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DESINFECO E ESTERILIZAO QUMICA.
Autoria: Thereza Christina Vessoni Penna
Departamento de Tecnologia Bioqumico Farmacutica
Faculdade de Cincias Farmacuticas da Universidade de So Paulo
Email: tcvpenna@usp.br
INTRODUO
A primeira referncia de desinfetante que se tem notcia, foi feita por
Homero em A Odissia, onde citava o uso do enxofre, na forma de dixido de
enxofre (aproximadamente 800a.C.). Substncia ainda hoje empregada na
preservao de frutas secas, sucos de frutas e vinho
14, 18
.
A cidade de Veneza foi uma das pioneiras em controle sanitrio. O
holands Anton Van Leeuwnhoek (1676) inventor do microscpio, foi um marco na
histria da microbiologia e desinfeco.
Louis Pasteur (1822-1895), com seu trabalho criterioso, quem muito
contribuiu para o desenvolvimento da microbiologia como cincia, ao demonstrar
serem os microorganismos os responsveis por doenas infecciosas. Pasteur
desenvolveu o mtodo fsico, denominado pasteurizao, ainda hoje utilizado na
higienizao de produtos alimentcios, mdico-odontolgicas.
As solues anti-spticas tm sido empiricamente utilizadas durante
sculos, mesmo antes de Pasteur e Koch demonstrarem a existncia de
microrganismos. O interesse de avaliaes da eficcia teraputica das solues
anti-spticas tpicas diminuiu com o uso indiscriminado de antibiticos.
A legislao brasileira prev as solues anti-spticas adequadas para uso
domiciliar e em reas da sade
3
. Assim tambm, sugere as caractersticas
mnimas necessrias para um anti-sptico, quais sejam:
atividade germicida sobre a flora cutnea, sem causar irritaes pele ou
mucosas;
no provocar reaes alrgicas ou queimaduras;
possuir baixo teor de toxicidade.
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Limpeza escrupulosa e eficiente faz o sucesso da adequada utilizao de
um agente desinfetante ou anti-sptico em ambiente domiciliar e as reas de
sade
4, 24, 27
. O nmero de microrganismos presentes no ambiente considerado
est relacionado a fatores como o nmero de pessoas, atividades em exerccio,
teor de umidade, poluio area e presena de matria orgnica favorvel
proliferao bacteriana.
Microrganismos encontrados em paredes, cho e outras superfcies, na
maioria dos casos, podem estar associados s infeces disseminadas por
contaminao cruzada.
Doenas Emergentes
As infeces emergentes tm sido caracterizadas por casos isolados ou surtos em
estabelecimentos de sade. Em hospitais e postos de sade as infeces esto associadas a uma
inadequada desinfeco de ambientes e de artigos mdicos. A severidade destes casos tm
variado desde uma colonizao assintomtica morte, com um grande nmero de agentes
causadores distintos.
A Organizao Mundial de Sade divulgou em maio de 1996, um alerta
dizendo que nenhum pas est livre das doenas infecciosas. A OMS informa
que o mundo passa por uma crise global, na qual enfermidades como a malria e
Aids continuam se alastrando, matando mais de 17 milhes de pessoas no planeta
por ano, incluindo 9 milhes de crianas
10, 20, 39
.
De acordo com relatrio da OMS, as doenas parasitrias, virais e
transmitidas por bactrias permanecem as principais causas de morte prematura,
sendo responsveis por uma em cada trs mortes
39
. Os nmeros so
assustadores, pois refletem uma tendncia desanimadora, na qual antigos
microrganismos esto ressurgindo resistentes aos antibiticos de primeira e
segunda geraes. A principal doena infecciosa, a tuberculose, matou 3.1
milhes de pessoas no ano de 1995. No Brasil, em 1995 foram notificados 91 mil
casos de tuberculose
4, 5, 10, 20
.
Tratar doenas infecciosas com antibiticos tem sido cada vez mais difcil
devido ao uso indiscriminado de medicamentos. A OMS solicita o combate das
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enfermidades emergentes, como a malria, clera e tuberculose, quando
poderiam ter sido prevenidas e tratadas ao custo de US$ 1.00 por pessoa. A
malria ataca cerca de 500 milhes de pessoas a cada ano e mata 2 milhes. Por
ser endmica em 91 pases, a enfermidade pe em risco cerca de 40% da
populao mundial. Algumas doenas infecciosas tem sido controladas atravs do
amplo uso de vacinas (ttano, poliomielite, febre Guin).
A OMS aponta as principais razes pelas quais algumas doenas infecciosas no so
controladas/ irradicadas, como
4, 10, 39
.
- disseminao da pobreza;
- crescimento populacional desordenado;
- aumento das concentraes urbanas;
- movimentos grandes de refugiados;
- degradao ambiental (desmatamento desenfreado, mudanas ecolgicas,
expondo o ser humano a um contato mais freqente com os agentes
transmissores);
- globalizao das economias;
- aumento das viagens internacionais;
- resistncia a antibiticos.
Nas ltimas duas dcadas, trinta novas e emergentes infees tem sido alvo de grande
preocupao: do HIV ao Ebola. As doenas respiratrias, incluindo gripe e pneumonia, ocupam a
categoria das infeces que causam maior letalidade, tendo sido responsveis por 4.4 milhes de
mortes em 1995
10, 39
.
Os infectologistas da Organizao Pan-Americana de Sade (Opas), no Dia Internacional
da Sade, em 7 de abril de 1997, fizeram um alerta global sobre as infeces que mataram 17
milhes de pessoas em todo o mundo em 1995. Enfatizaram que as doenas emergentes: Ebola,
Hantavrus, e Lassa, no esto circunscritas a uma regio ou pas e podem fazer vtimas em
qualquer lugar. Salientaram que a migrao o principal veculo disseminador das doenas;
sendo que o contgio ocorre em 60% dos casos pelo contato entre pessoas. Em 20%, a causa o
consumo de gua e alimentos contaminados, acentuada pela falta de saneamento bsico
4, 5, 10
. A
Opas ressalta que o retorno das endemias resultado do abandono de programas de vigilncia
sanitria, e diminuio de investimentos em programas de saneamento bsico
20
.
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O primeiro estudo brasileiro sobre incidncia de infeces hospitalares,
apresentado em 21 de maio de 1997 em Salvador, durante o 8
o
Congresso Pan
Americano de Infectologia, mostrou que os ndices de surtos de infeco
hospitalar podem ser controlados por adequao dos mtodos de limpeza,
desinfeco e esterilizao, respeitando as reas, equipamento e materiais
mdico-odontolgicos. No Brasil, calcula-se que 80% dos hospitais no fazem
controle de infeco hospitalar
4, 5, 10
.
Em outubro de 1996, a Fundao Osvaldo Cruz (Fiocruz) detectou ter sido
a bactria Acinetobacter agente causador da morte de vrios bebs no Hospital
Materno-Infantil Nossa Senhora de Nazar, em Boa Vista, de acordo com o
material de fezes e urina colhido de alguns recm-nascidos. A bactria natural
das mucosas (boca, nariz, e olhos), e pode ser fatal em 48 horas s crianas
infectadas. A. calcoaceticus, da famlia Neisseriaceae, a nica espcie aceita,
caracterizada por bastonetes Gram positivos, no mveis, desenvolvendo-se bem
em agar MacConkey, em condies de aerobiose, temperatura de 35
o
C. A
bactria faz parte da flora normal da pele e do trato gastrointestinal e respiratrio
superior. So igualmente responsveis por infeces oportunistas e hospitalares,
incluindo meningite, infeces de leses e septicemia aps intervenes invasivas
com artigos mdico hospitalares
14, 16, 18
.
As bactrias so principais agentes das infeces emergentes de
pacientes hospitalares, principalmente naqueles que recebem administrao de
injetveis, soluo parenteral, alimentao enteral e procedente de lactrio
hospitalar.
Relatou-se em 20/11/97, que mais dois bebs, internados na Unidade de
Terapia Intensiva neonatal do Hospital e Maternidade Vila Nova Cachoeirinha, em
So Paulo esto infectados pela bactria Serratia marcescens. Desde agosto de
97, foram notificados 15 bitos de recm-nascidos infectados por essa bactria,
segundo o Secretrio Municipal da Sade. Outros 11 bebs, embora infectados
nesse perodo, reagiram com antibiticos. A UTI s sofrer completa desinfeco
quando todas as crianas receberem alta; pois se os bebs deixarem a UTI agora,
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levam consigo o perigo da disseminao da bactria para outros ambientes. At o
momento sabe-se que a UTI neonatal o foco de infeco, porm no se tem
certeza do nascedouro de infestao, que por contaminao cruzada continua a
disseminao do microrganismo. A bactria Serratia marcescens, da famlia
Enterobacteriaceae, caracterizada por bastonetes Gram-negativos, mveis, no
encapsulados, que produzem pigmento vermelho em agar MacConkey,
temperatura tima de 22
o
C, em condies de aerobiose. A bactria S. marcescens
encontrada no seu habitat natural, como a gua e o solo. Representa importante
agente patognico oportunista, sendo responsvel por infeces do trato urinrio,
pulmonar, de leses em tecidos, e por septicemia
4, 16
.
Em 26/11/1997, constatou-se a presena de outro foco de infeco
hospitalar, que atingiu dez crianas da UTI do Hospital Tide Setbal, na zona leste
de So Paulo. O agente de infeco bacteriana detectado do gnero
Enterobacter. O foco pode ter sido desencadeado tanto por uma criana
contaminada, quanto por problemas de manuseio e superlotao. O Hospital tem
em mdia cerca de 400 partos mensais. A interdio do berrio durou 20 dias
para que a desinfeco das reas fosse realizada com sucesso. A bactria do
gnero Enterobacter, pertence famlia Enterobacteriaceae, sendo a espcie E.
cloacae a mais comum, caracterizada por bastonetes mveis Gram negativos,
no encapsulados, que se desenvolvem bem em agar MacConkey, em condies
de aerobiose temperatura de 37
o
C. A bactria geralmente encontrada no solo,
em gua e no trato intestinal. A bactria pode constituir-se em agente patognico
oportunista, sendo encontrada em leses de tecidos, no trato urinrio e em casos
de bacteremia
4, 16
.
Os casos de infeo em berrios tem se alastrado devido ausncia de
um programa nico de limpeza e desinfeco hospitalar divulgado pela Secretaria
de Sade do Municpio.
A validade cientfica, a reprodutibilidade e a preciso do mtodo eleito para a avaliao dos
desinfetantes dependem de fatores controlados (composio do meio de cultivo, temperatura,
tempo de exposio), assim como da presena de materiais orgnicos (soro, sangue...) e de
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variveis nas condies de uso dos agentes qumicos na rotina hospitalar
1, 23
.
A escolha de um agente qumico desinfetante difcil frente ao grande
nmero de produtos encontrados no mercado; cada um afirmando eficcia contra
uma variedade de microorganismos sob condies diferentes de teste
2, 9, 12, 21, 22,
25, 27, 28, 30, 35
.
Os indicadores biolgicos Bacillus stearothermophilus e Bacillus subtilis
so utilizados na padronizao das tcnicas de aplicao dos agentes
esterilizantes e desinfetantes, respectivamente
9, 18, 24, 25, 33
.
Atravs da determinao da concentrao mnima inibitria
18, 19, 35
e do
tempo de reduo decimal valor D
32, 33
, e da classificao do espectro de
atividade de cada agente esterilizante, torna-se possvel esboar um programa de
limpeza, desinfeco e esterilizao no ambiente hospitalar, principalmente de
ambientes e de itens reutilizveis
1, 25, 30, 34
.
Esforos para diminuir o risco de transmisses de infeces incluem programas no qual os
desinfetantes desempenham papel crucial na quebra da cadeia de transmisso das infeces.
De acordo com relatrio da Organizao Mundial de Sade (OMS)
divulgado a 20 de maio de 1996, as doenas parasitrias, virais e transmitidas por
bactrias permanecem as principais causas de mortes prematuras, sendo
responsveis por 30% das mesmas. Estes dados so assustadores, pois refletem
uma tendncia desanimadora, na qual antigos microrganismos bacterianos esto
ressurgindo, devido s condies insuficientes de saneamento bsico.
Definies. Padres de reas e artigos em estabelecimentos de sade
O primeiro estudo brasileiro sobre incidncia de infeces hospitalares,
apresentado em 21 de maio de 1997, em Salvador, durante o 8
o
Congresso Pan
Americano de Infectologia, mostrou que os ndices de surtos de infeco
hospitalar podem ser controlados definindo-se a periculosidade das reas, artigos
mdico-odontolgicos e equipamento.
As bactrias so principais agentes das infeces emergentes de pacientes
hospitalares, principalmente naqueles que recebem administrao de injetveis,
soluo parenteral, alimentao enteral e procedente de lactrio hospitalar.
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A descontaminao de equipamentos mdicos envolve a destruio ou
remoo de qualquer microrganismo a fim de prevenir a contaminao cruzada
entre pacientes ou das pessoas que trabalham em contacto com superfcies
contaminadas.
Microrganismos podem ser transmitidos de pessoa para pessoa, atravs de superfcies de
qualquer equipamento de uso comum. As medidas preventivas so a lavagem das mos entre
pacientes e a descontaminao do material e rea ao final de sua utilizao. Microrganismos
podem atingir o organismo por feridas abertas, inalao de substncias contaminadas ou ainda por
contato direto com mucosas. O fenmeno de contaminao de uma pessoa para outra ou de uma
pessoa por um objeto inanimado contaminado denominado contaminao cruzada. A legislao
brasileira preconiza requisitos bsicos de descontaminao. Os procedimentos incluem a limpeza,
desinfeco e/ou esterilizao de artigos e reas de estabelecimento de sade. As respectivas
Comisses e Servios de Controle de Infeco do estabelecimento de sade devem escolher e
supervisionar os produtos (natureza fsica e qumica) e auxiliares de limpeza a serem utilizados
3,
18, 19, 24, 28
. Os procedimentos bsicos de descontaminao so de fundamental importncia para a
preveno na disseminao de doenas em geral, principalmente a nvel hospitalar, transmitidas
por gua e por contacto pessoal. Para obter-se um processo de desinfeco eficiente necessrio
que se submeta superfcie em questo, primeiramente limpeza mecnica (frico) associada
qumica (soluo detergente, desincrostante ou enzimtico) para remoo da macro sujidade, pois
a matria orgnica uma barreira ao dos desinfetantes assim como reduz a atividade dos
mesmos, no momento de sua aplicao
8, 9, 24, 25, 28
.
Limpar (lavar), desinfetar (sanitizar) e esterilizar so procedimentos
utilizados nos procedimentos de descontaminao.
Descontaminao o conjunto de operaes de limpeza, de desinfeco ou /e esterilizao de
superfcies contaminadas por agentes potencialmente patognicos, de forma a tornar estas
superfcies barreiras efetivas que minimizem qualquer tipo de contaminao cruzada.
Limpeza o procedimento usado para remover materiais estranhos como: p,
terra, grande nmero de microrganismos, matria inorgnica (sais) e orgnica
(sangue, vmito, soro, detritos alimentcios). Geralmente para tal so utilizados
gua com detergentes associados (ou no) a produtos enzimticos e auxiliares
mecnicos de limpeza. A limpeza um pr-requisito indispensvel que determina
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o sucesso da desinfeco e esterilizao, pois garante o acesso do agente
qumico e/ou fsico ao microrganismo. O objetivo principal a eliminao da
matria orgnica, pois nela que os microrganismos se proliferam com maior
intensidade.
Esterilizao o conjunto de operaes que objetiva destruir (ou remover) todas
as formas possveis de multiplicao e propagao: (a) microorganismos (incluindo
esporos bacterianos), com capacidade de desenvolvimento durante os estgios de
conservao e de utilizao do produto; (b) prons e toxinas que causam infeco ou
intoxicao se consumidos ou em contacto com regies estreis e irrigadas do
paciente. Conservar manter as caractersticas do produto durante a vida til de
armazenamento (vida de prateleira) temperatura ambiente, assegurando a
esterilidade adquirida durante sua utilizao
11, 32, 33
.
Os prons so os agentes etiolgicos da encefalopatia espongiforme bovina (EEB),
zoonose descrita inicialmente nos bovinos e mais recentemente em humanos
(variante da doena de Creutzfeldt-Jakob). A EEB transmitida por produtos
crneos bovinos contaminados com tecidos do sistema nervoso central. Entre os
ovinos e caprinos a doena conhecida por encefalopatia espongiforme
transmissvel (EET), dentre as quais se destaca o scrapie nos ovinos, que uma
doena conhecida desde a metade do sculo 18. Atravs de itens crticos, os
prons podem ser transmitidos por contaminao cruzada em prticas
hospitalares. Os prons, que so pequenas partculas infecciosas proticas,
resistem aos procedimentos fsicos e qumicos de esterilizao (desinfeco)
normalmente aplicados aos itens crticos, objetivando a destruio de esporos
bacterianos. Os prons so capazes de se multiplicar em uma progresso incrvel,
induzindo as molculas proticas normais a alterar sua forma, convertendo-as em
molculas perigosas para o organismo do hospedeiro.
Esterilidade ou nvel de segurana a incapacidade de desenvolvimento das
formas resistentes ao processo de esterilizao, durante a conservao e utilizao
de um produto. A manuteno do nvel de esterilidade conferido a um produto
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garante o prolongamento da vida til de prateleira e depende das operaes de
limpeza, pr-esterilizao, de esterilizao e ps-esterilizao. Os mtodos de
esterilizao permitem assegurar nveis de esterilidade compatveis s
caractersticas do produto em questo e de sua utilizao. O mtodo escolhido
depende da natureza (microbiana, protica: toxinas, e prons) e da quantidade do
agente aser destrudo, inicialmente presente no item considerado. O calor, a
filtrao, a radiao, o xido de etileno, o plasma de perxido de hidrognio, o
glutaraldedo e formaldedo podem ser citados como agentes esterilizantes.
Anti-sepsia caracteriza-se por ser um procedimento atravs do qual
microorganismos presentes em tecidos so destrudos ou eliminados aps a
aplicao de agentes antimicrobianos.
Desinfeco (higienizao ou sanitizao) caracteriza-se por representar um
conjunto de operaes de natureza fsica ou/e qumica com o objetivo de reduzir o
nvel de contaminao por microrganismos e protenas txicas, nos itens (artigos e
reas) inanimados. Os procedimentos de desinfeco no asseguram a
eliminao total de bactrias na forma de esporos ou de protenas txicas (prons,
endotoxinas bacterianas). Desinfeco o processo que visa a eliminao de
microorganismos na forma vegetativa, excetuando-se esporos bacterianos ou
suas endotoxinas. Segundo o "Centers for Diseases Control and Prevention
(CDC)" os nveis de desinfeco podem ser classificados em
12
:
Desinfeco de Baixo Nvel: onde os agentes utilizados apresentam atividade
antibacteriana sobre a maioria das bactrias, alguns vrus e fungos, porm no inativam
microorganismos mais resistentes (micobactrias e esporos bacterianos);
Desinfeco de Nvel Intermedirio: onde os agentes aplicados so eficientes para
destruir as bactrias vegetativas (incluindo micobactrias da tuberculose), a maioria dos
vrus e fungos;
Desinfeco de Alto Nvel: onde os agentes aplicados so eficientes na destruio de
