas, pastizales, bosques o elaboracin de compostas es comn en otros pases (US-EPA, 1999). Por ejemplo, 98% de los estircoles y 75% de los bioslidos generados en los Estados Unidos son aplicados en suelos agrcolas (Lindemann, 2004), mientras que los materiales orgnicos ocupan el 40% del nitrgeno (N) utilizado en la produccin agrcola en Los Estados Unidos de Amrica (Havlin et al., 1999). La aplicacin apropiada de abonos orgnicos en suelos agrcolas aumenta como medio de disposicin, reciclaje de nutrientes y conservacin del agua (Cameron et al., 1996). Aunque los bioslidos y estircoles son materiales muy distintos qumica y fsicamente (Flores et al., 2001; Figueroa et al., 2000), tienen en comn que su utilizacin apropiada como fertilizantes orgnicos y mejoradores del suelo depende del porcentaje de descomposicin de sus estructuras orgnicas. Es decir, la tasa de mineralizacin del N orgnico es la clave para el clculo de dosis apropiadas sin afectar el ambiente (Flores, 2001; Jarvis et al., 1996; Stanford y Smith, 1972; Pratt et al., 1973). El reciclaje apropiado de los nutrientes contenidos en los abonos orgnicos tales como estircoles, compostas y bioslidos, entre otros, a travs de su incorporacin en suelos agrcolas requiere del conocimiento del porcentaje de descomposicin o tambin llamada tasa de mineralizacin. Este porcentaje debe ser estimado para diferentes condiciones 97

edficas y agro-ecolgicas, de tal manera que puedan utilizarse de apoyo en el clculo de dosis del abono orgnico de inters. Una subestimacin de la dosis puede ocasionar deficiencia de nutrientes por el cultivo y una reduccin en rendimiento y calidad del producto. Por el contrario, una sobre-estimacin de la dosis conduce a exceso de nutrientes, toxicidad al cultivo y contaminacin del suelo y agua (Flores, 2001; Flores et al., 2006). En vista de que la mayora del N en los residuos orgnicos est en forma orgnica, se considera necesario la realizacin de trabajos de investigacin para determinar la tasa de mineralizacin y predecir la disponibilidad de nutrientes, particularmente N para un uso adecuado y eficiente en la produccin agropecuaria. Por tal razn, se requiere informacin de campo para predecir la cantidad de N mineralizado en funcin del tipo de residuo, potencial de agua del suelo y tipo de suelo para diferentes regiones de Mxico. El presente documento tiene como objetivo realizar una descripcin de los factores que afectan la tasa de mineralizacin de N, describir la metodologa de resinas sintticas y presentar avances de investigacin obtenidos en el Norte de Mxico y sur de los Estados Unidos.

FACTORES QUE AFECTAN LA TASA DE MINERALIZACIN La informacin necesaria para el clculo de una dosis de abono orgnico incluye la caracterizacin del sitio, conocimiento del suelo, aspectos nutricionales del cultivo, caractersticas fsico-qumicas del abono y considerar otras fuentes de nutrientes que pudieran ingresar al sistema suelo-planta de inters, tales como el riego con aguas residuales ricas en nutrientes (Cogger y Sullivan, 1999). Con respecto al sitio se requiere conocer la pendiente, reas habitacionales cercanas, aplicaciones previas de abonos orgnicos, rotacin de cultivos, calidad del agua de riego o sistema agrcola de temporal, cultivo a sembrar (gramnea o leguminosa), rendimiento potencial del sitio a travs de informacin del productor y demanda nutrimental del cultivo asociada a un potencial productivo mediante referencias bibliogrficas existentes. En relacin al suelo, los parmetros a considerar son la textura, pH, sales solubles, materia orgnica, CIC, contenido de nutrientes, entre otros. Por ejemplo, el conocimiento de las Series de suelo de una regin es til para mejorar el uso de abonos orgnicos mediante la obtencin de tasas de mineralizacin por Serie de suelo, tal es el caso del Valle de Jurez, Chihuahua (Figura 3) donde se tienen una heterogeneidad muy marcada en tipo de suelos dado su origen aluvial (CIEPS, 1970). La informacin a considerar del abono orgnico puede incluir el tipo de abono: estircol, composta, bioslido, abono verde o residuo de cosecha; la condicin del material: fresco, grado de descomposicin, textura, contenido de nutrientes en formas orgnicas e inorgnicas, relacin carbono-nitrgeno (C:N), contenido de agua y la taza de mineralizacin al menos para el primer ao (Jarvis et al., 1996). Otras fuentes a considerar son la concentracin de nutrientes en forma nativa en el suelo, nutrientes presentes en el agua de riego a utilizar, efecto residual de abonos orgnicos previos, posible utilizacin de un fertilizante qumico como de arranque para el cultivo, aplicacin foliar, es decir un marco de referencia del sitio a beneficiar con abonos orgnicos.

98

Figura 3. Series de suelo en una porcin del Valle de Jurez, Chihuahua (CIEPS, 1970). Ejemplo, 23 en amarillo significa la Serie Jurez y textura arcillo-arenoso; 36 en rojo significa Serie Caseta y textura franco-arcillo-arenoso.

La interpretacin de los factores mencionados para el clculo de una dosis adecuada agronmica de estircol o bioslidos requiere del entendimiento del proceso de descomposicin de los abonos orgnicos en los suelos agrcolas (Flores, 2001). La descomposicin de abonos orgnicos es un concepto general que incluye una secuencia completa de procesos muy detallados en los cuales los organismos del suelo utilizan los compuestos orgnicos como fuente de alimento (Ross, 1989). De acuerdo con la fuente de energa principal, los organismos vivos se clasifican en fototrpicos, aquellos que utilizan la radiacin solar, quimiotrficos los que utilizan la energa liberada de oxidaciones qumicas. Adems, los organismos pueden ser subdivididos con base en su fuente de carbono principal en auttrofos los cules usan el carbono inorgnico (CO2) y hetertrofos los cuales utilizan compuestos de carbono orgnico tales como carbohidratos (Figura 4).

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Radiacin Solar

CO2

Fotosntesis Foto-auttrofos (plantas, algas) Absorcin radicular Respiracin Aerbica Quimio-heterotrofos (Invertebrados del suelo, bacterias)
Nutrientes simples (NH4+ , NO3-, SO42-, H2PO42Ca2+ , Mg2+ , K+ , Na+
Compuestos Orgnicos Complejos en el suelo (CHOs, proteinas, Lignina)

Ingesta

Compuestos excretados

Compuestos orgnicos

Figura 4. Relacin entre organismos quimio-heterotrfos ecosistema suelo-planta (adaptado de Ross, 1989).

foto-autotrfos

en

Los organismos responsables principalmente de la descomposicin de la materia orgnica del suelo son quimio-hetertrofos que incluye a todos los animales vertebrados e invertebrados, principalmente bacterias y hongos, los cuales fraccionan las molculas orgnicas complejas para obtener ambos energa y nutrientes simples que requieren para construir sus propios tejidos corporales (Tate, 1995). Los nutrientes excretados despus de la digestin quimo-heterotrfica pueden ser absorbidos por los foto-autotrfos (plantas superiores y algas). Dentro del ciclo del N, la mineralizacin se define como el proceso de transformacin de N orgnico a N mineral. Los subprocesos son la amonificacin y la nitrificacin. El primero consiste en la transformacin de N orgnico (protenas, cidos nucleicos) a N amoniacal (N-NH4 ) y el segundo es la oxidacin de N amoniacal a N-ntrico (N-NO3 ) donde participan dos especies de bacterias: nitrosomonas y nitrobacter. El otro proceso consiste en la inmovilizacin del N mineral del suelo al ser transformado a tejido microbiano, sin embargo ambos procesos ocurren simultneamente en el suelo (Brady y 100

Weil, 1996; Havlin et al, 1999). La medicin de la mineralizacin neta de N requiere tiempo para cuantificar la proporcin de N transformado o tasa de mineralizacin (Figura 5). Pratt et al. (1973) mencionaron que la tasa de mineralizacin es la clave para la aplicacin de cualquier material orgnico al suelo. Los factores que afectan la mineralizacin pueden ser ambientales, las caractersticas del residuo orgnico y de manejo del mismo. Entre los factores ambientales destacan el tipo de suelo, aeracin, temperatura y potencial de agua del suelo, tipo y diversidad de microorganismos. Las condiciones ptimas para una mineralizacin adecuada incluye: suelo franco, 30 a 35 oC temperatura del suelo, -33 a -10 KPa de potencial de agua del suelo (80% del espacio poroso est con agua), 15 a 20% de aeracin (oxgeno), pH de 6 a 8 y diversidad de microorganismos del suelo (Stanford y Epstein, 1973; Cassman y Munns, 1980; Tate, 1995). La disponibilidad de agua en el suelo afecta el proceso de descomposicin porque est directamente relacionado con el movimiento de los microorganismos, nutrientes, exudados, toxinas y difusin de gases en la solucin del suelo (Papendick y Campbell, 1981; Jarvis et al., 1996; Sierra, 1997; Flores, 2001).

Proceso de Descomposicin de la Materia Orgnica

Abonos Orgnicos
Factores que controlan El proceso:
Tipo y Tamao de La poblacin microbial Calidad y Cantidad Del substrato Relacin C:N Races de plantas y Exudados Tipo de suelo Humedad, temperatura, areacin, pH, textura, y prof.de suelo Nutrientes presentes Tipo de labranza Contaminantes orgnicos e inorgnicos

Materia Orgnica Nativa en el Suelo

Micro-organismos del Suelo

Mineralizacin Inmobilizacin

Plantas

N2, N2O NO3NO2-

Nutrientes Inorgnicos (CO2- , NH4+ , SO42- , PO4-)

Arcillas

101

Figura 5. Proceso de descomposicin de la materia orgnica con nfasis en nitrgeno y algunos factores que controlan el proceso.

Con respecto a las caractersticas ptimas del abono orgnico para favorecer la mineralizacin, ste debe ser de partculas finas, fresco, mnimo grado de digestin, 40 a 50% humedad y relacin C:N menor que 25:1, mientras que los factores de manejo incluyen una nivelacin del terreno, aplicacin al voleo triturado lo que permite una distribucin ms homognea en el terreno y agua de buena calidad (Lindemann, 2004). De acuerdo con Castellanos et al. (2000) la mineralizacin es mayor en suelos arenosos que en suelos arcillosos, mientras que residuos con alta relacin C:N (> 30:1) presentan una tasa de mineralizacin baja (residuos carbonceos de cereales) pero cuando el contenido de ligninas y polifenoles del residuo es alto la mineralizacin es baja. Una mayor velocidad de mineralizacin se presenta en residuos de leguminosas las cuales tienen una baja relacin C:N (< 20:1), es decir ricos en N.

Mineralizacin de N. Algunas metodologas han sido desarrolladas en condiciones de laboratorio (in vitro), otras en campo (in situ) y mtodos de la diferencia que consideran el N orgnico (total) antes y despus de la aplicacin de un residuo orgnico (Castellanos y Pratt, 1981; Dou et al. 1996; Flores, 1988; Cabrera, 1993). Los mtodos de laboratorio se caracterizan por utilizar incubadoras donde las condiciones de humedad y temperatura son controladas, utilizan substratos como arena, soluciones nutritivas, perodos de incubacin fijos y los datos pueden ser menos variables que en campo (Flores, 1988). Por el contrario, las metodologas de campo generan mayor variabilidad de informacin por estar sujetas a los cambios ambientales y perodos variables de incubacin (Flores, 2001; Sierra, 1990).

Existe un reducido nmero de estudios que han evaluado la mineralizacin gruesa o neta de N directamente en condiciones de campo en suelos agrcolas. Algunas tcnicas han propuesto la evaluacin de la disponibilidad de N en el suelo tales como el mtodo de la bolsa enterrada (Eno, 1960). Esta tcnica ha sido reportada que tiene potencial para monitorear la disponibilidad de N durante la estaciones de cultivo y para la estimacin del N absorbido por los cultivos (Westermann y Crothers, 1980).

Binkley y Matson (1983) encontraron que la tcnica de bolsa con resinas de intercambio inico result til en la prediccin de la disponibilidad de N. Este mtodo tiene las ventajas de sensibilidad a los factores del sitio, tales como humedad y temperatura del suelo, los cuales fluctan a travs del ao e influencian en la mineralizacin de N. El mtodo que utiliza una fraccin de suelo y resinas de intercambio inico fue desarrollado por Distefano y Gholz (1986). Esta metodologa se ha utilizado en algunos estudios referentes a la disponibilidad de N en condiciones de campo y tiene varias ventajas 102

con respecto a otros mtodos (Hart y Firestone, 1989; Rouppet, 1994; Hook y Burke, 1995; Kolberg et al., 1997; Flores, 2001; Flores et al., 2006). Las Figuras 6 y 7 muestran las resinas de intercambio inico. El mtodo de resinas permite una obtencin directa del lixiviado de N inorgnico (NO3- + NO2- + NH4+ ) en el flujo vertical. La fraccin de suelo utilizada est sujeta a los cambios de humedad y temperatura del suelo, adems existe un intercambio natural de gases en la solucin del suelo. Por lo tanto, este mtodo es sensitivo a condiciones ambientales y refleja las condiciones reales durante la medicin del N inorgnico como resultado del proceso de descomposicin de la materia orgnica (Kjonaas, 1999). Algunas desventajas del mtodo de resinas de intercambio inico consisten en que el contacto hidrulico entre la resina y el suelo pueden alterar el flujo de agua como resultado de la discontinuidad textural y efecto de gravedad (Figura 8). Esta condicin puede afectar la eficiencia de retencin de las resinas bien no cuantificar el N inorgnico total (Schnabel, 1983). Adems, Giblin et al. (1994) reportaron que las resinas tiene baja acumulacin de N en perodos largos de tiempo comparado a perodos cortos de incubacin, lo cul indica que la eficiencia de absorcin depende del tiempo.

Figura 6. Preparacin de la mezcla de resinas de intercambio inico (cationica y anionica)

Figura 7. Llenado de bolsas de nylon con resinas.

103

Figura 8. Cilindro utilizado en el mtodo de incubacin con resinas de intercambio inico (Poncio, 2007).

Rouppet et al. (1994) concluyeron que el mtodo de resinas de intercambio inico in situ fue aceptable para medir la mineralizacin de N en condiciones de campo, pero se requiere de muchas repeticiones para obtener mayor confiabilidad en las tasas de mineralizacin de N. Un nivel de alfa de 0.05 requiri de 28 a 36 muestras para obtener una precisin de 1 mg kg-1. Las caractersticas de resinas sintticas de intercambio inico (Figuras 6 y 7) utilizadas en algunos estudios de campo para evaluar la mineralizacin de N orgnico en estircoles y bioslidos se presentan en el Cuadro 1 (Flores, 2001; Flores y Corral, 2004; Flores et al., 2006).

104

Cuadro 1. Caractersticas de resinas de intercambio inico para estudios de mineralizacin de N en suelos agrcolas. Fuente: www.ionac.com/ionexchange/tables.htm Resina Tipo Forma Inica Retencin agua (%) Capacidad de Intercambio total (meq/ml) C-249 Gel cation Sodio ( Na+ ) 44 - 48 1.4 44 - 48 2.0

cido fuerte ASB-1 Gel

anin Cloro ( Cl - )

base fuerte

Qian y Schoenau (2002) realizaron una extensa revisin de las aplicaciones prcticas de las resinas de intercambio inico en investigacin con suelos agrcolas y aspectos ambientales. Algunos son extraccin secuencial de fsforo, especiacin inica en suelos, extraccin de fracciones bio-disponibles de compuestos orgnicos hidroflicos en suelos, estudios en microbiologa de suelos, medicin del suministro de nutrientes en perodos cortos, transformaciones de nutrientes en el suelo: mineralizacin- inmovilizacin, micronutrientes y toxicidad de metales en suelos, entre otros. Los resultados son altamente influenciados por las relaciones solucin/suelo/resina, tiempo de extraccin (agitacin), tipo y saturacin inica de las resinas, temperatura, mtodo para retener la resina y el mtodo utilizado para recuperar los iones adsorbidos por las resinas. El N inorgnico en las resinas puede ser extractado con KCL 2N (Flores et al., 2006) y medido mediante el mtodo de arrastre de vapor que utiliza oxido de magnesio para el N en forma de amonio y aleacin de devarda para el N en forma de nitratos (Aguilar et al., 1987; Bremner, 1996; Mulvaney, 1996). Los primeros estudios para simular la descomposicin y acumulacin de la materia orgnica en el suelo rechazaron una relacin lineal simple entre el peso del residuo o substrato orgnico remanente y el tiempo (Figura 9) Aunque sta relacin pareca funcionar para residuos frescos de fcil y rpida descomposicin, se encontr que una funcin negativa exponencial anloga a la cintica de primer orden de decaimiento para una sustancia radioactiva era ms apropiada (Figura 10). Esta ltima relacin implica la prdida de una fraccin constante de la cantidad de residuo que permanece en el suelo en lugar de la prdida de aumentos constantes de residuo en intervalos sucesivos iguales de tiempo (Ross, 1989).

105

Xt = Xo k t

Xt = cantidad del substrato orgnico residual despus de un tiempo, t.

Xo = cantidad del substrato orgnico al inicio (t = 0) t = tiempo

t
el tiempo (t).

k = tasa constante de reaccin

Figura 9. Relacin lineal entre la cantidad de un substrato orgnico residual (X) y

Xo X
Xt = Xo ek t

Xo

t
Figura 10. Relacin exponencial entre la cantidad de un substrato orgnico residual (X) y el tiempo (t). 106

De acuerdo con Alexander y Scow (1989) la mineralizacin de residuos orgnicos en el suelo sigue una cintica de primer orden que es expresada por la ecuacin:

dN = kN dt
La taza constante de mineralizacin (k) es proporcional a la cantidad de N potencialmente mineralizable (No) para un perodo especfico de tiempo (t). la Integracin de la ecuacin puede expresarse en logaritmos:

ln( No N ) = ln No

kt 2.303

Mediante el antilogaritmo de las funciones anteriores se obtiene:

Nm = No(1 e kt )

Este modelo fue propuesto por Stanford y Smith (1972) para describir la cantidad de N inorgnico acumulado (Nm) en funcin del tiempo (t). Sin embargo, Ellert y Bettany (1988) concluyeron que un modelo exponencial simple no puede describir la variacin en los patrones de mineralizacin (Figura 10). Lindemann y Crdenas (1984) encontraron que un modelo exponencial doble daba mejor ajuste que un modelo sencillo en suelos tratados con bioslidos. Posteriormente, White y Marinakis (1991) reportaron que los modelos Richards (Richards, 1959) comnmente utilizados para describir patrones de crecimiento orgnico pueden ajustar una variedad amplia de curvas de mineralizacin de N como el siguiente:

Nm = No(1 e kt )

1 (1 m )

107

Donde el parmetro m permite la flexibilidad de la curva y puede ser utilizado para comparar patrones de mineralizacin de N entre sitios y tiempo (Brown y Rothery, 1993). La solucin de la ecuacin se logra utilizando un mtodo iterativo de mnimos cuadrados no lineal, de acuerdo a una iteracin computacional de Gauss-Newton, as se estiman los parmetros (k, Noy m) para el modelo de regresin no lineal-Proc NLIN (SAS, 1997). La Figura 11 muestra algunas tendencias de N mineralizado acumulado que pueden ser ajustadas con el modelo mencionado anteriormente. Estas tendencias pueden ser causadas a diferencias en el tipo de suelo, dosis de abono orgnico, humedad del suelo y temperatura, entre otros factores que afectan el proceso de descomposicin de la materia orgnica en el suelo.

140

Nt = No (1 e k t )1 / (1 m)
120 100 80 60 40 20

Figura 11. Tendencias de mineralizacin de nitrgeno en suelos agrcolas.

Una vez preparados los cilindros con la mezcla de suelo y el sustrato orgnico (Bioslido o estircol) a la dosis de evaluacin, entonces se coloca la bolsa de nylon con la resina en la base del cilindro (Figura 12) y de esta manera quedan listos para su instalacin en campo (Figura 13).

N Mineralizado (mg / kg suelo) N Mineralizado (mg / kg suelo)

0 0 50 100 150 200 250 300

Tiempo (das)

108

Figura 12. Cilindros de aluminio llenos con la mezcla de suelo y sustrato orgnico.

Figura 13. Instalacin de cilindros en el suelo.

109

Las resinas son extractadas con KCL 2 N y se determina el N inorgnico obteniendo resultados como los que se muestran a continuacin: Ejemplo de Datos Obtenidos de N Mineralizado
Incubacin 1 N inorg. TRAT. 3 2 4 1 4 1 3 2 1 2 4 3 4 2 3 1 (mg/resin) 9,469 7,951 6,289 8,023 5,204 7,689 4,394 7,483 3,982 3,364 8,787 6,041 7,139 6,590 8,856 9,817 suelo en tubos 323,90 331,40 272,10 299,60 281,90 293,60 309,50 325,70 337,10 292,00 279,90 288,20 300,50 308,90 334,60 329,50 N inorg. (mg/kg) 29,234 23,992 23,111 26,780 18,462 26,188 14,196 22,974 11,811 11,520 31,394 20,962 23,759 21,335 26,467 29,793 Incubacin 2 N inorg. (mg/resin) 8,581 6,865 6,590 5,698 2,952 3,227 3,844 5,355 5,972 7,895 3,432 5,286 3,570 3,844 2,815 3,227 suelo en tubos 323,90 331,40 272,10 299,60 281,90 293,60 309,50 325,70 337,10 292,00 279,90 288,20 300,50 308,90 334,60 329,50 N inorg. (mg/kg) 26,493 20,715 24,220 19,018 10,471 10,989 12,421 16,440 17,717 27,036 12,263 18,341 11,879 12,445 8,412 9,792 Incubacin 3 N inorg. (mg/resin) 1,304 1,236 0,549 0,481 0,412 1,030 0,481 2,059 1,785 2,540 1,510 0,549 0,686 0,618 2,197 1,167

Esta informacin se puede analizar con el Programa Estadstico SAS (SAS Institute, 1997) para obtener los estimadores del modelo exponencial explicado anteriormente.
data Nmin; input x y1 y2 y3 y4; cards; 26 47 81 110 183 ; proc nlin best=100 method=marquardt; parms b0=0 to 2000 by 10 b1=.001 to 0.009 by .001; model y1=b0*(1-exp(-b1*x)); der.b0=1-exp(-b1*x); der.b1=b0*x*exp(-b1*x); output out=b p=y1hat r=y1resid; proc plot data=b; plot y1*x='a' y1hat*x='p' / overlay vpos=25; plot y1resid*x / vref=0 vpos=25; Proc print data=b; title1 'Tratamiento 1'; run; 16.712 39.747 50.973 57.082 60.346 14.459 39.911 53.456 62.464 66.67 30.065 54.692 65.899 73.56 76.698 30.079 52.817 70.825 78.767 82.699

110

MINERALIZACIN DE BIOSOLIDOS Y ESTIRCOLES Los resultados de mineralizacin de N han sido extremadamente variables debido a los factores ya mencionados que afectan el proceso de descomposicin de materia orgnica. Por esta razn a continuacin se muestran algunos avances de investigacin extranjeros y las experiencias obtenidas en el Norte de Mxico y Sur de los Estados Unidos. De acuerdo con la bibliografa sobre el tema, las metodologas utilizadas en el estudio de mineralizacin de N han incluido condiciones de laboratorio y campo, as como variables del tipo de suelo y su relacin con el manejo agronmico, suelos tratados con diferentes tipos de abonos orgnicos y bajo diferentes perodos de incubacin. La variacin observada en los valores de k y No ha sido muy amplia (Cuadro 2). Esto confirma la necesidad de estudios locales para generar informacin de mayor utilidad en la utilizacin de abonos orgnicos. Es importante aclarar que la cantidad de N mineralizado es calculada con ambos parmetros (k y No) utilizando el modelo exponencial.

