TCNICAS EXPERIMENTALES PARA INGENIEROS

Cdigo: 25980 ESCUELA INGENIERA QUMICA

PRCTICA 9: DETERMINACIN DE HIDROCARBUROS AROMTICOS POLINUCLEARES (PAHS) EN SUELOS CONTAMINADOS

PRCTICA # 9 DETERMINACIN DE HIDROCARBUROS AROMTICOS POLINUCLEARES (PAHS) EN SUELOS CONTAMINADOS

1. Materiales y reactivos 4 Soportes universales 4 Esptulas Papel de filtro franja azul o cuantitativo (110mm) 1 Balanza analtica 4 Erlenmeyers 200 mL 4 Placas para calentamiento con agitacin 4 Embudos de separacin de 250 ml. 4 Sistemas Soxhlets 3 Balones de 500 ml fondo redondo 2 Esptulas de acero inoxidable 3 Morteros Pipetas Pasteur Micropipetas de 20, 200l. Alambre de cobre activado (se sumerge en HCl) Viales para cromatografa 4 Balones de fondo plano de 250 ml Probeta graduada de 200 ml Pipetas de 1, 2 y 5 ml Beaker de 50, 100 y 250 ml 3 Columnas de vidrio de Cromatografa de 10 mm X 30 cm (Bureta de 25 ml o 50 ml con llave de vidrio es adecuada. GC/MS Columna de cromatografa capilar HP-5ms Papel aluminio 200 g Sulfato de Sodio anhidro (Na2SO4) 50 g de Flourisil o silica activado (se activa por 3 h en una mufla a 450C): 1 litro Acetona 2 litro Diclorometano 2 litro de n-Hexano Estndares de naftaleno (PAH) (200 mg/mL cada uno en soluciones de 0, 50, 100, 200, 500, 1000 y 2000 ng/ml)

TCNICAS EXPERIMENTALES PARA INGENIEROS

Cdigo: 25980 ESCUELA INGENIERA QUMICA

PRCTICA 9: DETERMINACIN DE HIDROCARBUROS AROMTICOS POLINUCLEARES (PAHS) EN SUELOS CONTAMINADOS

2. Objetivos Desarrollar en los estudiantes su capacidad para el diseo y realizacin de montajes de laboratorio. Llevar a cabo la operacin de extraccin slido-lquido con el dispositivo de laboratorio Soxhlet. Determinar el porcentaje de extracto que se puede obtener con este dispositivo. Aprender el empaquetamiento de una columna cromatogrfica. 3. Fundamentos tericos Se define la extraccin como el proceso mediante el cual se separa una mezcla en sus componentes, gracias a la solubilidad de unos e insolubilidad de otros en un determinado disolvente. Si se trata, como en este caso, de una mezcla cuyo disolvente es slido y contiene un lquido que se extrae con otro lquido, ser una extraccin slido-lquido. Se aplica el criterio de efectuar repetidas veces la extraccin con una determinada cantidad de disolvente, y uno de los sistemas que existen es utilizando el Extractor Soxhlet. Este dispositivo permite utilizar el mismo disolvente realizando repetidas extracciones en un proceso continuo y automtico, lo que constituye una gran ventaja desde el punto de vista prctico. En la actualidad es uno de los mtodos ms habituales para la descontaminacin de suelos de compuestos aromticos polinucleares (PAHS). Por otro lado, la cromatografa de gases es una tcnica de separacin en la que la fase mvil es un gas (denominado gas portador). En cromatografa gas/lquido la fase estacionaria es un lquido retenido o inmovilizado sobre un soporte slido. La separacin de los componentes de una muestra se produce debido a sus diferencias de retencin por la fase estacionaria. Las interacciones de los analitos con el gas portador son despreciables debido a la baja densidad de ste; en consecuencia, para una determinada fase estacionaria, las concentraciones de estos analitos en ambas fases estn determinadas por la temperatura. Por lo tanto, la optimizacin de una separacin en cromatografa de gases se centra en optimizar el programa de temperatura del horno en el que se encuentra la columna que contiene la fase estacionaria. Con esta tcnica la cuantificacin de los extractos obtenidos se realiza con la curva de calibracin respectiva a los compuestos que se han de encontrar. 4. Procedimiento 4.1. Extraccin en sistema Soxhlet Adicionar 150 ml de una mezcla 3:1 de diclorometano/n-hexano en un baln de 250 ml. Conecte el dispositivo Soxhlet al baln y el condensador.

