Buenas noches!

Curso Microbiologa (LME-17)

Profesores
2

Teora

Laboratorio

Dra. Tatiana Moya Moya

Especialista en Bacteriologa mdica Especialista en Parasitologa mdica

Dr. Evan Jensen Bjorck

Especialista en Hematologa

tmoyam@gmail.com

Atencin
3

Por favor no comer, beber y fumar en clase No atender telfono mvil, si requiere atenderlo salir del aula Mantener telfono mvil en vibracin o apagado para que no se de distraccin a sus compaeros o al profesor

Respeto tanto entre usted y sus compaeros como con el profesor

El estudiante debe revisar los temas discutidos en clase y/o ampliarlos en los textos de consulta o en internet

Semanas de evaluacin
ITEM
I Ex Parcial II Ex parcial III Ex parcial
PORCENTAJE (%)

Semana
5 (M) 9 (M) 13 (L) 15 (M) 17 (L) 13 (V) Diarios (V o S)

Fecha
13 junio 11 julio 06 agosto 22 agosto 03 setiembre 13 (V) Diarios (V o S)

15 20 20 30 100% 5 10

Ex final Ex ampliacin
Ex final Lab Ex cortos Lab

Evaluacin
Exmenes

son acumulativos 25% materia vieja

Texto

Cualquier texto de Microbiologa e Inmunologa, 2005 en adelante Gua de clase !

Ausencias
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Teora

Laboratorio

Mximo 3 lecciones

Una sola vez Prcticas de laboratorio no se reponen Llegar despus del examen corto diario, no se repone el examen corto

Por qu estudiar Microbiologa?

Microbiologa
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Ciencia encargada del estudio de los microorganismos, seres vivos pequeos (de mikros "pequeo", bios, "vida" y logos, "estudio"), tambin conocidos como microbios o grmenes
Se dedicada a estudiar los organismos que son solo visibles a travs del microscopio como los virus, bacterias, hongos, amebas y

10

Son considerados microbios todos los seres vivos microscpicos (excepcin de virus y priones son microscpicos pero no vivos)

Pueden

Estar constituidos por una sola clula (unicelulares), como por varias (pluricelulares) Ser eucariotas (clulas con ncleo) tales como hongos y amebas, o procariotas (clulas carentes de ncleo) como las bacterias Ser agentes acelulares virus y priones.

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Qu estudia la Microbiologa?
Los microorganismos y sus actividades, su forma, estructura, tipo de reproduccin, fisiologa, metabolismo, y cmo se efecta la identificacin de agente microbiano Estudiamos los efectos benficos y/o perjudiciales sobre los seres humanos y otros animales, y las alteraciones fsicas y qumicas producidas por los agentes microbianos sobre el medio ambiente.

Diferencias clula procariota vrs eucariota

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Procariotas

No presentan membrana nuclear, nucleoide Prcticamente no tiene organelas, solo ribosomas Hay pared celular verdadera Reproduccin asexual Un nico cromosoma circular Sin esteroles en membrana citoplasmtica Tamao menor de 5 m

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Eucariotas

Presentan ncleo verdadero, membrana nuclear. Tienen organelas No hay pared celular en clulas animales pero sin en hongos y plantas Reproduccin asexual y sexual Diversidad de cromosomas Esteroles en membrana citoplasmtica

CAMPOS DE APLICACIN DE LA MICROBIOLOGA

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16

Microbiologa de alimentos: estudio de los microorganismos que estropean los alimentos

Leche: pasteurizacin

Microbiologa veterinaria Microbiologa de suelos: fijar nitrgeno (Rhizobium sp) Microbiologa industrial: sustancias medicinales, bebidas alcohlicas, enzimas y cidos orgnicos son producidos por algunos microorganismos Microbiologa de los insectos: insectos portadores

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Microbiologa del espacio (Exobiologa): estudio de los microorganismos presentes en el espacio extraterrestre, en las estaciones espaciales, en las naves espaciales Microbiologa acutica y drenajes domsticos : calidad sanitaria al agua Aeromicrobiologa: estudio de los microorganismos transportados por el aire Microbiologa evolutiva: estudio de la evolucin de los microbios. Incluye

