Disciplina:

Biotecnologia e Biossegurana em Sade

Professora: Karla Barbosa

Email: karlapsb@gmail.com

Sistema de Avaliao (Titia Parte II, a misso!)

0,0 2,0 Exerccios, estudos dirigidos0,0 3,0 0,0 8,0 3 Provas 0,0 2,0 0,0 8,0 1 seminrio 0,0 1,0 0,0 2,0 Frequncia e participao 0,0 1,0 0,0 - 1,0 _________ _________ 30,0 (/3 = 10,0!!!) 30,0 (/3 = 10,0!!!)

Introduo Biotecnologia
Profa.: Karla Barbosa

Como uma histria em quadrinhos...

Um pouco de informao histrica...

A palavra biotecnologia comeou a ser utilizada no sculo XX, mas suas tcnicas j existiam h vrios anos, quando Sumrios e Babilnios iniciaram a produo de bebidas alcolicas por meio da fermentao de gros de cereais. Naquela poca o homem j utilizava essa tecnologia, pois lidava com a biotecnologia na produo de vinhos, queijos, pes, cervejas e derivados lcteos, mas o domnio deste conhecimento ocorreu gradativamente a partir das leis da herana desenvolvidas pelo monge austraco Johann Gregor Mendel, iniciou o verdadeiro avano cientfico na rea da biotecnologia.

 Mendel conseguiu desvendar os segredos da hereditariedade, fazendo cruzamentos de ervilhas com diferentes cores de flores no jardim de um monastrio.

E UM POUCO DE CULTURA...

China - Datong, cidade mineira, na provncia de Shanxi, monastrio suspenso no monte Heng.

Rssia - Monastrio St. Nil na Ilha Stolobnyi Lago Seliger na Provcia de Tver.

Fonte: http://colunas.revistaepoca.globo.com/viajologia/2007/08/08/datong-%C2%96-valeu-aviagem/

Fonte: http://theurbanearth.wordpress.com/2009/10/03/a-russia-de-1910-a-1915/

Acontecimentos que marcaram a Biotecnologia

BIOTECNOLOGIA
O termo biotecnologia formado por trs pequenas palavras de origem grega: bio que significa vida; tecnos - representa o uso prtico da cincia; logos que significa conhecimento.
Em seu sentido mais amplo, a biotecnologia compreende a manipulao de microrganismos, plantas e animais, objetivando a obteno de processos e produtos de interesse. Desta maneira, toda atividade que envolva a aplicao dos conhecimentos de fisiologia, bioqumica e gentica, considerada como tcnica biotecnolgica. Em seu senso mais restrito as biotecnologias esto associadas ao emprego das tcnicas modernas de biologia molecular e celular.

DNA O alvo da Biotecnologia!

Composto por duas fitas complementares, unidas por pontes de hidrognio entre bases pricas (A,G) e bases pirimdicas (T,C).

Como cortar e colar DNA de diferentes seres vivos?

O que BIOTECNOLOGIA?
Conceito:

qualquer tcnica que permitem ao homem utilizar organismos vivos ou suas partes, para fazer, melhorar, modificar ou desenvolver microrganismos de interesse especfico para prover bens e assegurar servios.
A biotecnologia uma das ferramentas tecnolgicas mais importantes da atualidade. Suas aplicaes tm contribudo para a estruturao de novos sistemas econmicos e sociais, especialmente nas reas de sades pblica e animal (Azevedo, 2008). Outras ferramentas consideradas fundamentais so vacinas seguras e eficazes, aliadas ao diagnstico confivel.

Se ainda ficaram dvidas...

Quais os conhecimentos bsicos necessrios? Quais agentes biolgicos so utilizados na biotecnologia? O que devemos entender por bens ou servios? Onde pode ser aplicada a biotecnologia?

Vamos extermin-las agora!

Microbiologia, Bioqumica, Gentica, Engenharia, Qumica, Informtica
CONHECIMENTO BIOTECNOLOGIA PRODUZIR BENS ASSEGURAR SERVIOS

Organismos, Clulas e Molculas (Enzimas, Anticorpos, DNA, etc.)

AGENTES BIOLGICOS

Alimentos, Bebidas, Produtos Qumicos, Energia, Produtos Farmacuticos, Pesticidas, etc.

Purificao da gua, Tratamentos de resduos, Controle de poluio, etc.

