UNIVERSIDADEFEDERALDEGOIS ESCOLADEVETERINRIA DEPARTAMENTODEMEDICINAVETERINRIA DISCIPLINADELABORATRIOCLNICOVETERINRIO

ROTEIRODEPROCEDIMENTOSPARA AULASPRTICASDELABORATRIO CLNICOVETERINRIO

Prof.Dr.AdilsonDonizetiDamasceno Prof.Dr.DirsonVieira
GOINIA2010/2SEMESTRE

VISTODECONFERNCIADASAULASPRTICAS Turma:

Bancada:

NMatrcula:

Nome:

AULAPRTICA1 AULAPRTICA4 AULAPRTICA7 AULAPRTICA10 AULAPRTICA2 AULAPRTICA5 AULAPRTICA8 AULAPRTICA11 AULAPRTICA3 AULAPRTICA6 AULAPRTICA9

AULAPRTICAN1INTRODUOAOLABORATRIOCLNICO
1.1.Gruposdeaulaprtica Os alunos devero se dividir em grupos com 5 a 6 componentes que devero ser fixos at o final do semestreletivo; Cada grupo confeccionar um relatrio de aulas prticas, onde dever constar os resultados e a sua discussoluzdaliteraturadisponvelquandosefizernecessrio. 1.2.Indumentria Durante as aulas prticas, o aluno manipular espcimes clnicos obtidos geralmente de animais doentes e reagentesqumicospotencialmentetxicos.Assimexposto,sugeresequeoalunoutilize: Jalecodemangacomprida(preferencialmente) Luvasdeprocedimento(adquiridaspeloaluno) Calascompridas Sapatofechado Observao: alm dos cuidados acima expostos, orientase ao aluno no se alimentar dentro da sala de aulaprticaenoutilizarbons,chapusousimilares. 1.3.Manuseiodomaterial Duranteaexecuodasprovas,osalunosdeveroestaradequadamenteparamentadosesentados; Omanuseiodomaterialdeverserfeitacuidadosamentesobreabancada; Paraousodomicroscpiorecomendase: descobriloeliglo; certificarseseestreguladocomaobjetivademenoraumento; queavisualizaodeverserfeitasempredaobjetivademenorparaademaioraumento; oleodeimersoparaautilizaodaobjetiva100x; limpar a objetiva de 100x aps seu uso, para retirada de resduo de leo de imerso, empregando soluoprpriadelimpezaepapel/tecidomacio; aretiradadalmina,sualimpezageral,desligamentoerecobrimentoaofinaldesuautilizao.

1.3.Geral Antesdesairdasaladeaula,certifiquesequeforamexecutadasaseguintestarefas: Descartarolixodabancadanalixeira; Lavarcuidadosamenteasvidrariasempregadasemaulaprtica; Limparasbancadas. 1.4.Atividadespropostas Focarlminasdeesfregaosanguneocorado,conformeorientaesanteriores; Homogeneizaodeamostras Pipetagemcommicropipetas(verfigura1.1)

Figura1.1Desenhoesquemticodeprocedimentodepreenchimentoeesvaziamentodemicropipetas.

Pipetagemcompradeborracha

Figura 1.2 Desenho esquemtico de procedimento de preenchemiento e esvaziamento de pipetas volumtricascomoauxliodeumapradeborracha.

AULAPRTICAN2EXAMEPARASITOLGICODEPELE
2.1.Microscopia

2.1.1.Mtodoparaexamedefungosecaros

Depositaromaterialquesedesejaexaminarsobreumalminademicroscpio; Pingarduasatrsgotasdeumasoluodehidrxidodesdiooudepotssioa10%; Homogeneizarlevementecomumbastodevidro; Cobrircomumalamnula; Aquecersuavementealmina,sobreumachamabranda,oquefacilitaroclareamentoeadissoluodo

tecidoraspado,auxiliandoassimavisualizaoeadissoluodotecidoraspado;

Estematerialdeverserexaminadocomobjetiva10X.

