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UNIVERSIDADE FEDERAL DE SO PAULO ESCOLA PAULISTA DE MEDICINA

XVI CONGRESSO DE INICIAO CIENTFICA - PIBIC I CONGRESSO DE INICIAO EM DESENVOLVIMENTO TECNOLGICO E INOVAO PIBITI I CONGRESSO DE EXTENSO - PIBEX

REITOR Prof. Dr. Ulysses Fagundes Neto

VICE-REITOR Prof. Dr. Sergio Tufik

PR-REITORIAS Graduao Prof. Dr. Luiz Eugnio Arajo de Moraes Mello Ps-Graduao e Pesquisa Prof. Dr. Helena Bonciani Nader Extenso Prof. Dr. Walter Manna Albertoni Administrao Prof. Dr. Srgio Antonio Draibe

COMISSO ORGANIZADORA
COORDENAO - CONGRESSO
Profa. Dra. Helena Bonciani Nader Profa. Dra. Lucia de Oliveira Sampaio Prof. Dr. Luiz Eugnio Arajo de Moraes Mello

COMISSO INSTITUCIONAL DE INICIAO CIENTFICA


Comit Institucional Profa. Dra. Adriana Karaoglanovic Carmona Profa. Dra. Braslia Maria Chiari Profa. Dra. Clara Lucia Barbieri Mestriner Profa. Dra. Clara Regina Brando de vila Profa. Dra. Eleonora Menicucci de Oliveira Profa. Dra. Eliane Beraldi Ribeiro Profa. Dra. Emlia Inoue Sato Prof. Dr. Flavio Faloppa Profa. Dra. Heimar de Ftima Marin Profa. Dra. Ieda Maria Longo Maugeri Prof. Dr. Lus Eduardo Coelho Andrade Prof. Dr. Luiz Roberto Ramos Prof. Dr. Manoel Joo Batista Castello Giro Prof. Dr. Manuel de Jesus Simes Profa. Dra. Maria Gerbase de Lima Profa. Dra. Maria Luiza Vilela Oliva Profa. Dra. Marlia de Arruda Cardoso Smith Prof. Dr. Miguel Sabino Neto Prof. Dr. Roberto Frussa Filho Profa. Dra. Rosana Fiorini Puccini Profa. Dra. Rosiane Mattar Profa. Dra. Sima Godosevicius Katz Profa. Dra. Sylvia Luisa Pincherle Cardoso Leo Profa. Dra. Maria Lucia Oliveira de Souza Formigoni

Comit Externo Prof. Dr. Eder Carlos Rocha Quinto Profa. Dra. Estela Maris Andrade Forell Bevilacqua Prof. Dr. Jos Eduardo Krieger Profa. Dra. Olga Celia Martinez Ibanez Prof. Dr. Paulo Lee Ho Prof. Dr. Roger Chammas Profa. Dra. Renata Mota Mamede Carvallo

SECRETRIA DO PIBIC E CONGRESSO


Cristiane Regina da Silva

SISTEMA DE COLETA DE DADOS

DESENVOLVIMENTO

Departamento de Gesto da Informao


Andr Alberto do Prado Ktia da Silva Diana Marcello Di Pietro

COLETA DE DADOS
Andr Alberto do Prado Ktia da Silva Diana

SITE E CD-ROM

Setor de Tecnologia de Informao da Pr-Reitoria de Graduao Me. Fbio Lus Falchi de Magalhes Lidiane Cristina da Silva Marcelo Antnio Meirinho Robson Soares Urschei Silvio Csar Cerri Walfran Carvalho De Araujo Yuri Bittar

ASSESSORIA DE EVENTOS
Pr-Reitoria de Extenso

XVI CONGRESSO ANUAL DE INICIAO CIENTFICA


A Universidade Federal de So Paulo (UNIFESP) tem por objetivo desenvolver, em nvel de excelncia, atividades inter-relacionadas de ensino, pesquisa e extenso. As atividades de ensino compreendem as reas de graduao, ps-graduao e de extenso. A UNIFESP criada em 15 de dezembro de 1994, resulta da transformao da Escola Paulista de Medicina, fundada em junho de 1933, federalizada em janeiro de 1956 e transformada em estabelecimento isolado de ensino superior de natureza autrquica em setembro de 1964. O curso de enfermagem teve incio em 1939, com a criao da Escola Paulista de Enfermagem. A pesquisa inicia-se em 1948, com a instalao do laboratrio de farmacologia e bioqumica. Novos cursos de graduao so iniciados em meados da dcada de 60: Cincias Biomdicas, 1966; Fonoaudiologia, 1968 e Tecnologia Oftlmica, 1970. Em 2003, a universidade cria, depois de mais de 35 anos, novos cursos de graduao. Inicialmente, foram implementados 5 cursos da rea da sade (Educao Fsica, Fisioterapia, Nutrio, Psicologia, Terapia Ocupacional) no campus da Baixada Santista. Em 2006, no campus de Diadema so criados 4 cursos da rea de exatas e biolgicas (Cincias Biolgicas, Engenharia Qumica, Farmcia/Bioqumica, Qumica), em So Jos dos Campos na rea das exatas (Cincias da Computao) e no campus de Guarulhos 4 cursos de humanidades (Cincias Sociais, Filosofia, Histria, Pedagogia). Deixamos de ser uma universidade temtica, integrando em nossas atividades as trs grandes reas do saber. O ensino de graduao na UNIFESP, universidade dedicada ao ensino e pesquisa fortemente influenciado por algumas caractersticas da Instituio que evidenciam a importncia de programa institucional de iniciao cientfica: integrao cientfica e geogrfica entre os Departamentos das reas bsicas e profissionais; corpo docente com titulao ps-graduada em porcentagem superior a 90%; grupos de excelncia em pesquisa e significativo envolvimento de alunos em programa de iniciao. O PIBIC (Programa Institucional de Bolsas de Iniciao Cientfica) completa, em 2008, dezesseis anos na UNIFESP. Esta importante ao indutora do CNPq ampliou de maneira considervel a iniciao cientfica na Instituio. No perodo de agosto/2007 a julho/2008, trezentos e vinte e dois (322) alunos de graduao receberam bolsa de IC PIBIC e PIBITI e apresentaro seus trabalhos durante o XVI Congresso de Iniciao Cientfica, seja na forma de painis ou de apresentao oral. Ainda, devero participar deste Congresso alunos de IC bolsistas da FAPESP, e de outras agncias de fomento que desenvolvem projetos na nossa Instituio, bem como em outras universidades. O Congresso de Iniciao Cientfica da UNIFESP tem como objetivos a divulgao dos resultados de projetos de pesquisa que vem sendo desenvolvidos pelos estudantes de graduao, bem como o treinamento na apresentao e discusso dos trabalhos. Todos os estudantes, bolsistas ou no do PIBIC, apresentam seus resultados tanto em sesses temticas, seja sob a forma de cartazes como apresentao oral. Ainda, os estudantes so os responsveis pela coordenao dos trabalhos orais, atuando como presidentes de sesso. Com isso, pretende-se estimular:

o treinamento do estudante de graduao na anlise e na interpretao dos dados de sua pesquisa, bem como na divulgao de seus resultados; o treinamento na elaborao dos dados para divulgao oral e de cartaz; a troca de experincia entre pesquisadores de grupos de pesquisa j consagrados e emergentes; o apoio e a oferta de subsdios tericos, visando ao aperfeioamento daqueles que se qualificam para a investigao cientfica; a vocao e os talentos potenciais para o pensar e o criar cientificamente; a divulgao de trabalhos de pesquisa desenvolvidos atravs dos Programas Institucionais da UNIFESP e de outras Instituies. Em nome dos docentes e funcionrios tcnico-administrativos da UNIFESP, em especial de todos da Pr-Reitoria de Graduao, damos as boas vindas aos participantes, desejando sucesso nesta reunio, e que as discusses dos resultados sejam de grande proveito no encaminhamento dos trabalhos de cada um.

Helena Bonciani Nader Lucia de Oliveira Sampaio Luiz Eugnio Arajo de Moraes Mello Pr-Reitoria de Graduao

PROGRAMAO
XVI CONGRESSO DE INICIAO CIENTFICA - PIBIC I CONGRESSO DE INICIAO EM DESENVOLVIMENTO TECNOLGICO E INOVAO PIBITI I CONGRESSO DE EXTENSO - PIBEX

17/06 18:00 horas Abertura Lanamento do livro A Formao Mdica na Unifesp: Excelncia e Compromisso Social Rosana Fiorini Puccini, Lucia de Oliveira Sampaio e Nildo Alves Batista (organizadores) Editora Unifesp Palestra proferida pelo Prof. Dr. Ivan Antnio Izquierdo Professor Titular de Medicina e Coordenador do Centro de Memria da Pontifcia Universidade Catlica do Rio Grande do Sul. Tema: A Arte de Esquecer Local: Teatro Marcos Lindenberg 18/06 08:00 s 10:30 horas - Apresentao Oral Local: Prdio dos Anfiteatros - Edifcio Costabile Galucci 11:00 s 12:00 horas - Apresentao Pster Local: Cobertura Estacionamento C 13:00 s 15:30 horas - Apresentao Oral Local: Prdio dos Anfiteatros - Edifcio Costabile Galucci 16:00 s 17:00 horas - Apresentao Pster Trabalhos de Extenso - Apresentao Pster Local: Cobertura Estacionamento C 19/06 08:00 s 10:30 horas - Apresentao Oral Local: Prdio dos Anfiteatros - Edifcio Costabile Galucci 11:00 s 12:00 horas - Apresentao Pster Local: Cobertura Estacionamento C 13:00 s 15:30 horas - Apresentao Oral Local: Prdio dos Anfiteatros - Edifcio Costabile Galucci 16:00 s 17:00 horas - Apresentao Pster Trabalhos de Monitoria - Apresentao Pster Local: Cobertura Estacionamento C

DISTRIBUIO DOS TRABALHOS POR REA

rea Cincias Bsicas Moleculares Cincias Bsicas Morfolgicas Cirurgia Aplicada Cirurgia Experimental Distrbios da Comunicao e Audio Enfermagem Exatas Humanidades Medicina Aplicada Medicina Experimental Sade Coletiva Monitoria Extenso Total Geral

Total 91 31 13 9 21 25 11 29 89 51 46 19 13 448

XVI Congresso de Iniciao Cientfica da UNIFESP 2008

Cincias Bsicas Moleculares Ttulo:


Autores: Bolsista: Orientador:

Ao de protenas isoladas de plantas sobre a bactria patognica Propionibacterium acnes


Ribeiro de Paula, H.; De Caroli, F.P.; Santana, L.A.; Maugeri, I.M.L.; Oliva, M.L.V. Henrique Ribeiro de Paula - UNIFESP Maria Luiza Vilela Oliva - Bioqumica / Bioqumica

Resumo:

Dois inibidores de peptidases com especificidades distintas foram isolados e caracterizados das sementes de Bauhinia bauhinioides. BbCI inibe elastase pancretica de porco (Kiapp 40 nM), elastase humana (Kiapp 5,3 nM), cathepsina L (Kiapp 2,2 nM) e cruzipana (Kiapp 0,2 M) (Oliva et al., 2001; de Oliveira et al., 2004, Arajo et al., 2005). BbKI (inibidor de calicrena plasmtica humana de Bauhinia bauhinioides) age sobre as serinopeptidases tripsina, calicrena plasmtica humana, calicrena tissular e plasmina. O efeito desses dois inibidores foi estudado sobre a bactria Propionibacterium acnes. BbCI inibiu a atividade proliferativa da bactria e a atividade antimicrobiana demonstrou ser dose-dependente sendo eficaz j na concentrao de 0,17M. Por outro lado, o BbKI, inibidor altamente similar, no interferiu no crescimento bacteriano. O efeito decorrente de BbCI parece no estar relacionado com uma possvel acidificao do meio uma vez que o pH da cultura bacteriana com a presena desses inibidores se manteve em 6,0 durante todo o experimento, diferentemente do que ocorre com o S. aureus na presena de BbKI, em que o pH do meio acidificado a 2,0. Utilizando o inibidor acoplado a um suporte slido (BbCI-Sepharose) foi possvel verificar a ligao de protenas provenientes do lisado bacteriano. Essas protenas esto sendo isoladas para determinao da regio N-terminal e identificao pelo banco de dados de protenas. Apoio: FAPESP, CNPq, FAP/FADA, CAPES/DAAD, MCT/CNPq, DECIT/MS e CT-BIOTECHNOLOGY Participantes: Henrique Ribeiro de Paula, Fernanda Peruzo de Caroli, Lucimeire A. Santana, Ieda Maria Longo Maugeri, Maira Luiza Vilela Oliva

XVI Congresso de Iniciao Cientfica da UNIFESP 2008

Cincias Bsicas Moleculares Ttulo:


Autores: Bolsista: Orientador:

Ao dos inibidores de calicrena plasmtica humana sobre a proliferao de clulas do cncer gstrico
Moraes, M.A.R.; Sallai, R.C.; Nakahata, A.M.; Santana, L.A.; Oliva, M.L.V. Mariana Alcantara Rodrigues de Moraes - UNIFESP Maria Luiza Vilela Oliva - Bioqumica / Bioqumica

Resumo:

As clulas so programadas para se desenvolver, crescer, diferenciar e morrer, em resposta a um sistema complexo de sinais bioqumicos. O descontrole desses mecanismos celulares normais pode levar ao crescimento de tumores benignos e malignos. Entretanto, somente as clulas malignas so capazes de proliferar durante o processo metasttico, pois ligam-se a outras clulas e ou protenas da matriz extracelular e estabelecem interaes clula-clula e clula-matriz extracelular que fornecem informaes essenciais sobre o controle da morfognese, ganho ou perda de funes especficas do tecido, migrao celular, reparo do tecido e morte celular. Inibidores de peptidases naturais ou sintticos so frequentemente testados como agentes anti-tumorais e seus efeitos podem ser devido inibio direta da protelise da matriz ou inibio indireta da ativao de uma cascata proteoltica, prevenindo a disseminao das clulas tumorais, podendo resultar na inibio da progresso tumoral. Neste trabalho, nosso objetivo foi isolar inibidores de proteinases presentes no Campomanesia phaea (cambuci), investigar seu efeito sobre enzimas do sistema da coagulao (plasmina e calicrena plasmtica humana) e do sistema digestrio (tripsina) e test-los quanto sua ao sobre os parmetros da cagulao (TP e TTPA) e sobre a proliferao de clulas tumorais in vitro. Tpico do Brasil, o Campomanesia phaea (cambuci) pertence famlia de lenhosas denominada Myrtaceae. Utilizando-se de mtodos cromatogrficos apropriados, o extrato de cambuci proporcionou o isolamento de um composto purificado que inibe tripsina (Kiapp = 5,7 nM) e calicrena plasmtica humana (Kiapp =14,6 nM), denominado CpKI (Campomanesia phaea kallicrein inhibitor) e a duas outras amostras com caractersticas proticas: 1) a frao eluda da resina Sepharose 4B com HAc 5% prolongou de forma expressiva o Tempo de Tromboplastina Parcialmente Ativada (TTPA), o que indicativo da ao de cambuci sobre a via intrnseca da coagulao e, alm disso, inibiu a proliferao de clulas tumorais in vitro; 2) o composto obtido da cromatografia de troca inica em DEAE-Sepharose e eludo com NaCl 0,15M, interferiu na atividade de duas enzimas proteolticas: tripsina e plasmina. Os resultados obtidos at agora mostram-se bastante promissores, por isso, pretendemos continuar nosso projeto para a investigao da ao desses inibidores na agregao plaquetria e na proliferao de clulas do cncer gstrico. Apoio: FAPESP, CNPq FAP/FADA, CAPES/DAAD, MCT/CNPq, DECIT/MS e CT-BIOTECHNOLOGY. Participantes: Mariana Alcantara Rodrigues de Moraes, Roberto Carlos Sallai, Adriana Miti Nakahata, Lucimeire A. Santana, Maria Luiza Vilela Oliva

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Cincias Bsicas Moleculares Ttulo:


Autores: Bolsista: Orientador:

Aes de compostos isolados de Cecropia glazioui Sneth na atividade de Na,K-ATPase e CaATPase musculares
Zimmermann, M.; Meliso, F.M.; Biondo, T.M.A.; Tanae, M.M.; Lima-Landman, M.T.R.; Souccar, C.; Lapa, A.J. MAYARA ZIMMERMANN CHICOTI - INES Antonio Jos Lapa - Farmacologia / Farmacologia

Resumo:

Introduo: A pesquisa de novos antimalricos direcionados a novos alvos moleculares do parasita tem se tornado uma necessidade premente devido ao aumento de incidncia da malria e da crescente resistncia do parasita aos medicamentos em uso. Neste sentido, as plantas medicinais, principalmente aquelas reputadas como antimalricas em regies endmicas, constituem potenciais fontes de novos compostos eficazes contra o parasita. De fato, os dois principais compostos atualmente utilizados para o tratamento da malria, as quininas e os derivados da artemisinina, so de origem natural. Dentre os potenciais alvos a serem considerados, os mecanismos reguladores do Ca2+ intracelular tem importncia crucial para os diferentes ciclos do parasita na clula hospedeira. Vrias bombas de Ca2+ foram identificadas no genoma do parasita e uma delas a PfATP6, um ortlogo das Ca2+-ATPases do retculo sarcoplasmtico, inibida pelas artemisininas. Outras ATPases como a Na,K-ATPase e a V-ATPase, so igualmente importantes para a manuteno do pH e as concentraes de Na+ e K+ no parasita (Becker e Kirk, 2004, Trends Parasitol., 20:590). O objetivo deste trabalho determinar a atividade de compostos isolados de Cecropia glazioui Sneth nos correlatos moleculares da bomba de sdio (Na+ ,K+-ATPase), da bomba de prtons (H,K-ATPase) e da bomba de clcio (Ca2+-ATPase) de mamferos. Esta proposio baseia-se na potente atividade antimalrica do extrato da planta demonstrada em testes in vitro contra o Plasmodium falciparum (Krettli e col., Mem. Inst. Oswaldo. Cruz. 96: 1033, 2001) e na inibio do influxo de Ca2+ produzida por vrios constituintes da planta em clulas de mamferos (Lima-Landman e col., Phytomedicine 14:314, 2007). Mtodos: Cobaias machos e fmeas (400 a 500 g) foram sacrificadas por injeo de pentobarbital sdico (50 mg/kg), o corao foi isolado, dissecado, pesado e homogeneizado em tampo HEPES 20 mM (pH 7,4, 4C) contendo 250 mM sacarose, 2 mM EDTA e 1 mM MgCl2 em homogenizador de vidro. A atividade da Na,KATPase foi determinada utilizando amostras membranares (50 L) em tampo Tris-HCl 200 mM, pH 7,5 a 37C contendo 10 mM ATP, na ausncia e na presena de 2 mM ouabana. A reao foi interrompida pela adio de 50 mL de cido tricloroactico (TCA) 50%, a 4C, as amostras foram centrifugadas (20 x g, 30 min) e os sobrenadantes retirados para a determinao da concentrao de Pi (Fiske e Subarrow, 1925). O teor de protenas das membranas foi determinado pelo mtodo de Bradford (1976). A atividade da Na,K-ATPase foi determinada como a diferena da atividade enzimtica determinada na presena e na ausncia de ouabana. Resultados: Aps determinao das concentraes timas da enzima (100 g), do substrato (10 mM) e do tempo de reao (10 min), a atividade enzimtica foi determinada na ausncia (controle) e na presena de diferentes concentraes de procianidina C (1 a 100 M), composto isolado de C. glazioui. A atividade da Na,KATPase da membrana sarcolemal determinada em condies controle foi de 29,23 0,06 nM (n=6). Aps a incubao da Procianidina C (1 a 100 M), que inibiu o influxo de Ca2+ em cardiomicitos de ratos neonatos, a atividade enzimtica foi reduzida a 75% do controle, na maior concentrao testada. Nas mesmas concentraes, porm, o mesmo composto inibiu a H,K-ATPase isolada de glndulas isoladas de coelho (Souccar e col., Phytomedicine, 2008). Anlises das aes de outros compostos isolados da mesma espcie na Na,K-ATPase de corao de cobaia e na Ca-ATPase de msculo esqueltico de coelho, in vitro, esto em andamento. Discusso: Os resultados indicam que o composto isolado de C. glazioui, procianidina C, no parece alterar significativamente a Na, K-ATPase muscular. Em vista da indicao de sua atividade antimalrica em testes in vitro e de suas aes inibitrias da bomba de prton e do influxo de Ca2+, detectadas em estudos do mesmo laboratrio, anlises da atividade do composto e de outros isolados da mesma planta na Ca-ATPase muscular esto em andamento. Apoio financeiro: CNPq, FAPESP, CBA, Aprovao no Comit de tica em Pesquisa No.: 0760/07 Participantes: Mayara Zimmermann Chicoti, Fabiana Marcelino Meliso, Thais Maira de Araujo Biondo, Mirtes Midori Tanae, Maria Teresa Riggio de LimaLandman, Caden Souccar, Antonio Jos Lapa

XVI Congresso de Iniciao Cientfica da UNIFESP 2008

Cincias Bsicas Moleculares Ttulo:


Autores: Bolsista: Orientador:

Aes de compostos polifenlicos isolados da "Sete-sangrias" Cuphea carthagenensis (Jacq.) J.F. Macbr. nas atividades de Na,K-ATPase e Ca-ATPase musculares
Meliso, F.M.; Isla, K.K.Y.; Tanae, M.M.; Lima-Landman, M.T.R.; Zimmermann, M.; Lapa, A.J.; Souccar, C. Fabiana Marcelino Meliso - UNESP Caden Souccar - Farmacologia / Farmacologia

Resumo:

Introduo: A pesquisa de novos antimalricos direcionados a novos alvos moleculares do parasita tem se tornado uma necessidade premente em vista do aumento da incidncia da malria e da crescente resistncia do parasita aos medicamentos em uso. Neste sentido, as plantas medicinais, principalmente aquelas reputadas como antimalricas em regies endmicas, constituem potenciais fontes de novos compostos eficazes contra o parasita. De fato, os dois principais compostos atualmente utilizados para o tratamento da malria, as quininas e os derivados da artemisinina, so de origem natural. Dentre os potenciais alvos a serem considerados, os mecanismos reguladores do Ca2+ intracelular tem importncia crucial para os diferentes ciclos do parasita na clula hospedeira. Vrias bombas de Ca2+ foram identificadas no genoma do parasita e uma delas a PfATP6, um ortlogo das Ca2+-ATPases do retculo sarcoplasmtico, inibida pelas artemisininas. Outras ATPases como a Na,K-ATPase e a V-ATPase, so igualmente importantes para a manuteno do pH e as concentraes de Na+ e K+ no parasita (Becker e Kirk, 2004, Trends Parasitol., 20:590). O objetivo deste trabalho foi avaliar a atividade de compostos isolados de C. cartagenensis na Na+ ,K+-ATPase e na Ca2+ATPase de msculo estriado de mamferos. O estudo baseou-se na atividade antimalrica atribuda popularmente aos extratos da planta (Botsaris, J. Ethnob. Ethnomed. 3:18, 2007) e na inibio do influxo de Ca2+ por alguns de seus constituintes demonstrada neste laboratrio, em cardiomicitos de ratos. Mtodos: Cobaias machos e fmeas (400 a 500 g) foram sacrificadas por injeo de pentobarbital sdico (50 mg/kg), o corao foi isolado, dissecado, pesado e homogeneizado em tampo HEPES 20 mM (pH 7,4, 4C) contendo 250 mM sacarose, 2 mM EDTA e 1 mM MgCl2 em homogenizador de vidro. A atividade da Na,KATPase foi determinada utilizando amostras membranares (50 L) em tampo Tris-HCl 200 mM, pH 7,5 a 37C contendo 10 mM ATP, na ausncia e na presena de 2 mM ouabana . A reao foi interrompida pela adio de 50 mL de cido tricloroactico (TCA) 50%, a 4C , as amostras foram centrifugadas (20 x g, 30 min) e os sobrenadantes retirados para a determinao da concentrao de Pi (Fiske e Subarrow, 1925). O teor de protenas das membranas foi determinado pelo mtodo de Bradford (1976). A atividade da Na,K-ATPase foi determinada como a diferena da atividade enzimtica determinada na presena e na ausncia de ouabana. Resultados: Aps determinao das concentraes timas da enzima (100 g), do substrato (10 mM) e do tempo de reao (10 min), a atividade enzimtica foi determinada na ausncia (controle) e na presena de diferentes concentraes dos compostos isolados de C. cartagenensis, woodfordina C e eucalbanina B (1 a 100 M). A atividade da Na,K-ATPase da membrana sarcolemal determinada em condies controle foi de 29,23 0,06 nM (n=6). A incubao de eucalbanina B (1 a 100 M) reduziu a atividade da Na,K-ATPase a 80% do controle somente na maior concentrao testada. Concentraes menores do composto no alteraram significativamente a atividade enzimtica. Nas mesmas concentraes, a woodfordina C reduziu a atividade da Na,K-ATPase a 50% do controle na maior concentrao testada. Anlises das aes desses compostos e de outros isolados da mesma espcie, nas atividades de Na,K-ATPase e Ca-ATPase musculares, continuam em andamento. Discusso: Os resultados indicam que a woodfordina C, mas no a eucalbanina B, inibe a Na, K-ATPase da musculatura cardaca. Em vista da inibio do influxo de Ca2+ pelos mesmos compostos em cardiomicitos de rato, anlises de suas aes na Ca-ATPase muscular esto em andamento visando futuros testes no parasita. Apoio financeiro: CNPq, FAPESP, CBA, Aprovao no Comit de tica em Pesquisa No.: 0760/07 Participantes: Fabiana Marcelino Meliso, Kaori Katiuska Yamaguchi Isla, Mirtes Midori Tanae, Maria Teresa Riggio de Lima-Landman, Mayara Zimmermann Chicoti, Antonio Jos Lapa, Caden Souccar

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Cincias Bsicas Moleculares Ttulo:


Autores: Bolsista: Orientador:

Anlise da concentrao de cido Hialurnico e contedo protico nas lgrimas de pacientes com Oftalmopatia de Graves e de pacientes com Conjuntivite Viral
Coelho, B.V.; Regatieri, C.; Paves, L.; Barbosa, J.B.; Freitas, D.; Belfort Jr, R.; Mendes, A.; Kobayashi, E.Y.; Martins, J.R.M.; Nader, H.B. Bruno Vieira Coelho - FMU Helena Bonciani Nader - Bioqumica / Biologia Molecular

Resumo:

O cido hialurnico (AH) um glicosaminoglicano (GAG) de alta massa molecular e altamente hidroflico, composto de unidades dissacardicas repetitivas de -D-Nacetil-glucosamina e cido -D-glucurnico. um importante componente da matriz extracelular onde exerce no apenas papel estrutural, mas tambm pode influenciar o comportamento celular por meio de interaes com outros componentes da matriz e com receptores especficos na superfcie celular. Seus nveis podem estar alterados em diversas condies fisiolgicas e patolgicas. Na Oftalmopatia de Graves (OG), fenmeno auto-imune que acompanha quadros de hipertiroidismo, h acmulo de GAGs, particularmente o AH e o condroitim sulfato, o que resulta em edema local e aumento do volume da musculatura e da gordura extraocular, enquanto que na cerato-conjuntivite por adenovirus GAGs como o AH parecem estar envolvidos na progresso desse processo inflamatrio. Tendo em vista a proximidade da glndula lacrimal com os tecidos retrooculares e seu possvel comprometimento devido inflamao presente na rbita, a determinao da concentrao de AH nas lgrimas de indivduos normais, de pacientes com OG, e de pacientes com conjuntivite por adenovrus, pode ser uma tentativa de correlacionar esses nveis com presena dessas doenas oculares. Amostras de lgrimas foram obtidas de 17 indivduos normais (34 olhos) sem nenhuma doena ocular ou sistmica, de 41 pacientes (82 olhos) portadores de OG confirmada clinicamente e por um exame de imagem (ultrassonografia ou tomografia ou ressonncia magntica) e de 11 pacientes (22 olhos) portadores de conjuntivite unilateral diagnosticada por critrios clnicos e por cultura positiva para adenovrus. A coleta da lgrima foi feita com fita de Schirmer e tambm com microcapilares colocados na extremidade temporal de cada olho sem o uso de anestsicos. As fitas foram secas temperatura ambiente e estocadas a -20 C at as anlises. No momento das dosagens, o AH e as protenas foram eludos da fita com gua destilada e analisados por ensaio fluoromtrico e colorimtrico, respectivamente. O perfil protico tambm foi analisado em SDS-PAGE 3-20% e as bandas visualizadas por Coomassie blue e/ou por nitrato de prata. As anlises mostraram que a concentrao de AH em pacientes com OG (35,1 34,7 ng/mg protena, variao de 2,9-173,7 ng/mg protena) foi significativamente mais elevada que a encontrada nos indivduos normais (18,9 12,6 ng/mg protena, variao de 3,2-45,0 ng/mg protena) (p<0,01), enquanto que a mdia do cido hialurnico presente na lgrima dos olhos comprometidos por conjuntivite foi de 96,7 86,5 ng/mg protena, e 53,7 32,0 ng/mg protena nos olhos contralaterais no comprometidos clinicamente (p<0,01). Apesar da sobreposio entre valores de normais e portadores de OG observamos uma diferena significativa na concentrao do AH entre os 2 grupos. J nos olhos acometidos por conjuntivite, oito dos 11 olhos comprometidos tiveram cultura positiva para o adenovrus e, nesses casos, a concentrao do AH aumentou para 117,8 94,2 ng/mg protena. Em duas culturas negativas o AH foi de 13,7 e 47,8 ng/mg protena. Quanto s protenas na lgrima, alm do aumento na sua concentrao nos olhos acometidos pela conjuntivite notamos tambm um perfil distinto no SDS-PAGE desses pacientes com aumento de uma banda de cerca de 60kDa. Esta nova abordagem mostrou ser til na caracterizao dos fenmenos inflamatrios presentes nessas duas doenas oculares e poder ser til em novos estudos envolvendo doenas oculares ou sistmicas seja como auxlio diagnstico ou para escolha de diferentes formas de tratamento. Aprovao no Comit de tica em Pesquisa No.: 0393/07 Participantes: Bruno Vieira Coelho, Caio Regatieri, Lus Paves, Jos Bonifcio Barbosa Junior, Denise de Freitas, Rubens Belfort Jr., Aline Mendes, Elsa Yoko Kobayashi, Joo Roberto Maciel Martins, Helena Bonciani Nader

XVI Congresso de Iniciao Cientfica da UNIFESP 2008

Cincias Bsicas Moleculares Ttulo:


Autores: Bolsista: Orientador:

Anlise da expresso da protena cida fibrilar glial (GFAP) na matria cinzenta periaquedutal aps tratamento com extrato hidroalcolico evaporado de Erythrina falcata Benth (EHEE).
Cerutti, M.C.; Cerutti, J.M.; Oliveira, D.R.; Bagnariolli, F. Fernando Bagnariolli de Oliveira - UNIFESP Suzete Maria Cerutti - Cincias Biolgicas /

Resumo:

Relatos sobre a atividade etnofarmacolgica do extrato de Erythrina falcata referem-se reduo da ansiedade e aos efeitos hipntico-sedativo e calmante. Agentes farmacolgicos que aumentam ou reduzem os sintomas de ansiedade podem atenuar ou inibir a resposta de congelamento a estmulos aversivos. Estudos realizados em nosso laboratrio mostraram que o EHEE interfere na resposta de congelamento induzida por processos de aprendizagem associativa. Sabe-se que a matria cinzenta periaquedutal (MCP) est diretamente associada ao aparecimento dessas respostas. Entretanto, os mecanismos moleculares subjacentes a este processo ainda no so totalmente conhecidos. Nesse sentido, o presente trabalho avaliou a expresso da GFAP na MCP de ratos, Wistar, machos, adultos tratados com EHEE nas doses de 0,25 g.Kg-1 (n=3), EHE 0.5 g.Kg-1 (n=3), Tween 80-12% (n=3) e Diazepam 4 mg.Kg-1 (n=3). O tratamento consistiu na administrao de uma dose (agudo), 7 dias (subagudo) ou durante 29 dias (crnico) das substncias supracitadas. Os animais foram submetidos ao teste da resposta emocional condicionada. 24 horas aps o teste os encfalos foram retirados e processados para imunohistoqumica (anti-GFAP). Estudos morfomtricos foram realizados nas regies dorsomedial (DMMCP), dorsolateral lateral (DLMCP), ventral (VMCP) e lateral (LMCP) para identificao de clulas GFAP+. Os dados mostraram aumento no nmero de clulas GFAP+ na DLMCP para os grupos EHE 0,25 g.Kg-1 e EHE 0,5 g.Kg-1 e Diazepam (p< 0,001), comparados ao grupo Tween (p< 0,001). No tratamento subagudo o maior nmero de clulas GFAP+ foi observado nas regies DMMCP e DLMCP para os grupos tratados com EHEE (p< 0,001). J no tratamento crnico diferenas significativas foram observadas para todas as regies. O aumentro da expresso da proteina GFAP na materia cinzenta periquedutal, verificada aps o tratamento com EHEE, sugerem que mudanas funcionais nas clulas astrocitrias poderiam fundamentar as alteraes na resposta ao medo condicionada observadas anteriormente em nosso laboratrio. Ainda, propem um mecanismo celular adicional no controle da resposta de medo condicionado. Apoio Financeiro: FAPESP; CNPQ Participantes: Suzete Maria Cerutti, Janete Maria Cerutti, Daniela R. Oliveria, Fernando Bagnariolli de Oliveira

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Autores: Bolsista: Orientador:

ANLISE DA MOBILIZAO DE CLCIO INTRACELULAR EM MODELO ANIMAL DE MUCOPOLISSACARIDOSE TIPO I.


Rodrigues, L.C.; Pereira, V.G; Lauro, E.M.; Gazarini, M.L.; D'Almeida, V. Lara Cheliz Rodrigues - USP Vania D'Almeida - Psicobiologia /

Resumo:

A mucopolissacaridose tipo I (MPS I) uma doena autossmica recessiva causada pela deficincia da enzima lisossmica -L-iduronidase (IDUA), responsvel pela degradao de glicosaminoglicanos (GAGs). O acmulo destes substratos no degradados nos lisossomos resulta em mudanas na fisiologia da clula durante a progresso da doena. Os lisossomos esto envolvidos em processos da biologia celular que incluem metabolismo e sinalizao, na qual a homeostase de clcio essencial para a regulao de muitos eventos como a exocitose e expresso de protenas. Nesse estudo, objetiva-se identificar possveis alteraes nos mecanismos de homeostase inica em linfcitos de bao de um modelo animal de MPS I para elucidao da fisiopatologia da doena. Os linfcitos foram isolados do bao de camundongos C57BL/6 Idua +/+ (homozigoto selvagem) e Idua -/- (homozigoto mutado) de seis meses de idade. Foram empregados os indicadores Fluo-3 AM e Acridine Orange nos ensaios de fluorescncia (microscopia confocal e espectrofluormetro) para os ons clcio e hidrognio respectivamente. A mobilizao citosslica de Ca2+ e H+ foi induzida pela adio de inibidor da Ca2+ATPase de retculo endoplasmtico (tapsigargina 10M), inibidor da H+ATPase de lisossomo (bafilomicina 0,2M) e ionforo K+/H+ (nigericina 10M). Esse projeto foi aprovado pelo Comit de tica em Pesquisa da Universidade Federal de So Paulo (Protocolo n 1165/07). Aps a adio de nigericina (10M), notou-se que o transporte de ons hidrognio do lisossomo para o citossol foi significativamente maior (Teste t: p<0.05; n=15) em linfcitos de camundongos Idua +/+ em relao aos linfcitos de Idua -/-. Ao adicionar bafilomicina (0,2M), foi observada a sada significativamente menor (Teste t: p<0.001; n=25) de ons clcio do lisossomo ao citossol em animais Idua -/-. Finalmente, nos ensaios com tapsigargina (10M), os camundongos Idua -/apresentaram um aumento significante (Teste t: p<0.05; n=25) de on clcio no retculo endoplasmtico comparados aos camundongos Idua +/+. Por conseguinte, os linfcitos de bao apresentaram uma alterao na regulao de ons clcio e hidrognio intracelulares, o que possivelmente pode estar associado a uma interferncia das vias de transporte pelo acmulo de GAGs. Apoio Financeiro: CNPq, FAPESP, CAPES, AFIP e Genzyme do Brasil. Aprovao no Comit de tica em Pesquisa No.: 1165/07 Participantes: Lara Cheliz Rodrigues, Vanessa Gonalves Pereira, Elaine Mendias Lauro, Marcos Leoni Gazarini Dutra, Vnia DAlmeida

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Autores: Bolsista: Orientador:

ANLISE DO POLIMORFISMO DO GENE RECEPTOR DA LIPOPROTEINA 5 (lrp5) COMO FATOR RELACIONADO BAIXA DENSIDADE MINERAL SSEA EM MULHERES APS A MENOPAUSA
Haidar, M.A.; Haidar, A.A. Andr Abou Haidar - UNIFESP Mauro Abi Haidar - Ginecologia / Endocrinologia Ginecolgica

Resumo:

A falta de ovulao e a deficincia na sntese de estrgeno e de progesterona representam o perodo da vida em que a mulher sofre modificaes, perodo correspondente ao climatrio. importante conhecer a variao do nmero de folculos ovarianos ao longo da vida da mulher para melhor compreender a fisiopatologia dessa importncia. Nesse perodo a mulher pode ter a falsa segurana, pois eventuais alteraes metablicas nem sempre apresentam sintomas, sendo algumas delas de evoluo silenciosa, em especial as que se instalam sobre o aparelho cardiovascular e ao metabolismo sseo. Estudos indicaram forte influencia na densidade mineral ssea, do gene LRP5, indicando, portanto, forte influncia do gene LRP5 na formao ssea e no risco de osteoporose. Analisar a correlao do polimorfismo do gene LRP5 e baixa densidade mineral ssea em pacientes na ps-menopausa. Foram avaliadas 200 pacientes com at cinco anos de ps-menopausa que possussem pronturios completos, com valores adequados de FSH, estradiol e densitometria ssea realizada antes de utilizao de terapia hormonal. O grupo foi analisado quanto presena de polimorfismo do gene LPR5. O dados clnicos foram registrados por meio de entrevistas com as pacientes. Avaliou-se a densitometria ssea, realizada em aparelho Lunar para anlise da densidade mineral ssea e do T escore, em coluna lombar (L2-L4). As genotipagens foram realizadas pela reao em cadeia da polimerase (PCR) com DNA proveniente de sangue coletado. Quanto ao polimorfismo do gene LPR5 esperasse encontrar uma correlao entre o polimorfismo do gene LRP5 e baixa densidade mineral ssea. Apoio Financeiro: CNPq Participantes: Mauro Abi Haidar, Andr Abou Haidar

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Autores: Bolsista: Orientador:

Anlise do polimorfismo dos receptores FcgamaIIIa e FcgamaIIIb em pacientes com lpus eritematoso sistmico
Andrade, L.E.C.; Santos, V.C.; Grecco, M.; Silva, N.P.; Mouro, T.B. Tula Bittencourt Mouro - UNIFESP Neusa Pereira da Silva - Medicina / Reumatologia

Resumo:

Introduo: o lpus eritematoso sistmico (LES) uma doena auto-imune que apresenta manifestaes clnicas variadas, com acometimento de mltiplos rgos e sistemas. Acredita-se que fatores genticos, imunolgicos e ambientais estejam associados ao desencadeamento e progresso da doena, incluindo a produo de auto-anticorpos e a formao de imunocomplexos (ICs) patognicos. A ineficincia no mecanismo de clearance de ICs leva a sua deposio nos tecidos, estimulando inflamao e causando destruio tecidual. Acredita-se que deficincias em protenas do complemento e alteraes em receptores que reconhecem a IgG (Fcgama) estejam associadas ao LES. Os receptores Fcgama so glicoprotenas encontradas na superfcie de clulas hematopoiticas. Em seres humanos esses receptores so: FcgamaRI (DC64), FcgamaRII (CD32) e FcgamaIII (CD16). Os receptores Fcgama so diferencialmente expressos nas clulas do sistema imunolgico e apresentam funes variadas, incluindo a ligao a ICs levando sua internalizao, degradao e apresentao do antgeno. Polimorfismos de FcgamaRs atualmente so considerados fatores de risco hereditrio para doenas auto-imunes e infecciosas. Nesse trabalho sero analisado especificamente, polimorfismos associados aos receptores FcgamaIIIa e FcgamaIIIb. FcgamaIIIa expresso principalmente na superfcie celular de clulas NK e macrfagos, j FcgamaIIIb expresso abundantemente em neutrfilos. Entre os polimorfismos do gene que codifica o receptor FcgamaIIIa, a substituio 559(G/T) que resulta na troca de valina (V) por fenilalanina (F), parece representar um maior risco para o desenvolvimento de LES. Os receptores FcgamaIIIb apresentam trs formas polimrficas conhecidas como antgeno neutroflico humano (HNA), HNA-1a, HNA-1b e HNA-1c. A relao dos receptores FcgamaRIIIa e FcgamaRIIIb com o LES foi estudada em diferentes etnias, porm os dados so conflitantes. No Brasil nenhum estudo foi realizado. Devido falta de dados na populao brasileira e a existncia de dados conflitantes, justificase o estudo do polimorfismo desses receptores e sua eventual contribuio na etiopatogenia do LES em nosso meio. Objetivos: determinar a prevalncia do polimorfismo dos receptores FcgamaRIIIa e FcgamaIIIb em paciente com LES e em indivduos saudveis, na populao brasileira e estudar a associao entre os polimorfismos observados e caractersticas clnicas e laboratoriais dos pacientes com LES. Mtodos: sero coletadas amostras de sangue de 300 pacientes com LES e 300 indivduos saudveis, excluindo a etnia oriental. Para identificao do polimorfismo feita extrao de DNA pelo mtodo de salting out e, a seguir, feito PCR (reao em cadeia da polimerase) convencional ou PCR em tempo real. No PCR convencional, depois da amplificao, as bandas especficas so visualizadas aps eletroforese em gel de agarose 1,5%, corado com brometo de etdio. No PCR em tempo real a presena do polimorfismo avaliada pela curva de melting do produto amplificado. Para comparao das freqncias dos diferentes alelos entre os grupos controle e lpico ser feito teste qui-quadrado, com um nvel de significncia de 0,05. No momento esto sendo realizadas a extrao de DNA e a padronizao dos mtodos de PCR. Resultados esperados: espera-se poder avaliar a relao entre o polimorfismo dos receptores FcgamaRIIIa e FcgamaIIIb e a etiopatogenia do LES na populao brasileira, assim como a associao desses polimorfismos com as diversas caractersticas clnicas da doena. Aprovao no Comit de tica em Pesquisa No.: 2074/07 Participantes: Lus Eduardo Coelho Andrade, Viviane Cardoso dos Santos, Marcelle Grecco, Neusa Pereira da Silva, Tula Bittencourt Mouro

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Autores: Bolsista: Orientador:

Anlise morfolgica e histoqumica de membranas hbridas (sinttica e biolgica) para reparo tecidual
Cunha, G.L.A.; Cherbo, T.; Mendes, A.; Feldner Jr, P.C.; Giro, M.J.B.C.; Dreyfus, J.L.; Nader, H.B. Tiago Cherbo - UNIFESP Helena Bonciani Nader - Bioqumica / Biologia Molecular

Resumo:

Introduo: Membranas de polipropileno, hbridas e derivadas de tecidos animais so amplamente empregadas, na cirurgia, para contenso ou suspenso, principalmente para correo da incontinncia urinria de esforo. Estudos mostram que os enxertos derivados de tecidos animais apresentam rejeio pelo paciente, possuem alto custo e so de tamanhos limitados, porm parecem se integrar totalmente ao tecido humano. J as membranas sintticas, possuem baixo custo, vrios tamanhos e formas, porm no so substitudas por tecido humano o que pode causar posterior eroso e cicatrizao do tecido adjacente. As membranas hbridas parecem ser uma nova ferramenta que se mostra altamente eficaz minimizando os danos teciduais e aumentando a facilidade de obteno do material. Objetivos: Investigar a composio biolgica de membranas hbridas (biolgica e sinttica) para melhor adequao de uso. Material e mtodos: Membranas hbridas (SIS, Cook Biotech, Lafayette, EUA) foram hidratadas, fixadas com para-formaldedo e em seguida emblocadas em parafina para realizao de cortes histolgicos de 3 micrometros cada. Os cortes foram colocados em lminas silanizadas e ento submetidas aos ensaios histolgicos (Hematoxilina-eosina, picrosrius, alcian blue, PAS) e de imunohistoqumica (anticorpos contra molculas de matriz extracelular e marcadores caractersticos). Os tipos de glicosaminoglicanos (GAGs) presentes na membrana foram tambm avaliados. As membranas foram preparadas e os GAGs purificados avaliados pela migrao caracterstica na eletroforese em gel de agarose. Resultados: Os GAGs presentes na membrana so: heparina e dermatansulfato. As anlises histoqumicas resultaram na deteco das seguintes molculas na membrana hbrida em estudo: Sindecam-4, proteoglicano de heparam sulfato presente na superfcie celular; fator de Von Willebrad, marcador de clula endotelial; Laminina, glicoprotena caracterstica de membrana basal; Vimentina, marcador de clula mesenquimal; -actina, marcador de clula muscular; Lumicam, proteoglicano de queratam sulfato presente na matriz extracelular (MEC); Decorim, proteoglicano de dermatam sulfato presente na MEC; Colgeno IV, protena caracterstica de membrana basal; Condroitim 4 sulfato e 6 sulfato, glicosaminoglicano presente na superfcie e MEC; Versicam, proteoglicano de condroitim sulfato de MEC; cido Hialurnico, glicosaminoglicano de MEC; Biglicam, proteoglicano de dermatam sulfato de MEC; Integrina -5, receptor MEC presente na superfcie celular. As seguintes molculas no esto presentes na membrana hbrida estudada, histoqumica negativa: Citoqueratina, marcador de clula epitelial; Fibronectina, glicoprotena abundante na matriz extracelular; Colgeno I, protena abundante na MEC. Concluso: A membrana hbrida para enxerto parece ser constituda principalmente de componentes da MEC, principalmente os presentes na membrana basal, clulas de origem mesenquimal (tecido conjuntivo) e clulas de origem muscular, alm do composto sinttico. Aprovao no Comit de tica em Pesquisa No.: 0660/05 Participantes: Gabriel Lopes Argello Cunha, Tiago Cherbo, Aline Mendes, Paulo Cezar Feldner Martins Junior, Manoel Joo Batista Castelo Giro, Juliana Luporini Dreyfuss, Helena Bonciani Nader

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Autores: Bolsista: Orientador:

Avaliao da atividade leishmanicida de complexos paladaciclos.


Mestriner, C.L.B.; Pimentel, I.A.S. Isabella Aparecida Salerno Pimentel - UNIFESP Clara Lcia Barbiri Mestriner - Microbiologia, Imunologia e Parasitologia / Parasitologia

Resumo:

As leishmanioses compreendem um grupo de parasitoses causadas por diversas espcies de protozorios flagelados do gnero Leishmania. Tal gnero compreende parasitas digenticos que se desenvolvem alternadamente em hospedeiros vertebrados mamferos, entre eles o homem, e em hospedeiros invertebrados, representados por insetos dpteros genericamente denominados flebtomos. Nos vertebrados, esses parasitas assumem a forma amastigota que se multiplica obrigatoriamente em um vacolo parasitforo dentro de macrfagos. A leishmaniose visceral ou calazar, nas Amricas causada pela Leishmania (Leishmania) chagasi, uma doena crnica e debilitante, que apresenta um carter consumptivo, podendo levar morte se no tratada precocemente. No Brasil 90% dos casos de leishmaniose visceral encontram-se na regio Nordeste e as estratgias de controle da doena empregadas at o momento baseiam-se no tratamento dos pacientes, combate aos vetores e, principalmente, no sacrifcio dos ces, o principal reservatrio domstico da leishmaniose visceral no pas. A eliminao dos ces doentes como medida profiltica, somada toxicidade dos medicamentos utilizados para o tratamento do calazar humano, tm levado procura de novas drogas, menos txicas e tambm ativas contra a leishmaniose visceral canina. O presente trabalho tem como objetivo testar a atividade leishmanicida de um composto organometlico de paldio ativo no combate a clulas tumorais e de ao lisossomal, (N,N-dimetil-1-feniletilamina-1,1'-bis (difenilfosfina) ferroceno [Pd(C2,N-S-(dmpa)(dppf)]Cl, denominado SF 1.2, sobre a L. (L.) chagasi. Testes iniciais foram realizados utilizando-se culturas in vitro de macrfagos peritoneais de camundongos infectados com amastigotas do parasita. O SF 1.2 foi testado nas concentraes de 0,5, 1,0, 1,5, 2,0, 5,0, 10 e 20 mM. Aps o tratamento das culturas, a infeco foi avaliada pelo clculo dos ndices fagocticos e a citotoxicidade foi analisada pelo mtodo do MTT [brometo de (3-4,5 dimetil tiazol-2yl)-2,5 diphenyl tetrazolium]. Os resultados demonstraram que, nessas concentraes, a droga no apresentou efeito leishmanicida sobre a L. (L.) chagasi. Observou-se tambm que de concentrao de 20 mM, o SF 1.2 exerceu um efeito citotxico significante sobre os macrfagos infectados (92%). Levando-se em conta esses resultados e a significante atividade leishmanicida de um outro composto organometlico paladaciclo, [Pd(N,N-dimetil-1-fenetilamina-1,2-etanobis-(difenilfosfina)] (DPPE 1.2) sobre os amastigotas de L. (L.) amazonensis, o prximo passo do nosso projeto ser testar a ao dessa droga sobre os amastigotas de L. (L.) chagasi com a expectativa de que esse composto apresente melhor atividade que a observada com o SF 1.2. Apoio: CNPq Aprovao no Comit de tica em Pesquisa No.: 107/08 Participantes: Clara Lcia Barbiri Mestriner, Isabella Aparecida Salerno Pimentel

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Autores: Bolsista: Orientador:

AVALIAO DA EXPRESSO DE RECEPTORES CB1 EM CAMUNDONGOS COM ALTO E BAIXO NVEL DE SENSIBILIZAO LOCOMOTORA INDUZIDA POR ETANOL
Coelhoso, C.C.; Oliveira, M.G.; Santos Junior, J.G; Silveira, D.X.; Mello, L.E.A.M. Cassia de Canha Coelhoso - UNIFESP Luiz Eugnio Arajo de Moraes Mello - Fisiologia / Neurofiosiologia

Resumo:

Relatos da literatura indicam que em camundongos, a susceptibilidade ao desenvolvimento da sensibilizao locomotora induzida pelo etanol est associada a alteraes do sistema dopaminrgico e glutamatrgico. Recentemente, foi descrito que o sistema endocanabinide exerce uma forte modulao na atividade dopaminrgica e glutamatrgica. No presente trabalho ser verificado se existe alterao na expresso de receptores canabinides CB1 no nucleus accumbens, crtex prefrontal medial e rea tegmentar ventral de animais tratados cronicamente com etanol e classificados como sensibilizados e no sensibilizados no paradigma da sensibilizao locomotora. Antes de iniciar o tratamento, camundongos suos machos adultos foram individualmente mantidos por 15 min em uma caixa de atividade automatizada, a fim de se verificar a distncia percorrida pelo animal durante este perodo. A partir do dia seguinte, os animais (N=32) foram submetidos ao tratamento com etanol (2 g/Kg, i.p. 15 % v/v) por 21 dias consecutivos. Animais controle (N=8) foram tratados com soluo salina. Logo aps a administrao nos dias 1, 7, 14 e 21, os animais foram avaliados por 15 min na caixa de atividade automatizada. Nos demais dias, os animais foram tratados e em seguida colocados em suas caixas moradias. Passados 4 dias do tratamento crnico, todos os animais foram desafiados com etanol (1,4 g/kg, i.p., 15% v/v) e novamente colocados na caixa de atividade. Aps 90 min do desafio, os animais foram perfundidos para posterior processamento do encfalo para imuno-histoqumica para receptores CB1. De acordo com a atividade locomotora obtida no dia do desafio entre os animais tratados cronicamente com etanol, foram formados dois grupos experimentais denominados: sensibilizados (1 desvio padro acima da mdia) e no sensibilizados (1 desvio padro abaixo da mdia). Com base nessa definio, os animais classificados como sensibilizados tiveram uma maior atividade locomotora no momento do desafio, quando comparados aos animais controle e no sensibilizados [F(2,21)=12,19 P<0,01]. Ainda, no houve diferena entre os grupos experimentais no que se refere atividade locomotora antes do incio do tratamento com a droga [F(2,21)=0,63 P=0,51]. O estudo imuno-histoqumico para a quantificao de receptores CB1 encontra-se em andamento e os dados sero apresentados por ocasio da apresentao do painel. Nossa hiptese experimental sugere que essas 2 distintas populaes de animais devem ter diferente expresso de receptores CB1 nas reas enceflicas de interesse. APOIO FINANCEIRO: CNPq e FAPESP. Participantes: Cssia de Canha Coelhoso, Michel Gonalves de Oliveira, Jair Guilherme dos Santos Junior, Dartiu Xavier da Silveira, Luiz Eugnio Arajo de Moraes Mello

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Avaliao da metilao aberrante do DNA como marcador molecular para tumores de cabea e pescoo
Longo, L.; Carvalho, A.C.; Oliveira, A.L.V.; Rettori, M.M.; Carvalho, A.L.; Cavalare, M. M. Mariana Marcusso Cavalare - UNIFESP Andr Luiz Vettore de Oliveira - Cincias Biolgicas / Laboratrio de Biologia Molecular do Cncer

Resumo:

O cncer de cabea e pescoo encontra-se entre os dez mais freqentes no mundo, sendo que a variante mais comum o carcinoma epidermide (CECP). Esta neoplasia apresenta uma elevada taxa de recidivas loco-regionais. A presena de hipermetilao nas regies promotoras dos genes est associada supresso da expresso gnica e tem sido considerada como um potencial marcador molecular para vrios tipos tumorais, incluindo os CECP. Por essa razo, o presente trabalho tem por objetivo avaliar o perfil de metilao de amostras de soro de pacientes submetidos ao tratamento de CECP coletadas prospectivamente nos perodos pr e ps operatrio. Desta forma se pretende verificar se o perfil de metilao pode ser uma ferramenta til para o diagnstico precoce de recidivas em pacientes acometidos por esta neoplasia. A possibilidade desta deteco precoce poder contribuir para um aumento na taxa de sobrevida e melhoria da qualidade de vida dos pacientes. Financiamento: FAPESP Aprovao no Comit de tica em Pesquisa No.: 0561/08 Participantes: Luiza Longo, Ana Carolina de Carvalho, Andr Luiz Vettore de Oliveira, Marianna M. Rettori, Andr L. Carvalho, Mariana Marcusso Cavalare

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AVALIAO DA MIGRAO DE CLULAS DE MEDULA SSEA GFP+ NO HIPOCAMPO DE CAMUNDONGOS EPILPTICOS


Romariz, S.A.A.; Ferrazoli, E.; Blanco, M.M.; Mello, L.E.A.M.; Longo, B.M. Simone Amaro Alves Romariz - Centro Univ. So Camilo Beatriz Monteiro Longo - Fisiologia / Neurofisiologia

Resumo:

Introduo: Estudos recentes mostram que clulas precursoras de medula ssea (MO) migram para a rea lesada no encfalo e se proliferam, e que os processos de migrao e proliferao dessas clulas esto, provavelmente, associados fenmenos do perodo agudo aps eventos lesivos. Nosso objetivo foi verificar o percentual de clulas GFP+ que migraram para o hipocampo de animais epilpticos previamente transplantados, e comparar com a quantificao por Nissl, que indica a sobrevivncia de clulas locais aps a induo do status epilepticus (SE) por pilocarpina. Mtodos: A medula ssea de camundongos adultos GFP+ foi removida em ambiente assptico e estril. Aps lavagens, clulas totais de MO, contendo 106 clulas por animal, foram injetadas por via endovenosa em camundongos adultos irradiados. Trinta dias aps o transplante, os animais foram injetados com pilocarpina e desenvolveram SE por 30 minutos, sendo ento perfundidos em diferentes tempos ps crise, 24h, 7 dias e 15 dias. Grupos de animais controles transplantados foram injetados com salina e processados da mesma maneira, nos mesmos tempos. Aps a perfuso, os encfalos foram seccionados (30 m) e processados para GFP e colorao de Nissl. As lminas foram quantificadas nas regies de CA1, CA3, hilo e camada granular do giro denteado. Resultados: Nos animais epilpticos, clulas GFP+ oriundas da medula ssea, esto presentes nas camadas subgranular, CA3 e hilo hipocampal com maior concentrao aos 7 dias aps o SE, com diferenas significantes quando comparado aos controles (p<0,01) e aos outros tempos (p<0,01). Aos 15 dias, o nmero de clulas GFP+ diminuiu. O mesmo padro em termos de regies hipocampais e perfil temporal foi observado para o Nissl. A quantificao por Nissl indicou um aumento entre 24h e 7 dias, e diminuio no tempo de 15 dias, seguindo o mesmo padro observado para as clulas GFP+. Discusso: Nossos dados indicam que clulas provenientes da medula ssea tm capacidade de migrar para regies do hipocampo envolvidas em leso por induo de crise epilptica. O pico de migrao e a localizao das clulas coincidem com as reas envolvidas na perda neuronal induzida neste modelo e com o tempo descrito para neurognese presente nestas reas. Quando a leso se estabiliza o nmero de clulas GFP+ diminui. Nossos dados sugerem que os processos de migrao dessas clulas esto, provavelmente, associados ao perodo agudo e resposta inflamatria que se segue aps eventos lesivos. Anlises posteriores com marcao para BrdU sero feitas a fim de verificarmos a proliferao e a presena de dupla marcao GFP/BrdU. Apoio financeiro: CNPq e FAPESP Aprovao no Comit de tica em Pesquisa No.: 0334/08 Participantes: Simone Amaro Alves Romariz, Enas Ferrazoli, Marcela Blanco, Luiz Eugnio Arajo de Moraes Mello, Beatriz Monteiro Longo

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AVALIAO DE MARCADORES DE ESTRESSE OXIDATIVO EM MODELO ANIMAL DE MUCOPOLISSACARIDOSE TIPO I


Lauro, E.M.; Pereira, V.G; Rodrigues, L.C.; Lungato, L.; D'Almeida, V. Elaine Mendias Lauro - Faculdade Oswaldo Cruz - FOC Vania D'Almeida - Psicobiologia /

Resumo:

Mucopolissacaridose tipo I (MPS I) uma doena autossmica recessiva causada pela deficincia da enzima lisossmica -L-iduronidase (IDUA), que necessria para a degradao de dois glicosaminoglicanos (GAGs): dermatam e heparam sulfatos. O acmulo dos GAGs nas clulas do organismo provoca uma srie de sintomas fsicos e anormalidades, como: articulaes rgidas, doenas cardacas, turvao da crnea, hepatoesplenomegalia, retardo mental e caractersticas faciais grosseiras. O estresse oxidativo est envolvido na patognese da vrias doenas, inclusive de outros erros inatos do metabolismo, nos quais uma excessiva produo de radicais livres pode ser devida acumulao de metablitos txicos na clula. O objetivo deste estudo foi avaliar marcadores bioqumicos de estresse oxidativo em diversos tecidos de um modelo animal de MPS I (Idua -/-), para avaliar a possvel participao de espcies reativas de oxignio na fisiopatologia da doena. Nveis de glutationa total (GSH) e atividade das enzimas superxido dismutase (SOD) e catalase (CAT) foram analisados em vrios tecidos (crebro, fgado e eritrcitos) de camundongos C57BL/6 Idua + / +, Idua + / - e Idua - / -, com idade de 6 meses, por mtodos colorimtricos e espectrofotomtricos, respectivamente. O projeto foi aprovado pelo Comit de tica em Pesquisa da Universidade Federal de So Paulo/Hospital So Paulo (CEP 1165/07). Uma reduo significativa na atividade de CAT eritrocitria (p<0,05) e um aumento significativo nos nveis hepticos de GSH (p<0,05) foram encontrados no grupo de heterozigotos (Idua +/-), quando comparado com os dois homozigotos (Idua + / + e Idua -/-). Estes resultados sugerem que existe um desequilbrio na defesa antioxidante nos heterozigotos para MPS I, levando a uma ruptura dos processos redox, e representam uma prova de que alguns mecanismos celulares poderiam estar alterados neste gentipo. Suporte Financeiro: CNPq, CAPES, AFIP e Genzyme do Brasil. Aprovao no Comit de tica em Pesquisa No.: 1165/07 Participantes: Elaine Mendias Lauro, Vanessa Gonalves Pereira, Lara Cheliz Rodrigues, Lisandro Lungato, Vnia DAlmeida

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Autores: Bolsista: Orientador:

Avaliao do fentipo linfocitrio em diferentes stios aps o transplante de pele


Silva, M.B.; Mussalem, J.S.; Squaiella, C.C.; Lopes, C.T.; Franco, M.F.; Maugeri, I.M.L.; Bueno, V. Marina Burgos da Silva - UNIFESP Ieda Maria Longo Maugri - Microbiologia, Imunologia e Parasitologia / Imunologia

Resumo:

A prtica de transplantes tem se tornado uma terapia extremamente importante em indivduos com funo comprometida ou falncia de determinados rgos. Apesar disso, o processo de rejeio, cujos mecanismos ainda no se encontram totalmente desvendados, continua sendo o principal fator limitante para o sucesso desse procedimento. Existe hoje um amplo conhecimento acerca dos regentes da rejeio hiperaguda, contudo, ainda persistem vrios enigmas quanto atuao dos diferentes tipos celulares na rejeio aguda e crnica, principais nos quadros clnicos atuais. Deste modo, torna-se fundamental o estudo de seus determinantes. Neste trabalho, propomos avaliar o processo de rejeio pelo modelo de transplante de pele em camundongos parcialmente compatveis tendo como animal doador F1(BALB/c x C57BL/6) e receptor C57BL/6. Alm destes, tambm utilizamos como receptores animais C57BL/6 knockouts (KO) para IL-10 ou IFN- Visando entender o papel destas citocinas no processo de rejeio. Os animais foram pesados diariamente para acompanhamento do ganho ou perda de massa corprea durante 20 dias aps o transplante. Foi feito o acompanhamento da sobrevida do enxerto para determinao da data de rejeio (90% de necrose tecidual) registrada por fotos. A anlise do fentipo linfocitrio das clulas do bao e linfonodos drenantes foi feita em animais 5 dias aps o transplante, por citometria de fluxo, utilizando marcadores para linfcitos TCD4+ e TCD8+ (anticorpos anti-CD3, anti-CD4 e anti-CD8). A anlise histolgica do infiltrado celular tambm foi feita no 5 dia aps o transplante, por HE. Como resultados parciais, observamos que no houve variao significante do peso dos animais transplantados selvagens ou animais transplantados KO durante os 20 dias aps o transplante. Apesar de certo grau de dificuldade, devido retrao dos enxertos, para determinarmos com preciso o dia exato da rejeio dos animais KO, verificamos que o tempo mdio de sobrevida do tecido transplantado foi de 9,8 1,8 dias para os animais receptores selvagens, 14,5 0,71 para os animais KO para IL-10 e 15,5 2,12 para os KO para IFN-, sendo ambos os animais KO estatisticamente significantes quando comparados aos selvagens. Pela anlise fenotpica, verificamos que houve queda significante no nmero de clulas TCD4+ e TCD8+ no bao dos animais selvagens transplantados em relao aos no transplantados, sendo a mdia do nmero absoluto de linfcitos TCD4+ e TCD8+ 11,51 0,89 x 106 cls/mL e 9,03 1,71 x 106 cls/mL para os animais transplantados e 20,5 2,2 x 106 cls/mL e 12,6 2,5 x 106 cls/mL para os animais no transplantados, respectivamente. J, nos linfonodos, no obtivemos variao significante no nmero de linfcitos TCD4+ e TCD8+ entre os animais selvagens transplantados (0,54 0,27 x 106 cls/mL e 0,45 0,23 x 106 cls/mL, respectivamente) e no transplantados (1,3 0,59 x 106 cls/mL e 1,03 0,35 x 106 cls/mL, respectivamente). Quanto anlise histolgica do enxerto, observou-se nas lminas dos animais C57BL/6 a presena de infiltrados linfomononucleares, componentes humorais como plasmcitos, alm de pontos com necrose, vasculite e destruio da camada drmica indicando o processo de rejeio aguda. Apesar de ainda no concludo, o estudo dos resultados obtidos at agora permite uma viso inicial dos mecanismos de rejeio aguda atuantes em transplantes de compatibilidade parcial. Como perspectiva para o projeto, temos o trmino da experimentao para todos os grupos propostos e conseqente comparao dos resultados para a integrao das diferentes variveis do processo. Com isso, haver uma melhor compreenso dos mecanismos envolvidos na rejeio de transplantes, permitindo otimizar as atuais terapias utilizadas para prolongar a viabilidade dos mesmos. Fontes Financiadoras: FAPESP, CNPq, CAPES. Aprovao no Comit de tica em Pesquisa No.: 0049/07 Participantes: Marina Burgos da Silva, Juliana Sekeres Mussalem, Carla Cristina Squaiella, Camila Tako Lopes, Marcelo Fabiano de Franco, Ieda Maria Longo Maugeri, Valquria Bueno

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Avaliao do Perfil de Metilao do Gene CLDN7 em Carcinoma Epidermide de Cabea e Pescoo


Carvalho, A.L.; Carvalho, A.C.; Oliveira, A.L.V.; Nagado, A. Aline Akemi Nagado - UNIFESP Andr Luiz Vettore de Oliveira - Cincias Biolgicas /

Resumo:

Os carcinomas epidermides de cabea e pescoo (CECP) encontram-se entre os dez tipos mais freqentes de neoplasias malignas, e as estratgias teraputicas atuais baseiam-se na localizao do tumor e no sistema de estadiamento TNM. Atualmente, buscam-se identificar marcadores moleculares capazes de auxiliar no diagnstico precoce, na determinao do prognstico e no seguimento dos pacientes, desta forma, se poder adequar melhor a teraputica ao grau de agressividade do tumor. As Claudinas (CLDN) compe uma famlia de protenas transmembrnicas responsveis pela adeso clula-clula em tecidos epiteliais. Anlises prvias de imuno-histoqumica e de expresso gnica mostraram que CLDN7 encontra-se hipoexpresso em CECP. A associao entre metilao aberrante do DNA e bloqueio da transcrio de diferentes genes supressores tumorais j foi demonstrada em diversas neoplasias. Experimentos com cultura de clulas mostraram que o tratamento com o agente desmetilante 5-aza-citidina promove a reexpresso de CLDN7, sugerindo que o processo de metilao aberrante possa estar envolvido com o silenciamento deste gene. O objetivo do presente estudo avaliar o perfil de metilao do gene CLDN7 em CECP a fim de confirmar o papel da metilao no silenciamento deste gene nestes tumores (CNPq e FAPESP). Aprovao no Comit de tica em Pesquisa No.: 0561/08 Participantes: Andr L. Carvalho, Ana Carolina de Carvalho, Andr Luiz Vettore de Oliveira, Aline Akemi Nagado

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Avaliao protica da -galactosidase A em pacientes portadores da doena de Fabry


Pesquero, J.B.; Turaa, L.T. Lauro Thiago Turaa - UNIFESP Joo Bosco Pesquero - Biofsica / Biofsica

Resumo:

Os Erros Inatos do Metabolismo (EIM) so doenas geneticamente determinadas, causadas por deficincias enzimticas especficas ou falhas no transporte de protenas. Entre os EIM, existem as doenas de depsito lisossmico (DDL), que so caracterizadas por acmulo progressivo de substratos no digeridos devido inativao, ausncia ou baixa atividade de uma das enzimas lisossomais. A Doena de Fabry (DF) uma das DDL mais comuns, sendo caracterizada por um erro na via catablica dos glicoesfingolipdeos, resultante da baixa atividade da enzima lisossomal -galactosidase A (AGAL). A possibilidade de tratamento efetivo dessas doenas genticas raras nos obriga a estar sempre alerta principalmente para o diagnstico precoce dos pacientes, j que eles podem ser altamente beneficiados pela terapia de reposio enzimtica (TER). O objetivo do nosso trabalho foi, em colaborao como o Laboratrio de Erros Inatos do Metabolismo da UNIFESP, avaliar a expresso de enzimas mutadas em pacientes portadores da DF. Inicialmente identificamos diferenas no peso molecular da enzima quando comparado forma selvagem, resultante de truncamentos. Analisamos tambm a proporo da enzima AGAL em relao s suas subunidades nos pacientes portadores da DF, comparando-a em relao aos indivduos normais. Alm disso, procuramos avaliar a interferncia de mutaes localizadas na regio promotora na expresso da enzima AGAL. Desse modo, pudemos relacionar tais alteraes proticas com sua respectiva mutao genmica, o que nos leva a uma melhor compreenso da importncia de determinadas alteraes no gene AGAL e seu respectivo impacto no fentipo do portador. Aprovao no Comit de tica em Pesquisa No.: 0585/07 Participantes: Joo Bosco Pesquero, Lauro Thiago Turaa

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Avaliao quantitativa e qualitativa dos glicosaminoglicanos da pele do paciente ps-cirurgia baritrica


Ferreira, L.M.; Tsuruta, J. Juliana Tsuruta - UNIFESP Lydia Masako Ferreira - Cirurgia / Cirurgia Plstica

Resumo:

O estudo tem o propsito de avaliar quantitativa e qualitativamente o contedo de GAGs (glicosaminoglicamos)na pele de pacientes ex-obesos classe III ou superior que foram submetidos cirurgia baritrica. As hipteses testadas so: 1 Existem diferenas quantitativas e qualitativas relacionadas as faixas etrias. 2 Existem diferenas quantitativas e qualitativas relacionadas ao gnero. 3 Existem diferenas quantitativas e qualitativas relacionadas cor da pele. 4 Existem diferenas quantitativas e qualitativas relacionadas ao tempo de ps-operatrio. 5 Existem diferenas quantitativas e qualitativas relacionadas reduo do IMC causada pela cirurgia baritrica. A matriz extracelular (MEC) um dos constituintes da pele humana. Ela formada por dois grupos de macromolculas. Um composto por estruturas fibrilares como o colgeno e a elastina e o outro por molculas que no se agrupam como a fibronectina, a laminina, os GAGs e os proteoglicanos. O colgeno e a elastina so responsveis pelo arcabouo estrutural e elstico de vrios tecidos. A principal funo da fibronectina aderir a matriz s clulas. A laminina contribui para a constituio da membrana basal. J os glicosaminoglicanos e os proteoglicanos formam estruturas que interagem com outros componentes da MEC e da superfcie celular, permitindo a circulao, nos tecidos conjuntivos, de nutrientes, hormnios e outros mensageiros qumicos. Estes compostos ainda esto envolvidos na adeso e diferenciao celular. O colgeno a protena mais abundante do corpo humano, correspondendo a 30% do seu total protico. sintetizado pelos fibroblastos e composto por uma trplice hlice com trs cadeias de polipeptdeos. Foram descritos mais de 18 tipos de colgeno, sendo que os tipos I, II e III, ditos fibrilares ou intersticiais, so os mais estudados. Na derme, o colgeno o principal constituinte. Receptores para estrognios e andrognios foram encontrados nos fibroblastos da pele, o que sugere a sua susceptibilidade a esses hormnios. O contedo de colgeno cutneo atinge o seu mximo entre os 20 e 40 anos de idade, ocorrendo a partir da uma relao inversa com a idade, que se acentua significativamente aps a menopausa. Os proteoglicanos (PGs) so macromolculas tambm presentes na MEC. So formados por um esqueleto protico ao qual encontram-se covalentemente ligadas uma ou mais cadeias laterais de glicosaminoglicanos sulfatados (GAGsS); que so heteropolissacardeos com estrutura bsica, constitudos por unidades alternadas de hexosamina e acar no-nitrogenado, que pode ser o cido urnico ou a galactose, unidos por ligaes glicosdicas. Esses acares podem ainda apresentar grupamentos sulfato que, juntamente com as carboxilas dos cidos urnicos, lhes conferem alta densidade de cargas negativas. Os PGs esto presentes na MEC, na membrana basal, na superfcie celular, e tambm intracelularmente, em grnulos secretrios. A atividade biolgica de cada PG depende das propriedades do seu esqueleto protico, da estrutura qumica do(s) GAG(s) covalentemente ligado(s), do nmero de cadeias, do grau de sulfatao e de sua localizao. Portanto, o tipo de cadeia de GAGs ligada exerce grande importncia na sua funo biolgica. As estruturas dos esqueletos proticos so muito semelhantes, porm a variabilidade estrutural das cadeias de GAGs muito grande. Isso sugere que a atividade biolgica dos PGs deve estar associada glicosilao, ou seja, diversidade da cadeia de GACGs. Atualmente, so conhecidos mais de 30 tipos diferentes de PGs, os quais exercem grande variedade de funes biolgicas. As cadeias de GAGs compoem 80 a 90% da sua massa. A seqncia arranjada com cargas negativas explica a atrao eletrosttica de vrias molculas de gua. Estas organizam-se em mltiplas camadas ao redor das cargas eltricas dos GAGs. Os principais GAGs encontrados nos tecidos animais so: condroitim 4-sulfato (4-CS), condroitim 6-sulfato (6-CS), dermatan sulfato (DS), heparan sulfato (HS), heparina (HEP), queratan sulfato (QS) e cido hialurnico (AH). Os passos do projeto so: (1)coleta das amostras; (2)extrao dos GAGs sulfatados; (3)mtodo analtico por densitometria; (4)eletroforese em gel de agarose; (5)identificao e quantificao dos GAGs; (6)dosagem do cido hialurnico; (7)anlise estatstica. O processo das peas ainda est em andamento e posteriormente ser feita a anlise dos dados na estatstica. Espera-se encontrar maior concentrao de cido Hialurnico do que qualquer GAG sulfatado e maiores concentraes de AH em pacientes com menos tempo de ps-operatrio de cirurgia baritrica. E em comparao com a literatura mundial, menores concentraes de GAGs sulfatados e de AH na pele desses pacientes do que de pessoas no obesas. Participantes: Lydia Masako Ferreira, Juliana Tsuruta

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Biblioteca de cDNA de Triatoma infestans: seqenciamento e anlise dos genes


Dorsa, K.K.; Buarque, D.S.; Tanaka, A.S. Karina Kores Dorsa - UNIFESP Aparecida Sadae Tanaka - Bioqumica / Bioqumica

Resumo:

A Doena de Chagas afeta de 16 a 18 milhes de pessoas na Amrica Latina, apresentando uma taxa anual de 50.000 mortes. O agente etiolgico da doena de Chagas o protozorio Trypanosoma cruzi, o qual infecta o hospedeiro vertebrado atravs de insetos da sub-famlia Triatominae, dentre eles, o hematfago Triatoma infestans, que considerado um dos principais vetores da Doena de Chagas no Brasil. O protozorio T. cruzi multiplica-se no tubo digestivo do T. infestans, sendo as formas infectantes eliminadas com suas fezes. Assim, os objetivos do presente trabalho foram a construo de uma biblioteca de cDNA de intestino mdio de insetos no alimentados e o seqenciamento das ESTs (Expression Sequence Tags) como forma de gerar informaes para o entendimento da biologia de T. infestans. A biblioteca de cDNA foi construda usando o SMARTTM cDNA Library Construction Kit. De posse da biblioteca, foi feita a exciso dos plasmdeos do genoma do fago utilizando a cepa de bactria E. coli BM 25.8. Colnias isoladas de bactrias resistentes a ampicilina foram aleatoriamente selecionadas e os clones amplificados por PCR (Polymerase Chain Reaction). Os produtos do PCR foram ento submetidos a reaes de seqenciamento de DNA utilizando o kit Dyenamic (GE healthcare). Em seguida, o material foi precipitado e ressuspenso em soluo formide loading Dye e os resultados foram fornecidos a partir do seqenciador automtico ABI-Prism 377. A anlise foi feita mediante comparao com sequncias disponveis no banco de dados e com base no algoritmo BLAST (http://www.ncbi.nlm.nih.gov/blast/Blast.cgi). Um total de 111 clones foi seqenciado, dos quais 63 foram utilizados neste trabalho. Cinco categorias principais de ESTs foram observadas. Dentre as seqncias analisadas, 20 (18,01%) foram relacionadas a protenas hipotticas com diferentes funes. Alm dessas, 18 seqncias (16,21%) mostraram alta similaridade com genes codificadores de protenas do metabolismo celular. Tambm foi possvel detectar 11 (9,9%) seqncias com funo de protena estrutural. Finalmente, foram identificadas 9 (8,1%) ESTs relacionadas a protenas com funo antimicrobiana (defensinas) e 5 (4,5%) ESTs com similaridade a inibidores de proteases (infestinas). As perspectivas desse trabalho so aumentar o nmero de seqncias para confirmar a distribuio dessas nos diferentes grupos de protenas. Apoio financeiro: FAPESP e CNPq. Aprovao no Comit de tica em Pesquisa No.: 0726/06 Participantes: Karina Kores Dorsa, Diego de Souza Buarque, Aparecida Sadae Tanaka

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Caracterizao da sensibilizao imediata por anfetamina e suas bases neuroanatmicas


Carmo, L.L.G.; Latorraca, R. Rafael Latorraca - UNIFESP Lcia Lameiro Garcez do Carmo - Farmacologia / Farmacologia

Resumo:

Introduo: Tanto a iniciao do abuso de drogas como a vulnerabilidade para recadas esto claramente relacionadas s propriedades reforadoras positivas destas drogas. Nesse contexto, j foi sugerido que neuro-adaptaes no-fisiolgicas induzidas pelas drogas de abuso no sistema dopaminrgico meso-accumbens poderiam culminar nos comportamentos desajustados caractersticos da dependncia qumica. A sensibilizao comportamental caracterizada pelo aumento progressivo da atividade locomotora aps administrao repetida de uma droga. um importante modelo animal para o estudo da plasticidade neuronal e dependncia farmacolgica,uma vez que tambm decorre de alteraes no sistema meso-accumbens. Recentemente, foi constatado o fenmeno de sensibilizao "imediata", aps uma nica exposio anfetamina (ANF). Nestes estudos, algumas horas aps a injeo inicial, quando j no havia indcios de nveis residuais de anfetamina, uma injeo desafio da droga foi capaz de promover uma hiperatividade locomotora aumentada em relao a camundongos previamente tratados com salina (SAL). Nosso presente estudo teve como objetivos replicar a sensibilizao imediata ao comportamento locomotor em camundongos obtida em nosso laboratrio (Chinen et al. 2006) e verificar se a sensibilidade imediata tem as mesmas bases neuroanatmicas da sensibilizao clssica. Para isso foram utilizados 4 grupos de camundongos machos EPM-M1 variando de acordo com o pr-tratamento e a injeo desafio (grupos SAL-SAL, SAL-ANF, ANF-SAL e ANF-ANF), com posterior quantificao da atividade locomotora e da atividade c-Fos de reas cerebrais especficas. Obtivemos como resultados a sensibilizao ao efeito hiperlocomotor da anfetamina 4 horas aps uma injeo prvia da droga [F(3,19) = 3,19 ; p < 0,001]-o grupo ANF-ANF apresentou atividade locomotora significantemente maior em relao aos demais grupos. Tambm no grupo ANF-ANF houve maior expresso de c-Fos no N. Accumbens [F(3,19)=10,92; p<0,001];Substncia Negra [F(3,19)=4,79; p < 0,05],crtex pr-frontal (cngulo) [F(3,19)=7,26; p = 0,002] e crtex pr-frontal (parte motora) [F(3,19) = 6,98 ; p = 0,002] em relao aos demais grupos. Podemos concluir, a partir da replicao da sensibilizao imediata ao comportamento locomotor em camundongos [F(3,19) = 3,19 ; p < 0,001] e do destaque estatstico do grupo ANF-ANF na marcao do ncleo accumbens [F(3,19)=10,92; p<0,001], uma forte evidncia de que o comportamento de sensibilizao imediata possui, ao menos como um dos mecanismos, as mesmas bases neuroanatmicas da sensibilizao clssica, ou seja, a plasticidade dopaminrgica do meso-accumbens. Dessa maneira, o uso agudo ou repetido por drogas de abuso poderiam levar a fenmenos plsticos em um mesmo sistema neuroqumico, acarretando repercusses comportamentais idnticas, mas distintas temporalmente. Aprovao no Comit de tica em Pesquisa No.: 1715/06 Participantes: Lcia Lameiro Garcez do Carmo, Rafael Latorraca

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Caracterizao de molculas envolvidas na interao entre Paracoccidioides brasiliensis e clulas B1.


Khoury, P.; Lopes, J.D.; Kono, F. Patricia Khoury - FMU Jos Daniel Lopes - Microbiologia, Imunologia e Parasitologia / Imunologia

Resumo:

A paracoccidioidomicose (PCM) uma micose profunda, de carter granulomatoso crnico, que compromete especialmente o tecido pulmonar, o sistema linftico, tecido mucocutneo e, por extenso, qualquer outro rgo (Brummer e col., 1993). PCM causada por Paracoccidioides brasiliensis, fungo termo-dimrfico, que se apresenta em forma de leveduras em vida parasitria ou quando cultivado a 36C e na forma de miclio quando cultivado temperatura ambiente. Est hoje estabelecido que linfcitos B murinos so classificados em clulas B-2 (clulas B convencionais), B-1a e B-1b. Clulas B-1 podem estar envolvidas na evoluo de processos infecciosos entretanto o papel destas clulas no destino da resposta inflamatria e na resistncia a infeces por parasitas no foi ainda completamente estabelecido. Camundongos Xid, geneticamente desprovidos de clulas B-1, so significantemente mais resistentes a infeces por P. brasiliensis (Kipnis, 1998). Clulas B-1 e macrfagos tm importante papel na formao do ranuloma in vitro (Vigna e cols, 2005), fato importante uma vez que pacientes com PCM apresentam quadro mais grave da doena quando a formao de granulomas reduzida. Estes resultados abrem novas perspectivas sobre o papel destas clulas na inflamao assim como no controle de infeces parasitrias como, por exemplo, a PCM. Dados no publicados do nosso laboratrio mostraram que h interao entre P. brasiliensis e clulas B-1 in vitro; contudo, os ligantes desta interao ainda no so conhecidos ou caracterizados. Com base nestes resultados, o presente projeto tem como objetivo avaliar se as molculas envolvidas na interao entre clulas B-1 e P. brasiliensis esto entre as j conhecidas ou esto entre aquelas detectveis por reagentes existentes ou produzidos no laboratrio e dirigidos contra o fungo ou molculas envolvidas com sua biologia. Com o intuito de avaliar se os anticorpos contra as molculas de superfcie de clulas B-1, como anti-CD5, anti-IgM, anti-B220, anti-Mac-1 eram capazes de inibir a interao de P. brasiliensis e clula B-1 in vitro foi fez-se ensaios de inibio. As clulas B-1 derivadas de camundongos coradas com CFDA (5,6-Carboxifluorescena diacetato) foram incubadas com anticorpo anti- CD5 , anti-IgM, anti B220, anti-Mac-1 e mantidas em co-cultura com o fungo P. brasiliensis. Aps 48 horas de co-cultivo foram analisadas por microscopia de fluorescncia. Neste ensaio foi observada interao entre fungo e clula B-1 na presena dos anticorpos anti-CD5, anti-IgM, antiB220, anti-Mac-1, mostrando que estes marcadores de superfcie de clulas B-1( CD5, IgM, B220, Mac-1 ) no esto envolvidas na interao fungo-clula B-1. Os prximos passos deste projeto consistiro na avaliao da participao de outros reagentes j conhecidos na interao entre clulas B-1 e P. brasiliensis, como gp75 e gp70, protenas presentes na superfcie do fungo. Aprovao no Comit de tica em Pesquisa No.: 0042/08 Participantes: Patricia Khoury, Jos Daniel Lopes, Fabiana Toshie de Camargo Konno

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Caracterizao de protenas quinases envolvidas no controle da diviso de organelas do Trypanosoma brucei


Umeda, L.; Jesus, T.C.L; Castilho, B.A; Schenkman, S. Luana de Cssia Umeda - Mackenzie Beatriz Amaral de Castilho - Microbiologia, Imunologia e Parasitologia / Microbiologia

Resumo:

As protenas TORs so quinases conservadas evolutivamente que coordenam o balano entre a sntese e a degradao protica em resposta a variaes ambientais como o nvel de nutrientes em clulas eucariticas. Estudos em clulas de mamferos e leveduras mostraram que a privao de nutrientes inibe a atividade das TORs quinase que resulta na parada do ciclo celular na fase G1 e dispara uma resposta ao stress nutricional pelo bloqueio do incio da traduo. Esse mesmo stress pode ser observado em clulas tratadas com rapamicina, uma droga imunossupressora que se liga FKB12, uma prolil-isomerase formando um complexo com a quinase TOR. Uma busca no genoma de Trypanosoma brucei, um protozorio parasita, permitiu identificar alguns candidatos que poderiam corresponder ao mesmo tipo de protena quinase (TbTOR1 e TbTOR2). Neste trabalho mostramos uma srie de experimentos para caracterizar a funo destas protenas em tripanossomas, uma vez que este organismo sendo um parasita, alm de evolutivamente distantes dos eucariotos superiores, apresenta uma grande dependncia ao meio ambiente para o seu crescimento e diferenciao. RNA de interferncia dessas quinases em T. brucei mostrou que ambas so essenciais para o crescimento do protozorio. As clulas interferidas apresentam uma morfologia que sugere erros na progresso do ciclo de diviso celular. Anticorpos gerados contra um fragmento da TbTOR1 e TbTOR2 reconheceram por imunofluorescncia diferentes estruturas celulares. Enquanto a TbTOR 1 se localiza em estruturas vesiculares correspondentes a cidocalcissomos, a TbTOR2 tem uma localizao coincidente com a nica mitocndria destes organismos. Em conjunto, estes resultados sugerem que estas protenas quinases devem ter um papel relacionado com a diviso da mitocndria e de cido calcissomos em tripanossomas. Aprovao no Comit de tica em Pesquisa No.: 1560/07 Participantes: Luana de Cssia Umeda, Teresa Cristina Leandro de Jesus, Beatriz Amaral de Castilho, Sergio Schenkman

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Caracterizao de um putativo DNA transposon no genoma do fungo dimrfico Paracoccidioides brasiliensis


Zanforlin, T.; Marini, M.M.; Cisalpino, P.S.; Franco da Silveira, J. Tamiris Zanforlin Olmos Fernandes - UNIFESP Jos Franco da Silveira Filho - Microbiologia, Imunologia e Parasitologia / Parasitologia

Resumo:

O fungo termodimrfico Paracoccidioides brasiliensis o agente causal da paracoccidioidomicose (PCM), a micose sistmica prevalente na Amrica Latina. Sua composio gentica pouco conhecida, sendo que um estgio, sexuado, ainda no foi descrito, o que dificulta o estudo deste fungo pelas tcnicas de gentica clssica. Elementos mveis so seqncias de DNA capazes de se mover pelo genoma, abundantes em procariotos e eucariotos, sendo vistos como agentes centrais na evoluo e reestruturao do genoma dos fungos. Os elementos transponveis em eucariotos so divididos em duas classes principais: retrotransposons e transposons. Os transposons apresentam uma regio codificadora da enzima transposase flanqueada por repeties terminais invertidas (ITR). Pouco se sabe sobre os elementos mveis em P. brasiliensis. O objetivo desse projeto identificar os transposons em P. brasiliensis e investigar a participao destes elementos na estrutura e organizao do genoma. A pesquisa de transposases no banco de dados do Projeto Genoma Funcional e Diferencial do P. brasiliensis (https://dna.biomol.unb.br/cgi-bin/Pb/home) revelou a existncia de dois contigs de cDNA, identificados como 530 (cn240498) e o 1938 (cn247880), que apresentam similaridade com transposases de Aspergillus fumigatus. A etapa seguinte foi amplificar por PCR fragmentos genomicos contendo as seqncias presentes nos contigs 530 e 1938. A reao de PCR utilizando como molde o DNA do isolado P. brasiliensis Pb18 resultou em fragmentos do tamanho esperado (500 pb) para os dois contigs. Os amplicons foram clonados no vetor p-GEM-T Easy e os clones recombinantes seqenciados, confirmando tratar-se das seqncias de interesse. Anlise com o algoritmo BLASTX (NCBI, http://www.ncbi.nlm.nih.gov/) revelou a existncia de similaridade dos clones com as transposases de A. fumigatus. Anlise com o programa ORF Finder (NCBI) detectou nos clones recombinantes um domnio conservado correspondente ao domnio HTH (Helix-Turn-Helix), regio do transposon responsvel pela ligao ao DNA. O clone contendo a seqncia do contig 530 foi utilizado como sonda em experimentos de hibridizao com o DNA genomico (Southern blot) e com as bandas cromossmicas separadas por eletroforese de campo pulsado (chromoblot). Este clone apresenta maior grau de identidade com outras transposases, assim como a seqncia correspondente ao domnio HTH. O DNA genmico de trs diferentes isolados de P. brasiliensis digeridos com as enzimas de restrio BamHI, BclI,BglII, EcoRI, EcoRV, HincI, HindIII e HinfI, assim como as bandas cromossmicas separadas por eletroforese de campo pulsado (PFGE) foram transferidos para membranas de nilon e hibridizados com o inserto do clone 530 marcado com fsforo radiativo. A hibridizao com o DNA genomico digerido com diferentes enzimas mostrou diferena significativa entre os diferentes isolados, indicando que o elemento est presente em muitas cpias no genoma. A sonda hibridizou intensamente com a banda cromossmica de maior tamanho (9,5 Mb) nos trs isolados .Em alguns isolados, outras bandas de menor tamanho tambm foram reconhecidas. Durante o desenvolvimento do nosso projeto foi liberada a seqncia do genoma do P. brasiliensis. A seqncia do contig 530 foi utilizada como objeto de busca neste banco de dados, o que permitiu uma anlise mais detalhada sobre os transposons existentes em seu genoma. Foram obtidas 140 entradas cuja anlise detalhada mostrou tratar-se de cpias truncadas do transposon. Uma caracterizao minuciosa deve ser realizada para a compreenso destes elementos mveis, bem como da estrutura e organizao dos mesmos no genoma do P. brasiliensis. Aprovao no Comit de tica em Pesquisa No.: 1834/07 Participantes: Tamiris Zanforlin Olmos Fernandes, Marjorie Mendes Marini, Patrcia Silva Cisalpino, Jos Franco da Silveira Filho

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Clonagem e expresso de um inibidor de trombina, a boofilina, de carrapato Boophilus microplus.


Batista, F.P.; Watanabe, R.M.O.; Cid, R.S.; Marchesano, R.A.F.O; Sasaki, S.D.; Tanaka, A.S. Fabricio Pereira Batista - UNIFESP Aparecida Sadae Tanaka - Bioqumica / Bioqumica

Resumo:

Os carrapatos so artrpodes hematfagos que parasitam diferentes tipos de hospedeiros. O carrapato Boophilus microplus prefere o boi como hospedeiro e apresenta grande importncia na Amrica do Sul. Os prejuzos causados por este caro pecuria brasileira superam um bilho de dlares por ano. Tais prejuzos nos bovinos so evidenciados principalmente pela ingesto de grandes volumes de sangue, que pode comprometer a produo de carne e leite; assim como a inoculao de agentes infecciosos nos hospedeiros; principalmente Anaplasma sp. E Babesia sp., responsveis pela tristeza parasitria bovina; e pela reduo da qualidade do couro devido s cicatrizes irreversveis ocasionadas durante a alimentao. Para obter sucesso durante a alimentao, esses artrpodes hematfagos necessitam interferir no sistema hemosttico do hospedeiro, inibindo a cascata da coagulao. O fator Xa e a trombina so as principais enzimas inibidas durante este processo. Recentemente, foi isolado de B. microplus um inibidor de trombina denominado boofilina, que possui dois domnios do tipo Kunitz-BPTI (Macedo-Ribeiro et al., 2008). Os objetivos desse trabalho so clonar, expressar e purificar este inibidor para a sua caracterizao funcional. Inicialmente foram construdos oligonucleotdeos baseados na seqncia depositada no banco de dados sob o nmero de acesso AJ304446. Esses oligonucleotdeos foram desenhados com a finalidade de clonar os dois domnios separadamente, chamados boofilina-d1 e boofilina-d2 e os dois domnios juntos, boophilina. Para isso foram realizadas as reaes em cadeia da polimerase (PCR) que amplificaram os fragmentos correspondentes s trs construes esperadas. As bandas de DNA foram purificadas e digeridas com as enzimas de restrio XhoI e Not I, juntamente com o vetor de expresso pPICZ- B. Em seguida, foram realizadas as ligaes dos fragmentos de cDNA da booflina, boofilina-d1 e boofilina-d2 no vetor pPICZ- B. As construes foram utilizadas na transformao de bactrias E. coli cepa DH5-, clones positivos foram selecionados para as trs construes. Em seguida, foram realizadas as mini-preparaes plasmidiais para realizar o seqenciamento de DNA. As perspectivas deste trabalho so a transformao de levedura P. pastoris e expresso das protenas recombinantes. Financiado por: FAPESP e CNPq. Aprovao no Comit de tica em Pesquisa No.: 0726/06 Participantes: Fabricio Pereira Batista, Renata Midori Okuta Watanabe, Renati Sakai Cid, Rafael Antonio Francesco de Oliveira Marchesano, Sergio Daishi Sasaki, Aparecida Sadae Tanaka

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Autores: Bolsista: Orientador:

CONCENTRAO DE -TOCOFEROL EM NEUTRFILOS NO ENVELHECIMENTO HUMANO


Matos, C.V.; Marco, D.B.; Giorgi, F.C.; Nogueira-Neto, J.; Cardoso, A.S.C.; Monteiro, H.P.; Junqueira, V.B.C.; Simon, K.A. Caio Vinicius de Matos - UNIFESP Karin Argenti Simon - Cincias Biolgicas /

Resumo:

Segundo uma das teorias do envelhecimento, este associado a uma alta carga de exposio a antgenos durante a vida, que leva a um processo inflamatrio crnico. Outra teoria o relaciona a um estresse oxidativo sistmico, devido menor quantidade de antioxidantes no enzimticos e a um acmulo de estruturas biolgicas oxidadas no organismo. Um dos mais importantes antioxidantes no enzimticos presentes no organismo o -tocoferol, a principal dentre as oito molculas que exercem a funo de Vitamina E. Alm de atuar na defesa antioxidante atravs da quebra de cadeias de peroxidao lipdica, estudos recentes mostram uma possvel participao do -tocoferol na sinalizao celular, podendo modular a adeso ao endotlio vascular e a liberao de espcies reativas em neutrfilos, que so a classe de leuccitos predominante na circulao e a primeira e mais imediata linha de defesa do organismo contra agentes infecciosos. Este estudo visa avaliar possveis variaes de concentrao de -tocoferol em neutrfilos de jovens e idosos humanos, frente ao estresse oxidativo sistmico observado no envelhecimento. At a presente etapa do projeto, foram verificados os nveis de -tocoferol no plasma e em neutrfilos humanos, comparando-se a um indicador de lipoperoxidao no plasma de jovens sadios. A dosagem de -tocoferol no plasma e nos neutrfilos foi realizada atravs de tcnica de cromatografia lquida de alto desempenho (HPLC) aps extrao com hexano, e o grau de lipoperoxidao foi medido atravs da concentrao de substncias reativas ao cido tiobarbitrico (SRAT), determinada atravs de espectrofotometria. Nesta etapa inicial, est sendo realizada a aprendizagem das tcnicas necessrias ao desenvolvimento do projeto e padronizao da extrao de -tocoferol dos neutrfilos e para tanto apenas material coletado de jovens est sendo utilizado. Espera-se que a concentrao de -tocoferol no plasma correlacione-se de forma inversamente proporcional ao grau de peroxidao lpidica, mas ainda no certo de que forma o valor da concentrao de -tocoferol nos neutrfilos ir se relacionar a esses dois valores. Apoio Financeiro: CNPq, FAPESP, CAPES Aprovao no Comit de tica em Pesquisa No.: 0237/07 Participantes: Caio Vinicius de Matos, Daniela Braga Marco, Francini Cheron Giorgi, Joes Nogueira-Neto, Andr dos Santos Carneiro Cardoso, Hugo Pequeno Monteiro, Vrginia Berlanga Campos Junqueira, Karin Argenti Simon

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Autores: Bolsista: Orientador:

Condies de Estresse Celular como Fator Desencadeador da Transformao Malgna


Morais, A.S.; Jasiulionis, M.G. Alice Santana Morais - UNILUS Miriam Galvonas Jasiulionis - Farmacologia / Farmacologia

Resumo:

Nos ltimos tempos, se tornou mais comum a abordagem de alteraes epigenticas como fatores desencadeadores da neoplasia. Contudo, o conhecimento do amplo contexto que envolve essas alteraes na cromatina ainda incipiente. Este projeto tem como objetivo central demonstrar a inter-relao entre os nveis de espcies reativas de oxignio e a metilao de DNA e sua contribuio com a transformao maligna. Para esse estudo, esto sendo utilizados dois modelos de transformao neoplsica, estabelecidos in vitro, a partir de clulas tratadas com agente desmetilante e inibidores de sintases de xido ntrico (NOS). O princpio para a gerao destas linhagens segue o mesmo raciocnio aplicado ao modelo murino de carcinognese, j obtido em nosso laboratrio, que favorece a aquisio de resistncia ao anoikis por melancitos imortalizados, porm no tumorignicos (Correa et al, 2005; Oba-Shinjo e Correa et al, 2006). A capacidade de ser reproduzido e a no utilizao de qualquer agente carcinognico externo faz do modelo um timo objeto para identificao de alteraes iniciais na gnese do melanoma, entre elas aquelas envolvendo metilao do DNA. Os resultados obtidos com o modelo base j demonstraram alteraes tanto na metilao de promotores de genes especficos como no nvel global de metilao e, tambm, alteraes nos nveis de espcies reativas. Por outro lado, os resultados prvios deste trabalho demonstram que as linhagens tratadas tendem a recuperar um padro mais prximo clula de origem (melan-a). Este estudo poder trazer informaes sobre os mecanismos moleculares envolvidos no estabelecimento de padres aberrante de metilao do DNA em melanomas, bem como contribuir com a identificao de novas estratgias de diagnstico, tratamento e preveno de tumores. Aprovao no Comit de tica em Pesquisa No.: 0220/07 Participantes: Alice Santana Morais, Miriam Galvonas Jasiulionis

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Autores: Bolsista: Orientador:

Construo de vetor retroviral para expresso controlada de condroitinase AC em leso no sistema nervoso central
Moreira, C.; Coulson-Thomas, Y.; Cantagalli, V.; Han, S.W.; Porcionatto, M. Caroline Monaco Moreira - UNIFESP Marimlia Porcionato - Bioquimica / Biologia Molecular

Resumo:

Nas leses no sistema nervoso central de mamferos adultos, os neurnios so incapazes de regenerar seus axnios e restabelecer as conexes funcionais. A falta de capacidade regenerativa devida, parcialmente, formao de uma cicatriz glial no local da leso. So encontrados na cicatriz glial, astrcitos, clulas precursoras de oligodendrcitos e micrglia, que produzem altos nveis de molculas que inibem o crescimento axonal. As principais molculas inibitrias produzidas por essas clulas so MAG (glicoprotena associada mielina), OMgp (glicoprotena associada mielina de oligodendrcitos), Nogo (protenas de superfcie celular que interagem com receptores especficos, NogoR e p75) e proteoglicanos de condroitim sulfato. Os proteoglicanos de condroitim sulfato so degradados por enzimas denominadas condroitinases, que so enzimas de origem bacteriana que despolimerizam especificamente as cadeias de condroitim sulfato, sendo a condroitinase AC a enzima que degrada condroitim-4-sulfato e condroitim-6-sulfato. J foi demonstrado que a remoo enzimtica das cadeias de condroitim sulfato aumenta a regenerao da fibra nervosa in vivo aps leses no trato nigroestriatal e na medula espinhal. Em trabalho recente do laboratrio (Coulson-Thomas et al, J. Neurosci. Meth., 171, 19-29, 2008) foi demonstrado que clulas mononucleadas derivadas da medula ssea transfectadas com um vetor contendo o gene para a enzima condroitinase AC e transplantadas no local da leso no SNC promovem a degradao de proteoglicanos de condroitim sulfato e o aumento da expresso de GAP-43 (protena associada ao crescimento axonal). Dando seqncia ao estudo da possvel utilizao de uma combinao de terapia celular e terapia gnica no tratamento de leses no SNC, este projeto tem por objetivo principal construir um vetor retroviral para expresso controlada da condroitinase AC. O gene da condroitinase AC, obtido por PCR a partir de DNA genmico da bactria Flavobacterium heparinum, foi inserido no sistema de vetores retrovirais BD RevTetOnTM. Esse sistema composto por dois vetores, um regulatrio, o pRevTetOn e um vetor de expresso, o pRevTRE, no qual o gene da condroitinase AC foi clonado. O vetor regulatrio produz um complexo protico denominado elemento regulatrio que age no vetor de expresso, promovendo a transcrio do gene clonado, porm somente na presena de tetraciclina ou doxiciclina, permitindo o controle da expresso do gene de interesse, neste caso, a condroitinase AC. Para a produo de retrovrus contendo o gene da condroitinase AC foram utilizadas clulas empacotadoras das linhagens PE501 e PT67. As clulas PE501, empacotadoras ecotrpicas, foram transfectadas com os vetores pRevTetOn e pRevTRE-condroitinase AC, separadamente, e os retrovrus produzidos por essas clulas foram utilizados para transduzir as clulas PT67, empacotadoras anfotrpicas. As linhagens celulares produtoras dos retrovrus foram selecionadas com higromicina e geneticina, pois os vetores de expresso e regulatrio possuem os genes de resistncia para esses antibiticos, respectivamente. Os retrovrus produzidos pelas PT67 foram utilizados para a determinao do ttulo viral em clulas da linhagem NIH 3T3. Os resultados obtidos at o momento indicam que a construo do retrovrus no sistema BD RevTetOnTM foi bem sucedida e obtivemos ttulos virais de 7x105 cfu/ml para o RevTRE-condroitinase AC e de 5x105 cfu/ml para o RevTetOn. Os retrovrus contendo o gene da cAC sero utilizados para realizao de testes in vitro, para avaliao da expresso da condroitinase AC sob o controle de doxiciclina e para determinao da atividade enzimtica. Tambm sero realizados ensaios in vivo, nos quais clulas mononucleadas derivadas da medula ssea sero infectadas com os retrovrus e sero posteriormente implantadas na regio da leso no SNC, para que secretem a enzima ativa e de maneira controlada, facilitando a regenerao axonal e a recuperao da rea lesada. Apoio Financeiro: FAPESP, CNPq, FADA-UNIFESP. Aprovao no Comit de tica em Pesquisa No.: 1875/07 Participantes: Caroline Mnaco Moreira, Yvette Coulson-Thomas, Vanessa Dionsio Cantagalli, Sang Won Han, Marimlia Porcionatto

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Autores: Bolsista: Orientador:

Correlao entre enzima conversora de angiotensina I (ECA) plasmtica e tecidual em ratos Wistar
Cardoso, R.S.; Oliveira, S.S.; Tetzlaf, D.R.; Neves, S.M.B.; Souccar, C.; Lapa, A.J.; Lima-Landman, M.T.R. Dbora Rodrigues Tetzlaf - UNIBAN Maria Teresa Riggio de Lima-Landman - Farmacologia / Farmacologia

Resumo:

Introduo: Ratos Wistar machos (M) e fmeas (F) da colnia 2-BAW apresentam diferentes nveis de atividade de ECA plasmtica o que permite agrup-los em animais com ECA alta (ECAa), ECA intermediria (ECAi) e ECA baixa (ECAb) (Ninahuaman e col., Phytomedicine, 2007; 14:321-7). Levando-se em conta a importncia crescente do sistema renina-angiotensina nos diferentes tecidos, o objetivo deste trabalho foi verificar a atividade da ECA tecidual nos rgos de animais com diferentes nveis de ECA plasmtica. Para tanto, a atividade da ECA do corao, do rim, das adrenais, do crebro, do pulmo, do fgado, do testculo ou dos ovrios foi determinada em ratos M e F com ECAa, ECAi e ECAb, comparativamente atividade enzimtica plasmtica. Mtodos: Ratos Wistar, adultos, M e F, provenientes do biotrio do INFAR da UNIFESP/EPM, foram agrupados em animais com ECA plasmtica alta (ECAa), com ECA plasmtica baixa (ECAb) e com ECA plasmtica intermediria (ECAi), conforme critrio previamente estabelecido (Ninahuaman e col., Phytomedicine, 2007; 14:321-7). Todos os protocolos utilizados foram aprovados pelo Comit de tica em Pesquisa da UNIFESP (CEP 0186/06). Aps a coleta de sangue por puno da artria caudal, os animais foram decapitados, e o corao, os rins, as adrenais, o crebro, os pulmes, o fgado, os testculos ou os ovrios foram retirados, pesados e armazenados em freezer -70 C. Os tecidos foram homogeneizados em tampo fosfato (PBS) 100 mM, pH 7,2, contendo sacarose 340 mM, NaCl 300 mM (1 g tecido: 10 mL tampo) e os inibidores de proteases p-hidroximetilbenzoato (p-OHMB) e fenil-metil-sufonil fluoreto (PMSF) (100 mM/mL de homogenato). O homogenato foi centrifugado (3000 rpm,10 min, 4C) e o sobrenadante foi congelado a -70C para posterior determinao da atividade da ECA. A concentrao de protenas dos homogenatos foi determinada pelo mtodo descrito por Bradford (1976). A atividade da ECA foi quantificada em microplacas mantidas em compartimento termostatizado (37C), pelo mtodo de fluorescncia apagada segundo Carmona e col. (Nat. Protoc. 2006;1:1971-6) em espectrofluormetro Chameleon Plate (ex 320 nm e em 420 nm). O aumento de fluorescncia devido a hidrlise do substrato Abz-YRK(Dnp)-P foi continuamente registrado e os valores expressos em unidades arbitrrias de fluorescncia (UAF) ou convertidos para atividade enzimtica em nmol/min/mL, quando de plasma, ou em nmol/min/mg de protena quando dos tecidos. Aps o estabelecimento das condies timas de ensaio para cada tecido, os experimentos (n=3 a 5 por grupo) foram realizados em triplicata. Resultados: A atividade da ECA plasmtica para os animais machos e fmeas foi 42,6 1,7 nmol/min/mL, 37,6 0,6 nmol/min/mL e 30,8 1,3 nmol/min/mL, e 43,3 2,3 nmol/min/mL, 36,4 0,6 nmol/min/mL e 28,1 1,2 nmol/min/mL, para os grupos de animais com ECAa, ECAi e ECAb, respectivamente. No grupo de animais fmeas com ECAa, o peso do crebro, do corao, dos rins, das adrenais, do fgado e dos ovrios foi (g): 1,47 0,01; 0,90 0,01; 1,82 0,03; 0,063 0,004; 7,98 0,35 e 0,11 0,02, respectivamente, no diferentes significativamente dos pesos de rgos dos grupos ECAi ou ECAb. No grupo de animais machos com ECAa, o peso do crebro, do corao, dos rins, das adrenais, do fgado e dos testculos foi (g): 1,39 0,07; 1,380,006; 2,930,14; 0,0620,001; 12,240,42; 3,400,23, respectivamente, no diferentes significativamente dos pesos de rgos dos grupos de machos com ECAi e ECAb. As relaes peso do rgo / peso do crebro no foi diferente entre os grupos de machos e fmeas com ECAa, ECAi ou ECAb. A atividade da ECA tecidual em nmol/min/mg protena no grupo de fmeas com ECAa foi 49,33,9; 176,029,3; 51,76,5; 177,718,2; 359,521,0; 45,82,2 para o corao, rins, adrenais, ovrios, pulmes e fgado, respectivamente, no diferentes do valor de ECA tecidual nos grupos de fmeas com ECAi ou ECAb. A atividade ECA tecidual em nmol/min/mg protena no grupo de machos com ECAa foi 92,120,6; 266,630,8; 78,319,4; 355,525,9; 397,413,3; 65,06,9 para o corao, rins, adrenais, testculos, pulmes e fgado, respectivamente, no diferentes do valor de ECA tecidual nos grupos de machos com ECAi e ECAb. Discusso: A atividade da ECA tecidual foi semelhante entre os animais com ECAa, ECAi e ECAb, indicando que os diferentes nveis de ECA plasmtica no se refletiram na atividade da ECA tecidual. Entre os rgos avaliados, o pulmo, tanto de machos como de fmeas, apresentou atividade da ECA maior comparativamente aos demais tecidos, seguido pelas atividades enzimticas dos rgos sexuais. Apoio financeiro: CNPq, FAPESP, CBA. Aprovao no Comit de tica em Pesquisa No.: 0186/06 Participantes: Renata dos Santos Cardoso, Sandrea Sales de Oliveira, Debora Rodrigues Tetzlaf, Siglia Maria Braga Neves, Caden Souccar, Antonio Jos Lapa, Maria Teresa Riggio de Lima-Landman

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Cryptococcus neoformans, anlise do crescimento em temperaturas distintas (30C e 37C)


Vallim, M.A.; Moretto, F.A. Felipe Alexandre Moretto - UNIFESP Marcelo Afonso Vallim - Cincias Biolgicas /

Resumo:

