..

.' "

<

:".

:<~.

Eri 1962, F.M.Rito~sa, un biologo italiano que estudiaba el desarrollo de la mosca'de Ii [ruta Drosophila, publico un hallazgo curioso.' Cuando la t~mperatura erda cual sedesarrollaban las.larvas de la mosca de la fruta se elevaba de 25 a 32C, se activaban varios sitios nuevos en Ids c.rori:i'osoritas gigantes de las celulas larvarias. Como se explica en el capinil() 10; los cromosomas gigantes de estas larvas de insectos proporcioan una expresion Visual de la expresi6n genica (fig. 10-8). Los resultados sugenan que el aumento de la tempetatura inducia la expresion de nuevos genes, hallazgo que se confirmo 10 afios mas tarde con la caracterizaciou de varias protemasque aparecian en las larvas despues de elevar la temperatura.' Pronto se descubrio que esta respuesta, denominada respuesta al choque te!:,l1\ico, 00 era exclusiva de la mosca de 1a fruta, sino que'tainbien'puede inducirse 'en muchas celulas diferentes d~todq~p? de organiSIl1O,s;-desde bacterias hasta plantas y mamiferos . Un exameri mas' minucioso revelo que las proteinas producidas durante la. respuesta no se en~Ontr-abatl'soI0 en las celulas sometidas al choque terrnico, tambien existian en menores concentraciones en celulas en condkioneS'norni;UJ~.<CJ"aJ ~na funci6n de estas llamadas protetnas de choquMermiEQ (hsps)?La respu~sta a esta pregunta se obtuvo de manera gradual en v.arios estudios que no paredan relacionados. .\:; Eln la'pagifia 77 se eXplic6 que algunas estructuras complejas con m.~tiple~ suJmnidades, como el dbosoma bacteriano 0 una particula del viius del mosaico del tabaco, pueden ensamblarse por si mismos a partir de las'subunidades purificadas. En la decada de 1960 se demostr6 que las pt'oteinas que confo,rman las p~rticul~s de bacteri6fagos (fig.1-21c) tam.'.>....... ....... ,Yo .. bin tienen una capacidad notable para ensamblarse por si mismas, pero ciisi siernpre son inca paces de formar una particula viral completa in vi~ Los exp~rirnentos sobre ensa,mble de bacteriOfagos en eelulas bacterianas eonfiImaiQil que estos requieren ayuda de las bacterias. Por ejempi?, e,n,1973 se,':o.elUpstr6'que gle'rt~'cepa bacteFiarra mutante, llatnada GroE, no podria soportar el en~ble de bacteriOfagos norma,les. SegUn eLtipo"de bactefi'6fago,la:'cabe~ 0 l'i'colaicte faparticula viral se ensamblaba t:n f9.rmOl~pcom;cta?'~ Es.tos e,.stucJ.ioss!lgirieron que una proteina codificada p"br el cromosdIna bacteriano participaba en el ensamble de virus-, aunque Ia proteina del hospedador ncffuera un componente de las particulas virales finales. Como es obvio que no eyolucion6 como ailici:liar para el ensamble viral,.la protefna bacteriana necesaria para el en,saqlble del bactetiOfago debia tener cierta funci6n en las actividades no~males de la celula, pero aun se desconQela la funci6n precisa. Los estudioS'ulteriores'i'evelaron que el sitio GroE en.el cromosoma bacteriano ~~vea.,~dad c;onti,ene,dos genes separados, GroEL y Gr()EE, que codifican dos pr6~einas separadas: GroEL y GroES. AI microscopio electr6nico, . la'protefna'purincada GroEL pareda un ensambH: eiliridrico formado pOJ do.s discos. Cada disco estaba compuesto pOI varias subunidades di:~puestas en fo~ma slmetrica alrededor del eje central (fig. 1).5,6 .', Vario~.:aii.os mas' tarde, un'estudio con plantas de gillsantes sugiri6 la existencia de una proteipa promotora de ensamble similar en los clor~plast6s d.e las.. la'n~as.7'Rubisco es una proteina grande en los clorop BI:lstos"qlw~sata]Jzala.{eaeci6n en la.-que las moleculas de CO2 captada de la atmosfera sc u~en por enlaces covalentes con moleculas organical>dut'anteo.-la fQ~osirftesjs (secd6n 6.6). Rubisco tiene 16 subunidades. Ocho subunidades p~quefias. (masa molecula,r de 14000 Da) y ocho SUhuDidad~s grarides (55 000' Da). Se observ6 quelas subunidades grandes ..de:Rubiscoj,sint<;tizadas dentro del cloroplasto, no se encuentran en estado independiente, ;sino relacionadas con un ens amble protefnico eI).orme consistente en subunidades iderrticas con masa molecular de 6000(lDa (60 kDa). En su documento,los investigadores eonsideraron la posibilid~d de' que el complejo formado por la subunidad grande de
I.':'