Produtos e Benefcios

Agricultura - adubo composto, pesticidas, silagem, mudas de plantas ou de rvores, plantas transgnicas, etc.
Alimentao - pes, queijos, picles, cerveja, vinho, protena unicelular, aditivos, etc. Qumica - butanol, acetona, glicerol, cidos, enzimas, metais, etc. Eletrnica biossensores Energia - etanol, biogs Meio Ambiente - recuperao de petrleo, tratamento do lixo, purificao da gua Pecuria embries Sade - antibiticos, hormnios e outros produtos farmacuticos, vacinas, reagentes e testes para diagnstico, etc.

 Primeiras tcnicas: FUNGOS po, vinho, lcool, antibiticos BACTRIAS iogurtes, queijos, coalhada

Atualmente: Engenharia gentica

Engenharia Gentica (EG)

o termo usado para descrever algumas tcnicas modernas em biologia molecular que vm revolucionado o antigo processo da biotecnologia.
A engenharia gentica acarreta opes muito vantajosas em relao a esta temtica, uma vez que, pode reconstituir tecidos e rgos humanos com base em clulas embrionrias e permite assim salvar vidas, reduzindo o tempo de espera, bem como evitar a rejeio de implantes por causa da falta de compatibilidade. A biotecnologia pode tambm, aumentar e melhorar a produo de medicamentos e vacinas.

A utilizao de organismos geneticamente modificados na indstria agroalimentar outro aspecto positivo a considerar. Aplica-se na produo de alimentos para melhorar o seu aspecto, assim como o seu sabor, para aumentar o seu valor nutritivo e tornar maior a resistncia das plantas a doenas, pragas e condies ambientais adversas.

 A engenharia gentica tem proporcionado aos pais escolher o sexo do filho, a cor dos seus olhos, do cabelo, do tom de pele; baseando-se numa tcnica de laboratrio chamada de pr-implantao de diagnstico gentico, retirando para isso, uma clula de um embrio muito novo, antes que ele seja implantado no ventre da me. Os mdicos selecionam um embrio que seja livre de genes indesejveis ou um embrio com os traos fsicos desejados como a pele mais escura para ajudar na preveno de cancro de pele, se j tiver um filho que tenha desenvolvido o cancro, para continuar com a gravidez e descartar outros embries.

Deve-se alertar que existe a possibilidade de "transformar bebs em produtos que as pessoas escolhem em uma prateleira". Filhos perfeitos e com caractersticas fsicas pr-estabelecidas pelos pais ou padres sociais podero contribuir para a eliminao de embries e fetos com defeitos genticos.

A EG tornou-se valiosa nas pesquisas sobre protenas, onde se pode utilizar tcnicas que permitam:
Perda de funo da protena, atravs da excluso ou bloqueio do gene respectivo desta protena.

Localizao celular e identificao de interaes de uma protena desejada (EX.: GFP Green Fluorescent protein ). Esta tcnica til, mas a fuso pode alterar algumas funes do gene teste pela criao de efeitos colaterais, tornando assim questionveis os resultados da experincia.

Aequorea Victoria

Camundongo GFP transgnico

Ex.: A insulina estimula a captao de glicose atravs da translocao da isoforma GLUT4 do transportador de glicose para a membrana plasmtica. Pode-se acompanhar os movimentos de GLUT4 em clulas vivas usando a microscopia confocal. Para isso, GLUT4 fundido com a protena fluorescente verde (GFP) da gua-viva Aequoria victoria.

Fibroblastos expressando GFP-GLUT4

Adipcitos expressando GFP-GLUT4

Produtos obtidos a partir da Engenharia Gentica

Hormnio de crescimento humano Interferons Insulina humana Vacinas Bioinseticidas

Engenharia Gentica nos alimentos

As sementes so modificadas para que as plantas possam resistir s pragas de insetos e grandes quantidades de pesticida.

Transgnicos
So organismos que, mediante tcnicas de engenharia gentica, contm material gentico de outros organismos. A gerao de transgnicos visa obteno de caractersticas especficas por um organismo de interesse.

A manipulao gentica recombina caractersticas de um ou mais organismos de uma forma que provavelmente no aconteceria na natureza. Por exemplo, podem ser combinados os DNAs de animais e plantas.
O primeiro transgnico foi a bactria Escherichia coli, que sofreu adio de genes humanos para a produo de insulina na dcada de 1980.

