PRODUCTO: INGERINIB PRINCIPIO ACTVO: IMATINIB Mesilato Comprimidos recubiertos 100 y 400 mg 1) OBJETIVO: Verificar que la metodologa propuesta

para el anlisis del producto terminado cumpla con los parmetros descriptos. 2) PARMETROS A VALIDAR: *LINEALIDAD *EXACTITUD *PRESICIN INTERMEDIA *ESPECIFICIDAD *ROBUSTEZ * LIMITE DE DETECCION * LIMITE DE CUANTIFICACION

LINEALIDAD Objetivo: Demostrar que la tcnica analtica empleada en el ensayo de valoracin se encuentra dentro del rango de linealidad para las concentraciones utilizadas en la determinacin del principio activo. Procedimiento: El estudio de linealidad fue realizado segn el esquema que se describe a continuacin.

DAS NIVELES PREPARACIONES CONCENTRACIONES % Nro. LECTURAS

1 6 1 por nivel 65 70 80 100 110 135 Duplicado

Se obtuvo la recta promedio, se calcul la ecuacin de la misma y el valor de R2. Criterio de Aceptacin: El valor de R2 no debe ser inferior al 0,990 Resultados: Los resultados del estudio de linealidad, que se observan en la tabla y grfico correspondiente, muestran que el valor de R2 es de 0,99

Conclusin: El mtodo es lineal en el rango de concentraciones utilizado en el mtodo de anlisis del principio activo.

PRECISION Prueba de recuperacin Objetivo: Demostrar la exactitud del mtodo, verificando que en diferentes concentraciones del principio activo agregadas a un placebo en valores cercanos al 70 80 100 y 110 % de lo solicitado en la tcnica ; el resultado obtenido no difiere en forma significativa al esperado, ya que los excipientes no afectan la extraccin del activo de la matriz. Procedimiento: Se utilizaron 4 niveles de concentracin: cercanos al 100 % (con respecto al valor esperado). Se realizaron 3 preparaciones de muestra . Se calcul el ttulo del activo para cada preparacin y se calcul la desviacin estndar relativa porcentual para los distintos niveles. Para los clculos se utilizaron los valores de rea y concentracin obtenidos en el ensayo de repetibilidad Criterio de Aceptacin: La recuperacin del principio activo debe encontrarse entre el 97% y el 103% Resultados: Los resultados del estudio de exactitud, que se observan en las tablas correspondientes, muestran que la extraccin del activo se encuentra dentro del rango propuesto. (99.8 %) Conclusin: Los resultados obtenidos muestran que el mtodo cumple con las aptitudes solicitadas lo cual era de esperarse ya que la tcnica propuesta indica una sonicacin de 15 minutos en la primer diulucin.

PRECISIN INTERMEDIA Estudio de la Capacidad de Repeticin: Objetivo: Se evalu la capacidad de repeticin, luego de la inyeccin de muestras sucesivas realizadas e mismo da, por un mismo operador; demostrando que pequeas variaciones en la preparacin de la muestra no tienen influencia significativa en el resultado en la determinacin del principio activo. Se evalu que las posibles variaciones dentro del mismo laboratorio, repitiendo el anlisis otro da con otro operador, empleando un esquema similar al utilizado en la evaluacin de la capacidad de repeticin, no afecten el resultado analtico. Procedimiento: Se realizaron 6 ensayos de cuantificacin del principio activo en dos das diferentes con distintos analistas, realizando 6 pesadas diferentes de la muestra a analizar en las condiciones cromatogrficas de la tcnica antes descripta para el anlisis de valoracin del principio activo. Las muestras fueron cromatografiadas por duplicado. Tratamiento de las muestras: Todas las soluciones inyectadas no sufrieron variacin en la preparacin, ni en el volumen de inyeccin. Criterio de Aceptacin: El coeficiente de variacin porcentual entre promedios de inyecciones de las 6 determinaciones deber ser inferior al 3% en cada serie de mediciones. El coeficiente de variacin porcentual del ttulo entre determinaciones deber ser inferior al 3%. Resultados: El desvo estndar fue del 0.3 % aproximadamente por lo que el ensayo CUMPLE con las expectativas esperadas

