Cromatografia de Afinidade

Aline Cardoso Bárbara Alamis Gabriel Branzani Isabela Rovero Marcos Maldonado Rafael Medeiros 3º A – Farmácia FMU - Liberdade

O que é? Cromatografia de afinidade é uma técnica que utiliza propriedades físico-químicas para separação dos componentes de uma mistura protéica. .

Como funciona? A Cromatografia de Afinidade se baseia numa especificidade biológica da proteína que se pretende analisar. . tal como a afinidade de uma enzima a um substrato ou a ligação entre antígeno e anticorpo.

e outra. aonde há a eluição das proteínas indesejadas restando somente aquela a ser estudada. .Como funciona? Consiste na separação de proteínas de uma mistura e é dividida em duas fases: uma estacionária. aonde a proteína a se analisar se liga a polímeros com ligantes específicos contidos na parede do tubo.

a proteína de interesse se liga ao composto contido no tubo. que logo atrairá a proteína A para si. conseqüentemente separando-a das demais. Portanto.Fase Estacionária Na fase estacionária. a parede do tubo aonde essa mistura será despejada conterá glicose. desejamos estudar a proteína A. que se liga facilmente com glicose. Por exemplo: numa mistura de proteínas A. que serão filtradas do tubo. B. . C e D.

No exemplo. em outro tubo para estudo.Eluição Após restar no tubo apenas os ligante com as proteínas de interesse. guanidina. é despejado no tubo uma solução contendo os mesmos ligantes contidos na parede do tubo ou reagente desnaturantes (uréia. etc) desprendendo a proteína da parede do tubo. sendo despejada. é adicionado uma solução de resíduos de glicose que fazem com que a proteína A se desprenda da parede do tubo. em meio a solução. .

Resumo .

 Purificar e concentrar uma solução enzimática. como as drogas.  Entender as ligações entre compostos biológicos e determinadas substâncias.  .  Reduzir a quantidade de uma substância em uma mistura.Aplicações Purificar e concentrar uma substância de uma mistura em uma solução tampão.

ac.html  http://www.edu/courses/gen omics/method/Affinity.pdf  .bio.huji.pdf08-1007.il/72682/Bookle ts/PHARMACIA-AffinityManual.davidson.quimica.ls.br/ignez/Aula0 8-extracao-3D http://teachline.Referências Bibliográficas http://www.ufscar.

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