Determinao de Diversos Compostos em Bebidas por Cromatografia Lquida de Alta Eficincia (HPLC)

Autores: Salvado, Alexandra; Sousa, Andreia; Paiva, Telmo Licenciatura em Bioqumica Bioqumica Experimental I, Turma n 3, Grupo n 1, DQB/FCUL, Campo Grande Ed. C8, 1749-016 Lisboa

Apresentao e Discusso de Resultados

Quadro 1. Resultados obtidos para os padres (cafena, sacarina e benzoato de sdio).

Padro Cafena 1 Cafena 2 Cafena 3 Cafena 4 Cafena 5 Sacarina Benzoato de sdio

rea 4910900 9452700 22829000 32371000 21353000 21174000 46142000

Tempo de Reteno (tR) /min 7,06 7,06 6,98 6,92 6,87 3,11 9,98

Tempo de Reteno Mdio ( ) /min

6,98

Quadro 2. Resultados obtidos para as amostras (Coca-Cola, caf e ch) os picos relevantes so apenas os que se podem relacionar com os padres utilizados.

Amostra Coca-Cola Caf Ch

Picos relevantes Pico 1 Pico 1 Pico 2 Pico 3 Pico 1 Pico 2

rea 16370000 4498100 19529000 732070 395520 8985800

Tempo de Reteno (tR) /min 6,99 3,19 7,01 9,81 3,19 6,98

Composto correspondente Cafena Sacarina Cafena Benzoato de sdio Sacarina Cafena

Comparando os tempos de reteno dos picos das amostras com os picos dos padres, conclui-se que na amostra de Coca-Cola existe cafena, na amostra de caf existe sacarina, cafena e benzoato de sdio e na amostra de ch existe sacarina e cafena.

Para realizar a curva de calibrao tem de se calcular a concentrao de cafena nos padres (1,2,3,4 e 5).

Padro de cafena 1

Padro de Cafena 2

Padro de Cafena 3

Padro de Cafena 4

Padro de Cafena 5

Atravs

dos

resultados

anteriores

das

reas

dos

picos

correspondentes construiu-se uma recta de calibrao. Para a construo desta recta ignorou-se o padro de cafena 5 por se encontrar muito afastado dos outros resultados (ponto a vermelho no grfico). 40 rea em milhes

30
20 y = 3E+08x + 4E+06 R = 0,9537 0,00 0,02 0,04 0,06 0,08 0,10 0,12 0,14 0,16 0,18 0,20 [Cafena] /mg mL-1

10
0

Figura 1. Recta de calibrao para a cafena.

Obteve-se, ento, a recta de calibrao a concentrao de cafena e y a rea do pico correspondente.

, onde

Atravs da recta de calibrao anterior calcula-se a concentrao de cafena em cada amostra. Ch

No ch existe 27,67 mg de cafena /g de ch. Caf

No caf existe 64,43 mg de cafena /g de caf. Coca-Cola

Na Coca-Cola existe 0,103 mg de cafena /mL de Coca-Cola.