ESPECIFICIDAD

NO LA HAGAS
Objetivo: Demostrar la no interferencia de excipientes y probables productos de degradacin en el mtodo de valoracin propuesto. Procedimiento: Se realizaron degradaciones forzadas del principio activo en distintos mtodos tendientes a dar reacciones de Oxidacin, Reduccin, Hidrlisis cida e Hidrlisis Alcalina, segn el siguiente esquema: Degradacin cida: Se pesa exactamente alrededor de 100 mg del Activo y se los lleva a un tubo de ensayo. Se agregan 10 ml de cido Clorhdrico 0.1 N y 10 ml de agua, y se deja en bao de agua regulado a 60C durante 4 horas. Luego se neutraliza. Degradacin Alcalina: Se pesa exactamente alrededor de 100 mg del Activo y se los lleva a un tubo de ensayo. Se agregan 10 ml de Hidrxido de Sodio 0.1 N y 10 ml de agua, y se deja en bao de agua regulado a 60C durante 4 horas. Luego se neutraliza. Degradacin Oxidante: Se pesa exactamente alrededor de 100 mg del Activo y se los lleva a un tubo de ensayo. Se agregan 10 ml de agua y 10 ml de agua Oxigenada de 180 Vol., y se deja en bao de agua regulado a 60C durante 4 horas. Luego se neutraliza. Degradacin Reductora: Se pesa exactamente alrededor de 100 mg del Activo y se los lleva a un tubo de ensayo. Se agregan 10 ml de cido Clorhdrico 0.2 N y 10 ml de agua, se mezcla y se agregan 200 mg de Cinc polvo. Se deja en bao de agua regulado a 60C durante 4 horas. Luego se neutraliza. Degradacin Lumnica Se pesa exactamente alrededor de 100 mg del Activo y se los lleva a un tubo de ensayo. Se los disuelve en 20 ml de agua, se mezcla.

Se coloca bajo la accin de la lmpara UV 254/366 combinada a 10 cm de distancia durante 12 horas. No interferencia de los excipientes: Se proceso un placebo de excipiente y se corri cromatogrficamente Ruido de base del sistema. - No interferencia de la fase mvil: Se proceso un placebo de excipiente y se corri cromatogrficamente Prueba de carga para sustancias relacionadas Se prepara una muestra de 5 mg / ml de API en fase mvil. Se sonica 5 minutos. Se filtra por 0.45 u y se inyecta.. El ensayo se realiza por duplicado a los efectos de constatar posibles productos relacionados que existan en concentraciones menores al 0.3 % Luego se realiza un ciclo de lavado de la columna. Tratamiento de las muestras: Cumplidas las 4 horas, las muestras se diluyen, tal como se especifica en la tcnica propuesta, y filtran por filtro de 0.45. Se analizaron las muestras segn el mtodo analtico descrito para el producto terminado.

Resultados: En todos los anlisis realizados a las muestras degradadas, los productos de degradacin investigados no interfieren en la determinacin de la concentracin del principio activo, como as tampoco los excipientes utilizados

ROBUSTEZ

CAMBIA ALGO DE LA F MOVIL A VER QUE PASA

Objetivo: Demostrar que el mtodo cromatogrfico resiste distintos operadores, distintos das y evaluar la estabilidad de la solucin a analizar Procedimiento Todo el ensayo de validacin se realiz a los largo de varios das, en los cuales la relacin de reas y tiempos de retencin se mantuvieron constantes. Se realizan cromatogramas de una solucin de referencia del principio activo en estudio, con la fase mvil descripta en el mtodo analtico propuesto, y cromatogramas con variantes de la misma. Resultados obtenidos Dia 1 Operador 1 vs Operador 2 diferencia porcentual: 0.91 % Dia 2 Operador 1 vs Operador 2 diferencia porcentual: 0.12 %

Conclusin: La tcnica propuesta no se ve afectada por el cambio de operador ni por el cambio de da.

LIMITE DE DETECCIN/ CUANTIFICACION Objetivo: Determinar la mnima cantidad de sustancia detectable, no cuantificable. Procedimiento: Se monitore la lnea de base, y se determin el promedio de la relacin sealruido. El valor obtenido se multiplic por tres. Luego se determin el valor de concentracin capaz de producir una respuesta igual al triple de relacin seal-ruido. Criterio de Aceptacin: El valor de concentracin hallado, produce la respuesta mencionada. Resultados: Limite de deteccin El valor promedio de la seal-ruido de 2 determinaciones es de 3 mV Por lo tanto la respuesta para el lmite de deteccin es 9. mV. Limite de cuantificacin El valor promedio de la seal-ruido de 2 determinaciones es de 3 mV Por lo tanto la respuesta para el lmite de cuantificacin es 30 mV. Conclusiones: El valor de concentracin hallado para el lmite de deteccin 1.6 g/ml. El valor de concentracin hallado para el lmite de Cuantificacin 1 g/ml.