Alimentos transgnicos
Aspectos positivos: Aumento na produo de alimentos. Alterao do valor nutricional dos alimentos. Desenvolvimento de espcies com caractersticas desejveis. Maior resistncia dos alimentos ao armazenamento por perodos maiores.

Aspectos negativos:
A maior resistncia a agro txicos e antibiticos nas pessoas e nos animais. A eliminao de populaes benficas como abelhas, minhocas e outros animais e espcies de plantas. O empobrecimento da biodiversidade. O desenvolvimento de ervas daninhas muito resistentes que podem causar novas doenas e o desequilbrio da natureza. O desconhecimento das consequncias da utilizao dos alimentos geneticamente alterados a longo prazo.

Clonagem
Clonagem basicamente a produo de indivduos geneticamente iguais. um processo de reproduo assexuada que resulta na obteno de cpias geneticamente idnticas de um mesmo ser vivo.

Clonagem - Dolly
A ovelha Dolly (5 de julho 1996) foi o primeiro mamfero a ser clonado com sucesso a partir de uma clula adulta.
Dolly foi gerada a partir de clulas mamrias de uma ovelha adulta com cerca de seis anos, atravs de uma tcnica conhecida como transferncia somtica de ncleo. Apesar das suas origens, Dolly teve uma vida normal de ovelha e deu luz dois filhotes, sendo cuidadosamente observada em todas as fases.

 Em 1999, foi divulgado na revista Nature que Dolly poderia desenvolver formas de envelhecimento precoce, uma vez que os seus telmeros (partes de alguns cromossomos) eram mais curtos que os das ovelhas normais. Esta questo iniciou uma acesa disputa na comunidade cientfica sobre a influncia da clonagem nos processos de envelhecimento, que est ainda hoje por ser resolvida. Em 2002 foi anunciado que Dolly sofria de um tipo de artrite degenerativa, o que foi interpretado por alguns setores como sinal de envelhecimento. Dolly foi abatida em fevereiro de 2003 para evitar a sua morte dolorosa por uma infeco pulmonar incurvel.

A pergunta que no quer calar...

Ser que existem clones humanos???

Terapia gnica
A terapia gnica proporciona, atravs da utilizao de vrus e bactrias, a cura das doenas se forem localizados os genes que as causaram, removendo ou acrescentando o gene saudvel pessoa, com o intuito de corrigir deficincias genticas. Esses genes so colocados dentro de clulas atravs da utilizao de vetores (viral ou bacteriano).
COMO FUNCIONA??? Selecionam-se vetores potencialmente nocivos in vivo. Modifica-se o DNA do vetor introduzindo o gene defeituoso no ser humano (2).

Retira-se, do ser humano, uma colnia de clulas para que os vrus possam se multiplicar e passar para gene normal (1). Separam-se as clulas portadoras do gene normal e injetam-nas no ser humano (3 e 4).

 Devido capacidade intrnseca dos vrus de invadir e fazer com que seu genoma seja transcrito pela maquinaria celular, alguns tipos de vrus so modificados e utilizados como vetores para terapia gnica. Apesar da maioria dos protocolos de terapia gnica estar em estgios iniciais de desenvolvimento, essa rea desperta interesse por seu potencial para o tratamento de uma grande diversidade de doenas. No entanto, existem efeitos secundrios devido introduo de genes nocivos ao ser humano. A resistncia aos antibiticos aumenta, e o combate a determinadas doenas torna-se muito mais difcil.

Vacina gnica
Apontada pelos cientistas como promessa no combate a doenas infecciosas como a malria, a dengue e, at mesmo, a AIDS, a vacina gnica uma nova estratgia para a preveno de doenas onde o conhecimento das tcnicas relacionadas ao DNA tem um papel essencial.

E como esta vacina feita?

1. Para a sua produo, necessria a retirada de uma sequncia de DNA do agente causador da doena que codifica uma protena capaz de estimular o nosso sistema imune. Depois que este fragmento de DNA retirado, ele clonado e inserido em vetores. Quando aplicado em animais, suas clulas passam a traduzir as sequncias do agente causador da doena, fazendo com que a protena traduzida seja exposta ao sistema imune que ir reconhec-la como no-prpria do organismo, desencadeando a produo de anticorpos e clulas de memria.

2. 3.