O fungo basidiomiceto Cryptococcus neoformans uma levedura encapsulada, agente etiolgico da criptococose. As espcies so comumente associadas com fezes de aves (pombos) e material vegetal (Eucaliptos). Esta levedura um patgeno oportunista que ataca pacientes imunocomprometidos pelo HIV,transplantados tratados com imunossupressores, e pessoas acometidas pelo cncer, alvo de tratamentos quimioterpios de ltima gerao. O objetivo do presente trabalho elucidar a via de transduo governada por Ras1 que possibilita ao fungo crescer em temperaturas elevadas (37C). Para alcanar tal objetivo, linhagens contendo inativao insercional gnica foram geradas e esto sendo analisadas com relao a capacidade de crescer a temperatura fisiolgica de mamferos. Ainda, em novos ensaios de transformao a ser realizados, espera-se gerar novos mutantes ampliando assim a busca por elementos envolvidos nesta via de transduo Aprovao no Comit de tica em Pesquisa No.: 1753.07 Participantes: Marcelo Afonso Vallim, Felipe Alexandre Moretto

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EFEITO AGUDO DA PENTOXIFILINA NA CONCENTRAO PLASMTICAS DE AMP CCLICO DE RATOS


Birbrair, A.; Aparecida-Santos, E.; Chiavegatti, T.; Andrade-Lopes, A.L.P.; Bergantin, L.B.; Godinho, R.O. Alexander Birbrair - UESC-BA Rosely Oliveira Godinho - Farmacologia / Farmacologia Celular

Resumo:

Introduo: A pentoxifilina um derivado de metilxantinas utilizado no tratamento de doena vascular perifrica e outras condies associadas ao dficit na microcirculao cerebral ou perifrica. O tratamento com pentoxifilina promove o aumento da deformabilidade das hemcias, a reduo da viscosidade sangunea, do potencial de agregao plaquetria e da formao de trombos. Alm disso, foi demonstrado que a pentoxifilina promove vasodilatao e atenua a inflamao durante eventos de sepse e choque hemorrgico, atravs da diminuio da ativao de neutrfilos e reduo de TNF-. O mecanismo de ao da pentoxifilina envolve a inibio no seletiva de fosfodiesterases e o acmulo intracelular de GMP cclico e AMP cclico, com conseqente fosforilao de protenas quinases especficas. Estudos anteriores do nosso grupo demonstraram a existncia de um transportador capaz de promover o efluxo do AMP cclico no msculo esqueltico. Assim, este segundo mensageiro poderia funcionar como pr-hormnio e exercer aes autcrinas e/ou parcrinas atravs do seu metablito farmacologicamente ativo adenosina (via extracelular AMP cclico - adenosina). Considerando o amplo uso da pentoxifilina no tratamento de doena vascular perifrica e que o seu mecanismo de ao envolve a produo de AMP cclico e, provavelmente, a ativao da via extracelular AMP cclico - adenosina, este trabalho teve como objetivo determinar se a pentoxifilina promove acmulo do segundo mensageiro no plasma. Mtodos: Ratos Wistar machos de trs meses de idade foram pesados e submetidos a gavagens dirias com gua (10 mL/kg), durante 14 dias. No 15 dia, os animais foram tratados com salina (n = 7) ou com o inibidor no seletivo de fosfodiesterases pentoxifilina (25 mg/kg, n = 6). Aps duas horas os animais foram anestesiados com cetamina 75 mg/Kg e xilazina 12 mg/Kg e o sangue da aorta abdominal (3 mL) foi coletado em tubos contendo 0,2 mL de EDTA 0,1 M. O plasma foi separado por centrifugao (2.500 x g por 20 min a 4 C) e fervido por 15 min para inativao de fosfodiesterases. O AMP cclico plasmtico foi quantificado por competio com o 3H-AMP cclico por uma protena ligadora. Para a atividade da acetilcolinesterase, amostras de plasma diludas 20 vezes em tampo fosfato 100 mM pH 8,0 foram incubadas com o substrato acetiltiocolina 2,4 mM na presena de DTNB 3,2 mM e a velocidade de formao do produto foi determinada a 405 nm. Resultados: Ao final do perodo de adaptao, no houve variao siginificante no peso dos animais em relao ao incio das gavagens (329,4 8,1 g), resultado compatvel com dados anteriores do laboratrio. O tratamento agudo por 2 h com pentoxifilina no alterou a atividade da acetilcolinesterase nem da concentrao plasmtica de AMP cclico em relao obtida em animais controles (2,2 0,2 pmoles/mL). Concluso: Os resultados obtidos demonstram que o tratamento agudo com pentoxifilina no altera as concentraes plasmticas de AMP cclico no plasma. Estudos complementares sero realizados para determinar o efeito da pentoxifilina nos metablitos do AMP cclico no plasma. Aprovao no Comit de tica em Pesquisa No.: 0222/08 Participantes: Alexander Birbrair, Edilaine Aparecida dos Santos, Tiago Chiavegatti, Ana Luiza Andrade de Paula Lopes, Leandro Bueno Bergantin, Rosely Oliveira Godinho

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EFEITO AGUDO DO AGONISTA DE ADRENOCEPTOR 2 FENOTEROL NA CONCENTRAO PLASMTICAS DE AMP CCLICO DE RATOS
Aparecida-Santos, E.; Birbrair, A.; Bergantin, L.B.; Chiavegatti, T.; Andrade-Lopes, A.L.P.; Godinho, R.O. Edilaine Aparecida dos Santos - Centro Univ. So Camilo Rosely Oliveira Godinho - Farmacologia / Farmacologia Celular

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Introduo: A asma uma doena inflamatria crnica de causa idioptica caracterizada por ataques recorrentes de dispnia devido a uma hiper-responsividade das vias areas inferiores. Segundo a OMS, a asma atinge 300 milhes de pessoas em todo o mundo, sendo que em 2005 aproximadamente 255 mil morreram em sua decorrncia. No Brasil anualmente a asma responsvel por aproximadamente 350.000 internaes, constituindo-se a quarta causa mais freqente de hospitalizao pelo SUS. Para tratar o broncospasmo agudo que ocorre durante a crise asmtica, utilizam-se com freqncia agonistas de adrenoceptor , como por exemplo o fenoterol, que possui alta afinidade ao subtipo 2. Os adrenoceptores pertencem famlia de receptores acoplados de protenas G heteromtricas (G protein coupled receptors GPCR). A ligao do agonista aos adrenoceptores ativa a protena G estimulatria (Gs), que, por sua vez, estimula a produo do segundo mensageiro AMP cclico ao interagir com a adenilil ciclase. Dentro da clula, o AMP cclico modula diversos processos fisiolgicos atravs da ativao de protenas quinases e fosforilao de fatores de transcrio, canais inicos e outras protenas intracelulares. No entanto, estudos anteriores do nosso grupo e de outros laboratrios demonstraram a existncia de um transportador capaz de promover o efluxo deste segundo mensageiro. Alm disso, foi demonstrada tambm a existncia de uma via extracelular de sinalizao do AMP cclico mediada pelo seu metablito adenosina (via extracelular AMP cclico - adenosina). Desta forma, o AMP cclico poderia promover respostas autcrinas e/ou parcrinas, funcionando como pr-hormnio devido a sua meia-vida extracelular maior em comparao da adenosina. O estudo da via extracelular AMP cclico - adenosina pode ser de grande importncia para a compreenso da patofisiologia e na busca de tratamentos para a asma, j que a adenosina potencializa a liberao de histamina e outras substncias vasoativas por mastcitos, promovendo intensa resposta broncoconstritora em pacientes asmticos. Considerando que o fenoterol uma droga amplamente utilizada na teraputica da asma e que o seu mecanismo de ao envolve a produo intracelular de AMP cclico e, provavelmente, ativao da via extracelular AMP cclico - adenosina, este trabalho teve como objetivo determinar se o fenoterol promove acmulo do segundo mensageiro no plasma. Mtodos: Ratos Wistar machos de dois meses de idade foram adaptados atravs de gavagens com gua (10 mL/kg) e o peso dos animais foi acompanhado durante os 14 dias da adaptao. No 15 dia, os animais foram tratados com salina (n = 7) ou com o agonista de adrenoceptores 2 fenoterol (10 mg/kg, n=6). Aps duas horas os animais foram anestesiados com cetamina 75mg/Kg e xilazina 12mg/Kg e o sangue da aorta abdominal (3mL) foi coletado em tubos contendo 200uL de EDTA 0,1 M. O plasma foi separado por centrifugao (2.500 x g por 20 min a 4 C) e uma alquota aquecida a 100 C por 15 min para inativao de fosfodiesterases. O AMP cclico plasmtico foi quantificado atravs de ensaio de competio do segundo mensageiro da amostra com o 3H-AMP cclico pela subunidade regulatria da protena quinase dependente de AMP cclico. Para a atividade da acetilcolinesterase, amostras de plasma diludas 20 vezes em tampo fosfato 100 mM pH 8,0 foram incubadas com o substrato acetiltiocolina 2,4 mM na presena de DTNB 3,2 mM e a velocidade de formao do produto foi acompanhada a 405 nm. Resultados: Ao final do perdo de adaptao, no houve variao siginificante no peso dos animais em relao ao incio das gavagens (294,0 8,3 g), resultado compatvel com dados anteriores do laboratrio. Da mesma forma, no foi observada alterao da atividade plasmtica da acetilcolinesterase aps o tratamento com fenoterol. Por outro lado, o tratamento agudo por 2h com fenoterol aumentou a concentrao plasmtica de AMP cclico em 211% em relao concentrao AMPc obtida em animais controles (2,2 0,2 pmoles/mL). Concluso: Os resultados obtidos demonstram que o tratamento agudo com fenoterol aumentam as concentraes plasmticas de AMP cclico, comprovando a existncia do efluxo do mesmo in vivo. Assim, a possvel formao de adenosina por esta via, especialmente no pulmo, poderia limitar a eficcia do tratamento da asma por agonistas 2. Apoio financeiro: FAPESP #05/59006-1, CNPq/PIBIC Aprovao no Comit de tica em Pesquisa No.: 0222/08 Participantes: Edilaine Aparecida dos Santos, Alexander Birbrair, Leandro Bueno Bergantin, Tiago Chiavegatti, Ana Luiza Andrade de Paula Lopes, Rosely Oliveira Godinho

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Autores: Bolsista: Orientador:

Efeito da ingesto de alimento sobre o teor extracelular de glicose no crtex cerebral de ratos normais ou com obesidade induzida por dieta hiperlipdica
Souza, A.P.; Souza, A.C.P.; Nakahira, C.; Ribeiro, E.B. Adriana Pereira de Souza Anthony Cardoso Pinto de Souza - UNIFESP / Carolina Nakahira - UNIFESP Eliane Beraldi Ribeiro - Fisiologia / Fisiologia da Nutrio

Resumo:

Diversas reas cerebrais esto envolvidas no controle da ingesto alimentar e do gasto energtico. Os centros hipotalmicos so as principais reas envolvidas no controle homeosttico da ingesto alimentar, enquanto as reas lmbicas e corticais, como o crtex pr-frontal, participam do aspecto hednico da ingesto alimentar, relacionado ao prazer e sensao de recompensa do ato de comer. Diversos hormnios, neurotransmissores e neuropeptdios participam deste controle, como leptina, insulina, serotonina, NPY, CART, orexinas, etc. Alm disto, h evidncias de que os prprios nutrientes ou seus metablitos poderiam atuar como sinalizadores no sistema nervoso central. Alguns estudos indicaram que a glicose que penetra no SNC, onde h neurnios cuja atividade se modifica em funo do teor de glicose, pode atuar como inibidor da ingesto alimentar. No est demonstrado se a glicose pode atuar como um sinalizador fisiolgico e se alteraes da dieta afetariam este papel. Apesar deste complexo sistema de controle, h, atualmente, uma alta prevalncia de obesidade que ocorre, entre outros fatores, devido ao consumo exagerado de alimentos hipercalricos e palatveis. Na gnese da obesidade, no s o teor calrico, mas tambm a composio de cidos graxos aparentam ser determinantes, sendo que os cidos graxos da srie n-3 (presentes no leo de peixe) possuem um menor efeito na obesidade quando comparado com os cidos graxos da srie n-6 (presentes no leo de soja). Contudo, mostramos que animais que ingeriram dieta enriquecida com n-3 tiveram alteraes no controle central da ingesto. Os trabalhos existentes ainda no concluem como dietas hiperlipdicas n-3 e n-6 alteram o controle central da ingesto. Neste contexto, o objetivo deste projeto avaliar se a ingesto alimentar altera o teor extracelular de glicose no crtex pr-frontal de ratos alimentados, dos dois aos quatro meses de idade, com dietas hiperlipdicas enriquecidas com leo de soja ou peixe. Para avaliar o teor de glicose extracelular utilizamos a tcnica de microdilise in vivo. Inicialmente implantamos uma cnula guia direcionada ao crtex pr-frontal (AP +3,2; L +0,6; DV -1.0). Aps uma semana de recuperao, um probe de 4 mm foi conectado cnula guia e iniciou-se a perfuso com lquido cerebrospinal artificial (1,5 ml/min.). Aps jejum de 18 horas iniciamos coleta de amostras de dialisato de 30 minutos. Aps trs amostras basais, o alimento foi oferecido e a ingesto medida por 30 min. E mais sete amostras foram colhidas aps o consumo. A dosagem do teor de glicose foi realizada com kit comercial, no qual a glicose sofre ao das enzimas hexoquinase e glicose-6-fosfodesidrogenase, transformando-se em NADH que detectada por espectrofotometria a 340nm. Aps os experimentos os animais foram sacrificados e seus crebros foram retirados para anlise histolgica com o objetivo de verificar o posicionamento do probe. Somente os animais com o posicionamento correto do probe foram utilizados para a anlise dos resultados. Nesta primeira fase dos estudos, realizamos experimentos necessrios padronizao e validao dos mtodos. O primeiro passo foi verificar se o aumento da glicemia seria capaz de modificar o teor de glicose do dialisato no crtex pr-frontal. Para isto, realizamos um teste com dois animais que receberam injeo intraperitoneal de glicose (0,5 g em 1ml de gua destilada). Observamos um aumento do teor de glicose do dialisato em ambos os animais, cujo valor mximo foi obtido aps 120 minutos para o rato 1, no valor de 464% e aps 180 minutos para o rato 2, no valor de 125% em relao ao nvel basal mdio. Este grupo deve ser ampliado, mas j possvel ver que nossa metodologia foi capaz de detectar elevao do teor de glicose nos dialisatos colhidos no crtex pr-frontal, quando a glicose circulante foi elevada por administrao exgena. Medimos a recuperao in vitro dos probe de microdilise (n = 6), que foi de apenas 5%. Em cinco animais controle relizamos o experimento completo. O teor mdio de glicose basal foi 0,13 0,01 mg/10ml e a ingesto alimentar foi 2,60 0,89 g. Observamos tendncia de queda do teor de glicose, que atingiu um decrscimo mximo de 54 17% em relao ao basal, na stima amostra colhida aps a oferta do alimento, isto , entre 180 e 210 minutos, contudo esse resultado no atingiu significncia estatstica. possvel que a baixa recuperao do probe tenha impedido a deteco do aumento de glicose no crtex pr-frontal. Entretanto, a ausncia de elevao pode ter-se devido baixa quantidade de alimento ingerida durante os trinta minutos. Devemos proceder determinao da glicemia, para verificar se uma muito baixa elevao glicmica ps-ingesto poderia explicar a ausncia de elevao no dialisato. Ao trmino dos experimentos com o grupo controle, o prximo passo ser averiguar se o consumo de dietas enriquecidas com leo de soja ou peixe modifica o teor de glicose no dialisato. Aprovao no Comit de tica em Pesquisa No.: 0567/07 Participantes: Adriana Pereira de Souza, Anthony Cardoso Pinto de Souza, Carolina Nakahira, Eliane Beraldi Ribeiro

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EFEITO DE CONDROITIM SULFATO E DE GLUCOSAMINA NO TRATAMENTO DE OSTEOARTRITE EM CAVALOS


Michelacci, Y.M.C.S.; Trentini Junior, N. Nelson Trentini Junior - UNIFESP Yara M. C. da S. Michelacci - Bioqumica / Biologia Molecular

Resumo:

Proteoglicanos esto presentes em todos os tecidos de mamferos, mas a cartilagem , de todos, o mais rico nesses compostos. Nas cartilagens articulares, os proteoglicanos so responsveis pela reteno de gua, e esta propriedade que lhes permite resistir a presses, amortecer impacto e reduzir o atrito. Estudos anteriores do laboratrio demonstraram que ocorrem mudanas na estrutura dos proteoglicanos de cartilagem articular com processos de crescimento e ossificao no tecido. No agrecam de cartilagens humanas jovens, assim como de cartilagens com osteoartrose, encondroma e condrossarcoma, a quantidade de queratam sulfato muito menor, e o condroitim sulfato contm uma proporo muito maior de dissacardeos 4-sulfatados, em comparao com o agrecam de cartilagem adulta normal. Os proteoglicanos so sintetizados no complexo de Golgi e degradados principalmente nos lisossomos. A maior parte dos proteoglicanos metabolizados nos tecidos reciclada, mas uma pequena parte eliminada na urina, sendo os principais glicosaminoglicanos urinrios: condroitim sulfato, dermatam sulfato e heparam sulfato, com traos de queratam sulfato e cido hialurnico. H evidncias sugerindo tambm que os glicosaminoglicanos urinrios tm origem sistmica e so filtrados no rim [Pereira DA, Aguiar JAK, Hagiwara MK, Michelacci YM; Biochim Biophys Acta 1672 (2004) 1-11]. Como a cartilagem o tecido mais rico em condroitim sulfato e queratam sulfato do corpo, possvel que alteraes que ocorrem nos proteoglicanos de cartilagens se reflitam nos proteoglicanos excretados na urina. De fato, recentemente demonstrou-se que cavalos atletas com osteoartrite excretam mais condroitim sulfato e menos heparam sulfato que atletas normais (expresso em concentrao). Alm disso, o condroitim sulfato dos atletas com ou sem osteoartrite contm mais unidades dissacardicas 4-sulfatadas. A excreo de queratam sulfato aumenta com a idade, mas diminui nos atletas e na osteoartrite [Vieira FAC, Baccarin RYA, Aguiar JAK, Michelacci YM J Equine Vet Sci 25 (2005) 387-400]. Um tratamento que vem sendo empregado com sucesso no tratamento de osteoartrite a administrao por via intramuscular ou oral de condroitim sulfato e/ou glucosamina. O objetivo deste estudo investigar se a administrao desses compostos a cavalos com osteoartrite afeta a excreo urinria de glicosaminoglicanos e se existe alguma correlao entre glicosaminoglicanos urinrios e melhora nos sintomas clnicos apresentados pelos animais. Para tal, numa primeira etapa, foi realizada a anlise dos medicamentos. Condroitim sulfato e heparam sulfato, presentes no Condroton Injetvel, foram quantificados por eletroforese em gel de agarose. Glucosamina foi analisada no Condroton Tradicional Para determinao da forma e sua dosagem. Tambm foi analisado o sulfato presente em ambos os medicamentos. Em seguida, foi estudado o padro de excreo urinria de glicosaminoglicanos em trs cavalos com osteoartrite, submetidos ao tratamento com Condroton Injetvel. Os animais receberam duas doses do medicamento, e tiveram sua excreo urinria de glicosaminoglicanos acompanhada por 12 dias. Os glicosaminoglicanos foram isolados das amostras de urina por cromatografia de troca inica em Q-Sepharose Fast Flow. Aps a extrao, estes compostos foram submetidos eletroforese em gel de agarose em tampo 1,3-diaminopropano-acetato 0,05 M, pH 9 (PDA), e a posterior quantificao por densitometria. Verificou-se que os nveis basais esto na faixa de 2-6 mg de glicosaminoglicanos por litro de urina, sendo aproximadamente 94,3% condroitim sulfato, e 5,7% heparam sulfato. Aps a administrao do condroitim sulfato exgeno, este aparece na urina nas primeiras 24 horas, caindo gradativamente at o quinto dia, quando a concentrao de condroitim sulfato volta aos nveis basais. Estes resultados permitiram estabelecer o protocolo de tratamento dos animais. Na segunda fase, foi seguido o protocolo estabelecido na etapa inicial do estudo. Para verificar os efeitos desse tratamento, seis (6) animais portadores de osteoartrite foram tratados com o medicamento Condroton Injetvel, recebendo 5 doses em um perodo de 25 dias. A evoluo clnica desses animais foi avaliada, paralelamente, por exame fsico e radiolgico das articulaes afetadas. Duas amostras de urina de cada animal foram coletadas antes do incio do tratamento (controle) e uma amostra de cada animal foi coletada a cada 5 dias, por 60 dias (durante o tratamento e 35 dias aps o trmino do mesmo). Os mesmos seis animais receberam, aps dois meses do trmino do primeiro tratamento, um segundo tratamento com Condroton Tradicional, que contm a Glucosamina. Foi mantido o mesmo cronograma teraputico utilizado com Condroton Injetvel. Os glicosaminoglicanos foram isolados das amostras de urina por cromatografia de troca inica em Q-Sepharose Fast Flow, submetidos eletroforese em gel de agarose e quantificados por meio de densitometria. Os resultados obtidos at o momento mostram uma correlao entre a excreo urinria de glicosaminoglicanos e a gravidade da osteoartrite nos animais. Participantes: Yara M. C. da S. Michelacci, Nelson Trentini Junior

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EFEITOS DA HIDROCORTISONA NA REATIVIDADE DE ARTRIAS DE RATOS NORMOTENSOS E ESPONTANEAMENTE HIPERTENSOS SUBMETIDOS A CHOQUE ENDOTXICO
Klumpp, C.C.; Feres, T.; Paiva, T.B.; Siroma, D. A. Daniela Akemi Siroma - UNIFESP Therezinha Bandiera Paiva - Biofsica / Biofsica

Resumo:

A sepse a sndrome da resposta inflamatria sistmica (SIRS) decorrente de um processo infeccioso comprovado. Estudos com modelos experimentais de choque endotxico podem ser obtidos atravs da injeo intra peritonial de LPS. Em estudos in vitro verificamos que o LPS induz hiperpolarizao em artrias de condutncia e de resistncia de ratos normotensos (NWR) e espontaneamente hipertensos (SHR) atravs da ativao de canais de potssio sensveis ao clcio (KCa++) (Br J Pharmacol. 137: 213-220, 2002). Recentes evidncias tm levado reconsiderao do uso de glicocorticides na sepse, devido a seus efeitos no tnus vascular, potencializando as respostas vasoativas das catecolaminas (Crit Care Med. 34(1):22-30, 2006). Assim, constitui objetivos deste trabalho estudar inicialmente os efeitos da hidrocortisona, um anti-inflamatrio clssico, na reatividade de artrias de ratos normotensos (NWR) e espontaneamente hipertensos (SHR) e posteriormente comparar os efeitos da hidrocortisona na reatividade de artrias de NWR e SHR submetidos a choque endotxico. Metodologia Anis de aorta torcica de (1cm) de NWR e SHR foram cortados e montados em cubetas de 5,0 ml contendo soluo de Krebs mantida a 37 0.5 C e borbulhada com uma mistura gasosa de O2 (95%) e CO2 (5%). Os anis foram submetidos tenso de 1 g. Aps um perodo de equilbrio de duas horas, adies cumulativas de noradrenalina (NA, 10-8 a 10-6 M) foram feitas s cubetas contendo anis articos de NWR e SHR na ausncia ou na presena de hidrocortisona (10-6 M). As respostas isomtricas so registradas por meio de um transdutor de fora F-60 (Narco, Texas, USA) e de um registrador ECB (modelo RB 102, Brasil), e curvas cumulativas, dose-efeito, noradrenalina foram feitas para todos os grupos de ratos. Medidas do relaxamento endotlio-dependente. Anis articos com endotlio, de NWR e SHR foram estimulados com noradrenalina e quando a contrao atingiu um patamar, uma dose de acetilcolina (ACh, 10-7 M) foi administrada. A resposta vasodilatadora foi calculada como porcentagem da contrao induzida por NA. Resultados e Discusso O presente estudo demonstrou reduzida reatividade das aortas de SHR em reposta NA, evidenciada atravs da reduzida tenso isomtrica mxima das aortas de SHR em relao s de NWR. A hiporeatividade NA observada nas aortas de SHR pode estar relacionada ao estado hiperpolarizado da membrana destas aortas em relao s aortas de NWR. Verificamos, que a hidrocortisona (HC) no alterou a resposta contrtil induzida por NA em aortas de NWR, enquanto promoveu um deslocamento no significativo para a esquerda da curva dose-resposta induzida por NA nas aortas de SHR. No observamos diferena significante no relaxamento induzido por ACh em aortas pr-contradas com NA entre as aortas de NWR e SHR. A presena de hidrocortisona no afetou a resposta relaxante induzida por ACh nos anis de NWR, enquanto nos anis de SHR causou uma reduo no significante desta resposta. Verificamos, portanto, que em vasos de condutncia (aorta) tanto de NWR como de SHR a hidrocortisona no afeta de modo significativo a resposta NA e ACh. Experimentos verificando os efeitos da HC em leito vascular mesentrico de NWR e SHR, e suas interaes com a NA e ACh esto sendo realizados. Aprovao no Comit de tica em Pesquisa No.: 0001/08 Participantes: Claudia Cristina Klumpp, Teresa Feres de Oliveira, Therezinha Bandiera Paiva, Daniela Akemi Siroma

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Efeitos da Nifedipina e Ginseng sobre alteraes induzidas pelo 3NP.


Lopes, G.S.; Nbrega, L.N. Leandro Nazare da Nbrega - UNIFESP Guiomar Silva Lopes - Farmacologia / Farmacologia

Resumo:

A doena de Huntington (DH) uma desordem gentica, autossmica dominante causada por uma expanso da repetio CAG no cromossomo 4, cujos sintomas surgem geralmente entre 30-40 anos de idade e incluem alteraes motoras, cognitivas e psquicas. Seus mecanismos ainda no foram completamente elucidados, mas sabe-se que alm da mutao gentica tambm esto presentes interaes proticas anormais, excitotoxicidade, alterao da sinalizao intracelular de Ca2+ e dficit do metabolismo energtico, sendo necessria uma maior investigao e compreenso da correlao existente entre os mesmos. Estudos anteriores mostraram que durante a progresso da doena ocorre uma degenerao na regio do estriado, onde se verificou a presena de mecanismos de excitotoxicidade e estresse oxidativo, mediados, respectivamente, pelo excesso do influxo de Ca2+ para o meio intracelular e pelo aumento nas espcies reativas de oxignio (ROS). Um dos modelos experimentais utilizados para o estudo da DH e padronizado previamente em nosso laboratrio (Rosenstock et al, 2004) utiliza-se do cido 3-nitropropinico (3NP) (20mg/Kg/dia) administrado em camundongos de forma sub-crnica (4 dias). Essa toxina inibe o complexo II da cadeia transportadora de eltrons da mitocndria e provoca alteraes comportamentais, tais como bradicinesia e discinesia orofacial, e celulares, como morte celular e alteraes mitocondriais, as quais so compatveis com as da DH. O presente trabalho teve o objetivo de investigar alguns agentes e tratamentos que poderiam ter um efeito protetor do Sistema Nervoso Central aps o tratamento com a neurotoxina 3NP. Entre os agentes protetores foi escolhida a planta adaptgena (Panax ginseng) conhecida como Ginseng. Foi testada tambm a ao do bloqueador de canal de Ca2+ do tipo L, Nifedipina. Para tanto, foram utilizados camundongos machos B6xCBA/F1 (2 meses) tratados cronicamente com o possvel protetor Ginseng (100 mg/Kg/dia durante 11 ou 23 dias via gavagem) ou Nifedipina (5 ou 10 mg/Kg/dia durante 11 dias via i.p.) e, durante os ltimos 4 dias do tratamento, com o 3NP (20 mg/Kg/dia via i.p.). Alm disso, analisamos os efeitos do 3NP em doses crescentes (20, 25 e 30mg/Kg/dia durante 4 dias) a fim de caracterizar as alteraes de um modo mais pronunciado e a possvel correlao entre efeitos e concentraes. Aps o tratamento, foram avaliados os parmetros comportamentais de locomoo, por meio do Campo Aberto, os movimentos orofaciais (MOFs) e ansiedade, aprendizado e memria por meio da Esquiva Passiva e Esquiva Discriminativa em labirinto em cruz elevado. Os resultados desses experimentos mostraram que, ao contrrio do esperado, as doses de 3NP utilizadas no foram capazes de provocar reduo da locomoo ou aumento do tempo de imobilidade no Campo Aberto. Estes resultados diferem dos obtidos anteriormente em nosso laboratrio (Rosenstock et al, 2004). Alm disso, o 3NP no alterou a memria dos camundongos testados pela Esquiva Passiva, bem como da memria, aprendizado e ansiedade, medidos pela Esquiva Discriminativa. Por outro lado e, conforme o esperado, os animais tratados com 3NP tiveram um aumento significante do nmero de MOFs em relao aos grupos controle (p<0,05). Este aumento dos MOFs ocorreu de maneira semelhante em todas as concentraes testadas. Quando os animais foram tratados previamente com a Nifedipina, esta reverteu significantemente o aumento do nmero de MOFs causado pelo 3NP (p<0,05 para a concentrao de de 5mg/Kg/dia e p<0,001 para a concentrao de 10 mg/Kg/dia). J o tratamento com o ginseng causou uma tendncia diminuio dos MOFs, porm no significante. Estes resultados sugerem que alteraes ambientais ou genticas podem ter levado a uma alterao do efeito do 3NP sobre a locomoo. Desta forma, outros modelos animais devero ser testados em relao ao 3NP e este parmetro comportamental. Por outro lado, o efeito do 3NP verificado anteriormente sobre os MOFs foi confirmado neste modelo animal, o que indica que estes animais podem ser utilizados nos estudos dos MOFs. interessante notar que os MOFs mimetizam a discinesia tardia verificada em pacientes com DH, sendo este um dos sintomas iniciais da doena em humanos. O efeito da nifedipina em reverter os aumentos de MOFs induzidos por 3NP sugere que as vias envolvidas com essas alteraes comportamentais podem estar relacionadas com a sinalizao de Ca2+ e com canais VOC do tipo L. Ser necessrio investigar os mecanismos envolvidos com esta resposta de proteo induzida pela nifedina, o que poder contribuir para a compreenso dos mecanismos de proteo de algumas vias que esto alteradas na DH. Apoio: FAPESP e CNPq. Aprovao no Comit de tica em Pesquisa No.: 0735/07 Participantes: Guiomar Silva Lopes, Leandro Nazare da Nbrega, Tatiana R. Rosenstock, Andrea G. Bezerra, Soraya S. Smaili, Vanessa C. Abilio

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Efeitos da varicocele experimental na morfologia e na expresso de receptores de andrgeno em testculos de ratos.


Fernandes, S.A.F.; Siu, E.R.; Schoorlemmer, G.H.M.; Lazari, M.F.M.; Porto, C.S.; Soares, T.S. Thiago da Silva Soares - UNISA Catarina Segreti Porto - Farmacologia / Farmacologia Celular

Resumo:

A importncia de protenas e/ou de fatores testiculares tem despertado interesse nos estudos da infertilidade masculina idioptica e no desenvolvimento de novos mtodos contraceptivos masculinos. Os estudos da interao clula a clula no testculo, da secreo protica e dos hormnios, fatores parcrinos e autcrinos que regulam as funes dessas clulas testiculares, principalmente das clulas de Sertoli, tm contribuido para o melhor entendimento dos eventos moleculares, celulares e bioqumicos envolvidos no processo da espermatognese (para reviso Physiol. Ver. 82: 825, 2002). A varicocele, uma dilatao do plexo pampiniforme, das veias espermtica e colaterais, pode levar infertilidade masculina (Human Reprod. Update 7:78, 2001). Em ratos, estudos histolgicos em testculos de animais adultos submetidos varicocele mostraram mltiplas leses devido isquemia, diminuio da espermatognese, suspenso da maturao, hiperplasia das clulas de Leydig e diminuio do volume testicular (B.J.U. Intern. 83: 493, 1999). A varicocele, quando induzida em ratos pberes, causa maiores danos testiculares quando comparada varicocele induzida na pr-puberdade e na fase adulta (J. Urol. 144: 499, 1990). Estudos dos efeitos da varicocele sobre a expresso gnica de diferentes alvos em testculos de ratos podem apontar novas direes para o esclarecimento da infertilidade masculina. Desde modo, o objetivo deste estudo foi analisar os efeitos da varicocele induzida experimentalmente na morfologia e na expresso de receptores de andrgeno em testculos de ratos pberes. Ratos machos Wistar com 40 e 50 dias de idade foram divididos em: controle e submetidos induo da varicocele experimental pela da ligadura parcial da veia renal esquerda (Human. Rep. Update 7:78 2001). Os animais foram sacrificados 4 semanas aps a induo da varicocele e a dilatao da veia espermtica interna foi observada. Os testculos de ratos controle e com varicocele induzida cirurgicamente foram retirados, dissecados, seccionados e imersos em soluo de Bouin. Foram desidratados com concentraes crescentes de etanol, embebidos em parafina e processados para microscopia de luz. Cortes de 5 m de espessura foram obtidos e corados com Tricrmio de Masson. Foram capturadas imagens de 20 campos aleatrios de cada tecido e determinados o nmero, dimetro e rea dos tbulos seminferos. A varicocele causou uma reduo do dimetro (19,2%) e da rea (11,7%) dos tbulos semniferos. No foi observada diferena significativa em relao ao nmero de tbulos seminferos. A varicocele causou degenerao e desintegrao do epitlio seminfero. A expresso dos receptores de andrgeno foi determinada por Western blot, usando extrato total dos testculos de animais com 50 dias e anticorpo anti-AR (N-20, Santa Cruz Biothecnology). A varicocele induziu um aumento da expresso de receptores de andrgeno (1,6 vezes) quando comparado ao controle. Estes estudos indicam que a varicocele causa alteraes na morfologia testicular e pode regular a expresso de receptores de andrgeno. Outros estudos esto em andamento no nosso laboratrio para verificar os efeitos da varicocele sobre a expresso gnica de diferentes alvos em testculos de ratos. Aprovao no Comit de tica em Pesquisa No.: 343 Participantes: Sheila Alessandra Ferreira Fernades, Erica Rosanna Siu, Gerhardus H. M. Schoorlemmer, Maria Ftima Magalhes Lazari, Catarina Segreti Porto, Thiago da Silva Soares

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Efeitos de dietas ricas em leo de peixe e leo de soja sobre componentes do Sistema Renina Angiotensina
Tudela, R.C.; Loiola, R.A.; Silveira, V.F.; Pesquero, J.B.; Fernandes, L. Renato Cardoso Tudela - UNIFESP Liliam Fernandes - Cincias Biolgicas /

Resumo:

INTRODUO: A clula endotelial um importante componente no controle circulatrio, capaz de produzir inmeras substncias, exercendo papel de verdadeiro rgo endcrino, parcrino e mesmo autcrino com mltiplas funes. Por possuir localizao estratgica no vaso sanguneo, sendo interface entre sangue e msculo liso vascular, o endotlio integra diversos sinais mecnicos e bioqumicos e dessa forma modula o tnus e o crescimento do msculo liso vascular, alm de interferir no processo de coagulao sangunea. A hipertenso arterial uma doena que atinge um quarto da populao mundial, sendo de grande importncia para a pesquisa. Inmeros relatos tm demonstrado a ntima relao entre hipertenso arterial e disfuno endotelial. Acredita-se que essa disfuno seja um dos fatores responsveis pelo aumento sustentado da resistncia vascular perifrica total, acarretando em aumento de presso arterial sistmica. O Sistema Renina Angiotensina (SRA) um dos principais controladores da presso sangunea, atravs do octapeptdeo Angiotensina II (Ang II). No endotlio e no msculo liso vascular, a Ang II promove efeitos hipertensores, agindo diretamente em receptores especficos, indiretamente atravs da liberao de outros fatores vasoativos, e por meio de interaes com vias intracelulares estimuladas por outros agentes. Estudos clnicos e experimentais estabeleceram pontos de inter-relao entre cardioproteo e consumo/metabolismo de cidos graxos essenciais (AGEs), utilizando leos naturais, cidos graxos isolados ou seus respectivos metablitos. Em humanos e em modelos experimentais, a ingesto de dietas ricas em AGEs-3 foi correlacionada reduo de presso arterial e menor incidncia de doenas cardiovasculares, efeitos atribudos melhora de funo endotelial, provavelmente via aumento na biodisponibilidade de xido ntrico. Outros estudos sugeriram que AGEs-6 podem tambm reduzir presso arterial, alm de diminuir agregao plaquetria, prevenir contra acidente vascular cerebral isqumico e infarto do miocrdio. Apesar dessas informaes, os mecanismos de ao envolvidos nos efeitos cardiovasculares dos AGEs no esto totalmente elucidados, e pouco se sabe a respeito de suas possveis aes sobre componentes do SRA em clulas endoteliais. OBJETIVOS: Analisar os efeitos de dietas enriquecidas com AGEs-3 e -6 sobre a presso arterial de ratos espontaneamente hipertensos (SHR). Alm disso, visando futuros estudos celulares, estabelecer, padronizar e caracterizar culturas primrias de clulas endoteliais de microvasos mesentricos desses animais. MTODOS: Durante 6 semanas, SHRs (n=10 por grupo), machos, adultos, receberam rao comercial ou dietas enriquecidas com AGEs-3 e -6, provenientes de leo de peixe e de soja, respectivamente. A presso arterial foi determinada semanalmente por pletismografia de cauda em ratos acordados. Para o estabelecimento de culturas de clulas endoteliais, ratos SHR foram anestesiados (hidrato de cloral, 500mg/kg), exsanguinados e submetidos laparotomia. Explantes de vasos mesentricos (2x2mm) foram retirados, plaqueados, recobertos com meio de cultura (DMEM, 20% de soro fetal bovino, 40mg/L de gentamicina), e removidos aps 48 hs. Aps 6 a 8 dias, as clulas foram transferidas para garrafas de 25 cm3, utilizando-se tripsina + EDTA. Ao atingirem confluncia, as culturas foram submetidas extrao de RNA (mtodo TRIzol), verificao de integridade por eletroforese, quantificao por espectrofotometria (Nanodrop, Thermo Fisher Scientific) e digesto de DNA (kit DNAse Promega). A construo do cDNA foi realizada a partir de 1g de RNA, utilizando-se M-MLV (Invitrogen), conforme instrues do fabricante. RESULTADOS: A evoluo dos nveis pressricos no diferiu entre os grupos estudados. Ao final da 6 semana de semana de tratamento, os valores mdios de presso arterial foram (em mmHg): 188,8 4,6 para o Grupo Rao Comercial, 182,73.1 para o Grupo leo de Soja e 182,56.6 para o Grupo Peixe. As culturas celulares foram estabelecidas e o protocolo foi padronizado. A extrao de RNA revelou que clulas em confluncia contidas em garrafas de 25cm3 apresentaram concentrao entre 1500 a 2000 ng/L, (n=8). A integridade do RNA extrado foi confirmada pela presena das bandas 18s e 28s, representando o RNAr. Aps a construo do cDNA, as amostras foram armazenadas em freezer -80oC para os estudos posteriores de expresso gnica CONCLUSO: As dietas empregadas no alteraram a presso arterial. Culturas primrias de endotlio e a extrao de RNA respectivos foram padronizadas. APOIO FINANCEIRO: CNPq, Processo n: 119605/2007-7. Aprovao no Comit de tica em Pesquisa No.: 1883/07 Participantes: Renato Cardoso Tudela, Rodrigo Azevedo Loiola, Vera Flor Silveira, Joo Bosco Pesquero, Liliam Fernandes

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Efeitos de estratgias de contra-condicionamento ambiental com um neurolptico atpico na dependncia qumica induzida pelo etanol
Baldaia, M.A.; Lima, A.J.O.; Marinho, E.A.V.; Wuo-Silva, R.; Frussa-Filho, R. Marilia Arajo Baldaia - Universidade Braz Cubas Roberto Frussa Filho - Farmacologia / Farmacologia

Resumo:

Objetivo: O uso abusivo de drogas afeta milhes de pessoas, causando problemas profissionais, de convvio social e familiar. Uma das drogas de abuso mais utilizadas o etanol e seu uso abusivo est relacionado a alteraes neuroqumicas no sistema dopaminrgico meso-accumbens. Sabe-se que os ambientes onde se faz o uso das drogas funcionam como gatilhos para disparar o desejo pelo uso da droga. O objetivo deste trabalho foi testar uma estratgia de contra-condicionamento ambiental com a ziprazidona em um modelo animal de dependncia ao etanol. A ziprazidona foi utilizada por tratar-se de um neurolptico atpico que no promove supersensibilidade dopaminrgica e a sensibilizao comportamental foi utilizada como modelo de dependncia qumica. Mtodos e Resultados: Utilizou-se 56 camundongos, fmeas (3 meses, 35-45g) que foram submetidos a habituao por 3 dias, nos quais diariamente recebiam a administrao ip de salina e 5 min depois, eram expostos a um campo aberto (CA) (arena circular dividida em 19 quadrantes, com parede de 50 cm de altura) por 10 min. No 3o dia os camundongos foram observados sendo contabilizados os quadrantes ambulados. A partir do dia seguinte, os animais foram divididos em 4 grupos, Salina-Salina (SalSal), Salina-Ziprazidona (Sal-Zipra), Etanol-Salina (Eta-Sal) e Etanol-Ziprazidona (Eta-Zipra). Os camundongos dos grupos Sal-Sal e Sal-Zipra receberam salina, ip, por 15 dias de forma intermitente, e 5 min aps a injeo, expostos ao CA. Os animais dos grupos Eta-Sal e Eta-Zipra receberam ip etanol (1,8 g/kg) tambm de forma intermitente pelos mesmos 15 dias de pareamento. Um dia aps a ltima administrao (17o dia), os animais dos grupos Sal-Sal e Eta-Sal, passaram a receber salina ip sempre pareada ao CA, de forma intermitente; enquanto os grupos Sal-Zipra e Eta-Zipra, Ziprazidona (5 mg/kg) da mesma forma. Os animais foram observados no 1o, 15o, 17o, e 23o dias. Quatro dias aps o trmino do segundo tratamento (27o dia) os animais foram desafiados com salina e 2 dias depois (29o dia), foram desafiados com etanol sendo observados para o registro da ambulao. Os resultados indicaram que os grupos Eta-Sal e Eta-Zipra nos primeiros 15 dias desenvolveram tolerncia ao etanol, reduzindo a ambulao (MdiaEPM) se comparados ao 1o dia de exposio (63955 para 48652 no grupo Eta-Sal e 57844 para 46444 no grupo Eta-Zipra). Nenhum dos grupos desafiados com salina no 27o dia apresentou locomoo condicionada. Os animais do grupo Eta-Sal desafiados com Eta (29o dia) apresentaram uma maior ambulao (64747) comparados aos animais igualmente desafiados com etanol, mas pr-tratados com salina (SalSal/43820), evidenciando o desenvolvimento de sensibilizao comportamental. Esta foi inibida pelo tratamento prvio e pareado ao ambiente com ziprazidona, uma vez que a ambulao dos animais do grupo Eta-Zipra (50931) no difere daquela do grupo Sal-Sal, sendo significativamente menor que aquela do grupo Eta-Sal. Concluses: Os resultados sugerem que uma estratgia de contra-condicionamento ambiental com neurolpticos atpicos pode ser potencialmente efetiva no tratamento da dependncia ao etanol. Apoio Financeiro: CNPq Aprovao no Comit de tica em Pesquisa No.: 0470/07 Participantes: Marilia Arajo Baldaia, Alexandre Justo de Oliveira Lima, Eduardo Ary Villela Marinho, Raphael Wuo da Silva, Roberto Frussa Filho

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Autores: Bolsista: Orientador:

Efeitos do lipopolissacardeo de E. coli sobre as catecolaminas de clulas mesangiais humanas imortalizadas e em situao de hipxia
Casarini, D.E.; Zanini, A.P. Ana Paula Zanini - Faculdade de Medicina do ABC Dulce Elena Casarini - Medicina / Nefrologia

Resumo:

As clulas mesangiais (CM) controlam a funo glomerular atravs de suas mltiplas funes, tais como, contratilidade, fagocitose, sntese e secreo de componentes da matriz extracelular, alm de substncias vasoativas e inflamatrias, incluindo angiotensina II, eicosanides e citocinas. Estudos em nosso laboratrio evidenciaram que as CM possuem toda a maquinaria para a produo das catecolaminas (CA): dopamina (DA), adrenalina (AD) e noradrenalina (NOR), envolvidas nos processos renais de filtrao e vasoconstrio. As CM expressam o mCD14, um dos componentes do receptor de lipopolissacardeo (LPS) que est associado ao Toll Like receptor tipo 4 na superfcie celular. O LPS presente na sepse e a hipxia celular so fatores que podem desencadear a insuficincia renal aguda. O objetivo deste estudo avaliar possveis alteraes na produo/liberao de CA pelas clulas mesangiais humanas imortalizadas (CMHI) frente a processos de sepse e hipxia. Inicialmente, as CMHI foram cultivadas em meio DMEM (Dulbecco's Modified Eagle's Medium) com dez porcento de soro bovino fetal. As CMHI foram incubadas com LPS (100 mcg/mL) por um perodo de duas horas, e submetidas situao de hipxia por 30 minutos. O estudo da viabilidade celular foi realizado com os corantes fluorescentes: laranja de acridina e brometo de etdeo, para a visualizao de necrose. A apoptose celular foi avaliada pelo corante Hoechst 33342. A sntese/liberao de CA pelas CMHI foi quantificada, utilizando-se cromatografia lquida de alta performance com deteco eletroqumica (HPLC-ED). A expresso da enzima passolimitante para a sntese de CA, tirosina hidroxilase (TH), foi avaliada por Western blotting. Foi observado que as CMHI apresentaram-se viveis frente ao processo de hipxia e presena de LPS. A incubao com LPS induziu um aumento significativo nos nveis de CA intracelular, enquanto que no meio de cultura, a liberao de AD e L-Dopa foi reduzida, e os nveis de NOR e DA permaneceram praticamente inalterados. A enzima TH no teve sua expresso afetada de forma significativa pelo LPS e hipxia. At o presente, os resultados sugerem que o LPS pode influenciar a produo/liberao das CA nas CMHI. Como continuidade do projeto, prope-se a dosagem do cofator biopterina por HPLC-ED, o ensaio da atividade de enzimas que degradam as CA, imunofluorecncia e imunocitoqumica. Aprovao no Comit de tica em Pesquisa No.: 1210/06 Participantes: Dulce Elena Casarini, Ana Paula Zanini

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EFEITOS DO TRATAMENTO CRNICO COM VITAMINA C SOBRE A HIPERTENSO E AS ALTERAES METABOLICAS DESENCADEADAS PELA SOBRECARGA DE SACAROSE NA DIETA EM RATOS
Dolnikoff, M.S.; Oliveira, T.G.C.; Freitas, R.R.A.; Oliveira-Sales, E.B.; Boim, M.; Bergamaschi, C.M.T.; Campos, R.R. Thais Galvo Cesar De Oliveira - UNIFESP Miriam Sterman Dolnikoff - Fisiologia / Fisiologia Cardiovascular e Respiratria

Autores: Bolsista: Orientador:

Resumo:

Introduo e Objetivo: Resultados anteriores mostram que a sobrecarga de sacarose na dieta est associada hipertenso, hiperinsulinemia e elevao da angiotensina II plasmtica. Considerando que este hormnio alm de provocar vasoconstrio, tambm estimula a produo de espcies reativas de oxignio, o objetivo desse trabalho foi investigar se o tratamento com cido ascrbico (AA) capaz de melhorar a hipertenso, bem como as demais alteraes metablicas e hormonais desencadeadas por essa dieta. Para tanto, avaliamos a presso arterial, a glicemia atravs do teste de tolerncia glicose (TTG), a insulinemia e a expresso gnica renal dos receptores AT1, das subunidades da enzima NAD(P)H oxidase (p47phox e gp91phox) e da enzima CuZnSOD. Mtodos e Resultados: Ratos Wistar (150-180g) foram tratados por 30 dias com soluo de sacarose (20%) (SC, n=15) ou gua (CC, n=24) para beber. O AA (150mg/Kg) foi administrado por gavagem, nos ltimos 7 dias do tratamento, tanto a animais que receberam sacarose (SAA, n=16) como gua (CAA, n=23). A presso arterial mdia (PAM) foi registrada. Para o TTG, determinou-se a glicemia basal e aps 3, 5, 10, 15, 20, 30, 45 e 60 minutos da injeo iv de 0,75g/kg de glicose. Amostras de sangue foram coletadas para a dosagem de insulina. A expresso do mRNA do crtex renal foi analisada pela tcnica de Real Time RT-PCR. Constatouse um aumento (P<0,05) da PAM no grupo SC comparado ao CC (1363; 1114 mmHg). J, a suplementao com AA diminuiu (P<0,05) a PAM tanto nos grupos CAA como SAA (1023; 1051 mmHg). A glicemia basal manteve-se inalterada, porm a insulina plasmtica aumentou aps a dieta rica em sacarose e no se modificou com a administrao de AA. Nos ratos SC, constatou-se expresso gnica aumentada (P<0,05) da p47phox e gp91phox, mas no houve qualquer alterao na de CuZnSOD ou na do AT1. No entanto, o AA reverteu o aumento na expresso de mRNA das subunidades da NAD(P)H oxidase e reduziu (p<0,05) a expresso do AT1. A expresso gnica da CuZnSOD no sofreu alteraes aps a administrao de AA. Concluses: Os resultados indicam que o aumento da PAM dos ratos tratados com sacarose pode estar relacionado maior produo de radicais livres, uma vez que o tratamento com AA melhorou a hipertenso e diminuiu a expresso do mRNA dos indicadores do estresse oxidativo. O AA no alterou a resposta hiperinsulinmica decorrente da sobrecarga glicdica durante o TTG, sugerindo que no seja o efeito hipertensor da insulina o causador desse aumento de PAM. Apoio Financeiro: FAPESP (proc. 06/58219-4) Aprovao no Comit de tica em Pesquisa No.: 0572/07 Participantes: Miriam Sterman Dolnikoff, Thas Galvo Cesar de Oliveira, Raphael Ribeiro de Aquino Freitas, Elizabeth Barbosa de Oliveira Sales, Mirian Boim, Cssia Marta de Toledo Bergamaschi, Ruy Ribeiro de Campos Junior

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Autores: Bolsista: Orientador:

EFEITOS METABLICOS DE CININAS NA REGENERAO HEPTICA


Pasquarelli, E.W.; Tineli, A.C.; Nagaoka, M.R.; Kouyoumdjian, M.; Borges, D.R. Eduardo Wiliian Pasquarelli - Centro Univ. Nove de Julho Mrcia Regina Nagaoka - Bioqmica / Hepatologia Experimental

Resumo:

INTRODUO: O fgado importante rgo no controle do metabolismo e nico rgo capaz de regular seu crescimento. Aps hepatectomia parcial (HP), hepatcitos replicam de maneira sincrnica para compensar a perda de massa funcional. Aspectos metablicos e hemodinmicos do fgado vm sendo estudados em nosso grupo, utilizando-se a perfuso monovascular de fgado isolado de rato como modelo experimental para estudo da modulao do sistema cinina. Estudos sobre a ao da bradicinina (BK) demonstraram que ela age atravs de 2 receptores: B1 (induzido) e B2 (constitutivo). A resposta hipertensiva portal BK mediada pelo B2R e modulada pelo sistema NO e na regenerao heptica est preservada. OBJETIVO: Analisar os efeitos metablicos produzidos pelas cininas, BK (agonista de B2R) e des-arg-bradicinina (DABK) (agonista de B1R) no fgado em regenerao. MTODOS: HP foi realizada com a retirada de 70% de massa do fgado. A perfuso do fgado remanescente foi realizada aps 0, 1, e 2 dias de regenerao. Fluxo heptico foi de 3-4 ml/min/g fgado. A presso portal foi monitorada aps injeo de BK (0,2 mmol) ou DABK (0,15 mmol). Os efeitos metablicos foram avaliados antes e depois da adio do agonista pela secreo de bile, liberao de glicose e depurao de bromosulfalena (BSP). RESULTADOS: A liberao de glicose (mg/g fgado) menor quando comparado com o animal normal (3,4 0,4, n=3) e diminuiu gradativamente entre os dias 0 e 2, variando de 2,3 0,6 (dia 0, n=6) a 1,0 0,2 (dia 2, n=7).. A secreo de bile (l/min/g fgado) no se altera ao longo do tempo ps-HP (0,5 a 0,6, n=5) e nem em relao com os animais normais (0,7 0,1, n = 5). Aps adio de BK ou DABK no observamos alterao no perfil da glicose e de bile. O t1/2 do BSP (0,3 0,1 min/g fgado, n = 3) aumentou significativamente (ANOVA, p = 0,009) nos grupos 1-2 dias (1,5 0,4 min/g fgado, n = 3), porm a adio de BK ou DABK no alterou este padro. CONCLUSES: Nossos dados mostram que h alterao nos efeitos metablicos durante a fase de regenerao aps HP em relao depurao de BSP e, ao contrrio, liberao de glicose e secreo de bile se mantm preservadas. Interessante observar que mesmo o fgado em intensa atividade proliferativa que ocorre nas primeiras 48hs ainda mantm seu metabolismo intacto. No foi observado efeito das cininas nos parmetros de metabolismo estudado; entretanto, recentemente, verificamos aumento do receptor B1 de BK, analisado por Western Blotting, nos animais aps 1 e 2 dias de HP sugerindo o papel deste receptor na regenerao heptica. Participantes: Eduardo Wiliian Pasquarelli, Ana Carolina Tineli, Mrcia Regina Nagaoka, Maria Kouyoumdjian, Durval Rosa Borges

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Autores: Bolsista: Orientador:

ESTABELECIMENTO DE LINHAGENS CELULARES COM EXPRESSO PERMANENTE DE EGFPBAX, DSRED-BAX, EGFP-BCL-XL E PERICAMS.
Terashima, J.Y.; Muler, M.L.; Morales, A.P.; Han, S.W.; Smaili, S.S. Juliana Yoshie Terashima - UNIFESP Soraya Soubhi Smaili - Farmacologia / Farmacologia

Resumo:

Objetivos: Estabelecimento de linhagem celular de astrcitos provenientes do crtex cerebral de ratos e caracterizao funcional da mesma. Utilizao destas clulas para o estabelecimento de linhagens celulares com expresso permanente de protenas fluorescentes, como eGFP-Bax e DsRed-Bax. Mtodos e Resultados: Para o estabelecimento da linhagem celular de astrcitos foram utilizados astrcitos obtidos do crtex cerebral de ratos neonatos, os quais foram cultivados e, aps 11 dias, transfectados com o plasmdeo pSV3-neo e incubados a 37C e 5% de CO2. Quatro dias aps a transfeco iniciou-se a seleo das clulas por adio do antibitico geneticina ao meio de cultura. A concentrao do antibitico foi gradualmente aumentada de 200 a 800 g/mL durante 3 semanas. Posteriormente, as colnias foram isoladas por anel de clonagem. A anlise morfolgica das clulas foi feita por meio de microscopia de fluorescncia de alta resoluo. Os resultados mostraram que os astrcitos no transfectados (cultura primria) sobreviveram at a 8 passagem, sendo que a partir da 5 passagem apresentaram caractersticas de senescncia, com diminuio da taxa de proliferao. Os astrcitos imortalizados apresentaram-se com morfologia epiteliide, forma poligonal e achatada, caracterstica de astrcitos do tipo 1 (Neurosci Res., 39:205, 2001). A taxa de proliferao dos astrcitos imortalizados no foi afetada nas passagens subseqentes. Para estudar os receptores e os estoques intracelulares de clcio, as clulas foram estimuladas com ATP (200 M), Tapsigargina (TG, 2 M) e FCCP (5 M) e analisadas em microscpio de fluorescncia de alta resoluo. Estas drogas promoveram aumentos dos nveis de clcio citoslico de 28%, 55% e 17%, respectivamente, nos astrcitos testados at a 20 passagem. Concluses: Os astrcitos transfectados com o plasmdeo pSV3-neo apresentaram caractersticas morfolgicas de linhagem imortalizada e pouca alterao em relao primeira passagem das culturas primrias. As clulas imortalizadas continuaram responsivas aos agentes mobilizadores de clcio testados, o que uma evidncia de que no houve alterao funcional dos astrcitos imortalizados at a 20 passagem. A caracterizao funcional ser feita at a 40 passagem e posteriormente estas clulas sero utilizadas para investigar se os estmulos mobilizadores de clcio e os estmulos autofgicos so capazes de induzir morte celular e/ou autofagia atravs da superexpresso das protenas fluorescentes anteriormente citadas. Aprovao no Comit de tica em Pesquisa No.: 0455/07 Participantes: Juliana Yoshie Terashima, Mari Luminosa Muler, Ana Paula Morales, Sang Won Han, Soraya Soubhi Smaili

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Estudo da atividade inibitria de complexos paladaciclos sobre o crescimento e a infectividade de Leishmania.


Mestriner, C.L.B.; Paladi, C.S. Carolina de Siqueira Paladi - UNIFESP Clara Lcia Barbiri Mestriner - Microbiologia, Imunologia e Parasitologia / Parasitologia

Resumo:

As leishmanioses so doenas parasitrias transmitidas por insetos denominados flebtomos que acometem principalmente regies subdesenvolvidas como conseqncia das intensas migraes humanas, do desmatamento e da urbanizao. A Leishmania (L.) amazonensis uma das espcies desse protozorio responsvel por uma forma cutnea da doena cuja distribuio predominante na Regio Amaznica. Nos hospedeiros mamferos o parasita se desenvolve na forma amastigota que sobrevive e se reproduz dentro de vacolos parasitforos dos macrfagos. O presente trabalho tem como objetivo testar a ao leishmanicida de um composto organometlico de paldio, ativo no combate clulas tumorais, [Pd(N,N-dimetil-1-fenetilamina-1,2-etanobis-(difenilfosfina)], denominado DPPE 1.2. Resultados prvios do nosso trabalho permitiram estabelecer que a concentrao do DPPE 1.2 eficaz contra os amastigotas intracelulares de L. (L.) amazonensis 1.000 nM. Na seqncia de nosso trabalho foi realizada a cintica do tratamento com o DPPE 1.2 concentrao de 1.000 nM das culturas de macrfagos murinos infectados com a L. (L.) amazonensis durante 3, 5 e 7 dias. A citotoxicidade do DPPE 1.2 para os macrfagos tratados foi avaliada pelo mtodo do MTT. A atividade do DPPE 1.2 tambm foi avaliada in vivo sobre as leses cutneas de camundongos suos e BALB/c 30 dias aps a infeco com a L. (L.) amazonensis. Os resultados desses experimentos podem ser assim resumidos: (1) Houve reduo significante dos ndices fagocticos nas culturas dos macrfagos infectados aps o tratamento com o DPPE 1.2, tendo-se observado uma correlao direta entre o tempo de tratamento e o efeito leishmanicida da droga sobre os amastigotas intracelulares; (2) O DPPE 1.2 concentrao de 1000 nM no exerceu efeito citotxico sobre os macrfagos em nenhum perodo do tratamento; (3) Os testes in vivo com os camundongos suos e BALB/c mostraram que no houve diferenas significantes entre os animais de nenhum dos grupos quando a infeco foi avaliada pelo tamanho das leses. Entretanto, foi observada uma diminuio significante, em relao ao controle, do nmero de parasitas presentes nas leses dos animais tratados quando a infeco foi avaliada pelo teste da diluio limitante. O decrscimo da infeco, porm, no indicou uma diferena significante entre o efeito leishmanicida do DPPE 1.2 e a do glucantime. Esses resultados levaram-nos a testar o efeito leishmanicida do DPPE 1.2 em camundongos BALB/c 15 dias aps a infeco com a L. (L.) amazonensis utilizando um nmero maior de animais. Os resultados desses testes esto em processamento. Apoio: CNPq. Aprovao no Comit de tica em Pesquisa No.: 0568/07 Participantes: Clara Lcia Barbiri Mestriner, Carolina de Siqueira Paladi

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ESTUDO DA EXPRESSO DE GLICOSAMINOGLICANOS E PROTEOGLICANOS EM LINHAGENS CELULARES DE CARCINOMAS PAPILFEROS DA TIRIDE


Martinatti, D.B.; Coelho, B.V.; Dominato, J.A.A.; Kobayashi, E.Y.; Mendes, A.; Martins, J.R.M.; Nader, H.B. Daniela Bortoletto Martinatti - FMU Helena Bonciani Nader - Bioqumica / Biologia Molecular

Resumo:

Linhagens de clulas de tumores malignos da tiride, NPA (portadoras de mutao no gene BRAF) e PTC (portadoras de rearranjo RET/PTC 1), mostraram em experimentos realizados anteriormente no nosso laboratrio padro distinto na sntese do cido hialurnico (AH). Clulas PTC sintetizaram cerca de 20 vezes mais AH que clulas NPA. Alm, disso, estudo preliminar mostrou, por PCR convencional, que tal diferena poderia se dever tanto menor sntese quanto maior degradao do AH, uma vez que as clulas NPA apresentavam menor expresso da sintase 3 (HAS 3) e maior expresso de hialuronidase (HYASE). No presente estudo, foi investigada a presena e atividade de HYASE tanto nos meios de cultura quanto nos extratos celulares dessas clulas. Inicialmente procuramos identificar essa atividade por zimografia, mas os resultados foram negativos, talvez pela limitao do mtodo em relao sua capacidade de identificar pequenas concentraes da enzima. Idealizamos ento, um mtodo fluoromtrico para detectar a atividade de HYASE em placas de ELISA usando AH padro de cordo umbilical humano como substrato adsorvido nas placas. A atividade de HYASE foi determinada por comparao com a atividade presente em concentraes conhecidas de HYASE padro de Streptococcus hyalurolyticus (Sigma) em dois tampes diferentes, PBS pH 7,4 e acetato de sdio pH 4,0. O ensaio foi conduzido em sextuplicatas (100 mcL/well) tanto para os padres de HYASE como para as amostras de meios de cultura e extratos celulares, e a atividade presente determinada pela fluorescncia residual na placa aps incubao com protena de ligao do AH marcada com eurpio. A curva obtida foi inversamente proporcional atividade de enzima presente em cada soluo. Observamos que, em pH fisiolgico, meios de cultura provenientes das clulas PTC apresentaram maior atividade de HYASE do que a encontrada para as clulas NPA (14,3 x 1,1 mcUI/mL). Por outro lado, quando avaliado em pH cido observamos o inverso, com os meios de cultura das clulas NPA apresentando maior atividade que as PTC (25,6 x 1,2 mcUI/mL). Esses dados sugerem que ambas as linhagens celulares secretam para o meio de cultura enzimas com atividade de HYASE mas de caractersticas distintas e com possvel impacto no comportamento biolgico desses tumores tiroidianos. Aprovao no Comit de tica em Pesquisa No.: 0086/07 Participantes: Daniela Bortoletto Martinatti, Bruno Vieira Coelho, Juliana Augusta Albieri Dominato, Elsa Yoko Kobayashi, Aline Mendes, Joo Roberto Maciel Martins, Helena Bonciani Nader

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Autores: Bolsista: Orientador:

ESTUDO DA EXPRESSO DE GLICOSAMINOGLICANOS E PROTEOGLICANOS EM LINHAGENS DE CARCINOMAS FOLICULARES E ANAPLSICOS DA TIRIDE


Avakian, K.C.; Martinatti, D.B.; Dominato, J.A.A.; Coelho, B.V.; Kobayashi, E.Y.; Mendes, A.; Lima, M.L.O.; Nader, H.B.; Martins, J.R.M. Kevork Chamilian Avakian - Centro Univ. Nove de Julho Joo Roberto Maciel Martins - Bioqumica / Biologia Molecular

Resumo:

Nesse estudo identificamos o padro de sntese de glicosaminoglicanos (GAGs) e proteoglicanos (PGs) em linhagens celulares de carcinoma folicular da tiride (WRO) e de uma linhagem orinria de carcinoma anaplsico (ARO) tambm tiroidiano. As clulas foram mantidas nos meios apropriados e a sntese de novo dos GAGs, aps marcao com sulfato radioativo, bem como a sntese de cido hialurnico (AH), foram determinadas por eletroforese em gel de agarose no tampo 1,3diaminopropano acetato, pH 9,0 e por um fluorensaio, respectivamente. A anlise eletrofortica mostrou um padro distinto dos GAGs que compem os PGs quando as linhagens foram comparadas. Enquanto clulas WRO expressavam PGs contendo cadeias de condroitim sulfato (CS) e heparam sulfato (HS), as clulas ARO perderam completamente a expresso das cadeias polissacardicas de CS. Em temos quantitativos, tambm houve diferenas com as clulas WRO sintetizando cerca de cinco vezes mais GAGs totais que as clulas ARO (2702 x 517 cpm/mg de protena). Alm disso, as propores dos GAGs secretados para o meio de cultura ou retidos no extrato celular foram iguais nas clulas WRO ao passo que nas clulas ARO mais de 70% dos GAGs foram secretados para o meio de cultura. Outro dado interessante foi a capacidade dessas clulas sintetizarem AH: clulas WRO sintetizaram cerca de 20-30 vezes mais AH que clulas ARO (266,9 x 8,0 ng/mg protena). Esses dados, preliminares, mostram um padro distinto na sntese tanto de GAGs sulfatados como do AH nas duas linhagens de clulas de carcinomas tiroidianos estudadas. A ausncia do CS bem como a menor expresso de AH nas clulas ARO so achados surpreendentes que parecem indicar mudanas drsticas na biossntese (tanto na sntese como na degradao) desses compostos. Se isso influencia o comportamento de tais neoplasias, in vivo, ainda motivo de especulao. Aprovao no Comit de tica em Pesquisa No.: 0086/07 Participantes: Kevork Chamilian Avakian, Daniela Bortoletto Martinatti, Juliana Augusta Albieri Dominato, Bruno Vieira Coelho, Elsa Yoko Kobayashi, Aline Mendes, Mrcio Luiz de Oliveira Lima, Helena Bonciani Nader, Joo Roberto Maciel Martins

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Estudo da expresso do receptor B1 de cininas em leuccitos de pacientes com artrite reumatide, artrite psotitica e espondilite anquilosante submetidos a tratamento com imunobiolgicos anti-TNF
Silva, C.G.; Faria, A.G.A.; Silva, N.P.; Eloi, M. Marina Eloi - UNIFESP Neusa Pereira da Silva - Medicina / Reumatologia

Resumo:

Introduo Nos processos inflamatrios crnicos ocorre um desbalano entre os diversos mediadores, resultando em dano celular e tecidual. Evidncias recentes apontam para o papel das cininas na dor e dano celular associados com doenas articulares inflamatrias. Nesse caso, mediadores do sistema calicrenas-cininas devem ser importantes na artrite reumatide, artrite psoritica e espondilite anquilosante. A artrite reumatoide (AR) uma doena inflamatria crnica, auto-imune, que pode levar destruio da cartilagem e do osso, aparecimento de deformidades e importante incapacidade funcional. A artrite psoritica uma doena inflamatria, geralmente soronegativa para o fator reumatide, associada psorase cutnea. A espondilite anquilosante uma doena inflamatria crnica sistmica com envolvimento principalmente do esqueleto axial. Sua etiologia desconhecida embora apresente forte associao com subtipos de HLA-B27. Na AR, vrios componentes do sistema calicrenas-cininas foram identificados no sangue, lquido sinovial e na sinvia, incluindo nveis circulantes aumentados de bradicinina (BK) em comparao com voluntrios. As cininas exercem suas funes por ao sobre dois tipos de receptores, B1 e B2. O receptor B1 pouco expresso em condies normais, mas rapidamente induzido em condies patolgicas por vrios estmulos pr-inflamatrios como IL-1, IFN- e TNF-. A busca de marcadores de atividade de doena de interesse no s para monitorao do paciente como por abrir perspectivas para novas opes teraputicas. Atualmente, existem agentes anti-TNF disponveis para o tratamento dessas doenas. Esses imunobiolgicos tm sido alvo de grande interesse e objeto de estudo tanto em animais quanto em seres humanos. Objetivo - Estudar o efeito do tratamento com imunobiolgicos anti-TNF- na expresso do receptor B1 de cininas em clulas linfomononucleares e neutrfilos de sangue perifrico de pacientes com artrite reumatode, artrite psoritica e espondilite anquilosante. Metodologia - Amostras de sangue perifrico de pacientes foram coletadas antes da primeira, segunda e terceira dose do tratamento com anti-TNF. Linfcitos e neutrfilos foram isolados para extrao de RNA total e obteno de extrato protico. A expresso gnica foi avaliada por RT-PCR seguido de PCR em tempo real. Os extratos proticos foram congelados para posterior uso em testes de expresso do receptor B1 por western blot. Resultados - A separao das populaes celulares, extrao de RNA total e protenas, RT-PCR e PCR em tempo real foram padronizados. Os resultados obtidos at o momento por sugerem que a expresso gnica est reprimida antes do tratamento com o imunobiolgico, sobe aps a primeira dose e diminui ao longo do tempo. Discusso - Ainda no temos dados suficientes para anlise estatstica. Observamos aumento da expresso de receptor B1 aps a primeira dose, seguido de posterior queda. Essa observao sugere a existncia de um mecanismo de controle negativo inibindo a transcrio antes do inicio do tratamento com o imunobiolgico. A confirmao dessa hiptese depende da incluso de maior nmero de amostras e da anlise da expresso protica do receptor B1. Participantes: Cristiane Gallindo Silva, tila Granados de Afonso Faria, Neusa Pereira da Silva, Marina Eloi

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ESTUDO DA HOMEOSTASE DE CLCIO E MORTE CELULAR EM CLULAS QUE SUPEREXPRESSAM PROTENAS DA FAMLIA DA BCL-2
Muler, M.L.; Terashima, J.Y.; Morales, A.P.; Smaili, S.S. Mari Luminosa Muler - UNIFESP Soraya Soubhi Smaili - Farmacologia / Farmacologia

Resumo:

Objetivo: O objetivo do presente trabalho foi investigar as alteraes do Ca2+ induzidas pela superexpresso da protena anti-apopttica Bcl-xL em clulas MCF-7 (de adenocarcinoma mamrio humano), bem como o papel do Ca2+ na modulao da apoptose. Mtodos e Resultados: Clulas MCF-7 em cultura foram utilizadas para padronizar e obter linhagens celulares que superexpressam permanentemente protenas da famlia da Bcl-2, tais como a Bcl-xL. Para tanto, foram utilizados construtos com o gene que codifica a protena anti-apopttica Bcl-xL com a protena fluorescente verde (EGFP-Bcl-xL). Clulas MCF-7 foram inicialmente transfectadas com o construto de interesse e, aps a transfeco, as clulas foram selecionadas com G418, seguida de procedimento de sorting em citmetro de fluxo, para obteno de uma populao mais homognea superexpressando a protena de interesse. As clulas transfectadas e superexpressando apenas a EGFP foram utilizadas como controle. Posteriormente, o mesmo procedimento ser realizado para os construtos do gene da protena pr-apopttica Bax com as protenas fluorescentes verde (EGFP) e vermelha (DsRed). Os resultados mostram que foram obtidas populaes de clulas MCF-7 que superexpressam permanentemente a EGFP ou a EGFP-Bcl-xL. As anlises de microscopia de fluorescncia destas clulas mostraram que a EGFP-Bcl-xL apresenta-se associada a compartimentos subcelulares que podem ser estoques de Ca2+, tais como o retculo endoplasmtico e a mitocndria. Em clulas carregadas com indicador fluorescente de Ca2+ Fura-2 foram aplicados estmulos como o ATP (100 uM) e Tapsigargina (1 uM) e foram realizadas medidas de Ca2+ intracelular. O ATP e a Tapsigargina induziram aumentos de Ca2+ intracelular de 14,5 e 15,7 %, respectivamente. Concluses: O procedimento utilizado para o estabelecimento dessas linhagens celulares permitiu que a Bcl-xL fosse expressa de maneira permanente em clulas MCF-7. Ainda, observou-se que essas clulas so sensibilizadas por estmulos mobilizadores de Ca2+, o que permitir a utilizao das mesmas nos estudos dos mecanismos de sinalizao de Ca2+ envolvidos no processo de morte celular por apoptose. Aprovao no Comit de tica em Pesquisa No.: 0290/08 Participantes: Mari Luminosa Muler, Juliana Yoshie Terashima, Ana Paula Morales, Soraya Soubhi Smaili

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Autores: Bolsista: Orientador:

Estudo da influncia do tratamento crnico com anfetamina e etanol no sistema nervoso adrenrgico perifrico de ratos peri-adolescentes.
Mendes, C.S.; Jurkiewicz, N.H.; Jurkiewicz, A.; Zanuto, J.G.C.; Pereira, J.D. Cairo Mendes Sobrinho - UNIFESP Neide H. Jurkiewicz - Farmacologia / Farmacologia

Resumo:

Introduo e objetivos O objetivo desse estudo verificar se o sistema adrenrgico perifrico de animais peri-adolescentes influenciado pelo tratamento simultneo com anfetamina e etanol. Para isso estudamos a resposta farmacolgica da musculatura lisa do ducto deferente agonistas adrenrgicos aps o tratamento crnico com anfetamina e etanol. O ducto deferente (DD) de rato possui rica inervao adrenrgica e por isso utilizado h muito tempo como modelo de estudo desse tipo de neurotransmisso. A importncia de estudar as interaes entre a anfetamina e o etanol no sistema adrenrgico resultante do fato de que esta neurotransmisso participa da mediao de importantes mecanismos fisiolgicos como o processo de contrao do ducto deferente que fundamental para o processo da ejaculao e tambm da regulao da expresso de receptores de membrana, dentre outros e tambm do fato dessas drogas serem largamente utilizadas como drogas de abuso. Os animais no perodo peri-adolescente parecem estar mais suscetveis a perturbaes farmacolgicas. Nesse perodo os efeitos da anfetamina e do etanol parecem ser maiores, possivelmente devido aos efeitos do estresse aumentado, importante na modulao dos efeitos dessas drogas. H indcios de uma importante funo de reforo cruzado entre a anfetamina e o etanol, mediado por vias cerebrais. Alm disso, tanto a anfetamina quanto o etanol podem desenvolver mecanismos de dependncia, principalmente em animais peri-adolescentes, com idade entre 30-45 dias. Metodologia Tratamos ratos peri-adolescentes dos 35 aos 45 dias de idade com etanol (no bebedouro a 25%) e anfetamina (5mg/kg/dia) (Grupo 1), com apenas anfetamina (5mg/kg/dia) (Grupo 2) ou com apenas etanol (no bebedouro a 25%) (Grupo 3). Ao trmino do tratamento, os animais foram sacrificados e tiveram o DD retirado e montado para medida de contrao. Os DD de animais tratados (T) e controle (C) foram comparados quanto resposta contrtil atravs de curvas dose-resposta de Brio, Noradrenalina, Dopamina, e Fenilefrina. Doses nicas do agonista adrenrgico indireto Tiramina foram tambm usadas para analisar os estoques de noradrenalina endgena. Os parmetros farmacolgicos utilizados a partir das curvas foram a afinidade dos agonistas pelo receptor (pD2) e o efeito mximo (Emax). Para padronizar as curvas dose-resposta construdas, fizemos uma curva de brio para cada DD. Como o Brio o agonista que faz o ducto deferente efetuar sua mxima contrao possvel, construmos todas as outras curvas com relao ao Emax do Brio. Para definir a significncia estatstica das comparaes utilizamos teste t de Student pareado. Quando p<0,05 consideramos a diferena estatisticamente significativa (diferena estatstica). Resultados Tiramina: Para o efeito da Tiramina, observamos diferenas significativas para o grupo 1 (n=5) e para o grupo 2 (n=8) em relao aos seus controles. Em ambos os grupos, observamos que o efeito da tiramina dos animais tratados foi significativamente menor (25% menor) do que a dos animais controle. Isso pode indicar que a anfetamina, tanto isoladamente quanto em conjunto com o etanol, depleta os estoques endgenos vesiculares de noradrenalina. Na comparao entre os grupos, no observamos diferena estatstica para o efeito da Tiramina. Afinidade aparente do Agonista pelo Receptor (pD2): com relao ao parmetro pD2, no observamos nenhuma diferena estatstica. Isso pode significar que o tratamento dos grupos 1 e 2 no altera a resposta do sistema receptor a doses iguais dos agonistas adrenrgicos utilizados para esses dois grupos. Quando comparamos os animais tratados do grupo 1 e 2 entre si verificamos que tambm no houve diferena estatstica. Efeito Mximo: observamos diferena estatstica no efeito mximo do Brio, noradrenalina e fenilefrina dos animais do grupo 1 em relao a seus controles. Para os animais do grupo 2 no observamos nenhuma diferena estatstica entre os Emax dos animais tratados e controles. Quando comparamos os animais tratados do grupo 1 e 2 verificamos que h diferenas significativas entre os Emax do Brio, noradrenalina e fenilefrina. Em conjunto, nossos resultados podem indicar que o tratamento crnico com anfetamina e etanol modifica a quantidade de noradrenalina disponvel nas vesculas, mas no modifica a afinidade aparente dos agonistas por seus receptores, o que seria esperado para compensar a menor quantidade de noradrenalina disponvel. Por outro lado, os efeitos obtidos dos animais tratados dos grupos 1 e 2 no tiveram diferenas entre si, ou seja, a no ser a diminuio do Emax do Brio, noradrenalina e fenilefrina, todos os outros efeitos observados no grupo 1 poderiam ser resultantes apenas da anfetamina. Pretendemos ainda terminar o grupo 3, para podermos comparar os grupos entre si e aumentar o nmero de animais (n) do grupo 1, o que dever ser feito at a elaborao do relatrio final. Aprovao no Comit de tica em Pesquisa No.: 364/08 Participantes: Cairo Mendes Sobrinho, Neide H. Jurkiewicz, Aron Jurkiewicz, Joo Gabriel Carnietto Zanuto, Janana D. Pereira

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Autores: Bolsista: Orientador:

Estudo da inibio da via de fosforilao de ERK atravs do uso de PD-98059 in vitro


Marco, D.B.; Cardoso, A.S.C.; Monteiro, H.P.; Simon, K.A.; Junqueira, V.B.C. Daniela Braga Marco - UNIFESP Vrginia Berlanga Campos Junqueira - Cincias Biolgicas / Toxicologia

Resumo:

Os neutrfilos compem a populao mais numerosa de leuccitos no sangue circulante e participam da primeira linha de defesa, sendo rapidamente atrados por substncias quimiotticas originadas pelas clulas dos locais invadidos por bactrias. A funo dessas clulas depende em grande parte de processos de sinalizao celular, entre eles os que envolvem as cascatas de MAP quinases (MAPK). As MAPK pertencem famlia das serinatreonina-quinases. Essas protenas fosforiladas desencadeiam uma cascata de fosforilao de serinas e treoninas na clula, de longa durao, para que possam manter o sinal e mand-lo para o ncleo, onde ir alterar o padro de transcrio gnica. Essa via ativada estimula a proliferao, diferenciao e morte celular. Estudos preliminares do laboratrio indicaram que o pr-tratamento de neutrfilos com um inibidor da ERK 1/2 (uma MAPK) levou diminuio da adeso dos neutrfilos a clulas endoteliais de veia umbilical humana em cultura. Inibidores das outras vias de transduo de sinal, como as vias da JNK e p38, no surtiram o mesmo efeito. O objetivo desse trabalho comprovar a inibio da via da ERK 1/2 in vitro, pelo inibidor PD-98059 (2-amino-3-metoxiflavona). Para isso, ser coletado sangue de jovens saudveis de 18 a 25 anos, e os neutrfilos sero separados por centrifugao e gradiente de densidade (Hystopaque/Dextran). Os neutrfilos previamente separados (2 x 106 PMNs, em um volume final de 2 mL de PBS glicosado) sero pr-incubados com PD-98059, na concentrao de 50 mM, por 30 minutos a 37C. Aps esse perodo, os tubos sero centrifugados por 10 minutos a 1800 rpm em temperatura ambiente, e os pellets formados sero ressuspendidos em 2mL de PBS para corrida nos Western Blots. Os neutrfilos obtidos (1 x 106 clulas), pr-incubados ou no com PD-98059, sero estimulados com zymosan opsonizado (100 partculas/clula) e lisados por sonicao. O lisado celular ser diludo (1:2) em tampo Laemmli 2x. Para a realizao dos blots sero utilizados volumes correspondentes a 20-50 mg de protenas em cada poo do gel de eletroforese. As amostras sero separadas eletroforeticamente em gel de poliacrilamida 10% e transferidas para membranas de nitrocelulose. A presena das protenas na membrana ser confirmada pela revelao com soluo de Ponceau. As membranas sero bloqueadas com BLOTTO 1X. Em seguida, a membrana ser incubada com os anticorpos primrios anti ERK1/2 ou anti ERK 1/2 fosforilada, diludos 1:1000 em BLOTTO 1X. Finalmente, as membranas sero incubadas com revelador NBT/BCIP em tampo fosfatase alcalina por 30 minutos ou at revelao das bandas. Espera-se poder comprovar a inibio da fosforilao da ERK 1/2 pelo PD-98059 em neutrfilos humanos nas condies utilizadas nos experimentos anteriores, caso contrrio ser necessrio alterar essas condies de maneira a efetivar essa inibio, possibilitando o estudo da participao desta via no processo de adeso neutrfilo/endotlio. Apoio financeiro: Programa Institucional de Bolsas de Iniciao Cientfica (PIBIC),Capes, FAPESP e CNPq. Aprovao no Comit de tica em Pesquisa No.: 0312/08 Participantes: Daniela Braga Marco, Andr dos Santos Carneiro Cardoso, Hugo Pequeno Monteiro, Karin Argenti Simon, Vrginia Berlanga Campos Junqueira

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Estudo do papel da flagelina H6 de uma amostra de Escherichia coli enteropatognica Tpica, que co-expressa os padres de adeso localizada e agregativa (AL/AA), quanto a adeso e formao de biofilme
Sampaio, S.C.; Gomes, T. A.; Garcia, B.G. Bruna Gil Garcia - Fundao Santo Andr Tnia Aparecida Tardelli Gomes do Amaral - Microbiologia, Imunologia e Parasitologia / Microbiologia

Autores: Bolsista: Orientador:

Resumo:

Entre as diarrias de etiologia bacteriana, as Escherichia coli diarreiognicas (DEC) tm destaque. As DEC so classificadas em seis patotipos diferentes: E. coli enteropatognica (EPEC), E. coli enterotoxignica (ETEC), E. coli enteroinvasora (EIEC), E. coli produtora da toxina Shiga (STEC), E. coli enteroagregativa (EAEC) e E. coli que adere difusamente (DAEC). EAEC assim denominado em funo da expresso de aderncia agregativa (AA), na qual as bactrias se ligam superfcie de clulas HEp-2 ou HeLa, apresentando aspecto de tijolos empilhados e formando biofilmes. EPEC tem a capacidade de produzir uma leso caracterstica no epitlio intestinal denominada leso attaching-effacing (leso A/E), cujos determinantes genticos localizam-se na regio LEE (locus of enterocyte effacement) que consiste em uma ilha de patogenicidade cromossmica. Alm disto, EPEC portadora do plasmdio EAF (EPEC Adherence Factor), o qual alberga o operon bfp, que codifica uma estrutura fimbrial (Bundle Forming Pilus- BFP). Esta fmbria medeia a expresso do padro de adeso localizada (AL), que se caracteriza pela formao de microcolnias compactas na superfcie celular. As EPECs podem, eventualmente, expressar outros fatores de virulncia que no so codificados pelo plasmdio EAF ou pela regio LEE, dentre eles os flagelos. Estudos recentes demonstram o envolvimento do flagelo na adeso em clulas intestinais, invaso de superfcies do hospedeiro, induo da resposta imune e formao de biofilmes. A formao de biofilme bacteriano confere vantagens adaptativas de resistncia ao mecnica exercida pelo fluxo de fluidos e peristaltismo intestinal, bem como proteo contra antibiticos e clulas fagocitrias. Em estudo recente de nosso laboratrio, foram identificadas 14 amostras de E. coli que apresentavam um padro de adeso hbrido AL e AA, e promoviam a formao de um biofilme maduro em ensaios de 6 h. Aps avaliar a ocorrncia de fatores de virulncia dos patotipos tEPEC e EAEC, concluiu-se que essas amostras deveriam ser classificadas como tEPEC, uma vez que eram desprovidas de outras propriedades descritas no patotipo EAEC (exceto do padro AA e a formao de biofilme). A ocorrncia de amostras EPEC com este inusitado fentipo hbrido de aderncia AL/AA, que associa a capacidade das EPEC em formar a leso A/E com a capacidade de formar biofilme, tradicionalmente associados s EAEC, poderia potenciar a capacidade de virulncia deste enteropatgeno, propiciando uma maior persistncia de colonizao da mucosa intestinal. Diversas publicaes recentes demonstram que o flagelo necessrio tanto para a adeso como para a formao de biofilme em diferentes espcies bacterianas. Entretanto, at o momento, no foi descrito o papel do flagelo na adeso e formao de biofilme em amostras de EPEC que apresentam padro hbrido (AL/AA) de adeso. O objetivo deste estudo foi investigar o papel do flagelo no fentipo de adeso hbrido (AL/AA) de uma amostra selecionada (EPEC 99245) e no estabelecimento de biofilme. Para essa finalidade, foram selecionadas as seguintes amostras de E. coli: EPEC 99245 (sorotipo ONT:H6), amostra selvagem produtora de AL/AA, isolada de um criana diarrica. As amostras prottipos de tEPEC E2348/69, EAEC 042, e uma amostra no diarreiognica (E. coli HB101) foram empregadas como controles dos padres AL, AA e no aderente, respectivamente. Inicialmente, para confirmar a pureza das amostras, estas foram semeadas em Agar MacConkey e submetidas a ensaios bioqumicos especficos, em meios EPM, MiLi e Citrato de Simons.em Para confirmar a manuteno das propriedades de adeso, foram empregados ensaios de adeso em clulas HeLa, com perodo de incubao de 6 h. A capacidade de formar biofilme foi avaliada, de maneiras qualitativa e quantitativa, em microplacas de poliestireno e colorao do biofilme com Giemsa. Foi tambm avaliada a susceptibilidade das amostras canamicina (50 mg/ml), cido nalidxico (20 mg/ml), zeocina (60 mg /ml) e apramicina (100 mg/ml) para se verificar a possibilidade do uso dessas drogas na obteno, por diferentes metodologias, de mutantes na expresso da flagelina, componente estrutural do flagelo bacteriano. A amostra selvagem 99245 foi sensvel a todos os antibiticos, permitindo o emprego de um sistema de mutagnese no gene fliC (que codifica a flagelina), que utiliza lambda red (Datsenko et al., 2000). Foram realizadas duas tentativas de obteno de mutantes deficientes na formao de flagelos, ainda sem sucesso. Em paralelo, est sendo empregado um sistema de mutagnese que emprega um plasmdio suicida (pJP5603). A amostra selvagem foi comparada com as amostras de E. coli HB101 (controle negativo) e EAEC 042 (controle positivo). Os resultados obtidos neste estudo permitiro avaliar o papel do flagelo na adeso e formao de biofilme. Aprovao no Comit de tica em Pesquisa No.: 651/08 Participantes: Suely Carlos F. Sampaio, Tnia Aparecida Tardelli Gomes do Amaral, Bruna Gil Garcia

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Estudo do papel da tripeptidil-peptidase I (TPPI) e das catepsinas lisossomais na Lipofuscinose Ceride Neuronal Infantil Tardia (LCNIT)
Kawamoto, E. E.; Alves, M.F.M.; Juliano, M.A.; Juliano, L.; Carmona, A.K. Eric Eiji Kawamoto - UNIFESP Adriana Karaoglanovic Carmona - Biofsica / Biofsica

Resumo:

O termo Lipofuscinose Ceride Neuronal (LCN) caracteriza um grupo de doenas hereditrias neurodegenerativas que afeta principalmente crianas e adolescentes. As LCN so caracterizadas pela perda progressiva da viso, neurodegenerao, epilepsia e acmulo de um lipopigmento autofluorescente nos neurnios e outras clulas. Clinicamente as LCN so classificadas como doenas de acmulo, definidas por um acmulo progressivo de agregados proticos intracelulares e a disfuno e morte de populaes especficas de neurnios do sistema nervoso central. A LCN infantil tardia (LCNIT) clssica a forma mais comum da doena que aparece entre dois e quatro anos de idade e leva a criana morte aproximadamente aos 10 anos. A LCNIT causada por uma mutao no gene cln2 que codifica a tripeptidilpeptidase I (TPPI), uma protease lisossomal. Como a LCNIT caracterizada pelo grande acmulo de subunidade c da ATP sintase nos lisossomos, h indcios de que este acmulo se deva deficincia da TPPI. Por outro lado, experimentos com camundongos knock-out para os genes das catepsinas D e F tambm apresentaram quadros de LCN, sugerindo que o produto destes genes tambm possam estar envolvidos nesta patologia. Como a TPPI est co-localizada com as catepsinas no lisossomo, o objetivo do nosso trabalho verificar se a degradao da subunidade c da ATP sintase deve-se diretamente TPPI ou se ela est envolvida em um processo indireto de degradao da subunidade, como por exemplo, na ativao das catepsinas. Para isto sintetizamos 7 peptdeos fluorognicos baseados na seqncia de aminocidos da subunidade c da ATP sintase e testamos como substratos das catepsinas K, V, S, L e da CLN2. Resultados preliminares demonstram que as catepsinas lisossomais so capazes de hidrolisar os peptdeos fluorognicos baseados na seqncia c, sugerindo que esta protena seja um substrato natural destas enzimas. Por outro lado, a TPPI hidrolisa apenas o primeiro peptdeo da srie (que possui o N-terminal livre) no agindo sobre os outros peptdeos da serie. Estes resultados sugerem que a atuao da TPPI na degradao seja indireta como, por exemplo, ativando as catepsinas pela clivagem e liberao dos pr-domnios. Os resultados obtidos podero contribuir para a melhor compreenso da fisiopatologia das LCN. Aprovao no Comit de tica em Pesquisa No.: 204/08 Participantes: Eric Eiji Kawamoto, Marcio F. M. Alves, Maria Aparecida Juliano, Luiz Juliano Neto, Adriana Karaoglanovic Carmona

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ESTUDO DOS ADRENOCEPTORES E PURINOCEPTORES NAS DISFUNES SIMPTICAS DA MUSCULATURA LISA E CARDACA DE ANIMAIS HIPERTENSOS: Papel do xido Ntrico
Huang, A.I.U.; Caricati Neto, A. Adriana I Un Huang - UNIFESP Afonso Caricati Neto - Farmacologia / Farmacologia

Resumo:

INTRODUO A hipertenso arterial sistmica (HAS) doena caracterizada pelo aumento da presso arterial resultante da resistncia vascular perifrica. A HAS representa uma patologia de alto custo mdico-social por estar relacionada com diversas doenas cardiovasculares, incluindo a doena crebrovascular, a doena arterial coronariana, a insuficincia cardaca, a insuficincia renal crnica e a doena vascular de extremidades. Estudos experimentais e clnicos mostraram que disfunes simpticas esto envolvidas na fisiopatologia da HAS (de Champlain et al., Can J Cardiol, 1999). Embora o uso de drogas simpatolticas para reduzir o tnus simptico no sistema cardiovascular constitua uma das principais estratgias anti-hipertensivas, os mecanismos moleculares envolvidos nas disfunes simpticas permanecem sob investigao. Alguns estudos sugerem que os mecanismos envolvidos na regulao da transmisso simptica, como o xido ntrico (NO), podem estar envolvidos nas disfunes simpticas na HAS. Estudos realizados por Furchgott e cols. (Furchgott & Zawadzki, Nature, 1980) na dcada de 80 mostraram que o endotlio vascular libera uma substncia relaxante envolvida na regulao da presso arterial. Descobriu-se mais tarde que este fator relaxante derivado do endotlio era o NO. Estudos recentes (Toda & Okamura, Pharmacol Ver 55, 2003) mostraram que os nervos autonmicos tambm podem liberar o NO. Todavia, o papel do NO na neurotransmisso autonmica permanece desconhecido. Visando investigar o papel do NO na transmisso simptica e nas disfunes simpticas associadas HAS, estudamos os efeitos de frmacos capazes de aumentar (Nitroprussiato de Sdio, NPS) ou reduzir (L-NAME) a formao endgena de NO sobre as respostas funcionais mediadas pela noradrenalina (NA) e 5trifosfato de adenosina (ATP) em tecidos ricos em nervos simpticos (ducto deferente e trio) isolados de ratos normotensos (NWR) e espontaneamente hipertensos (SHR). METODOLOGIA Os NWR e SHR (machos de 16-20 semanas de idade) foram sacrificados por decapitao e submetidos aos procedimentos cirrgicos para a remoo dos ductos deferentes (DD) e do corao. O DD de NWR e SHR foi isolado, limpo, lavado internamente e montado em banho de rgos isolados contendo 10 ml de soluo nutritiva de Tyrode. Para o estudo das contraes neurognicas, o DD foi montado entre dois eletrodos de platina conectados ao estimulador eltrico (Grass S88), para a estimulao eltrica transmural (EET) de 0,2 a 20 Hz (durao de 1ms e voltagem 60 V). Para o registro das contraes neurognicas, os DD foram fixados ao transdutor de tenso modelo FT202 (CB Science, USA) conectado ao sistema de aquisio de dados analgico/digital Powerlab 800 (AD Instruments, USA). O trio direito de NWR e SHR foi isolado, limpo dos tecidos adjacentes e montado em banho de rgos isolados contendo 10 ml de soluo nutritiva de KrebsHenseleit. Para o registro das contraes espontneas, o trio foi fixado ao transdutor de tenso modelo FT202 (CB Science, USA) conectado ao sistema de aquisio de dados analgico/digital Powerlab 800 (AD Instruments, USA). RESULTADOS E DISCUSSO O aumento da PA (60%) e da massa cardaca (32%) confirma a HAS em SHR. O DD submetido a EET de 20 Hz apresentou contraes rpidas (fsicas) seguidas de contraes sustentadas (tnicas), em NWR e SHR. Estas contraes foram inibidas pelo bloqueador de canais de sdio neuronal tetrodotoxina (3mM), confirmando sua natureza neurognica. As contraes fsicas foram bloqueadas pelo antagonista purinrgico suramin (10mM), enquanto as contraes tnicas foram bloqueadas pelo antagonista -adrenrgico prazosin (0,1mM). Portanto, estas contraes so mediadas pela ao do ATP e da NA liberados dos nervos simpticos em purinoceptores e adrenoceptores ps-sinpticos, respectivamente (Caricati-Neto et al. 1992; 2004). As contraes purinrgicas e noradrenrgicas foram inibidas pelo NPS (100mM) em NWR, mas no em SHR. Por outro lado, estas contraes foram aumentadas pelo L-NAME (100mM), em NWR e SHR. O trio direito de NWR e SHR apresentou contraes rtmicas e espontneas, as quais foram inibidas pelo agonista purinrgico ATP (1mM) e aumentadas pelo agonista dos -adrenrgico isoprenalina (1mM), em NWR e SHR. O NPS (100mM) reduziu a amplitude das contraes atriais espontneas e potencializou o efeito inibitrio do ATP. Por outro, o NPS (100mM) reduziu o efeito estimulante da isoprenalina em NWR e SHR. Estes resultados sugerem que o NO liberado pelos nervos autonmicos e outros tecidos poderia modular a transmisso simptica no msculo liso e cardaco (Choate & Paterson, 1999). Esta modulao seria decorrente da ao pr-(inibio da liberao de ATP e NA) e ps-sinaptica (relaxamento da musculatura lisa) do NO (Toda & Okamura, 2003). Alm disso, a ao modulatria do NO parece estar atenuada em SHR (CRABOS et al., 1997; KOLO et al., 2004). CONCLUSES Estes resultados sugerem que o NO est envolvido na modulao da transmisso nas sinapses neuro-efetoras simpticas da musculatura lisa e cardaca e sua ao neuromodulatria parece estar alterada na hipertenso arterial. Aprovao no Comit de tica em Pesquisa No.: 0012/07 Participantes: Adriana I Un Huang, Afonso Caricati Neto

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Estudo dos mecanismos de regulao ps-transcricional em Trypanosoma cruzi (cepa G) utilizando como modelo o gene do transportador de hexose
Rocha, M.R.; Barros, R.R.M.; Franco da Silveira, J. Murilo Ramos Rocha - UNIFESP Jos Franco da Silveira Filho - Microbiologia, Imunologia e Parasitologia / Parasitologia

Resumo:

Os transportadores de membrana so protenas essenciais para a obteno de energia pelos parasitas, responsveis pela captao de nutrientes do meio extracelular. O gene que codifica o transportador de hexose de T. cruzi (TcrHT1) foi clonado e caracterizado por Tetaud et al. 1994. Nos tripanossomatdeos a regulao gnica ocorre fundamentalmente ao nvel ps transcricional. O objetivo do nosso projeto estudar a expresso do gene do transportador de hexose (TcrHT1) nas diferentes formas evolutivas de Trypanosoma cruzi e identificar os possveis mecanismos de regulao ps-transcricional. Para tanto necessitamos identificar e caracterizar os transcritos expressos nas diferentes formas evolutivas do parasita. Tcnicas de Southern blot, northern blot, PCR, RT-PCR e reaes de seqenciamento so as principais metodologias utilizadas neste trabalho. Na fase inicial do nosso projeto, a fase aberta de leitura do gene que codifica o transportador de hexose (TcrHT1) foi clonada por PCR a partir do DNA genomico de T. cruzi (cepa G). Confirmamos por hibridizao em northern blot A presena de diferentes espcies de mRNAs TcrHT e em diferentes concentraes nas formas epimastigotas e tripomastigotas metacclicas. Hibridizao de filtros contendo RNA total de epimastigotas e tripomastigotas metacclicos sonda TcrHT1 mostrou a presena de 2 tipos de transcritos TcrHT1 em epimastigotas e apenas 1 tipo em tripomastigotas metacclicos. Transcritos TcrHT1 foram isolados de biblioteca de cDNA de formas metacclicas de T. cruzi (cepa G) por hibridizao com a sonda genomica TcrHT1. Estes clones esto sendo seqenciados e caracterizados por northern blot. Pretendemos tambm clonar os mRNAs TcrHT1 expressos em outras formas evolutivas do parasita por RT-PCR (transcriptase reversa e PCR). Alm disso, pretendemos identificar quais mensageiros TcrHT1 so encaminhados aos polissomas em cada uma das fases do ciclo de vida do parasita. Sero feitas comparaes utilizando-se os RNAs total e polissomal extrados de epimastigotas e tripomastigotas metacclicos. Os resultados obtidos at o momento comprovam a existncia de 2 transcritos TcrHT1 nas diferentes formas evolutivas do parasita. Participantes: Murilo Ramos Rocha, Roberto Rudge de Moraes Barros, Jos Franco da Silveira Filho

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Estudo dos parmetros replicativos dos subtipos B, C e F do HIV-1 em monocultivos e cultivos mistos virais em PBMCs
Santos, C.M.; Peixoto, J.M.; Soane, M.M.; Alkmim, W.; Janini, L.M.R. Camila Mauricio Santos - UNIFESP Luiz Mario Ramos Janini - Microbiologia, Imunologia e Parasitologia / Microbiologia

Resumo:

O HIV-1 possui uma importante diversidade gentica. No Brasil, os subtipos de maior circulao so B, C e F. Toda essa diversidade resultado direto da incorporao de erros durante a replicao viral. A capacidade de diversificao da informao gentica contida em seu genoma permite ao HIV adaptar-se s presses seletivas impostas pelo meio onde est se replicando. A prpria imunopatognese da doena, na era pr e ps-tratamento empregando-se anti-retrovirais, influenciada pela variabilidade gentica viral. A co-circulao de mltiplos subtipos e a presena de infeco mista favorece o surgimento de vrus recombinantes entre subtipos distintos de HIV-1, o que pode significar a seleo de uma estrutura viral mais adaptada. Apesar da existncia de um grande nmero de informaes sobre a diversidade do HIV-1 baseada em suas caractersticas genticas, pouco se sabe a respeito das notveis diferenas em suas propriedades biolgicas. A proposta deste estudo analisar, in vitro, a dinmica viral de isolados de HIV-1 de diferentes subtipos circulantes no Brasil. Para isso, procuraremos produzir altos ttulos destes isolados, a fim de realizar monocultivos. Conseqentemente, tentaremos prosseguir com experimentos de infeco dupla para avaliar a dinmica da competio viral entre os subtipos prevalentes na epidemia brasileira. Este estudo aborda questes referentes diversidade gentica do HIV-1, com mnimas referncias na literatura. Acreditamos que os resultados obtidos possam responder questes importantes da biologia e da epidemiologia molecular do HIV-1 no Brasil. O melhor entendimento destes mecanismos poder, inclusive, contribuir para a idealizao de novas estratgias teraputico-vacinais. Aprovao no Comit de tica em Pesquisa No.: 1701/07 Participantes: Camila Mauricio Santos, Juliana Magagnato Peixoto, Michel Moraes Soane, Wagner Alkmim, Luiz Mario Ramos Janini

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Cincias Bsicas Moleculares Ttulo:


Autores: Bolsista: Orientador:

Estudo in vitro de expresso do gene -L-iduronidase humana utilizando o sistema phiC31


Stilhano, R.S.; Matsumoto, P.K.; Silva, F.H.; Pereira, V.G; D'Almeida, V.; Han, S.W. Roberta Sessa Stilhano - UNIFESP Sang Won Han - Biofsica / Fsico Qumica

Resumo:

Introduo: A mucopolissacaridose do tipo I (MPS I) uma doena lisossomal que se d pela presena de mutaes no gene que codifica a enzima -L-iduronidase (IDUA). Terapias para MPS I incluem transplante alognico de medula ssea e terapia por reposio enzimtica (TRE) e, a terapia gnica com gene IDUA surge como uma alternativa promissora. A terapia na base de TRE tem corrigido parcialmente a doena, mas rgos vitais como o crebro no recebem o mesmo benefcio. Alm disso, o processo inconveniente, por que a terapia deve ser feita semanalmente. Num primeiro momento a terapia gnica atravs de vetores virais vem sendo utilizada como tratamento para MPS I em modelos animais, entretanto a facilidade e o menor custo da produo em larga escala, a formulao farmacolgica mais segura e a menor toxicidade tornam os vetores no-virais superiores aos virais para terapia gnica. Entretanto, os vetores no-virais levam a expresso transiente que um fator inconveniente para doenas hereditrias. A integrase phiC31 uma enzima codificada pelo fago de Streptomyces, sendo um membro das recombinases stio-especficas, capaz de integrar genes de maneira unidirecional em stios especficos do genoma humano denominados pseudo attPs. Estes stios tambm foram encontrados no genoma de camundongos, ratos e Drosophila. A terapia gnica com vetores plasmidiais expressando a integrase phiC31 tem sido utilizada em fase pr-clnica no tratamento de diversas doenas de origem monognica, como Distrofia Muscular de Duchene (DMD) e Epidermlise Bolhosa (EB), porm este sistema ainda no foi testado para tratar MPS I. Dois novos procedimentos sero elaborados e estudados quanto ao tempo e nvel de expresso gnica em modelo animal: terapia gnica in vivo direcionada ao msculo esqueltico e ex vivo com uso de clulas tronco de medula ssea. Objetivo: Desenvolver um sistema de expresso do gene L-Iduronidase (IDUA) duradoura com a integrase phiC31 para a terapia de Mucopolissacaridose do tipo I. Mtodos e Resultados: O vetor com GFP (green fluorescence protein) e com o stio de reconhecimento para integrase (pTA-GFP-attB) foi construdo e co-transfectado na proporo 1:1 com o plasmdio uP-INT (expressa integrase) ou p-INT (integrase sem promotor) em clulas HEK 293 para avaliar a durabilidade de expresso do GFP. Aps cerca de 30 dias de transfeco 10 % das clulas com phiC31 estavam com fluorescncia e nenhuma fluorescncia em controles. Para a anlise de durao da expresso do IDUA, foram construdos os seguintes vetores: uP-IDUA (expressa IDUA), uP-IDUA-attB (uP-IDUA com o stio de reconhecimento para integrase), uP-INT e p-INT. A expresso do IDUA aps 16 dias de transfeco em HEK293 foi (atividade da IDUA em nmol/mg/h): uP-IDUA (47,5) uP-IDUA-attB + uPINT (78,3), uP-IDUA-attB + p-INT (34,9) endgeno (1,4). A expresso do IDUA em linhagem murina NIH3T3 foi (2 e 16 dias): uP-IDUAattB + uP-INT (75,7; 8,0), uPIDUAattB + p-INT (3,8; 3,9), uP-IDUA (69,0; 3; 9), endgeno (0,6; 0,4).Em clulas-tronco mesenquimais de camundongos nocaute para IDUA (MSC-KO), a expresso do IDUA foi (2 e 16 dias): uP-IDUAattB + uP-INT (68,1; 0,3), uP-IDUAattB + p-INT (34,6; 0,1), uP-IDUA (88,2; 0,6), endgeno (0,1; 0,1). A partir desses dados podese sugerir uma possvel integrao do gene IDUA no genoma das clulas HEK 293, uma vez que o grupo uP-INT + uP-IDUA-attB, tem o dobro da atividade enzimtica do grupo controle uP-IDUA-attB + p-INT, e 60 X mais atividade da IDUA que as cplulas HEK 293 no transfectadas. Porm, observou-se queda da atividade da IDUA no 16 dia para todos os vetores nas linhagens murinas. Concluso: Nas clulas HEK tranfectadas com vetores up-IDUA-attB e up-INT a expresso de IDUA foi cerca de 60 vezes maior quando comparada ao controle endgeno, aps 16 dias. Em clulas NIH3T3 e MSC-KO houve expresso do gene IDUA inicialmente, porm a mesma no se manteve aps 16 dias. Estes resultados indicam que pode ter ocorrido um silenciamento gnico nas clulas murinas ou a no integrao do gene. Experimentos para elucidar a queda da expresso gnica esto em andamento. Aprovao no Comit de tica em Pesquisa No.: 1277/07 Participantes: Roberta Sessa Stilhano, Priscila Keiko Matsumoto, Flvia Helena da Silva, Vanessa Gonalves Pereira, Vnia DAlmeida, Sang Won Han

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Autores: Bolsista: Orientador:

Estudo in vitro de expresso do gene a-L-iduronidase humana utilizando o sistema Sleeping Beauty
Matsumoto, P.K.; Stilhano, R.S.; Silva, F.H.; Pereira, V.G; D'Almeida, V.; Han, S.W. Priscila Keiko Matsumoto - UNIFESP Sang Won Han - Biofsica / Fsico Qumica

Resumo:

Introduo Terica O Sleeping Beauty (SB) um sistema de transposio no-viral que expressa uma transposase capaz de integrar genes em seqncias especficas do genoma de clulas de mamferos permanentemente. A necessidade de expresso gnica permanente obtida por esse sistema de transposio parece ser ideal para tratamento de doenas genticas, como mucopolissadaridoses (MPS). A MPS tipo I uma das mais freqentes doenas de acmulo lisossomal, e se caracteriza por mutaes no gene que codifica a hidrolase lisossomal a-L-iduronidase (IDUA). Dessa forma ocorre um acmulo de heparam sulfato e dermatam sulfato em diversos tecidos e rgos, provocando feies faciais grosseiras, retardo mental, anomalias esquelticas, baixa estatura, excesso de GAGs na urina e outras manifestaes que caracterizam os diversos tipos de MPS. Tratamentos como a reposio enzimtica e transplante de medula ssea so realizados atualmente, porm com diversas restries nos efeitos benficos, alm de custo elevado e mortalidade, devido a reaes imunolgicas. A terapia gnica com o sistema SB poder trazer solues alternativas ou melhores que as atuais. Objetivos A Mucopolissacaridose tipo I uma doena de acmulo lisossomal sistmico devido ausncia de a-L-iduronidase (IDUA). Uso de um sistema de alta expresso e duradoura do gene IDUA tem potencialidade teraputica. Neste trabalho, a transposase SB (Sleeping Beauty) foi avaliada para expresso duradoura de IDUA in vitro em clulas HEK293, NIH3T3, HeLa e clulas-tronco mesenquimais de camundongos nocaute para IDUA (MSC-KO). Metodologia e Resultados O vetor com GFP (pT2BHGFP) foi construdo e co-transfectado em diferentes propores com o plasmdio pCMVSB11 ou pCMV-SBDDE (SB mutante) em clulas HEK 293 e NIH 3T3 para avaliar a durabilidade de expresso do GFP. Aps 24 dias de transfeco 5% das clulas com SB estavam com fluorescncia e nenhuma fluorescncia em controles. A integrao do vetor foi comprovada por PCR. A durao da expresso de IDUA, do vetor com IDUA (pT2BH-IDUA) e pCMV-SB11 ou pCMV-SBDDE em MSC-KO, NIH3T3, HEK293 e HeLa, foi analisada. Aps 2 e 9 dias de transfeco nas clulas HEK293 as seguintes dosagens de IDUA foram obtidas (em nmol/mg prot/h): uP-IDUA (83; 74), pT2BH-IDUA (82; 40), SB11+pT2BH-IDUA 5:1 (67; 8), pCMV-SBDDE+pT2BH-IDUA 5:1 (48; 2), SB11+pT2BH-IDUA 1:1 (58; 5), pCMV-SBDDE+pT2BH-IDUA 1:1 (33; 4), endgeno (2; 0,8). Com as clulas HeLa, dados semelhantes foram obtidos. Entretanto, nas clulas MSC-KO e NIH3T3 no houve expresso de IDUA pelo vetor pT2BH-IDUA na presena ou na ausncia dos plasmidios pCMV-SB11 ou pCMVSBDDE. O vetor de expresso constitutiva de IDUA uP-IDUA promoveu alta expresso de IDUA em todas as clulas testadas aqui. Discusso Obteve-se expresso em longo prazo de GFP e integrao cromossmica atravs da transposase SB. O plasmidio pT2BH-IDUA parece no expressar em MSC-KO e NIH3T3, que possuem origem murina, enquanto h expresso em linhagens humanas como HEK293 e HeLa. A presena da seqncia de vetores derivados de SB e/ou do promotor CMV com seqncia intrnica parece interferir a expresso do gene IDUA. Aprovao no Comit de tica em Pesquisa No.: 1278/07 Participantes: Priscila Keiko Matsumoto, Roberta Sessa Stilhano, Flvia Helena da Silva, Vanessa Gonalves Pereira, Vnia DAlmeida, Sang Won Han