Cuadro 2. Valores de No and k reportados para suelos agrcolas y abonos orgnicos (Flores, 2001). Condicin Suelo agrcola Estircol bovino Suelo agrola Estircol bovino Suelo agrcola Composta (bovino) Suelo agrcola 0.04-0.26 85-364 Broersma et al. (1996) k (mg sem-1) 0.044-0.069 0.039-0.054 0.083-0.18 0.05 0.024-0.034 0.003 No(mg kg-1) np 255-429 np 773 np 85-95 Referencia Stanford and Smith (1972) Griffin and Laine (1983) Campbell et al. (1984) Chae and Tabatabai (1986) El Gharous et al. (1990) Hadas and Portnoy (1994)

Mineralizacin de Estircol Bovino. Flores (2001) realiz un estudio durante tres ciclos agrcolas en suelos del Sur del Estado de Nuevo Mexico (EUA) en los cuales se evaluaron diferentes abonos orgnicos y perodos variables de incubacin utilizando resinas sintticas de intercambio inico. En el sitio Las Cruces, los valores de k variaron de 0.0061 a 0.015 mg
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N da-1 en los suelos tratados con estircol bovino lechero, mientras que en el testigo fue de 0.009 mg N da-1. Los valores de k para el sitio Artesia fluctuaron de 0.0064 a 0.0179 mg N da-1 en los suelos tratados y 0.0133 mg N da-1 en el control. De tal manera que las tasas de mineralizacin fueron de 2.8, 4.3, 4.0 y 6.6 mg N kg-1 semana-1 para el testigo, estircol seco, composta y estircol fresco, respectivamente. La Figura 14 muestra el N mineralizado acumulado y ajustado con el modelo exponencial. Las diferencias de N mineralizado entre el testigo y cada tipo de abono orgnico fueron de 23, 16 y 51 mg N kg-1 suelo a los 250 das de incubacin en condiciones de campo.

Mineralizacin de Biosolidos. Los biosolidos son un tipo de abono orgnico con enorme potencial para suelos agrcolas en Mxico y se cuenta con avances en legislacin (SEMARNAT, 2002). El concepto de dosis agronmica ha sido definido como la cantidad de N requerido por los cultivos para alcanzar un potencial productivo dado en un perodo de crecimiento definido, de tal manera que la cantidad de N en los bioslidos que pase el perfil radicular del cultivo sea minimizado para evitar un impacto negativo en la calidad del agua fretica (Barbarick e Ippolito, 2000). La dosis agronmica depende del contenido de N en el bioslido, suelo y agua de riego, de la tasa de descomposicin del N orgnico del bioslido y de la demanda de N del cultivo asociado a un potencial de rendimiento (Cogger y Sullivan, 1999).

112

Figura 14. Nitrgeno mineralizado en tres tipos de abonos orgnicos (estircol seco de varios meses, composta y estircol fresco de corral) y en dos contenidos de humedad del suelo (Flores, 2001).

113

Algunos valores representativos de N mineralizable reportados para biosolidos en los Estados Unidos son: 30% para bioslido estabilizado con cal, 15% para bioslido anaerobicamente digestado y de 5% a 10% para bioslido composteado (NRC, 1996). Particularmente, la adicin de cal en el proceso de tratamiento de bioslidos puede aumentar el pH del suelo, y las adiciones de bioslidos puede incrementar la capacidad amortiguadora de pH de un suelo (Pierzynski, 1994). Las tasas de mineralizacin de N orgnico en bioslidos secos o en compostas son menor que aquellas observadas en bioslidos lquidos y bioslidos desaguados. Por ejemplo, los bioslidos con estabilizacin alcalina pueden presentar de 50 a 55% de mineralizacin de N durante el primer ao, mientras que la mineralizacin de N en bioslidos composteados es de 10% annual. Barbarika Jr., et al. (1985) reportaron valores de N orgnico mineralizado de 1.8 a 60.3% a diferentes temperaturas del suelo (17 a 35 oC) y tiempos de incubacin (5 a 16 semanas), el parmetro que mejor correlacion fue la relacin C:N del bioslido y del suelo. Garau et al. (1986) reportaron tasas de mineralizacin (k) de N de 0.0202 0.0011 y 0.0650 0.0068 por da, respectivamente para procedimientos de lixiviado y no lixiviado. El N potencialmente mineralizable se increment con la dosis de bioslido aplicado. El porcentaje neto de N mineralizable en relacin al N orgnico agregado fue 43 7.8 y 27.7 4.0, respectivamente. Rowell et al. (2001) relacionaron las tasas de mineralizacin de N de bioslidos con su qumica inicial para encontrar parmetros de prediccin. La mineralizacin neta de N fue expresada como cantidad de N orgnico transformado por cantidad de materia orgnica aplicada, la cual vari de 182 a 248 g kg-1 y la mineralizacin neta de N vari de 2.09 a 18.21 g N kg-1 de materia orgnica aplicada. Rogers et al. (2001) determinaron la tasa de mineralizacin de N (TMN) con la siguiente formula: TMN (%) = { ( N inorgnico del suelo con bioslido N inorgnico del suelo sin bioslido N inorgnico agregado inicialmente del bioslido) / (N orgnico agregado del bioslido) } x 100.

114

50 Testigo 200 Kg NTK/ha 400 Kg NTK/ha 600 Kg NTK/ha

40

NO-3 + NH+4 (mg/kg)

30

20

10

0 0 20 40 60 80 100 120 140 160 180 200

Perodo de Incubacin (das) Figura 8. Nitrgeno inorgnico (NO3 + NH4 ) obtenido en un suelo franco tratado con biosolidos en condiciones de campo, 2003.

100

N Mineralizado (mg kg suelo )

80

-1

60

40

20

Testigo 200 kg NTK/ha 400 kg NTK/ha 600 kg NTK/ha Predicho 0 20 40 60 80 100 120 140 160 180 200

Tiempo de Incubacin (dias) Figure 9. Nitrogeno mineralizado acumulado (NH4 + NO3 ) para diferente dosis de biosolidos estabilizados con cal en Primavera-verano, Valle de Juarez, Chihuahua, Mexico, 2005.

115

Las investigaciones sobre biosolidos en el Estado de Chihuahua han sido realizadas por Figueroa et al (2000), Uribe et al (2002) y Flores et al. (2001-2006). Los primeros dos autores evaluaron dosis de biosolidos en suelos con algodonero y maz forrajero, sin embargo no evaluaron la tasa de descomposicin, mientras que Flores et al (2001-2006) incluyeron tanto la evaluacin a nivel comercial como la determinacin del porcentaje de descomposicin de biosolidos estabilizados con cal. Flores et al (2003) evaluaron las dosis 0, 9.8, 19.7 y 29.5 Mg ha-1 bioslido base seca que correspondieron a los tratamientos 0, 164, 328 y 492 kg NTK ha-1 y diseo experimental en bloques al azar con ocho repeticiones. El N mineralizado fue afectado significativamente por la dosis de bioslido (P<0.05). En promedio, los valores mximos de N mineralizado con el mtodo de las resinas sintticas y el mtodo de la diferencia fueron de 20% y 50% con la dosis de 164 Kg NTK ha-1. Los porcentajes de N mineralizado con las dosis 328 y 492 Kg NTK ha-1 fueron de 7 y 4% con valores similares entre mtodos (Figura 8). Estos porcentajes tan bajos se atribuyeron a que la temperatura del suelo fue menor a 15 oC lo que disminuy la actividad microbiana en el suelo y a que las altas cantidades de N inorgnico suministradas por el agua de riego (33 mg N L-1) pudieron afectar el proceso de mineralizacin. Los autores concluyeron que la mayor precisin del mtodo de las resinas puede justificar la utilizacin de una tasa del 20% como primera aproximacin para clculos de dosis de bioslidos estabilizado con cal de una y su aplicacin a nivel comercial en el ciclo agrcola otoo-invierno en el Valle de Jurez, Chihuahua. La Figura 9 muestra los resultados mas recientes de mineralizacin de N en un suelo cultivado con sorgo forrajero (Flores et al, 2006). Resulta notorio que la cantidad de N mineralizado es mayor que lo sealado en la Figura 8, es decir que la mineralizacin aumenta durante el ciclo Primavera-Verano quizs al aumento en la temperatura del suelo. Estos trabajos han tenido la particularidad de que se han realizado en suelos irrigados con aguas negras, lo cual ha permitido definir la influencia del N del agua de riego en la descomposicin de biosolidos.

CONCLUSIONES

La falta de datos de mineralizacin de N para ciertas condiciones edafo-climticas y de manejo ha ocasionado que las dosis agronmicas para abonos orgnicos sean calculadas con base en tasas de mineralizacin generalizadas, sin embargo la extrapolacin de datos puede ocasionar que se realicen aplicaciones excesivas o dosis con las que no se satisface el requerimiento nutricional de los cultivos para obtener el potencial productivo. Es posible concluir que la mineralizacin de N es un componente esencial para el clculo de dosis adecuadas de abonos orgnicos, as como la utilizacin de mtodos in situ como el resinas sintticas que permiten generar informacin realista de las condiciones edafo-climticas y de
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manejo de cultivos, as como su utilidad para calibrar mtodos de incubaciones en laboratorio. Por ello resulta evidente la necesidad de mayor investigacin sobre la descomposicin de abonos orgnicos en suelos agrcolas en Mxico.

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FITORREMEDIACIN DE SUELOS CONTAMINADOS CON METALES PESADOS

Hortensia Ortega-Ortiz 1, Adalberto Benavides-Mendoza2*, Roberto Arteaga Alonso2, Alejandro Zermeo-Gonzlez3

Centro de Investigacin en Qumica Aplicada, Blvd. Enrique Reyna Hermosillo 140, CP 25253 Saltillo, Coahuila Mxico. Tel. (844) 438 98 30, Fax: 438 98 39. Email: hortega@ciqa.mx
2

Departamento de Horticultura, Universidad Autnoma Agraria Antonio Narro, Buenavista, CP 25315 Saltillo, Coahuila Mxico.
3

Departamento de Riego y Drenaje, UAAAN.

* Autor para correspondencia: abenmen@uaaan.mx

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RESUMEN El suelo puede perder su valor para la produccin de alimentos o diferentes productos o servicios a causa de la acumulacin de materiales peligrosos que pueden constituir un riesgo para el ambiente y la salud, a niveles tales que repercuten negativamente en su comportamiento. Los elementos que se consideran causantes de problemas de contaminacin son: Pb, Cr, Cd, Co, Ni, Cu, Zn, As, Mo, Sn, Ba, Hg. Los metales no se degradan, as que pueden acumularse provocando efectos adversos en la mayora de los organismos. Las tecnologas tradicionales de remediacin requieren remover fsicamente el suelo contaminado, debido a esto surge la necesidad de utilizar tcnicas alternas como la biorremediacin, la cual promueve los procesos naturales para acelerar la recuperacin de suelos, como lo es la fitorremediacin, que se basa en el uso de una especie de plantas llamadas metalofitas que han desarrollado mecanismos fisiolgicos para resistir, tolerar y sobrevivir en suelos con altos niveles de metales. Bsicamente, hay dos tipos de fitorremediacin aplicables a los suelos contaminados por metales pesados: la fitoestabilizacin que se basa en el uso de plantas tolerantes a los metales para inmovilizarlos y la fitoextraccin, es la captacin de iones metlicos por las races de la planta y su acumulacin en tallos y hojas. Adems, las plantas denominadas fitorremediadoras, poseen como atributos ideales la capacidad de acumular los metales de inters, en la parte superior de la planta; son tolerantes a la concentracin del metal acumulado, crecen rpido y generan elevada produccin de biomasa. Como una rea de estudio, surge la posibilidad de promover la formacin de nanopartculas metlicas en clulas de plantas o en condiciones de crecimiento de las plantas que hagan ptima la absorcin, la acumulacin, la estabilidad y tamao de los nanocristales en los sitios de acumulacin, la tasa de recuperacin, as como los procesos involucrados con el aislamiento y purificacin de las nanopartculas metlicas.

Palabras clave: contaminacin del suelo, biorremediacin, plantas hiperacumuladoras, nanopartculas metlicas.

INTRODUCCIN El desarrollo econmico que trajo consigo la revolucin industrial iniciada hace ms de 200 aos llevo a considerar a las industrias como signo de prosperidad. No fue hasta los descubrimientos de los daos ocasionados a los ecosistemas y a la alteracin de la calidad del aire, el suelo y el agua, que se tomo conciencia de que el crecimiento econmico puede, tambin, traer consigo efectos indeseables (Maqueda, 2003). De los sistemas ambientales el suelo es el medio ms esttico, donde los contaminantes pueden permanecer durante mucho tiempo. Esta permanencia a largo plazo es especialmente grave en el caso de contaminantes inorgnicos, como los metales pesados,
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que no pueden ser degradados. Su persistencia, acumulacin progresiva y/o su transferencia a otros sistemas supone una amenaza para la salud humana y la de los ecosistemas (Becerril et al., 2007). La contaminacin constituye uno de los aspectos ms importantes en la degradacin de los suelos. La calidad de un suelo, es decir, su capacidad para sostener efectivamente el crecimiento de las plantas y otros organismos, puede verse afectada negativamente por la contaminacin. (Maqueda, 2003). La consecuencia directa de esta contaminacin, es una ausencia inicial de vegetacin o la prdida de su productividad. Puede ocurrir tambin disminucin de la biodiversidad al reemplazarse la vegetacin natural con una cierta variedad de especies de plantas (metalofitas) capaces de colonizar estos suelos degradados (Wong, 2003). La recuperacin de suelos contaminados mediante mtodos fsicos o qumicos normalmente rpida pero de alto costo econmico. Esta puede realizarse in situ (tratando el suelo en su lugar) o ex situ (tratamiento tras transporte del suelo). Las tcnicas biolgicas, o biorremediacin, tienen como objetivo bsico promover los procesos naturales y desarrollar tcnicas para acelerar la recuperacin de suelos y sedimentos contaminados. Dentro de las tcnicas biolgicas o ecolgicas, el uso de plantas (fitorremediacin) se considera capaz de dar soluciones in situ, con un gasto financiero y tecnolgico relativamente bajo. Adems, el resultado, una cobertura verde, es ms agradable estticamente y ms aceptable desde el punto de vista ambiental (Bernal et al., 2007). La fitorremediacin de suelos contaminados se basa en el uso conjunto de metalofitas, y tcnicas agronmicas para eliminar, retener, o disminuir la toxicidad de los contaminantes del suelo (Chaney, et al.; 1997). Este grupo de fitotecnologas rene un gran nmero de ventajas, especialmente la limpieza y la economa; no utilizan reactivos qumicos peligrosos, ni afectan negativamente a la estructura del suelo, slo aplican prcticas agrcolas comunes (Cunningham et al., 1995).
Las metalofitas son especies de plantas que han desarrollado los mecanismos fisiolgicos para resistir, tolerar y sobrevivir en suelos con altos niveles de metales y, por ello, son endmicas de suelos con afloramientos naturales de minerales metlicos (Shaw, 1990). A pesar de que esas

plantas se conocan ya antes de los aos de la dcada de 1970, no llamaron la atencin de la mayora de los cientficos hasta casi una dcada despus. Desde entonces, ha emergido en torno a ese grupo de plantas un inters multidisciplinario, adems de cientfico, tambin econmico, y en disciplinas tan diversas como la fisiologa vegetal, la arqueologa, la fitorremediacin, la fitominera, etc. (Vzquez, 2003). El gran inters despertado por las plantas hiperacumuladoras, especialmente para remediar un ambiente contaminado, obliga tambin a resolver problemas relativos a otras disciplinas; Brooks, (1998) hace hincapi en ello y destaca la importancia para el avance de la fitorremediacin de la integracin de diversos campos como botnica, fisiologa, agronoma, qumica y gentica. Por esta razn diversas investigaciones se han enfocado a desarrollar tcnicas que exploten de forma conjunta los procesos biolgicos dependientes de plantas y microorganismos, as como procesos qumicos como el uso de agentes quelatantes o secuestrantes para reducir el uso inherente asociado con los suelos contaminados con metales (Maqueda, 2003).

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Es muy importante recalcar que el objetivo ltimo de un proceso de fitorremediacin de suelos contaminados no debe ser solamente eliminar el contaminante o, en su defecto, reducir su concentracin hasta lmites marcados en la legislacin, sino sobre todo recuperar o acercarse al estado ptimo del suelo, entendido sta como la capacidad de este recurso para realizar sus funciones de forma sostenible (Garbisu et al., 2007). CONTAMINACIN DEL SUELO

El suelo puede definirse como la materia, no consolidada, compuesta por partculas inorgnicas, materia orgnica, agua, aire y organismos, que comprenden la capa superior de la superficie terrestre hasta diferentes niveles de profundidad (Medina et al., 2001). Un suelo contaminado es aquel donde se encuentran presentes uno o ms materiales peligrosos y/o residuos de ndole tal que pueden construir un riesgo para el ambiente y la salud (Medina et al., 2001). La contaminacin antrpica del suelo aparece cuando una sustancia est presente a concentracin superior a sus niveles naturales, y tiene un impacto negativo en alguno o todos los constituyentes del mismo. Los niveles promedio de concentracin de metales pesados y metaloides en el suelo se anotan en el siguiente cuadro.

Cuadro 1. Contenido de metales y metaloides en suelos. Contenido promedio (mg kg-1) 10.38 0.097 <100 5-40 22 0.04 13-42 0.2-6 Contenido en suelos ricos en el elemento 250-2500 20-800 100-300 >2000 10-100 >1% 10-100 23 400 Lmites de acuerdo a la NOM-147 22 37 280

Elemento

As Cd Cr Co Cu Hg Pb Mo

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Ni Se Zn

35 0.29 <3-790

800-8000 7 >1%

1600 390

He et al. 2005. Por contaminacin o por efecto del material madre de donde se form el suelo. NOM-147-SEMARNAT/SSA1-2004. Los valores anotados son para uso agrcola.

Los niveles para considerar un suelo contaminado dependen del elemento en cuestin, uso del suelo y la legislacin de cada pas (Bernal, 2007).

Efecto de los contaminantes del suelo El suelo se puede degradar al acumularse en l sustancias a unos niveles tales que repercuten negativamente su comportamiento. Los efectos desfavorables son (Porta et al., 1994): 1. Destruccin del poder de autodepuracin por procesos de regeneracin biolgica normales, al haber superado la capacidad de aceptacin del suelo. 2. Disminucin cualitativa y cuantitativa del crecimiento normal de los microorganismos del suelo, o bien alteracin de su diversidad. 3. Disminucin del rendimiento de los cultivos con posibles cambios en la composicin de los productos con riesgo para la salud de los consumidores, al entrar elementos a la cadena trfica. 4. Contaminacin de las aguas superficiales y freticas por procesos de transferencia. se alcanzan concentraciones superiores a las consideradas aceptables. 5. Disminucin de las funciones de soporte de actividades de esparcimiento. Los espacios contaminados presentan problemas de salubridad para los usuarios. Remediacin del suelo

Los metales no se degradan, as que pueden acumularse en el ecosistema a travs del tiempo provocando concentraciones elevadas, efectos adversos en la mayora de los organismos; por ello, se han desarrollado tcnicas para remediar a los suelos contaminados de metales pesados (Gardea-Torresday et al., 2002; Krenlampi et al., 2000; Nelly et al., 2000).

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Las tcnicas tradicionales de remediacin del suelo contaminado con metales pesados generalmente involucran prcticas convencionales de ingeniera civil, aplicadas individualmente o en grupo. En estos procesos fsicos, qumicos y trmicos principalmente se requiere remover fsicamente el suelo del sitio contaminado o bien minimizar el riesgo de exposicin (Brennan y Shelley, 1999; McIntyre, 2003).

A. Contencin, incluye a las tcnicas denominadas de cobertura, barreras verticales y barreras horizontales. Al aplicar estos procesos el material contaminado se mantiene en su lugar, de manera que no entra en contacto con personas ni con el medio ambiente (McIntyre, 2003; Mulligan et al., 2001; Seoane, 1999; US EPA, 1997). B. Solidificacin y estabilizacin, son procesos en los que se mezclan o inyectan agentes de tratamiento al material contaminado para obtener residuos slidos, reducir la solubilidad del contaminante, disminuir el rea de contaminacin expuesta o limitar el contacto entre fluidos y contaminantes. En esta categora se incluyen tcnicas como mezcla de cemento, encapsulacin con polmeros y vitrificacin (Mulligan K. et al., 2001; Seoane, 1999; US EPA, 1997, US EPA, 2003). Las tcnicas de remediacin antes mencionadas tienen un alto costo, elevado consumo de energa, destruccin del sitio contaminado y problemas de logstica (Cunningham et al., 1995; Henry, 2000; Krenlampi et al., 2000; McIntyre, 2003, Nedelkoska y Doran, 2000; Susarla et al., 2002). Debido a las limitaciones que presentan las tecnologas tradicionales de remediacin surge la necesidad de utilizar tcnicas alternas como la biorremediacin (Nedelkoska y Doran, 2000; Raskin et al., 1997).

Biorremediacin El trmino biorremediacin fue acuado a principios de la dcada de los 80`s, y proviene del concepto de remediacin, que hace referencia a la aplicacin de estrategias fsico-qumicas para evitar el dao y la contaminacin en suelos. La biorremediacin surge como una rama de la biotecnologa que busca resolver los problemas de contaminacin mediante el uso de seres vivos (microorganismos y plantas) capaces de degradar o acumular compuestos que provocan desequilibrio en el medio ambiente, ya sea suelo, sedimento, fango o mar (ArgenBio, 2007). Bsicamente, los procesos de biorremediacin pueden ser de tres tipos.

Degradacin enzimtica. Este tipo de degradacin consiste en el empleo de enzimas en el sitio contaminado con el fin de degradar las sustancias nocivas (PQB, 2003).

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Remediacin microbiana. En este tipo de remediacin se usan microorganismos directamente en el foco de la contaminacin. Los microorganismos utilizados pueden ser los ya existentes (autctonos) en el sitio contaminado o pueden provenir de otros ecosistemas, en cuyo caso deben ser agregados o inoculados.

Fitorremediacin. Es el uso de plantas para limpiar ambientes contaminados. Aunque se encuentra en desarrollo, constituye una estrategia muy interesante, debido a la capacidad que tienen algunas especies vegetales de absorber, acumular y/o tolerar altas concentraciones de contaminantes como metales pesados, compuestos orgnicos y radioactivos (PQB, 2003)).

Ventajas:

Las plantas pueden ser utilizadas como entidades extractoras de bajo costo econmico para depurar suelos y aguas contaminadas. Algunos procesos degradativos ocurren en forma ms rpida con plantas que con microorganismos. Es un mtodo apropiado para descontaminar superficies grandes o para finalizar la descontaminacin de reas restringidas en plazos largos.

Desventajas: El proceso se limita a la profundidad de penetracin de las races o aguas poco profundas. Los tiempos del proceso pueden ser prolongados. Mecanismos involucrados en la fitorremediacin. La biodisponibilidad de los compuestos o metales es un factor limitante de la captacin de los mismos. Las plantas pueden incorporar las sustancias contaminantes mediante los procesos que se representan en el Figura 1 (PQB, 2003).

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Figura 1. Mecanismos involucrados en la f fitorremediacin (INE, 2007).

La fitorremediacin contempla seis procesos bsicos a travs de los cuales las plantas pueden contribuir a la recuperacin de suelos, sedimentos y aguas contaminadas. Dependiendo de la estrategia de recuperacin, estos procesos darn lugar a la contencin o procesos a la eliminacin de los contaminantes del suelo. La fitoestabilizacin y la fitoinmovilizacin corresponden a la primera de las dos estrategias, mientras que la fitoextraccin, fitodegradacin, fitovolatilizacin y rizofiltracin representan procesos de eliminacin (Cuadro rizofiltracin 2) (Bernal, 2007).