 A vacina de DNA tem sido considerada mais segura e eficiente do que as vacinas convencionais, oferecendo segurana e uma resposta imunolgica duradoura, no sendo necessria a aplicao de outras doses.
Um exemplo de vacina de DNA que vem trazendo bons resultados a da raiva. Aps testes em macacos, os pesquisadores obtiveram 100% de imunizao. Eles foram expostos (desafiados) doses letais do vrus da raiva e no desenvolveram a doena. Esta uma boa notcia, tendo em vista que surgem no mundo, a cada ano, mais de 40.000 novos casos de raiva. A vacina de DNA abre novas portas, trazendo esperana para a soluo de doenas como a AIDS e a malria, para as quais ainda no foram obtidas vacinas eficazes.

Teste de paternidade
O teste de paternidade (teste de DNA), permite comparar as informaes genticas do DNA da criana com aquelas encontradas no DNA do suposto pai. Basta uma pequena amostra de sangue dos envolvidos (suposto pai, me e filho) para que haja 99,99% de certeza do resultado.

Como feito o teste de paternidade?

1. As partes envolvidas na investigao (me, pai e filho) vo a um laboratrio, onde uma pequena amostra de sangue dos trs coletada em um papel-filtro, sem utilizao de seringa. No caso de morte de alguma das partes, pede-se a exumao do corpo e a coleta de uma parte do organismo, em geral, um fmur. 2. O material pode ser coletado em laboratrios diferentes. Para que no haja confuso com troca de materiais, assim que o sangue coletado, o papel-filtro etiquetado e recebe a assinatura de cada envolvido. A coleta est pronta para ser mandada para um laboratrio especializado em exames de DNA. 1. Do papel-filtro so retirados pequenos discos do tamanho da ponta de uma caneta. O material levado para uma espcie de banho-maria. Atravs de uma espcie de aquecimento e resfriamento, faz-se com que o DNA contido na coleta seja amplificado.

Como feito o teste de paternidade? 4. Aps a amplificao das molculas de DNA, o material levado para o sequenciador automtico, uma sofisticada mquina onde o cdigo gentico ser sequenciado. 5. Finalmente, um computador l a sequncia e j pode dar um primeiro resultado. Mesmo assim, as sequncias so analisadas por um especialista em gentica, uma vez que mutaes no cdigo podem levar a mquina a cometer enganos. Cada teste revisto atravs de um processo de prova e contraprova.

Seqenciador: Megabase

Resultado liberado pelo Megabase

Como feito o teste de paternidade?

Passos para incluso e excluso de paternidade pelo DNA:

1) Compare as bandas da me (M), criana (C) e possveis pais (P).

2) Identifique quais bandas da criana vieram da me. As bandas restantes (bandasteste) vieram do pai.

3)

As bandas-teste esto presentes no possvel pai? Identifique-o.

Resultado final:

OU

Entenderam como o feito o teste de DNA???

Vamos fazer um teste:

Simulado Fuvest 2008 - Questo 1 - Biologia

Teste de DNA confirma paternidade de beb perdido no tsunami

Um casal do Sri Lanka que alegava ser os pais de um beb encontrado aps o tsunami que atingiu a sia, em dezembro de 2008, obteve a confirmao do fato atravs de um exame de DNA. O menino, que ficou conhecido como "Beb 81" por ser o 81 sobrevivente a dar entrada no hospital de Kalmunai, era reivindicado por nove casais diferentes. Folhaonline, 14/02/2005 (adaptado). Algumas regies do DNA so sequncias curtas de bases nitrogenadas que se repetem no genoma, e o nmero de repeties dessas regies varia entre as pessoas. Existem procedimentos que permitem visualizar essa variabilidade, revelando padres de fragmentos de DNA que so uma impresso digital molecular. No existem duas pessoas com o mesmo padro de fragmentos com exceo dos gmeos monozigticos. Metade dos fragmentos de DNA de uma pessoa herdada de sua me e metade, de seu pai. Com base nos padres de fragmentos de DNA representados abaixo, qual dos casais pode ser considerado como pais biolgicos do Beb 81?

BIOTECNOLOGIA, um trilho perigoso?

A responsabilidade moral de cientistas em suas pesquisas, bem como de suas aplicaes est diretamente relacionada com a biotica. Biotica o estudo transdisciplinar entre biologia, medicina e filosofia (desta, especialmente as disciplinas de tica, Moral e Metafsica), que investiga todas as condies necessrias para uma administrao responsvel da vida humana (em geral), da pessoa (em particular) e da biotecnologia. So temas dessa rea questes delicadas como a clonagem, os transgnicos, a terapia gnica, dentre outras.

Daqui a alguns anos...