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Estudo mutacional do gene da L-ferritina e expresso de glicosaminoglicanos em uma famlia brasileira com sndrome de hiperferritinemia hereditria com cataratas.
Gilio, F.; Mendes, A.; Martins, J.R.M.; Toma, L.; Nader, H.B.; Lopes, C.C. Felipe Gilio Andrade de Meneses - UNIFESP Carla Cristina Lopes de Azevedo - Cincias Biolgicas /

Resumo:

A sndrome de hiperferritinemia hereditria com cataratas (SHHC) uma patologia rara que, resumidamente, d-se atravs da manifestao precoce de cataratas nucleares bilaterais associada taxa elevada de ferritina no soro (1.000g/l) na ausncia de sobrecarga de ferro (GIRELLI et al., 1995). A SHHC foi primeiramente descrita no ano de 1995 em duas famlias italianas que apresentavam taxas normais de ferro no sangue, mas uma alta quantidade da subunidade L da ferritina. Essa desordem foi classificada como uma herana gentica autossmica e dominante (GIRELLI et al., 1995). A SHHC constantemente confundida com a hemocromatose hereditria (HH), que apresenta herana gentica recessiva e est associada mutao no gene HLA presente no cromossomo 6 (FEDER et al., 1996). caracterizada pelo aumento de ferritina no soro e acmulo de ferro nos tecidos. O objetivo deste projeto estudar o tipo de mutao do gene da L-ferritina e a expresso de glicosaminoglicanos (GAGs) em uma famlia com sndrome de hiperferritinemia hereditria com cataratas. E assim, ajudar no diagnstico correto desta sndrome, utilizando outras ferramentas visto que, aparentemente, esta a primeira famlia brasileira documentada. Primeiramente, todos os pacientes foram submetidos a testes laboratoriais para dosagem dos nveis de ferritina do soro. Para anlise dos GAGs urinrios, a urina desses pacientes foi dessalificada em cromatografia de gel filtrao em Sephadex G-25/ PD10 e submetidas a eletroforese em gel de agarose em tampo PDA e posteriormente quantificadas. Foi analisada, tambm, a quantidade de cido hialurncio (AH). Para isso, amostras de urina foram submetidas ao ensaio fluorimtrico no-competitivo ELISA-like. Este mtodo detecta de 0,2 a 500 g/l de AH presente nas amostras (MARTINS et al., 2003). Como esperado, a dosagem de ferritina srica foi maior em pacientes com catarata (1.000g/l). Os resultados obtidos at o momento mostraram que a expresso de GAGs e tambm do AH no est alterada nos pacientes que apresentam catarata e altos nveis de ferritina srica, caracterticas da SHHC. Devido ao pouco tempo, ainda no foi realizado o estudo mutacional do gene da L-ferritina. Aprovao no Comit de tica em Pesquisa No.: 1873.07 Participantes: Felipe Gilio Andrade de Meneses, Aline Mendes, Joo Roberto Maciel Martins, Leny Toma, Helena Bonciani Nader, Carla Cristina Lopes de Azevedo

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Estudos da Relao Estrutura-Atividade da Gomesina


Garcia, F.G.; Ambrsio, L.F.S.; Daffre, S.; Miranda, A. Felipe Gomes Garcia - UNIFESP Antonio de Miranda - Biofsica / Fsico Qumica

Resumo:

A gomesina (gm) um peptdeo antimicrobiano de 18 resduos de aminocidos que foi isolado da hemolinfa da aranha Aconthoscurria gomesiana e que apresenta a seguinte seqncia primaria: Pyr-Cys-Arg-Arg-Leu-Cys-Tyr-Lys-Gln-Arg-Cys-Val-Thr-Tyr-Cys-Arg-Gly-Arg-NH2. Os quatro resduos de cistena formam duas pontes de dissulfeto entre as posies 2-15 e 6-11 que estabilizam a conformao em hairpin, composta por duas folhas antiparalelas (entre os resduos de pGlu1 e da Tyr7 e entre a da Arg10 e da Arg16 com uma extenso C-terminal, Gly17 e Arg18) conectadas por uma dobra no cannica (entre os resduos Tyr7, Lys8, Gln9 e Arg10). A gm uma molcula anfiptica formada por uma face hidrofbica composta pelos resduos Leu5, Tyr7, Gln9, Arg10, Val12 e Tyr14, e trs regies hidroflicas contendo aminocidos positivamente carregados e que a conferem um carter catinico. A primeira regio localizada na poro N-terminal (Arg3 e Arg4), a segunda na poro C-terminal (Arg16 e Arg18) e a ultima na regio central da molcula (Lys8, Gln9 e Arg10). A gm mostrou-se efetiva contra o crescimento de bactrias Gram-positivas e Gram-negativas, contra fungos filamentosos e leveduras e tambm afeta a viabilidade das Leishmania amazonensis e Leishmania mayor, do Trypanosoma cruzi e dos Plasmodium falciparum e Plasmodium berghei. Mostrou-se eficiente tambm contra clulas tumorais. Apesar desta fantstica gama de atividades, a gm apresenta uma certa toxicidade contra eritrcitos humanos (40% de hemlise para uma concentrao de 100 M da gm). Dos vrios estudos entre a relao estrutura-atividade da gm realizados pelo nosso grupo observaram-se que: i) pelo menos uma das pontes de dissulfeto necessria para a manuteno atividade antimicrobiana, entretanto as duas pontes so imprescindveis para a estabilidade qumica da molcula quando em presena de plasma humano; ii) da serie Ala-scan (onde cada resduo de aminocido individualmente foi substitudo por alanina) observou-se que os resduos hidrofbicos: Leu5, Tyr7, Gln9, Arg10, Val12 e Tyr14 so essenciais para a atividade antimicrobiana; e iii) h uma direta correlao entre a atividade antimicrobiana e a hemoltica. No presente estudo, a importncia da disposio espacial das cadeias laterais dos resduos de aminocidos nas atividades biolgicas (antimicrobianas e hemoltica) foi avaliada. Para tanto, uma srie de anlogos da gm foi elaborada com modificaes pontuais, em que cada resduo de aminocido foi substitudo pelo respectivo ismero na forma D. Apenas os resduos de cistena no foram modificados, para que a estrutura espacial da molcula com um todo no se alterasse; alem claro do resduo de glicina. Os quatorze peptdeos foram sintetizados pelo mtodo da fase slida manual empregando-se a estratgia t-Boc e utilizando-se a metilbenzidrilamino-resina (MBHAR) com grau de substituio de 0,8 mmols/g de resina. Os peptdeos foram clivados da resina pela reao com HF e aps a extrao e diluio foram deixados em pH 6,8-7,0 por 72 horas, para que ocorresse a formao das pontes de dissulfeto intramoleculares. A ciclizao foi monitorada por cromatografia lquida de alta eficincia acoplada a um espectrmetro de massas (LC-MS). Aps purificao em cromatografia liquida de alta eficincia em colunas de fase reversa, os compostos foram caracterizados por anlise de aminocidos e por LC-MS. As alteraes conformacionais dos peptdeos foram avaliadas por dicrosmo circular em diferentes meios que mimetizaram a interao da membrana biolgica/peptdeo. As atividades antimicrobianas foram avaliadas por meio de um ensaio de inibio de crescimento em meio liquido com Micrococcus luteos, Candida Albicans e Escherichia coli. As atividades hemolticas foram determinadas em presena de eritrcitos humanos. Financiamento: CNPq, CAPES, FAPESP e FADA/UNIFESP. Aprovao no Comit de tica em Pesquisa No.: 1486/07 Participantes: Felipe Gomes Garcia, Lilian Faccioli de Sousa Ambrsio, Sirlei Daffre, Antonio de Miranda

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Autores: Bolsista: Orientador:

Expresso de enzimas lisossomais que atuam sobre glicosaminoglicanos em modelo experimental de diabetes mellitus
Peres, G.B.; Michelacci, Y.M.C.S. Giovani Bravin Peres - UNIFESP Yara M. C. da S. Michelacci - Bioqumica / Biologia Molecular

Resumo:

Proteoglicanos (PGs) so macromolculas formadas por um esqueleto protico, ao qual est covalentemente ligada pelo menos uma cadeia de glicosaminoglicano (GAG). GAGs so heteropolissacardeos lineares formados por unidades dissacardicas repetitivas em que um dos acares uma hexosamina (glucosamina ou galactosamina), e o outro um acar no-nitrogenado (galactose, cido glucurnico ou cido idurnico). Os GAGs so, ainda, sulfatados, em diferentes graus e posies. Os PGs so amplamente distribudos nos tecidos animais. Virtualmente todas as clulas de mamferos produzem PGs e os secretam para a matriz extracelular, inserem na membrana plasmtica e/ou armazenam em grnulos secretrios. Os PGs que esto na matriz extracelular, sejam eles residentes ou no, bem como os de superfcie celular, so internalizados por endocitose e degradados em lisossomos. Os fragmentos menores so completamente degradados pela ao seqencial de exoglicosidases e sulfatases. Uma pequena parte dos GAGs parcialmente degradados excretada na urina normal. Quando uma das enzimas lisossomais est deficiente, ocorrem as doenas de acmulo, como as mucopolissacaridoses, nas quais produtos de degradao parcial acumulam-se nos lisossomos e so excretados na urina. A mucopolissacaridria o principal sinal para diagnstico dessas doenas. Mais recentemente, observou-se que a excreo urinria de GAGs encontra-se alterada tambm em outras doenas, como diabetes mellitus, litase renal, osteoartrite e cncer. Como os PGs so importantes componentes da matriz extracelular e como alteraes morfolgicas parecem anteceder os sintomas de disfuno renal, estudos anteriores do nosso laboratrio demonstraram que, em modelo experimental de diabetes mellitus tipo I em ratos, ocorre acmulo de dermatam sulfato e de condroitim sulfato nos rins dos ratos diabticos. Este acmulo talvez seja devido s clulas mesangiais, uma vez que se demonstrou que clulas mesangiais isoladas de ratos diabticos sintetizam, in vitro, muito mais dermatam sulfato do que clulas de ratos normais. Entretanto, a excreo urinria de GAGs em ratos diabticos cerca de 1/5 dos valores normais (expresso em ug/24 h). Esta queda ocorreu nos primeiros 15 dias, logo aps a induo da diabetes e mesmo antes de se estabelecer franca albuminria. Com o objetivo de esclarecer este aparente paradoxo - aumento na excreo de protena e queda na excreo de GAG - foi estudada a excreo urinria de um polissacardeo sulfatado exgeno, que no metabolizado (pelo menos em larga escala) nos tecidos. Administrou-se, por via intraperitoneal, dextran sulfato (6 a 11,5 kDa) a ratos normais e diabticos, e demonstrou-se que o polissacardeo era filtrado no rim, com o limite de filtrao determinado pelo tamanho das molculas. Ratos diabticos excretavam menos dextran sulfato na urina do que ratos normais, sendo que o limite de tamanho molecular era inferior ao do rato normal. Por outro lado, 48 horas aps a administrao observouse acmulo das molculas maiores no fgado e no rim dos diabticos, sugerindo a participao de clulas no acmulo e na excreo renal destas molculas. Estes resultados tambm sugerem que albumina e polissacardeos sulfatados sigam diferentes caminhos para excreo renal, possivelmente envolvendo clulas glomerulares e/ou tubulares, talvez com comprometimento de enzimas lisossomais. O presente projeto tem por objetivo investigar a expresso de enzimas lisossomais que atuam sobre GAGs em fgado e rim de ratos diabticos, em comparao com ratos normais. Sero analisados os mRNAs das diferentes enzimas, as protenas expressas e as atividades enzimticas. Diabetes foi induzida em ratos Wistar machos por uma nica injeo de estreptozotocina (10 mg/kg de peso). Tanto a glicemia quanto a massa corprea foram medidas no dia da injeo da droga e, 72 horas depois, verificou-se novamente a glicemia. Os animais que ficaram diabticos estavam hiperglicmicos e no ganharam peso durante o perodo experimental (10 ou 30 dias). Os primeiros animais tratados com estreptozotocina contraram infeco no biotrio, possivelmente devido sua queda de imunidade. Foi necessrio, ento, reiniciar os experimentos com um novo grupo. Ao final de 10 ou 30 dias, foram coletados fragmentos de rim e de fgado em tubos de congelamento, a partir dos quais se realizar a anlise dos mRNAs das catepsinas B, C e D por meio de RTPCR. A atividade das enzimas ser medida utilizando-se substrato fluorognico, em presena ou ausncia de inibidores especficos. A anlise das sulfatases ser feita por incubao de extratos contendo essas enzimas com condroitim sulfato e heparam sulfato marcados com 35S-sulfato. Estes compostos esto sendo preparados e purificados por coluna de gel filtrao. Espera-se, com este projeto, obter dados que nos permitam melhor entendimento do metabolismo de polissacardeos sulfatados em diabetes mellitus, evitando-se e/ou corrigindo-se efeitos adversos da doena. Apoio financeiro: CNPq. Aprovao no Comit de tica em Pesquisa No.: 1614/05 Participantes: Giovani Bravin Peres, Yara M. C. da S. Michelacci

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Expresso de gp43 em culturas induzidas de isolados Paracoccidioides brasiliensis


Rodrigues, P.F.M.A.; Rocha, A.A.; Puccia, R. Paula Fernanda Morais Andrade Rodrigues - Mackenzie Rosana Puccia - Microbiologia, Imunologia e Parasitologia / Biologia Celular

Resumo:

Introduo: Gp43 a molcula melhor caracterizada do patgeno fngico Paracoccidioides brasiliensis. Essa glicoprotena o principal antgeno diagnstico da paracoccidioidomicose, contm epitopos para clulas T que so vacinais em modelo animal e stios de ligao para protenas da matriz extracelular. O gene PbGP43 foi o primeiro caracterizado no fungo. Recentemente no laboratrio um fragmento da regio 5 intergnica de ~2.000 bp do PbGP43 do isolado Pb339 foi seqenciado, evidenciando a existncia de inmeros elementos de transcrio NIT2 putativos. Resultados experimentais sugerem que pelo menos 4 deles so ligantes de elementos NIT2. Por outro lado, resultados de crescimento do P. brasiliensis em meios induzidos mostraram rpida represso no acmulo do mRNA do PbGP43 em meio definido suplementado com sulfato de amnio ou glutamina e, em contrapartida, uma rpida induo desse acmulo aps depleo do sal. Aparentemente um fenmeno semelhante ocorre pela adio e retirada de glicose, como observado em experimentos preliminares. Objetivos: verificar o resultado da modulao da expresso de gp43 com fontes de nitrognio e carbono em nvel de protena, atravs da deteco da molcula em sobrenadantes de culturas da fase leveduriforme de P. brasiliensis moduladas por fontes de carbono e nitrognio. Comparar os isolados Pb339 e Pb3. A estudante de IC trabalhou basicamente com a Pb3, a qual faz parte de uma espcie filogentica crptica do fungo. Metodologia: P. brasiliensis foi cultivado em meio definido F12/1.5% de glicose por 4 dias a 36oC, sob agitao, quando foi acrescido de 10 mM de sulfato de amnio e cultivado por 72h; as clulas foram precipitadas e cultivadas em meio fresco de F12/1.5% de glicose por outras 48h. Alquotas foram coletadas todos os dias. Os sobrenadantes de cultura foram analisados em gis de SDS-PAGE corados pela prata ou azul de Coomassie. Indues de 6 dias com sulfato de amnio e diferentes concentraes de glicose, ou com nitrato de potssio e glicerol tambm foram realizadas. Em paralelo, os sobrenadantes foram testados para atividade proteoltica sobre gp43 purificada. Os resultados foram avaliados em gis corados de SDS-PAGE. Resultados: somente foram considerados experimentos nos quais as culturas tinham clulas com viabilidade acima de 89%. Em todos os experimentos, o pH do sobrenadante variou entre 5,5 e 6,0. O nmero de clulas de culturas controles e induzidas foi semelhante no ponto zero (momento do acrscimo do sal). Infelizmente a gp43 no foi visvel em colorao pela prata em nenhum dos experimentos realizados com a Pb3, portanto no foi possvel associar a variao na quantidade de protena com a presena ou ausncia de fontes de nitrognio ou carbono. Em experimentos com a Pb339, para os quais a gp43 foi visvel, o resultado foi de difcil avaliao porque aparentemente houve a expresso de proteases reguladas pelo nitrognio que clivaram a glicoprotena no sobrenadante de cultura. Todos os sobrenadantes de cultura dos experimentos com Pb3 foram, desta maneira, testados para atividade proteoltica sobre a gp43, na presena ou ausncia de inibidores de proteases. Em eventuais amostras houve uma aparente clivagem da gp43, todavia essas observaes carecem de confirmao. Aprovao no Comit de tica em Pesquisa No.: 366/07 Participantes: Paula Fernanda Morais Andrade Rodrigues, Antonio A. Rocha, Rosana Puccia

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Expresso e localizao de inositolfosforilceramida em Leishmania.


Carvalho, J.U.; Tanaka, A.K.; Takahashi, A.H.S. Juliana Ubices de Carvalho - UNIFESP Anita Hilda Straus Takahashi - Bioqumica / Biologia Molecular

Resumo:

Leishmania so parasitas dimrficos causadores de infeco denominada leishmaniose. O tratamento dessa doena est baseado primariamente na quimioterapia com antimoniais. Com intuito de buscar novas drogas para o tratamento, nosso laboratrio tem avaliado a presena de molculas/vias metablicas especficas para este parasita, ausentes em mamferos. Assim, o inositolfosforilceramida (IPC), esfingolipdio predominante em Leishmania e ausente em mamferos, bem como a enzima responsvel pela sua sntese, IPC sintase, seriam possveis alvos para quimioterapia. Recentemente foi produzido, em nosso laboratrio, um anticorpo monoclonal (mAb) murino denominado LST-1 (IgM) reativo com IPC de formas promastigotas de Leishmania (Leishmania) amazonensis. O objetivo deste trabalho verificar a localizao celular do IPC, em promastigotas de L. (L.) amazonensis, bem como, determinar o papel biolgico desta molcula no parasita. Para tanto, o anticorpo LST-1 foi purificado de ascite murino, por cromatografias em colunas de BioGel A0.5M e BioGel A5M. A pureza do anticorpo foi determinada por eletroforese em gel de poliacrilamida. Em seguida, o anticorpo purificado foi marcado com fluorescena isotiocianato (FITC) e utilizado em ensaios de imunofluorescncia direta. Formas promastigotas de L. (L.) amazonensis foram incubadas, concomitantemente, com o mAb LST-1 conjugado FITC (que reconhece IPC) e iodeto de propdeo (que identifica clulas no viveis, ligando-se ao DNA) e observadas por microscopia de fluorescncia. Promastigotas fixados com formaldedo 4% apresentam forte marcao com o anticorpo LST-1 em todo o parasita. Por outro lado, quando se incuba o mAb LST-1 com formas promastigotas vivas, isto , no fixadas, no se detecta fluorescncia na grande maioria dos parasitas. Nestas condies observou-se que uma pequena populao de parasitas, com forma arredondada, apresentou forte fluorescncia com o mAb LST-1. Cabe salientar que estes parasitas arredondados, reconhecidos pelo mAb LST-1, no apresentaram marcao com iodeto de propdeo, sugerindo que a marcao com LST-1 no decorrente da presena de parasitas no viavis nas culturas. Estes resultados sugerem que o IPC est localizado em formas promastigotas alongadas na poro interna da membrana plasmtica, uma vez que o anticorpo no reativo com as formas vivas. Estudos sero conduzidos visando caracterizar a populao de parasitas vivos, reconhecidos pelo mAb LST-1, que apresentaria o IPC na poro externa da membrana plasmtica, bem como se nestes parasitas haveria co-localizao de IPC com fosfatidil-serina. Financiamentos: FAPESP, CAPES e CNPq Aprovao no Comit de tica em Pesquisa No.: 0017/06 Participantes: Juliana U. de Carvalho, Amria Kaori Tanaka, Anita Hilda Straus Takahashi

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EXTRAO E PURIFICAO DE GLICOSAMINOGLICANOS DE OSSO DE RATO DESMINERALIZADO


Vasselo, K.P.; Reginato, R.D.; Kobayashi, E.Y.; Katchburian, E.; Nader, H.B.; Toma, L.; Merli, L.A.S.; Faloppa, F. Keila Priscila Vasselo - UNICSUL Leny Toma - Bioqumica / Biologia Molecular

Resumo:

O osso um tecido especializado, que resiste a foras mecnicas devido a uma combinao estrutural ideal dos seus componentes orgnicos e inorgnicos. Colgeno tipo I, proteoglicanos, fsforo e sialoprotenas so os principais componentes da matriz orgnica, enquanto o fosfato de clcio e cristais de hidroxiapatita so responsveis pela mineralizao da matriz. O objetivo do presente trabalho foi estabelecer procedimentos metodolgicos de extrao e purificao de glicosaminoglicanos (GAGs) e proteoglicanos da matriz mineral ssea de fmur de ratos. Vrios mtodos foram testados, incluindo os descritos anteriormente na literatura. De acordo com estes mtodos de isolamento e purificao de GAGs uma seqncia dissociativa de extrao foi empregada, com agentes desnaturantes como cloreto de guanidina, alm de EDTA como agente desmineralizante. Assim, a extrao emprega homogeinizao do tecido sseo em tampo Tris-HCl 0,05M pH7.4, em presena de cloreto de guanidina 4M e EDTA 0,25M. A seguir, a soluo centrifugada e o sobrenadante submetido a protelise, seguido de precipitao com TCA 9%. Com este procedimento um baixo rendimento de glicosaminoglicanos foi obtido de fmur de rato. Uma das dificuldades nesse mtodo foi liberar o proteoglicano de sua associao com o mineral sseo. Portanto, para tentar resolver esse problema, ossos femorais foram inicialmente fixados com formaldedo e testado em dois protocolos diferentes de desmineralizao, utilizando EDTA (EDTA 7% em tampo fosfato de sdio 0.2M, pH 7.2, com paraformaldedo 4%, em microondas) e cido frmico (cido frmico 25% pH2.0, temperatura ambiente durante 30 h), ambos associados a uma subseqente digesto com papana . Surpreendentemente, o maior rendimento de extrao de condroitim sulfato resultou do emprego destes dois ltimos mtodos, comparando-se com o da literatura. Estes mtodos permitiro avaliar as alteraes deste GAG em ossos neoformados, depois de leso, e aplicao de radiao laser de baixa intensidade para fins de cicatrizao. Aprovao no Comit de tica em Pesquisa No.: 0740-06 Participantes: Keila Priscila Vasselo, Rejane Daniele Reginato, Elsa Yoko Kobayashi, Eduardo Katchburian, Helena Bonciani Nader, Leny Toma, Luiz Antonio de Souza Merli, Flavio Faloppa

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Fosforilao do AKT nuclaer


Atique, R.; L'Abbate, C.; Machado, J.Jr; Miranda, M.P. Mayara Passos Miranda - UNIFESP Joel Machado Junior - Cincias Biolgicas /

Resumo:

A resistncia de clulas tumorais morte celular por perda de adeso (anoikis) uma das principais caractersticas celulares que contribuem para a progresso e metstase tumoral. Resultados anteriores do nosso laboratrio mostraram que clulas de melanoma murino Tm-1 e Tm-5 apresentam resistncia ao anoikis mediada pela quinase AKT, uma vez que a inibio da atividade desta quinase tornou as clulas de melanoma susceptveis ao anoikis. Alm disso, a resistncia ao anoikis mediada por AKT envolveu a fosforilao de membros da famlia de fatores de transcrio FOXO. Neste trabalho investigamos a localizao celular de AKT em clulas de melanoma submetidas ao cultivo na ausncia de adeso celular, uma vez que a atuao de AKT no ncleo tem sido envolvida com a inibio da apoptose. Anlises por Western-blot de extratos nucleares e citoplasmticos de clulas de melanoma mostraram que h um acmulo de AKT na sua forma no fosforilada no citoplasma destas clulas durante o cultivo em suspenso por 24 e 48h. Entretanto, por imunofluorescncia observamos que as clulas de melanoma submetidas ao mesmo tratamento descrito acima mostraram um acmulo de AKT fosforilado no ncleo destas clulas, comparado com clulas cultivadas em condies de adeso. Desta forma nossos resultados mostraram que o impedimento da adeso celular contribui para localizao de AKT ativado no ncleo, sugerindo que a localizao nuclear de AKT dependente do seu status de fosforilao e adeso celular. Participantes: , , Joel Machado Junior, Mayara Passos Miranda

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Identificao de Novos Genes Regulados por T3 Envolvidos na Termognese Metablica: Ampliando o Gasto de Energia
Dorsa, K.K.; Santos, M.V.; Silva, M.R.D. Karina Kores Dorsa - UNIFESP Magnus R. Dias da Silva - Bioqumica / Bioqumica

Resumo:

Introduo: Calor um subproduto da transformao da energia qumica liberada lentamente durante a oxidao dos alimentos, sendo armazenada temporariamente na forma de ATP. Essa aparente ineficincia termodinmica mantem o indivduo aquecido, otimizando o funcionamento das clulas, tecidos e sistemas (Brand et al., 1999). A termognese obrigatria deriva da taxa de metabolismo basal (TMB) e a facultativa deriva do calor produzido alm da BMR. Esta ltima pode ser induzida por adaptao exposio ao frio, dieta hipercalrica e exerccio fsico (Silva, 2006). largamente conhecido que os hormnios tiroidianos (HT) so mediadores essenciais da termognese obrigatria e tambm do desencadeamento e da manuteno da termognese facultativa, em especial atravs do controle transcricional das protenas desacopladoras (UCPs) (Zhang and Lazar, 2000). Estas protenas otimizam a ineficincia termodinmica mitocondrial, ou seja, desvia o gradiente de prtons da gerao de ATP para gerao de calor. Objetivos: Apesar do reconhecido papel dos HT sobre a via clssica de produo de calor (UCP), muito pouco se conhece acerca do papel do T3 sobre outras protenas das vias metablicas de oxidao de nutrientes (gerao de ATP ao nvel de substrato), nesse sentido, objetivamos identificar enzimas envolvidas nas vias da gliclise, glicogenlise, liplise, ciclo de Krebs, cadeia respiratria e fosforilao oxidativa possivelmente reguladas por T3. Material & Mtodos: utilizamos a anlise in silico dos promotores de 57 genes metablicos para identificar elementos cis (TREs, Thyroid Response Elements) de regulao gnica responsivos ao T3, utilizando como referncia de significncia estatstica o promotor do gene do TSH e SERCA2. Foram selecionados somente as regies promotoras dos genes em teste com estudo de validao in vitro prvio. Resultados: Dentre as enzimas analisadas, 21/57 apresentavam stios de ligao ao T3R. Em ordem decrescente, as enzimas que alcanaram score acima de 0,80 (melhor valor preditivo: 1) foram: Citrato Sintase, Fosfoglicose Isomerase, Adenina Nucleotdeo Translocase, Succinato Desidrogenase, UCP3, UCP2, Fosfoglicerato Mutase, Gliceraldedo 3 Fosfato Desidrogenase, UCP4, Glicoquinase, Malato Desidrogenase, Citocromo b e Lactato Desidrogenase. Alm disso, 20% dessas enzimas ainda no foram descritas na literatura como reguladas por T3. Concluso: Nossos resultados apontam para novos genes regulados por T3, e por conseguinte, possivelmente adjuvantes ao processo de termognese metablica. Participantes: Karina Kores Dorsa, Michelle Venncio dos Santos, Magnus Regios Dias da Silva

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Influncia da atividade da enzima conversora de angiotensina 1 (ECA) plasmtica no efeito de drogas antihipertensivas
Silva, R.M.; Oliveira, S.S.; Hayashi, M.; Valero-Lapchik, V.B.; Souccar, C.; Lapa, A.J.; Lima-Landman, M.T.R. Regiane Marinho da Silva - UNIBAN Maria Teresa Riggio de Lima-Landman - Farmacologia / Farmacologia

Resumo:

Introduo: A hipertenso uma patologia prevalente entre os seres humanos de difcil controle uma vez que tem origem multifatorial e polignica. Um dos sistemas diretamente envolvido no controle da presso arterial o sistema renina-angiotensina-aldosterona. Drogas que atuam neste sistema so ferramentas teraputicas importantes na hipertenso arterial. Recentemente, foi proposto que a atividade da ECA plasmtica seria um indicador mais importante do que a genotipagem desta enzima na previso da resposta de pacientes hipertensos aos inibidores da ECA (Danser et al., Pharmacol.&Therapeutics 113: 607, 2007). Estudos anteriores demonstraram que ratos Wistar machos (M) e fmeas (F) apresentam nveis diferentes de atividade de ECA plasmtica, possibilitando sua diviso em trs fentipos diferentes: ratos com atividade ECA alta (ECAa- M: 43,0 3,7; F: 42,2 5,2 nmol/ml/min),com atividade ECA intermediria (ECAi- M: 36,7 1,6; F: 36,3 1,7 nmol/ml/min) e com atividade ECA baixa (ECAb- M: 30,7 3,2; F: 28,1 3,0 nmol/ml/min). O presente trabalho visa: 1) testar a sensibilidade de ratos machos com diferentes fentipos s drogas antihipertensivas: captopril (CAP) e prazosin (PRAZ) e 2) determinar a atividade da ECA plasmtica destes animais durante os tratamentos. Mtodos: A atividade enzimtica foi determinada no plasma de 40 ratos machos adultos, normotensos. Amostras de sangue (500 uL) foram coletadas em tubos heparinizados, por puno da artria caudal, a intervalo de duas semanas. O sangue foi centrifugado (2500 rpm, 4C, 10 min), o plasma foi separado e armazenado a 20C. A atividade da ECA foi determinada pelo mtodo da fluorescncia apagada (Carmona et al., Nat. Protoc. 2006;1(4):1971-6). Inicialmente, os animais, divididos de acordo com a atividade da ECA, foram tratados por 4 semanas com gua (5 mL/kg/dia, p.o). Durante este perodo de adaptao ao tratamento, a presso arterial dos animais (PA) foi monitorada semanalmente por mtodo plestimogrfico no invasivo, medida na cauda dos animais. Os animais foram tratados com CAP (12.5, 25, e 50 mg/kg/bid, p.o.) durante 36 dias, aps os quais passaram a ser tratados com gua novamente. Depois de estabilizada a presso arterial, estes mesmos grupos de animais passaram a receber PRAZ (1,2 e 3 mg/kg/dia, p.o.). Um grupo controle composto de animais com ECAi foi tratado com gua (5 mL/kg/dia p.o) durante todos os tratamentos. A atividade da ECA foi expressa como mdia desvio padro da mdia (nmol/min/mL). A PA foi expressa em mm Hg e comparada pelo teste t de Student (p<0,05). Todos os protocolos utilizados foram avaliados e aprovados pelo Comit de tica em Pesquisa da UNIFESP (CEP 0186/06). Resultados: A atividade da ECA plasmtica foi 53,1 4,1; 42,0 4,1 e 27 6,3 nmol/min/mL) para os grupos com ECAa, ECAi e ECAb, respectivamente. A PA dos ratos no foi diferente entre os 3 grupos de ECA (C=124 3,6). O tratamento com CAP (12,5 mg/kg/bid, por 9 dias) diminuiu a PA a 116 3 somente no grupo ECAb. O aumento da dose para 25 mg/kg/bid, causou uma diminuio maior da PA no grupo ECAb (108 4), com um incio de diminuio tambm nos grupos ECAa (114 5) e ECAi (112 3). CAP 50 mg/kg/bid reduziu a PA ao mesmo nvel em todos os grupos de ECA (ECAb = 103 5 mm Hg). Aps 1 semana da interrupo do tratamento com CAP, a PA retornou a nveis controle em todos os grupos experimentais (ECAi = 122 0,8 mm Hg). O tratamento oral destes mesmos animais com PRAZ (1 mg/kg/dia, 2 mg/kg/dia e 3 mg/kg/dia) reduziu a PA controle (C= 120 0,5 mm Hg) de forma dose-dependente e independente do nvel de ECA do grupo experimental, atingindo, aps 6 semanas de tratamento, os seguintes valores: ECAa= 107 1 mm Hg; ECAi = 107 1,2 mm Hg e ECAb = 1050,9 mm Hg. A atividade da ECA plasmtica determinada semanalmente nestes animais aps 30 dias de tratamento quando a amostra de sangue foi coletada 1 h aps a administrao foi de 54% (24 6,6 nmol/min/mL); 61% (16 4,7 nmol/min/mL) e 65% (9,2 4,5 nmol/min/mL) menor nos animais com ECAa, ECAi e ECAb, respectivamente. O tratamento com PRAZ no alterou a ECA plasmtica em nenhum dos grupos experimentais avaliados. Discusso: Estes resultados indicam que a sensibilidade dos animais ao CAP, inibidor da ECA, varia de acordo com o fentipo enzimtico dos animais variando na seguinte ordem: ECAb > ECAi > ECA. A sensibilidade ao PRAZ, um bloqueador -adrenrgico, no foi afetada pelo fentipo enzimtico do animal. Este dado refora a hiptese de que o conhecimento dos nveis plasmticos de ECA pode antever o prognstico no tratamento antihipertensivo com inibidores de ECA. Apoio finaceiro: CNPq, FAPESP, CBA, FADA-UNIFESP Aprovao no Comit de tica em Pesquisa No.: 0186/06 Participantes: Regiane Marinho da Silva, Sandrea Sales de Oliveira, Mrian Hayachi, Valderez Bastos Valero-Lapchik, Caden Souccar, Antonio Jos Lapa, Maria Teresa Riggio de Lima-Landman

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Influncia da idade sobre a monoamino oxidase (MAO) no sistema nervoso perifrico de ratos
Zanuto, J.G.C.; Jurkiewicz, A.; Jurkiewicz, N.H.; Mendes, C.S. Joo Gabriel Carnietto Zanuto - UNIFESP Aron Jurkiewicz - Farmacologia / Farmacologia

Resumo:

Introduo: O presente estudo tem por objetivo verificar os possveis efeitos do tratamento agudo e semi-agudo in vivo com inibidores da MAO (pargilina e iproniazida), que atuariam como perturbadores sobre a reatividade farmacolgica da musculatura lisa de ratos. Para tal utilizamos o ducto deferente (DD) de rato. Mtodos: Estudamos a contrao muscular induzida in vitro por drogas adrenrgicas (noradrenalina), na presena e na ausncia de antagonistas (prazosin, fentolamina, WB4101). Atravs destas curvas, foram medidos a potencializao (DR) da curva de noradrenalina em relaco a uma curva padro, aps bloqueio de fatores (captao neuronal e extraneuronal e adrenoceptores ) que poderiam interferir no resultado. Alm disso, tambm analisamos parmetros de afinidade como pA2 (para antagonistas) e pD2 (para agonistas), alem do efeito contrtil produzido pelo agonista indireto tiramina. Utilizamos ratos de 90 e 150 dias, que foram tratados por via intraperitonial com doses que variam de acordo com o tratamento: (1) Tratamento agudo, com animais tratados por 1 dia com uma dose de 100mg/kg de pargilina (IMAO B) ou iproniazida (IMAO A). (2) Tratamento semi-agudo de animais tratados por 3 dias com dose de 20mg/kg/dia de pargilina (IMAO B) ou iproniazida (IMAO A). Todos os grupos controle foram tratados com soluo salina. Os animais foram sacrificados duas horas aps a ltima dose. Resultados: O tratamento agudo (1) com iproniazida revelou diferenas estatisticamente significantes nos parmetros pA2 (controle: 7.78 0.11 e tratado: 8.20 0.13), pD2 (controle:6.31 0.11 e tratado: 7.08 0.04), DR (controle:2.28 0.14 e tratado: 1.48 0.08). O tratamento agudo (1) com pargilina tambm apresentou diferenas significantes pD2 (controle: 6.11 0.11 e tratado: 8.00 0.30) e DR (controle: 1.90 0.27 e tratado: valores no detectados).O tratamento semi-agudo (2) com pargilina no revelou diferenas significantes entre os grupos tratado e controle nos parmetros pA2 e DR. Somente a tiramina apresentou diferenas entre os dois grupos (controle: 54,13,02 e tratado: 63,832,39, p < 0,05). Ainda no tratamento semi-agudo (2), com iproniazida, houve diferenas para a contrao por tiramina (controle 45,33,38mm, tratado 60,72,54mm, p < 0,05), e pD2 de noradrenalina (controle 6,430,20, tratado 7,490,22, p< 0,05). Dentre os antagonistas competitivos (fentolamina, prazosin e WB4101) a fentolamina apresentou diferenas significativas de pA2 (controle 8,050,03, tratado 7,650,11, p< 0,05 ) e DR (controle 1,980,26, tratado 0,730,38, p<0,05). O prazosim apresentou diferenas apenas no DR (controle 1,850,44, tratado 0,400,10, p< 0,05). Os animais de 5 meses que foram submetidos ao tratamento agudo com iproniazida apresentaram resultados semelhantes aos animais de 3 meses submetidos ao mesmo tratamento. Discusso: Um fato interessante que os padres de afinidade pA2 e pD2 apresentaram resultados opostos, ao contrrio do esperado. Esperava-se que tanto o pA2 como o pD2 aumentassem, porem em alguns casos o pA2 dos animais controle foram maiores que dos tratados. Esse fato ser investigado na continuao do trabalho. A tiramina apresentou diferenas estatsticas em todos os tratamentos semi-agudos. Esse resultado indica a possibilidade de que a inibio de MAO resultou em uma maior quantidade de neurotransmissores nos terminais neuronais. Aprovao no Comit de tica em Pesquisa No.: 0400/08 Participantes: Joo Gabriel Carnietto Zanuto, Aron Jurkiewicz, Neide H. Jurkiewicz, Cairo Mendes Sobrinho

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Influncia da inervao motora na atividade da adenilil ciclase de msculo esqueltico


Bergantin, L.B.; Andrade-Lopes, A.L.P.; Chiavegatti, T.; Rodrigues, F.S.M.; Godinho, R.O. Leandro Bueno Bergantin - UNIFESP Rosely Oliveira Godinho - Farmacologia / Farmacologia Celular

Resumo:

O msculo esqueltico de mamferos formado por fibras musculares, inervadas por um nico axnio de neurnio motor. Alm do neurotransmissor acetilcolina (ACh), outras substncias liberadas pelo neurnio motor modulam a fisiologia muscular, como o peptdeo relacionado ao gene da calcitonina (CGRP), controlando desde a expresso de protenas sinpticas at a prpria contrao muscular. Alm disso, fatores extra-neuronais provenientes da circulao sistmica, como as catecolaminas, modulam a sntese protica e protelise muscular, propiciando a manuteno da massa do msculo. Quando o CGRP ou as catecolaminas interagem com seus respectivos receptores de membrana, promovem a ativao sucessiva da protena G estimulatria (Gs) e da enzima adenilil ciclase (AC) aumentando a sntese de AMPc. O AMPc exerce suas aes at a sua degradao por fosfodiesterases. AC e o AMPc so, portanto, fatores limitantes nessa cascata de sinalizao. Por outro lado, a desnervao de msculo esqueltico causa atrofia muscular gradativa, a reduo do nmero de receptores nicotnicos (nAChRs) e da enzima acetilcolinesterase (AChE) na juno neuromuscular. A retirada da inervao priva o msculo de fatores trficos liberados pelo neurnio motor, inclusive dos que ativam a via da protena Gs. Apesar de se saber que a desnervao reduz nAChRs e AChE na juno neuromuscular, ainda obscuro se a inervao motora tambm controla a expresso de protenas da cascata de sinalizao do AMPc . Desta forma, o objetivo deste trabalho foi avaliar o efeito da desnervao na cintica de AC do msculo esqueltico. Para tanto, ratos Wistar machos com 3 meses de idade foram submetidos desnervao muscular atravs da seco do nervo tibial. Aps 14 dias da cirurgia, os msculos sleo, extensor longo dos dedos (EDL) e gastrocnmio foram retirados. O msculo sleo sofreu atrofia de 47% em relao ao controle (106,1 10,9 mg, n=3-5 ratos), enquanto que os msculos EDL e gastrocnmio sofreram atrofia de 38% e 34 % em relao aos respectivos controles (120,2 17,3 mg e 811,4 43,5 mg, n=3-5 ratos). A atividade de AChE foi determinada por mtodo colorimtrico (405 nm) utilizando como substrato a acetiltiocolina . A desnervao dos msculos EDL, sleo e gastrocnmio reduziu em 79, 50 e 75% a atividade da AChE em relao aos respectivos controles (24,3 3,3; 13,0 0,9 e 61,41 2,8 UA/min/mg tecido, n=3), confirmando a efetividade da desnervao cirrgica. Para os ensaios de cintica da AC, msculos EDL (n=3) foram homogeneizados em tampo Tris 12,5 mM, pH 7,4, contendo EDTA 1 mM; PMSF 1 mM e pepstatina A 1 uM. A cintica da AC foi realizada incubando membranas musculares (10 ug) com o agonista de adrenoceptores B isoproterenol (10 uM) em Tris 12,5 mM, pH 7,4 contendo GTP 1 uM, IBMX 1 mM, MgCl2 10 mM e BSA 1 mg/ml, na presena de ATP (0 a 3,2 mM) por 30 min a 30 C e o AMPc produzido foi quantificado por mtodo radiomtrico. A cintica obtida ajustou-se a uma hiprbole retangular (r2=0,91), permitindo a obteno dos parmetros cinticos Vmx (5,05 0,4 pmol de AMPc/h/ug protena) e Km (0,15 0,05 mM), validando ento o ensaio de preparao de membrana para o estudo da cintica de AC. Para avaliarmos o efeito da desnervao na ativao de AC, os ensaios de cintica enzimtica foram realizados utilizando forscolina 10 uM (ativador direto da AC) em msculos EDL submetidos ou no desnervao cirrgica (n=3). Nos msculos controles, a cintica de ativao da enzima ajustou-se a uma hiprbole retangular (r2=0,89). Tanto Vmx (4,60,79 pmol de AMPc/h/ug protena) como Km (0,50,16 mM) da AC do EDL no foram modificados pela desnervao (Vmax = 3,50,9; Km = 0,480,24). Os resultados mostram que a desnervao por 14 dias no altera os parmetros cinticos da AC do msculo EDL, indicando a adaptao da via de sinalizao ausncia do estmulo trfico neural. Experimentos adicionais devem ser realizados para determinar o efeito de perodos mais prolongados de desnervao/desuso tanto na AC de msculos de contrao fsica (EDL) como tnica (Sleo). CNEN AP 0706 Financiamento: FAPESP/CNPQ Aprovao no Comit de tica em Pesquisa No.: 0057/08 Participantes: Leandro Bueno Bergantin, Ana Luiza Andrade de Paula Lopes, Tiago Chiavegatti, Francisco Sandro Menezes Rodrigues, Rosely Oliveira Godinho

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Influncia da Sensibilizao Comportamental ao Efeito Estimulante do Etanol na Resposta a Agonista e Antagonista dos Receptores Dopaminrgicos D2
Abraho, K.P.; Souza, K.L.; Souza-Formigoni, M.L.O.S. Karen de Lima Souza - UNIFESP Maria Lucia Oliveira de Souza Formigoni - Psicobiologia / Medicina e Sociologia do Abuso de Drogas

Resumo:

A sensibilizao comportamental, caracterizada pelo aumento progressivo do efeito estimulante aps repetida administrao das drogas de abuso, pode induzir neuroadaptaes que alteram de maneira duradoura o funcionamento dos sistemas neurais de reforo e recompensa. As drogas de abuso compartilham a propriedade comum de aumentar a disponibilidade sinptica de dopamina no ncleo accumbens, estrutura central das vias de reforo e recompensa. Assim como em relao sndrome de dependncia, existe grande variabilidade quanto ao desenvolvimento da sensibilizao comportamental ao efeito estimulante do etanol. Fatias de crebro de animais sensibilizados apresentam maiores nveis de ligao a receptores dopaminrgicos D2 do que as de animais no-sensibilizados. O objetivo geral desse trabalho foi avaliar se as diferenas em receptores dopaminrgicos entre animais sensibilizados e no sensibilizados ao efeito estimulante do etanol podem se manifestar nas respostas a uma droga agonista ou a uma droga antagonista do sistema dopaminrgico, afetando os comportamentos de estereotipia e catatonia. Todos os experimentos foram realizados com camundongos Suos Albinos machos com trs meses de idade. Inicialmente foram feitas duas curvas dose-resposta: a primeira para a apomorfina (agonista D2) avaliando o movimento estereotipado, quantificado usando uma escala de escores; a segunda para o haloperidol (antagonista D2) tendo sido avaliado o comportamento catatnico por rigidez muscular em barra suspensa. Dessas curvas foram selecionadas as doses de 10mg/kg de apomorfina e 1mg/kg de haloperidol para o experimento crnico. Nos mesmos animais utilizados no experimento de curva dose-resposta, foi avaliada a interao das diferentes doses de apomorfina e haloperidol com 2,2g/kg de etanol (administrao intra-peritoneal). Foi observado que a administrao aguda de etanol aumentou a catalepsia induzida pelo haloperidol e reduziu a estereotipia induzida pela apomorfina. Considerando que o etanol provoca aumento dos nveis de dopamina, o aumento da catalepsia pode estar relacionado ao da dopamina em receptores dopaminrgicos pr-sinpticos. No entanto, o etanol agudamente causa incoordenao motora o que pode ter contribudo para diminuir os nveis de estereotipia. Um novo grupo de camundongos foi tratado durante 14 dias com 2,2 g/kg de etanol via intra-peritoneal ou salina, sendo avaliados quanto a sua locomoo a cada sete dias. De acordo com a resposta locomotora apresentada no ltimo dia de tratamento, os animais tratados com etanol foram classificados como sensibilizados ou no sensibilizados. Parte dos animais foi submetida ao teste de estereotipia com apomorfina e outra parte ao teste de catalepsia com haloperidol. Foi observado que o tempo de catatonia induzida por haloperidol no diferiu significativamente entre os grupos salina, sensibilizados e no sensibilizados. Isso pode ter ocorrido pelo fato de a dose de haloperidol ter sido suficiente para induzir catalepsia de maneira homognea entre os grupos Por outro lado, a estereotipia induzida por apomorfina em animais no sensibilizados foi significativamente menor que nos animais controle. Os nveis de estereotipia dos animais sensibilizados no diferiram dos grupos no sensibilizados e salina. Aprovao no Comit de tica em Pesquisa No.: 1200/07 Participantes: Karina Possa Abraho, Karen de Lima Souza, Maria Lucia Oliveira de Souza Formigoni

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Interao das protenas do sistema calicrena-cininas plasmtico com o endotlio vascular


Motta, G.; Veronez, L.C. Camila Lopes Veronez - UNIFESP Guacyara da Motta - Bioqumica / Bioqumica

Resumo:

O sistema calicrena-cinina plasmtico humano composto basicamente pelo precursor inativo da calicrena plasmtica (huPK), a pr-calicrena (PK), e pelo cininognio de alta massa molecular (HK), responsveis pela liberao do nonapeptdeo bradicinina (BK). Este sistema est relacionado biologia vascular, regula a presso sangunea local atravs da liberao de BK e interage com os sistemas de coagulao, fibrinlise, complemento e renina-angiotensina. A PK e o HK circulam no plasma complexados no covalentemente, sendo a PK convertida em huPK quando o complexo interage com o endotlio. A hidrlise do HK pela huPK libera o mediador vasoativo e pr-inflamatrio BK, e a hidrlise do HK ntegro tem importncia fundamental para que seus fragmentos exeram atividades. O HK clivado por diversas proteases como as calicrenas, o fator XIIa, o fator XIa, a plasmina e etc. Nosso laboratrio desenvolve estudos sobre a interao das protenas do sistema calicrena-cinina plasmtico humano com diferentes tipos celulares, sendo o objetivo deste trabalho avaliar a degradao do HK e da PK na interao com uma linhagem de clulas endoteliais obtidas a partir de aorta de coelhos (RAECs), analisando possveis alteraes estruturais das molculas. Em nossos experimentos foram preparados a partir das RAECs um lisado celular em tampo acetato de sdio 50 mM pH 5,5 e outro em tampo Hepes-Tyrode pH 7,35. A quantidade de protena presente nas preparaes de lisado foi determinada pelo mtodo de Bradford. Nos estudos de degradao do HK ou PK pelos dois diferentes lisados, as incubaes foram realizadas em diferentes tempos, a 37C, e na ausncia ou presena de inibidores de proteases. O perfil de alterao das protenas foi analisado aps separao por eletroforese em gel de poliacrilamida na presena de SDS e agente redutor, com deteco utilizando anticorpo policlonal anti-HK e revelao pela tcnica de quimioluminescncia. No foi observada a alterao na estrutura da PK (90 kDa) aps incubao com as duas diferentes preparaes de lisado. O HK ntegro (140 kDa) incubado com lisado de RAECs em tampo pH 7,35 no apresentou qualquer alterao de estrutura, indicando assim que neste valor de pH no h hidrlise. Todavia, quando o HK foi incubado com lisado preparado em pH 5,5, sua degradao foi observada com formao de um fragmento de aproximadamente 75 kDa, indicando a hidrlise da cadeia nica correspondente ao HK ntegro. Este perfil de degradao difere do perfil obtido quando o HK clivado pela huPK, na qual so gerados fragmentos de 75 kDa e 56 kDa, correspondentes respectivamente s cadeias pesada e leve do HK. Na tentativa de caracterizar a possvel enzima responsvel pela degradao do HK observada em pH 5,5 o lisado foi incubado com o HK na presena de diversos inibidores de proteases, dentre eles a antipana, o PMSF, o E-64, a o-phe e a aprotinina, e no foi observada inibio da degradao por esses inibidores. Ainda, conhecendo-se a atividade inibitria do BbKI e do EcTI, protenas extradas de sementes das leguminosas Bauhinia bauhinioides e Enterolobium contortisiliquum, respectivamente, sobre diferentes classes de proteases, estas protenas tambm foram empregadas e os resultados preliminares indicam uma inibio da degradao do HK pelo EcTI. Este trabalho abre perspectivas para a purificao de proteases responsveis pela degradao do HK e anlise de possveis stios de clivagem do HK por proteases celulares. A anlise dos fragmentos obtidos, correspondendo aos diferentes domnios que constituem o HK, permitir o entendimento da interao celular e do caminho seguido pelo HK dentro da clula. Aprovao no Comit de tica em Pesquisa No.: 1661/05 Participantes: Guacyara da Motta, Camila Lopes Veronez

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Intervenes capazes de prolongar a sobrevida de fibroblastos e macrfagos murinos primrios submetidos a enucleao.
Paladino, F.V.; Rabinovitch, M. Fernanda Vieira Paladino - FMU Michel Pinkus Rabinovitch - Microbiologia, Imunologia e Parasitologia / Parasitologia

Resumo:

Este trabalho visa examinar intervenes que possam prolongar a sobrevida de citoplastos (clulas cujo ncleo mecanicamente removido) de diferentes tipos celulares. Foram realizadas enucleaes de fibroblastos primrios (FPC) e de macrfagos murinos. Apesar de demonstrado que macrfagos murinos morrem rapidamente aps a enucleao, a manuteno em hipotermia branda (34oC) prolonga a vida de citoplastos de L929, ainda que os mecanismos implicados no tenham sido esclarecidos. Outra interveno que poderia prolongar a vida dos citoplastos ainda est em curso de avaliao, como infeco intracelular com o parasita Toxoplasma gondii. Todavia, os experimentos propostos com o 2-mercaptoetanol foram abandonados porque a molcula se revelou txica tanto para clulas nucleadas quanto para as enucleadas. Os mecanismos implicados no decaimento e na morte anunciada dos citoplastos poderiam envolver vias alternativas de apoptose, identificadas pelo co-cultivo de macrfagos e citoplastos: se apoptticos, a exposio membranar do lipdio fosfatidilserina seria detectada pelos fagcitos. Experimentos preliminares de microscopia ptica indicaram um reconhecimento macrofgico dos citoplastos, sugerindo que o decaimento das clulas enucleadas est relacionado com processos apoptticos. Aprovao no Comit de tica em Pesquisa No.: 0862/07 Participantes: Fernanda Vieira Paladino, Michel Pinkus Rabinovitch

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ISOFORMA DE ALTO PESO MOLECULAR DA ADIPONECTINA E COMPONENTES DA SNDROME METABLICA EM NIPO-BRASILEIROS


Moises, R.C.M.S.; Crispim, F.; Ferreira, S.; Schumacher, F.C.; Martins, L.E.S. Felipe Conrado Schumacher - UNIFESP Regina Clia Mello Santiago Moiss - Medicina / Endocrinologia

Resumo:

A adiponectina um hormnio secretado exclusivamente pelo tecido adiposo e tm sido reconhecido como um modulador da sensibilidade insulina. Em contraste com outras adipocitocinas cujos nveis aumentam com o aumento da massa do tecido adiposo, os nveis de adiponectina so diminuidos em indivduos com obesidade, mostrando correlao negativa com mltiplos ndices de resistncia insulina. Esse hormnio encontrado na circulao na forma de complexos que incluem trmeros e hexmeros, coletivamente descritos como oligmeros de baixo peso molecular (Low Molecular Weight - LMW) de aproximadamente 190kDa e multmeros de alto peso molecular (High Molecular Weight - HMW) com mais de 300kDa. Estudos recentes indicam que a isoforma de HMW a forma ativa dessa protena, sendo responsvel por seus efeitos metablicos. A populao de Nipo-brasileiros exibe uma alta prevalncia de distrbios no metabolismo dos carboidratos, sendo a prevalncia de diabetes mellitus uma das mais altas do mundo. Em trabalho anterior verificamos que baixos nveis de adiponectina so preditores independentes para o desenvolvimento de intolerncia glicose. Os objetivos desse trabalho foram investigar as relaes entre nveis circulantes de adiponectina total e de HMW com componentes da Sndrome Metablica em NipoBrasileiros. Material e Mtodos Populao estudada: Foram avaliados 28 indivduos com tolerncia normal glicose (TGN, 15 homens, idade: 549,2 anos) e 26 portadores de diabetes mellitus (DM, 12 homens, idade:558,6anos) recrutados do Japanese-Brazilian Diabetes Study Group. Todos os indivduos foram submetidos avaliao clnica incluindo medidas antropomtricas (peso, altura e circunferncia abdominal) e teste oral de tolerncia glicose Mtodos Laboratoriais: Adiponectina total foi medida atravs de RIE (Linco Research) e suas formas multimricas foram determinadas atravs de Western Blot. Resistncia insulina foi avaliada atravs do HOMA-IR e a composio corporal de gordura foi determinada atravs de bioimpedanciometria. Resultados Os valores mdios de adiponectina total no foram diferentes entre TGN e DM (9,677,5 ug/ml vs 7,86,5 ug/ml, p=NS). Entretanto, os nveis de adiponectina HMW e a razo adiponectina HMW/total foram maiores entre os indivduos com TGN do que nos DM (3,77 3,8 ug/ml vs 1,903,27 ug/ml, p=0,006 e 0,360,1 vs 0,190,1, p<0,001, respectivamente). Uma correlao negativa entre adiponectina HMW e IMC (Rs=-0,29, p=0,03) e HOMA-IR (Rs=-0,4, p=0,003) foi observada na populao estudada, porm no se observando o mesmo com a adiponectina total. Concluses: Os dados do presente estudo indicam que a forma multimrica de HMW da adiponectina melhor indicadora de componentes da Sndrome Metablica do que a adiponectina total em Nipo- Brasileiros. Aprovao no Comit de tica em Pesquisa No.: 1159/06 Participantes: Regina Clia Mello Santiago Moiss, Felipe Crispim, Sandra Ferreira, Felipe Conrado Schumacher, Lus Eduardo Silveira Martins

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MODULAO DA SINALIZAO DE CLCIO INDUZIDA PELA PROTENA -AMILIDE E GLUTAMATO EM ASTRCITOS E NEURNIOS DE RATO
Oseki, K.T.; Monteforte, P.T.; Smaili, S.S. Karen Tubono Oseki - UNIFESP Soraya Soubhi Smaili - Farmacologia / Farmacologia

Resumo:

A doena de Alzheimer (DA) uma patologia neurodegenerativa caracterizada por distrbios cognitivos e emocionais, resultantes de morte neuronal, degenerao sinptica e deposio de agregados da protena -amilide e emaranhados neurofibrilares da protena Tau hipersfosforilada associada a microtbulo em regies relacionadas memria e aprendizagem, tais como amgdala, hipocampo e crtex frontal e parietal. Aumentos de clcio intracelulares podem estar relacionados com mecanismos de excitotoxicidade e de apoptose presentes na DA. Este trabalho visa estudar o efeito do peptdeo -amilide na homeostase de clcio intracelular e tambm verificar seu efeito em situaes de estresse para as clulas, como a superexpresso da protena pro-apopttica Bax, com o objetivo de investigar se a presena de -amilide capaz de induzir a translocao da Bax. Foram feitas culturas primrias de astrcitos de crtex de ratos Wistar neonatos, cultivados por oito dias, tripsinizados e utilizados de acordo com o experimento. Para se observar o aumento de clcio intracelular na presena do peptdeo -amilide 25-35, as clulas foram incubadas com fura-2AM por 30 minutos e visualizadas em microscpio de fluorescncia de alta resoluo em tempo real. Foram testadas concentraes crescentes de 25, 50 e 75 M do peptdeo. Para se verificar a influncia do peptdeo -amilide 25-35 sobre a translocao da protena pro-apopttica Bax, os astrcitos foram transfectados com GFP-Bax no dia anterior ao experimento. No momento do experimento, as clulas foram submetidas a uma dose de 50 M do peptdeo -amilide 25-35. Os experimentos foram realizados em microscpio de fluorescncia de alta resoluo em tempo real. O aumento de clcio intracelular induzido pelo peptdeo foi comparado com os valores basais de clcio intracelular e a anlise estatstica feita pelo teste ANOVA. Na dose de 25 M, observou-se um aumento de 12,4 % no clcio intracelular; para 50 M o aumento foi de 35,98 % e na presena de 75 M do peptdeo, foi notado um aumento de 50 % em relao ao basal. Os dados mostraram que as doses promovem aumentos significantes do clcio e que estatisticamente, as concentraes induziram efeitos diferentes entre si. O peptdeo -amilide 25-35 induziu, em astrcitos, a translocao da protena pro-apopttica Bax. Os resultados indicam que o peptdeo -amilide 25-35 causa um aumento de clcio intracelular de maneira concentrao dependente. Dados da literatura sugerem que o peptdeo -amilide mobilize clcio do meio extracelular (Biochimica et Biophysica Acta 1742:81, 2004). necessrio investigar o mecanismo de mobilizao de clcio e a potenciao dos efeitos do glutamato pela amilide. Em relao aos experimentos realizados com Bax, os resultados preliminares inferem que o peptdeo amilide capaz de induzir a translocao da protena Bax, tendo como um possvel destino a membrana de organelas, por exemplo, a mitocndria. A literatura afirma que essa translocao causa a formao de poros na membrana mitocondrial e a liberao de fatores apoptticos, como o citocromo c, por eles, sinalizando, portanto, a apoptose. Aprovao no Comit de tica em Pesquisa No.: 0586/08 Participantes: Karen Tubono Oseki, Priscila Totarelli Monteforte, Soraya Soubhi Smaili

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Nveis de xido ntrico e caracterizao da isoforma da xido ntrico sintase em um modelo de melanoma murino
Ramaldes, L.A.L.; Monteiro, H.P.; Rodrigues, E.G.; Curcio, M.F. Luana Aparecida de Lima Ramaldes - UNIFESP Hugo Pequeno Monteiro - Bioqumica / Biologia Molecular

Resumo:

O melanoma maligno um tumor que se origina de clulas pigmentadas, os melancitos. Este tumor conhecido por sua propenso de metastatizar para quase todo o organismo, porm, os locais mais freqentemente acometidos so: pulmes, crebro e fgado. Melanomas murinos tm sido bastante usados como modelos experimentais para o entendimento da evoluo deste tipo de cncer e da resposta imune do hospedeiro que pode ser de resistncia ou susceptibilidade ao tumor. O xido ntrico (NO) um radical livre gasoso gerado pelas xido ntrico sintases (NOS) localizadas no citosol ou ligadas membrana que convertem o aminocido Larginina em citrulina e NO. As NOS foram caracterizadas em trs isoformas principais: NOS induzvel (iNOS), NOS constitutiva neuronal (nNOS) e NOS constitutiva endotelial (eNOS).O papel do NO vem ganhando significncia, pois tem sido demonstrada a presena da iNOS em tumores slidos. Outras observaes apontam para um papel positivo do NO na proliferao do tumor. Para este estudo foram utilizadas as sublinhagens, B16F10 Nex2B e B16F10 Nex2D. As clulas foram inoculadas em camundongos C57B1/6 , depois os tumores desenvolvidos foram utilizados para anlise pela imunohistoqumica e tambm pela tcnica de western blot. Foi avaliado no projeto tambm a atividade da protena iNOS nas duas sublinhagens atravs da sua fosforilao nos resduos de tirosina. Desse modo, foi analisado a presena das isoformas da NOS, alm da expresso da RPTP.Nos resultados obtidos por imunohistoqumica nota-se uma maior concentrao das isoformas iNOS e eNOS, nos tumores subcutneos gerados pela sublinhagem Nex2D. Enquanto que a expresso de RPTP apresenta-se maior no tumor subcutneo gerado pela sublinhagem Nex2B. A maior expresso de RPTP por Nex2B, pode estar associada ao seu menor potencial metasttico. O mesmo pode ser considerado para as isoformas iNOS e eNOS, pois a sublinhagem Nex2D, apresenta maior expresso destas isoformas e maior potencial metasttico. Por serem mais metastticos, estes tumores devem apresentar angiognese que permitiria a instalao do tumor e sua maior proliferao. Observamos tambm que a iNOS est fosforilada em resduos de tirosina de forma mais acentuada no clone Nex 2D. A fosforilao da iNOS em resduos de tirosina pode modular negativamente a produo de NO por esta enzima. Baixos nveis de NO poderiam promover a progresso (proliferao) de tumores e poderiam estar correlacionados com a sua maior atividade metasttica. Com essa observao pode-se sugerir a associao da produo de NO com a atividade metasttica mais acentuada do clone Nex2D. Apoio: FAPESP e Projeto Milnio - Redoxoma - CNPq Aprovao no Comit de tica em Pesquisa No.: 1604/05 Participantes: Luana Aparecida de Lima Ramaldes, Hugo Pequeno Monteiro, Elaine Guadelupe Rodrigues, Marli Ferreira Curcio

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O tratamento com clulas tronco mesenquimais melhora a Insuficincia renal aguda por modulao imunolgica
Palasio, C.G.S.; Semedo, P.; Saraiva, N.O.; Pacheco-Silva, A. Carolina Gardini Sanches Palasio - Faculdade de Medicina do ABC Alvaro Pacheco e Silva Filho - Medicina / Nefrologia

Resumo:

Devido as altas taxas de morbi-mortalidades da Insuficincia Renal Aguda (IRA), existe a necessidade de se estudar formas alternativa de tratamento, entre elas a terapia por clulas-tronco mesenquimais (CTMs). CTMs possuem a capacidade de acelerar a regenerao de tecidos lesados agudamente, porm os mecanismos ainda so incertos. Para estudar tais processos, CTMs foram isoladas da medula ssea de ratos machos Wistar e cultivadas em meio DMEM, 10% soro fetal bovino (SFB). As clulas foram caracterizadas quanto ao fentipo de marcadores de superfcie por citometria de fluxo e quanto diferenciao para outras linhagens celulares, como adipcito e ostecito. A leso de isquemia e reperfuso (IR) foi induzida em ratos Wistar fmeas, atravs do clampeamento bilateral dos pedculos por 60 minutos. Aps este perodo, a reperfuso foi visualizada e 6h depois foram administradas 2x105 clulas por animal, endovenosamente. Aps 24 e 48 horas, os animais foram sacrificados, tendo o sangue coletado para dosagens de creatinina e uria srica, e os rins coletados para anlises morfomtricas e de transcritos gnicos. Os animais tratados com CTMs apresentaram menores nveis de creatinina (Cr 24h: controle: 3,53 vs. Animais tratados com CTM: 1,13 mg/dL, p<0.05, Cr 48h: controle: 2,14 vs. Animais tratados com CTM: 0,92mg/ dL, p<0.05). A melhora da funo renal, em 24h, foi associada a uma menor expresso de IL-1 e de TNF e a uma maior expresso de IL-4. Foi analisada tambm a expresso da IL-6, e como resultado observou-se uma menor expresso desta interleucina em 24h. Interessantemente, a expresso do RNAm dessas citocinas em 48h demonstrou-se diferente. Em 48h, h uma maior expresso de IL-6. Ainda a relao entre a expresso de Bcl-2 (anti-apopttico) e Bad (pr-apopttico) apresenta-se maior em 24h nos animais tratados dos que os animais no tratados. Porm esses ndices, em 48h, j esto reduzidos. A administrao de CTM em modelo agudo de leso de IR acarreta em melhora dos parmetros funcionais, provavelmente atravs da modulao imunolgica e da apoptose em 24h, porm em 48h estas modulaes j no so mais observada. CEP 0210/06. Ministrio da Sade, CNPq, FAPESP (04/08311-6 04/13826-5, 06/00620-5). Aprovao no Comit de tica em Pesquisa No.: 0210/06 Participantes: Carolina Gardini Sanches Palasio, Patricia Semedo, Niels Olsen Saraiva, Alvaro Pacheco e Silva Filho

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Padronizao de metodologia de screening de drogas anti-Trypanosoma cruzi


Tsuchiya, C.T.; Coimbra, V.C.; Cunha, R.L.; Juliano, L.; Schenkman, S. Carolina Terumi Tsuchiya - UNIFESP Sergio Schenkman - Microbiologia, Imunologia e Parasitologia / Biologia Celular

Resumo:

Grande parte dos estudos relacionados ao desenvolvimento de drogas para a Doena de Chagas baseia-se em modelos que utilizam as formas epimastigotas em cultura axnica do Trypanosoma cruzi e que correspondem s formas encontradas no tubo digestivo do inseto vetor. Somente estudos mais recentes vm utilizando para testes clulas de mamferos infectadas com formas tripomastigotas do parasita, o que se aproxima mais da situao de infeco. Esses ensaios, no entanto, so muito laboriosos e limitam a quantidade de substncias que podem ser testadas simultaneamente. Inibidores de cisteno-proteases abundantes no T. cruzi tm-se mostrado capazes de bloquear a invaso celular pelo T. cruzi. Com o intuito de estabelecer e padronizar um ensaio mais eficiente testou-se a atividade antiparasitria de compostos orgnicos de telrio tanto no processo de invaso como na proliferao dos parasitas em clulas L6 provenientes de mioblastos de msculo esqueltico de rato. Isto porque esses compostos apresentam atividade inibitria de cisteno-proteases de T. cruzi em doses muito baixas. Por ensaios de citotoxicidade pelo ensaio de MTT dessas organoteluranas em clulas L6 selecionamos 5 compostos de baixa toxicidade por at 48 h de incubao em concentraes de at 50 uM. Dois desses compostos diminuram significativamente a invaso da clula L6 por formas tripomastigotas do T. cruzi e quatro deles reduziram a replicao intracelular do parasita em doses de at 5 uM. Esses resultados permitiro (i) padronizar uma metodologia automatizada de contagem dos parasitas intracelulares, a fim de facilitar a triagem de novos compostos com atividade anti-T. cruzi; (ii) executar ensaios para testar a eficcia do tratamento de animais infectados com as organoteluranas; (iii) verificar um possvel sinergismo associando-se as organoteluranas com a droga benznidazol, utilizada no tratamento da Doena de Chagas. Aprovao no Comit de tica em Pesquisa No.: 0228/08 Participantes: Carolina Terumi Tsuchiya, Vanessa Cristina Coimbra, Rodrigo L. O. R. Cunha, Luiz Juliano Neto, Sergio Schenkman

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Perfil de cido hialurnico e dermatam sulfato em pele de ratas aps ooforectomia e tratamento com glucosamina e condroitim sulfato
Melo, C.M.; Nader, H.B.; Moura, M.L.A.; Corra, O.M.T.; Mendes, A.; Kobayashi, E.Y.; Pinhal, M.A.S. Carina Mucciolo Melo - Faculdade Oswaldo Cruz - FOC Maria Aparecida da Silva Pinhal - Bioqumica / Biologia Molecular

Resumo:

O cido hialurnico, um glicosaminoglicano no sulfatado constitudo por unidades alternadas de cido D-glucornico e N-acetilglucosamina. Sua funo na derme proporcionar a hidratao, estabilidade e manuteno do volume, oferecendo suporte estrutural e elasticidade. O dermatam sulfato polmero de N-acetilgalactosamina, cido D-glucurnico e cido idurnico est relacionado organizao da rede de colgeno IV e V. Glucosamina sulfato e condroitim sulfato em associao com glucosamina sulfato (Zodiac, Brasil) so usadas no tratamento de doenas articulares (Hungerford & Jones, 2003). O objetivo desse estudo foi verificar o efeito da supresso hormonal no perfil de glicosaminoglicanos presentes na pele e investigar se ocorre alguma alterao aps administrao de glucosamina sulfato e condroitim sulfato associado glucosamina sulfato. Foram utilizadas ratas Wistar com 4 meses de idade. Aps ooforectomia bilateral foram administrados por gavagem 0,135 g/g de peso ambos os compostos durante 45 a 60 dias. A pele das ratas foram homogeneizadas em acetona e submetidas protelise. Os glicosaminoglicanos foram identificados e quantificados aps precipitao com metanol e eletroforese em gel de agarose como descrito (Dietrich, 1977). A quantificao de cido hialurnico foi realizada utilizando mtodo de ELISA-competitivo (Martins et al., 2003). Os glicosaminoglicanos encontrados na pele dos animais foram dermatam sulfato e cido hialurnico. O dermatam sulfato aumenta significativamente aps ooforectomia. Porm, o tratamento com condroitim sulfato em associao com glucosamina sulfato diminui os nveis de dermatam sulfato prximo dos valores valores obtidos para o grupo controle, respectivamente ooforectomizados (30,52 2,01 g/g de tecido), tratado (11,52 5,36 g/g de tecido) e controle (16,91 7,05 g/g de tecido). Observamos uma diminuio na quantidade de cido hialurnico em todos os grupos ooforectomizados (231,99 154,30 g/g de tecido), comparando-se com o grupo controle (426,98 145,40 g/g de tecido). No foi observada alterao na quantidade de cido hialurnico nos grupos ooforectomizados que receberam tratamento, independentemente do composto recebido. Conclumos assim que a administrao de glucosamina sulfato e condroitim sulfato afeta exclusivamente o dermatam sulfato. Variaes no contedo de cido hialurnico e no de dermatam sulfato ocorrem quando h supresso hormonal comparando-se com animais controle. Aprovao no Comit de tica em Pesquisa No.: 1179/05 Participantes: Carina Mucciolo Melo, Helena Bonciani Nader, Marcio Lus Alves Moura, Olga Maria de Toledo Corra, Aline Mendes, Elsa Yoko Kobayashi, Maria Aparecida da Silva Pinhal

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PESQUISA DA FMBRIA CURLI E FORMAO DE BIOFILME EM AMOSTRAS DE Escherichia coli PRODUTORAS DE TOXINA SHIGA
Siqueira, G.A.; Biscola, F.T.; Abe, C.M.; Guth, B.E.C. Gabriela Alves Siqueira - UMESP Beatriz Ernestina Cabilio Guth - Microbiologia, Imunologia e Parasitologia / Microbiologia

Resumo:

Escherichia coli produtora de toxina Shiga (STEC) tem sido associada com surtos e casos espordicos de doenas humanas, responsveis por manifestaes clnicas intestinais e extra-intestinais. A formao de biofilme em superfcies biticas e abiticas pode favorecer a contaminao por diversos microrganismos, inclusive por STEC. Estudos tm associado a formao de biofilme expresso da fmbria curli, entretanto, essa relao tem sido pouco estudada em STEC. Este trabalho teve como objetivos pesquisar fenotpica e genotipicamente a presena da fmbria curli e analisar a capacidade de formao de biofilme em amostras de STEC de diferentes sorotipos. Foi analisado um total de 51 amostras de STEC, 33 no-O157 e 18 O157. A expresso de curli, avaliada pelo cultivo em gar com vermelho Congo (CR) a 28C, foi encontrada em 42% e 11% das no-O157 e O157, respectivamente, sendo que algumas amostras apresentaram colnias mistas (variantes). As seqncias genticas relacionadas aos genes estrutural (csgA) e ao regulador (crl), pesquisadas por PCR, foram encontradas em todas amostras de STEC estudadas. A quantificao da formao de biofilme, realizada em placa de poliestireno, mostrou que a formao de biofilme ocorreu em 19 (58%) amostras de STEC no-O157, sendo que somente 8 (42%) expressaram curli quando cultivadas em gar com CR, no sendo encontrada, portanto, uma alta correlao entre a capacidade dessas amostras em formar biofilme e a expresso da fmbria. Entretanto, nas STEC O157 foi observado que somente as amostras curli positivas foram capazes de aderir s placas de poliestireno (17%), enquanto as curli negativas no formaram biofilme, exceto uma amostra. Foi tambm realizada microscopia eletrnica em um par de variantes, vermelha e branca de STEC O157, identificados fenotipicamente em gar acrescido de CR, e somente foram encontradas estruturas de superfcie na variante vermelha (curli positiva). Os resultados obtidos sugerem que nas amostras STEC O157 a formao de biofilme parece estar mais relacionada a expresso da fmbria curli quando comparado as STEC no-O157. Aprovao no Comit de tica em Pesquisa No.: 1284/07 Participantes: Gabriela Alves Siqueira, Franciele Tafarello Biscola, Ceclia Mari Abe, Beatriz Ernestina Cabilio Guth

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Pesquisa de determinantes de virulncia por meio de testes biolgicos em amostras de Escherichia coli isoladas de bacteremia.
Romano, R.; Santos, A.C.M.; Pignatari, A.C.C.; Gales, A.C.; Silva, R.M. Ricardo Francisco Tavares Romano - UNIFESP Rosa Maria Silva - Microbiologia, Imunologia e Parasitologia / Microbiologia

Resumo:

Sabe-se que Escherichia coli compreende centenas de sorotipos dos quais apenas alguns so patognicos. Dentre estes encontram-se as amostras que causam doenas entricas, conhecidas como diarrheagenic E. coli (DEC) e as amostras que causam doenas extra-intestinais, atualmente denominadas ExPEC (extraintestinal pathogenic E. coli). Muitos fatores de virulncia (FVs) tm sido descritos para amostras de E. coli envolvidas em infeces extra-intestinais. Atualmente, esses FVs j somam algumas dezenas (entre genes e alguns alelos variantes) que incluem diversas adesinas, toxinas, sistemas de captao de Ferro, capas de polissacardeos e invasinas. Pesquisa em desenvolvimento em nosso laboratrio demonstrou que, de 75 amostras de E. coli isoladas de bacteremia de indivduos internados no Hospital So Paulo entre 2005 e 2006, apenas oito no apresentaram nenhum dos 23 fatores de virulncia pesquisados por meio de hibridao com sondas de DNA especficas. Uma vez que essas oito amostras foram isoladas de indivduos com bacteremia, levantou-se a hiptese de que elas devem possuir propriedades de virulncia as quais seriam codificadas por determinantes genticos diversos dos at ento pesquisados. Este trabalho teve por objetivo investigar esta hiptese empregando os seguintes mtodos biolgicos: 1) testes de produo de hemolisinas (em meio de cultura contendo 5% de sangue de carneiro desfibrinado); 2) capacidade de aglutinao de hemceas de sangue humano e de carneiro [suspenses contendo 3% de hemceas lavadas adicionadas suspenso de clulas bacterianas (V/V), tanto na ausncia como na presena de 1% de D-manose]; 3) resistncia ao do Complemento presente no soro humano (comparando-se quantitativamente a viabilidade bacteriana na presena de 50% de soro humano normal e de soro inativado pelo calor); e 4) capacidade de aderncia a linhagens de clulas eucariticas cultivadas in vitro [verificando-se a capacidade de interao das bactrias com clulas HeLa (carcinoma de colo uterino) e clulas T84 (linhagem intestinal humana), tanto na presena quanto na ausncia de D-manose a 1%]. Todas as oito amostras demonstraram ser resistentes ao Complemento presente no soro humano uma vez que, ao longo de 24 horas de incubao, apresentaram um aumento de cerca de dois log(10), tanto na presena de soro normal (contendo Complemento) quanto de soro inativado (sem Complemento). Todas as oito amostras demonstraram possuir adesinas capazes de promover sua interao com clulas eucariticas, independentemente de sua origem tecidual. Duas amostras apresentaram uma aderncia difusa a qual foi inibida por D-manose sugerindo que a estrutura bacteriana envolvida deve ser semelhante fmbria Tipo1. As seis amostras restantes apresentaram um padro de aderncia agregativa (clulas bacterianas dispostas de forma empilhada) que foi, eventualmente, desarranjado mas no inibido por D-manose. Nenhuma amostra foi hemaglutinante ou hemoltica. Conclui-se que as oito amostras isoladas de bacteremia estudadas possuem duas importantes propriedades de virulncia: resistncia ao soro e aderncia a clulas eucariticas as quais devem ser mediadas por alelos genticos variantes e que ainda no foram caracterizados. Estudos no sentido de clonar e caracterizar esses genes so importantes no somente para aumentar o potencial dos mtodos moleculares utilizados atualmente na pesquisa de patgenos extra-intestinais, mas tambm no desenvolvimento de possveis mtodos preventivos de infeces causadas por essas bactrias, que usualmente so acompanhadas de alta morbidade e mortalidade. Participantes: Ricardo Francisco Tavares Romano, Ana Carolina de Mello Santos, Antonio Carlos C. Pignatari, Ana Cristina Gales, Rosa Maria Silva

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Polimorfismo e Rearranjos Cromossmicos em T. cruzi: comparao do caritipo molecular de clones isolados da cepa CL.
Cortez, D.R.; Santos, M.F.; Lima, F.M.; Souza, R.T.; Mortara, R.A.; Franco da Silveira, J. Danielle Rodrigues Cortez - UNIBAN Jos Franco da Silveira Filho - Microbiologia, Imunologia e Parasitologia / Parasitologia

Resumo:

O Trypanosoma cruzi, agente etiolgico da doena de Chagas, um protozorio parasita pertencente famlia Trypanosomatidae, ordem Kinetoplastida. Alm de sua importncia mdica, o T. cruzi tambm muito interessante do ponto de vista evolutivo. Trata-se de um microorganismo eucarionte primitivo que apresenta caractersticas tanto da clula eucaritica de animais e plantas. A anlise gentica do T. cruzi dificultada pela ausncia neste organismo de condensao cromossmica na mitose e reproduo sexuada. Os cromossomos do T. cruzi so separados e visualizados pela tcnica de eletroforese em campo pulsado (PFGE) que permite a separao de grandes fragmentos de DNA em gel de agarose. Por meio dessa tcnica identificamos diferenas de tamanho entre as bandas cromossmica dos clones CL Brener (clone de referncia do Projeto Genoma de T. cruzi) e CL 14, ambos derivados da mesma cepa parental CL. Por exemplo, a banda XVI (2,6Mb) identificada no clone CL Brener e na cepa parental CL tem seu tamanho reduzido para 2,0 Mb no clone CL 14. Talvez, essa diferena seja conseqncia de uma deleo ou um rearranjo cromossmico na banda XVI. Para testar esta hiptese utilizamos marcadores genticos (H49, SL, TEUF0078) previamente mapeados na banda XVI do clone CL Brener e compararmos o perfil de hibridizao da cepa CL e dos clones CL Brener e CL 14. Esses marcadores hibridizaram com a banda XVI (2,3 Mb) na cepa Cl e no clone CL Brener e com uma banda de 2,0 Mb no clone CL 14, confirmando que a banda de 2,0 Mb derivada da banda XVI. Anlise das seqncias do clone CL Brener depositadas no banco GeneDB levou a identificao de um scaffold de 404 kb no qual esto localizados os genes XM811753, Miosina e PI 3,5 K. Ns utilizamos como sonda os 3 genes localizados nas duas extremidades do scaffold, separados por mais de 200 kb do gene H49. O perfil de hibridizao foi exatamente igual ao obtido com gene H49, indicando que a quebra ou deleo no ocorreu dentro desta regio, mas, provavelmente em uma das extremidades do cromossomo. Uma outra abordagem utilizada foi a anlise de restrio da banda XVI (2,3 Mb) e 2,0 Mb dos clones CL Brener e CL 14, respectivamente, por meio de eletroforese em campo pulsado bidimensional (PFGE-2D). As bandas de 2,3 e 2,0 Mb foram isoladas do gel de agarose aps separao por PFGE (primeira dimenso) e digeridas com enzima de restrio que gera extremidades coesivas. A seguir, o bloco de agarose contendo os fragmento de restrio foram incubados com DNA polimerase (fragmento de Klenow) na presena de 32P-dCTP, preenchendo portanto as extremidades protuberantes. O material era submetido a uma nova eletroforese em campo pulsado (segunda dimenso), transferido para filtro de nilon e exposto em filme RX. Com esta anlise foi possvel identificar diferenas no padro de restrio das bandas de 2,3 e 2,0 Mb. Estamos investigando as extremidades cromossmicas das bandas em questo, para identificarmos possveis delees nas regies subtelomricas. Aprovao no Comit de tica em Pesquisa No.: 0066/07 Participantes: Danielle Rodrigues Cortez, Michele Fernades Santos, Fabio Mitsuo Lima, Renata Torres de Souza, Renato Arruda Mortara, Jos Franco da Silveira Filho

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Polimorfismo e Rearranjos Cromossmicos em Trypanosoma cruzi: comparao dos caritipos moleculares da cepa parental G e do clone D11
Santos, M.F.; Lima, F.M.; Cortez, D.R.; Souza, R.T.; Mortara, R.A.; Franco da Silveira, J. Michele Fernandes Santos - UNIBAN Jos Franco da Silveira Filho - Microbiologia, Imunologia e Parasitologia / Parasitologia

Resumo:

O Trypanosoma cruzi o agente etiolgico da doena de Chagas que afeta de 16 a 18 milhes de indivduos na Amrica Latina. Trata-se de um protozorio flagelado, caracterizado pela existncia de um nico flagelo e do cinetoplasto. Considerado um microorganismo eucarionte primitivo, o T. cruzi apresenta caractersticas de clula eucaritica e procaritica. O genoma de T. cruzi (CL Brener) apresenta uma grande quantidade de seqncias repetitivas que dificultam a construo de mapas fsicos e genticos dos cromossomos. Rearranjos cromossmicos so comuns em microorganismos eucariontes sexuados ou assexuados, constituindo-se em um importante mecanismo de variabilidade gentica. O nmero e tamanho das bandas cromossmicas separadas por PFGE (eletroforese de campo pulsado) diferem entre cepas e clones e tambm entre clones derivados de uma mesma cepa de T. cruzi. Foi sugerido que o polimorfismo cromossmico pode ser o responsvel pelas variaes do contedo de DNA existentes em diferentes clones e cepas do parasita. Estamos estudando os mecanismos moleculares envolvidos nos rearranjos cromossmicos entre o clone D11 e a cepa parental G. O projeto consiste no mapeamento de marcadores genticos nas bandas cromossmicas destes dois isolados, e na identificao de marcadores genticos localizados nas regies envolvidas nos rearranjos cromossmicos. Tais rearranjos no clone D11 foram identificados por hibridizao de bandas cromossmicas com sondas especficas, dentre elas tubulina. Devemos lembrar que estudos de genotipagem com marcadores microssatlites indicam que a cepa parental uma populao homognea (estrutura monoclonal) sugerindo que o clone D11 foi gerado no processo de clonagem. Existem relatos de que o protozorio parasita pode sofrer rearranjos quando submetido a algum tipo de estresse, porm estas hipteses necessitam de comprovaes. Uma etapa importante do nosso projeto consiste na identificao de marcadores genticos que estejam flanqueando os genes envolvidos nos rearranjos cromossmicos que permitam a identificao de possveis stios de quebra cromossmica. Esta anlise tem sido dificultada pelo fato do genoma da cepa G parental no ter sido seqenciado. Tentamos abordar esta questo utilizando marcadores presentes em contigs de seqncia que contm o gene tubulina do clone CL Brener por ser o nico genoma de T. cruzi seqenciado at o presente momento. Os contigs de seqncias contendo o gene tubulina foram selecionados e analisados separadamente. Foi encontrado no contig de seqncia AAHK01000249, de 46.808pb, 9 genes que compem um grupo de ligao com o gene tubulina no clone CL Brener. O grupo de ligao constitudo pelos genes: XM811606, PUF-9, exossome, tubulina, XM801274, calpana, XM801270, XM800902 e XM800903. Estes marcadores genticos foram amplificados por PCR diretamente do DNA genmico do clone CL Brener usando oligonucleotdeos iniciadores especficos de cada um dos genes. Os produtos de PCR foram separados em gel de agorose, clonados no vetor pGEM-T Easy e seqenciados para confirmao de sua identidade. A seguir, eles foram usados como sondas em hibridizaes com chromoblots contendo as bandas cromossmicas da cepa G e do clone D11. O gene que codifica tubulina mapeia nas bandas de 1,57 e 2,00 Mb na cepa G e nas bandas de 2,35 e 2,62 Mb no clone D11. Entretanto, os marcadores XM800902, XM811606, exossome, PUF-9, XM801274, XM801270 e XM800903 hibridizam nas bandas de 1,14 e 1,42 Mb na cepa G e nas bandas de 1,10 Mb e 1,32 Mb no clone D11, indicando que estes genes no formam um grupo de ligao com tubulina nestes isolados do grupo T. cruzi I como indicam os dados de seqncias do clone CL Brener. Novos experimentos esto em andamento em nosso laboratrio visando identificar genes ligados a tubulina na cepa G. Estes marcadores poderiam ser teis para mapear os pontos de quebras nos rearranjos cromossmicos envolvendo ao gene tubulina. Aprovao no Comit de tica em Pesquisa No.: 01315/06 Participantes: Michele Fernades Santos, Fabio Mitsuo Lima, Danielle Rodrigues Cortez, Renata Torres de Souza, Renato Arruda Mortara, Jos Franco da Silveira Filho

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Preparao e Estudo Conformacional de - halometilcetonas derivadas de - aminocidos protegidos


Reis, A.K.C.A.; Felix, M.J. Maria Julia Pereira Felix - UNIFESP Adriana Karla Cardoso Amorim Reis - Cincias Exatas e da Terra / Qumica Orgnica

Resumo:

O estudo prope preparao e anlise conformacional de a '- halometilcetonas derivadas de aminocidos. Para analisar os diversos fatores e os vrios tipos de interaes que regem a estabilidade da conformao molecular desses compostos, utilizam-se as espectroscopias de IV, 1H-RMN, 13C-RMN e clculos tericos. Assim, pretende-se entender as propriedades macroscpicas dessas substncias e tentar associar as informaes obtidas com suas atividades biolgicas e aplicaes sintticas. Para obteno dos - amino-'- halometilcetonas necessrio preparar a correspondentes amidas de Weinreb. Essa a etapa em que se encontra a pesquisa atualmente. O prximo passo reagir esse produto com o reagente de Grinhard seguido de halogenao para obter os compostos desejados. Os aminocidos utilizados na rota sinttica so: prolina, glicina e fenialanina. Os produtos obtidos at esse momento, esto de acordo com o planejamento proposto. Posteriormente sero realizados os clculos tericos e as anlises mais precisas dos compostos. Participantes: Adriana Karla Cardoso Amorim Reis, Maria Julia Pereira Felix

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Projeto de Mutagnese por ENU: Induo de novas mutaes que afetam o sistema nervoso central de camundongos
Pinto, W.B.V.R.; Ko, G.M.; Ariza, C.B.; Valero-Lapchik, V.B.; Porcionatto, M. Wladimir Bocca Vieira de Rezende Pinto - UNIFESP Marimlia Porcionato - Bioquimica / Biologia Molecular

Resumo:

Uma das principais etapas existentes dentro do processo de entendimento da fisiopatologia das doenas no homem compreende o desenvolvimento de modelos experimentais adequados em animais de laboratrio. H duas abordagens gerais existentes na criao de modelos genticos para estudos funcionais: "reverse genetics" e "forward genetics". Diferentemente das estratgias de "reverse genetics" obtidas diretamente por manipulao gentica de uma seqncia gnica conhecida, a estratgia que utilizamos foi de "forward genetics" com um agente mutagnico para originar fentipos por meio de mutaes em genes inicialmente desconhecidos. Dentre os principais mtodos utilizados na criao de tais modelos, pode-se citar a mutagnese induzida por agentes qumicos, como a N-etil-Nnitroso-uria (ENU), utilizado neste estudo. A partir da injeo de ENU em 40 camundongos BALB/c machos (divididos em 4 grupos que receberam diferentes doses grupo 1 com 3 doses de 95 mg/kg, grupo 2 com 3 doses de 90 mg/kg, grupo 3 com 3 doses de 85 mg/kg e grupo 4 com 3 doses de 80 mg/kg de massa corporal), foi desenvolvida a estratgia de cruzamentos para os quatro grupos. A injeo de ENU ocasiona um perodo de esterilidade que varivel entre os animais e, no nosso caso, os perodos foram de 16,5 semanas, 14,9 semanas, 12,2 semanas e 13,1 semanas, para os grupos 1, 2, 3 e 4, respectivamente. At a fase de obteno de F3, 1 animal do grupo 1 e 1 animal do grupo 3 permaneceram estreis, enquanto 1 animal do grupo 3 morreu na etapa de administrao de ENU e 2 animais do grupo 2 foram sacrificados. A taxa de mortalidade para os animais que receberam ENU foi de 70%, 37,5%, 50% e 60%, respectivamente, para os grupos 1, 2, 3 e 4. No houve, no entanto, mudana estatisticamente significante na massa corporal dos machos pertencentes aos grupos 1, 2, 3 e 4. Os machos injetados originalmente com ENU foram cruzados com fmeas BALB/c selvagens; a gerao F1 obtida teve, ento, aproveitamento dos machos F1 que foram colocados em cruzamentos com fmeas selvagens; as fmeas obtidas em F2 foram colocadas para cruzamentos com irmos (machos F2 resultantes do cruzamento em F1 dos mesmos genitores) ou com o macho F1 que deu origem a tais fmeas; como resultado de tais cruzamentos na segunda gerao, obtivemos animais em F3 que, potencialmente, podem carregar alteraes genotpicas que se expressem em seu fentipo, como resultado de padro de herana gentica autossmica recessiva. Trata-se, portanto, de estratgia de rastreamento fenotpico ("phenotypic screening"), em que, a partir da origem de geraes com certos fentipos, consegue-se caracterizar funo e participao de genes especficos no desenvolvimento, assim como aplicao de tais mutantes para estudo de doenas. At o momento, obtivemos 3 ninhadas de mutantes com caractersticas de ataxia - obtidos em F3 com padro de herana autossmica recessiva, sendo que as 3 so originadas de um mesmo macho F1. Alm dessas ninhadas, tambm obtivemos mutantes com padro de herana autossmica dominante, com as seguintes caractersticas fenotpicas: ausncia completa da pelagem (nude), nanismo, hiperatividade, ausncia de pelagem na regio ceflica e adinamia - todas estas obtidas em F1 ou F2. Alm dos animais que apresentam fentipos evidentes de problemas neurolgicos, as ninhadas sem alteraes evidentes sero submetidas a testes comportamentais para deteco de alteraes neurolgicas e/ou comportamentais mais sutis. O prximo passo do projeto envolve a fixao das mutaes obtidas, seguida de mapeamento gentico por microssatlites. Nossa proposta realizar o seqenciamento de genes que possam estar envolvidos com a origem de cada um dos fentipos, de forma que tais modelos possam ser utilizados para o estudo da fisiopatologia de doenas, desenvolvimento de frmacos e compreenso da manifestao fenotpica de doenas genticas que afetem o homem. Suporte Financeiro: FAPESP, CNPq. Aprovao no Comit de tica em Pesquisa No.: 0613/07 Participantes: Wladimir Bocca Vieira de Rezende Pinto, Gui Mi Ko, Carolina Batista Ariza, Valderez Bastos Valero-Lapchik, Marimlia Porcionatto

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Reatividade intestinal em ratos Wistar com epilepsia do lobo temporal induzida por pilocarpina
Nouailhetas, V.L.A.; Theodoro, C.M. Caio Munhoz Theodoro - UNIFESP Viviane Louise Andre Nouailhetas - Biofsica / Biofsica

Resumo:

Introduo: Epilepsia uma desordem neurolgica crnica com prevalncia de 4-10/1000 na populao mundial. A forma mais comum a epilepsia do lobo temporal (ELT) representando 40% de todos os casos. Em modelos animais, a ELT pode ser induzida atravs da utilizao de pilocarpina, um potente agonista muscarnico retirado do arbusto pilocarpus jaborandi. Sabe-se de muitas co-morbidades associadas epilepsia como depresso, distrbios de sono e doenas relacionadas reduo da condio fsica. Em relao ao trato gastrintestinal poucos estudos foram realizados. Contudo, estudos j demonstraram a intensa comunicao entre o sistema gastrintestinal e o sistema nervoso central atravs do sistema nervoso autnomo e de outras substncias. Acreditamos que alteraes centrais possam causar alteraes gastrintestinais devido a essa intercomunicao. Para tal anlise usaremos o estudo da contratilidade intestinal a fim perceber alteraes funcionais e estudos histolgicos na percepo de alteraes morfolgicas. Objetivo: Estudar os efeitos da epilepsia do lobo tempora (ELT) induzida por pilocarpina na resposta contrtil funcional e na morfologia do intestino de roedores. Material e mtodos: Ratos Wistar de 3 meses foram submetidos ao protocolo de induo de ELT atravs da utilizao dos frmacos metilescopolamina,pilocarpina e diazepam. A avaliao funcional foi feita atravs de respostas contrteis isomtricas a diferentes estimulantes (KCl, carbacol, bradicinina). Com os valores de contrao registrados foram construdas curvas concentraes-respostas e adquiridos os valores de CE50 (concentrao da droga que causa 50% do efeito mximo) e Emx (tenso mxima do tecido). A anlise morfolgica foi feita pela obteno e colorao de cortes do leo de rato com o mtodo de eosina-hematoxilina. Os tecidos corados com eosina-hematoxilina foram comparados de acordo com a escala de Chiu. Em relao anlise estatstica os dados foram apresentados como mdia EPM e analisados por ANOVA de uma via, seguido de ps teste de Bonferroni. Resultados: Na tentativa de se utilizar s j padronizadas curvas concentraes-respostas realizadas em camundongos C57BL/6 no laboratrio, o protocolo de induo de epilepsia foi realizado nesses animais. O resultado de tal procedimento apresentou mortalidade de 85% dos animais (34 de 40 animais), sendo que dos 6 animais sobreviventes somente 2 se tornaram epilpticos. Dessa forma, resolvemos utilizar definitivamente os ratos Wistar que apresentavam o protocolo de induo de epilepsia bem padronizado, porm a construo de curvas concentraes-respostas do leo no padronizadas. Em relao padronizao, aps a construo das curvas, para bradicinina o valor de CE50 8,3.10-11 M e o Emx de 2,2 g. Em relao ao KCl, o valor de CE50 foi de 6,9.10-3 e o valor de Emx foi de 2,3 g. Para o carbacol, houve um problema experimental e a construo est sendo repetida para esse frmaco. Posteriormente o protocolo de induo de epilepsia foi realizado em 10 Ratos Wistar com mortalidade de 100%. Um novo grupo de animais epilpticos est sendo atualmente estudado. Discusso: A mortalidade conseqente do modelo de pilocarpina para induo de epilesia foi alta. Dessa forma, no houve um n favorvel para comparaes entre os grupos. Acreditamos que nas prximas semanas, quando os animais atingirem a idade certa para a realizao dos experimentos, teremos finalmente a possibilidade de compararmos as respostas funcionais e as alteraes morfolgicas induzidas pela epilepsia. Aprovao no Comit de tica em Pesquisa No.: 0270/08 Participantes: Viviane Louise Andre Nouailhetas, Caio Munhoz Theodoro

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Regulao epigentica da expresso de receptores de estrgeno por frmacos moduladores destes receptores em diferentes clulas e tecidos alvos
Moura-Martins, L.A.; Silva, A.G.; Siu, E.R.; Correa, M.; Jasiulionis, M.G.; Porto, C.S. Letcia Abigail de Moura Martins - UNIFESP Catarina Segreti Porto - Farmacologia / Farmacologia Celular

Resumo:

Os estrgenos regulam vrios processos fisiolgicos, incluindo proliferao, diferenciao e crescimento celular, e funo de rgos do sistema reprodutor masculino e feminino. Alm disso, esto envolvidos no cncer prosttico e mamrio (para reviso Differentiation 75:871, 2007; Steroids 73:233, 2008). Os efeitos dos estrgenos so mediados pelos receptores de estrgeno (ESR1 e ESR2), que so fatores de transcrio ativados pelos ligantes, presentes em tecidos do sistema reprodutor e em clulas cncer mamrio (para reviso Trends Pharmacol Sci 24:479, 2003; Science 307:1572, 2005). Recentemente, foi mostrada a ligao do 17-estradiol ao receptor de membrana acoplado protena G (GPR30) em clulas do cncer mamrio (Trends Endocrinol Metab, 16:362, 2005). A expresso dos ESR1 e ESR2 pode ser regulada pelo desenvolvimento sexual, pelo prprio hormnio e por processos patolgicos em glndulas mamrias e na prstata (para reviso Breast Cncer 14:175, 2007; Steroids 73:233, 2008). A regulao da expresso do GPR30 pela progresso do cncer mamrio foi tambm observada (Steroids, in press, 2008). Os mecanismos envolvidos na regulao da expresso destes receptores por diferentes fatores precisam ser esclarecidos. Dessa forma, o objetivo deste estudo analisar as alteraes no padro de metilao dos promotores dos genes que codificam os receptores de estrgeno (ESR1, ESR2 e GPR30) em rgos do sistema reprodutor masculino pelo tratamento de ratos com o antiestrgeno fulvestranto (ICI 182,780) e em cultura de clulas do cncer mamrio pelo tratamento com 17 -estradiol, tamoxifeno e fulvestranto. Foram usados ratos Wistar machos distribudos nos seguintes grupos experimentais: - ratos tratados com o antiestrgeno esteroidal ICI 182,780 (fulvestranto, 10 mg/animal, s.c.), a partir dos 30 dias de idade, uma vez por semana, durante 60 dias (Biol Reprod, in press, 2008), e - ratos controles (30 e 90 dias de idade). Aps o tratamento, os animais foram sacrificados e os rgos genitais acessrios, dctulos eferentes, cabea e cauda do epiddimo e prstata, foram retirados, congelados ou imediatamente processados. Foi tambm realizada cultura de clulas das seguintes linhagens celulares de cncer de mama MCF7 (ESR1+, ESR2+, GPR30+), MDAMB-231 (ESR1+, ESR2+), SKBR3 (ESR1-, ESR2-, GPR30+) e MCF10A (ESR1+, ESR2+) clula epitelial de mama, usada como controle. As diferentes linhagens celulares foram tratadas com 17--estradiol, fulvestranto (antagonista de ESR1 e ESR2 e agonista do GPR30) e tamoxifeno (SERM, modulador seletivo dos receptores de estrgeno). Foram extrados DNA e RNA dos diferentes tecidos e das clulas para a realizao de ensaios MS-PCR e RT-PCR, respectivamente. Foi tambm obtido extrato total de cada tecido e clula para a realizao de ensaios de Western Blot. RNA mensageiro para o GPR30 foi detectado em dctulos eferentes, cabea e cauda de epiddimo e prstata de ratos com 90 dias de idade, sugerindo a presena deste receptor em diferentes tecidos do sistema reprodutor masculino. Os estudos da regulao da expresso deste receptor pelo fulvestranto nos diferentes tecidos do sistema reprodutor masculino esto em andamento no nosso laboratrio. Com relao expresso de ESR1 e ESR2, o tratamento com fulvestranto causou uma diminuio da expresso do ESR1 na cauda do epiddimo quando comparado ao controle. Na cabea do epiddimo, a expresso deste receptor no foi alterada. Por outro lado, a expresso do ESR2 foi diminuda na cabea do epiddimo e no alterada na cauda do epiddimo quando comparado ao controle, sugerindo uma modulao da expresso destes receptores dependente da regio do tecido analisada. A modulao da expresso do ESR1 e ESR2 em outros tecidos do sistema reprodutor masculino esto em andamento. Os resultados indicam a presena do RNA mensageiro para o GPR30 em rgos do sistema reprodutor masculino e a regulao da expresso de ESR1 e ESR2 pelo fulvestranto dependente da regio do epiddimo analisada. Os mecanismos envolvidos nesta regulao, como a metilao dos promotores dos genes que codificam esses receptores, esto em andamento. Experimentos preliminares com o 17-estradiol e fulvestranto em clulas epiteliais de mama (controle) MCF10A (ER +, ER +) no induziu alterao no status de metilao da regio promotora do gene que codifica para o ESR1. Aprovao no Comit de tica em Pesquisa No.: 124/08 Participantes: Letcia Abigail de Moura Martins, Amanda Gonalves da Silva, Erica Rosanna Siu, Mariangela Correa, Miriam Galvonas Jasiulionis, Catarina Segreti Porto

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RELAXINA INDUZ PROLIFERAO DE CLULAS DE SERTOLI EM CULTURA.