todos os microorganismos presentes, com exceo de esporos bacterianos.
Desinfeo associada esterilizao: onde os agentes utilizados so capazes de destruir
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e/ou eliminar todos os tipos de microrganismos, inclusive de esporos bacterianos (> 5-
log
10
), reduzindo e por vezes inativando substancialmente (> 3-log
10
) prons e protenas
txicas
39
.
Cada instrumento, equipamento ou superfcie do ambiente de sade que entra em contato
com um paciente um disseminador em potencial de infeco. Baseando-se no risco de infeco
relacionado ao tipo e uso de cada item, E.H. Spaulding
8, 11, 19, 25, 28, 32
, desenvolveu uma
classificao que divide os artigos mdico-hospitalares e odontolgicos em trs categorias
distintas:
Categoria A - Artigos Crticos: so aqueles que envolvem risco potencial de infeco ao
paciente. Estes itens entram em contacto direto com sistemas vasculares ou tecidos estreis
(adiposo, muscular, sistema linftico ou vascular, sseo e sistema nervoso). Devem ser
igualmente considerados os dispositivos conectados aos artigos crticos. Estes itens devem ser
obrigatoriamente estreis para serem utilizados. Esta categoria inclui instrumentos cirrgicos,
implantes, agulhas, cateteres cardacos e urinrios, implantes e hemodializadores. Muito
destes itens so de uso nico (descartveis) e so adquiridos estreis. Itens crticos
termolbeis podem ser esterilizados por imerso em solues de glutaraldedo ou em cmaras
por elementos gasosos que apresentem xido de etileno, perxido de hidrognio, formaldedo.
Estes processos so praticados a baixas temperaturas.
Categoria B - Artigos Semi-Crticos: so aqueles que entram em contato com
membranas mucosas ou tecidos corporais lesados. Estes itens devem ser
submetidos a procedimentos rgidos de limpeza, desinfeco ou esterilizao.
Membranas mucosas intactas geralmente resistem infeces por esporos
bacterianos, mas so suscetveis a bactrias e vrus patognicos. Esta
categoria inclui laparoscpios, endoscpios, equipamentos de anestesia, entre
outros. Muito desses equipamentos requerem pasteurizao por calor mido
ou desinfeco de alto nvel usando agentes qumicos como cloro, perxido de
hidrognio, cido peractico ou glutaraldedo. Esses artigos aps desinfeco
devem receber enxge com gua estril, secagem e estocagem em
condies asspticas, evitando a recontaminao.
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Categoria C - Artigos No Crticos: incluem itens no invasivos, que entram em
contato direto com pele intacta do paciente. A pele considerada barreira
efetiva para a maioria dos microorganismos. Consequentemente, estes itens
exigem desinfeco de mdio ou baixo nvel. Ao contrrio dos itens crticos e
semicrticos, a maioria desses itens so reutilizveis. O risco de transmisso
de agentes infecciosos para os pacientes atravs destes itens bastante
reduzido. Entretanto estes itens podem contribuir para a contaminao
cruzada, principalmente por mos de pacientes, enfermeiras e outros
profissionais de sade e equipamentos mdicos. Desinfetantes de baixa
atividade germicida podem ser utilizados. Exemplos: aparelhos de presso,
eletrodos, mscaras faciais. Para esta categoria na maioria dos casos limpeza
com gua e sabo suficiente. Atravs da desinfeco pode-se garantir uma
segurana adicional. Mas h casos particulares nos quais a limpeza requer
desinfetantes de nvel mdio, quando h confirmao de microrganismos
potencialmente patognicos.
O mtodo de descontaminao do artigo considerado depende da finalidade
de seu emprego e das caractersticas fsicas e qumicas do mesmo, prevendo
compatibilidade do material aos produtos qumicos de limpeza e de desinfeco
escolhidos.
Quando realizados de modo adequado, os processos de desinfeco e
esterilizao garantem um nvel de segurana adequado na utilizao do artigo
invasivo (crtico) e no invasivo (semicrtico, no crtico) no paciente. No entanto
isto requer um programa de procedimentos validados para limpeza, desinfeco e
esterilizao, prevenindo a contaminao cruzada.
Para que se possa diferenciar procedimentos de limpeza e de higienizao,
as reas dos ambientes de manipulao da sade so classificadas e
subdivididas, segundo o risco potencial na transferncia de infeces em
24
:
crticas, semicrticas e no crticas.
Portanto, a classificao dos artigos e reas de sade determinam o processo a ser utilizado,
ou seja, de desinfeco ou de esterilizao.
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Fatores interferentes
H fatores que alteram a eficcia dos procedimentos de desinfeco e
esterilizao. A atividade antimicrobiana dos agentes qumicos depende de uma
variedade de fatores intrnsecos (natureza, estrutura e caractersticas dos
microorganismos) e de fatores extrnsecos (caractersticas qumicas e fsicas do
ambiente circunvizinho). O conhecimento desses fatores imprescindvel para o
sucesso da aplicao dos procedimentos de desinfeco e esterilizao.
Principais fatores interferentes e determinantes:
1- Natureza do microrganismo e da protena txica (pron)
1.1. Os microrganismos variam consideravelmente quanto
susceptibilidade aos agentes desinfetantes qumicos em funo de sua estrutura e
composio. De maneira genrica, a ordem decrescente de resistncia
apresentada ao agente antimicrobiano compreende: os esporos bacterianos, as
clulas bacterianas, os fungos, as leveduras e os vrus. As clulas de
micobactrias apresentam, maior resistncia em relao s clulas bacterianas,
devido s caractersticas hidrofbicas da superfcie celular. Porm, esta ordem de
resistncia varivel de acordo com o agente qumico escolhido e condies de
aplicao.
1.2. Os prons resistem aos mtodos tradicionais de esterilizao, incluindo
uso de radiao, calor seco, calor mido e agentes qumicos por: xido de etileno
e formaldedo. Tratamentos em autoclave s temperaturas de 121
o
C 132
o
C por
60 minutos, ou 134
o
C por 18 minutos resultam em decrscimos de 5 ciclos
logartimicos de prons. A utilizao de formaldedo em concentrao de 10% por
uma hora, reduz o titulo de prons em 30 vezes, sendo um adjuvante interessante
no tratamento trmico. Experimentos utilizando temperaturas de 130
o
C por 15
minutos, demonstraram inativao de 6 ciclos logartimicos (cerca de 99,9999%)
do tipo scrapie pron 263K. No entanto, se uma frao mnima permanece
inalterada, esta apresenta excepcional resistncia
39, 40
.
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2 Nvel de contaminao e localizao dos contaminantes
A resposta dos microrganismos aos desinfetantes varia em relao a fatores, tais como:
pH, temperatura, fase de multiplicao, presena de matria orgnica e outros agentes qumicos.
A resistncia aos desinfetantes pode ser uma propriedade intrnseca do microrganismo ou
pode ser adquirida. Habitualmente, as bactrias Gram-negativas so mais resistentes em relao
s bactrias Gram-positivas. Esse fenmeno est relacionado composio da parede celular,
que apresenta uma estrutura mais complexa, oferecendo menor permeabilidade difuso dos
agentes desinfetantes.
A atividade antimicrobiana diretamente proporcional ao nmero de microrganismos
presentes. Quanto maior a carga microbiana, maior o tempo de exposio necessrio para destru-
la. Assim, uma limpeza prvia escrupulosa, visando reduzir o nmero de microorganismos
inicialmente presente, de grande interesse para o sucesso da desinfeco.
O acesso de todos os componentes do item considerado ao agente de
limpeza, desinfeco e/ou esterilizao se faz imprescindvel, pois garante a
conservao do item e previne a sua recontaminao interna atravs do local
menos acessvel. Artigos compostos de mltiplas peas devem ser desmontados
e expostos aos agentes de limpeza para ento o serem ao agente desinfetante.
(tubulaes, coneces, equipamentos variados). A limpeza e desinfeco in
place no deve substituir integralmente a separao das mltiplas peas,
evitando assim a contaminao de um material complexo por uma simples pea
inacessvel ao agente de limpeza/desinfeco.
4 Concentrao, tempo de exposio e concentrao do agente desinfetante
Dependendo da natureza do agente desinfetante, quanto mais concentrado
o princpio desinfetante maior a eficcia e menor o tempo de exposio
necessrio para a destruio da mesma carga microbiana. Os compostos de cloro
dependem do valor de pH do meio, da natureza qumica do composto clorado
inorgnico ou orgnico, e sobre tudo da presena de sujidade na superfcie
aplicada. Assim tambm compostos de cido peractico que tem a atividade
reduzida com o aumento do valor de pH e na presena de material orgnico.
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4 - Fatores fsicos e qumicos
Diversos fatores fsicos e qumicos influenciam nos processos de desinfeco e
esterilizao, sendo os mais importantes temperatura, o pH, a umidade relativa e
a dureza da gua.
4.1 - Temperatura: os desinfetantes so comumente usados temperatura
ambiente, porm o aumento da temperatura pode favorecer a atividade do agente
desinfetante, como do formaldedo. Porm, a temperatura de aplicao do agente
desinfetante depende da compatibilidade do artigo em questo. Cateteres
cardiovasculares so deformveis s temperaturas superiores a 45
o
C, em
cmaras com xido de etileno, perxido de hidrognio ou formaldedo
1, 29
.
4.2 Valor de pH: o efeito do valor de pH na ao antimicrobiana depende
do desinfetante, dos microorganismos e do item submetido desinfeco.
Geralmente, valore de pH < 7.0 sensibilizam clulas vegetativas e favorecem a
difuso do agente desinfetante. A atividade dos compostos de cloro depende do
valor de pH do meio de aplicao. A atividade do perxido de hidrognio
independe do valor de pH. Os compostos quaternrios de amnio e a clorexidina
tornam-se mais efetivos ao valor de pH > 7.0, pois so ativas na forma de ctions.
O pH na faixa alcalina aumenta a atividade destes compostos catinicos, e
sinergicamente, provoca aumento do nmero de grupos carregados
negativamente nas protenas da superfcie bacteriana, possibilitando maior
nmero de stios com os quais o agente desinfetante pode se combinar. A
atividade dos fenis favorecida em pH cido, embora possam ser efetivos em pH
alcalino, na presena de substncias solubilizadoras. Solues de glutaraldedo
so ativadas em pH entre 7,5 e 8,5, temperatura ambiente. A dependncia da
atividade antimicrobiana do desinfetante em relao ao valor de pH diminui
medida que a temperatura do meio atinge 70
o
C.
4.3 - Dureza da gua: os ons divalentes clcio e magnsio presentes na
gua interagem com detergentes e outros compostos orgnico, formando
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precipitados insolveis. A eficcia dos compostos quaternrios de amnio
marcadamente afetada na presena de gua dura.
4.4 - Umidade Relativa: este fator afeta diretamente a atividade de
compostos na forma gasosa, como o xido de etileno, o perxido de hidrognio
(inativado na presena de gua) e o formaldedo.
5 - Matria Orgnica
Matrias orgnicas, em diversas formas como soro, sangue, pus, vmitos,
fezes e resduos de alimentos, interferem na ao dos agentes antimicrobianos,
por simples reao ou formao de complexos que reduzem a concentrao do
agente qumico disponvel para reagir com os microrganismos.
Matrias orgnicas exercem reduo acentuada das atividades dos
compostos altamente ativos como os liberadores inorgnicos de cloro e do cido
peractico. A limpeza, previamente aplicada ao item considerado, minimiza e
previne a inativao da atividade dos agentes desinfetantes, aumenta a
permeabilidade e difusividade dos mesmos nos locais de menor penetrao e
garante o sucesso da desinfeco e/ou esterilizao. A limpeza o estgio mais
importante, simples e menos custoso de um protocolo de desinfeco
6, 8, 19, 29, 31,
37
. A limpeza deve preceder aos procedimentos de desinfeco ou de
esterilizao, pois reduz a carga microbiana pela remoo da sujidade e matria
orgnica presente nos materiais, possibilitando o contato necessrio entre o
agente antimicrobiano e a superfcie considerada
18, 24
. Constitui o incio de todos
os programas referentes aos cuidados de higiene.
Todo processo de descontaminao, para assegurar o nvel de segurana
mximo esperado, exige que o material, superfcie ou rea em questo no
apresente qualquer tipo de resduo que dificulte difuso e acesso ao agente
qumico ou fsico aplicado. Da advir necessidade de programas de limpeza
prvios dos itens e reas consideradas. A limpeza deve prever a remoo de at
10
5
microorganismos por unidade do item considerado, mesmo para artigos de
difcil acesso como os cateteres utilizados em cateterismo cardiovascular
1, 29, 34, 37
.
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16
Estudos tm demonstrado que a limpeza manual ou mecnica, com gua e
detergente e/ou associados a produtos enzimticos, pode causar a remoo de
aproximadamente 10
5
microorganismos da populao inicialmente considerada
1, 6,
8, 11, 19, 29, 31, 32, 34
. Assim, lcito afirmar que a limpeza rigorosa condio bsica
para qualquer processo de desinfeco ou esterilizao. Pois, possvel limpar
sem esterilizar (desinfetar), mas no possvel garantir a esterilizao (ou
desinfeco) sem limpar.
A segurana da desinfeco ou esterilizao expressa pela probabilidade
de sobrevivncia dos microrganismos ao processo considerado. O nvel de
segurana a ser estabelecido varia de acordo com a finalidade de uso do artigo
11,
32
:
Para artigos crticos, a probabilidade de sobrevivncia admitida de 1 (um)
microrganismo sobrevivente para cada 10
6
unidades processadas. Este critrio
expresso em 10
-6
e conhecido como nvel de esterilidade ou de
desinfeco de alto nvel. Este nvel de segurana , convencionalmente,
verificado no laboratrio atravs do teste de esterilidade. Dependendo do
indicador biolgico (IB) utilizado, o nvel de segurana aceitvel pode variar de
10
-4
(1 IB sobrevivente: 10
4
unidades processadas), 10
-5
(1 IB sobrevivente:
10
4
unidades processadas) ou 10
-6
(1 IB sobrevivente: 10
4
unidades
processadas). A padronizao mais rigorosa prev de nvel de segurana de
10
-12
(1 IB sobrevivente: 10
4
unidades processadas) para a probabilidade de
sobrevivncia de esporos de Clostridium botulinum em solues crticas e
invasivas (intravenosas, intramusculares e subcutneas) assim como para
solues parenterais, alimentao enteral, e alimentos enlatados no-cidos.
Os IB de maior resistncia do que aquela apresentada por esporos de
Clostridium botulinum so usualmente empregados, e o nvel mximo
considerado de 10
-6
.
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17
Para artigos semicrticos, o intervalo do nvel de segurana em 10
-4
a 10
-5
foi
exigida na esterilizao (desinfeco) para veculos de explorao espacial na
busca de evidencias de vida extraterrestre no planeta Marte.
Para artigos no crticos, o nvel de segurana geralmente aceito de 10
-3
(1
IB sobrevivente: 1000 unidades processadas). Critrio este menos rigoroso,
pois direcionado para artigos no invasivos, prevendo que a superfcie em
contacto apresente barreira microbiolgica penetrao (pele).
Quanto aos prons: a eficcia dos procedimentos de esterilizao (desinfeco)
so mensurados quanto reduo atingida de unidades infectantes durante a
exposio do item considerado aos agentes fsicos e/ou qumicos. O nvel de
reduo das unidades infectantes depende do nvel de contaminao e da
eficcia do procedimento escolhido. Um instrumento contaminado com 50 mg
de tecido de crebro de uma pessoa infectada com CJD e com ttulo de 1x10
5
(50% unidades de dose letal intracerebral por grama) teria 5x10
3
unidades
infectantes. A eficcia de um procedimento de limpeza associado
desinfeco pode causar a reduo do ttulo em at 10
7
unidades de pron, ou
seja, uma reduo de 4-log
10
atravs da limpeza e reduo 3-log
10
atravs
do processo de desinfeco e/ou esterilizao. Limpeza, seguida de
procedimento de desinfeco pode assegurar significativa margem de
segurana.
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PRINCPIOS ATIVOS USADOS COMO DESINFETANTES E
ESTERILIZANTES QUMICOS
Em processo de desinfeco, os princpios ativos permitidos pelo Ministrio da Sade
(atravs da Portaria n 930 de 27/08/92
3
), a serem incorporados nos produtos qumicos, so:
aldedos, fenlicos, quartenrios de amnia, compostos orgnicos e inorgnico liberadores de cloro
ativo, iodo e derivados, lcoois e glicis, biguanidas e outros, desde que atendam legislao
especifica. A Portaria MS 15/88
3
classifica os germicidas a partir de seu espectro de ao. Os
agentes esterilizantes (ao comprovada sobre esporos) e os desinfetantes so subdivididos para
uso em reas e em artigos.
Apesar da grande oferta de produtos qumicos no mercado, a escolha do agente qumico
mais adequado depende das caractersticas consideradas nesta seleo
3, 9, 23, 25, 32
, ou seja:
- Amplo espectro de ao microbiana
- Inativar rapidamente os microrganismos,
- No ser corrosivo para metais,
- No danificar artigos ou acessrios de borracha, plsticos ou
equipamentos,
- Sofrer pouca interferncia, na sua atividade, de matria orgnica,
- No ser irritante para pele e mucosas,
- Possuir baixa toxicidade,
- Tolerar pequenas variaes de temperatura de pH,
- Ter ao residual sobre superfcies quando aplicado no ambiente,
- Manter sua atividade mesmo sofrendo pequenas diluies
- Ser um bom agente umectante,
- Ser de fcil uso,
- Ser inodoro ou ter odor agradvel,
- Ter baixo custo
- Ser compatvel com sabes e detergentes,
- Ser estvel quando concentrado ou diludo.
Entretanto no existe um desinfetante qumico que atenda a todas as
especificaes e necessidades encontradas, sendo preciso conhecer as
caractersticas de cada um para se ter subsdios suficientes para a escolha correta
do produto, evitando custos excessivos e uso inadequado. A escolha do
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desinfetante deve levar em considerao aspectos como: espectro de atividade
desejada, ao rpida e irreversvel, toxicidade, estabilidade e natureza do
material a ser tratado.
DENTRE OS DESINFETANTES MAIS UTILIZADOS POR CARACTERSTICAS PECULIARES
APRESENTADAS
9, 11,
, ESTO:
I. LCOOIS
Os lcoois mais empregados em desinfeco so o etanol e o isopropanol, sendo o primeiro o
mais utilizado no Brasil, em funo da disponibilidade e do baixo custo.
ATIVIDADE ANTIMICROBIANA
So indicados para desinfeco de baixo nvel e de nvel intermedirio. Os lcoois
etlico e isoproplico apresentam atividade rpida sobre as bactrias na forma
vegetativa (grampositivos e gramnegativas). Atuam tambm sobre as clulas de
Mycobacterium tuberculosis, alguns fungos e vrus lipoflicos (atuam na capa e no
capsdeo).
MECANISMO DE AO
Mecanismo de ao dos lcoois ainda no foi totalmente elucidado, sendo a
desnaturao de protenas a explicao mais plausvel. Na ausncia de gua, as
protenas no so desnaturadas to rapidamente quanto na presena da mesma,
razo pela qual o etanol absoluto, um grande desidratante, menos ativo do que