Observao: podese melhorar a visualizao, aumentando o contraste atravs do uso de tinta nanquim em partesiguais,comumasoluodehidrxidodepotssioa20%. 2.1.2.Mtodoparaexamedefungosecarosdeorelhaexterna(exameparasitolgicodecermen)

Introduzirapontacomalgododeumsuabeouzaragatoaestrilnocondutoauditivoexternoefriccionla
paredeparaaobtenodecermenousecreo.

Pormeiodarolagemdosuabe,transferirocermenousecreoparaumalminademicroscpio. Coraroesfregaopelatcnicadopanticoedeixarsecar. Examinaraomicroscpio,emobjetivade40x,comajudadoleomineral.

2.2.Apresentaodosresultados

RESULTADODERASPADODEPELE

NIdentificaodaamostra:

Data:

____/____/________

Espcie:

CAN

FEL

BOV

EQU

OUTRA:

Amostra(espcimeclnico):

RESULTADO

AULAPRTICAN3HEMOGRAMA(ERITROGRAMA)
3.1.Determinaodovolumeglobular(hematcrito) 3.1.1.Mtododomicrohematcrito Homogeneizarbemaamostradesangue(contendoanticoagulante). Encher2/3deumtubocapilarcomsangue. Limparosanguedeforadotubocomalgodo,mantendootubonahorizontal. Fecharaextremidadelivredotubocomumamassademodelarounachama. Colocarotubonacentrfugacomaextremidadefechadaapontadaparafora. Certificarqueacentrfugaestejaadequadamentefechada. Centrifugara10,000rpmdurante5minutos. Fazeraleituradotuboemumgrficocomescalaprpria,considerandoarelaodovolumeeritrocitrioo sobrenadante. 3.2.Contagemdehemcias Homogeneizarbemaamostradesangue(contendoanticoagulante). Removerosanguedeforadapipetacompapelabsorvente. Diluir10Ldesangueem2mldodiluidornumtuboepreencheracmaradeNeubauercomoauxlioda micropipeta. Apstrsminutosemrepouso,levaracmaraaomicroscpio. Contarashemciasde5dos25quadradosdareareticuladacentral(quadradosescuros). Paraisso,focalizarcomobjetivade10xecontarcomobjetivade40x. Somaroresultadoemultiplicarpor10.000paraobtenodoresultadoporL(mm3).

Figura 3.1 esquerda retculo da cmara de Neubauer (ao centro os quadrados para leitura do nmero de hemcias). direita Exemplo de regra para contagem de hemcias em um doscincoquadradinhosdoretculocentral.

3.4.Apresentaodosresultados

RESULTADODEERITROGRAMA

NIdentificaodaamostra:

Data:

____/____/________

Espcie: CAN FEL Amostra(espcimeclnico):

BOV

EQU

OUTRA:

ERITROGRAMA Hemcias: Hematcrito: Hemoglobina: VCM: HCM: CHCM: Obs.:

RESULTADO
12

VALORESDEREFERNCIA(veranexo) UND
12

tera/L* % g/dL fL g/dL pg

*unidadeteracorresponde10 ;unidadegigacorresponde10

AULAPRTICAN4HEMOGRAMA(ERITROGRAMA)
4.1.Determinaodahemoglobina 4.1.1.Mtododireto

Identificardoistubosdeensaiocomobranco(B)eamostra(A). Emseguida,transferirparaostubos,osreagentesconformequadroabaixo. TUBO A B Homogeneizaredeixaremrepousopor2minutos. Determinarasabsorbnciasdobrancoedaamostraem405nmacertandoozerocomobranco. Multiplicarovalorobtidoporumfatordecorreode6.2paraobterovalordahemoglobina(g/dL) GUADESTILADA 4mL 4mL SANGUE 10L

4.2.Contagemdereticulcitos 4.2.1.Preparaoseca

Aspirar100Ldecorantenovoazuldemetileno(ouazulcresilbrilhante)etransferirparaumtubodevidro. Aspirar 100L de sangue (remover o sangue de fora da pipeta com um algodo ou papel absorvente) e transferirparaotubocontendoocorante. Homogeneizarbemeincubarpor5minutosembanhomaria37C. Prepararumesfregaoconformeitem4.2.1. CoraroesfregaosecopelatcnicadoGiemsaoupanticorpido(item4.2.2) Contar as hemcias em um campo microscpico de imerso (100x) onde as mesmas encontramse distribudashomogeneamente,paraservirdevalormdiodonmerodehemcias(NMH). Contar os reticulcitos em 10 campos microscpicos de imerso e dividir por 10 para obter a mdia de reticulcitos(NMR).Osreticulcitossohemciascomgrnulosefilamentoscoradosemescuro. Apercentagemdereticulcitosdeterminadaconformeafrmulaabaixo: %reticulcitos= NMR NMH

A % de reticulcitos pode ser multiplicada pelo nmero de hemcias do eritrograma para a obteno do nmerodereticulcitosemmicrolitrosdesangue.