Nascimento, A.R.; Cardoso, L.C.; Royer, C.; Porto, C.S.; Lazari, M.F.M. Aline Rosa do Nascimento - UNISA Maria de Ftima Magalhes Lazari - Farmacologia / Farmacologia Celular

Resumo:

Relaxina um hormnio peptdico estruturalmente relacionado insulina que ativa o receptor RXFP1, o qual est acoplado a protena G e apresenta sete domnios transmembranares. Em testculos de ratos, RXFP1 expresso em clulas de Sertoli e em espermtides alongadas (Reprod. Biol. Endocrinol. 5; 29, 2007). Estas observaes e observaes anteriores, nas quais maturao espermtica est diminuda em camundongos knockout para relaxina (Lab. Invest. 83; 1055, 2003), sugerem que relaxina pode ser um fator fundamental para o controle da espermatognese. Em homens, a relaxina produzida pela prstata e em estudos anteriores realizados em nosso laboratrio demonstramos que a prostatectomia reduziu o tamanho dos tbulos seminferos de ratos adultos (Resumo 71; PIBIC 2007). O objetivo do presente estudo foi investigar se a prostatectomia interfere na espermatognese e se a relaxina afeta a proliferao de clulas de Sertoli de ratos. A prostatectomia foi realizada em ratos Wistar de 90 dias de idade. Trinta dias depois, os animais foram sacrificados e os testculos removidos. O efeito da prostatectomia sobre a espermatognese foi observado em cortes testiculares corados com cido Peridico Schiff (PAS), e na anlise de marcadores para clulas germinativas haplides por RT-PCR: Protena tipo histona ligadora especfica para espermtides 1 (Hils1) e protamina 2 (Prm2). Embora tenhamos confirmado que a prostatectomia reduziu o tamanho dos tbulos seminferos, este procedimento no afetou o ciclo espermatognico ou os transcritos para Hils1 e Prm2. Desde que demonstramos previamente a presena de transcritos para relaxina em outros tecidos alm da prstata, a prostatectomia no provavelmente uma boa estratgia para eliminar completamente a relaxina endgena. O efeito da relaxina sobre a proliferao celular foi testado em culturas primrias de clulas de Sertoli removidas de ratos de 15 dias de idade, usando o mtodo de incorporao de [3H]-Timidina. Relaxina, 100 e 200 ng/mL, aumentou a proliferao de clulas de Sertoli em 46,71,0% e 54,60,4%, respectivamente (P<0,05). Esses resultados sugerem que a relaxina pode afetar a espermatognese atravs de um efeito sobre as clulas de Sertoli. Estudos adicionais so necessrios para esclarecer os mecanismos envolvidos. Apoio financeiro: CNPq-PIBIC, FAPESP, CAPES, CNPq. Aprovao no Comit de tica em Pesquisa No.: 1657/07 Participantes: Aline Rosa do Nascimento, Lais Cavalca Cardoso, Carine Royer, Catarina Segreti Porto, Maria de Fatima Magalhes Lazari

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Autores: Bolsista: Orientador:

Resistncia ao anoikis como um gatilho epigentico na transformao maligna de melancitos


Santiago, K.M.; Jasiulionis, M.G. KARINA MIRANDA SANTIAGO - UNIBAN Miriam Galvonas Jasiulionis - Farmacologia / Farmacologia

Resumo:

A perda de contato de uma clula com a matriz extracelular dispara reaes que culminam em morte celular, resultando na homeostase do tecido de origem. Este tipo de apoptose por perda de adeso matriz chamada de anoikis. Uma vez que propicia a sobrevivncia celular, a resistncia ao anoikis considerada uma aquisio importante no processo carcinognico, tanto em suas fases iniciais quanto para a metastatizao. Visando estudar a relao entre o crescimento independente de ancoragem e a transformao maligna, foi desenvolvido em nosso laboratrio um modelo murino de carcinognese in vitro que favorece especificamente a aquisio de resistncia ao anoikis. Este modelo de carcinognese consistiu no estabelecimento de linhagens celulares correspondendo a diferentes fases da progresso tumoral obtidas aps submeter melancitos murinos imortalizados, porm no tumorignicos, a ciclos seqenciais de bloqueio de ancoragem por 96 horas. Pelo fato deste modelo ter uma origem gentica comum, ele se tornou ideal para o estudo da contribuio de alteraes epigenticas, entre elas a metilao do DNA, na perda do controle homeosttico e no processo carcinognico. A partir da anlise da metilao do DNA nestas linhagens obtidas, constatou-se um padro de metilao alterado em relao a sua linhagem parental, sendo que este padro j se encontra alterado aps 3 a 5 horas do primeiro ciclo de cultura em suspenso, onde se observa um pico de hipermetilao global do DNA. Estas evidncias nos levaram a questionar se ciclos curtos de bloqueio de ancoragem, suficientes (5 horas e 24 horas) ou no (10 minutos) para promover alteraes na metilao do DNA, tambm so capazes de gerar linhagens com caractersticas de malignidade. At o momento foi possvel observar que as linhagens estabelecidas a partir deste procedimento diferem em relao morfologia, ao nvel de metilao global do DNA, expresso de DNA metiltransferases (Dnmts) e resistncia ao cultivo independente de PMA. Correlacionando o impacto das alteraes na metilao do DNA com a aquisio de um fentipo celular transformado resistente ao anoikis, este estudo poder contribuir com informaes sobre as bases moleculares epigenticas da gnese do melanoma. Aprovao no Comit de tica em Pesquisa No.: 0184/07 Participantes: Karina Miranda Santiago, Miriam Galvonas Jasiulionis

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Sntese de ceto-lactonas atravs da clivagem oxidativa de -hidrxi-teres promovida por RuO4


Longo Jr., L.S.; Vilalba, B.T. Bruno de Tomasi Vilalba - UNIFESP Luiz Sidney Longo Junior - Cincias Exatas e da Terra / Qumica Orgnica

Resumo:

Lactonas de anel mdio (aquelas contendo de 8 a 11 membros) so alvos sintticos importantes e tambm unidades estruturais presentes em um grande nmero de produtos naturais biologicamente ativos. Dentre elas, podemos citar como exemplos as Xestodecalactonas A-C, as quais foram isoladas de fungos Penicillium montanense coletados da superfcie das esponjas marinhas Xestospongia exgua. Tais lactonas apresentaram importante atividade antifngica contra Candida albicans. Deste modo, visamos dar continuidade ao estudo da clivagem oxidativa de -hidrxi-teres bicclicos promovida por tetrxido de rutnio cataltico, com o objetivo de aplicar a metodologia desenvolvida na sntese de decalactonas com interesse farmacutico, mais especificamente benzo ceto-lactonas de 10 membros estruturalmente relacionadas s xestodecalactonas A-C, as quais sero avaliadas quanto s suas propriedades biolgicas (atividade antifngica, antibacteriana e antiprotozoria). Inicialmente, preparamos 3-alquenis aromticos derivados de tetralonas comerciais em trs etapas: (1) reao de Reformatsky entre a cetona (tetralona e 6-metxi -tetralona) e 2-bromo propionato de etila; (2) desidratao dos -hidrxi-steres intermedirios promovida por cido clordrico em THF; (3) reduo dos steres insaturados com LiAlH4 em THF. Os 3-alquenis assim obtidos foram submetidos reao de epoxidao da ligao dupla carbono-carbono, utilizando dimetildioxirana (DMD) gerada in situ pela reao de OXONE com acetona, a qual levou aos respectivos 3,4-epxi lcoois esperados em rendimentos moderados. Tais epxi lcoois mostraram-se levemente instveis. Tentativas de ciclizao dos 3,4-epxi lcoois catalisada por base (10 equivalentes de KOH em DMSO 75% aquoso; condies de diluio elevada) foram infrutferas, sendo que, na maioria das vezes que a reao foi efetuada observamos a recuperao do material de partida, e no a formao dos -hidrxi-teres esperados. Neste momento estamos trabalhando na melhoria da reao de epoxidao dos 3-alquenis, esperando obter amostras mais puras e em maior rendimento para que sejam utilizadas na prxima etapa da sequncia reacional (ciclizao catalisada por base). Deste modo esperamos ser possvel a obteno dos respectivos -hidrxi-teres bicclicos para darmos incio segunda fase deste projeto, ou seja, o estudo da reao de clivagem oxidativa destes substratos promovida por tetrxido de rutnio em condies catalticas. Participantes: Luiz Sidney Longo Junior, Bruno de Tomasi Vilalba

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Sistema renina-angiotensina intra-renal: Inibio da atividade da renina pelo lipopolissacardeo de E. coli, in vivo
Almeida, W.S.; Schor, N.; Castanheiro, A.O. Aline Oliveira Castanheiro - UNICID Nestor Schor - Medicina / Nefrologia

Resumo:

Sepse e choque sptico so causas freqentes de morte por mltiplas disfunes orgnicas incluindo a Insuficincia Renal Aguda. Recentemente, demonstramos que a administrao de LPS de E. coli reduziu significantemente, de forma precoce e persistente, os nveis de Ang I e Ang II nas CMHI atravs da reduo da atividade da renina e/ou enzimas com atividade semelhante sobre o angiotensinognio. Se reproduzvel in vivo, a inibio do SRA local pelo LPS demonstrada em nossos experimentos teria importncia clnica dado o papel normalmente desempenhado pela Ang II sobre as CM e dessas na auto-regulao da hemodinmica glomerular, assim como, pelos efeitos da Ang II sobre as modificaes celulares endoteliais e epiteliais tubulares. No presente estudo, identificaremos a presena do LPS no tecido renal, mais especificamente na regio mesangial glomerular. Em seguida determinaremos a gerao de Ang I e Ang II local e atividade enzimtica da renina no modelo de perfuso do rim isolado para dosagem da atividade da renina. Mtodos: Sero utilizados ratos Wistar, machos, adultos, com peso variando entre 200 e 300g. Para mimetizar a sepse in vivo, ser utilizado LPS-FITC em diferentes concentraes, sendo injetado diretamente na veia femoral para alcanar distribuio sistmica. Aps 1h, os rins sero perfundidos in situ com soro fisiolgico gelado, e imediatamente removidos. Os fragmentos de rim sero fixados e analisados por microscopia de fluorescncia, para identificao de LPS de E. coli marcado no interior dos glomrulos. As CM sero identificadas por colorao habitual. Para excluir efeitos secundrios da administrao do LPS sobre o funcionamento renal, rins sero removidos aps perfuso in situ com soro fisiolgico gelado + heparina e montados para perfuso contnua. LPS de E. coli em concentraes crescentes ser acrescentado soluo de perfuso. A seguir fragmentos renais sero fixados e analisados por imunohistoqumica (IHQ) para SRA. Alm disso, aps perfuso extra-corprea, glomrulos renais sero isolados para dosagem da atividade da renina. A atividade da renina ser mediada no extrato glomerular incubado com inibidores de proteinases e angiotensinognio recombinante humano em excesso. Resultados: Ainda no foi possvel diferenciar se o nvel de fluorescncia observado nos vrios compartimentos do tecido renal era decorrente da presena de LPS-FITC ou da autofluorescncia existente no tecido renal. Outras estratgias a serem testadas: 1Canular artria femoral e introduzir a ponta do cateter na aorta acima das artrias renais e injetar o LPS-FITC para obter maior concentrao renal. 2Pesquisar na literatura se existe disponvel comercialmente LPS conjugado com outro marcador. 3Injeo de LPS no marcado e realizar imunohistoqumica utilizando anticorpo primrio anti-LPS e anticorpo secundrio marcado. Participantes: Waldemar S. Almeida, Nestor Schor, Aline Oliveira Castanheiro

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Autores: Bolsista: Orientador:

Uso de transposon sleeping beauty e integrase phi-C31 para expresso do gene colgeno VII em fibroblasto
Pinheiro, J.R.S.; Stilhano, R.S.; Matsumoto, P.K.; Han, S.W. Jhonatan Rafael Siqueira Pinheiro - UNIFESP Sang Won Han - Biofsica / Fsico Qumica

Resumo:

O gene do colgeno tipo VII (COL7A1) uma complexa estrutura que transcreve um RNA mensageiro de 9,2 Kb que, por sua vez, traduzido para a formao de uma cadeia polipeptdica de 300 KDa nos queratincitos da epiderme e, em menor grau, nos fibroblastos da derme. Tais cadeias polipeptdicas, no meio extracelular, interagem para a formao de fibrilas ancorantes, que unem a epiderme derme. Uma mutao nesse gene pode levar a uma ausncia ou diminuio da expresso da protena colgeno tipo VII na pele, levando ao aparecimento de Epidermlise Bolhosa Distrfica (EBD). A EBD um grupo de doenas hereditrias caracterizadas pela formao de bolhas aps mnimos traumas e pela separao tecidual que ocorre abaixo da membrana basal, ao nvel das fibrilas ancorantes. uma doena para a qual ainda no h tratamento eficaz, sendo a terapia gnica uma alternativa teraputica promissora. Os vetores de plasmdeos tm vantagem em relao aos vetores virais por serem mais seguros e fceis de manipular e produzir. No entanto, para as doenas genticas que requerem expresses duradouras, estes vetores no so adequados. Para isso, os sistemas integrativos derivados de transposase Sleeping Beauty (SB) e de integrase phi-C31 do fago de Streptomyces podem ser acoplados aos plasmdeos. O SB um transposon cuja estrutura molecular consiste de um gene que codifica para uma transposase, que reconhece genes entre dois terminais invertidos repetidos (IRs) para translocao. Introduzindo um gene teraputico entre as seqncias IRs e o gene da transposase no mesmo ou em vetores distintos, possvel aplicao para terapia gnica. J a integrase phi-C31 responsvel pela recombinao do stio attP (presente no fago) com o stio attB (presente no genoma de bactria). Para a terapia gnica, pode-se construir um vetor para expressar a recombinase e outro contendo o gene teraputico e a sequencia attB, que recombinar nos stios pseudo-attPs presentes nos genomas de mamferos. O objetivo deste projeto a construo de vetores plasmidiais para se obter alta expresso do gene do colgeno tipo VII a longo prazo em fibroblastos utilizando os sistemas SB ou phi-C31. Para obter o gene COL7A1 a partir do plasmdeo pCOL7A1 (cedido pela Dra. Michele P. Calos), a regio do gene COL7A1 foi seqenciada para localizar os stios de restrio usando o seqenciador automtico ABI PRISM 3700 avant. Duas combinaes de digesto enzimtica foram realizadas para liberar o fragmento correspondente ao COL7A1: Hind III e Eco RI ou Hind III e Eco RV, e os fragmentos liberados foram purificados do gel de agarose. Este fragmento de DNA correspondente ao gene COL7A1 ser usado para construo de vetores de expresso posteriormente. Para a construo do vetor uP-attB (4,5 kb) (vetor de expresso que possui o promotor CMV humano e o stio de reconhecimento para a integrase attB), o stio attB foi retirado do plasmdeo pTA-attB (4,1 kb) pela clivagem com as enzimas BamHI e EcoRV e o vetor uP foi linearizado pela clivagem com a enzima BspHI. O plasmdeo uP e o stio attB foram purificados do gel e tratados com a Klenow polimerase. Posteriormente, os dois fragmentos de DNA foram ligados com uso de T4 DNA ligase. As bactrias DH10B competentes foram transformadas com o produto de ligao anterior, e posteriormente, os plasmdeos das colnias de bactrias foram analisados individualmente para localizar o vetor uP-attB. Aps anlise de 18 colnias, identificamos uma colnia com padro de restrio esperado. Esta colnia ser amplificada para obteno de plasmdeo em grande quantidade para introduzir o gene COLA71. Para construo do vetor pT2BH-COL7A1, para uso com o sistema SB, fez-se a clivagem do pT2BH-GFP com a enzima SpeI, para a obteno do vetor pT2BH (3,5 kb) sem GFP. O tempo de reao foi 15 min para ter digesto parcial. A digesto parcial foi necessria devido a presena de vrios stios SpeI. Atualmente, estamos analisando esta construo, e tendo obtido o produto esperado, o gene COL7A1 ser introduzido nesta construo. Aprovao no Comit de tica em Pesquisa No.: 0636/08 Participantes: Jhonatan Rafael Siqueira Pinheiro, Roberta Sessa Stilhano, Priscila Keiko Matsumoto, Sang Won Han

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Verificao da importncia da melanina na resistncia a mltiplas drogas (MDR) em melanoma murino


Thobias, E.A.; Rodrigues, E.G. Eliana de Aguiar Thobias - UNISA Elaine Guadelupe Rodrigues - Microbiologia, Imunologia e Parasitologia / Biologia Celular

Resumo:

O melanoma maligno possui grande resistncia a vrias drogas antineoplsicas e os mecanismos que geram essa resistncia ainda no esto bem definidos. Alguns estudos sugerem a heterogeneidade tumoral e a presena de melanossomos como possveis mecanismos de resistncia a mltiplas drogas observada no melanoma. Alguns estudos utilizam clulas tumorais de diferentes origens (melanoma e carcinoma epidermide) para verificar a importncia do melanossoma nos mecanismos de eliminao dos quimioterpicos. Em nosso laboratrio desenvolvemos um modelo constitudo por 2 clones celulares que foram isolados por diluio limitante a partir de uma linhagem de clulas de melanoma murino, a B16F10-Nex2. Tanto o clone Nex2B amelantico e o clone Nex2D melantico contm melanossomas, devido sua origem a partir de clulas pigmentadas. Nosso objetivo foi analisar a resistncia desses clones Cisplatina, uma vez que foi demonstrado que a presena de melanina leva as clulas tumorais a eliminarem essa droga via melanossomas. Pretendemos observar se nosso clone melantico apresentava a mesma resistncia Cisplatina observada em outras linhagens celulares, e se a ausncia da melanina poderia afetar a sensibilidade/resistncia a um ciclopaladado ainda em fase experimental de estudos. Nossos resultados demonstraram que o clone melantico Nex2D mais resistente Cisplatina do que o clone Nex2B, e que a presena da melanina no interferiu na sensibilidade dos clones ao ciclopaladado C7A. Participantes: Eliana de Aguiar Thobias, Elaine Guadelupe Rodrigues

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Cincias Bsicas Morfolgicas

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ALTERAES BIOMTRICAS, BIOQUMICAS E COMPORTAMENTAIS EM CAMUNDONGOS ADULTOS EM RESPOSTA PRIVAO DE SONO DE SUAS MES APS A FERTILIZAO.
Fernandes, L.; Calegare, B.F.A.; Tufik, S.; D'Almeida, V. Leandro Fernandes - UNIFESP Vnia D'Almeida - Cincias da Sade / Cincias da Sade

Resumo:

Durante a gestao, 2/3 das mulheres consideram seu sono anormal. Alteraes no padro de sono j ocorrem no primeiro trimestre da gestao devido a alteraes nas concentraes hormonais. Pouco se sabe sobre a importncia das perturbaes do sono durante a gravidez. Porm, recentes estudos em humanos e animais tm demonstrado que alteraes no ambiente uterino causadas por estresse, podem ter impacto sobre o desenvolvimento fetal. Tendo em vista que alteraes no padro de sono podem afetar o desenvolvimento dos filhotes, o objetivo do presente estudo foi identificar as alteraes em diferentes aspectos do desenvolvimento da prole cujas mes foram privadas de sono. Dentre eles, avaliamos alteraes biomtricas (desenvolvimento ponderal, comprimento naso-anal e ndice de Lee), alteraes comportamentais (labirinto em cruz elevado) e bioqumicas (marcadores de estresse oxidativo - catalase e superxido dismutase). Foram usados camundongos fmeas da linhagem Swiss com 3 meses de idade e foi feito esfregao vaginal das fmeas para identificao da fase do ciclo estral. Depois de observados dois ciclos completos foram colocados camundongos machos para fertilizao das fmeas e, quando identificado um plugue vaginal a olho nu ou espermatozides no esfregao, foi considerado o dia zero da prenhez. Determinado o dia zero da prenhez, os animais foram distribudos em 4 subgrupos: fmeas privadas de sono paradoxal por 72 horas pelo mtodo das plataformas mltiplas (PM 72); fmeas privadas de sono pelo mtodo de manipulao gentil (gentle handling) por 6 horas, com 24 horas (GH 24) e com 48 horas (GH 48) de prenhez; e o grupo controle, que pde dormir normalmente (CT). Aps o nascimento dos filhotes, os animais foram submetidos mensurao da massa e do comprimento naso-anal (CNA). A partir destes dados, obtivemos um ndice de massa corprea, o ndice de Lee. Estas medidas foram realizadas no 3, 17, 31, 42, 61, 72 e 82 dias de vida dos animais. Quando atingiram a vida adulta (3 meses), os camundongos foram testados no labirinto em cruz elevado. Os registros comportamentais se deram pelo nmero de entradas nos braos fechados (fuga) e pelo tempo em que permaneceram nos braos abertos (esquiva). Tambm foi avaliada a locomoo do animal, sendo registrado o nmero de entradas em cada brao do labirinto. Aps avaliao comportamental, os animais foram sacrificados por decapitao, e o sangue coletado em tubos contendo EDTA. As clulas vermelhas, que foram lavadas para obteno do hemolisado, foram utilizadas na dosagem de catalase (CAT) e de superxido dismutase (SOD), baseados nos mtodos espectrofomtricos de Adamo (1989) e McCord e Fridovich (1969), respectivamente. Os dados foram analisados por meio de uma anlise de varincia (ANOVA) de uma via e posteriormente, quando necessrio, realizou-se teste Tukey. Os dados foram representados pela mdia desvio padro. O nvel de significncia considerado foi p<0,05. O programa STATISTICA 6.0 foi empregado para efetuar as anlises. A avaliao do desenvolvimento biomtrico no 3 dia de vida apresentou diferenas na evoluo ponderal no grupo GH 48 quando comparado ao controle. Camundongos machos do grupo GH 24 diferiram do grupo controle na evoluo ponderal, CNA e ndice de Lee. O grupo GH 48 diferiu do controle apenas em relao ao ndice de Lee. As fmeas do grupo GH 48 e PM 72 tiveram evoluo ponderal e CNA diferentes do controle. O grupo PM 72 foi diferente do controle quando comparamos o ndice de Lee. Na anlise do comportamento pelo mtodo do labirinto em cruz elevado, o grupo PM 72 diferiu do grupo controle tendo maior nmero de entradas no brao aberto. O grupo GH 48 diferiu do controle quanto maior permanncia no brao fechado, esta averso pelos braos abertos apresenta vrias propriedades que pode indicar uma situao provocadora de "medo" ou "ansiedade". Na avaliao do estresse oxidativo, os machos do grupo GH 24 apresentaram diminuio na atividade da enzima SOD, mas no na atividade da enzima CAT. Conclumos que a privao de sono das mes em diferentes estgios da gestao pode influenciar nas diferentes respostas do desenvolvimento da prole. (Apoio financeiro: CNPq / PIBIC, FAPESP e AFIP) Aprovao no Comit de tica em Pesquisa No.: 1225/06 Participantes: Leandro Fernandes, Bruno Frederico Aguilar Calegare, Sergio Tufik, Vnia DAlmeida

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ANLISE DO PADRO DE METILAO DO GENE SIRT1 NO ENVELHECIMENTO


Lisboa, L.C.F.; Gigek, C.O.; Silva, P.N.O.; Leal, M.F.; Lima, E.M.; Labio, R.W; Payo, S.L.M.; Assumpo, P.P.; Burbano, R.R.; Smith, M.A.C. Luara Carolina Frias Lisboa - UNIFESP Marlia de Arruda de Cardoso Smith - Morfologia e Gentica / Gentica

Resumo:

O envelhecimento se refere deteriorao das funes fisiolgicas e s mudanas fenotpicas que afetam os membros de uma espcie com o passar do tempo. Esto envolvidos no processo de envelhecimento genes relacionados ao reparo de DNA, ao estresse oxidativo, resposta restrio calrica, entre muitos outros. Acreditase que alteraes epigenticas possam gerar modificaes na expresso gnica e assim modular o processo de envelhecimento. Essas alteraes podem ser ocasionadas pela modificao na freqncia e nos padres de metilao do DNA, ocorridas em ilhas CpGs localizadas dentro de promotores gnicos. A metilao, em geral, inibe a transcrio gnica, impedindo assim a formao do RNA mensageiro e a produo da protena relacionada a ele, influenciando inmeros aspectos do ciclo celular. O gene SIRT1 codifica uma protena da famlia das sirtunas, desacetilases conservadas evolutivamente, de mesmo domnio cataltico que a do gene ortlogo em leveduras, Sir2. Sugere-se que essas protenas sejam sensoras do estado oxidativo e metablico das clulas, e que estejam profundamente relacionadas ao combate ao envelhecimento celular. SIRT1 est envolvida na regulao transcricional de diversos genes, como o p53, influenciando aspectos fisiolgicos como sobrevivncia celular, diferenciao e metabolismo. Neste trabalho foi analisada a freqncia de metilao do promotor do gene SIRT1 pela tcnica de bissulfito de sdio aliada a MS-PCR, em amostras de DNA de 40 jovens e 48 idosos. O gene SIRT1 apresentou-se metilado em 14,6% dos idosos e em 2,5% dos jovens, o que evidenciou uma tendncia (p=0,0668) maior freqncia de metilao no grupo de idosos. Estes dados sugerem que o gene SIRT1 pode ser um possvel marcador e modulador do envelhecimento, regulado epigeneticamente. J foi relatado que o aumento da expresso de SIRT1 pode contribuir para o aumento da longevidade de clulas de mamferos, principalmente quando aliado restrio calrica. Por isso, o estudo do controle epigentico sobre a expresso desta protena pode ser interessante para novas estratgias teraputicas no s relacionadas ao envelhecimento, mas tambm s doenas associadas a ele. Aprovao no Comit de tica em Pesquisa No.: 266/06 Participantes: Luara Carolina Frias Lisboa, Carolina de Oliveira Gigek, Patrcia Natlia Oliveira da Silva, Mariana Ferreira Leal, Eleonidas Moura Lima, Roger William de Labio, Spencer Luiz Marques Payo, Paulo Pimenta Assumpo, Rommel Rodriguez Burbano, Marlia de Arruda Cardoso Smith

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Autores: Bolsista: Orientador:

Anlise do perfil epidemiolgico das espcies de Candida relacionadas aos episdios de Infeco de Corrente Sangunea no Hospital do Cncer- A. C. Camargo.
Mascia, A.R.; Colombo, A.L.; Rodrigues, B.Q.; Guimares, T.; Geiger, D.C.P.; Janini, L.M.R. Adriana Rainha Mascia - UNIFESP Luiz Mario Ramos Janini - Microbiologia, Imunologia e Parasitologia / Microbiologia

Resumo:

Introduo: A incidncia de infeces da corrente sangnea (ICS) causadas por espcies de Candida tem aumentado dramaticamente em diferentes regies do mundo, particularmente entre pacientes em uso de antibiticos, de terapias imunossupressoras ou nutrio parenteral, bem como entre pacientes submetidos a procedimentos mdicos invasivos como cateteres intravasculares, hemodilise e cirurgia abdominal. Atualmente, as espcies de Candida correspondem quarta espcie mais comumente isolada em episdios de ICS nos hospitais norte-americanos, respondendo por cerca de 10% de todas as ICS com documentao microbiolgica . Apesar de todo conhecimento sobre a epidemiologia e fatores de risco para aquisio de candidemia, esta complicao infecciosa associa-se ainda hoje a altas taxas de mortalidade. Estudos na Amrica do Sul sugerem que ICS causadas por espcies de Candida tm surgido como um importante problema, mas os dados disponveis sobre sua real incidncia ainda so limitados. Dados obtidos de estudos multicntricos realizados em centros mdicos do Brasil e Argentina sugerem que espcies de Candida no-albicans sejam tambm muito freqentes em nossos hospitais. Contudo, diferente da realidade epidemiolgica dos centros mdicos dos EUA e Europa, nos pases da Amrica Latina parece haver predomnio de espcies no-albicans sensveis a fluconazol, particularmente C. parapsilosis e C. tropicalis. No Brasil, dados sobre a ocorrncia de resistncia entre isolados de diferentes espcies de Candida sp. relacionadas a ICS so ainda limitados. Objetivo: 1-Avaliar a distribuio de espcies de Candida relacionados aos episdios de ICS em pacientes oncolgicos. 2-Avaliar o perfil de susceptibilidade aos antifngicos de espcies de Candida relacionados aos episdios de ICS em pacientes oncolgicos. Mtodo: Trata-se de um estudo prospectivo observacional para a caracterizao de episdios de candidemia em um hospital oncolgico de So Paulo. Sero includos neste projeto apenas pacientes admitidos neste hospital que apresentarem pelo menos uma hemocultura positiva para espcies de Candida. Anlise microbiolgica: todas as amostras de Candida sp. que forem isoladas em hemoculturas de pacientes do estudo sero transferidas ao Laboratrio Especial de Micologia da UNIFESP. O transporte ser realizado em temperatura ambiente, sendo o cultivo da amostra problema realizado em meio de Sabouraud com cloranfenicol. Chegando ao laboratrio, o cultivo inicial ser realizado em meio cromognico seletivo para leveduras (ChromAgar-Candida, Paris), no sentido de avaliar a pureza e viabilidade da amostra. Aps a confirmao da pureza e viabilidade de cada amostra, estas sero identificadas ao nvel de espcie atravs de metodologia convencional. Sero realizados microcultivos para estudo das caractersticas micromorfolgicas das leveduras e o perfil bioqumico das mesmas ser avaliado pelo sistema comercial ID32C (bioMrieux-Paris). Aps a correta identificao, todas as amostras de Candida sero avaliadas com relao a sua susceptibilidade a anfotericina B, fluconazol, itraconazol, voriconazol e caspofungina. Proteo dos pacientes sob estudo: esta pesquisa no envolver contato direto com os pacientes participantes do estudo e no envolve risco para os mesmos. O anonimato pessoal dos pacientes ser mantido. Resultados parciais: Foram identificadas 12 amostras. Destas sete so Candida albicans, trs so C. parapsilosis, uma C. krusei e uma C. tropicalis. As 12 amostras pertenciam a 9 pacientes, dois deles apresentaram mais que um episdio. Os dados clnicos dos pacientes ainda esto sendo coletados. Nenhum teste de sensibilidade foi realizado at o presente momento. Discusso: Nossos resultados, at o momento, so insuficientes para chegarmos concluses ou para realizarmos uma comparao sobre diferenas epidemiolgicas entre pacientes com doenas oncolgicas e no-oncolgicas. Mas ressaltamos a importncia do presente trabalho, para a realizao de um perfil epidemiolgico de candidemia em pacientes com cncer e para a investigao da sensibilidade das espcies de Candida aos antifngicos. Ao decorrer da pesquisa, enfrentamos dificuldades quanto a coleta de dados clnicos, pois dependemos da disponibilidade dos pronturios da referida Instituio. Continuidade: 1- Continuar a coleta de dados clnicos dos pacientes que apresentaram candidemia; 2- Continuar identificando as amostras e realizar testes de sensibilidade; 3- Continuar a coleta dos dados epidemiolgicos e realizar uma comparao entre os dados de pacientes oncolgicos e no oncolgicos. Aprovao no Comit de tica em Pesquisa No.: 1189/07 Participantes: Adriana Rainha Mascia, Arnaldo Lopes Colombo, Beatriz Quental Rodrigues, Thas Guimares, Dbora de Cassia Pires Geiger, Luiz Mario Ramos Janini

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Autores: Bolsista: Orientador:

Anlise do polimorfismo PstI do gene APO A-I em coorte de idosos de regio censitria de So Paulo
Furuya, T.K.; Chen, E.S.; Arajo, L.M.Q.; Ramos, L.R.; Cendoroglo, M.S.; Payo, S.L.M.; Burbano, R.R.; Smith, M.A.C. Tatiane Katsue Furuya - UNIFESP Marlia de Arruda de Cardoso Smith - Morfologia e Gentica / Gentica

Resumo:

Apolipoprotenas desempenham papel importante no transporte e metabolismo de lipdeos, e seus polimorfismos tm sido correlacionados predisposio a doenas multifatoriais ou complexas associadas idade. Polimorfismos de genes do cluster da regio 11q23 APOA-I/C-III/A-IV/A-V tm sido investigados visando sua caracterizao como fatores de risco e marcadores genticos de predisposio s dislipidemias. A apolipoprotena A-I (APOA-I) a principal componente de HDL e participa da esterificao de colesterol, como cofator da enzima lecitina-colesterol-acil-transferase, desempenhando papel importante no efluxo de colesterol de clulas perifricas e no transporte reverso de colesterol. Nveis de HDL e APO A-I esto inversamente relacionados a doenas cardiovasculares, de modo que alguns estudos revelaram associao entre seus baixos nveis plasmticos e aumento do risco de infarto agudo do miocrdio. O presente estudo pretende analisar a associao entre o polimorfismo PstI do gene APOA-I e morbidades, bem como com nveis sricos de lipdeos e fraes de albumina, creatinina, uria, hemoglobina glicosilada e glicemia em jejum em uma coorte composta por aproximadamente 330 idosos do Estudo Longitudinal do Idoso (EPIDOSO). Esta coorte constituda por 89,2% de indivduos de origem europia, 3,3% de japonesa, 1,8% do Oriente Mdio e por 5,7% de mestia ou outras. As seguintes condies tm sido investigadas: hipertenso arterial, doena cardiovascular, diabetes tipo II, obesidade, neoplasia, demncia e depresso. O DNA foi extrado a partir de sangue perifrico e a genotipagem foi feita por meio da tcnica PCR-RFLP. Estatstica descritiva, regresso logstica, teste do Qui-Quadrado e/ou exato de Fisher e teste t-Student foram utilizados. At o momento, 242 indivduos foram genotipados. As freqncias genotpicas encontram-se em equilbrio de Hardy-Weinberg (p=0,4888). A freqncia encontrada para o alelo raro (G) (9,3%) no diferiu de uma populao mediterrnea (10,7%), porm foi maior do que uma afro-americana (2,1%). Em nossa amostra, este polimorfismo no foi associado a nenhuma das condies estudadas. Na literatura, o alelo raro foi associado doena coronariana em algumas populaes, porm, esses achados foram controversos em outras populaes. Em relao aos nveis sricos, no houve associao entre o polimorfismo PstI e os nveis estudados. Estes resultados preliminares no corroboram os da literatura, que descreve que a presena do alelo raro est associada a concentraes reduzidas de APO A-I e nveis aumentados de TG plasmticos. A presena do alelo raro diminuiu os nveis de APO A-I e HDL em pacientes com doena coronariana de uma populao grega. Em populaes mediterrneas os nveis de HDL tambm aparecem diminudos nos indivduos com gentipo GG. O presente estudo ainda aumentar a amostra para confirmar as associaes e mais estudos so necessrios para confirmar esses achados. Aprovao no Comit de tica em Pesquisa No.: 1609/04 Participantes: Tatiane Katsue Furuya, Elizabeth Suchi Chen, Lara M. Q. Arajo, Luiz Roberto Ramos, Masa Seabra Cendoroglo, Spencer Luiz Marques Payo, Rommel Rodriguez Burbano, Marlia de Arruda Cardoso Smith

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Autores: Bolsista: Orientador:

Anlise dos polimorfismos +2498G>C e +484C>G do gene PPARalpha em uma coorte de idosos de So Paulo
Mazzotti, D.R.; Chen, E.S.; Furuya, T.K.; Arajo, L.M.Q.; Ramos, L.R.; Cendoroglo, M.S.; Payo, S.L.M.; Burbano, R.R.; Smith, M.A.C. Diego Robles Mazzotti - UNIFESP Marlia de Arruda de Cardoso Smith - Morfologia e Gentica / Gentica

Resumo:

Alteraes no transporte e metabolismo de lipdeos tm sido correlacionadas predisposio a doenas complexas associadas idade, tais como aterosclerose e doenas cardiovasculares. Proliferator peroxisome-activated receptor alpha (PPARalpha) um fator de transcrio nuclear ativado por cidos graxos com funo de regulao da expresso de genes envolvidos nos metabolismos lipdico e energtico, possuindo, assim, um importante papel hipolipidmico. Polimorfismos do gene PPARalpha tm sido investigados visando sua caracterizao como fatores de risco e marcadores genticos de predisposio s dislipidemias. O polimorfismo +2498G>C, localizado no ntron 7 deste gene, foi associado a menor expresso de PPARalpha in vitro. Portadores do alelo C possuem maior progresso de aterosclerose. Em relao ao polimorfismo +484C>G, o alelo G (valina) possui maior atividade transcricional na presena de altas concentraes de ligante in vitro. Alm disso, foi verificado que este polimorfismo est associado a variaes nas concentraes plasmticas de colesterol total, LDL, APO B, HDL e APO A-I, alm de estar relacionado aterosclerose. O objetivo do presente estudo : 1) avaliar a associao dos polimorfismos +2498G>C e +484C>G do gene PPARalpha com as seguintes morbidades: doena cardiovascular, diabetes tipo II, obesidade, neoplasia, demncia, depresso e hipertenso arterial; 2) investigar se as freqncias genotpicas desses polimorfismos encontram-se em equilbrio de Hardy-Weinberg; 3) observar a associao entre estes polimorfismos com nveis sricos de lipdeos, fraes de albumina, creatinina, uria, hemoglobina glicosilada e glicemia em jejum em uma coorte composta por cerca de 330 idosos do Estudo Longitudinal do Idoso (EPIDOSO). Esta coorte constituda por 89,2% de indivduos de origem europia, 3,3% de japonesa, 1,8% do Oriente Mdio e 5,7% mestia ou outras. O DNA foi extrado a partir de sangue perifrico e a genotipagem foi feita por meio da tcnica PCR-RFLP. Estatstica descritiva, regresso logstica, exato de Fisher e teste tStudent foram utilizados. At o presente momento, 247 indivduos foram genotipados para o polimorfismo +2498G>C. Em nossa amostra, a freqncia do alelo C do polimorfismo +2498G>C foi de 21,26%, semelhante freqncia em outras populaes de origem europia, como populaes finlandesa (13,4%), inglesa (17,4%), russa (16,1%) e alem (17%-19%). Alm disso, as freqncias genotpicas encontram-se em equilbrio de Hardy-Weinberg em nossa amostra ( 2=3,387 e p=0,0657). Em nossos achados, no foi encontrada associao entre este polimorfismo e as morbidades estudadas. Portadores do alelo C, entretanto, apresentaram menores nveis de triglicrides (p=0,003) e VLDL (p=0,010), mostrando um efeito protetor desse alelo para doenas cardiovasculares. PCR para o polimorfismo +484C>G j foi padronizada. O tamanho da amostra, no momento, insuficiente para realizar associaes estatsticas. A continuidade nos estudos de associao entre polimorfismos genticos e doenas complexas em idosos pode fornecer fatores de risco, que podero subsidiar diagnsticos, prognsticos e tratamento alm de permitir uma melhor compreenso fisiopatolgica destes genes na populao idosa brasileira. Financiamento: CNPq, CAPES, FAPESP. Aprovao no Comit de tica em Pesquisa No.: 1609/04 Participantes: Diego Robles Mazzotti, Elizabeth Suchi Chen, Tatiane Katsue Furuya, Lara M. Q. Arajo, Luiz Roberto Ramos, Masa Seabra Cendoroglo, Spencer Luiz Marques Payo, Rommel Rodriguez Burbano, Marlia de Arruda Cardoso Smith

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Autores: Bolsista: Orientador:

Anlise molecular do gene receptor de andrgenos como candidato gnese da pr-eclmpsia em uma casustica de pacientes do estado de So Paulo
Miotto, A.; Vretos, C.; Ramos, E.S.; Alonso, L.G. Andr Miotto - UNIFESP Lus Garcia Alonso - Morfologia e Gentica / Anatomia Descritiva e Topogrfica

Resumo:

A pr-eclmpsia (PE) (OMIM 189800) caracteriza-se pelo aumento da presso arterial e proteinria, aps 20 semanas de gestao. mais comum em primigestas e nos extremos da vida reprodutiva feminina (antes dos 18 e aps os 35 anos de idade). Nos pases desenvolvidos a progresso para eclmpsia (E) uma das maiores causas de morte materna e fetal. Apresenta-se como resultado de mudanas patolgicas no desenvolvimento placentrio. O papel gentico na pr-eclmpsia amplamente aceito, mas o modo de herana controverso. Alguns pesquisadores sugerem herana autossmica recessiva ou um gene dominante com penetrncia incompleta. Estudos sobre possveis genes reguladores da susceptibilidade para a pr-eclmpsia tm sido realizados; todos na tentativa de associar dados epidemiolgicos ao modelo de transmisso. Vrios genes candidatos so importantes para o desenvolvimento fetal/placentrio e vrios estudos tm evidenciado que os nveis de andrgenos esto elevados em pacientes com PE. Concentraes de testosterona total quanto livre mostraram-se significantemente mais altas em mulheres com PE do que em controles. Interessante o fato de que os nveis altos de andrgenos podem permanecer altos at 17 anos aps uma gravidez preclmptica. O presente trabalho teve como objetivos verificar a presena de mutaes no gene receptor de andrgenos (AR) e correlacion-las com o desenvolvimento de PE/E. O estudo foi realizado utilizando-se 5 ml de sangue perifrico materno, atravs de tcnicas de Biologia Molecular [Reao em Cadeia da Polimerase (PCR)], e corrida em gel de poliacrilamida. Foram estudadas 10 pacientes diagnosticadas com PE/E em comparao com quatro indivduos controle do sexo masculino e quatro do sexo feminino. No foram encontrados padres de banda alterados, em comparao com o grupo controle e as pacientes, em nenhum dos oito exons analisados do gene AR. Nossos dados sugerem que o gene AR no seja o principal fator gentico atuando no desenvolvimento de PE/E, mas estudos com maiores amostras de pacientes devem ser realizados para confirmar estes achados. Alguns autores propem uma complexa interao entre dois ou mais genes maternos, fatores ambientais e gentipo fetal; uma combinao de contribuio gentica materna, fetal e paterna (atravs do feto) ou interao materno-fetal. provvel que a susceptibilidade para pr-eclmpsia seja devida a um ou mais genes, agindo na me e no feto, modificado por vrios fatores ambientais. A contribuio gentica nos riscos para pr-eclmpsia pode depender das caractersticas da populao estudada (etnia, gravidade da doena, idade materna por ocasio da gestao). Em concluso, a anlise de nossa casustica nos fez desconsiderar o gene AR como candidato gnese da PE. Aprovao no Comit de tica em Pesquisa No.: 1351/2004 Participantes: Andr Miotto, Christina Vretos, Ester Silveira Ramos, Lus Garcia Alonso

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Autores: Bolsista: Orientador:

Anlise Morfolgica e Catalogao de Esporos de Fungos em Coletas de Chuva Polnica, Floresta Ombrfila Mista, Sul do Brasil
Bitencourt, A.L.V.; Moraes, L.S. Lais de Souza Moraes - UNIFESP Ana Luisa Vietti Bitencourt - Cincias Biolgicas /

Resumo:

A anlise das caractersticas morfolgica de esporos de fungos constitui a base de dados para a formao de um catlogo de referncia de esporos de fungos, importante instrumento de estudo e consulta para pesquisadores e alunos nas reas de palinologia, botnica, ecologia, cincias ambientais e da sade. O trabalho realiza-se no mbito do Programa de Educao Tutorial (PET), o primeiro da Universidade Federal de So Paulo e em fase de implementao, vinculado ao curso de Cincias Biolgicas do Campus Diadema, constitui um programa temtico na rea de Meio Ambiente e Uso Sustentvel dos Recursos Naturais. Os esporos so as estruturas de reproduo dos fungos, presentes tanto nas formas de reproduo sexuada e assexuada. Esporos e plens esto dispersos no ar e, alm de refletiram as caractersticas do ambiente, so causadores, muitas vezes, de patologias. A Anlise e montagem da coleo de referncia tem incio a partir da coleta de chuva polnica, realizada na Reserva Ecolgica de Aracuri, no Estado do Rio Grande do Sul, no domnio da Floresta Ombrfila Mista (floresta com Araucaria). Um dos objetivos dessa coleo, alm do catlogo, de caracterizar e comparar a ocorrncia de esporos de fungos em diferentes sistemas vegetacionais, atravs de coletas em outras reas, englobando, por exemplo, o domnio da Floresta Ombrfila Mista (floresta Atlntica). A coleta feita a partir da instalao de coletores tipo Oldfield, formado por um funil de 17 cm de boca, fibra de l de vidro no interior, uma tela com dimetro 0,062mm fixada na abertura basal do funil para evitar a fuga do material durante as chuvas e uma rede externa que protege a l de vidro no interior do funil. Os coletores so recolhidos aps o perodo de 1 ano e o material retido na l de vidro extrado pelo processo qumico denominado de acetlise. O material acetolizado fixado em lminas delgadas. A anlise dos esporos feita mediante varredura de lminas em microscpio ptico. Os gros so medidos e fotografados, pela captura da imagem e, posteriormente, editados. A identificao das estruturas morfolgicas dos esporos realizada atravs de alguns elementos chaves, destacando-se: a) nmero de Septos, linhas transversais ou longitudinais no interior dos esporos ou das hifas, b) nmero de clulas ou espaos delimitados pelos septos, c) presena ou no de fendas germinativas, aberturas na parede do esporo ou plasma germinal, d) nmero de poros, aberturas ou reas de fraqueza na parede do esporo, podendo apresentar diferentes formas e estruturas, e) pela cor, podendo ser hialino ou marrom escuro e d) tipo de ornamentao, podendo ser lisos, equinados, punctados, reticulados, estriados. A nomenclatura baseada pelas caractersticas morfolgicas, por exemplo pelo nmero de clulas e septos: unicelulares (amenosporo), duas clulas (didimosporo), trs clulas (fragmosporo), multicelulares com septos transversais e longitudinais (dictiosporo), em forma de estrela (estaurosporo) em espiral (helicosporo). A cor pode tambm caracterizar os gros em hialinos,(incolores) e feosporos (colorao escura). Alm disso, outros aspectos tambm so considerados como o nmero de poros: inaperturado (sem poro), monoporado (um poro), diporado (dois poros), triporado (trs poros) ou poliporado (mais de quatro poros), ou ainda pela ornamentao (liso, equinado, punctado ou verucado). Finalmente, a forma tambm considerada: ovalado, elptico, bastonete, periforme ou globular. Alm dos esporos so tambm analisados as hifas, filamentos de clulas que formam o miclio, e frutificaes ou corpos frutferos. Todas essas caractersticas so registradas, dimensionadas e fotografadas, com a perspectiva de montar um banco de dados para subsidiar a montagem do Catlogo de Referncia, assim como a tentativa da classificao taxonmica. A formao desse tipo de coleo de fundamental importncia no somente para o registro dos tipos morfolgicos e taxonmicos, mas o registro da ocorrncia de esporos em relao aos ambientes de origem, ampliando banco de dados e de informaes sobre a biodiversidade polnica. Participantes: Ana Luisa Vietti Bitencourt, Lais de Sousa Moraes

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Autores: Bolsista: Orientador:

Arquitetura da bainha e do tendo do msculo oblquo superior do olho humano


Smith, R.L.; Asseituno, V.M. Vitor Asseituno Morais - UNIFESP Ricardo Luiz Smith - Morfologia e Gentica / Anatomia Descritiva e Topogrfica

Resumo:

Procedimentos cirrgicos que envolvem o tendo do msculo oblquo superior (MOS) e sua bainha, por vezes realizadas em estruturas vizinhas, como o msculo levantador da plpebra superior tm provocado complicaes. A sndrome de encarceramento do tendo do MOS uma complicao de cirurgias deste msculo e do msculo reto superior que podem causar hipertrofia e inciclotropia. O conhecimento das estruturas envolvidas pode ser til nos procedimentos cirrgicos. A importncia do tema deste trabalho vem das peculiaridades anatmicas que envolvem as estruturas: bainha, tendo e trclea, do msculo oblquo superior (MOS) do olho humano. O trabalho comeou com o estudo das poucas literaturas existentes sobre o assunto a ttulo de reviso de conhecimentos. Em seguida, fizemos dissecaes dessas estruturas sob microscpio cirrgico e observao de cortes das mesmas em microscopia de luz. O MOS o mais longo e delgado msculo extra-ocular, seu tendo direcionado pela trclea at o bulbo ocular, onde se insere na esclera. O estudo se focou nas duas bainhas pelas quais o tendo deve deslizar na dinmica do MOS, aspecto esquecido em trabalhos mais recentes. As observaes confirmaram as relaes propostas. A bainha externa relaciona-se com a gordura intra-orbitria e funde-se com as bainhas dos msculos reto superior e levantador da plpebra superior. Finas dissecaes dessa bainha expem a bainha interna. Esta possui finas trabculas que a conectam com a fscia bulbar (cpsula de Tenon) e com o tendo. Diferentemente do que ocorre na regio trans-troclear, durante a passagem do tendo pela trclea, as duas bainhas esto fundidas numa nica bainha conjuntiva. O tendo formado por fibras colgenas densamente agrupadas, enquanto que as bainhas so formadas por tecido conjuntivo pouco denso. Os resultados apresentados indicam que h uma relao funcional entre o tendo do MOS, suas bainhas e estruturas adjacentes que incluem a trclea, a gordura orbital (e suas relaes de proximidade) e os elementos da fscia orbital. A anlise destas relaes morfolgicas implica na funcionalidade do sistema, pois suas interconexes indicam que os movimentos do tendo do MOS no correspondem ao seu deslizamento dentro das bainhas, podendo-se concluir que o conjunto move-se como um todo. Isto no verdadeiro para a poro que atravessa a trclea. Aprovao no Comit de tica em Pesquisa No.: 1344/07 Participantes: Ricardo Luiz Smith, Vitor Asseituno Morais

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Autores: Bolsista: Orientador:

Avaliao da presso arterial e funo renal da prole de ratas induzidas obesidade


Abud, I.C.K.; Gomes, GN; Santos, J.M.; Fonseca, T.M.; Gil, F.Z Isabela Cristina Kirnew Abud - UNIFESP Guiomar Nascimento Gomes - Fisiologia / Fisiologia Renal e Termometabologia

Resumo:

Introduo: A obesidade, definida como deposio excessiva de gordura quando comparada a valores esperados para parmetros como estatura, sexo e idade, tem tido sua prevalncia aumentada rapidamente no mundo todo, representando um problema de sade pblica. bem conhecido que a obesidade pode levar a hipertenso, diabetes mellitus e doena cardiovascular, que podem, por sua vez, causar leso renal. Porm h poucos estudos que relacionam diretamente obesidade e leso renal. Um dos mecanismos aparentemente envolvidos nestas alteraes a produo de hormnios e molculas de sinalizao (leptina, adiponectina, inibidor de ativao de plasminognio, citocinas, protenas do sistema renina-angiotensina e resistina) pelo prprio tecido adiposo. Vrios modelos experimentais foram desenvolvidos para o estudo das alteraes funcionais causadas pela obesidade, sendo o de maior importncia o do glutamato monossdico. O glutamato monossdico (MSG) injetado em ratos no perodo neonatal causa leso hipotalmica por aumento na condutncia inica das membranas excitveis com conseqente morte de neurnios de reas do hipotlamo como o ncleo arqueado e o ncleo ventromedial, que controla a ingesto alimentar. H, como conseqncia, hipertrofia do tecido adiposo, hiperinsulinemia e alterao da resposta da secreo do hormnio de crescimento, que resulta em inadequada mobilizao de gordura e contribui para a adiposidade. Objetivo: Estudar a presso arterial e a funo renal de ratas induzidas obesidade pelo tratamento neonatal com glutamato monossdico associado sobrecarga com sacarose. Material e mtodos: Ratos Wistar foram colocados para cruzar para obteno dos filhotes. As proles com 6 filhotes fmeas receberam MSG (4g/Kg, via subcutneo) ou soluo fisiolgica, nos dez primeiros dias de vida. Os animais divididos nos grupos experimentais: Controle (C), Controle com sobrecarga de sacarose (CS), Glutamato (G) e Glutamato com sacarose (GS), foram estudados aos 3 meses de idade. Aps o desmame, C e G receberam gua para beber; CS e GS receberam soluo de sacarose a 10%. O grau de adiposidade foi avaliado pela quantidade de gordura abdominal (GA). Foram estudados: ritmo de filtrao glomerular (RFG), fluxo plasmtico renal (FPR), frao de filtrao (FF%), proteinria e excreo renal de cidos [acidez titulvel e excreo de amnio (NH4+)]. Resultados: Valores apresentados como mdiaep, p<0,05. Observamos aumento da adiposidade em G e GS visto que a quantidade de gordura abdominal nestes grupos foi significativamente maior que a dos demais grupos [GA g: C:3,330,06; G:6,550,43; CS:3,150,29; GS:5,800,41]. Quanto aos parmetros da funo renal observamos nos animais GS queda significativa dos valores de RFG e de frao de filtrao (FF%) em comparao com C e G [RFG ml/min/kg: C:9,470,21 G:9,420,25; CS:7,280,21; GS:6,790,12] [FF%: C:37,400,37; G:45,310,54; CS:42,041,20; GS:25,620,28]. A excreo de amnio tambm foi reduzida em GS [NH4+ mEq/min/kg: C:2,890,06; G:2,380,08; CS:3,060,1, GS:1,50,03]. Concluses: Os resultados mostram que os animais tratados com MSG e sobrecarga de sacarose apresentaram maior grau de adiposidade, comprometimento da funo renal com diminuio no ritmo de filtrao glomerular, na frao de filtrao e na excreo de amnio. possvel que substncias produzidas no tecido adiposo possam contribuir para essas alteraes, entretanto outros experimentos so necessrios para esclarecimento dos mecanismos envolvidos no comprometimento da funo renal destes animais. Aprovao no Comit de tica em Pesquisa No.: 0575/07 Participantes: Isabela Cristina Kirnew Abud, Guiomar Nascimento Gomes, Jacqueline Medeiros Santos, Thas Maria da Fonseca, Frida Zaladek Gil

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Autores: Bolsista: Orientador:

Avaliao do procedimento de UV-Crosslinking na viabilidade celular de trofozotos de Acanthamoeba castellanii


Freitas, D.; Santos, T. T. M. Thaliata Telles M. dos Santos - UNIFESP Denise de Freitas - Oftalmologia / Oftalmologia

Resumo:

Introduo: Amebas de vida livre do gnero Acanthamoeba so protozorios amplamente dispersos na natureza. A importncia do estudo clnico envolvendo espcies de Acanthamoeba se deve ao fato deste protozorio estar relacionado s infeces em diferentes regies do corpo humano, como crebro, epitlio cutneo e olhos. As infeces cerebrais e cutneas por Acanthamoeba spp so raras, acometendo principalmente pacientes imunodeprimidos. Por outro lado, as infeces oculares so prevalentes e envolvem, principalmente, o epitlio corneano, causando a ceratite amebiana. As ceratites por Acanthamoeba spp esto relacionadas, em geral, com aumento da populao de usurios de lentes de contato e higiene inadequada das mesmas. A infeco caracterizada pela dificuldade no diagnstico clnicolaboratorial, uma vez que se assemelham ao quadro clnico de ceratites virais, complexidade na teraputica, haja vista a ausncia de protocolo padronizado quanto ao uso de agentes antimicrobianos, e prognstico, caracterizado pela lenta recuperao do paciente. A utilizao de agentes fsicos em processos teraputicos oftalmolgicos tem sido proposta como importante alternativa aos tratamentos qumicos disponveis na atualidade. Neste aspecto, a utilizao de raios ultravioleta (UV) surge como opo para o tratamento clnico de etiologias do epitlio corneano. O cross-linking do colgeno corneano associado riboflavina (vitamina B2) uma tcnica inovadora utilizada para aumentar, mecnica e bioquimicamente, a estabilidade do tecido estromal. No entanto, no se conhece os efeitos desta terapia na viabilidade celular de Acanthamoeba spp. Objetivos: Aplicar o procedimento de UV Cross-Linking associado riboflavina (vitamina B2) em diferentes concentraes celulares de trofozotos de Acanthamoeba castellanii. Metodologia: O projeto de pesquisa proposto foi previamente submetido avaliao pelo Comit de tica em Pesquisa (CEP) da Universidade Federal de So Paulo/ Escola Paulista de Medicina, cujo protocolo se encontra identificado sob nmero 0554/08. O estudo experimental foi realizado no setor de Doenas Externa Oculares e Crnea (DEOC), em parceria com o Laboratrio de Microbiologia Ocular (LOFT) do Departamento de Oftalmologia da Universidade Federal de So Paulo (UNIFESP). O protocolo experimental foi realizado, na ntegra, em triplica, para fins de anlise estatstica, obedecendo s normas vigentes de biossegurana em experimentaes laboratoriais. Diferentes concentraes celulares de A. castellanii foram submetidas ao procedimento de UV cross-linking. Ensaios qualitativos e quantitativos de viabilidade celular foram realizados. Os resultados obtidos foram tratados estatisticamente. Resultados: Os resultados provenientes deste projeto de pesquisa podem abrir perspectivas para novos e promissores procedimentos teraputicos de infeces oculares por amebas de vida livre, com nfase em Acanthamoeba spp. Os experimentos laboratoriais, in vitro, podero indicar a viabilidade prtica da aplicao da terapia UV Cross-Linking com riboflavina, como alternativa complementar ao tratamento qumico de ceratites e outras infeces oculares amebianas, em futuras experimentaes utilizando modelo animal. Aprovao no Comit de tica em Pesquisa No.: 0554/08 Participantes: Denise de Freitas, Thaliata Telles M. dos Santos

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Coleo de plens e esporos de referncia a partir de amostras de chuva polnica


Bitencourt, A.L.V.; Araujo, A.N. Aline Neves Arajo - UNIFESP Ana Luisa Vietti Bitencourt - Cincias Biolgicas /

Resumo:

A coleo de plens e esporos de referncia est sendo desenvolvida no mbito do Programa de Educao Tutorial (PET), um programa Temtico da SESU-MEC na rea do Meio Ambiente e Recursos Naturais Sustentveis, vinculado ao curso de Cincias Biolgicas - Campus Diadema, tendo como tutora e orientadora profa. Ana Luisa Vietti Bitencourt. O objetivo da coleo de formar um catlogo, contendo informaes e um banco de dados sobre os aspectos morfolgicos, ocorrncia e disperso dos plens e de esporos no ambiente, alm de fornecer dados sobre classificao taxonmica de palinomorfos, servindo como fonte de consulta tanto para o ensino, pesquisa e extenso. O programa insere-se no contexto de um projeto de pesquisa, que contempla a coleta de plens e esporos a partir da chuva polnica em sistemas vegetacionais, com posterior anlise morfolgica, a partir da observao dos gros em microscpio ptico. A montagem do catlogo inicia-se com material proveniente da coleta de chuva polnica em domnio da Floresta Ombrfila Mista, floresta com Araucaria do sul do Brasil. O catlogo de referncia servir como fonte de dados para pesquisas relacionadas disperso polnica, estudos ambientais, composio de ecossistemas ou de paisagens, variaes climticas e subsdios para fins mdicos. A catalogao das espcies polnicas e palinomorfos est sendo realizada atravs dos aspectos morfolgicos, como a forma dos gros, padres da disposio espacial do gro ou vista (polar ou equatorial), estruturais, como por exemplo a presena de poros ou de colpos, tipos de texturas (lisas, equinadas, reticuladas, estriadas, punctadas, entre outras). O conjunto e associao destes elementos permitem reconhecer e classificar taxonomicamente os gros analisados em famlias, gneros e s vezes at espcies. A importncia deste catlogo, alm da catalogao morfolgica e taxonmica de palinomorfos, reside no fato de fornecer informaes sobre a biodiversidade polnica e sua distribuio geogrfica. Alm disso, gros de plens e esporos mantm suas caractersticas externas (estruturas) durante o processo de fossilizao, possibilitando, diagnosticar, com grande valor, alm da taxonomia, diferentes grupos de plantas na tentativa de traar linhas evolutivas nos diferentes txons, permitindo, ainda, indicaes sobre o ambiente. Alm da formao de um catlogo fotogrfico, a coleo ser disponibilizada para consulta na internet, relacionado gros de plens e de esporos de plantas e fungos e o ambiente relacionado, a coleo subsidiar tambm a consulta forense, ramo da investigao policial criminal. Participantes: Ana Luisa Vietti Bitencourt, Aline Neves Arajo

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Comparao da reparao ssea alveolar na prole de ratas com diabetes induzido na fase prgestacional com a de ratos diabticos na fase ps-natal.
Mura, C.A.M.; Noh, H.J.; Lucas, S.R.R. Hyun Jin Noh - UNIFESP Sandra Regina Rodrigues Lucas - Morfologia e Gentica / Biologia do Desenvolvimento

Resumo:

Acredita-se que o modelo de reparao ssea do diabtico seja deficiente. Porm, no h, na literatura, informaes sobre possveis diferenas no processo de reparao ssea alveolar na prole de mes diabticas comparado com aqueles animais que desenvolveram diabetes ps-natal. Avaliamos os seguintes grupos: de filhotes machos de mes controles (C); de filhotes machos de ratas com diabetes induzida pela estreptozotocina antes da gestao (DPG) e, de filhotes machos de mes controle que tiveram diabetes induzida ps-natalmente (DPN). Estes animais tiveram o incisivo central superior direito extrado quando adultos. A velocidade de reparao ssea alveolar foi avaliada aos 21 e aos 42 dias aps a extrao. Para tanto, os animais foram decapitados e a maxila processada para estudo histolgico. Cortes transversais dos alvolos nas pores apical, mediana e cervical foram corados por hematoxilina-eosina e, posteriormente, foram submetidos anlise histomorfomtrica para determinao da rea total do alvolo e porcentagem de tecido sseo neoformado. Os resultados parciais sugerem que os animais que tiveram diabetes induzida ps-natalmente apresentaram reparao ssea alveolar deficiente quando comparados aos animais controles, nos dois momentos estudados. Porm, os resultados obtidos at o momento, no evidenciaram diferenas significantes na velocidade de reparao ssea alveolar nos filhos de mes diabticas. Aprovao no Comit de tica em Pesquisa No.: 1349/07 Participantes: Cludia Adriana Marques Mura, Hyun Jin Noh, Sandra Regina Rodrigues Lucas

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Autores: Bolsista: Orientador:

CORRELAO ENTRE O VOLUME INTRACRANIANO E A PONTUAO A ESCALA CLINICAL DEMENTIA RATING (CDR) EM IDOSOS COM E SEM PREJUZO COGNITIVO
Del Cole, C.G.; Baldaara, L.; Moraes, W.; Montao, B.; Lacerda, A.L.T.; Tufik, S.; Bressan, R.A.; Ramos, L.R.; Jackowski, A.P. Carolina Grego Del Cole - UNIFESP Andrea Parolin Jackowski - Psiquiatria / Psiquiatria

Resumo:

Objetivos: Estudos recentes tm evidenciado que idosos com comprometimento cognitivo leve (CCL) podem se encontrar em um estgio pr-clnico de doena de Alzheimer (Arch. Neurol. 56:303-8, 1999) e que essa progresso pode levar demncia. O objetivo deste estudo comparar o volume intracraniano (VIC) de idosos com e sem prejuzo cognitivo, alm de correlacionar a taxa de atrofia cerebral com a pontuao na escala Clinical Dementia Rating (CDR). Mtodo e Resultados: Imagens de Ressonncia Magntica (RM) de crnio de 28 idosos com e sem comprometimento cognitivo foram analisadas. Dentre os 28 sujeitos avaliados, 17 eram mulheres (80.15.6 anos) e 11 homens (82.54.9 anos). O VIC foi delimitado, para cada sujeito, utilizando o software BRAINS2. Os indivduos foram divididos em trs grupos de acordo com a pontuao no box-escore (BS) na escala CDR e o risco de desenvolver demncia (Arch. Neurol. 58:397-405, 2001): grupo 1 sem CCL- baixo risco (9 sujeitos (6 mulheres e 3 homens); BS-CDR=0); grupo 2 com CCL- Mdio risco (10 sujeitos (5 mulheres e 5 homens); BS-CDR: 0,5, 1,0 e 1,5); grupo 3 com CCL - alto risco (9 sujeitos (6 mulheres e 3 homens); BS-CDR: 2,0, 2,5 e 3,0). Nenhuma diferena signficativa em relao ao sexo ( 2=0,74, p=ns), idade (F=0,19, p=ns), escolaridade (F=0,12, p=ns) e VIC foi observada entre os grupos (H=2,3, p=ns). Nenhuma correlao significativa entre o VIC e a pontuao do BS-CDR foi encontrada (r=-0.21, p=ns). Concluso: Os resultados no demonstraram diferenas entre os grupos em relao ao VIC e nenhuma correlao entre o VIC e a pontuao do BS-CDR em idosos com e sem CCL. Anlises de amostras maiores so necessrias para corroborar estes achados. Aprovao no Comit de tica em Pesquisa No.: 0258/08 Participantes: Carolina Grego Del Cole, Leonardo Baldaara, Walter Moraes, Beatriz Montao, Acioly Luiz Tavares De Lacerda, Sergio Tufik, Rodrigo Affonseca Bressan, Luiz Roberto Ramos, Andrea P. Jackowski

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EFEITO ANTIOXIDANTE DA VITAMINA C SOBRE O INFARTO AGUDO DO MIOCRDIO.


Campos, R.R.; Buttros, J.B.; Bergamaschi, C.M.T.; Ribeiro, D.A. Juliana Beatriz Buttros - UNIFESP Ruy Ribeiro de Campos Junior - Fisiologia / Fisiologia Cardiovascular e Respiratria

Resumo:

Introduo: O uso de antioxidantes com o propsito de diminuir a produo de espcies reativas de oxignio tem sido uma das estratgias para reduzir o dano celular no infarto agudo do miocrdio (IAM). Objetivos: O objetivo deste trabalho foi avaliar os efeitos da administrao oral aguda e crnica de um antioxidante - vitamina C - sobre a presso arterial (PA), freqncia cardaca (FC), controle barorreflexo da FC e alteraes histolgicas do miocrdio em ratos submetidos a IAM pela administrao do agonista -adrenrgico isoproterenol. Materiais e Mtodos: Foram utilizados 36 ratos Wistar (250-300g), provenientes do CEDEME-UNIFESP (comit de tica n0080.07), divididos em seis grupos (n=6): 1) grupo controle (C); 2) grupo controle tratado com vitamina C (250mg/kg/dia) agudo atravs de gavagem por dois dias consecutivos; 3) grupo infartado (I) tratado com isoproterenol subcutneo (150mg/kg/dia) por dois dias consecutivos; 4) grupo infartado tratado com vitamina C agudo (I VitC ag), recebeu a vitamina 30 minutos antes de cada administrao do isoproterenol, tambm por dois dias consecutivos; 5) grupo controle tratado com vitamina C crnico (VitC cr) por sete dias consecutivos; 6) grupo infartado tratado com vitamina C crnico (I VitC cr) por sete dias consecutivos. A PA, presso arterial mdia (PAM) e FC foram registradas on line em animais conscientes. Foram injetadas, de forma aleatria, 10ug de fenilefrina (iv) e 10ug de nitroprussiato de sdio (iv) em 0,1 mL, a fim de se obter dados sobre o controle barorreflexo da FC. O ganho do barorreflexo foi estimado dividindo-se as variaes de FC em batimentos para cada mmHg de alterao de PA em resposta administrao da droga vasoativa, o ganho foi expresso em bat/mmHg. Para a anlise estatstica, foi utilizado o teste t de Student admitindo-se P<0,05 para significncia estatstica. Resultados: O grupo I apresentou queda significante de PAM em relao ao grupo C (C 112 3,7 e I 80 2,2 mmHg) com aumento tambm significante de FC (C 352 9,5 e I 403 28,7 bpm). O tratamento com vitamina C produziu queda significante de PAM somente no grupo controle (C 112 3,7; VitC ag 99 4,2 e VitC cr 96 5 mmHg), por outro lado, a FC no se alterou em resposta ao tratamento com vitamina C em nenhum dos grupos. Entretanto, houve aumento significante no componente vagal do barorreflexo no grupo infartado tratado com vitamina C (I 2 0,4; I VitC ag -2,9 0,7 e I VitC cr - 2,84 0,5 bat/mmHg) , sem modificaes no componente simptico (I 2,5 0,9; I VitC ag 1,5 0,4 e I VitC cr - 2,04 0,3 bat/mmHg) alm de aumento da PAM no grupo I VitC cr em relao ao grupo I (I 80 2,2 e I VitC cr 87 1,1 mmHg). No que diz respeito s alteraes histolgicas, o tratamento com VitC reduziu de forma significante as alteraes histopatolgicas em resposta ao isoproterenol. Concluso: Os resultados sugerem que o tratamento com vitamina C, tanto agudo quanto crnico, pode produzir respostas diferenciadas no controle autonmico da FC, com melhora na ao vagal cardaca no grupo IAM tratado com vitamina C. Essa resposta foi acompanhada de menor dano cardaco no grupo IAM tratado com vitamina C. Esses efeitos podem ser resultantes da ao antioxidante da vitamina C e reduo do estresse oxidativo. Apoio Financeiro: FAPESP (2004/15969-8) e CNPq. Aprovao no Comit de tica em Pesquisa No.: 0080.07 Participantes: Ruy Ribeiro de Campos Junior, Juliana Beatriz Buttros, Cssia Marta de Toledo Bergamaschi, Daniel Araki Ribeiro

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Efeito do Laser Teraputico na Reparao ssea


Vasselo, K.P.; Sousa, R.T.; Faloppa, F.; Reginato, R.D.; Nader, H.B.; Merli, L.A.S.; Katchburian, E.; Morretto, A.C. Andressa Cristina Morretto - Faculdades Integradas Paulista Eduardo Katchburian - Morfologia e Gentica / Histologia e Biologia Estrutural

Resumo:

O processo de reparao ssea depende da estimulao, multiplicao, e proliferao dos tecidos extraperiostais, periostais e medulares sseos, o que resulta na consolidao da ferida no tecido sseo. O laser teraputico tem sido apontado como um possvel acelerador do processo de reparao, pois possui uma forte ao bioestimulante. Estudos preliminares sugerem que o tecido sseo submetido ao tratamento com laser apresenta uma maior rea ssea neoformada, em relao ao grupo controle (que no recebeu laser). Nos ltimos anos, vrias pesquisas foram realizadas utilizando-se terapia a laser, mas seus mecanismos de ao teraputica e de bioestimulao ainda no so conhecidos. O objetivo deste estudo foi investigar a atuao da terapia a Laser AsGaAl (Arseneto de Glio e Alumnio) na bioestimulao da reparao ssea, avaliando as possveis alteraes na composio celular e nos componentes da matriz ssea no tecido neoformado. Para o estudo foram utilizados ratos Wistar machos de aproximadamente 200 a 300g com 3 meses de idade. Aps anestesia foram confeccionadas incises de 3 cm de dimetro na regio posterior de ambas patas dos ratos e realizadas leses em seus fmures. A terapia laser foi aplicada na leso da pata esquerda e a pata direita foi utilizada como controle, no recebendo a aplicao do laser. Aps um perodo de 0 (zero), 04, 08 e 14 dias aps a aplicao do laser, os animais foram sacrificados em uma cmara de CO2. As patas foram dissecadas e fixadas em soluo de formaldedo 4% (preparado a partir do paraformaldedo) em tampo fosfato de sdio 0,1 M, pH 7,2. Aps a fixao, os fragmentos foram descalcificados, em um perodo de 48 a 72 horas em cido frmico 25% - pH 2 ou por EDTA (Ethylenediamine Tetraacetic Acid) a 10% utilizando o Mtodo do Microondas Laboratorial. Aps a descalcificao, os fragmentos sseos foram desidratados em concentraes crescentes de lcool, diafanizados em xilol e includos em parafina. Os cortes histolgicos foram realizados com espessura de 5m, aderidos em lminas previamente silanizadas e corados com Hematoxilina e Eosina (HE). Nesta primeira etapa do projeto foram realizados vrios experimentos para padronizar o melhor fixador e o tempo de fixao e tambm o melhor agente descalcificador para preservao estrutural do material (fmur).O formaldedo 4% (preparado a partir do paraformaldedo) e o cido frmico apresentaram melhores resultados na fixao e descalcificao, respectivamente. Os resultados mostraram que o grupo que foi tratado com laser logo aps a realizao da leso (dia zero) no apresentou nenhum sinal de neoformao ssea. No entanto, as trabculas sseas parecem ocupar maior rea no grupo que recebeu o tratamento a laser 4 dias seguidos aps a cirurgia, do que no grupo controle (4 dias sem laser). Foi observado um aumento na quantidade de rea ssea neoformada (trabculas sseas) na leso de animais 8 dias aps a cirurgia no grupo que recebeu tratamento a laser. No grupo 14 dias aps a leso, muitas trabculas sseas neoformadas foram observadas, tanto no grupo controle como no grupo experimental. O osso neoformado do grupo laser, apresenta aspecto lamelar mais acentuado do que o grupo controle. A quantificao da rea ocupada pelas trabculas sseas ser feita na prxima etapa do trabalho utilizandose o programa Axionvision 4.2 REL. Apoio financeiro: FAPESP e CNPq. Aprovao no Comit de tica em Pesquisa No.: 0740/06 Participantes: Keila Priscila Vasselo, Raphael Thiago de Sousa, Flavio Faloppa, Rejane Daniele Reginato, Helena Bonciani Nader, Luiz Antonio de Souza Merli, Eduardo Katchburian, Andressa Cristina Morretto

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Efeitos da hiperprolactinemia em crneas de filhotes de camundongas tratadas com metoclopramida


Simes, M.J.; Gomes, R.C.T.; Verna, C.; Kavay, M. Milene Miki Kavay - UNIFESP Carina Verna - Morfologia e Gentica / Histologia e Biologia Estrutural

Resumo:

Objetivo: Avaliar o efeito da hiperprolactinemia na crnea de filhotes de camundongas tratadas com metoclopramida e com hiperprolactinemia comprovada por dosagem hormonal. Metodologia: 20 camundongas, virgens, adultas foram mantidas em ambiente, sem manipulao durante duas semanas. Em seguida foram realizados esfregaos vaginais diariamente com a finalidade de avaliar o ciclo estral. As camundongas que apresentaram trs ou mais ciclos estrais de 4-5 dias foram divididas em dois grupos, a saber: Grupo I - animais que receberam injees subcutneas de soluo salina 0,9%; e Grupo II - camundongas que receberam injees subcutneas de metoclopramida (10 mg/dia). As injees foram administradas diariamente, sempre no mesmo perodo, durante pelo menos 50 dias consecutivos. Aps esse perodo todos os animais foram colocados para acasalamento. Durante o perodo de gestao e amamentao, as camundongas continuaram recebendo o tratamentos com soro fisiolgico ou metoclopramida. Os filhotes foram amamentados por 15 dias. No 16 dia os filhotes foram anestesiados e sacrificados. Em seguida, os globos oculares foram imediatamente retirados, fixados em Bouin e submetidas rotina histolgica para incluso em parafina. Os cortes foram corados pelo H.E e sero observados em microscopia de luz. Resultados: O material esta em anlise. Participantes: Manuel de Jesus Simes, Regina Clia Teixeira Gomes, Carina Verna, Milene Miki Kavay

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Efeitos da melatonina na expresso dos receptores esterodicos e do VEGF em ovrios de ratas pinealectomizadas
Hatty, J.H.; Maganhin, C.C.; Fuchs, L.F.P.; Freschi, G.; Simes, R.S.; Simes, M.J.; Haidar, M.A.; Soares Jr, J.M.; Baracat, E.C. Juliana Halley Hatty - UNIFESP Edmund Chada Baracat - Ginecologia / Ginecologia Endcrina e Climatrio

Resumo:

Introduo: A melatonina um hormnio produzido pela glndula pineal, cuja secreo est diretamente relacionada ao ciclo claro-escuro. um poderoso antioxidante e tem papel fundamental na regulao do estado sono/viglia, do ritmo de vrios processos fisiolgicos, participando do controle do relgio biolgico dos animais e seres humanos. A angiognese definida como a formao de novos vasos sangneos pela migrao e pela proliferao de clulas endoteliais oriundas de vasos pr-existentes. Esse processo est intimamente relacionado com o aumento da expresso do fator de crescimento endotelial vascular (VEGF) que considerado o principal fator mitognico das clulas endoteliais, induzindo a migrao, diferenciao e proliferao celular, participando tambm na maturao e estabilizao dos vasos sangneos. Estudos mostraram a interao da melatonina sobre a diminuio da expresso do VEGF. Objetivos: Avaliar a expresso do VEGF aps administrao de melatonina em ratas pinealectomizadas. Material e Mtodos: Foram estudadas 80 ratas albinas (Rattus norvegicus albinus), adultas (3 meses), virgens, pesando aproximadamente 250g, da linhagem EPM-1 Wistar, procedentes do Centro de Desenvolvimento de Modelos Experimentais para Medicina e Biologia (CEDEME) da UNIFESP/EPM. Diariamente foram coletados esfregaos vaginais, para identificao das fases do ciclo estral, os quais foram corados pelo Shorr-Harris. Aps confirmao da ciclicidade estral, as ratas foram divididas em quatro grupos: GI - controle que recebeu veculo (n=20); GII - Sham (falsamente operada, n=20), que recebeu veculo; GIII - pinealectomia, que recebeu veculo (n=20); GIV - pinealectomia com reposio com melatonina (10 g/Kg, por animal/noite)(n=20). A melatonina foi administrada na gua de beber somente durante o perodo noturno, durante trs meses. Aps esse perodo, na noite anterior ao sacrifcio, os animais foram acondicionados em gaiolas metablicas para coleta de urina e posterior determinao da 6 - sulfatoximelatonina. No dia seguinte, os animais foram sacrificados os ovrios retirados, mergulhados em formaldedo a 10% e processados para tcnica de incluso em parafina. Dos blocos foram realizados cortes com 5 m de espessura, coletados em lminas silanizadas e destinadas a deteco imunohistoqumica. Foram utilizados anticorpos para o VEGF-A (Santa Cruz), os dados foram obtidos em sistema de captura de imagem AxionVision 4.2 (Carl Zeiss) no microscpio AxioLab Standart. A intensidade de reao foi realizada pelo Software Image Lab. Os dados obtidos foram submetidos anlise da ANOVA e ao post hoc de Bonferroni. Resultados: A expresso do VEGF foi maior no grupo pinealectomizado sem reposio de melatonina (GIII) e nos grupos controle (GI), Sham (GII) e das ratas pinealectomizadas com reposio de melatonina (IV) a expresso do VEGF foi menor e similar entre estes grupos. Nota-se que a ausncia de melatonina no grupo (III) fez com que a expresso do VEGF fosse maior. Concluso: Houve diminuio da expresso do VEGF pela imunohistoqumica aps administrao de melatonina. Aprovao no Comit de tica em Pesquisa No.: 0232/06 Participantes: Juliana Halley Hatty, Carla Cristina Maganhin, Luiz Fernando Portugal Fuchs, Gustavo Freschi, Ricardo Santos Simes, Manuel de Jesus Simes, Mauro Abi Haidar, Jos Maria Soares Jnior, Edmund Chada Baracat

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Efeitos do ultra-som pulsado de baixa intensidade e do laser teraputico de baixa potncia na regenerao do msculo tibial anterior aps a crioleso em ratos
Renno, A.C.M.; Toma, R.L. Renata Luri Toma - UNIFESP Ana Claudia Muniz Renno - Cincias da Sade / Recursos Fisicos e Manuais da Fisioterapia

Resumo:

O tecido muscular um dos tecidos mais freqentemente afetados por leses, seja durante atividades esportivas, seja durante as atividades de trabalho. Estudos anteriores demonstraram que tanto o laser de baixa potncia (LLLT), quanto ao ultra-som de baixa intensidade (US) podem promover acelerao da regenerao muscular aps uma leso. Com isso, o objetivo deste estudo foi investigar os efeitos do US pulsado (1,5 Mhz, 30mW/cm) e laser (AsGaAl, 830nm, 50 J/cm2) na regenerao do msculo tibial anterior em ratos aps crioleso. Foram utilizados 40 ratos machos Wistar, distribudos nos seguintes grupos: grupo controle-intacto, grupo controle leso muscular, grupo leso muscular tratado com US, grupo leso muscular tratado com LLLT. A avaliao dos efeitos dos recursos estudados no processo de regenerao tecidual foi feita atravs da analise histolgica. Foi observado que houve um aumento do recrutamento de clulas inflamatrias no grupo tratado com o US quando comparado com o grupo controle leso. Para o grupo tratado com laser, observou-se alm de um recrutamento de clulas inflamatrias, um padro de reparo muscular nas reas lesadas. No grupo submetido leso muscular somente,foi observado uma extensa rea de necrose entreposta s fibras musculares normais. Em suma, tais resultados sugerem que ambas terapias, ou seja, o US e o laser, foram eficazes para otimizar o processo de reparo muscular, sendo o laser o que apresentou maior efetividade. Aprovao no Comit de tica em Pesquisa No.: 1526/07 Participantes: Ana Claudia Muniz Renno, Renata Luri Toma

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Efeitos dos esterides sexuais nos glicosaminoglicanos uterinos de camundongas em hiperprolactinemia


Oliveira, P.B.; Simes, M.J.; Baracat, E.C.; Gomes, R.C.T.; Rossi, A.G.Z.; Olawo, P.J.; Soares Jr, J.M. Patrcia Bedesco de Oliveira - UNIFESP Jos Maria Soares Jnior - Ginecologia / Endocrinologia Ginecolgica

Resumo:

Objetivo: foi avaliar os efeitos dos esterides sexuais (estrognio e progestagnio) sobre os glicosaminoglicanos uterinos (condroitim sulfato, dermatam sulfato e heparam sulfato) em camundongas submetidas hiperprolactinemia prvia (induzida pela metoclopramida) e ooforectomia bilateral. Material e Mtodos: Realizou-se estudo em 60 camundongas adultas, tratadas por 50 dias, medicadas com metoclopramida, na dosagem de 200 microgramas/dia, e divididas em cinco grupos: GI - 12 camundongas no ooforectomizadas medicadas com metoclopramida; GII - 12 camundongas ooforectomizadas, que receberam metoclopramida; GIII - 12 camundongas ooforectomizadas tratadas com metoclopramida e 17 -estradiol, na dosagem de 1 micrograma/dia; GIV - 12 camundongas ooforectomizadas medicadas com metoclopramida e progesterona micronizada, na dosagem de 1 miligrama/dia; GV - 12 camundongas ooforectomizadas, que receberam metoclopramida, 17 -estradiol (na dosagem de 1 micrograma/dia) e progesterona micronizada (na dosagem de 1 miligrama/dia). Aps esse perodo, todos os animais foram sacrificados, sendo que os animais com ovrios intactos continuaram recebendo as injees e foram sacrificados assim que atingiram a fase de proestro. Os cornos uterinos foram retirados para a caracterizao e quantificao dos glicosaminoglicanos no endomtrio. Resultados: Observou-se a presena de condroitim sulfato, dermatam sulfato e heparam sulfato na composio do tero. A menor concentrao do total de glicosaminoglicanos foi detectada no grupo que no sofreu a ooforectomia (GI). J os grupos ooforectomizados apresentaram maiores valores (GII, GIII, GIV e GV). Concluses: A reposio com estrognio e/ou progesterona em animais com hiperprolactinemia e castrados no reduziu os glicosaminoglicanos sulfatados em relao aos dos animais no ooforectomizados e com hiperprolactinemia. Aprovao no Comit de tica em Pesquisa No.: 1397/07 Participantes: Patrcia Bedesco de Oliveira, Manuel de Jesus Simes, Edmund Chada Baracat, Regina Clia Teixeira Gomes, Alexandre Guilherme Zabeu Rossi, Paul Juma Olawo, Jos Maria Soares Jnior

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Estabelecimento de Modelo de Desmielinizao Quimicamente Induzida em Ratos da Linhagem Lewis.


Sasaki, P.H.; Zollner, R.L.; Oyama, L.M.; Medalha, C.C.; Castro, G.M. Pedro Henrique Sasaki - UNIFESP Glaucia Monteiro de Castro - Cincias da Sade / Mdulo do tomo Clula

Resumo:

Introduo: A Esclerose Mltipla (EM) uma doena neurolgica crnica, inflamatria, desmielinizante do Sistema Nervoso Central (SNC), onde caractersticas imunolgicas e patolgicas apontam para natureza auto-imune. Desta forma, componentes do SNC atuam como antgenos, atraindo clulas do sistema imune, ocasionando a destruio do oligodendrcito e, conseqentemente, o processo de desmielinizao. Grande parte do conhecimento sobre a patognese desta doena e da biologia do oligodendrcito tem sido esclarecida a partir de modelos experimentais, os quais dependem de linhagens geneticamente susceptveis, como os ratos da linhagem Lewis. Animais altamente susceptveis autoimunidade, em funo de alteraes na resposta do eixo hipotlamo-hipfise-adrenal e nveis reduzidos de corticosterona, so amplamente utilizados nos modelos da EM. Objetivos: Avaliar o modelo de desmielinizao qumica em ratos da linhagem Lewis, atravs do emprego de cuprizona na dieta alimentar. Mtodos: Foram utilizados ratos da linhagem Lewis machos, fornecidos pelo (CEMIB-UNICAMP). Os animais foram distribudos em grupos denominados Cuprizona (n=5) e Controle (n=5), com 4 (Grupo1), 5 (Grupo2) e 8 (Grupo3) semanas de vida, mantidos nos biotrios do Departamento de Biocincias, Campus Baixada Santista e do Departamento de Fisiologia Endcrina, Campus Vila Clementino da UNIFESP; em ciclo de claro/escuro (12/12h), recebendo gua, rao e maravalha autoclavadas. A Cuprizona (m/m 0,6%) foi oferecida juntamente com a rao moda, os animais do grupo controle receberam tratamento idntico sem a adio de cuprizona na dieta. Na quarta e ltima semana do protocolo, os animais foram submetidos ao teste comportamental e motor de neurotoxicidade (Functional Observation Battery/FOB). Para obteno de amostras os animais, dos grupos tratados e seus controles, foram decapitados e o SNC foi retirado. Estas peas foram congeladas e submetidas a cortes de 20m em criostato, os quais foram corados pelo mtodo de Luxol Fast Blue. Para avaliao da reduo de peso foram quantificadas as protenas e lipdios totais destes animais. Resultados: Nossos resultados demonstram que o tratamento com cuprizona reduz a evoluo no ganho de peso quando comparados ao grupo controle. A anlise do comportamento destes animais demonstrou um aumento na atividade do SNC e alteraes na reao sensrio-motora (p=0,002). Em teste de campo aberto os animais do Grupo1 apresentaram diferenas estatisticamente significativas no nmero de exploraes verticais (p=0,027) e do nmero de pulos (p=0,039). Por outro lado, a quantificao dos bolos fecais dos animais dos Grupos 2 (p=0,028) e 3 (p=0,025), demonstrou que o grupo tratado com cuprizona apresentou um nmero menor de bolos fecais que os animais do grupo controle. Observou-se na anlise morfolgica dos crebros dos animais tratados com cuprizona e respectivos controles, a presena de infiltrados inflamatrios em amostras obtidas dos animais tratados com cuprizona. A quantificao de protenas totais presente nas carcaas no apresentou diferenas significativas entre os grupos experimentais. Por outro lado, a quantificao de lipdios de todos os grupos demonstrou que os animais controle apresentaram ndices significativamente maiores que o tratado com cuprizona, compatvel com o peso reduzido dos animais deste grupo em relao ao controle. Concluso: No presente trabalho verificou-se que os animais do grupo cuprizona apresentavam-se mais agitados e de difcil manipulao. Os resultados do teste FOB mostraram maior atividade, caractersticas que denotam maior agitabilidade e estresse por parte dos animais tratados com cuprizona do que os animais controle. Confirmando estas observaes, no teste de campo aberto, os grupos experimentais se diferenciaram principalmente na explorao vertical e na quantidade de bolos fecais. Reforando esta sugesto, os resultados da anlise morfolgica preliminar evidenciam a presena de infiltrados perivasculares de linfcitos nos animais tratados com cuprizona, indicativos de reao inflamatria no SNC. Verificou-se ainda que os animais tratados apresentaram peso significativamente menor quando comparados ao tratado. A quantificao de protenas e lipdios totais demonstrou que os animais tratados com cuprizona estavam significativamente menores que os animais do grupo controle, o que, embasado pela quantificao de protenas totais, que no apresentou diferena entre os grupos, foi demonstrado que no h relao da perda de peso com a ocorrncia de desnutrio. Assim, as alteraes constatadas so compatveis com o esperado nas desordens na substncia branca, sugerindo que esta linhagem pode ser adequada para o estudo deste modelo. Nas prximas etapas do projeto sero analisadas a expresso de citocinas e outros indicadores da presena de uma reao inflamatria no SNC, bem como, estudos da quantidade de lipdios totais no crebro. Aprovao no Comit de tica em Pesquisa No.: 0301/07 Participantes: Pedro Henrique Sasaki, Ricardo Lima Zollner, Lila Missae Oyama, Carla Christina Medalha, Glucia Monteiro de Castro

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Hiperprolactinemia como fator modulador de componentes da matriz extracelular (Colgeno, fator de crescimento fibroblstico e fator de crescimento vsculo endotelial) do endomtrio de camundongas
Simes, J.R.; Barros, L.M.G. Luciana Miguel Gomes de Barros - UNIFESP Manuel de Jesus Simes - Morfologia e Gentica / Histologia e Biologia Estrutural

Resumo:

Introduo: A hiperprolactinemia definida como a elevao persistente dos nveis plasmticos de prolactina na ausncia de condies fisiolgicas, como gravidez e lactao. Esta alterao repercute em vrios tecidos como o ovrio e o tero, resultando em infertilidade. O estudo de camundongas nas diferentes fases do ciclo estral permite-nos elucidar patologias do trato reprodutivo correlacionadas com os hormnios esterides (estrognios e progesterona) e a prolactina, em especial, tendo a infertilidade como uma das conseqncias da hiperprolactinemia. Durante o ciclo estral, a prolactina e os hormnios sexuais esto elevados na fase de proestro, o que permite o mximo desenvolvimento do epitlio luminal, das glndulas, do estroma uterino. Tal desenvolvimento uterino sugere ao de fatores de crescimento. Objetivo: Avaliar a imunoexpresso do fator de crescimento de fibroblasto (FGF) de camundongas na fase de proestro. Material e Mtodos: Consiste em um estudo com 20 camundongas que foram distribudas em 2 grupos, constitudos por 10 animais cada, a saber: A- grupo controle, que foram submetidos injeo diria de 0,2 ml de soluo salina por via intraperitoneal por 50 dias consecutivos ; B- grupo experimental, que recebeu injeo diria de 200 microgramas de metoclopramida por via intraperitoneal durante 50 dias consecutivos. Aps este perodo, foram realizados exames colpocitolgicos para confirmao das fases do ciclo, e as que estavam na fase proestro foram anestesiadas e sacrificadas (Anestsico: ketamina, analgsico: ketalar). Foram retirados os cornos uterinos e processados para anlises morfolgicas e imunoexpresso para FGF. As imagens da imunoexpresso foram feitas e avaliadas, utilizando-se representao de imagem por meio de um sistema computadorizado, constitudo por microscpio de luz (Carl Zeiss), adaptado a uma cmera de alta resoluo (AxioCam MRC da Carl Zeiss) e um monitor de vdeo colorido (Samsung). Resultados: os dados preliminares no grupo proestro controle mostraram que a marcao imuno-histoqumica foi homognea por toda matriz extracelular endometrial, em conformidade com a fase, pois nesta fase os hormnios sexuais (estrognio e progesterona) esto promovendo a proliferao celular, sendo a principal clula do endomtrio, o fibroblasto. No grupo proestro tratada, a marcao imuno-histoqumica foi fraca por toda matriz extracelular endometrial, concentrando-se fortemente, apenas, entre a face endometrial e miometrial. Concluso: De acordo com os estudos preliminares, a hiperprolactinemia, possivelmente, afeta a formao e o crescimento de fibroblastos. Aprovao no Comit de tica em Pesquisa No.: 1736/06 Participantes: Manuel de Jesus Simes, Luciana Miguel Gomes de Barros

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Metastses cerebrais: Estudo clinico-patolgico e imunohistoquimico.


Paschoal, G.M.; Stvale, J.N. Guilherme Monteiro Paschoal - UNIFESP Joo Norberto Stvale - Patologia / Patologia Cirrgica

Resumo:

Introduo e caracterizao do problema: a possibilidade de clulas neoplsicas atingirem atravs da corrente sangunea o Sistema Nervoso Central (SNC) bem conhecida. Os tumores mais comuns que originam metstase para o SNC originam-se nos pulmes, mama, pele, rins e trato gastrointestinal. As manifestaes clnicas dos casos de tumores cerebrais variam com a sua localizao, manifestando-se atravs de cefalia, convulses, dficit motor e alterao mental. Para o diagnstico, so de grande importncia os achados radiolgicos, as caractersticas macroscpicas e as microscpicas, sendo entre estas o estudo imunohistoqumico do tecido neoplsico metasttico uma importante ferramenta para determinao da neoplasia primria. Objetivos, metas, metodologia e estratgia de ao: tendo em vista a importncia de se levantar um perfil das metstases cerebrais em um Hospital Geral, est sendo feito um estudo retrospectivo dos casos de metstases cerebrais para caracterizao do sitio primrio atravs de histria clnica, exame histopatolgico e imunohistoqumico. Para isso, sero selecionados casos de metstase no SNC do perodo compreendido entre 1990 e 2006, a partir dos registros de Patologia Cirrgica do Departamento de Patologia - Unifesp/EPM. Resultados parciais: O registro total de casos foi de 242. Foram selecionadas lminas de cada caso, e aps reviso e excluso dos casos no presentes no arquivo, o nmero final de casos foi 179. Em cada lmina, foi feita confirmao diagnstica e seleo do local onde se tem a melhor representao histolgica do tecido metasttico. A partir disso, esto sendo feitos blocos com a utilizao da tcnica de "Tissue Microarray". A avaliao imunohistoqumica e a anlise de pronturio mdico ainda encontram-se em desenvolvimento. Participantes: Guilherme Monteiro Paschoal, Joo Norberto Stvale

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Autores: Bolsista: Orientador:

Mtodos de descalcificao para processamento histolgico de fmures lesionados de rato sob terapia laser de baixa intensidade
Merli, L.A.S.; Katchburian, E.; Morretto, A.C.; Nader, H.B.; Faloppa, F.; Vasselo, K.P.; Reginato, R.D.; Sousa, R.T. Raphael Thiago de Sousa - Faculdades Integradas Paulista Eduardo Katchburian - Morfologia e Gentica / Histologia e Biologia Estrutural

Resumo:

A descalcificao um processo frequentemente necessrio para o estudo histolgico de tecidos de grande dureza como o tecido sseo. A matriz mineralizada composta de fosfato de clcio, na forma de hidroxiapatita, e outras molculas (principalmente colgeno), torna o tecido sseo difcil de ser seccionado no micrtomo. A descalcificao consiste em retirar a parte mineral da matriz, sem alteraes nos constituintes celulares e na composio qumica do tecido. Vrias substncias podem ser empregadas como descalcificadores, mas nem sempre ocorre uma boa preservao estrutural do tecido. O objetivo do presente estudo, portanto, foi comparar trs mtodos de descalcificao, com a finalidade de preservar a parte estrutural do tecido sseo e tambm a integridade dos constituintes da matriz orgnica. Para esse experimento foram utilizados ratos Wistar machos de aproximadamente 200 a 300g, com 3 meses de idade. Esse experimento faz parte do projeto de pesquisa sobre o efeito do laser teraputico na reparao ssea. Os fmures foram fixados em soluo de formaldedo 4% (preparado a partir do paraformaldedo) em tampo fosfato de sdio 0,1 M, pH 7,2. Aps a fixao, os fragmentos foram descalcificados utilizando trs protocolos de descalcificao, o EDTA (Ethylenediamine Tetraacetic Acid) 10% - pH 7.2, o mtodo de EDTA 7% (em tampo fosfato) mais paraformaldedo a 4% e o mtodo de cido frmico 25% - pH 2.0. Para o primeiro estudo os fragmentos de fmures foram descalcificados em EDTA 10%. Todo o processo de descalcificao foi realizado em aparelho de microondas (Pelco, modelo 3440). Os materiais foram colocados em um Becker com EDTA 10% e esse em um pirex com gelo. Foram realizados 6 ciclos de 1 hora temperatura de 33C - 35C, durante 3 dias, com intervalo de 15 minutos, necessrios para a troca de gelo. A cada 1 hora o EDTA 10% foi trocado e os materiais deixados em descanso por 30 minutos. Na descalcificao de EDTA 7% (em tampo fosfato) mais paraformaldedo a 4% os fragmentos de fmures foram descalcificados na mistura de EDTA 7% (em Tampo Fosfato 0,2M pH 7,2) mais paraformaldedo 4%. Todo o processamento foi feito em aparelho de microondas como descrito anteriormente. No processo por cido frmico 25%, os fragmentos foram descalcificados durante 30 horas temperatura ambiente em cido frmico 25% pH 2,0. Posteriormente, todos os fragmentos de fmures foram desidratados em concentraes crescentes de lcool etlico, a partir do lcool 70% at o absoluto, sendo ento, diafanizados em xilol e includos em parafina. Os cortes foram realizados com 5 m de espessura, aderidos a lminas de vidro e corados com Hematoxilina de Carazzi e Eosina de Lison (HE). Os resultados mostraram uma melhor preservao estrutural do tecido sseo quando realizados os protocolos de EDTA 10% e cido frmico 25% comparados com o EDTA 7%(em tampo fosfato) mais paraformaldedo a 4%. No entanto, o cido frmico 25% apresentou melhores resultados quando comparado ao EDTA 10%. Financiamento: FAPESP Aprovao no Comit de tica em Pesquisa No.: 0740/06 Participantes: Luiz Antonio de Souza Merli, Eduardo Katchburian, Andressa Cristina Morretto, Helena Bonciani Nader, Flavio Faloppa, Keila Priscila Vasselo, Rejane Daniele Reginato, Raphael Thiago de Sousa

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Autores: Bolsista: Orientador:

Morfologia polnica
Bitencourt, A.L.V.; Videira, A. Alexandre Videira - UNIFESP Ana Luisa Vietti Bitencourt - Cincias Biolgicas /

Resumo:

Estudo da variabilidade polnica em amostras de chuva polnica no domnio da Floresta Ombrfila Mista - Estao Ecologia da Aracuri- Esmeralda, RS O estudo da variabilidade polnica est sendo desenvolvido no mbito do Programa de Educao Tutorial (PET), um programa Temtico da SESU-MEC na rea do Meio Ambiente e Recursos Naturais Sustentveis, vinculado ao curso de Cincias Biolgicas - Campus Diadema, tendo como tutora e orientadora profa. Ana Luisa Vietti Bitencourt. O programa prev a montagem de um a coleo de plens e esporos de referncia, visando fornecer dados sobre classificao taxonmica de palinomorfos e material de consulta para ensino, pesquisa e extenso. A coleo visa, alm destes aspectos, fornecer dados polnicos de vrios sistemas vegetaiconais, com objetivo da completar informaes sobre diversidade polnica e distribuio geogrfica. O presente trabalho apresenta alguns aspectos sobre a diversidade polnica em amostras provenientes da coleta de chuva polnica, realizada na estao ecolgica de Aracuri, no municpio de Esmeralda, Estado do Rio Grande do Sul, inserido no domnio da Floresta Ombrfila Mista (Floresta com Araucaria). A estao Ecolgica de Aracuri encontra-se localizada no planalto sul-rio-grandense, predominando altitudes em torno de 700 m. A paisagem marcada pela presena da Araucaria angustifolia Podocapus lambertii, Ilex paraguensis, alm de outras famlias que compe a mata latifoliada, como Myrtaceae, Solanaceae, Melastomataceae, Lauraceae. Neste contexto aparecem no interior da floresta, no estrato herbceao, algumas pteridfitas (xaxim) , sendo comuns os gneros Blechnu e Polopodium e, ainda, vegetao de pequeno porte, compondo arbustos, pertencentes a famlia Asteraceae, com predomnio dos gneros Bacharis e Vernonia. Tal fisionomia realada na paisagem pela presena de grandes espaos ocupados por vegetao herbcea que recebe o nome de campos de cima da serra. A zona de transio entre o campo e a mata evidenciado pela presena de Anarcadiaceae (aroeira). O estudo da variabilidade polnica realizado a partir dos aspectos morfolgicos, particulares para cada gro de plens e de esporos, permitindo caracterizar famlias, gneros e espcies. Essas caractersticas so estabelecidas geneticamente, no esto sujeitas alteraes ambientais, o que as torna, em geral, bastante estveis e de grande valor diagnstico para aplicaes em estudos taxonmicos, botnicos, ambientais e reconstituio de paisagens. A descrio morfolgica acompanha fotomicrografias, contendo o detalhamento da forma dos gros em suas diferentes vistas (polar e equatorial), podendo apresentar vrios formas, gros elipticos, esfricos, triangulares e formas compostas, como dades, ttrades ou polades. Alm disso, so considerados os tipos e o nmero de aberturas (poros ou colpos), o tipo de ornamentao do corpo (psilados, equinados, escabrados, estriados, reticulados) assim como os da parte perifrica do gro, denominada de exina. O tamanho do gro do plen normalmente representado pela relao das mediadas do dimetro polar(P) e do dimetro equatorial (E), originando classes de plens quanto forma (P/E). A base nomenclatural utilizada, obedece os sistemas de classificao polnicas vigentes. O conjunto dessas informaes fornecer subsdios para a construo de uma base de dados, atravs da formao do catlogo, que alm da consulta, proporcionar a ampliao do conhecimento da diversidade polnica. Participantes: Ana Luisa Vietti Bitencourt, Alexandre Videira

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Autores: Bolsista: Orientador:

Oligodendroglioma: Estudo imunohistoqumico de fatores de prognostico com correlao clnicopatolgica


Rodrigues, F.V.; Almeida, J.S.; Carregosa, M.J.; Malheiros, S.M.F.; Stvale, J.N. Felipe Veiga Rodrigues - UNIFESP Joo Norberto Stvale - Patologia / Neuropatologia Cirurgica

Resumo:

INTRODUO: Os oligodendrogliomas correspondem a 4% das neoplasias primrias do Sistema Nervoso Central e 10 a 20% dos gliomas infiltrativos. As descries originais de Bailey e Cushing (1926) e Bayle e Bucey (1929) fazem referncia a uma neoplasia constituda por ncleos redondos e constantes em tamanho, citoplasma escasso, rede de finos capilares e calcificao. A classificao atual da OMS reconhece dois graus: oligodendroglioma grau II e oligodendroglioma anaplsico III. As neoplasias grau II apresentam baixa a moderada celularidade, tendncia a envolver o crtex cerebral e, em sua progresso, crescem em ndulos. Podem ocasionalmente apresentar mitoses e atipia citologia, mas atividade mittica intensa, proliferao microvascular ou necrose so consistentes com grau III. A partir 1998, foram publicados trabalhos mostrando a importncia da deleo do cromossomo 1p/19q como fator diagnstico e prognstico. OBJETIVO: Investigar marcadores prognsticos relacionados a este grupo de tumores. METODOS: Foram coletados todos os casos de oligodendroglioma do Arquivo de Neuropatologia do Departamento de Patologia da UNIFESP que possuiam acompanhamento clnico. Todas as lminas dos respectivos casos foram revisadas com marcao puntiforme para realizao do TMA. Aps a realizao do TMA, sero usados os seguintes marcadores, Ki67, GFAP, p53, Sinaptofisina. RESULTADOS PARCIAIS: Foram selecionados 23 casos de oligodendroglioma grau II com acompanhamento clnico. Aps a realizao do TMA, sero contadas todas as clulas positivas em relao ao total, correlacionando com os aspectos clnicos e evolutivos dos pacientes. Participantes: Felipe Veiga Rodrigues, Joaquim Soares Almeida, Maria Jos Carregosa, Suzana Maria Fleury Malheiros, Joo Norberto Stvale

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Autores: Bolsista: Orientador:

PAPEL DA OSMOLALIDADE PLASMTICA NA INGESTO DE SDIO EM RATOS


Colombari, E.; Aniche, M.F.; Schoorlemmer, G.H.M. Marcelo Finavaro Aniche - UNIFESP Eduardo Colombari - Fisiologia / Fisiologia Cardiovascular e Respiratria

Resumo:

INTRODUO: A quantidade de sdio no organismo est intimamente relacionada com o volume do fluido extracelular e, portanto, a quantidade de sdio no organismo deve ser bem controlada. Alteraes tanto na ingesto quanto na excreo de sdio contribuem para a regulao do equilbrio do on. A privao de sdio reduz o volume do fluido extracelular, o volume sangneo e a presso arterial, de modo que estimula a produo de angiotensina II e a liberao de aldosterona, que agem diretamente no crebro para estimular a ingesto de sdio. Temos como objetivo investigar se os sensores que afetam a ingesto de sdio esto dentro o fora da barreira hematoenceflica, e, se eles so sensveis s mudanas do volume celular ou concentrao de sdio. MTODOS: Ratos machos Wistar (~400 g) foram anestesiados com halotano para a implantao de uma cnula na veia femoral. Aps a recuperao da cirurgia (> 1 semana) eles foram depletados de sdio com um diurtico (2 injees subcutneas de furosemida, 10 mg/kg peso cada, e separadas em 30 min) e mantidos por 20 h sem sdio para induzir a apetite ao sdio. Depois foram permitidos beber gua e NaCl 0,45 M por 2 h, e as volumes ingeridas foram registrados. Foi dado uma infuso endovenosa de 15 min com uria concentrada, para investigar a localizao do sensor em respeito da barreira hemato-enceflica, logo antes da acesso ao sdio. Uria atravessa a membrana celular, mas no atravessa facilmente a barreira hemato-enceflica, portanto a infuso de uria desidrata seletivamente tecido dentro da barreira hematoenceflica. Foi dado uma infuso endovenosa de manitol concentrado. Para investigar se o mecanismo sensvel ao volume celular ou a concentrao sangnea de sdio. Manitol um acar que no atravessa a membrana celular, e, portanto, desidrata as clulas sem aumentar a concentrao de sdio no sangue. Assim, retiramos amostras de sangue da cnula venosa para avaliar o efeito das infuses sobre o volume sangneo (concentrao da hemoglobina sangneo) e osmolalidade plasmtica (ponto de congelamento). RESULTADOS: A infuso da uria (1 mL uria 8 M em NaCl 0,15 M), logo antes do acesso ao sdio, aumentou a osmolalidade plasmtica em 13,3 0,8%, e o volume sanguneo em 3,9 1,1% (n = 8). A infuso de uria no reduziu a ingesto de gua e de salina com espera de 5 minutos aps a infuso (6,4 1,0 no controle, n = 20; 5,2 1,1 mL/2 h aps uria, n = 20) e nem com espera de 35 minutos aps a infuso (9,3 1,3 no controle, n = 13; 7,6 1,5 mL/2 h aps uria, n = 13). A infuso de manitol concentrada (6 mL 1 M em 0,15 NaCl) aumentou a osmolalidade plasmtica em 3,8 0,9% (n = 4) e o volume sangneo em 8,7 1,0% (n = 12). A soluo controle (20 mL manitol 0,3 M) aumentou o volume sangneo em 5,3 1,1% (n = 12). Manitol hipertnico e manitol isotnico causaram a mesma reduo na ingesto de salina (controle 8,7 1,4, n = 5; manitol hipertnico 3,8 1,2, n = 6; manitol isotnico 4 2,0 mL/2 h, n = 4). CONCLUSO: A infuso de uria no diminuiu significativamente a ingesto de salina, embora desidratou o crebro. Assim, pode-se concluir que os sensores que afetam a ingesto de sdio esto fora da barreira hematoenceflica. Com manitol, infuses isotnicas e hipertnicas so equipotentes. Portanto, estes dados sugerem que a reduo da ingesto de salina induzida pela infuso de NaCl hipertnico depende do aumento da [Na+] do sangue. Aprovao no Comit de tica em Pesquisa No.: 1071/04 Participantes: Eduardo Colombari, Marcelo Finavaro Aniche, Gus H. M. Schoorlemmer

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Autores: Bolsista: Orientador:

Polimorfismos 3238C>G e -482C>T do gene APO C-III em coorte de idosos de So Paulo


Ota, V.K.A.; Chen, E.S.; Arajo, L.M.Q.; Ramos, L.R.; Cendoroglo, M.S.; Payo, S.L.M.; Burbano, R.R.; Smith, M.A.C. Vanessa Kiyomi Arashiro Ota - UNIFESP Marlia de Arruda de Cardoso Smith - Morfologia e Gentica / Gentica

Resumo:

Apolipoprotenas so molculas complexas com funo crucial no transporte e metabolismo de lipdeos. Polimorfismos do cluster APOA-I/C-III/A-IV/A-V em 11q23 tm sido investigados, visando sua caracterizao como fatores de risco e marcadores genticos de predisposio s dislipidemias. Este estudo tem como objetivos: a) avaliar as freqncias allicas os polimorfismos 3238C>G e -482C>T do gene APO C-III; b) verificar se as distribuies genotpicas se encontram em equilbrio de Hardy-Weinberg; c) analisar se h associao entre os alelos destes polimorfismos com as morbidades estudadas, bem como alelos com nveis sricos de triglicrides, colesterol total, HDL, VLDL, LDL, uria, creatinina, albumina, glicemia em jejum e hemoglobina glicosilada. A amostra foi composta por 318 idosos com mdia de idade de 79,585,26 pertencentes ao Estudo Longitudinal do Idoso (EPIDOSO - Geriatria/UNIFESP). Esta coorte constituda por 89,2% de indivduos de origem europia, 3,3% de origem japonesa, 1,81% de origem do Oriente Mdio e por 5,70% de origem mista ou outras. As morbidades estudadas foram: doena cardiovascular, diabetes tipo II, obesidade, neoplasia, demncia, depresso, alm de hipertenso arterial. O DNA foi extrado a partir de sangue perifrico e a genotipagem foi feita por meio da tcnica PCR-RFLP. Estatstica descritiva, regresso logstica, teste de R2 e teste t-Student foram utilizados. Em nossa amostra, o alelo G do polimorfismo 3238C>G apresentou freqncia de 12,42%, similar encontrada em outras populaes caucasides (8-21%) e menor que na populao japonesa (25%). Nossos dados mostraram que as freqncias genotpicas do polimorfismo 3238C>G no se encontraram em equilbrio de Hardy-Weinberg (p=0,0017;R2=9,867). No houve associao deste polimorfismo com nenhuma das morbidades, nem tampouco, com os nveis sricos estudados. Estes dados confirmaram os encontrados em crianas brasileiras e divergiram dos observados na populao finlandesa. Quanto ao polimorfismo -482C>T, 192 indivduos foram genotipados at o momento. A freqncia do alelo T foi 35,94%, maior que a encontrada em populaes de brancos (25%), e menor que em negros (71%) e sul-asiticos (44%). Foi observado que as freqncias genotpicas desse polimorfismo encontram-se em equilbrio de Hardy-Weinberg (p=0,3153; R2=1,008). Nossos dados preliminares no mostram associao do polimorfismo -482C>T com as morbidades e com os nveis sricos investigados. A amostra ser ainda ampliada para alcanarmos resultados conclusivos quanto susceptibilidade deste polimorfismo para as morbidades observadas e nveis sricos alterados. Aprovao no Comit de tica em Pesquisa No.: 1609/04 Participantes: Vanessa Kiyomi Arashiro Ota, Elizabeth Suchi Chen, Lara M. Q. Arajo, Luiz Roberto Ramos, Masa Seabra Cendoroglo, Spencer Luiz Marques Payo, Rommel Rodriguez Burbano, Marlia de Arruda Cardoso Smith

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POSSVEL DISSOCIAO ENTRE A RESPOSTA NEUROENDCRINA E SOMATOMOTORA APS A LESO DE ESTRIADO DORSAL NO CONDICIONAMENTO CLSSICO DE MEDO AO SOM
Ferrari, R.B.; Ferreira, T.L.; Tiba, P.A.; Suchecki, D.; Oliveira, M.G.M. Roberta Bullio Ferrari - UNIFESP Maria Gabriela Menezes de Oliveira - Psicobiologia / Psicobiologia

Autores: Bolsista: Orientador:

Resumo:

Objetivo: Trabalhos prvios sugerem o envolvimento do estriado dorsal (ED) na tarefa de condicionamento clssico de medo ao som (CMS). A expresso emocional desta associao aprendida mediada por conexes da amgdala que envia projees a outras regies cerebrais que elicidam as respostas endcrina, viceromotora e somatomotora, associadas expresso do medo. LeDoux e cols. em 1988 mostraram que as respostas comportamentais e autonmicas condicionadas so separadamente prejudicadas por leses seletivas de algumas regies inervadas pela amgdala. Assim, seria importante verificar se a leso de ED - uma estrutura que recebe projees diretas e indiretas da amgdala - interfere seletivamente com a resposta somatomotora de congelamento e no com a hormonal. Inicialmente, foram realizados estudos de padronizao da resposta hormonal em animais submetidos ao procedimento de condicionamento de medo ao som. O principal objetivo do presente estudo foi verificar a resposta hormonal (atravs da avaliao da liberao de ACTH) e somatomotora (tempo de congelamento) de animais com leso de estriado dorsal submetidos ao condicionamento de medo ao som Materiais e Resultados: Ratos Wistar machos de 3 meses de idade foram submetidos ao CMS e foram coletadas amostras de sangue para a dosagem de ACTH. Em seguida, outros animais foram submetidos leso eletroltica de ED e submetidos tarefa de CMS, onde foram avaliados o tempo de congelamento dos animais durante o teste da tarefa de CMS, e as concentraes plasmticas de ACTH 20 minutos aps o trmino do teste comportamental. Pode-se observar que no houve diferenas significativas entre os animais pseudo-condicionados e condicionados com relao aos nveis plasmticos de ACTH. Os animais com leso bilateral de ED, apresentaram desempenho comportamental prejudicado na tarefa de CMS e os nveis hormonais de ACTH no foram diferentes entre os grupos. Concluso: Os resultados observados confirmam o envolvimento do ED na mediao da resposta somatomotora de congelamento, mas sugerem que esta estrutura no est envolvida na mediao da resposta neuroendcrina de medo. Aprovao no Comit de tica em Pesquisa No.: 0494/07 Participantes: Roberta Bullio Ferrari, Tatiana Lima Ferreira, Paula Ayako Tiba, Deborah Suchecki, Maria Gabriela Menezes Oliveira

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Autores: Bolsista: Orientador:

Sensibilidade ao sdio em animais submetidos reduo do volume do compartimento extracelular


Cravo, S.L.D.; David, V.M. Vivian Maria David - UNIFESP Srgio Luiz Domingues Cravo - Fisiologia / Fisiologia Cardiovascular e Respiratria

Resumo:

Introduo: O apetite ao sdio um importante componente comportamental para a manuteno da osmolaridade plasmtica. Estudos tm demonstrado que a sensibilidade ao sdio pode ser determinada antes do nascimento, atravs de diferentes influncias materno-fetal, incluindo mudanas na homeostase hidromineral, atravs de desidratao e vmito. No entanto, nenhum desses estudos avaliou se alteraes no incio da vida extra-uterina poderiam tambm promover mudanas no apetite ao sdio. Objetivos: Desta forma, o presente estudo tem como objetivo determinar se a desidratao induzida em animais jovens altera a sensibilidade ao apetite ao sdio. Mtodos: A desidratao nos animais jovens (a partir de 21 dias) foi obtida por meio de privao hdrica. Os animais sofreram privao inicialmente de 24h nas primeiras semanas de condicionamento e posteriormente de 48h. A privao ocorreu durante aproximadamente 6 semanas, com intervalos de at 96h de recuperao. Um grupo controle foi mantido com livre acesso gua. Aps trs semanas do trmino do tratamento, os animais dos dois grupos experimentais foram submetidos a testes de ingesto induzida de gua e sdio. Para tanto os animais foram individualizados e tratados com a aplicao subcutnea de furosemide (FUR, 10 mg/kg) e permanecem sem acesso gua ou rao por 24h. Aps este perodo uma bureta contendo gua e outra contendo soluo salina (NaCl 0,3 M) foram colocadas nas gaiolas, permitindo livre acesso dos animais s duas solues. O volume ingerido foi medido em intervalos de 30 min por duas horas. Os animais foram submetidos de cinco a seis testes de ingesto induzida para a anlise da ingesto de gua e sdio. Os dados experimentais obtidos (variaes da ingesto de gua e sdio; PAM e FC) so expressos como mdia EPM (erro padro da mdia) e analisados atravs de anlise de varincia de duas vias para medidas repetidas, seguido pelo teste de Newman-Keuls, nos casos em que o f atingir o valor crtico assumindo-se p < 0,05. Resultados: Os resultados at aqui obtidos mostram que em animais controle, a mdia do volume de gua ingerido foi 27,8 1,3 ml/rato/120min, enquanto no grupo de animais submetidos desidratao este valor foi 28,3 1,2 ml/rato/120min. Quanto a ingesto de NaCl os resultados obtidos foram de 26,8 1,4 e 27,0 1,8 , para os grupos controle e desidratao, respectivamente. Os resultados obtidos indicam tambm que no houve variao significativa entre os valores de ingesto de gua ou NaCl entre os testes realizados. Os animais do grupo controle tiveram mdia de ingesto de gua 20,4 2,0 no primeiro teste e 35,4 1,4 no ltimo teste, com relao ingesto de NaCl as mdias de ingesto foram 20,4 4,2 e 32,8 4,0, no primeiro e ltimo teste, respectivamente. Os animais do grupo experimental tiveram mdia de ingesto de gua 26,2 2,2 no primeiro teste e 31,5 3,5 no ltimo teste, com relao ingesto de NaCl as mdias de ingesto foram 19,2 2,7 e 26,8 4,5, no primeiro e ltimo teste, respectivamente. Os resultados obtidos sugerem que o padro de ingesto cumulativa de gua e sdio obtidos so semelhantes entre os dois grupos, sugerindo que o tratamento com desidrataes sistemticas dos animais nos primeiros meses de vida no foram suficientes para induzir alterao no padro de ingesto no teste realizado. Os resultados demonstram ainda que no ocorre sensibilizao e/ou aprendizado com a realizao de testes repetidos em nenhum dos grupos estudados. Alm dos testes de ingesto os animais sero avaliados quanto aos valores de presso arterial e respostas ao aumento sbito das concentraes de sdio circulantes. Os resultados obtidos com estes novos testes ainda esto sendo obtidos e analisados. Aprovao no Comit de tica em Pesquisa No.: 063707 Participantes: Srgio Luiz Domingues Cravo, Vivian Maria David

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Autores: Bolsista: Orientador:

Separao de subpopulaes de clulas indiferenciadas do msculo esqueltico por propriedades de adeso


Fonseca, L.B.; Andrade-Lopes, A.L.P.; Godinho, R.O.; Chiavegatti, T. Luciana Brunetta Fonseca - Faculdade Oswaldo Cruz - FOC Rosely Oliveira Godinho - Farmacologia / Farmacologia Celular

Resumo:

Introduo: A replicao de DNA no msculo esqueltico diferenciado praticamente inexistente. Assim, a renovao e/ou a regenerao da fibra muscular depende da ativao de populaes de clulas mononucleadas quiescentes associadas ao msculo. Dentre elas, destacam-se as clulas satlites (SC), comprometidas com a linhagem miognica e localizadas sob a lmina basal da fibra muscular e as clulas-tronco derivadas do msculo esqueltico (muscle derived stem cells, MDSC), tambm quiescentes, porm capazes de se diferenciar em outras linhagens celulares. As MDSC tm a capacidade de excluir alguns corantes como o intercalador de DNA Hoechst 33342 e alta adeso ao plstico (Ade+), caractersticas que as distinguem das SC, que possuem baixa adeso ao plstico (Ade-) e cujos ncleos so marcados pelo Hoechst 33342. Estudos recentes tm avaliado a diferenciao das populaes de clulas mononucleadas associadas ao msculo esqueltico e a influncia de drogas amplamente utilizadas como indutores da diferenciao celular, como o glicocorticide dexametasona (DEXA). Objetivo: Estabelecer protocolos para identificao e isolamento de MDSC e de SC e avaliar o efeito da dexametasona na diferenciao destas populaes. Materiais e Mtodos: Culturas de clulas Ade+ e Ade- foram obtidas dos msculos sleo e extensor longos dos dedos (EDL). As clulas que aderiram nas 2 primeiras horas de plaqueamento foram denominadas Ade+ e mantidas em DMEM com baixa glicose, soro fetal bovino 2% e soro de cavalo 10%. Enquanto as clulas que no aderiram ao plstico em at 24 horas (Ade-) foram mantidas em DMEM com alta glicose, soro fetal bovino 10% e soro de cavalo 2%. As culturas foram tratadas ou no com DEXA 1M durante 15 dias e posteriormente submetidas marcao dos ncleos com Hoechst 33342 e da Fosfatase Alcalina, nas duas populaes. Resultados: Aps 4 dias de cultivo de clulas Ade+, notamos o aparecimento de aglomerados celulares (mioesferas) que expressam altas concentraes de ALP (ALP+). Nas culturas Ade-, o aparecimento das mioesferas foi tardio, sendo observado aps 7 dias de cultivo. Quando as culturas foram marcadas concomitantemente para ALP e com Hoechst dye 33342, observou-se a existncia de duas populaes de clulas ALP+: as clulas Hoechst+ e as clulas Hoechst-. O tratamento de clulas Ade- com DEXA promoveu aumento de 66% no nmero de fibras musculares em relao ao controle (1,55 + 0,2 fibras/mm2 n =21). A DEXA tambm induziu a hipertrofia das fibras em ambas as duas populaes, de 104% em clulas Ade+ e de 85% em clulas Ade-, em relao aos respectivos dimetros controles (19,8 +/0,8 m, n = 66; 22,7 +/- 2,8 m, n = 30). Concluso: A presena de clulas Hoechst+/ALP+ e Hoechst+/ALP- em culturas Ade- indica que as clulas satlites so capazes de originar clulas multipotentes. Alm disso, o rpido aparecimento de mioesferas aps cultivo de clulas Ade+ indica que a separao por adeso ao plstico permitiu o enriquecimento das culturas Ade+ com clulas indiferenciadas e com alta taxa de proliferao. Por fim, nossos dados mostram que a DEXA estimula a diferenciao miognica independentemente da subpopulao celular analisada: Ade- e Ade+. Finaciamento: PIBIC/CNPq; FAPESP; MCT/CNPq, DECIT/MS e Fundo Setorial de Biotecnologia (CT-Biotecnologia) # 552178/05-5. Aprovao no Comit de tica em Pesquisa No.: 0220/08 Participantes: Luciana Brunetta Fonseca, Ana Luiza Andrade de Paula Lopes, Rosely Oliveira Godinho, Tiago Chiavegatti

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Cincias Bsicas Morfolgicas Ttulo:


Autores: Bolsista: Orientador:

Tentativa de classificao taxonmica atravs de esporos de fungos em amostras de chuva polnica


Bitencourt, A.L.V.; Andrade, E.S. Enrico Sala de Andrade - UNIFESP Ana Luisa Vietti Bitencourt - Cincias Biolgicas /

Resumo:

O presente trabalho se desenvolve no contexto do Programa de Educao Tutorial - PET Cincia Biologias, Campus Diadema, coordenado pela professora Tutora Ana Luisa Vietti Bitencourt, visando a formao de uma coleo de referncia de plens e esporos, servindo de fonte tanto para a pesquisa, o ensino e a extenso. A coleo objetiva a construo de um banco de dados, atravs da formao do catlogo, para estudos relacionados composio de paisagens, a vegetao, a biodiversidade polnica, a disperso de palinomorfos e/ou caracterizao ambiental. A coleo est sendo realizada a partir de amostras de coletas de chuva polnica, inicialmente, no domnio da Floresta Ombrfila Mista (floresta com Araucaria), na estao ecolgica de Aracuri-Esmeralda (RS). A coleo abranger o registro de esporos de fungos em outros sistemas vegetacionais, como por exemplo, o domnio da Floresta Ombrfila Densa (Floresta Atlntica), na tentativa de se criar um banco de informaes com as espcies caractersticas ou dominantes em cada sistema vegetacional amostrado. A classificao taxonmica a partir das caractersticas morfolgicas dos esporos torna-se um grande desfio, j que os esporos encontram-se isolados nas lminas, desprovidos das demais estruturas que compem as colnias, que constituem a base para a classificao taxonmica dos fungos. A classificao taxonmica a partir dos esporos de fungos realizada por comparao morfolgica atravs da consulta de catlogos ou publicaes especializadas pr-existentes, levando-se em conta o nmero de septos, clulas, a cor, a textura ou ornamentao do corpo, a presena de hifas, poros ou fendas germinativas. Durante os sete primeiros meses de anlise e comparao dos esporos foi possvel identificar duas as famlias pertencentes a subdiviso Ascomycetes: Pleosporaceae e Meliolaceae. A famlia Pleosporaceae a mais freqente at agora e costuma apresentar quatro gneros: Curvularia sp, Pleospora sp, Alternaria sp e Pithomyces sp. Morfologicamente, os esporos de Curvularia sp so fragmosporos, apresentando, geralmente 4 septos e uma clula central maior e curva, o que sugere o nome do gnero. Os esporos de Pleospora sp, Alternaria sp e Pithomyces sp so dictiosporos, constitudos por multiclulas e septos transversais e longitudinais. A distino entre eles feita pelo tamanho e a forma das clulas nas extremidades dos condios e dos septos. Na famlia Meliolaceae o gnero identificado o Meliola sp., um fragmosporo, formado por 4 septos e 5 clulas de colorao marrom escuro. E ainda foram identificados dois gneros considerados insertos na classificao do Index Fungorum (Incertae Sedis): Dactylaria sp e Torula sp. O esporo de Dactylaria sp um fragmosporo, com 5 a 7 clulas, normalmente apresentando a clula central maior que as demais. A pesar da classificao inserta, alguns autores consideram como pertencentes a famlia Moniliaceae da subdiviso dos fungos imperfeitos (Deuteromycetes), Os condios do gnero Torula sp, so tambm fragmosporos, multicelulares, com 4 ou mais clulas arredondadas e de colorao marro escuro, diferenciando-se do Meliola sp pelo formato e o menor nmero de clulas. A tentativa da classificao taxonmica a partir da morfologia dos esporos, constitui uma importante fonte de dados para as pesquisas que utilizam a identificao de partculas palinomorfas em suspenso no ar ou no solo, tanto para estudos de composio da atmosfera, meio ambiente ou de ecossistemas, incluindo os fungos como elementos importantes e indicadores ambientais e evolutivos. Neste sentido a constituio de um catlogo contemplando informaes morfolgicas e taxonmicas, visa preencher lacunas neste campo do conhecimento, beneficiando profissionais dos mais variados interesses. Participantes: Ana Luisa Vietti Bitencourt, Enrico Sala de Andrade

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Cirurgia Aplicada

Ttulo:

Anlise de bipsias de artria femoral em pacientes submetidos ao tratamento endovascular de aneurisma e disseco de aorta abdominal e/ou torcica como fator preditor de uma doena arterial sistmica.
Real, D.S.S.; Silva, V.F.; Branco, J.N.R.; Catani, R.; Kim, H.C.; Ishigai, M.M.S; Buffolo, E.; Palma, J.H. Daniel Sundfeld Spiga Real - UNIFESP Jos Honrio de Almeida Palma da Fonseca - Cirurgia / Cirurgia Cardiovascular

Autores: Bolsista: Orientador:

Resumo:

O presente trabalho possui como principal mote propiciar subsdios cientficos para uma possvel identificao de alteraes endoteliais que possam servir de preditores de uma leso inicial na aorta para, assim, propiciar um tratamento clnico mais eficaz na preveno da degenerao da parede da aorta e de sua pior conseqncia, a ruptura do aneurisma. Para contemplar referido objetivo, utilizar-se- um estudo prospectivo em que sero arregimentados fragmentos de artria femoral de 0,3cm, imediatamente submetidos fixao em formalina 10%, evitando-se qualquer alterao do material, de vinte pacientes seqenciais diagnosticados com aneurisma e disseco de aorta torcica e/ou abdominal e que sero submetidos ao tratamento endovascular. Aps o tempo adequado de fixao, o material ser seccionado e preparado para o processamento histolgico habitual para incluso em parafina e colorao pelo mtodo do HE (hematoxilina e eosina). A anlise morfolgica avaliar as alteraes inflamatrias quanto intensidade do processo, elementos celulares envolvidos, intensidade da necrose tissular quando presente, presena ou no de corpos apoptticos (nucleares ou citoplasmticos), sinais de fibrose, calcificaes e presena de ateromas. Essas alteraes, caso significativas, sero selecionadas para uma anlise semiquantitativa, utilizando-se uma avaliao subjetiva em que ser fornecido um valor numrico que representar a intensidade do processo analisado como se segue: 0 (nenhum), 1 (discreto), 2 (moderado), 3 (acentuado) e 4 (severo). Para mais fidedigna avaliao, cada lmina ser subdividida em quatro campos de observao microscopia ptica. A cada campo ser referido um valor. Ser usada a MODA dos valores encontrados nos quatro campos como valor para anlise estatstica. Em atual tempo, os dados que se fizeram presentes ainda no nos permitem realizar qualquer aluso aos resultados esperados, sendo de pouca consistncia qualquer referncia a resultados. Portanto, no se far de valor, nesse tempo do projeto, qualquer tendncia que se figurasse como "resultados" nesse relatrio. Disso, opta-se pela no literao dos dados preliminares. Ao trmino dessas anlises, os resultados quantitativos sero submetidos ao estudo e anlises estatsticas com o Teste T de Student - ANOVA. Aprovao no Comit de tica em Pesquisa No.: 1928/07 Participantes: Daniel Sundfeld Spiga Real, Virgilio Figueiredo Silva, Joo Nelson Rodrigues Branco, Roberto Catani, Hyong Chun Kim, Mrcia Marcelino de Souza Ishigai, Enio Buffolo, Jos Honrio de Almeida Palma da Fonseca

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Cirurgia Aplicada Ttulo:

AVALIAO DA FUNO EVACUATRIA E DO PADRO MANOMTRICO E PROFILOMTRICO COMPUDARIZADO ANORRETAL DE PACIENTES PORTADORES DE MIELOMENINGOCELE OPERADA
Martins, J.L.; Salu, S. Samuel Salu - UNIFESP Jos Luiz Martins - Cirurgia / Cirurgia Peditrica

Autores: Bolsista: Orientador:

Resumo:

Objetivo: Avaliar a funo evacuatria e o padro manomtrico e profilomtrico computadorizado anorretal de pacientes portadores de mielomeningocele operada. Mtodos: Foram analisados 14 pacientes portadores de mielomeningocele operada aps o nascimento. Destes, 8 so do sexo feminino e 6 do sexo masculino. As idades variaram de 1 ano a 11 anos, sendo a mediana de 5 anos. A partir da manometria anorretal computadorizada, foram medidos a presso de repouso, a presso de contrao voluntria (esfncter externo), a resposta pressrica tosse (feixe puborretal + esfncter externo), o reflexo reto-esfincteriano (esfncter interno) e as curvas pressricas do canal anal. Estas medidas foram comparadas com o grau de continncia fecal e urinaria desses pacientes. Foi feita a introduo e retirada do cateter com construo de esquema computadorizado pressrico do canal anal, sendo os diferentes valores pressricos representados por diferentes cores: Verde = <20mmHg; azul = 20 - 50mmHg; amarelo = 50 - 80mmHg; vermelho = >80mmHg. Resultados: Observamos que 7 pacientes apresentavam bexiga neurognica ,6 apresentavam perda fecal associada, 4 deles tinham tambm perda urinria. 6 pacientes apresentavam constipao importante com formao de fecalomas e perda de muco misturado s fezes. 12 apresentavam algum grau de perda fecal. A presso mdia de repouso anal (PR) variou de 9 a 86mmHg, sendo a mdia 30,9mmHg. A presso de contrao voluntria anal (PCV) variou de 28 a 120mmHg, sendo a mdia 57,9mmHg. As curvas pressricas do canal anal tiveram forma normal em 9 pacientes e forma anormal em 5 pacientes, porm, a profilometria mostrou a predominncia das cores azul, seguida do verde na maior parte dos pacientes (85,7% apresentaram o azul e 71,4% apresentaram o verde). 3 pacientes tinham o valor da PR at 10mmHg, 2 pacientes acima de 10 e at 20mmHg e 9 pacientes acima de 20mmHg. 7 pacientes apresentaram a razo PCV/PR abaixo de 2 e deste grupo, 3 apresentaram incontinncia fecal importante. Usando a classificao de Martins, 1993, conclumos que 64,3% dos pacientes so continentes. No entanto, 85,7% deles apresentam algum grau de perda fecal, sendo na verdade pacientes retentores e no incontinentes fecais. Concluses: Mais de metade dos pacientes apresentaram presses baixas em toda circunferncia do canal anal. A maior parte dos pacientes apresentam algum grau de perda fecal sendo, na verdade, retentores e no incontinentes fecais. Participantes: Jos Luiz Martins, Samuel Salu

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Cirurgia Aplicada Ttulo:


Autores: Bolsista: Orientador:

Avaliao da intensidade da dor ps operatria pelas escalas analgicas visual, numrica verbal e de escores verbal.
Sakata, R.K.; Rabitti, G. Giovana Rabitti - UNIFESP Rioko Kimiko Sakata - Cirurgia / Anestesiologia, Dor e Terapia Intensiva

Resumo:

Durante 8 meses visitamos as enfermarias do Hospital So Paulo, sorteadas ao acaso( cirrgia cardaca,gastroenterologia,oncologia,etc). Nestas visitas foram realizados o preenchimento dos formulrios com as escalas de avaliao da dor do paciente ps operatrio. As escalas utilizadas foram a analgica visual, anumrica verbal e a descritiva verbal. Em seguida, aps a tabulao dos dados de todas as entrevistas feitas, os dados obtidos foram comparados e analisados a fim de avaliar se as escalas utilizadas apresentavam resultados concordantes. Aps devida anlise,conclumos que na maioria dos casos as escalas, apesar de avaliarem a dor atravs de mtodos diferentes apresentaram um consenso notvel. Participantes: Rioko Kimiko Sakata, Giovana Rabitti

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Cirurgia Aplicada Ttulo:


Autores: Bolsista: Orientador:

Avaliao da viabilidade de realizao de orquiectomia bilateral em pacientes com neoplasia prosttica em estadio avanado utilizando apenas a a cupuntura como forma de analgesia
Ortiz, V.; Cotait, M. Michel Cotait Neto - UNIFESP Valdemar Ortiz - Cirurgia / Urologia

Resumo:

Introduo: A acupuntura uma importante modalidade teraputica na Medicina Tradicional Chinesa, baseada na idia de um fluxo de energia atravs de todo o corpo, sendo que a interrupo desse fluxo seria o fator indutor das doenas. Um uso bem conhecido dessa tcnica chinesa o controle da dor. Aqueles que conhecem e utilizam a acupuntura como forma de analgesia afirmam que suas vantagens so suficientemente numerosas para torn-la prefervel analgesia clssica, sempre que possvel. Entre estas podemos citar: eliminao de medicamentos anestsicos com seus riscos, o paciente permanece consciente durante todo o procedimento colaborando inclusive com o cirurgio em algumas situaes em que sua participao importante, alem de manter a sua atividade motora conservada podendo ficar em p imediatamente aps o procedimento e deambular. Esta situao seria ideal para a realizao de pequenos procedimentos em ambulatrios, desafogando o centro cirrgico para cirurgias maiores. Segundo Niboyet (Niboyet, 1973), at 1970 20% de todas as intervenes cirrgicas realizadas na China anualmente eram realizadas por meio de analgesia acupuntural. Essas vantagens podem se tornar ainda mais importantes a partir do momento em que o seu mecanismo de ao seja totalmente elucidado. Objetivo: Avaliamos a viabilidade de realizao de orquiectomia bilateral em pacientes com neoplasia prosttica em estdio avanado utilizando apenas a acupuntura como forma de analgesia. Pacientes: Foram includos 8 pacientes, do sexo masculino, com neoplasia prosttica avanada, em seguimento no ambulatrio de Urologia do HSP/UNIFESP. Os pacientes que estavam em uso de medicao anticoagulante ou anti-agregante foram orientados a suspender a medicao por 10 dias antes do ato operatrio. Foram excludos pacientes em uso de medicamentos com ao sobre o sistema nervoso central. Mtodos: Para a realizao da anestesia por acupuntura, agulhas de ao-inoxidvel, descartveis e esterilizadas, de 0,30 X 30 mm, foram introduzidas na orelha externa, bilateralmente, em pontos clssicos da Medicina Tradicional Chinesa com ao na rea genital. Para potencializar a ao destes pontos, foi utilizado um aparelho de eletro estimulao. A eletro-acupuntura muito utilizada para casos de dor crnica, como por exemplo, em dores de membros contrados em sequelados de acidentes vasculares cerebrais. O paciente foi mantido com esse estmulo por 30 minutos, aps os quais foi realizado um teste de sensibilidade na rea escrotal por meio de uma pina cirrgica. Caso manifestasse presena de sensibilidade, administrava-se anestesia local com xilocaina 2% sem vasoconstrictor no cordo espermtico, conforme rotina adotada em nosso servio para este procedimento. A cirurgia inicia-se com a anti-sepsia da regio escrotal e perineal. Seguiu-se com uma inciso escrotal mediana, seco dos planos anatmicos e realizao de orquiectomia bilateral sub-capsular. Foi considerado sucesso quando o efeito anestsico proveio somente da acupuntura, dispensando totalmente o uso de anestsico local. Porem, quando no teste de sensibilidade inicial ou em qualquer momento do procedimento, foi necessria aplicao de anestsico local, o caso foi classificado como insucesso do mtodo. Resultados: No obtivemos sucesso em nenhum dos casos operados. Discusso/Concluso: Tentando entender o porqu dos resultados, uma possibilidade que o aparelho de eletro-estimulao utilizado no o mais adequado. Revendo o caso cujo procedimento foi realizado totalmente por meio de anestesia por eletro-acupuntura, o aparelho proporciona um tipo de onda do tipo exponencial. Porm, para a realizao do trabalho, os aparelhos de eletro-acupuntura disponveis eram de outro tipo, que proporcionam ondas do tipo sinuside. Revendo os dados descritos por Niboyet, o tipo de onda fundamental para o sucesso dos procedimentos. Todas as intervenes cirrgicas realizados na China so realizadas utilizando um aparelho que produz este tipo de onda. Infelizmente, s pudemos analisar o tipo de onda gerada pelo nosso aparelho depois de encerrado este trabalho. Outras possibilidades seriam: a freqncia da onda utilizada inadequada (continua, pausada ou mista), tempo de passagem de corrente insuficiente, localizao dos pontos auriculares inexatos (prximos, mas no no local correto). Conclumos que o mtodo pesquisado se revelou inadequado e seriam necessrios mais estudos, utilizando um aparelho de eletro-acupuntura cujas ondas fossem do tipo exponencial, as quais j se revelaram adequadas para anestesia acupuntural em outras intervenes (Niboyet, 1973). Com os pontos de acupuntura auricular utilizados e um aparelho de eletro - estimulo que produz ondas do tipo elipside, com uma freqncia mista, este mtodo no foi capaz de promover a anestesia em orquiectomias bilaterais. Aprovao no Comit de tica em Pesquisa No.: 01558/07 Participantes: Valdemar Ortiz, Michel Cotait Neto

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Cirurgia Aplicada Ttulo:


Autores: Bolsista: Orientador:

Distribuio de Quelide e Cicatriz Hipertrfica segundo Classificao de pele de Fitzpatrick


Farkas, C.B.; Hochman, B.S.; Isoldi, F.C.; Ferrara, S.F.; Furtado, F.M.P.; Ferreira, L.M. Caroline Benevides Farkas - UNIFESP Lydia Masako Ferreira - Cirurgia / Cirurgia Plstica

Resumo:

O quelide e a cicatriz hipertrfica so cicatrizes patolgicas com prevalncia de 1,5% nos USA e atingindo 16% na frica. No Brasil, apesar de no haver levantamento estatstico, sabe-se que a prevalncia relativamente alta. O mecanismo de formao dessas cicatrizes ainda no foi completamente elucidado. Entretanto, sabe-se que o quelide e a cicatriz hipertrfica podem ser correlacionados por uma natureza patognica comum, sendo consideradas distintas expresses fenotpicas de um mesmo distrbio fibropatognico. Por isso, tem sido genericamente denominadas de cicatrizes fibroproliferativas. Foram classificadas segundo Muir nos tipos: "Short-Term Evolution" (STE), que clinicamente corresponderia cicatriz hipertrfica, "Long-Term Evolution" (LTE), que corresponderia ao quelide, e "Intermediate Group" (IG), que corresponderia quelas com aspecto de STE, mas com evoluo clnica compatvel com LTE, ou cicatrizes LTE com evoluo clnica compatvel com cicatrizes do tipo STE. So mais freqentes em pessoas de cor de pele no branca, e mais prevalentes em regies tropicais. Pessoas provenientes de pases com clima frio, quando passam a residir em regies de clima tropical, aumentam a incidncia de cicatrizes fibroproliferativas, principalmente nas reas do corpo expostas radiao UV. Assim sendo, ao invs de relacionar as cicatrizes fibroproliferativas com tipos de pele segundo classificaes estticas, como cor de pele, uma classificao dinmica, como a de Fitzpatrick, que leva em considerao a reao da pele exposio solar, poderia contribuir no entendimento de sua fisiopatologia. Objetivo: Investigar a distribuio dos tipos de cicatrizes fibroproliferativas segundo a classificao de fototipos de Fitzpatrick. Mtodos: Esse estudo um estudo primrio, observacional, analtico e transversal. Foram includos 146 pacientes portadores de qualquer tipo de cicatriz fibroproliferativa, em um ou mais locais corporais, de ambos os gneros, com idade entre 15 e 60 anos. Os pacientes foram provenientes do ambulatrio da Disciplina Cirurgia Plstica da UNIFESP. A avaliao do tipo de pele do paciente, segundo a classificao de Fitzpatrick, foi realizada mediante questionrio aplicado pela pesquisadora, abrangendo 5 fototipos (I a V-VI). Nessa casustica, os pacientes portadores de cicatriz fibroproliferativa distriburam-se da seguinte forma: Fitzpatrick I (FI) = 0,684%; Fitzpatrick II (FII) = 8,904%; Fitzpatrick III (FIII) = 46,57%; Fitzpatrick IV (FIV) = 30,821%; e Fitzpatrick V-VI (FV-VI) = 13.014%. Foram excludas as cicatrizes fibroproliferativas cujo tempo de evoluo foi menor do que 6 meses, assim como as cicatrizes recidivadas ps-resseco cirrgica. Na classificao do tipo de cicatriz foi adotado o critrio de Muir, cuja casustica distribuu-se da seguinte forma: STE = 16,438%; LTE = 34,931% e IG = 48,63%. A localizao topogrfica da leso foi atribuda de acordo com as regies classificadas pela Nomenclatura Anatmica Internacional atualmente vigente, e foi distribuida: regio da orellha = 39,726%; regio pr esternal = 16,438%; regio deltidea = 8,904%; regio pbica = 5,749%; regio escapular = 4,79%; regio mamria = 4,79%; outras regies (somatria) = 19,603%. Para anlise da associao entre as variveis foi utilizado o teste do Qui-quadrado com nvel de significncia de p = 0,05. Resultados: Houve associao com significncia estatstica entre os tipos de cicatrizes de acordo com Muir e os fototipos de Fitzpatrick (p = 0,025). A distribuio dos tipos de cicatrizes fibroproliferativas segundo os fototipos de Fitzpatrick foi: FI apresentando STE = 100%; FII apresentando STE = 7,692%, LTE = 61,538%, IG = 30%; FIII apresentando STE = 22,059%, LTE = 38,235%, IG = 39,706%; FIV apresentando STE = 13,333%, LTE 24,444%, IG 62,222%; FV-VI apresentando STE = 5,263%, LTE = 31,579%, IG = 63,158%. Concluses: Existe associao entre o tipo de cicatriz fibroproliferativa e o fototipo de pele segundo Fitzpatrick. O fototipo de Fitzpatrick III sede mais freqente de cicatrizes fibroproliferativas. O tipo de cicatriz fibroproliferativa do tipo "Intermediate Group" mais prevalente nos fototipos de Fitzpatrick IV e V-VI. O tipo de cicatriz fibroproliferativa do tipo "Long-Term Evolution" (quelide) o tipo mais prevalente no fototipo de Fitzpatrick II. Aprovao no Comit de tica em Pesquisa No.: 1198/07 Participantes: Caroline Benevides Farkas, Bernardo Srgio Hochman Rzeszetkowski, Felipe Contoli Isoldi, Soraia Francisco Ferrara, Fabianne Magalhes Pimentel Furtado, Lydia Masako Ferreira

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Cirurgia Aplicada Ttulo:


Autores: Bolsista: Orientador:

Estudo da influncia da L-arginina na translocao bacteriana (TB). Estudo experimental em ratos


Koh, I.H.J.; Lee, A.J.H. Andr Jeng Huei Lee - UNIFESP Ivan Hong Jun Koh - Cirurgia / Tcnica Operatria e Cirurgia Experimental

Resumo:

A literatura tem salientado a participao da TB, a passagem de bactrias da luz intestinal para stios extra-intestinais, por via linftica e hematognica, na gnese da sepse. Alm disso, tambm tem sido considerada como um fator de agravamento de um estado de inflamao sistmica pr-existente, propiciando a evoluo para a falncia de mltiplos rgos. Considerando que o xido ntrico (NO) um mediador importante na fisiopatologia do choque sptico, pela sua ao na musculatura lisa dos vasos, contribuindo com a hipo-reatividade vascular da microcirculao, propusemos a estudar o efeito de L-arginina, um substrato para a formao do NO, no processo de TB. Objetivo: Avaliar a influncia da L-arginina na translocao bacteriana. Mtodos: Foram utilizadas 23 ratas fmeas Wistar-EPM, com idade aproximada de 3 meses que foram distribudos em 4 grupos: 1) Grupo Sham - Intestino delgado inoculado com soro fisiolgico (10ml); 2) Grupo L-arginina - Infuso contnua de L-arginina (1ml com 1,5mg/ml) via jugula por 01 hora; 3) Grupo TB - intestino delgado inoculado com bactrias E.coli (10ml na concentrao 1010); 4) Grupo TB + L-arginina - Intestino delgado inoculado com bactrias E.coli e infuso de L-arginina. Os animais foram anestesiados com injeo intramuscular de hidrato cloral + quetamina (1:4), 0,1ml/100g de peso corporal. Aps duas horas da inoculao bacteriana ou soro fisiolgico com ou sem a infuso de L-arginina, os animais foram submetidos mesma anestesia e realizada a laparotomia e a coleta do material para a cultura obedecendo a seguinte ordem: sangue da veia cava inferior (1ml), linfonodos do mesentrio, fgado e bao. A seguir, os rgos foram pesados em balana digital e submetidos triturao, em condies estreis e ressuspensos em 2ml de soro fisiolgico e uma alquota de 100 microlitros desta suspenso foi utilizada para a cultura em meio de McConkey. O sangue foi aliquotado sem macerao. Aps a incubao em placas de cultura a 370 C por 24 horas, foi feita a contagem do nmero de colnias bacterianas. Resultados: Os dois grupos controle (grupo Sham e grupo L-arginina, n=5 cada) foram negativos para a TB. Nos grupos TB (n=5) e TB+L-arginina (n=8) ocorreu ndices de translocao semelhantes para os linfonodos de mesentrio (mdia de 4,72 e 4,41 log10 UFC/g de tecido, respectivamente). No entanto, para o fgado e bao, os ndices de TB foram menores nos animais infundidos com L-arginina, apesar de no significantes. Alm disso, a positividade do processo de translocao por compartimento foi de 100% (linfonodo, fgado e bao) e de 40% (sangue) no grupo-TB, enquanto que no grupo TB + L-arginina, a positividade no linfonodo do mesentrio, fgado, bao e sangue foi de 100%, 62,5%, 50% e 0%, respectivamente. Concluso: A L-arginina mostrou uma tendncia a reduzir o ndice translocao para o compartimento sanguneo (via hematognica de TB) sem alterar a via linftica de TB. Alm disso, reduziu a proporo de positividade de TB para fgado, bao e sangue. Aprovao no Comit de tica em Pesquisa No.: 1780/07 Participantes: Ivan Hong Jun Koh, Andr Jeng Huei Lee

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Cirurgia Aplicada Ttulo:


Autores: Bolsista: Orientador:

Estudo histomorfomtrico da aorta ascendente e vlvula artica de pacientes submetidos operao de troca da raiz artica (cirurgia de Bentall e De Bono)
Silva, V.F.; Real, D.S.S.; Branco, J.N.R.; Catani, R.; Kim, H.C.; Ishigai, M.M.S; Palma, J.H.; Buffolo, E. Virgilio Figueiredo Silva - UNIFESP Enio Buffolo - Cirurgia / Cirurgia Cardiovascular

Resumo:

Introduo H quase quarenta anos atrs Hugh Bentall e Antony De Bono descreveram uma tcnica para o tratamento combinado das doenas da vlvula artica e do segmento da aorta ascendente utilizando um tubo valvulado no qual eram reimplantados os stios das artrias coronrias. Variantes tcnicas tm sido descritas com o mesmo propsito tendo resultados de sobrevida variveis. Operaes de preservao do aparelho valvar foram introduzidas para aqueles pacientes cujas cspides valvares eram normais ou possuam mnimas anormalidades. Objetivo Estudar as alteraes histomorfomtricas existentes no segmento da aorta ascendente e na cspide da vlvula artica de pacientes submetidos operao de troca da raiz artica, que se alterados justifiquem a substituio racional dos mesmos ou que nos permita refletir sobre a possibilidade de manuteno do aparelho valvar. Mtodo e pacientes Aps aprovao de presente trabalho pelo comit de tica e pesquisa da presente instituio Unifesp-EPM e tendo a concordncia do paciente em participar no estudo a partir de um termo de consentimento informado iniciamos a coleta dos segmentos utlizados em nosso estudo. Quinze doentes seqenciais com indicao de substituio da aorta ascendente e da vlvula artica foram includos em nosso estudo. Como grupo controle para o estudo, utilizamos fragmentos da aorta ascendente e das cspides articas de doadores de rgos cujos coraes no foram utilizados para transplante por motivos os quais no sejam leses cardacas. As amostras da parede da aorta foram coradas com hematoxilina eosina e azul de Alcian e usados para examinar o grau de fragmentao das fibras elsticas da camada mdia, sinais de processo inflamatrio, calcificao e ateromatose, alm de indicar possvel leso celular por necrose tissular e quantidade de mucopolissacardeos. A espessura da parede da aorta ascendente foi determinada pela reao de Verhoeff para deteco da presena de elastina utilizando o corante de Verhoeff como um contracorante para corar as fibras elsticas em negro As amostras das cspides das vlvulas articas foram analisadas macroscopicamente por um patologista que emitiu um laudo anatomopatolgico a pea cirrgica. Lminas foram confeccionadas utilizando o Hematoxilina-eosina para se identificar leses, a partir da observao de calcificao, degenerao ou processo inflamatrio. O reagente Azul de Alcian foi utilizado para avaliar degenerao das cspides das vlvulas a partir da deteco de depsitos de mucopolissacardeos Segmentos das cspides da vlvula artica foram preparados para a reao de Imunohistoqumica utilizando o anticorpo monoclonal especifico para a isoforma tipo endotelial da enzima xido ntrico sintetase. O acompanhamento clnico dos pacientes realizado junto ao setor de aorta da Disciplina de Cirurgia Cardiovascular UNIFESP - EPM. Dados demogrficos, perioperatrios e de seguimento a curto, mdio e longo prazo dos pacientes so coletados. Resultados At o momento nossos resultados so observacionais e, portanto no refletem comparaes estatsticas entre os segmentos estudados. Pela observao das tcnicas descritas pode-se averiguar a presena de leses na aorta ascendente dos pacientes submetidos operao de Bentall e De Bono A anlise inicial das vlvulas articas demonstram uma variabilidade importante de achados microscpicos. Nesse momento h a necessidade de submeter esse material a anlises morfomtricas que quantifiquem o grau de leso encontrado na aorta ascendente a fim de classific-lo e dessa forma possibilitar uma correlao com os achados histolgicos e patolgicos observados nas vlvulas articas podendo nesse nterim existir vlvulas sadias em oposio ao que foi observado no segmento da aorta ascendente. As reaes de imunohistoqumica esto em fase de confeco de laminas silanizadas e sero essenciais para quantificar a expresso da enzima xido ntrico sintetase que parecem estar diminudos em vlvulas articas biscpides. Concluso A partir da constatao de que h diferentes nveis de leso entre as cspides articas e o segmento da aorta ascendente correspondente, poderemos sugerir e justificar um procedimento mais conservador com a resseco do segmento doente da aorta ascendente e a possibilidade de preservao do aparelho valvar da raiz artica. Aprovao no Comit de tica em Pesquisa No.: 1927/07 Participantes: Virgilio Figueiredo Silva, Daniel Sundfeld Spiga Real, Joo Nelson Rodrigues Branco, Roberto Catani, Hyong Chun Kim, Mrcia Marcelino de Souza Ishigai, Jos Honrio de Almeida Palma da Fonseca, Enio Buffolo

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Cirurgia Aplicada Ttulo:


Autores: Bolsista: Orientador:

INFLUNCIA DO ESTRESSE OXIDATIVO NA INDUO DE HIPERATIVIDADE DO DETRUSOR APS UM PERODO DE OBSTRUO INFRAVESICAL CRNICA
Dambros, M.; Pereira, L.P.S. Leonardo Petramale de Souza Pereira - UNIFESP Miriam Dambros - Cirurgia / Urologia

Resumo:

Introduo: A Hiperplasia Benigna da Prstata apresenta-se como uma doena urolgica que atinge aproximadamente 30% dos indivduos do sexo masculino com idade superior a 60 anos. Na evoluo desta entidade clnica ocorre o desenvolvimento de diferentes disfunes miccionais que levam a inmeras queixas clnicas no paciente, afetando sua qualidade de vida de forma importante. At o momento, a literatura descreve algumas hipteses na tentativa de elucidar o mecanismo fisiopatolgico pelo qual a obstruo infravesical levaria a deteriorizao vesical. Entre as linhas de pesquisa, cita-se a aquela que descreve a presena de ciclos de isquemia seguida por um perodo de reperfuso, durante a mico de animais obstrudos, como a mais consistente e clara. O esclarecimento da participao da gerao de radicais livres na obstruo infravesical e sua associao com o padro de disfuno miccional apresentando na evoluo da doena obstrutiva torna-se essencial a fim de que esta linha de pesquisa possa detalhar a fisiopatogenia da doena miccional no idoso e propor medidas preventivas e teraputicas. Este projeto se prope a utilizar a tcnica de obstruo infravesical crnica, em animais cobaias (porquinho da ndia) que apresentam um trato urinrio inferior fisiologicamente semelhante ao humano. Aps a obstruo os animais tero suas bexigas avaliadas dinmica e enzimaticamente, tornando possvel a descrio de um padro esperado entre tempo de obstruo; nveis de estresse oxidativo, caractersticas da disfuno miccional. Objetivo:. avaliar a participao dos radicais livres, atravs da dosagem de MDA e Capacidade Antioxidante Total no tecido vesical e prosttico, na dinmica vesical, aps um perodo de obstruo infravesical crnica. Materiais e mtodos: Vinte e um animais ratos machos, imaturos, da raa Wistar, (pesando entre 200-230 gramas; entre 6-8 semanas de vida) devero ser empregados no experimento. Os animais sero divididos em 3 grupos com 7 animais em cada: Grupo A = sero submetidos a um procedimento sham; abertura e fechamento da parede abdominal, sem posicionamento do anel obstrutivo.Grupo B = os animais sero submetidos a um procedimento cirrgico para obstruo parcial do colo vesical (conforme descrito abaixo)., grupos A e B , 4 semanas aps o procedimento sero submetidos a um estudo urodinmico e sacrificados para remoo da bexiga , Grupo C = os animais sero submetidos a um procedimento para obstruo parcial do colo vesical, sendo que, quatro semanas antes do procedimento ser introduzida uma dieta rica em um antioxidante (flavonide galangina). Aps o procedimento, a dieta ser mantida, at quatro semanas aps, quando os animais sero submetidos avaliao urodinmica e sacrificados para remoo da bexiga. Discusso e resultados parciais: Para os dados at agora obtidos conclui-se que o grupo submetido a procedimento sham e/ou obstruo crnica com uso concomitante de galangina tiveram valores inferiores de MDA aos do grupo submetidos a procedimento de obstruo infravesical crnica. Para o grupo com obstruo crnica, observou-se ainda nveis menores de TEAC, corroborando com a hiptese de que elevados nveis de peroxidao lipidica associam-se a obstruo crnica infravesical. Participantes: Miriam Dambros, Leonardo Petramale de Souza Pereira

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Cirurgia Aplicada Ttulo:


Autores: Bolsista: Orientador:

Linfadenectomia Ileoinguinal em Melanoma Cutneo


Machado, T.Y.S.; Oliveira, A.F.; Santos, I.D.A.O.; Ferreira, L.M. Taila Yuri Siqueira Machado - UNIFESP Ivan Dunshee de Abranches Oliveira Santos - Cirurgia / Cirurgia Plstica

Resumo:

Introduo: O papel da disseco profunda dos linfonodos inguinais no melanoma maligno metasttico quando comparada disseco superficial continua controversa. Alguns pesquisadores defendem a linfadenectomia radical enquanto outros dizem que o resultado depende mais da extenso da doena do que da extenso do tratamento. Dessa forma, foram revisados os pacientes submetidos linfadenectomia inguinal para investigar possveis efeitos teraputicos da linfadenectomia ileoinguinal. Mtodos: Realizou-se uma reviso retrospectiva de 42 casos que foram submetidos linfadenectomia inguinal e ileoinguinal devido ao melanoma cutneo no Setor de Tumores da Disciplina de Cirurgia Plstica do Hospital So Paulo (UNIFESP). Foram excludos aqueles j operados previamente em outras instituies na regio inguinal, os que apresentaram outra neoplasia concomitante com exceo do carcinoma basocelular e os que apresentaram evidncia de metstase distncia durante o estadiamento. Avaliou-se o nmero de linfonodos comprometidos com o estadiamento M.D. Anderson e a evoluo clnica dos pacientes. Resultados: Um total de 17 linfadenectomias inguinais e 25 ileoinguinais foram analisados. A mdia de idade foi de 52,26 anos, sendo 22 (52,38%) do sexo feminino e 20 (47,62%) masculino. 20 pacientes apresentavam linfonodos clinicamente comprometidos na poca da cirurgia e, portanto, estadio clnico IIIB. Relacionando a espessura de Breslow com o nmero de linfonodos comprometidos encontrou-se que quanto maior a espessura, maior o nmero de linfonodos metastticos [7 (53,84%) dos pacientes que apresentaram 3 ou mais linfonodos comprometidos tinham Breslow > 4mm]. Aqueles com maior nmero de linfonodos ileoinguinais positivos alcanaram estadios mais avanados da doena [4 (66,67%) dos pacientes que atingiram o estadio IV de M.D. Anderson tinham 3 ou mais linfonodos metastticos]. Sete (41,17%) dos pacientes com metstase inguinal e 7 (28,00%) daqueles com metstase ilaca evoluram para metstase visceral. Dos 4 bitos confirmados, 1 (25%) tinha metstase ilaca. A sobrevida global de todos os pacientes foi de 21,62 % em cinco anos. Desses, a sobrevida foi de 66,67% quando no haviam linfonodos comprometidos e de 33,33% quando haviam 2 linfonodos positivos. O intervalo livre de doena, aps 5 anos da interveno cirrgica, foi de 10,81%. Concluses: O nmero de pacientes estudados ainda no foi suficiente para uma concluso. A pesquisa continuar com levantamento de mais casos, pois o grupo de pesquisa acredita que a linfadenectomia ilioinguinal pode melhorar a qualidade de vida dos pacientes durante a evoluo da doena. Aprovao no Comit de tica em Pesquisa No.: 1542/07 Participantes: Taila Yuri Siqueira Machado, Andrea Fernandes de Oliveira, Ivan Dunshee de Abranches Oliveira Santos, Lydia Masako Ferreira

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Cirurgia Aplicada Ttulo:


Autores: Bolsista: Orientador:

Padres e prevenibilidade de leses fatais por trauma em uma grande metrpole: estudo de autpsias na cidade de So Paulo, Brasil.
Wilson Jr, J.L.; Tineli, A.C.; Herbella, F.A.M. Jorge Luis Wilson Junior - UNIFESP Fernando Augusto Mardiros Herbella Fernandes - Cirurgia / Gastroenterologia Cirrgica

Resumo:

Objetivo: Este estudo visa a reviso de uma srie de mortes decorrentes de trauma, em uma grande metrpole, a fim de identificar causas de mortalidade previnveis. Mtodos: 500 casos consecutivos e no selecionados relacionados com a mortes decorrentes de trauma foram estudados prospectivamente. As variveis estudadas foram: mecanismo de trauma, etiologia, local da morte, necessidade de interveno cirrgica, erro mdico, rgos lesados, prevenibilidade e mortalidade. Os casos foram agrupadas de acordo com o mecanismo de trauma: trauma penetrante, trauma fechado, envenenamento, afogamento, queimaduras, e asfixia. Resultados: Registraram-se 418 casos (83,6%) do sexo masculino e 82 casos (16,4%) do sexo feminino (idade mdia de 39 19,6 anos, intervalo de 3 a 91 anos). Os traumas penetrantes representaram 217 (43%) dos casos. Os traumas fechado representaram 40% dos casos. O mecanismo de trauma mais comum entre os traumas penetrante foi os ferimentos por arma de fogo, representando 41% do total de casos; entre os traumas fechados, o mecanismo mais comum foram os acidentes de transporte, representando 22% do total de mortes. Houve 71 casos (14%) de bitos evitveis: (a) tromboembolismo, em 35 (7%) casos; (b) complicaes infecciosas em 25 (5%) casos; negligncia mdica em 7 (1%) casos, e (d) leses tratveis em vtimas hospitalizadas em 5 (1%) casos. Concluso: Este estudo mostra que a morte traumtica, na cidade de So Paulo est associada a leses graves e complexas. A preveno das mortes deve ser direcionada ao controle da violncia. Participantes: Jorge Luis Wilson Junior, Ana Carolina Tineli, Fernando Augusto Mardiros Herbella Fernandes

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Cirurgia Aplicada Ttulo:


Autores: Bolsista: Orientador:

Repercusso da Tonsilectomia sobre o Sistema Imune em Crianas


Barison, G.A.S.; Pignatari, S.S.N.; Weckx, L.L.M.; Salomo, R.; Themis, M.; Paes, M.; Maringolo, L.F. Gustavo Anderman Silva Barison - UNIFESP Shirley Shizue Nagata Pignatari - Otorrinolaringologia / Otorrinolaringologia Peditrica

Resumo:

As tonsilas palatinas so, por motivos diversos, verdadeiros focos de infeco, o que leva a uma srie de complicaes, cujo tratamento a tonsilectomia, um dos procedimentos cirrgicos mais realizados no mundo. OBJETIVO: verificar a repercusso da tonsilectomia sobre a produo de imunoglobulinas pelo sistema imune humoral na criana e seu possvel comprometimento. MTODO: foram analisadas at agora 19 crianas de idade entre 2 e 12 anos, agendadas para a realizao de tonsilectomia, em decorrncia de tonsilites de repetio ou hipertrofia obstrutiva das tonsilas. Cada criana foi submetida avaliao de IgA, IgG e IgM sricas, atravs de exames realizados imediatamente antes do procedimento cirrgico, com a criana sob anestesia geral e outro 4-5 semanas aps a cirurgia. Todos os exames foram realizados no Laboratrio Central do HSP. RESULTADOS: A partir dos dados coletados at agora, foi constatado que tanto a mdia dos resultados properatrios como dos ps-operatrios para cada imunoglobulina demonstrava valores dentro dos valores de referncia. Alm disso, a partir do teste t de Student, foi demonstrado no haver diminuio significativa (para p<0,05) de IgA (p=0,98 IC 95% = -135,62 a 137,44), nem de IgG (p=0,51 e IC 95% = -156,85 a 298,06) ou IgM (p=0,78 e IC 95% = -50,42 a 38,92). CONCLUSO: Os resultados sugerem que a tonsilectomia no interfere na concentrao srica de Imunoglobulinas, cujos valores no mostraram diminuio estatisticamente significativa, alm de se encontrarem compatveis com os padres sricos de normalidade. Aprovao no Comit de tica em Pesquisa No.: 0582/07 Participantes: Gustavo Anderman Silva Barison, Shirley Shizue Nagata Pignatari, Luc Louis Maurice Weckx, Reinaldo Salomo, Michele Themis, Mara Paes, Leonardo Fernandez Maringolo

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Cirurgia Aplicada Ttulo:


Autores: Bolsista: Orientador:

Sndrome da doena eutiroideana na cirurgia cardaca


Buffolo, E.; Locali, R.F.; Matsuoka, P.K.; Cherbo, T.; Gabriel, E.A. Rafael Fagionato Locali - UNIFESP Enio Buffolo - Cirurgia / Cirurgia Cardiovascular

Resumo:

Introduo: A concentrao srica dos hormnios tireoideanos sofre flutuaes em situaes de estresse fsico. Essa variabilidade poderia estar presente no psoperatrio da revascularizao do miocrdio, repercutindo-se negativamente na recuperao do paciente. Objetivo: Pesquisar a variabilidade do nvel srico de hormnios tireoideanos na cirurgia de revascularizao do miocrdio. Mtodo: Incluiu-se 24 pacientes de ambos os sexos, com idade mdia de 63,75 anos submetidos revascularizao do miocrdio, com emprego de circulao extracorprea. Os hormnios pesquisados foram o T4, T4 livre, T3, T3 livre e TSH, quantificados no properatrio, intra-operatrio, 24 e 48 horas de ps-operatrio. Utilizou-se o teste de Friedman, com significncia de 5% para rejeio da hiptese de nulidade. Resultados: Nos tempos avaliados notou-se uma queda significativa do T4 (p < 0,001), T4 livre (p < 0,002), T3 (p < 0,001) e T3 livre (p < 0,001). No entanto, no se observou queda significativa do TSH durante o perodo considerado (p = 0,157). Da mesma maneira, no houve complicaes ps-operatrias significativas, relacionadas queda dos nveis hormonais. Concluso: De fato, a cirurgia de revascularizao do miocrdio associada circulao extracorprea desencadeia uma queda nos nveis dos hormnios tireoideanos. Esse fenmeno poderia se repercutir clinicamente por situaes de baixo dbito cardaco no ps-operatrio, o que prolongaria a estadia do paciente em ambiente de terapia intensiva e, concomitantemente, elevaria as morbidades associadas e os custos hospitalares. Aprovao no Comit de tica em Pesquisa No.: 1870/06 Participantes: Enio Buffolo, Rafael Fagionato Locali, Priscila Katsumi Matsuoka, Tiago Cherbo, Edmo Atique Gabriel

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Cirurgia Aplicada Ttulo:


Autores: Bolsista: Orientador:

Transplante Renal em Crianas com Trombose de Veia Cava Inferior Usando Alongamento da Veia Renal do Enxerto
Vasconcelos, V.T; Pestana, J.O.M.; Baptista-Silva, J.C.C. Vladimir Tonello de Vasconcelos - UNIFESP Jos Carlos Costa Baptista Silva - Cirurgia / Cirurgia Vascular

Resumo:

H na literatura, poucos casos descritos de transplantes renais em crianas com trombose de veia cava inferior. Alm disso, no encontramos, casos descritos de seguimento desses pacientes. Assim, no h dados para avaliar se um sistema colateral ir manter a drenagem eficiente do retorno venoso. Com o alongamento da veia renal do enxerto esperamos demonstrar que no transplante de rim em crianas pode oferecer aos pacientes com hipoplasia renal, e agenesia ou trombose de VCI a no necessidade de dilise e ter uma boa qualidade de vida no ps transplante. Foram includos 8 receptores crianas de transplantes renais de doadores cadveres entre Janeiro de 2002 e Dezembro de 2006. Os vasos dos receptores foram avaliados pelo ultra-som e pela angiorressonncia magntica. Porm, em quatro casos somente no intraoperatrio foi descoberto a ocluso das veias ilacas e a cava inferior. A avaliao ps-transplante incluiu medio da funo renal pela creatinina do soro e taxa de filtrao glomerular medidos periodicamente durante o pstransplante, e medio de mudana do tamanho renal pela ultra-sonografia. Os dados, ainda em fase final de anlise, apontam para uma adequada funo do enxerto e uma patncia das anastomoses e do segmento alongado da veia renal do enxerto usado para transpor a ocluso da veia cava inferior. Aprovao no Comit de tica em Pesquisa No.: 0572/08 Participantes: Vladimir Tonello de Vasconcelos, Jos Osmar Medina Pestana, Jos Carlos Costa Baptista-Silva

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Cirurgia Experimental

Ttulo:
Autores: Bolsista: Orientador:

Avaliao das Tcnicas Artroscpicas no Joelho de Porco


Iha, L.A.N.; Navarro, R.D.; Granata Junior, G.S.M.; Reali, E.F. Enzo Fucci Reali - UNIFESP Ricardo Dizioli Navarro - Ortopedia e Traumatologia / Ortopedia e Traumatologia

Resumo:

OBJETIVO:A prtica ortopdica tem verificado, com freqncia ascendente, um significativo nmero de leses de joelho. As razes so diversas, mas certamente se associam a um estilo de vida mais ativo, talvez sem a preparao fsica adequada. Neste panorama, a cirurgia artroscpica, procedimento cirrgico apoiado totalmente pela literatura mundial, em grande parte dos casos escolhida para sanar o comprometimento do paciente e reintroduzi-lo nas atividades corriqueiras bem como nas atividades esportivas de alto nvel, se possvel sem dficit algum. Nosso projeto objetiva aprimorar a habilidade tridimensional, essencial em procedimentos artroscpicos, e propiciar desde cedo contato com procedimentos cirrgicos, mesmo que em modelo animal, o que contribuir para maior destreza e segurana em futuros procedimentos em humanos. MATERIAIS/MTODOS: O trabalho por ns realizado envolve a cirurgia experimental em peas de joelhos sunos(espcie escolhida devido a semelhana anatmica com o joelho humano e pelo baixo custo econmico) e desenvolvido no Laboratrio de Artroscopia do Departamento de Ortopedia e Traumatologia - UNIFESP Grupo de Cirurgia do Joelho e Artroscopia, cuja estrutura fsica e funcional decorrente de uma PPP(parceria pblico privada) e est aparelhado com materiais de primeira qualidade dentro das tcnicas modernas da especialidade. O projeto monitorizado pelos prprios membros do Grupo. RESULTADOS: O treinamento, realizado semanalmente, relacionou-se s abordagens das mais diferentes estruturas intraarticulares do joelho, como meniscos, ligamentos, cartilagens e outras mais. Para tanto foram utilizados os portais ntero-medial e ntero-lateral, que permitem a visualizao do compartimento lateral e do medial (em um portal coloca-se a ptica, conectada a cmera de vdeo, e em outro o instrumento a ser usado). Aps algum tempo de treinamento, tornou-se possvel a realizao de procedimentos intraarticulares como sinovectomias, meniscectomias totais ou parciais, condrectomias e reconstrues ligamentares. CONCLUSO: Uma vez que o procedimento artroscpico de considervel dificuldade, h uma demanda com longo perodo de aprendizado terico-prtico, supervisionado, para significativa evoluo - o que vem sendo conquistado gradativamente. Aprovao no Comit de tica em Pesquisa No.: 1743 /06 Participantes: Luiz Alberto Nakao Iha, Ricardo Dizioli Navarro, Geraldo S. M. Granata Junior, Enzo Fucci Reali

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Cirurgia Experimental Ttulo:


Autores: Bolsista: Orientador:

Caracterizao da resposta simptica no choque hemorrgico


Terada, C.A.; Caricati, A.; Mitsunaga Jr, J.K.; Poli-de-Figueiredo, L.F.; Porto, A.C.S.; Paiva, J.M.G. Cleide Alessandra Terada - UNIFESP Luiz Francisco Poli de Figueiredo - Cirurgia / Tcnica Operatria e Cirurgia Experimental

Resumo:

Introduo: O choque hemorrgico(CH) uma condio clnica caracterizada pela severa perda sangunea e importante mudanas neuroendcrinas e imunoinflamatrias,que se no forem revertidas ,podem resultar em disfuno de mltiplos rgos e at mesmo levar o indivduo morte.Para desvendar o papel do sistema nervoso autonmico no choque hemorrgico,estudamos a transmisso autonmica em um tecido rico em nervos simpticos (ducto deferente, DD)de animais submetidos ao CH.Alm disso,avaliamos o tratamento com soluo hipertnica 7,5% (SH), cristalide (SC)e reposio sangunea(RS). Mtodo: ratos machos wistar(16-20semanas) foram anestesiados e submetidos a cateterizao da artria e da veia femoral para aferio da presso arterial mdia (PAM)e choque hemorrgico, respectivamente.Foi retirado sangue at atingir PAM=40 mmHg. Aps o CH por 10,30 ou 60 min, os DD foram cirurgicamente removidos, montados em banho de rgos isolados entre dois eletrodos de platina e submetidos estimulao eltrica transmural (EET, 0,1-20Hz, 1ms, 60V) para o estudo das contraes pela noradrenalina (NA) e adenosina trifosfato (ATP) liberadas dos nervos simpticos.O efeito da reposio volmica ,com a hipertnica(equivalente a 1/4 do volume sanguneo retirado)reposio total do sangue retirado,e Ringer Lactato(3x o valor retirado)tambm foi estudado. Resultados:Controles mantiveram PAM de 105+-3mmHg em todos os 3 grupos experimentais.Os ratos que foram submetidos ao choque hemorrgico controlado apresentaram uma PAM mdia de 39+-3mmHg depois de 10,30 e 60 minutos.O tipo de resposta obtida (medidos pela ATP e noradrenalina liberados) aps eletroestimulao no grupo choque hemorrgico e grupo controle foi similar,contudo a amplitude das contraes foi maior nos 3 grupos hemorrgicos.A adio de Tetrodotoxina aboliu as contraes induzidas pela EET confirmando a natureza neurognica de tais contraes.A contrao mediada por ATP foi bloqueada pelo antagonista do purinoceptor Suramina P2-seletivo.A contrao mediada pela noradrenalina foi bloqueada pela Prazosin,um "receptor adrenrgico -seletivo". Concluses:Os resultados obtidos sugerem que o choque hemorrgico causa um aumento na funo simptica,provavelmente, devido a um incremento na liberao do ATP e da Noradrenalina mediante a hipotenso.O tratamento com um pequeno volume de soluo hipertnica , mas no com todo o sangue retirado e nem com um grande volume de Ringer Lactato,atenuou a hipotenso e preservou a hiperatividade simptica.Esses achados foram importantes para entender a fisiopatologia do choque hemorrgico e seus tratamentos. Aprovao no Comit de tica em Pesquisa No.: 0669/07 Participantes: Cleide Alessandra Terada, Afonso Caricati Neto, Jorge Kiyoshi Mitsunaga Junior, Luiz Francisco Poli de Figueiredo, Ana Carolina Souza Porto, Joo Marcos Goes de Paiva

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Cirurgia Experimental Ttulo:


Autores: Bolsista: Orientador:

Efeitos da estimulao histaminrgica no hipocampo dorsal , sobre o dficit de evocao de memria induzido pela escopolamina, em um teste de esquiva inibitria em ratos.
Pereira, B.C; Medalha, C.C. Brbara Caetano Pereira - UNIFESP Carla Christina Medalha - Cincias da Sade / Cincias da Sade

Resumo:

Muitas evidncias sugerem que a histamina cerebral esteja envolvida nos processos de aprendizagem e memria, porm a verdadeira contribuio do sistema histaminrgico hipocampal nestes processos continua em discusso. O objetivo do presente estudo foi analisar a interao entre a atividade do sistema histaminrgico no hipocampo dorsal e seus efeitos sobre o processo de aprendizagem da esquiva inibitria, com o uso do clobenpropit, um antagonista histaminrgico do receptor H3. Para este propsito ratos Wistar machos, pesando entre 250 e 280g, mantidos com ciclo claro-escuro de 12h, e com gua e comida ad libidum, foram bilateralmente implantados por meio da cirurgia estereotxica e treinados em um paradigma de esquiva inibitria. Foi utilizada uma caixa claro-escuro automatizada, com porta deslizante e sensores de posicionamento animal. O procedimento ocorreu em dois dias consecutivos sendo que, no dia do treino, os animais foram colocados no compartimento claro e, ao entrarem no compartimento escuro, receberam um choque nas patas por 5s (0,3 mA; 40V). Imediatamente aps o treino os animais foram tratados com salina (n=16) e clobenpropit nas doses de 5,0 (n=16) e 10,0 (n=11) g/regio. A latncia de entrada no compartimento escuro foi registrada e, 24 horas aps, foi realizado o teste por meio da repetio do procedimento sem aplicao do choque. Houve diferena estatisticamente significativa entres as latncias do teste (P= 0.0357; Anlise de Varincia de Kruskal-Wallis; Teste de Dunn) sendo a latncia do grupo injetado com clobenpropit na dose de 10 g/regio maior que o grupo controle. Os resultados apontam para um efeito facilitador do sistema histamrgico hipocampal dorsal sobre a consolidao da memria em teste de esquiva inibitria. Aprovao no Comit de tica em Pesquisa No.: 1616/07 Participantes: Brbara Caetano Pereira, Carla Christina Medalha

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Autores: Bolsista: Orientador:

Efeitos do ch verde sobre a sensibilidade insulina em ratos tratados com dieta hipercalrica
Pereira de Maria, U.; Shiroma, D.H.; Sasaki, P.H.; Egushi, R.; Oller do Nascimento, C.M.; Oyama, L.M. Uyara Pereira de Maria - UNIFESP Lila Missae Oyama - Cincias da Sade / Cincias da Sade

Resumo:

Estudos demonstram que o consumo ou a suplementao de alimentos com fitoestrgenos, como as isoflavonas encontradas no ch verde, podem apresentar efeitos positivos sobre a obesidade e a homeostase glicmica. Assim, avaliamos o efeito da ingesto de ch verde sobre a resposta glicmica de ratos tratados com dieta hiperlipdica e hipercalrica. Ratos Wistar com 1 ms de vida foram tratados com dieta padro comercial ou hiperlipdica e hipercalrica (D) associado (CV) ou no (A) com a ingesto de ch verde, por 4 semanas. Foi avaliado o ganho de massa corporal, o contedo de protena e gordura da carcaa e realizado o teste de tolerncia glicose. Os resultados mostram que o ganho de massa corporal dos animais tratados com dieta hiperlipdica e hipercalrica foi menor que o grupo tratado com dieta padro, somente nas duas primeiras semanas. Analisando a composio da carcaa, observamos que o contedo de protenas no foi diferente entre os grupos experimentais. Por outro lado, avaliando o contedo de gordura da carcaa, observamos que o tratamento com dieta hiperlipdica e hipercalrica associado ao ch verde promoveu aumento quando comparado ao respectivo grupo controle (DCV = 13,72,1; CCV = 6,41,6), mostrando que a ingesto de ch verde no foi eficiente para normalizar este parmetro. Ao avaliarmos o teste de tolerncia glicose, os resultados mostram que a ingesto de dieta hiperlipdica e hipercalrica promoveu um aumento na glicemia, ao compararmos com os outros grupos experimentais, 4 minutos aps a administrao de glicose. A associao da dieta hiperlipdica e hipercalrica com a ingesto de ch verde normalizou a resposta carga de glicose (CA = 353,949,4; CCV = 393,840,5; DCV = 228,721,4; DA = 664,970,2). Estes resultados mostram que apesar da ingesto de ch verde no ter normalizado o contedo de gordura da carcaa, foi eficiente em normalizar a resposta glicmica. Apoio Financeiro: CNPq, CAPES e FAPESP Aprovao no Comit de tica em Pesquisa No.: 1184/07 Participantes: Uyara Pereira de Maria, Daniele Harumi Shiroma, Pedro henrique Sasaki, Ricardo Egushi, Cludia Oller do Nascimento, Lila Missae Oyama

XVI Congresso de Iniciao Cientfica da UNIFESP 2008

Cirurgia Experimental Ttulo:


Autores: Bolsista: Orientador:

ESTRESSE OXIDATIVO INDUZIDO PELO H2O2 EM FIBROBLASTOS CULTIVADOS DE QUELIDES


Gragnani Filho, A.; Alvim, W.F.B. Welington Fabrcio Botelho Alvim - UNIFESP Alfredo Gragnani Filho - Cirurgia / Cirurgia Plstica

Resumo:

Quelides so proliferaes benignas da derme, desencadeados por uma resposta hiperproliferativa do tecido conectivo em conseqncia ao trauma, no regredindo espontaneamente. O mecanismo de formao complexo, pouco compreendido e no existe tratamento bem sucedido. O fibroblasto fundamental no reparo tecidual e pode se tornar apopttico ou senescente como resultado do estresse oxidativo durante o processo de cicatrizao. O objetivo deste estudo a anlise da senescncia e apoptose dos fibroblastos humanos cultivados de quelide, desencadeadas no estresse oxidativo pelo perxido de hidrognio (H2O2). O isolamento de fibroblastos foi realizado pela tcnica de explante a partir de fragmentos de quelide descartados de cirurgias reparadoras. As clulas foram submetidas ao estresse oxidativo pela adio de 150 M de H2O2 nas garrafas, ficando na incubadora mida por 2 horas. Aps esse perodo, trocou-se o meio das clulas e depois de 48 horas na incubadora, as clulas foram semeadas em placas de 24 poos. No dia seguinte, 72 horas aps a exposio ao perxido de hidrognio, avaliou-se a senescncia das clulas, atravs da marcao da enzima lisossomal, a galactosidase, presente em fibroblastos senescentes, considerado um marcador do processo de senescncia destas clulas. Para a avaliao da viabilidade e apoptose das clulas foi utilizada a marcao com o iodeto de propdeo (PI) e a anexina V (AV) no citmetro de fluxo FACSClibur, que foi realizada 48 horas aps a exposio ao perxido de hidrognio, no momento em que foi realizada a semeadura das clulas nas placas de 24 poos para a anlise da senescncia. As clulas foram colocadas em tubos para citmetro e marcadas com os respectivos marcadores, em quatro grupos: sem marcao, com marcao dupla com PI e AV, somente PI e somente AV. Todos os experimentos foram realizados em triplicata, sendo observadas as mdias e os desvios padro das triplicatas para a anlise estatstica. Na avaliao da senescncia, com a galactosidase, obtivemos a mdia de 21,9 de clulas senescentes para os fibroblastos originrios de quelide sem a exposio ao perxido de hidrognio, e que aps a exposio ao perxido de hidrognio foi obtida a mdia de 46,7 de fibroblastos senescentes de quelide. Estes resultados foram submetidos anlise de varincia (ANOVA), corrigido pelo teste comparativo mltiplo de Tukey entre os grupos, e mostrou diferena significativamente diferente (p<0,05) entre os grupos, o que demonstra ser o perxido de hidrognio um bom indutor senescncia no fibroblasto derivado de quelide. Quando os resultados foram comparados pelos mesmos testes estatsticos aos de fibroblastos humanos de pele normal, observamos mdia de 19 de clulas senescentes, e que aps a exposio ao perxido de hidrognio foi obtida mdia de 54 de clulas senescentes. No foi encontrada diferena estatisticamente significante entre os fibroblastos senescentes originrios de quelide e de pele normal que foram ou no expostos ao perxido de hidrognio. Assim, os resultados preliminares mostram uma resposta semelhante pelos fibroblastos de pele normal e de quelide ao estresse oxidativo induzido pelo perxido de hidrognio nas dosagens subtxicas utilizadas. No entanto, os resultados sugeriram uma resistncia maior pelos fibroblastos de quelide ao estresse oxidativo induzido pelo perxido de hidrognio na concentrao de 150 M. O fato pode ser explicado pelo desenvolvimento de uma maior taxa de apoptose dos fibroblastos originrios de quelide, fato esse sugerido pelos resultados preliminares da anlise da citometria de fluxo, que atualmente esto sendo avaliados e repetidos para mostrar essa tendncia. Mtodos teraputicos, como o uso do perxido de hidrognio, que possa induzir uma maior taxa de apoptose nos fibroblastos de quelide, caso esse fato seja confirmado nos dados preliminares nessa anlise final dos experimentos na citometria de fluxo, poder ser mais uma alternativa na busca do conhecimento e no tratamento definitivo dos quelides. Aprovao no Comit de tica em Pesquisa No.: 0242/08 Participantes: Alfredo Gragnani Filho, Welington Fabrcio Botelho Alvim

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Cirurgia Experimental Ttulo:


Autores: Bolsista: Orientador:

Estudo da reao inflamatria em ratos induzida pelo uso de materiais sintticos em cirurgia cardaca
Gomes, W.J.; Melo, G.R. Geraldine Ragot de Melo - UNIFESP Walter Jos Gomes - Cirurgia / Cirurgia Cardiovascular

Resumo:

A insuficincia cardaca uma sndrome caracterizada por uma ativao imune e inflamatria prolongada, que pode culminar em disfuno miocrdica, dentre elas a disfuno isqumica de ventrculo esquerdo. Para a correo desse processo patolgico tem sido feito, atualmente, o uso de materiais sintticos no corao induz formao de resposta de corpo estranho, com conseqente reao inflamatria crnica no tecido cardaco. Estudos anteriores mostraram que pericrdio bovino e compostos de teflon so associados com infiltrao inflamatria predominantemente mononuclear no tecido adjacente e induo de resposta imunolgica tipo enxerto-hospedeiro. Essas formaes constituem fonte ativa de produo de citocinas, que podem iniciar e manter processos inflamatrios induzidos por substncias estranhas ao organismo. Portanto, o uso de materiais sintticos na reconstruo do ventrculo esquerdo pode estar relacionado induo de processos inflamatrios crnicos do miocrdio, que hoje so reconhecidos como a base da fisiopatologia da insuficincia cardaca. O objetivo do estudo realizar comparao entre a resposta inflamatria mediada por macrfagos em ratos da cepa Wistar-EPM em relao ao material inserido. Os 36 animais foram divididos em 3 grupos: grupo em que foi inserido dcron, o que foi inserido pericrdio bovino e o grupo controle, em que foi realizado apenas um pequeno corte no pericrdio do rato. Cada grupo foi, ento, dividido em 2 para que fossem realizados os sacrifcios, feitos com sobrecarga de tiopenthal, no 21 dia e no 90 aps o procedimento . Dessa forma, a evoluo da resposta inflamatria e a comparao entre os grupos puderam ser analisadas. Foram coletados o sangue retirado dos animais, que foi centrifugado e separado o plasma e o boto leucocitrio, foram armazenados em frascos contendo EDTA em congelador a -80; ambos objetivando futuras anlises citolgicas e biomoleculares, e o corao dos animais e o ventrculo esquerdo separado em 2 partes, uma que foi preparada para estudo histolgico e outra que foi guardada em congelador a -80 para ser realizada a extrao de RNA total e posterior realizao da Reao em cadeia de polimerase PCR em tempo real (qPCR). O material separado para anlise histolgica foi fixado em lquido de Bouin e posteriormente desidratado, diafanizado e includos em parafina. A partir dele, foram feitas lminas, submetidas colorao por Tricrmio de Masson, Hematoxilina-Eosina (HE) e ao mtodo da Imunohistoqumica. O primeiro mtodo resulta em uma cor azul caracterstica para o colgeno, facilitando a visualizao dessa protena tpica da reao inflamatria. A partir desses resultados, foram analisadas as lminas submetidas HE e foi, ento, observada a desorganizao das fibras miocrdicas nos locais onde havia concentrao de colgeno, sugerindo o local de inflamao. A Imunohistoqumica, realizada com o marcador CD68 um mtodo mais sensvel, em que no se obteve sucesso em algumas realizaes. Nova tentativa foi realizada, porm a anlise das lminas ainda no foi completada. No conseguimos realizar o mtodo do PCR, pois nosso pedido de auxlio CNPq no foi aceito. Requisitaremos, ento, auxlio financeiro FAPESP. Como resultados incompletos, temos: nos grupos de 21 dias - 16,67% de fragmentos positivos no grupo controle, 40% no grupo com insero de dcron e ausncia de positividade para o grupo do pericrdio bovino; nos grupos de 90 dias - no foi observada resposta inflamatria no grupo controle, 83,3% de positividade em dcron e 80% em pericrdio bovino. A partir de tais resultados pode-se supor que provavelmente o grupo de 21 dias mostrou uma reao inflamatria aguda caracterizada pela presena de infiltrado mesmo no grupo controle, no qual no foi inserido enxerto de qualquer espcie. Podemos diante destes resultados inferir que houve nos grupos de 90 dias provavelmente uma resoluo da reao inflamatria aguda. Alm disso houve posterior estabilizao da reao inflamatria crnica,mostrada por uma grande porcentagem de material acometido nos grupos de 90 dias com enxerto dcron e pericrdio respectivamente com 83,3% e 80% de positividade. Isso sugere provavelmente que h um grande papel dos enxertos na induo e manuteno da resposta inflamatria nesse tecido, mesmo por que o grupo que apenas teve como a agresso a cirurgia no mostrou a longo prazo resposta inflamatria . Pudemos observar que no caso do dcron, houve nos dois grupos uma resposta inflamatria aguda exacerbada (40% e 83,3%) e uma resposta inflamatria aumentada em pequena porcentagem em relao ao pericrdio bovino (0% e 80%) no grupo de 90 dias sugerindo que o dcron provavelmente teria um papel aumentado na induo de inflamao em relao ao pericrdio. Os resultados esto incompletos pois esse embasamento relaciona-se apenas aos resultados por Tricrmio de Masson. Como analisamos apenas 36 lminas optamos por no realizar um estudo estatstico. Aprovao no Comit de tica em Pesquisa No.: 1813/06 Participantes: Walter Jos Gomes, Geraldine Ragot de Melo

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Cirurgia Experimental Ttulo:


Autores: Bolsista: Orientador:

Fixao interna das fraturas: Estudo experimental biomecnico para avaliar o mtodo ideal de estabilizao das fraturas.
Ueda, L.R.S.; Reis, F.B.; Sousa, G.O.; Gomes, J.O. Lo Renato Shigueru Ueda - UNIFESP Fernando Baldy dos Reis - Ortopedia e Traumatologia / Ortopedia e Traumatologia

Resumo:

A utilizao de fixao interna na estabilizao de fraturas sseas vem, h muito tempo, sendo feita. Porm, o conhecimento sobre como se obter a melhor relao custo-benefcio para o paciente ainda no muito clara, sendo que estudos mais precisos sobre o assunto devem ser feitos, visto que a literatura no fornece evidncias conclusivas sobre o tema. Sabe-se que o nmero e a localizao de parafusos nas placas fixadoras influenciam diretamente na estabilidade proporcionada ao local da fratura ssea; entretanto, estatisticamente no h consenso em quanto varia essa influncia. aceito tambm que quanto maior o nmero de parafusos utilizados, mais invasivo ser o tratamento, e, conseqentemente maiores sero as chances de complicaes mdicas. Quanto maior o nmero de parafusos, maior ser a estabilidade, mesmo que no proporcionalmente; porm, no sabemos at que ponto esse ganho ser recompensada pela maior interferncia biolgica no local da fratura. A meta desse trabalho , atravs de estudos comparativos em modelos experimentais, verificar qual a melhor forma biomecnica de estabilizao das fraturas, sendo considerada a utilizao de placas e parafusos. O conceito de fixao biolgica, ou seja, menor nmero possvel de parafusos e conseqente menor dano biolgico com uma adequada estabilidade, ser nosso principal objetivo a ser testado. Aprovao no Comit de tica em Pesquisa No.: 0865/07 Participantes: Lo Renato Shigueru Ueda, Fernando Baldy dos Reis, Guilherme Oliveira de Sousa, Jefferson de Oliveira Gomes

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Cirurgia Experimental Ttulo:


Autores: Bolsista: Orientador:

Impacto da formao do colgeno sobre a deiscncia de sutura


Mansur, R.B.; Cukier, C.; Scalabrini, M.; Ferraro, J.C.; Lopes Filho, G.J. Rodrigo Barbchan Mansur - UNIFESP Gaspar de Jesus Lopes Filho - Cirurgia / Gastroenterologia Cirrgica

Resumo:

Esse trabalho tem como objetivo geral analisar o impacto do processo de cicatrizao sobre a deiscncia de parede abdominal. Sero selecionados pacientes com hrnia incisional tardia em cicatriz mediana submetidos a ressutura da parede abdominal. O grupo controle ser constitudo de pacientes submetidos a relaparatomia que no tenham tido deiscncia da cicatriz primria. Dos pacientes submetidos ao presente estudo sero obtidos fragmentos da cicatriz existente, da pele e da aponeurose do msculo reto distantes dois centmetros da linha mediana. A partir da anlise histolgica e imunohistoqumica dessas amostras pretendemos determinar caractersticas do metabolismo intermedirio do colgeno que interfiram no processo de cicatrizao normal, predispondo o aparecimento da hrnia incisional tardia. Participantes: Rodrigo Barbchan Mansur, Celso Cukier, Milton Scalabrini, Jos Roberto Ferraro, Gaspar de Jesus Lopes Filho

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Cirurgia Experimental Ttulo:


Autores: Bolsista: Orientador:

Pentoxifilina no retalho TRAM monopediculado em ratos expostos a nicotina


Almeida, L.F.S.; Gomes, H.F.C.; Abla, L.E.F.; Silveira, T.; Costa, M.; Chiferi Junior, V.; Brasolin, A.G.; Ferreira, L.M. Luiz Fernando Saldanha de Almeida - UNIFESP Luiz Eduardo Felipe Abla - Cirurgia / Cirurgia Plstica

Resumo:

Consagrado como uma das melhores alternativas para reconstruir a mama aps mastectomia, o retalho musculocutneo transverso do msculo reto do abdome (TRAM Flap) tem como complicao mais temida a necrose tecidual. Sabe-se que a pentoxifilina melhora a microcirculao aumentando a flexibilidade dos eritrcitos e diminuindo a viscosidade do sangue pela queda da concentrao de fibrinognio plasmtico. Visa-se, com este estudo experimental randomizado, analisar o efeito da pentoxifilina no retalho TRAM monopediculado em ratos expostos nicotina. Dividiu-se os 40 animais em quatro grupos, sendo que o primeiro recebeu apenas soluo fisiolgica de NaCl, outro recebeu soluo de nicotina, outro pentoxifilina e o ltimo nicotina e pentoxifilina. O retalho apresentava 5 cm latero-lateralmente e 3 cm crnio-caudalmente, posicionado 1 cm abaixo do processo xifide. Realizou-se a medida da porcentagem de necrose pelo mtodo do gabarito de papel, descrito por Sasaki e Pang. A anlise estatstica das reas de necrose mostrou correlao estatisticamente significante apenas entre os grupos controle e pentoxifilina, mostrando diminuio da necrose com o uso da droga, no podendo-se afirmar o mesmo quando h tmabm exposio a nicotina. Cortes corados por hematoxilina e eosina sero analisados microscopicamente. Aprovao no Comit de tica em Pesquisa No.: 1840/07 Participantes: Luiz Fernando Saldanha de Almeida, Heitor Francisco de Carvalho Gomes, Luiz Eduardo Felipe Abla, Tiago Silveira, Mara Costa, Valcir Chiferi Junior, Adriano Brasolin, Lydia Masako Ferreira

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Distrbios da Comunicao e Audio

Ttulo:
Autores: Bolsista: Orientador:

A compreenso do bairro como diviso poltica do espao fsico da cidade: Estudo com alunos surdos do Ensino Fundamental
Soares, M.A.L.; Gomes, M.T.; Marrafon, C.S.; Nascimento, A.L.M.; Nascimento, T.A. Mnica Takaaci Gomes - UNIFESP Maria Aparecida Leote Soares - Fonoaudiologia / Distrbios da Audio

Resumo:

Introduo: A poltica de incluso escolar ocasionou um aumento nos estudos voltados ao desempenho acadmico dos alunos surdos. Pesquisas indicam que um nmero significativo desses alunos enfrenta muita dificuldade na aquisio dos contedos curriculares. Sabemos que o principal aspecto dessa dificuldade a apreenso dos conceitos por parte dos alunos encaminhados ao NAIALE - Ncleo de Atuao Interdisciplinar em Audio, Linguagem e Educao, que oferece, desde 2005, como atividade de extenso do Departamento de Fonoaudiologia da Universidade Federal de So Paulo, atendimento a alunos surdos com dificuldades de aprendizagem do contedo escolar. Visto que a linguagem, uma das reas de maior abrangncia para atividade da Fonoaudiologia, tambm inclui os contedos escolares, incorpor-los terapia fonoaudiolgica pode resultar, nesse caso, em um trabalho que implica no s em possibilitar contedos apresentados, mas tambm em conhecer o espao em que vive, mas tambm em saber se situar na cidade em que mora.. Na disciplina de Geografia, a dificuldade de compreenso desses conceitos agravada pela pouca vivncia do espao fsico da cidade, pois grande parte dos alunos da escola pblica transita apenas de casa para a escola. Objetivo: Este trabalho teve por objetivo realizar avaliao e interveno voltadas ao desenvolvimento da linguagem para a aquisio dos conceitos inerentes ao contedo de geografia definidos para o Ciclo I do Ensino Fundamental. Metodologia: O trabalho foi desenvolvido no NAIALE com 5 escolares com deficincia auditiva neurossensorial de grau moderado a profundo, bilateral e usurios de aparelhos auditivos. A avaliao inicial consistiu na aplicao de um questionrio com 45 perguntas que visaram averiguar a compreenso do bairro como diviso poltica da cidade, a caracterizao do bairro em que moram e do bairro de Vila Clementino, onde se localiza o NAIALE, assim como as semelhanas e diferenas entre eles, suas principais vias, meios de transporte, centros culturais e estabelecimentos comerciais. Para o trabalho de interveno, foram realizadas 10 sesses, semanalmente, com durao de uma hora cada em que foi trabalhado o contedo de acordo com as dificuldades apresentadas na avaliao. Ao trmino da interveno o contedo foi reavaliado pelo mesmo instrumento da avaliao inicial. Resultados: Na avaliao feita antes da interveno, os alunos obtiveram uma mdia de 17,3% de acertos, indicando que os escolares apresentaram pouco conhecimento do bairro em que moram e no o compreenderam, juntamente com os demais bairros, como integrantes de uma cidade. Ou seja, no tinham o conceito de bairro como diviso poltica da cidade. Na reavaliao, verificamos que esses alunos obtiveram uma mdia de 80,7% de acertos, o que indica que adquiriram grande parte dos conceitos trabalhados nas sesses. Concluso: Pde-se constatar que a dificuldade de linguagem, tanto oral quanto escrita, aliada s dificuldades de acesso aos diferentes bairros das diferentes regies pela dimenso e complexidade da cidade de So Paulo, so fatores que limitam as oportunidades de vivenciar os espaos e, conseqentemente, comprometem a aquisio do contedo de Geografia voltado ao conhecimento da cidade nos vrios aspectos de sua conformao. Aprovao no Comit de tica em Pesquisa No.: 0595-08 Participantes: Maria Aparecida Leote Soares, Mnica Takaaci Gomes, Caroline Somera Marrafon, Ana Laura Machado Nascimento, Tnia Augusto Nascimento

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Distrbios da Comunicao e Audio Ttulo:


Autores: Bolsista: Orientador:

A compreenso dos enunciados na resoluo de problemas matemticos em escolares surdos


Soares, M.A.L.; Marrafon, C.S.; Gomes, M.T.; Nascimento, A.L.M.; Nascimento, T.A. Caroline Somera Marrafon - UNIFESP Maria Aparecida Leote Soares - Fonoaudiologia / Distrbios da Audio

Resumo:

Introduo: O baixo desempenho na disciplina de matemtica tem sido constatado nas avaliaes do rendimento escolar dos alunos das escolas pblicas. A matemtica se caracteriza como uma dimenso da linguagem e sem ela o processo de alfabetizao no se consolida. Em relao aos alunos surdos essa dificuldade agravada pelos prejuzos causados pela perda da audio, na aquisio e desenvolvimento da linguagem, que compromete o desempenho na leitura e na escrita. Alguns autores afirmam que o principal problema que esses alunos enfrentam na disciplina de matemtica diz respeito mais compreenso dos enunciados do que resoluo de contas isoladas Por isso, faz parte do processo de avaliao dos pacientes encaminhados ao NAIALE com queixa de dificuldades escolares, verificar o desempenho em relao ao contedo de matemtica definido para o Ensino Fundamental da rede pblica. Objetivo: Com base nestes estudos os objetivos do trabalho foram: 1) Verificar a capacidade de resoluo de contas isoladas, aplicando as tcnicas referentes s operaes fundamentais; 2) Identificar a palavra representada pelo smbolo utilizado na matemtica para designao das diferentes operaes fundamentais; e 3) Identificar, nos enunciados das situaes problemas, a palavra que indicava a operao a ser realizada.Metodologia: Foram definidas trs etapas para a avaliao de matemtica de um grupo de dez alunos surdos com deficincia auditiva de grau moderado a profundo, usurios de prteses auditivas. Para o processo de avaliao foram apresentadas atividades de resoluo de contas isoladas, sendo elas: operao de adio e subtrao sem reserva; adio e subtrao com reserva; multiplicao e diviso sem reservas e multiplicao e diviso com reservas. Todas as contas que envolviam adio e subtrao continham numerais que representavam unidades, dezenas, centenas e milhares. Tambm foram apresentados quatro enunciados de situaes problemas em que, para a soluo de cada um deles, era requerida uma das quatro operaes fundamentais. Cada enunciado continha na ao principal a palavra que indicava a operao a ser realizada: mais, menos, vezes, dividir. Os resultados sero analisados de forma quantitativa identificando a concentrao dos acertos e erros cometidos nas atividades propostas nas trs etapas. Aprovao no Comit de tica em Pesquisa No.: 0599/08 Participantes: Maria Aparecida Leote Soares, Caroline Somera Marrafon, Mnica Takaaci Gomes, Ana Laura Machado Nascimento, Tnia Augusto Nascimento

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Distrbios da Comunicao e Audio Ttulo:


Autores: Bolsista: Orientador:

A Relao das Habilidades Pragmticas com o Desenvolvimento Infantil em Deficientes Auditivos


Curti, L.M.; Quintas, T.D.; Chiari, B.M. Luana Mota Curti - UNIFESP Braslia Maria Chiari - Fonoaudiologia / Disturbios da Comunicao Humana

Resumo:

Ao determinar o impacto da deficincia auditiva na vida de uma pessoa, fundamental que se considere o efeito da perda auditiva na habilidade de se comunicar. A pragmtica uma habilidade comunicativa, social. o aspecto funcional da comunicao, ou seja, o uso da linguagem. O conhecimento pragmtico influencia na compreenso e na produo de atos de fala, porm, os mecanismos responsveis pela aquisio de tal conhecimento parecem diferir um tanto daqueles que esto por trs do desenvolvimento da linguagem. Utilizar-se da anlise pragmtica permite ao fonoaudilogo a determinao de como e quando a criana utiliza suas funes comunicativas. Podendo obter melhor diagnstico e controle evolutivo nos casos da deficincia auditiva nas crianas. Objetivo: Comparar os desempenhos de crianas, deficientes auditivas, em um teste de triagem do desenvolvimento e na avaliao das habilidades pragmticas, a fim de verificar possveis relaes. Mtodo: Esta pesquisa foi realizada no Departamento de Fonoaudiologia da Universidade Federal de So Paulo - Escola Paulista de Medicina (UNIFESP-EPM), no laboratrio de Investigao da Linguagem nos Distrbios da Audio. A amostra constituda de 16 crianas de 2;0 a 6;7 anos de idade, sendo todas portadoras de deficincia auditiva neurossensorial de grau moderado a profundo. Esta pesquisa um subproduto do projeto denominado: Avaliao das habilidades pragmticas em um grupo de crianas deficientes auditivas, que tem a aprovao do Comit de tica em Pesquisa, nmero 1363/07. Foi aplicado, em todas as crianas, o Teste de Triagem do Desenvolvimento de DENVER II (Frankenburg, 1967), constando itens relativos ao desempenho pessoalsocial; motor fino-adaptativo; linguagem e motor grosseiro, obtidos atravs da realizao de tarefas solicitadas s crianas e/ou relato de seus responsveis. Com o objetivo de analisar as habilidades pragmticas, foi aplicado o Teste de Linguagem Infantil ABFW - Pragmtica (Fernandes, 2000), sendo observados e registrados os atos, meios comunicativos e funes comunicativas. Aps a coleta de todos os dados, estes foram analisados qualitativamente e quantitativamente, comparando o desempenho obtido no teste de triagem do desenvolvimento com o teste de linguagem infantil. Resultados: Na primeira comparao realizada, foram considerados os parmetros iniciais observados na anlise de cada teste, ou seja, relacionado o escore total obtido no Teste de Triagem de DENVER II com o nmero de atos por minuto efetuados pelas crianas no Teste de Linguagem Infantil - ABFW - Pragmtica. No teste de Triagem, 100% (n=16) da amostra foi classificada como risco e no Teste de Linguagem Infantil, todas as crianas tambm tiveram o desempenho atrasado quanto ao nmero de atos por minuto em relao idade. A fim de que houvesse uma comparao mais estreita entre os dois testes, o Teste de DENVER II foi desmembrado em reas j subdivididas no protocolo e pareado com os aspectos analisados no Teste de Linguagem Infantil. A rea pessoal-social do Teste de DENVER II foi comparada com a funo comunicativa predominante desempenhada pela amostra no Teste ABFW, j que ambos aspectos consideram a capacidade comunicativa e de interao social das crianas. Houve uma discrepncia entre os dados encontrados, j que, na triagem do desenvolvimento 86,67% (n=16) da amostra teve resultado compatvel com a normalidade, e no teste de linguagem infantil, apenas 31,25%(n=16) obtiveram resultados esperados, ou seja, somente 5 crianas utilizaram-se de funes comunicativas mais interacionais. A rea classificada como linguagem no teste de triagem do desenvolvimento foi comparada com o meio comunicativo predominante, utilizado pelas crianas no teste de linguagem infantil. No primeiro, 100 % (n=16) das crianas foram classificadas como risco, segundo critrios de normalidade contidos no DENVER II. No ABFW, 100%(n=16) da amostra utilizaram-se do meio gestual para se comunicar, o que no esperado para crianas normais, acima de dois anos, j que estas j so capazes de se expressar por linguagem oral. Concluso: Podemos considerar que o teste de triagem do desenvolvimento de DENVER II capaz de nos alertar sobre alguns aspectos avaliados no teste de linguagem infantil ABFW - Pragmtica. Quanto classificao geral do DENVER II vale ressaltar que se houver pelo menos um aspecto classificado como risco, isto reflete no escore total obtido no teste. Dessa forma, considerando que toda a amostra no foi capaz de se expressar por comunicao verbal, tiveram resultados abaixo do esperado na rea da linguagem, influenciando, assim, no resultado geral do Teste de DENVER II. Este dado, tambm capaz de sugerir resultados obtidos no ABFW, j que, neste teste h uma classificao das competncias verbais e funcionais dos indivduos. E no caso de deficientes auditivos, o transtorno pragmtico constitudo causal ou consequentemente por um prejuzo nos componentes expressivo e receptivo de linguagem. Aprovao no Comit de tica em Pesquisa No.: 1363/07 Participantes: Luana Mota Curti, Taiana dAvila Quintas, Braslia Maria Chiari

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Distrbios da Comunicao e Audio Ttulo:


Autores: Bolsista: Orientador:

A relao do atendimento teraputico com o desempenho escolar de alunos surdos inseridos no ensino regular
Soares, M.A.L.; Nascimento, A.L.M.; Marrafon, C.S.; Gomes, M.T.; Nascimento, T.A. Ana Laura Machado Nascimento - UNIFESP Maria Aparecida Leote Soares - Fonoaudiologia / Distrbios da Audio

Resumo:

Introduo: O NAIALE- Ncleo de Atuao Interdisciplinar em Audio, Linguagem e Educao, oferece desde 2005, como atividade de extenso do Departamento de Fonoaudiologia da Universidade Federal de So Paulo, atendimento a alunos surdos e ouvintes com dificuldades de aprendizagem do contedo escolar. A partir de 2006, juntamente com os responsveis pelo Ambulatrio de Audiologia Educacional, foram promovidos os Encontros de Pais de Pacientes Surdos. A tnica das discusses tem girado em torno da dificuldade de obteno do diagnstico de surdez e, principalmente, do atendimento teraputico. Objetivo(s): Sabendo que essa uma das dificuldades enfrentadas pelas famlias de surdos, usurios dos servios pblicos de sade, o objetivo desse trabalho foi investigar a trajetria de um grupo de pais relacionando-as com o desempenho escolar de seus filhos, uma vez que o diagnstico precoce e o atendimento teraputico de linguagem so condies essenciais para o desenvolvimento cognitivo das crianas surdas e conseqentemente para sua escolarizao. Mtodo: Para tanto, foram selecionados quinze pais de alunos surdos de escolas pblicas, estes com perda auditiva neurossensorial, bilateral, de grau moderado a profundo, matriculados da 3 a 5 sries do Ensino Fundamental. Para a coleta dos dados foi aplicado questionrio contendo 26 questes com respostas abertas. As perguntas visaram obter informaes sobre o percurso dos pais, desde o momento da suspeita da surdez de seu filho at o momento atual. Para avaliao do desempenho na leitura, foram aplicadas questes para a verificao da compreenso de alguns textos que compunham as provas de Lngua Portuguesa do Sistema de Avaliao de Rendimento Escolar do Estado de So Paulo - SARESP do ano de 2005, elaboradas para as quatro sries iniciais do Ensino Fundamental. Resultados: Pde-se verificar, por meio desses instrumentos, que dentre o grupo de pais, seis tinham filhos que obtiveram diagnstico antes dos trs primeiros anos de vida, atendimento teraputico de linguagem e o atendimento pedaggico especfico. Cinco tinham filhos que apesar de terem obtido o diagnstico de surdez nos trs primeiros anos de vida no conseguiram nenhum tipo de terapia e quatro tinham filhos que receberam o diagnstico somente aps os trs primeiros anos de vida e no tiveram nenhum tipo de atendimento teraputico. Os alunos que no obtiveram o diagnstico de surdez antes dos trs primeiros anos de vida e tampouco conseguiram atendimento teraputico de linguagem tiveram desempenho abaixo dos demais grupos. Os alunos que obtiveram o diagnstico nos trs primeiros anos de vida, mas que, tambm, no conseguiram atendimento teraputico de linguagem, apresentaram pior desempenho que aqueles que obtiveram diagnstico em idade semelhante, mas que tiveram atendimento teraputico. Alunos que obtiveram, alm do atendimento teraputico, o atendimento pedaggico especfico aprendizagem do contedo escolar, tiveram melhor desempenho que os dois primeiros grupos. Concluso: Apesar de sabermos que o rendimento escolar resultado de mltiplas determinaes, pudemos verificar que possvel estabelecer uma relao entre o acesso aos atendimentos oferecidos pelos servios de sade pblica e o desempenho acadmico. Aprovao no Comit de tica em Pesquisa No.: 0608/08 Participantes: Maria Aparecida Leote Soares, Ana Laura Machado Nascimento, Caroline Somera Marrafon, Mnica Takaaci Gomes, Tnia Augusto Nascimento

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Autores: Bolsista: Orientador:

ALTERAES FONOAUDIOLGICAS EM PACIENTES PEDITRICOS COM TUMOR DE SISTEMA NERVOSO CENTRA


Gonalves, M.I.R.; Popriaga, R. Rafaela Popriaga - UNIFESP Maria Ines Rebelo Gonalves - Fonoaudiologia / Distrbios da Comunicao

Resumo:

Os tumores do SNC em populao peditrica no Brasil apresentam incidncia moderada e envolvem uma srie de fatores scio-econmicos. As principais terapias de tratamento de cncer so freqentemente efetivas na conteno da progresso do tumor, porm trazem o risco de importantes seqelas, podendo provocar uma srie de efeitos colaterais, comprometendo funes orgnicas. Dentre as seqelas, so encontradas alteraes fonoaudiolgicas que podem afetar as funes de fala, voz, deglutio, linguagem e /ou audio, as quais, geralmente, so conseqncias de tratamentos cirrgico, quimioterpico e/ou radioterpico, e tambm, da presena e localizao do tumor. Objetivo: Investigar as alteraes fonoaudiolgicas mais freqentes em pacientes peditricos com tumor de SNC, correlacionando-as com o tipo do tumor, sua localizao e o tratamento realizado. Mtodos: Anlise de levantamento de dados de protocolos de avaliao e anamnese fonoaudiolgica realizadas de maro de 2002 a dezembro de 2007 com 200 sujeitos, de ambos os sexos, com idades de at 18 anos, diagnosticados com Tumor de Sistema Nervoso Central. Resultado esperado: Detalhar e quantificar estatisticamente as alteraes fonoaudiolgicas que acometem pacientes peditricos com Tumor de SNC. Aprovao no Comit de tica em Pesquisa No.: 0308/08 Participantes: Maria Ines Rebelo Gonalves, Rafaela Popriaga

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Distrbios da Comunicao e Audio Ttulo:


Autores: Bolsista: Orientador:

ATRIBUIO DE ESTADOS MENTAIS NO DISCURSO DE CRIANAS PORTADORAS DO ESPECTRO AUTISTA


Rodrigues, L.C.C.B.; Tamanaha, A.C.; Perissinoto, J. Lyvia Christina Camarotto Battiston Rodrigues - UNIFESP Jacy Perissinoto - Fonoaudiologia / Distrbios da Comunicao Humana

Resumo:

Introduo: Os quadros que compem o Espectro Autista podem ser caracterizados pela presena de prejuzos severos e invasivos nas reas de interesses, interao social e comunicao; para alguns autores, as inabilidades sociais e de comunicao podem ser explicadas pela ausncia ou dificuldade em atribuir estados mentais ao interlocutor, ou seja, compreender e atribuir intencionalidade e sentimentos aos outros (Teoria da Mente). Objetivo: Analisar a atribuio de estados mentais no discurso de portadores do Espectro Autista por meio da comparao de discurso aps 6 meses e 1 ano de terapia fonoaudiolgica. Mtodos: Trabalho analisado e aprovado pelo CEP - UNIFESP (0469/07). A amostra foi constituda por 5 crianas autistas e 5 com Sndome de Asperger (DSM-IV). Foram colhidas dos pronturios amostras de fala para caracterizao do desempenho verbal e da habilidade de atribuio de estados mentais de cada criana e transcritas fitas da avaliao, aps 6 meses e 1 ano do processo teraputico, com durao aproximada de 45 minutos cada sesso; o discurso foi analisado, foram consideradas as emisses espontneas e no as repeties e, para este estudo, verificamos as palavras pertencentes s classes substantivo e verbo que foram classificadas como termos que referem estados fsicos e mentais. Resultados: O teste da diferena das medianas foi utilizado para anlise estatstica da amostra, sendo esta diferena estatisticamente significante ao nvel de 10%. Na comparao intra-grupos, quanto atribuio de estados fsicos e mentais, foi observada diminuio estatisticamente significante na atribuio de substantivos de estados fsicos no perodo de 6 meses entre as transcries 1 e 2 para o grupo de crianas Autistas, mas no para o grupo de crianas com Sndrome de Asperger, alm de tambm aparecer esta diferena na anlise total das crianas, sem diferena estatisticamente significante para a atribuio de verbos de estados fsicos e mentais e substantivos de estados mentais para ambos os grupos. Foi observada correlao estatisticamente significante entre ter vocabulrio inicial adequado e apresentar maior nmero de substantivos de estados mentais na primeira transcrio. Na anlise intergrupos (Sndrome de Asperger x Autismo), no foi observada diferena estatisticamente significante quanto atribuio de verbos e substantivos de estados fsicos ou mentais em se comparando as transcries 1 e 3. Concluso: A partir da anlise dos resultados, observou-se que a atribuio de estados mentais no discurso de crianas portadoras do espectro autista no se modificou aps perodo de interveno teraputica fonoaudiolgica, porm, h indicativos de que crianas com melhor vocabulrio apresentam melhor desempenho na atribuio de estados mentais. Aprovao no Comit de tica em Pesquisa No.: 0469/07 Participantes: Lyvia Christina Camarotto Battiston Rodrigues, Ana Carina Tamanaha, Jacy Perissinoto

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Distrbios da Comunicao e Audio Ttulo:


Autores: Bolsista: Orientador:

Audiometria tonal e vocal em deficincia auditiva de grau profundo: influncia do tipo de transdutor.
Marangoni, A .T.; Gil, D. Andrea Tortosa Marangoni - UNIFESP Daniela Gil - Fonoaudiologia / Distrbios da Comunicao Humana

Resumo:

Introduo: Existem trs tipos de fones na prtica da audiologia clnica que so utilizados para obteno de limiares de audibilidade tanto para tons puros como para estmulos de fala, a saber: fones supra aurais, circum-aurais e de insero. Com os fones supra aurais TDH-39, devido a grande rea do crnio exposta vibrao, h possibilidade de deficientes auditivos neurossensoriais de grau profundo apresentarem respostas por vibrao, impossibilitando a medida exata da sensibilidade auditiva nesses pacientes, especialmente nas freqncias baixas. Os fones de insero reduzem a rea da cabea exposta ao estmulo sonoro devido a sua adaptao dentro do meato acstico externo (MAE) por meio de plugs de espuma descartveis e desta forma, reduzem as respostas por vibrao. Alm disso, tm como vantagem o conforto do paciente, a confiabilidade do exame e o aumento da atenuao entre as orelhas. Objetivo: Este estudo tem como objetivo verificar a influncia do tipo de transdutor na obteno dos limiares auditivos por via area em indivduos com deficincia auditiva neurossensorial de grau profundo. Material e mtodo: Foram avaliados 50 indivduos encaminhados para avaliao audiolgica para obter o benefcio do transporte coletivo gratuito, sendo 25 do sexo feminino, com idades variando de 17 a 55 anos, e 25 do sexo masculino, variando de 16 a 55 anos de idade, com presena de deficincia auditiva neurossensorial bilateral de grau profundo simtrica com curva timpanomtrica tipo A e ausncia de comprometimentos neurolgico e/ou cognitivo evidentes. Os indivduos foram submetidos anamnese, meatoscopia, e posteriormente, audiometria tonal limiar e audiometria vocal (Limiar de deteco de voz - LDV). A avaliao audiolgica (audiometria tonal limiar e logoaudiometria) foi realizada em cabina acstica, com o audimetro de marca MA-41 Interacoustics calibrado segundo o padro ANSI 1969. A audiometria tonal limiar e a audiometria vocal foram realizadas com fones supra-aurais TDH-39, e posteriormente, com os fones de insero ER-3A. Para a utilizao do fone ER3A no mesmo equipamento, foram utilizados os fatores de correo sugeridos pelo fabricante para as freqncias de 250 a 8000 Hz. Durante a pesquisa do limiar de audibilidade, realizada nas freqncias de 250 a 8000 Hz, os indivduos foram instrudos a levantar a mo para todos os estmulos ouvidos, mesmo que em fraca intensidade. A freqncia inicial do teste foi de 1000 Hz e posteriormente foram obtidos os limiares de audibilidade nas freqncias de 2000, 3000, 4000, 6000, 8000, 500 e 250 Hz, nesta ordem. A tcnica utilizada na obteno dos limiares com ambos os transdutores foi o mtodo descendente. Na audiometria vocal (LDV) com ambos os transdutores, os indivduos foram instrudos a levantar a mo para todos os estmulos de fala percebidos, tendo sido realizada a viva voz inicialmente a 100dB NA, e registrado o menor nvel de intensidade na qual foi detectado o som. Resultados: Na anamnese pudemos observar que 82% da amostra apresentou perda auditiva congnita e apenas 18% apresentou perda auditiva adquirida. Em relao presena de zumbido e tontura, 6% e 24% da amostra apresentaram os sintomas, respectivamente. Quanto audiometria tonal e vocal, notamos que, com o fone de insero, foram obtidos limiares auditivos maiores do que os obtidos com o fone supra-aural TDH-39 nas freqncias 250Hz, 500Hz, 1000Hz, 3000Hz e 8000Hz, sendo estatisticamente significantes nas freqncias de 250Hz e 1000Hz. Ao observarmos a diferena entre os resultados obtidos com o transdutor TDH-39 e o ER-3A em cada orelha separadamente, notamos que a diferena entre os transdutores foram maiores na orelha direita nas freqncias de 250Hz, 500Hz, 4000Hz, sendo estatisticamente significante somente na freqncia de 250 Hz, a favor do transdutor TDH-39. Ao compararmos a diferena entre os resultados obtidos com os transdutores TDH-39 e o ER-3A em cada sexo separadamente, notamos que a diferena entre os transdutores foram maiores no sexo masculino nas freqncias de 250Hz, 500Hz, 1000Hz, e 8000Hz, sendo estatisticamente significante somente na freqncia de 250 Hz, a favor do transdutor TDH-39. No entanto, nas freqncias de 2000Hz, 3000Hz, 4000 Hz e no LDV, a diferena maior foi encontrada no sexo feminino, sendo estatisticamente significante somente no LDV, a favor do transdutor ER-3A. Concluso: Deficientes auditivos neurossensoriais de grau profundo apresentam limiares tonais de audibilidade mais elevados (piores) com os fones de insero nas freqncias baixas (250Hz e 1000Hz), sendo a diferena maior, comparando os transdutores, na orelha direita e no sexo masculino na freqncia de 250Hz. Aprovao no Comit de tica em Pesquisa No.: 1044/07 Participantes: Andra Tortosa Marangoni, Daniela Gil

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Autores: Bolsista: Orientador:

Avaliao audiolgica em pacientes portadores da seqncia de mebius


Kim, J.J.H.; Souza, M.R.F.; Guedes, Z.C.F.; Azevedo, M.F. Jessica Ji Hae Kim - UNIFESP Marisa Frasson de Azevedo - Fonoaudiologia / Distrbios da Audio

Resumo:

INTRODUO: A Seqncia de Mebius consiste em uma paralisia congnita e no progressiva do VI e do VII par craniano, podendo envolver tambm outros pares, tais como o III, IV, V, VIII, X, XI e XII, e ocorre, na maioria das vezes, bilateralmente. Tal paralisia compromete funes motoras e sensoriais. Dentre as possveis alteraes cita-se expresso facial reduzida; ausncia de reflexo palpebral; lbios pequenos e permanentemente abertos e alteraes neurolgicas. Quanto aos aspectos otolgicos, possvel a ocorrncia de deformidades no pavilho auricular e orelhas calciformes. Tambm h relatos de alteraes de orelha mdia e interna, sem informaes acerca da possibilidade de perda auditiva. No Brasil, a incidncia de casos de Seqncia de Mebius tem aumentado nos ltimos anos. O crescimento da populao acometida por esta doena possivelmente est relacionado com a popularizao do uso de misoprostol como abortivo, droga comercialmente conhecida como Cytotec, e indicada para o tratamento de lcera gstrica e duodenal. OBJETIVO: O presente trabalho teve como objetivo verificar a ocorrncia de perda auditiva, caracterizando seu tipo, em pacientes sem riscos para perda auditiva e comparar tais resultados queles j encontrados nos pacientes com Seqncia de Mebius, em trabalho realizado em 2006/2007. METODOLOGIA: A amostra foi composta por 22 crianas distribudas em dois grupos: grupo estudo - 11 crianas com Seqncia de Mebius de um ms a 13 anos de idade e grupo controle - crianas sem Seqncia de Mebius e sem risco para perda auditiva neurossensorial, pareadas por idade e sexo ao grupo estudo. Todas as crianas foram submetidas a avaliao audiolgica que constou de: observao comportamental para crianas com idade inferior a trs anos, audiometria ldica para crianas com idade entre trs e cinco anos e audiometria tonal liminar com idade acima de cinco anos e em todas as crianas foram realizadas as medidas de imitncia acstica e a pesquisa das emisses otoacsticas. RESULTADOS: No grupo controle observou-se 8 indivduos (72,7%) audiologicamente normais e 3 (27,3%) com perda auditiva condutiva devido otite, sendo em 2 (66,7%) bilateral e em 1 (33,3%) unilateral. No foram encontrados pacientes com perda auditiva neurossensorial nesse grupo. No grupo estudo observou-se: 7 indivduos (63,6%) com perda auditiva condutiva, sendo em 4 (57,1%) o comprometimento bilateral e em 3 (42,9%) unilateral. Neste grupo, 4 (57,1%) pacientes apresentaram disfuno tubria e 3 (42,9%) apresentaram otite. Ainda no grupo estudo, foram encontrados 2 indivduos (18,2%) audiologicamente normais e 2 indivduos (18,2%) com perda auditiva neurossensorial, sendo que 1 (50,0%) apresentou comprometimento bilateral e 1 (50,0%) unilateral. No grupo estudo verificou-se uma maior ocorrncia de alteraes auditivas estatisticamente significante (p=0,010*). Da mesma forma, o grupo estudo apresentou maior ocorrncia de alteraes auditivas tanto condutivas como neurossensoriais estatisticamente significante (p=0,027*). DISCUSSO: No grupo estudo, houve maior ocorrncia de alteraes auditivas do que com a audio normal, diferentemente do grupo controle. Dentre tais alteraes, a perda auditiva condutiva foi o achado mais freqente, estando presente em 7 (63,6%) dos indivduos, sendo que no grupo controle esteve presente em apenas 3 (33,3%) dos indivduos. A disfuno tubria e casos de otite dos pacientes do grupo estudo podem ser explicados pela hipotonia muscular, devido a uma inervao prejudicada dos msculos relacionados com a contrao da tuba auditiva, em pacientes com Seqncia de Mebius. Assim, a respirao bucal e a paralisia dos msculos do palato mole so fatores que podem contribuir para que as alteraes citadas ocorram. Tambm importante citar a presena de perda neurossensorial em 2 (18,2%) dos pacientes do grupo estudo, o que no ocorreu em pacientes do grupo controle. CONCLUSO: Crianas com Seqncia de Mebius apresentaram maior ocorrncia de alteraes auditivas, estatisticamente significante, tanto de perdas auditivas condutivas quanto de perdas auditivas neurossenoriais. (CNPq) Aprovao no Comit de tica em Pesquisa No.: 0546/06 Participantes: Jessica Ji Hae Kim, Marilia Rodrigues Freitas de Souza, Zelita Caldeira Ferreira Guedes, Marisa Frasson de Azevedo