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Cuadro 2. Tipos de Fitorremediacin, indicando la zona de la planta en donde ocurre este proceso (PQB, 2003).
Tipo Fitoextraccin Las plantas se usan para concentrar metales en las partes que se cosechan (hojas y races) Rizofiltracin Las races de las plantas se usan para absorber, precipitar y concentrar metales pesados a partir de efluentes lquidos contaminados y degradar compuestos orgnicos Fitoestabilizacin Las plantas tolerantes a metales se usan para reducir la movilidad de los mismos y evitar el pasaje a capas subterrneas o al aire. Fitoestimulacin Se usan los exudados radicales para promover el desarrollo de microorganismos degradativos (bacterias y hongos) Fitovolatilizacin Las plantas captan y modifican metales pesados o compuestos orgnicos y los liberan a la atmsfera con la transpiracin. Fitodegradacin Las plantas acuticas y terrestres captan, almacenan y degradan compuestos orgnicos para dar subproductos menos txicos o no txicos. Municiones (TNT, DNT, RDX, nitrobenceno, nitrotolueno), antraceno, solventes clorados, DDT, pesticidas fosfatados, fenoles y nitrilos, etc. Mercurio, selenio y solventes clorados (tetraclorometano y triclorometano) Hidrocarburos derivados del petrleo y los poliaromticos como benceno, tolueno, antraceno, etc Lagunas de deshecho de yacimientos mineros. Mtodo Propuesto para compuestos fenlicos y compuestos clorados. Cadmio, cobalto, cromo, nquel, mercurio, plomo, plomo selenio, zinc istopos radioactivos, compuestos fenlicos Cadmio, cobalto, cromo, nquel, mercurio, plomo, selenio, zinc Proceso Involucrado Contaminacin Tratada

Bsicamente, dos tipos de fitorremediacin son aplicables a los suelos contaminados por metales pesados: la fitoestabilizacin y la fitoextraccin.
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La fitoestabilizacin se utiliza en los suelos donde la gran cantidad de contaminantes imposibilita la fitoextraccin, y se basa en el uso de plantas tolerantes a los metal para metales inmovilizarlos a travs de su absorcin y acumulacin en las races o precipitacin en la rizosfera, reduciendo as su movilidad y su biodisponibilidad para otras plantas o microorganismos. Por otra parte, la fitoextraccin, tambin conocida como fitoacumulacin, Es la captacin de fitoacumulacin, iones metlicos por las races de la planta y su acumulacin en tallos y hojas (Figura 2). Hay plantas que absorben selectivamente grandes cantidades de metales acumulando en los tejidos concentraciones mucho ms altas que las presentes en el suelo o en el agua. Este que proceso se ha utilizado para eliminar hidrocarburos de agua y suelo con cultivos de alfalfa, lamos, enebro (Vzquez, 2003). Un objetivo importante de la fitoextraccin es maximizar el crecimiento de las plantas naturalmente hiperacumuladoras. En algunos ensayos de fertilizacin del suelo se han conseguido incrementos significativos de la biomasa de diferentes especies del gnero Alyssum (Kidd et al., 2007). El cultivo puede ser, entonces, cosechado en el momento de ). mxima acumulacin metlica en la biomasa area, que frecuentemente se da en el estado de media floracin (Angle et al. 2001). Robinson et al. (1997) consiguieron aumentar tres . . veces la biomasa de A. bertolonii (hasta 9 tonha-1) con fertilizacin NPK La fertilizacin NPK. tambin hizo multiplicar por un factor de diez la biomasa de A. serpyllifolium subsp. lusitanicum desarrollada en suelos de mina contaminados con metales (Kidd y Monterroso, 2005).

Figura 2. Representacin de la fitoextraccin (INE, 2007).

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Aunque estas tcnicas han sido probadas y son de indudable ayuda, tambin presentan sus limitaciones, ejemplificadas en el denominado efecto barrera: con algunas pocas excepciones, las plantas pueden acumular un determinado elemento solamente hasta una cierta concentracin. De hecho, en el caso del mercurio, las races pueden actuar a modo de barrera impidiendo que el elemento ascienda hacia los rganos superiores de la planta (UCLM, 2007). En este sentido las plantas pueden ser clasificadas en cuatro categoras:

Sin efecto de barrera, las que concentran el elemento qumico investigado sin restricciones y de forma continua. Semi barrera, que concentran entre 30 y 300 veces la concentracin del elemento considerada normal en la planta. Con barrera, contenidos de hasta 3-30 veces la concentracin del elemento considerada normal en la planta. Con barrera de fondo, que no superan las concentraciones normales del elemento en una determinada planta (UCLM, 2007).

Metales pesados. Se considera metal pesado a aquel elemento con densidad igual o superior a 5 g/cm3 cuando esta en forma elemental, o cuyo nmero atmico es superior a 20 (excluyendo a los metales alcalinos y alcalino-trreos). Su concentracin promedio en la corteza terrestre es inferior al 0.1% y casi siempre menor del 0.01%. Junto a estos metales pesados hay otros elementos qumicos denominados metaloides y no metales que suelen englobarse con ellos por presentar orgenes y comportamientos asociados; es el caso del As, Sb, B, Ba y Se (Garca y Dorronsoro, 2001).

Los metales y metaloides que se consideran causantes de problemas de contaminacin son: Pb, Cr, Cd, Co, Ni, Cu, Zn, As, Mo, Sn, Ba, Hg (Porta et al., 1994).

Dentro de los metales pesados hay dos grupos:

A. Oligoelementos o Micronutrientes.- Requeridos en pequeas cantidades traza por plantas y animales, y son necesarios para que los organismos completen su ciclo vital, pasando cierto umbral son txicos. Dentro de este grupo se encuentra: As, B, Co, Cr, Mo, Mn, Ni, Se, Zn (Dorronsoro, 2001; Nedelkoska y Doran, 2000). B. Metales pesados sin funcin biolgica conocida.- La presencia en determinadas cantidades en seres vivos lleva a disfunciones en el funcionamiento de sus organismos. Resultan altamente txicos y presentan la propiedad de acumularse en los organismos vivos. Son Principalmente: Cd, Hg, Pb, Cu, Sb, Bi (Maqueda, 2003).

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ACUMULACIN DE METALES EN EL SUELO

Los metales pesados incorporados al suelo pueden seguir cuatro diferentes vas (Garca y Dorronsoro, 2001).

A. Quedan retenidos en el suelo, ya sea disueltos en la solucin del suelo o bien fijados por procesos de adsorcin, complejacin o precipitacin. B. Son absorbidos por las plantas e incorporados a las cadenas trficas. C. Se volatilizan a la atmsfera. D. Pueden contaminar a las aguas superficiales o subterrneas Dependiendo del metal en cuestin, las prcticas de manejo del suelo, como la modificacin del pH y la fertilizacin, pueden tener diferentes efectos sobre la absorcin. Por ejemplo, se ha demostrado que la acidificacin del suelo favorece la hiperacumulacin de Cd o Zn, aunque un exceso de acidez puede inducir fitotoxicidad de Al o Mn (Brown, et al., 1999; Wang, et al., 2006). Por el contrario, la absorcin y acumulacin aumentan con el incremento del pH (Li, et al., 2003).

Proceso de acumulacin de metales en las plantas. Aunque las plantas hiperacumuladoras tienen una extraordinaria capacidad para absorber metales pesados, esta capacidad depende de la biodisponibilidad de los metales en el suelo y, particularmente, del suministro a partir de formas menos disponibles para la planta (McGrath, et al., 1997, Wenzel, et al., 2003). Los metales aparecen en el suelo unidos a fracciones con distinto grado de labilidad: cambiables, ligados a materia orgnica, a xidos de hierro y manganeso, y a estructuras minerales. El concepto de biodisponibilidad se encuentra ntimamente relacionado con las condiciones fisicoqumicas del ambiente, que determinan las relaciones entre las formas disueltas, lbiles y no lbiles de los elementos. Por ello es fundamental al determinar el grado de contaminacin por metales pesados de un ambiente, conocer su biodisponibilidad, es decir, la concentracin del metal libre y lbil presente en la muestra (Brown et al., 1999; Kim et al., 2002; Krishnamurti y Naidu, 2000; Lussier et al., 1999; Manson y Lawrence, 1999). El equilibrio dinmico que se establece entre estas fracciones, ms que el contenido total de metales, determina la movilidad y biodisponibilidad, siendo el pH, el potencial redox, y la cantidad y tipos de materia orgnica y arcillas los factores edficos ms importantes en su control (Korcak y Fanning, 1985). Adems, las condiciones de la interfase raz-suelo (rizosfera) pueden ser modificadas por la planta, a travs de produccin de exudados radicales y la accin de deposiciones como muclago y restos celulares (Adriano et al., 2001; Lombi et al., 2001; Puschenreiter et al., 2003; Wenzel et al., 2003)
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De acuerdo a Maqueda (2003), el proceso de acumulacin de metales tiene en general los siguientes mecanismos:

A. Los iones alcanzan la zona de absorcin de la raz por difusin a travs de la solucin del suelo, son arrastrados por el movimiento del agua hacia la raz o entran en contacto con la zona de absorcin a medida que la raz crece. (Fernndez y Maldonado, 2000). Los iones metlicos son movilizados por la secrecin de agentes quelantes, protenas que promueven la solubilidad del elemento o por la acidificacin de la rizosfera. B. Las races capturan a los metales hidratados o a los complejos metal-quelante y los internan al medio celular por medio de sistemas de transporte constituidos por canales inicos y transportadores. Dichos sistemas de transporte son energizados por bombas de protones secundarias. Dentro de las clulas los metales son quelatados principalmente por cido orgnicos, ionforos o fitoquelatinas; la vacuola o protenas especializadas como la ferritina o las metalotionenas constituyen siempre un almacn importante de metales. C. Los metales se transportan a la parte area va el xilema ya sea como iones hidratados o principalmente como complejos con histidina o cido ctrico, entre otros. D. Despus de penetrar el apoplasto foliar, los metales se distribuyen dentro de las clulas, manteniendo en cada organelo las concentraciones dentro de rangos fisiolgicos especficos. El exceso de metales esenciales y no esenciales se almacenan en la vacuola. Mecanismos de resistencia a metales. Los vegetales que crecen en sitios naturalmente enriquecidos con metales desarrollaron mecanismos de tolerancia a su medio ambiente, a la fecha dichos mecanismos no han sido comprendidos en su totalidad; sin embargo, las posibles estrategias se clasifican en dos categoras:

Exclusin, implica la formacin de compuestos bioqumicos complejos en el medio ambiente o en la pared celular de las plantas; precipitacin de metales en el exterior, a travs de secrecin de muclagos y otros compuestos orgnicos; alteracin de los sistemas de membrana del transporte para reducir la entrada de metales y aumento en la actividad de ciertas bombas inicas (Lasat, 2002; Maiti et al., 2002; McGrath et al., 2002; Mejre y Blow, 2001; Raskin y Ensley, 2000; Salt et al., 1998).

Inclusin y acumulacin, comprende la captura en el interior de las clulas donde no tiene efectos txicos como en la vacuola y la pared celular; detoxificacin interna de los metales a travs de la incorporacin de protenas, cidos orgnicos, histidina y pptidos ricos en grupos tiol denominados fitoquelatinas ; reacciones de oxido-reduccin las cuales cambian el estado reactivo de los metales a una forma menos txica (Chaney et al., 1997; Garbisu y Alkorta, 2001; Lasat, 2002; Maiti et al., 2002; McGrath et al., 2002; Mejre y Blow, 2001; Salt, et al., 1998).
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El uso de estos mecanismos naturales de tolerancia a los metales es la base de la seleccin de especies para la fitoextraccin de metales contaminantes o metales valiosos.

Fabricacin biolgica de nanometales. Las plantas denominadas fitorremediadoras, poseen como atributos ideales la capacidad de acumular los metales de inters, preferiblemente en la parte superior de la planta; son tolerantes a la concentracin de metal acumulado, crecen rpido; generan elevada produccin de biomasa; resultan fcilmente cosechables y contienen sustancias que impiden que los herbvoros las consuman, para evitar la transferencia de metales pesados a la cadena alimenticia (Garbisu y Alkorta, 2001; Gisbert et al., 2003; Krenlampi et al., 2000; McIntyre, 2003). Ya que la disponibilidad de metales de transicin en los suelos es muy variable, aunque normalmente tiende a ser baja, las plantas desarrollan mecanismos eficientes para su captura, trasporte y asimilacin. Las races son los sitios en donde normalmente ocurre la captura de estos metales, para de all ser transportados hacia el resto de la planta. El mecanismo normal de absorcin de metales involucra la accin de agentes quelatantes, solubilizadores o facilitadores de la disponibilidad del metal en el suelo, los cuales forman complejos que son transportados al interior de los tejidos radicales. Cuando los metales se encuentran en solucin en el agua del suelo en forma inica no pueden formar estos complejos, por lo cual deben ser reducidos por una reductasa de la membrana o de la pared celular, para ser movilizados luego al interior de la clula por medio de una protena transportadora (Anderson y Beardall, 1991). Al parecer los sitios naturales de almacenamiento de los metales son las vacuolas, los cloroplastos y las mitocondrias, las cuales son de manera natural fbricas de nanoestructuras de metales. La razn probable de ello es el mantenimiento de la concentracin de iones de metales dentro de lmites seguros para disminuir la generacin de radicales libres

Biotransformacin. Para reducir la respuesta txica de una sustancia en un organismo hay que disminuir la cantidad de sustancia en forma activa (txica) y el tiempo de permanencia de la misma en el sitio de accin, incrementando la polaridad ya que ello aumenta la difusibilidad del txico y por tanto puede incrementar la velocidad de excrecin. Adems, muchas sustancias txicas que ven incrementada su polaridad se convierten en sustratos accesibles para posteriores reacciones de detoxificacin, reacciones que, por otra parte, no seran posibles de no incrementar la polaridad. Con frecuencia pues, se trata de convertir un xenobitico (compuestos cuya estructura qumica en la naturaleza es poco frecuente o inexistente debido a que son compuestos sintetizados por el hombre en el laboratorio) no polar en un compuesto soluble en agua. Estas reacciones se agrupan en dos conjuntos denominados Biotransformacin Fase I y Biotransformacin Fase II:

Fase I. Biotransforma los xenobiticos convirtindolos en substratos de los enzimas de la Fase II, al mismo tiempo que los hace ms hidrfilos.
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Fase II. Agrega un grupo polar de tamao relativamente grande a los productos de las reacciones de la Fase I, o a los xenobiticos originales que contienen los grupos funcionales apropiados para ser substratos de las reacciones de conjugacin (Navarro-Avio et al., 2007).

Mecanismo de reparacin celular. Estos mecanismos se activan para restablecer las caractersticas iniciales de la clula. Los mecanismos mejor conocidos son los que participan en la sntesis de componentes de pared, y aquellos mecanismos que participan en la activacin de procesos de reparacin de errores rutinarios en la copia de ADN. Se sabe que en los procesos de reparacin activados despus del dao causado por la presencia de metales pesados estn involucradas las metalotionenas (protenas de bajo peso molecular inducidas por factores de estrs y capaces de ligar a metales pesados) y, sobre todo, las protenas de choque trmico. Estas ltimas incrementan su expresin en gran variedad de organismos en respuesta a factores de estrs como la subida de temperaturas por encima de la ptima. Tambin se expresan en respuesta a otros estreses como metales pesados, de forma que actan como chaperoninas para la proteccin y reparacin de protenas. Se ha comprobado que un preacondicionamiento por exposicin a corto tiempo con alta temperatura antes de estrs por metales pesados induce un efecto de tolerancia, disminuyendo o previniendo los daos celulares (Navarro-Avio et al., 2007).

PLANTAS HIPERACUMULADORAS DE METALES

Brooks et al., (1977) establece el concepto de "planta hiperacumuladora" para describir a aquellas plantas que contenan niveles de nquel equivalentes o superiores a 1000 microgramos de metal por gramo de materia seca (0,1% 1000 mg kg-1). Aunque el nquel no est considerado como un elemento esencial para las plantas, s se trata del elemento hiperacumulado por el mayor nmero de especies vegetales y actualmente integra la lista de elementos esenciales de las plantas. Otros metales como Zn, Mg, Mn y Cu son requeridos por las plantas en, al menos, pequeas cantidades. No obstante, cuando la concentracin de estos metales en las plantas sobrepasa un determinado umbral, resultan txicos. Slo determinadas especies pueden acumular metales en alta concentracin. Actualmente se conocen plantas hiperacumuladoras no slo de nquel, sino tambin de zinc, cobre, selenio, cadmio, manganeso y cobalto (Vzquez, 2003) (Cuadro 3).

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Cuadro 3. Contenido de metales pesados en algunas plantas hiperacumuladoras. Concentracin Elemento Especie (mg kg peso seco) Thlaspi caerulescens Haumaniastrum H. katangense Thlaspi rotundifolium Macadamia neurophyila Alyssum bertolonii Berkheya coddii Astragalus pattersoni Iberis intermedia Thalaspi Calaminare 3,000 10,200 8,356 8,200 55,000 13,400 17,000 6,000 3,070 10,000 (ton ha-1 ao-1) 4 4 5 4 30 9 18 5 8 4
-1

Biomasa

Cd Co Cu Pb Mn Ni Ni Se Ta Zn

La hiperacumulacin es un fenmeno raro y su base evolutiva es motivo de discusin desde su descubrimiento. Algunos estudios recientes sugieren que la acumulacin inusual de metales confiere a estas plantas la capacidad de limitar el herbivorismo y la patgenesis (Boyd y Martens, 1998; Boyd et al., 1994; Pollard y Baker, 1997; Poschenrieder et al., 2006). Las plantas hiperacumuladoras adecuadas para llevar a cabo acciones de fitoextraccin deben cumplir algunas caractersticas como la tolerancia al metal que se desea eliminar, que la acumulacin se produzca fundamentalmente en la parte area de la planta, y que presenten un rpido crecimiento, as como una gran produccin de biomasa en la parte area. Una de las lneas de investigacin actuales es la transferencia y mejora de los genes de estas plantas hiperacumuladoras (Brooks, 1998). Algunas especies comunes que se han ensayado con xito como potenciales fitorremediadoras son la alfalfa, la mostaza, el tomate, la calabaza, el esparto, el sauce y el bamb. Incluso existen especies vegetales capaces de disminuir la alta salinidad en la capa superficial del suelo, gracias a su capacidad para acumular el cloruro de sodio (Wangensteen, 2002). 139

Recuperacin de metales acumulados en las plantas. En general, hay plantas que convierten los productos que extraen del suelo a componentes inocuos, o voltiles. Pero cuando se plantea realizar un esquema de fitorremediacin de un cuerpo de agua o un rea de tierra contaminados, se siembra la planta con capacidad (natural o adquirida por ingeniera gentica) de extraer el contaminante particular, y luego del perodo de tiempo determinado, se cosecha la biomasa y se incinera. De esta forma, los contaminantes acumulados en las plantas no se transmiten a travs de las cadenas alimenticias a otros organismos. El movimiento de los constituyentes inorgnicos de la planta es controlado selectivamente, de manera que algunos elementos son admitidos libremente mientras que otros son rechazados en mayor o menor grado. Aunque las races rechacen selectivamente a algunos elementos tales como el plomo, el vanadio o el mercurio, una parte significativa llega a los rganos superiores de la planta y puede ser fcilmente detectada mediante anlisis qumicos. Esta capacidad de algunas plantas de acumular elementos qumicos las hace doblemente interesantes, ya que por un lado, nos permiten detectar anomalas en un determinado elemento qumico, y por otra, dada su capacidad de acumulacin, pueden ser utilizadas para limpiar un terreno contaminado. Tras su cosecha, los restos vegetales pueden ser reciclados o confinados de una forma poco costosa, lo que constituye una estrategia econmica para la limpieza de suelos contaminados. Una limitacin importante de la aplicacin prctica de la mayora de las especies hiperacumuladoras en la fitorremediacin es su reducido tamao y escasa biomasa. Optimizar las prcticas de manejo del suelo y la cosecha, con el objeto de incrementar su productividad y la concentracin de metales en la biomasa, as como cultivar especies hiperacumuladoras mejoradas, podra ser, por tanto, una combinacin clave en el desarrollo ltimo de esta tcnica (Kidd, 2007).

FABRICACIN DE NANOPARTCULAS METLICAS

La nanotecnologa manipula materiales naturales y sintticos a escala atmica y molecular. Abarca todos los procesos que implican medicin, manipulacin y fabricacin a escala de entre 1 y 100 nanmetros. Las herramientas y procesos nanotecnolgicos virtualmente se pueden aplicar a todos los artculos manufacturados en todos los sectores de la industria. Las aplicaciones comerciales son, por lo tanto, potencialmente ilimitadas (UITA, 2007). Un campo potencial de estudio y aplicacin potencialmente valiosa es la adecuacin de procesos biolgicos como la acumulacin de metales por las plantas para la sntesis de nanopartculas, el cual se est convirtiendo en una rama importante de la nanotecnologa. Se espera que la nanotecnologa abra nuevas vas para atacar y prevenir enfermedades usando materiales a la medida en escala atmica. Entre los ms promisorios nanomateriales con propiedades antimicrobianas estn las nanopartculas metlicas, las cuales exhiben una
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notable actividad qumica debido a su alto cociente de superficie a volumen, caracterstica que les ofrece gran efectividad antimicrobiana (Furno et al., 2004). Sin embargo, un tema importante que debe resolverse antes de la promocin de su uso industrial o domstico es el efecto de las nanopartculas de metales que se emitan en desechos o drenaje hacia los ecosistemas. Shankar et al. (2003) reportaron el uso de extractos foliares de geranio (Pelargonium graveolens) para el tratamiento de soluciones de nitrato de plata, obteniendo una rpida reduccin de los iones plata, as como la formacin de nanocristales de plata en la solucin. Los anlisis de microscopia electrnica de transmisin indicaron que dichas partculas de plata, en tamaos de 16 a 40 nanmetros, se ensamblaron en superestructuras cuasilineales. La tasa de reduccin de los iones plata por el extracto foliar de geranio fue mayor a la reportada para hongos como F. oxysporum. Esto posibilita utilizar las plantas como dispositivos de sntesis de nanopartculas. Gardea-Torresdey et al., (2003) reportaron la obtencin y aislamiento de nanopartculas metlicas utilizando como modelo la planta de alfalfa. Los resultados de este trabajo son importantes en el rea ya que los autores reportaron la sntesis de nanopartculas en plantas completas. Utilizando un sistema de bioacumulacin de plata en clulas de semillas, plntulas y plantas de sanda Cabrera De la Fuente et al. (2006a, 2006b) obtuvieron nanopartculas de plata en semillas de la especie mencionada. En el caso de las plntulas y plantas la aplicacin de plata en el substrato no dio lugar a la formacin de nanoplata pero fue posible incrementar el potencial antioxidante de los tejidos vegetales hasta tres veces sobre su nivel natural utilizando la dosificacin ms baja de plata. Este ltimo efecto fue particularmente interesante ya que ilustra la posibilidad de mejorar la calidad nutricional de las plantas haciendo uso de los metales pesados en baja concentracin. Resultados anlogos fueron obtenidos por Rosales-Velzquez et al. (2006a, 2006b) utilizando semillas y plantas de cebolla en donde se aplic plata en el sustrato y en el tejido foliar. La primera tcnica no permiti la obtencin de nanopartculas de plata pero de nuevo se obtuvo tejido vegetal con un incremento sustancial en el potencial antioxidante respecto al testigo. Por otra parte, la aplicacin de plata foliar dio lugar a la obtencin de nenopartculas de plata en las hojas y en el bulbo, pero no dio lugar a cambios en el potencial antioxidante. Se ha demostrado entonces que es posible la formacin de nanopartculas metlicas en clulas de plantas o en condiciones de crecimiento de las plantas que hagan ptima la absorcin, la acumulacin, la estabilidad y tamao de los nanocristales, los sitios de acumulacin, la tasa de recuperacin, as como los procesos involucrados con el aislamiento y purificacin de las nanopartculas metlicas. Este tema los autores los consideramos interesante en el sentido de su potencial aplicacin conjunta con las tcnicas de fitorremediacin por fitoextraccin.

CONCLUSIONES

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La sustentabilidad del sistema de vida de nuestra especie se liga a los suelos. Por desgracia, en los ltimos cientos de aos, este recurso se ha degradado rpidamente como consecuencia de una serie de actividades humanas derivadas de nuestro explosivo crecimiento poblacional. Es clara la necesidad de estrategias de saneamiento y recuperacin duraderos y con el adecuado balance costo-beneficio, as como con la consideracin de todos los componentes biticos del sistema suelo. Aunque con mayor costo en tiempo y posiblemente mayor costo econmico, la prctica de la fitorremediacin, la cual contempla procesos bsicos a travs de los cuales las plantas promete que contribuir a la recuperacin de suelos, sedimentos y aguas contaminadas. Dependiendo de la estrategia de recuperacin, estos procesos darn lugar a la contencin o a la eliminacin de los contaminantes del suelo.

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ENFOQUE INTEGRAL DE NUTRICIN EN FRUTALES

Jorge B. Retamales
Departamento de Horticultura, Facultad de Ciencias Agrarias, Universidad de Talca, Chile

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RESUMEN

Los frutales son plantas perennes leosas que obtienen la mayor parte de sus nutrientes de la solucin suelo. El propsito fundamental de la produccin frutcola es la obtencin sostenida de altos rendimientos de frutos de calidad. Los nutrientes tienen, en general, baja incidencia en los costos totales del huerto, pero afectan fuertemente en la definicin de la cantidad y calidad de fruta a cosechar. Los diferentes rganos de un frutal demandan nutrientes en diversas cantidades y oportunidades; dichas demandas deben ser satisfechas en la cantidad y momento apropiado. El clculo de las dosis de fertilizantes debe considerar: los diversos aportes (reciclaje, agua de riego, aporte natural del suelo), la eficiencia de aplicacin de fertilizantes, as como la extraccin por diversos rganos, especialmente frutos. La eficiencia de aplicacin, vara segn nutriente, sistema de riego, fecha de aplicacin, etc. Para alcanzar una alta eficiencia de aplicacin, se requiere hacer coincidir el aporte de nutrientes con las demandas por los distintos rganos y con la mxima superficie de absorcin por parte de las races. El huerto es un sistema integrado en donde diversas prcticas culturales (riego, poda, raleo, etc.) afectan no slo un rgano definido y por un perodo breve, sino alteran por un extenso lapso el equilibrio copa/raz y el balance entre crecimiento reproductivo y vegetativo, y con ello las necesidades y proporciones en las demandas de nutrientes por parte de los diversos rganos. As, paradjicamente, muchos problemas nutricionales no se resuelven aplicando nutrientes. Se presentarn diversos ejemplos de alteraciones en dichos equilibrios y su influencia en el manejo nutricional de huertos de especies frutales de hoja caduca.