4.3.Apresentaodosresultados

RESULTADODEHEMOGLOBINAERETICULCITOS

NIdentificaodaamostra:

Data:

____/____/________

Espcie: CAN FEL Amostra(espcimeclnico):

BOV

EQU

OUTRA:

ERITROGRAMA Hemcias: Hemoglobina: Reticulcitos:

RESULTADO
12

VALORESDEREFERNCIA(veranexo) UND
12

tera/L* g/dL %

*unidadeteracorresponde10 ;unidadegigacorresponde10

AULAPRTICAN5HEMOGRAMA(LEUCOGRAMA)
5.1.ContagemGlobaldeLeuccitos Aspirar400LdesoluodeTurkemumtubodevidro; Homogeneizarbemaamostradesangue. Aspirar20Ldesanguecomapipetaautomtica. Removerosanguedeforadapipetacompapelabsorvente. DiluirosanguenasoluodeTurkehomogeneizaramisturaportrsminutos. PreencheracmaradeNeubauerpreviamentemontada. Apstrsminutosemrepouso,levaracmaraaomicroscpio. Contarosleuccitosdos4quadradosangulares(figuraabaixo),conformeorientao. Paraisso,focalizarcomobjetivade10xecontarcomobjetivade40x. Somaroresultadodos4quadradosemultiplicarpor50paraobtenodoresultadoporL(mm3).

Figura 5.1 Retculo da cmara de Neubauer evidenciandoemcinzaosquadrados angulares empregados na contagem deleuccitos.

5.2.DeterminaoDiferencialPercentualdeLeuccitos 5.2.1.Preparodoesfregao Homogeneizarbemaamostradesangue(contendoanticoagulanteoufresco). Comumtubodemicrohematcritotransferirumagotculadesangueparaumadasextremidadesdeuma lminademicroscopialimpaedesengordurada. Pegarumalminadecantosrecortadosecolocarareferidaextremidadefrentedagotculadesangue, numnguloaproximadode45. Fazerumligeiromovimentoparatrs,atosangueespalharpelapontadalmina.

Comummovimentouniforme,parafrente,fazeressalminadeslizarsobreaoutra,arrastandoatrsdesi, osanguequeseespalharemfinacamada(figuraabaixo).

Agitaralminaatoesfregaosecarcompletamente. Identificaralminaadequadamente

Figura5.2Etapasdeconfecodeesfregaosanguneo(paramaisdetalhesvidetcnicadepreparao5.2.1)

5.2.2.Coloraodoesfregao Panticorpido Mergulharesfregaconocorante1por7segundos. Retiraresfregao,deixarescorrere, Mergulharnocorante2porigualtempo. Mergulharnocorante3porigualtempo,escorrerelavaremguadetorneira. Secaraoareexaminar. MtododeGiemsa Cobriresfregaocomlcoolmetlicopor3min. CobriresfregaocomGiemsadiludocomguatamponada. Aguardar20a30min. Escorrerelavarcomguadetorneira. 5.2.3.Contagemdiferencialdeleuccitos

Focalizarcomobjetivade100x(usarleodeimerso). Procederaleituradoesfregaoseguindoaformadetorreacada7ou8campos(desenhoabaixo)ou10 camposemcasosdeleucopenia,contandoediferenciandoosleuccitos,attotalizaode100clulas. Registraracontagememformapercentualeconverteremvaloresabsolutosapartirdoresultadoobtido nacontagemtotal.