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Autores: Bolsista: Orientador:

AVALIAO DA COMPREENSO DO ESPAO GEOGRFICO POR PARTE DOS ESCOLARES SURDOS E OUVINTES DO ENSINO FUNDAMENTAL
Soares, M.A.L.; Gomes, M.T. Mnica Takaaci Gomes - UNIFESP Maria Aparecida Leote Soares - Fonoaudiologia / Distrbios da Audio

Resumo:

Introduo: A poltica de incluso escolar ocasionou um aumento nos estudos voltados ao desempenho acadmico dos alunos surdos. Pesquisas indicam que um nmero significativo de sujeitos surdos enfrenta muita dificuldade na aquisio dos contedos curriculares. O principal aspecto dessa dificuldade a apreenso dos conceitos relacionados aos contedos apresentados. Entretanto estudos envolvendo alunos ouvintes tambm demonstram que estes apresentam desempenho semelhante. Na disciplina de Geografia, a dificuldade de compreenso desses conceitos agravada pela pouca vivncia do espao fsico da cidade, pois grande parte dos alunos da escola pblica transita apenas de casa para a escola. Essas dificuldades foram observadas na avaliao da maioria dos escolares encaminhados ao NAIALE - Ncleo de Atuao Interdisciplinar em Audio, Linguagem e Educao, que oferece, desde 2005 como atividade de extenso do Departamento de Fonoaudiologia da Universidade Federal de So Paulo, atendimento a alunos surdos com dificuldades de aprendizagem do contedo escolar. Objetivo: Este trabalho teve por objetivo realizar avaliao dos conceitos inerentes ao contedo de geografia definidos para o Ciclo I do Ensino Fundamental. Metodologia: O trabalho foi desenvolvido no NAIALE com 5 escolares com deficincia auditiva neurossensorial de grau moderado a profundo, bilateral e usurios de aparelhos auditivos e 5 escolares ouvintes. A avaliao consistiu na aplicao de um questionrio com 45 perguntas que visaram averiguar o conhecimento que eles possuem do bairro em que moram, a relao com os demais bairros e a compreenso destes como parte integrante da cidade, alm de suas principais caractersticas como tipos de meios de transporte, de estabelecimentos comerciais e de moradias. Resultados: Pelos resultados obtidos nesta avaliao, pudemos constatar que o desempenho dos escolares surdos e ouvintes em relao ao conhecimento que eles possuem do bairro em que moram, a relao com os demais bairros e a compreenso destes como parte integrante da cidade, alm de suas principais caractersticas como tipos de meios de transporte e centros comerciais, apresenta similaridade. Tanto por parte dos escolares surdos quanto dos ouvintes, a maior dificuldade foi em relao aos centros comerciais e meios de transporte. Aprovao no Comit de tica em Pesquisa No.: 0594-08 Participantes: Maria Aparecida Leote Soares, Mnica Takaaci Gomes

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Autores: Bolsista: Orientador:

AVALIAO DA QUALIDADE DE VIDA DE INDIVDUOS SUBMETIDOS REABILITAO VESTIBULAR COM REALIDADE VIRTUAL
Santos, P.R.; Okai, N.W.; Pichelli, T.S.; Ganana, C.F. Priscila Regina dos Santos - UNIFESP Cristina Freitas Ganana - Fonoaudiologia / Distrbios da Audio

Resumo:

INTRODUO: Muitos estudos mostraram a importncia de se avaliar os prejuzos da qualidade de vida em pacientes vertiginosos com o intuito de quantificar os efeitos impostos pela vertigem nas funes de vida diria, alm de auxiliar na escolha do tratamento e avaliao do mesmo. Visando avaliar a qualidade de vida (QV) ou a capacidade funcional dos pacientes, o Dizziness Handicap Inventory (DHI) foi elaborado e validado por Jacobson e Newman (1990) e adaptado para o portugus por Castro et al, (2003) para avaliar a auto-percepo dos efeitos incapacitantes caudados pela tontura. Trata-se de um questionrio de 25 questes que avaliam os aspectos fsico, emocional e funcional. A reabilitao vestibular (RV) consta de um programa de exerccios repetitivos de olhos, cabea, a qual pode ser feita com estmulos de realidade virtual, que possibilita a modificao da percepo do ambiente e pode provocar um conflito vestbulo-ocular e a mudana do ganho deste mesmo reflexo. A recente aquisio de uma plataforma de realidade virtual pela UNIFESP-EPM possibilita o desenvolvimento de estudos nessa rea. OBJETIVO: Verificar a influncia da reabilitao vestibular com realidade virtual na qualidade de vida dos indivduos com sndromes vestibulares crnicas. MTODO: Esta pesquisa foi realizada no Setor de Reabilitao Vestibular da Disciplina de Otoneurologia dos Departamentos de Otorrinolaringologia e Distrbios da Comunicao Humana da UNIFESP-EPM, durante o ano de 2007 e 2008. Constou de um ensaio clnico prospectivo envolvendo a avaliao da qualidade de vida de pacientes submetidos RV para o tratamento de disfuno vestibular crnica. A casustica foi composta por 5 pacientes que fizeram a RV com realidade virtual, realizada uma vez por semana, durante 8 semanas, e foi baseada principalmente na estimulao das condies sensoriais em que cada paciente mostrou maiores alteraes nos parmetros de controle postural. A RV utilizou o equipamento Balance Rehabilitation Unit, da Medicaa (Montivideo, Uruguay), o qual fornece estmulos visuais que elicitam respostas oculomotoras de perseguio, movimentos sacdicos, optocintico, reflexo vestbulo-ocular e a interao visual e vestibular. Ao final, os resultados das avaliaes do DHI pr e ps-reabilitao foram comparados. Esta pesquisa um subproduto do projeto denominado Reabilitao Vestibular com Realidade Virtual em pacientes com Disfuno Vestibular, que tem a aprovao do Comit de tica em Pesquisa. RESULTADOS: O grupo foi constitudo por 5 pacientes com idades entre 22 e 60 anos (mdia de 41,8 anos), sendo trs indivduos do sexo feminino e dois do masculino. Todos os pacientes apresentaram prejuzo na qualidade de vida por causa da tontura em pelo menos dois aspectos avaliados pelo DHI pr - reabilitao. Os scores totais iniciais variaram entre 12 e 78 pontos. Dentre os aspectos avaliados pelo DHI (emocionais, fsicos e funcionais), os mais comprometidos foram emocionais e fsicos respectivamente, ambos com score mximo de 24 pontos. Aps a reabilitao, 4 pacientes (80%) apresentaram melhora no score total do DHI em comparao com o score pr-reabilitao. Em relao ao aspecto emocional, 3 pacientes (60%) revelaram melhora, e 2 pacientes (40%) mantiveram as queixas iniciais. No aspecto fsico, foi observada melhora da qualidade de vida em 3 pacientes (60%). Quanto ao aspecto funcional, 2 pacientes (40%) apresentaram melhora, sendo que os outros 3 (60%) mantiveram as mesmas queixas iniciais. CONCLUSO: A maioria dos pacientes com sndromes vestibulares crnicas, submetidos reabilitao vestibular com realidade virtual apresentou melhora na qualidade de vida avaliada pelo DHI, indicando a eficcia deste novo mtodo teraputico em RV. Aprovao no Comit de tica em Pesquisa No.: 1253/07 Participantes: Priscila Regina dos Santos, Natlia Waldmann Okai, Tathiany Silva Pichelli, Cristina Freitas Ganana

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Autores: Bolsista: Orientador:

Desempenho comunicativo na surdocegueira: avaliao e diretrizes teraputicas


Silva, C.C.R.; Zannon-Andrade, M.; Chiari, B.M. Cludia Cristvo Ribeiro da Silva - UNIFESP Braslia Maria Chiari - Fonoaudiologia / Disturbios da Comunicao Humana

Resumo:

Introduo: A surdez e a cegueira prejudicam duas importantes modalidades sensoriais. H vrias doenas e sndromes cujas manifestaes acometem o indivduo com as deficincias visual e auditiva, simultaneamente. No se trata apenas da somatria de perdas, mas de um fator multiplicador, onde a combinao da privao de sentidos resulta em severos problemas na comunicao, desenvolvimento e educao, necessitando de programas exclusivos para atendimento em suas especificidades. A Fonoaudiologia pode colaborar na importante identificao, junto aos pacientes, de suas necessidades de comunicao e prioridades, estabelecendo metas realistas que efetivamente reduzam seus handcaps e conseqentemente proporcionem uma melhor qualidade de vida. Objetivo: Avaliar qualitativamente o desempenho comunicativo de indivduos com diagnstico de Sndrome de Usher. Material e Mtodo: Foram entrevistados 2 indivduos portadores da Sndrome de Usher, inscritos no Grupo Brasil de Apoio ao Surdocego e ao Mltiplo Deficiente Sensorial, durante o ano de 2007. Os indivduos foram entrevistados, respondendo a perguntas relativas funcionalidade da sua comunicao, envolvendo os aspectos de vida pessoal, social e profissional, pr e ps diagnstico. Foi adotado o modelo de entrevista semi-estruturada. Resultados: Para anlise das informaes obtidas nas respostas foi utilizada uma modalidade de anlise do discurso, o Discurso do Sujeito Coletivo (DSC), proposto por Lefvre e Lefvre. A proposta do DSC consiste em analisar o material verbal coletado, extraindo-se de cada um dos depoimentos as expresses-chaves e as Idias Centrais semelhantes ou complementares. A partir disso, rene-se as expresses-chave referentes s idias centrais semelhantes ou complementares, em um discurso sntese que o discurso do sujeito coletivo. Aps essa anlise, observou-se que a surdocegueira no fator impeditivo para a comunicao, mas pode limitla. Os pacientes referiram alterao da dinmica familiar e do convvio social, bem como restrio da locomoo. Para um dos pacientes, a falta da viso mais problemtica, por impedi-lo de trabalhar; para o outro, a falta da audio pior, pois o isola das conversas. Ambos os pacientes expressaram que gostariam de ser vistos como pessoas normais, aptas a exercer suas funes na sociedade. Discusso: O conhecimento sobre o que o paciente pensa a respeito de sua doena e principalmente como enfrenta e convive diariamente com ela, constituem ferramentas de grande utilidade para implementar estratgias com o objetivo de tornar melhor sua qualidade de vida. A metodologia de anlise quali-quantitativa proposta mostrou-se um instrumento valioso para a gerao de tais dados. Participantes: Cludia Cristvo Ribeiro da Silva, Marlia Zannon de Andrade, Braslia Maria Chiari

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Autores: Bolsista: Orientador:

DESEMPENHO DE ESCOLARES DAS REDES PBLICA E PARTICULAR EM TESTE DE AVALIAO DA LINGUAGEM PRAGMTICA.
Arajo, A.C.A.; Avila, C.R.B.; Carvalho, C.A. Amanda Cristina Augusto de Araujo - UNIFESP Clara Regina Brando de Avila - Fonoaudiologia / Disturbios da Comunicao Humana

Resumo:

Introduo: A linguagem humana pode ser definida como "um complexo sistema de smbolos convencionais utilizado de vrios modos para o pensamento e a comunicao" e seu uso efetivo depende da aquisio e desenvolvimento adequados dos subsistemas fonolgico, morfolgico, sinttico, semntico-lexical e pragmtico. A funo pragmtica da linguagem envolve a determinao das intenes comunicativas e das pressuposies assim como o domnio de capacidades gerenciais. As primeiras esto relacionadas com os atos de pedir, solicitar, chamar e fazer comentrios. Levando-se em conta o grau de formalidade utilizado no discurso, as pressuposies envolvem as habilidades de supor e inferir, capacidades estas necessrias para a compreenso do enunciado alheio. O terceiro domnio refere-se s habilidades de gerenciamento do discurso. No desenvolvimento normal de Linguagem possvel observar a emergncia das habilidades pragmticas mesmo antes da criana emitir palavras. A investigao sobre o desenvolvimento dessa capacidade ainda pouco explorada e, a maioria das pesquisas esto voltadas para as questes dos transtornos dessa funo da linguagem. Objetivo: Estudar o desempenho de escolares sem queixa relacionada linguagem ou aprendizagem em tarefas que avaliam a funo pragmtica da linguagem segundo as variveis srie e rede de ensino. Mtodos: Este trabalho foi analisado e aprovado pelo CEP/UNIFESP sob o n 0839/06 e teve incio aps a assinatura do Termo de consentimento livre e esclarecido. Participaram deste estudo 160 escolares matriculados regularmente de 3 6 srie na rede pblica (50,0%) e particular (50,0%) do Ensino Fundamental do estado de So Paulo. Passaram inicialmente por triagem de linguagem oral e escrita que permitiu a excluso de escolares com indicaes de transtornos de desenvolvimento. A seguir, foram avaliados por meio do Test of Pragmatic Language - TOPL (PHELPS e TERASAKI, 1992) - adaptao para o Portugus Brasileiro de CARVALHO (2008) aplicado oral e presencialmente pela mesma examinadora, que solicitou dos escolares, respostas a proposies ou questes, a maioria delas baseada em figuras. Foram questes relacionadas aos seis subcomponentes da funo pragmtica da linguagem: cenrio, audincia, tpico, objetivo, pistas visuais e abstrao. O teste foi aplicado individualmente e as respostas foram registradas e transcritas para anlise realizada por banca (duas fonoaudilogas e uma estudante de fonoaudiologia). Pontuaram-se as respostas com 1 ou 0 pontos, de acordo com padres de respostas (CARVALHO, 2008). O desempenho dos escolares foi analisado segundo os parmetros propostos pelo teste: escore bruto, percentil, quociente e idade equivalente. Na anlise estatstica foram aplicados testes de Anlise de Varincia (ANOVA), Kruskal-Wallis, e Teste tindependente. O nvel de significncia adotado foi de 5% (0,005). Resultados e comentrios: A aplicao do TOPL permitiu a caracterizao do desempenho dos escolares de 3 a 6 srie das duas redes de ensino. O nmero de adequaes de respostas de ambos os grupos de escolares foi alta, em todos os parmetros analisados, para todas as questes propostas, evidenciando, pelas indicaes do apresentado no teste original, a ausncia de alteraes ou transtornos pragmticos na amostra avaliada. Conforme esperado, no foi possvel identificar diferenas estatisticamente significantes quando os desempenhos foram comparados por srie, por rede de ensino. A comparao independente de cada rede de ensino permitiu identificar maior pontuao dos escolares da 4 srie, na rede pblica (ANOVA : 0,046 *,0,027 *, 0,015 *) bem como melhor desempenho da 3 srie na rede particular, pontuado para os parmetros quociente e percentil (ANOVA: 0,003 *). O tamanho da amostra pode ter influenciado os resultados. O confronto com a literatura no foi possvel. Concluso: Os escolares sem queixas de linguagem ou aprendizado responderam adequadamente maioria das questes formuladas, mostrando adequao do desempenho em tarefas que avaliaram a linguagem pragmtica ao longo das quatro sries das duas redes de ensino. Aprovao no Comit de tica em Pesquisa No.: 0839/06 Participantes: Amanda Cristina Augusto de Arajo, Clara Regina Brando de Avila, Carolina Alves de Carvalho

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Desenvolvimento infantil e maturidade simblica: achados preliminares


Quintas, T.D.; Curti, L.M.; Chiari, B.M. Taiana D'avila Quintas - UNIFESP Brasilia Maria Chiari - Fonoaudiologia / Disturbios da Comunicao Humana

Resumo:

Introduo: O desenvolvimento da criana consiste na aquisio progressiva de habilidades motoras e psicocognitivas. Entre estas, o desenvolvimento da linguagem um processo complexo e contnuo, onde processos biolgicos e de aprendizagem contribuem para que ele acontea de forma harmnica. Neste processo, a entrada no mundo simblico fator preponderante para que a criana possa, alm de representar a realidade experienciada, atingir os nveis de maior complexidade no domnio da linguagem. Crianas com deficincia auditiva no conseguem adquirir a linguagem no mesmo perodo e velocidade de uma criana normo-ouvinte, pois o aprendizado da linguagem oral um evento essencialmente auditivo. Objetivo: avaliar aspectos do desenvolvimento motor grosseiro, motor fino adaptativo, pessoal social e linguagem, e relacion-los ao desenvolvimento do jogo simblico em um grupo de crianas deficientes auditivas. Mtodos: Esta pesquisa parte integrante de trabalho analisado e aprovado pelo CEP - UNIFESP (1367/07) e financiada pela FAPESP. Ela est sendo realizada no Departamento de Fonoaudiologia da Universidade Federal de So Paulo, no Laboratrio de Investigao da Linguagem nos Distrbios da Audio. A amostra constituda de 16 crianas, de 2 a 6 anos de idade, sendo todas portadoras de deficincia auditiva neurossensorial de grau moderado a profundo. Foram aplicados o Teste de Triagem de Desenvolvimento de Denver II (Frankenburg, 1967) e a Avaliao da Maturidade Simblica (Befi-Lopes & col., 2000). Resultados: Ao analisar o Teste de Denver II como proposto pelo autor, os aspectos pessoal-social, motor fino-adaptativo, motor grosseiro e linguagem conjuntamente, todas as crianas so classificadas como risco. Isso ocorre porque um atraso ou dois cuidados marcados em qualquer uma das reas j determina esta classificao final no teste. Contudo, por se tratar de um grupo de crianas deficientes auditivas, que tm impedimentos sensoriais para desenvolver a linguagem, optou-se, tambm, por fazer a anlise dos aspectos separadamente. Dessa forma, observou-se grande discrepncia entre os desempenhos, j que na linguagem o grupo inteiro classificado como risco e nos outros aspectos o desempenho melhor, sendo o percentual de crianas de risco de 13% (n=16) no pessoal-social, 31% (n=16) no motor fino-adaptativo e 6% (n=16) no motor grosseiro. Na Avaliao da Maturidade Simblica observou-se a presena de simbolismo na brincadeira de 81,25% (n=16) do grupo, enquanto que 18,75% (n=16) apenas apresentaram esquemas pr-simblicos. Quanto complexidade do jogo simblico, observou-se que 37,5% (n=16) das crianas realizaram, como jogo mais elaborado, o Jogo Simblico Assimilativo; 25% (n=16) o Jogo Simblico Combinatorial Mltiplo; 12,5% (n=16) o Jogo Simblico Imitativo e 6,25% (n=16) o Jogo simblico com Objeto substituto. Concluso: As crianas participantes desta pesquisa demonstraram, em sua maioria, desenvolvimento cognitivo, avaliado pela Avaliao da Maturidade Simblica, compatvel ao desempenho das mesmas nos aspectos pessoal-social, motor fino-adaptativo e motor grosseiro do Teste de Triagem de Desenvolvimento de Denver II, quando analisados separadamente. Portanto, recomenda-se cuidado quando se trabalha com testes objetivos. No caso do teste estudado importante, alm de considerar o escore proposto, analis-lo sob a tica quali-quantitativa, valorizando cada uma das reas no desenvolvimento global da criana. Aprovao no Comit de tica em Pesquisa No.: 1367/07 Participantes: Taiana dAvila Quintas, Luana Mota Curti, Braslia Maria Chiari

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Distrbios da Comunicao e Audio Ttulo:


Autores: Bolsista: Orientador:

Estudo do agramatismo em pacientes afsicos falantes do portugus.


Ortiz, K.Z.; Venegas, M.J. Mayra Jacuviske Venegas - UNIFESP Karin Zazo Ortiz - Fonoaudiologia / Distrbios da Comunicao Humana

Resumo:

A linguagem pode estar alterada na ocorrncia de uma leso cerebral. Vrios distrbios podem estar presentes, sendo a afasia um deles. As afasias compem um espectro clnico com diversas manifestaes. Uma das manifestaes o agramatismo. Indivduos agramticos apresentam uma alterao na estrutura sintxica das sentenas. Nos casos mais graves, os pacientes utilizam prevalentemente substantivos, juntamente com o emprego sistemtico de verbos no infinitivo, e, nos casos mais leves, pode ocorrer omisso ou substituio das palavras no lexicais como preposies, artigos e conectivos, determinado uma forma de expresso semelhante fala telegrfica. O portugus falado no Brasil, assim como as demais lnguas, possui regras de formao e estrutura sintxica. Desta forma, seria importante verificar quais so as falhas que ocorrem nas estruturas sintticas de pacientes agramticos falantes do portugus. OBJETIVO: Caracterizar a fala de pacientes afsicos agramticos falantes do portugus falado no Brasil. MATERIAL E MTODO: O estudo foi realizado na Disciplina de Distrbios da Comunicao Humana do Departamento de Fonoaudiologia da Universidade Federal de So Paulo e recebeu aprovao do Comit de tica em Pesquisa da Instituio (protocolo nmero 1790/07). Trata-se de um estudo clnico observacional com descrio retrospectiva de casos dos pacientes diagnosticados no Ambulatrio de Distrbios Neurolgicos Adquiridos de Fala e Linguagem. Foram selecionados 201 pronturios de pacientes com diagnstico de Afasia Expressiva ou Mista. Destes pronturios o estudo seguiu com os dos pacientes que possuam agramatismo como manifestao. Foram excludos os pronturios de pacientes que no tiveram a fala espontnea transcrita, obtida previamente durante a avaliao fonoaudiolgica, atravs da aplicao da prancha do Roubo dos Biscoitos, do teste de Boston para diagnstico das afasias. Foram ento selecionados os pronturios de 16 pacientes agramticos. A partir da anlise da transcrio, uma nova transcrio foi realizada, preenchendo-se elementos ausentes da fala do paciente, para posterior comparao. Foram analisados e comparados os nmeros totais de palavras classe aberta (C.A) ou lexicais, como substantivos, adjetivos e verbos, o nmero total de palavras de classe fechada (C.F), ou no-lexicais, como preposies, artigos e conectivos, uma anlise dos verbos produzidos quanto presena ou ausncia e no caso de estar presente, conjugao correta ou incorreta e, por fim, a manuteno da estrutura das frases (sujeito, verbo e complemento verbal). RESULTADOS: O resultado da anlise do agramatismo mostrou que existiu uma diferena entre o nmero total de palavras previstas para o nmero total das palavras produzidas pelos pacientes. Ou seja, o contedo geral da fala, quantitativamente, foi menor em pacientes agramticos do que na fala prevista para um falante normal. Pacientes agramticos utilizaram menos palavras de C.A tais como substantivos, adjetivos e verbos, do que o encontrado em falantes normais. Essa diminuio foi ainda maior em relao s palavras de C.F tais como preposies, artigos e conectivos. Houve diferenas significantes entre os discursos produzidos e previstos em relao s palavras de C.A e de C.F. Em relao s palavras de C.A houve predomnio de diminuio dos verbos, seguido pela diminuio de adjetivos e de substantivos. J em relao s palavras de C.F, houve predomnio de omisso de artigos, seguido das preposies e conectivos. Na fala prevista foi possvel observar que a presena dos elementos sujeito, verbo e complemento apareceram, em mdia, com a mesma porcentagem (33,12% de sujeitos, 33,74% de verbos e 33,12% de complemento verbal). Na fala produzida pelos pacientes, o nmero de verbos foi relativamente maior do que sujeitos e complementos verbais. Os achados revelaram presena de 28,51% do elemento sujeito, 38,95% do elemento verbo e 32,53% de complemento verbal. Foi observado que durante a fala espontnea desses indivduos, as omisses de verbos so mais freqentes do que a conjugao errnea dos mesmos. Do total de verbos previstos 19,88% foram omitidos, enquanto 9,35% dos verbos no foram conjugados corretamente. CONCLUSO: A caracterizao da fala dos pacientes com agramatismo oral deu-se por uma reduo de todas as classes gramaticais, sendo mais evidentes a diminuio de verbos, artigos, preposies e conectivos durante o discurso espontneo. Alm disso, pode-se concluir uma diminuio significativa de sujeitos das frases, ou seja, uma diminuio na referncia do discurso. Complementos verbais tambm diminuram em relao estrutura frasal. Por fim os verbos foram mais omitidos do que conjugados de forma errada. Este estudo contribui para a caracterizao da fala de pacientes agramticos falantes da lngua portuguesa e apontou importantes diferenas na caracterizao do que ocorre em outras lnguas que possuem diferentes estruturas sintticas. Tais aspectos devem ser considerados na avaliao e reabilitao desse distrbio de linguagem. Aprovao no Comit de tica em Pesquisa No.: 1790/07 Participantes: Karin Zazo Ortiz, Mayra Jacuviske Venegas

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Influncia da demncia e da depresso na utilizao de prteses auditivas: um estudo em idosos.


Soler, A.; Irio, M.C.M. Alline Soler - UNIFESP Maria Ceclia Martinelli Irio - Fonoaudiologia / Distrbios da Audio

Resumo:

Introduo: Muitas pessoas so protetizadas anualmente devido a uma perda auditiva que pode variar quanto ao tipo e grau. Muitas dessas prteses so oferecidas pelo SUS aos seus usurios, mas h poucos estudos que estudam a interferncia que a depresso e/ou demncia podem ocasionar no desempenho desses ou mesmo se estas melhoram a qualidade de vida dos idosos. Objetivo: A pesquisa visou avaliar os possveis efeitos da demncia e depresso no desempenho de idosos protetizados pelo SUS, por meio de questionrios e testes especficos e da medida de benefcio quantificada atravs do questionrio de auto-avaliao para handicap auditivo para idosos, o HHIE. Mtodos: Foram avaliados 40 idosos que receberam suas prteses auditivas dispensadas pelo SUS a partir de agosto de 2007. Na primeira entrevista, quando receberam a prtese auditiva, eles foram submetidos aplicao do teste Miniexame do Estado Mental (MEEM), e aos questionrios de auto-avaliao: escala de depresso Geritrica (GDI) e questionrio para handicap auditivo para idosos (the hearing handicap inventory for the elderly - HHIE). A partir desta avaliao os idosos foram subdivididos, de acordo com os escores dos questionrios e teste, em quatro grupos: 1. Sem depresso e sem alterao cognitiva; 2. sem depresso e com alterao cognitiva; 3. com depresso e sem alterao cognitiva; 4. com depresso e com alterao cognitiva. Aps dezesseis semanas de uso das prteses auditivas, perodo de aclimatizao, os idosos foram reavaliados por meio dos mesmos questionrios e teste. Resultados Parciais: Depois de aplicados os questionrios e teste nos quarenta idosos, foram computados seus escores e obtivemos a formao inicial dos grupos da seguinte maneira: Grupo 1, constitudo por 21 idosos (52,5%); Grupo 2, constitudo por 4 idosos (10,0%) ; Grupo 3, constitudo por 12 idosos (30,0%); Grupo 4, constitudo por 3 idosos (7,5%). Aps dezesseis semanas de utilizao da prtese auditiva, perodo de aclimatizao, reaplicamos os mesmos questionrios e teste e obtivemos novos escores rearranjando os grupos da seguinte maneira: Grupo 1, 26 idosos (65,0%); Grupo 2, 4 idosos (10,0%); Grupo 3, 8 idosos (20,0%); Grupo 4, 2 idosos (5,0%). Na primeira aplicao do HHIE o Grupo 1 apresentou 9,5% dos seus indivduos sem percepo do handicap auditivo, 52,4% com percepo de leve a moderada do handicap e 38,1% com percepo severa do handicap. O Grupo 2 apresentou 25% com percepo de leve a moderada do handicap e 75% com percepo severa do handicap. No Grupo 3, 25% com percepo de leve a moderada do handicap, e 75% com percepo severa do handicap. No Grupo 4, houve uma igualdade de porcentagem entre as 3 percepes de handicap (sem, leve a moderada e severa), 33,3%. No total 7,5% dos idosos no apresentaram percepo do handicap auditivo, 40% apresentou uma percepo de leve a moderada do handicap e 52,5% apresentaram percepo severa do handicap. Na segunda aplicao do HHIE o Grupo 1 apresentou 73% dos seus indivduos sem percepo do handicap auditivo, 19,3% com percepo de leve a moderada do handicap e 7,7% com percepo severa do handicap. O Grupo 2 apresentou 75% sem percepo do handicap e 25% com percepo severa do handicap. No Grupo 3, 50% sem percepo do handicap, 12,5% percepo de leve a moderada do handicap, e 37,5% com percepo severa do handicap. No Grupo 4, 100% sem percepo do handicap auditivo. No total 70% dos idosos no apresentaram percepo do handicap auditivo, 15% apresentaram uma percepo de leve a moderada do handicap e 15% apresentaram percepo severa do handicap. Concluses: Houve aumento do nmero de pacientes sem depresso e demncia (Grupo 1) devido a melhora dos escores no GDI e MEEM, aplicados no recebimento da prtese auditiva e aps o perodo de aclimatizao. O nmero de pacientes somente com demncia (grupo 2) manteve-se o mesmo enquanto que o nmero de pacientes somente com depresso ou com depresso e demncia reduziu (Grupos 3 e 4. Todos os grupos apresentaram melhora da auto-percepo do handicap auditivo. Aprovao no Comit de tica em Pesquisa No.: 0739/07 Participantes: Alline Soler, Maria Ceclia Martinelli Irio

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INFLUNCIA DO NISTAGMO ESPONTNEO DE OLHOS FECHADOS E DO NISTAGMO PRROTATRIO NAS RESPOSTAS DA PROVA PENDULAR DECRESCENTE ROTATRIA
Ganana, C.F.; Makibara, R.R.; Fukunaga, J.Y; Quitschal, R.M.; Pimenta, R.A.; Sousa, L.L. Renata Rumy Makibara - UNIFESP Cristina Freitas Ganana - Fonoaudiologia / Distrbios da Audio

Resumo:

Introduo: A Prova Rotatria Pendular Decrescente (PRPD) constitui parte integrante do exame vestibular. Nesta prova, realizado o registro do nistagmo rotatrio e, assim, verifica-se a simetria entre os canais semicirculares. Os resultados permitem detectar uma disfuno vestibular perifrica bilateral. A presena de nistagmo espontneo de olhos fechados (NEOF) e pr-rotatrio poder ou no influenciar o resultado dessa prova, gerando assimetria, isto , preponderncia direcional nistgmica (PDN) alterada. Atualmente, diversos estudos tm demonstrado a influncia do NEOF nas provas calricas. Entretanto, o NEOF pode interferir tambm nos resultados da PRPD e, com isso, na interpretao desta prova. Objetivo: Verificar a influncia do nistagmo espontneo de olhos fechados na prova rotatria pendular decrescente. Metodologia: Estudo retrospectivo, realizado no Ambulatrio de Equilibriometria da Disciplina de Otoneurologia do Departamento de Otorrinolaringologia da UNIFESP-EPM, a partir do levantamento de pronturios de 212 pacientes atendidos entre os meses de fevereiro a novembro de 2007. Foram coletados dados referentes pesquisa do nistagmo espontneo de olhos fechados e PRPD. Para realizao do exame, utilizaram-se os seguintes equipamentos: barra luminosa controlada via computador, software especfico para aquisio e anlise dos resultados e otocalormetro NGR05; todos da empresa fabricante Neurograff Eletromedicina Ltda. A casustica foi dividida em dois grupos, a saber: sem NEOF e sem nistagmo pr-rotatrio (Grupo Controle, n=105) e com NEOF e/ou nistagmo pr-rotatrio (Grupo Experimental, n=107). Investigou-se a ocorrncia de NEOF, sua direo, sentido e velocidade angular mdia (VACL). Os resultados da PRPD foram considerados normais, ou seja, simtricos, com a PDN de at 27/s. Os dados foram analisados com o intuito de verificar a ocorrncia de alteraes da PRPD nos dois grupos (assimetria). Alm disso, investigaram-se os canais semicirculares mais susceptveis a alteraes devido presena do NEOF e/ou pr-rotatrio. Resultados: Verificou-se diferena significativa entre os resultados da PRPD no Grupo Controle e Experimental, com ocorrncia de assimetria nos casos do Grupo Experimental, sendo o canal mais acometido o lateral. Concluso: O NEOF associado ou no presena do nistagmo pr-rotatrio pode influenciar as respostas da PRPD sendo necessrio considerar a interferncia dessas variveis na interpretao do exame vestibular. Aprovao no Comit de tica em Pesquisa No.: 0130/08 Participantes: Cristiana Freitas Ganana, Renata Rumy Makibara, Jackeline Yumi Fukunaga, Rafaela Maia Quitschal, Regina Aparecida Pimenta, Luciana Leal de Sousa

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O efeito do rudo dos equipamentos odontolgicos na audio dos profissionais desta rea
Estevam, V.A.; Pereira, L. D. Vanessa Andria Estevam - UNIFESP Liliane Desgualdo Pereira - Fonoaudiologia / Distrbios da Audio

Resumo:

Introduo.Muitas situaes cotidianas na rotina do trabalho dos profissionais da rea odontolgica trazem riscos audio, pois esto expostos, muitas vezes sem nenhuma proteo, a equipamentos e instrumentos que proporcionam alto nvel de rudo por perodo prolongado. Objetivo. Verificar o nvel de conhecimento de odontologistas, sobre os indicadores de perda auditiva que seu ambiente de trabalho proporciona e uso de medidas preventivas, investigar a existncia de perda auditiva devido exposio contnua ao rudo e avaliar a presena de dficits no processamento auditivo atravs de testes que avaliam as funes centrais nas habilidades auditivas de figura-fundo e resoluo temporal. Mtodos. O trabalho teve a aprovao do comit de tica e pesquisa da UNIFESP sob o numero 0754/06. Participaram 50 profissionais da rea odontolgica exercendo a profisso no ramo, em consultrios ou clnica, foram submetidos a questionrios contendo informaes sobre o conhecimento dos danos auditivos, eventuais sintomas de danos na audio e processamento auditivo, e conhecimento sobre medidas de preveno da perda auditiva ocupacional. Os profissionais foram divididos segundo as variveis: tempo (em anos) de trabalho em consultrio, nmero (em horas) de trabalho dirio. Para a avaliao audiolgica e do processamento auditivo foram selecionados 25 profissionais de idade entre 30 e 59 anos da rea odontolgica exercendo a profisso no ramo por perodo superior ou igual a 10 anos. Aplicou-se um questionrio inicialmente e em seguida foram pesquisados os limiares auditivos por audiometria tonal limiar e o ndice de reconhecimento de fala. Para avaliao do processamento auditivo aplicaram-se os testes: Teste de fuso auditiva randomizada (Randon Gap Test -RGDT) e teste dictico de dgitos. A analise dos dados levou em conta as caractersticas relevantes apresentadas na entrevista inicial.Foram usados testes estatsticos com nvel de significncia de 0.05. Resultados. Em relao aos anos de trabalho em consultrio odontolgico e as horas dirias de trabalho percebeu-se que a maioria dos profissionais entrevistados (58%) alegou no escutar bem em ambiente ruidoso.Observaram-se diferenas estatisticamente significantes entre os grupos com mais de 10 anos de trabalho e o grupo com menos de 10 anos de trabalho, sendo que no primeiro predominou respostas de dificuldade auditivas. Em relao ao conhecimento sobre os danos auditivos causados por rudos, apesar de a maioria dos profissionais terem alegado conhecimento que o rudo causa danos auditivos, a maioria no sabia sobre o nvel de intensidade mxima permitido para 8 horas de trabalho dirio, sobre os equipamentos odontolgicos causadores de rudo e as normas em vigor para estes equipamentos. Nos grupos com mais de 10 anos de trabalho h diferena quanto s questes levantadas a respeito da anlise do processamento auditivo em relao aos grupos com menos de 10 anos de trabalho, apresentam dificuldades que indicam um possvel dficit no processamento auditivo. Os profissionais odontologistas queixam-se de dificuldades na compreenso de fala, que envolve todo o processo de anlise e sntese para a recepo e percepo do sinal acstico.Na avaliao audiolgica verificou-se na maioria dos profissionais a existncia de Inadequao auditiva de grau leve bilateral e tambm inadequao auditiva de grau moderado bilateral segundo a classificao proposta para este estudo. A maioria dos profissionais (52,9%) possui perdas auditivas que acomete as freqncias altas indicando uma perda em agudos. Justamente esta caracterizao de perda est relacionada exposio ao rudo como um dos fatores.Quanto ao ndice de reconhecimento de fala (IPRF) verificou-se que todos os participantes obtiveram porcentagem de acertos acima de 88%, demonstrando boa capacidade de ouvir a fala em ambiente silencioso. No teste dictico de dgitos a maior parte dos profissionais (52%) apresentou alterao para o teste, tambm foi observado que a grande maioria dos profissionais que tiveram alterao neste teste possuam idade superior a 45 anos. No teste RGDT verificou-se que a mdia do intervalo de tempo em ms foi de 19,08 ms, que mostra alterao segundo os critrios de referencia para normoouvintes. Foram encontradas alteraes importantes com grande variabilidade nas mdias (entre 60 e 90ms), em alguns indivduos de idade superior a 45 anos. Cabe lembrar que a idade mxima dos profissionais avaliados foi de 60 anos. Concluso. Os odontologistas em sua maioria alegam conhecimento que o rudo causa danos auditivos, porm desconhecem as medidas preventivas que devem ser tomadas em seus consultrios. A maioria dos odontologistas expostos ao rudo devido aos equipamentos do consultrio odontolgico apresenta alterao nos testes relacionados ao processamento auditivo tanto na escuta dictica como na resoluo temporal. Conforme o avano da idade e o perodo maior de exposio ao rudo, a dificuldade aumenta. Apoio FAPESP. Aprovao no Comit de tica em Pesquisa No.: 0754/06 Participantes: Vanessa Andria Estevam, Liliane Desgualdo Pereira

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PERFIL DE CRIANAS E ADOLESCENTES COM QUEIXAS VESTIBULARES


Okai, N.W.; Pichelli, T.S.; Santos, P.R.; Ganana, C.F. Tathiany Silva Pichelli - UNIFESP Cristina Freitas Ganana - Fonoaudiologia / Distrbios da Audio

Resumo:

Introduo: Os distrbios vestibulares infantis no so raros e apresentam alta prevalncia de nuseas, vmitos, zumbido, desequilbrio, quedas, medo do escuro, enurese e dificuldade de aquisio da linguagem oral e escrita. Todos os tipos de tontura podem ser originados por distrbios do sistema vestibular. As manifestaes mais freqentes so a vertigem e o desequilbrio, instabilidade, desorientao espacial ou flutuao. No fcil obter da criana ou de seus parentes e outros informantes a descrio precisa da vertigem e outros tipos de tonturas e o exame da funo vestibular geralmente mais difcil de ser realizado na criana do que no adulto. Diante dos prejuzos trazidos por perturbaes do sistema vestibular, a avaliao otoneurolgica se torna um importante mtodo para o diagnstico de possveis anormalidades deste sistema que podem acarretar juntamente com os sintomas associaddos impactos negativos na qualidade de vida destes pacientes. OBJETIVO: Analisar o perfil relacionado s queixas prevalentes e os achados do exame vestibular de pacientes atendidos no ambulatrio de Otoneurologia Infantil da UNIFESP-EPM. METODO: Foi realizado um estudo retrospectivo pela anlise dos pronturios de 14 pacientes avaliados entre maio de 2007 e maro de 2008 do Ambulatrio de Otoneurologia Infantil do Departamento de Otorrinolaringologia com idades entre 7 a 15 anos. A anlise foi realizada levando em considerao os achados no exame vestibular realizado com a Vectonistagmografia Digital (Neurograff Eletromedicina Ltda) e as queixas relatadas anamnese. RESULTADOS: Dos 14 pacientes avaliados, a idade mdia foi de 12,6 anos, sendo 57,2% do sexo masculino e 42,8% do sexo feminino. Foi constatado que 14,3% apresentaram exame vestibular normal; 28,5% Sndrome Vestibular Perifrica Deficitria e 57,2% Sndrome Vestibular Perifrica Irritativa, totalizando 85,7% de exames alterados .Na anamnse, 14,3% dos pacientes no souberam referir a respeito de seus sintomas; 21,4% dos pacientes referiram tontura no rotatria e 42,8% vertigem (sendo 33,3% caracterizada como subjetiva e 66,7% como objetiva), 21,5% referiram tontura no rotatria e vertigem. Em relao caracterizao do quadro clnico 42,7% tiveram incio sbito; 21,5% constante; 21,5% em crises. Quanto intensidade: 21,5% leve, 42,7% moderada, 21,5% intensa. A ocorrncia das crises foi descrita como freqente em 57%; espordica em 21,5%; muito freqente em 7,2%. Em 28,5% dos pacientes a crise durava segundos; em 35,7% minutos; 14,3% horas e 7,2% dias. Todos os pacientes relataram sintomas como cefalia, cinetose, nuseas, desequilbrio associados ao quadro otoneurolgico. Concluso: Os resultados obtidos na anamnese destas crianas e adolescentes indicaram a elevada prevalncia de sintomas relacionados a uma disfuno do sistema vestibular, sendo a vertigem o mais comum, de incio sbito, de intensidade moderada e ocorrncia freqente, dados que foram confirmados pelas alteraes encontradas no exame vestibular da maioria destes pacientes. Aprovao no Comit de tica em Pesquisa No.: 0033/08 Participantes: Natlia Waldmann Okai, Tathiany Silva Pichelli, Priscila Regina dos Santos, Cristina Freitas Ganana

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Pesquisa da funo da tuba auditiva em indivduos adultos com membrana timpnica ntegra
Gil, D.; Makibara, R.R. Renata Rumy Makibara - UNIFESP Daniela Gil - Fonoaudiologia / Distrbios da Comunicao Humana

Resumo:

Introduo: A tuba auditiva tem a funo de eqalizar a presso do meio externo com a orelha, protegendo-a contra as mudanas rpidas de presso, alm de auxiliar na drenagem da orelha mdia evitando o acmulo de secreo. O bom funcionamento da tuba auditiva imprescindvel para que se tenha uma cavidade timpnica saudvel e funcional. O mau funcionamento dessa estrutura pode causar infeces na orelha, comprometer a conduo do som e causar desconfortos auriculares. O dficit no funcionamento da tuba auditiva um dos fatores de risco mais comuns para a otite mdia (OM). Com a ocluso da tuba auditiva, a ventilao na cavidade da orelha mdia torna-se pobre e insuficiente, aumentando a absoro de nitrognio na orelha mdia, gerando, continuamente, presso negativa, o que resulta no desenvolvimento da OM. Objetivo: O objetivo deste trabalho comparar a funo da tuba auditiva em indivduos adultos com e sem histria de otite mdia prvia sem perfurao de membrana timpnica. Material e mtodo: Foram selecionados 22 indivduos, com idades entre 18 e 55 anos de ambos os sexos, com membrana timpnica ntegra, curva timpanomtrica tipo A e sem histrico de cirurgias otolgicas. Todos foram submetidos inspeo visual do meato acstico externo, audiometria tonal limiar, audiometria vocal, medidas de imitncia acstica e pesquisa da funo da tuba auditiva, em ambas as orelhas. A pesquisa da funo da tuba auditiva foi realizada por meio do imitancimetro AT235. Para a realizao desse teste, foi realizado um registro timpanomtrico com a introduo de presso positiva de +200daPa. Em seguida, foi solicitado ao paciente beber um copo de gua, para diminuir a presso na orelha mdia. Neste momento, foi realizado o segundo registro timpanomtrico. Por ltimo, o paciente foi instrudo a fechar a boca, ocluir as narinas com dois dedos e assoprar o ar para o nariz, para criar presso positiva na orelha mdia. Foi realizado, ento, o terceiro registro timpanomtrico. A funo da tuba auditiva foi analisada segundo os seguintes parmetros: funcionamento normal da tuba; tuba fechada ou no funcionante e tuba aberta. Para a anlise dos resultados neste estudo, os pacientes foram pareados, segundo sexo e idade em dois grupos, a saber: Grupo Controle (sem passado otolgico, ou seja, sem histrico de otite mdia recorrente, de obstruo de adenide ou infeces de vias areas superiores e sem sintomas ou sinais de infeco de trato respiratrio) e Grupo Experimental (com passado otolgico, ou seja, com histrico de otite mdia, obstruo de adenide e/ou alergias de vias areas). Os dados foram analisados com o intuito de comparar a funo da tuba auditiva nos dois grupos. Estes foram comparados segundo a presena ou no de passado otolgico. Resultados: Foram coletados dados referentes a 22 pacientes, 12 do sexo masculino e 10 do sexo feminino, divididos nos Grupos Controle e Experimental. A mdia de idade foi 28 anos. No Grupo Controle, em 100% dos casos verificou-se funcionamento normal da tuba auditiva, limiares auditivos normais em 91% dos casos e reflexos acsticos presentes em 81,8% dos casos. No houve queixas auditivas ou otolgicas. No Grupo Experimental, 36,36% indivduos referiram apresentar histrico de otite mdia, alm de infeces de vias areas superiores (rinite e/ou sinusite), enquanto em 63,64% dos casos, os pacientes referiram apresentar somente rinite e/ou sinusite. 45,45% dos indivduos referiram queixas auditivas (zumbido) e/ou otolgicas (dor de ouvido e sensao de plenitude auricular). Quanto avaliao audiolgica, em 27,27% dos casos verificou-se mau funcionamento da tuba auditiva, mesmo na presena de limiares auditivos normais e reflexos acsticos presentes. Concluso: Aps a anlise dos resultados, verificamos que a presena de histrico de infeces de orelha mdia, de rinite e/ou sinusite pode influenciar no funcionamento da tuba auditiva, sendo importante realizar a pesquisa da funo tubrea destes indivduos, mesmo com avaliao audiolgica bsica normal. Aprovao no Comit de tica em Pesquisa No.: 1043/07 Participantes: Daniela Gil, Renata Rumy Makibara

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POSTUROGRAFIA EM IDOSOS COM VESTIBULOPATIAS SUBMETIDOS REABILITAO VESTIBULAR COM REALIDADE VIRTUAL
Santos, P.R.; Pichelli, T.S.; Gazzola, J.M.; Don, F.; Ganana, C.F.; Okai, N.W. Natalia Waldmann Okai - UNIFESP Cristina Freitas Ganana - Fonoaudiologia / Distrbios da Audio

Resumo:

INTRODUO: Um dos principais fatores que limitam a vida do idoso o desequilbrio. A tontura em idosos se deve alta sensibilidade dos sistemas auditivo e vestibular e ao processo de deteriorao funcional desses sistemas com o envelhecimento. Diante dessas alteraes que prejudicam a qualidade de vida e a segurana do idoso, a Reabilitao Vestibular (RV) se faz necessria e de grande importncia para a melhora dos sintomas. A utilizao de um sistema de realidade virtual, vinculado a RV, possibilita a imerso em um mundo ilusrio, onde a percepo do ambiente modificada por estmulo sensrio-artificial, o qual pode provocar um conflito vestbulo-ocular e a mudana do ganho deste mesmo reflexo. E foi constatado recentemente que h uma adaptao no controle postural depois da RV com realidade virtual e indicao para sua utilizao a fim de impedir a instabilidade e queda da populao idosa. OBJETIVO: Comparar os resultados da avaliao posturogrfica em idosos com vestibulopatias perifricas crnicas pr e ps-reabilitao vestibular com realidade virtual. MTODO: Esta pesquisa foi desenvolvida no ambulatrio de Reabilitao Vestibular da Disciplina de Otoneurologia da UNIFESP durante o ano de 2007 e 2008. Tratou de um ensaio clnico prospectivo envolvendo a avaliao e reabilitao de quatro pacientes, de ambos os sexos, com idades entre 65 e 85 anos, com disfuno vestibular perifrica crnica. Os pacientes se submeteram anamnese, a avaliao posturogrfica pr e ps-tratamento, e a 12 sesses do protocolo de instabilidade de idosos da RV com realidade virtual (equipamento Balance Rehabilitation Unit - BRU, da Medicaa), baseadas em estmulos visuais controlados pelo computador e que apareceram em lentes de um culos acoplado cabea do paciente. Esses estmulos visuais desencadearam respostas oculomotoras de perseguio, movimentos sacdicos, optocintico, reflexo vestbulo-ocular e a interao visual e vestibular. Os pacientes no foram medicados para tontura. Ao final, foram analisadas as medidas da posturografia relacionadas rea do limite de estabilidade, da rea de elipse (cm2) e da velocidade de oscilao (cm/s) de 10 condies sensoriais pr e ps RV. RESULTADOS: Aps a RV, na reavaliao posturogrfica, foi observado um aumento do valor da rea do Limite de Estabilidade nos 4 pacientes, sendo que 2 apresentaram mais do que o dobro da rea inicial, indicando melhora das estratgias vestbulo-espinais relacionadas manuteno do equilbrio corporal. Em 3 de 4 pacientes, observamos diminuio de 5 ou mais condies nas 10 condies sensoriais da rea de Elipse. Porm, foi observado que 1 dos 4 pacientes diminuiu a Velocidade de Oscilao em todas as condies sensoriais, o restante diminuiu somente em at 3 condies. CONCLUSO: A mudana dos valores dos parmetros (aumento da rea do Limite de Estabilidade, e diminuio da rea de Elipse e da Velocidade de Oscilao) avaliados na posturografia, observada ps RV, indica melhora na capacidade postural dos pacientes, mostrando que a posturografia um mtodo objetivo e seguro na avaliao e reavaliao de pacientes idosos submetidos RV com realidade virtual. Aprovao no Comit de tica em Pesquisa No.: 1301/07 Participantes: Priscila Regina dos Santos, Tathiany Silva Pichelli, Juliana Maria Gazzola, Flvia Don, Cristina Freitas Ganana, Natlia Waldmann Okai

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RESOLUO TEMPORAL EM IDOSOS COM SENSIBILIDADE AUDITIVA NORMAL E PERDA AUDITIVA NEUROSSENSORIAL
Pereira, L. D.; Dias, K.Z.; Quitschal, R.M. Rafaela Maia Quitschal - UNIFESP Liliane Desgualdo Pereira - Fonoaudiologia / Distrbios da Audio

Resumo:

Introduo: O Processamento Auditivo refere-se a processos de anlise e interpretao de sons ouvidos que envolvem estruturas do Sistema Nervoso Central como as vias auditivas e crtex. Alteraes nesses processos geram distrbio do processamento auditivo. Indivduos portadores deste distrbio manifestam prejuzos quanto ao comportamento auditivo que podem se associar problemas de fala, leitura, escrita, linguagem e comportamento social. Tanto as queixas relacionadas s dificuldades auditivas quanto s relacionadas com a compreenso de fala so comuns populao de indivduos idosos. A dificuldade para compreender a fala nem sempre se relaciona com o nvel de perda auditiva. Esse fato tem aumentado o interesse no estudo da relao entre o envelhecimento e o processamento auditivo temporal, um dos aspectos do processamento auditivo que mais tem sido discutido recentemente. A resoluo temporal uma das categorias do processamento temporal e refere-se capacidade em detectar mudanas rpidas nos estmulos ao longo do tempo. O Random Gap Deteccion Test (RGDT) avalia a resoluo temporal pela determinao do menor espao de tempo em que dois estmulos breves e sucessivos so identificados e percebidos (limiar de acuidade temporal). Objetivo: Comparar a habilidade auditiva de resoluo temporal em indivduos com sensibilidade auditiva normal e com perda auditiva do tipo neurossensorial de grau leve, com idade superior a 60 anos. Metodologia: Foram avaliados 19 indivduos de 62 a 75 anos, de ambos os gneros, sendo 12 com mdia de limiares auditivos para as freqncias sonoras de 500Hz a 4000Hz dentro dos critrios de normalidade, que constituram o grupo 1 (G1) e 7 indivduos portadores de deficincia auditiva de grau leve, do tipo neurossensorial, que constituram o grupo 2 (G2). Todos os indivduos foram submetidos ao teste RGDT - Exp (Keith, 2000). Este projeto foi aprovado pelo Comit em tica e Pesquisa sob o protocolo 1564/07. Resultados. A idade media do grupo com perda auditiva foi de 71,14 anos, maior e estatisticamente significante em relao ao grupo sem perda auditiva, cuja idade media foi de 66,58 anos. A variabilidade entre as idades foi baixa. Ambos os grupos apresentam nmero de anos de estudo semelhantes mostrando semelhana em termos de nvel de exposio linguagem escrita. O grupo com perda auditiva mostrou limiares de audibilidade piores e estatisticamente significantes em relao ao grupo sem perda auditiva. O limiar mdio de reconhecimento de fala do grupo com perda auditiva (cerca de 29dB) foi maior do que o do grupo sem perda auditiva (20dB). O ndice mdio de reconhecimento de fala foi maior no grupo sem perda auditiva (cerca de 95%) em relao ao grupo com perda auditiva (78%) . Em ambos os grupos os reflexos acsticos estavam presentes em nveis normais. Os limiares mdios de acuidade temporal foram aumentados em ambos os grupos e sem diferena estatisticamente significantes entre eles. O valor obtido para o grupo com perda auditiva foi de cerca de 37 milissegundos e para o grupo sem perda auditiva de cerca de 51 milissegundos. Existiu uma correlao inversamente proporcional e estatisticamente significante entre limiar mdio de acuidade temporal e ndice de reconhecimento de fala, porm foi baixa (32,4%). Concluso: O presente estudo mostrou desempenho semelhante na habilidade de resoluo temporal com tons puros de diferentes freqncias sonoras em idosos com e sem perda auditiva neurossensorial de grau leve. Fonte financiadora: CNPq (Departamento de Fonoaudiologia/UNIFESP) Aprovao no Comit de tica em Pesquisa No.: 1564/07 Participantes: Liliane Desgualdo Pereira, Karin Ziliotto Dias, Rafaela Maia Quitschal

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Distrbios da Comunicao e Audio Ttulo:


Autores: Bolsista: Orientador:

Zumbido: estudo da desvantagem causada e do impacto na qualidade de vida de indivduos com audio normal e perda auditiva.
Prestes, R.; Gil, D. Raquel Prestes - UNIFESP Daniela Gil - Fonoaudiologia / Distrbios da Comunicao Humana

Resumo:

Introduo: O zumbido pode ser definido como uma sensao de som percebido pelo indivduo na ausncia de uma fonte sonora externa. Em 15 a 20% dos casos, o zumbido interfere na qualidade de vida dos seus portadores, podendo afetar o sono, a concentrao, o equilbrio emocional e atividades sociais. Objetivo: Qualificar o zumbido em indivduos com e sem perda auditiva, por meio de uma anamnese, um questionrio que avalia a desvantagem causada por esse sintoma (THI) e um questionrio referente qualidade de vida (WHOQOL). Material e Mtodo: Este estudo foi realizado nos ambulatrios de audiologia clnica do departamento de fonoaudiologia da Unifesp. O projeto do estudo foi analisado e aprovado pelo comit de tica em pesquisa da UNIFESP CEP 1042/07 e fomentado pela FAPESP-processo 07/55460-5. Os indivduos foram selecionados na faixa etria de 17 a 60 anos de idade e divididos em dois grupos: um com deficincia auditiva (DA) e outro com audio normal (NL), e esses dois grupos foram subdivididos em quatro subgrupos segundo considerando sua faixa etria (A. 18-30 anos e B.31-60 anos). A anamnese envolveu questes referentes: ao desconforto, pitch, lateralidade, tipo de zumbido e tempo de acometimento (calculado em meses). Foi aplicado tambm o questionrio THI (Tinnnitus Handicap Inventory) que contm 25 perguntas relacionadas ao incmodo que este sintoma provoca, em quais atividades de vida diria o zumbido interfere mais na vida deste indivduo. A contagem de pontos varia de 0 a 100 e quanto maior a pontuao maior a repercusso do zumbido na qualidade de vida do entrevistado. Por fim utilizamos, um questionrio de qualidade de vida (WHOQOL) que contm 26 perguntas sobre aspectos gerais de sade mental, psicolgica, motora, cognitiva e social. A contagem de pontos varia de 1 a 130 e quanto maior a pontuao melhor a qualidade de vida referida pelo entrevistado. Ambos os questionrios foram aplicados pela examinadora, a qual esclareceu dvida e reformulou questes de acordo com a necessidade do entrevistado. Resultados:Analisando os dados de anamnese quanto ao desconforto causado pelo zumbido, verificamos que nos indivduos mais jovens de ambos os grupos o sintoma mostrou-se mais perturbador. No entanto, a classificao de desconforto severo somente foi observada no grupo DA. Em relao ao pitch do zumbido, o do tipo agudo foi o mais freqente em todas as faixas etrias, tanto nos indivduos no grupo NL quanto no grupo DA. Quanto lateralidade, a forma bilateral do zumbido foi a mais comum dentre todos os indivduos avaliados, especialmente no grupo etrio mais jovem. Em relao ao tipo do zumbido, verificamos distribuio uniforme entre os tipos contnuo e intermitente no grupo etrio mais jovem. Nos demais grupos etrios no verificou-se um padro, observando-se alternncia dos tipos tanto no grupo NL quanto no DA. Quanto ao tempo de acometimento (em meses) verificamos que o grupo DA independente da faixa etria apresentou maior durao do sintoma. Analisando os dados do T.H. I, verificamos que o grupo DA apresenta maior handicap comparado ao grupo NL. A classificao mais freqente foi a moderada para ambos os grupos. Com relao qualidade de vida no observamos impacto significante do zumbido a partir de um questionrio geral. Concluso: Os indivduos mais jovens consideram o zumbido mais perturbador, o pitch mais encontrado foi o agudo, a forma bilateral foi a mais frequente, analisando o tipo foi observado uma homogeneidade. O grupo DA apresentou maior durao do sintoma, em tambm maior handicap devido ao zumbido, porm no observamos impacto significante do zumbido na qualidade de vida a partir de um questionrio geral. Aprovao no Comit de tica em Pesquisa No.: 1042/07 Participantes: Raquel Prestes, Daniela Gil

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Enfermagem

Ttulo:
Autores: Bolsista: Orientador:

AES DE ENFERMAGEM EM UNIDADES DO PROGRAMA SADE DA FAMLIA NA ZONA SUL DO MUNICPIO DE SO PAULO
Marcolan, J.F.; Pires, M.P.O.; Jardini, L. Maria Paula de Oliveira Pires - UNIFESP Joo Fernando Marcolan - Enfermagem /

Resumo:

A Enfermagem desempenha papel central na prestao da assistncia no Programa Sade da Famlia (PSF) sendo necessrio analisar a percepo dos profissionais sobre as aes desenvolvidas buscando aprimor-las. Os objetivos do estudo foram investigar as aes de enfermagem no PSF, verificar as atribuies dos enfermeiros frente prescrio dos protocolos e descrever a percepo dos enfermeiros sobre as aes efetuadas. Estudo exploratrio-descritivo com abordagem quantitativa, realizado em seis unidades do PSF na regio de Cidade Ademar no municpio de So Paulo. Os dados foram coletados por meio de entrevista com 26 enfermeiros. Dos participantes, 4 (15,4%) tinham especializao nas reas de Sade da Famlia e Sade Pblica. As aes descritas foram na esfera assistencial (50,4%), administrativa (22,9%), educativa (20,4%) e de planejamento (6,3%). Todos referiram prestar assistncia de acordo com a legislao especfica do Ministrio da Sade e a maioria (84,6%) justificou respeitar o protocolo de aes. A maior parte (61,5%) realizava aes alm das preconizadas pelo PSF, prevalecendo s aes assistenciais, situao imposta pela necessidade da populao e falta de profissionais. Havia 19 participantes (73,1%) que realizavam aes aqum das preconizadas por considerarem no realizar alguma atividade especfica; as justificativas para tal foram a falta de tempo, falta de interesse do profissional, absentesmo dos usurios, falta de funcionrios e excesso de atividades. A maioria (69,2%) dedicava mais tempo s aes assistenciais. Os 23 (88,5%) enfermeiros que realizavam aes da esfera dos auxiliares e tcnicos de Enfermagem associavam tal fato falta de capacitao e quantitativo adequado dos funcionrios. A maioria (84,6%) no realizava atribuies alm das suas competncias; quando isto ocorria era devido falta de outros profissionais. As condies de trabalho foram consideradas favorveis por 20 (76,9%) enfermeiros devido ao espao fsico e materiais e equipamentos adequados; ao elencarem os problemas, 14 (22,6%) enfermeiros apontaram para a falta de conhecimento da populao sobre o papel e funcionamento do PSF, 14 (22,6%) a falta de materiais, equipamentos e profissionais e 7 (11,3%) o espao fsico inadequado. A maioria (84,6%) referiu satisfao com as aes desenvolvidas, principalmente por ter reconhecimento e retorno da populao e autonomia no trabalho. Quanto ampliao das aes, gostariam de realizar algumas aes especficas individuais (24,5%), realizar mais atividades em grupos (24,5%), ter mais tempo para investir na qualidade da ao (24,5%) e investir em sua qualificao (14,1%). Acreditamos ser fundamental para o sucesso das aes de Enfermagem no PSF a adequao do quantitativo dos profissionais, a devida qualificao dos mesmos e priorizar a qualidade em detrimento do nmero de atendimentos. Aprovao no Comit de tica em Pesquisa No.: 0896/07 Participantes: Joo Fernando Marcolan, Maria Paula de Oliveira Pires, Larissa Jardini

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Enfermagem Ttulo:
Autores: Bolsista: Orientador:

AVALIAO DA EVOLUO DA FUNO RENAL DE PACIENTES COM HIV DESDE O MOMENTO DO DIAGNSTICO
Friedl, D.B.; Bosco, D.C.; Fino, L.C.; Belasco, A.G.S. Daniane Bornea Friedl - UNIFESP Anglica Gonalves Silva Belasco - Enfermagem / Fundamentos de Enfermagem e Enfermagem Mdico Cirrgica

Resumo:

Introduo: Afeces renais no so incomuns nos pacientes infectados pelo HIV e podem contribuir de forma significativa para o aumento da morbidade e mortalidade. Entre as formas de apresentao dos problemas ocorridos nos portadores de HIV encontramos desde apresentaes comuns at formas especficas relacionadas doena. Muitas drogas utilizadas para o tratamento do paciente e suas complicaes so nefrotxicas. Objetivo: Avaliar a evoluo da funo renal dos portadores de HIV/AIDS que iniciaram acompanhamento ambulatorial no Centro de Controle de Doenas Infecciosas (CCDI) do Hospital So Paulo/UNIFESP. Metodologia: O estudo foi retrospectivo e analtico e utilizou como mtodo a anlise dos pronturios de pacientes portadores de HIV/AIDS atendidos no CCDI. Os pronturios que no continham dosagem de creatinina srica e peso na primeira e ou na ltima consulta foram excludos. A coleta de dados iniciou-se aps a aprovao do projeto pelo Comit de tica e Pesquisa da UNIFESP e ocorreu entre outubro de 2005 e maro de 2008. Resultados/Discusses: Foram analisados 200 pronturios. A maioria dos pacientes foi masculina (58,5%), com idade mdia de 44,6 anos, branca (46,5%), com mais de 50 meses de diagnstico (69,5%), mdia de 2,7 comorbidades adquiridas variando de 0 a 9 patologias e 174 (87%) estavam realizando o tratamento medicamentoso. Dos 200 pacientes analisados, 13 (6,5%) apresentaram valores de creatinina maior que 1,2mg/dL na primeira dosagem e 11 (5,5%) na ltima dosagem. A anlise dos dados nos permitiu concluir que o grupo analisado no apresentou alterao da funo renal, mesmo em uso de medicamentos, ao contrrio de outros estudos. Estudo recente realizado nos Estados Unidos demonstrou que a terapia antiretroviral pode ser um fator protetor para que os pacientes infectados com HIV no desenvolvam nefropatias, enquanto que diabetes, hipertenso e hepatite C podem ser fatores desencadeantes de diversas nefropatias, principalmente, na populao infectada pelo HIV com CD4+ baixo e carga viral alta. Frente aos nossos achados e os dados da literatura podemos concluir que so necessrios mais estudos nesta rea. Aprovao no Comit de tica em Pesquisa No.: 1358/05 Participantes: Daniane Bornea Friedl, Daniele C. Bosco, Luana C. Fino, Anglica G. S. Belasco

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Enfermagem Ttulo:
Autores: Bolsista: Orientador:

Avaliao da reao vasovagal insero do dispositivo intra-uterino: orientao e assistncia de enfermagem.


Neves, C.C.O.; Barbieri, M.; Arajo, F.F.; Guazzelli, C.A.F. Carla Cristina de Oliveira Neves - UNIFESP Mrcia Barbieri - Enfermagem / Enfermagem Obsttrica

Resumo:

O Dispositivo intra-uterino (DIU) um mtodo contraceptivo seguro, efetivo e de longa durao. No entanto, durante a sua insero podem ocorrer vrias complicaes, entre elas a reao vasovagal (RVV). A RVV uma sncope breve, de recuperao espontnea e rpida, que acompanhada de hipotenso e pode se associar bradicardia. Os sinais prodrmicos da reao incluem fraqueza, palidez, nuseas, vmitos, sudorese e sensao de frio. Objetivou-se com este estudo descrever a prevalncia das reaes vasovagais durante a insero do DIU, analisar os fatores scio-demogrficos envolvidos, assim como a influncia da assistncia de enfermagem. Trata-se de uma pesquisa analtica e transversal, realizada no setor de Planejamento Familiar da UNIFESP entre 90 mulheres, com idade igual ou superior a 19 anos, candidatas insero do DIU no perodo de agosto de 2007 a abril de 2008. O estudo foi realizado em trs fases: orientaes de enfermagem sobre o DIU e sua insero; preenchimento da ficha clnica e da ficha de insero do DIU e assistncia de enfermagem durante e aps a colocao. A RVV foi avaliada durante a insero do DIU, por meio da aferio dos sinais vitais - presso arterial, freqncia cardaca e freqncia respiratria - e da observao clnica da paciente, atentando-se palidez, sudorese, tontura, nuseas e/ou vmitos e dor. Para avaliar a ocorrncia de RVV, considerou-se bradicardia a queda de pelo menos dois batimentos por minuto em relao ao valor da pr-insero. Os resultados revelam que os fatores scio-demogrficos, tais como idade, escolaridade, renda familiar, entre outros, no esto associados reao vasovagal. A bradicardia esteve presente em 51% e, associada hipotenso, em cerca de 23% das mulheres. Apresentou ao menos um dos sinais prodrmicos 31% da amostra, sendo constatada perda transitria da conscincia em uma paciente (1,1%). O DIU foi escolhido como primeira opo para cerca de 95% e obteve-se resultado significativo (qui-quadrado=4,495) de bradicardia o fato da mulher j t-lo usado antes. Os fatores ansiedade e reaes a procedimentos invasivos tambm no mostraram ser significativos para a RVV. Conclu-se que, mesmo orientadas, metade das mulheres estudadas apresentou sinais de reao vasovagal e que a presena de um profissional enfermeiro bem informado e atualizado tcnico-cientificamente torna-se imprescindvel antes, durante e aps a insero. Aprovao no Comit de tica em Pesquisa No.: 1578.07 Participantes: Carla Cristina de Oliveira Neves, Mrcia Barbieri, Fabio Fernado Arajo, Cristina Aparecida Falbo Guazzelli

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Enfermagem Ttulo:
Autores: Bolsista: Orientador:

Avaliao das intervenes educativas focadas na promoo do autocuidado de pacientes transplantados


Andrade, F.R.; Cazonato, A.M.; Ribeiro, M.F.L.; Aguiar Jnior, P.N.; Gaeta, P.; Adami, N.P.; Cruz, M.G.S.; Leite, R.F. Fabricio Rodrigues de Andrade - UNIFESP Nilce Piva Adami - Enfermagem / Enfermagem em Sude Pblica e Administrao Aplicada a Enfermagem

Resumo:

Introduo: Este estudo, decorrente de um projeto de extenso desenvolvido no perodo de agosto a dezembro de 2007, por alunos graduandos de Medicina e Enfermagem da UNIFESP teve por propsito realizar intervenes educativas visando o ensino do autocuidado para a melhoria da qualidade de vida de pacientes transplantados. De acordo com o referencial terico adotado e a partir da identificao dos temas de maior interesse dessa populao alvo, foi elaborado o programa educativo privilegiando as estratgias de ensino que favorecem a participao ativa dos educandos no processo ensino-aprendizagem visando promover a sua autonomia no autocuidado para preservao do rgo transplantado, diminuio da ocorrncia de problemas associados e maior taxa de sobrevida desses pacientes. Objetivo: O objetivo foi avaliar as aes educativas realizadas junto aos pacientes ps-transplantados renais a fim de promover o autocuidado. Mtodos: A pesquisa descritiva incluiu pacientes que faziam controle no Ambulatrio Ps-Transplante do Hospital do Rim e Hipertenso e que concordaram em participar do estudo assinando o Termo de Consentimento Livre e Esclarecido. A coleta de dados foi realizada aps o trmino das aulas ministradas por meio de um questionrio composto por questes estruturadas visando a mensurar os seguintes aspectos: importncia dos temas abordados e possibilidade de aplicao dos contedos ensinados na vida diria; opinio sobre: estratgias de ensino e materiais de ilustrao utilizados; relao professor/aluno; identificao do conhecimento prvio destes alunos e participao em sala de aula. Incluiu tambm, uma questo aberta para obter opinies e sugestes visando melhoria da oferta de novos programas educativos. Resultados: As intervenes educativas abrangeram os seguintes temas: alimentao saudvel, atividades que podem ser realizadas no cotidiano, medicao, hipertenso, diabetes mellitus e obesidade. Participaram da avaliao 71 pacientes transplantados e a grande maioria destes (94,4%), julgou que os assuntos ensinados foram importantes para seu autocuidado e 98,6 % afirmaram ser possvel a aplicao dos contedos ensinados no autocuidado dirio. Em relao s estratgias de ensino utilizadas para facilitar a apreenso dos contedos apresentados, 95,8% dos pacientes responderam que facilitaram a sua compreenso. Quanto identificao do conhecimento prvio dos educandos acerca dos assuntos a serem abordados a fim de adequar a linguagem e o nvel de informao ao perfil do grupo, 97,2% dos pacientes informaram que os educadores utilizaram essa estratgia. Ainda, 97,2% dos participantes afirmaram que os educadores facilitaram sua participao em sala de aula e 95,8% dos pacientes relataram que o relacionamento educador/paciente em sala de aula foi bom. Por ltimo, expressaram suas opinies e sugestes para a melhoria dos prximos cursos exemplificadas a seguir: sobre o processo ensino/aprendizagem Eu acho que no deveria mudar nada porque ns aprendemos muito sobre o assunto; Ela explicou tudo da melhor forma possvel; O mtodo usado foi bem claro para que todos entendam bem. Sobre as aulas ministradas Est timo, foi muito bom; Gostei muito, no tenho que reclamar, foi excelente; Minha opinio : o curso excelente; Vocs esto de parabns. Sobre a participao dos pacientes As que tiverem eu vou participar; importante a participao de todos nos cursos ministrados. Em relao manuteno das aulas os pacientes escreveram: Manter sempre as palestras; Que seja uma coisa freqente, pois todo dia algum transplantado e as dvidas so muitas; Que seja apresentada no pr-transplante; Eu sugiro que sempre venha ter este incentivo aos pacientes porque existem muitos pacientes perdendo o rgo por falta de informao. Sobre os temas abordados os pacientes relataram Fazer reunies sobre outros assuntos; Falar mais as causas das perdas dos rins e o que fazer para melhoria deles; Incluir no curso informaes sobre auxlio ou benefcio do ps-transplante. As principais sugestes foram: Dar mais tempo para as aulas, mais informaes sobre alimentao; Debater mais os assuntos entre os pacientes; Se possvel elaborar apostilas com as dvidas mais freqentes at para que os parentes tambm possam aprender. Reclamaram de um problema sentido na dinmica de atendimento no Ambulatrio: Compatibilidade de horrio. Adequar para que os pacientes participem mais e no fiquem ansiosos para no perder a ficha. Concluso: Os resultados obtidos permitiram concluir que as intervenes educativas realizadas alcanaram seu propsito primordial de disseminar conhecimento sobre o autocuidado para melhoria da qualidade de vida de pacientes transplantados. Alm disso, algumas medidas devem ser adotadas antes da oferta de programas de educao em sade nesse servio visando, principalmente, facilitar a participao de pacientes durante as reunies educativas sem a preocupao de serem chamados para consulta mdica ou de perderem o atendimento agendado. Aprovao no Comit de tica em Pesquisa No.: 1164/07 Participantes: Fabrcio Rodrigues de Andrade, Amanda de Matos Cazonato, Maria Flvia de Lima Ribeiro, Pedro Nazareth Aguiar Jnior, Priscila Gaeta, Nilce Piva Adami, Maria Goreti da Silva da Cruz, Renata Fabiana Leite

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Enfermagem Ttulo:
Autores: Bolsista: Orientador:

AVALIAO PUPILAR EM PACIENTES NO PR-OPERATRIO DE CIRURGIAS INTRACRANIANAS


Novais, S.S.; Diccini, S.; Sobral, M. Silvia Souza Novais - UNIFESP Solange Diccini - Enfermagem / Fundamentos de Enfermagem e Enfermagem Mdico Cirrgica

Resumo:

Introduo: O exame neurolgico realizado pelo enfermeiro na admisso do paciente, tem como objetivo avaliar disfunes presentes no sistema nervoso, determinar os efeitos dessas disfunes na vida diria do mesmo e detectar situaes de risco de vida. No exame neurolgico avalia-se o nvel de conscincia, das pupilas, da fora motora, da funo sensitiva, da funo cerebelar e dos nervos cranianos. O enfermeiro utiliza o exame neurolgico abreviado diariamente para avaliar o nvel de conscincia, fora motora e pupilas para examinar o paciente. O paciente consciente internado para cirurgia eletiva intracraniana pode no apresentar sinais de hipertenso intracraniana (HIC), com funo cognitiva preservada e desempenhando as atividades da vida diria. Entretanto, este paciente tambm apresenta risco de descompensao da HIC e deve ser monitorado at seu encaminhamento ao centro cirrgico. O diagnstico rpido das alteraes pupilares pode facilitar o tratamento e a proteo de danos cerebrais. Alm disso, o exame das pupilas um dos parmetros mais teis para a distino das causas metablicas e estruturais, podendo, inclusive, auxiliar na localizao anatmica de uma disfuno cerebral. Uma das formas empregadas para esta avaliao a medida comparativa da pupila, realizada atravs do uso de um instrumento elaborado com uma esptula de madeira e uma escala de crculos progressivamente maiores em 1 milmetro, denominada de pupilmetro. O exame neurolgico utilizado por enfermeiros tanto na admisso, como na evoluo ps-operatria de pacientes submetidos a cirurgias intracranianas eletivas ou de emergncia, em unidades de terapia intensiva e de neurocirurgia. Porm em pacientes no pr-operatrio de cirurgias de tumores intracranianos e com hipertenso intracraniana na sua fase de compensao, no h estudo que demonstre a necessidade de mensurao do dimetro pupilar. Na prtica observamos que o exame pupilar realizado pelo enfermeiro uma vez em cada planto, onde so anotados a simetria e a fotorreao. O importante que a avaliao pupilar de pacientes neurolgicos seja realizada pelo menos uma vez a cada planto ou conforme a gravidade do paciente, tendo como base de comparao avaliao pupilar de admisso hospitalar. Objetivo: O objetivo do estudo foi avaliar a evoluo do exame pupilar realizado pelo enfermeiro em pacientes com tumores intracranianos durante o pr-operatrio. Mtodo: Este estudo foi do tipo coorte prospectivo, realizado na Unidade de Neurocirurgia do Hospital So Paulo. O exame pupilar foi aplicado de uma a trs vezes ao dia, atravs da esptula pupilmetro e uma lanterna que foi usada para avaliar a forma, o dimetro e a fotorreao das pupilas. A pupila foi avaliada, do 1 dia de internao at o dia da cirurgia. Resultados: Neste estudo foram includos 64 pacientes, sendo que 31 (48%) do sexo feminino e 33 (52%) do sexo masculino. A idade mediana dos pacientes foi de 47,5 anos, variando de 19 a 76 anos. Na admisso dos pacientes na unidade de Neurocirurgia durante o exame pupilar tanto a mediana da pupila direita quanto da pupila esquerda foi de 3 milmetros, variando de 2 a 6 milmetros. Durante a internao hospitalar 6 (9,4%) pacientes apresentaram valores no tamanho da pupila maiores que 6 mm, sendo que, 5 (83%) tiveram aumento bilateralmente e 1 (27%) unilateralmente (D>E). Dos pacientes que apresentaram alterao de tamanho pupilar, 1 (1,6%) evoluiu para descompensao da hipertenso intracraniana durante o pr-operatrio. Em relao simetria, 60 (94%) pacientes apresentavam pupilas isocricas e 4 (6%) apresentavam pupilas anisocricas. A fotorreao pupilar estava presente em 54 (84%) do pacientes avaliados e em 10 (16%) pacientes a fotorreao estava lentificada. Em relao a forma das pupilas 62 (97%) pacientes apresentavam as pupilas na forma arredondada, 1 (1,5%) na forma de buraco de fechadura e 1 (1,5%) na forma ovide. Do total de pacientes avaliados, 3 (4,7%) pacientes do sexo masculino apresentaram descompensao aguda da HIC, sendo que todos foram encaminhados a tomografia computadorizada de crnio e posteriormente ao centro cirrgico. Dentre estes, 1 (33,4%) paciente apresentou dimetro pupilar superior a 6mm, constatando o aumento da Presso Intracraniana (PIC) . No centro cirrgico, 2 (66,7%) pacientes foram tratados com a colocao de derivao ventrculo-peritoneal e 1 (33,4%) paciente foi submetido a exerese do tumor intracraniano. Concluso: H necessidade que o enfermeiro no pr-operatrio de pacientes com tumores intracranianos, realize dentro da avaliao pupilar o exame da simetria e fotorreao das pupilas, como tambm, da avaliao do dimetro pupilar. Apoio financeiro:FAPESP Aprovao no Comit de tica em Pesquisa No.: 1073/06 Participantes: Silvia Souza Novais, Solange Diccini, Marianna Sobral

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Enfermagem Ttulo:
Autores: Bolsista: Orientador:

COMPLICAES OBSTTRICAS EM GESTAES COM FETO PORTADOR DE ANOMALIA INCOMPATVEL COM A SOBREVIDA NEONATAL
Sala, D.C.P.; Abraho, A.R. Danila Cristina Paquier Sala - UNIFESP Anelise Riedel Abrao - Enfermagem / Sade Pblica

Resumo:

Este trabalho investigou as possveis complicaes obsttricas no perodo gestacional, parto e puerprio imediato, em gestantes com fetos incompatveis com a sobrevida neonatal que optaram por manter a gestao at o termo. Este um estudo transversal descritivo e retrospectivo, realizado por meio de levantamento de pronturios de pacientes atendidas pela Disciplina de Medicina Fetal da Universidade Federal de So Paulo que tiveram partos nessa mesma instituio, no perodo de janeiro de 2000 a dezembro de 2006. Fazem parte da amostra desse estudo 78 gestantes. A idade mdia materna foi de 26 anos. Durante o curso desta gestao foi encontrada variao do volume amnitico em 68%(52) dos casos, em 45%(35) oligoidrmnio e em 23%(18) polidrmnio. O abortamento, parto pretermo e a gravidez prolongada estiveram presentes em 6,41%(5), 55,13%(43) e 3,84%(3) das gestaes, respectivamente. Em 17,95% (14) ocorreu bito fetal intra-uterino, e ruptura prematura das membranas em 14,10% (11), ainda as laceraes e distcias do trajeto, 15,38% (12) e 12,82% (10). O descolamento prematuro da placenta ocorreu em 6,41% (5) das gestaes e histerectomia em 2,56% (2). Em 35,89%(28) das gestantes houve reteno de fragmentos placentrios e 1,28%(1) reteno placentria uterina. Houve hemorragia puerperal grave em 5,13%(4) dos casos, exigindo tratamento por transfuso de hemocomponentes. A hipertenso arterial e o diabete melito esteve presente como patologia atual em 7,69%(6) e como descompensao de doena preexistente em 5,13%(4). Apenas 1,28%(1) das gestantes no apresentaram intercorrncias. Estes resultados demonstram indcios de complicaes na gravidez na gestao com fetos incompatveis com a vida. Fato que demonstra a necessidade destes dados serem ampliados e seu estudo aprofundado. Aprovao no Comit de tica em Pesquisa No.: 0598/06 Participantes: Danila Cristina Paquier Sala, Anelise Riedel Abraho

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Enfermagem Ttulo:
Autores: Bolsista: Orientador:

Educao em Diabetes: Promovendo resultados


Gamba, M.A.; Dal Fabbro, I.L.; Nascimento, O.F.V. Lvia Ins Dal Fabbro - UNIFESP Mnica Antar Gamba - Enfermagem / Enfermagem em Sude Pblica e Administrao Aplicada a Enfermagem

Resumo:

Introduo: As complicaes do Diabetes Mellitus (DM) se constituem um problema de Sade Pblica. A educao para a prtica do auto cuidado uma ao indispensvel para a preveno de tais complicaes. Objetivos: Avaliar um programa de educao em Diabetes realizado por uma equipe multiprofissional; Comparar nveis de HBA1C e glicemias mdias capilares semanais; Avaliar a aderncia ao tratamento clnico de pessoas com Diabetes Mellitus do tipo 2. Metodologia: Este um estudo epidemiolgico do tipo descritivo que integra um projeto educacional do Centro Integrado de Hipertenso e Metabologia Cardio-Vascular pertencente ao Hospital do Rim com uma equipe multidisciplinar representada por mdicos, enfermeiros e nutricionistas que atua com pedagogia roblematizadora. Todas as variveis investigadas seguiram o padro ouro para classificao de normalidade. Foram selecionados 21 indivduos, com HBA1C superior a 7%, e acompanhados por no mnimo oito semanas. Os dados foram analisados com o auxlio do programa epiinfo e SPSS (Atlanta 2005). O projeto foi submetido a comisso de tica respeitando seus pressupostos. Resultados: Dos 21 indivduos acompanhados 76% eram do sexo feminino, possuam mdia entre 5 a 8 anos de estudo, renda de 2 a 4 salrios mnimos, 38% eram economicamente ativos, com durao mdia da doena de 13 anos, 33,3% eram tabagistas, 9,5% eram etilistas, somente 14,3% faziam previamente a dieta, 71,4% faziam tratamento combinado (oral e insulina), 52,4% eram obesos (IMC> 30kg/cm2), 76,2% possuam hipertenso arterial, 57,1% no possua doena vascular, 23,8% possua cardiopatia, 61,9% no possuam dislipidemia, 4,8% possua neuropatia, 47,6% possua retinopatia e 4,8% possua nefropatia, ou seja, indicadores de complicaes bastante alarmantes. Estes dados na anlise estatstica no apresentaram diferenas significativas. Com um seguimento de oito semanas o grupo apresentou 100 % de aderncia ao tratamento clnico, mudana nos hbitos de vida, como: alimentao, automonitorizao e aplicao de insulina, cuidados com os ps e reconhecimento das complicaes agudas e crnicas. Houve observao da reduo da taxa glicmica em 67mg/dl de todo o conjunto amostral, porm na comparao entre o incio e o final, esta diferena no se mostrou estatisticamente significativa (p=0,236). Ainda esto sendo analisados os resultados referentes a hemoglobina glicada. Dados qualitativos permitem apontar uma mudana significativa da auto-estima e do comportamento positivo para a prtica do autocuidado; relatos como: ... em doze anos da doena nunca tive um tratamento desta natureza; ....ao ouvir que eu era capaz, tive um estmulo e um desejo de me cuidar, e isto me tornou apta, aps as orientaes, para aplicar a insulina e economizei o dinheiro que gastava na farmcia, permite referendar tais observaes. Concluses: Apesar dos resultados primrios e do pequeno nmero de observaes clnicas possvel concluir que ocorreu considervel diferena entre as glicemias iniciais e finais e que mudanas parciais no comportamento para a prtica do autocuidado foram observadas. Portanto, um programa de educao pode possibilitar a melhoria do controle glicmico e consequentemente a preveno terciria das complicaes crnicas, promovendo a qualidade de vida das pessoas com DM. Aprovao no Comit de tica em Pesquisa No.: 02035/07 Participantes: Mnica Antar Gamba, Lvia Ins Dal Fabbro, Viviane Ftima Oliveira Nascimento

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Estrutura e Processo assistencial de enfermagem para a preveno de infeco de stio cirrgico.


Gutirrez, M.G.R.; Peterlini, M.A.S.; Pawluk, L.C.; Silva, L.M.G. Larissa Christiane Pawluk - UNIFESP Maria Gaby Rivero de Gutirrez - Enfermagem / Fundamentos de Enfermagem e Enfermagem Mdico Cirrgica

Resumo:

A mastectomia uma das principais modalidades de tratamento para o cncer de mama, e classifica-se como cirurgia limpa com taxas de infeco de 1,74 a 3,42%. Estudos prvios, realizados no Setor de Oncomastologia da Disciplina de Mastologia, do Departamento de Ginecologia da UNIFESP/HSP, encontraram variaes de 14,1% a 22%. Altas taxas de infeco podem refletir a qualidade do servio, sendo assim, julgou-se necessrio avaliar a estrutura e processo assistencial de enfermagem, com foco na preveno e controle de infeco de stio cirrgico. Realizou-se estudo descritivo, observacional que constou das seguintes etapas: anlise documental, avaliao estrutural e dos processos assistenciais de enfermagem, por meio de instrumentos de avaliao elaborados e testados especificamente para esse estudo. Os resultados evidenciaram que os documentos normativos esto em consonncia com o preconizado pela literatura, porm, a estrutura fsica dos locais pesquisados apresentam limitaes importantes com impacto negativo para o desenvolvimento dos processos assistenciais adequados preveno de infeco de stio cirrgico. Os processos assistenciais atendem parcialmente aos padres recomendados. Destaca-se que a lavagem das mos, o uso racional de antimicrobianos e a realizao de curativos ps-operatrios apresentam oportunidades de melhoria que poderiam impactar positivamente as taxas de infeco de stio cirrgico. Conclui-se que para estar em conformidade com o preconizado pelos documentos institucionais e a literatura, h necessidade de se revisar e adequar a estrutura, contemplando inclusive, questes relativas educao permanente da equipe para que os processos assistenciais possas ser desenvolvidos adequadamente. Aprovao no Comit de tica em Pesquisa No.: 1486/07 Participantes: Maria Gaby Rivero de Gutirrez, Maria Angelica Sorgini Peterlini, Larissa Christiane Pawluk, Lcia Marta Giunta da Silva

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ESTUDO COMPARATIVO DAS COMPETNCIAS GERENCIAIS DE ENFERMEIROS ENTRE HOSPITAIS PBLICOS E PRIVADOS
Caballero, C.C.F.F.; Cunha, I.C.K.O. Cintia Cristina de Farias Furtado Caballero - UNIFESP Isabel Cristina Kowal Olm Cunha - Enfermagem / Enfermagem em Sude Pblica e Administrao Aplicada a Enfermagem

Resumo:

Estudo exploratrio de abordagem qualitativa que objetivou identificar e comparar as competncias gerenciais de enfermeiros hospitalares. Foram entrevistados gerentes de enfermagem de dois hospitais pblicos e dois privados da cidade de Osasco, So Paulo, de junho a outubro de 2007. A entrevista semi-estruturada continha dados de identificao e duas questes norteadoras. O projeto foi aprovado pelo Comit de tica em Os dados foram transcritos e agrupados por similaridade de discurso. Os resultados, ainda preliminares, mostram que a maior parte dos enfermeiros gerentes so mulheres de 37 a 46 anos, 8 a 21 anos de formao e esto no cargo gerencial de 2 meses a 4 anos. Todos possuem curso de especializao. Quanto s competncias gerenciais necessrias aos enfermeiros, as mais citadas foram conhecimento tcnico, liderana, tomada de deciso e comunicao. Dos entrevistados dos hospitais pblicos, um desconhecia o tema e outro demonstrou conhecimento e desenvolvimento das competncias gerenciais necessrias aos enfermeiros na instituio. Nos hospitais privados, ambos as identificavam e as desenvolviam em suas gestes. Fonte financiadora: CNPq Aprovao no Comit de tica em Pesquisa No.: 0538/07 Participantes: Cintia Cristina de Farias Furtado Caballero, Isabel Cristina Kowal Olm Cunha

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Estudo qualitativo sobre a associao entre abuso de lcool e violncia no ciclo vital familiar
Noto, A.R.; Leite, A.G. Andreza Gama Leite - UNIFESP Ana Regina Noto - Psicobiologia /

Resumo:

Introduo:O presente estudo teve por objetivo identificar fases do ciclo vital familiar de intensificao ou diminuio de comportamentos violentos associados ao uso de bebidas alcolicas, por meio de pesquisa qualitativa baseada no relato de autores e de vtimas de violncia familiar. Mtodos: A partir de uma amostra intencional por critrios, foram realizadas 16 entrevistas com mulheres vtimas de violncia cujo agressor atuava sob efeito de bebidas alcolicas. As entrevistas foram gravadas, transcritas, lidas e analisadas. O contedo foi codificado e categorizado foco na identificao das fases do ciclo vital familiar. Resultados: Em todas as entrevistas foi observada estreita associao entre a intensidade de consumo e de comportamentos violentos. Em 14 casos foram identificadas diferentes fases do ciclo vital associadas intensificao do consumo de lcool e comportamento violento: 06 casos associados a nascimento de filhos (ou gravidez), 05 a desemprego, 06 a casamento, 04 a mudana de residncia. Em relao ao tipo de violncia, 9 entrevistadas relataram sofrer mais de um tipo (verbal, sexual, fsica, ameaas); 12 entrevistadas relataram ter sofrido violncia por mais de 5 anos;. No que se refere ao fim ou reduo substancial, as fases mais freqentes foram separao do casal (N=8) ou morte do marido (N=2). Concluses: Parece existir um compasso entre consumo de lcool e comportamento violento, com importante influencia das fases do ciclo vital familiar. A violncia associada ao lcool parece perdurar por vrios anos, com reduo predominantemente relacionada ao fim do relacionamento, o que indica a baixa procura de ajuda. Aprovao no Comit de tica em Pesquisa No.: 02/11918-4 Participantes: Ana Regina Noto, Andreza Gama Leite

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Folheto informativo como estratgia de divulgao de conhecimento sobre doao de rgos e tecidos
Schirmer, J.; Formaggio, P.M.; Roza, B.A. Patrcia Matias Formaggio - UNIFESP Janine Schirmer - Enfermagem / Enfermagem Obsttrica

Resumo:

A histria do transplante no Brasil foi e ainda delineada por altos e baixos. A falta de conhecimento da populao brasileira sobre a doao de rgos, um dos fatores causadores da baixa oferta de rgos no pas; outro fator ainda mais preocupante desse contexto, o fato dos profissionais da sade tambm no terem conhecimento sobre o processo de transplante, doao e captao de rgos, diagnstico e notificao de morte enceflica (ME). A falta de polticas de educao continuada aos profissionais de sade sobre o processo de doao de rgos, e todos os desdobramentos decorrentes do no conhecimento desse processo, so possveis causas da no notificao. Portanto, levando-se em conta a importncia de aes educativas voltadas para esses profissionais, no intuito de sedimentar os conhecimentos acerca dos princpios tcnicos, aspectos relativos legislao e aspectos bioticos, a fim de prepar-los no somente para o diagnstico da morte enceflica e manuteno clnica do potencial doador de rgos, mas tambm acerca de posturas institucionais e de abordagem da famlia, este estudo visa informar os profissionais da sade sobre as leis que regulamentam o processo de doao e transplante de rgos e tecidos, especialmente no que diz respeito identificao, diagnstico e notificao da morte enceflica. A meta diminuir o ndice da no notificao de morte enceflica por falta de conhecimento dos profissionais da sade sobre o assunto. O estudo do tipo exploratrio-descritivo. O resultado obtido at o momento, foi o desenvolvimento de um folheto, contendo informaes claras, prticas e objetivas, as quais se do por meio de perguntas e respostas e de um fluxograma prtico das aes do profissional mdico ou enfermeiro desde a deteco da morte enceflica at a devoluo do corpo do paciente famlia, ocorrida ou no a doao dos rgos, informaes estas baseadas nas principais leis que regem o processo de doao e transplante de rgos e tecidos no Brasil. O contedo do folheto abrange questes como: Quem pode ser considerado potencial-doador? O que Morte Enceflica (ME)? Como diagnosticar uma ME? Quais so os exames necessrios (clnicos e grficos)? Quem deve realizar os exames para diagnstico da ME? Em que momento deve-se informar a famlia sobre a ME? Como e quando realizar a notificao da ME? Quem pode autorizar a doao? O que acontece ento se a famlia autorizar a doao? Quais so os cuidados bsicos na manuteno do doador? O que acontece se a famlia no autorizar a doao? O folheto foi encaminhado a uma comisso de especialistas/experts sobre doao de rgos e profissionais que atuam nas Organizaes Procuradora de rgos (OPO?s) do Estado de So Paulo para ser validado. Espera-se com a posterior distribuio desse folheto, auxiliar os profissionais da sade na identificao, diagnstico e notificao de Morte Enceflica. Aprovao no Comit de tica em Pesquisa No.: 0035/08 Participantes: Janine Schirmer, Patrcia Matias Formaggio, Bartira de Aguiar Roza

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Incidncia de lcera por presso em pacientes submetidos a cirurgia de coluna vertebral


Diccini, S.; Lemos, C.S Cassiane de Santana Lemos - UNIFESP Solange Diccini - Enfermagem / Fundamentos de Enfermagem e Enfermagem Mdico Cirrgica

Resumo:

Introduo: Pacientes submetidos cirurgia de coluna apresentam maior risco para desenvolver lceras por presso, devido suas restries quanto a mobilizao no ps-cirrgico e alteraes de fora motora e da sensibilidade. Objetivos: Avaliar o risco de desenvolvimento de lcera por presso no pr e ps-operatrio a partir da utilizao da escala de Braden e avaliar a incidncia de lceras em pacientes submetidos cirurgia de coluna vertebral no pr e ps-operatrio.Mtodo: Estudo do tipo Coorte prospectivo, realizado na unidade de internao e terapia intensiva da Neurocirurgia do Hospital So Paulo, de agosto de 2007 a abril de 2008. Foram includos os pacientes submetidos cirurgia de coluna eletiva e que no apresentavam na internao lcera por presso. A coleta de dados foi realizada atravs da avaliao diria da pele, funo motora, sensibilidade,e risco para o desenvolvimento de lcera por presso, utilizando a escala de Braden. Resultados: Dos 17 pacientes includos neste estudo, 11(65%) eram do sexo masculino e 6(35%) do sexo feminino. A idade mediana dos pacientes foi de 54 anos, variando de 29 a 81 anos. Os diagnsticos mdicos encontrados foram 8 (47%) pacientes com hrnia de disco, 5 (29%) pacientes com tumor medular, 2 (12%) pacientes com Arnold Chiari I, 1 (6%) paciente com lipomielocele e 1 (6%) paciente com listese. Entre os 27 antecedentes patolgicos, destacaram-se 7(25,9%) pacientes com hipertenso arterial e 3(11,1%) pacientes com diabetes mellitus. No perodo pr-operatrio a mediana na escala de Braden foi de 20 pontos, sendo que dos 17 pacientes avaliados, 13 (76,5%) no tinham risco para desenvolver lcera por presso e 4 (23,5%) pacientes tinham risco (escala de Braden < 18). Destes, 1 (25%) paciente desenvolveu seis lceras por presso na unidade de internao: 1 (16,6%) leso em regio de calcneo, estgio I; 2 (33,3%) leses nos cotovelos, 1 (16,6%) leso em regio trocanter e 1 (16,6%) leso no trax (ao nvel de T6), todas estgio II; 1 (16,6%) leso em regio sacral, estgio III. A incidncia de lcera por presso no pr-operatrio foi de 6%. A mdia do tempo de cirurgia foi de 298 minutos, variando de 80 a 570 minutos. No ps-operatrio a mediana na escala de Braden foi de 16 pontos, sendo que dos 17 pacientes avaliados, 6 (35,3%) no tinham risco para desenvolver lcera por presso e 11 (64,7%) tinham risco (escala de Braden <18). Dos 4 (23,5%) pacientes que apresentaram leses, 3 (27,2%) pacientes tinham risco e 1(16,6%) paciente no tinha risco, desenvolvendo num total de 11 lceras por presso, das quais 10 (91%) foram observadas no ps-operatrio imediato. Os locais das leses foram: 4 (36,3%) em regio mamilar, 1 (9%) na asa do nariz, 1 (9%) em face, 1 (9%) no hipocndrio, 1 (9%) no ombro, 1 (9%) em regio axilar e 2 (18,1%) em regio inguinal. Os estgios das lceras foram 6 (54,5%) leses estgio I e 5 (45,4%) leses estgio II. A mdia do tempo de cirurgia dos pacientes que desenvolveram lcera foi de 490 minutos. Concluses: A incidncia de lcera por presso no pr-operatrio foi de 6% no total de pacientes avaliados e de 25% entre os pacientes com risco de desenvolverem lcera. No ps-operatrio a incidncia foi de 23,5% no total de pacientes avaliados e de 27,2% entre os pacientes com risco de desenvolverem lcera. Mais estudos devem ser realizados, integrando medidas de preveno desde o intra-operatrio, visto que a grande maioria das lceras por presso desenvolveram-se no ps-operatrio imediato. Como tambm, que estas medidas de preveno possam ser eficazes no ps-operatrio mediato, mesmo com restries de mobilizao devido ao procedimento cirrgico ou as alteraes de fora motora e sensibilidade. Aprovao no Comit de tica em Pesquisa No.: 0848/07 Participantes: Solange Diccini, Cassiane de Santana Lemos

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Mapeamento cruzado das intervenes de enfermagem para o diagnstico de enfermagem proteo ineficaz em pacientes no ps-operatrio de revascularizao do miocrdio
Jurko, J.S.; Barros, A.L.B.L.; Assis, C.C.; Lucena, A.F.; Ribeiro, M.N.P. Juliana Soares Jurko - UNIFESP Alba Lcia Bottura Leite de Barros - Enfermagem / Fundamentos de Enfermagem e Enfermagem Mdico Cirrgica

Resumo:

Introduo: A cirurgia de revascularizao do miocrdio tem como objetivos prolongar a vida, promover alvio da angina, melhorar a qualidade de vida dos pacientes e preservar a funo do miocrdio. Pacientes aps revascularizao do miocrdio podem apresentar situaes clnicas e os enfermeiros tm importante papel na deteco dos mesmos. Intervenes de enfermagem so estratgias do enfermeiro para auxiliar o cliente a chegar a resultados esperados. A Classificao das Intervenes de Enfermagem (NIC) compreende o ordenamento das atividades de enfermagem em grupos ou conjuntos. Objetivos: Identificar os cuidados de enfermagem prescritos pelas enfermeiras da Unidade de Terapia Intensiva Ps-Operatria de Cirurgia Cardaca (UPO) para o diagnstico de enfermagem Proteo Ineficaz em pacientes que realizaram revascularizao do miocrdio; Comparar os cuidados de enfermagem prescritos para o diagnstico de enfermagem estabelecidos pelas enfermeiras da UPO com as intervenes de enfermagem propostas pela NIC para esse diagnstico. Mtodo: Estudo descritivo, transversal, retrospectivo, realizado na Unidade de Terapia Intensiva Ps-Operatrio de Cirurgia Cardaca (UPO) do Hospital So Paulo (HSP) Universidade Federal de So Paulo (UNIFESP), hospital de nvel tercirio localizado na regio sul do municpio de So Paulo, aprovado pelo Comit de tica em Pesquisa da instituio, CEP 0960/07. Foram analisados os pronturios dos pacientes submetidos cirurgia de revascularizao do miocrdio no perodo de Jan/2007 a Jun/2007 que foram diagnosticados com Proteo Ineficaz. Para tanto, utilizou-se da estatstica descritiva e do mapeamento cruzado como estratgias metodolgicas. Resultados: As 27 internaes, referentes aos pacientes no ps-operatrio de revascularizao do miocrdio no perodo do estudo demandaram um total de 1104 prescries de cuidados de enfermagem. O total de prescries para cada paciente variou de 24 a 58 cuidados prescritos para o diagnstico em estudo. Os cuidados de Enfermagem foram agrupados por similaridade perfazendo um total de 20 cuidados de enfermagem. Os 20 cuidados foram mapeados em 11 intervenes NIC. Destas, apenas Precaues contra Sangramento considerada interveno adicional optativa (ligada ao diagnstico) sendo as demais: Monitorizao de sinais vitais, Reduo de Sangramento, Cuidados com Drenos: Torcico, Cuidados com Sondas e Drenos, Manuteno de Dispositivo para Acesso Venoso, Cuidados com Cateter Central de Insero Perifrica, Cuidados com Local de Inciso, Administrao de Medicamentos: Subcutnea, Cuidados com Sondas: Urinrio e Controle de Vias Areas Artificiais ligadas a outros diagnsticos que no o do estudo. Concluso: Todas as prescries realizadas para o diagnstico de enfermagem proteo ineficaz na unidade estudada puderam ser comparadas com as intervenes propostas pela NIC. Foram encontradas correspondncias entre todos os cuidados prescritos e a NIC, apesar das intervenes no se referirem quelas ligadas ao diagnstico Proteo Ineficaz, o que sugere uma reavaliao da pertinncia da prescrio deste diagnstico de enfermagem para esta situao clnica. Aprovao no Comit de tica em Pesquisa No.: 0960/07 Participantes: Juliana Soares Jurko, Alba Lucia Bottura Leite de Barros, Cinthia Calsinski de Assis, Amlia de Ftima Lucena, Maria Nazar Pinheiro Ribeiro

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O BRINQUEDO TERAPUTICO NO PREPARO DA CRIANA PARA A COLETA DE SANGUE: O SIGNIFICADO PARA OS PAIS
Ribeiro, C.A.; Conceio, C.M Caroline Monteiro Conceio - UNIFESP Circa Amalia Ribeiro - Enfermagem / Enfermagem Peditrica

Resumo:

INTRODUO: Procedimentos intrusivos especialmente os que envolvem a utilizao de agulhas, como a puno venosa, so particularmente estressantes tanto para a criana quanto para seus pais ou acompanhantes. A literatura aponta que esses procedimentos, so percebidos pelas crianas como uma invaso extremamente dolorosa de seu corpo, um ato hostil e mutilador, configurando-se como uma vivncia ameaadora e aterrorizante; elas referem que se sentem machucadas pelas agulhas e que estas desencadeiam medo da dor e do procedimento em si. Os pais e acompanhantes, por sua vez, quando presenciam as crianas sendo submetidas a procedimentos teraputicos dolorosos e intrusivos, referem que sofrem por v-las sofrendo e por se sentirem impotentes e incapazes de ajud-las e livr-las dessa situao. Na tentativa de minimizar esse sofrimento, um dos recursos que tem sido preconizado, na assistncia de enfermagem, o Brinquedo Teraputico (BT). Brincar a atividade mais importante da vida da criana e crucial para o seu desenvolvimento fsico, emocional, mental e social; o modo pelo qual a criana se comunica e expressa ativamente seus sentimentos, ansiedades e frustraes. O BT baseia-se na funo catrtica do brinquedo e tem como objetivo diminuir a tenso decorrente de situaes difceis da vida da criana, preparar as crianas para procedimentos, minimizando o estresse decorrente dessa vivncia e promovendo o bem estar psicofisiolgico da mesma. Para a criana, o BT transforma situaes desagradveis, em experincias construtoras de conhecimento e aprendizagem, j que, atravs da brincadeira, ela vai compreender o significado e os motivos pelo qual passar por um procedimento, como a coleta de sangue. Seu uso, enquanto instrumento de interveno de enfermagem preconizado pela legislao profissional conforme a resoluo 295/2004 do Conselho Federal de Enfermagem, sendo considerado competncia do enfermeiro que assiste a criana e sua famlia. Enquanto aluna do curso de graduao em Enfermagem desta Universidade, como aprendizagem da parte essencial da assistncia de Enfermagem, entendemos que o atendimento humanizado e consciente fundamental, objetivando tambm uma ateno s necessidades emocionais e sociais da criana. Assim o BT consiste num elemento essencial de ateno e cuidado, proporcionando aos pais e s crianas um atendimento mais digno e humano. OBJETIVO: Compreender o significado atribudo pelos pais, a respeito da utilizao do BT no preparo de seus filhos, para a puno venosa seguida da coleta de sangue. METODOLOGIA: O trabalho descritivo, de natureza qualitativa e foi realizado no ambulatrio do Centro Assistencial Cruz de Malta (CACM), organizao filantrpica conveniada com o Sistema nico de Sade-SUS, localizada na cidade de So Paulo, que mantm com o Departamento de Enfermagem da UNIFESP o Programa de Integrao Docente Assistencial PIDA-CACM. Trata-se de um programa de extenso cadastrado na Pr Reitoria de Extenso da Universidade, que serve de campo de estgio para os alunos de graduao em enfermagem e tem como um de seus projetos O preparo da criana e famlia para puno venosa, com o uso do BT. Os dados foram coletados por meio de entrevistas individuais, no estruturadas, com os pais e responsveis das crianas submetidas coleta de sangue, iniciadas com a seguinte pergunta orientadora: O que o senhor (a) achou do preparo do seu filho para a coleta de sangue, com o Brinquedo Teraputico?. Ao todo foram realizadas oito entrevistas, com cinco mes, um pai, uma av e uma cuidadora responsvel pela criana. A anlise dos dados se deu segundo os passos de codificao e categorizao propostos por MAYAN (2001). RESULTADOS: A anlise dos dados permitiu compreender que os pais aprovam o BT como interveno de preparo da criana para a coleta de sangue e consideram seus resultados satisfatrios por promover o conhecimento da criana sobre o procedimento a ser realizado; diminuir o medo e acalmar a criana; promover a segurana da criana e dos pais, assim como a distrao da criana, alm de reduzir o tempo do procedimento e evitar a necessidade de conteno do filho. Eles reconhecem sua importncia mesmo quando a criana demonstra medo e reage chorando no momento do procedimento e embora cheguem a ficar at decepcionados com tais reaes, atribuem-nas ao trauma decorrente de experincias anteriores como hospitalizaes e convivncia com profissionais indiferentes ao sofrimento na criana, quando realizam procedimentos sem o preparo adequado. Eles consideram que essa prtica promove um atendimento humanizado criana e sua famlia, fazendo a diferena no sentido de uma enfermagem de qualidade. Consideramos que o objetivo do estudo foi alcanado e que o BT mostrou-se importante tambm para os pais, proporcionando-lhes alvio, confiana, segurana e tranqilidade na hora de levar a criana para realizar uma coleta de sangue. Assim, recomendamos que sua utilizao seja implementada na assistncia criana, inclusive nas unidades bsicas de sade e ambulatoriais. Aprovao no Comit de tica em Pesquisa No.: 1072/04 Participantes: Circa Amalia Ribeiro, Caroline Monteiro Conceio

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O PRECONCEITO ENTRE ADOLESCENTES NO AMBIENTE ESCOLAR: UMA ABORDAGEM DA SADE.