Palabras clave: Uso eficiente de fertilizantes, suelo, fruticultura, frutales de zonas templadas.

INTRODUCCIN

La nutricin mineral vegetal involucra la captacin y utilizacin por las plantas de la gran mayora de los elementos qumicos que forman parte de su composicin y la de sus consumidores, incluidos nosotros los humanos. La mayor parte de los elementos que forman parte de los seres humanos, se introducirn en la biosfera terrestre por las plantas mediante la nutricin mineral de los cultivos. En la dieta humana, las frutas han ido adquiriendo creciente importancia por los beneficios de su consumo para la salud. Por ser plantas perennes, la nutricin mineral frutales involucra aspectos diferenciales en cuanto a la absorcin, distribucin y reciclaje de los distintos elementos minerales.

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INFLUENCIA DE LA NUTRICIN MINERAL

Cerca del 15% del peso fresco de una planta corresponde a la materia seca. De esa materia seca, cerca de 10% representan el contenido mineralgico de la planta; por lo tanto los componentes minerales alcanzan en promedio a 1,5 % del peso fresco. Una deficiencia se puede desarrollar si la concentracin de un elemento en el suelo o sustrato es baja, o si el elemento est en formas qumicas que impiden su disponibilidad para ser absorbido. As, en ciertas ocasiones, las concentraciones excesivas de otro elemento pueden reducir la absorcin de un nutriente y provocar una deficiencia. Tal dficit inducido por una accin antagonista de otro elemento, se puede desarrollar an cuando el nutriente est presente en el suelo en nivel adecuado. Cuando un tejido est deficitario en un elemento esencial, se generan importantes cambios en su metabolismo y crecimiento. En primer lugar, se reduce la tasa metablica en los procesos donde dicho elemento participa. Debido a que cada reaccin metablica es parte de un grupo interconectado de vas bioqumicas, bajo condiciones de dficit prolongado o severo, se alterar gran parte del funcionamiento de la planta. La influencia de la nutricin mineral sobre el crecimiento, rendimiento y calidad de fruta de una planta frutal depender de: 1.- el elemento en cuestin, 2.- el momento de ocurrencia del dficit o exceso, 3.- la magnitud del desbalance, tanto en relacin a su distancia proporcional al ptimo, como en la duracin en la condicin de desbalance.

Nutricin mineral y crecimiento

La nutricin y el crecimiento son interdependientes. El crecimiento y el desarrollo alteran los requerimientos nutricionales de una planta, pero tambin la nutricin mineral afecta el crecimiento y desarrollo de la planta. En el caso de los frutales, estas pasan por una fase juvenil en la cual no hay produccin de fruta; por ello, los requerimientos nutricionales en esa fase son distintos de cuando la planta es adulta. Un alto porcentaje de la materia seca (75-85%) proviene de los carbohidratos formados en la fotosntesis. La capacidad fotosinttica de una hoja (fotosntesis neta a saturacin luminosa), est altamente correlacionada con el nivel de N, independiente que hayan variaciones en los niveles de N por diferencias entre especies, edades de hojas o disponibilidades de N en el suelo. Ello en parte se debe a que +/- 50% del N en la hoja est contenido en la enzima Rubisco (ribulosa bifosfato carboxilasa oxigenasa), que es la encargada de asimilar el CO2 en frutales. En plantas adultas, un mayor nivel de N puede aumentar el crecimiento total de la planta, pero ese mayor crecimiento de brotes puede reducir los carbohidratos disponibles para produccin de fruta. Lo anterior, puede causar mayor sombreamiento dentro de la copa e inducir menor induccin de yemas florales y con ello, menor rendimiento en la planta (Cuadro 1). En suma, el aporte de N debe usarse con cautela y ciertamente no slo para aumentar la tasa de fotosntesis.

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Las plantas regulan la distribucin de materia seca (carbohidratos y nutrientes minerales) mediante una intrincada interaccin entre fuentes (sources en ingls) y receptculos (sinks), la cual se basa en tres criterios: 1.- Fuerza de los receptculos, que corresponde al efecto del tamao y actividad de los mismos, 2.- Distancia entre fuentes y receptculos, y 3.Prioridad, donde la prioridad es: Frutos/flores > brotes/hojas > tronco y ramas > races. Las plantas usan diversos mensajeros qumicos para vincular fuentes con receptculos y as coordinar crecimiento y desarrollo entre diversos rganos de la planta. Entre tales sustancias estn las hormonas vegetales clsicas (auxinas, giberelinas, citokininas, etileno y cido abscsico), as como otras descubiertas ms recientemente: fitocromo, cido jasmnico, cido saliclico, sistemin, factores Nod, y brasinoesteroides. Algunos nutrientes alteran la respuesta de crecimiento de la planta en dos tipos de roles: 1. Como mensajeros, el ms prominente es el caso del Ca, pero el Mg tiene roles en servir de puente entre N y P, 2.Como reguladores. Por ejemplo, el nitrato regula la transcripcin de RNAmensajero. As tambin, bajos niveles de fosfato inducen genes que favorecen la captacin y reciclaje de fosfato.

Cuadro 1. Influencia de la disponibilidad de radiacin (% pleno sol) sobre el nivel de produccin (cantidad de frutos) y calidad de fruta en manzanos (Fuente: Rom, 1991). Proceso Factor Iniciacin cuaja Desarrollo dardos Calidad Color rojo Color verde Slidos solubles Slidos solubles Tamao frutos floral; Variedad % Pleno sol

Cantidad

Todas

30

Todas Delicious Granny Smith Delicious Granny Smith Todas

30 70 80 30 60 60 50 50

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Nutricin mineral y rendimiento

El rendimiento es un concepto econmico, que establece la proporcin de la materia seca producida por una planta que es destinada a los rganos cosechables. En los rboles frutales, los rganos cosechables son los frutos. Dependiendo de la edad del frutal y su nivel de rendimiento, estos pueden constituir 40-65% de la materia seca producida por un rbol frutal en la temporada. La vinculacin entre crecimiento y rendimiento puede ser negativa; es decir, un mayor crecimiento puede reducir el rendimiento. Por ello, el rendimiento de un frutal no slo depende de la interaccin de la planta con su medio ambiente, sino en buena medida de los estndares comerciales que definan la proporcin de la fruta que tendr los atributos para ser comercializados. Al analizar la vinculacin entre nutricin mineral y rendimiento, es til usar el concepto de componentes del rendimiento. Los componentes del rendimiento para un manzano sern: nmero de ramas, nmero de dardos o brotes frutales/rama, nmero de inflorescencias/brote o dardo, porcentaje de cuaja o amarre (proporcin de flores que llegan a la cosecha), y finalmente peso/fruto. La nutricin mineral puede incidir sobre todos y cada uno de estos componentes del rendimiento. Dado que varios componentes del rendimiento se forman o establecen en los aos previos, el efecto de la nutricin sobre el rendimiento no solo ocurre en la temporada de produccin de fruta. El efecto de la nutricin mineral sobre el rendimiento puede ser directo o indirecto. Un efecto directo podra darse ante insuficiencias nutricionales para satisfacer los requerimientos de determinados nutrientes en el crecimiento o desarrollo de los frutos (es decir sobre el componente del rendimiento correspondiente al tamao o peso por fruto). En tanto que un efecto indirecto de la nutricin sobre el rendimiento podra darse por la incidencia de la nutricin en la magnitud de cualquiera de los otros componentes del rendimiento, tanto en el ao de produccin como en los aos previos.

Nutricin mineral y calidad de fruta

La calidad de fruta es un concepto subjetivo definido por el mercado (compradores y comercializadores). Dentro del concepto global de calidad de fruta se incluyen atributos tales como: tamao, forma, color, ausencia de golpes, infecciones, abrasiones, desrdenes fisiolgicos o heridas, aromas, consistencia de la pulpa, etc. La nutricin de huertos frutales debe considerar el aporte de elementos a rganos especficos, antes que a la planta como un todo. As por ejemplo, para una mxima vida postcosecha, los frutos deben tener ciertos niveles de minerales. Las tcnicas para lograr esto son diferentes de aquellas para nutrir las partes vegetativas del rbol. En este caso, los nutrientes deben aplicarse al rbol y luego, manipular las variables que inciden sobre la translocacin y acumulacin de dichos nutrientes en la fruta.

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CRECIMIENTO RADICAL

Las races son la parte menos visibles de la planta, pero igualmente importante que las estructuras areas. Las races anclan el rbol, absorben, transportan y ocasionalmente almacenan nutrientes y agua, adems de sintetizar compuestos que son esenciales para la regulacin de las actividades de la planta. Debido a que es menos visible y ms difcil de acceder, ha sido menos estudiada que los rganos areos.

Importancia del crecimiento radical

Los huertos frutales crecen y producen en un sitio por 15-50 aos. La naturaleza perenne de los frutales y sus altas producciones, imponen condiciones distintas a las de plantas anuales o rboles forestales. La condicin del sistema radical puede afectar el rendimiento an cuando no existan deficiencias minerales aparentes en el suelo. An cuando las copas de los rboles se podan y manejan cuidadosamente, hay pocas prcticas culturales que alteren directamente el sistema radical. Un rbol frutal tiene demandas nutricionales variables durante el ao, segn la tasa de crecimiento de fruta y brotes, la magnitud de reservas de nutrientes desde la temporada anterior y las condiciones de
crecimiento.

A veces, las altas demandas de nutrientes pueden no ser satisfechas por las races y requieran ser suministradas mediante aplicaciones foliares. An cuando las races de los rboles frutales tienen el potencial de desplegarse en el suelo, a menudo 70% de las races crecen en los 0-30 cm de profundidad. La aireacin del suelo determina la profundidad mxima del sistema radical. La amplitud de las races generalmente es mucho mayor a la que alcanzan las ramas. rboles maduros de manzanos y peras alcanzan 18-21 m2 amplitud, mientras los frutales de carozo logran amplitudes de 8-16 m2. La densidad del largo de raz vara entre 0,2 km/m2 en manzanos hasta 12 km/m2 en plantas de kiwi (una diferencia de 60 veces). La tasa de supervivencia de races al invierno depende de su dimetro; as, en manzanos Red Chief Delicious/M 26, la tasa de supervivencia fue de 12% para races < 0,3 mm de dimetro; 30% para races 0,3-0,5 mm dimetro; y 55-60% para races de 0,5 a 1,1 mm dimetro. Por otra parte, las races ms finas se encontraban en sectores ms densamente poblados y tenan mayor tasa de mortalidad que races ms gruesas.

Crecimiento radical: plantas anuales vs. plantas perennes

Al comparar el crecimiento radical entre cultivos anuales y rboles frutales perennes, se observan marcadas diferencias en la magnitud (largo, densidad), y arquitectura del sistema
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radical. A pesar del potencial de extenderse a grandes distancias y profundidades, la densidad del sistema radical de las plantas frutales es de varios rdenes de magnitud menor al de especies anuales, tales como las gramneas y dicotiledneas (Cuadro 2). Ello implica menor capacidad de la raz para explorar, as como escasa interfase raz/suelo. Si la densidad radical es baja, es dable esperar una alta tasa de remocin de agua desde la zona contigua a la raz, a fin de satisfacer las demandas de agua por la transpiracin de los rganos areos. Ello crea fuertes gradientes en la superficie de la raz. As, las tasas de ingreso de soluciones a la raz de frutales seran 5-8 veces mayor que las medidas en plantas anuales.

Cuadro 2. Relacin crecimiento raz/crecimiento foliar: La (cm raz por cm2 hoja). Cultivo La (cm cm-2) Gramneas Dicotiledneas herbceas Conferas Frutales Fuente: Neilsen y Neilsen, 2003 100 4.000 53 310 69 126 26

Al comparar plantas anuales con rboles frutales, la escasa magnitud del sistema radical es incrementada al considerar los pelos radicales. As, mientras un manzano de 1 ao posee 17 millones de pelos radicales y una largo total de 3 Km, una planta de cebada puede tener 17 mil millones de pelos radicales, con un largo total de 600 Km. La variable ms importante en definir la captacin de nutrientes es el largo total del sistema radical. La absorcin de nutrientes inmviles (P, Zn y Fe), es muy dependiente del rea de contacto de la raz, la cual depende del largo de raz, de pelos radicales y las hifas de micorrizas. Se esperara que rboles con mayor densidad de largo radical (km m-2), tuvieran mayor capacidad de captar nutrientes y, con ello, mayor produccin. Pero, al comparar diversos frutales, no hay relacin entre densidad del largo radical y potencial de produccin en condiciones ideales (Fig. 1). Los manzanos tendran dinmicas de races muy eficientes; as adquiriran ms nutrientes y agua por unidad de C destinada a la raz. Ello involucrara ajustar las tasas de crecimiento radical, la longevidad de races y las tasas de respiracin radical. As, la longevidad radical ser mnima para races con baja eficiencia y mxima en races con alta eficiencia. Las estimaciones en eficiencia del sistema radical asumen que las plantas pueden desprender las races cuando se hacen ineficientes; sin embargo, las races no se desprenden de las races como los brotes se desprenden de las hojas, pues no hay zona de abscisin clara en las races. Pero, existe evidencia que las plantas tienen control macro de 154

la longevidad de las races. Por ejemplo, hay mucha muerte de races dentro de 2 semanas de la completa desfoliacin de manzanos. As tambin, alta produccin de fruta se asocia
con alta mortalidad de races.

Figura 1. Comparacin entre produccin de fruta y largo de races en huertos de varios frutales. A. Mximo rendimiento estable bajo condiciones ideales de cultivos frutales, B. Largo mximo y mnimo de raz/ unidad de rea de huerto adulto (Fuente: Eissenstat et al., 2002).

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Coordinacin del crecimiento

La optimizacin del crecimiento radical con la disponibilidad de nutrientes en el suelo, es consistente con el concepto de equilibrio funcional entre raz y parte area (brote). Este concepto propone que las distancias entre fuentes y receptculos regulan la distribucin de carbohidratos y nutrientes. As, las races satisfacen ms fcilmente sus requerimientos por nutrientes minerales que por carbohidratos, mientras lo opuesto ocurre para los brotes. Cuando los nutrientes estn escasos, el crecimiento de la raz y del brote estarn limitados por los nutrientes; en esas condiciones hay amplia disponibilidad de carbohidratos para el brote y se translocarn carbohidratos a las races. Cuando una raz encuentra un volumen de suelo rico en nutrientes, los nutrientes absorbidos inicialmente quedan en la raz y promueven el crecimiento. A medida que los nutrientes en la raz alcanzan el nivel adecuado, se translocan ms nutrientes hacia el brote. A menudo, las conexiones vasculares determinan que una parte del brote recibe una proporcin significativa de sus nutrientes desde una seccin de la raz, y en retorno, provee carbohidratos en primer lugar a esa raz. Esa seccin del brote, que ahora tiene un nivel suficiente de nutrientes, llega a estar escasa en carbohidratos y transloca una cantidad relativamente escasa de carbohidratos a la raz; as, el crecimiento de esa raz llega a estar limitada por carbohidratos. En especies forestales templadas hubo muy baja correlacin entre vida media de hojas y races, pero alta correlacin entre largo radical especfico (largo raz/peso seco raz) y rea foliar especfica (rea foliar/peso seco foliar). En manzanos existira crecimiento asincrnico de brotes y races. As, rara vez se sobreponen perodos de fuerte crecimiento de brotes y races, ello indicara competencia por carbohidratos entre brote y raz; pero, recientes investigaciones muestran que ello no siempre ocurre (Figura 2).

Factores que afectan crecimiento radical

Diversos factores ambientales y de manejo afectan el crecimiento radical. As, en manzanos la produccin de races es afectada por: portainjerto, edad de la planta, riego (tipo, frecuencia y carga de agua), manejo del suelo, uso de mulch, fertilizacin (nutriente, dosis, localizacin), poda area, poda radical y carga frutal. Por limitaciones de espacio, en este texto nos concentraremos en la disponibilidad de nutrientes.

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Figura 2.- Patrones de nacimiento de races a lo largo de 2 temporadas de crecimiento en rboles de Gala/M9 en Summerland, BC, Canad. Los rboles recibieron riego pleno en ambos lados. Se indica fecha de plena flor (B) y cosecha (H) (Fuente: Eissenstat et al., 2006).

Disponibilidad de nutrientes. El crecimiento radical es mnimo en suelos infrtiles por limitacin nutricional cerca del pice radical. Al aumentar el contenido de nutrientes, las races proliferan y forman una estructura ms densa. Cuando los nutrientes exceden los rangos ptimos, el crecimiento radical se inhibe por disponibilidad de carbohidratos y eventualmente cesa. El efecto de la nutricin sera indirecto y actuara alterando las partes areas de los frutales. En el caso del N, estimula el crecimiento primario de races absorbentes. En una planta con adecuado N, el peso radical aumenta en 50% y la superficie radical absorbente se incrementa en 200% respecto a un rbol con dficit. Por otra parte, N en exceso reduce el crecimiento radical, pues promovera crecimiento de brotes e impidira acumular materia seca en la raz. En plntulas de manzano (Red Chief Delicious), la adicin localizada de N (nitrato), aument la eficiencia radical al aumentar la absorcin de N en mayor medida que lo hizo el costo de la raz. Consistente con ello, las races del sector donde se aplic N tenan mayor vida media. Ello sugerira que la planta puede extender la longevidad de races ms eficientes con mayor asignacin de carbohidratos y aumento en sistemas de defensa para races que operan con mayor eficiencia (Fig. 3). En cuanto a otros elementos, la adicin de K y P aumenta la ramificacin del sistema radical. El K aumenta el peso radical de manera ms eficiente que la parte area del rbol. El Ca es esencial para que crezca el pice radical; dichos pices mueren ms frecuentemente con dficit leve o marcado de Ca. Aplicar P (foliar o suelo), reduce la infeccin radical por micorrizas en frutales; ello se debera a inhibicin de germinacin de esporas del hongo o por alteracin de compatibilidad de micorriza con el husped (rbol). En cualquier caso, una menor infeccin de micorrizas puede alterar, entre otros: capacidad de planta a enfrentar situaciones de estrs, resistencia a ataques por microorganismos fitopatgenos y disponibilidad de nutrientes inmviles: P, Zn y Cu.

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Figura 3.- Vida mediana de races de manzano creciendo en macetas divididas. Las plantas recibieron: nitrato en dosis alta (H; 8,0 mmol) o baja (L; 1,6 mmol) dos veces por semana separadamente en cada maceta. Tratamientos: alto N en ambas macetas (HH), alto N en una y bajo N en la otra (HL), y bajo N en ambas macetas (LL). Asterisco indica maceta medida. Vida mediana de races se midi usando minirizotrones y tubo transparente rgido para 2 grupos de races. El grupo 1 son races nacidas antes de la primera cosecha (112 posttransplante) y el grupo 2 son races nacidas entre primera y segunda cosecha (112 a 127 das post transplante).

DEMANDA DE NUTRIENTES

Los nutrientes cumplen diversas funciones, por lo que su demanda vara, entre otros, segn: especie y variedad frutal, edad de la planta, condicin hdrica, carga frutal, condicin fitosanitaria y poca del ao. Segn sus caractersticas (materia orgnica, pH, textura, CIC, profundidad, etc.), cada suelo tiene cierta disponibilidad de nutrientes para su absorcin por la planta. Para evitar dficit, deber suplirse la oferta natural de nutrientes con fertilizantes (al suelo o follaje), en la forma y momento oportunos.

Elementos y rganos

Los diversos rganos en las distintas especies y variedades frutales, tienen ciertas concentraciones de los diferentes elementos minerales. Hay alta extraccin de K, Ca y N (Cuadro 3). Hay alta remocin de K por los frutos. Existe similar distribucin de N hacia los distintos rganos de la planta. Gran parte del Ca est en ramas y brotes, en desmedro de frutos; ello explica la baja acumulacin de Ca en frutos y preponderancia de desrdenes vinculados a dficit de este elemento en frutos de rboles frutales. 158

Cuadro 3: Distribucin de nutrientes (kg/ha) en manzano cv. Golden Delicious con 500 plantas/ha y rendimiento de 90 ton/ha (Fuente: Neilsen and Neilsen, 2003).

Nutriente Nitrgeno Fsforo Potasio Calcio Magnesio Azufre Cloro

Ramas 39,7 6,0 33,9 83,5 8,0 8,5 4,5

Hojas 32,6 3,9 25,7 53,5 6,7 2,8 24,3

Races 27,6 5,6 16,8 21,0 3,5 3,9 1,3

Frutos 21,3 4,0 120,0 4,4 3,7 0,2 15,2

Total 121,2 19,5 196,4 162,4 21,9 15,4 45,3

DETERMINACIN DE LA CONDICIN NUTRICIONAL DEL HUERTO

En cultivos anuales, se usa regularmente el anlisis de suelo para estimar aporte de nutrientes del suelo y necesidades de fertilizacin. Pero en frutales, por ser plantas perennes presentan reciclaje de nutrientes en la planta. As, se requiere integrar informacin de anlisis de suelo, anlisis foliar, de frutos y sntomas visuales.

Sntomas visuales

Los sntomas visuales se han usado extensamente en la nutricin mineral. Dado que los niveles de un nutriente afectan ciertas vas metablicas, el dficit/exceso de un nutriente altera la fisiologa y produce sntomas. Basar el manejo nutricional de un huerto slo en sntomas es problemtico: 1.- Muchos sntomas slo se expresan con dficit severos, por lo que cuando se enmienda el problema, la planta ya ha tenido un perodo de desbalance con efectos negativos sobre el rendimiento y calidad de fruta, 2.- Un sntoma puede deberse a diversos problemas, algunos de los cuales pueden estar vinculados a la nutricin; incluso aunque su causa fuera nutricional, hay desbalances en diversos elementos que producen sntomas similares, 3.- Se requiere mucha experiencia para diferenciar entre diversos sntomas, 4.- Es un mtodo cualitativo, por lo que es difcil definir niveles de fertilizacin basndose slo en los sntomas.

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Anlisis de suelos

El propsito del anlisis de suelo es proveer simultneamente informacin sobre los nutrientes solubles e intercambiables existentes en el suelo, y la cantidad de nutrientes potencialmente disponibles a partir de componentes orgnicos e inorgnicos. Su efectividad depende de la capacidad para simular las condiciones qumicas del suelo que controlan la disponibilidad de un nutriente, y para predecir la absorcin de nutrientes por el cultivo. An as, el anlisis de suelo puede ser un til indicador del aporte de nutrientes en huertos, especialmente si se hace un seguimiento a travs del tiempo. An ms, es la nica forma de conocer posibles limitaciones de nutrientes antes de plantar el huerto; en este contexto, la informacin de salinidad y, particularmente pH, puede ser importante para definir la disponibilidad de nutrientes para la planta. Existen dificultades para el uso regular del anlisis de suelo en establecer pautas de fertilizacin en frutales. Es difcil colectar una muestra representativa de la zona de enraizamiento en rboles que tienen races profundas y distribuidas irregularmente. Adems, la distribucin radical puede alterarse por la aplicacin de agua y fertilizante, con lo que al muestrear una pequea porcin del suelo puede no reflejar la realidad. Finalmente, los valores crticos del suelo no han sido establecidos con exactitud en frutales, los cuales tienen potencialmente un mayor perodo de captacin de nutrientes que los cultivos anuales, adems de presentar almacenaje y reciclaje de nutrientes. Una forma de tratar de reducir los problemas del muestreo de suelo es el uso de los llamados lismetros de succin, que son cpsulas porosas unidas a tubos de PVC de 60-120 cm de largo que se insertan en la zona radical de frutales. Las cpsulas de 1,25 de dimetro, emularan la raz de los frutales (Fig. 4). Las muestras de nutrientes disueltos en agua de riego (10-15 cc/muestra), deben colectarse 12-24 horas despus del riego. Debe estandarizarse el muestreo para reducir dispersin de los datos obtenidos.

Figura 4.- Lismetro de succin usado para obtener muestras de solucin de nutrientes en zona de crecimiento radical en frutales.

