SANGRE

Dr Eduardo Kremenchutzky

FUNDACION HECTOR ALEJANDRO BARCEL FACULTAD DE MEDICINA

GUIA DE TRABAJOS PRACTICOS

TEJIDO SANGUINEO

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SANGRE La sangre es un tejido conectivo especializado derivado del mesnquima como todos los dems , constituido por los ELEMENTOS FIGURADOS y por una sustancia intercelular llamada PLASMA SANGUNEO. Conserva su fluidez cuando circula por vasos con paredes ntegras. Al salir del vaso al lesionarse la pared (endotelio) se produce el mecanismo de la coagulacin. Est constituido por a) PLASMA: formado por sustancias orgnicas inorgnicas. Tiene color amarillento.

b) ELEMENTOS FIGURADOS Son las clulas de la sangre y los derivados celulares 1- GLBULOS ROJOS ERITROCITOS HEMATIES 2- GLBULOS BLANCOS LEUCOCITOS Polimorfo nucleares NEUTRFILO EOSINFILO BASFILO Mononucleares MONOCITOS LINFOCITOS 3- PLAQUETAS TROMBOCITOS

ERITROCITOS o HEMATIES Son clulas muy diferenciadas que no tienen Ncleo , MITOCONDRIAS , NI ERGASTOPLASMA, es decir, carecen de la mayora de los organoides. Todos estos elementos los pierde la clula precursora antes de pasar a la sangre. En preparados de sangre fresca tienen forma aplanada de frente y de perfil forma de disco bicncavo.

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Tamao : El tamao in vivo es de 7,8 un de dimetro , 2,6 mu de espesor mximo y 0,8 mu de espesor mnimo . En los preparados histolgicos vara de acuerdo al mtodo utilizado . El color in vivo es amarillento, mientras que en preparados teidos es acidfilo. Nmero : hombre : 5.400.000/mm3 (+ 600.000) mujer : 4.800.000/mm3 (+ 600.000) Estructura Est formado por una membrana plasmtica sobre la cual hay un complejo enorme de sustancias , entre otras , las determinantes de los grupos sanguneos . Estos Ag de superficie forman parte de una molcula glucoprotica de la membrana del eritrocito denominada Glucoforina . En el interior tiene enzimas , electrolitos , agua y la hemoglobina , protena conjugada responsable del color y formada por la globina + el hemo. Las enzimas pertenecen a la gluclisis anaerbica y al ciclo de las pentosas , entre otras . Presenta una matriz citoplasmtica algo densa por el alto contenido en Fe de la Hb. No presenta ribosomas , mitocondrias ni retculo endoplasmtico. Pueden observarse debajo de la membrana plasmtica vesculas claras que contienen una protena filamentosa y contrctil : la espectrina.

Dibuje un glbulo rojo con el MO.

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Vida de los eritrocitos : Viven 120 das . Se destruyen por fagocitosis en el bazo, mdula sea hgado . Funcin del eritrocito : Transporte de O2 desde los capilares hasta los tejidos y el CO2 desde los tejidos a los capilares alveolares. La Hb realiza sta funcin . Citoesqueleto del glbulo rojo Se conoce ms acerca de la membrana del glbulo rojo que de la de cualquier otra clula . Se han encontrado en la misma 15 protenas mayores , tres de las cuales constituyen el 60 % del total . Ellas son espectrina glicoforina protena banda 3 Espectrina Es una protena perifrica asociada al lado citoplasmtico de la bicapa lipidica . Es el principal constituyente del citoesqueleto del eritrocito que mantiene la forma de disco bicncavo . Glicoforina Se encuentra solo en los glbulos rojos .

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Protena banda 3 Su nombre deriva de la posicin que ocupa en la electroforesis de las protenas del glbulo rojo . Es integral de pasaje mltiple . Su funcin es permitir el pasaje de CO2 para que el glbulo rojo lo transporte , adems de fijar el citoesqueleto .

RETCULOCITOS Son un estadio en la maduracin de los eritrocitos y se encuentran normalmente en la sangre en una cantidad del 0,5 al 1% del total de glbulos rojos. Su aumento indica una intensa actividad eritropoytica de la mdula sea que es el sitio donde se producen los glbulos rojos.