Tadini, A.C.; Brtas, J.R.S. Aline Cssia Tadini - UNIFESP Jos Roberto da Silva Brtas - Enfermagem / Sade Coletiva

Resumo:

Trata-se de um estudo do tipo Survey que tem como objetivo caracterizar a populao e identificar os tipos de preconceitos presentes no ambiente escolar; tendo como sujeitos os adolescentes que freqentam trs escolas pblicas de ensino fundamental e mdio da regio de Santo Eduardo, Municpio de Embu, So Paulo. A populao, estudada at o presente momento, constituda por 668 adolescentes, de ambos os sexos, que esto entre a faixa etria de 10 a 19 anos de idade, participantes das oficinas desenvolvidas pelo Projeto de Extenso Universitria Corporalidade e Promoo da Sade da Universidade Federal de So Paulo (UNIFESP). O instrumento de coleta de dados ser um questionrio semi-estruturado abordando dados socio-demogrficos e variveis relacionadas temtica (preconceitos de gnero, social, da cor da pele (racial/etnia), religioso, sexual e fsico). At o presente momento obtivemos adolescentes: 51,0%(345) do sexo feminino e 49,0%(323) sexo masculino. Com base nos encontrados, referente questo scio-demogrfica desses adolescentes, observamos: 76,5%(511) esto entre a faixa etria de 12 e 15 anos; 87,7%(586) consideram heterossexuais. Segundo a religio: 51,3%(343) so catlicos, 25,0%(167) evanglicos, 18,0%(120) referiram no tm nenhuma religio. Grande parcela (95,6% /639) reside em casa de alvenaria. Referente cor da pele desses adolescentes: 53,0%(354) autodenominaram serem da cor parda; 28,7%(192) da cor branca; 15,7%(105) da cor preta. Segundo o tipo de limitao fsica encontrada, 84,0%(560) assinalaram no terem limitaes, porm 12,7%(85) relataram fazer uso de culos e 7(1,0%) fazem uso de prtese dentria ou auditiva. J com referncia aos tipos de artes-corporais que os mesmos usam ou possuem, foram encontrados: 543(81,4%) dizem no terem nenhum tipo, mas 57(8,5%) tm cabelos coloridos e 33(5,0%) usam piercings. Os dados coletados referente aos tipos de turmas que os adolescentes mais convivem, observamos que h vrios tipos. As turmas encontradas so referentes s representaes sociais que envolvem seus interesses, como: afinidades musicais, predilees, grupamentos comportamentais semelhantes, questes geogrficas, vnculo escolar, gnero, esporte, dentre outras caractersticas; tudo como meio de socializao. Os tipos mais encontrados at o momento so: 10,9%(73) Ecltico; 7,3%(49) Turma das meninas; 5,1%(34) do futebol; 3,9%(26) Turma da classe; das msicas: 4,8%(32) Black, 2,2%(15) Rock, 2,2%(15) Funk; 1,8%(12) Pagode; 1,6%(11) da igreja; 1,6%(11) do Hip-Hop; 1,5%(10) Time da escola; 1,5%(10) dos meninos. Porm, 28,0%(187) relataram no terem um tipo especfico de turma. A respeito do preconceito no ambiente escolar, pode ser evidenciado que o adolescente entra em contato com os preconceitos e discriminaes na escola, dos quais podem ser geradores de violncia. Atravs dos dados parciais encontrados, estes demonstram que existem adolescentes sofrendo por preconceito, onde 54,0%(361) j sofreram por este tipo de violncia. Foi atravs das histrias fictcias, abordando adolescentes que sofreram algum tipo de preconceito, que podemos obter parcialmente: 6,9%(46) das garotas identificam-se com o caso da Karina (preconceito de gnero) e 6,1%(41) se identificam com o caso da Joana (preconceitos: fsico (altura e peso) e religioso). J os garotos 11,8%(79) se identificaram com Joo (preconceito de gnero) e 6,7%(45) com Leonardo (preconceito social). Desta forma, os sentimentos desvelados pelas vivncias do preconceito na escola foram: ofensa, tristeza frente aos acontecimentos, raiva, o preconceito com fato natural, sensao de estarem sozinhos, pensamento de abandono escolar, perda de interesse pela escola, vontade de brigar, vingana (matar, espancar, xingar, jogar fogo na escola, humilhar e machucar o prximo) e reao preconceituosa (inventar apelidos, dentre outros). Demonstrando assim, a necessidade de se obter mais dados para concluir tais achados referentes ao preconceito, como forma de violncia entre as pessoas, dentro do ambiente escolar. Aprovao no Comit de tica em Pesquisa No.: 0549/07 Participantes: Aline Cssia Tadini, Jos Roberto da Silva Brtas

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O RUDO NA UNIDADE DE TERAPIA INTENSIVA PEDITRICA: OPINIES DE PROFISSIONAIS DE ENFERMAGEM DE ALGUNS HOSPITAIS DE SO PAULO
Pinheiro, E.M.; Jardini, L.; Pires, M.P.O. Larissa Jardini - UNIFESP Eliana Moreira Pinheiro - Enfermagem / Enfermagem Peditrica

Resumo:

A equipe de enfermagem desempenha um papel central na promoo de um ambiente seguro para a criana hospitalizada e a famlia e profissionais que atuam em Unidade de Terapia Intensiva Peditrica (UTIP). Assim, reconhecendo a importncia da ecologia ambiental da UTIP para um cuidado seguro e da importncia da opinio da equipe de enfermagem sobre o rudo para o aprimoramento deste cuidado, este estudo teve por objetivo verificar as opinies dos profissionais de enfermagem que atuam em UTIP de alguns hospitais pblicos, de ensino do municpio de So Paulo a respeito das repercusses do rudo para a criana, a famlia e os profissionais no processo de hospitalizao. Estudo exploratrio-descritivo com abordagem quantitativa, realizado em trs unidades peditricas de hospitais pblicos ligados a uma Universidade Federal. Os sujeitos constituram-se de 48 profissionais, sendo 14 enfermeiros, 18 auxiliares de enfermagem e 16 tcnicos de enfermagem. Os dados foram coletados pelos pesquisadores em maro de 2008, nos plantes da manh, tarde e noite, por meio de um formulrio que continha questes fechadas e abertas. Dos profissionais, (43,5%) tinham menos de cinco anos de atuao na UTIP e (52,0%) trabalham no planto noturno destas unidades. Na opinio dos sujeitos, um pouco mais da metade (56,5%) consideram o ambiente das unidades muito ruidoso, e a maioria (60,5%) considera que o rudo pode exercer alguma influncia no desempenho dos profissionais para o cuidado criana hospitalizada, podendo lev-los a desconcentrao, stress, irritabilidade e barulho na cabea. As equipes de enfermagem destes servios citam que os alarmes de equipamentos (45), a conversao entre pessoas (27) e o toque do telefone (17) constituem-se nas principais fontes que produzem rudo nas UTIPs. Uma proporo considervel dos profissionais entrevistados (43,5%) considera-se muito cuidadoso em relao as fontes que podem provocar o rudo nas UTIPs que atuam. Possuem a opinio de que tambm (37,5%) a equipe de enfermagem do seu planto muito cuidadosa. Uma proporo considervel (81,5%) dos respondentes revela que o rudo sempre perceptvel na UTIP. Quanto susceptibilidade ao rudo em relao ao ambiente das UTIPs, (62,5%) destacam que so muito susceptveis ao rudo das unidades que atuam. Apontam que o rudo pode trazer-lhes conseqncias para a sade (71,0%) e que tambm pode alterar o estado emocional (73,0%), podendo lev-los a um aumento da irritabilidade, do stress, do mau humor e de problemas de audio. Cerca de (48,0%) dos respondentes acreditam que o rudo sempre perceptvel para a criana durante a hospitalizao. Afirmam um pouco mais da metade dos profissionais (64,5%) que o rudo presente nos ambientes pode trazer conseqncias para a sade da mesma. Afirmam (77,0%) que o nvel de rudo das UTIPs pode tambm alterar o estado emocional dos pacientes, gerando irritabilidade, alterao no padro sono-repouso, choro e agitao. A metade (50,0%) dos sujeitos da pesquisa tem opinio que o rudo das UTIPs sempre perceptvel para as famlias. Consideram (69,0%) que o rudo do ambiente pode alterar o estado emocional das mesmas, levando-as a manifestar preocupao, irritabilidade e ansiedade. Em relao ao nvel de rudo das UTIPs para o desempenho dos profissionais durante a jornada de trabalho (39,5%) dos entrevistados o consideram regular, e em uma proporo aproximada (31,0%) como bom. Na opinio dos profissionais, o rudo das unidades nunca interfere no dilogo com os colegas de trabalho (54,0%), na relao com a criana hospitalizada (75,0%) e na interao com a famlia (73,0%). Os profissionais afirmam (69,0%) que o nvel de rudo dos ambientes das UTIPs devem ser sempre mensurados. Quando se indagou se a mensurao dos nveis de rudo das UTIPs tem alguma relao com o cuidado seguro para a criana hospitalizada (83,5%) dos profissionais responderam afirmativamente. Em proporo expressiva (94,0%) dos sujeitos consideram que deveria ser oferecida pela educao continuada dos hospitais investigados alguma informao para os profissionais sobre os efeitos do rudo ambiental das unidades para a criana hospitalizada e famlia. A totalidade dos sujeitos (100%) pensa que deveria ser oferecida pela educao continuada das instituies alguma informao para os profissionais de enfermagem sobre os efeitos do rudo para a sade dos trabalhadores. Considerando que na opinio dos profissionais de enfermagem o rudo dos ambientes das UTIPs pesquisadas regular, podendo alterar o estado emocional e trazer conseqncias para a sade dos profissionais, crianas e famlias, e que no parecer das equipes de enfermagem os nveis de rudo das UTIPs devam ser sempre mensurados, os resultados demonstram a necessidade de realizar intervenes como medies dos nveis de presso sonora nas UTIPs e realizar a deteco de fontes que produzem rudo para posterior intervenes, por meio de programas educativos, que possam conduzir a sensibilizao dos profissionais de enfermagem. Levando-se em considerao os resultados encontrados referentes s opinies dos profissionais de enfermagem que atuam em UTIPs e que outras equipes de sade trabalham tambm nesses ambientes, o estudo sugere que seja investigado as opinies de outros profissionais afim de avaliar a necessidade de inclu-los em programas educativos sobre o rudo nas UTIPs. Aprovao no Comit de tica em Pesquisa No.: 032/08 Participantes: Eliana Moreira Pinheiro, Larissa Jardini, Maria Paula de Oliveira Pires

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O UNIVERSO FEMININO NA OBRA O CORTIO


Cagnacci, C.V.; Arajo, A.C.; Brtas, A.C.P. Carolina Vieira Cagnacci Aline Corra de Arajo - UNIFESP Ana Cristina Bretas - Enfermagem / Sade Pblica

Resumo:

Introduo-A arte literria nasce da apropriao que um autor faz da palavra, no se limitando sua significao, expressando sentimentos, pensamentos, ampliando possibilidades de interpretao do mundo, de compreender o outro, ou narrar um fato. fruto da imaginao ou das experincias reais do autor, que dotado de sensibilidade, mescla sua inveno com suas percepes de realidade.A literatura tem grande importncia na influncia de um determinado comportamento social ou retrato deste.Tal importncia se caracteriza no auxlio de um entendimento da biografia de um indivduo, na compreenso do ser humano e da sociedade, na reconstruo da histria social e cultural, alm da legitimao de costumes e valores.Objetivo-Compreender o universo feminino do O Cortio e estabelecer uma relao dialgica deste mundo com a categoria analtica gnero.Metodologia-Este ensaio tomou como instrumento de pesquisa a Tertlia Literria Dialgica: um encontro entre amigos para leitura, discusso e reflexo de obras clssicas, baseada na aprendizagem dialgica-conceito, pautada nos conceitos de dialogicidade de Freire e na teoria da ao comunicativa de Habermas. Inspiradas nela nos reunimos sistematicamente para conversar e dividir experincias a partir das interpretaes da obra.Para anlise textual consideramos os valores, atitudes, hbitos construdos pelo autor expressando a cultura de um grupo de mulheres no fim do sculo XIX.Apresentao dos dados Azevedo apresenta o universo feminino por meio de 20 personagens com caractersticas sociais, tnico-culturais e polticas diversas.Escolhemos a histria de 7 mulheres, dado a riqueza de informaes e diversidade de comportamento que o autor atribui a cada uma: Augusta Carne Mole,Paula,Bertoleza,Pombinha,Lonie,Rita Baiana e Albino.Inclumos este descrio das mulheres visto que se considera e considerado pelos moradores do Cortio como tal, apesar de ser do sexo masculino.Estas personagens retratam singularidades do ser mulher da poca, trazendo peculiaridades formao social brasileira:Augusta Carne Mole:brasileira, branca, lavadeira, mulher de um militar e me de muitos filhos.Aparentava um comportamento exemplar, julgava os que no compartilhavam de seus rgidos valores morais e contraditoriamente submete uma de suas filhas aos cuidados de uma prostituta abastada. Era de uma honestidade proverbial no Cortio, honestidade sem mrito, porque vinha da indolncia de seu comportamento e no do arbtrio de seu carter. (p.30).Paula: idosa, ndia, chacoteada pelos moradores do Cortio e paradoxalmente respeitada por suas feitiarias. Cabocla velha, meio idiota a quem respeitavam todos pelas virtudes de que s ela dispunha para benzer erisipelas e cortar febres por meio de rezas e feitiarias.(...). Chamavam-lhe Bruxa. (p.30).Bertoleza:brasileira, negra e escrava, companheira do dono do Cortio.Considerada e tratada como moeda de troca, submetia-se ao trabalho gratuito por acreditar que era seu dever ao amante branco o que significava para ela ascenso social. Bertoleza no queria sujeitar-se a negros e procurava instintivamente o homem numa raa superior a sua.(p.14). Pombinha:branca, filha de portugus, supervalorizada por sua educao, delicadeza e bondade, seus modos finos diferia-a dos demais moradores do cortio, era a flor do Cortio(...) dezoito anos, no tinha ainda pago natureza o cruento tributo da puberdade (p.31).Lonie:francesa, cabelos artificialmente loiros, roupas exagerada, prostituta.Respeitada por todos no Cortio seu comportamento aparenta independncia financeira, social e moral. Uma cocte de trinta mil ris para cima. (p.30).Rita Baiana: mestia, brasileira, lavadeira, caridosa e festeira. Personagem sensual sendo motivo de briga entre um brasileiro e portugus.Apresenta um comportamento liberto no se importando com o julgamento alheio, carismtica.no m criatura. Tirante o defeito da vadiagem (p.33).Albino:branco, lavadeiro.Sensvel, delicado, frgil, provocava nas demais personagens um instinto de proteo, sendo aceito por todos. Era lavadeiro e vivia sempre entre as mulheres, com quem j estava to familiarizado que elas o tratavam como a uma pessoa do mesmo sexo (p.32).Consideraes finais: O legado deixado pelo universo feminino da obra expressa significados simblicos s vidas das mulheres contemporneas.Como mulheres e enfermeiras percebemos nas relaes cotidianas que muito do que fazemos e/ou somos cobradas a fazer oriundo de mentalidades socialmente construdas e culturalmente fundamentadas. Compreender a histria de mulheres do sculo XIX: suas atitudes, comportamentos e julgamentos nos leva reflexo sobre nossa condio feminina possibilitando a ruptura de paradigmas. Participantes: Carolina Vieira Cagnacci, Aline Corra de Arajo, Ana Cristina Passarella Brtas

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Passagem de microorganismos da regio orofarngea e gstrica para a traquia em crianas submetidas ventilao pulmonar mecnica.
Silva, C.C.; Peterlini, M.A.S. Cristiane Cruz da Silva - UNIFESP Maria Angelica Sorgini Peterlini - Enfermagem / Enfermagem Peditrica

Resumo:

Introduo: A pneumonia importante causa de morte por infeco adquirida em hospitais, principalmente em pacientes submetidos ventilao pulmonar mecnica (VPM). Um dos acessos dos microrganismos ao trato respiratrio inferior a aspirao de secreo contendo patgenos da orofaringe, da cavidade gstrica ou dos seios sinusais. O processo de higiene oral com a utilizao de agentes antibacterianos tem sido descrito como necessrio para a reduo da colonizao oral e do acmulo de microorganismos presentes nessa cavidade, que podem passar para as vias areas inferiores e promover a colonizao pulmonar.1-2. Objetivo: Verificar a associao entre a colonizao microbiana orofarngea, gstrica e traqueal de crianas em VPM submetidas a intervenes farmacolgicas e no farmacolgicas de higiene oral. Casustica e Mtodo: Estudo clnico, prospectivo e randomizado referente associao entre a colonizao orofarngea, gstrica e traqueal de crianas em VPM, submetidas higiene oral com e sem a utilizao de anti-sptico. A investigao teve incio aps a aprovao do projeto pelo CEP da instituio e da obteno do consentimento livre e esclarecido dos responsveis pela criana. A amostra foi composta por 30 crianas distribudas aleatoriamente no grupo no farmacolgico (GC) e no grupo farmacolgico (GE), para o qual a higiene oral foi realizada com aplicao de gel de clorexidine a 0,12%. Foram pesquisadas variveis relacionadas criana, a internao hospitalar, a utilizao de VPM, a terapia medicamentosa e nutricional. As culturas para anlise da colonizao orofarngea, gstrica e traqueal foram coletadas com 24, 48 e 96 horas de internao da criana na Unidade de Cuidados Intensivos Peditricos (UCIP). Padronizaram-se os materiais utilizados, a tcnica de coleta, a identificao da amostra e as condies para o armazenamento e transporte das culturas ao laboratrio. As amostras foram semeadas e incubadas de acordo com os parmetros determinados para atmosfera, temperatura, tempo e umidade e submetidas a provas bioqumicas para identificao exata das espcies. As variveis foram analisadas segundo os testes de varincia, Qui-Quadrado de Person e Exato de Fisher, sendo fixado em 0.05 o nvel de rejeio da hiptese de nulidade. Resultado: A maioria das crianas era lactente e pr-escolar, do sexo masculino, cor da pele branca, eutrfica, portadores de patologias prvias de carter crnico, mantidos em jejum oral, com uso de sondas gstricas. Quanto terapia medicamentosa, predominou o uso de antibiticos, depressores do sistema nervoso central e modificadores do pH gstrico. Todas as crianas foram submetidas intubao orotraqueal, tendo mdia de tempo de utilizao de VPM de 199,6 horas. O tempo mdio de permanncia na UCIP e no hospital foi de 12,7 e 33,9 dias, respectivamente. No houve diferena estatisticamente significante entre os grupos. Foram obtidas 212 culturas, sendo 34,4% de secreo orofarngea, 34,0% traqueal e 31,6% gstrica. Na orofaringe houve predominncia de flora normal nas crianas do GC, havendo significncia estatstica na Cultura I (p=0,0498). A flora patgena foi identificada prioritariamente no GE, tendo diferena estatstica na Cultura I (p=0,0105) e III (p=0,0210). Em relao s culturas de secreo gstrica e traqueal no foi identificada diferena estatstica quanto presena da flora normal e patgena, entre os grupos, nos diferentes tempos de coleta. As espcies de bactrias patgenas identificadas com maior freqncia foram: Enterobacter spp, Klebsiella pneumoniae, Escherichia coli, e Pseudomonas aeruginosa. Na secreo gstrica isolou-se tambm leveduras e Cndida spp. No estudo da associao entre a colonizao microbiana orofarngea, gstrica e traqueal de crianas do GC e GE, verificou-se a passagem de microorganismos da orofaringe para a traquia em 42,8% das crianas do GC e em 55,3% das crianas do GE. A passagem de microorganismos da regio gstrica para a traqueal foi verificada em 2,8% das crianas do GC e no ocorreu entre as crianas do GE. No houve diferena estatisticamente significante entre os grupos estudados, tanto na passagem de microorganismos da orofaringe para a traquia (p=0,204) quanto do estmago para a traquia (p=0,483) e o uso de anti-sptico para a higiene oral. Concluso: Houve predominncia de patgenos gram-negativos nas culturas analisadas. A utilizao de medidas farmacolgicas para a realizao da higiene oral neste grupo de crianas no influenciou o padro de colonizao e passagem de microorganismos da orofaringe e estmago para traquia. Referncias: 1- Garcia R. A review of the possible role of oral and dental colonization on the occurrence of health care-associated pneumonia: Underappreciated risk and a call for interventions. Am Journal Infect Control 2005;33(9):527-41. 2- Safdar N, Crnish CJ, Maki DG. The pathogenesis of ventilator - associated pneumonia: its relevance to developing effective strategies for prevention. Respiratory Care 2005;50(6):725-39. Agradecimento: Fundao de Amparo Pesquisa do Estado de So Paulo - FAPESP. Fomento pesquisa processo n. 04/13361-2. Aprovao no Comit de tica em Pesquisa No.: 794/04 Participantes: Cristiane Cruz da Silva, Maria Angelica Sorgini Peterlini

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Perfil das dissertaes do curso de mestrado em Enfermagem Peditrica da UNIFESP - perodo de 1981 a 2006.
Cagnacci, C.V.; Ohara, C.V.S. Carolina Vieira Cagnacci - UNIFESP Conceio Vieira da Silva - Enfermagem / Sade da Criana e Adolescente

Resumo:

Introduo - A avaliao contnua, na qual se incluem as pesquisas, constitui a estratgia apropriada que possibilita aos cursos, a obteno de dados para reestruturao necessria aos avanos constantes em direo a excelncia de qualidade, fazendo frente a cada vez mais intenso fluxo da produo de conhecimento. Cabe mencionar que este estudo um recorte do projeto de pesquisa aprovado pelo CNPq n 501742/2007-7, referente anlise interpretativa das dissertaes do curso de mestrado em Enfermagem Peditrica do Programa de Ps-graduao e enfermagem da Universidade Federal de So Paulo o perodo de 1981 a 2006. Metodologia - Trata-se de uma pesquisa de carter quantitativo exploratrio retrospectivo com o objetivo de levantar as teses de mestrado do programa de psgraduao em enfermagem peditrica da Universidade Federal de So Paulo no perodo de 1981 a 2006 nos acervos da BIREME, secretria de ps-graduao, catlogos de teses dessa secretaria. A fim de caracterizar a produo cientfica quanto rea de predomnio das dissertaes, abordagem metodolgica, tipo de estudo, orientao, locais, sujeitos, faixa etria, foco de estudo. Resultados: Evidenciou-se 105 teses no perodo estudado concentrando maior produo na dcada de 90, houve predomnio de 80% das teses na rea assistencial, 14% no ensino e 4% na administrao e 2% na assistncia e ensino. Utilizaram abordagem quantitativa 76%, sendo 51% do tipo descritivo. As teses foram realizadas por 52,5% de enfermeiras assistenciais. Quanto a orientao das teses, 74% foram orientadas por enfermeiras docentes,18% mdicos e 8% outros profissionais como antroplogos, socilogos, pedagogos e bibliotecrios. Os locais onde os estudos foram desenvolvidos compem-se de 48,6% em hospitais , 17% em ambulatrios, 10,5% escolas de enfermagem, 9,5% creches, 5,5% em Escolas de Ensino fundamental, 5% em domiclio e 4% em mais de um local. Os achados revelaram tambm que 75% utilizaram uma populao, 9% duas populaes, 4% trs populaes e 2% mais de trs populaes envolvendo seres humanos, j 10% dos estudos utilizaram como populao pronturios, ficha de recursos humanos, composio do leite e ambiente hospitalar. Os sujeitos dos estudos foram muito diversificados, embora as crianas, enfermeiras, mes e estudantes de enfermagem representam a maior freqncia respectivamente. Nas pesquisas que envolveram as crianas, o neonato, seguida do lactente e pr-escolar foram os mais estudados, a minoria foi de adolescentes e escolares. Em relao a temtica do estudo, 96 teses se dirigem `a assistncia em enfermagem, dessas ,46% focam em Pediatria Curativa (constituda por procedimentos, processo de enfermagem, famlia, cuidado, doenas crnicas, doenas genticas, consulta de enfermagem, administrao da assistncia, dor, cirurgia ,internao e comunicao), 35,3% tem seu foco na Pediatria Preventiva (composta por temas como creche, consulta de enfermagem, adoo, desenvolvimento infantil, concepes populares, vacinao, DST e amamentao ) e 17,7% o foco em neonatologia (assistncia ao RN, alojamento conjunto, UTI, triagem neonatal, mortalidade neonatal e bebs deficientes). Os instrumentos mais utilizados nos estudos foram questionrios, formulrios e observao. No h explicitao em 68% das teses da linha de pesquisa a qual o projeto est vinculado. Consideraes finais - Acreditamos que a reviso do percurso das teses de mestrado subsidiar os docentes da rea de Sade da Criana e Adolescente no aperfeioamento do programa, e em especial contribuio com os estudos de redefinio das linhas de pesquisas, assim como as lacunas que constituem essas teses. Aprovao no Comit de tica em Pesquisa No.: 969/99 Participantes: Carolina Vieira Cagnacci, Conceio Vieira da Silva Ohara

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Potencial de hidrognio de solues de antibiticos submetidas a condies ambientais de uma unidade hospitalar no climatizada
Monteiro, C.; Pedreira, M.L.G.; Machado, A.F. Cntia Monteiro - UNIFESP Mavilde Gonalves Pedreira - Enfermagem / Enfermagem Peditrica

Resumo:

INTRODUO:Durante a realizao da terapia intravenosa(IV), vrios so os frmacos e solues utilizados para o alcance das finalidades teraputicas, sendo os antibiticos(ATB) um dos medicamentos mais utilizados em crianas. Para adequada administrao, cuidados especializados de enfermagem relativos ao processo de diluio e determinao do tempo de infuso devem ser implementados, visando adequar o processo de administrao s caractersticas anatmicas e fisiolgicas de pacientes peditricos e prevenir complicaes como as decorrentes da infuso de solues muito cidas ou bsicas por cateteres IV perifricos predispondo a flebite e infiltrao. Na prtica clinica h falta de ATB de apresentao peditrica, deste modo, doses podem ser fracionadas e as solues submetidas a vrios processos de diluio. Assim, surgem questionamentos quanto s possveis alteraes do comportamento qumico dos frmacos aps reconstituio, diluio e infuso por tempo prolongado em condies ambientais de unidades hospitalares no climatizadas. OBJETIVOS:Medir o pH de ATB, aps reconstituio e diluio prprias para administrao IV em crianas; verificar os valores de pH de ATB aps determinados tempos de exposio s condies ambientais em uma unidade hospitalar no climatizada; identificar valores de pH que poderiam constituir fator de risco para complicaes locais da terapia IV. MATERIAL E MTODO:Estudo experimental para aferio do pH de cinco ATB: ceftriaxona sdica, cloridrato de vancomicina, metronidazol, penicilina cristalina e sulfato de amicacina; aps a reconstituio, diluio e simulao da tcnica de administrao na prtica clnica de uma unidade hospitalar de atendimento cirrgico de crianas. A coleta de dados foi realizada em fevereiro de 2008, aps aprovao do Comit de tica em Pesquisa (1458/06). Os ATB foram reconstitudos com gua destilada e diludos com soro fisiolgico (SF) ou soro glicosado 5% (SG) em concentrao teraputica preconizada. Foi avaliado o pH: apresentao lquida ou soluo reconstituda; t0:imediatamente aps a diluio; t1:cinco minutos aps a diluio; t2:30 minutos; t3:60 minutos; t4:120 minutos; t5:24 horas. O controle da temperatura ambiental demonstrou valor mnimo de 26,5C e mximo de 31,2C. O pH foi mensurado com equipamento digital com tcnica padronizada. Os dados so apresentados segundo valor absoluto, mdia e desvio padro de pH. RESULTADOS:Foram analisados 147 valores de pH. A ceftriaxona sdica aps reconstituio apresentou valor mnimo de pH de 6,49, mximo 6,73 e mdio 6,60; em SF o pH mdio foi 6,380,15(mn.5,85 em t0; mx.6,67 em t5); em SG o valor mnimo foi 6,25 em t2 e mximo 6,75 em t5(6,490,08). Aps ser reconstitudo o valor mdio de pH do cloridrato de vancomicina foi 3,48(min.3,34;mx.3,55); aps diluio em SF apresentou pH de 4,10(0,12), com pequena variao no decorrer do experimento(min.3,95 em t0; mx.4,39 em t5); com SG o pH mdio foi 3,97(0,09), valor mximo de 4,10 em t3 e mnimo, em t0, de 3,76. A penicilina cristalina reconstituda apresentou pH mnino de 6,66, mximo de 6,84 e mdio de 6,75; aps diluio em SF, pH mnimo(5,89) e mximo(6,94) ocorreram em t5,(6,410,17); em SG pH mnimo de 6,28 foi aferido aps 24 horas de exposio as condies ambientais e mximo(6,77) em t1(6,650,15). O valor mdio de pH de sulfato de amicacina aps a reconstituio foi 4,47(mn.4,21; mx4,61); em SF apresentou valor mnimo de 4,54 em t2, mximo de 5,07 em t0, e mdio de 4,56(0,02); para o SG obteve-se valor mnimo de 4,59, mximo de 5,06(ambos em t3) e mdio de 4,62(0,03). O metronidazol no pode ser submetido diluio, assim, a apresentao lquida do frmaco evidenciou valor mdio de pH de 4,96 (mn.4,95;mx.4,98) e; exposto a condio ambiental o valor mnimo(4,94) foi aferido em t1 e, o mximo(5,04) em t3(4,970,02). No se identificaram a olho nu, alteraes no aspecto fsico das solues com ATB no decorrer do experimento. Destaca-se que os valores de pH do cloridrato de vancomicina, sulfato de amicacina e metronidazol caracterizam ATB de risco para o desenvolvimento de complicaes da terapia IV, mesmo aps o processo de diluio. Os valores mnimos de pH aferidos para a ceftriaxona sdica e penicilina cristalina foram prximos a 6, valor descrito em faixa considerada segura para administrao de frmacos em veias perifricas. Em relao a estudo similar previamente realizado em laboratrio com condies ambientais de luz e temperatura controladas, verificou-se que os valores de pH identificados no apresentaram variaes que ultrapassassem uma unidade de pH, para mais ou para menos. CONCLUSES:Todos os valores de pH aferidos dos ATB estudados caracterizaram solues cidas, independentemente do diluente. Os valores de pH dos ATB estudados no apresentaram discrepncias no decorrer dos tempos de aferio, que caracterizassem alteraes do comportamento cido-bsico das solues. Alguns dos valores de pH obtidos constituem fator de risco para o desenvolvimento de complicaes locais da terapia IV, em especial para o cloridrato de vancomicina, sulfato de amicacina, metronidazol. Aprovao no Comit de tica em Pesquisa No.: 1458/06 Participantes: Cntia Monteiro, Mavilde L. Gonalves Pedreira, Ariane Ferreira Machado

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Prevalncia de Diabetes Mellitus auto-referida entre funcionrios de um complexo hospitalar universitrio


Bettencourt, A.R.C.; Martins, C.A. Cssia Andrade Martins - UNIFESP Ana Rita de Cssia Bettencourt - Enfermagem / Fundamentos de Enfermagem e Enfermagem Mdico Cirrgica

Resumo:

O Diabetes Mellitus (DM) tende a elevar muito sua prevalncia nos prximos anos. Estima-se que 3 a 5 % dos brasileiros sejam diabticos, mas cerca de metade dessa populao desconhece ser portador da doena. Este trabalho, caracterizado por um estudo transversal, tem como objetivo verificar a prevalncia de DM entre os profissionais de enfermagem do Hospital So Paulo, bem como relacionar os principais fatores de risco e as dificuldades relacionadas ao controle da doena. A coleta de dados foi realizada por meio de um questionrio, aplicado a 1287 funcionrios, que correspondem a 82% do nmero de profissionais de enfermagem do hospital. Obtivemos como resultado, a prevalncia de 2,6% de DM e foram reconhecidos como principais fatores de risco: idade, obesidade e histrico familiar. Detectamos que o planto noturno concentra mais da metade dos diabticos. A maioria dos funcionrios diabticos faz uso de medicao e est satisfeita com o tratamento que recebe, porm os do tipo 2 no seguem corretamente a dieta, apesar de orientados. Aprovao no Comit de tica em Pesquisa No.: 1517/07 Participantes: Ana Rita de Cssia Bettencourt, Cssia Andrade Martins

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Qual o conhecimento que as mulheres que freqentam o ambulatrio de distrbios do sono no climatrio- Unifesp tm sobre higiene do sono
Ribeiro, F.M.N.; Vigeta, S.M.G.; Campos, H.H. Fernanda Miranda Novaes Ribeiro - UNIFESP Snia Maria Garcia Vigeta - Enfermagem / Sade Coletiva

Resumo:

Introduo: Pesquisa realizada por Baker et al (2003) constatou que 50% a 75% das mulheres na perimenopausa e ps-menopausa se queixam de insnia para iniciar o sono, apresentam despertares freqentes durante a noite e sonolncia durante o dia (Taylor, 2007). Compreendendo a experincia subjetiva do dormir ser particular e complexa e dada importncia do sono para a manuteno da qualidade de vida, interessou-nos saber o conhecimento que mulheres na perimenopausa e psmenopausa tm sobre a Higiene do Sono, que considerada uma terapia sem a utilizao de medicamentos, isto , apresenta medidas que favorecem a eficincia do sono. A higiene do sono um conjunto de prticas e atitudes dirias que visa diminuir o perodo de latncia para o sono, aumentar o tempo total do sono e melhorar a atividade diria da pessoa, conseqentemente proporcionar uma melhora na qualidade de vida (Means, 2000; Ringdahl, 2004;Reimo, 2006). Objetivo: O principal objetivo deste estudo foi identificar o conhecimento que as mulheres com distrbios do sono que freqentam o ambulatrio de climatrio tm sobre a higiene do sono. Metodologia: A pesquisa fundamentou-se na metodologia de natureza quantitativa, por meio de um estudo transversal exploratrio. O projeto de pesquisa foi aprovado pelo Comit de tica em Pesquisa da Universidade Federal de So Paulo/ Hospital So Paulo, sob o n 01063/07. Os sujeitos do estudo foram 74mulheres, entre 45 a 60 anos de idade, na sala de espera para consulta com ginecologista com especializao em sono do Ambulatrio de Climatrio da Disciplina de Endocrinologia Ginecolgica do Departamento de Ginecologia da Universidade Federal de So Paulo (UNIFESP), no perodo de agosto a outubro de 2007. Era explicado o objetivo do estudo e as mulheres que concordavam em participar assinavam o Termo de Consentimento Livre e Esclarecido. Posteriormente, as mulheres, muitas com o auxlio das pesquisadoras, preenchiam o questionrio com os itens sobre a higiene do sono, em que era solicitado responder sim ou no se reconhecia aquele fator como relevante para manuteno e conciliao do sono. E em seguida era realizada uma palestra educativa sobre higiene do sono. Resultados: Na grande maioria as mulheres estavam na faixa etria dos 50 a 60 anos (59,4%); E 58,1% das participantes do estudo tinham sido diagnosticada com distrbio do sono e j estavam fazendo tratamento sobre o mesmo.Ao serem perguntadas se conheciam o termo higiene do sono, 79,7% no sabiam sobre o que esse assunto abordava. A maioria (65,8%) das participantes questionadas, que conheciam ou no a higiene do sono, respondiam corretamente as perguntas em relao aos cuidados e hbitos de higiene do sono. Concluso: Este estudo mostrou que apesar dos conhecimentos que as mulheres tm sobre os itens de higiene do sono, no os coloca em prtica, no os identifica como sendo parte de hbitos saudveis para um bom sono. Promover as medidas de higiene do sono fundamental para que as mulheres possam modificar ou favorecer comportamentos e atitudes que proporcionam uma melhor qualidade do sono.Cabe aos profissionais de sade, entre eles o(a) enfermeiro(a), ao assistir as mulheres na fase da transio menopusica e ps-menopausa com dificuldades de conciliar o sono, estar atento ao sintoma declarado incentivando hbitos saudveis para o sono. Aprovao no Comit de tica em Pesquisa No.: 01063/07 Participantes: Fernanda Miranda Novaes Ribeiro, Snia Maria Garcia Vigeta, Helena Hachul de Campos

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Sade Reprodutiva da mulher indgena: encontrando problemas e propondo solues


Oliveira, L.S.S.; Arajo, A.C.; Pereira, E.R.; Ito, L.C. Aline Correa De Araujo - UNIFESP Lavinia Santos Souza Oliveira - Medicina Preventiva / Medicina Preventiva

Resumo:

A sade reprodutiva da mulher indgena um tema pouco conhecido e explorado. Os dados disponveis evidenciam um quadro marcado por alta prevalncia de doenas sexualmente transmissveis como o HPV, cncer do colo uterino, alteraes ginecolgicas e queixas de etiologias variadas como dor em baixo ventre, dispareunia e leucorria. A desassistncia contribui para elevar as taxas de morbi-mortalidade materna e perinatal. A assistncia especializada de difcil acesso e baixa resolutividade. Identifica-se nestas populaes padres elevados de fecundidade com intervalos interpartais curtos e incio de vida reprodutiva por volta dos 13 anos de idade, estendendo-se at os 45 anos. A precria assistncia sade da mulher indgena envolve questes tais como: culturais, territoriais, alta rotatividade e despreparo das equipes de sade, estrutura inadequada dos servios de sade prestados nas aldeias, problemas de articulao entre a ateno bsica e referncias, dificuldade no acesso das mulheres aos exames preventivos. Fatores de risco como presena do HPV, multiplicidade de parceiros, incio precoce da atividade sexual, multiparidade e elevados ndices de DST esto presentes de uma maneira geral no perfil sade-doena dos indgenas. A vulnerabilidade para as DSTs relaciona-se a maneira como vivenciam a sexualidade, maior intensificao das relaes de contato com no ndios, aumento da freqncia dos indgenas nas reas urbanas, consumo excessivo de lcool, explorao de recursos naturais das terras indgenas e o difcil acesso s informaes de preveno e ateno sade. Informaes sobre morbi-mortalidade por cncer crvico-uterino nas mulheres indgenas do Brasil so escassas. Poucos estudos realizados com alguns povos apontam para a necessidade de aes de preveno. Um estudo realizado no Estado do Par, verificou alta incidncia de neoplasia intra-epitelial (6,6%), sendo maior nas mulheres abaixo de 35 anos de idade. Foi elevado (38,8%) o percentual desta neoplasia nos exames anatomopatolgicos de bipsias dirigidas por achados colposcpicos anormais (Souza e Santos, 2001). Nos anos de 1993 e 2000 foram estudadas nas mulheres Parakan o HPV e constatou a presena de dois sub-tipos de alto risco e o aumento da infeco de 14% para 42% nos respectivos anos (Brito, 2004).No Parque Indgena do Xingu-MT, a problemtica da sade da mulher est sendo estudada desde 1997 (Taborda e cols), evidenciando alteraes colpocitolgicas significativas e mudanas no padro scio-demogrfico e de fecundidade em povos como os Kaiabi (Pagliaro, 2005). Kamaiur (Pagliaro e Junqueira, 2005 e 2007) e Suy (Pagliaro, Carvalho, Mendona, Baruzzi, 2008). Em coleta realizada em 97,6% das mulheres sexualmente ativas foi evidenciado 12,6% de alteraes colpocitolgicas. Destas, 4 % apresentavam leses citolgicas de baixo grau (NIC I, HPV), 1,5 % leses de alto grau (NIC II, NIC III), 4 % ASCUS e AGUS, 2,7 % de ASC-H e 0,4 % de carcinoma invasor (Pereira, Speck, 2006). Este projeto est sendo desenvolvido por alunos de graduao de enfermagem da Universidade Federal de So Paulo indgena em parceria com servios do Complexo HSP/Unifesp e a equipe de enfermagem da Casa de Sade do ndio de So Paulo-CASAI-SP. Enfoca a problemtica especfica do cncer do colo uterino, dada a magnitude do problema. Os aspectos norteadores das atividades foram: dificuldades de realizao e obteno de resultados do exame preventivo do cncer crvico-uterino nas reas indgenas, pouco conhecimento das mulheres sobre os cuidados e preveno da doena e a oportunidade da coleta do exame e do trabalho educativo possvel de ser realizada na CASAI-SP, principal local de hospedagem de pacientes e acompanhantes indgenas que esto em tratamento de sade na capital paulista. Compreendeu-se que esta abordagem pode ajudar no entendimento da preveno do cncer do colo do tero, indicar outros aspectos relevantes sobre sade da mulher indgena e propiciar espao de discusso entre as mulheres e os profissionais de sade. 2. Metodologia Buscou-se contemplar a dimenso cientfica e assistencial do tema, mediante situaes de aprendizado assistencial e iniciao pesquisa. O primeiro momento foi de descrio da realidade por pesquisa bibliogrfica, leitura de textos e discusses. Em outubro de 2007 foram iniciadas atividades de coleta do exame preventivo do cncer do colo uterino, aes educativas e acompanhamento de pacientes, sendo que este ltimo foi orientado por um instrumento de coleta de informaes nos moldes de uma consulta de enfermagem. Em 2008, alm do trabalho assistencial e educativo pretende-se sistematizar dados sobre cncer do colo uterino na populao estudada. 3. Demonstrativo de atividades Reunies de planejamento e avaliao com orientadores : 06; Atividades assistenciais e educativas no Ambulatrio do ndio 07 Visitas a CASAI para reunies educativas e coleta de exames: 04 Acompanhamento de pacientes no Centro Alfa : 01 Entrevistas com pacientes 14 Coleta de exames colpocitolgicos 12 Etnias atendidas: Guarani (SP), Surui (RO), Sui (MT), Xicrin (TO) 4. Aspectos qualitativos e impresses das participantes A possibilidade de conhecer e vivenciar na prtica a dimenso antropolgica da doena, perceber as especificidades culturais e as dificuldades de entendimento neste contexto, foram os principais pontos apontados como aprendizado e desafio pelas alunas. Um lado pouco explorado foi o de leitura e discusso de textos de antropologia que apoiaria essa dimenso e que poderia facilitar o entendimento do universo indgena, seus sistemas de cura, doena e itinerrios teraputicos. A pouca experincia foi apontada como fator limitante, principalmente por se tratar de populao indgena, sendo de vrias etnias, costumes, comportamentos diferentes e que encontram-se fora de sua realidade e desejosos de retornar s suas aldeias de origem. Outro aspecto restritivo foi o pouco tempo para os encontros e discusses e disponibilidade de horrios para as atividades na CASAI. A vontade de aprender e a novidade de trabalhar com pacientes indgenas, inclusive no aspecto da coleta de colpocitologia onctica foram os principais fatores motivadores. 5. Consideraes finais Observou-se que a maioria das mulheres indgenas tem interesse em participar das conversas e realizar o exame ginecolgico. A comunicao dificultada por que muitas delas no falam bem o portugus ou tem vergonha de se expressar e assim apresentam dificuldade de compreender a proposta da conversa e do exame, a despeito da ajuda de tradutores e at de outros pacientes. Algumas possuem mais facilidade de comunicao devido a maior interao com a sociedade envolvente e at discusses acumuladas sobre o tema. A impresso primeira e preocupante a de que poucas mulheres conheciam e j haviam se submetido ao exame ginecolgico e coleta de colpocitologia onctica. Aquelas que haviam realizado no sabiam sua importncia. So desafios o medo e a vergonha das pacientes, dificuldade de comunicao, ansiedade e preocupao em estar longe da famlia. O acolhimento e formao de vnculo com essas pacientes, que ultrapasse o objetivo de resoluo de um problema de sade, mas adentre nas interfaces entre sade, cultura e modo de vida dessas pessoas, passa a ser um exerccio constante de aprendizado com o outro. Neste perodo pudemos acumular mais perguntas do que respostas: quais doenas que preocupam as mulheres que esto na CASAI? Como so os cuidados com o corpo nas diferentes fases da vida? Como visto o exame ginecolgico? Como as partes do corpo so denominadas? Esperamos obter parte das respostas at o trmino do Projeto. Participantes: Lavinia Santos Souza Oliveira, Aline Corra de Arajo, Erica Ribeiro Pereira, Luclia C. Ito

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Enfermagem Ttulo:
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Sendo motivada pelo desafio: a experincia da enfermeira com o uso da ultra-sonografia para puno venosa perifrica em crianas.
Lima, M.C.K.A.; Pettengill, M.A.M. Mariana Cristina Kabakura do Amaral Lima - UNIFESP Myriam Aparecida Mandetta Pettengill - Enfermagem / Enfermagem Peditrica

Resumo:

Introduo: os enfermeiros desenvolvem muitas atividades em ambientes altamente tecnolgicos e vivenciam situaes que devem ser fundamentadas e direcionadas pelo conhecimento cientfico, na busca de resultados cada vez mais seguros, benficos e eficazes para a recuperao da sade ou alvio do sofrimento do paciente. Diariamente eles so atrados por inovaes tecnolgicas e se preocupam em implement-las em sua prtica, porm ainda so poucos os estudos que analisam como ocorre esse movimento, enfocando as facilidades e dificuldades que eles enfrentam e a mudana da sua maneira de trabalhar. Objetivo: compreender o significado da aplicao da ultra-sonografia (US), como uma inovao tecnolgica para guiar a puno venosa perifrica em crianas hospitalizadas, na perspectiva da enfermeira pediatra. Mtodo: pesquisa descritiva de abordagem qualitativa. O estudo foi realizado em uma Unidade de Cirurgia Peditrica de um hospital universitrio, na cidade de So Paulo. Foram realizadas entrevistas semi-estruturadas com oito enfermeiras pediatras, aps aprovao pelo Comit de tica em Pesquisa da Instituio (1549/07). Resultados: a anlise qualitativa de contedo realizada nos permitiu compreender que a enfermeira se sente desafiada na busca por inovaes que permitam aperfeioar a tcnica de puno venosa perifrica, percebida pela criana e famlia como um momento de grande estresse. Motivada por esse desafio ela se mobiliza para incorporar o novo em seu cotidiano, no caso a US. Porm, se percebe despreparada para utilizar essa inovao tecnolgica, o que a faz temer causar danos criana e exp-la a maior grau de sofrimento. Seu desafio superar esse despreparo, buscando a reestruturao e o desenvolvimento de estratgias para se ajustar ao novo. Durante a adaptao nesse processo encontra muitas barreiras que a desestimulam, porm concomitantemente tem a oportunidade de vivenciar experincias positivas, que a motivam ainda mais. Apesar dessa ambigidade, aos poucos, conforme adquire conhecimento, recebe estmulo do meio acadmico e melhora a sua destreza, ela se percebe mais segura e valorizada pelos profissionais, tendo assim uma modificao no seu comportamento. Todos esses elementos favorecem a incorporao da tecnologia em sua prtica, estimulando-a, inclusive, a querer compartilhar o conhecimento adquirido com outros profissionais. Concluso: Nesse estudo, o desafio para promover uma prtica segura e benfica criana e famlia, minimizando o estresse e a ansiedade causados pela puno venosa perifrica relevante na motivao da enfermeira para buscar a aplicao de inovao tecnolgica em sua pratica. Para que consiga implementar preciso enfrentar o despreparo e modificar crenas e valores pessoais que favoream sua adaptao. O envolvimento dos profissionais em grupos de estudos e pesquisa revelou que o ambiente uma fonte de estmulos para o desenvolvimento e a aplicao de inovaes. Acreditamos que necessrio investir em estudos que ajudem a ampliar a compreenso desse processo, de maneira a estimular o desenvolvimento, a aplicao e a utilizao das mudanas no cotidiano profissional. Aprovao no Comit de tica em Pesquisa No.: 1549/07 Participantes: Mariana Cristina Kabakura do Amaral Lima, Myriam Aparecida Mandetta Pettengill

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Enfermagem Ttulo:
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Vigilncia epidemiolgica de HIV e Sfilis em um hospital escola do Municpio de So Paulo.


Kunitake, N.; Vianna, L.A.C. Natalia Kunitake - UNIFESP Lucila Amaral Carneiro Vianna - Enfermagem / Enfermagem em Sude Pblica e Administrao Aplicada a Enfermagem

Resumo:

Introduo: As doenas de transmisso vertical so aquelas transmitidas de me para filho durante a gestao, parto ou ps-parto. Objetivos: Conhecer a prevalncia de HIV e variao sorolgica para sfilis e a presteza da Comisso de Epidemiologia na notificao destas crianas ao Sistema Nacional de Agravos de Notificao. Mtodo: estudo de corte transversal desenvolvido em um hospital universitrio entre mulheres internadas no centro obsttrico e seus recm-nascidos no perodo de agosto de 2006 a agosto de 2007. Resultados: a prevalncia de HIV e de variao sorolgica para sfilis foi respectivamente de 2,54% e 1,12%. A notificao destes agravos foi de 79,40% para HIV e apenas 20,00% para variao sorolgica para sfilis. Concluso: A notificao por parte dos profissionais de sade parece mais bem estabelecida para HIV do que para sfilis. A prevalncia de HIV mostrou-se elevada provavelmente em decorrncia do hospital ser referncia para tal agravo enquanto a de soro-reagente para sfilis foi subnotificada, sugerindo que esforos devem ser canalizados para uma maior efetividade do servio. Participantes: Natalia Kunitake, Lucila Amaral Carneiro Vianna

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Exatas

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Avaliao de um sistema de telecardiologia baseado no ECG de sndrome coronariana aguda


Baba, M.M.; Lopes, P.R.L.; Carvalho, A.C.C. Marcelo Massakazu Baba - UNIFESP Antnio Carlos de Camargo Carvalho - Medicina / Cardiologia

Resumo:

INTRODUO: Telemedicina compreende uma ampla variedade de servios ligados aos cuidados da sade, e o telediagnstico em cardiologia uma de suas aplicaes. Existem na literatura vrias descries e experincias do uso da telecardiologia. Uma das formas de aplicao da telemedicina em cardiologia o uso da eletrocardiografia (ECG) distncia. Onde o paciente submetido ao exame em um determinado local e as informaes do exame so transmitidas para outro local, onde se encontra o especialista que ir gerar um laudo. OBJETIVO: Realizar uma avaliao quantitativa e qualitativa de um sistema de telecardiologia baseado no ECG de sndrome coronariana aguda. MTODO: Anlise das experincias de outros servios de telecardiologia, avaliao quantitativa e qualitativa do uso atual de um sistema de telecardiologia baseado no ECG de sndrome coronariana aguda, anlise dos eventuais problemas que o sistema pode gerar e propor solues para os mesmos. RESULTADOS: Aps a realizao de uma reviso da literatura, foi possvel observar que a telecardiologia est sendo empregada em diversos servios pelo mundo. No entanto, poucos relatos de uma avaliao e descrio do mtodo empregado foram encontrados. Baseado nas experincias descritas e dentro do contexto do complexo hospitalar do Hospital So Paulo, foi implantado um sistema de telecardiologia baseado no ECG na Unidade de Terapia Intensiva da Disciplina de Cardiologia. Este sistema foi utilizado em paralelo, servindo de suporte a um protocolo de pronturio eletrnico de pacientes com sndrome coronariana aguda da Unidade de Terapia Intensiva. Foi realizada uma observao do servio que se estendeu de agosto de 2007 a abril de 2008. Durante este perodo foram gerados e transmitidos 237 traados de ECG. O servio sofreu, durante esse perodo, trs modificaes que visaram aperfeioar a ferramenta. Inicialmente, o servio iniciou e seguiu por dois meses, com a gerao e o armazenamento dos traados em um nico computador. Nos dois meses seguintes, a gerao e o armazenamento dos traados foram realizados em computadores diferentes, no entanto, com os dados restritos a esses dois computadores. A partir do quinto ms do servio, os dados passaram a ser enviados a um computador remoto, incorporado a ficha eletrnica do paciente e disponvel na Internet, protegidos por senha. Foram observadas as seguintes dificuldades: Problemas com o equipamento de ECG digital; Falta de comunicao entre os computadores; Dificuldade de adaptao por parte dos profissionais a nova ferramenta; Dependncia do servio a profissionais treinados. Devido o servio ter sido incorporado a um protocolo ainda estar em andamento, no foi possvel obter dados sobre o impacto real desta nova ferramenta no servio. Participantes: Marcelo Massakazu Baba, Paulo Roberto de Lima Lopes, Antnio Carlos de Camargo Carvalho

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Exatas Ttulo:
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Avaliao qumica e termoanaltica de sementes de caf em diferentes perodos de estocagem


Mercuri, L.P.; Moscardini F., E. Elder Moscardini Filho - UNIFESP Lucildes Pita Mercuri - Cincias Exatas e da Terra /

Resumo:

Introduo O caf, gro de grande importncia no mbito comercial (exportaes) brasileiro (neste ano, destaca-se que 27 milhes de sacas de 60 Kg devem ser exportadas) uma das bebidas mais antigas e apreciadas do mundo. Deste montante, a espcie Coffea arabica responsvel por 83,4%1. Devido importncia comercial do gro, e principalmente, a representatividade desta espcie em particular na produo brasileira decidiu-se caracterizar por anlise trmica e por processos qumicos as sementes de caf verde estocados por um perodo, das safras de 2004 at 2007, avaliando o perfil trmico e a composio qumica desses materiais coletados na Fazenda Limoeiro situada no municpio de Ribeiro Corrente, interior de So Paulo. Material e Mtodos Para a realizao deste trabalho, utilizou-se sementes de caf verde armazenadas entre os perodos de 2004 at 2007. Tambm utilizou-se um padro de cafena anidra (da Sigma) para comparao. As curvas TG/DTG foram obtidas utilizando uma termobalana TGA-51, marca Shimadzu, submetidas em atmosfera dinmica de ar, com vazo de 50 mL/min e razo de aquecimento 10C/min. Variou-se a temperatura da temperatura ambiente at 900C. As curvas DSC foram obtidas em uma clula DSC-50, marca Shimadzu, cujas amostras foram submetidas atmosfera dinmica de nitrognio [N2(g)], com vazo de 100 mL/min e razo de aquecimento 10C/min. Variou-se a temperatura ambiente at 500C. A anlise elementar para um teste preliminar composicional das amostras foi feita na Central Analtica do Instituto de Qumica da USP. Resultados e Discusso Para efeito comparativo, foi avaliado o padro de cafena anidra que evidenciou um nico evento de perda de massa entre 200 e 350C, correspondente ao seu processo de decomposio trmica. As amostras de caf apresentaram eventos consecutivos de perca de massa, entre 25 e 900C. temperatura final pode-se verificar uma pequena quantidade de resduo de colorao branca, evidenciando a presena de material inorgnico que variou de 3,7 a 4,0% da massa inicial das amostras conforme o ano da safra. A variao de massa observada em cada evento foi calculada a partir das curvas DTG. Para as amostras da safra de 2004, a variao de massa obtida foi de 1,1 a 35%. Contudo, para a safra de 2005 as amostras apresentaram variao de massa entre 0,5 a 32,5%. Entretanto, as amostras da safra de 2006 evidenciaram uma variao de massa entre 0,3 a 33,7%. J as amostras da safra de 2007 mostraram uma variao de massa entre 2,4 e 34,4%. O padro de cafena anidra apresentou no DSC trs eventos endotrmicos, sendo que o segundo representa a fuso do material (Tpico=237C). Este dado foi confirmado pela literatura2. As amostras de gros de caf verde mostraram eventos exotrmicos consecutivos. Os principais aparecem a 353C (Tpico=387C - safra 04), 351C (Tpico=378C - safra 05), 350C (Tpico=381C - safra 06) e 357C (Tpico=393C - safra 07) e correspondem ao processo de decomposio trmica dos materiais. Os teores percentuais de carbono, hidrognio e nitrognio encontrados nas amostras em estudo foram os seguintes: (a) Safra 04: semente (%C= 45,87; %H= 6,54; %N= 2,32) e resduo (%C= 4,13; %H= 2,85; %N= 0,31). (b) Safra 05: semente (%C= 45,23; %H= 6,86; %N= 2,34) e resduo (%C= 3,93; %H= 2,38; %N= 0,32). Safra 06: semente (%C= 45,49; %H= 7,03; %N= 2,35) e resduo (%C= 4,17; %H= 2,76; %N= 0,31). (d) Safra 07: semente (%C= 45,16; %H= 6,94; %N= 2,22) e resduo (%C= 3,99; %H= 2,21; %N= 0,24). (e) Cafena Sigma: (%C= 49,75; %H= 5,01; %N= 28,66). Com esses resultados pode-se inferir a presena da cafena nas sementes e a diminuio da sua concentrao aps a torrefao, dado observado no material residual. Concluses Pela anlise das curvas TG/DTG possvel sugerir o incio da decomposio trmica da cafena nas amostras de caf (pela sobreposio das curvas das amostras e da cafena), e assim, sugerir a temperatura de torrefao ideal para a obteno do caf com melhor sabor, dentro do controle de qualidade do produto. As curvas DSC mostraram apenas eventos exotrmicos a partir e 200C o que indica a decomposio da cafena concomitante a outras espcies. A anlise elementar mostra a presena de uma pequena quantidade de compostos orgnicos com base nos resultados do teor de carbono. Isso vem de encontro aos dados obtidos por TG. Participantes: Lucildes Pita Mercuri, Elder Moscardini Filho

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CATALISADORES METLICOS SUPORTADOS PARA REAES DE DECOMPOSIO CATALTICA VISANDO OBTENO DE NANOTUBOS DE CARBONO.
Santos, K.S.; Noda, L.K. Kamila de Sousa Santos - UNIFESP Lcia Kiyomi Noda - Qumica / Qumica

Resumo:

Os nanotubos de carbono tm se mostrado como uma das formas de carbono organizado mais interessantes e promissoras do ponto de vista de aplicaes tecnolgicas, surgidas nos ltimos tempos, devido s suas excepcionais propriedades eltricas e mecnicas. A sntese dos nanotubos uma rea estratgica, pois a produo de boa qualidade dessas estruturas dominada por poucos grupos no mundo. Um dos mtodos mais promissores consiste na decomposio trmica de reagentes que contm carbono (metano e acetileno, por exemplo), usando um catalisador metlico (nquel, ferro, entre outros). Prepara-se geralmente o catalisador suportado, com a finalidade de melhorar as propriedades do catalisador. Nesse projeto sero preparados catalisadores a partir de vrias rotas de sntese. Iniciamos com a rota que utiliza um polmero orgnico como "template", sendo que nesse caso usou-se um biopolmero, a quitosana. J foi reportado que Al2O3 dopada com Ni preparado por esse mtodo possui elevada rea superficial e partculas metlicas altamente dispersas. Al2O3 dopado com Ni e Co foram preparados por esse mtodo e caracterizados por espectroscopia Raman e difrao de raios-X. A espectroscopia Raman foi particularmente til para se caracterizar as formas presentes nas amostras de Al2O3 dopado com Co, calcinadas a diferentes temperaturas. Verificou-se a presena de Co3O4 nas amostras calcinadas, alm do Al2O3. J nas amostras de Al2O3 dopado com Ni, ainda no se chegou a uma concluso sobre quais espcies estariam presentes, alm do Al2O3. Estes dados sero utilizados como base para a determinao do catalisador mais eficiente nas reaes de decomposio cataltica de metano e/ou etanol a serem realizadas para a obteno de nanotubos de carbono. Apoio: PIBIC/CNPq, Edital Universal/CNPq Participantes: Kamila de Sousa Santos, Lcia Kyiomi Noda

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Corroso Qumica do Cobre Sob Enfoque Ambiental


Rettori, D.; Noda, L.K.; Gonalves, N.; Vautier-Giongo, C; Moreira, C.J. Cau Jannuzzi Moreira - UNIFESP Carolina Vautier Teixeira Giogo - Cincias Exatas e da Terra / Qumica

Resumo:

Ptina uma fina camada de corroso formada quando o cobre e suas ligas so expostos atmosfera. As ptinas assumem coloraes que podem variar do marrom escuro ao verde claro, a depender da composio atmosfrica. Este tabalho pretende avaliar os efeitos de diferentes meios eletrolticos (NaCl 1 M, pH = 5,9;HCl, pH = 2,2; H3COOH, pH = 2,2; H3COOH, pH = 2,2, contendo 0,1 M NaCl; gua da chuva de Diadema, pH = 5,6; controle: gua destilada) na formao acelerada de ptinas de cobre, a partir de diferentes estratgias experimentais de exposio de lminas de cobre aos meios corrosivos (exposio ao vapor e nvoa produzidos pelas solues de eletrlitos e imerso total nas solues de eletrlitos). A corroso das lminas observado visualmente e com o auxlio de um estereomicroscpio. As taxas de corroso so determinadas por gravimetria. A caracterizao da composio das ptinas ser feita por Espectroscopia Raman. O processo corrosivo das lminas por vapor, nvoa ou imerso total mais pronunciado nas solues cidas (HCl, H3COOH, e H3COOH contendo NaCl), sendo comparativamente mais acentuado e acelerado em presena de H3COOH contendo NaCl, o que pode ser explicado pela maior concentrao inica no referido meio eletroltico, A ao da gua de chuva de Diadema na corroso do cobre comparvel ao efeito produzido pela gua destilada. A ptina formada pelos meios contendo H3COOH verde escura e distribui-se homogneamente sobre toda a superfcie da lmina de cobre, enquanto que a formada por HCl verde clara e apresenta-se distribuda sob a forma de pequenos agregados. As lminas expostas gua da chuva e ao NaCl apresentam colorao marrom escura. Apoio financeiro: CNPq Aprovao no Comit de tica em Pesquisa No.: 0567/08 Participantes: Daniel Rettori, Lcia Kyiomi Noda, , Carolina Vautier Teixeira Giogo, Cau Jannuzzi Moreira

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DESENVOLVIMENTO DE METODOLOGIA PARA DETERMINAO DE 17--ETINILESTRADIOL POR LC/MS


Teixeira, S.C.; Moraes, M.L.L. Suemar Teixeira Cavalcanti - UNIFESP Maria de Lourdes Leite de Moraes - Cincias Exatas e da Terra /

Resumo:

O 17--etinilestradiol um estrognio sinttico utilizado em terapias de reposio e mtodos contraceptivos que tem despertado preocupao, tanto pela potncia como pela quantidade contnua introduzida no meio ambiente. A presena de hormnios (em concentraes na faixa de mg/L e ng/L) tm sido ultimamente relatadas em esgoto domstico, em efluentes de estaes de tratamento de esgoto (ETE) e em guas superficiais e de subsolo. Entre as tcnicas usadas em anlises ambientais, a cromatografia lquida acoplada ao detector de espectrometria de massas (LC/MS) uma tcnica analtica que prev resultados quantitativos com limites de deteco nvel de traos. A deteco de hormnios, em especial o 17--etinilestradiol por MS complicada devido baixa taxa de ionizao dessa molcula. Normalmente necessrio derivatizar a amostra antes da anlise. Neste trabalho o objetivo foi desenvolver uma metodologia simples, rpida e sensvel para a determinao de 17--etinilestradiol usando LC/MS, que possa ser usada posteriormente para anlises deste composto em amostras ambientais. Foi utilizado um Sistema LC/MS-MS marca Varian, 1200L Quadrupolo, com fonte de eletrospray. Inicialmente foi otimizada as condies do MS. Foi realizada a infuso de 0,40 L/ min da amostra derivatizada com cloreto de dansila no modo positivo. As condies de anlise no LC foram: fase mvel: 95% de gua (0,1% de cido frmico) e 5% de acetonitrila. Coluna C18 de 5 cm. Os resultados no MS indicaram que foi obtida uma taxa de 14% de ionizao que corresponde a 404mV. Essa taxa foi observada para o pico 531,3 que representa o on molecular da 1 ionizao da amostra derivatizada (mol = 530). O on molecular da 2 ionizao corresponde ao pico 171. Foram testados a infuso da amostra em vrios pHs a fim de melhorar a porcentagem de ionizao da molcula. Como a derivatizao realizada em meio de bicarbonato de amnio, testou-se a eliminao deste sal antes da infuso. A infuso em pH 3,0 foi a que apresentou melhor resultado, devido ao valor do pka da molcula que em torno de 3,4. Participantes: Suemar Teixeira Cavalcanti, Maria de Lourdes L. de Moraes

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Estudo da influncia do grupo fluoreno nas propriedades de homopolmeros condutores


Philadelphi, L.O.P.; Santos, T.C.F. Thays Cristina Fernandes dos Santos - UNIFESP Laura Oliveira Pres Philadelphi - Cincias Exatas e da Terra / Qumica das Transformaes

Resumo:

Polmeros so materiais que apresentam muitas subunidades (monmeros) repetidas, onde a unio dessas, formam macromolculas, atravs de reaes de polimerizao. A este material, anteriormente conhecido por sua caracterstica isolante, foram introduzidas cargas condutoras, formando uma nova classe de polmeros: polmeros condutores. Podem tambm apresentar caractersticas semelhante as dos metais, e sua condutividade se deve presena de ligaes duplas intercaladas com ligaes simples (conjugao), que permite a mobilidade dos eltrons das duplas ligaes. Neste trabalho, foi realizada a sntese do poli(2,7-9,9dioctilfluoreno-1,4-fenileno) atravs de reao de Suzuki, que geralmente oferece um bom rendimento. Para que esta reao ocorresse, foi necessrio a presena de um material organoborado e outro halogenado, juntamente com um catalisador de paldio. No caso, foram realizadas duas snteses orgnicas com 1,4fenilenobisbornico e 9,9-dioctil,2,7-dibromofluoreno, sendo que na ultima sntese foi adicionado cloreto benzalcnico, com o intuito de melhorar o rendimento da reao. A massa esperada (100% de rendimento) era de 2,185g, porm os rendimentos alcanados foram de 68,9% para a sntese 1 e 63,9% para a sntese 2. Para a verificao da eficincia das snteses, foram realizadas caracterizaes desses materiais, atravs de anlise em Infravermelho, ultravioleta, fluorescncia e RMN de prton e carbono. A anlise de infravermelho, indicou semelhana entre os materiais das snteses 1 e 2, sendo diferenciados pelo aparecimento de uma banda de gua na sntese 1(em 3450 cm-1); na anlise em ultravioleta foi possvel a observao de trs picos, sendo estes 287, 303,5 e 315nm para a sntese 1 e 288, 303 e 315 para a sntese 2; j na anlise de fluorescncia os materiais foram excitados em 287, 303, 314 e 330nm para a sntese 1 e 287,1, 303, 314 e 330nm para a sntese 2 formando assim os picos em 360, 376nm e 360 e 378nm, respectivamente. Todos os grficos apresentaram uma grande semelhana entre as snteses analisadas, assim como no foi verificada a presena do grupo bornico, confirmando assim a formao do polmero. Aprovao no Comit de tica em Pesquisa No.: 0374/08 Participantes: Laura Oliveira Pres Philadelphi, Thays Cristina Fernandes dos Santos

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Estudo de equaes de annealing em traos de fisso em minerais


Oliveira, S.G; Avila, E.C. Erick Cortello Avila - UNIFESP Sandro Guedes de Oliveira - Cincias Exatas e da Terra / Engenharia e Cinicas Fsicas e Matemticas

Resumo:

O estudo da termocronologia de traos de fisso infere a histria trmica que um mineral foi submetido, atravs do estudo das trilhas danificadas geradas pela fisso natural do U-238. Aps o tratamento qumico, estas trilhas podem ser observadas ao microscpio ptico e so denominadas traos. Quando o trao submetido ao tratamento trmico, ocorre uma diminuio do seu comprimento. Este fenmeno denominado "annealing". O objetivo geral deste trabalho foi estudar a cintica de "annealing" atravs de equaes empricas e semi-empricas j propostas. Para isso, usaram-se conjuntos de dados, laboratoriais e geolgicos (KTB), que so usados para a calibrao dos parmetros das equaes. Os dados geolgicos foram includos porque o maior problema obter previses dessas temperaturas em tempos geolgicos (5-500 Ma), pois as equaes so calibradas com dados de tempos laboratoriais (1-10000 horas). Os ajustes foram feitos usando o software Origin 7.5, que ajusta os parmetros das equaes com os conjuntos de dados. Os resultados foram avaliados atravs da comparao de ndices trmicos calculados com as equaes, usando o Origin 7.5, com evidncias de campo. As equaes calibradas podem ser usadas para o estudo de amostras minerais cujas histrias trmicas so desconhecidas. Participantes: Sandro Guedes de Oliveira, Erick Cortello Avila

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ESTUDOS METODOLGICOS DE REAES ALDLICAS ENVOLVENDO SUBSTRATOS QUIRAIS E AQUIRAIS


Aguillar, A.M.; Kolling, F.A. Fernanda Almeida Kolling - UNIFESP Andrea Maria Aguillar - Cincias Exatas e da Terra /

Resumo:

Introduo e objetivos: A reao aldlica uma metodologia muito importante para a construo de ligaes C-C que pode ser aplicada na sntese total de produtos naturais e sintticos com elevada complexidade estrutural e com atividade biolgica destacada. O mecanismo reacional envolve a formao de um enolato, a qual se d a partir da coordenao do metal do cido de Lewis com a carbonila de cetonas ou aldedos, seguido pela retirada de um hidrognio a-carbonila pela base utilizada. O aldedo depois adicionado ao meio reacional e atacado pelo enolato formado, formando a ligao C-C e tambm um carbono estereognico. O objetivo deste projeto estudar os elementos que controlam a diastereosseletividade de reaes aldlicas envolvendo enolatos de titnio, que sero preparados a partir de metilcetonas e submetidos s reaes com aldedos quirais e aquirais. Resultados: A primeira parte deste projeto envolveu a preparao da metil-cetona ((3S,4S)-4-(4-metoxibenzilxi)-3,5-dimetilexan-2-ona) que ser utilizada como substrato nas reaes aldlicas, e que apresenta uma relao anti entre os dois carbonos estereognicos. Inicialmente, foi feita a reao de acilao entre a (R)-4benziloxazolidin-2-ona e o cloreto de propionila, que forneceu a ((R)-4-benzil-3-propioniloxazolidin-2-ona) em 99% de rendimento. A oxazolidinona acilada um indutor quiral, isto , a estereoqumica da reao aldlica, que foi realizada na etapa seguinte, foi gerada de acordo com a configurao do centro quiral contido nesta molcula. Em seguida, foi realizada a reao aldlica entre a oxazolidinona acilada e metacrolena obtendo-se o aduto de aldol desejado (R)-4-benzil-3-((2S,3R)-2,4dimetil-3-(trimetilsililxi)pent-4-enoil)oxazolidin-2-ona em apenas 32% de rendimento Uma possvel explicao para este baixo valor de rendimento que a reao no tenha ficado tempo suficiente para transformar todo o material de partida (que foi recuperado em 50%). O aduto de aldol obtido foi submetido a uma reao de desproteo com cido trifluoractico para retirada do grupo protetor (trimetilsilila). O produto desprotegido foi hidrogenado utilizando-se atmosfera de hidrognio e catalisador de Pd/C fornecendo o ((R)-4-benzil-3-((2S,3S)-3-hidroxi-2,4-dimetilpentanoil)oxazolidin-2-ona) em 59% de rendimento. Observou-se a formao de subprodutos no identificados, o que justifica um rendimento moderado. O produto hidrogenado foi ento protegido com o grupo protetor de PMB (p-metoxibenzila) obtendo-se o (R)-4-benzil-3-((2S,3S)-3-(4-metoxibenzilxi)-2,4-dimetilpentanoil) oxazolidin-2-ona com um rendimento reacional de apenas 30%, e recuperao de 60% do material de partida. Neste caso, o baixo rendimento reacional foi atribudo ao uso de um cido muito fraco para catalisar a reao (p-toluenossulfonato de piridnio). Com base nos baixos rendimentos obtidos foi proposta uma nova rota sinttica para a preparao desta metil-cetona na sua forma racmica, cuja preparao mais simples. A primeira etapa envolveu uma reao aldlica entre o acetato de etila e o isobutiraldedo utilzando o LDA (diisopropilamideto de ltio) como base. Nesta reao foi obtido o 3-hidrxi-4-metil-pentanoato de etila em 70% de rendimento. A etapa seguinte envolve a alquilao do carbono na posio-a utilizando MeI. A otimizao das condies reacionais para a realizao desta reao est em andamento. Concluses e perspectivas: Os rendimentos reacionais obtidos na primeira proposta para a sntese da metil-cetona quiral com relao estereoqumica anti foram muito baixos, e por isso, foi necessria a elaborao de uma nova rota sinttica para a sntese da mesma metil-cetona na forma racmica, cuja preparao mais simples. Essas reaes esto sendo realizadas, e espera-se que os produtos sejam obtidos em rendimentos mais elevados. Aps a preparao da metil-cetona desejada, sero realizadas as reaes aldlicas, objetivo do presente projeto, com cidos de Lewis de titnio utilizando aldedos aquirais e comerciais para avaliar a diastereosseletividade da reao. Aprovao no Comit de tica em Pesquisa No.: Participantes: Andrea Maria Aguillar, Fernanda Almeida Kolling

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Laboratrio Virtual de Fsica


Assuno, M.P.M.; Castro, L. Laira Augusta Freitas Castro - UNIFESP Marlete Pereira Meira de Assuno - Cincias Exatas e da Terra / Engenharia e Cinicas Fsicas e Matemticas

Resumo:

Este trabalho visa a elaborao do projeto piloto do Laboratrio Virtual de Fsica (LVF) para que os estudantes de graduao possam complementar suas aulas prticas e utiliz-lo como uma ferramenta de estudo nas unidades curriculares (UCs) de Fsica I e Fsica II. Outro aspecto importante diz respeito utilizao do LVF junto aos alunos com reprovao nestas UCs. As medidas experimentais foram selecionadas a partir dos relatrios elaborados pelos estudantes das UCs de Fsica I e II de 2007 referente a quatro experimentos: Medidas Fsicas, Mola - Lei de Hooke, Lei de Boyle Mariotte e Fenmenos de Expanso Trmica em Slidos. Para a anlise estatstica dos dados foram empregados programas do sistema Windows. Com os resultados obtidos ser possvel a produo dos textos na linguagem de ensino distncia previsto no projeto. Participantes: Marlete Pereira Meira de Assuno, Laira Augusta Freitas Castro

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Preparao qumica e caracterizao de polianilina em lquidos inicos


Bazito, F.F.C.; Correa, C.M. Cintia Marques Correa - UNIFESP Fernanda Ferraz Camilo Bazito - Cincias Exatas e da Terra /

Resumo:

Lquidos inicos (LI) so sais lquidos a temperatura ambiente constitudos, geralmente, por um ction orgnico volumoso com carga deslocalizada e um nion inorgnico poliatmico. Majoritariamente, esses sais possuem caractersticas nicas, tais como baixa presso de vapor e inflamabilidade, boa estabilidade qumica e trmica, alta capacidade solubilizante, condutividade inica intrnseca, boa organizao estrutural e, alguns deles, excelente estabilidade eletroqumica. Devido a esses fatos, lquidos inicos tornam-se compostos bastante promissores para substituir os solventes orgnicos volteis em vrios processos qumicos, bioqumicos e eletroqumicos. Apesar disso, apenas recentemente, o emprego de lquidos inicos na qumica de polmeros tem despertado interesse na comunidade cientfica. Dentre as diferentes classes de polmeros, o estudo de polmeros condutores em lquidos inicos o que apresenta maior destaque devido abrangncia que o uso desses sais lquidos promoveu para essa rea. Sucintamente, polmeros condutores ou "metais sintticos", so macromolculas que possuem ligaes duplas conjugadas, as quais permitem a criao de um fluxo de eltrons em condies especficas (processo de dopagem). importante ressaltar que a condutividade eltrica de um polmero condutor intrnseco pode ser resultado da transferncia de cargas ao longo de sua prpria cadeia, entre cadeias e, tambm, entre partculas, dessa forma, embora a conjugao ao longo da cadeia seja condio necessria ela no suficiente para uma boa conduo. Assim, o mtodo de sntese de polmeros condutores de extrema importncia, j que a preparao de um polmero com longa conjugao, boa linearidade e boa organizao estrutural das cadeias acarretar na maximizao dos trs processos de transferncia de carga mencionados acima e, portanto na otimizao da condutividade eltrica desses polmeros. Este projeto tem como objetivo a sntese qumica e caracterizao de polianilina, em diferentes lquidos inicos tetrafluoroborato de 1-metil-3-octilimidazlio (LI1) e bis(trifluorometanossulfonil)imideto de 1-metil-3-octilimidazlio (LI2) e condies reacionais (com e sem cido (cido difenilfosfnio)). As motivaes desse trabalho so: (a) Durante a oxidao qumica do monmero (anilina), acredita-se que os ctions radicais formados possam ser estabilizados nesse novo meio reacional, podendo formar polmeros de alta massa molar e com alto grau de conjugao. (b) Alm disso, os LI podem, devido a sua estrutura inica organizada, servir como moldes para as cadeias dos polmeros formados resultando em uma melhor organizao. Dessa forma, devido a esses dois fatores, acredita-se a sntese qumica de polianilina em LI pode resultar em um material polimrico com maior condutividade eltrica do que aqueles sintetizados em meio convencional. A escolha pelos dois lquidos inicos mencionados acima se deve a boa estabilidade eletroqumica que ambos apresentam e a longa cadeia lateral na espcie catinica o que acarreta numa melhor organizao espacial. A presena ou ausncia de cido durante a etapa de sntese justifica-se pelo fato que a polianilina deve ter nitrognios protonados para que a mesma seja condutora. Ambos os lquidos inicos foram sintetizados em duas etapas. A primeira foi a reao de quaternizao de 1-metilimidazol com 1bromooctano seguida pela de troca inica com HBF4 (LI1) e com bis(trifluorometanossulfonil)imideto de ltio (LI2). Esses sais foram apropriadamente purificados e secos antes do uso. Em seguida foram caracterizados espectroscopicamente (RMN de 1H e 13 C), por anlise elementar, analise trmica (Termogravimetria-TG e carlorimetria diferencial exploratria - DSC) e eletroquimicamente (Voltametria cclica). Ambos os lquidos apresentaram excelente estabilidade trmica (superior a 400 oC) e eletroqumica (janela eletroqumica superior a 4,0 V). As polinilinas foram sintetizadas nos dois diferentes lquidos inicos na presena e ausncia do referido cido. Resumidamente, dissolveu-se anilina (0,01 mol) em uma pequena quantidade de lquido inico (1,0 mL) e em seguida adicionou-se a suspenso de perssulfato de amnio (0,0125 mol) tambm em lquido inico (2,0 mL). No caso das snteses com cido, esse foi adicionado na anilina antes do agente oxidante. A mistura permaneceu sob agitao constante e temperatura ambiente por 48 horas. Em seguida, o meio reacional foi lavado com gua, soluo 1 M de HCl e acetona. Em todas as snteses foi obtido um slido verde, caracterstico de polianilina condutora. Os melhores rendimentos foram obtidos no LI2 e principalmente na presena do cido. Os polmeros esto sendo caracterizados espectroscopicamente (IV), por anlise elementar, termicamente (TG e DSC), morfologicamente (DRX) e a condutividade eltrica estimada usando um probe de 4 pontas. Concluindo, neste trabalho efetuou-se a sntese qumica de um dos polmeros condutores mais amplamente estudados, polianilina, em diferentes lquidos inicos e condies reacionais. Notou-se que dependendo da metodologia de sntese, tanto rendimento quanto tipo de material polimrico obtido pode ser alterado. Aprovao no Comit de tica em Pesquisa No.: 0374/08 Participantes: Fernanda Ferraz Camilo Bazito, Cintia Marques Correa

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Exatas Ttulo:
Autores: Bolsista: Orientador:

Sntese e caracterizao de copolmero condutor com piridazina


Philadelphi, L.O.P.; Leite, E.S. Elaine da Silveira Leite - UNIFESP Laura Oliveira Pres Philadelphi - Cincias Exatas e da Terra / Qumica das Transformaes

Resumo:

A rota de Suzuki foi a via utilizada para a sntese de um polmero conjugado que apresenta em sua composio um grupo fenil e grupo piridazina dispostos alternadamente. A primeira sntese realizada obteve um rendimento de 10,8% e, por esse motivo, realizou-se uma segunda sntese com cloreto benzalcnico na tentativa de aumentar o rendimento da reao que, por fim, gerou um rendimento de 11,2%. Foram feitas anlises de UV, Infravermelho, Ressonncia Magntica e Fluorescncia para o polmero obtido tanto na sntese 1 quanto na sntese 2 (com cloreto benzalcnico) com a finalidade de se comprovar a composio do mesmo, e suas propriedades fsico-qumicas. A anlise do infravermelho evidencia picos dispostos em 2961, 1730, 1260 e 800 cm-1 (picos caractersticos do polmero formado) e a faixa correspondente ao grupo bornio no aparece (1320 e 1350 cm-1). Nas anlises de fluorescncia os valores de pico registrados para os dois polmeros foram parecidos. O polmero 1 foi excitado em 330 e 314,9 nm e o polmero 2 foi excitado em 330 e em 315 nm, gerando picos em 344,7 e 364,7 para o polmero 1 e 360,7 e 379,7 para o polmero 2. No UV foi possivel visualisar a formao de apenas 1 pico em 241 nm para o polmero 1 e em 241 e 318,9 nm para o polmero 2. Aprovao no Comit de tica em Pesquisa No.: 0374/08 Participantes: Laura Oliveira Pres Philadelphi, Elaine da Silveira Leite

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A CONSTITUIO DOS SUJEITOS NAS PRTICAS SOCIAIS: SNDROME DE ASPERGER, TRABALHO E EDUCAO
Carvalho, M.F.; Arajo, C.A. Camila Azevedo de Arajo - UNIFESP Maria de Ftima Carvalho - Pedagogia / Psicologia e Educao

Resumo:

O trabalho de Iniciao Cientfica A constituio dos sujeitos nas prticas sociais: sndrome de Asperger, trabalho e educao parte do projeto de pesquisa Incluso Educacional de Jovens e Adultos com Deficincia Mental: Interao Social, Relao com o Conhecimento e Constituio de Sujeitos, desenvolvido pela Professora Dra. Maria de Ftima Carvalho. No contexto dessa pesquisa, busca contribuir para a reflexo sobre a relao entre Educao e Trabalho no estudo do desenvolvimento de jovens e adultos com comprometimento do funcionamento mental e realizado no mbito do curso de Pedagogia, na UNIFESP/Guarulhos, com o apoio do PIBIC 2007/2008. Assume como fundamentos tericos metodolgicos os pressupostos da psicologia histrico-cultural (Vygotsky 1996, 1997, 2001) acerca do desenvolvimento humano como processo social e da importncia da considerao dos aspectos histricos e scio-culturais na constituio das mais diversas formas de comprometimento do funcionamento mental. Prope-se a investigao das possibilidades de aprendizagem e desenvolvimento construdas por um adulto com sndrome de Asperger, um rapaz de 28 anos, em prticas de trabalho voluntrio na funo de auxiliar de professor, desenvolvidas em uma escola especial de carter filantrpico que atende crianas e adolescentes com paralisia cerebral na cidade de So Paulo. Tem como objetivo observar, registrar (em udio e dirio de campo) e analisar as interaes que configuram o trabalho voluntrio desempenhado pelo sujeito junto aos demais envolvidos (professores, pesquisadora e alunos), buscando explicitar e compreender, nessas prticas sociais, aspectos dos processos de aprendizagem e desenvolvimento do sujeito, de sua constituio como adulto, trabalhador voluntrio. O trabalho de pesquisa caracteriza-se como um Estudo de Caso, desenvolvido a partir da observao participante e anlise microgentica. Os trabalhos de observao e registro so realizados pela pesquisadora, durante 06 semanas, duas vezes por semana, s quartas e sextas-feiras, das 7 s 11 horas, nas salas/turmas X e Y onde o sujeito trabalha como voluntrio. No processo de observao e registro, a pesquisadora participa das atividades pedaggicas tambm como auxiliar, voluntria. Soma-se s observaes o material construdo a partir da realizao de entrevistas semi-estruturadas realizadas (gravadas em udio) com as professoras e com o sujeito. No processo atual de construo dos dados (observao, registro, realizao de entrevistas, fundamentao terica e discusso), destacam-se aspectos organizadores das interaes sociais vividas pelo sujeito e pela instituio na configurao do trabalho voluntrio, tais como: o que caracteriza o trabalho feito pelo sujeito; as expectativas frente a sua atuao; os modos de participao mais caractersticos do sujeito (e demais envolvidos) nas interaes; os recursos cognitivos e de comunicao usados pelo sujeito; como a sndrome de Asperger compreendida e qual o papel desempenhado pelas diferenas que caracterizam o sujeito nessas prticas, etc. Participantes: Maria de Ftima Carvalho, Camila Azevedo de Arajo

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Humanidades Ttulo:
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A construo da profisso docente no Brasil: as representaes do bom professor na revista Criana e Escola (1963-1972)
Lugli, R.S.G.; Sanches, A.C. Angelica Cristina Sanches - UNIFESP Rosario Silvana Genta Lugli - Pedagogia / Estudos Sociolgicos da Escola

Resumo:

Este projeto tem como objetivo identificar as representaes a respeito da boa prtica docente na escola elementar que foram veiculadas por um dos mais representativos peridicos dirigidos a professores durante a dcada de 1960: a revista Criana e Escola. Na parte inicial do projeto, foi feita uma anlise do ciclo de vida da revista, compreendendo seus editoriais, sees e seus aspectos materiais, destacando o contedo da revista que era oferecido para compreender a profisso docente nesta poca (1963 - 1972). A revista foi publicada e distribuda nacionalmente para os professores primrios pelo PABAEE (Programa de Assistncia Brasileiro-Americana ao Ensino Elementar). Nesse perodo, priorizava-se a formao dos professores para o ensino elementar, devido aos dados do Censo Escolar do ano de 1964, que revelou que mais da metade do total de docentes do ensino elementar brasileiro eram leigos, ou seja, no possuam a formao mnima requerida para o exerccio da funo. Desse modo, a revista proporcionava contedos destinados orientao dos professores, atravs de mtodos e prticas adequados a uma escola modernizada. Para melhor compreenso do ciclo de vida da revista Criana e Escola, foram feitas algumas tabelas organizando os temas da revista, alm de uma Ficha Padronizada segundo o modelo de Pierre Caspard (1981). A revista teve um total de trinta e cinco edies (jan.1963 - set.1972), sendo a primeira em carter experimental. Apresentava uma mdia de cinqenta e trs pginas por exemplar, e uma periodicidade de duas a cinco publicaes por ano. Em relao direo geral de contedo, a revista sofreu quatro mudanas, que nesta pesquisa foram consideradas como quatro fases. Essas fases apresentaram algumas modificaes na revista, como a materialidade, temticas contempladas, e o surgimento ou o desaparecimento de algumas sees. Algumas sees permaneceram em destaque durante todo o ciclo de vida da revista, devido situao que o pas enfrentava em termos da insuficiente formao de seus quadros docentes, citada acima. Estas se caracterizavam pela apresentao de bons exemplos, bem como pelo esclarecimento de dvidas e problemas que os professores enfrentavam em seu cotidiano na sala de aula. Uma seo publicada durante considervel nmero de edies (17 a 34) e que constituir o objeto da continuidade desta pesquisa, tinha como ttulo Voc Pergunta / Ns Respondemos. Criana e Escola foi uma revista publicada para tentar transformar os professores que no possuam o tipo de formao que a profisso passou a exigir a partir da dcada de 1950 no Brasil (Lugli, 2002). Nesse perodo, os altos ndices de analfabetismo e de excluso escolar do pas fizeram necessria a discusso dos temas da reprovao e da evaso escolar, situaes que mereciam maior ateno uma vez que os recursos pblicos deveriam ser utilizados com maior eficincia. A soluo que a revista propunha inicialmente para essas questes era a apresentao de mtodos e materiais de ensino modernos, que tornassem a ao docente mais eficaz. Embora no tenha deixado nunca de apresentar sugestes prticas, um diagnstico mais realista do fracasso escolar, considerando tambm as condies de vida do aluno menos favorecido, aparece a partir do nmero 17. Participantes: Rosario Silvana Genta Lugli, Angelica Cristina Sanches

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Humanidades Ttulo:
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A EDUCAO PR-ESCOLAR NO MUNICPIO DE GUARULHOS NA EXPANSO DA ESCOLA POPULAR DE MASSAS E A CRIANA POBRE COMO OBJETO DE PESQUISA (1945-1971).
Costa, P.; Freitas, M.C. Patrica da Silva Costa - UNIFESP Marcos Cezar de Freitas - Pedagogia / Historia Social da Escola e Historia Social da Infancia

Resumo:

Este trabalho teve como objetivo investigar aspectos singulares da expanso da escola pblica, em Guarulhos, expanso esta geradora de uma escola popular de massas. Pesquisou, sobretudo, as repercusses dessa expanso na oferta de educao pr-escolar e na ampliao do atendimento pblico crianas de zero a seis anos de idade. O perodo abrangido pelo projeto foi de 1968, data de criao da primeira escola pblica de educao infantil at 2008. Nesse perodo a investigao revelou que as modificaes na estrutura do atendimento populao de zero a seis anos de idade se deu no bojo de um processo de acelerao do crescimento demogrfico da cidade de Guarulhos. A pesquisa demandou caracterizar aspectos econmicos, sociais e migratrios ocorridos no Brasil na dcada de 1950. Naquele contexto, Guarulhos foi cenrio para instalao de plo industrial e, conseqentemente, de sensvel exploso demogrfica, atraindo, sobretudo, migrantes do interior do Brasil. Tais deslocamentos agravaram desigualdades sociais revelando que o processo manteve grandes contingentes populacionais com baixo poder aquisitivo, experimentando situaes, por vezes, de crtica marginalizao e pobreza. O cenrio tornou-se ainda mais complexo com uma nova dilatao demogrfica motivada pela instalao do Aeroporto Internacional de So Paulo. O trabalho recupera aspectos da expanso demogrfica e analisa o processo de regionalizao e periferizao do municpio. Regionalizao e periferizao revelaram-se palavras-chave para compreender a histria da ampliao da oferta de vagas em escolas pblicas e tambm das transformaes ocorridas no mbito da educao infantil. A pesquisa obteve dados estatsticos reveladores da complexidade prpria do municpio de Guarulhos e revelou, inclusive, a presena de novas estratgias de ao governamental no campo do atendimento criana pequena, cujo exemplo mais significativo pode ser identificado no Programa Educriana. Este Programa, marco da poltica de ao da Secretaria de Educao de Guarulhos foi concebido como ao emergencial para atender crianas de um a trs anos, que compem o segmento etrio predominante nas creches, ainda que, nos termos da legislao a referncia etria seja de zero a trs anos. As fontes consultadas no transcorrer das atividades de pesquisa relevaram que o Programa estruturou-se em meio polmicas e debates de variado contedo poltico e ideolgico. O Programa Educriana tem por caracterstica bsica o atendimento a crianas oferecido em ao que envolve tambm o trabalho de mes, responsveis ou ainda as chamadas mes-comunitrias, que so indicadas pelos responsveis pela criana matriculada. O Programa Educriana oferece bolsa-auxlio (bolsa-creche) ao responsvel participante, subsidiada com Recursos do Tesouro Municipal para a Educao; formao social para o cuidar e o desenvolver da educao da criana. possvel concluir que a vigorosa expanso na oferta de atendimento criana pequena revelou particularidades prprias metrpole que Guarulhos se tornou. A estratgia diferenciada de criao do Educriana, nesse sentido, corrobora a concluso de que, no municpio, a expanso estudada pelo projeto teve caractersticas muitos particulares. Aprovao no Comit de tica em Pesquisa No.: Participantes: Patrica da Silva Costa, Marcos Cezar de Freitas

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A EXPERINCIA DA DITADURA NA EPM


Calhau, H.L.; Rodrigues, J. Hugo Leonardo Calhau dos Santos - UNIFESP Jaime Rodrigues - Histria / Histria

Resumo:

A partir dos acervos do CeFHI e do Departamento de Medicina Preventiva da UNIFESP, iniciei minha colaborao no projeto "UNIFESP 75 anos: patrimnio cultural e perspectivas" conferindo os itens listados na base de dados do Arquivo Histrico e encontrado fisicamente no mesmo Arquivo os documentos considerados relevantes para os temas da pesquisa. Posteriormente, levantei dados de jornais, fotografias e peridicos da poca da ditadura relacionados EPM e ao Hospital So Paulo, fotografias comemorativas das efemrides, dados financeiros de emprstimos da Caixa Econmica Federal, o Manifesto de Fundao da EPM, discursos de professores (incluindo de paraninfos). Na Medicina Preventiva, levantei as fichas mdicas do Projeto Xingu. Alm disso, foram elaborados fichamentos de obras historiogrficas sobre a EPM. Participantes: Hugo Leonardo Calhau dos Santos, Jaime Rodrigues

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A idia de poder monrquico em D. Joo de Castro: transcrio e estudo do manuscrito "Da quinta & ultima monarchia futura" (1597-1606)
Lima, L.F.S.; Rodrigues, B.R. Bruno Romano Rodrigues - UNIFESP Lus Filipe Silvrio Lima - Histria / Histria Moderna

Resumo:

Nos momentos instveis da virada do sculo XVI para o XVII , foram diversos os movimentos ligados expectativa e esperana relativas a soberanos europeus que desempenhariam um papel quase messinico. Emblemas disso foram as atribulaes do postulante Dimitri, na Rssia, passando pelas disputas e consolidao da Coroa Catlica da Frana em Henri IV, at chegar s repercusses ao desastre portugus de Alccer-Quibir e Unio Ibrica; poca de nascimento da crena na espera do retorno do Rei D. Sebastio . Em Portugal, somava-se ainda a existncia de um messianismo e providencialismo expressos desde a construo da narrativa da fundao do Reino em torno do Milagre de Ourique. Pensando esse momento histrico, a presente pesquisa dedica especial ateno ao sebastianismo do incio do sculo XVII. Para tanto, encontra-se em curso a transcrio e anlise de uma fonte de autoria do letrado lusitano D. Joo de Castro (1550 - 1623), o manuscrito "Da quinta & ultima monarchia futura". O tratado faz parte de sua vasta obra, em 22 volumes, produzida em seu exlio na Frana. No manuscrito, Castro teorizou acerca dos desgnios divinos que erigiriam uma derradeira Monarchia redentora do Universo e que seria encabeada pelo Vigrio de Cristo. Para ele, isso significava Portugal liderado pelo Encoberto D. Sebastio. No atual estgio da pesquisa se encontram transcritos quatorze dos dezoito captulos da obra, alm de produes de resenhas de obras referncias e de um texto inicial com breves consideraes bibliogrficas e anlise da fonte. O desenvolvimento deste trabalho faz parte de uma pesquisa sobre "As concepes e usos de Imprio nos tratados profticos em Portugal. Sculo XVII", desenvolvido na Unifesp pelo Prof. Dr. Lus Filipe Silvrio Lima, ligado ao Projeto Temtico "Dimenses do Imprio Portugus", sob coordenao da Profa. Dra. Laura de Mello e Souza e financiado pela FAPESP, na Ctedra Jaime Corteso/USP. Participantes: Lus Filipe Silvrio Lima, Bruno Romano Rodrigues

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A interdisciplinaridade na formao do nutricionista: um estudo no campus baixada santista


Janurio, W.A.; Batista, S.H.S.S Wederley Alexandre Janurio - UNIFESP Sylvia Helena Souza da Silva Batista - CEDESS / Trabalho em sade

Resumo:

Introduo: As Diretrizes Curriculares Nacionais apontam para uma perspectiva interdisciplinar na formao do nutricionista, superando a fragmentao disciplinar e tendo na pesquisa, no trabalho em equipe, na perspectiva da integralidade do cuidado ncoras terico-metodolgicas fundamentais. neste mbito que se insere o Projeto Poltico Pedaggico do Campus Baixada Santista da UNIFESP, no qual esto implantados os cursos de Educao Fsica, Fisioterapia, Psicologia, Terapia Ocupacional e Nutrio e tem seus fundamentos inscritos na educao interprofissional. Objetivo: analisar as concepes sobre interdisciplinaridade e formao de professores que atuam, nos anos de 2006 e 2007, no eixo Especfico do Curso de Nutrio do Campus Baixada Santista, buscando apreender o significado atribudo por estes professores interdisciplinaridade, assim como ampliar as concepes do corpo docente sobre este tema, investigando os significados apreendidos com as nfases do projeto pedaggico do Campus Baixada Santista, da UNIFESP. Metodologia: A coleta de dados foi realizada atravs de entrevistas semi-estruturadas, que foram gravadas e posteriormente transcritas em sua ntegra, com as cinco professoras nutricionistas que atuam no eixo Aproximao Prtica Especfica de Nutrio. um estudo de carter qualitativo, que contou com a tcnica de anlise de contedo para a anlise dos dados coletados. Resultados: a concepo de interdisciplinaridade para as professoras emergiu com os traos de integrao de contedos, integrao entre reas de conhecimento, tendo sido enfatizada uma dimenso de dilogo e troca. Tambm pode ser apreendida uma perspectiva de interdisciplinaridade vinculada a uma viso integral do ser humano, compreendendo-o no contexto em que est inserido. As experincias reconhecidas como interdisciplinares so identificadas como aquelas que foram construdas em um territrio multi/interprofissional, com efetivo trabalho coletivo, em que se investem em discusses conjuntas e colaboraes recproca entre os profissionais. As dificuldades relatadas abrangem a resistncia dos profissionais, formao ainda centrada na fragmentao dos contedos, ausncia de trabalhos em equipe e a dificuldade de construir interaes mais articuladas. No mbito das vantagens h uma convergncia em torno dos ganhos que a formao do nutricionista pode ter com prticas interdisciplinares: aprendizagem significativa e produo de um cuidado em sade mais ampliado. Concluso: identificou-se que a construo de um cotidiano Interdisciplinar complexa, mas reconhece-se sua importncia em uma proposta de formao em sade que valorize o interprofissionalismo e a produo do conhecimento cientfico com relevncia social. Aprovao no Comit de tica em Pesquisa No.: 0047/07 Participantes: Wederley Alexandre Janurio, Sylvia Helena Souza da Silva Batista

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A presena dos Antigos nos tratados profticos de Portugal no sculo XVII: Tratado da Quinta Monarquia e Histria do Futuro
Lima, L.F.S.; Vieira, M.L. Maria Luisa Vieira - UNIFESP Lus Filipe Silvrio Lima - Histria / Histria

Resumo:

Nesta pesquisa, sero analisadas dois tratados profticos: Histria do Futuro do padre Antnio Vieira (166?) e o Tratado da Quinta Monarquia do frei Sebastio de Paiva (164?). Pretende-se discutir at que ponto e como a presena clssica foi utilizada na elaborao destes tratados e at onde este uso confere autoridade aos projetos profticos portugueses. Interessa tambm perceber como eram vistos nesses tratados os Imprios e Monarquias do mundo antigo que estavam representados nos cincos reinos profetizados. Para proceder essas anlises, pretendemos pensar nessas fontes como discursos concebidos a partir de uma gramtica. Como textos pensados dentro de uma perspectiva retrico-teolgica, faz-se necessrio, para alm de traar a estrutura dos gneros utilizados, buscar identificar os lugares, figuras, exemplos utilizados e, mais importante, a adequao dos argumentos e tpicas s ocasies e auditrios. Os autores desses tratados profticos inspiraram-se e comprovaram a veracidade das suas previses com o uso das profecias e textos do Mundo Antigo, que eram utilizados para garantir autoridade. Esta confirmao por meio de textos da Antigidade era necessria, pois se partia do pressuposto de que, mais do que autorais, as prticas textuais estavam fundadas na autoridade: a auctorictas. Participantes: Lus Filipe Silvrio Lima, Maria Luisa Vieira

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A violncia sexual contra crianas e adolescentes nos cinemas: analisando a representao do agressor
Landini, T.S.; Moraes, L.N.Z. Lauren Nathaly Zeytounlian de Moraes - UNIFESP Tatiana Savoia Landini - Cincias Sociais / Cincias Sociais

Resumo:

A presente pesquisa aborda dois temas clssicos da sociologia, o cinema e a violncia sexual. Por ocorrer majoritariamente em ambientes privados, a experincia da violncia sexual geralmente fica restrita a seus personagens. A mdia em geral, e o cinema em particular, d visibilidade ao que est escondido, torna pblico o privado, constituindo uma importante fonte para a anlise de representaes sociais. Esta pesquisa possui dois objetivos principais: a) analisar a representao do agressor sexual de crianas e adolescentes no cinema a partir de dois filmes que passaram recentemente em cinemas paulistanos e que abordam a violncia sexual: Na Captura dos Friedman (EUA, 2003) e O Lenhador (EUA, 2004); b) pesquisar os filmes comerciais que tratem da temtica da violncia sexual e que foram exibidos em cinemas na cidade de So Paulo nos ltimos cinco anos a fim de formar uma videoteca que poder ser usada em pesquisas posteriores. Alm da anlise especfica dos filmes citados, o projeto possibilitou a comparao entre a representao do agressor nos dois filmes e a reflexo sobre eles em relao ao conjunto dos filmes encontrados nos jornais. Concluo que a violncia sexual contra crianas e adolescentes um tema recente nos cinemas e que o agressor, em ambos os filmes analisados, deve ser compreendido a partir do contexto da cultura psi e do interesse cientfico pela violncia. Participantes: Tatiana Savoia Landini, Lauren Nathaly Zeytounlian de Moraes

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Avaliao do perfil cognitivo e fluncia computacional dos estudantes do primeiro ano dos cursos do Campus Vila Clementino da UNIFESP
Bernardo, V.; Paiva, P.B.; Almeida, W.V. William Vazquez de Almeida - UNIFESP Paulo Bandiera Paiva - Informtica em Sade / Informtica em Sade

Resumo:

Este trabalho tem como objetivo principal avaliar o perfil cognitivo e a fluncia computacional dos estudantes do primeiro ano dos cusos de graduao do Campus Vila Clementino da UNIFESP. Assim, participaro um total de 267 alunos, sendo 33 do curso de Biomedicina, 121 do curso de Medicina, 80 do curso de Enfermagem e 33 do curso de Fonoaudiologia. Para avaliar o perfil cognitivo desses alunos ser utilizado um instrumento especfico, j traduzido para o Portugus, o CSI (Cognitive Styles Index, Allison & Hayes, 1996)). Este classifica os indivduos em uma pontuao que, de acordo com os autores, indica a sua posio em um eixo determinado por duas dimenses cognitivas distintas: a intuio em um extremo e a anlise, no outro. Resultados preliminares no subgrupo dos alunos de Graduao do curso Biomdico da UNIFESP indicaram que a maioria dos alunos de primeiro ano so alunos analticos, ou seja, quando raciocinam, focalizam-se em detalhes ao processar informao. Enquanto que, para avaliar a Fluncia Computacional, foi elaborada uma ferramenta que permitir identificar a fluncia desses mesmos alunos, com base especialmente na sua capacidade em lidar com Internet, e-mail e Web. Este instrumento foi desenvolvido baseado em um questionrio validado e publicado por Bunz et al (Computers in Human Behaviour, 2007). Este trabalho faz parte de um protocolo de pesquisa que visa confirmar a necessidade de individualizar ambientes online de aprendizagem com base no estilo cognitivo e de aprendizagem dos alunos para beneficiar sua memorizao e melhorar o seu desempenho. Aprovao no Comit de tica em Pesquisa No.: 1815/07 Participantes: Viviane Bernardo, Paulo Bandiera Paiva, William Vazquez de Almeida

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Da criao a federalizao da EPM e outros momentos


Suzeley, M.; Rodrigues, J. Michele Suzeley Piacente - UNIFESP Jaime Rodrigues - Histria / Histria

Resumo:

No ano de 2007, ano em que o campus Guarulhos entrou em funcionamento, docentes do curso de Histria da UNIFESP deram incio a um projeto de pesquisa que visava, dentre outros resultados, elaborar um livro sobre os 75 anos da EPM/UNIFESP. Fui uma das alunas escolhidas para auxiliar na pesquisa. Meu trabalho concentrou-se na leitura e no fichamento por assunto de diversos livros de atas que se encontravam nos arquivos da Reitoria da universidade e do CeHFI. Os primeiros livros lidos diziam respeito s assemblias gerais e extraordinrias que registraram os primeiros tempos da EPM (de 1933 a 1936). Os demais livros referiam-se s reunies da Congregao (instncia mxima de deliberao interna) entre 1933 e 1959, e do Conselho Tcnico Administrativo (de 1933 a 1951). Tambm realizei pequenos fichamentos de textos de livros e a realizao de tabelas com as informaes coletadas desses. Nesse sentido, o projeto foi til para minha compreenso acerca da dinmica e do funcionamento de um trabalho de pesquisa na rea de Histria. Minha colaborao na pesquisa serviu de ferramenta, juntamente com o trabalho de outros alunos, para a elaborao do livro escrito pelos docentes ligados ao projeto de pesquisa. Participantes: Michele Suzeley Piacente, Jaime Rodrigues

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Democracia Direta ou Processo Oligrquico? Um Estudo sobre o Oramento Participativo em Guarulhos


Peres, P.S.; Baiochi, N. Nayara Baiochi do Nascimento - UNIFESP Paulo Srgio Peres - Cincias Sociais / Cincias Sociais

Resumo:

O Oramento Participativo [OP] um mecanismo de administrao popular implantado pelo PT a partir da experincia iniciada pelo partido na prefeitura de Porto Alegre nos anos de 1980. Mas, alm de suas inovaes administrativas, o OP apontado como um instrumento prtico de realizao da democracia direta, uma vez que, por seu intermdio, os cidados decidem, eles mesmos, a maneira pela qual o oramento municipal deve ser alocado na resoluo dos problemas mais prementes das comunidades. Assim, alm de serem eliminadas as intermediaes clientelsticas, substitui-se tambm a instncia partidria na relao entre Estado e Sociedade Civil. Sob este aspecto, o objetivo da apresentao enquadrar o Oramento Participativo no mbito da teoria democrtica, de forma a delinear seus fundamentos tericos e normativos, assim como possveis obstculos plena realizao de seus dois maiores objetivos: (1) o funcionamento efetivo da democracia direta e (2) a educao poltica dos cidados. Participantes: Paulo Srgio Peres, Nayara Baiochi do Nascimento

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Ecos de uma narrativa sobre a Colonizao na historiografia brasileira: Varnhagen em Bomfim e Prado Jr. - 1850 - 1942
Escanhuela, D.L.; Nemi, A.L.L. Diego Luiz Escanhoela - UNIFESP Ana Lcia Lana Nemi - Histria / Histria

Resumo:

Esta pesquisa em Iniciao Cientfica pretende estudar a narrativa do historiador do XIX brasileiro, Francisco Adolfo de Varnhagen, em especial a obra Histria Geral do Brasil e sua definio de sentidos para a colonizao do Brasil, buscando identificar, em sua elaborao, influncias e/ou contribuies para o importante debate historiogrfico que, no sculo XX, procurou esquadrinhar esses sentidos para a colonizao braslica. O texto O Brasil na Amrica, de Manuel Bomfim, ser utilizado na pesquisa como indicador cronolgico dessa narrativa que, ora dissonante, ora contnua, foi canonizada em leitura singular pela obra de Caio Prado Jnior, Formao do Brasil Contemporneo, que tambm ser objeto da pesquisa. Por estar em momento inicial da pesquisa, direcionarei minha fala anlise j desenvolvida acerca da obra de Varnhagen, pois seja, a leitura interna da obra, inserindo-a na ambincia poltica coeva, considerando neste sentido, a trajetria poltica e cientfica do autor. Participantes: Diego Luiz Escanhuela, Ana Lcia Lana Nemi

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Glossrio ingls/portugus para a leitura de textos de Cincias Sociais em lngua inglesa


Vian Jr., O.; Lpez-Barreyro, L.A. Luz Amparo Lopez Barreyro - UNIFESP Orlando Vian Junior - Cincias Sociais / Ingls Instrumental

Resumo:

Os cursos de Filosofia, Cincias Sociais, Histria e Pedagogia, oferecidos no campus de Guarulhos da UNIFESP incluem aulas de leitura instrumental em ingls e em francs, j que existe a necessidade de utilizao desses idiomas para um amplo aproveitamento da bibliografia das Unidades Curriculares desses cursos. Dentro do curso instrumental de ingls, detectou-se a necessidade de elaborao de um glossrio ingls-portugus na rea de Cincias Sociais, para auxiliar a compreenso das leituras dos textos em lngua inglesa. Aps pesquisa bibliogrfica e consulta s fontes de textos da rea de Cincias Sociais, bem como avaliao das necessidades de leituras dos alunos do curso, chegou-se concluso de que um glossrio que abrangesse as trs reas dentro das Cincias Sociais - Antropologia, Sociologia e Cincia Poltica - seria muito amplo e invivel de acordo com o tempo disposto para a pesquisa. Levando-se em considerao a quantidade de material traduzido existente a partir da consulta aos professores especialistas da rea, alm da quantidade de material textual disponvel para execuo da pesquisa, optou-se pelo campo da Antropologia. O corpus coletado compreende textos de diversas revistas especficas de Antropologia, compreendendo um total de 50 textos em ingls e 50 textos em portugus. A partir da utilizao dos princpios da Lingstica de Corpus (Berber Sardinha, 2004), foi utilizado o programa computacional WordSmith Tools (Scott, 1999), por meio do qual possvel manusear uma grande quantidade de textos e, atravs da ferramenta computacional WordList, oferecida pelo programa, possvel observar, a partir de listas de palavras, as palavras mais freqentes em ingls e em portugus. Com base no manuseio dos dados componentes do corpus, foi possvel elaborar um glossrio inicial das palavras mais freqentes no campo da Antropologia, que ser disponibilizado para os alunos do Curso de Cincias Sociais como subsdios para suas leituras de textos da rea escritos em ingls. Participantes: Orlando Vian Junior, Luz Amparo Lpez Barreyro

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Guia didtico e acadmico sobre o ensino da disciplina Histria da frica no Brasil


Schermann, P.S.; Pace, A.M. Alice Martins Pace - UNIFESP Patrcia Santos Schermann - Histria / Histria da frica

Resumo:

