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DOENAS MULTIFATORIAIS

DOENAS GENTICAS

CROMOSSMICAS
1 cromossomo

MONOGNICAS 1 gene

MULTIFATORIAIS
GENES + AMBIENTE

Doenas monognicas e cromossmicas so caractersticas qualitativas

DOENA MONOGNICA
Alelo mutado presente Alelo mutado ausente

INDIVDUO AFETADO Cromossomo alterado presente

INDIVDUO NORMAL Cromossomo alterado ausente

DOENA CROMOSSMICA

Princpios da Herana Multifatorial


polignica Pequenas contribuies de vrios genes
A + B + C + D

Vrios fatores ambientais

1 + 2 + 3 + 4 + 5

DOENA
CARACTERSTICAS QUANTITATIVAS COM DISTRIBUIO NORMAL

Existem vrias caractersticas quantitativas com herana multifatorial


Presso sangunea

Peso
Concentrao srica de colesterol Circunferncia ceflica

Altura
Inteligncia Cor da pele

O que distribuio normal ?


Supondo que a altura fosse determinada por 1 par de genes, com relao de co-dominncia
A: alto (1,80m) a: baixo (1,50m)
2

Proporo fenotpica

Aa x Aa AA Aa Aa aa

1 AA: alto (1,80m) 2 Aa: altura mdia (1,65m) 1 aa: baixo (1,50m)

p r o p o r o

0 baixo mdio alto

3 categorias fenotpicas

Considerando que a altura seja determinada por 2 genes:

Gene A contribui com 1 cm;


Gene C contribui com 1,2 cm; Letras minsculas representam alelos contribuindo com 0,5 cm e 0,6 cm, respectivamente

Os fentipos se dividiriam em cinco grupos:


AACC AaCC aACC AACc AAcC aaCC aACc AacC AaCc aAcC AAcc aaCc aacC aAcc Aacc aacc

6
p r o p o r o

5 4 3 2 1 0 A (4) A/B (3:1) A/B (2:2) A/B B (4) (1:3)

Passam a
existir mais categorias de

fentipos
intermedirios

Todos alelos p/ alto: 1 3 alelos alto:1 alelo baixo=4 2 alelos alto:2 alelos baixo=6 1 alelo alto:3 alelos baixo=4 Todos alelos baixo: 1

Vrias medidas de alturas seriam possveis, dentro das 5 categorias

Gentipos possveis
AACC AaCC aACC AACc AAcC aaCC aACc AacC AaCc aAcC AAcc aaCc aacC aAcc Aacc aacc

No alelos c/ contribuio mxima 4 3 3 3 3 2 2 2 2 2 2 1 1 1 1 0

Altura 4,4 3,9 3,9 3,8 3,8 3,4 3,3 3,3 3,3 3,3 3,2 2,8 2,8 2,7 2,7 2,2

A=1,0; a=0,5; C=1,2; c=0,6

Se a altura for determinada por 3 pares de genes, mais categorias fenotpicas ocorrero

20 18 16 14 12 10 8 6 4 2 0 A (6) A/B A/B A/B A/B A/B B (6) (5:1) (4:2) (3:3) (4:2) (5:1)

Os fatores ambientais iro conferir ainda mais variaes fenotpicas

As caractersticas quantitativas tm uma distribuio


normal na populao (gaussiana) mdia
No. indivduos Desvio padro

1,40

Altura (m)

1,95
Emery

MAS...
Muitas doenas multifatoriais parecem estar

presentes ou ausentes nos indivduos

que

segue

uma

distribuio

normal

SUSCETIBILIDADE doena

Existe um LIMIAR DE SUSCETIBILIDADE que precisa ser


cruzado para a doena estar presente

O modelo do limiar

No afetados Limiar de suscetibilidade Afetados

baixa Poucos fatores genticos/ambientais contribuem para a doena

SUSCETIBILIDADE

alta

Muitos fatores genticos/ambientais contribuem para a doena

Emery

O limiar de suscetibilidade pode variar entre os sexos


limiar

Quem tem maior chance de ter um baixo suscetibilidade alto irmo afetado, o homem ou a mulher ?

baixo

suscetibilidade

alto
Jorde 3. edio

Muitas doenas apresentam herana multifatorial


Surgimento na vida infantil e adulta Congnitas Asma Autismo Diabetes mellitus Epilepsia Glaucoma Hipertenso Doena cardaca isqumica Doena manaco-depressiva Obesidade Doena de Parkinson Cncer Artrite reumatide Lupus Esquizofrenia