GLBULOS BLANCOS LEUCOCITOS Se los divide segn los grnulos especficos con tincin de mezcla tipo Romanowsky en : TIPO DE LEUCOCITO Polimorfo nucleares SUBTIPOS Neutrfilos Eosinfilos Basfilos Monomorfonuclear es Linfocito Monocito

Nmero 5.000 a 10.000/mm3 entre todos. En el recin nacido las cifras son ms elevadas (20.000/mm3). Muerte de las clulas blancas de la sangre . Todos los das mueren billones de neutrfilos en el humano para ser renovados . El mecanismo por el cual se produce la muerte es desconocido en su mayora pero se ha visto que las clulas sufren una serie de cambios denominados apoptosis a diferencia de las clulas que mueren accidentalmente que sufren la llamada necrosis . La apoptosis consiste en que el ncleo de la clula se arruga condensa y fragmenta hasta que la clula muere . Luego son fagocitadas por los macrfagos sin que se produzca

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derrame de dicho componente de la clula muerta ni respuesta inflamatoria siendo el mecanismo mucho ms eficiente que el de la necrosis . Una vez dentro del macrfago los componentes qumicos de la clula muerta son reutilizados . Los macrfagos reconocen una clula que debe morir por apoptosis debido a cambios en la composicin qumica de la superficie celular . Los macrfagos producen y secretan una protena llamada trombospondina que establece un puente entre los macrfagos y la clula que debe morir ; por este mecanismo el macrfago reconoce a una clula que est pidiendo ser eliminada . Hay cuatro mecanismos similares en estudio en resumen la muerte de las clulas se produce por la activacin de un programa intracelular suicida que es reconocido por los macrfagos los cuales las fagocitan y desensamblan .

NEUTRFILO Ncleo : lobulaciones : 3 a 5 . La forma ms comn es trilobular (45%). Tambin hay formas bilobulares (35%) tetralobulada (17%) pentalobulada (2%) y en cayado (5%) . Los neutrfilos en cayado y bilobulados constituyen las "formas juveniles" , que en caso de estar aumentadas constituyen la llamada "desviacin a la izquierda" del hemograma. En las mujeres en algunos neutrfilos (30 por ciento) se puede ver el palillo de tambor (DRUMSTICK) que corresponde al "Cromosoma X" . En la parte central del ncleo predomina la eucromatina , mientras que en la parte perifrica predomina la heterocromatina . Los de ms de 5 lbulos se llaman hipersegmentados y son viejos . Cromatina densa. Los lbulos estn unidos por puentes delgados de cromatina. Citoplasma : Tiene grnulos neutrfilos que se clasifican de varias formas , en primarios , secundarios y , terciarios .

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Haga un dibujo del neutrfilo con el MO.

Tipos

20% Primarios inespecficos tipo A

Caracterstica s son azurfilos (color salmn) . Son lisosomas

Tamao mayor . ovoides de elevada densidad electrnica.

Contenido Contienen hidrolasas cidas mieloperoxidasa (bactericida) y defensinas (similares a anticuerpos)

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Secundarios 80% especficos tipo B

Son ms menor abundantes que los primarios. Presentan aspecto pulverulento , grisceo . Son grnulos bactericidas

Contienen fosfatasa alcalina , colagenasa , lisozima (protenas bactericidas)

terciarios

Fosfatasas y metaloporoteinas . Actan en la migracin de la clula

Permanencia en la sangre : estn en la sangre horas y luego pasan a los tejidos donde viven varios das ; luego mueren y son fagocitados por los histiocitos . Tienen gran capacidad anaerbica , por lo que pueden vivir sin oxigeno ms que otras clulas . Funcin : Defensa antibacteriana . Es un micrfago. Participan en la inflamacin , constituyendo la primera ola de clulas que llegan al sitio agredido . Son capaces de fagocitar bacterias que tengan en la superficie algn ligando , como la IgG , las posoninas y el complemento srico , que son molculas que se unen a la bacteria y permiten que el neutrfilo se fije a ella a travs de receptores que tiene en su membrana plasmtica . No fagocitan bacterias a las que no se pueden unir . Una vez que fagocitan las bacterias agresoras les vuelcan los agentes antibacterianos que poseen en los grnulos especficos . Producen H2O2 y ion superoxido O2+ que son bactericidas . La lisozima ataca la pared celular de las bacterias . La lactoferrina les saca el hierro para que mueran . Luego actan los grnulos inespecficos , que son lisosomas , que terminan con la destruccin de la bacteria . Despus de la fagocitosis mueren por que se quedan sin energa constituyendo el pus . Otras propiedades : son el ameboidismo , la diapdesis y el quimiotactismo. El neutrfilo luego de 4-10 horas de ser incorporado a la circulacin sale de