TCNICAS EXPERIMENTALES PARA INGENIEROS

Cdigo: 25980 ESCUELA INGENIERA QUMICA

PRCTICA 9: DETERMINACIN DE HIDROCARBUROS AROMTICOS POLINUCLEARES (PAHS) EN SUELOS CONTAMINADOS

Tare en la balanza un pedazo de papel de aluminio y pese 1 g de suelo previamente contaminado. Adicione al mortero 1 g de sulfato de sodio anhidro. Homogenice la mezcla con la mano del mortero hasta que se incorporen los dos polvos. Secar en una estufa de 105 C por 30 min. En un papel de filtro cuantitativo grande transfiera la mezcla del mortero ayudado con una esptula. Envuelva los polvos en el papel filtro y cierra las puntas con una engrapadora. Introduzca el papel filtro con los polvos en el Soxhlet y coloque el condensador. Conecte el agua del condensador. Caliente el sistema y gradu la temperatura de tal forma que el goteo del condensador no debe ser mayor de 1-2 gotas por segundo. El llenado y vaciado del Soxhlet se realizar una vez cada hora. Deje el sistema trabajando por 16 h. Una vez concluida la extraccin, apague el sistema y djelo enfriar. Asegure la transferencia de todo el solvente al baln de 500 ml. Conecte el baln al rota-evaporador (asegrese que est limpio). Inicie la rotacin, coloque el vaco caliente a 35 C. Evapore el solvente lentamente del baln de 500 ml hasta un volumen de 5 ml. Transfiera su contenido a un vial (20 ml) con una pipeta pasteur y ajuste el volumen del extracto hasta 10 ml con n-hexano. Guarde el extracto en la nevera hasta la siguiente parte de la prctica. 4.2. Limpieza de los Extractos Adicione a 5 gramos de Florisil silica gel, 10 ml de n-hexano en un vaso de precipitados de 50 ml y mezcle bien. Parte en pedazos muy pequeos papel de filtro y con una pinza transfiralos dentro de la columna de cromatografa. Con una varilla limpia, asegrelos en el fondo de la columna que sirva como un pequeo tapn para retener slidos Empaque la columna de cromatografa, adicionando la mezcla de Florisil/n-hexano y deje fluir el solvente, abriendo la llave de la columna, pero sin dejar que se seque el material de empaquetamiento (solvente debe quedar medio centmetro por encima del material del nivel de Florisil). Adicione 10 ml del extracto con la pipeta pasteur a la columna cromatogrfica. Deje eluir la columna y recoja el extracto. Antes que el solvente llegue al nivel del Florisil, en un embudo de separacin coloque 50 ml de una solucin de 20% de diclorometano en hexano. Situ el embudo de separacin encima de la columna y deja fluir el solvente suavemente regulando la salida de la columna a 1 gota cada segundo. Recoja todo el volumen eluido. Rotoevapore el solvente hasta 5 ml con todas las precauciones mencionadas arriba. Transfiera el volumen de 1 ml del extracto obtenido en el paso anterior a un vial de cromatografa mediante el uso de una pipeta de Pasteur. Inyecte la solucin. 5. Preguntas y Ejercicios Determinar el porcentaje de extraccin obtenida despus de la limpieza por columna. Explicar el fundamento del cuerpo extractor para realizar los vacos cada hora. Cules condiciones cromatogrficas se manejaron para la separacin ptima de los compuestos extrados? En qu concentraciones se encontraron los contaminantes PAHs?