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A tcnica de separao dos fragmentos de DNA atravs de gis de agarose ou acrilamida; A agarose um polissacardeo (como gar e pectina);

Dissolve em gua fervente e ento gelifica quando esfria como a


gelatina; Para realizar uma eletroforese, um gel de agarose preparado; Adicionado a uma cuba de eletroforese; Adicionado o corante brometo de etdio;

Se intercala com o DNA fundamental na leitura do gel;

Adiciona-se um pente ao gel formao dos poinhos;

As amostras so introduzidas em pequenos poos de gel;

Aplica-se uma corrente eltrica atravs do gel;


Como o DNA negativamente carregado, ele atrado pelo

eletrodo positivo;
Deve migrar atravs do gel de agarose; O gel corresponde a uma malha; Os fragmentos menores migrar mais rapidamente que os fragmentos maiores;

A velocidade de migrao atravs do gel inversamente proporcional a log10 de seus pesos moleculares; Fragmentos de DNA formados com a ao das enzimas de restrio possuem tamanhos diferentes; possvel calcular o tamanho exato de um dado fragmento com base na sua razo de migrao;

Aps a eletroforese em gel, os fragmentos de DNA

que foram corados com brometo de etdeo;


Possui afinidade pelo DNA e fluorece (torna-se

visvel) vivamente em contato com luz ultravioleta;


Pode-se localizar as bandas que correspondem ao

DNA;
Os fragmentos de DNA podem, ser isolados e

purificados a partir dos gis de agarose.

Regio do exon 10 do gene do fator V, seguida de digesto pela enzima MnlI , para a deteco da mutao Fator V Leiden. Visualizao aps eletroforese em gel de poliacrilamida 7% e colorao por brometo de etdeo. Raia 1: marcador de peso molecular fX 174 RF/Hae III digest Pharmacia); raias 2 e 3: pacientes que no apresentaram a mutao analisada; raias 4 e 6: pacientes com a mutao Fator V Leiden em heterozigose; raia 5: paciente com a mutao Fator V Leiden em homozigose

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