FIGURA 1 Un modele d~l c6fuplejo GibEL"tbmi~do de ac~~rdo C00:105 datos de la micros~opia, elech-9ni4a.;y r~determinacion de!. pes9 molecular. Se observa que e1complejo:consiste en dos discos, cada uno formado por siete subunidades Idenllcas,ol'denad3$ de man~ra simettica alrededor de un eje central. EsWdio~ subsigui.entes most:raroIJ, .que el complejo contiene dos camaras iriternas. (TOM~A C~N AUToRlZAcroN DEL,EDlTOR, A,PARTIR DE.T HOHN., ETAt.;]; MOL. BIOL.129:371, i?:'l9. COPYRlGHT 1979, ACADEMIC PRESS, E~SE'fIER SCIENCE.)
Rubiseo y el polip6ptido de 60 kDa' fuer-a iriterrii"ediarlo en el ensamhle de una molecula completa de Rui:lisco.,. i " .'.$ Una linea de investigaci6n separada en las celulas de m\illli(eros tambil::n revel61a existencia de proteinas que:parecian ayudar al ertsamble de las proteinas de mUltiples subunidad~s. Como Rub!sco, las m?leC)Jlas de anticuerpos consisten en un complejo de dos subunidades de diferentes tipos, cadena? Hgeras mas pequeiias y cadenas pesadas mas grandes. Tal como las subunidades grandes de Rubisco se relacionan con Qtra proteina que no forma parte del complejo final, 10 miSrrlO oeurre con las cadenas pesadas del cpmp}ejo de un anticuerpo.8 Estap!0teina, que se relacic{na con las cadenas pesadas recien sintetizadas, pero no con las cadenas pesadas ya unidas con las cadenas ligeras, se denomin6proteina de union, 0 BiP. Mas tarde se descubri6 que HiP tiene Una ma.sa de 7Q.OOO Da (70 kDa). . . Hasta este punto"se han descrlto dosJineas de investigaci6h; una concerniente a la respuesta al choque termico y. la otra con p.!'o.t~inas que fomentan el ensamble proteinico. Estos dos campos confluyeron en 1986) cuando se dymostr6 que una de la,S protein as mas prominentes en la respuesta al choque termico, una que se habia denominado protdna 70 de choque termico (hsp70j por su maSa molecular, era idtntica a BiP. la proteina implicada en el ensamble de las moleculas de anticuerpos.9 Induso antes del descubrimiento de la respuesta al choque termico, se sabia que las proteinas eran sensibles aJa temperp.tura, .un pequeno aurnento en la temperatura hacia que estas delicadas:moiec,ulas empezaran a desplegatse. EI despliegue expone los residuos hidr6fobos que antes estaban ocultos en el centro de la prot~fna. ,As! como las moleculas de grasa en un taz6n de sopa se aglomeran en gotas, 10 mismo oc= con las protefnas con parches bidr6fobos en susupetficie. Por consi-guiente, cuando una celula es sornetida a calor, his proteinas solubles se desnaturalizan y forman agregados. Uri informe de 1985 demostr6 qUt. despues de un aumento en la temperatura, las moleculas de hsp70 reden sintetizadas ingresan a los nucleos celulares y se unen con agregado; de proteinas nucleares, donde actUan como palancas para fomentar disgregaci6n.10 Por su funcion como auxiliar en el ensamble de protefm...

!ro.