suas solues aquosas. Coagulam ou precipitam protenas presentes no soro, pus
e outros materiais biolgicos, que podem proteger os microorganismos do contato
direto com lcool. Atividade bacteriosttica provavelmente devida inibio da
produo de metablicos essenciais diviso celular.
CARACTERSTICAS IMPORTANTES
Os lcoois no possuem ao residual. So inflamveis, requerendo, portanto,
cuidados especiais na manipulao e estocagem. Por evaporarem rapidamente
sua ao torna-se limitada, recomendando-se a imerso do item em questo.
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20
APLICAES
Os lcoois possuem ampla aplicao. No laboratrio, so empregados na
desinfeco e descontaminao de superfcies de bancadas, fluxos laminares,
equipamentos de grande e mdio porte e para anti-sepsia das mos
6, 30
.
Nos estabelecimentos de sade, so indicados para desinfeco e descontaminao de
superfcies e artigos como: ampolas e vidros, termmetros oral e retal, estetoscpios, cabos de
otoscpios e laringoscpicos, superfcies externas de equipamentos metlicos, macas, mesas de
exame, dentre outros.
CONCENTRAES USUALMENTE RECOMENDADAS
Concentraes entre 60 a 90% so as mais utilizadas, sendo que para concentraes inferiores a
50%, a atividade depende do perodo de imerso.
EFEITOS ADVERSOS
O etanol e o isopropanol so irritantes para os olhos e so produtos txicos. A
freqente aplicao produz irritao e dessecao da pele.
II. Formaldedo
ATIVIDADE ANTIMICROBIANA
Desinfetante de alto nvel, formaldedo apresenta atividade sobre bactrias gram-positivas e
negativas na forma vegetativa, incluindo as micobactrias fungos, vrus e esporos bacterianos. A
atividade esporocida lenta, exigindo um tempo de contato longo para a maioria das formulaes.
FORMA DE APRESENTAO
O formaldedo um gs encontrado disponvel na forma lquida em solues de
37 a 40%, contendo metanol para retardar a polimerizao (formalina); e na forma
slida, polimerizado em paraformaldedo.
MECANISMO DE AO
Formaldedo inativa os microorganismos atravs da alquilao dos grupamentos amino e sulfidrilas
de protenas e dos anis de nitrognio das bases purinas.
CARACTERSTICAS IMPORTANTES
Formaldedo pouco ativo a temperaturas inferiores a 20
o
C, aumentando a
atividade em temperaturas superiores a 40
o
C. Ativo na presena de material
orgnico. No inativado na presena de materiais orgnicos naturais, sintticos
e detergentes.
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APLICAES
Formaldedo utilizado principalmente para descontaminao, atravs de
fumigao de ambientes fechados (cabines de segurana, salas diversas, salas de
envase em indstria de medicamentos estreis, biotrios, hospitais). Em funo da
sua toxicidade e carter irritante, no recomendado para desinfeco rotineira
de superfcies, equipamentos e vidraria, podendo ser utilizado em situaes
especiais.
Na rea hospitalar, considerado desinfetante de alto nvel, tem, ainda, aplicao como
esterilizante de artigos crticos termossensveis e na desinfeco de artigos semicrticos, sendo
tambm usado para a desinfeco de capilares dos sistemas dialisadores. No entanto tem sido
substitudo por glutaraldedo e cido peractico para esta aplicao.
CONCENTRAES USUALMENTE RECOMENDADAS/TEMPO DE CONTATO
a - Para fumigao em ambientes fechados;
Como formalina: 18ml de formalina e 35ml de gua por 24 horas
Como paraformaldedo: as indicaes variam de 4g/ml a 10,5g/ml por 24 horas.
b - Para desinfeco: 4% (v/v) por 30 minutos.
c - Para desinfeco de capilares de sistemas dialisadores: 4%(v/v) por 4 horas
d - Para esterilizao: solues alcolicas a 8% e solues aquosas a 10% por aproximadamente
18 horas de imerso.
EFEITOS ADVERSOS
Desinfetante de alto nvel, embora seja considerado potencialmente carcinognico. O seu uso
limitado pelos vapores irritantes, odor caracterstico desagradvel mesmo em baixa concentrao
(1ppm). Causa endurecimento e branqueamento da pele, dermatite de contato e reaes de
sensibilizao. A concentrao mxima na atmosfera recomendada pelo National Institute for
Occupational Safety and Health de 1 ppm
17, 25, 38
.
A formalina slida vaporizada atravs do calor na presena de umidade, sendo os resduos
txicos, danificando alguns instrumentos. Embora seja uma opo econmica tem sido pouco
estudada quanto aos efeitos adversos.
III. Glutaraldedo
ATIVIDADE ANTIMICROBIANA:
Glutaraldedo possui amplo e rpido espectro de atividade, considerado desinfetante de alto nvel.
Amplamente utilizado na desinfeco/esterilizao de materiais termossensveis, agindo sobre
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bactrias na forma vegetativa, incluindo micobactrias, fungos, vrus e esporos bacterianos,
possuindo excelente atividade esporocida quando comparada a outros aldedos como formaldedo
e o glioxal.
A atividade micobactericida relativamente mais lenta. Existe uma complexa
relao entre os parmetros de concentrao, temperatura e pH. A atividade de
solues aquosas cidas consideravelmente mais baixa do que as solues
ativadas ao intervalo de pH entre 7,5 e 8,5. A ativao feita com agentes
alcalinizantes, por exemplo, 0,3%(m/v) de bicarbonato de sdio. A concentrao
usualmente indicada de 2%. Com o aumento da temperatura, a atividade das
solues cidas e alcalinas independe do pH e so similares.
MECANISMO DE AO
A atividade biocida e inibitria do glutaraldedo devida a alquilao dos grupos
sulfidrila, hidroxila e amino, alterando os cidos nuclicos e a sntese de protenas,
nos microorganismos. O mecanismo de ao sobre os esporos ainda no foi bem
elucidado. Baixas concentraes inibem a germinao de esporos de Bacillus
subtilis e Bacillus pumilus e concentraes mais elevadas de 2%, so
esporocidas.
Glutaraldedo um dialdedo, que possui grande espectro de atividade contra bactrias, gram-
positivas e negativas, esporos bacterianos, fungos e vrus.
O mecanismo de ao do glutaraldedo envolve uma associao forte com as camadas tanto
externas quanto internas das clulas bacterianas, inibindo a germinao dos esporos bacterianos e
posterior desenvolvimento.
CARACTERSTICAS IMPORTANTES
A utilizao ampla de produtos base de glutaraldedo deve-se s caractersticas
especiais: ativo na presena de material orgnico, pouco inativado por materiais
naturais e sintticos e detergentes. No coagula material protico e no
corrosivo para os metais, materiais de borracha, lentes e cimento de materiais
ticos. Um outro problema apresentado por estas solues a polimerizao. As
solues cidas so estveis por longos perodos, enquanto as solues ativadas
alcalinas tendem a polimerizar rapidamente, com perda correspondente da
atividade antimicrobiana, pois ocorre queda na concentrao do dialdedo livre,
que essencial para a ao biocida.
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23
APLICAES
Glutaraldedo um dialdedo, utilizado como desinfetante de alto nvel e esterilizante de artigos
crticos e semicrticos termossensveis (artigos que no podem ser submetidos a mtodos fsicos
de esterilizao, como material cirrgico, endoscpios de fibra tica, artigos metlicos e
equipamentos de anestesia e aspirao).
Em nvel laboratorial, tambm indicado para recipientes de descarte de material, apesar de no
ser uma prtica Brasileira, devido ao alto custo do produto em questo. No indicado para
desinfeco de superfcies de maneira rotineira, somente em situaes especiais.
Apesar do custo elevado a caracterstica positiva mais evidente o amplo espectro de ao que
permite a utilizao segura para os pacientes.
FORMULAES/TEMPO DE CONTATO
3
Produtos comerciais se apresentam geralmente em formulaes contendo 2% de
glutaraldedo em solues cidas, que so ativadas atravs de agentes
alcalinizantes. Uma vez ativadas estas solues possuem um prazo de validade
limitado, geralmente de 14 dias. Tambm se encontram disponveis formulaes
cidas estabilizadas com 2% de princpio ativo, cujo prazo de validade, aps
ativao, de geralmente 28 dias. Novos produtos contendo associaes com
compostos fenlicos tm sido desenvolvidos e avaliados.
Solues ativadas de glutaraldedo a 2% so consideradas esterilizantes qumicos
por uma exposio de 8 a 10 horas, assegurando a destruio de esporos
bacterianos.
Mesmo em concentraes inferiores a 2% ativo contra diversos vrus e diversas bactrias em
forma vegetativa. Na desinfeco de nvel intermedirio de artigos semicrticos como os
endoscpios, o intervalo de exposio por 20-30 minutos considerado suficiente e seguro para o
paciente. Para os chamados vrus lentos, e prions ainda no foi identificada atividade germicida
quando expostos aos aldedos.
Todas as aplicaes exigem limpeza criteriosa dos artigos antes da imerso em
solues de glutaraldedo e posterior cuidadoso enxge com gua esterilizada,
para evitar recontaminao.
EFEITOS ADVERSOS
Glutaraldedo um composto txico, irritante para a pele, mucosas e olhos, que
exige precaues ocupacionais durante a manipulao com proteo individual
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24
(mscaras, luvas) e ambiente arejado. Provoca dermatite e sensibilizao da pele.
O limite de exposio mximo recomendado de 0,2ppm
9, 24, 25, 38
.
Aplicao dos Aldedos como agentes esterilizantes
3, 9, 24, 25
.
O agente qumico mais utilizado na esterilizao o glutaraldedo a 2%, por um perodo de
exposio de oito a doze horas. indicado para esterilizao de artigos crticos termossensveis
como acrlicos, cateteres, drenos, nilon , silicone e outros. O formaldedo pode ser usado como
esterilizante, tanto no estado lquido como no gasoso. Usualmente, o tempo mnimo de
esterilizao de 18 horas, tanto para a soluo alcolica a 8% quanto para soluo aquosa a
10%.
IV. Compostos liberadores de cloro ativo:
Existe um nmero razovel de compostos liberadores de cloro ativo disponveis
para alvejamento e desinfeco em diversas reas.
Os compostos mais comumente utilizados so os inorgnicos: hipoclorito de sdio,
clcio, ltio; e os orgnicos: cido dicloisocianrico.
ATIVIDADE ANTIMICROBIANA:
Desinfetante de baixo a alto nvel, dependendo da concentrao, valor de
pH da soluo e do tempo de exposio, os compostos liberadores de cloro so
ativos sobre bactrias gram-positivas e negativas, incluindo micobactrias, assim
tambm contra esporos bacterianos, fungos, vrus lipoflicos e hidroflicos. Quanto
maior a concentrao e ou o tempo maior o espectro de ao,podendo ser
utilizado como desinfetante de baixo e alto nvel.
A forma ativa o cido hipocloroso (HOCL), que formado em solues com pH
de 5 a 8. Os ons hipocloritos (OCL
-
), que predominam nas solues alcalinas
fortes, constituem a forma menos ativa.
A eficcia do cloro decresce com o aumento do pH e vice-versa, paralelamente
concentrao da forma no dissociada do cido hipocloroso.
Concentraes to baixas como 10 ppm so eficientes aps pr-lavagem na
desinfeco de artigos no crticos e na assepsia da pele, destruindo reduzidas
cargas de microrganismos sensveis. Tais concentraes inferiores a 10 ppm so
igualmente preservantes bacteriostticos. Usualmente aplicados na concentrao
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de 1000 ppm, para as mais diversas aplicaes. Atualmente o desinfetante mais
utilizado devido baixo custo e largo espectro de ao.
MECANISMO DE AO
Mecanismo exato atravs do qual o cloro ativo destri microorganismos ainda no
foi demonstrado experimentalmente. Algumas teorias so sugeridas como:
combinao com protenas da membrana celular, formando compostos txicos e
inibio de reaes enzimticas essenciais, entre outras suposies. Em vrus, os
compostos liberadores de cloro ativo desnaturam os cidos nuclicos.
CARACTERSTICAS IMPORTANTES
Os desinfetantes base de cloro reagem rapidamente com matria orgnica,
incluindo sangue, fezes e tecidos. Sua atividade reduzida, sendo o grau de
inativao proporcional quantidade de material presente. Portanto, a
concentrao de cloro disponvel no processo de desinfeco deve ser alta o
suficiente para satisfazer a demanda do cloro (cloro consumido pela carga
orgnica presente) e fornecer cloro residual suficiente para destruir os
microorganismos. Este fenmeno deve ser cuidadosamente considerado antes de
qualquer aplicao. Os compostos clorados so tambm inativados por matria
natural no protica e plsticos. So incompatveis com detergentes catinicos.
Os hipocloritos so muito instveis, sendo a estabilidade dependente de fatores
como concentrao, temperatura, pH, luz e metais. Solues concentradas
(100.000 ppm de cloro ativo) so mais instveis do que as diludas. Temperaturas
elevadas reduzem a estabilidade. Embora a atividade antimicrobiana seja
favorecida aos valores de pH inferiores a 7, a estabilidade dos hipocloritos diminui
com o tempo. A estabilidade dos compostos de cloro durante a estocagem,
mantendo a atividade microbiocida quando em uso, assegurada por adio de
hidrxido de sdio, que mantm o pH alto durante o armazenamento. Porm, a
soluo concentrada de hipoclorito deve apresentar a capacidade de
tamponamento quando diluda, favorecendo o decamento gradativo do valor de
pH tornando o produto ativo na forma de cido hipocloroso.
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A decomposio fotoqumica ocorre com solues expostas luz. Estas
caractersticas evidenciam a necessidade do armazenamento em frascos opacos,
ao abrigo da luz e do calor.
A decomposio cataltica ocorre na presena de ons, metais pesados, cobalto,
mangans, nquel e ferro, produzindo cloreto e oxignio.
cido dicloroisocianrico mais estvel, principalmente quando estocado em local
seco, e menos sensvel presena de material orgnico. Apresenta tambm a
vantagem de ser menos corrosivos para metais do que os hipocloritos.
Os hipocloritos so corrosivos para metais, s concentraes superiores a 10ppm.
Objetos de prata e alumnio so os mais atingidos, porm ao inoxidvel mais
resistente, sendo danificado em altas concentraes normalmente empregadas.
Por isso, o enxge com gua contendo 10 ppm de cloro livre disponvel permite a
presena residual do cloro sem causar danos.
APLICAES
Os compostos liberadores de cloro ativo tm uma ampla aplicao em diversas
reas. No laboratrio, so apropriados para desinfeco em geral de objetos e
superfcies inanimadas, inclusive as contaminadas com sangue e outros materiais
orgnicos e para recipientes de descarte de materiais.
Nos estabelecimentos de sade tem aplicao para desinfeco de superfcies e
artigos semicrticos no-metlicos e artigos de lactrios.
So ainda recomendados para uma variedade de finalidades, entre elas
desinfeco de gua para o consumo humano e para processos industriais, guas
de piscinas, alimentos e superfcies relacionadas.
FORMULAES
As solues de hipoclorito de sdio disponveis para comercializao se
apresentam em concentraes em torno de 5% a 12% (reagente qumico), a 2%
na forma de gua sanitria.
Os hipocloritos de clcio e ltio so compostos slidos e os isocianricos so comercializados na
forma de p, associados a detergentes.
CONCENTRAES usualmente recomendadas/tempo de contato
3
:
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Observao: Se 1 ppm equivale a 1.0 mg por litro, 10.000 ppm equivale a 1.0 %
de cloro ativo disponvel (no complexado com matria orgnica).
1 - Desinfeco/descontaminao de superfcies - 10.000 ppm por 10 minutos de contato.
2 - Desinfeco em lactrios de superfcies - 200 ppm por 60 minutos de contato.
3 - Desinfeco de inaloterapia e oxigenoterapia no metlicos - 200 ppm por 60
minutos.
4 - Desinfeco de artigos semicrticos - 10.000 ppm por 30 minutos.
5 - Recipientes de descarte de materiais - 10.000 ppm durante 60 minutos
EFEITOS ADVERSOS
Os compostos liberadores de cloro provocam irritao da pele, dos olhos e do
aparelho respiratrio. Quando ingeridos, provocam irritao das membranas
mucosas.
V. COMPOSTOS QUATERNRIOS DE AMNIO (QACS)
Os compostos quaternrios de amnio so substncias detergentes
catinicas com propriedade germicida, sendo derivados orgnicos da amnia,
contendo um hidrognio pentavalente em sua frmula ligado a quatro radicais
orgnicos com 8 a 18 tomos de carbono. Quatro dos substituintes so radicais
alquila ou arila e o quinto um haleto (cloreto), sulfato ou similar. Cada composto
possui caractersticas antimicrobianas prprias que dependem da distribuio e do
tamanho das cadeias dos radicais. Alguns compostos freqentemente utilizados
so: cloretos de alquildimetilbenzilamnio (cloreto de benzalcnio) e cloretos de
dialquildimetilamnio.
ATIVIDADE ANTIMICROBIANA
Considerados desinfetantes de baixa toxicidade e classificados de atividade de
baixo nvel, os compostos quaternrios de amnio (QACs) so efetivos contra
bactrias gram-positivas e apresentam menor atividade frente s bactrias gram-
negativas. So ativos para alguns fungos e para vrus no-lipdicos. No
apresentam ao letal para esporos bacterianos, e para micobactrias. So ativos
particularmente contra bactrias Gram-positivas, mas falham contra Gram-
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negativas, sendo a P. aeruginosa, E.coli e Salmonella typhimurium resistentes
sua ao. Tambm no atuam contra micobactrias. Os vrus apresentam maior
resistncia aos QACs em relao aos fungos. QACs so mais eficazes contra os
vrus lipoflicos, como o HIV e HBV.
MECANISMO DE AO
A ao bactericida atribuda inativao de enzimas responsveis pelos processos de
produo de energia, desnaturao de protenas celulares essenciais e ruptura da membrana
celular.
Os agentes catinicos reagem com os fosfolpideos que compe a membrana microbiana,
sendo o mecanismo de ao subdivido em: i) adsorso e penetrao do agente na clula; ii)
interao membrana citoplasmtica, promovendo a desorganizao da membrana; iii) aumento
da permeabilidade da membrana, evaso e perda de material intracelular de baixo peso molecular;
iv) degradao de protenas e cidos nuclicos e v) lise da parede celular. Por fim, QACs
provocam desorganizao estrutural e da integridade da membrana citoplasmtica nas bactrias, e
perda da capacidade de duplicao.
CARACTERSTICAS IMPORTANTES
Os quaternrios de amnio so fortemente inativados por material orgnico
atravs de processo de adsoro, por uma variedade de materiais naturais e
sintticos e por detergentes no-inicos e sabes. So influenciados
negativamente pela presena dos ons clcio e magnsio presentes na gua dura.
Podem danificar borrachas sintticas, cimento e alumnio. O pH ideal o alcalino
(9-10); valores de pH abaixo de 7,0 so desfavorveis. Possuem efeito residual.
APLICAO
So recomendados para desinfeco de baixo nvel, aplicados a superfcies no crticas como
pisos, mobilirio e paredes, de reas no crticas. Apropriados para desinfeco de superfcies e
equipamentos em todas as reas relacionadas tambm com alimentos. So considerados
germicidas de baixo nvel, mas de baixa toxicidade podendo ser empregados em alimentos e reas
que entram em contato com sua produo. Seu uso como anti-sptico (0,1 a 0,5%) tem sido
questionado devido ao risco de contaminao das suas solues, mas so comercializadas
solues para anti-sepsia da oro-faringe com cloreto de cetilpiridium (Cepacol

