Manual de Biossegurana

LABS PATOLOGIA CLNICA

1999
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NDICE 1. Objetivos do documento 2. Responsabilidades 2.1 Descrio das responsabilidades 3. Vestimenta e equipamentos 3.1 Vestimenta obrigatria para os funcionrios da rea tcnica 3.2 Equipamentos de proteo individual 3.3 Equipamentos de proteo coletiva 3.4 Recipientes para descarte de material no contaminado, contaminado ou esterilizao de material 3.5 Apoio biossegurana 3.6 Mapa de risco (segundo a NR5) 4. Armazenamento de substncias 5. Disponibilidade, montagem e uso dos Equipamentos de proteo 5.1 Placas indicativas 5.2 Jalecos 5.3 Luvas 5.4 Mscaras e culos de proteo 5.5 Lava-olhos 5.6 Escudo de proteo contra respingos 5.7 Kit de primeiros socorros 5.8 Kit de desinfeo 5.9 Ducha de segurana 5.10 Capelas de exausto e cmaras de fluxo laminar 6 POP de biossegurana: Instrues de trabalho 6.1 Controle ambiental 6.1.1 Descontaminao de reas aps derramamento de material biolgico ou culturas de microrganismos 6.1.2 Descontaminao de pequenas reas 6.2 Esterilizao e descontaminao 6.2.1 Procedimentos gerais de descontaminao 6.3 Autoclavao 6.3.1 Controle do processo 6.3.2 Critrios de aceitabilidade 6.3.3 Registro 6.4 Forno Pasteur 6.5 Desinfetantes 6.5.1 Desinfetantes lquidos 6.6 Segurana biolgica de centrfugas 7.0 Manejo do lixo 7.1 Tipos de lixo 8 Rotulagem de resduos do laboratrio 8.1 Principais resduos qumicos do laboratrio 9 Recolhimento e desativao de resduos do laboratrio 10 Manipulao de produtos qumicos 11 Armazenamento e transporte de produtos qumicos 12 Preparo de solues 12.1 Procedimentos em caso de acidentes com solues
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13 Incndios 13.1 Equipamentos para controle de incndios 14 Telefones teis 15- REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS 16 Documentos anexos e legenda dos smbolos 1. Objetivos deste documento Este documento objetiva garantir a segurana dos trabalhadores, descrevendo as rotinas de trabalho com um mnimo de risco, esclarecendo os princpios bsicos de biossegurana, bem como o correto uso dos Equipamentos de proteo individual (EPIs), alm de medidas que evitem os acidentes mais comuns no laboratrio clnico. 2. Responsabilidades Os chefes dos setores, juntamente com a comisso de biossegurana so os responsveis pela segurana biolgica do laboratrio, cabendo a cada funcionrios executar as rotinas de acordo com as normas descritas neste manual, uma vez que segurana uma responsabilidade de cada indivduo. 2.1-Descrio das responsabilidades em biossegurana: A. Comisso de Biossegurana: 1. Preparar o manual de biossegurana, dentro das legislao vigente e suas revises quando necessrio. 2. Distribuir a todos os setores do laboratrio que estejam envolvidos direta ou indiretamente com rotina que envolva o contato com material clnico. Isto envolve os setores burocrticos uma vez que as visitas aos setores tcnicos constitui uma atividade de rotina. 3. Investigar os acidentes e suas causas buscando solues que minimizem a repetio do mesmo . 4. Coordenar a coleta e descarte de rejeitos. 5. Garantir o treinamento em biossegurana dos funcionrios 6. Garantir a realizao do programa de biossegurana e o registro de todas as atividades ligadas biossegurana. B. Chefe de setor: 1. Verificar e relata comisso de biossegurana os riscos decorrentes das atividades do seu setor. 2. Assegurar a realizao das atividades de biossegurana 3. Treinar o pessoal do seu setor em biossegurana C. Coordenador de segurana do setor: 1. Cooperar com o chefe do setor na garantia das atividades de biossegurana , incluindo treinamento. D. Criao e manuteno da CIPA (COMISSO INTERNA DE PREVENO DE (ACIDENTES) composta por funcionrios de todos os nveis, que deve atender s exigncias legais vigentes.

E. Implantao e manuteno do SESMT - (Servios Especializados em Engenharia de Segurana e Medicina do Trabalho). Sob responsabilidade de um mdico do trabalho. F. Implantao e manuteno do PCMSO - (Programa de Controle Mdico de Sade Ocupacional). Sob responsabilidade de um mdico do trabalho F. Implantao e manuteno do PPRA - (Programa de Preveno de Riscos Ambientais) Sob responsabilidade direta da Comisso de biossegurana.