CHAPERONAS: AYUDAN A LAS PROTEiN AS A LLEGAR A SU ESTADO PLEGADO APROPIADO

79

n~]a prevencion de interacciones indeseables, hsp70 y las mole-dacionadas se l1amaron chaperonas moleculares.!' ?xo despues se dernostro que la proteina bacteriana de choque GroEL y 1a proteins de ensamble Rubisco en las plantas eran hornologas, En realidad, ambas protemas comparten casi la de los mas de 500 residuos de aminoacidos en sus respectivas .u EI heche de que las dos proteinas, ambas miembros de ... fk ebaperonas Hsp60, hayan eonservado tantos de los mismos C:::C30'<10S refleja su funcion similary esencial en los dos tipos de ceero, ~cUlH esa.funcion eseucial? .En ese memento, se pens6 que es principal era rnediar el ensamble de complejos con multiples .i1des, comb Rubisco. Esta idea cJmbi6 por los experimentos .que =ron Jas chaperonas rrioleculares-en .Ias mitocondrias. Se sabra _, protein as rnitocondriales recien sintetizadas producidas en el tenian que cruzar las memi'fran'<ls rnitocondriales externas en monomerica, desplegada y extendida. Se entontr6 un mutante L:Uaba la actividad de otro micmbro de 1a familia de chaperonas . resirua dentro de las mitocondrias. En las ce1ulas que contenian ;..operona mutante, las proteinas transportadas a las rnitocondrias ?legaban hasta sus fOImas nativasP Incluso las proteinas que te.ona sola cadena peptidica fallaban en su plegamiento hasta su con=ciOn nativa. Este hallazgo cambio ]a percepci6n de 1a funci6n de ~rona de la idea de que ayudan al ensamble de las subunidades ya para formar complejos mas grandes, a la noci6n actual de que aI plegamiento de la cadena polipeptidica. Los resultados de estos y otros estudios indicaron la presencia en de al menos dos fami.iias de chaperon as moleculares: las cha- Hsp70, como BiP, y las' chaperonas Hsp60 (tambien llamadas .,inns), C0Il)O Hsp60, CroEL yla proteina de ensamble Rubisco . ...licaci6n eoeani en las:ohap'eronjnas Hsp60, como GroEL, -n las mejotN::b6ocidas, /' ,.' G>mo se revel6 en 1979, GroEL es un complejo molecular enor14 subunidades polipeptidicas dispuestas en dos anillos apilados, .do a una rosquilla doble.5,6 QUnce mos despues que se obtuvieran nneras micrografias electr6nicas, se esclareci6 la estructma tridina1 de CroEL mediante cristalografia con rayos X 14 EI estudio Ia presencia de una cavidad central dentro del cilindro CroEL.

-.0

Los estudios ulteriores demostraron que esta cavidad se dividia en 005 .. camaras separadas, cada una siruada dentro del centro de uno de los ,: anillos del complejo CroEL y 10 bastante grande para contenerun polipeptido en proceso de plegarniento. Los estudios de rnicroscopia electronica tam bien aportaron infor. macion sobre la estructura y funci6n de una segunda proteina, Gn~ES, que acnia junto con GroEL. A1 igual que esta, GroES es una protefna . anular con siete subunidades dispuestas en forma sirnetrica alrededor de un eje central. Sin embargo, GroES tiene solo un anillo y sus sub\tJ;li~, . dades SOn mucho mas pequefias (10000 Da) que las de GroEL . Da), GrqES se considera una tapa 0 dorno que se adapta sbtlre.cuii1ailie>,'),o, ra de los ,extr~Jllos -del cilindro de 'GI'oEL, (~g. 2). La, Ul'''lJ1A,''~.'' con un extreme de GroEL produce un'cambio drastioo . hi.:t:piltQ!,l:j:l!\~ cion de la protein a CroEL que aumenta rnucho el vohimen de~a~~rr.{a:f;~?'.:~<' cerrada al final del complejo.P . , La importancia de este cambio en la conformaci6n se reve16 gran detalle en estudios con cristalografia por rayos X en los laborato,.. rios de Arthur Horwich y Paul Sigler en Yale University.16 Como'se muestra en la figura 3, la uni6n de la tapa de CroES se acompafia de una rotacion de 60 del dominio apical (rojo) de las subunidades que
0

.~.'.~:;:'''f'''-;"

se

(b)

2 Reconstrucciones de GroEL con base en rnicrografias electronialta resolucion obtenidas de muestras congeladas en etano liquido y ..:nadas a -170C. La imagen izquierda muestra al complejo GroEL .necha el complejo de GroEL con GroES, que se ve como un domo extremo del cilindro. Es evidente que la union de GroES se acomde un cambio en la conformacion del extremo apical de las protefnas .,nstituyen el anillo superior de GroEL (fiecha), 10 que produce un roto notable ell, la camara sUferior. (RElMPRESA CONAUTORIZACI6N .%T1R p'B S. CHEN, ET AL., CORTESlA.DEHELEN R. SAIBIL,NATURE -=63,1994. COPYRIGHT 1994 MACMILI,ANMAGAZINESLIMITED.)