Fenda labial/palatina
Defeitos cardacos congnitos Defeitos do tubo neural

Risco de recorrncia e padro de transmisso para doenas multifatoriais


No possvel conhecer todos os fatores genticos e ambientais
envolvidos na doena no h como calcular risco de recorrncia para cada casal

Risco emprico

Calculado a partir da observao da recorrncia da doena em famlias numa dada populao

Fatores genticos e ambientais so diferentes entre as populaes

Ou seja, o risco calculado a partir da agregao familiar da doena


Parentes tm maior chance de compartilhar genes

Risco relativo: Prevalncia da doena em uma classe de parente do afetado Prevalncia da doena na populao r= classe de parentes (irmos, pais, etc)

r =

Se r = 1, risco igual ao da populao

Critrios para definio de herana multifatorial


O risco maior se mais de um membro da famlia afetado
Lembre-se: o risco inicial de uma famlia o estimado, no o real ! O que muda agora no o risco real, mas o seu conhecimento sobre a

suscetibilidade dessa famlia

Se a expresso da doena no probando for mais severa, o risco de recorrncia maior Expresso mais grave - mais fatores causadores da doena presentes nessa famlia

O risco de recorrncia maior se o probando for do sexo menos comumente afetado Se o sexo que precisa de mais fatores genticos e ambientais para desenvolver a doena chegou a apresent-la porque a famlia contm muitos fatores de risco

Tabela 1: Risco de recorrncia para estenose pilrica Probandos homens Probandas mulheres Londres Belfast

Parentes

Londres

Belfast

Irmos

3,8

9,6

9,2

12,5

Irms

2,7

3,0

3,8

3,8

Observe que o risco de recorrncia diferente em cada populao

Jorde, 3. edio

O risco de recorrncia geralmente diminui rapidamente em parentes mais remotos

improvvel que todos os fatores de risco estejam presentes em membros mais distantes Se a prevalncia da doena na populao f, o risco da prole e de irmos do probando de aproximadamente f No uma regra absoluta

Tabela 2: Risco relativo (%) para diferentes graus de parentesco Grau de parentesco

Doena

Prevalncia

1. grau

2. grau

3. grau

Lbio leporino/palato fendido

0,1

4,0

0,7

0,3

P torto

0,1

2,5

0,5

0,2

Autismo

0,04

4,5

0,1

0,05

Jorde, 3. edio

Gene principal + componente multifatorial

Gene A: gene nico causando grandes efeitos sobre a altura Efeito multifatorial: outros genes + ambiente somam efeitos individuais menores

Como as influncias genticas podem ser separadas das influncias ambientais ?

Estudos de gmeos Estudos caso - controle

Estudos de gmeos
Gmeos monozigticos
Geneticamente idnticos Qualquer diferena pode ser atribuda ao ambiente

Geneticamente to diferentes quanto irmos no gmeos Compartilham ambiente mais semelhante do que irmos no gmeos Sujeitos a variaes ambientais semelhantes aos gmeos MZ

Gmeos dizigticos

Os gmeos podem ser concordantes ou discordantes para uma caracterstica Caracterstica totalmente determinada geneticamente 100% concordncia em MZs Concordante em menor frequncia em

DZs (~50%) Genes idnticos Ambientes diferentes

Gmeos MZs criados separadamente

Limitaes:
Variao gentica entre gmeos MZs (p.ex.: inativao do X)
Exposio ambiental pode no ser a mesma Alelos ou fatores ambientais diferentes nos diferentes pares de gmeos Vis de amostragem

Herdabilidade
Frao da variao fenotpica total que causada pelos genes Para caractersticas qualitativas: Herdabilidade (h) = 2 (CMZ CDZ)

Para caractersticas qualitativas: Calcula-se o Coeficiente de correlao intraclasse

Aplica os valores na frmula


Variao entre os indivduos Variao total

Onde: variao total = variao entre os indivduos + variao ambiental

Tabela 3: Taxas de concordncia entre Mzs e DZs Doena/caracterstica Distrbio afetivo (bipolar) Alcoolismo Autismo IMC Sarampo Infarto do miocrdio (homens) Infarto do miocrdio (mulheres)