10


Figura 5.3 Desenho esquemtico da tcnica de contagem de leuccitos no esfregao sanguneo corado. O corpoaporomaislargaeespessadoesfregao,localemqueasclulasestosobrepostaseos leuccitos apresentamse aglomerados. A cauda do esfregao corresponde sua poro final, ondepossvelobservarleuccitosrompidos,hemciascomperdadepalidezcentral,maspode ser til para a deteco de microfilrias, agregados de plaquetas e clulas grandes incomuns. O local de contagem situase entreo corpoea caudado esfregaoecaracterizase porapresentar uma monocamada de clulas uniformemente distribuda. Os leuccitos encontramse achatados com detalhes internos mais evidentes. As hemcias apresentam caractersticas morfolgicas tpicas.

5.3.Apresentaodosresultados

RESULTADODELEUCOGRAMA

NIdentificaodaamostra:

Data:

____/____/________

Espcie: CAN FEL Amostra(espcimeclnico):

BOV

EQU

OUTRA:

LEUCOGRAMA Leuccitos: Mielcitos Metamielcitos: Bastonetes: Segmentados: Eosinfilos: Basfilos: Linfcitos: Linfcitosatpicos: Moncitos: Plasmcitos

RESULTADO REL ABS REL

VALORESDEREFERNCIA UND ABS REL ABS

% % % % % % % % % % % x10 /mm /mm /mm /mm /mm /mm /mm /mm /mm /mm /mm
3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3 3

PESQUISA Hematozorios: Inclusoviral: Observaes:

RESULTADO

*unidadeteracorresponde10 ;unidadegigacorresponde10

12

12

11

AULAPRTICAN6CONTAGEMDEPLAQUETAS
6.3.1.MtododeFnio

Fazerumesfregaofino,secarecorarpelomtododoPanticorpido(aulaprtican5). Contaronmerodeplaquetasem10camposcomobjetivade100X(deimerso). Multiplicaroresultadopelonmerodehemcias(dohemograma)edividirpor1000paradeterminaodo nmerodeplaquetasemL(mm3). 6.3.2.Mtododireto

Aspirar4mLdesoluodediluidora(citratodesdio3,8g;formol40%0,2mL;azulcresilbrilhante0,1g eguadestiladaqsp100mL)deplaquetasemumtubodevidro. Homogeneizarbemaamostradesangue. Aspirar20Ldesanguecomapipetaautomtica. Removerosanguedeforadapipetacomumalgodo. Diluirosanguenasoluodiluidoraehomogeneizaramisturaportrsminutos. PreencheracmaradeNeubauerpreviamentemontadaecoloclaemcmaramida. Apsdezminutosemrepouso,levaracmaraaomicroscpio. Contarasplaquetasde5dos25quadradosdareareticuladacentral(paracontagemdehemcias). Multiplicaroresultadopor10.000paraaobtenodoresultadoemL(mm3). 6.3.Apresentaodosresultados

RESULTADODEPLAQUETOMETRIA

NIdentificaodaamostra:

Data:

____/____/________

Espcie: CAN FEL Amostra(espcimeclnico): PLAQUETOMETRIA Plaquetas: Obs.:

unidadegigacorresponde10
9

BOV

EQU

OUTRA:

RESULTADO VALORESDEREFERNCIA(veranexo) UND

giga/L*

12

AULAPRTICAN7TESTEDECOMPATIBILIDADESANGUNEA
7.1.Provacruzadamaior Diluir500LdosanguedodoadorcolhidocomEDTAem3mLdesoluodecloretodesdio0,9%(salina) emumtubodeensaio,homogeneizarecentrifugloa1000rpmpor2minutos. Desprezarosobrenadanteerepetiroprocedimentomaisduasvezes. Colocar100Ldeplasmaousorodoreceptore100Ldasuspensodehemciaslavadasemumtubode ensaio. Seguiromesmoprocedimentousandosoroouplasmadodoador(controlenegativo). Homogeneizarbemeincubarpor15a30minutosembanhomariaa37C. Centrifugara1000rpmporumminuto. Analisar os tubos, para aglutinao ou hemlise. No havendo hemlise nem aglutinao, considerase a provanegativaparaincompatibilidade. Colocar sobre lmina uma gota do tubo teste e cobrir com lamnula para visualizao em microscpio de campoclaro,paraverificaraausnciadecogulos. 7.2.Provacruzadasimples Pingar50Ldesangueasertransfundidoe50Ldeplasmadoreceptorsobreumalminademicroscpio. Homogeneizareanalisarcontraumfocodeluzaocorrnciadeformaodegrumos(aglutinao). 7.3.Apresentaodosresultados