3 Cambio en la conformacion en CroEL. (a) EI modelo de 4 . izquierda muestra la superficie de la estructura de los dos ar\illos que constituyen la chapemnina CroEL. E1 dibujo de la derecha ilustra la esc trucrura terciaria de una de las subunidades del anillo superior de GroEL. Puede verse que la cadena polipeptidica se pliega en tres dominios. (b) Cuando un anillo de GroES (fiecha) se une con el cilindro de GroEL, el dominic apical de cada subunidad de GroEL del anillo adyacente ex~ perimenta una rotaci6n marcada cercana a 60, mientras el domini~ iil~ termedio (en verde) acrua como bisagra. El efecto de este cambio enlas partes del polipeptido es una elevacion intensa de la pared de GroELy:u~ agrandamiento de la camara interna. (REIMPRESA CON AUrORIZACI6& fl. PARTIRDE Z.XU,A.L.HORWICH, y P.B, SIGLER,NATURE 388:744,'19.,~7 . COPYRIGHT 1997 MACMILLANMAGAZINESLIMITED.)

FIGURA

.'

80

Capitulo 2 LAS BASES QUiMICAS DE LA VIDA

conforman el anillo de GroEL en' el extremo del cilindro GroEL. La union de GroES hace mas ,que inducir un cambio en la conforrnacion que agranda Ill,carnara de GroEL., Antes de la union de GroES,la pared Intema de la carnara de GroEL tiene residues hidr6fobos expuestos qu,e dan a1 recu'~rimieri.to up.icarao~er hitir,(:)fobo,Los polipeptidos no n~tiv:~stambi~p 'ti~ne~p~sid:uos,hi4r#obos, que quedan ocultos en el ." ,ifit~riot del polijj'~pti?oiiaMO.. GomqIi{ts(iperfiCies hi~Ofobas tienden , a mteractuar, el (etubritilientQ h~dr6fobb de IiI cavidad de GroEL se une conlasupe~f].cie:delos polipeptidos np nativos.La union de GroES con CroEL sepulta los residuos hidr6fo])os,de la pared de GroEL y e.xpone varios residuos polares, 10 que cambia el caracter de la pared de la camara. Como tesultado de este cambio, un,polipeptido no nativo que haya estado unido con la pared de GroEL mediante interacciones hidr6fobas se desplaza a! espacio dentro de la cimara. Una vez Iiberado de su uni6n con la pared de la camara) el polipeptido tiene la oportunidad de continuar su plegamiento en un amhiente protegido. Despues de unos 15 s,la tapa de GroES se separ}1del anillo GroEL y e1 polipeptido se e.xpulsade la camara. Si el polipeptido no ha llegado a su conformacion nativ.a para el momentQ de Ill, expulsion, puede unirse de nuevo con Ill, misma moleculade GroEL p con otra yel proceso se repire. La figura 4 muestra un modelo que iluStt~ algunos de los pasos que se cree ocurren "4urante el plegatniemo asisrido-por'CroEL y GroES. " Cerci! de 250. de las 2 40.0. prol'dnas pr~s.entes,en el citosol de una .'.''~elulade.E. coli intetacruan cdnCroll:L'7,~t:6fnO es posible que l)na cha peiona se U:nacon tantos polipepfidQs distintos? El sitio de union de . 'GroEL. consiste en, una superficie JFdr6foba formada sobre todo por , dos helices ex del dominio apical que es capaz. de unirse con cua!quier secuencia de residuos hidr6fobos que pudieran ser accesibles en un polipeptido plegado en forma parcial 0 rna! plegado_l8Una comparaei6n de la estructura del crista! de Iamoletula de GroEL Iibre con la de GroEL unida coo varios peptidos distintos .revelo que el sitio de union del dominio apical de una subunidad de GroEL puede ajustar localmente su