Taxa de concordncia
MZ 0,79 >0,60 0,92 0,95 0,95 0,39 DZ 0,24 <0,30 0,0 0,53 0,87 0,26 Herdabilidade

>1,0 0,60 >1,0 0,84 0,16 0,26 0,60


Jorde, 3. edio

0,44

0,14

Estudos caso-controle
Casos: indivduos com a doena
Controles: indivduos sem a doena Verifica-se a frequncia com que a doena ocorre em toda a extenso familial de cada grupo

Estudos de associao de mutaes a doenas


Frequncia allica ou genotpica observada nos casos e nos controles Gentipo ou alelo est associado com a doena

Frequncia genotpica/allica casos > controle

Doenas com herana complexa


Diabetes mellitus tipo 1 (insulino-dependente)
Representa ~10% dos casos de diabetes mellitus Incidncia de 1:200 em populao caucasiana (0,5%) Destruio das clulas do pncreas Taxa de concordncia em MZ: 40% Taxa de concordncia em DZ: 4,8% s = 12

O papel das HLAs na resposta imune

Mutaes em genes HLA (HLA-DR3, HLADR4 ou HLA-DQ) so frequentes em indivduos com DM tipo 1

Nature Reviews Immunology 2, 283-291 (April 2002

Doena de Alzheimer
Perda progressiva de memria e outras
funes Morte de neurnios e formao de placas amilides Placas amilides: peptdeo a Trs formas raras com herana AD, de incio precoce (30 a 50 anos)

Forma mais comum apresenta


agregao familiar e r elevado, de incio tardio (>60 anos)

Apolipoprotena E (APOE) Protena componente do LDL Constitui as placas amilides junto com o peptdeo a Existem 3 alelos na populao: e2, e3 e e4
AD (EUA)
Gentipo e4/e4 e3/e4 e2/e4 e3/e3 e2/e3 e2/e2 0,64 0,31 0,47 0,17 Controle (EUA) AD (Japo) Controle (Japo)

0,36

0,69

0,53

0,83

Malformaes congnitas

Como defeitos isolados, possuem herana complexa Defeitos de fechamento do tubo neural Fenda labial com ou sem palato fendido Fenda palatina Malformaes cardacas congnitas

Anencefalia
Prosencfalo, meninges, abbada craniana e pele ausentes

Espinha bfida
Falta de fuso dos arcos das vrtebras (lombares) Graus variados: oculta ou aberta (meningocele ou meningomielocele)

Tubo neural

Meningomielocele

23 dia

Meningocele

Os defeitos do TN e a deficincia de cido flico


Risco de DFTN inversamente proporcional aos nveis maternos de cido flico Efeito limiar: 200 mg/l Suplementao diettica com 400/800 mg cido flico/dia reduz a incidncia de DFTN em >75%

Metilao do DNA
Hipometilao Problemas na segregao dos cromossomos Trissomia do 21 Metionina

Defeitos de fechamento do tubo neural Isquemia arterial Dano endotelial Homocistena

THF

5-metil-THF

cido flico

5,10-metilenoTHF

MTHFR

dTMP

Sntese do DNA
Revista Brasileira de Medicina, 62(9), 401-408. Journal of Integrative Biology 12 (4):229,2008

Menor incidncia de cncer de colon

GENTICA DO CNCER

O CNCER UM PROCESSO QUE OCORRE EM MLTIPLOS ESTGIOS

Estgios de desenvolvimento do cncer

Os tumores so capazes de produzir seus prprios vasos sanguneos (angiognese)

Estgio metasttico

Na progresso do processo neoplsico, a clula adquire as capacidades de :

Auto-suficincia em sinalizao para o crescimento Insensibilidade sinalizao anti-crescimento

Potencial replicativo ilimitado


Evaso do processo apopttico - imortalidade Angiognese Invaso tecidual e metstase

O CNCER UMA

DOENA DO
CICLO CELULAR

O ciclo celular
Fase G2 Preparao para a diviso celular MITOSE Diviso celular

G1, S, G2

Intrfase
FASE S Duplicao do DNA

FASE G1 Atividade metablicas associadas com crescimento celular e replicao do DNA

FASE G0 A clula no est se reproduzindo

Fase G0

Como assegurado que os eventos do ciclo


celular ocorram na ordem correta?

ciclina
CDK Protena que, quando presente, torna a CDK ativa Protena quinase que ativa as protenas responsveis pelos eventos de uma determinada fase do ciclo