RESULTADODAPROVASDECOMPATIBILIDADESANGUNEA
NIdentificaodaamostra:

Data:

____/____/________

Espcie: CAN FEL Amostra(espcimeclnico): EXAME Provacruzadamaior: Provacruzadasimples:

BOV

EQU

OUTRA:

RESULTADO

13

AULAPRTICAN8BIOQUMICASRICA(PROTENASTOTAISEALBUMINA)
8.1.Dosagemsricadeprotenastotais 8.1.1.MtododoBiureto Identificartrstubosdeensaiocomobranco(B),padro(P)eamostra(A). Emseguida,transferirparaostubos,osreagentesconformequadroabaixo. REAGENTE ReagentedeTrabalho(Biureto) Amostra Padron2(7.0g/dL) Hidrxidodesdio Homogeneizaredeixaremrepousopor5minutos,embanhomariaa37C. Determinarasabsorbncias(A)dotesteepadroem550nm(oufiltroverde)acertandoozerocomo branco. Acorfinalpermaneceestvelpor3horas. Oresultadodotesteparaprotenastotaisfeitoapartirdaseguintefrmulamatemtica: PT= 8.2.DosagemsricadeAlbumina Identificartrstubosdeensaiocomoreagentedetrabalho(B),padro(P)eamostra(A). Emseguida,transferirparaostubos,osreagentesconformequadroabaixo. REAGENTE ReagentedeTrabalho(deCor) Amostra Padron2(3.8g/dL) Misturaredeixaremrepousopor2minutos,temperaturaambiente(2030C). Determinarasabsorbncias(A)dotesteepadro630nm(625640nm)acertandoozerocomobranco. Acorfinalpermaneceestvelpor10minutos. BRANCO 2,5mL PADRO 2,5mL 10L TESTE 2,5mL 10L Adoteste Adopadro x4,0g/dL BRANCO 1000L 1gota PADRO 1000L 50L 1gota TESTE 1000L 20L 1gota

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 Oresultadodotesteparaalbuminafeitoapartirdaseguintefrmulamatemtica: Albumina= 8.3.DeterminaodarelaoAlbumina/Globulina(protenatotalalbumina) RelaoA/G= 8.4.Apresentaodosresultados Albumina PTAlbumina Adoteste Adopadro x4,0g/dL

RESULTADODEBIOQUMICASRICA
NIdentificaodaamostra:

Data:

____/____/________

Espcie: CAN FEL Amostra(espcimeclnico): EXAME Protenatotal: Albumina: RelaoA/G:

BOV

EQU

OUTRA:

RESULTADO

VALORESDEREFERNCIA(veranexo) UND g/dL g/dL

15

AULAPRTICAN9URINLISE(EXAMEFSICOEQUMICO)
9.1.ExameFsico Transferir10mLdeurinaparaumtubodevidrotransparente; Avaliar visualmente colocandose o tubo contra a luz e anotar os achados referentes cor, aspecto e depsito; Realizaraolfaodoespcimeclnicoemquestoeanotaroresultadoreferenteaoodor; Emseguida,transferirumagotadaurinaparaorefratmetro(reaespelhada),cobriromesmoeproceder aleituradadensidadepelaocular. 9.2.ExameQumico Mergulhar rapidamente (2 segundos) a tira reagente na urina, de modo que todas as reas reagentes sejamimersasquasequesimultaneamente; Retiraratira,deslizandopelabordadotubopararemoveroexcessodeurinadamesma; Manteratiranaposiohorizontalparaprevenirmisturadeprodutosqumicosdereasadjacentes; Realizarasleiturasem60segundoseentre60e120segundosparaleuccitos; Comparar os resultados obtidos nas reas reagentes com a tabela de referncia contida no rtulo do frasco(norealizarleituraaps120segundos)

RESULTADODEURINLISE
NIdentificaodaamostra:

Data:

____/____/________

Espcie:

CAN

FEL

BOV

EQU

OUTRA:

Amostra(espcimeclnico):

REFERNCIA CAN
10mL amarelocitrino suigeneris lmpido ausente 1,0151,045

EXAMEFSICO Volume: Cor: Cheiro: Aspecto: Depsito: Densidade:

RESULTADO

FEL
10mL amarelocitrino suigeneris lmpido ausente 1,0201,040

BOV
10mL amarelocitrino suigeneris lmpido escasso 1,0251,045

EQU
10mL amarelocitrino suigeneris turvo escasso 1,0201,050

EXAMEQUMICO pH: Protena: Glicose: Corposcetnicos: Urobilinognio: Bilirrubina: Hemoglobina: Nitrito: Saisbiliares:

RESULTADO

CAN
6,07,0 ausente/traos ausente ausente <2mg/dL ausente ausente ausente ausente

FEL
6,07,0 ausente/traos ausente ausente <2mg/dL ausente ausente ausente ausente

BOV
7,48,4 ausente/traos ausente ausente <2mg/dL ausente ausente ausente ausente

EQU
7,08,0 ausente/traos ausente ausente <2mg/dL ausente ausente ausente ausente

16

AULAPRTICAN10URINLISE(SEDIMENTOSCOPIAEOUTROSEXAMES)
10.1.Sedimentoscopia Transferir10mLdeurinaparaotubodecentrfuga; Ajustaracentrfugapara3600rpmpor5minutos; Aofinaldesteperodo,transferirosobrenadanteparaoutrofrasco; Ressuspenderopelletnovolumedeurinaresidual; Transferirumagotadasuspensoparaumalminadevidroecobrircomlamnula; Procederobservaoemmicroscpiodecampoclaroempregandoobjetivade40x; Anotarequantificarapresenadecilindros,clulas(renais,plvicas,vesicaisededescamao),hemcias, leuccitos,muco,espermatozides,casoestejampresentes. Adotarcomoreferncia: Cilindro,clulas,mucoeespermatozides Ausente +(raras) ++(algumas) +++(vrias) Leuccitosehemciasdeverosercontadosem4a5camposde400x,sendooresultadoa mdiadasunidadesdoscamposlidos. 10.2.Outrosexamesdaurina 10.2.1.Indican Tranferir2mLdosobrenadanteparaumtubodeensaio; Adicionar2mLdecidoclordricoconcentrado,agitandoemseguida; Acrescentar2gotasdeguaoxigenada; Acrescentar2mLdeclorofrmio; Agitarvigorosamenteporinversoedeixaremrepouso. Oclorofrmiosedepositanofundodotuboecasoadquiratonalidadeazuladainformaapresenade indican. Noencontrado 23unidadesporcampo 46unidadesporcampo 7unidadesporcampo

17

10.2.2.Examedesaisbiliares(TestedeHay) Transferir4mLdosobrenadanteparaumtubodeensaio; Polvilharaflordeenxofre(enxofreemp)sobreasuperfciedaurinacomotuboemrepouso; Observarotubocontraumafontedeluzparaverificaradescidadaspartculasdeenxofrepelaurina,oque indicapresenadesaisbiliares.

RESULTADODEURINLISE
NIdentificaodaamostra:

Data:

____/____/________

Espcie:

CAN

FEL

BOV

EQU

OUTRA:

Amostra(espcimeclnico):
SEDIMENTOSCOPIA* Clulasrenais: Clulasplvicas: Clulasvesicais: Leuccitos(picitos): Hemcias: Cilindros: hialinos gran.finos gran.grossos Cristais: Muco: Microbiotabacteriana: Espermatozides:

CAN
raras raras raras <6 <6 ausente ausente ausente ausente ausentes ausente normal

RESULTADO

FEL
raras raras raras <6 <6 ausente ausente ausente ausente ausentes ausente normal

BOV
raras raras raras <6 <6 ausente ausente ausente ausente ausentes ausente normal

EQU
raras raras raras <6 <6 ausente ausente ausente ausente raros(uratos) raro normal

*Sedimentoscopiarealizadacomobjetivade40X

18

AULAPRTICAN11COPROLOGIA
11.1.Examesmacroscpicosoufsicos

Comauxliodeumbastodevidroeobservaoatenta,verificar: Colorao Consistnciaeforma Odor(cheiro) Elementosanormais

11.2.Examemicroscpicodireto

Sujarapontadeumbastodevidrocomfezes. Esfregarocontedonasuperfciedeumalminademicroscopia. Instilarumaouduasgotasdeguasobreasfezesehomogeneizar. Cobrir a lmina com uma lamnula, separando por arrasto partculas que possam atrapalhar o perfeito
acoplamentodasmesmas.