posicion cuando- seune .con distintas parejas. Este hallazgo indica (j'he el sitio de union tiene flexibilidad estructural que le permite adapfar su forma a la de un poli.pepcido particular con el que deba intetattUl!:r.:l Varies estudios han sugerido que Gro'ELhace masque soIo'b~f\:)~ dar una <;am<l!< .enla ;queJas proremas puedan plew-se sin iilt.~~ipasiva fefe(lcia'~){,tefi6i,.E.n.: eSt:udio,se use la ml.\tagen~si~dirXgkla;!.,gn. ;t,to tjn ~ para modificar' u~ iesiil.\.Jo' hive;T)T71 de GroESj cUy:a,c'aa~i1I(lat\t'al c cuelga .del.tech,'?',MJa' cam,ara de. plegamiento." Po~ su anillci,: u9~~i co,la nrosma nene UJ]. caracter hidrofobo modesto (fig. 2-26). C:uajld,p Tyr71 se sustituyo por un amiuoacido con carga positiva oa'~g~iiP~, el complejo GroEL-GroES variante mostro una mayor eapacidad2~a ayudar a! plegamiento de un, polipeptido ajeno especifico, Ill, proteiii'!i verde fiuorescente (GFP). Sin embargo,las sustituciones de Tyr71 'qu~ mejoran la capacidad de GroES-GroEL para aumentar el plegamierito de GFP volvieron a la chaperonina menos eompetente para ayudar ,a sus sustratos naturales a plegarse. Por tanto, conforme la 'chaperorunase volvio mas especializada para interactuar con GFP, perdio su eapacid~a general para auxiliar al plegamiento de proteinas que ternan una estrgctura distinta. Estehallazgo sugiere que jos aminoacidos individu..a,IflS Ill, pared de lit d.ma,ra de plegamiento poddan participar de algl)nil.fo~ rna en la reacci66 de plegamiento. Los datos de otro estudio sugirieto~" que la union de una proteina no nativa ton GroEL va seguida:,d(;:::.U:tl: ,plegamiento' fop:ado de una protein a sustrato.20 1,;0. ti'aJ.l~le.J:eri81i@~ energia de' r<:iqnaneja fiU:Qre~cep.ciils (fRET, fiuores&llc~ *esMJ~% energy transfer) !l'S-unatecnic~ (descrita enla seccion H(l) qu~Ji~tihitt a los investigadorCli conocer la ,distal')i:iaentre distintas PaJtes:d~i:tiP~, moIeeula proi:eiruca en distintos momentos' durante un proceso de#lf;: minado. En este estudio, los investigadores encontraron que la J.lJ:ote,ii naen proceso de plegamiento, en este caso Rubisco, unida al'dominig apical del acillo de GroEL, se encuentra en un estado relativamente compacto. La naturaleza compacta de la proteina unida se revelo por' Ill, proximidad estrecha coo otta de las etiquetas de FRET, que estaba

en

con

Gro~

r
ATP Union del polipeptido
genera
UI'l

ATP

C)
Tiempo = 15 s Union con GroES Plegamiento Expulsion

Tiempo = 0

FIGU~A 4 llustracion esquematica, de los pasos propuestos durante el plegamiento de un polipeptido CGnla ayuda de GroEL-GroES, Se observa que GroEL consiste en dos tamaras can estructuras y funciones .' eql,livalentes que se alternan en activid)ld. Cada camara se si,ruadentro ,', '. ":.~e ,un~ de los d~s ~ni1los q~e ~0:rP9l'le~ e1 complejo G~oEL. El po" ,'llpeptldo no, natlvo ent,ra a 'una de Ill? camaras (paso 1) y se une a los sitios hid,r6[opos deja pared deJa camara. La union de la tapa de GroES

~e;.2~e pared hacia el espacio encapsulado la

,10 9uc.:. causa

ca.mbio en la .conforma~6n. en la pared de la camara superior, agra..odai'nJel'Jto D&).;1 c~1:rn.u-ay liberocion del PQiipt!pCido