A ciclina que ativa a CDK responsvel por uma fase do ciclo celular ser degradada na fase seguinte

Complexo CDK1/ciclina B (responsvel pela entrada da clula em mitose)

A progresso pelo ciclo celular controlada pelos complexos CDKs/ciclinas


G1 S G2 M

CDK4 CIC.D CDK6 CIC.D

CDK2 CDK1 CIC.A CIC.B

CDK1 CDK2 CIC.E CIC.A

G1

CICLINA D

CICLINA E

CDK4,6

CDK 2

pRb

E2F P P P P pRb Ciclina A Timidilato sintase Dihidrifolato redutase Timidina quinase Ciclina E E2F

E2F

O CNCER UMA DOENA

GENTICA

A clula adquire as caractersticas neoplsicas atravs do acmulo de mutaes

Genoma estvel

Clula normal

cromossmicas Mutaes

pontuais

Genoma instvel

Clula tumoral

Caritipo de um rabdomiosarcoma em um homem de 21 anos. Hipotetraplide, com muitas alteraes numricas e estruturais, no ltimo caso resultando em ganhos significativos nos cromossomos 2q, 5, 8p, 9q e 11q e perdas nos cromossomos 3q, 4q, 12q, 17, 19 e 21.

Caritipo espectral (SKY, spectral karyotiping)

Pontos de quebra dos cromossomos tumorais (cancer breakpoints) Locais onde a quebra recorrente (considerando-se o mesmo tipo e/ou tipos diferentes de tumores)

So regies muito ricas em genes - 20 das 30 regies


cromossmicas mais ricas em genes so breakpoints As aberraes cromossmicas podem resultar em perda ou ganho da funo de genes
MUTAES PONTUAIS E ALTERAES EPIGENTICAS TAMBM SE ACUMULAM DURANTE O PROCESSO TUMORAL

Respostas ao dano no DNA

PARE
Bloqueio na diviso celular Impede que a clula d origem a outra clula com o dano Reparo do DNA Elimina o dano porque o conserta Apoptose

Elimina o dano porque elimina a clula que o contm

Nature 408: 433, 2000

Sistemas de Reparo do DNA


Manuteno das informaes do DNA Resposta envolve uma variedade de protenas e complexos enzimticos Clulas mltiplos sistemas de reparo

Essencialidade Diversidade de origem dos danos

www.rsc.org/.../10/Discovering_DNA_repair.asp

Etapas bsicas do reparo do DNA


4) DNA ligase ligao fosfodister para selar a fita
1) Protena reconhecedora do dano 2) Endonuclease retira os nucleotdeos

3) DNA polimerase sintetiza novos nucleotdeos

TTGAACTGGGTACGATCCA T AACTTGACCCATGCTAGGT

Os pontos de checagem (checkpoints) do ciclo celular

O controle do checkpoint na fase G1

CDK2 p21 CDK4Cic D Cic E/A

Controlam a sada da fase G1

pRb

E2F

p21

p53 ATM

Morte celular

Necrose

Apoptose

translocase

FADD Casp 8 Casp 8 Casp 8 Casp 8 Bid

Via independente da MT Bax p53

ATM
Cit. c Apaf-1 Casp. 9 DFF40 Casp. 3 Protenas do citoesqueleto Acinus
Ca+ Mg+

300 / 50 kb endonuclease 180/200pb

Dois eventos chave para surgimento/progresso do tumor:


Homeostase

PROLIFERAO CELULAR

MORTE CELULAR

Acmulo de clulas - TUMOR

Gene atuando normalmente no processo homeosttico


Necessidade de aumentar a populao celular

Sinais para: Induo de proliferao celular Inibio de morte celular


OU

Diviso celular

Apoptose

Aumenta nmero de clulas

O MESMO GENE SOFRENDO MUTAO DE GANHO DE FUNO

OU

Proliferao celular

Apoptose

Aumento excessivo do nmero de clulas - tumor

Oncogenes

Genes

que,

quando

mutados,

so

constitutivamente

expressados, podendo resultar em proliferao descontrolada,

inibio da apoptose e transformao neoplsica.


Ex.:fatores de crescimento, protenas quinases, transdutores

de sinais, fatores de transcrio.

