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UFPB-Universidade Federal da Paraba CT- Engenharia de Alimentos Aluna: Camila Ferreira Marinho Matricula: 10921155 Professora: Janeeyere Ferreira

1 Relatrio de Microbiologia de Alimentos

2012

Sumrio:
1. Microscopia e Colorao de Gram. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .1.1 2. Introduo. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .1.2 3. Objetivos. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .1.3 4. Materiais. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .1.4 5. Concluso. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .1.5 6. Bibliografia. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . .1.6

1.

Microscopia e Colorao de Gram:

1.2 Introduo O microscpio usado o laboratrio e Microbiologia tem a funo de aumentar a imagem com o auxilio de um jogo de lentes associado a uma forte iluminao do campo de observao e da viso translucida do micro-organismo. A colorao de Gram, desenvolvida em 1884 pelo mdico dinamarqus Christian Gram, um dos mtodos de colorao mais aplicados em Bacteriologia. Trata-se de um mtodo de colorao diferencial, dado que permite dividir as bactrias em duas classes - Gram negativas e Gram positivas. pois uma ferramenta essencial na classificao e diferenciao de bactrias. Esta diferenciao baseia-se na diferente estrutura e composio, nomeadamente no diferente teor lipdico, da parede celular de bactrias Gram positivas e Gram negativas. A parede celular das bactrias Gram negativas tem um teor em lpidos elevado na sua membrana externa, para alm de uma camada fina de peptidoglicano que circunda a membrana plasmtica. Em consequncia, durante o passo de diferenciao pelo lcool, parte dos lpidos so dissolvidas pelo lcool, formando-se poros na parede por onde o corante primrio (violeta de cristal) sai das clulas. Estas clulas ficam transparentes aps o passo de diferenciao pelo lcool, sendo posteriormente coradas com o corante secundrio (safranina). A parede celular das bactrias Gram positivas constituda principalmente por uma camada grossa de peptidoglicano e o seu teor em lpidos nulo ou muito baixo (em poucas espcies bacterianas). A camada de peptidoglicano actua, assim, como uma barreira impedindo a sada do corante primrio e estas clulas ficam coradas de violeta escuro. 1.3 Objetivos Colocar uma pequena quantidade de amostra da bactria em uma gota de gua sobre uma lamina espalhando a gota, deixa secar e aps esquenta com calor do bico de Bunsen. E na descolorao mistura-se com lcool acetona para o cristal violeta ser retirado das clulas gram positivas depois lava a lamina para retirada do excesso de solvente. Quando examinado no microscpio a amostra prepara-se a lamina com trs esfregaos na bactria gram- positiva e gram- negativa, dessa forma podemos ver se ela foi bem sucedida. A ampliao til a ampliao necessria para que a imagem do objeto se torne visvel, ou seja, para que atinja dimenses iguais ou superiores ao limite de resoluo do olho humano. Para conforto do observador, as imagens so ampliadas at dimenses que tornam a sua observao confortvel. O factor de ampliao adicional a ampliao vazia. Exemplo: Para que um objeto no limite de resoluo do microscpio ptico se torne visvel necessrio ampli-lo: 0,2mm / 0,2 m = 200 m / 0,2 m = 1000 x. Para uma observao confortvel, podemos ampli-lo at 1mm, utilizando um fato de ampliao adicional de 1mm/0,2mm=5.

1.4 Materiais Lamina; Soluo Salina; Bico de Bunsen; Ala Bacteriolgica; Bico de Bunsen; Colnia de bactrias; Crista Violeta, Lugol, alcool-acetona, Papel Filtro, Fusina; Microscpio;

1.5 Concluso Ento pode se concluir que na tcnica de colorao de Gram se trata de um esfregao das bactrias, com o auxilio do calor dado pelos reagente dos materiais citados ,que pode ser determinado se ela positiva ou negativa e tambm a determinao da estrutura morfolgica da bactria ,sendo esse o mtodo mais usado em laboratrios de microbiologia. A tcnica tem importncia clnica uma vez que muitas das bactrias associadas a infeces so prontamente observadas e caracterizadas como Gram-positivas ou Gram-negativas em esfregaos de pus ou de fluidos. 1.5 Bibliografia http://www.e-escola.pt/topico.asp?id=306