). Podem ser
empregados como preservativo em colrios e utilizados como xampus anti-caspa, creme
condicionador e agentes amaciantes de roupa.
TCV Penna
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29
FORMULAES
So apresentados em formulaes complexas e concentradas, contendo um ou mais princpios
ativos, que devem ser diludos em gua autoclavada.
EFEITOS ADVERSOS
Os compostos quaternrios de amnio apresentam baixa toxicidade, porm
podem causar irritao e sensibilizao da pele; assim tambm so considerados
poluentes ambiental.
VI. lcool Iodado
ATIVIDADE ANTIMICROBIANA
um potente agente bactericida, considerado de nvel mdio, comumente aplicado como anti-
sptico. No entanto tem aplicao como desinfetante de materiais, virucida, fungicida. As solues
de iodo so rapidamente inativadas por protenas, por substncias plsticas e por substncias
naturais em menor grau. So inativados por detergentes no inicos.
MECANISMO DE AO
O iodo altamente reativo e sua ao microbicida se d pela combinao com protenas por ao
qumica ou adsoro.
APLICAES
lcool iodado utilizado na anti-sepsia complementar da pele aps a lavagem das
mos e antes de procedimentos invasivos sem efeito residual. Recipientes abertos
com solues so contra-indicados por facilitarem a deteriorao, evaporao e
contaminao.
Em curativos as solues aquosas de iodo so indicadas nas concentraes de 0,5 a 1% de iodo.
Essas diluies devem ser preparadas a partir de solues oficiais.
FORMULAO e TOXICIDADE
A eficcia da soluo no prejudicada pela presena de matria orgnica a concentraes de
iodo superiores a 0,1%. A toxicidade local do iodo baixa, entretanto, provoca ressecamento e
irritao da pele e ocasionalmente pode levar a reaes de hipersensibilidade caracterizadas por
febre e erupo cutnea de tipos variados.
O complexo polivinil pirrolidona adicionado de iodo molecular (PVP-I
2
)
utilizado como anti-sptico e desinfetante. De maneira semelhante ao cloro, a
ao do iodo rpida, mesmo em concentraes baixas (1% I
2
), porm seu
mecanismo de ao no foi completamente elucidado. O iodo penetra na clula
TCV Penna
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30
bacteriana e se complexa a grupos de protenas, nucleotdeos e cidos graxos,
resultando na morte da clula.
A incorporao de 10% w/v de iodo ao complexo polivinil pirrolidona (PVP-I
2
) aumenta o efeito
antimicrobiano do iodo e reduz irritao da pele na aplicao. A soluo aquosa de PVP-I
2