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ella por medio de emisin de pseudpodos o ameboidismo , atravesando la pared vascular probablemente por accin enzimtica. De sta forma pasa al espacio extravascular continuando sus movimientos ameboides sobre el sustrato fibrilar del tejido conectivo, cumpliendo funcin de defensa. La diapedesis es la propiedad de entrar y salir de los capilares sanguneos . El quimiotactismo es la capacidad de ser atrados por sustancias qumicas . Nmero por mm3: 6.500 Porcentaje del total de glbulos blancos : 62-65

BASFILO Ncleo Puede ser oval , esfrico o escotado y a veces bilobulado con cromatina laxa ; cuando hay puentes de cromatina sta es gruesa. En general el ncleo se tie algo menos que el de los otros granulocitos. Son los leucocitos que se encuentran en menor cantidad . Tiene heterocromatina perifrica y eucromatina central . Citoplasma Presenta granulaciones muy grandes , que llegan a tapar al ncleo , basfilas . La membrana tiene receptores para las IgE . Grnulos GRANULOS caracterstica contenido ESPECIFICOS Grandes muy densos Histamina Heparina leucotrienos INESPECIFICOS lisosomas Enzimas hidrolticas

Funcin

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Vuelcan el contenido de los grnulos a la sangre con efectos vaso activos y anticoagulantes. Son similares en su funcin (pero no son la misma clula) a los mastocitos del tejido conectivo y al igual que ellos fijan en su superficie IgE , que se produce luego de la primera entrada de un antgeno . Si ese antgeno entra por segunda vez , se une con la IgE formada anteriormente y como consecuencia se libera el contenido de los grnulos , ocasionando reacciones relacionadas con la alergia . Nmero por mm3: 100 - 2/mm3 Porcentaje del total de glbulos blancos : 0 a 2 % Haga un dibujo del basfilo con el MO.

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EOSINFILO Ncleo : en la mayora de los casos (68%) es bilobulado , con un puente de cromatina delgada. Puede no ser lobulada (6%) y en casos raros tener 4 lbulos (4%) . Tienen eucromatina central y heterocromatina perifrica . Citoplasma : Presenta granulaciones

GRANULOS contenido

ESPECFICOS O 2 Protenas toxicas sobre los parsitos Protenas que neutralizan a las de los basfilos

INESPECFICOS O 1 Enzimas hidrolticas

Funcin caracterstica

Antiparasitarios digestin Contienen un cuerpo Son lisosomas cristaloide

Funcin: fagocitosis y neutralizacin de complejos Ag-Ac disminuyendo la intensidad de las reacciones alrgicas . Limitan la inflamacin Llegan a la zona por diapdesis. Son atrados por sustancias de los mastocitos denominados factores quimio tcticos eosinoflicos .Neutraliza los efectos de la histamina , leucotrieno C , serotonina y bradiquinina (es antagonista del basfilo y mastocito). Defensa frente a parsitos .

Vida media : Estn 3 a 8 horas en la sangre y luego pasan a los tejidos , sobre todo la piel , pulmn y aparato digestivo . Aumentan en la sangre a la maana y disminuyen a la tarde . Nmero por mm3 : 200-400/mm3 . Porcentaje del total de glbulos blancos : 1-5%

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Haga un dibujo del eosinfilo con el MO.

MONOCITO Ncleo : excntrico con una escotadura . Cromatina laxa A veces se puede ver uno ms nuclolos. En la escotadura se encuentra el centriolo y el aparato de Golgi . Se diferencian originando a todos los macrfagos tisulares Citoplasma : dbilmente basfilo con grnulos pequeos azurfilos que son lisosomas . Haga un dibujo del monocito con el MO.