A Histria da frica e de seus povos sempre foi vista por grande parte da populao mundial, como uma coisa sem importncia, pois, eram pessoas que pela opinio e pelos conceitos daqueles que adentraram o territrio africano, diziam que os negros viviam na barbrie, que no possuam uma Histria e, tambm pela suas diferentes tradies que possuam eram considerados inferiores e que necessitavam de dominao dos europeus para ser civilizados. Com a chegada dos desbravadores na frica, no sculo XV, houve um choque cultural entre esses dois grandes continentes, o europeu e o africano. Quando os primeiros se implantaram no territrio do alm-mar entraram em contato com os costumes dos negros que l viviam; assim utilizaram dos prprios valores e tradies que os povos mantinham para justificar a dominao europia no continente. Ou seja, devido aos costumes e modo de vida que os africanos possuam, os europeus se acharam no direito e dever de civilizar esses povos, pois, no seu conceito, viviam na barbrie e era extremamente selvagens devido ao fato de os negros no viverem como os europeus viviam. Essa barbrie e selvageria podem ser classificadas de vrias formas como, a tradio que as tribos mantinham; o no seguimento da religio catlica e principalmente no registro de sua histria, que era feita oralmente por pessoas destinadas a essa funo, como, por exemplo, os griots. Os povos africanos no tinham o costume de escrever sua histria, pois para eles a palavra dita tinha um valor sagrado. Essa tradio acabou entrando em choque com os costumes dos europeus que acreditavam e valorizavam muito a escrita e diziam que povos que no escreviam os acontecimentos ocorridos nas suas regies e, tambm que no registravam as suas prprias tradies eram povos sem histria e, que por isso necessitavam ser disciplinados. Assim, no decorrer na colonizao na frica foram feitas escolas para concretizar o ideal de civilizao to desejado pelos europeus. Crianas africanas aprendiam a histria de seu continente pela viso dos colonizadores, ou seja, a histria que era contada a elas eram a de ps-chegada dos brancos que iniciaram o registro escrito dos acontecimentos. Essa viso de no histria da frica antes do europeu chegar ao continente durou at o sculo XX quando as tropas civilizadoras se retiraram do territrio devido aos processos de independncia, e quando alguns africanos foram estudar na Europa e perceberam que seu continente de origem era muito mais vasto do que era ensinado pelas escolas africanas ministradas pelos colonizadores e tentaram assim revalorizar as tradies, lendas e ensinamento dos povos africanos para o seu prprio povo. Com isso, na metade do sculo XX, Joseph Ki-Zerbo organizou juntamente com o apoio da Unesco, uma coleo de textos de africanos sobre a frica, ao qual se chamou: Histria Geral da frica que tem como intuito romper com a idia que ainda existe sobre o continente africano. Essas idias que vigoraram na maioria das colnias que os europeus dominaram so de cunho preconceituoso e no condizem com a realidade do continente africano. Sempre foi muito dito pelas sociedades consideradas civilizadas sobre a frica que era necessrio a implantao da tutela dos povos africanos; o territrio e a populao eram e so consideradas subdesenvolvidas econmica e intelectualmente; e, o que chama muito a ateno o predomnio da ideologia de vitimizao dos povos africanos, sendo isso ensinado nas escolas da Europa, Amrica, sia e, inclusive no prprio continente africano que teve incio com as escolas coloniais. Em 2003 foi aprovada uma lei 10639 no Brasil pelo atual governo de Lus Incio Lula da Silva e, pelas inmeras presses que o movimento negro proporcionou que visa o ensino da disciplina Histria da frica e dos afro-descendentes em todas as escolas e universidades pblicas e privadas do pas. No entanto, foi realizado nessa pesquisa, levantamentos das ementas das principais e maiores universidades do estado de So Paulo onde pude perceber que cerca de somente 20% delas cumprem essa lei que j existe h cinco anos. Alm das justificativas expostas acima, outros problemas que ainda existem sobre essa disciplina so: a falta de material didtico e a falta de profissionais especializados na rea. Juntando essas dificuldades e, devido formao das instituies educacionais no Brasil serem proporcionadas pelos civilizadores europeus, h muita coisa para ser trabalhada e muitas discusses a serem feitas em torno desse assunto para tentar romper a idia que muitos tm da frica, que um continente aptico, submisso aos interesses dos colonizadores, de uma populao escrava e sem histria onde s passou a possu-la a partir da chegada dos detentores dos conhecimentos europeus que se implantaram e dominaram tudo o que tinha valor comercial para seu prprio benefcio. Assim se formou a educao na maioria das colnias aonde os europeus chegaram e tentaram conduzir as sociedades nos moldes europios de viver. A discusso consiste em, como diz Joseph Ki-Zerbo; para quando frica?. Participantes: Patrcia Santos Schermann, Alice Martins Pace

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Igualdade nas prticas pedaggicas e nas polticas educacionais:


Soares, A.P.S.; Auad, D. Ana Paula de Souza Soares - UNIFESP Daniela Auad - Pedagogia / Perspectivas Sociolgicas sobre a Educao

Resumo:

A pesquisa que o presente resumo d notcia foi realizada com bolsa de Iniciao Cientfica concedida pelo CNPq e pela Pro - reitoria de Graduao da Universidade Federal de So Paulo. O estudo teve por objetivo conhecer o conceito de igualdade, a partir de corpus bibliogrfico produzido no interior da rea de Cincia Humanas. Para tal fez-se necessrio saber como igualdade, especialmente no tocante s relaes de gnero e relaes tnico-raciais, figurava tanto em determinados textos educacionais (governamentais ou acadmicos) quanto nas opinies coletadas a partir de entrevistas com professoras e professores de escola pblica do Municpio de Guarulhos. Para atingir o objetivo da presente pesquisa foi realizada pesquisa bibliogrfica com busca, seleo, leitura e anlise de teses, artigos e relatrios cientficos e governamentais. Alm do estudo deste corpus bibliogrfico, realizou-se pesquisa de campo na qual a escola que acolheu a pesquisa foi caracterizada a partir de um conjunto de critrios, tais como nmero de alunos atendidos, nmero de professoras e professores, bem como suas formaes acadmicas. Na escola-campo, foram entrevistados dez sujeitos integrantes do corpo docente (sete professoras, um professor, uma diretora da escola e uma coordenadora pedaggica). As entrevistas foram gravadas e conduzidas com perguntas semi-abertas. As transcries verteram o contedo verbal das falas das professoras e professores em textos escritos, passveis de anlise e comparao com os textos que foram objeto de levantamento, seleo, leitura e anlise durante a pesquisa. Como uma das concluses, notou-se que possvel a construo de um dilogo, a partir das relaes de gnero e das relaes tnico-raciais, entre as diversas acepes dos conceitos de igualdade, diferena e desigualdade tanto presentes nos textos estudados quanto recorrentes nos contedos das falas das professoras e professores. Estes e estas no esto apartados dos debates que se avizinham sob a forma dos variados discursos sobre a diversidade na escola, o sistema de cotas no sistema pblico de ensino ou a educao em direitos humanos. Assim, notou-se, como uma das concluses possveis, que tais slogans podem guardar ou esconder na maioria das vezes, o debate sobre igualdade racial, igualdade de gnero e diversidade sexual. Tal assertiva demanda continuidade de pesquisa, com aprofundamento do estudo bibliogrfico e com a construo de novos instrumentos de coleta de dados e de anlise do cotidiano escolar. Participantes: Ana Paula de Souza Soares, Daniela Auad

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Introduo ao estudo da sade e da doena


Sarti, C.A.; Higa, L.M. Lais Miwa Higa - UNIFESP Cynthia Andersen Sarti - Cincias Sociais / Cincias Sociais

Resumo:

A pesquisa visa uma introduo ao campo da sade e da doena pela perspectiva das Cincias Sociais. A complexidade dos fenmenos humanos mostra como fatos considerados to simples como a existncia do corpo e outros to difceis de se pensar, pela variedade de possibilidades j estudadas, como a dor, encontram nas Cincias Sociais uma possibilidade de novas respostas e paradigmas. A introduo a esse pensamento desvenda no somente problemas especficos da relao da biomedicina com a cultura mas mostra como seu mtodo e os estudos realizados tornam-se cada vez mais teis e reveladores para as Cincias Sociais como um todo. O papel social da Medicina vai muito alm da conotaao humanista que essa expresso carrega, ele tambm um papel moralizador, um substituto fundamental do sistema de moral exercido antes pela religio que foi gradualmente dissolvido nos processos histricos que tornaram nossa sociedade laica e cientificista. Manteve-se a vontade do homem de buscar respostas e isso se d no campo de saber predominante em cada poca. Todo um universo de possibilidades se abre ao passarmos os olhos pelo campo de estudos das cincias sociais sobre a sade e a doena. No estudo sobre as relaes mdico-paciente, observamos as concepes de cada um desses atores sobre a anatomia, fisiologia e os modelos representativos da doena. Assim, podemos perceber que a doena pode estar relacionada perturbao das relaes sociais, que sua expresso e tratamento esto intrinsecamente comprometidos com o tipo de paradigma de cura da sociedade em que se manifesta e que a Medicina Ocidental Moderna objeto e instrumento no apenas de um saber, mas tambm de um poder, do qual fala o filsofo Michel Foucault. Ao voltarmos a ateno para o corpo tentamos entender este instrumento que liga o homem ao mundo externo e, diante do espanto que causa o distanciar-se dele, por meio da reflexo, possvel observ-lo sob outras perspectivas, inclusive a do no reconhecimento de uma existncia corporal em certas sociedades. A questo que liga todos os temas estudados, que deu sentido pesquisa feita e que abre novos caminhos para a continuao do trabalho de pesquisa consiste no fenmeno da dor, inerente vida humana. Por meio do estudo da dor e das formas como o homem lida com o sofrimento, envolvido nas questes fundamentais de sua vida - nascimento, crescimento, doenas, morte - pode-se buscar entender as solues que busca, suas formas de se expressar e de se comunicar e entender o Outro. Participantes: Cynthia Andersen Sarti, Lais Miwa Higa

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MEMRIA DA SADE: CONSIDERAES SOBRE OS ARQUIVOS DA UNIVERSIDADE FEDERAL DE SO PAULO


Bueno, S.H.A.; Rodrigues, J. Silvia Helena de Araujo Bueno - UNIFESP Jaime Rodrigues - Histria / Histria

Resumo:

Neste estudo, meu intuito ser informar a atual situao do patrimnio arquivstico da Universidade Federal de So Paulo, relantando as condies fsicas em que o mesmo se encontra e sugerindo medidas de preservao desse patrimnio e da memria institucional construda ao longo de 75 anos, contados a partir da fundao da EPM (1933). O acervo documental da Unifesp consiste, por conta da EPM, essencialmente de registros de prticas no campo da Sade. A conservao desses registros implica na abertura de caminhos para pesquisas relativas a esse setor, tanto por especialistas das Cincias da Sade quanto para profissionais das Cincias Humanas, considerando a nova realidade da UNIFESP aps a expanso ocorrida no incio do sculo XXI. Alm deste papel no mbito interno, todo arquivo possui uma funo no contexto externo: promover a guarda e disponibilizao dos registros histricos pesquisa e um intercmbio permanente com o pblico. Contudo, observamos na UNIFESP um conjunto de arquivos entendido como depsitos, sem organizao e outros cuidados necessrios. A eventual deteriorao desse patrimnio tem como conseqncia a impossibilidade de se recuperar a memria da produo intelectual desenvolvida desde 1933, privando os pesquisadores e a sociedade em geral de obter conhecimento das prticas exercidas em um dos mais importantes centros do pensamento sobre a Sade no Brasil. Participantes: Silvia Helena de Araujo Bueno, Jaime Rodrigues

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Missionrios cristos entre os Guarani da cidade de So Paulo


Rufino, M.P.; Botelho, T. Thas Botelho - UNIFESP Marcos Pereira Rufino - Cincias Sociais / Antropologia

Resumo:

A pesquisa "Missionrios cristos entre os Guarani da cidade de So Paulo" pretende analisar como as lideranas indgenas Guarani recebem e avaliam a presena e aplicao do programa missionrio catlico da Arquidiocese de So Paulo assim como a maneira como este programa aplicado junto s suas comunidades, residentes em Parelheiros, na regio metropolitana da cidade de So Paulo atualmente, tendo em vista todos as complicaes referentes demarcao de terras, problemas de saneamento, educao servios de sade, etc. Pretende-se verificar qual a estratgia de evangelizao da Igreja usada atualmente em um contexto to especfico, bem como sua receptividade, como no caso das comunidades instaladas nas aldeias de Barragem e Krukutu. At agora nossos esforos foram voltados na tentativa de dominar a literatura pertinente ao povo Guarani e s estratgias crists de evangelizao, assim como tentar estabelecer contato com os missionrios na Pastoral Indigenista da Arquidiocese. Contudo, apesar das diversas tentativas de contato, os missionrios no se mostraram receptivos s propostas de entrevistas nem as tentativas de participao em suas reunies. Tendo isto em vista, foi necessria uma mudana de foco no projeto, passando o enfoque para as lideranas indgenas e no mais para os evangelizadores, como era o caso anteriormente. Em virtude disso, ainda nos encontramos em fase de entrevistas, devido aos empecilhos postos no rumo da pesquisa. Participantes: Marcos Pereira Rufino, Thas Botelho

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Motivos alegados para escolha e/ou evaso do Curso de Tecnologia Oftlmica e discusso da criao do Ncleo Tecnolgico da UNIFESP
Scarpi, M.J.; Youn, S. Sara Youn - UNIFESP Marinho Jorge Scarpi - Oftalmologia / Distrbios Visuais e Funcionais

Resumo:

Introduo: O curso de Tecnologia Oftlmica iniciou no ano de 1997 para habilitar o tecnlogo ao desenvolvimento de processos que apiem as atividades mdicooftalmolgicas, de pesquisa e outras de promoo da sade ocular, em 3 anos de aprendizagem. Conta hoje com 126 egressos diplomados, e 41 evadidos. Em 2008 a mudana curricular manteve a mesma carga horria e aumentou para 4 anos a sua durao em meio perodo.Objetivo: conhecer os motivos que levaram os alunos de Tecnologia Oftlmica a escolherem e/ou desistirem deste curso.Mtodos: survey atravs de questionrio aplicado a amostra de 42 alunos e 11 ex-alunos do curso de Tecnologia Oftlmica da Universidade Federal de So Paulo, todos assinaram o Termo de Consentimento Livre e Esclarecido.Resultados:31% optou pelo curso por gostar da rea de biolgicas; 37% o escolheu pelo fato do curso ser inovador ou mesmo pela universidade ser em So Paulo ou at mesmo para poder prestar concurso pblico, j que o curso de tecnologia considerada um curso superior; 83 % dos entrevistados tomaram conhecimento do curso atravs de material informativo e uma pequena parcela ficou sabendo do curso pelo prprio oftalmologista (4%) ou por parentes e amigos (11%) que j so tecnlogos. A desistncia foi por achar que no teria oportunidade de crescimento na profisso o que corresponde a 30% dos evadidos, mas a maioria (40%) dos evadidos desistiram por insatisfao ao curso devido as aulas mal dadas ou por terem se enganado com o curso, duas (20%) pessoas desistiram porque o curso era integral e por isso dificultava sua permanncia no curso, e apenas uma pessoa (10%) decidiu sair do curso pois achou que fonoaudiologia era mais interessante que oftalmologia. Em relao criao do Ncleo Tecnolgico, 57% dos entrevistados opinaram dizendo que acha que essa reformulao no seria muito boa; alguns disseram que um curso de perodo integral mudar para meio perodo s ir fazer com que o profissional torne-se mais tcnico do que tecnlogo pela pouca carga horria do curso especfico. Os que gostaram da mudana (17%) afirmam que a universidade tem que mudar para que o curso tenha uma procura maior e como agora no currculo ter aulas de exatas, isso ser um fator positivo para que o curso no seja apenas direcionado para a rea clnica, como atualmente, mas possa seguir uma rea mais tcnica dos equipamentos e no apenas saber apertar boto sem saber como eles funcionam. Outros ficaram indecisos (26%) e no tinham ainda uma opinio formada sobre o assunto, porque no sabiam realmente o que esperar da mudana do currculo do curso. Aprovao no Comit de tica em Pesquisa No.: 0224/07 Participantes: Marinho Jorge Scarpi, Sara Youn

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O cinema como representao da histria: desenvolvimento urbano de So Paulo e modernizao brasileira no Cinema Marginal (1967-1974). Guarulhos, 2008
Ferreira, L.G.P.; Nemi, A.L.L. Lus Gustavo Pereira Ferreira - UNIFESP Ana Lcia Lana Nemi - Histria / Histria Contempornea

Resumo:

Na passagem para a segunda metade da dcada de 90 do XX, surgiram em So Paulo dois fenmenos praticamente imperceptveis aos olhos dos sempre apressados habitantes dessa megalpole, a cidade que no dorme e no pode parar: de um lado a criao ou recuperao de uma srie de equipamentos e edificaes, por iniciativa do poder pblico ou de instituies privadas, como o Centro Cultural Banco do Brasil, o Centro Cultural da Caixa Econmica Federal, o Museu da Lngua Portuguesa, a Pinacoteca e o Museu de Arte Sacra. Ainda podemos citar a Pinacoteca construda na estao Jlio Prestes, a transferncia da Orquestra Sinfnica do Estado de So Paulo (OSESP) para a Estao de Ferro Sorocabana e a restaurao do antigo prdio do Departamento de Ordem Poltica e Social (DOPS), no Largo General Osrio. O fenmeno que ocorre paralelamente a esse a criao e proliferao da arquitetura que impede a permanncia das pessoas na face externa de imveis ou espaos de lazer, conhecida como arquitetura anti-mendigo. Alm desses fenmenos, So Paulo vive problemas urbanos que vo tornando-se cada vez mais srios, como a falta de moradia digna para a populao de menor renda e o trnsito, item que atualmente mais preocupa o poder pblico, pois a capacidade da capital de suportar o nmero de veculos em circulao est esgotada. Essa pesquisa tambm o resgate da histria de conflitos entre a vida das camadas populares e o uso concreto que fizeram da cidade, assim como do poder pblico representando os interesses da elite, histria essa que continua sendo vivida e que resulta em prticas como as que vimos acima. O processo de urbanizao que causou boa parte dos conflitos citados teve o que a historiografia chama de take off Entre o fim da 2a Guerra Mundial e o fim do governo Juscelino Kubitsheck (1957-1961), quando a capital paulista passou por um agudo surto de industrializao e cresceu, no apenas econmica mas tambm urbanisticamente, e aprofundou o processo de verticalizao. Na dcada seguinte, os velhos casares, sobrados e palacetes, smbolos da antiga aristocracia cafeeira, deram lugar a espiges de concreto e ferro. Os meios de transporte tambm se modernizaram, o nmero de carros aumentou, e se alteraram o ritmo e as idias e valores de seus moradores. A cidade se dinamizou, surgirem novas tecnologias e as relaes econmicas e sociais tiveram que se adaptar aos novos tempos. Porm, enquanto parte da populao paulistana pde ascender socialmente e migrar para regies melhores, outra parte se pauperizou e, de reduzido poder aquisitivo, no participou do crescimento, transformando-se no que hoje chamamos de excludos. Com esta alterao geogrfica da populao, bairros da regio central da cidade deixaram de ser rea residencial da elite, passando a receber atividade comercial. Na virada dos anos 70 comeou a se desenhar uma nova centralidade econmica em So Paulo: a Av. Paulista. Assim, progressivamente o poder pblico acabou por abandonar o velho centro de So Paulo sua prpria sorte. Partes dessa regio tornaram-se locais de concentrao de prostituio e de prtica de crimes. O de Campos Elsios, por exemplo (ironicamente projetado para ser o Champs Elise paulistano), em boa parte foi tomado pelo submundo, em razo da proximidade de duas estaes de trem e uma de nibus, depois que a prostituio foi expulsa do Bom Retiro, bairro prximo, onde havia sido permitida e posteriormente proibida. Sediado nesta regio, o Cinema Marginal em sua face paulistana (1967-1974) retratou o momento que o Brasil vivia, e o desenvolvimento urbano de So Paulo e parte da histria do pas. Assim, o presente texto faz uma reflexo sobre a relao entre realizaes do Cinema Marginal paulistano, entre os anos 1967 e 1974, e o desenvolvimento da capital paulista no contexto da ditadura militar, cujas conseqncias foram retratadas por este cinema, ainda que no tenha sido opo consciente dos seus realizadores. A presente pesquisa uma reflexo sobre as formas e conseqncias do processo recorrente de reforma urbana E suas excluses e incluses e como isso ficou registrado na cidade e em sua arte. Pretendemos investigar a forma pela qual as concepes do cinema de So Paulo no perodo e no espao definidos permitiram que as contradies do desenvolvimento econmico-social brasileiro, assim como a trajetria urbana de So Paulo, a partir da segunda metade do XIX, fossem retratadas no cinema. Financiamento: Programa Institucional de Bolsas de Iniciao Cientfica do Conselho Nacional de Pesquisa (PIBIC/CNPQ). Participantes: Lus Gustavo Pereira Ferreira, Ana Lcia Lana Nemi

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O Oramento Participativo em Guarulhos


Peres, P.S.; Fausto, P.S. Priscila de Souza Fausto - UNIFESP Paulo Srgio Peres - Cincias Sociais / Cincias Sociais

Resumo:

Considerado uma das maiores inovaes na administrao pblica recente, o Oramento Participativo [OP], inicialmente vinculado ao governo municipal do PT em Porto Alegre, nos anos de 1980, proliferou-se por vrias prefeituras do pas, inclusive sob a administrao de outros partidos. Em Guarulhos, o OP foi iniciado pelo Partido Verde e desenvolvido pelo Partido dos Trabalhadores a partir de 2000. Desde ento, essa prtica vem sendo adotada a cada novo perodo oramentrio, envolvendo a populao na proposio de temas e na escolha das prioridades para a realizao do investimento pblico. Porm, apesar de j funcionar h alguns anos, o OP daquele municpio ainda no foi estudado de maneira sistemtica. Sob tal perspectiva, o objetivo da exposio apresentar, de maneira descritiva, resultados parciais de uma pesquisa emprica que vem sendo realizada sobre o Oramento Participativo de Guarulhos, dando destaque (1) ao histrico de sua criao e (2) estrutura de seu mecanismo decisrio. Participantes: Paulo Srgio Peres, Priscila de Souza Fausto

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Os costumes indgenas na perspectiva do Pe. Jos de Acosta.


Giacomini, A.B.; Gonzalez, R.R. Ana Beatriz Giacomini Marques - UNIFESP Rafael Ruiz Gonzalez - Histria / Histria da Amrica

Resumo:

Os sculos XVI e XVII trouxeram Europa um importante e complexo debate sobre a melhor forma de colonizar os povos da Amrica. Deste debate surgiram, basicamente, dois grupos distintos: o primeiro defendendo a posio de que os ndios americanos seriam dotados de razo e uma grande habilidade de aprender e por este motivo deveriam ser colonizados e catequizados de forma que alguns de seus costumes fossem utilizados e preservados; o segundo, argumentando que os ndios eram brbaros e infiis e, portanto, a colonizao pela fora e a guerra seriam justas. Dois importantes representantes deste debate so Bartolomeu de Las Casas, representando o primeiro grupo, e Juan Gins Seplveda, o segundo. O debate entre estes dois pensadores da colonizao da Amrica travou-se em Valladolid, em 1550. A discusso sobre o assunto em questo ultrapassou e muito este primeiro debate. Padre Jos de Acosta, jesuta espanhol, interessa-se pelo debate e em 1570 seu pedido de ir Amrica atendido. Na Amrica, Acosta passa pelas Antilhas, Peru e Nova Espanha, lugares onde procura observar e refletir sobre os povos locais. Os ltimos trs livros de sua obra Historia Natural y Moral de Las Indias publicada em 1590, trs anos aps seu retorno Espanha, so o principal objeto de estudo desta pesquisa. Em Historia Natural y Moral de Las Indias, o padre descreve costumes indgenas e apresenta argumentos por meio dos quais defende que os ndios deveriam ser colonizados e regidos por seus prprios costumes. Contudo, para Acosta, nem todos os costumes indgenas deveriam ser preservados, mas apenas aqueles que no contrariassem os dogmas da Igreja Catlica. Esta argumentao est fundamentada em conceitos e reflexes profundas baseadas em modos europeus e catlicos de pensar e organizar. A obra escrita em tempos de conflitos em torno deste assunto e o padre teria como objetivo defender um modo de pensar semelhante ao primeiro grupo,ou seja, queles que defendiam alguns costumes indgenas. A partir da anlise dos livros citados, nota-se que Acosta se utiliza da analogia para entender os costumes destes povos, julg-los como bons ou ruins e defend-los ou atac-los como forma de argumentao dentro deste grande debate estabelecido. Por exemplo, em diversos momentos estabelece relaes anlogas entre elementos das religies de alguns povos americanos e catlicos. Porm, muitos dos costumes ligados religio so duramente criticados pelo padre, mesmo quando este os relaciona com elementos cristos. O principal argumento neste ponto seria de que esses povos tm f, mas no em Deus e sim no diabo. Por terem f e grande capacidade de aprender estabelece-se a defesa da possibilidade de catequizao pacfica. A idia de anlise de costumes por analogia defendida tambm pelo autor Giovani Levi, no que se refere ao modo de pensar a justia na Pennsula Ibrica nos dois sculos abordados. A analogia, para Levi, seria o modo de pensar e estabelecer a justia. Para Acosta, o uso da analogia na descrio dos costumes indgenas tinha como objetivo a busca da justa medida para a colonizao. As noes de analogia e justa medida no so prvias, mas se percebem no momento em questo, no caso concreto a partir de um modelo de natureza humana. Para o autor Manuel de Hespanha, a mesma natureza admitiria corpos diferentes com funes diferentes. Da mesma forma, Acosta defendia as diferentes formas de organizao dos povos sem deixar de basear-se na idia de uma s natureza criada por Deus. O maior problema estaria nos costumes que contrariassem esta natureza. A converso ao catolicismo seria, para o padre, a maneira de fazer com que os indgenas no contrariassem a natureza, j que esta era estabelecida por Deus e no pelo demnio. Acosta defendia, porm, que aqueles costumes que no contrariassem a natureza deveriam ser mantidos, pois esta seria a melhor maneira de reger estas sociedades. Assim para ele se daria o justo. Esta forma de pensar analogicamente, apesar de tambm se opor a importantes costumes para a cultura de povos americanos, possibilita certo dilogo entre diferentes culturas mesmo que no intencionalmente. A historiografia tem dado mais ateno a modos de colonizao que no possibilitaram este dilogo. Pens-lo, possibilita alm de tudo refletir sobre o modo como esses costumes indgenas contriburam na formao da sociedade colonial americana. Participantes: Ana Beatriz Giacomini Marques, Rafael Ruiz Gonzalez

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OS IMPACTOS DA POLTICA EDUCACIONAL PAULISTA NA PRTICA DOCENTE E NA ORGANIZAO DO TRABALHO PEDAGGICO NAS ESCOLAS ESTADUAIS NA PERSPECTIVA DOS PROFESSORES.
Novaes, L.C.; Leite, C.C.. Camila Cristina Leite - UNIFESP Luiz Carlos Novaes - Pedagogia / Polticas Pblicas da Educao Brasileira

Autores: Bolsista: Orientador:

Resumo:

Esta pesquisa teve incio com a reflexo acerca da relao entre poltica educacional e cotidiano escolar que vem sendo realizada pelo Grupo de Estudos e Pesquisas em Polticas Educacionais e Cotidiano escolar (GREPPECE), da Universidade Federal de So Paulo, no Campus de Guarulhos. Interessou-nos saber como as aes propostas pela Secretaria de Estado da Educao de So Paulo (SEE/SP) interferem na organizao do trabalho pedaggico da escola e na prtica docente, na perspectiva dos professores, titulares de cargo e ocupantes de funo atividade (OFAs), da rede estadual no municpio de Guarulhos. No decorrer do processo nos deparamos com a existncia de um profissional totalmente ocultado pelas polticas educacionais em curso, o professor eventual, e, percebendo a importncia desse profissional para o funcionamento da escola, o incorporamos s investigaes. Aps a definio do grupo de professores organizamos um roteiro para a realizao de entrevistas semi-estruturadas, a fim de saber o que tais docentes pensavam sobre o prprio trabalho, sobre os alunos, sobre a escola pblica, bem como das aes propostas pela SEE/SP para o funcionamento e organizao das escolas estaduais. As entrevistas foram gravadas, mediante autorizao dos professores, e transcritas para anlise. As respostas obtidas foram organizadas em quadros, facilitando a criao de categorias para a anlise de contedo. Os resultados alcanados apontam para um descompasso entre o que proposto pela SEE/SP para as escolas da rede estadual e o que os professores apontam como prioridades para a realizao de seu trabalho, marcando uma relao de extrema desconfiana dos docentes como a poltica educacional da SEE/SP. Alm disso, os dados permitem identificar as concepes dominantes dos docentes entrevistados sobre a escola pblica, bem como sobre o ideal de qualidade defendido. Em relao aos professores eventuais, identificamos para esse grupo um tratamento extremamente diferenciado por parte dos alunos, pais e demais professores das unidades escolares investigadas, que os tratam como docentes de menor valor, afetando, de maneira significativa, a construo de sua identidade profissional e provocando, entre tais professores, uma situao de extremo desnimo com o exerccio profissional, marcando sua forma de ser e estar na profisso, resultando, muitas vezes, em situaes de extrema improvisao, aligeiramento e precariedade do trabalho pedaggico. Participantes: Luiz Carlos Novaes, Camila Cristina Leite

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Perfis excessivos: A construo Homem e da Tragdia.


Silva, G.I.; Moraes, W.Z. William Zeytounlian de Moraes - UNIFESP Guilherme Igncio da Silva - Francs Instrumental / Francs Instrumental

Resumo:

Ao ler-se atentamente obras teatrais trgicas de William Shakespeare, Christopher Marlowe e Jean Racine percebe-se o constante uso do excesso para o desenrolar das tramas e peripcias. A vida desregrada, a moral degradada, fatores biolgicos ou de fora superior levam as personagens a cometer atos errneos ou extremos que abrem caminho para o fim trgico de suas histrias. Seus comoventes destinos serviam de lio para o pblico dos sculos XVI e XVII. Antes de serem obras "universais" e reflexes atemporais sobre o humano, as tragdias de William Shakespeare so um espelho de idias e crenas da poca em questo (fim do sculo XVI e incio do XVII). As dez obras trgicas analisadas (Hamlet, Otelo, Macbeth, Rei Lear, Antnio e Clepatra, Titus Andronicus, Coriolano, Romeu e Julieta, Julio Csar e Timon de Atenas) documentam situaes comoventes geradas pelo desregramento de muitas personagens. Esse desregramento apresentado de vrias formas: o cime de Otelo, a misantropia de Timon, a melancolia de Hamlet, a loucura de Lear so alguns exemplos. Na maioria dos casos, se no em todos, esses comportamentos so frutos de fatores biolgicos: o excesso de certos humores. Essa afirmao evidenciada por trechos das prprias obras. Colricos, sanguneos, fleumticos e melanclicos revezam seus excessos nas tragdias de Shakespeare: para compreender a desmedida em suas peas preciso compreender os humores. A tragdia do Doutor Fausto, de Christopher Marlowe trata de outra forma de excesso: a ambio desmedida pelo saber. Como Satans caiu ao tentar se igualar a Deus ou como Ado e Eva se perderam na busca pela cincia, Fausto levado por Mefistfeles na sua tentativa de aguar seu engenho. A queda de Fausto um exemplo para os "prudentes" que sabem dela extrair lies. Alm de serem obras de alto teor potico, as tragdias de Jean Racine (em questo Ester, Fedra, Atlia, Andrmaca e Britnico) representam um marco na produo teatral francesa. Tecidas da melhor forma possvel (em mtrica e estilo nicos, dentro dosem moldes clssicos) suas personagens eram apresentadas na corte como exemplos da perdio pelo amor desmedido ou equivocado, da perigosa combinao entre afeto e poltica, dos perigos dos humores tirnicos (como os de Nero em Britnico). Seus dramas so intensos e suas personagens duplamente sutis e excessivas. Para melhor compreender o valor do excesso e a desmedida na sociedade da poca preciso ter em mente o ideal da busca constante pela medida, regramento e prudncia. A vida ntegra do atento corteso faz contrapeso s histrias de loucura e paixo das personagens dramticas. timas referncias de como se devia portar e se equilibrar o homem da poca esto presentes em manuais de conduta como O livro do Corteso, de Baldassare Castiglione; o Galateo, de Giovanni della Casa e a Arte da Prudncia, de Baltasar Gracin. A partir dessas referncias, compreende-se bem a importncia do exemplo criado pelas peas. To recorrentes nas cortes quanto os livros acima citados, as tragdias so, no final das contas, espcies de manuais de conduta. Didticos e ricos em exemplos, a funo dessas obras era deleitar e instruir. O excesso o artifcio que mostra o caminho da medida e a desmedida, o do regramento. Participantes: Guilherme Igncio da Silva, William Zeytounlian de Moraes

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Profetismo e ao poltica entre os Guarani dos sculos XVI e XVII: anlise etnolgica e etnohistrica
Sztutman, R.; Barbosa, F.B. Francisca Batista Barbosa - UNIFESP Renato Sztutman - Cincias Sociais / Cincias Sociais

Resumo:

O presente resumo o resultado parcial do projeto de pesquisa sobre o "Profetismo e ao poltica entre os Guarani dos sculos XVI e XVII: anlise etnolgica e etnohistrica", situados na bacia do Prata. Algumas questes especficas nortearam essa pesquisa; foram elas: 1. Quem eram os Guarani, no sculo XVI e XVII? Quem fala deles? 2. O que era o profetismo desses Guarani do sculo XVI e XVII? 3. Qual a relao entre esse profetismo e as chefias? 4. Qual o impacto da colonizao sobre o mundo Guarani? A partir da anlise de parte da bibliografia proposta possvel perceber como as migraes, os discursos sobre a Terra sem Mal, a liderana religiosa exercida pelos grandes xams ou pajs se agrupam sob o ttulo de profetismo. E ainda, a esses fenmenos se articulam elementos da ao poltica. Elementos esses interligados entre o funcionamento interno do modo de ser Guarani e entre a dinmica externa de resistncia ao poder colonial. A reviso das discusses clssicas de Hlne Clastres (1975), Maxime Haubert (1990), Bartomeu Meli (1993) e John Monteiro (1998) sobre a etnologia e a histria indgenas permitiu um aprofundamento do modo de ser guarani - no que concerne ao profetismo e ao poltica - dos sculos XVI e XVII. Alm desses autores citados, Ruiz de Montoya pea fundamental desse quebra-cabea (desse estudo); Conquista Espiritual a bibliografia primria dessa pesquisa Apesar dessa obra ser uma antropologia aplicada que busca tratar da implantao das redues, possvel extrair dessa obra com caracterstica fortemente ideolgicas, dados etnogrficos de grande importncia (conforme prope Sztutman, 2005). Embora Montoya seja o texto principal desse projeto de pesquisa, a anlise de sua obra ser feita posteriormente, na segunda parte desse estudo, a fim de que se chegue anlise sistemtica dessa obra com um profundo conhecimento sobre o tema e sobre as concluses daqueles que de certa forma dialogam - direto ou indiretamente - com Ruiz de Montoya. Na busca da reconstruo desse mundo dos Guarani antigos, essas vrias interpretaes possibilitaram uma nova avaliao do profetismo e da ao poltica entre os Guarani dos sculos XVI e XVII. Muitas dessas interpretaes se contrapem, embora em outros momentos se complementem. Por meio do debate entre os autores acima citados foi possvel perceber que o discurso proftico est presente tanto na origem quanto na destruio da sociedade ou do domnio poltico (conforme prope Sztutman, 2006:7). O que fiz no semestre foi uma preparao para a leitura do jesuta Ruiz de Montoya. Produzi resenhas, a partir de obras dos autores acima citados, no sentido de extrair dos textos lidos questes que sero na pesquisa objeto da reflexo. Questes essas pertinentes ao modo como os Guarani antigos vivenciaram a sua ao proftica. Participantes: Renato Sztutman, Francisca Batista Barbosa

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projeto de pesquisa UNIFESP 75 anos


Rezende, G.F.; Rodrigues, J. Gabriela De Rezende Ferreira - UNIFESP Jaime Rodrigues - Histria / Histria

Resumo:

Participei de um grupo de pesquisa, no mbito do curso de Histria da UNIFESP, que tinha como objeto de trabalho a histria da mesma Universidade, abordada de forma temtica e abrangendo desde de sua criao (1933) at os dias atuais. Desse grupo, fizeram parte quatro professores e foram escolhidos seis alunos de graduao, que ajudaram no levantamento de dados. Esse levantamento foi feito principalmente na documentao histrica existente nos arquivos da UNIFESP (campus Vila Clementino). Nesse trabalho, lidei com a documentao do curso de Enfermagem e, posteriormente, com alguns livros de atas da Congregao e do Conselho Universitrio, que se encontram no Arquivo da PROGRAD e do CeHFI. Meu trabalho consistiu na leitura e no fichamento desses livros, buscando evidncia referentes a seis tpicos pr-selecionados pelos professores. Trabalhei com documentos dos anos de 1946 a 1958 (na documentao do curso de Enfermagem) e de 1962 a 1974 (nos livros de Atas da Congregao). Tambm colaborei no levantamento dos arquivos, que buscava diagnosticar, dentre outras coisas, as condies em que os documentos esto guardados e quais documentos existem em cada arquivo da UNIFESP. Esses levantamentos serviram de base para a elaborao de um livro e do diagnstico dos arquivos, que servir para encaminhar recomendaes instituio para melhor preservar seu patrimnio documental. Participantes: Gabriela De Rezende Ferreira, Jaime Rodrigues

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So Paulo/Guarulhos. Trajetos e fluxos na construo de uma metrpole vivida e simblica


Barbosa, A.C.M.M.; Oliveira, C.A.B.L. Carolina Alves de Brito Lopes Oliveira - UNIFESP Andrea Claudia Miguel Marques Barbosa - Cincias Sociais / Cincias Sociais

Resumo:

Esse trabalho teve como objetivo principal pesquisar a sociabilidade construda nas linhas de nibus intermunicipais entre Guarulhos e So Paulo pois vimos nesses trajetos e na sociabilidade propiciada por eles um lugar privilegiado para construo de significado entre as duas cidades. O que essas pessoas carregam de uma cidade para outra? Que cidades simblicas elas constroem? Em busca desses objetivos foi realizado um trabalho de campo, utilizando como metodologia bsica a etnografia baseada na observao participante. A linha escolhida foi a Vila Any, que sai de So Paulo no terminal rodovirio Armnia. Foi feito ao mesmo tempo um estudo bibliogrfico, que seguiu pelo aprofundamento do tema da antropologia urbana e que tambm buscou informaes sobre o municpio de Guarulhos, atentando para o Bairro dos Pimentas (regio onde se situa o ponto final do nibus). Para tanto a participao no grupo de pesquisa urbana e visual (VISURB) coordenado pela professora Andra Barbosa, foi de grande importncia, como reforo do aprendizado terico e metodolgico de fazer pesquisa em antropologia urbana. Essa pesquisa tem como resultado um artigo/relatrio final, que busca abarcar as reflexes propiciadas por esta pesquisa, alm de dois ensaios fotogrficos. Participantes: Andrea Claudia Miguel Marques Barbosa, Carolina Alves de Brito Lopes Oliveira

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Sugestes, Benefcios e Dificuldades quanto Incluso de Crianas com Necessidades Especiais nas Unidades Municipais de Educao Infantil de Santos
Yamamoto, B.T.; Ide, M.G.; Silva, C.C.B. Beatriz Tieko Yamamoto Mariana Graziella Ide - UNIFESP Carla Cilene Baptista da Silva - Cincias da Sade /

Resumo:

Recentemente, o terapeuta ocupacional tem atuado em diferentes contextos educacionais com diversas funes, contribudo para a efetivao de uma educao inclusiva. Considerando que cabe ao terapeuta ocupacional no s encaminhar para a escola regular e atender a criana com necessidades educacionais especiais, mas sim que h necessidade de um trabalho conjunto entre a terapia ocupacional e a comunidade escolar, o presente estudo teve por objetivo identificar e caracterizar as sugestes, dificuldades e necessidades levantadas pelos orientadores educacionais de educao infantil do municpio de Santos, relacionadas s intervenes quanto ao processo de incluso escolar de crianas com necessidades educacionais especiais. Para tanto, participaram deste estudo 15 orientadores educacionais de Unidades Municipais de Educao Infantil de Santos, o que correspondeu a 75% do total. O instrumento de coleta de dados utilizado foi um questionrio semi-aberto, que possibilitou caracterizar os participantes da pesquisa e identificar sugestes e dificuldades quanto ao processo de incluso escolar. Os dados obtidos permitiram uma anlise qualitativa e quantitativa quanto s dificuldades e benefcios das crianas com necessidades educacionais especiais, assim como das dificuldades e sugestes dos profissionais da rea da educao quanto ao atual processo de incluso escolar. Os resultados apresentados neste estudo podero contribuir para a reflexo e implementao de aes que visem a melhoria da ateno especializada criana no seu processo de desenvolvimento, na aprendizagem e na incluso escolar. Aprovao no Comit de tica em Pesquisa No.: 1628/07 Participantes: Beatriz Tieko Yamamoto, Mariana Graziella Ide, Carla Cilene Baptista da Silva

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UNIFESP - 75 ANOS: Das origens federalizao


Nichterwitz, F.; Rodrigues, J. Fernanda Nichterwitz - UNIFESP Jaime Rodrigues - Histria / Histria

Resumo:

Apresentarei minha participao como pesquisadora auxiliar no programa "Unifesp 75 anos: Patrimnio Cultural e Perspectivas". Apresento breve resumo de minhas atividades no desenvolvimento do projeto: fichamentos de documentos da Inspetoria Federal de Medicina localizados no Arquivo da Pr-reitoria de Graduao; leitura de Atas da Congregao e do CTA; localizao e fichamento de balanos econmicos da EPM e do HSP; localizao de notas do jornal O Estado de So Paulo e Folha de So Paulo sobre a EPM/UFSP, encontradas em microfilmes disponveis no AESP (criao da EPM, criao da USP, fundao do HSP, federalizao da EPM); localizao de imagens de jornais sobre comemoraes de aniversrio da EPM para uso em exposio; transcries de entrevistas e diagnsticos de arquivos da UNIFESP, entre outros. Participantes: Fernanda Nichterwitz, Jaime Rodrigues

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UNIFESP 75 anos: patrimnio cultural e perspectivas


Soares, M.; Rodrigues, J. Mauricio Antunes De Oliveira Soares - UNIFESP Jaime Rodrigues - Histria / Histria

Resumo:

O Programa - UNIFESP 75 anos: patrimnio cultural e perspectivas - foi realizado ao longo do ano de 2007. A pesquisa foi feita com a participao de quatro professores do curso de Histria e seis alunos de graduao do mesmo curso. Entre os objetivos do projeto est a elaborao de um livro sobre a histria da UNIFESP. Na pesquisa, desempenhei as tarefas de transcrio de entrevistas realizadas pelos professores, com alguns depoentes que vivenciaram a formao e outros processos marcantes da histria da EPM, como a federalizao, a transformao em UNIFESP e a expanso, com a criao de novos campi e cursos. Tambm realizei pesquisas no CeHFI, para o reconhecimento e edio de fotografias, que foram selecionadas pelos professores, de acordo com os temas julgados relevantes para os temas da histria da EPM/UNIFESP. Alm do livro, essas fotografias iro integrar a exposio itinerante, que passaro pelos campi da UNIFESP, referente histria da instituio. Participantes: Mauricio Antunes de Oliveira Soares, Jaime Rodrigues

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Medicina Aplicada Ttulo:


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ADAPTAO TRANSCULTURAL DA ESCALA ASEX DE DISFUNO SEXUAL EM PACIENTES COM ESQUIZOFRENIA E TRANSTORNO ESQUIZOAFETIVO, VERSO EM PORTUGUS.
Bressan, R.A.; Dieckmann, L.H.J. Luiz Henrique Junqueira Dieckmann - UNIFESP Rodrigo Affonseca Bressan - Psiquiatria / Psiquiatria Clnica

Resumo:

Introduo: Disfunes sexuais podem ser relatadas em cerca de 52,6% dos pacientes com esquizofrenia .Por estarem ligadas diretamente qualidade de vida , h necessidade de instrumentos vlidos e confiveis para avaliar a disfuno sexual nesta populao. Objetivos: 1-Anlise da sensibilidade, especificidade e valores preditivos positivo e negativo da ASEX em pacientes com esquizofrenia ou transtorno esquizoafetivo (T.E.). 2 -Comparao com escala DGSFi (nica traduzida e validada para este tipo de doentes no Brasil).A escala ASEX foi traduzida para o Portugus, retrotraduzida e submetida ao teste-piloto. 3-Traar um panorama scio-demogrfico e de qualidade de vida dos pacientes entrevistados. Mtodos: Desenho transversal para avaliar as duas escalas (ASEX, DGSFi) com 125 pacientes preenchendo critrios para esquizofrenia ou T.E. pelo DSM IV. Alm disso, um questionrio scio-demogrfico e uma escala de qualidade de vida foram aplicadas. Resultados: 1-Dados scio-demogrficos e caractersticas clnicas dos pacientes do PROESQ (Unifesp): 74(59,2%) do sexo masculino; 51(40,8%) do sexo feminino; 100(80%) solteiros; 76(60,8%) brancos; 42(36,6%), com ensino mdio completo; 82(65,6%) vivem com os pais; 94(75,2%) esto desempregados; Mdia da idade: 36,5 (DP 9,9) anos; Renda mensal familiar mdia: 1962,00 reais (DP 1518,6) ;mdia de idade do incio dos sintomas: 13,2(DP 7,8) anos; Qualidade de Vida (valores de 0 a 10): 7,1 (DP 2,2). 2-ASEX uma escala sensvel (0,795 com 95% IC [0.688,0.871]) e especfica (0,885 com IC 95% [0,770, 0,946]) ;VPP (0,906 com 95% IC [0.810,0.956]) e VPN (0,754 com 95%IC[0.633,0.845]). Concluses: ASEX uma escala sensvel e especfica como a ferramenta DGSFi e pode ser utilizado como um instrumento capaz de detectar disfunes sexuais em pacientes com esquizofrenia ou T.E. .ASEX pode ser auto-aplicvel por ser de fcil entendimento, sendo usada em pessoas com ou sem parceiros sexuais, com tempo de realizao de menos de 5 minutos. Aprovao no Comit de tica em Pesquisa No.: 1036/06 Participantes: Rodrigo Affonseca Bressan, Luiz Henrique Junqueira Dieckmann

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Anlise da Evoluo Clnica de Pacientes com Craniofaringiomas submetidos Quimioterapia intracstica com Interferon Alfa
Costa, M.D.S; Ierardi, D.F.; Cavalheiro, S. Marcos Devanir Silva da Costa - UNIFESP Sergio Cavalheiro - Neurologia e Neurocirurgia / Neurocirurgia

Resumo:

Introduo e Objetivos: Os craniofaringiomas so tumores raros que acometem o eixo hipotlamo-hipofisrio. Apesar de sua natureza benigna, estes tumores possuem uma evoluo clnica maligna. As principais modalidades teraputicas propostas para este tipo de tumor so a resseco total, resseco parcial seguida de radioterapia, quimioterapia intracstica, a radioterapia. Nosso grupo descreveu a utilizao da citocina Interferon alfa (IFN-alfa) em quimioterapia intracstica para craniofaringiomas predominantemente csticos. O objetivo deste estudo foi analisar o estado geral dos pacientes diagnosticados com craniofaringiomas e tratados com quimioterapia intracstica utilizando o IFN-alfa. Materiais e Mtodos: Para o estudo foram selecionados os pacientes diagnosticados com craniofaringioma cstico e tratados com quimoterapia intracstica com INF-alfa. Para cada um dos pacientes foram levantados os dados clnico-patolgicos atravs da anlise dos pronturios arquivados no Servio de Arquivo Mdico. Resultados: Foram analisados os pronturios de 15 pacientes. As idades dos pacientes no incio do tratamento variaram de 3 a 15 anos e 77% dos mesmos eram do sexo masculino. As queixas iniciais foram: 41% cefalia, 33% cefalia e dficit visual, 13% dficit visual e 13% outras. Dos 15 pacientes, 13 foram submetidos ao tratamento com IFN-alfa e 2 pacientes que no o receberam foram submetidos cirurgia de resseco e completaram o tratamento com radioterapia, pois no possuam tumor com componente cstico maior que 60%. Dos 13 pacientes que receberam o tratamento a reduo no tamanho do tumor variou de 62 a 96%. Concluses: Nossos dados mostram um predomnio de pacientes do sexo masculino e apresentam principalmente cefalia e dficit visual. A reduo do tumor e a melhora dos sintomas revelam que o interferon alfa usado intratumoral pode ser mais uma forma de tratamento para este tipo de tumor. Aprovao no Comit de tica em Pesquisa No.: 1597/06 Participantes: Marcos Devanir Silva da Costa, Daniela Filipini Ierardi, Sergio Cavalheiro

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Autores: Bolsista: Orientador:

ANLISE DO COLGENO NO TECIDO UTERINO PR E PS-TRATAMENTO DE LEIOMIOMA UTERINO COM A TCNICA DE EMBOLIZAO DAS ARTRIAS UTERINAS
Dornelas Jr, G.O.; Bernardo, A.; Maganhin, C.C.; Yokoyama, C.; Ajzen, S.A.; Giro, M.J.B.C.; Simes, M.J.; Bonduki, C.E. Gilmar de Oliveira Dornelas Junior - UNIFESP Claudio Emlio Bonduki - Ginecologia / Ginecologia Endcrina e Climatrio

Resumo:

Introduo: Leiomioma uterino a neoplasia benigna mais prevalente em Ginecologia. A indicao do tratamento leva em considerao se os miomas ocasionam sintomas ou se tem comportamento de crescimento no decorrer do tempo. Histerectomia a tcnica consagrada para a terapia do mioma uterino. J o tratamento conservador pode ser expectante, medicamentoso, cirrgico (miomectomias), alm da Embolizao das Artrias Uterinas (EAU). Estudos recentes demonstram que a EAU procedimento eficaz, seguro e com alto grau de satisfao da paciente, o que a torna uma boa alternativa de tratamento para o leiomioma. Objetivo: Analisar as repercusses histomorfomtricas da EAU no tecido uterino, especialmente mediante quantificao de tecido colgeno, atravs de bipsia uterina pr e ps-tratamento de leiomioma uterino com a referida tcnica. Metodologia: Participaram do estudo 15 pacientes portadoras de leiomiomas sintomticos e/ou com infertilidade submetidas EAU, aps cincia do termo de consentimento livre e esclarecido, obedecendo aos critrios de excluso do estudo. Foi realizada bipsia uterina na fase secretria do ciclo menstrual atravs de cureta de Novak antes da EAU e 3 meses aps o procedimento, para avaliao do colgeno. Aps o processamento histolgico do material, foram feitos cortes de 3 micras, sendo alguns corados pela Hematoxilina e Eosina (H.E) e outros pela colorao especfica para fibras colgenas (Picrosirius-red). Em seguida, foi realizada a leitura e interpretao das lminas e a quantificao do colgeno. Para a captura das imagens utilizamos cmera de alta resoluo (AxioCam MRc - Zeiss) acoplada a microscpio (Zeiss) e a computador com ambiente Windows, contendo programa AxioVision 4.6 (Zeiss). A quantificao do colgeno foi efetuada em programa IMAGELAB 2000, sendo calculada como o percentual da rea composta por colgeno, e o resultado expresso em mdia desvio padro (DP). Os dados foram ento submetidos anlise estatstica pelo teste t-Student pareado ( p<0,05). Resultados: Nas lminas das bipsias realizadas antes do tratamento notamos a presena de clulas musculares lisas, em vrias orientaes, contendo ncleo volumoso e central. Estas clulas encontram-se rodeadas por rica trama de fibras colgenas que compem o tumor, vasos sanguneos e ncleos de fibroblastos. Nas lminas das bipsias realizadas aps o tratamento observamos a presena de necrose de coagulao difusa, trombose vascular, reas de calcificao e de infiltrao linfoplasmocitria e ntida diminuio do componente colgeno. A porcentagem de fibras colgenas foi maior no grupo pr-EAU (84,081,46) do que no grupo psEAU, (81,051,50), com p<0,0001, e intervalo de confiana de 95% (IC 95%) entre 2,080 e 3,827. Discusso: Os achados so coerentes com os relatos da literatura. O padro histolgico tpico, correspondente grande maioria dos ndulos leiomiomatosos, se caracteriza pela presena de amplos feixes de clulas musculares lisas entrelaadas em diferentes direes, sem atipias, necrose ou mitose, permeadas por quantidade varivel de vasos sangneos, fibroblastos e colgeno, seja intersticial ou formando faixas. Clulas musculares lisas so alongadas, com ncleos uniformes de bordas rombas e nuclolo pouco evidente. A EAU no tratamento dos leiomiomas promove necrose difusa, trombose vascular, calcificao distrfica, reao granulomatosa tipo corpo estranho, corpo estranho em vasos vizinhos ao tumor, focos de necrose no miomtrio circunjacente, e reao inflamatria no miomtrio vizinho, por vezes com a formao de microabscessos. Os leiomiomas so irrigados quase que totalmente pelas artrias uterinas, e o objetivo da EAU ocluir ambas artrias com mltiplos pequenos mbolos, compostos, nesse estudo, por microesfereas de gelatina tris-acryl, resultando em isquemia e retrao dos leiomiomas. Infarto e necrose uterina so complicaes possveis, mas pouco provveis, devido a abundante circulao colateral da pelve. Concluso: A reduo quantitativa e qualitativa do colgeno evidencia que o tratamento proposto eficaz em reduzir a massa tumoral, composta principalmente por fibras colgenas de permeio s clulas musculares lisas neoplsicas. Todavia, so necessrios estudos complementares a fim de se estudar a repercusso funcional e biolgicas dessas alteraes. Apoio: FAPESP Participantes: Gilmar de Oliveira Dornelas Junior, Andr Bernardo, Carla Cristina Maganhin, Claudio Yokoyama, Srgio Aron Ajzen, Manoel Joo Batista Castelo Giro, Manuel de Jesus Simes, Claudio Emilio Bonduki

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Autores: Bolsista: Orientador:

Anlise funcional de nova mutao no gene PAX-8 encontrada em pacientes com hipotiroidismo congnito
Maciel, R.M.B.; Micheletti, T.; Moraes, P.I.M. Talita Micheletti - UNIFESP Rui Monteiro de Barros Maciel - Medicina / Endocrinologia

Resumo:

Introduo:O hipotiroidismo congnito uma das doenas endcrinas mais comuns em crianas e o distrbio metablico congnito mais freqente na populao. Cerca de 85% dos casos so espordicos, contudo h corroborao de etiologia gentica em muitas apresentaes da doena. Quando o hipotiroidismo permanente, pode ser causado por disgenesia tiridea (agenesia, ectopia e hipoplasia), fatores iatrognicos (terapia materna com radioiodo) e distrbios hereditrios da sntese de hormnios da tiride (disormonognese). Internacionalmente, a deficincia de iodo a etiologia mais prevalente, porm, onde a oferta de iodo na dieta adequada, aproximadamente 85% das ocorrncias so devidas a disgenesia tiroidiana. Trs genes de fatores de transcrio esto claramente envolvidos com disgenesia da tiride, entre eles o PAX8. A deleo com perda de funo do PAX8 em heterozigose tem sido associada a hipotireoidismo congnito devido a disgenesia. O papel central do PAX-8 na organognese e na expresso de genes especficos da tireide est firmemente estabelecido. Conhecer os genes controladores do desenvolvimento da tiride e de sua sntese hormonal um passo fundamental para o entendimento desse distrbio congnito, tanto nos casos familiares como nos espordicos que apresentam caractersticas fenotpicas adicionais. Objetivo: Realizar a anlise funcional da nova mutao Arg52Pro/G155C, descoberta no gene PAX-8 de pacientes portadores de hipotiroidismo congnito.Materiais e mtodos: Foram elaborados primers contendo a nova mutao atravs do programa eletrnico QuikChange Primer Design Program. A nova mutao seria ento introduzida por mutagnese em bactrias XL1-Blue Cell conforme protocolo do kit Quik Change II de mutagnse stio-dirigida (Stratagene). Em seguida, seria transferida para clulas HeLa, o que possibilitaria avaliao da funo do gene mutado atravs de testes com enzima luciferase Renilla. Resultados: Os primers foram devidamente adquiridos e diversas tentativas do uso do kit de mutagnse foram realizadas, contudo sem sucesso. As bactrias (XL1-Blue Cell) que conteriam a mutao no cresceram aps tentativas de cultivo, mesmo depois de solicitao de troca do material junto ao laboratrio responsvel. Novas tentativas esto sendo empreendidas at o momento.Concluso: A anlise funcional do gene PAX-8 ficou prejudicada devido a dificuldades tcnicas, contudo, o projeto ainda est em andamento. Aprovao no Comit de tica em Pesquisa No.: 0722/06 Participantes: Rui Monteiro de Barros Maciel, Talita Micheletti, Pedro Ivo De Marqui Moraes

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Autores: Bolsista: Orientador:

ANLISE PROSPECTIVA DO TRANSPLANTE PENETRANTE DE CRNEA REALIZADO COM LASER DE FENTOSEGUNDO EM PACIENTES COM CERATOCONE
Simes, J.R.; Sousa, L.B.; Lindoso, E.M.S. Joice Regina Simes - UNIFESP Luciene Barbosa de Sousa - Oftalmologia / Oftalmologia

Resumo:

INTRODUO: O ceratocone uma doena corneana, que provoca ectasia e diminuio da acuidade visual, sendo uma das principais indicaes de transplante de crnea no mundo. Atualmente, pode-se utilizar como alternativa teraputica ao transplante penetrante de crnea convencional manual, o transplante com o laser de fentosegundo, na tentativa de diminuir complicaes e melhorar a recuperao visual. OBJETIVO: Analisar, prospectivamente, os resultados visuais e recuperao ps-operatria do transplante penetrante de crnea realizado com laser de fentosegundo em pacientes com ceratocone. METODOLOGIA: Foi realizado um estudo prospectivo, nico centro, nico cirurgio, randomizado com 60 pacientes (60 olhos) com ceratocone, com indicao de transplante penetrante para melhora da acuidade visual. Os pacientes foram randomizados em dois grupos de tratamento: Grupo 1. Ceratoplastia Penetrante com Laser Fentosegundo, inciso modelada na forma de cogumelo, com 1mm de lamela (9 e 7mm), corte anterior com angulao de 45, sem diferena entre doador/receptor. Sutura com 8 pontos separados e uma contnua (IntraLase Enabled Keratoplasty [IEK]) (n=30); Grupo 2. Ceratoplastia penetrante com trepanao a vcuo, com mesmo dimetro entre doador/receptor. Sutura com 8 pontos separados e uma contnua, (MPK) (n=30). As avaliaes ps-operatrias de 1, 7, 15 e 30 dias, 3 e 6 meses incluram medida da acuidade visual com a melhor correo, refrao, exame de biomicroscopia, presso intra-ocular, topografia de crnea, paquimetria, tomografia de coerncia ptica de crnea, microscopia especular e aberrmetria. Os pacientes foram avaliados por um nico observador. RESULTADOS: A anlise estatstica de todas as informaes coletadas nesta pesquisa foi realizada de forma descritiva, atravs do Teste t-Student, e mtodo de Bonferroni. Atravs desta encontrou-se que o comportamento mdio da Acuidade Visual dos indivduos do Grupo Intralase Enabled Keratoplasty ao longo do tempo estatisticamente o mesmo quando comparados aos indivduos do Grupo Ceratoplastia Penetrante com Trepanao a vcuo (p= 0,126). Os indivduos do Grupo Intralase Enabled Keratoplasty apresentaram valores mdios de Acuidade Visual menores que os indivduos do Grupo Ceratoplastia Penetrante com Trepanao a vcuo em todos os momentos de coleta (p<0,001). E quanto aos resultados das anlises inferenciais, constatou-se que os indivduos do Grupo1 apresentaram valores mdios de refrao dioptria esfrica (p=0,215), refrao dioptria cilndrica (negativo) (p=0,645), eixo do cilindro (p=0,320), paquimetria ultrassnica (p=0,510) e microscopia especular (p=0,217), estatisticamente iguais aos indivduos do Grupo 2. CONCLUSO: O presente estudo mostrou que os indivduos submetidos Ceratoplastia Penetrante com Laser Fentosegundo apresentaram valores mdios de Acuidade Visual menores, ou seja, melhor Acuidade Visual, quando comparados aos indivduos submetidos a Ceratoplastia Penetrante com Trepanao a vcuo em todos os momentos de coleta da informao. Aprovao no Comit de tica em Pesquisa No.: : 0466 Participantes: Joice Regina Simes, Luciene Barbosa de Sousa, Elissandro Mrcio Silva Lindoso

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Aspectos epidemiolgicos e evolutivos dos pacientes com sepse atendidos no pronto socorro do hospital So Paulo
Salomo, R.; Silva, J. Juliana da Silva - UNIFESP Reinaldo Salomo - Medicina / Infectologia

Resumo:

Objetivo: Caracterizar e descrever a evoluo do paciente sptico atendido no pronto socorro do hospital So Paulo de acordo com algumas caractersticas do prprio paciente e da infeco. Mtodos: Esse estudo foi realizado durante um perodo de sete meses, incluindo 80 pacientes adultos entre 18 e 90 anos, de qualquer etnia e sexo, e que foram admitidos no pronto socorro do hospital So Paulo com hiptese diagnstica de sepse, sepse grave e choque sptico. A primeira etapa consistiu em obter registros iniciais com os respectivos nomes, telefones, RHSP, idades e histrico clnico. Esses dados foram obtidos a partir da ficha preenchida na data de entrada do paciente no pronto socorro. Aps preenchimento dos dados iniciais da pesquisa, foram observados os critrios de sepse, sepse grave ou choque sptico e se naquele momento j havia suspeita de foco infeccioso. A segunda etapa, foi constituda de visitas dirias ao pronto socorro para serem colhidos os seguintes dados: presso arterial sistlica, freqncia cardaca, creatinina, uria, diurese, leuccitos, plaquetas, hematcrito, bilirrubina, glicemia, saturao de oxignio e lactato. Esses pacientes tiveram dados colhidos a cada sete dias at o desfecho de bito ou alta hospitalar. Resultados: Nesse estudo, a mediana da idade foi de 65,87 anos variando entre 25 e 87 anos apresentando desvio padro de 17,976 e predominncia do sexo masculino com 66,7% (n=53,36). A permanncia no pronto socorro foi de 8 dias em mdia, variando entre 2 e 14. Observou-se que, dentre os pacientes acompanhados no perodo, 6,7% (n= 5,36) evoluram para sepse grave e posteriormente para choque sptico e desses 100% (n= 5,36) foram a bito. O restante 93,3% (n=74,64) teve desfecho de alta. Quanto queles que tinham foco infeccioso determinado 53,4% (n=72), predominou foco pulmonar com 26,7% (n=21,36). Dentre as demais variveis observadas, as que tiveram mais relevncia foram: presso arterial sistlica teve mediana de 100, desvio padro de 25,87 variando ente 63 e 150 mmHg; freqncia cardaca teve mediana de 115, desvio padro de 18,89 variando entre 76 e 130 batimentos por minuto; creatinina variou entre 0,57 e 27,0 , teve desvio padro de 7,25 e mediana de 2,15mg/dL; leuccitos, 66,7% (n=53,36) no teve registro do dado, porm, 33,3% (n=26,64) teve valor maior que 12000 por microlitro de sangue; lactato, apenas 26,8% (n=21,44) teve esse registro que variou entre 12 e 30 mmol/L, tendo mediana de 22,5. Concluso: Esse estudo prospectivo mostrou que no pronto Socorro do Hospital So Paulo o paciente sptico apresenta o seguinte perfil: sexo masculino, vivendo a sexta dcada de vida e com foco infeccioso pulmonar. Quanto s variveis houve o aumento dos parmetros quanto aos nveis normais, como do lactato que apresentou aumento de cerca de dez vezes mais quanto quantidade aceitvel em repouso e da creatinina que apresentou aumento em cerca de trs vezes. Portanto, o paciente sptico necessita de cuidados e manuteno especiais, pois sua evoluo para sepse grave ou choque sptico pode lev-lo a bito. Aprovao no Comit de tica em Pesquisa No.: 1447.07 Participantes: Reinaldo Salomo, Juliana da Silva

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Associao do polimorfismo do gene do fator vascular de crescimento endotelial com a gravidez ectpica
Marconi, N.M.H.; Elito Jr, J. Natali Maiumi Higashi Marconi - UNIFESP Jlio Elito Jnior - Obstetrcia / Obstetrcia Patolgica e Tococirurgia

Resumo:

Entende-se como gravidez ectpica (GE), a implantao e o desenvolvimento do ovo fora da cavidade uterina. considerada doena de grande importncia por apresentar nmero crescente de manifestaes, por vezes de prognstico ominoso, e perspectiva atual de um possvel diagnstico precoce e realizao de condutas conservadoras. Mesmo com os avanos de mtodos com maior sensibilidade como as dosagens sricas da frao do hormnio gonadotrfico corinico (-hCG) e a ultra-sonografia transvaginal (USTV), o diagnstico pode no ser precoce, a ponto da GE evoluir com quadro grave de abdome agudo hemorrgico devido ruptura tubrea. O fator vascular de crescimento endotelial (VEGF) fator angiognico. Sua produo e secreo dependem de condies locais como hipxia, podendo ser induzido por fatores de crescimento e citocinas. Sabe-se que o ambiente tubrio menos vascularizado que o endometrial, dessa forma caso haja implantao tubrea, a produo e secreo do VEGF podem ser estimuladas a fim de acomodar a gravidez nesse ambiente desfavorvel. Mas no so todas as mulheres que, caso o concepto esteja em ambiente inapropriado para o seu desenvolvimento, apresentam implantao e incio do desenvolvimento embrionrio, evoluindo, assim, com GE. Pode-se sugerir, ento, que a GE ocorre naquelas nas quais o ambiente desfavorvel torna-se propcio para a implantao do ovo, ou seja, apresentam maior angiognese, talvez associada com variaes na manifestao do VEGF. Sabe-se que o gene do VEGF polimrfico, possuindo alterao na seqncia de base do DNA, resultando na apresentao de dois ou mais gentipos alternativos cuja freqncia de cada um deles superior quela que poderia ser mantida somente por mutaes recorrentes na populao. Dentre os identificados pode-se apontar o 634, o 936 e o 460. Como os estudos vem demonstrando que o VEGF tem papel importante no diagnstico da GE e que at o momento nenhum estudo relacionou o polimorfismo do gene do VEGF com a GE, buscando avaliar pacientes com maior risco, houve motivao para a realizao deste trabalho pioneiro. Dessa forma, levando-se em conta todas essas consideraes, o objetivo desse estudo avaliar se as variantes polimrficas do gene do VEGF podem estar associadas ocorrncia da GE, sendo a meta final estabelecer parmetros que auxiliem no diagnstico precoce da GE. Est sendo realizado um estudo prospectivo na qual os critrios de incluso so de pacientes com histria prvia de GE ou que esto em vigncia do quadro, com o diagnstico confirmado com a associao da dosagem srica de -hCG e USTV, ou no intra-operatrio (grupo GE), e a seleo de mulheres na psmenopausa que no tiveram GE e apresentaram pelo menos duas gravidezes e que essas tenham sido normais (grupo C). At o momento foram selecionadas 55 pacientes para o grupo GE em acompanhamento no Ambulatrio de Gravidez Ectpica da Universidade Federal de So Paulo (UNIFESP), e em paralelo foram selecionadas 25 mulheres para o grupo C, em acompanhamento no Ambulatrio de Climatrio da UNIFESP. Esse projeto foi aprovado pela FAPESP, da qual houve obteno de recursos para aquisio de materiais e reagentes para a realizao do projeto no Laboratrio de Obstetrcia da UNIFESP. Aps as pacientes concordarem em participar do estudo e assinarem o termo de consentimento aprovado pelo comit de tica em pesquisa da UNIFESP, foram coletados 10 ml de sangue em puno venosa a fim de separar as clulas polimorfonucleadas e posteriormente obter a extrao de DNA pela tcnica DTAB/CTAB. A seguir realizada a reao em cadeia de polimerase (PCR) para a determinao dos polimorfismo de VEGF, com a definio dos primers para identificao de cada polimorfismo. Aps a realizao do PCR, foi realizada a digesto enzimtica, com aplicao do produto em gel de agarose 3% para posterior eletroforese e anlise do gel em transluminador de luz ultravioleta, identificando os fragmentos no gel das diferentes amostras. Foi escolhido inicialmente avaliar o polimorfismo 936 seguindo o protocolo descrito por Papazoglou. Podem ser definidos os gentipos CC (com deteco de um fragmento de 208bp); CT (com deteco de fragmentos de 208 bp, 126 bp, 86 bp); e TT (com deteco de fragmentos de 126 bp e 86 bp). At o momento os dados obtidos so preliminares. J foi extrado o DNA das 80 amostras coletadas e a anlise do polimorfismo de VEGF 936 de 35 amostras do grupo GE (gentipo CC em 31 amostras; gentipo CT em 4 amostras ; gentipo TT em nenhuma amostra) e de 6 amostras do grupo C (gentipo CC em 4 amostras; gentipo CT em 2 amostras; gentipo TT em nenhuma amostra). Ainda no foi realizada anlise estatstica por haver baixa amostragem do grupo C. Como metas a cumprir pode-se apontar a complementao na seleo de amostras do grupo GE e do grupo C, desejando-se alcanar 80 amostras de cada grupo; proceder extrao de DNA de todos os casos novos; completar a genotipagem do polimorfismo do gene do VEGF 936; iniciar o estudo do gentipo para os polimorfismo do gene do VEGF 634 e 460; analisar os resultados obtidos; e elaborar manuscrito para publicao. Aprovao no Comit de tica em Pesquisa No.: 1612/07 Participantes: Natali Maiumi Higashi Marconi, Jlio Elito Jnior

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Autores: Bolsista: Orientador:

Associao entre arritmias cardacas e calcificao coronariana em pacientes com doena renal crnica
Nishimi, A.Y.; Marcassi, A.P.; Cassiolato, J.L.; Lemos, M.M.; Jancikic, A.D.B.; Draibe, S.A.; Carvalho, A.B.; Sanches, F.M.R.; Santos, R.D.; Canziani, M.E.F. Alexandre Yukio Nishimi - UNIFESP Maria Eugnia Fernandes Canziani - Medicina / Nefrologia

Resumo:

Introduo: Calcificao coronariana um preditor de eventos cardiovasculares e de mortalidade em pacientes com doena renal crnica (DRC). Arritmia cardaca uma importante causa de mortalidade nessa populao. Objetivo: O objetivo desse estudo foi investigar a associao entre a presena de calcificao coronariana e de arritmia em pacientes com DRC em fase pr-dialtica. Mtodos: 108 pacientes com DRC acompanhados no ambulatrio de uremia foram includos (clearance de creatinina = 33,7(12.7-94.4)mL/mim). Todos os pacientes foram avaliados atravs de tomografia computadorizada multi-slice e ECG de 24 horas. Calcificao coronariana foi definida por escore de clcio maior que 10UA. Taxa de variabilidade cardaca foi avaliada utilizando os valores de SDNN e pNN50. Resultados: O grupo de pacientes com calcificao era mais velho, predominantemente homens, apresentava alta prevalncia de diabetes, arritmias e menor taxa de variabilidade da freqncia cardaca. No houve diferena entre os grupos quanto raa, durao de tratamento, clearance de creatinina, e taxas anormais de conduo e repolarizao como mostram os dados a seguir. Dados referentes, respectivamente, aos pacientes sem calcificao,com calcificao e p. O n: 55 (sem calcificao) e 53 (com calcificao);Idade (anos): 55 (27-71), 61 (41-79)e <0,001. Sexo (masculino/feminino): 21M / 34F, 43M/ 10F e <0,001; Raa (n/%branco): 30 (55), 25 (47) e 0,44. Diabetes (n/%); 11 (20), 23 (43) e 0,09. Durao do tratamento (ms): 22 (3-192), 16 (3-178) e 0,72. Clearance de creatinina (ml/min): 32,8 (13,4-94,4), 36,3 (12,7-80,5) e 0,66. PAS total (mmHg): 122 (101-185), 129 (96-168) e 0,14. PAD total (mmHg): 79,1 10,5, 78,3 11,6 e 0,73. PAS viglia (mmHg): 126,9 15,6, 131,1 17,3 e 0,19. PAD viglia (mmHg): 80 (60-111); 78 (58-110) e 0,43. PAS sono (mmHg): 117 (88-77), 124,5 (94-171) e 0,09. PAD sono (mmHg): 73 (56-106), 74,5 (53-111) e 0,60. Descenso noturno sistlico (%): 6,5 (-15-17), 4 (-9-18) e 0,24. Descenso noturno diastlico (%): 6,7 8.2, 4,5 7,9 e 0,17. SDNN (ms): 112,3 36.4, 104 36,8 e 0,24. SDNN Anormal(n/%): 3 (5), 3 (6) e 1,00. pNN50 (%): 6,5 (0-29.7), 3,1 (0-30.1) e 0,10. PNN Anormal (n/%): 26 (47), 35 (66) e 0,049. Arritmia Ventricular (n/%): 4 (7), 13 (25) e 0,01. Arritmia Supraventricular (n/%): 7 (13), 19 (36) e 0,005. conduco anormal (n/%): 1 (2), 4 (8) e 0,20. repolarizao anormal (n/%): 1 (2), 4 (8) e 0,36. Concluso: Houve uma associao entre calcificao coronariana e arritmia ventricular em pacientes com DRC o que pode contribuir para o aumento da taxa de mortalidade nessa populao. Aprovao no Comit de tica em Pesquisa No.: 0545/05 Participantes: Alexandre Yukio Nishimi, Aline Pantano Marcassi, Jos Luiz Cassiolato, Marcelo Montebello Lemos, Alessandra Dias Barbosa Jancikic, Sergio Antonio Draibe, Aluzio Barbosa de Carvalho, Fabiana da Mota Ribeiro Sanches, Raul Dias Santos, Maria Eugnia Fernandes Canziani

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Medicina Aplicada Ttulo:


Autores: Bolsista: Orientador:

AVALIAO DA ADERNCIA PRECAUES DE CONTATO PARA BACTRIAS MULTIRRESISTENTES EM UNIDADE DE TERAPIA INTENSIVA
Medeiros, E.A.S.; Gomes, A.L.; Angelieri, D.B.; Bakowski, E. Andria Latanza Gomes - UNIFESP Eduardo Alexandrino Servolo de Medeiros - Medicina / Infectologia

Resumo:

A resistncia microbiana um grave problema no mundo. Sabe-se que vrios fatores contribuem para seu desenvolvimento sendo o mais importante a falha dos profissionais de sade na aplicao de medidas de controle para limitar a disseminao de microrganismos resistentes a diversos antibiticos. A principal forma de transmisso destes agentes por contato direto do profissional da rea da sade (PAS) com o paciente atravs das mos. Objetivos: Avaliar a adeso s precaues de contato por PAS em uma Unidade de Terapia Intensiva (UTI) de um hospital universitrio no atendimento a pacientes colonizados/infectados por microrganismos multi-resistentes (MMR); analisar o conhecimento dos PAS s medidas de preveno para transmisso de MMR; e avaliar a aplicao de um programa educativo para a preveno da transmisso de MMR. Casustica e mtodo: O estudo foi desenvolvido na Unidade de Terapia Intensiva da Anestesiologia localizada no 60 andar do Hospital So Paulo (HSP-UNIFESP). A unidade possui 12 leitos de cuidados intensivos para pacientes ps-cirurgias e clnicos. Em setembro de 2007 aplicamos um questionrio aos profissionais da unidade para avaliar seu conhecimento sobre MMR e precaues de contato. Realizamos ento observaes durante os meses de outubro e novembro de 2007 para avaliar a adeso s precaues de contato para pacientes colonizados/infectados com MMR preconizadas pela Comisso de Controle de Infeco Hospitalar do HSP-UNIFESP. Observamos a higienizao das mos antes e aps o contato com pacientes, o uso de luvas de procedimento, avental descartvel e instrumento individual/desinfectado. As observaes foram realizadas durante 30 minutos, trs vezes/semana, trs turnos de trabalho. Avaliamos a adeso s precaues por turno e categoria profissional, que padronizamos como grupos A (tcnicos/auxiliares de enfermagem), B (enfermeiros), C (fisioterapeutas) e D (mdicos). Entre 12/2007 e 02/2008 realizamos uma interveno com o objetivo de melhorar a adeso dos PAS s precaues recomendadas. Fixamos na UTI e distribumos para cada profissional informativo sobre precaues de contato para MMR. Realizamos aulas na prpria unidade usando lbum seriado e divulgando os dados das observaes. Novas observaes esto sendo realizadas no perodo de maro a abril de 2008. Resultados: As freqncias da adeso dos PAS s precaues de contato no atendimento a pacientes colonizados ou infectados por MMR, coletadas na primeira observao, mostram que h falhas. A higienizao das mos antes do contato (N=153 oportunidades) foi a menos praticada. No perodo da manh houve adeso de 57,9% do grupo A, 75% do grupo B, 66,7% do grupo C e 33,3% do grupo D. No perodo da tarde, a adeso do grupo A foi de 67,4%, do grupo B de 50%, do grupo C de 69% e a do grupo D foi 83,3%. noite as taxas caram: 52,6%, 33,3%, 25% e 25% respectivamente para os grupos A, B, C e D. Por outro lado, o uso de luvas de procedimento (N=275 oportunidades) e de artigos individualizados/desinfectados (N=257 oportunidades) tiveram as maiores freqncias de adeso pelos PAS. Para o uso de luvas houve adeso pela manh de 92,2% do grupo A, 100% do B, 87% do C e de 100% do grupo D. tarde a adeso foi de 78,1% do grupo A, 86,7% do grupo B, 85,7% do grupo C e 83,3% do grupo D. noite a adeso para os grupos A, B, C e D foi respectivamente de 83,3%, 80%, 80% e 25%. Sobre o uso dos artigos, o grupo A teve adeso de 96,9% pela manh, 76,6% tarde e 95,8% noite; a adeso do grupo B foi de 100% pela manh, 62,5% tarde e 100% noite; no grupo C aderiram 82,6% de manh e de tarde e 80% noite; a adeso do grupo D foi de 66,7% pela manh, 100% tarde e 50% noite. Observamos que o avental descartvel (N= 257 oportunidades) foi mais empregado nos momentos de banho, sendo seu uso por vezes negligenciado durante pequenos procedimentos de rotina. Por fim, a higiene das mos aps o contato com o paciente (N= 215 oportunidades) teve adeso no perodo da manh de 76,8% , 71,4%, 86,4% e 100% para os grupos A, B, C e D respectivamente. tarde, a adeso foi de 75,4% no grupo A, 73,3% no B, 71,4% no C e 66,7% no D. noite a adeso foi de 79,5% do grupo A, 77,8% do grupo B, 100% do grupo C e de s 33,3% do grupo D. Concluso: O estudo mostrou que h falhas no uso das precaues de contato principalmente no perodo da noite, e que a precauo menos utilizada foi higienizao das mos antes do contato com pacientes enquanto as mais empregadas foram uso de luvas e de artigos individualizados/desinfectados. As freqncias indicam que a categoria que menos utilizou as precaues foi de mdicos. Como os questionrios ainda esto sendo analisados, no h dados conclusivos sobre o conhecimento prvio dos profissionais sobre MMR e precaues de contato. O segundo perodo de observaes est sendo realizado e esperamos melhora dos indicadores de aderncia dos profissionais a prticas de preveno de infeco/colonizao por MMR aps a interveno que utilizou medidas educacionais. Aprovao no Comit de tica em Pesquisa No.: 1576/07 Participantes: Eduardo Alexandrino Servolo de Medeiros, Andria Latanza Gomes, Daniela Bicudo Angelieri, Elcio Bakowski

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Avaliao da cicatrizao de ferimentos em pacientes em uso de Isotretinona oral para tratamento da acne.
Almeida, F.A.; Guadanhim, L.R.S.; Bagatin, E.; Yarak, S. Lilia Ramos dos Santos Guadanhim - UNIFESP Fernando Augusto de Almeida - Dermatologia / Dermatologia Geral

Resumo:

A acne vulgar dermatose inflamatria crnica da unidade pilossebcea, sebo-dependente e imunomediada. doena multifatorial e sua etiopatogenia inclui: hiperqueratinizao folicular, aumento da produo de sebo estimulada pelos andrgenos, colonizao bacteriana do folculo pelas propionibactrias, resposta imunolgica inata e adquirida com liberao de mediadores da inflamao. altamente prevalente em jovens de ambos os sexos, com pico de ocorrncia entre 12 e 18 anos. As formas mais graves causam impacto psico-social, afetando negativamente a qualidade de vida dos adolescentes. Da a importncia do tratamento precoce. A isotretinona oral utilizada h 30 anos e, pela extensa literatura dispon;ivel, mantendo-se como padro ouro para o tratamento das formas moderada a severa. nica droga que permite remisso prolongada ou a cura da acne vulgar. Nos anos 80 e 90 surgiram relatos de casos sobre a possvel influncia da isotretinona no processo de cicatrizao da pele, aumentando o risco de cicatrizes hipertrficas e quelides. Esta suposio, nunca suficientemente comprovada, mantm contraindicado o tratamento das cicatrizes da acne conseqentes s formas inflamatrias, aps o trmino do uso da isotretinona em perodo inferior a 6 a 12 meses. Como no existem estudos especficos confirmando ou no a relao entre o uso de isotretinona oral e a ocorrncia de cicatrizes hipertrficas ou quelides, o objetivo deste projeto foi avaliar a cicatrizao de feridas em pacientes em uso de Isotretinona oral para o tratamento da acne vulgar. A abordagem das cicatrizes deprimidas da acne exige combinao de tcnicas, tais como: exciso cirrgica, dermabraso, peelings qumicos, laser entre, etc. A dermabraso foi a tcnica escolhida neste estudo por ser simples, de baixo custo e pelos seus resultados satisfatrios. O projeto foi delineado como estudo de interveno teraputica, prospectivo, aberto, no randomizado. Foram includos sete pacientes, em uso de isotretinona oral para tratamento da acne vulgar, acompanhados no Ambulatrio de Dermatologia - UNIFESP. Os sujeitos da pesquisa foram examinados, com enfoque nas cicatrizes deprimidas da acne localizadas na face. Foi selecionada uma rea de 1x1 cm para realizao de dermoabraso. O procedimento foi efetuado, aps assepsia, com anestesia infiltrativa local e utilizao de lixa dgua estril, at o surgimento de orvalho sangrento. Em seguida foi realizado curativo com a pelcula Duoderm, mantido por 48 horas. Os pacientes foram orientados a evitar exposio solar. A evoluo da ferida foi acompanhada em quatro visitas, ou seja, 7, 30, 90 e 180 dias aps o procedimento, com registro fotogrfico. Como resultados preliminares, nas visitas de 7 e 30 dias, observou-se excelente evoluo das feridas, com reepitelizao normal. No houve, at o momento, diferenas no padro de cicatrizao nesses pacientes em relao ao observado, na prtica diria, naqueles submetidos dermabraso realizada seis meses ou mais aps a suspenso da isotretinona oral. Portanto, este estudo parece no confirmar a hiptese de que a isotretinona oral possa influir na cicatrizao de feridas. Dessa forma, poder sugerir que seja revista a orientao sobre a necessidade de se aguardar esse perodo para iniciar a abordagem das cicatrizes deprimidas da acne, aps o trmino do tratamento com isotretinona oral. Aprovao no Comit de tica em Pesquisa No.: 175/07 Participantes: Fernando Augusto de Almeida, Lilia Ramos dos Santos Guadanhim, Edilia Bagatin, Samira Yarak

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Autores: Bolsista: Orientador:

Avaliao da disciplina Observao da Prtica Mdica pelos graduandos de medicina da Unifesp Escola Paulista de Medicina
Schor, P.; Rampim, D.B.; Plens, J.A.; Silva, J.F.R. Danielle Bianchini Rampim - UNIFESP Paulo Schor - Oftalmologia / Oftalmologia

Resumo:

INTRODUO: Os primeiros anos do curso de medicina so marcados pela aquisio terica do conhecimento atravs das cadeiras bsicas, fazendo com que os estudantes permaneam muito distantes da prtica mdica podendo gerar, no futuro, problemas como dificuldades em conciliar suas necessidades pessoais quelas relacionadas sua formao profissional. Sabe-se que necessrio treinar o afeto do mdico nas relaes por ele estabelecidas e isso depende de modelos de humanizao durante o ensino mdico. comum se observar que um grande nmero de alunos no percebe a manifestao de qualidades humansticas nas relaes com pacientes ou colegas por parte de seus professores, bem como no os entendem como um bom modelo no ensino da relao mdico-paciente. Visando uma aproximao progressiva do aluno prtica mdica, atravs de um conhecimento real da relao mdico-paciente nos diversos ambientes da rea de sade e do entendimento dos alunos sobre essa relao, o curso Observao da Prtica Mdica (OPM) ministrado no 1 semestre do 1 ano da graduao de medicina na UNIFESP - Escola Paulista de Medicina. Atravs dele permitido ao aluno desenvolver a capacidade de observar, como um telespectador, os defeitos e qualidades a serem assimilados dos encontros observados, permitindo uma integrao desde o incio da formao entre a sala de aula e o campo de atuao mdica. Desta forma, o estudante de medicina um observador nos vrios cenrios do Complexo Assistencial da UNIFESP, nos quais se realizam atendimentos a pacientes. OBJETIVO: O estudo avaliou a influncia imediata e ao longo do tempo da disciplina OPM sobre a vivncia prtica dos graduandos de medicina do 1 ao 3 anos da UNIFESP, analisando a mudana na percepo desses em relao disciplina. MTODO: Utilizamos como ferramenta metodolgica um questionrio com 5 questes de mltipla escolha e 3 questes abertas, elaboradas pelos autores. Participaram 30 estudantes do 1 ao 3 anos da graduao mdica da UNIFESP (ano letivo 2006), sendo 10 de cada ano, sorteados aleatoriamente. As questes foram fornecidas antes do incio ou ao trmino de uma aula regular, sendo que os alunos receberam um termo de Consentimento Livre e Esclarecido antes de respond-las. Os dados foram digitados em planilhas do Excel 2000 for Windows para adequado armazenamento e anlise estatstica das informaes, sendo as questes abertas categorizadas aps anlise dos dois autores e consenso entre eles sobre as categorias. RESULTADOS E DISCUSSO: Constatamos que para 68% dos alunos a disciplina OPM contribuiu para o melhor conhecimento da estrutura da UNIFESP e para 19% foi significativa no acolhimento emocional, sendo a diferena mais significativa observada do 2 para o 3 ano, onde o conhecimento da estrutura passou de 60% para 80% e o acolhimento emocional passou de 30% para 10%. Quando questionados em relao importncia da OPM em sua formao, em uma escala de 0 (menos importante) a 5 (mais importante), 37% dos alunos responderam 3(trs), 23%, 2(dois) e 20%, 4(quatro), sendo que em nenhum dos anos a disciplina foi considerada sem importncia alguma (nota 0). A nota 4 predominou no 1 ano (60%) e houve o aparecimento da nota mxima nos 2 e 3 anos. Em relao contribuio da OPM para sua atitude frente ao paciente, utilizando a mesma escala, 33% dos alunos responderam 2(dois), 27%, 3(trs) e 27% responderam 4(quatro), sendo que a avaliao melhorou com o passar dos anos, saindo dos 40% de nota 3 no 1 ano para 50% de notas acima de 3 no 3 ano. Quando questionados sobre o momento adequado da administrao do curso OPM, pelo menos 80% dos alunos das trs sries pensam que o curso deve continuar sendo ministrado apenas no 1 ano da graduao, postura mais evidente com o avanar dos anos. A OPM aumentou o conhecimento de: 70% dos estudantes sobre a estrutura da UNIFESP, 33% sobre os pacientes, 30% sobre os colegas e professores, 27% sobre si mesmo e 17% sobre seu conhecimento mdico. 40% dos entrevistados relataram que a vivncia que mais contribuiu para sua formao durante a disciplina foi a visita ao Centro Obsttrico devido ansiedade e curiosidade dos alunos nesse momento do curso relatando grande envolvimento emocional. Por outro lado, a vivncia que menos contribuiu para sua formao foi visitar a UBS (17%) e realizar discusso aps as visitas (13%). O curso proporcionou: conhecimento da prtica mdica (43%), atividade prtica dentro de um curso essencialmente terico (37%), conhecimento da relao mdicopaciente (23%). Para 23% dos participantes, o objetivo da OPM foi conhecer a estrutura da UNIFESP. A principal sugesto ao curso foi continuar a discusso aps a visita (17%) e a principal crtica foi a necessidade de se realizar relatrios na disciplina (17%). CONCLUSO: Houve uma modificao na percepo dos alunos do curso de medicina a respeito do curso OPM sob diversos aspectos, ao longo de sua formao. Aprovao no Comit de tica em Pesquisa No.: 01728/06 Participantes: Paulo Schor, Danielle Bianchini Rampim, Juliana Augusta Plens de Moura Garcia, Julieta Freitas Ramalho Silva

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Autores: Bolsista: Orientador:

AVALIAO DA EFETIVIDADE DO MTODO PILATES NA MELHORA DA DOR E QUALIDADE DE VIDA DE PACIENTES COM LOMBALGIA MECNICO-POSTURAL CRNICA
Natour, J.; Alves, S.W.C.R. Srgio Willians Crispim Ribeiro Alves - UNIFESP Jamil Natour - Medicina / Reumatologia

Resumo:

Introduo - a lombalgia uma doena extremamente freqente em pases industrializados e apresenta elevado ndice de incapacidade e morbidade, sendo de alta relevncia tanto mdica como socioeconmica. Vrias intervenes teraputicas, medicamentosas e no medicamentosas esto atualmente disponveis para a abordagem dos pacientes; a maior parte delas so inefetivas. Objetivo - avaliar a efetividade do mtodo Pilates na dor e qualidade de vida de pacientes com lombalgia mecnico-postural crnica. Hiptese - esperamos que o mtodo Pilates seja eficiente na melhora da dor e qualidade de vida destes pacientes em relao queles que se mantm somente com tratamento medicamentoso. Podendo assim, comprovar a eficincia do mtodo, servindo como terapia complementar no tratamento de pacientes com lombalgia mecnico-postural crnica. Material e Mtodo: 1.Tipo de estudo: ensaio clnico, controlado, randomizado, com avaliador cego e seguimento de cento e oitenta dias. 2.Seleo: sero selecionados 60 pacientes, de ambos os sexos, entre 18 e 65 anos, com diagnstico de lombalgia mecnico-postural crnica h mais de 12 semanas e dor medida pela escala visual analgica (de 0 a 10) entre 4 e 7. Pacientes com fibromialgia, cirurgia prvia, litgio, IMC > 30 kg/m, que tenham iniciado alguma atividade fsica, fisioterapia ou acunpultura no ltimos 30 dias no podero ser includos no projeto. 3. Randomizao: os pacientes selecionados sero randomizados atravs de uma tbua de randomizao gerada eletronicamente em dois grupos, grupo experimental e grupo controle. 4. Procedimentos: o grupo experimental ir realizar aulas de Pilates, que sero ministradas duas vezes por semana durante 50 minutos por noventa dias e o grupo de controle ficar em lista de espera por cento e oitenta dias. Ambos os grupos sero orientados a fazer uso de diclofenaco de sdio 50mg conforme a necessidade, at o consumo mximo de 4 comprimidos dirios. 4. Procedimentos: as avaliaes sero administradas logo aps o inicio do estudo e 45, 90 e 180 dias depois. Para a avaliao sero utilizados a escala visual e analgica para dor, a escala de Likert, o questionrio Roland-Morris, o questionrio SF-36 e a contagem do consumo de AINH. 5. Anlise estatstica: utilizaremos para anlise estatstica os testes t-student, ANOVA de mltipla entrada e x. Andamento do projeto - o estudo encontra-se na fase de incluso de pacientes e ainda no temos resultados suficientes para anlise. Aprovao no Comit de tica em Pesquisa No.: 1136/06 Participantes: Jamil Natour, Srgio Willians Crispim Ribeiro Alves

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Avaliao da eficcia de um programa de educao em pacientes com Lpus Eritematoso Sistmico atendidos em um servio pblico
Sato, E.I.; Zanovello, W.G. Willey Gonalves Zanovello - UNIFESP Emilia Inoue Sato - Medicina / Reumatologia

Resumo:

Introduo: O LES uma doena inflamatria crnica, sistmica, de etiologia multifatorial, que afeta principalmente mulheres jovens. Tem manifestaes polimrficas e evoluo crnica, com fases de exacerbaes e perodos de remisses. O tratamento deve ser orientado de acordo com o rgo afetado, e, alm dos medicamentos, deve incluir orientaes gerais sobre a doen-a e cuidados para se evitar fatores associados reativao. Estudos de pases desenvolvi-dos tm mostrado melhora do prognstico nas ltimas dcadas. Acesso aos medicamentos, conhecimento sobre a doena e adeso ao tratamento so fatores importantes no desfecho da doena. Vrios trabalhos mostram a eficcia da educao dos pacientes (EP) no aumento do conhecimento da doena e na melhora da qualidade de vida dos pacientes. Entretanto, h poucos estudos na literatura mundial avaliando a eficcia dos programas educacionais em pacientes com LES, e, no Brasil, a literatura ainda mais escassa. Objetivos: Avaliar a eficcia de um programa de educao de pacientes com LES atendidos em um servio pblico e avaliar se h correlao entre anos de estudo e conhecimento sobre a doena e comprometimentos mais graves e melhor conhecimento sobre a doena. Pacientes: Os pacientes da sala de espera de atendimento do ambulatrio de Doenas Reu-mticas Auto-imunes do HSP/UNIFESP foram convidados a participar do estudo, caso possu-ssem o diagnstico de LES. Foram excludos pacientes com distrbio cognitivo que impedisse o entendimento do questionrio e menores de 18 anos. Aps reviso do pronturio, os pacien-tes que no preenchessem 4 critrios do Colgio Americano de Reumatologia para classifica-o de LES foram excludos da anlise. Mtodos: Foi construdo um questionrio para avaliar o conhecimento da doena, em seus diversos aspectos. O questionrio foi inicialmente aplicado em 10 pacientes com LES para verificar sua compreenso. As perguntas no compreendidas por no mnimo 90% dos pacien-tes foram modificadas e reaplicadas at a obteno do questionrio final. As primeiras 52 pa-cientes que aceitaram o convite e confirmaram presena, por ocasio do contato telefnico, constituram o grupo I. As 84 pacientes que confirmaram presena para a 2 aula constituram o grupo II. No dia previamente estabelecido os pacientes responderam ao questionrio (pr-teste), e, posteriormente, assistiram aula, preparada em multimdia, com durao de uma hora, abordando os principais aspectos da doena. Alm da aula, os pacientes do grupo II tambm receberam um livro sobre a doena. Aps 4 semanas os pacientes responderam o mesmo questionrio (ps-teste). Foram realizadas revises dos pronturios mdicos para a busca de dados relativos doena. Os nmeros de acertos intra e inter-grupos foram compa-rados, utilizando o teste de Mann-Withney. Valores de p <0.05 foram considerados significan-tes. Resultados: Apenas 23 pacientes do grupo I compareceram aula. Duas pacientes que no preencheram os critrios do ACR foram excludos. Dezoito pacientes (16 mulheres e 2 ho-mens, mdia de idade de 36,2 10,35 anos; anos de estudo de 7,2 4,05 anos e tempo de doena de 7,3 5,7anos) responderam aos dois testes. Quarenta e um dos 84 pacientes do grupo II compareceram aula. Sete pacientes que no preencheram os critrios do ACR foram excludos. Vinte e dois pacientes (todas do sexo feminino, com mdia de idade de 42,9 15,09 anos, tempo de estudo de 9,1 2,89 anos e tempo de doena de 11,2 8,8 anos) responderam os dois testes. A mdia de acertos do grupo I no pr-teste foi de 35,6% e no ps de 58,5%, sendo essa diferena estatisticamente significante (p<0,001). No grupo II, a mdia de acertos no pr-teste foi de 43,5% e de 71,4% no ps, sendo esta diferena tambm significante (p<0,001). A diferena no nmero mdio de acertos entre o grupo I e II no pr-teste, 35,6% e 43,5% respectivamente, no foi estatisticamente significante (p= ....). A % de melhora mdia do grupo I foi de 24%, enquanto a do grupo II foi de 27%, com um p=0,389. Discusso/concluso: Os resultados acima revelaram que a aula foi eficaz, pois proporcionou um aumento significativo no nmero de respostas corretas dos dois grupos, e consequente-mente, um aumento do conhecimento dos pacientes sobre o lpus a curto prazo. Entretanto, no houve diferena significante entre a melhora do grupo I em relao ao grupo II, mostrando, neste estudo, que o livro no aumentou o conhecimento dos pacientes. Aprovao no Comit de tica em Pesquisa No.: 1020/07 Participantes: Emilia Inoue Sato, Willey Gonalves Zanovello

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Autores: Bolsista: Orientador:

Avaliao da evoluo temporal da presena de metalo--lactamases em amostras de Pseudomonas aeruginosa isoladas no Hospital So Paulo no perodo de 1997 a 2006.
Nicoletti, A.G.; Gales, A.C. Adriana Giannini Nicoletti - UMESP Ana Cristina Gales - Medicina / Infectologia

Resumo:

Introduo: P. aeruginosa a principal causa de infeces relacionadas assistncia sade, principalmente nas unidades de terapia intensiva, sendo os carbapenens os agentes mais potentes para o tratamento dessas enfermidades. Entretanto, a prevalncia de resistncia aos carbapenens nesta espcie vem aumentando mundialmente. A produo e disseminao de enzimas que inativam os carbapenens, conhecidas como metalo--lactamases (MBLs) adquiridas, um dos fatores que contribuem para o aumento destas taxas. Existem seis diferentes classes de genes j identificados que codificam MBLs adquiridas: blaIMP, blaVIM, blaSPM-1, blaGIM-1, blaSIM-1 e blaAIM-1. Inmeras variantes de IMP e VIM vem sendo reportadas em vrias partes do mundo, enquanto as outras trs tipos encontram-se restritos ao Brasil, Alemanha, Coria e Austrlia, respectivamente. Objetivo: Avaliar a evoluo temporal da presena das MBLs em amostras de P. aeruginosa isoladas no Hospital So Paulo no perodo de 1997 a 2006. Material e Mtodos: Foram avaliadas 231 amostras de P. aeruginosa resistentes aos carbapenens isoladas no Hospital So Paulo neste perodo. O teste de hidrlise foi realizado com o objetivo detectar a atividade enzimtica nestas amostras, e a PCR e o seqenciamento foram realizadas para a deteco de genes codificadores de MBLs nas amostras positivas ao teste de hidrlise. As amostras de P. aeruginosa que possuam a mesma classe de MBLs foram avaliadas pela tcnica de PFGE para determinar a existncia de amostras geneticamente relacionadas. O RFLP dos integrons das amostras produtoras de IMP foi realizado para a anlise da disseminao horizontal destes genes. Resultados: Das 231 amostras analisadas, 32% eram produtoras de MBLs, sendo que destas, 86,5% carreavam o gene blaSPM-1. Este gene est distribudo em todo o perodo analisado, com maiores ndices nos trs ltimos anos do estudo. O gene blaIMP-1 (13,5%) foi encontrado somente a partir do anos de 2004. No ano de 1998 no foi encontrada nenhuma amostra produtora de MBL. Nas amostras de P. aeruginosa produtoras de SPM-1 foram encontrados somente 2 perfis genticos, sendo que o perfil A (n=24) possua 10 subtipos diferentes. O PFGE das amostras produtoras de IMP-1 revelou uma disseminao clonal, com somente duas amostras sendo similares, entretanto, o RFLP dos integrons revelou que dentre as amostras pertencentes ao mesmo clone (n=8) havia a ocorrncia de trs integrons diferentes. Concluso: A emergncia da produo de MBL por isolados de P. aeruginosa no Hospital So Paulo aconteceu em 1997, sendo observado o determinante de resistncia blaSPM-1. A freqncia de MBLs em isolados clnicos de P. aeruginosa resistentes ao carbapenens nesta instituio durante o perodo de 1997 a 2006 foi de 32%, sendo que 86,5% e 13,5% destas amostras eram produtoras de SPM-1 e IMP-1, respectivamente. Entre as amostras que carreavam o gene blaSPM-1 houve o predomnio de um perfil gentico com vrias cepas similares, enquanto que a 8 das 10 amostras que possuam o gene blaIMP-1 eram pertencentes ao mesmo clone, sendo que a aquisio do integron contendo este gene ocorreu aps a disseminao deste clone no hospital. Aprovao no Comit de tica em Pesquisa No.: 1689/07 Participantes: Adriana Giannini Nicoletti, Ana Cristina Gales

XVI Congresso de Iniciao Cientfica da UNIFESP 2008

Medicina Aplicada Ttulo:


Autores: Bolsista: Orientador:

Avaliaao de desempenho dos testes de Kent, Wilson e Mini-Exame do Estado Mental na prediao dos escores da Wechsler Adult Intelligence Scale (WAIS-III) em pacientes psiquitricos.
Santilli, A.L.M.; Malta, S.M.; Marin, J.C.M.; Lacerda, A.L.T. Andr Luiz Medeiros Santilli - UNIFESP Acioly Luiz Tavares de Lacerda - Psiquiatria / Psicologia Mdica e Psiquiatria Social

Resumo:

Introduo: Existem na literatura evidncias de que pode haver certa degradao do nvel intelectual em transtornos psiquitricos crnicos, como a esquizofrenia e transtornos afetivos, de onde surge a hiptese de que esta caracterstica faa parte da histria natural da doena. A caracterizao objetiva do nvel intelectual exige avaliao neuropsicolgica a partir testes padronizados com propriedades psicomtricas - dentre eles, o mais difundido o Wechsler Adult Intelligence Scale-Terceira Edio (WAIS-III) - aplicados somente por psiclogos devidamente treinados. Objetivos: Desenvolver novos instrumentos de avaliao de inteligncia para rastreamento de pacientes psiquiatricos com suspeita de dficit intelectual, que sejam de fcil e breve aplicao, adequados para o uso rotineiro em avaliaes mdicas. O presente estudo pretende avaliar a validade de trs escalas de inteligncia: MiniExame do Estado Mental (MMSE), Escala de Kent e Escala de Wilson - como preditores do nvel intelectual aferido pelo WAIS-III. Material e Mtodos: O grupo de estudo, em anlise, consiste em uma amostra de convenincia de 46 pacientes com diagnstico de esquizofrenia que freqentam o ambulatrio do Programa de Esquizofrenia (PROESQ), da Universidade Federal de So Paulo. Todos esto sendo submetidos aplicao do WAIS-III, por psicloga treinada, alm do MMSE, Escala de Kent e Escala de Wilson, por acadmico do 6 ano de Medicina e escala de sintomas por psiquiatra. A fim de avaliar a validade dos testes de Kent, Wilson e MMSE, esto sendo gerados os coeficientes de correlao intra-classe (CCI) por anlise varincia (ANOVA ICC) entre o nvel intelectual estimado pelos testes e o nvel intelectual determinado pela WAIS-III. Dados clnicos - como tempo de evoluo de doena, idade de incio, tipo e dosagem de medicaes em uso e os escores gerados em uma escala de funcionamento social e ocupacional tambm esto sendo correlacionados com o nvel intelectual. Resultados: Dados preliminares ainda esto em processo de anlise. Esperamos que resultados conclusivos sejam obtidos at a apresentao no presente congresso. Discusso: Como perspectiva de continuidade do trabalho h a possibilidade de incluir novos grupos de estudos, para validao dos testes em diferentes populaes homogneas de pacientes psiquitricos. Aprovao no Comit de tica em Pesquisa No.: 0806/07 Participantes: Andr Luiz Medeiros Santilli, Stella Maria Malta, Joao Carlos Martinez Marin, Acioly Luiz Tavares De Lacerda

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Medicina Aplicada Ttulo:


Autores: Bolsista: Orientador:

Avaliao de Freqncia de Arritmias Cardacas em Pacientes com Apnia do Sono


Paola, A.A.V.; Salvadori, P.S. Priscila Silveira Salvadori - UNIFESP Angelo Amato Vincenzo de Paola - Medicina / Cardiologia

Resumo:

A sndrome da apnia/hipopnia obstrutiva do sono (SAHOS) tem grande incidncia na populao geral e pode ser potencial fator de risco para doenas cardiovasculares. Caracteriza-se por obstruo completa recorrente das vias area superiores durante o sono, resultando em dessaturao de oxihemoglobina e despertares noturnos freqentes, com conseqente sonolncia diurna. No h consenso nos resultados encontrados na literatura, mas acredita-se que a queda na saturao de oxignio durante os episdios de apnia um importante fator desencadeante de arritmias cardacas nos pacientes portadores da sndrome. O presente trabalho teve como objetivo determinar a freqncia de arritmias cardacas ventriculares e supra-ventriculares, em pacientes com apnia do sono comparados com grupo controle. Os participantes foram submetidos ao holter de 24 horas aps avaliao clnica, exames laboratoriais, ECG, teste ergomtrico e ecocardiograma. Em anlise parcial, 211 pacientes foram analisados, sendo 163 portadores de SAHOS e 138 controles. O IMC foi significativamente maior no grupo portador da doena (p=0,001865). O ronco foi observado em 88,34% dos pacientes e 68,12% dos controles, p=0,000051 Em relao s arritmias cardacas, o holter detectou alguma anormalidade do ritmo em 25 pacientes (15,34%), enquanto que no grupo controle apenas 15 pacientes apresentaram essa anormalidade (p=0,000166). Concluso: Na amostra estudada, o grupo com SAHOS apresentou maior IMC, maior ocorrncia de roncos e arritmias cardacas, quando comparados com o grupo controle. Apoio: CNPq e FAPESP Participantes: Angelo Amato Vincenzo de Paola, Priscila Silveira Salvadori

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Medicina Aplicada Ttulo:


Autores: Bolsista: Orientador:

Avaliao de longo prazo dos pacientes submetidos hemipelvectomia interna sem reconstruo.
Herrero, A.P.; Garcia Filho, R.J.; Maia Viola, D.C. Antonio Paulo Herrero - UNIFESP Reynaldo Jesus-Garcia Filho - Ortopedia e Traumatologia / Ortopedia e Traumatologia

Resumo:

O objetivo da pesquisa realisar a avaliao de longo prazo dos pacientes submetidos hemipelvectomia interna sem reconstruo no setor de Ortopedia e Traumatologia(DOT) da Universidade Federal de So Paulo(UNIFESP) no periodo de 1 de janeiro de 1990 a 31 de dezembro de 2006.Foram avaliados, de forma retrospectiva,29 pacientes submetido cirurgia e os dados(sexo,idade na data da cirurgia,ossos acometidos,diagnstico antomo-patolgico,tipo de cirurgia realizada,comprometimento ou no da coluna,complicaes ps-operatrias,padro de marcha ps-operatrio,dor ps-operatria, leso neurolgica e recidiva local) foram tabulados, na planilha eletnica Exell(Microsoft co.) e posteriormente analisados.A principal importncia do estudo avaliar os resultados do tratamento cirrgico de resseco tumoral dos ossos da pelve realizados pelo departamento,com isso espera-se identificar quais foram os maiores acertos e as maiores complicaes dos mtodos teraputicos realizados. Participantes: Antonio Paulo Herrero, Reynaldo Jesus-Garcia Filho, Dan Cara Maia Viola

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Medicina Aplicada Ttulo:

AVALIAO DE SEGUIMENTO DE PACIENTES USURIOS E/OU DEPENDENTES DE LCOOL E DROGAS - ESTUDO DAS DIFICULDADES E POSSIBILIDADES ENCONTRADAS DURANTE SEGUIMENTO
Souza-Formigoni, M.L.O.S.; Marra, C.E.B. Carlos Eduardo Borges Marra - UNIFESP Maria Lucia Oliveira de Souza Formigoni - Psicobiologia / Medicina e Sociologia do Abuso de Drogas

Autores: Bolsista: Orientador:

Resumo:

Introduo: A terapia cognitivo-comportamental tem sido uma das modalidades mais utilizadas nas ltimas dcadas para tratamento da dependncia de substncias psicoativas. Alm disso, pesquisas sobre o processo de recada tm apontado que um dos primeiros obstculos que o indivduo enfrenta, na tentativa de manter sua meta, a exposio a uma situao de risco. Objetivos: Dar continuidade ao follow-up (FUP) de pacientes que participaram do Protocolo VII (estudo comparativo entre terapias cognitivo-comportamental individual e familiar); analisar, qualitativamente, as principais dificuldades do seguimento; e realizar um levantamento e classificar as principais causas de recadas relatadas pelos pacientes durante o tratamento. Metodologia: O estudo foi realizado utilizando pronturios de 124 pacientes dependentes de lcool e de outras drogas, atendidos entre 1999 e 2005 na UDED. Os grupos foram acompanhados no seguimento, utilizando-se dois instrumentos: ASI (Addiction Severity Index) e FUPAbandono. Realizou-se tentativa de contado, atravs de telefonemas, para todos pacientes. Resultados: Dos 124 pronturios de pacientes, excluram-se 67 pacientes que no apresentaram contatos viveis (FUP-Impossvel) e classificou-se os pacientes entre grupo I, tratados, e grupo II, no tratados. Do grupo I, 12 pacientes apresentaram contatos negativos, 3 contatos positivos e 4 tiveram FUP-Finalizado (21,1% do grupo I). O nmero mdio de tentativas para os pacientes com contato negativo foi de 4,3 contatos. Os pacientes com FUP-Finalizado apresentaram entrevista com durao mdia de 45,5 minutos e o consumo de lcool e outras drogas, no ltimo ms, foi limitado, tendo 1 paciente apresentado recada no consumo de lcool. Do grupo II, 21 pacientes apresentaram contatos negativos, 4 contatos positivos e 13 tiveram FUP-Finalizado (34,2% do grupo II). Desses ltimos, a durao mdia das entrevistas foi de 16,4 minutos, no tendo 4 pacientes apresentado recadas; dos demais, um tero apresentou 1 recada, 33,3%, de 5 a 7 recadas e o restante, mais de 10 recadas. Dentre as causas de recada, so referidos uso em razo de impulsos e/ou tentaes, emoes agradveis e/ou desagradveis e conflito com outras pessoas. Desses 13 pacientes, 46,2% afirmaram que seus problemas com lcool e drogas esto melhores e 38,5% disseram no ter mais problemas. Consideraes: Avalia-se que as principais dificuldades encontradas no FUP sejam decorrentes do abandono do seguimento pelos pacientes, refletido na ausncia de contatos viveis e em contatos negativos. Participantes: Maria Lucia Oliveira de Souza Formigoni, Carlos Eduardo Borges Marra

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Autores: Bolsista: Orientador:

Avaliao do efeito de concentrado de soja na apoptose de clulas CD34 positivas da medula ssea e correlao com a clnica em indivduos com Sndrome Mielodisplsica
Viana, T.A.O.F.; Chauffaille, M.L.L.F. Thiago de Almeida Oliveira Felippe Viana - UNIFESP Maria de Lourdes Lopes Ferrari Chauffaille - Medicina / Hematologia e Hemoterapia

Resu