recomendada para assepsia tpica.
VII. Perxido de Hidrognio (H
2
O
2
)
ATIVIDADE ANTIMICROBIANA
Perxido de hidrognio (H
2
O
2
) empregado na qualidade de esterilizante qumico e
desinfetante de alto nvel de artigos termossensveis. Perxido de hidrognio apresenta amplo
espectro de ao e rpida eficcia sobre bactrias gram-positivas e negativas, bacilos da
tuberculose; vrus e fungos. A atividade esporocida dependente da resistncia do esporo
considerado (esporos de Bacillus stearothermophilus apresentam maior resistncia frente a H
2
O
2
em relao aos esporos de Bacillus subtilis). A inativao de microrganismos funo da
concentrao, do tempo de exposio e da temperatura ambiente. Devido sensibilidade luz e
ao calor, perxido de hidrognio instvel s temperaturas superiores a 25
o
C.
MECANISMO DE AO
A ao do perxido de hidrognio est relacionada produo de radicais hidroxilas, no
meio intracelular, conduzindo incapacidade de sobrevivncia microbiana. A atividade da H
2
O
2
pode ser inativada na presena de catalase produzida nos sistemas citocrmicos de
microrganismos aerbios e anaerbios, o que resulta na degradao do perxido de hidrognio em
gua e oxignio
9
.
CARACTERSTICAS IMPORTANTES
Os perxidos so fortes oxidantes, sendo comprovadamente mais eficazes que
permanganato de potssio, e compostos clorados. Apresenta nveis de segurana elevados, j que
um metablito natural do organismo, sendo extremamente miscvel gua. Apresenta grande
versatilidade, pois pode ser usado em diferentes formulaes e a atividade selecionada contra
algum microrganismo definido, simplesmente por ajuste das condies de reao (pH,
temperatura, tempo de reao, catalisador, etc). O perxido de hidrognio apresenta-se na forma
liquida, gasosa e de plasma. altamente oxidante, no sensvel na presena de matria
orgnica, sendo txico, irritante pele e aos olhos.
APLICAES
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31
O perxido de hidrognio apresenta-se na forma liquida, gasosa e de
plasma. altamente oxidante podendo ser ativo na presena de matria orgnica,
sendo txico, irritante pele e aos olhos.
Concentraes 3-4% tm sido aplicadas na desinfeco de ambientes e na
remoo de matria orgnica aderida a artigos, como auxiliar de limpeza
34, 37
.
Pode ser aplicado em ambientes, ar, gua, material de descarte, meios de cultura,
superfcies em geral e como anti-sptico. O seu uso est sendo difundido como substituto do
glutaraldedo.
CONCENTRAO
A concentrao de H
2
O
2
varia com o tipo de utilizao. De acordo com Rutala
24
,
concentraes da soluo de perxido de hidrognio comumente utilizadas variam de 3% a 25%.
Concentrao de H
2
O
2
a 3%, durante seis a oito minutos, recomendada na desinfeco
de endoscpios, Concentraes entre 6% e 7.5% de H
2
O
2
promovem desinfeco de alto nvel
aps exposio de 30-60 minutos e esterilizao quando o tempo de exposio estendida para
seis horas
3
.
EFEITOS ADVERSOS
Sintomas de superexposio so irritao nos olhos, nariz e garganta, processos de
inflamao das crneas, eritemas, erupes drmicas, e manchas na pele (ao alvejante).
VIII. cido Peractico-PAA-(CH
3
COOOH)
Considerado desinfetante de nvel intermedirio e de alto nvel, dependendo
da concentrao e do valor de pH do meio, o cido peractico (CH
3
COOOH)
apresenta as seguintes vantagens:
os produtos de sua decomposio so seguros e incuos (cido actico e oxignio),
decompondo em produtos no txicos (cido actico e oxignio),
permanecendo ativo mesmo na presena de peroxidases e de matria orgnica.
ATIVIDADE MICROBIANA
O cido peractico (CH
3
COOOH) considerado um agente biocida mais
potente, se comparado ao perxido de hidrognio, sendo esporocida, bactericida,
virucida e fungicida mesmo em concentraes baixas.
MECANISMO DE AO
Age de maneira semelhante ao perxido de hidrognio, desnaturando protenas e enzimas,
aumentando a permeabilidade da parede celular e destruindo pontes de sulfeto.
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32
APLICAO
Desinfetante de alto nvel, a baixas temperaturas. Sua aplicao mais conhecida na
desinfeco de equipamentos de hemodilise; sendo tambm utilizado na desinfeco de
endoscpios, instrumentos de diagnsticos e outros materiais termo sensveis. A Portaria n15 de
23 de Agosto de 1988 inclui este principio ativo para uso com finalidade desinfetante e esterilizante
3
.
FORMULAES
cido peractico (PAA) considerado um biocida potente ao valor de pH 2.0, mesmo a
baixas concentraes (0,0001 a 0,2%)
3
.
Concentraes de 100 ppm, na ausncia de matria orgnica, apresentam ao
bactericida e fungicida, ou de 200 a 500 ppm na presena de matria orgnica
15
.
PRECAUES:
Possui um odor menos forte que o glutaraldedo, porm pode causar
irritao aos olhos e s vias respiratrio, necessitando de equipamento de
proteo individual para o seu manuseio.
Acido Peractico + Perxido De Hidrognio
A mistura apresenta atividade semelhante quela desenvolvida por
perxido de hidrognio e cido peractico, liberando molculas de H
2
O
2
, cido
actico. Desinfetante de alto nvel, porm no deve ser utilizado em materiais
como cobre ou bronze, possui boa compatibilidade com plsticos. irritante aos
olhos e rvore respiratrio, necessitando de equipamento de proteo individual
para o seu manuseio. As concentraes recomendadas para uso variam de 0,2 a
0,35% em cido peractico.
O produto comercial utilizado apresenta na composio cido peractico (4.5% v/v) e
perxido de hidrognio (22 % v/v) adicionado de cido actico, 10 mg/L (Minncare, pH 1.3,
Minntech Corporation, MN, USA).
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33
IX-ASSOCIAO DE AGENTES FSICOS E QUMICOS PREVENDO A REDUO DE PRONS A NVEIS SEGUROS.
A maioria dos desinfetantes so inadequados para a denaturao com
segurana de unidades infectantes de prons. Os quatro desinfetantes qumicos
que reduzem o ttluo > 4log
10
so: cloro, fenol, hidrxido de sdio, tiocianato de
guanidina. Mesmo exposio por 1 hora concentrao de 2,5% de hipoclorito de
sdio s inativa 3,3-log
10
de CJD. Hidrxido de sdio 1 N por 1 hora de exposia
mostrou pouca eficincia (reduo < 3-log
10
) . Os prons resistem aos mtodos
tradicionais de esterilizao, incluindo uso de radiao, calor seco, calor mido e
agentes qumicos por: xido de etileno e formaldedo. A utilizao de formaldedo
em concentrao de 10% por uma hora, reduz o titulo de prons em 30 vezes,
sendo um adjuvante interessante no tratamento trmico.
Tratamentos em autoclave s temperaturas de 121
o
C 132
o
C por 60
minutos, ou 134
o
C por 18 minutos resultam em decrscimos de 5 ciclos
logartimicos de prions. Experimentos utilizando temperaturas de 132
o
C por 15
minutos, demonstraram inativao de 6 ciclos logartimicos (cerca de 99,9999%)
do tipo scrapie pron 263K. No entanto, se uma frao mnima permanece
inalterada, esta apresenta excepcional resistncia
39, 40
.
Segundo recomendaes
40
da Organizao Mundial de Sade (OMS) e da
Unio Europia (EU), os tratamentos que asseguram completa inativao dos
prions, rotineiramente utilizados desde 1995 no Centro de Esterilizao de
Materiais em hospitais so:
Tratamento Fsico: Calor mido: tempo de 20 min de exposio temperatura
de 133
o
C presso de 3 bars;
Tratamento Qumico: tempo de exposio por 1 hora soluo concentrada de
hidrxido de sdio;
Tratamento Qumico: tempo de exposio por 1 hora soluo de hipoclorito
de sdio concentrao de 50%.
Em hospitais, procedimentos alternativos e associados tem sido aplicados
na esterilizao e/ou desinfeco de alto nvel de itens crticos e tem mostrado
eficincia atingindo inativao de pelo menos 7 ciclos logartmicos de prons. A
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34
imerso em hidrxido de sdio 0,09 N por 2 horas ou em soluo clorada
concentrada por 1 hora, previamente ao tratamento em autoclave a 133
o
C por 20
min, sob presso, apresentam associados a eficincia de inativar pelo menos 7
ciclos logartmicos de prons. Porm a maior desvantagem dos compostos
qumicos concentrados est na agresso a maioria dos materiais de uso
hospitalar.
Doenas causadas por prons so raras em nosso ambiente, porm os
prons apresentam resistncia aos tratamentos de desinfeco e/ou esterilizao
convencionais. Maiores detalhes sobre os prons sero discutidos no captulo 16.
Normatizao dos desinfetantes no Brasil
Os desinfetantes esterilizantes qumicos pertencem classe denominada saneantes com
ao antimicrobiana. Tais produtos esto submetidos ao regime de vigilncia sanitria conforme as
Leis 6360/76 e 6437/77.
Para serem comercializados no pas devem ser registrados junto ao
Ministrio da Sade. Este registro possui a validade de cinco anos, e ao fim deste
prazo, o fabricante deve revalid-lo.
As normas especficas para o registro dos saneantes com ao
antimicrobiana so objeto da Portaria DISAD 15/88 (Brasil, 1988), que contm as
definies, classificao e requisitos especficos e de rotulagem. So descritos os
microorganismos frente aos quais os produtos devem apresentar atividade e
includa lista de princpios ativos permitidos e respectivos efeitos txicos.
De acordo com a Portaria acima referida, os saneantes com ao
antimicrobiana so classificados, no nosso pas, da seguinte maneira:
DESODORIZANTES
Desinfetantes
1 - de uso geral;
2 - para indstria alimentcia;
3 - para piscinas;
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35
4 - para lactrios;
5 - hospitalares para superfcie fixas;
6 - hospitalares para artigos semicrticos.
ESTERILIZANTES
Em relao ao controle de qualidade dos produtos aqui abrangidos, o Instituto
Nacional de Controle em Sade da Fundao Oswaldo Cruz (INCQS/FIOCRUZ)
o rgo de referncia Nacional para as questes tecnolgicas e normativas
referentes aos insumos, produtos, ambiente e servios vinculados Vigilncia
Sanitria. Na rea dos saneantes, o INCQS realiza anlises laboratoriais para
verificao antimicrobiana, avaliao qumica e toxicolgica, em atendimento s
exigncias legais vigentes e nos programas sistemticos de avaliao da
qualidade de produtos.
EFICINCIA DE DESINFETANTES
Devido ao nmero crescente de casos de infeces hospitalares, torna-se
de extrema importncia estabelecer programas de sanitizao que implicam na
escolha de agentes desinfetantes adequados, bem como de sua aplicao de
maneira eficaz.
A fim de reduzir custos e falhas humanas no preparo e utilizao das solues
sanitizantes, necessrio padronizar um mnimo de produtos qumicos de eficcia comprovada,
definir sua concentrao e diluio indicada e a finalidade a que se destinam.
Pretendeu-se avaliar a eficcia de agentes desinfetantes de uso hospitalar, (Tabela 1)
atravs da determinao da concentrao mnima inibitria (CMI). As cepas microbianas testadas
foram: Bacillus subtilis var. globigii ATCC 9372, Bacillus stearothermophilus ATCC 7953,
Escherichia coli ATCC 25922, Staphylococcus aureus ATCC 25923, Enterobacter cloacae IAL
1976 (registro do Instituto Adolfo Lutz), Serratia marcescens IAL 1478 (registro do Instituto Adolfo
Lutz) e Acinetobacter calcoaceticus ATCC 19606, IAL 124 (registro do Instituto Adolfo Lutz). A
carga microbiana inicialmente presente foi superior a 10
6
unidades formadoras de colnias por ml
de meio.
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36
Atravs da determinao da Concentrao Mnima Inibitria (CMI), e da
classificao do espectro de atividade de cada agente esterilizante, torna-se
possvel esboar um programa de limpeza, desinfeco e esterilizao no
ambiente hospitalar, principalmente de materiais reutilizveis.
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37
TABELA 1- Solues dos agentes qumicos, concentraes e valores de pH, testados para a concentrao mnima
inibitria (CMI).
Agente Qumico Solution
Concentrations (%)
Solution
pH values
Gluconato de Clorexidina 4.0, 0.1, 1.0 6.18 - 6.95
QACs Compostos de amnio quaternrio: Cloreto de
benzalcnio
0.5 6.3 - 6.9
Glutaraldedo 2.0, 1.5 7.14
Formaldedo 0.5, 2.3 7.79
Alcohol: Etanol (EtOH) ou Isopropanol 70.0
70.0
5.50 (EtOH)
6.59 (Isopropanol)
Etanol (EtOH) com glicerina 70.0 (EtOH) + 2.0 (glicerina) 5.94
Ethanol (EtOH) com iodo 70.0 (EtOH) + 1.0 (I
2
)
70.0 (EtOH) + 10.0 (I
2
)
5.50
5.50
Pvp-I
2
tpico: Aquosa: polivinilpirolidona iodo - Pvp-I
2
Pvp-I
2
soap Aquosa: Pvp-I
2
+ sulfato de lauril eter (25%
w/v)
Pvp-I
2
Alcolico: Pvp-I
2
+ ethanol (70% v/v)
10.0 (I
2
)
10.0 (I
2
)
10.0 (I
2
)
5.32 5.95
5.72
2.04 2.90
CRAs Compostos liberadores de cloro Hipoclorito de sdio
(NaOCl) + tampo de fosfato
1.0 cloro total livre
0.1 cloro total livre
> 9.0
7.0 7.6
NaDCC - dicloro-isocianrico 1.0 cloro total livre 6.70
H
2
O
2
- Perxido dde Hidrognio 4.0 3.3
cido Peractico (PAA) a 3.7%. pH = 3.03. 3.7 3.03
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38
Tcnica da concentrao mnima inibitria (CMI)
Avaliao do espectro de ao do agente qumico, e determinao do
tempo de tempo mnimo inibitrio quanto resistncia dos microrganismos
estudados
18, 19, 34, 35
.
A determinao da concentrao inibitria mnima (CIM) para cada agente
qumico realizada utilizando-se o mtodo clssico de diluio sucessiva.
Seleciona-se doze tubos com rosca (10 x 100mm) e distribui-se 1mL de meio de
cultura, Tryptic Soy Broth (TSB) para cada tubo exceto para um deles. Autoclava-
se os tubos sob presso constante e temperatura de 121
o
C. Numera-se os tubos
de 1 a 12, lembrando que o frasco nmero 1 o frasco vazio. Para o primeiro e o
segundo da srie adicionar 1mL da soluo do agente qumico sanitizante em
teste; agitar o tubo 2 e transferir 1mL para o tubo 3. Repetir a transferncia
sucessiva at o tubo 11. Adiciona-se para todos os frascos exceto para o de
nmero 11 o inculo (microrganismo em teste) em um volume de 0,1mL. Incubar
a temperatura tima de crescimento por 24 e 48h. Proceder leitura, o CIM o
tubo de maior diluio onde se verifica a ausncia de crescimento bacteriano.
Observaes:
Tubo 11: controle negativo (TSB + antimicrobiano)
Tubo 12: controle positivo (TSB + inculo)
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39
Em seguida verifica-se esquema ilustrativo da tcnica:
1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12
Preparao do inculo
Repicar em 3 tubos de Plate Count Agar (PCA) inclinado cepa do
microrganismo a ser utilizado e incubar a temperatura tima de crescimento. Aps
esse perodo, ressuspender crescimento de dois tubos com 5 mL de SF cada um
(reservar o terceiro para repiques futuros). Receber em 90 mL de soluo
fisiolgica (SF) com prolas e agitador magntico, esta suspenso me (10
0
)

