UNIVERSIDADE FEDERAL DO RIO GRANDE DO SUL FACULDADE DE FARMCIA DEPARTAMENTO DE ANLISES DISCIPLINA DE TOXICOLOGIA FAR 03306

DOSAGEM DE PARAQUAT EM SORO

1) Amostra: soro ou plasma (heparina, EDTA) 2) Procedimento: 2.1) Curva calibrao usando padres a partir de 50mg/L de Paraquat.

Concentraes (mg/L) Amostra soro (mL) Soluo padro (L) gua destilada (L) c. Sulfossaliclico (L)

BRANCO 1,0 200 2,0

0,5 (mg/L) 1,0 10 190 2,0

1,0 (mg/L) 1,0 25 175 2,0

2,5 (mg/L) 1,0 50 150 2,0

5,0 (mg/L) 1,0 100 100 2,0

10,0 (mg/L) 1,0 200 2,0

- Vortx por 30 segundos. - Centrifugar por 10 minutos, velocidade 3. - Pipetar em tubo de ensaio 600 L do sobrenadante + 900 L de ditionito de sdio. - Ler a absorbncia em 396 nm, zerando com o branco. - Construir a equao da reta, projetando as absorbncias obtidas na leitura na ordenada (eixo y) e a concentrao (mg/L) na abscissa (eixo x).

2.2) Procedimento com a amostra Fazer a amostra em duplicata

Branco

Amostra (duplicata)

1 mL de soro branco

1 mL de soro teste

2,0 mL de cido sulfossaliclico 10%

2,0 mL de cido sulfossaliclico 10%

- Vortx por 30 segundos. - Centrifugar por 10 minutos, velocidade 3. - Pipetar em tubo de ensaio 600 L do sobrenadante + 900 L de ditionito de sdio. - Ler a absorbncia em 396 nm, zerando com o branco. - Aplicar a absorbncia obtida na equao da reta da curva de calibrao para obter a concentrao da amostra.

3) Interpretao dos resultados A interpretao do resultado realizada atravs do Nomograma, pela correlao entre a concentrao do paraquat no soro e o tempo decorrido da ingesta.