3. Vestimenta e equipamentos
3.1-Vestimenta obrigatria para funcionrios da rea tcnica: Cala comprida confeccionada em tecido resistente. Calas at os tornozelos, ou acima, no so admitidas. calado fechado (sapato ou tnis) blusa com manga curta ou comprida , As bijuterias como brincos, em tamanho e nmero discretos, podem ser utilizadas durante o trabalho tcnico, entretanto os anis, pulseiras e relgio devem ser evitados. Maquiagem pode ser utilizada, porm de forma discreta (ex. batom), uma vez que podem interferir com o resultado de alguns exames (ex. bases, e outras em forma de p) Cabelos compridos devem estar presos ao manusear equipamentos rotativos ou manipulao e coleta de material biolgico. Homens com barba devero seguir as mesmas precaues que indicadas para cabelos compridos. 3.2-Equipamentos de proteo individual (EPIs): Jaleco branco, de manga comprida e com a logomarca da empresa Luvas de ltex Luvas plsticas para manipulao de equipamentos no contaminados durante a rotina Luvas em tecidos resistentes para trabalhos em altas temperatura culos de proteo Mscara de proteo Protetor de ouvidos Toca para os cabelos Escudo de proteo contra respingos

3.3-Equipamentos de proteo coletiva (EPCs)

Lava olhos Chuveiro Kit de primeiros socorros Extintores de incndio Capelas de exausto Cmara de fluxo laminar

3.4-Material para descarte de material no contaminado, contaminado ou esterilizao de material Recipiente de lixo plstico
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P plstica Lata de lixo de metal com acionamento por pedal Carrinho para transporte de sacos de lixo Frascos contendo soluo germicida (germekil ou hipoclorito 2%) Saco plstico autoclavvel Saco plstico branco para material contaminado Lmpadas ultravioleta Autoclaves Forno Pasteur Reservatrios para produtos qumicos Frascos para pipetas e ponteiras contaminadas

3.5-Apoio biossegurana Os setores que apresentarem alguma particularidade nos procedimentos de limpeza devem apresentar um programa de treinamento aos funcionrios da limpeza. A superfcie das bancadas e piso deve ser de material impermevel gua, cidos, bases, solventes orgnicos e no mnimo moderadamente termoresistente. Todos os setores devem apresentar um conjunto de toalhas descartveis, alm de soluo germicida e sabo lquido. Adesivos associados Biossegurana, segundo as normas da ABNT.

3.6-Mapa de risco (segundo a NR5)

Um mapa constando das diferentes reas do laboratrio onde devero estar sinalizados e potencializados os riscos, tais como: Fsico, Qumico, Biolgico, Mecnico e Ergonmico. As reas devero ser indicadas com crculos de diferentes cores para um entendimento mais fcil, conforme indicado abaixo:

VERDE: Fsico VERMELHO: Qumico MARROM: Biolgico AZUL: Mecnico AMARELO: Ergonmico
a.

Agentes Fsicos: so representados no ambiente de trabalho atravs de rudos, vibraes, temperaturas anormais, radiaes ionizantes, radiaes no-ionizantes, iluminao e umidade.

b. Agentes Qumicos: por agentes qumicos em Higiene do Trabalho, entendem-se aqueles que quando penetram no organismo podem afetar vrios rgos, causando alteraes em sua estrutura e/ou funcionamento. c. gentes Biolgicos: so microorganismos causadores de doenas com os quais pode o trabalhador entrar em contato no exerccio de diversas atividades profissionais. Como por exemplo: bactrias, fungos, helmintos, protozorios, vrus, etc. d. Agentes Mecnicos: o agente mecnico toda situao de risco que pode gerar acidentes imediatos.

e.

Agentes Ergonmicos: so aqueles relacionados com fatores fisiolgicos e

psicolgicos inerentes execuo das atividades profissionais. Estes fatores podem produzir alteraes no organismo e no estado emocional dos trabalhadores, comprometendo a sua sade, segurana e produtividade.

Principais fatores: trabalho fsico pesado, postura incorreta de trabalho e de

levantamento de peso, posio incmoda, ritmo excessivo, monotonia, trabalho de turnos, jornadas prolongadas, ansiedade, responsabilidade, desconforto, ocasionando danos sade que podem se manifestar por: hipertenso arterial, lceras digestivas, doenas nervosas, alm de alterao no sono, problemas de coluna, taquicardia, tenso, ansiedade, medo, etc. Para evitar que estes agentes afetem as atividades do trabalhador, faz-se necessrio o ajustamento mtuo do homem ao trabalho, que se obtm atravs da modernizao e higienizao dos ambientes de trabalho, da modificao de processos, do projeto de mquinas e de ferramentas perfeitamente adaptadas e da adoo de ritmos e posies adequadas ao trabalho e racionalizao de trabalho.