(paso 2). Despues de

unos 15 s, GroES se disocia del complejo y el polipeptido se expul~a,:ae.: Ill, camara (paso 3). Si el polipeptido ya alcanzo su conf0rmacionnaliya;'~' como en Ill, rnoleeula de la izquierda, el proteso de plegamie):lto :~\i <: completo. Sin embarg9> si el polipeptido s610 esta pleg~do e~ ,part~i~,?: si esta mal plegado) se ~mede nuevo con hi camara de Gl:oEL.pai;3,"l.ill,~;~' ciar otro cielo d~;plegamiento. (Nota: como se iil<4t~, et roecas,ijlo/4~i acci6n de GroEL se impulsa por la union e hidr6lisis de ATPi una"ifl(?~~ lecula rica en energia cuya fu'1ci6n se describe con detalle en el ta_pttclo: siguiente.) (TOMA,DA D);:A.L. HORWICH, ET AL. PRoe NAT'!., ACNn sc~
USA 96:11037,1999.)
t , .

SINOPSIS

81

con aminoacidos situados en extremos opuestos de la cadena de - o. Entonces, durante el cambio en la conformacioii que aumenta 2wnen de la cavidad de GroEL (fig. 3), la protein a Rubisco unida <Dto desplegamiento forzado, como 10 dernuestra el aumento en la rcia entre los dos extremos marcados de la molecula, Este estudio C'e que ell. polipeptido Rubisco regresa por complete a su estado ..e;ado, desde donde tiene oportunidad de plegarse de nuevo desde ;::cipio. Esrpcci6n deberia ayudar a evitar que la protefna no nativa ._ mapad;{en forma permanente en el estado desplegado. En otras -ss, cada ~sita a la carnara GroEL-G;oES representa un intento iIo 0 nadi" Fara iilcanzar el estado nativo, en Iugar de ser solo una pasos en la que la proteina se aproxima al estado native con cada

6. HENDRIX, W. 1979. Purification and properties of ~oE, a host proR. tein involved in bacteriophage assembly.] Mol ..Bioi. 149:375-392. ' 7. BARRACLOUGH, ELLIS, .J,1980, Protein synthesis in chloroplasts. R. & R IX. Biocbim. Biophys. Acta 608:19-31. ' . 8. HAAs,1. G. & Wl).'BL, 1983.Ill)munogl~bulin heavy chain binding, M. protein. Nature 306:387-389 . 9. MUNRO, S.& PELHAM, H.R.B. 1986.An Hsp7p-like protein ill the E;R: Identity with the:78 kD _glucose-regulatedprotein and irnmunoglobin heavychain binding protein. Cell 46:291-300. 10.' LEWIS, .f, & PELHAM, M H.R.B.1985. invol;"eme~tofATP in the ~uclear and nucleolar functions of the 70kD heat-shockprorein. EMl30 J 4:3137-3143. ' ,", ,,/ 11. ELLIS,].1987.Proteins as molecular chaperones. Nature 328:378-379.
, ::.(:"'. .~/. ,:' .H~{"

de plegamiento.
~mgase pr:esente, que las chaperonas moleculares no transmiten :o-.:acionpara el preceso de plegamiento, sino que impiden que las "".2 se desvien de su via de plegamiento correcto y se encuentren :::::...dos al p;legacios0 agregados.Tal como descubri6 Anfinsen hace m .:..tS, la estructura tridimensional de una proteina depende de su se_. de amino acidos. , .... ,
-::;-

12. HEMMINGSEN, S.M. ETAL.1988.Homologous plant and bacterial proteins chaperone oligomeric protein assembly.Nature 333:330-:3'34,

"'

1':

:.

, :~:.::"

it.. .;.

r,.

13. CHENG, . Y. ET At. 1989, Mitochondrial heat-shock protein Hsp60 M is essential for assembly of proteins imported into yeast mitochondria. Nature 337:620-625. " .~' ,lit .\,. :., 14. BRAIG, . ET AL.1994.The crystal structure of the bacterial chaperonin K GroEL at 2.8A. Nature 371:578-586, .' '-. -;,... h!.15. CHEN,S. ETAL.1994. Location of a folding protein and shape changes in GroEL-GroES complexes.Nature 371:261-264 . 16. Xu, Z., HORWICH, L., &SIGL'ER, . B.1997. The crystal structure,of A. p the asymnietric GroEL-GroES-(ADP)7 chaperonin complex.Na';"re 388:741-750. 17. KERNER, . J. ET AL.2005. Proteoniecwide analysi~ of cllapei:O~:: M dependent protein folding in Escherichiq coli. Cell 122:209-220. 18. CHEN,L. & Sigler, P. 1999. The"crysialsti:uctlite of a'Gi:oEUpepJ~e complex:plasticity as a basis for substrate diversity.Cell 99:757-768. 19. WANG, . D. ET AL. 2002. Dinicted evolution of subsiIat~~"optirri~zed J GroEUS chaperonins. Cell 111:1027-1039. 20. LIN, Z. ETAL,2008. GroEL stimUlatesprotei~ folding clu-ooghf~~~d unfolding. Nature Struct. Mol. BioI. 15:303-311.