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Nmero por mm3: 400 - 800/mm3. Porcentaje del total de glbulos blancos : 4-8%. Vida media : estn 3 das en la sangre , luego salen de ella y viven hasta aos en el tejido conectivo . Funcin : migran al espacio conectivo extravascular por diapdesis y all se transforman en macrfagos , actuando sobre virus , hongos , bacterias , partculas extraas y clulas envejecidas. Recordar que el monocito es la clula representante del Sistema Retculo Histiocitario Sistema de Fagocitos mononucleares en la sangre. Se encuentran entonces en trnsito entre su origen en la mdula sea y los tejidos donde se dirigen , permaneciendo en la sangre slo unos 3 das . Tambin actan en la inmunidad al concentrar antgenos y mostrrselos a los linfocitos . LINFOCITO

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Es un grupo de clulas sumamente complejas que se estudiaran en profundidad en el captulo de inmunidad . Aqu solo veremos las caractersticas generales Ncleo : grande y redondeado , cromatina densa Citoplasma : Tiene una delgada cubierta de citoplasma poco basfilo y con algunos grnulos azurfilos que corresponden a lisosomas de contenido . NO tiene grnulos especficos , por eso es un agranulocito

Haga un dibujo del linfocito con el MO.

Tipos de linfocitos T : actan en la inmunidad celular o Citotxicos o Helper o supresores B : actan en la inmunidad humoral NK : destruyen clulas infectadas y tumorales

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En la sangre hay 70% de LT y 30% de LB. Son clulas inmunocompetentes circulantes que reconocen y responden a antgenos , como estudiaremos en el captulo de inmunidad Nmero por mm3 : 2.500/mm3 . Porcentaje del total de glbulos blancos : 25% . Medida : 6 a 18 um como promedio . En los tejidos hay linfocitos chicos , medianos y grandes . En la sangre slo hay pequeos y medianos .

PLAQUETAS TROMBOCITOS Estructura : son segmentos citoplasmticos irregulares con tendencia a la forma oval. Dimetro de 2 a 3 um. Se pueden ver conglomeradas o aglutinadas en el frotis Haga un dibujo de una plaqueta con el MO.

Regiones de las plaquetas

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1) Hialmero: Es la zona perifrica plida llamada hialmera y carece de organoides pero puede poseer vesculas. Se encuentra el citoesqueleto 2) Crommero Granulmero : Es la zona central granular de la plaqueta Al MICROSCPIO ELECTRNICO el grnuloplasma posee organoides (mitocondrias glucgeno algunos ribosomas etc.) . Contiene grnulos alfa, delta y lambda .

Con el microscopio electrnico se observa en la membrana perforaciones que son la desembocadura de un sistema de conductos interno . Debajo de la membrana plasmtica hay un haz marginal de microtubulos que mantiene la forma convexa de la plaqueta . En el citoplasma estn los grnulos , micro tbulos densos , mitocondrias y glucgeno . Origen : Se originan por desprendimiento citoplasmtico del megacariocito en la Mdula sea. El megacariocito se fragmenta debido a la aparicin de mltiples invaginaciones de la membrana plasmtica que forman canales de demarcacin en el citoplasma . Luego las membranas plasmticas invaginadas se fusionan , fragmentndose el citoplasma , que constituye las plaquetas .

Ciclo vital La vida media es de 3-8 das. Se destruyen en el bazo. (La funcin del bazo incluye tambin la destruccin de Glbulos Rojos que han cumplido su vida media. Funcin : actan en la coagulacin

Nmero por mm3: 200.000 a 250.000 (algunos autores citan hasta 500.000). Tamao : 2 um . Suelen encontrarse agrupadas . Migracin de los glbulos blancos

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Muchos glbulos blancos van a los tejidos cuando hay inflamacin . Son atrados por los llamados factores quimio tcticos . En ella se producen seales que actan en los capilares produciendo la separacin de las clulas endoteliales y aumentando su adherencia . Los glbulos blancos se adhieren al endotelio y pasan a los tejidos . La unin inicial con el endotelio se hace por protenas llamadas selectinas e integrinas .