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Anlisis de tejidos

En contraste con los anlisis de suelos, el anlisis de tejidos (incluido el anlisis foliar), integra variables que afectan la disponibilidad de nutrientes y, por ello, refleja los factores que inciden en la disponibilidad de nutrientes (clima, manejo y carga frutal), antes que el contenido del nutriente en el suelo. En frutales, las variaciones en niveles foliares son menores que en anuales. Varios factores pueden alterar los niveles de nutrientes en tejidos. La baja absorcin de un nutriente puede deberse a poca aireacin (baja respiracin en raz), bajo nivel hdrico en el suelo o poca actividad metablica en la raz. En cambio, una alta absorcin de nutrientes puede reflejar condiciones ptimas de temperatura, sistema radical amplio y activo, o alta capacidad fotosinttica que entregue a la raz suficientes carbohidratos para un ptimo metabolismo radical. Para que el anlisis de tejidos pueda ser til en determinar la condicin nutricional de un huerto, es preciso establecer criterios de muestreo que permitan comparar las muestras obtenidas con los estndares establecidos para cada cultivo y variedad. As, debe definirse el momento de toma de muestra, el tipo y nmero de hojas, as como las caractersticas de las plantas a muestrear. Se ha sugerido muestrear siempre de los mismos rboles, a fin de poder correlacionar la condicin mineral de las plantas con el crecimiento vegetal, as como el nivel y calidad de la produccin obtenida. Considerando la diferente movilidad de los elementos entre los distintos rganos de una planta, existen situaciones en que la condicin nutricional del follaje no representa la captacin y acumulacin de ciertos nutrientes por los frutos. Dado que la nutricin de ciertos elementos minerales (en particular calcio) afecta la calidad y la vida postcosecha de la fruta, en diversas especies ha sido necesario establecer la condicin mineral de los frutos. Hay bastante controversia sobre las partes del fruto que deben ser incorporadas en el anlisis y diversos laboratorios proponen variados mtodos. Aqu tambin deben seguirse pautas estrictas sobre el muestreo y manipulacin de muestras. Para tener un mayor conocimiento de la evolucin de los niveles de N en la planta a lo largo de la temporada, se han usado otros tejidos vegetales para hacer un seguimiento de este elemento en la planta. As, se ha postulado la determinacin durante el receso de los niveles de este elemento en dardo y races de manzano, as como en sarmientos y races de vid, ello permite establecer el nivel de reservas de N y su disponibilidad para la brotacin. En el caso de la vid, se ha establecido una alta correlacin (r = 0,92) entre los niveles del aminocido arginina y el N-total en races.

Integracin e interpretacin de datos

Para efectuar recomendaciones de fertilizacin debe integrarse la informacin proveniente de diversas fuentes. Dado que la nutricin afecta el funcionamiento de diversos procesos vegetales, sus efectos no slo se van a observar en el anlisis foliar. Al momento de establecer la condicin nutricional del huerto, no slo debe incorporarse los resultados de los anlisis de los diversos muestreos (foliar, fruto, suelo, etc), sino adems informacin sobre: 161

cantidad y calidad de fruta (peso, color, golpe de sol, vida postcosecha, firmeza, etc.), crecimiento vegetal (brotes y races), as como fecha de cada de hojas, niveles de cuaja o amarre, sntomas en frutos, hojas y brotes. Para interpretar el anlisis foliar, normalmente se ocupan los rangos estndares, crticos u ptimos de los nutrientes. Dado que los niveles de nutrientes varan durante la temporada y entre diversos tejidos, dichos rangos estndares estn definidos segn: 1.- poca de muestreo, 2.- Tipo de tejido, 3.- Especie (y a veces variedad y patrn). En esas condiciones, el nivel foliar ptimo de un determinado elemento se vincula al mximo nivel de produccin y calidad de fruta; este nivel est definido para una determinada variedad y condicin climtica. Diversos investigadores sealan que el uso del nivel crtico para la evaluacin del estado nutricional de cultivos es cuestionable, pues ese enfoque no define si la deficiencia es aguda o no; adems, en el caso que se hayan clasificado uno o ms nutrientes como deficientes, tampoco establece cual nutriente es el ms limitante. An ms, los niveles de los nutrientes estn influidos por la dilucin o concentracin debido a las variaciones en la cantidad de materia seca producida por el crecimiento. Un enfoque diferente en la interpretacin de los anlisis de tejidos lo constituye el sistema integrado de diagnstico y recomendacin (en ingls: DRIS), el que compara relaciones duales entre nutrientes en el huerto bajo muestreo (N/P, P/K, K/Ca, Ca/Mg, etc.) respecto a un grupo de alto rendimiento, lo que entrega valores estndares o normalizados. El mtodo DRIS ha ayudado a establecer desbalances nutricionales en diversos rboles frutales (cerezo, manzano, vid, durazno) y de nuez (pecana y avellano europeo), en relacin al rendimiento y calidad de fruta. Se sealan como ventajas del DRIS sobre el mtodo del valor crtico: 1.- la integracin de interacciones entre los nutrientes, as como de estos con la acumulacin de materia seca y con las actividades metablicas, 2.- Calcula ndices de balance de nutrientes segn un orden de su dficit. Por otra parte, el mtodo M-DRIS, considera los contenidos de nutrientes, as como un ndice de materia seca y no slo sus relaciones duales. Comparado con otros mtodos integradores, una ventaja de este mtodo es su mayor sensibilidad a identificar grupos de plantas con problemas no nutricionales. Este mtodo puede ser particularmente til cuando los valores crticos disponibles no son satisfactorios. Finalmente, el mtodo CND requiere anlisis de la composicin estadstica de los datos y se basa en el establecimiento de variables multinutrientes (z), las que se consideran en trminos relativos mediante la media geomtrica de la composicin nutricional. Se ha reportado que la consistencia en la interpretacin del anlisis aumenta en la medida que el enfoque univariado (nivel crtico) aumenta hacia un enfoque de relaciones bivariadas (de dos en dos o DRIS, M-DRIS). Progresivamente a travs de un anlisis multivariado, se incorporara la completa estructura de variacin. No fue posible encontrar en literatura ensayos en que comparen los tres mtodos en frutales; sin embargo, un estudio de ese tipo realizado en Eucalyptus en Brasil concluy: Dependiendo de la forma escogida de comparacin y grado de concentracin del nutriente, se pueden obtener resultados muy diferentes en relacin a la concordancia de los mtodos. Por otra parte, se ha sealado que estos mtodos han sido poco probados en frutales y que el mtodo DRIS frecuentemente no provee mayor informacin que el uso de valores crticos.

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FERTILIZACIN

En huertos frutales, los fertilizantes se aplican para elevar los niveles nutricionales si estos son inadecuados para la produccin en calidad y cantidad de fruta. Tambin se aplican para mantener la fertilidad del suelo, la que declinar si las cantidades removidas del suelo por prdidas (lixiviacin, desnitrificacin, volatilizacin) o por la absorcin del cultivo, son mayores a los nutrientes aportados por la degradacin de material parental o la mineralizacin de la materia orgnica. La aplicacin de fertilizantes puede hacerse directo al suelo, disuelto en el agua de riego y aplicado por riego presurizado (fertigacin), as como asperjados a la parte area (foliar) o aplicado en postcosecha dirigido al fruto (aspersin o inmersin).

Determinacin de dosis

Para estimar dosis de fertilizantes, se requiere conocer o calcular: 1.- la demanda del elemento por la planta, 2.- el aporte del elemento por el suelo, y 3.- la eficiencia de fertilizacin. La demanda proviene de los requerimientos de cada elemento para formar los tejidos del frutal (Cuadro 3). Ello tiene relacin con el crecimiento y distribucin de la materia seca y los nutrientes minerales entre diversos tejidos del frutal. Normalmente la carga frutal incide fuertemente en esta variable. Para establecer el aporte de nutrientes minerales del suelo, hay varios enfoques. Uno es considerar los niveles provenientes del anlisis de suelo, teniendo presente que este mtodo es ms aplicable a cultivos anuales. En el caso del N, puede asumirse un factor de mineralizacin de la materia orgnica. La eficiencia de fertilizacin puede ser estimada con cierta precisin para el caso del N, mediante el uso de nitrgeno pesado (N15). El cual al ser aplicado como fertilizante, permite conocer el nivel de prdidas, el movimiento en el suelo y su distribucin entre los diversos tejidos vegetales. En el caso de los otros nutrientes, se trata de estimar las prdidas por cada una de las variables que afectan el aprovechamiento del fertilizante (Cuadro 4).

Cuadro 4. Valores promedio de cuatro aos de la eficiencia de recuperacin de nutrientes en un huerto de kiwi cv. Hayward (Fuente: Buwalda and Smith, 1988).

Variable (Kg/ha Absorcin Uso fertilizante Entrada atmsfera

N 527 331 124

P 70 92 1

K 572 430 28

Ca 517 3900 28

Mg 87 318 16

S 88 65 48

Cl 241 290 464

163

Nutriente reciclado Eficiencia (%)

364 64

39 53

223 84

485 12

76 21

73 47

190 26

As por ejemplo, los clculos para estimar las necesidades de fertilizantes (dosis de referencia) en un cultivo de manzano Rojo spur en funcin de la eficiencia de fertilizacin (%) y los niveles de rendimiento, arrojan los siguientes valores (Cuadro 5)

Cuadro 5.- Dosis de referencia de N calculadas para distintas producciones alcanzables y diferentes eficiencias de fertilizacin nitrogenada en manzano Rojo Spur (Fuente: Silva y Rodrguez, 1995).

Dosis de N Eficiencias de Rendimiento (ton/ha) 40 50 60 70 75 90 105 120 60 72 84 96 total 40 50

(Kg / ha) Aplicacin (%) 60 70

50 60 70 80

43 51 60 69

Fertilizantes: caractersticas y consideraciones para su eleccin y uso

Al momento de definir el fertilizante a emplear y su forma de aplicacin, los principales factores a considerar son: forma del nutriente, velocidad de accin, riesgo de prdidas, cambio en la reaccin del suelo (pH), concentracin de nutrientes, aporte de otros nutrientes, costo de adquisicin, transporte, almacenaje y aplicacin.
164

La aplicacin de fertilizantes slidos al suelo, particularmente las formas menos solubles como en el caso de fsforo y potasio, es muy conveniente antes de establecer el huerto, por la posibilidad de incorporar fcilmente el fertilizante

Formas de fertilizacin: suelo vs. follaje

Aplicaciones al suelo. El nitrgeno es el fertilizante que es ms frecuentemente aplicado en huertos frutales. La adicin de fsforo y potasio al suelo slo se justificar cuando los anlisis de suelo, la respuesta de la planta o el anlisis de tejido indiquen la necesidad de aplicar. Las aplicaciones de calcio pueden ser importantes cuando se usa para aumentar el pH del suelo. A veces se recomienda aplicar magnesio y boro, mientras que los otros micronutrientes rara vez se aplican al suelo. Los fertilizantes solubles, especialmente el nitrgeno, pueden ser repartidos sobre el piso del huerto y pueden moverse hacia la zona radical mediante las lluvias o el riego. La aplicacin concentrada dentro de la banda de herbicida puede ayudar a reducir prdidas por absorcin de la vegetacin entre hileras. Dadas las dificultades en su implementacin y su potencial dao al sistema radical, la aplicacin en bandas es poco usada en huertos frutales, a pesar que potencialmente mejorara la absorcin, especialmente en suelos poco frtiles. Un ejemplo de esta aplicacin en bandas, es la colocacin de fertilizante fosforado (fosfato mono-amnico) en altas dosis en el hoyo de plantacin, lo que puede estimular el crecimiento inicial del sistema radical, siempre que no se alcancen niveles excesivos de salinidad en el suelo.

Fertigacin. La adicin de fertilizantes con el agua de riego es una tcnica reciente para fertilizar huertos frutales. Esta tcnica tiene diversas ventajas, las que incluyen la posibilidad de transportar los nutrientes solubles directamente a la zona radical al momento de regar. De esta forma, las cantidades y oportunidades de aplicacin de fertilizante pueden ser ajustadas para coincidir con las demandas reales de la planta, reduciendo el trfico frecuente en el huerto para distribuir el fertilizante. El sistema funciona mejor con sistemas de microriego de baja presin: goteo, microjet y microaspersin, los que tienden a concentrar las races en un menor volumen de suelo. La reduccin de pH puede ser un problema serio, especialmente cuando fertilizantes acidificadores se aplican repetidamente a suelos con baja capacidad tampn o buffer. Investigaciones que compararon aplicacin al voleo vs. fertigacin muestran que ambos pueden lograr similar crecimiento y rendimiento, pero el fertiriego tiene mayor eficiencia y requiere menos fertilizante. Ya que el N como NO3 se mueve con el agua, una programacin efectiva del riego que impida los excesos, logra tambin reducir las prdidas por lixiviacin de N. Slo fertilizantes altamente solubles pueden aplicarse va fertigacin al ser incorporados con sifn o inyector al sistema de riego. La fertilizacin puede ajustarse por volumen o zona de riego, antes que a rboles individuales.
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Fertilizacin Foliar. Los nutrientes minerales pueden ser aplicados directamente de rboles frutales mediante la aspersin de concentraciones diluidas al follaje, yemas e incluso corteza. Las aplicaciones foliares son particularmente efectivas cuando se dan alguna de las siguientes circunstancias: 1.- Baja disponibilidad de nutrientes en los suelos (especialmente por problemas de pH), 2.- Suelo con bajo nivel de humedad, 3.- Disminucin de actividad radical durante la etapa reproductiva. En la actualidad, las aplicaciones foliares son parte del manejo comercial de huertos frutales (Cuadro 6).

Cuadro 6. poca, dosis y concentracin de los principales aplicaciones de nutrientes recomendados para su aplicacin foliar en manzanos. Neilsen and Neilsen, 2003. Nutriente Forma poca Dosis (Kg/ha) Macro Nitrgeno Urea Postcosecha ; corregir dficit y 2-11 bajar inculo venturia Magnesio Sulfato o Follaje temprano (4-6 semanas 45-90 Nitrato Fsforo KH2PO4 post flor); corregir dficit Follaje y fruta temprana ; reducir 22 degradacin por baja temperatura Calcio Cloruro o Al fruto, 6 sem. post flor y 6 sem. 14-21 Nitrato pre cosecha; reduccin Bitter pit y mejor guarda Micro Boro Solubor Pre floracin, mantener 2,8-5,6 60-100 300-500 1000 1200-2000 200-1000 Concentracin (g/100 l)

rendimiento y corregir dficit Zinc Sulfato (36% slido) Hierro Manganes o Cobre Oxisulfat Follaje temprano de plantas 1-2 50
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Botn plateado a yema hinchada; 4,5 -45 mantencin o corregir dficit

120-1200

Quelato Sulfato

Corregir dficit Corregir dficit

1,1-2,3 2-9

Segn proveedor 60-200

juveniles;

puntas

verdes

en

rboles productivos

Las aplicaciones foliares de nutrientes minerales ofrecen la ventaja de una rpida respuesta de la planta que la aplicacin de nutrientes al suelo. Sin embargo, el suministro es mas temporal y tiene algunos problemas: 1.- Baja tasa de penetracin, particularmente en hojas con cutculas gruesas (e.g. citrus y caf), 2.- Escurrimiento desde superficies hidrofbicas, 3.Lavado por lluvia, 4.- Secado rpido de soluciones, 5.- Cantidad limitada de un nutriente (especialmente macronutriente), que puede ser aplicado cada vez, y 6.- Dao o necrosis foliar. En fertilizacin foliar es importante la proporcin de la aspersin que llega a cada rgano de la planta. Esta variable debe necesariamente considerarse cuando se trata de mejorar niveles de nutrientes poco mviles (como el calcio); as, si se pretende aumentar el nivel de Ca en frutos, menos de 2 % de lo aplicado llega a ese rgano y, dado que es poco mvil, habr bajsima retranslocacin desde otros rganos de la planta, an cuando se encuentren a escasa distancia del fruto en cuestin (Cuadro 7).

Cuadro 7. Efecto del volumen de mojamiento en la distribucin de depsitos de pesticida usado para aplicar la misma cantidad de producto/ha a un huerto maduro de manzano en expansin foliar plena.

Area muestreada

Volumen de aplicacin (l ha-1) 3742 560

Area de destino Follaje Fruto Corteza Total

Porcentaje depositado por g aplicado 44,3 1,9 8,4 54,6 58,3 1,8 9,7 69,8

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Deriva Piso huerto Otras* Total 32,2 13,2 45,4 24,3 5,9 30,2

Fuente, Hall, 1991. * Representa todas las reas fuera del huerto tratado.

ABSORCIN DE NUTRIENTES

El hecho que existe mucha diferencia entre la composicin mineral del sustrato (suelo) y aquella de las plantas, es indicativo que hay entrada selectiva de elementos a la planta. As, la concentracin de potasio en la solucin suelo es generalmente menor a 0,005% (50 ppm), mientras que dicho elemento constituye normalmente cerca de 1% del peso seco de la planta. La barrera que separa la planta del medio es la membrana plasmtica de la clula. Sin esta membrana, las clulas vegetales estaran inundadas por su ambiente externo. Por cada gramo de materia seca que la planta acumula, transpira 50-2000 gramos de agua. Este movimiento de agua por la planta acarrea los solutos disueltos en ese lquido a la superficie radical (flujo masal). An cuando los solutos pueden estar diluidos en agua, los volmenes de agua son tan grandes que las cantidades de solutos acarreados a la superficie de las races pueden ser considerables. La membrana plasmtica es una barrera que evita la entrada descontrolada de tales solutos.

Interaccin raz/sustrato

La absorcin de nutrientes por las races de plantas ocurre por 3 vas: 1.- Flujo masal de nutrientes disueltos en agua en contacto con la raz, 2.- Intercepcin directa de la raz, y 3.difusin (si hay gradiente de concentracin entre raz y suelo circundante). Estudios en gramneas sealan que la difusin explica la mayor parte de la absorcin de P (93%) y K (78), mientras que el flujo de masa sera responsable del mayor porcentaje de la absorcin de N(99), Ca (72), Mg (87), Fe (53) y B (97). La intercepcin radical explica un bajo porcentaje de la absorcin de Ca (28), Mg (13) y Fe (10). En frutales, por su baja densidad radical, tendra menor importancia la intercepcin directa. La mayor cantidad de iones disueltos en agua es en la regin ubicada pocos centmetros detrs del pice radical. Esta es la regin con mayor actividad y en la cual los pelos radicales son ms numerosos. Los tejidos mas viejos de las races de los rboles frutales, se suberizan progresivamente y se hacen menos permeables. Pero, esta impermeabilidad no es absoluta, por lo que normalmente hay considerable flujo de agua y nutrientes a travs de 168

estas regiones menos activas de la raz. Las secciones no suberizadas de los rboles a menudo no tienen la suficiente presencia en el tiempo y espacio como para proveer por si solas los requerimientos de estas plantas. Una vez que los nutrientes disueltos en agua ingresan a las clulas de la raz, el movimiento radial hacia los haces vasculares lo pueden hacer ingresando al interior de las clulas (simplasto) o movindose entre las clulas (apoplasto). Se estima que la mayor parte del flujo es por la va de menor resistencia (apoplasto). En partes maduras de la raz, la parte que se movi va apoplasto, debe ingresar al interior de las clulas al llegar a un grupo de clulas conocidas como endodermis, en la cual la presencia de una formacin llamada Banda de Caspari impide el paso de sustancias por el apoplasto. Una vez que pasan la endodermis, la solucin con nutrientes llega a los haces vasculares y puede moverse hacia la partes areas de la planta va xilema gracias a las diferencias de presin generadas por la transpiracin de agua en las hojas. El tejido vascular es el principal paso de agua en la raz, a travs del tallo, en los pecolos y venas de hojas. En la hoja, las venas traen nutrientes hasta clulas del mesfilo. El agua se mueve por el mesfilo (a travs del apoplasto como lo hizo antes de manera radial en la raz) y ah se transpira desde la superficie foliar por los estomas.

Interaccin hoja/solucin fertilizante

Gran parte de los nutrientes aplicados al follaje son sales o compuestos polares. Para pasar adentro de la hoja deben atravesar la epidermis (banda compacta con 1 o ms capas de clulas). Tiene dos estructuras vinculadas con ingreso y salida de sustancias: cutcula y estomas (Figura 5). La cutcula contiene principalmente cutina (un polmero lpido) y cera, la que cubre la pared externa (a menudo engrosada), de las clulas epidermales. En muchos frutales, la cutcula est cubierta por una pelcula de cera, que disminuye la prdida de agua y la entrada de sustancias.

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Figura 5. Esquema de la cutcula de una hoja, indicando sus distintas partes (Fuente. Epstein and Bloom, 2005).

La cutcula ofrece dos opciones para ingresar sustancias: la ruta lipoflica (no polar), apta solo para ingresar compuestos no polares, por lo que tiene rol menor en el ingreso de fertilizantes foliares. Las molculas polares o cargadas elctricamente, penetran la cutcula mediante poros polares, los que estn cargados negativamente (favorecen ingreso de cationes y rechazan entrada de aniones). En los ltimos aos, el rol de la va estomtica ha sido objeto de controversia. Se ha demostrado que los estomas estn protegidos contra el ingreso de agua lquida; ello se tom como evidencia contra la posibilidad de absorcin de sustancias a travs de los estomas. Pero, estudios posteriores han demostrado que el ingreso ocurre en conexiones lquidas que cruzan los estomas (conexin transestomtica) provistas por agua adherida a las paredes de los poros estomticos. Los estomas seran importantes para el ingreso de sustancias aplicadas foliarmente; en el caso de aplicacin de N (como urea, nitrato o amonio), la va estomtica signific 70-90% del total de solucin absorbida va foliar.

ESTUDIOS DE CASOS

Se analizar en mayor profundidad la fisiologa y el manejo nutricional del calcio, elemento de gran importancia en el rendimiento y calidad de fruta.

Nutricin con calcio

El calcio es tal vez el elemento mineral ms importante para la calidad de los frutos. Frutos con altos niveles de Ca tienen mayor y mejor vida postcosecha y menor tasa de maduracin (Cuadro 11). Las concentraciones de Ca en los tejidos necesarias para obtener estos beneficios son mayores a las que se pueden alcanzar naturalmente. Por ello, el inters de producir fruto con alto Ca es difcil de alcanzar y requiere manejar todos los factores que afectan la absorcin y acumulacin de calcio por los frutos. La nutricin de calcio es complicada, pues el Ca se necesita principalmente en frutos. Por ello, este no slo debe absorberse por la raz, sino translocarse hacia el fruto.

Calcio en el suelo y la planta. La mayor parte de los suelos plantados con frutales contienen altos niveles de calcio (3,5%, 35 ton/ha) como minerales de carbonato, silicato,
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sulfato y fosfato. El Ca comprende normalmente a 65-85 % de los cationes intercambiables adsorbidos a la materia orgnica y a coloides inorgnicos del suelo. El Ca tiene la mayor concentracin (50-100 ppm) de cualquier catin en el suelo. La disponibilidad de Ca en el suelo tiene fuerte relacin con su pH: a mayor pH, mayor saturacin de cationes con Ca. Las necesidades de Ca por la planta son satisfechas por el flujo masal de agua hacia la raz. La cantidad de Ca en el suelo generalmente es suficiente para el crecimiento vegetal.

Interaccin con otros elementos. Hay competencia entre Ca, Mg y Na por los sitios activos de absorcin por las races en el suelo. Las relaciones ideales entre estos elementos seran: Ca/Mg = 6:5:1 y Ca /K = 13:1, pero ello no siempre se cumple en la prctica y dichos valores slo seran indicativos. En cuanto al manejo de la fertilizacin, solo la adicin de altas dosis de K han tenido, en ciertas ocasiones efectos negativos sobre la absorcin de calcio. El in NH4 es fuerte competidor en la absorcin de Ca. Ello por su efecto sobre una reduccin del pH del suelo y su efecto antagnico en la absorcin de calcio por las races. La adicin de 250 unidades de urea/ha a manzanos, redujo el pH entre 0,5 y 2 unidades, dependiendo de la poca del ao y profundidad de obtencin de la muestra.

Calcio: roles, fisiologa y efectos de dficit. El Ca es un macronutriente por su requerimiento por la planta y niveles en la hoja; pero a nivel celular, funciona como micronutriente. El Ca tiene roles fisiolgicos y bioqumicos en apoplasto y citoplasma. Para cumplir estos roles, la concentracin en el apoplasto es de 1.000 a 5.000 M, mientras que en el citoplasma es de 0,1 a 1,0 M. El Ca tiene roles en la estructura de la pared celular e integridad de membranas; ello afecta la firmeza de los frutos. Al formar parte de una protena (calmodulina), tiene rol regulador en diversas funciones celulares. El Ca controla la apertura estomtica, lo que regula entrada de CO2 (para la fotosntesis) y salida de agua (transpiracin). El Ca participa en la interpretacin de seales desde el ambiente. Muchas seales ambientales mediadas por el Ca se vinculan con estrs bitico o abitico (salinidad, anoxia, choques trmicos, perturbaciones mecnicas y altas concentraciones de aluminio). An cuando los sntomas de bajo Ca pueden observarse en diversos tejidos, en los frutales los sntomas ms importantes ocurren en los frutos. Un fruto con bajo nivel de Ca tiene mayor incidencia de desrdenes fisiolgicos (Bitter pit, cork spot, internal breakdown), menor vida postcosecha, maduracin ms acelerada, cada mas brusca de la firmeza en postcosecha y menor resistencia al transporte y manipulacin (Cuadro 8).