Examinaraomicroscpiocomobjetivade10x
11.3.MtododeflutuaosegundoWILLIS

Dissolveraquantidadedefezescorrespondenteaumapontaderguademadeiraem10mLdesoluo
saturadadecloretodesdionumBecker,comoauxliodeumbastodevidro.

FiltrarasuspensoresultanteemgazeparaoutroBecker. Encherumfrascotipoborrel(frascodebocalargade3cmdealtura)atabordacomofiltrado. Cobrir o frasco com lmina limpa e desengordurada, de modo que o filtrado entre em contato com a
lmina.

Deixar em repouso por 15 minutos, retirar a lmina sem perder o lquido que ficar aderido sua face
inferior,invertla,cobrircomlamnulaeexaminarcomobjetivade10xe40x(paraoocistosaobjetiva40X oferecemelhorresoluo) 11.4.MtododesedimentaosegundoHOFFMAN

Dissolveraquantidadedefezescorrespondenteaumapontaderguademadeiraemgualimpanum
Becker.

Comcuidado,filtraremgazeparaumclicedesedimentao(fundocnico). Completarcomguaatencheroclice.
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 Deixaremrepousopor30minutos. Aps este tempo, ocorrer formao de sedimento no clice. Para melhor resoluo das imagens,
recomendase desprezar o sobrenadante e encher novamente o clice para lavar o sedimento. Esta operaopoderacontecermaisdeumavez.

Aps30minutos,colherumpoucodosedimentocomauxliodeumapipetaepingarumagotanalmina,
cobrircomlamnulaeexaminarcomobjetivas10xe40x. 11.5.Mtododotermotropismoparapesquisadelarvas,segundoBAERMAN

Encherumclicedesedimentaocomguanatemperaturaentre40a43C. Cobriroclicecomtelademalhafina,deformaqueaguatoquenasuperfcieinferiordatela. Sobreatela,abrirumpequenopedaodegazeesobreagazedepositar10gdefezes. Deixaremrepousopor1hora,retiraratelaeasfezes. Comauxliodeumapipeta,recolherpequenovolumedosedimentoformadoeexaminaremlmina,sem

lamnula,comobjetiva10x 11.6.Pesquisadetripsinafecal(Mtododofilmeradiogrfico)

Emumtubodeensaioverter10mLdesoluodebicarbonatodesdioa10%. Acrescentarduaspontasderguademadeiradefezesehomogeneizar. Mergulharumatiradefilmeradiogrficovelado,deformaqueofilmefiqueparcialmenteforadasoluo. Em intervalos de 15 minutos, retirar o filme da soluo e lavlo em gua corrente, fazendo leitura at 1
horaapspreparo.

Odescoramentodaporodofilmemergulhadonasoluodefezesindicapresenadetripsina.
11.7.Apresentaodosresultados Resultadosesperados: + ++ +++ Observao: Ao lado das cruzes colocar a espcie ou gnero dos ovos/oocistos encontrados utilizando como referncia a pranchailustradapresentenaspastasfornecidaspeloprofessor. Negativonaamostraanalisada Presenade1a2ovos/oocistosporlmina Presenade3a5ovos/oocistosporlmina Presenade>5ovos/oocistosporlmina

20

RESULTADODEEXAMEDEFEZES
NIdentificaodaamostra:

Data:

____/____/________

Espcie:

CAN

FEL

BOV

EQU

OUTRA:

Amostra(espcimeclnico):

RESULTADO

ILUSTRAODO(S)ACHADO(S)MICROSCPICO(S)

21

ANEXOSVALORESDEREFERNCIAHEMATOLGICOS

22