::rencias _.
'TOSSA, F.1962. A new puffing pattern induced by temperature shock ...d DNP iri'Drosophila. E~pereniia 18:571-573.

- <S.IERS, A.,

MlTCHELL, K., & JRACY, H.

u.M. 1974. Protei!}synthe-

in salivary glands of Drosophila melanogaster. Relation to chromomal puffs.] Mol. Bioi. 84:389-398.

-nNBERGi N, 19J'3. Properties of a mutant of Escherichia coli de~ in bacteriophage lambda head formation (groE).] Mol. Bioi. - -13. ".,,,
.',

POULOS, ET AL.1973. Host participation in bacteriophage C_:p' head assembly.] Mol. Biol.76:45-60. T. ET AL.1979.Isolation and characterization of the host protein : m'IOlvedin bacteriophilge lambda assembly.] Mol. BioI. 129:359-

......... ,-"ioi_~covalentes mantienen unidos los lltOmOSpara formar _~_ .... Los enlaces covalentes son asociaciones estables que se aJ:IDdo los atomos com parten los electrones de su capa ext.:: manera que cada uno completa dicha capa. Tales enlaces .;a' simples, dobles 0 triples, seglin el numero de pares de compartidos. Si los atomos componentes comparten ~es de un enlace en forma desigual, el atomo con mayor por los electrones (el atomo mas electronegativo) porta ...aga negativa parcial, mientras que el otro porta una carga parcial. Las moleculas que carecen de enlaces polarizados un car:icter no polar, 0 hidr6fobo, que las haee insolubles Las moleculas que tienen enlaces polarizados tienen un polar, 0 hidrofilico, 10 que los hace hidrosolubles. Las mopolares con importancia biol6gica contienen :itomos ademas mono e hidr6geno, casi siempre 0, N, SoP (pag, 32).

con carga positiva y negativa completas; los enlaces de hidr6geno se establecen entre un atomo de hidr6geno con enlace covalente (con una carga positiva parcial) y un atomo de nitr6geno u oxigeno unido por enlace covalente (con carga negativa parcial); las fuerzas de van der Waals se forman entre dos atomos que tienen una carga transitoria por una asimetria moment:inea en la distribuci6n de electrones alrededor de los atomos. Las moleculas no polares 0 las porciones no polares de moleculas grandes tienden a relacionarse entre si en ambientes acuosos para formar interacciones hidr6fobas. Los ejemplos de estos diversos tipos de interacciones no covalentes incluyen la relacion del DNA Yproteinas mediante enlaces i6nicos, la relaci6n de pares de cadenas de DNA mediante enlaces de hidrogeno y la formacion del centro hidr6fobo de las proteinas solubles como resultado de las interacciones hidr6fobas y fuerzas de van der Waals (pag. 33). El agua tiene propiedades Unicas de las que depende la vida. Los enlaces covalentes que conforman una molecula de agua estan muy polarizados. Como resultado, el agua es un excelente solvente capaz de formar enlaces de hidr6geno con todas las moleculas polares. El agua tambien es un factor determinante de la estruetura de las moleculas biol6gicas y los tipos ge interacciones en las que pueden participar. El pH de una solucion es una medida de la concentraci6n de iones hidr6geno (0 hidronio). La mayor parte de los procesos bio16gicos es muy

ca1aces no covalentes se forman por fuerzas de atracci6n debiregiones con carga positiva y negativa dentro de la misma
_..1lCIlIlao entre dos moIeculas cercanas. Los enlaces no covalentes una funci6n clave en el mantenimiento de la estructura de mobiologieas y en la mediacion de sus actividades dinamicas. Los no covalentes incluyen enlaces i6nicos, enlaces de hidr6geno y de van der Waals. Los enlaces ionicos se forman entre grupos