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Cuadro 8. Efecto de tratamientos con Ca sobre diversas variables de manzanas Golden Delicious. Fuente: Glenn et al., 1988. Nivel Ca (ppm) Firmeza (kg) Respiracin Etileno (ml CO2 kg-1 h-1) - Ca +Ca 185 350 6,3 8,6 15 10 (m kg-1 h-1) 90 40

Prediccin de desordenes fisiolgicos: el caso del Bitter pit. En frutales, los niveles foliares de Ca raramente son deficientes, an cuando puedan presentarse deficiencias de Ca en frutos. Dado que existe escasa retranslocacin de Ca desde brotes a frutos, la determinacin de los niveles de Ca en frutos debiera ser un mejor indicador de la acumulacin de este elemento que los niveles foliares. Pero, hay problemas (muestreo de frutos y la eleccin de los tejidos del fruto en los cuales se analizar el calcio para determinar Ca en el fruto) que dificultan su uso. Al respecto, debe considerarse que los niveles de Ca varan entre rboles, dentro del rbol y dentro del fruto. Por lo tanto, es difcil conseguir una muestra que sea representativa de todo el huerto. Una vez definido el rbol y fruto que se colectar para anlisis, debe considerarse que los niveles de calcio (y otros elementos) fluctan dentro del fruto, tanto al comparar diversas zonas del fruto como durante su crecimiento en el rbol y en su vida postcosecha. Ello ha generado que diversos laboratorios tomen muestras de diversa forma y midan diferentes partes del fruto, as como tambin se establezcan diversos estndares. Por lo anterior, la correlacin entre niveles de calcio e impacto sobre la calidad de fruta (desrdenes fisiolgicos) puede ser baja (Cuadro 9).

Cuadro 9. Capacidad predictiva (R2)z de diversos mtodos para estimar la incidencia de bitter pit en manzanas.

Mtodo predictivo Infiltracin frutos con Mg 0,671- 0,871

R2 y

Inmersin frutos en Ethephon, 2000

172

ppm

0,601-0,841

Ethephon + Infiltracin frutos con Mg

0,791

Largo brote terminal

0,381- 0,502

Anlisis mineral de Frutos: K + Mg / Ca 0,123-0,401

: Ca
z

0,191-0,433 en post

R2 (coeficiente de determinacin): mide la proporcin de incidencia de bitter pit

cosecha (90-120 d a 1-3 C), que es explicada por muestras colectadas dentro de 7 d de cosecha
y

Fuentes: 1= Gajardo, 1996; 2= Retamales and Valdes, 2000; 3= Van der Boon, 1980.

Para obviar los anteriores problemas, el autor de este artculo ha liderado un grupo de investigadores que ha usado el antagonismo natural entre algunos elementos y el Ca. Se gener un mtodo para predecir desordenes en manzanos (particularmente Bitter pit) que induce a la fruta a expresar rpidamente su nivel de Ca. El mtodo implica un cuidadoso muestreo de frutos 20 o 40 das precosecha y su infiltracin en MgCl2, para inducir luego de 16-20 das manchas tipo Bitter pit en la superficie de frutos. El nmero de frutos con manchas tipo Bitter pit tiene alta correlacin con la incidencia de Bitter pit en fruta despus de 3 meses en almacenaje refrigerado. El mtodo ha sido ensayado con xito en diversos pases: Chile, Polonia, Corea del Sur, Brasil y Sudfrica.

Efecto de aplicaciones de Calcio: suelo vs. follaje. Aplicar Ca al suelo puede aumentar los niveles foliares, pero no los del fruto. Por ello, aplicar Ca al suelo slo se justifica en huertos plantados en suelos muy cidos.

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An cuando una baja proporcin de lo aplicado llega al fruto, los mejores efectos sobre los niveles de Ca en frutos y su calidad se han obtenido con aplicaciones repetidas al follaje, normalmente como cloruro, pues es barato y efectivo. Usualmente se usa 0,5% (peso/volumen), pero aspersiones nicas al 4% justo antes de cosecha si bien queman el follaje, han sido efectivas en reducir desordenes. El Ca absorbido por frutos tiene directa relacin con el nmero de aplicaciones, las que varan entre 4-10 (Cuadro 9). Hay mayor efectividad al combinar aplicaciones tempranas (dentro de 6 semanas post cuaja) y tardas (dentro de 6 semanas pre cosecha). Si hay condiciones predisponentes para bajo Ca en frutos, las aspersiones foliares pueden complementarse con inmersin o ducha con hasta 2% CaCl2 (peso/volumen)en postcosecha.

Manejo integral de la nutricin de Calcio. Un manejo integral de la nutricin de Ca debe incorporar un conjunto de prcticas que alteren las diversas fases de acumulacin de Ca por los frutos. Entre ellas: 1.- Aumentar la absorcin de Ca por la planta, 2.- Incrementar, dentro de la planta, el aporte proporcional de Ca hacia el fruto, 3.- Evitar la dilucin del calcio acumulado, y 4.- Incrementar el tenor de calcio mediante aplicaciones dirigidas directamente al fruto. Respecto al primer punto, puede lograrse con: 1.- Mayor generacin de nuevas races en cada temporada, 2.- Mantener adecuado nivel hdrico en el suelo, evitar exceso o dficit, 3.Evitar altos niveles de NH4, K y Mg, los que compiten con Ca por su absorcin por las races. Respecto al segundo punto: Incrementar en la planta, el aporte proporcional de Ca al fruto (Cuadro 3). Esto se puede lograr: 1.- Impidiendo crecimiento excesivo de brotes (manejo hdrico, N, carga frutal), 2.- Evitando podas invernales severas, y 3.- Efectuando podas veraniegas suaves. Respecto al tercer punto, puede alcanzarse: 1.- Evitando raleo (aclareo) excesivo de frutos, 2.- Realizando buena polinizacin, para tener alto nmero de semillas, mayor nivel de auxinas y mayor atraccin de Ca hacia el fruto. El punto 4 ya ha sido tratado en este documento.

LITERATURA CITADA

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Manejo de la Nutricin y Fertilizacin en el cultivo del Nogal Pecanero

Dmaris L. Ojeda Barrios1, Victoria Fernndez Fernndez2, Esteban Snchez Chvez1 y Homero Ramrez Rodrguez3

Facultad de Ciencias Agrotecnolgicas. Universidad Autnoma de Chihuahua Campus 1. Chihuahua, Chih. Mxico. 2Estacin Experimental del Aula Dei. Consejo Superior de Investigaciones Cientficas (CSIC), Apdo, 202, Zaragoza, Espaa. 3 Universidad Autnoma Agraria Antonio Narro Departamento de Horticultura. Saltillo, Coah. Mxico. dojeda@uach.mx

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Haba bajado a los nogales Para ver las flores del valle Por ver si la via, estaba brotando Y florecan los granados Cant 6, 11

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INTRODUCCIN

El cultivo del nogal pecanero (Carya illinoinensis), tambin conocido como nueces de pecana, nuez encarcelada o nogal de Illinois, es un rbol caducifolio de la familia Juglandcea. Su origen se encuentra el Suroeste de Estados Unidos y el Norte de Mxico, regin que contribuye con el 95% de la produccin a nivel mundial. Los frutos de este rbol son conocidos como nuez americana, son de forma oblonga y puntiaguda y se cosechan secos; es una nuez de agradable sabor y alto nivel nutritivo que se consume principalmente al natural como aperitivo, aunque se usa cada vez con mayor frecuencia como un buen ingrediente para la elaboracin de postres, tartas, pasteles y helados. Estados Unidos, Canad y Mxico son los principales consumidores de nuez pecanera, aunque existen mercados con fuerte desarrollo como Hong Kong, China y la Comunidad Europea. En Estados Unidos la nuez pecanera ocupa el tercer lugar entre las nueces, detrs de la almendra y la nuez de castaa (walnuts). La produccin mundial de nuez pecanera en el 2005 se estimo en 193,862 toneladas. Esto significa el 3.6% de la produccin mundial de nueces. Los principales productores de nuez pecanera son Estados Unidos de Norteamrica y Mxico. Representan el 95% del total mundial, con el 59.3% y 35.7%. Otros pases productores son Australia, Sudfrica, Brasil y Egipto. En Mxico las plantaciones y los rendimientos se han incrementado en los ltimos diez aos. Para 2005 se reportaron 65,685 hectreas plantadas de las cuales 51,328 hectreas se encontraban en produccin. Los principales Estados productores son Chihuahua y Coahuila que en conjunto aportan el 75% de produccin nacional. Destacan tambin Sonora, Durango y Nuevo Len. Actualmente, el cultivo del nogal pecanero ocupa el sexto lugar en importancia econmica por su valor en pesos de los cultivos agrcolas ms importantes en el Estado de Chihuahua con una superficie plantada de 42,685 hectreas de las cuales 29,449 hectreas se encuentran en produccin y el resto en desarrollo, con una produccin de 44,472 toneladas para el ciclo 2005, que equivale a un 56 % de la produccin nacional, que lo hace el primer productor de nuez en el pas. Para Chihuahua existen cuatro regiones importantes productoras de nuez: Jimnez-Valle de Allende, Delicias-Camargo, Chihuahua-Aldama y BuenaventuraAhumada regiones donde se produce la nuez de mayor calidad en el mundo (FIRA, 2006).
GENERALIDADES DE LA NUTRICIN

El nogal pecanero requiere de los 17 elementos esenciales para el crecimiento de las plantas. No obstante el nitrgeno y el zinc son los nutrientes a los que presenta mayor respuesta en crecimiento y calidad. En el norte de Mxico las aplicaciones ms frecuentes son de nitrgeno, fsforo, potasio y zinc.

DIAGNSTICO NUTRICIONAL

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Para reconocer las necesidades nutricionales de los nogales se utilizan diversos enfoques, dentro de los cuales tenemos la tasa de extraccin de nutrimentos, sintomatologa visual, anlisis de suelos, anlisis de agua y el anlisis foliar.

EXTRACCIN DE NUTRIENTES

Esta tcnica parte del supuesto de que dentro de la huerta todo es un sistema cclico y que se deben reponer nicamente los nutrientes que son extrados por Ia cosecha. Los niveles de extraccin de nutrientes de acuerdo a Sparks (1977) en nogal se presentan en el Cuadro 1. Como se puede apreciar las cantidades removidas por esta cosecha son bajas, y el cultivo del nogal no puede desarrollarse satisfactoriamente si solo aplicramos estas cantidades. Lo anterior es porque se requieren nuevos nutrimentos para la formacin de nuevas estructuras de los rboles, tomar en cuenta los nutrientes removidos por las podas, considerar que la descomposicin de los tejidos que se incorporan en el suelo no ocurre, al ritmo de necesidades de las plantas, y por ltimo tener en cuenta que la eficiencia de la aplicacin de los fertilizantes no es del cien por ciento.

SINTOMATOLOGA

El enfoque de la sintomatologa visual de deficiencias y excesos de los nutrimentos y otros elementos qumicos se basa en la afectacin de los procesos fisiolgicos en los que intervienen. La principal ventaja de este mtodo es que con la participacin de un tcnico capacitado se pueden realizar diagnsticos confiables a bajo costo.

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Cuadro 1. Cantidad de nutrimentos removidos por una cosecha de 2000 kg de nueces. Nutriente Nitrgeno Fsforo Potasio Calcio Magnesio Manganeso Hierro Boro Cobre Zinc Molibdeno Sparks, 1977 Kg de nutrientes 17.06 3.86 7.38 6.52 0.98 0.138 0.054 0.020 0.016 0.056 0.0036

Por otro lado, la principal desventaja es que cuando se presentan los sntomas visuales, ya ha ocurrido un dao a la fisiologa de la planta que se traducir en una reduccin del potencial de rendimiento. A continuacin se describen las funciones de los nutrientes y la sintomatologa visual de sus deficiencias y excesos.

Nitrgeno . El N es el cuarto elemento en la composicin cuantitativa de los tejidos vegetales, en ellos forma parte de distintas biomolculas como aminocidos, protenas, enzimas, cidos nucleicos DNA y RNA, hormonas as como en la clorofila y otros componentes celulares (Marshner, 1995 y Mengel y Kirkby, 1987). Es altamente mvil dentro
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de las plantas por lo que su deficiencia se presenta en las hojas adultas. Como ningn otro nutriente, es determinante del vigor, produccin y calidad de la fruta. Por tal razn, el correcto manejo de la fertilizacin nitrogenada requiere del conocimiento de los ciclos internos del nitrgeno en el suelo y en el rbol. Afortunadamente, en los ltimos aos se ha enfatizado mucho en comprender cmo las distintas especies frutales utilizan el nitrgeno y los resultados obtenidos permiten un manejo mucho ms racional del fertilizante y del sistema suelo-planta en su conjunto (Ojeda et al., 2005). Cuando este nutriente es deficiente, se reduce el crecimiento de los brotes y cuando los crecimientos anuales no alcanzan ms de 15 cm de longitud, es un sntoma de que la planta puede requerir mayor cantidad de este nutriente. Tambin se presentan fallas en el IIenado de la almendra. Por otro lado el exceso de este nutrimento provoca mucho crecimiento vegetativo que puede afectar problemas en la calidad, sobre todo por la germinacin de las nueces. El mayor efecto de este nutrimento es en el nmero de frutos. Esto afecta directamente al rendimiento (Sparks, 1994). Niveles excesivos de N tienden a reducir las concentraciones de otros elementos en el rbol principalmente K y en menor cantidad P, simplemente porque el crecimiento estimulado por el N adicional, diluye la cantidad de K y P. Si la cantidad de K en hoja esta en nivel mnimo, la aplicacin de N induce lo que se denomina quemado. El quemado de la hoja causa una severa defoliacin que aparece primero en la parte basal de las hojas y brotes y progresivamente aumenta hacia las puntas (Goff et al., 2000). El nitrgeno y el potasio parecen estar involucrados en un desorden fisiolgico conocido como hoja corchosa, que se manifiesta como reas necrticas en las hojas del nogal. Este problema se presenta en huertas donde la fertilizacin nitrogenada es alta, y el suministro de potasio es bajo. Las variedades ms afectadas son Shoshoni, Desiderable, y Cheyenne. No obstante, un estudio donde se evaluaban dosis de nitrgeno y potasio no se encontr efecto significativo en la interaccin de estos dos nutrientes. Solo en tres de 11 anos en estudio se encontr que el sntoma se redujo cuando se incrementaban las dosis de potasio (Worley, 1991).

Fsforo. Participa en los procesos energticos de las plantas. Es mvil dentro de los tejidos por lo que se trasloca a los tejidos jvenes cuando hay bajos niveles de abastecimiento por parte del suelo. Su deficiencia provoca palidez en las hojas ms adultas las cuales se tornan de un color rojizo. Sntomas de su exceso no han sido reportados, pero pudieran presentarse problemas en el funcionamiento de otros nutrientes, especialmente con zinc. El fsforo afecta la calidad de los frutos, incrementando el por ciento de almendra (Sparks, 1994). El N y P estn ntimamente involucrados en el metabolismo y crecimiento de las plantas, tienen numerosos puntos de interaccin y sus procesos son dependientes. El papel del P en el metabolismo del N se ha estudiado con detalle, la asimilacin de NO3- se ve alterada cuando las plantas son privadas de P (Ruiz y Romero, 1999).

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Potasio. El K es el segundo macronutriente ms requerido por las plantas y en cultivo de nogal donde es requerido para una mayor produccin. No tiene una funcin estructural, pero desempea numerosos papeles catalticos, que no estn muy claramente definidos (Marschner, 1995). Ms de 50 enzimas, dentro de las que se encuentran la NR y otras que participan en el metabolismo del N son estimuladas por este elemento, ya que induce cambios en la conformacin de las enzimas, aumentando las velocidad de las reacciones catalticas Vmax y en algunos casos aumenta la afinidad por el sustrato (Marschner, 1995) en concentraciones adecuadas favorece los procesos de absorcin y translocacin de N (Ruiz et al., 1999). Algunos autores mencionan que su papel principal es el de mantener la turgencia de las clulas, la apertura y cierre de estomas est regulada por el contenido de K en clulas guardia. Est involucrado tambin en el transporte de carbohidratos, regulacin de smosis y otros procesos fisiolgicos en las plantas. Sus funciones ms importantes estn en el transporte de azcares y la regulacin hdrica de la planta. Es un elemento mvil dentro de las plantas por lo que su deficiencia se presenta en los tejidos ms adultos. Las deficiencias se manifiestan durante el verano como una necrosis marginal que inicia primeramente en !as hojas ms adultas. Estos sntomas son ms aparentes en la variedad Wichita. Sntomas de excesos no se han apreciado, pero pudiera provocar desbalances nutricionales, sobre todo con magnesio. Al igual que fsforo tambin influye positivamente en el por ciento de almendra de las nueces (Sparks, 1994).

Magnesio y Calcio. El primero participa estructuralmente en la clorofila, mientras que el segundo es un elemento esencial en la pared celular y juega un papel importante en la integridad de la membrana celular, interviene en muchas funciones celulares como secrecin, regulacin del intercambio de gases, balance inico, expresin gentica, metabolismo del carbono etc. La influencia del Ca en el metabolismo del N depende principalmente de la fuente nitrogenada usada. Cuando la forma nitrogenada es NH4+, la aplicacin de Ca aumenta la absorcin de NH4+ y mejora la utilizacin de N en la planta, mejorando los rendimientos en produccin y biomasa (Azcn-Bieto, 2000).

Hierro. Participa activamente en procesos enzimticos, tanto en la fotosntesis como la respiracin, y es tambin un elemento esencial en la sntesis de clorofila (Mengel y Kirkby, 1987). Este nutriente es poco mvil en el rbol. La carencia de fierro se presenta al inicio de la estacin de crecimiento (mediados de abril-principios de mayo) y se hace ms evidente conforme avanza el ciclo (Tarango, 2004). Las deficiencias se manifiestan como una clorosis general de las hojas jvenes, en las cuales solo las nervaduras permanecen verdes; bajo condiciones severas la clorosis puede presentarse en todas las hojas del brote, para posteriormente aparecer necrosis en los bordes de las hojas y el color amarillo puede tornarse blanco. Asimismo, el potencial de produccin de flores y de amarre de los frutos se reduce (Nuez, 2001).

Manganeso. Este elemento participa en diversos procesos enzimticos. Su deficiencia no es comn, aunque la sintomatologa en hojas de oreja de ratn, en la cual la nervadura central sales de la lmina foliar ha sido relacionada con deficiencias de cobre o man182

ganeso. Sin embargo este problema es bastante complicado, atribuyndosele a diversos desordenes nutricionales y fisiolgicos y se le ha encontrado relacin con Fe, la relacin N/S y al calcio (Marschner, 1995) y ltimamente se asocia a una deficiencia de Ni (Wood, 2002).

Cobre. Este elemento participa principalmente en procesos de oxidacin-reduccin. Al igual que al manganeso se le ha relacionado con el sntoma de la oreja de ratn. No se han reportado deficiencias de cobre en huertas de nogal (Tarango, 2004).

Boro. Participa en la formacin y distribucin de azucares en las plantas. Actualmente no se han detectado deficiencias de este elemento en las huertas nogales. Uno de sus efectos pudiera observarse en el amarre del fruto ya que participa en la germinacin y crecimiento del tubo polnico. En regiones ridas del suroeste de Estados Unidos no se ha encontrado respuesta a la aplicacin foliar de borato de sodio en dosis de 1.5 Kg por ha (Kilby et al., 1998). Rara vez se encuentran los sntomas foliares de carencia de boro. En las regiones ridas, generalmente hay suficiente B para los nogales. Un exceso de B puede ser ms comn que una carencia (Tarango, 2004).

Zinc. Junto con el nitrgeno, este elemento es uno de los nutrientes claves en la produccin y calidad del nogal pecanero. Participa en la formacin de triptfano un precursor del cido indolactico, auxina que promueve el crecimiento de los tejidos vegetales (Mengel y Kirkby, 1987). Esta auxina promueve el crecimiento de las hojas y entrenudos. Cuando los niveles de AIA, son bajos, los entrenudos son cortos y las hojas pequeas y lanceoladas dando la apariencia de una roseta. La deficiencia de este nutriente tambin afecta la formacin de la clorofila y el intercambio gaseosos por los estomas. El nivel mnimo para alcanzar las mximas tasas de este proceso es de 15 ppm (Hu y Sparks, 1991). La deficiencia de zinc provoca que la calidad de la nuez se reduzca (Hu y Spark, 1991). El peso del ruezno, el peso de la cscara de la nuez, el peso de la almendra, el por ciento de almendra, el volumen por nuez, la densidad de la nuez, la longitud y ancho de la nuez y el grosor de la cscara de la nuez son afectados negativamente en rboles deficientes de zinc. El nmero de nueces por brote se reduce de 2.2 en rboles normales a 1.3 en rboles deficientes. As mismo, la apertura del ruezno se puede retrasar hasta en 42 das en los rboles con sntomas de deficiencia severa. Brotes con sntomas de roseta prcticamente no presentan nueces (Nuez, 2001).

Nquel. Recientemente se ha demostrado que el nquel es el causante del sntoma conocido como oreja de ratn en nogal pecanero (Wood et al., 2002), aunque su funcin fisiolgica an no esta bien definida. El nquel es parte de la estructura de la enzima ureasa, la cual afecta el metabolismo de N en el rbol (Figueroa, 2006). De acuerdo a este autor, este sntoma se presenta comnmente en huertas o rboles replantados en sitios donde haba nogales maduros, debido probablemente a una acumulacin excesiva de Zn. Aunque tambin se puede observar en rboles creciendo en suelos arenosos o con pH tendiente a la acidez. En Mxico no hay productos a base de Ni que se comercialicen para corregir esta deficiencia (Figueroa, 2006). 183

ANLISIS DE SUELO

Esta tcnica permite conocer las condiciones en las cuales las races toman los nutrientes para su desarrollo. En los frutales, la relacin entre la cantidad de nutrientes determinados, pocas veces se relaciona con el desarrollo de las plantas. Esto se debe en parte a que sus sistemas radicales tienen mayor grado de exploracin. No obstante, si se pueden, determinar satisfactoriamente los elementos o compuestos qumicos que producen toxicidad (salinidad). Por otro lado, las condiciones fsicas, como textura, densidad aparente, capacidad de infiltracin, compactacin del suelo, son determinantes para el desarrollo de las races y por ende de las plantas (Herrera, 2005). A continuacin se presentan las condiciones ptimas del suelo para el desarrollo de los nogales.
Para el anlisis de suelo se recomienda tomar muestras a tres profundidades, de 0 a 30, de 30 a 60 y de 60 a 90 cm. Durante la toma de la muestra se debern apreciar caractersticas fsicas y qumicas como la presencia de capas duras, capas de caliche, gravas, cambios repentinos en textura, reas con diferente coloracin (rojiza, oscura, amarilla, blanca), contenido de humedad, entre otras.

Estas observaciones sern de mucha utilidad durante la interpretacin de los anlisis. La regla fundamental del muestreo es no mezclar dos unidades que no son homogneas. Si la persona que muestrea mezcla suelo de dos reas con diferentes caractersticas- en consecuencia no obtendr resultados satisfactorios. Generalmente, una superficie homognea no mayor de 15 ha puede constituir una muestra. Una muestra deber constar de varias submuestras. Al menos 10 submuestras sern requeridas para cada profundidad, las cuales se mezclaran y se obtendr una muestra (Glover, 1983). Estas muestras deben secarse a temperatura ambiente. El laboratorio requerir de dos kilogramo de suelo para correr los anlisis rutinarios. A continuacin, en el Cuadro 2 se presentan los niveles adecuados para el desarrollo de este cultivo (Guerrero et al., 2000).