Microbiologa mdica
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Estudio del papel de los microbios en las enfermedades humanas. Incluye el estudio de la patognesis microbiana y la epidemiologa y est relacionada con el estudio de la patologa de la enfermedad y con la inmunologa. Trata los microorganismos o agentes microbianos productores de enfermedad en humanos conocidos como patgenos

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Ramas de la Microbiologa mdica

Hematologa Inmunologa Inmunohematologa Bacteriologa Micologa Virologa Parasitologa Helmintologa Protozoologa Artropodologa Qumica Clnica Hormonas y drogas Gentica humana

En Microbiologa intentamos responder a cuatro preguntas con relacin a los procesos infecciosos
20
1.

Quin o quines causan?

2.

Qu es lo que produce?

3.

Cmo se puede controlar?

Uso de antimicrobianos Otras formas de control: corte de cabello, bao diario

4.

Cmo puede ser prevenido?

Vacunacin Medidas de higiene

21

HISTORIA DE LA MICROBIOLOGA
http://www.youtube.com/wat

ch?v=Gg6KNGCvK4&feature=relate d

Aristteles
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Generacin espontnea
Sosteniendo

que la vida poda surgir del lodo, del agua, del mar o de las combinaciones de los cuatro elementos fundamentales: aire, fuego, agua, y tierra. Propuso el origen espontneo para gusanos, insectos, y peces a partir de sustancias como l roco, el sudor y la humedad

Anthony van Leeuwenhoek

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1674 Desarrollo del microscopio

rudimentario

Animalculos en gota de agua Escritos a la Sociedad Real Inglesa

Edward Jenner Inmunizacin = Vacunacin

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1793 Muchacho de 8 aos Vacuna contra viruela

Vaccinia

8 aos

8 aos

Joseph Lister, 1867

25

Mostr mtodos de propagacin de la enfermedad Ciruga

Cloroformo y ter como anestsico

cido fnico

antisepsia y asepsia

Primero alude a la destruccin de los grmenes en las heridas por medio de agentes qumicos y el segundo se refiere al mtodo por medio del cual se dejan libres de grmenes, antes de la intervencin, todos los objetos que vayan a tocar la herida o la piel del enfermo

26

1840

Friedrich Henle Criterio: teora germen de la enfermedad

Edad de oro
1875-1910 Pasteur y Koch Aislaron agentes especficos Comprobaron a travs del mtodo

podan causar enfermedad Definieron enfermedades bacterianas y patgenos causantes

ntrax,

experimental que

clera, rabia, plaga, tuberculosis

Louis Pasteur
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Considerado Padre de la Microbiologa Refut la generacin espontnea Trabaj con rabia (virus)

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Robert Koch
29

Primero en comprobar que una bacteria causaba una enfermedad; carbunco en ovinos Concepto de cultivo puro Postulados, base se investigacin mdica Trabaj tambin con
Fermentacin Tuberculosis Carbunco

Postulados de Koch
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El microorganismo debe estar presente en todos los individuos con la misma enfermedad. El microorganismo debe ser recuperado del individuo enfermo y poder ser aislado en medio de cultivo. El microorganismo proveniente de ese cultivo debe causar la misma enfermedad cuando se lo inocula a otro hospedero. El individuo experimentalmente infectado debe contener el microorganismo

31

Algunos autores han adaptado estos postulados para explicar la probabilidad de que una molcula endgena pueda ejercer un papel determinado en la patogenia de un proceso.
La

molcula se expresa en casos de enfermedad La molcula se expresa en forma distinta en casos de enfermedad y en individuos sin enfermedad La administracin experimental de la molcula puede iniciar o exacerbar la enfermedad La neutralizacin experimental de la molcula puede prevenir o mejorar la enfermedad http://www.youtube.com/wat
ch?v=Gg6KNGCvK4&feature=relate d

