Cromatografia de Afinidade

Aline Cardoso Bárbara Alamis Gabriel Branzani Isabela Rovero Marcos Maldonado Rafael Medeiros 3º A – Farmácia FMU - Liberdade

O que é? Cromatografia de afinidade é uma técnica que utiliza propriedades físico-químicas para separação dos componentes de uma mistura protéica. .

.Como funciona? A Cromatografia de Afinidade se baseia numa especificidade biológica da proteína que se pretende analisar. tal como a afinidade de uma enzima a um substrato ou a ligação entre antígeno e anticorpo.

e outra. aonde a proteína a se analisar se liga a polímeros com ligantes específicos contidos na parede do tubo. .Como funciona? Consiste na separação de proteínas de uma mistura e é dividida em duas fases: uma estacionária. aonde há a eluição das proteínas indesejadas restando somente aquela a ser estudada.

desejamos estudar a proteína A. C e D. a proteína de interesse se liga ao composto contido no tubo. B. que se liga facilmente com glicose. . a parede do tubo aonde essa mistura será despejada conterá glicose. Portanto. conseqüentemente separando-a das demais. que serão filtradas do tubo. Por exemplo: numa mistura de proteínas A.Fase Estacionária Na fase estacionária. que logo atrairá a proteína A para si.

é despejado no tubo uma solução contendo os mesmos ligantes contidos na parede do tubo ou reagente desnaturantes (uréia. etc) desprendendo a proteína da parede do tubo. em outro tubo para estudo. .Eluição Após restar no tubo apenas os ligante com as proteínas de interesse. em meio a solução. guanidina. sendo despejada. No exemplo. é adicionado uma solução de resíduos de glicose que fazem com que a proteína A se desprenda da parede do tubo.

Resumo .

 .  Reduzir a quantidade de uma substância em uma mistura.  Entender as ligações entre compostos biológicos e determinadas substâncias.Aplicações Purificar e concentrar uma substância de uma mistura em uma solução tampão. como as drogas.  Purificar e concentrar uma solução enzimática.

edu/courses/gen omics/method/Affinity.ac.bio.html  http://www.il/72682/Bookle ts/PHARMACIA-AffinityManual.pdf  .Referências Bibliográficas http://www.huji.pdf08-1007.br/ignez/Aula0 8-extracao-3D http://teachline.quimica.ls.davidson.ufscar.

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