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Cuadro 2. Condiciones del suelo adecuadas para el nogal pecanero. Caractersticas del suelo Valor adecuado

Textura Densidad aparente (g/cc) Espacio Poroso % Conductividad Hidrulica cm/hr pH Conductividad elctrica, (extracto de saturacin, dS/m) CaCO3 (%) Por ciento de sodio intercambiable (PSI) Materia organica (%) N-N03 (ppm) Fsforo Olsen (ppm) Potasio soluble (ppm) Calcio Kg/ha DTPA - Fe (ppm)1 DTPA - Zn (ppm) DTPA - Mn (ppm)

Franco arenosa a Franco Arcillosa 1.10 1.10 1.68 6.2-7.5 < 2.00

2.1 < 10.00

1.61 40 16 41 5626 10 2.51 20.1

Micronutrimentos extractables con DTPA (dietiln triamino pentactico). Escala de clasificacin de las propiedades bsicas del suelo propuestas por Uvalle-Bueno(1994) generadas mediante el Diagnostico Diferencial Integrado (DDI) y adaptadas a los requerimientos del nogal pecanero. (Guerrero et al, 2000)

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El nogal puede prosperar satisfactoriamente, aun cuando no se presenten las condiciones ptimas. Sin embargo la implementacin de prcticas de manejo deber llevarse a cabo para lograrlo. Por ejemplo, en un suelo con pH de 8.0 se tendr mayor problema con deficiencias de zinc, por lo que se requerirn de una a dos aplicaciones ms de este elemento. Con relacin a la textura, se puede cultivar nogal en suelos arenosos con un buen suministro de agua, antes de que la humedad aprovechable del suelo se abata al 50 %; mientras que en suelos arcillosos, la condicin es que no se tengan problemas de infiltracin de agua. En el caso de los nutrientes, s estos se encuentran en condiciones bajas, se deben de adicionar al suelo (Nuez, 2001).

ANLISIS DE AGUA

El nogal pecanero es un cultivo considerado como sensible a la salinidad. Es conveniente conocer el tipo y la cantidad de sales del agua de riego, particularmente cuando es de pozo, para determinar las necesidades de acidificacin y seleccionar adecuadamente los fertilizantes. Los datos del anlisis de agua y de suelo se usan conjuntamente, sobre todo cuando se fertirriga (Tarango, 2004). Aguas de riego con 0.5 a 0.75 mmhos/cm son aptas para la mayora de los suelos agrcolas. En suelos arcillosos, valores ms grandes afectan el rendimiento y desarrollo de los nogales. Suelos arenosos con buen drenaje pueden tolerar hasta 2.00 mmhos/cm. El RAS no debe exceder valores de 3 a 5 (Miyamoto, 1994). La muestra de agua debe tomarse de la fuente de abastecimiento. Si esta proviene de un pozo es conveniente tomar la muestra una vez que el pozo tenga al menos 24 horas funcionando. Se debe colocar en un recipiente de plstico, envuelto en una bolsa de papel y enviarla lo ms pronto posible para su anlisis.

ANLISIS FOLIAR

El principio de esta tcnica se basa en la relacin que existe entre la concentracin de los nutrimentos en el tejido de las plantas y su desarrollo y rendimiento. En nogal se han establecido valores de referencia para determinar la condicin nutricional de los nogales (Herrera, 1983; Sparks, 1977; Nuez, et al., 1991; Meraz, 1999, Chvez, 2005 y Ojeda, 2005). Esto permite ajustar los programas de fertilizacin. En el Cuadro 3 se presentan estos niveles (Meraz, 1999). Estos valores fueron generados para la zona sur del Estado de Chihuahua para la variedad Western sobre la base de la concentracin nutricional de plantas altamente rendidoras con calidad de nuez excelente, y ajustados de acuerdo a experiencias de otras regiones nogaleras (Kilby, 1986; Sparks, 1977). En general los valores para Western pueden ser utilizados para Wichita, aunque esta ltima para nitrgeno su intervalo ptimo de nitrgeno es de 2.5 a 2.8 %.
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Cuadro 3. Generacin de estandares nutricionales foliares en nogal pecanero western schley mediante diagnostico diferencial integrado (DDI) para la regin de Jimnez, Chih.

Nutriente Nitrgeno (%)

Nivel Nutricional Bajo Total 1.62-2.42 Suficiente 2.66 Alto 2.90-3.70 Excesivo 4.28

372-728 Nitratos ppm 0.075Fsforo (%) 0.105

856

934-1340

1570

0.121

0.167

.183

0.74 Potasio (%) 0.44-0.58 1.20 Calcio (%) 0.62-0.90 0.39 Magnesio (%) 0.19-0.28 161 Sodio (ppm) 33-96 108 Hierro (ppm) 60-83 46 Zinc (ppm) 21 126 Manganeso (ppm) 16-70 8.20 Cobre (ppm) Meraz, 1999 3.4-5.7

0.90-1.44

1.84

1.50-2.54

3.30

0.50-0.98

1.37

226-592

895

133-499

842

71-214

334

182-950

1664

10.7-33.5

54.0

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En la condicin "Bajo", los rboles pueden no mostrar sntomas visuales, pero puede ocurrir respuesta a la aplicacin de fertilizante. En el nivel "Alto", puede no afectarse el rendimiento y calidad de la nuez, pero los costos de produccin se incrementan. Niveles deficientes seran los valores menores a los del intervalo "Bajo", y de "Exceso" corresponden a valores mayores al intervalo 'Alto". Tanto en "Deficiente", como en "Exceso" se presentan sntomas, y el rendimiento y calidad son
afectados.

Mediante el anlisis foliar, se han realizado estudios para conocer la condicin nutricional de los huertos de nogal pecanero en Estado de Chihuahua (Snchez, et al., 2005 y Ojeda et al., 2005). La toma de las muestras debe realizarse del 15 de julio al 15 de agosto de acuerdo a diversos autores en el Estado de Chihuahua (Ojeda, 2003). Cuando el crecimiento y desarrollo del fruto tienen una alta demanda por nutrientes de las hojas. Se recomienda tomar el tercer par de foliolos de una hoja de la parte media del brote localizado a una altura de 1.50 a 2.00 m. Colectar de 60 a 80 foliolos de al menos 25 rboles tpicos de una superficie homognea no mayor a 10 ha. No es recomendable mezclar rboles de diferentes variedades, dado que existe efecto varietal sobre la composicin mineral. As mismo, no obtener muestras de diferentes tipos de suelo y su manejo. La superficie de muestreo no debe ser mayor a 10 ha. Es recomendable lavar la muestra para eliminar los residuos de nutrientes aplicados foliarmente de cualquier agroqumico en general. El polvo puede ser fuente de contaminacin. Hay un efecto varietal en la concentracin de nutrimentos. Los mayores efectos se han reportado para los micronutrientes Zn y Mn (Worley, 1991). En el Cuadro 4 se presenta el efecto varietal en la composicin mineral del nogal pecanero en la Costa de Hermosillo (Nez y Valdez, 1991). En este cuadro se pueden apreciar efectos significativos de la variedad en el contenido de nitrgeno, potasio, y magnesio.

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Cuadro 4. Composicin mineral de siete variedades de nogal pecanero en la costa de Hermosillo.

Variedad Western Wichita Cheyenne Mig Shoshoni Rincon Mahan

N %
2.6

P % 0.18 0.17 0.17 0.18 0.16 0.17 0.16

K % 1.33 1.66 1.25 1.50 1.12 1.10 1.18

Mg % 0.25 0.26 0.30 0.31 0.36 0.34 0.33

Fe ppm 202 162 180 185 247 152 207

Mn ppm 190 230 282 292 210 235 212

Zn ppm 24 19 27 18 21 26 22

Cu ppm 20 18 18 17 18 17 17

2.3 2.3
2.3

2.2
2.2

2.2

La concentracin es sobre la base de peso seco. Nuez et al., 2001

El xito de un diagnstico depende de los procedimientos de muestreo realizados. Es importante seguir un patrn de muestreo ao con ao. La concentracin de nutrientes vara entre variedades, poca de muestreo, posicin de la hoja muestreada y entre fololos dentro de una hoja. Cada uno de los mtodos antes descritos presentan ventajas y desventajas, la integracin de estos mtodos conllevar a una mejor interpretacin de los resultados y a la elaboracin de programas de manejo y fertilizacin ms adecuados. Existen diversos enfoque para interpretar los resultados del anlisis foliar. Dentro de estos se tiene el de valores crticos como el descrito actualmente. Otros enfoque han sido desarrollados, el mas reciente es el denominado Sistema Integrado de Diagnstico y Recomendacin (DRIS por sus siglas en ingles) el cual se basa en las relaciones que hay entre los nutrientes y su efecto en el rendimiento y calidad de la cosecha. A estas relaciones se le Ilama normas. Se han publicado algunas normas preliminares para el nogal las cuales se obtienen de las siguientes concentraciones da nutrientes: N=2.72, P=0.14, K=1.02, Ca=1.45, Mg=0.38, Fe=89, Mn=324, Zn=126, Cu=10, Mo=6, B=40, AI=1380. Los macronutrientes se expresan en % y los micronutrientes en ppm (Beverly, et al, 1992). Este sistema tiene la ventaja de que ordena los nutrimentos de acuerdo al requerimiento. Durante dos aos se generaron normas DRIS para la regin de Jimnez, Chih de acuerdo a diferentes dosis aplicadas de nitrgeno y fsforo encontrndose el requerimiento de la siguiente manera Mn> Zn> N> P >K> Fe> Cu (Basurto et al., 1995).
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FERTILIZACIN

Esta prctica consiste en adicionar al suelo los nutrientes que este no puede proporcionar a las plantas. La fertilizacin de los rboles de nogal o de la huerta es una de las prcticas ms importantes durante el ao y deber ser integrada dentro del programa de manejo general de la huerta (Nuez, 2001). En donde se tomarn en cuenta factores tales como la fuente del fertilizante, tiempo de aplicacin, frecuencia de las aplicaciones y mtodos de aplicacin. Aunado a estos factores una estrategia de manejo apropiado incluye otros factores como pH de suelo (cido, neutro o alcalino), textura de suelo (fina, media) composicin qumica del suelo (por ejemplo cantidades de diferentes elementos en la solucin del suelo; capacidad de intercambio catonico), atmsfera del suelo (aerbica o anaerbica), microflora del suelo (tipo y abundancia de microorganismos), tipo y costo de la fuente a utilizar (urea, nitrato de amonio, sulfato de amonio, amoniaco, etc.) tipo de cultivar (con alta alternancia o moderada alternancia), humedad del suelo (saturado, hmedo, seco), movimiento del agua a travs del perfil del suelo, cubiertas en los huertos (cultivos limpios, pastos o legumbres), cantidad y mtodo de irrigacin (inundacin, goteo o aspersin), edad fisiolgica de los rboles (jvenes, intermedios o viejos), nivel del nutriente en los rboles (bajo, moderado, alto), periodos de demanda (desarrollo de follaje, llenado de almendra, dormancia), temperatura del aire (fro, moderado, caliente) localizacin de las races absorbedoras en el perfil del suelo (superficiales, medias o profundas ( Wood, 2002). En las huertas adultas, los costos derivados por la fertilizacin corresponde alrededor del 16 % del costo total de produccin anual (SAGAR, 1998). Existen cuatro factores base para asegurar el xito de un programa de fertilizacin. Primeramente se debe definir que tipo de nutrientes y fertilizantes se deben de utilizar, en segundo termino aplicarlo en la poca ptima, el tercer factor es colocar el fertilizante en el lugar adecuado y por ultimo, utilizar la dosis que requieren las plantas para su ptimo desarrollo (Kilby, 1990). Los nutrientes ms requeridos por los nogales a nivel mundial es el nitrgeno y el zinc. El nogal, al igual que muchos frutales presentan gran habilidad para la absorcin de fsforo y potasio (Tarango, 2004). No obstante, bajo ciertas condiciones de suelo, la aplicacin de cualquiera de los 13 elementos que las plantas toman del suelo puede ser requerido y su aplicacin ser necesaria. El resto de los nutrientes se aplica en menor cantidad, y no en todas las huertas. El periodo de mxima demanda de nutrientes es cuando ocurre el mayor crecimiento de las plantas. Tomando en cuenta que los fertilizantes pasan por una serie de reacciones qumicas y biolgicas antes de que puedan formar parte de la solucin del suelo, que es de donde las plantas los toman en forma de iones, estos deben aplicarse con anticipacin. Por otro lado, dado que Ias plantas perennes utilizan algunos de sus rganos como reservas de nutrientes en forma de componentes orgnicos, lo ptimo es que entren al reposo, bien abastecidos nutricionalmente, para que durante la brotacin, cuando las races no presentan al elevada actividad, el crecimiento y desarrollo de brotes se de satisfactoriamente con las 190

reservas de la planta. Por esto que fertilizaciones de postcosecha se han vuelto comunes en la industria nogalera de Sonora, sin embargo en la zona nogalera de Chihuahua y Coahuila esta prctica an no es comn, los resultados de estudios recientes nos muestran que es posible observar que los rboles en etapa de produccin muestran una tendencia positiva a la fertilizacin tarda (Ojeda et al., 2005). El sitio correcto donde se deben colocar el fertilizante varia de acuerdo a la movilidad del nutriente, a las condiciones del suelo y sistema de riego utilizado. En general, el nitrgeno presenta alta movilidad en el suelo, tanta que en suelos arenosos deben extremarse el manejo del agua para evitar lixiviaciones. Potasio tiene movilidad moderada, mientras que la del fsforo es muy restringida. Estudios acerca de la movilidad del este ltimo nutriente han demostrado que se puede desplazar 5 cm del sitio donde se aplico antes de que sea inmovilizado como una forma de fosfato clcico en suelos calcreos, el cual no puede ser utilizado por las plantas. Por otro lado, el nitrgeno puede presentar perdidas por volatilizacin en forma de gas hacia el aire. Para esto tambin hay que considerar la densidad de las races del nogal. Entre mayor sea la densidad de races mayor capacidad se presentara para la absorcin de nutrientes como el fsforo. La cantidad del nutriente a aplicar ser determinada por la edad de los rboles, su desarrollo, eficiencia del fertilizante y las condiciones del suelo. Por supuesto que las necesidades de las plantas es el punto ms importante en determinar la dosis, sin embargo, debemos de considerar la eficiencia del fertilizante. Esto se refiere a que no todo el nutriente aplicado es aprovechado por las plantas, diversas porciones se pierden dependiendo de Ia naturaleza del fertilizante. En el caso del nitrgeno pueden existir perdidas por volatilizacin y lixiviacin, o por el uso de otras plantas presentes en la huerta. Las perdidas pueden Ilegar a ser hasta del 75 %, si no se Ilevan a cabo practicas de manejo, como el colocar, el fertilizante debajo de la superficie del suelo el cual debe contener humedad suficiente para solubilizarlo. Las fuentes amoniacales son las que presentan mas problemas de volatizacin, mientras que en las fuentes ntricas este problema es casi nulo, a excepcin de los suelos muy arcillosos y hmedos.

DESCRIPCIN DEL SUMINISTRO DE DIVERSOS NUTRIENTES A LAS HUERTAS DE NOGAL

Nitrgeno. Este nutriente es absorbido principalmente como in nitrato (NO 3-), y en menor cantidad como amonio (NH4+). La fertilizacin nitrogenada prcticamente puede iniciarse desde el primer ao de plantacin. Los requerimientos por rbol son de 50 gramos de nitrgeno para el primero, 150 para el segundo, 250 para el tercero, 400 en el cuarto y 550 en el quinto ano. Si los rboles jvenes presentan crecimientos mayores de 1.5 metros por ao, se recomienda reducir o eliminar el suministro de nitrgeno, por otro lado, si este es menor a 60 cm debe de ser incrementado. Despus de esta etapa se puede tomar como gua general el aplicar de 90 a 100 gramos de nitrgeno por cada cm de dimetro del tronco. Los rboles adultos requieren de 150 a 250 unidades de nitrgeno por ha, dependiendo del tipo de suelo, edad de la planta y rendimiento. En Georgia se evaluaron dosis de 112 a 224 Kg por hectrea y se encontr que a largo plazo (8 aos) no se tuvieron diferencias en el rendimiento pero hubo una tendencia a producir ms nuez con la dosis alta y los rboles ms productivos 191

fueron aquellos que presentaron 2.50% de nitrgeno en el follaje (Worley, 1991). Las plantas con mayor dosis de nitrgeno requirieron mayor dosis de potasio. Si los crecimientos terminales, de la parte superior del rbol muestra crecimientos menores de 15 cm, es un indicativo de que el programa esta quedando corto y se debe incrementar su suministro. Por otro lado si es mayor de 30 cm, entonces lo ms probable es que se esta aplicando de ms. Fertilizaciones hasta de 300 unidades pueden recomendarse en huertos donde se produzcan ms de 3.0 toneladas por ha. El aplicar la cantidad de nitrgeno de acuerdo a los requerimientos por la cosecha ayuda a reducir niveles de alternancia. En rboles jvenes se sugiere dividir la dosis anual en 4 o 5 partes durante los meses de crecimiento, realizando tambin una aplicacin antes de brotacin. En condiciones de sistemas de riego presurizado se puede dividir la dosis anual en los meses de riego y aplicarlo a travs del sistema. Es importante que al menos el 25% de la dosis total se aplique antes de la brotacin para permitir que se encuentre en la solucin del suelo antes de que sea requerido por la planta. En huertas podadas, la dosis del fertilizante se reducir directamente proporcional a la cantidad de madera podada. Si la poda elimino el 25 % de la madera entonces hay que reducirla en un 25 % (Kilby, 1990). En los rboles adultos, con un sistema de riego por gravedad, se recomiendan tres pocas de fertilizacin nitrogenada, una en prebrotacin, otra en abril y la final en mayo. La proporcin de las fertilizaciones es del 40 % para la primera, 20 % en la segunda y del 40 % en la tercera. Al igual que en los rboles jvenes, si se cuenta con un sistema de riego presurizado, puede fraccionarse la dosis durante la etapa de crecimiento del nogal. Nuevamente, es conveniente aplicar al menos el 25 % de la dosis total en prebrotacin (Nuez, 2001). De acuerdo a Lombardini (2004) en lo que respecta a dosis y poca de aplicacin menciona que la cantidad de N que se debe aplicar esta influenciada por el tamao o edad de los rboles, disponibilidad de N en el suelo y nivel de produccin esperada. Las necesidades de cada huerta son diferentes. No es recomendable fertilizar el primer ao debido que es preferible el establecimiento de races. Es recomendable solo en caso de suelos de baja fertilidad y textura ligera, aproximadamente 100 g de N/rbol colocado alrededor del tronco (20-30 cm). En huertas jvenes se recomienda 200 g/de N/rbol para el segundo ao, esta dosis podr incrementarse ao con ao hasta 700 g/rbol en el sptimo ao. Para huertas en produccin se sugiere aplicacin de 80-100 kg de N/ha por cada tonelada de nuez que se espera cosechar. Se debe tomar en cuenta que aplicaciones de N en sistema de riego por gravedad se tienen prdidas ms grandes (30-45%) y que aplicaciones de N en sistema de riego presurizado tienen una eficiencia mayor. Se reportan tres importantes periodos de aplicacin: crecimiento primaveral, desarrollo de las nueces (junio-julio) y el almacenamiento de N para el ao siguiente (agosto). La aplicacin de nitrgeno debe de ser programada dependiendo del ao que se trate (alta o baja produccin). En el ao de alta produccin se requiere una mayor aplicacin de N a finales de verano (para mantener un buen nivel de nutrientes en las hojas). En el ao de baja produccin se debe fertilizar de manera mas moderada. La aplicacin de primavera del ao siguiente al de baja produccin se realizara por perodos ya que cada etapa necesita N de acuerdo a las reservas acumuladas, en base a esto, no requieren aplicacin inmediata. Esto deber hacerse hasta que el 75% del follaje esperado se haya desarrollado (abril-mayo) se pueden aplicar 50 kg/ha. Para mayo se pueden aplicar 50 kg/ha de N y una tercera aplicacin
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con el objetivo de mantener saludable el follaje hasta (cosecha) esto es de 20-40 kg/ha. Juntos o separados: 20 kg/ha en julio y 20 kg/ha en agosto. Aunque realmente no esta comprobado que una aplicacin en septiembre-octubre sea necesaria. Esta tercera aplicacin puede no ser necesaria en aos de baja produccin. La aplicacin de N en primavera cuando la huerta tuvo una alta produccin, requieren aplicacin inmediata con los primeros retoos finales de marzo o principios de abril (50 kg/ha) debido a que no tienen N almacenado. Esta fertilizacin es importante para asegurar un buen crecimiento, desarrollo de la flor masculina y la formacin del fruto. En mayo se recomiendan de 20-50 kg/ha de N (si la produccin es baja o nula, no es necesaria esta segunda aplicacin). Durante el llenado de la almendra un nogal requiere al menos del 30% del nitrgeno que recibe en primavera. Al fertilizar con nitrgeno en agosto la almendra llena bien y no le compite a las hojas por nutrientes, por lo que el rbol llega a la dormancia con suficientes reservas de ste elemento. As, con adecuadas reservas de carbohidratos y nitrgeno, en la siguiente primavera el nogal estar en condiciones de formar las flores necesarias para una buena cosecha, efecto que reduce el grado de la alternancia (Wood, 2002). Huertos transplantados generalmente no requieren de fertilizacin nitrogenada durante el primer ao, a menos que el suelo sea arenoso. En los aos subsiguientes se aplicara nitrgeno sobre la base del desarrollo, y cuando inicie la produccin se recomendara aplicar sobre la base de la carga de nueces (Herrera, 1988). Los fertilizantes ms adecuados son aquellos que tengan una reaccin cida, como el sulfato de amonio (20.5-00-00), fosfato diamnico (18-46-00), nitrato de amonio (33.5-00-00) y la urea (46-00-00). Tambin es recomendable utilizar fertilizantes con bajo ndice de salinidad. El nitrato de amonio presenta un ndice salino alto, el resto de los fertilizantes antes mencionados presentan ndices salinos bajos. Por las condiciones de suelo alcalinas en el norte de Mxico, el fertilizante mas recomendable es el sulfato de amonio ya que es el que presenta el mayor efecto residual de acidez. En el caso del amoniaco anhidro, el cual es aplicado por algunos productores presenta el inconveniente de que su reaccin con el agua de riego provoca que el pH se incremente considerablemente. Esto trae consigo que algunos elementos qumicos presentar en el suelo se precipiten. Este es el caso del calcio y el magnesio, de los cuales se forman carbonatos. Dado que el sodio puede permanecer en solucin, por que presenta ndices de solubilidad ms altos, entonces la Relacin de Adsorcin de Sodio se incrementa significativamente incrementando el potencial de sodificacin de los suelos, que a la larga pueden transformarse en problemas de pobre infiltracin de agua en el suelo, endurecimiento del mismo y toxicidad por sodio. Por otro lado, se han observado daos momentneos a plantas, sobre todo las anuales, ya que el amoniaco en si puede ser toxico para las races, antes de que sea transformado a amonio. De hecho de la superficie de la lmina de riego puede volatizarse amoniaco si esta permanece mucho tiempo en la superficie. La adicin de cidos como el sulfrico durante la aplicacin del amoniaco a ayudado a reducir este problema. Estos cidos neutralizan los iones hidroxilos que provocan el incremento de pH, formados de la solubilizacin del amoniaco. En general, se sugiere aplicar 3 partes de cido por cada parte de amoniaco aplicado, esto sobre la base de peso. Es decir, si se aplican 100 kg de amoniaco anhidro se requerirn 300 kg de cido sulfrico. 193

En sistemas de riego presurizados se puede utilizar aquellos fertilizantes que presenten alta solubilidad. Estos son nitrato de amonio, urea, sulfato de amonio y el nitrato de potasio. Este ltimo es adecuado donde se requiere la aplicacin de potasio. Los ndices de solubilidad son altos, en el caso del nitrato de amonio y de potasio pueden solubilizarse hasta 1 k g por litro de agua a temperatura ambiente. La forma de aplicacin de los fertilizantes depende en gran parte en la forma de acceso a las races. El nitrgeno acceda a las races principalmente por flujo de masas, es decir que por el flujo que provoca la transpiracin de agua por las hojas y otros rganos de las plantas. Entonces los iones de la solucin del suelo son transportados a la raz. Esto es cierto para el caso del nitrato, el cual no puede ser retenido por la matriz del suelo, ni forma parte de compuestos orgnicos. Entonces, en huertos adultos, donde las races prcticamente ocupan toda la superficie del suelo (Nez y Uvalle, 1992), su aplicacin en banda o al voleo es efectiva. En rboles jvenes se recomienda su aplicacin en banda alrededor del arbol, e incorporados a una profundidad de 15 a 20 cm. Durante los tres primeros anos el fertilizante no deber colocarse a distancias menores de 50cm del tronco, para evitar daos por toxicidad a los rboles. Los fertilizantes amoniacales (los que contienen al ion amonio) y ricos (como la urea) son los que presentan mayor toxicidad. En el caso de la fertilizacin a travs del sistema de riego. En huertos adultos, la aplicacin de nitrgeno puede ser al voleo, o aplicada en banda a lo largo de las hileras. El fertilizante aplicado al voleo puede ser incorporado con rastra o con el agua de riego. Para nitrgeno, la forma de aplicacin determina en gran parte su eficiencia. Por ejemplo, cuando el sulfato de amonio e incorpora con rastra inmediatamente despus de volearlo puede perderse de un 5 a 20 %, por volatizacin, bajo nuestras condiciones de pH alto. En las mismas condiciones, volearlo e incorporar o con el riego, representara perdidas de al menos el 40 % del fertilizante aplicado. El nitrato de amonio, en la primera situacin puede perderse menos del 5 %, y en el segundo de un 5 a 20 %. Para obtener la mayor eficiencia de los fertilizantes nitrogenadas es ms recomendable aplicarlo en banda a una profundidad de 25 cm (Traynor, 1980).

