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Coordenadoria Regional de Desenvolvimento da Educao 10 CREDE - Russas

NCLEO REGIONAL DE DESENVOLVIMENTO DA ESCOLA NRDES

ROTEIRO DAS AULAS PRTICAS DO LDC


ESCOLA: E.E.F.M ARSNIO FERREIRA MAIA PROFESSOR COORDENADOR: OTACLIO JR. / SELMIRA DISCIPLINA: BIOLOGIA PROFESSOR DA TURMA: EDUARDO. DATA: 28/05/2012 02/06/2012. TURMAS: 3 ANOS A, B, C, D. NOME DA PRTICA: EXTRAO E OBSERVAO DA MOLCULA DE DNA.

OBJETIVO: Extrair o DNA da banana que pode ser visualiza a olho nu. Observar a estrutura do DNA no microscpio Analisar a importncia da molcula de DNA para os seres vivos. MATERIAL UTILIZADO: Saco plstico (tipo zip loc); Morango ou banana ou kiwi; Tubos de ensaio; Basto de vidro ou palito de madeira; lcool etlico gelado; Bquer ou copo de vidro; Conta-gotas; Lmina e lamnula; Microscpio; Aparato filtrante (gases ou papel de filtro); Funil; Aproximadamente 10ml de soluo extratora de DNA; gua (de preferncia mineral);

Observao: Receita da soluo extratora de DNA: 50mL de detergente lquido; (DE PREFERNCIA INCOLOR). 2 colheres de ch de sal (NaCl); 900mL de gua. Misture tudo em um recipiente (bquer ou copo).

METODOLOGIA: 1. Coloque a fruta, previamente lavada em saco plstico zip loc e esmague-a com o punho (cuidado para no rasgar o saco) at ficar um extrato homogneo; 2. Adicione a soluo extratora ao contedo do saco, misture tudo apertando com as mos homogeneizando; 3. Derrame o extrato no filtro com o aparato filtrante e deixe filtrar num recipiente (bquer ou copo); 4. Encha a menos da metade, um tubo de ensaio com o filtrado; 5. Derrame devagar o lcool gelado do tubo de ensaio (deixando-o escorrer vagarosamente pela borda) a fim de se formar duas fases, a superior, alcolica e a inferior, a aquosa. O volume adicionado do lcool deve ser aproximadamente o mesmo volume do filtrado; 6. Mergulhe o basto ou palito dentro do tubo at o local onde se encontra a soluo mais turva (o filtrado com molculas de DNA); 7. Retire um pouco dos filamentos e coloque-os em uma lmina, pingue uma gota da soluo extratora, cubra com uma lamnula e em seguida observe ao microscpio. 8. Desenhe em forma de esquema o observado. ANLISE O detergente dissolve as membranas lipdicas alm de desintegrar os ncleos e os cromossomos das clulas da cebola, liberando o DNA. Com a ruptura das membranas, o contedo celular, incluindo DNA e protenas, se soltam e se dispersam na soluo. Um dos componentes do detergente, o lalril sulfato de sdio, desnatura as protenas, separando-as do DNA cromossmico. A adio de sal, no incio da experincia, proporcionou ao DNA um ambiente favorvel. O sal contribui com ons positivos Na+ que neutralizam a carga negativa do DNA. Nessa forma, O DNA precipita na soluo aquosa. O lcool gelado, alm de proporcionar uma mistura heterogenia (duas fases), em ambiente salino, faz com que as molculas de DNA se aglutinem, formando uma massa filamentosa e esbranquiada. O DNA no se dissolve no lcool, na concentrao e na temperatura que se usou neste experimento. Pelo fato do DNA ser menos denso que a gua e a mistura aquosa dos restos celulares, ele se localiza na interface da fase alcolica e aquosa. BIBLIOGRAFIA Matias, O.;Martins, P.(2004). Manual de biologia de 11 ano. Areal Editores. Porto Sites: http://www.dbio.uevora.pt/LBM/Foco/Extraccao/Extraccao_DNA.html, http://www.seara.ufc.br/sugestoes/biologia/biologia007.htm