1910

Paul Ehrlich Primer agente antibacteriano contra sfilis Salvarsn, derivado de arsnico

32

1928 Alexander Fleming Penicilina

http://www.youtube.com/watch?v =G3q7KMQp5ak&feature=relate d

1935

Gerhard Domack Sulfonamida

1943

Selman Waksman Estreptomicina

1946

John Enders Cultivo de virus en cultivo celular

33

La humanidad tiene 3 grandes enemigos: la fiebre, la hambruna y la guerra; de ellos el mayor y ms temible es la fiebre Sir William Osler Mdico - humanista 1896

Fiebre: infeccin azote de la humanidad

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Tb y otras formas de infeccin pulmonar:

causa muerte prematura en ricos y pobres

Imposibilidad de prevenir o modificar el curso de la enfermedad Siglo XX: naciones que solventen costo

Avances en sanidad pblica Desarrollo de vacunas y antimicrobianos

Siglo XXI: 2 tipos de pases con causas de muerte

1. 2.

Ataques cardacos, cncer y accidentes cerebrovasculares Infeccin como causa de muerte

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Nuevo motivo de preocupacin parte evolutivo, parte descubrimiento y parte siniestro

Resistencia

a los antimicrobianos Aparicin del HIV Espectro de infeccin se ha ampliado

ORIGEN DE LOS PROCESOS INFECCIOSOS

Causalidad

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Evolucin histrica del concepto de causalidad de la enfermedad

37

1.

Enfermedades eran castigos de dioses vengativos

Descripciones bblicas de leprosos

2.

Causas se deban a la naturaleza

Alteraciones en la naturaleza Hipcrates: miasmas o factores adversos del ambiente eran responsables de la enfermedad

3.

Desequilibrios de los humores corporales

Galeno: causalidad de la enfermedad era resultado de desbalance de humores corporales

Evolucin histrica del concepto de causalidad de la enfermedad

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4.

Agentes infecciosos

Agentes especficos causan enfermedades especficas Pasteur y Koch

5.

Interrelacin agente causal, hospedero y ambiente

La causa de una enfermedad como la interaccin de una trama de factores, que incluye hospedero, agente y ambiente: triada ecolgica de enfermedad

Triada ecolgica
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Factores inmunes Susceptibilidad gentica

Agente

Hospedero

Factores de virulencia Capacidad de sobrevivencia

Ambiente
rea geogrfica Clima Condiciones socioeconmicas

Polticas

Agente
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Tipos de agentes

Abiticos: no es biolgico

Fsicos. fuerzas externas (traumatismo o lesiones por exposicin) Qumicos: sustancias exgenas o endgenas cuya presencia excesiva o ausencia relativa puede ser causa de enfermedad; incluye desde txicos (exgenos) hasta hormonas (endgenos) y factores nutricionales cuya ausencia o exceso es perjudicial

Biticos: organismos vivos que causan dao sea directa, indirectamente o mediante alguno de sus productos que sean txicos, irritantes o causantes de alergias

Infecciosos: bacterias y hongos Virus y priones

41

Hospedero

Ambiente
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Tipos

Biolgico: formado por micro y macrobiota que nos rodea, incluyendo agentes potencialmente patgenos Fsico: clima, riqueza del suelo, presencia de barreras naturales (montaas, ros, etc.)

Sociocultural: religin, creencias, costumbres, ocupacin, pasatiempos,

Salud
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OMS:
estado

de completo bienestar fsico, mental, espiritual, emocional y social, y no solamente la ausencia de enfermedades.