HEMOCITOPOYESIS La formacin de la sangre o hematopoyesis en el adulto , sucede en la mdula sea . Todas las clulas de la sangre se originan de un antecesor comn que es la clula madre omnipotencial o stem cell . Estas clulas madre originan a cada elemento figurado de la sangre por medio de una serie de pasos en los cuales la clula se va transformando hasta convertirse en la clula madura Resumen de las clulas progenitoras
Pro eritroblasto Eritroblasto Basfilo Eritroblasto Policromatfilo Mieloblasto Promielocito Mielocito Monoblasto Promonocito Monocito Linfoblasto Prolinfocito Linfocitos -No comprometido -LB maduro -L Pretmico promegacariocito Megacariocito megacarioblasto

Eritroblasto Ortocromtico o normoblasto Normocito

Metamielocito

Plaquetas

Retculocito

Grnulocito con ncleo en cayado (en banda) Grnulocito maduro Neutrofilo Eosinofilo basfilo

Eritrocito

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Factores reguladores de la hemocitopoyesis . Las clulas precursoras sobreviven , proliferan y se diferencian originando a las clulas de la sangre solo si se encuentran factores especficos llamados factores estimulantes. Los ms conocidos son Eritropoyetina . Se produce en el rin y regula la formacin de los glbulos rojos . La produccin de eritropoyetina es estimulada por la falta de oxigeno o por la disminucin del nmero de glbulos rojos . Acta sobre las CFC-E Interleuquina 3 tambin estimula la formacin de glbulos Los factores estimulantes actan por varios mecanismos regulan la frecuencia de la divisin regulan el suicidio celular regular el tiempo del ciclo celular regulan el tiempo de vida de la clula

Todos los elementos figurados se originan en la mdula sea

MDULA OSEA Se encuentra en la difisis de los huesos largos y en el dploe de los huesos planos. Encontraremos

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parnquima sinusoides estroma

Estroma La mdula sea tiene un estroma de fibras reticulares , colgeno tipo I y III , PGs , GAGs , fibronectina , laminina y hemonectina (que une el estroma con las clulas) , clulas adiposas . Capilares sinusoides que son vasos sanguneos especializados , constituyendo una circulacin cerrada . Por fuera hay clulas llamadas adventiciales o reticulares . Las clulas reticulares tienen prolongaciones que sirven de sostn a las clulas de las progenies que se estn formando . Tambin producen fibras reticulares y tendran un rol en la diferenciacin de las UFC .Las clulas reticulares del estroma tienen el steel-factor en su membrana , que acta por contacto . Por eso se produce la activacin de las stem-cells solo en la medula sea en contacto con las clulas del estroma . Parnquima Est constituida por la llamada mdula sea roja y la amarilla. La primera es la activa , ya que all se producen las progenies celulares. La amarilla es inactiva y aumenta con la edad siendo constituida por tejido adiposo . El parnquima est dado por los distintos estadios celulares de la progenie roja (eritroctica) , blanca (grnuloctica) y plaquetaria (tromboctica). Se encuentran estos estadios agrupados segn la Progenie constituyndose los llamados nidos blancos (conglomerados de clulas de la progenie blanca) y nidos rojos (conglomerados de clulas de la progenie roja). Cada nido rojo contiene un macrfago . Ubicacin de los nidos Los Nidos Rojos y los Megacariocitos estn cerca de los sinusoides permitiendo que los GR y plaquetas pasen directamente a la sangre . Los Nidos Blancos estn ms lejos por eso para entrar en la sangre los glbulos blancos deben migrar desde su sitio de origen hasta los sinusoides . Cuando

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una clula se ha formado y debe pasar a la sangre , se produce una perforacin en el endotelio del sinusoide , que luego es reparada . Capilares sinusoides Presentan ciertas caractersticas diferenciales con respecto a los capilares de otros tejidos . La pared del sinusoide , al igual que la de cualquier capilar , est formada por clulas endoteliales que descansan sobre una membrana basal Haga un esquema de la medula sea con el MO.

Liberacin de las clulas de la medula sea

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Los glbulos rojos se forman alrededor de macrfagos con largas prolongaciones por las que migran las clulas mientras maduran . Cuando termina la maduracin atraviesan la clula endotelial y pasan a la sangre . Los megacariocitos estn en contacto con las paredes de los sinusoides por las cuales pasan prolongaciones que entran a la luz y ah se van liberando las plaquetas . Los glbulos blancos migran hasta salir .