submetida agitao magntica por 30 minutos. Transfere-se 1 mL dessa


suspenso para frasco com 100 mL de SF, agitador magntico e prolas
(suspenso 10
-2
), esta nova suspenso submetida agitao magntica por 20
minutos. Este procedimento deve ser repetido at que se obtenha suspenses 10
-
4
e 10
-6
, essas devem ser semeadas em profundidade com PCA (45
o
C). Aps a
solidificao do meio, incubar as placas em temperatura tima de crescimento do
microrganismo podendo-se assim avaliar o nmero de bactrias presentes na
soluo inicialmente (UFC/mL).
ANTIMICROBIANO
TSB
INCULO
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40
TABELA 2: INTERVALOS DE CONCENTRAO MNIMA INIBITRIA (CMI) para solues de agentes qumicos para inativar
populaes bacterianas superiores a 10
6
UFC/mL (6-log
10
).
Bacteria Bacillus
stearothermophilus
Bacillus subtilis
Acinetobacter
calcoaceticus
Enterobacter
cloacae
Escherichia coli Serratia
marcescens
Staphylococcus
aureus
MIC
mg/L % mg/L % mg/L % mg/L % mg/L % mg/L % mg/L %
Agente
QACs 156 0.0156 117 0.0117 9.77 0.0010 78 0.0078 59 0.0059 59 0.0059 59 0.0059
Clorhexidine * * 10000 1.0 63 0.0063 71 0.0071 71 0.0071 141 0.0141 71 0.0071
Glutaraldedo 1875 0.1875 3250 0.325 3250 0.325 3250 0.325 3250 0.325 1375 0.1375 1875 0.1875
Formaldedo 246 0.0246 235 0.0235 39 0.0039 117 0.0117 156 0.0156 58.5 0.0059 156 0.0156
lcool 87500 8.75 87500 8.75 43750 4.375 87500 8.75 65650 6.565 43750 4.375 87500 8.75
EtOH (+ glicerina) * * * * 87500 8.75 87500 8.75 87500 8.75 87500 8.75 87500 8.75
EtOH (+ I
2
1%) 87500 8.75 87500 8.75 43750 4.375 87500 8.75 43750 4.375 43750 4.375 43750 4.375
I
2
1% + EtOH 1250 0.125 1250 0.125 1250 0.125 1250 0.125 625 0.0625 625 0.0625 625 0.0625
EtOH (+ I
2
10%) - - 43750 4.375 - - 43750 4.375 - - - - 21870 2.187
I
2
10 % + EtOH - - 6250 0.625 - - 6250 0.625 - - - - 3125 0.313
Pvp-I
2
-tpico 12500 1.25 50000 5.0 12500 1.25 6250 0.625 12500 1.25 6250 0.625 6250 0.625
Pvp-I
2
sabo 6250 0.625 50000 5.0 6250 0.625 6250 0.625 6250 0.625 6250 0.625 6250 0.625
Pvp-I
2
alcolico 12500 1.25 25000 2.5 12500 1.25 3125 0.3125 1560 0.156 3125 0.3125 3125 0.3125
CRAs 1% pH > 9 4491 0.4491 4491 0.4491 867 0.0867 420 0.0420 1129 0.1129 474 0.0474 945 0.0945
CRAs 0.1% pH 7 621 0.0621 621 0.0621 150 0.015 150 0.015 150 0.015 150 0.015 150 0.015
NaDCC 5990 0.599 5990 0.599 1123 0.1123 374 0.0374 1123 0.1123 187 0.0187 749 0.0749
H
2
O
2 1875 0.1875 1875 0.1875 469 0.0469 1250 0.125 2505 0.250 625 0.0625 938 0.0938
cido Peractico 4620 0.4620 18500 1.85 9250 0.925 9250 0.925 2310 0.231 9250 0.925 4620 0.462
(*sem eficcia)
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41
RESULTADOS
Os principais agentes desinfetantes qumicos inseridos em produtos formulados para o
comrcio, so largamente empregados em estabelecimentos da sade para aplicaes tpicas
(anti-spticos) e em superfcies inanimadas de diferentes configuraes, dimenses e natureza
qumica. Os resultados das concentraes mnimas inibitrias (CMI) para os agentes qumicos
testados frente aos microrganismos escolhidos esto apresentados na Tabela 2.
Gluconato de Clorexidina 4%
No Brasil, a soluo de clorexidina a 4% contendo 4% de lcool, para
prevenir contaminao cruzada com proteus e pseudomonas
3
, utilizada na
degerminao das mos por mdicos e enfermeiros em reas pr-cirrgicas.
Uma soluo alcolica de clorexidina a 0.5% indicada como anti-sptica
tpica em substituio soluo de PVP-I
2
em casos alrgicos e no banho de
recm nascidos.
A soluo de clorexidina a 0.006% igualmente utilizada na limpeza de
lentes de contacto (0.005 - 0.006%). Para reduzir populaes superiores a 5 log
10
de S. marcescens, a CMI de 0.003% (24h de exposio) mostrou-se equivalente
imerso concentrao de 0.05% por 10 min de exposio
7, 13
. Aps 24 h de
contato, S. marcescens manifestou crescimento em solues concentrao
variando entre 0.001% e 0.006%
7, 13
.
Na pesquisa conduzida, o gluconato de clorexidina no apresentou
atividade esporocida. A cepa de S. marcescens apresentou maior resistncia do
que as demais cepas vegetativas, mostrando capacidade de crescimento ao
intervalo de concentrao entre 0,0125-0,0156% (125-156 mg/L), duas vezes o
intervalo (0.0063-0.0071% [63-71 mg/L]) observado para E. cloacae, E. coli e S.
aureus.
TCV Penna
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42
Amnio Quartenrio (QACs)
Compostos de amnio quaternrio no so esporocidas, porm inibem os
estgios de germinao das formas esporuladas, assim como lcool e clorexidina.
A CMI no intervalo de 0.0117-0.0156% (117-156 mg/L) para B. subtilis e B.
stearothermophilus foi o dobro daquele exibido para E. cloacae, E. coli, S. aureus
e S. marcescens, CIM variando de 0.0059-0.0078% (59-78 mg/L), que por sua vez
foi pelo menos cinco vezes maior em relao aquele observado (MIC = 9.77 mg/L)
para A. calcoaceticus.
Compostos de amnio quartenrio (QACs) possuem em sua molcula uma regio
hidroflica e uma regio hidrofbica. Dependendo do meio, a ionizao desse composto, confere o
carter catinico, aninico ou anftero. QACs so geralmente utilizados como detergentes
catinicos, anti-spticos e desinfetantes. Podem ser aplicados clinicamente na desinfeco de
pele, mucosas ou ainda em superfcies e reas no crticas. Em associao ao formaldedo so
utilizados como desodorizantes.
Em reas de estabelecimentos da sade, QACs so considerados
desinfetantes de baixo nvel, e so aplicados na concentrao de 0.2% (2000
mg/L), sem formaldedo na sua formulao
3
. QACS so principalmente aplicados
como anti-spticos e desinfetantes devido caracterstica no agressiva dos
compostos de amnio, permanecendo atividade residual aps aplicao. QACs
so utilizados em substituio aos compostos de fenol. Em enfermarias de
estabelecimentos de sade, os QCAs devem ser aplicados na desinfeo de
camas e colches; e superfcies em geral com finalidade de minimizar a
contaminao cruzada e o risco da super populao excedente, fato que ocorre
freqentemente nos hospitais do sistema SUS.
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43
Glutaraldedo (1,5-pentanodial)
Glutaraldedo exibe amplo espectro de ao antimicrobiana (bactericida,
esporocida, fungicida, virucida), pois apresenta elevada capacidade de
desinfeco (alto nvel) e esterilizante. A soluo concentrao de 2.0% ativada
(pH = 8.3) aplicada por perodo de 6-10 h recomendada para a esterilizao de
artigos e superfcies crticos e semi crticos
3
.
A concentrao inibitria mnima (CIM) da soluo no intervalo de 0.275% - 0.375% (2750 -
3750 mg/L) de glutaraldedo reduziu 09 ciclos logartmicos de B.subtilis, e pelo menos 8 ciclos
logartmicos de A.calcoaceticus, E.cloacae, E.coli, S.marcencens. As clulas vegetativas de
S.aureus e de S. marcescens apresentaram redues de 8 ciclos logartmicos, quando expostas ao
intervalo de 0.1375 -0.1875% (1375 1875 mg/L), que caracterizou a CMI para reduzir 06 ciclos
logartmicos da populao de B.stearothermophilus
18, 19, 35
. Esporos de B.subtilis, microrganismo
padro de teste frente a desinfetantes de alto nvel
3, 9, 24, 25
, foram reduzidos em 9 ciclos
logartmicos, em concentraes 1,5 vezes maior.
Cuidados Especiais:
Apesar de sua efetiva capacidade antimicrobiana, e custo/ benefcio vantajoso, apresenta
severos efeitos colaterais que demandam ambiente especfico com boa circulao de ar,
vestimentas especiais (mscaras e luvas) para manter padres de trabalho com mxima
segurana contra eventuais acidentes de percurso. Faz-se necessrio igualmente neutralizao
da soluo antes de seu descarte e o enxge em gua fluente para a remoo de todo resduo
que possa a causar queimadura na utilizao do artigo considerado
16, 38
.
TCV Penna
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44
Formaldedo (monoaldede)
O uso do formaldedo no Brasil
3
permitido para desinfeco de alto nvel
de artigos crticos, semi-crticos e no crticos. Dentre os artigos crticos, as
mquinas dializadoras (dializadores reutilizveis); drenos e tubos em geral,
cateteres; laparoscpios; artroscpios, ventiloscpios, itens de acrlico. Os artigos
crticos devem permanecer imersos por 18 h em soluo concentrao de 8% de
soluo alcolica de formaldedo, seguida de enxge em gua autoclavada, em
soluo fisiolgica esterilizada ou em lcool (70%), prevenindo re-contaminao.
Na concentrao de 1% por 18 h de contacto, a soluo aquosa empregada na
descontaminao das membranas de osmose reversa, anteriormente
preparao de solues parenterais. O enxge se faz com gua para injeo ou
tambm denominada Water for Injection (WFI), em abundncia. Ativo na presena
de material orgnico, sendo estvel na presena de detergentes.
Formaldedo igualmente aplicado na desinfeco do ar circulante devido
atividade antimicrobiana (bactericida, virucida, fungicida). Observou-se que o
contato por 18-24 h concentrao de 0.5 a 1.0% de soluo aquosa de
formaldedo provocou a reduo de 6-9 log
10
de S. marcescens (CMI = 58.5 mg/L)
de E. cloacae (CMI =117 mg/L); de S. aureus (CMI = 156 mg/L) e de E. coli; (CMI
= 235 mg/L). A CMI de 246 mg/L reduziu 09 ciclos de B. subtilis e 06 de B.
stearothermophilus.
Comentrios:
A soluo alcolica de formaldedo a 8% corresponde concentrao de
10% de formaldedo em soluo aquosa, recentemente preparada de soluo
concentrada a 37% (w/v) de formaldedo, sendo que a destilao industrial do
mesmo resulta em soluo concentrada (37%), sem vapor irritante ou qualquer
toxicidade, para uso nos estabelecimentos de sade e industriais.
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45
Formaldedo utilizado principalmente para descontaminao, atravs de
fumigao de ambientes fechados (cabines de segurana, salas diversas, salas de
envase em indstria de medicamentos estreis, biotrios, hospitais).
Na rea hospitalar, tem, ainda, aplicao como esterilizante de artigos
crticos termossensveis e na desinfeco de artigos semicrticos, sendo tambm
usado para a desinfeco de capilares dos sistemas dialisadores.
Pode ser igualmente administrado como anti-sptico das vias urinrias
(dilise), s concentraes entre 100 a 200 mg/L
17,38
na bexiga. Os agentes
residuais do formaldedo no organismo abrandam peritonites severas.
Em funo da sua eventual toxicidade (ao sistema respiratrio) e carter irritante, pele
(eczema) no recomendado para desinfeco rotineira de superfcies, equipamento e vidraria,
podendo ser utilizado em situaes especficas.
O formaldedo pode ser usado como esterilizante, tanto no estado lquido como no gasoso.
Usualmente, o tempo mnimo de exposio de 18 horas, tanto para a soluo alcolica a 8%
quanto para soluo aquosa a 10%.
As desvantagens do uso do formaldedo, so: atividade esporocida lenta, exigindo tempo
de contato longo; eventual toxicidade (ao sistema respiratrio por vapores) e carter irritante pele
(eczema); agente potencialmente txico e cancergeno. Apesar de sua antiga utilizao no
tratamento de infeces urinrias e peritoneais
9, 38
, as solues de formaldedo no so
recomendadas para desinfeco rotineira de superfcies, equipamento e vidraria. Essas
formulaes so destinadas a aplicaes especficas.
TCV Penna
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46
Etanol 70% v/v e Isopropanol 70% v/v
Apesar de sua vasta utilizao, assim como os compostos de amnio quaternrio e
clorexidina, etanol e isopropanol concentrao de 70% no apresentam atividade esporocida.
Porm, sua eficcia se restringe inibio dos estgios de germinao de esporos bacterianos.
Muitos lcoois tm se mostrado antimicrobianos efetivos, lcool etlico e
isoproplico so os mais utilizados, ambos exibem um rpido espectro de ao
frente a clulas vegetativas, vrus e fungos, promovem a ativao dos esporos,
inibem o crescimento das clulas germinativas. O isopropanol apresenta maior
eficcia frente s bactrias por possuir propriedades lipoflicas, mas menos ativo
contra vrus hidroflicos. Etanol o lcool de escolha no Brasil, pois um
subproduto da fermentao da cana de acar, obtido por destilao do mosto,
facilmente encontrado e de baixo custo.
Para reduzir pelo menos 6 ciclos logartmicos (06 log
10
) das populaes
bacterianas testadas, frente ao lcool 70% (v/v), as cepas de maior sensibilidade
foram S.marcescens e A.calcoaceticus (MIC=4,4%). S.aureus e E. cloacae,
apresentaram o dobro de resistncia (MIC=8,75%), equivalente quela observada
para as cepas esporo formadoras de B.stearothermophilus e B.subtilis.
Os lcoois no so recomendados para a limpeza de ambientes, mas so largamente
utilizados na desinfeco de superfcies, equipamento e na descontaminao da pele intacta.
Trautmann et al. (2001)
31
observou que a freqncia de cepas de bactrias gram-negativas foi
reduzida e raramente isoladas das mos dos funcionrios do hospital universitrio, por terem sido
as mos sanitizadas aps o contacto com pacientes. Cada funcionrio carregava consigo um
frasco borrifador com lcool a 70%.
Os lcoois apresentam a desvantagem de danificar tubos plsticos, artigos de acrlico e de
borracha. No Hospital Santa Cruz
8
, na cidade de So Paulo, na rea centralizada para limpeza e
desinfeco, aps a lavagem com detergente enzimtico, a imerso de artigos semi-crticos e no
crticos em lcool a 70% por 18-24 h tem mostrado resultados surpreendentes, eliminando o
emprego de solues de fenol e de formaldedo. Consequentemente, a eficincia da limpeza foi um
estgio importantssimo para garantir a eficincia do lcool, havendo reduo do custo total de
produtos adquiridos mensalmente e aumento do benefcio indireto ao paciente. O consumo de
1800L/ms de lcool substituiu 2550L/ ms de fenol sinttico, e reduziu o custo total em cinco
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47
vezes
8
.
Os lcoois utilizados como solventes de outras substncias qumicas pode ter sua ao
germicida reduzida ou potencializada, dependendo das caractersticas qumicas associadas entre
os componentes dissolvidos.
A presena de 2% de glicerina (emoliente para mos e antebraos) em lcool 70% (lcool
glicerinado) inibe a atividade do lcool.
A adio de 10% de iodo no lcool 70% potencializou a atividade bactericida do lcool e
reduziu a CMI para a metade (CIM = 4.37%) para B. subtilis e E. cloacae, e diminuiu em 25% (CMI
=2.187%) em relao a S. aureus.
lcool 70% tem sido incorporado s solues desinfetantes (PVP-I
2
,
chlorhexidine, formaldedo) para prevenir a contaminao com bactrias gram-
negativas, que so responsveis por biofilmes que se formam e impedem o livre
acesso do desinfetante superfcie considerada e facilitam a contaminao
cruzada. lcool pode potencializar a ao do PVP-I
2
como anti-sptico tpico na
assepsia da pele intacta, assim tambm facilitar a penetrao de clorexidina e a
sua ao residual nas mos e antebraos, aps a lavagem mecnica com
detergente. A prtica de lavagem das mos e desinfeco posterior com lcool
(misturado ou no com clorexidina ou PVP-I
2
) previne a disseminao de agentes
causadores de surtos de infeco em reas da sade, assim como, em
estabelecimentos de preparao de alimentos. Conrad (2001)
6
constatou o dobro
de consumo de lcool em hospital - escola de 260 leitos (Sua), sem causar