La salud implica que todas las necesidades fundamentales de las personas estn cubiertas: afectivas, sanitarias, nutricionales, sociales y culturales. Deja por fuera al medio ambiente Definicin utpica (10-25% poblacin es completamente sana) Es necesaria una definicin ms global Compete no solo al mdico sino tambin a polticos, a la sociedad y al individuo mismo

SALUD VS ENFERMEDAD

44

Punto de vista infeccioso

45

Colonizacin:

Presencia del microorganismo en nuestros tejidos sin producir cambios qumicos o fsicos. Presencia del microorganismo, produciendo cambios fsicos (fiebre) y/o qumicos Implica interaccin entre dos seres vivos: huspedhospedero, ambos en fuerte competencia

Infeccin:

Enfermedad:
Lesin en el hospedero perjudicando su adecuado funcionamiento Presencia de fiebre, dolor Alteraciones en el hemograma, elevacin de la PCR (protena C reactiva).

Qu es un agente patgeno?
46

Aquel microorganismo capaz de producir un proceso infeccioso, que implique la aparicin de cambios qumicos y fsicos en el hospedero.

Oportunistas Facultativo Estricto

Tres tipos de agente patgeno:

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1.

Oportunistas
Causa infeccin solo en personas inmunosupresas Ejemplos: Hongos
Pneumocystis jiroveci, Candida albicans, microsporidios

2.

Facultativo
Flora normal fuera de su hbitat Ejemplos
Staphylococcus aureus (fosas nasales y/o raramente en piel) Escherichia coli (intestino)

3.

Estricto:
Siempre que se encuentre estar produciendo enfermedad Ejemplos:
Mycobacterium tuberculosis (tuberculosis) Shigella sp (diarrea aguda invasiva) Neisseria gonorrhoeae (gonorrea)

Para que un microorganismo sea patgeno, debe ser capaz de:

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Metabolizar

y reproducirse dentro de los tejidos del hospedero las defensas del hospedero hasta un nmero suficiente como para producir sintomatologa clnica como:
Dolor Fiebre

Resistir

Inflamacin
Alteraciones

del hemograma Cambios en los niveles de la protena C reactiva

Patogenicidad/virulencia
49

Patogenicidad

Capacidad de un microorganismo de penetrar al hospedero y causar o producir cambios qumicos, anatmicos y/o fisiolgicos, resultando en una enfermedad. Es multifactorial

Virulencia

Capacidad relativa de un microorganismo de causar dao en su hospedero Dao explicado por caractersticas propias del microorganismo cc factores de virulencia Caractersticas de la virulencia

La virulencia es directamente proporcional al poder patognico Se puede incrementar la virulencia de un agente, cuando ste se manipula en el laboratorio. La virulencia puede ser perdida.

Factores de virulencia
50

Sirven para persistir, ocasionar afeccin y/o escapar

Tipos: 1. Adhesinas

Cpsula, fimbria, glicoprotenas (hemaglutinina), invasinas, etc.

2.

Toxinas y enzima

Relacionados con la capacidad de multiplicacin y/o daar y alterar los tejidos o fisiologa del hospedero (toxina tetnica o colrica, fosfolipasas, proteasas, etc.)

3.

Relacionados con la alteracin o evasin del sistema inmune

Endotoxina, proteinasa, listeriolisina, etc.

4.

Invasin de la clula y adaptacin al ambiente intracelular

Virus

La virulencia depende de:

51

1.

La velocidad de crecimiento del microorganismo

Infeccin aguda, crnica, persistente, latente.

2.

La capacidad toxignica:

Produccin de endotoxinas o exotoxinas

3.

La capacidad de producir cpsula (bacterias y 1 hongo)

Factor que ayuda a evadir el sistema inmune

4.

La capacidad de producir enzimas:

Hialuronidasas, lecitinasas, coagulasa, proteasas, leucocidinas, ADN asas.

5.

La capacidad de evadir la respuesta inmune

52

Produccin de enfermedades infecciosas (patognesis) requiere de:

1.

Exposicin al agente patgeno Vas de transmisin Colonizacin del hospedero

Penetracin del agente microbiano en el tejido

2.

3.

4.

Produccin de sustancias txicas

1. Exposicin
53

Factores
1. 2. 3. 4. 5. 6.

