Cromatografia de Afinidade

Aline Cardoso Bárbara Alamis Gabriel Branzani Isabela Rovero Marcos Maldonado Rafael Medeiros 3º A – Farmácia FMU - Liberdade

O que é? Cromatografia de afinidade é uma técnica que utiliza propriedades físico-químicas para separação dos componentes de uma mistura protéica. .

Como funciona? A Cromatografia de Afinidade se baseia numa especificidade biológica da proteína que se pretende analisar. . tal como a afinidade de uma enzima a um substrato ou a ligação entre antígeno e anticorpo.

e outra. aonde a proteína a se analisar se liga a polímeros com ligantes específicos contidos na parede do tubo. aonde há a eluição das proteínas indesejadas restando somente aquela a ser estudada.Como funciona? Consiste na separação de proteínas de uma mistura e é dividida em duas fases: uma estacionária. .

Por exemplo: numa mistura de proteínas A. que logo atrairá a proteína A para si. conseqüentemente separando-a das demais. desejamos estudar a proteína A. Portanto. a proteína de interesse se liga ao composto contido no tubo. C e D. a parede do tubo aonde essa mistura será despejada conterá glicose. . que se liga facilmente com glicose. B.Fase Estacionária Na fase estacionária. que serão filtradas do tubo.

No exemplo. em outro tubo para estudo.Eluição Após restar no tubo apenas os ligante com as proteínas de interesse. é adicionado uma solução de resíduos de glicose que fazem com que a proteína A se desprenda da parede do tubo. etc) desprendendo a proteína da parede do tubo. em meio a solução. guanidina. . é despejado no tubo uma solução contendo os mesmos ligantes contidos na parede do tubo ou reagente desnaturantes (uréia. sendo despejada.

Resumo .

 Entender as ligações entre compostos biológicos e determinadas substâncias.  Purificar e concentrar uma solução enzimática. como as drogas.  .  Reduzir a quantidade de uma substância em uma mistura.Aplicações Purificar e concentrar uma substância de uma mistura em uma solução tampão.

edu/courses/gen omics/method/Affinity.Referências Bibliográficas http://www.bio.davidson.br/ignez/Aula0 8-extracao-3D http://teachline.ac.il/72682/Bookle ts/PHARMACIA-AffinityManual.pdf  .huji.html  http://www.quimica.ls.pdf08-1007.ufscar.

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