aumento de leses pele, devido ao uso do lcool incorporado ao treinamento da
assepsia das mos.
Complexo iodo - polivinil pirrolidona (PVP-I
2
)
As solues aquosas de iodo so instveis, pelo menos sete espcies de
iodo esto presentes e em equilbrio com iodo molecular (I
2
). O desenvolvimento
de iodforos (carregadores de iodo ou liberadores de iodo) estabiliza o
halogneo. Iodforos so complexos de iodo e um agente solubilizante ou
carreador, que agem como liberadores de iodo ativo. O complexo polivinil
pirrolidona adicionado de iodo molecular (PVP-I
2
) utilizado como anti-sptico e
desinfetante. De maneira semelhante ao cloro, a ao do iodo rpida, mesmo
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48
em concentraes baixas (1% I
2
), porm seu mecanismo de ao no foi
completamente elucidado. O iodo penetra na clula bacteriana e se complexa a
grupos de protenas, nucleotdeos e cidos graxos, resultando na morte da clula.
A incorporao de 10% w/v de iodo ao complexo polivinil pirrolidona (PVP-I
2
) aumenta o
efeito antimicrobiano do iodo e reduz irritao da pele na aplicao da soluo. A soluo aquosa
de PVP-I
2
recomendada para assepsia tpica; quando adicionada de detergente no-inico, a
soluo degermante; o complexo alcolico PVP-I
2
(adicionado ou no de clorexidina) indicado
na delimitao do campo cirrgico, sem causar leses, irritaes ou alergias
3
. Para solues
aquosas ou alcolicas de PVP-I
2
(tpico ou sabo) a CMI variou entre 0.625 e 1.250% para A.
calcoaceticus e B. stearothermophilus, sendo o maior intervalo CMI de 2.5-5.0% em relao a B.
subtilis, independentemente da soluo.
TCV Penna
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49
COMPOSTOS LIBERADORES DE CLORO ATIVO (CRAs)
Existe um nmero razovel de compostos liberadores de cloro ativo disponveis para
alvejamento e desinfeco em diversas reas. Os compostos mais utilizados so aqueles
inorgnicos, como os hipocloritos de sdio (NaOCl) e de clcio; e os compostos orgnicos como
dixido de cloro e cido dicloisocianrico (NaDCC). Estes CRAs so accessveis, de fcil
manipulao, no txicos, e compatveis com detergentes aninicos e no inicos.
NaOCl e NaDCC so extensivamente empregados nas aplicaes
asspticas e desinfetantes; assim como, na descontaminao de superfcies
contaminados por material orgnico (como sangue), em laboratrios e
estabelecimentos de sade
3, 9, 24
. Apresentam parcial reduo da atividade
antimicrobiana (bactericida, virucida e fungicida) quando em contato com material
orgnico, durante a exposio da soluo a cu aberto e armazenamento longo.
NaDCC apresenta-se na forma de pastilhas, que liberam o cloro gradualmente na
presena de gua, ao valor de pH que se mantm prximo do neutro. NaDCC
apresenta vantagem de gerar concentraes expressivas de cloro livre mesmo na
presena de material orgnico, que pouco afeta sua atividade. Em gua, o
hipoclorito de sdio sofre ionizao (sdio e hipoclorito), que estabelece um
equilbrio com cido hipocloroso. A forma ativa de hipoclorito de sdio (NaOCl) o
cido hipocloroso (HOCL), que formado em solues aos valores de pH entre 5
e 8. Os ons hipoclorito (OCL
-
) predominam nas solues alcalinas e constituem a
forma menos ativa. Entre pH 4 e 8, prevalece a forma de cido hipocloroso, em pH
9, prevalece a forma de hipoclorito. A eficcia do cloro ativo decresce com o
aumento do valor de pH e vice-versa, paralelamente concentrao da forma no
dissociada do cido hipocloroso. Em elevadas concentraes CRAs so
esporocidas, dependendo do pH e da concentrao de cloro disponvel.
Os ensaios foram realizados com hipoclorito de sdio (NaOCl), diludo em
gua, ao valor de pH final em torno de 9. B.subtilis e B.stearothermophilus
(MIC=4625 5990 mg/L) apresentaram-se mais resistentes com redues
superiores a 9 e 7 ciclos logartmicos das populaes, respectivamente. E.coli
destacou-se por apresentar resistncia elevada (MIC=1497mg/L) apenas 4 vezes
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50
mais sensvel que as populaes esporo formadoras. As populaes mais
sensveis foram de S.marcencens (MIC=187,2mg/L) e de E.cloacae
(MIC=289mg/L) para reduo de 8 ciclos logartmicos das populaes iniciais,
portanto 30 vezes mais sensveis que as cepas esporuladas e 08 vezes mais
sensveis que populaes de E. coli.
Intervalos de CMI muito prximos foram observados para solues de
NaOCl (pH> 9) e NaDCC s concentraes iniciais entre 8000 - 9000 mg/L de
cloro livre. As cepas gram-negativas mais resistentes foram E. coli and A.
calcoaceticus que exibiram CMI no intervalo de (1109.38 - 1497 mg/L); quatro
vezes mais sensveis do que as cepas esporo formadoras de B.subtilis e de
B.stearothermophilus, para um intervalo de CMI entre 4000 5000 mg/L. Para
valor de pH ajustado a neutro (7,0), os valores de CMI foram reduzidos em 1/10
devido elevada prevalncia da forma ativa de hipoclorito (HOCl). Para solues
concentraes 0.1% NaOCl, estabilizadas ao pH neutro, o intervalo da
concentrao mnima inibitria para as formas vegetativas de bactria CMI = 150-
300 mg/L, sendo que para esporos, a CMI = 621 mg/L.
Comentrios
Solues comerciais de NaOCl devem apresentar tampo com capacidade de ajuste na
diluio com gua para atingir o valor de pH 7.0 ou inferior, e favorecer a formao da forma ativa
de cido hipocloroso (HOCL), que formado em solues aos valores de pH entre 5 e 8.
No Brasil, as solues de NaOCl and NaDCC concentrao de 1% (8000 mg/L de cloro
livre) so aplicadas na desinfeco de superfcies de reas crticas em hospitais (unidade de
terapia intensiva; enfermarias, berrios, salas de cirurgias, ambientes de procedimentos especiais
como cateterismo). So tambm adicionadas gua previamente utilizao na limpeza de
ambientes e superfcies. Solues de NaOCl a 5000 mg/L (0.5%) empregadas na desinfeco de
material semi-crtico para inalao ou de oxigeno terapia; e de anestesia (mscaras, tubulaes..)
por 18 s 24h
3, 8
. Solues de NaOCl, estabilizadas com cloreto de sdio, podem ser aplicadas na
desinfeco de: (i) mamadeiras nos lactrios (frascos e bicos) concentrao de 0.0125% (125
mg/L), (ii) talheres e utenslios de alimentao, concentrao de 0.025% (250 mg/L), (iii) artigos
com resduos de material orgnico (sangue, vmitos, mucosas, fezes, urina) potencialmente
contaminados por vrus, concentrao de 1.0% (10000 mg/L)
23, 24
, (iv) tanques para a preparao
de solues parenterais, concentrao de 0.1% (1000 mg/L). gua utilizada no enxge de
material crtico, principalmente daqueles submetidos desinfeco de alto nvel com aldedos,
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51
deve ser totalmente livre de bactrias gram-negativas, deve apresentar concentrao de NaOCl
residual no intervalo entre 0.2 e 0.5 mg/L
3
.
Perxido de Hidrognio (H
2
O
2
)
A soluo padro de H
2
O
2
a 4% w/v (40000 mg/L) reduziu populaes
maiores que 08 log
10
, para intervalos de CMI de 0.125 a 0.25% em relao a B.
subtilis e B. stearothermophilus; CMI de 0.125 a 0.376% para E. coli e E. cloacae;
CMI de 0.0625 to 0.0938% para S. marcescens, S. aureus; CMI a 0.0313 to
0.0625% para A. calcoaceticus.
Comentrios:
O perxido de hidrognio um agente oxidante potente, produzindo radicais livres, que
atacam componentes celulares essenciais, incluindo lipdeos, protenas e DNA. H
2
O
2
possui um
bom espectro de atividade frente a vrus, bactrias, leveduras e esporos bacterianos. Mostra
atividade mais eficaz frente a bactrias gram-positivas, porm a presena de catalase ou de outras
peroxidases no ambiente intracelular pode aumentar a tolerncia do microorganismo na presena
do agente em baixas concentraes. Concentraes mais elevadas de perxido (10-30%) e maior
tempo de contato so pr-requisitos para atividade esporocida. gua oxigenada no decomposta
na presena de material orgnico, a no ser catalase, produzida por microrganismos catalase
positivas. Concentraes superiores a 10% de H
2
O
2
podem ser utilizadas na esterilizao de itens
semi-crticos e no-crticos, pois a atividade esporocida da soluo mantida por 18-24 h de
exposio. Perxido de hidrognio um agente no txico, facilmente manipulado e aplicado a
itens no-crticos. Resduos que permanecem na superfcie metlica de materiais, na aplicao
rotineira de H
2
O
2
, no causam danos s caractersticas fsicas dos mesmos. H
2
O
2
tem sido
igualmente utilizada no tratamento de grandes volumes de gua servida (esgoto), na desinfeco
de gua utilizada na lavagem de alimentos em cozinhas industriais e hospitalares
3
.
cido Peractico (CH
3
COOOH)
Solues de cido peractico (PAA) concentrao de 3% (pH 3.0),
reduziu populaes maiores que 9 ciclos logartmicos, para um intervalo de CMI
entre 0.9 e 1.85 % frente a B. subtilis, e metade desta CIM = 0.46% foi suficiente
TCV Penna
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52
para reduzir populaes (>6-7 log
10
) de S. aureus e B. stearothermophilus, aps
24 h de contato.
cido peractico (PAA) considerado um biocida potente ao valor de pH
2.0, decompondo em produtos no txicos (cido actico e oxignio), e
permanece ativo mesmo na presena de peroxidases. Entretanto, Sagripanti and
Bonifacino 26 demonstraram que a presena de soro concentrao de 5-25%
reduz a atividade esporocida do PAA em at 1000 vezes, devido ao aumento no
valor de pH para 5.0.
Rutala
24
comentou que as solues estabilizadas a 2% de glutaraldedo; a
6% de perxido de hidrognio e a 3% de cido peractico so classificados como
agentes qumicos esterilizantes quando aplicados aps rigoroso procedimento de
limpeza.
Esterilizao.
Esterilizao o processo que objetiva destruir todas as formas de vida com
capacidade de desenvolvimento durante os estgios de conservao e de utilizao
do produto. Conservar manter as caractersticas do produto durante a vida til de
armazenamento (vida de prateleira) temperatura ambiente.
Esterilidade ou nvel de segurana a incapacidade de desenvolvimento
das formas sobreviventes ao processo de esterilizao, durante a conservao e
utilizao de um produto. A manuteno do nvel de esterilidade conferido a um
produto garante o prolongamento da vida til de prateleira e depende das operaes
pr-esterilizao, de esterilizao e ps-esterilizao.
Os mtodos de esterilizao permitem assegurar nveis de esterilidade compatveis s
caractersticas exigidas em produtos farmacuticos, mdico-hospitalares e alimentcios. O mtodo
escolhido depende da natureza e da carga microbiana inicialmente presente no item considerado.
O calor, a filtrao, a radiao e o xido de etileno podem ser citados como agentes esterilizantes
33
.
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53
Esterilizao a vapor: De todos os mtodos avaliados para a
esterilizao, o calor mido na forma de vapor saturado sob presso o agente
esporocida mais utilizado e o mais confivel. Este mtodo no txico e no
custoso. O vapor aquece rapidamente o material e penetra na sua estrutura.
Considerando estes fatos, a esterilizao a vapor poderia ser utilizada sempre
que possvel para todos os itens que no so sensveis ao calor e umidade (ex
equipamento para anestesia e terapia respiratria), mesmo na desinfeco de
artigos semi-crticos e no-crticos. O princpio bsico da esterilizao a vapor,
quando feito em uma autoclave, o tratamento de cada item com vapor a uma
temperatura e presso adequados, por um tempo especfico, com a finalidade de
destruir os microorganismos por meio de coagulao irreversvel e desnaturao
das enzimas e estruturas proticas. Consequentemente, so quatro os
parmetros para esterilizao a vapor: temperatura, presso, tempo e
concentrao de vapor. O vapor ideal para esterilizao 100% saturado, com
gua no saturada na forma de um fina nvoa. A produo de presso a altas
temperaturas fundamental para matar os microorganismos rapidamente. A
temperatura especfica deve ser obtida para garantir a atividade microbicida. As
duas temperaturas mais utilizadas para esterilizao a vapor so 121
0
C e 134
0
C.
Esporos de Bacillus stearothermophilus so utilizados para monitorar a eficincia
da esterilizao
33
. Geralmente o tempo de exposio necessrio para esterilizar
suprimentos empacotados de hospitais de 20-30 minutos a 121
0
C em autoclave
convencional ou 4 minutos a 134
0
C em cmara provida de pr-pulsos de vcuo e
secagem final. O autoclave deve ser validado diariamente quanto
operacionalidade: remoo total do ar, qualidade do vapor, temperatura, presso
e tempo para assegurar o nvel de esterilidade desejada.
Esterilizao por xido de Etileno. O xido de etileno (EtO) um gs
incolor, inodoro, inflamvel, explosivo e potencialmente carcinognico. Porm,
quando o EtO misturado a um gs inerte, sob determinadas condies, tem sido
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54
utilizado freqentemente para esterilizar produtos mdicos e odontolgicos que
no podem ser esterilizados a vapor (termossensveis). Misturando EtO (10 a
12%) ao dixido de carbono ou clorofluorcarbono (CFC), os riscos de exploso e
incndio so minimizados a nveis seguros. Devido aos danos do CFC camada
de oznio, em 31 de dezembro de 1995 foi proibida a produo e utilizao do
CFC. Os hospitais e estabelecimentos de esterilizao tem trs misturas
alternativas para uso: 8.5% EtO em 91.5% de dixido de carbono; EtO misturado
com hidrofluorcarbonos e 100% ETO (usado na presena de nitrognio).
A atividade microbicida do EtO considerado ser resultante da
alquilao das protenas, DNA e RNA, impedindo a multiplicao celular. xido
de etileno inativa todos os microorganismos, embora esporos bacterianos
especialmente Bacillus subitilis so mais resistentes que outro microorganismos.
Conseqentemente, o Bacillus subitilis usado como indicador biolgico do
processo.
A eficcia da esterilizao por EtO depende de 4 fatores essenciais: a
concentrao de gs, temperatura, umidade e tempo de exposio. A operao
varia de acordo com estes 4 parmetros 450 para 1,200 mg EtO/L, 30 C para
65C, 30% para 60% de umidade e de 2 a 8 horas de exposio. Dentro de certas
limitaes, um aumento na temperatura pode encurtar o tempo necessrio para
esterilizar o material. O ciclo bsico de esterilizao por EtO consiste de 5
estgios (pr-vcuo e umidificao, introduo de gs, exposio, evacuao e
esgotamento do gs com ar) sendo o perodo total de esterilizao e aerao de
48h s 72h . A aerao mecnica de 8 a 12 horas, temperatura entre 50 e 60C
remove os resduos txicos (EtO, etilenocloridrina e de etilenoglicol) impregnados
nos artigos expostos. O processo por EtO apresenta custo elevado, lento (48-
72h), potencialmente perigo e carcinognico para operacionais. Requer ambiente
isolado e aerado e proteo individual ao profissional. ETO e seus resduos so
considerados potencialmente carcinognicos
1, 32
. A legislao brasileira orienta
quanto s instalaes para armazenamento e emprego do xido de etileno, do
TCV Penna
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55
controle de sade do usurio e da proteo individual e coletiva durante o
processo de esterilizao
3
.
Gs plasma de perxido de hidrognio O processo baixa
temperatura associado ao plasma de perxido de hidrognio, gerado no
equipamento Sterrad