Fuente de microorganismos Tamao de inculo Va de transmisin Afinidad tisular del microorganismo Capacidad patognica del microorganismo Estado inmunolgico del hospedero

54

1. Fuente de microorganismos
1.

Endgena: organismos que se encuentran colonizando el cuerpo humano que pueden causar enfermedad si se altera el equilibrio normal del hospedero

Microbiota indgena o flora microbiana normal

Microorganismos que con frecuencia se encuentran en diversos sitios del cuerpo en los individuos normales y saludables Los integrantes y el nmero de representantes de la flora varan en

Distintas reas del cuerpo Edad Estado fisiolgico

Debe existir un equilibrio entre la flora microbiana y el hospedero

55

1. Fuente de microorganismos

Exgeno

Proviene del exterior del individuo Alimentos, inhalacin, contacto directo

Endgeno

Flora microbiana normal o microbiota indgena Microorganismos que con frecuencia se encuentran en diversos sitios del cuerpo de los individuos normales y saludables Integrantes y nmero de representantes de la flora normal dependen de rea del cuerpo, edad y estado fisiolgico Importantes como mecanismo de defensa y como fuente de organismos con posibilidades patgenas Necesidad de equilibrio entre la flora normal y el hospedero

2. Tamao del inculo

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Inculo: mnima cantidad de microorganismos para establecer enfermedad

depende de factores del hospedero como pH Pequeo:

Ejemplos:

Shigella sp: diarrea disentrica o diarrea aguda invasiva Campylobacter sp : diarrea mixta 200 clulas

Grande:

Ejemplo:

Vibrio cholerae 108 clulas diarrea aguda acuosa, por efecto de exotoxina

3. Va de transmisin
57

a. b. c. d.

Vas respiratorias Va oral (ano-mano-boca) Va traumtica Contacto directo o de persona a persona

a. Inhalacin: va aergena
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Bacterias

Mycobacterium Nocardia Mycoplasmapneumoniae Legionella Bordetella Chlamydia pneumoniae

Hongos

Histoplasma Blastomyces Coccidioides Cryptococcus

Virus

Virus respiratorio sincitial

Ortomixovirus Paramixovirus Varicela-zoster

59

b. Ingestin, ruta ano-manoboca

Bacterias

Salmonella Shigella Escherichia coli enterotoxignica Vibrio cholerae Campylobacter Clostridium botulinum Bacillus cereus.

Hongos

Microsporidios

Virus

Rotavirus Poliovirus Virus de la hepatitis A

c. Penetracin directa
60

Contacto directo

Beso y saliva: Herpes simple tipo I Piel a piel por abrasiones inadvertidas

Sfilis Tias imptigo

Contacto sexual:

Treponema pallidum Neisseria gonorrhoeae VIH Chlamydia trachomatis Papilomavirus Virus del herpes simple II

Traumatismo:

Clostridium tetani Sporothrix schenckii Virus de la rabia

61

Transfusiones:

Staphylococcus aureus HBV, HCV VIH

Picadura o mordedura de artrpodo (Transmisin zoontica):

Rickettsia Borrelia sp Yersinia pestis

Transplacentaria (transmisin vertical):

Treponema pallidum, rubeola, VIH

Dirigida por el organismo:

helmintos

62

2. Colonizacin del hospedero

El primer paso en el desarrollo de un proceso infeccioso es la adherencia de agente a los tejidos del hospedero seguida de la replicacin para que se de la colonizacin

Implica molculas o estructuras superficiales especficas que corresponden a receptores en las clulas humanas

Los patgenos tiene molculas que se enlazan a las clulas del hospedero
Interaccin entre cpsula u otras adhesinas (cidos teicoicos, fimbrias, flagelos) y receptores glucoproteicos o glucolipdicos de la clula del hospedero

No hay fiebre ni alteraciones en el hemograma, pero puede haber dolor y enrojecimiento del rea afectada.
Permite persistir el tiempo suficiente para poder invadir

63

3. Penetracin (invasin) del agente al tejido

Invasin requiere adaptacin a nuevos ambientes
Puede darse por

Multiplicacin local en sitio de adherencia.

