Cromatografia de Afinidade

Aline Cardoso Bárbara Alamis Gabriel Branzani Isabela Rovero Marcos Maldonado Rafael Medeiros 3º A – Farmácia FMU - Liberdade

O que é? Cromatografia de afinidade é uma técnica que utiliza propriedades físico-químicas para separação dos componentes de uma mistura protéica. .

.Como funciona? A Cromatografia de Afinidade se baseia numa especificidade biológica da proteína que se pretende analisar. tal como a afinidade de uma enzima a um substrato ou a ligação entre antígeno e anticorpo.

Como funciona? Consiste na separação de proteínas de uma mistura e é dividida em duas fases: uma estacionária. aonde há a eluição das proteínas indesejadas restando somente aquela a ser estudada. aonde a proteína a se analisar se liga a polímeros com ligantes específicos contidos na parede do tubo. e outra. .

a parede do tubo aonde essa mistura será despejada conterá glicose. que se liga facilmente com glicose. . desejamos estudar a proteína A.Fase Estacionária Na fase estacionária. Portanto. B. C e D. conseqüentemente separando-a das demais. Por exemplo: numa mistura de proteínas A. que logo atrairá a proteína A para si. a proteína de interesse se liga ao composto contido no tubo. que serão filtradas do tubo.

No exemplo. etc) desprendendo a proteína da parede do tubo.Eluição Após restar no tubo apenas os ligante com as proteínas de interesse. em meio a solução. em outro tubo para estudo. sendo despejada. é despejado no tubo uma solução contendo os mesmos ligantes contidos na parede do tubo ou reagente desnaturantes (uréia. é adicionado uma solução de resíduos de glicose que fazem com que a proteína A se desprenda da parede do tubo. . guanidina.

Resumo .

Aplicações Purificar e concentrar uma substância de uma mistura em uma solução tampão.  Purificar e concentrar uma solução enzimática.  Entender as ligações entre compostos biológicos e determinadas substâncias.  Reduzir a quantidade de uma substância em uma mistura.  . como as drogas.

bio.quimica.Referências Bibliográficas http://www.huji.html  http://www.pdf08-1007.ufscar.edu/courses/gen omics/method/Affinity.pdf  .davidson.il/72682/Bookle ts/PHARMACIA-AffinityManual.ac.br/ignez/Aula0 8-extracao-3D http://teachline.ls.

Sign up to vote on this title
UsefulNot useful