100 (Advanced Sterilization Products - ASP, Johnson &
Johnson) tem sido aplicado aos artigos mdicos-odontolgicos em substituio ao
xido de etileno, em hospitais do territrio brasileiro que realizam de 300 a 1200
procedimentos cirrgicos mensais. O ciclo operacional do Sterrad

100 curto, de
75 a 85minutos, faixa de temperatura entre 45C e 50C, e consiste em cinco
estgios, de vcuo, de injeo do perxido de hidrognio (58%), de difuso do
mesmo, de plasma, de ventilao. O vapor de perxido de hidrognio presso
de 500 mTorr, sob o impacto da energia de radiofreqncia (13,56 MHz), se
decompe em radicais livres reativos, como hidroperxidos e hidroxilas, alm de
gua e de oxignio. A eficincia do ciclo de esterilizao avaliada por um
sistema de bioindicador que inclui 10
6
esporos de Bacillus subtilis var. globigii
(ATCC 9372) e/ou de Bacillus stearothermophilus ATCC 7953 por fita e por
indicador qumico. O ciclo operacional do Sterrad

100 livre de resduos txicos


e de exposio ocupacional a agente danoso; e, aplicado aos artigos mdico
hospitalares sensveis tanto ao calor quanto umidade. Os itens so previamente
embalados em envelopes de Tyvek

/Mylar

ou em bandejas e estas duplamente


envoltas em mantas de polipropileno
1, 34, 36, 37
.
No dia a dia dos hospitais verificamos vrios motivos para a adoo do processo
Sterrad

100 de esterilizao, dentre os quais podemos citar:


Prevenir desgaste de corte (afiao) de itens metlicos delicados, garantindo
maior durabilidade e menor freqncia de consertos e reparos.
Prevenir oxidao de determinadas ligas metlicas de baixa qualidade, as quais
no tm substituio no mercado (materiais no mdicos).
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Reduzir o tempo de processo de esterilizao para 75 minutos, garantir
ausncia de umidade e segurana (ausncia de resduos) para o paciente e para
o cirurgio/enfermeira.
Reduzir o inventrio dos artigos mdico hospitalares, principalmente dos itens
de custo elevado de aquisio.
Aumentar a disponibilidade e rotatividade dos artigos, principalmente crticos, e
evitar excesso de inventrio dos mesmos.
Aumentar o tempo da vida til de prateleira, principalmente de artigos metlicos
de uso restrito atravs do acondicionamento em embalagens de (Tyvek

/Mylar

),
e de manta de polipropileno, assegurando esterilidade prolongada e assim evitar
desgaste desnecessrio do material.
Comparao entre os agentes qumicos de esterilizao baixa temperatura:
xido de etileno e gs plasma de perxido de hidrognio.
A tecnologia desenvolvida de esterilizao de artigos mdico hospitalares baixa
temperatura por plasma de perxido de hidrognio como agente esterilizante alternativo ao xido
de etileno e ao vapor mido tem mostrado ntida eficincia e vantagens; e, teve o uso autorizado
em 1993, pela FDA United States Food and Drug Administration.
A introduo do plasma de perxido de hidrognio surgiu da busca de
agentes esterilizantes alternativos baixa temperatura principalmente ao xido de
etileno (ETO) na esterilizao de materiais mdico hospitalares.
O plasma de perxido de hidrognio no retido na forma de resduos ao
material aplicado; porm o ETO libera resduos de acordo com a natureza qumica
do artigo esterilizado, exigindo perodo ps esterilizao de aerao.
O processo baixa temperatura por plasma de perxido de hidrognio
mostrou mais vantagens econmicas se comparado aquele por xido de etileno,
devido principalmente rapidez do ciclo de esterilizao, fcil instalao e
procedimento, e nenhuma toxicidade ambiente.
No processo de esterilizao com plasma baixa temperatura, vapor de
perxido de hidrognio empregado como precursor do mesmo. O plasma
formado atravs do campo eletromagntico induzido por ondas de rdio
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57
freqncia de 13,56 MHz. O vapor de perxido de hidrognio sob o impacto desta
energia se decompe em radicais livres reativos, incluindo: hidroperxidos e
hidroxilas. Estes radicais interagem com a membrana celular incapacitando a
multiplicao microbiana. Quando a energia de radio freqncia desligada, os
radicais se convertem em molculas de gua e oxignio, produtos que compem o
ar atmosfrico.
Ao final do ciclo, os itens esterilizados por plasma de perxido de hidrognio
podem ser imediatamente empregados na rotina cirrgica e/ou hospitalar, pois o
plasma de perxido de hidrognio no deixa resduos txicos, em contraste aos
agentes esterilizantes xido de etileno e formaldedo.
O processo Sterrad

100 de esterilizao de artigos mdico - hospitalares
por gs plasma de perxido de hidrognio apresenta como principais
caractersticas:
O equipamento compacto e de fcil locomoo, podendo ser locado prximo
s reas de utilizao dos itens esterilizados;
Necessita apenas de uma fonte de energia eltrica para a instalao;
No exige operador tcnico especializado para conduzir o ciclo que
automtico, com emisso de relatrio;
Os resduos finais do gs plasma so: gua e oxignio;
O ciclo operacional curto (75 a 85minutos), silencioso e no interfere no
ambiente, permitindo igualmente a racionalizao do inventrio mdico-hospitalar;
A faixa de temperatura do ciclo permanece entre 45C e 50C.
Praticamente todos os tipos de artigos mdicos so compatveis ao processo,
sendo liberados sem umidade e sem danos das propriedades operacionais.
O processo de esterilizao de artigos mdico - hospitalares por gs plasma
de perxido de hidrognio, no equipamento Sterrad

100, apresenta
incompatibilidades com:
Substncias que absorvem o vapor de perxido de hidrognio e interrompem o
ciclo: (i) materiais de natureza celulsica; (ii) gua e lquidos em geral;
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58
Metais base de Cobre e Prata (catalisam a degradao do perxido de
hidrognio em gua e oxignio);
Artigos com lume de fundo cego;
Artigos com lume de dimetro interno estreito e comprimento longo necessitam de dispositivo
acelerador de difuso ou amplificador (booster) do vapor de perxido de hidrognio
recomendados para: (i) lumes metlicos com dimetro interno maior ou igual a 1 mm e/ou
comprimento entre 40 cm e 50 cm; (ii) lumes no metlicos de dimetro interno maior ou igual a 1
mm e/ou comprimento entre 100 e 200 cm.
Todo processo de esterilizao, para assegurar o nvel de esterilidade
esperado, exige que o material em questo no apresente qualquer tipo de
resduo que dificulte difuso e acesso ao agente esterilizante. Da advir
necessidade de programa de limpeza e desinfeco prvia dos itens mdico
hospitalares e odontolgicos
1, 13, 31, 33, 34
.
CINTICA DE MORTE LOGARTIMICA
Pela conceituao clssica, entende-se que esterilizao o processo de
destruio de todas as formas de vida microbiana, ou seja, bactrias nas formas
vegetativas e esporula, fungos e vrus, mediante a aplicao de agentes fsicos e
qumicos
33
. Entretanto considerando a cintica de destruio logartmica dos
microrganismos sob ao de um agente qumico ou fsico (morte em curva
logartmica), o processo de esterilizao assume um entendimento mais
complexo. Sendo assim, esterilizao o processo pelo qual os microrganismos
so mortos a tal ponto que no seja mais possvel detecta-los no meio de cultura
padro no qual previamente haviam proliferado. Convencionalmente, considera-se
um artigo estril quando a probabilidade de sobrevivncia dos microrganismos que
o contaminam menor do que 1:1. 000.000
3
. Este critrio o principio bsico dos
testes biolgicos usualmente utilizados para controlar os processos de
esterilizao.
A segurana da esterilizao expressa pela probabilidade de os
microrganismos poderem sobreviver a este processo que corresponde ao
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59
proporcional tratamento que um artigo deve receber de acordo com o seu risco
potencial de causar infeco. O nvel de segurana de esterilizao varia de
acordo com o uso do artigo: 10
-6
de probabilidade de sobrevivncia de
microrganismos para classificao artigos crticos (material estril para
procedimentos que requeiram assepsia cirrgica) e semi-crticos; 10
-3
requisito
menos rigoroso direcionado para artigos no crticos, que entram em contato
apenas com pele ntegra. A padronizao mais rigorosa 10
-12
para a
probabilidade de o esporo de Clostridium botulinum sobreviver, sendo aplicada
para tratamento de alimentos enlatados no-acidos
9, 24, 32
.
A probabilidade de 10
-4
foi determinada como nvel de exigncia de
esterilizao para veculos de explorao espacial na busca de evidncias de vida
extraterrestre no planeta Marte
10
.
CONSIDERAES GERAIS
O sucesso nos processos de limpeza, desinfeco e/ou esterilizao
depende da correta e criteriosa escolha, aplicao e observao das
caractersticas peculiares de cada agente qumico e dos fatores interferentes na
sua atividade. A eficcia desta atividade est relacionada natureza do item
considerado, sua utilizao e do nvel de reduo previsto da microbiota
contaminante.
Entretanto, cabe salientar que, alm disto, imprescindvel que tanto os reagentes
qumicos empregados no preparo das solues qumicas, quanto os produtos comerciais
adquiridos preencham os requisitos de qualidade estabelecidos. A gua de enxague, assim como
para a diluio quando necessria deve ser isenta de contaminantes para que a soluo
desinfetante no se torne veculo disseminador de microorganismos.
Solues com ao desinfetante ineficaz implicam na no destruio dos microorganismos
indesejveis, o que significa risco para o profissional e para os pacientes, no caso de uso
hospitalar. O desinfetante pode ainda tornar-se um veiculador de microorganismos ao invs de um
agente biocida, favorecendo contaminao cruzada.
Este fato ressalta a importncia e necessidade de programas peridicos de avaliao
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da qualidade dos agentes qumicos comercializados e da eficcia quanto ao nvel de
segurana que garantem durante o uso, para o qual foram designados.
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