Ej: Bordetella pertussis y Corynebacterium diphteriae Ej: Shigella sp, invade epitelio de mucosa colnica, se alimenta y se multiplica, luego el epitelio es destrudo, genera inflamacin.

Invasin de tejidos y replicarse en l.

Adquisicin de hierro: siderforos. Las bacterias que producen hemolisinas son capaces de romper los glbulos rojos y liberar el grupo hem

Liberacin de enzimas degradadoras para la diseminacin de organismos a travs del tejido

4. Produccin de sustancias txicas

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Dos tipos
Endotoxinas
Exclusivo

o lipopolisacrido (LPS)

de bacterias Gram negativa Parte constitucional de la bacterias

Exotoxinas

Libera

al medio

Endotoxinas
65

Se libera al morir la bacteria

Parte integral y/o estructural de la pared celular de los agentes Gram negativo Dosis letal alta De naturaleza lipdica

Activa linfocitos B
Estimula produccin de citoquinas como factor de necrosis tumoral, interleucina 1 ( IL-1), y prostaglandinas No induce el desarrollo de una adecuada respuesta inmune No hay toxoide Efectos depende de la dosis (alta dosis provoca fiebre, hipotensin, shock y muerte)

Es un pirgeno (eleva la fiebre) Inicia cascada del complemento

Exotoxinas
66

Producidas tanto por bacterias Gram positiva como por bacterias Gran negativa Dosis letal muy baja Excretadas por la bacteria al medio ambiente De naturaleza proteica

No induce aumento de fiebre Son inmunognicos Se puede desarrollar un toxoide

Potentes venenos metablicos

Inhiben sntesis proteica Aumentan los niveles del AMP cclico

Exotoxinas
67

Pueden ser:
1.

Citolticas, donde el efecto depende de la dosis,

Dosis altas: interrumpe la integridad estructural de la membrana conduciendo a la muerte celular. Ej: hemolisinas Dosis ms bajas: alteran funciones especficas

2.

Bipartitas, con 2 subunidades: A y B, donde la subunidad B se une a la clula del hospedero y la subunidad A es la que tiene la accin generando las modificaciones intracelulares que causan dao. Ej: toxina de Vibrio cholerae es 1A y 5B que activa la adenilato ciclasa, aumenta el AMPc generando diarrea secretoria

68

MANIFESTACIONES DE UNA ENFERMEDAD INFECCIOSA

69

Fiebre, dolor e inflamacin

Signos

universales Inespecficos

Luego los rganos especficos que participan y la velocidad del proceso san lugar a ms signos y sntomas de la enfermedad Muchas veces signos y sntomas de superponen Las conclusiones clnicas dependen del sistema o sistemas corporales implicados

DEFENSAS DE LOS MICROORGANISMOS CONTRA EL HOSPEDERO

70

Defensas microbianas
71

1.

Produccin de cpsula
Inhibe fagocitosis Enmascara componentes superficiales como el LPS

2.

Imitacin antignicos
Ej cpsula de cido hialurnico, presente en tejido conectivo humano

3.

Enmascaramiento antignico
Cuando antgeno se localiza dentro de clula hospedera

4.

Cambio antignico
Variacin rpida de la expresin de varias pilinas, evita la eliminacin del gonococo

Defensas microbianas
72

5.

Produccin de proteasas contra los anticuerpos

Actividad de anticuerpos IgA es anulada o convertirla en ineficaz por interferencia con la activacin del complemento

6.

Destruccin de fagocitos

Enzimas para lisar fagocitos, ej estreptolisina

7.

Inhibicin de la quimiotaxis

Protena A de Staphylococcus aureus

8.

Inhibicin de fagocitosis

Defensas microbianas
73

9. Inhibicin de la fusin fagolisosoma

Legionella Mycobacterium tuberculosis Chlamydia

10. Resistencia a enzimas lisosmicas

Salmonella sp Coxiella Ehrlichia Mycobacterium leprae

11. Adaptacin a la replicacin intracelular

Listeria Rickettsia virus