Como os oncogenes so mutados


Geralmente so eventos somticos mutaes em clulas germinativas tornam-se constitutivas, o que letal

1) Amplificao gnica : so feitas muitas cpias de um gene


Ex. : gene MYC
Double minutes

Regies homogeneamente coradas


Trends in Genetics 22:447, 2006

2 Translocaes cromossmicas 2.a ) Produo de protenas quimricas

Ex. : BCR/ABL em leucemia mielide crnica

BCR ABL

GRB2

JAK2

CAKL

Inibio da apoptose Proliferao Crescimento independente de fator de crescimento

2.b) Transposio para uma regio que muito ativa transcricionalmente Ex. : MYC/IGH em linfoma de Burkit IGH : muito expresso em linfcitos MYC : fator de transcrio que estimula proliferao celular

Mutao pontual
Alterao de uma ou poucas bases, mudando a informao gentica Ex. : gene RAS ativa inativa

GDP

RAS

RAS GTP

Diviso celular

ativa RAS GDP inativa

GTP

RAS

Diviso celular

A PREDISPOSIO

AO CNCER PODE
SER HERDADA

GENES SUPRESSORES DE TUMOR: a segunda categoria de genes mutados no cncer

Retinoblastoma
Origina-se de retinoblastos que se diferenciam em clulas fotorreceptoras e neurnios

Processo de diferenciao falha nos tumores, e as clulas continuam


a se dividir, podendo se espalhar e metastatizar Cncer comum em crianas

40% hereditrios

60% espordicos
Bilateral Unilateral

Unilateral Maioria dos casos bilateral 80% desses casos so mutaes de novo na linhagem germinal

Forma hereditria

Mutao somtica (2 evento) Mutao herdada (1 evento)

Basta outro evento para o desenvolvimento de novo tumor


Comumente bilateral
Knudson, A. - Nature Rev 1:157, 2001

Forma espordica
Mutao somtica (1 evento) Mutao somtica (2 evento)

Mais dois eventos devem acontecer para produzir outro tumor Raramente bilateral
Knudson, A. - Nature Rev 1:157, 2001

Hiptese dos dois eventos (two hits)


Knudson, 1971 2 eventos so necessrios para ocorrncia do tumor, tanto da forma hereditria quanto da no-hereditria Na forma hereditria, o primeiro evento ocorre na linhagem germinativa, e o segundo uma mutao somtica Na forma espordica, as 2 mutaes so somticas

Predisposio herdada ao cncer (cnceres


familiais)
Doena Polipose adenomatosa do clon familial Cncer de clon hereditrio, no poliposo Cncer de mama e ovrio Cncer de mama de incio precoce Sndrome de Li Fraumeni Ataxia telangiectasia Melanoma familial Gene APC MSH2, MLH1 BRCA1 BRCA2 TP53 ATM CDKN2A (p16)

Gene atuando normalmente no processo homeosttico


Necessidade de diminuir a populao celular

Sinais para: Inibio de proliferao celular Induo de morte celular


OU

Diviso celular

Apoptose

Reduz nmero de clulas

O mesmo gene sofrendo mutao de perda de funo

OU

Diviso celular

Apoptose

Um alelo ainda consegue realizar a funo Os dois precisam ser inativados para contribuir para o processo tumora

Genes supressores de tumor

Genes que inibem o fentipo neoplsico, geralmente envolvidos na inibio da diviso celular e ativao da apoptose.

Quando so inativados ou perdidos, o crescimento


descontrolado torna-se possvel.

Genes supressores de tumor

Mutaes nestes genes resultam em perda de funo

Os dois alelos precisam estar inativados para que haja contribuio para o processo tumoral a mutao recessiva

Como os genes supressores de tumor so mutados


Mutao pontual: alterao de uma ou poucas bases, resultando em perda ou diminuio da funo Deleo do gene: pequenas delees cromossmicas, que no so visveis ao microscpio Metilao da regio promotora: impede ligao do aparato basal de transcrio regio promotora

Classificao dos genes supressores de tumor

Genes zeladores (caretakers -proteo do genoma)

Genes porteiros (gatekeepers - proliferao e sobrevivncia)

Reparo do DNA Proteo do telmero

Controle do ciclo celular Apoptose

Estabilidade genmica

Desenvolvimento tumoral envolve aumento da taxa de mutaes

Agentes mutagnicos elevam a taxa basal de mutaes

Genes responsveis por eliminar o dano no esto funcionando corretamente

Genes responsveis por eliminar a clula danificada no esto funcionando corretamente

Clulas com mutaes adquirem vantagem proliferativa em relao clula normal