Fosforo y potasio. El fsforo se absorbe de la solucin del suelo como ion ortofosfato (H2PO4-, HP042-). El potasio es absorbido como ion (K+). La recomendacin de estos nutrimentos debe ser basada en los resultados de los anlisis foliares. Si estos indican que los niveles son bajos, entonces se sugiere aplicar de 80 a 100 unidades por Ha de cada uno de ellos. Los fertilizantes fosforados mas recomendables son el fosfato monoamnico (11-5200), el fosfato diamnico (16-48-00), el superfosfato triple (00-00-46) y el cido fosfrico (0000-52). Por la reaccin cida que representan, el fosfato monoamnico es el ms adecuado para las condiciones de suelos alcalinos. Entre los potsicos tenemos al sulfato de potasio (00-00-50) y nitrato de potasio (14-00-44). El cido fosfrico es el ms adecuado para realizar su aplicacin a travs de sistemas de riego presurizados (CFA, 1987). El acceso de estos nutrientes a las races se da por difusin en el caso del fsforo y por flujo de masa para el potasio. Dado que el movimiento por difusin es muy lento y depende en gran parte de gradientes de concentracin, lo ms recomendable es aplicarlo en forma localizada, en banda o en puntos. El potasio puede aplicarse al voleo o en banda. Bajo
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condiciones alcalinas el fsforo reacciona rpidamente en el suelo para formar compuestos altamente insolubles, los cuales no pueden ser aprovechados por las plantas. La aplicacin localizada retrasa esta reaccin y permite su aprovechamiento por ms tiempo. Estos fertilizantes debern ser aplicados antes de la brotacin en banda y a una profundidad de 15 a 20 cm, a una distancia de 2.0 a 3.5 m del tronco. En condiciones deficientes hasta 150 unidades de estos nutrientes deben aplicarse. A travs de sistemas de riego presurizados pueden aplicarse desde antes de la brotacin hasta antes del amarre del fruto.

Calcio y magnesio. Estos elementos son absorbidos por las plantas coma cationes divalentes (Ca y Mg). Deficiencias de estos nutrientes no han sido detectadas en los huertos del norte de Mxico. La aplicacin de calcio se realiza en algunas huertas, pero con la finalidad de contrarrestar efectos dainos del sodio, no propiamente como nutriente.

Micronutrientes

La mayora de ellos, a excepcin del molibdeno, presentan baja disponibilidad en condiciones de suelos alcalinos. Esto se debe a que en condiciones de pH alcalino estos metales reaccionan con los iones hidroxilos formando compuestos insolubles. Por lo anterior aplicaciones de sales como los sulfatos y xidos no han sido eficientes cuando se aplican al suelo. En el mbito comercial, se han realizado esfuerzos de aplicacin al suelo acidificando parte del suelo con cidos, coma el sulfrico. Los resultados no han sido satisfactorios. Existen algunos compuestos orgnicos coma los quelatos que presentan diversos grados de estabilidad en pH alcalinos. Su respuesta errtica y su alto costo, no han permitido que se comercialicen. Por lo anterior, la correccin de deficiencias de estos nutrientes, se realiza aplicando los fertilizantes por va foliar utilizando sales o quelatos.

Hierro y manganeso. Las formas en que la planta toma estos metales son Fe2+ y Mn2+. Estos elementos no se aplican generalmente en los huertos nogaleros. Si se detectan niveles bajos o deficiente; de estos nutrimentos mediante al anlisis foliar, se sugiere realizar aplicaciones foliares durante la poca de crecimiento vegetativo . Existen diversos productos comerciales que pueden asperjarse con resultados satisfactorios, dentro de estos tenemos a las sales en forma de sulfatos u xidos, y compuestos formulados con quelatos, cidos orgnicos, extractos de plantas marinas y hmicos, entre otros. Las dosis comerciales varan del 0.10 al 0.25 %. La concentracin de 0.10 % equivale a aplicar 100 gramos o mililitros de material comercial por cada 100 litros de agua. La variedad Wichita es la que ha presentado sntomas de deficiencia de fierro y manganeso en suelo muy arcillosos.

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Zinc. Es el nutriente clave de los nogales. Es tomado del suelo en forma de Zn 2+. A pesar de requerirse en bajas cantidades, tal vez en ningn otro frutal la respuesta a su aplicacin sea tan aparente. En el norte de Mxico las aplicaciones foliares de este nutrimento son esenciales. Debe aplicarse desde el estado de punto verde en la brotacin hasta que los brotes han alcanzado su mximo desarrollo. Por las condiciones de alta alcalinidad en el suelo, este elemento no puede aplicarse al suelo ya que inmediatamente se transforma a compuestos insolubles, los cuales no puede aprovechar la planta. Por lo anterior aplicaciones foliares se realizar a partir de la brotacin. Para el norte de Mxico se ha encontrado que se requieren de al menos 5 aplicaciones de este nutriente para que los anlisis foliares ubiquen a este nutriente dentro de los niveles "ptimos" (Nez, 1991). Estudios indican que el normal puede requerir 50 ppm de zinc en base a peso seco para alcanzar los mximos rendimientos y calidad, y crecimiento vegetativo (Sparks, 1993). Existen diversos productos comerciales que pueden ser utilizados para abastecer de este nutriente a los nogales. De los mas utilizados son el Agrozinc y el NZN, ambos productos formulados con nitrgeno (nitrato de zinc). La dosis comercial es de 0.25 a 0.35 %. A pesar de que estos productos tienen capacidad de reducir el pH e la solucin asperjada, se recomienda utilizar un producto surfactante, para incrementar la capacidad de absorcin por parte de a planta. Otros productos pueden ser utilizados, como las sales de zinc (sulfatos, fosfatos y xidos), soluciones quelatadas (formulados con citratos, EDTA, cidos orgnicos), combinados con cidos hmicos y cidos carboxlicos, entre otros. Para estos productos comerciales se sugiere utilizar las dosis recomendadas por las compaas que los producen. Las aplicaciones de sulfato de zinc (36 % zinc) mezcladas con uran (producto lquido con 32 % de nitrgeno). Este producto se utilizo durante los anos 70's para la correccin de deficiencias de zinc. Despus las formulaciones lquidas de nitrato de zinc como el NZN vinieron a sustituir su uso (Nuez, 2001). Es muy importante cumplir con un programa de aplicaciones. Se recomienda la primera cuando se presenta el punto verde, la segunda una semana despus de la primera, la tercera 15 das despus de la segunda. Posteriormente se pueden realizar aplicaciones cada 15 das, de acuerdo a los requerimientos establecidos por el crecimiento de los brotes. Durante cuatro aos (2001-2004) en la regin Lagunera de Mxico se estableci un experimento en rboles en produccin con el objetivo de determinar la tecnologa de abastecimiento de micronutrientes para sostener una buena produccin con calidad a travs del tiempo. Se realizaron aplicaciones tanto edficas como foliares con fuentes como quelatos, sulfatos y el producto de uso tradicional NZn. Cinco de los tratamientos consisten en aplicaciones foliares utilizando diversos productos y uno de ellos (T2) consiste en una sola aplicacin anual edfica de quelato de EDDHA, el cual ha probado ser efectivo y estable en suelos calcreos. Durante el primer, segundo, tercer y cuarto ao de estudio, todos los tratamientos han probado ser efectivos para mantener un nivel de concentracin de Zn, Fe, Mn y Cu. Adicionalmente a travs de los aos de estudio se ha presentado un efecto de tratamientos similar en la produccin y calidad de nuez (Chvez et al., 2005).

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EL HIERRO EN LA NUTRICIN DE CULTIVOS AGRCOLAS

Ranferi Maldonado Torres, Mara Edna lvarez Snchez, Edmundo Robledo Santoyo, Langen Corlay Chee
Departamento de Suelos, Universidad Autnoma Chapingo, Texcoco, Mxico

Correspondencia: ranferimt@yahoo.com.mx

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INTRODUCCIN
Ms de un tercio de la poblacin mundial padece deficiencia de hierro (Fe), especialmente las mujeres en edad reproductiva y los nios (Robinson et al., 1999). Si la fuente principal de hierro de la dieta humana proviene de las plantas, una estrategias para mejorar el nivel nutrimental en stos sera garantizando el consumo de vegetales con adecuado nivel de hierro (Theil et al., 1997). De ah surge la importancia del estudio de la deficiencia de Fe en los cultivos, adems de las mermas econmicas que origina a la produccin. Sin embargo, la nutricin con Fe en las plantas es afectada por factores que promueven niveles subptimos, especialmente cuando desarrollan en suelos calcreos. Los suelos calcreos, que suman ms de un tercio de la superficie terrestre, se caracterizan por poseer pH alto (7.0 a 8.5), un contenido de carbonatos mayor al 1.0% y niveles de Fe en el suelos y en las plantas que promueven la clorosis frrica (Gildersleeve y Ocampaugh, 1989). Las plantas con deficiencia de Fe muestran una clorosis internerval por una disminucin en la concentracin de clorofila. Los procedimientos utilizados para corregir este problema son: el suministro de fertilizantes con Fe (sales y quelatos de Fe) va foliar o al suelo, soluciones de cidos orgnicos e inorgnicos para modificar el pH de la solucin del suelo, seleccin de variedades de plantas con habilidad para absorber el Fe de formas poco disponible (Olsen et al., 1981; Chen y Barak, 1982).

FUNCIONES METABLICAS DEL Fe El Fe constituye diversas molculas orgnicas del metabolismo vegetal, como: la ferredoxina la cual participa en la reduccin de NO3- y SO42-; es parte estructural de citocromos, catalasa, peroxidas, etc., que a su vez intervienen en la fotosntesis y respiracin; activando enzimas que promueven la sntesis del cido ribonuclico y clorofila (Benett, 1993). Por su participacin en la formacin de clorofilas, una deficiencia de Fe en las plantas disminuye la concentracin de stas, carotenos y xantofilas, lo cual ocasiona una disminucin en la actividad de los transportadores de electrones y en los fotosistemas (Rmheld y Marschner, 1991), originando una merma significativa de la fotosntesis neta y en consecuencia una disminucin del tamao del follaje, disminucin de la capacidad de fijacin y reduccin de CO2 (Terry y Abadia, 1986). En la mayora de los cultivos un dficit de Fe se manifiesta visualmente por una clorsis intervenal, que en casos extremos pueden llegar a tornarse amarillas hasta las nervaduras, las hojas jvenes reducen su tamao, presentndose muerte regresiva de ramas, y aunque las hojas viejas permanecen verdes, se origina disminucin en el crecimiento de la planta y rendimiento (Sadhu 1988; Weir y Sarooshi, 1991).
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QUMICA DEL Fe EN SUELOS CALCREOS

El Fe es el cuarto elemento ms abundante en la corteza terrestre (5.1% del peso) y se encuentra en los suelos formando los minerales Fe(OH)3 (amorfo), Fe(OH)3, maghemita ( Fe2O3), lepidocrocita (- FeOOH), hematita ( Fe2O3) y goetita (FeOOH). Sin embargo, en algunos suelos su disponibilidad es limitada para los cultivos, presentndose en ellos el sntoma tpico de la clorosis frrica (Vempati y Loeppert, 1988). Aunque la clorosis frrica en los cultivos puede ser originada por excesiva humedad en el suelo, baja temperatura en ste, exceso de fosfatos, deficiencia de potasio, exceso o deficiencias de magnesio, excesos de sales solubles, excesos de cinc, cobre y/o manganeso, la causa ms comn es la acumulacin de altas cantidades de CaCO3 (>1.0) provenientes de minerales como la calcita (CaCO3), magnesita (MgCO3), dolomita (CaCO3), dolomita (Ca.Mg.CO3) carbonatos de sodio (Na2CO3), huntita [Mg3Ca(CO3)4] y/o aragonita en suelos de tipo calcimrficos (que efervescen visiblemente al ser tratados con HCl 0.1 N.) (Veen y Arndt, 1973). Los carbonatos provenientes de la calcita y aragonita, principalmente, reaccionan con el H2O y liberan OH-, confirindole al suelo un pH entre 7.0 y 8.5, segn la reaccin siguiente:

CaCO3 (calcita) Ca2+ + CO32- + H2O HCO3 + OH

HCO3- + H2O H2CO3 + OHH2CO3 CO2 + H2O

Este pH puede variar en el tiempo dependiendo de la concentracin de CO32-, Ca2+, por la solubilidad y fineza de la calcita, y por la presin parcial de CO2 (Rowell, 1994). Una vez disuelta la calcita el Fe soluble nativo del suelo y/o el aplicado mediante los fertilizantes es precipitado al reaccionar de la manera siguiente:

2Fe3+ + 3CaCO3 + 3H2O 4Fe2+ + 4CaCO3 + 2H2O + O2

2Fe(OH)3 + 4Ca2+ + 3CO2 FeOOH + 4Ca2+ + 4CO2

En esta reaccin es importante la cantidad de Fe en solucin, la superficie especfica del CaCO3 y la composicin del aire, ya que en ambientes oxidados el Fe2+ cambia a Fe3+ 202

favorecindose la formacin de Fe no disponible y disminuyendo el disponible (a >10-20M), mientras que a mayor CO2 disminuye la oxidacin del Fe2+ y decrece el pH del suelo (Loeppert and Hossner, 1984). El elevado pH no slo promueve un dficit de Fe sino tambin disminuye la disponibilidad de P, Zn y elementos como el Co, Cd, Cu, Ni, Mn, Pb, Sr y U, quienes pueden sustituir al Ca en los CaCO3 o precipitar dentro de stos (Kobata-Pendias y Pendias, 1984; Fuehring, 1973).

CORRECCIN DE LA DEFICIENCIA DE FE EN CULTIVOS AGRCOLAS

El aprovechamiento de Fe por los cultivos presenta problemas complejos asociados a la disponibilidad de ste en el suelo, en su absorcin a nivel rhizosfera y dificultades en su transporte y distribucin dentro de la planta, lo cual hace muy difcil su correccin. Sin embargo, la deficiencia de Fe en los cultivos se ha tratado de resolver mediante: (1) aplicaciones de Fe (FeSO4 o Q-Fe) al suelo, (2) aplicaciones de mejoradores cidos ((NH4)2SO4, S2 o H2SO4, H3PO4 y HNO3 diluidos) al suelo, (3) aspersiones foliares y/o inyecciones de Fe (FeSO4 o Q-Fe) al tronco en el caso de rboles, (4) mediante el desarrollo de genotipos de plantas Fe-eficientes y (5) el uso de ingeniera gentica.

Aplicaciones de Fe al suelo. Las aplicaciones de Fe soluble (FeSO4 o Q-Fe: FeEDTA, FeEDDHA o FeDDHMA) en suelos calcreos ha resultado poco efectiva para corregir la deficiencia de Fe, ya que el contacto de Fe soluble con los CaCO3 reacciona rpidamente formando compuestos de baja solubilidad (Fe(OH)3 y FeOOH), mediante el mecanismo discutido anteriormente. Adems su aplicacin resulta elevada (10 a 25 kg ha-1) y costosa, sobre todo cuando se aplican quelatos (Bould et al., 1984; Loeppert, et al., 1984;Rowell, 1984). Mejoradores cidos. Las aplicaciones de mejoradores cidos disminuyen el pH, aumentan la CE, incrementan la disponibilidad de micronutrimentos (Fe, Mn, Zn y Cu) y de P. Segn Sutaria et al., (1992) en tres suelos de naturaleza calcrea se aplicaron tratamientos de 0, 25, 50 75 y 100% de saturacin de la basicidad titulable con H2SO4. Los resultados indicaron que con el tratamiento ms alto de H2SO4 se promovi en las primeras 24 horas un descenso del pH de 7.9 a 3.9, la CE aument de 0.54 a 4.81 dS m-1, el P-Olsen aument de 16.5 a 50 mg kg-1, el Fe aument de 8.9 a 107, mientras que el Mn de 33 a 234 mg kg-1. Se sabe que la accin del H2SO4 sobre el Fe y P, es por reaccin directa con los minerales que contienen a estos nutrimentos. Generalmente se libera mucho Ca, el cual aumenta la CE y neutraliza a los HCO -3 , disminuyendo la superficie de reaccin y disolucin de CO 2 - lo que 3 incrementa la concentracin de xidos de Fe solubles (Ryan et al., 1975; Sutaria et. al., 1992). Sin embargo, los mejoradores cidos son caros y se requieren en grandes cantidades (de 100 hasta 1000 kg ha-1) para promover efectos positivos; se forman y acumulan nuevos minerales (CaSO4) en el suelo que con el tiempo pueden afectar el crecimiento y desarrollo de los cultivos, y an ms, la correccin del problema es temporal ya que el Fe soluble rpidamente (seis das) vuelve a precipitar en formas pobremente cristalizadas y no disponibles (Sutaria et al., 1992).
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Aplicaciones foliares e inyecciones de Fe. Las aplicaciones foliares de Fe han resultado ms exitosas que las aplicaciones al suelo debido a que; (1) se impiden las complicadas reacciones del Fe con los minerales del suelo, (2) no exige un adecuado nivel de humedad en el suelo para su disolucin, acceso, absorcin y transporte, (3) resulta significativamente ms econmico y (4) la respuesta es ms rpida (Morvetd, 1972). Sin embargo, su efecto es pasajero y costoso, sobre todo cuando se ha aplicado Fe-EDDHA y Fe-EDTA, los cuales son muy estables y causan menos dao al follaje an en dosis mayores a 500 mg L1 (Boult et al., 1984). Las inyecciones de Fe al tronco de los rboles, para corregir su deficiencia, comenzaron a utilizarse en la poca de los 50(s), aplicndose 400 mL de FeSO4 del 1 al 2 % por rbol. Sin embargo, el efecto correctivo de la deficiencia de Fe en cultivos (durazno, manzana, pera y ciruelo) que desarrollan en suelos calcreos ha sido parcial. La clorosis se ha disminuido cuando se inyectan a presin, de 2 a 8 L de solucin de Fe, pero se han originado daos a los rboles incrementndose los costos por rbol (Wallace, 1991). El poco efecto correctivo de la deficiencia de Fe, mediante aplicaciones foliares e inyecciones al tronco, se debe a que an cuando el Fe haya sido absorbido por las plantas, las condiciones de alcalinidad propias de suelos calcreos, elevan el pH del apoplasto (xilema y espacios intercelulares), precipitando el Fe en el interior, inactivando a las reductasas (que convierten el Fe3+ a Fe2+) y a los transportadores de Fe (como el dicitrato y nicotianamida) afectando el transporte y asimilacin del Fe dentro de la planta (Plker, 1991; Mengel y Milissiovas, 1981; Holden et al., 1991; Stephan y Schols, 1993). Por lo que estos procedimientos no ofrecen una solucin definitiva al problema.

Seleccin de genotipos de plantas Fe-eficientes. En los ltimos aos se han identificado plantas que desarrollan mecanismos cundo se cultivan bajo deficiencia de Fe (Olsen et al, 1981); Jauregui y Reisenauer, 1982), los cuales se conocen como estrategias I y II (Marschner y Rmheld, 1994). La estrategia I que se muestra en la Figura 1, es realizada por todas las especies vegetales (dicotiledneas y monocotiledneas), con excepcin de los pastos, y consiste de tres componentes: induccin de reductasa a nivel de membrana, incremento en la excrecin de protones y aumento en la liberacin de quelatos reductores de Fe3+ (principalmente fenoles). La excrecin de H+ acidifica la rhizosfera e incrementa la solubilizacin de Fe no disponible, a la vez que favorece la actividad de la enzima reductora de Fe3+ y en consecuencia la excrecin de fenoles que aumentan la absorcin de Fe (Rmheld y Marschner, 1981). Sin embargo, en especies y genotipos que desarrollan en altos niveles de HCO3- puede disminuirse la actividad de las enzimas reductoras y evitar que actu la estrategia I, originando grandes variaciones en el aprovechamiento del Fe (Jolley et al., 1992). La estrategia II que se muestra en la Figura 2, slo es atribuida a los pastos, aunque se ha cuestionado su posible funcionamiento en otras especies diferentes a stos, siendo caracterizada por dos componentes: liberacin de fitosiderforos (cido mugenico y avenico) y una alta afinidad de los transportadores de la membrana con los fitosiderforos Fe3+ en las clulas de las races. Se ha estimado que una planta puede excretar por da hasta 1 % (con base a peso seco de raz) de fitosiderforos (cido mugenico), el cual es
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hasta 1000 veces mayor a la concentracin de Fe en la rhizosfera. Esta alta excrecin de fitosiderforos sirve para atenuar su disminucin por descomposicin microbiana y para prevenir la precipitacin del Fe en las cargas negativas de los fosfolpidos en la membrana. (Wada et al., 1987; Mihashi et al., 1991).

Rhizoplano

Apoplasto

Citoplasma
NADH

Rhizoplano

Apoplasto Fitosiderforo

Citoplasma

Fe3+FS

Fe3+ Fe2+

R
Tr

NAD+

Fe2+
St

Zn2+
Mineral

Fe3+
Mn2+
2+

Fe3+

Fe3+

H+
Quelato Reductor

H
+

Fe3+

Cu

Fe3+FS
Zn2+ Cu2+ Mn2+

Tr

Fe3+FS
Zn2+ Cu2+ Mn2+

Oxido Fe

Fe3+

X Plasmalema

Figura 1. Estrategia I.

Figura 2. Estrategia II.

La liberacin de los fitosiderforos es estimulada bajo deficiencias de Fe y en presencia de luz, y no es afectada por pH alcalino externo, pudiendo, adems de poder quelatar Fe, Zn, Cu, Mn (Treeby et al., 1989) e inclusive Ca y Mg (Singh et al., 1992; Marschner et al., 1986). Aunque se conoce mucho de las estrategias I y II, an no estn completamente entendidos algunos procesos que toman lugar en el apoplasto radical, ni el papel de exudados de bajo peso molecular y siderforos en la adquisicin de Fe. Tambin por el momento han sido pocas las especies (sorgo, cebada, frjol, especies forrajeras, pepino y algunos frutales) donde se han seleccionado genotipos Fe-eficientes. Especialmente en el caso de frutales, el proceso ha sido lento ya que requieren primero de una seleccin de capacidad reductora de Fe y acidificacin en soluciones nutritivas, despus se necesita clasificar los genotipos en condiciones de invernadero y finalmente realizar la validacin en campo. Ingeniera gentica. Ya se conocen tcnicas de biologa molecular para incrementar los mecanismos de Fe-eficiencia. Especficamente se esta trabajando con genes que inducen la sntesis de nicotianamina para incrementar la velocidad de transporte de Fe dentro de la planta y acelerar la produccin de fitosiderforos y actividad de las reductasas en la membrana de la raz (Higuchi, et al., 1999).

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CONCLUSIN Conociendo las limitaciones de cada procedimiento de correccin de la clorosis frrica de plantas cultivadas en suelos calcreos, la seleccin de genotipos Fe-eficientes representa la mejor alternativa de solucin a este difcil problema a mediano plazo, an cuando el proceso para la identificacin de genotipos sea complicado. A futuro, mediante el uso de la ingeniera gentica los tiempos para la obtencin de materiales Fe-eficientes podran ser menos difciles. Para una regin en particular, la implementacin de estrategias de solucin a la clorosis frrica debera iniciarse, realizando un inventario regional que involucre: la caracterizacin de las clases de suelo y su fertilidad, la caracterizacin de los portainjertos en cuanto a su adaptacin a los factores limitantes del suelo, clima, humedad del suelo, plagas y enfermedades. Para ello es necesario trabajar de manera interdisciplinaria con especialistas que buscan en el genotipo caractersticas deseables, como: ms produccin, mayor calidad en el producto de inters, resistencia a ciertas plagas y enfermedades importantes en la regin, que la arquitectura de la planta facilite labores culturales y cosecha, que desarrolle bien en condiciones de estrs nutrimental, que su ciclo de crecimiento y desarrollo permita producir en pocas donde la cosecha tenga mayor precio, etc. Una vez reunidos los genotipos ms deseables deber realizarse un programa de validacin, para evaluar su comportamiento, produccin y calidad en los ambientes ms comunes de la regin, en cuestin.

LITERATURA CITADA

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