4. Armazenamento de substncias 4.1-combustveis

Os cilindros de gs devem ser armazenados em local externo, amplo, coberto, naturalmente ventilado e devidamente protegido. Os reagentes inflamveis e combustveis devero ser armazenados em local arejado e ao abrigo da luz. A rea de armazenagem deve conter adesivos informando a presena de substncias combustveis.
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4.2-substncias qumicas
Todas as substncias consideradas nocivas devero ser armazenadas em ambiente devidamente sinalizado com a simbologia que represente risco. Estas devem estar em ambientes ventilados e mantidas preferencialmente prximas ao solo para evitar acidentes de queda sobre o manipulador ao tentar apanh-la.

5. Disponibilidade, montagem e uso dos Equipamentos de proteo:

O laboratrios deve se responsabilizar pelo fornecimento de EPIs para os funcionrios, bem como garantir a limpeza e/ ou descarte dos mesmos, evitando que no sejam levados para a casa dos funcionrios ou descartados em locais imprprios, o que representa um risco de difuso de patgenos comunidade.

5.1-Placas indicativas: Representam a principal ferramenta de educao dos funcionrios

e devem estar em todas as partes do laboratrio onde uma informao sobre biossegurana tiver que ser passada.

5.2-Jaleco: Deve ser de uso individual e utilizado em todas as reas do laboratrio que
desenvolvam atividades tcnicas, inclusive corredores de acesso a estas reas. Este deve ser retirado apenas nas reas de transio entre os setores tcnicos e de apoio. proibida a circulao de funcionrios com EPIs nos setores no tcnicos, bem como o de funcionrios sem jaleco nos corredores e setores tcnicos. O laboratrio deve garantir a disponibilidade de jalecos para os visitantes e funcionrios de setores no tcnicos que necessitem entrar nos setores tcnicos.

5.3-Luvas:
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 As diferentes luvas disponveis para os funcionrios devem conferir proteo contra risco biolgico, agentes qumicos especficos, temperaturas extremas e injria traumtica. Quando utilizadas com material biolgico ou qumico devem ser descartadas em container para descarte de lixo biolgico. As mos devem ser lavadas aps a remoo das luvas. Devem ser retiradas ou uma Segunda luva de proteo deve ser colocada para trabalho com material no contaminado, como atender o telefone ou utilizar o terminal de computador. Ser descontaminada aps cada uso e estocada em uma rea limpa no caso das luvas no descartveis.

TODO MATERIAL BIOLGICO, deve ser manipulado com o uso de luvas de

borracha. Isto se aplica mesmo aqueles em recipientes APARENTEMENTE LIMPOS

E SECOS. 5.4-Mscara e culos de proteo: Devem ser utilizados em todas as atividades que
envolvam a formao de aerossol ou suspenso de partculas ( ex.: pipetagem, centrifugao, execuo de raspados epidrmicos, semeadura de material clnico, etc.). As mos devero ser lavadas freqentemente durante o dia. Lav-las sempre que retirar as luvas, antes de sair do laboratrio, antes e aps o contato com pacientes , come ou fumar, ou contato acidental com material biolgico. 5.5- Lava-olhos: Devem estar localizados dentro do laboratrio e os funcionrios treinados para o uso. Deve ser verificado semanalmente para o correto funcionamento. Quando ocorrer acidente com derrame de material nos olhos, estes devem ser lavados por no mnimo 15 minutos.

5.6-Escudo de proteo contra respingos: Devem ser fornecidos para qualquer

funcionrio que esteja envolvido em atividades geradoras de aerossol como a abertura de tubos de sangue.

5.7-Kit de primeiros socorros: Deve estar disponvel em todos os setores e constar de

material necessrio para tratamentos, como pequenos ferimentos na pele ocorridos na rea de trabalho. Os funcionrios devem ser treinados para o uso.

5.8-Kit de desinfeo: Deve estar disponvel em todos os setores para conteno e

descontaminao em caso de acidentes com material biolgico no laboratrio. Os funcionrios devem ser treinados para seu uso.

5.9-Ducha de segurana: Deve estar montada dentro da rea do laboratrio em local de

fcil acesso por todos os setores. O acionamento deve ser fcil para que funcionrios mesmo com os olhos fechados possam acion-la. Devem ser checadas mensalmente para seu correto funcionamento.

5.10-Capelas de exausto e cmaras de fluxo laminar: Devem ser utilizadas para

proteo contra material voltil ou proteo microbiolgica respectivamente. As cmaras de fluxo laminar podem ser utilizadas na proteo do operador ou do material no seu interior dependendo da rotina efetuada.

6. Quadro
Nvel do Risco Biolgico (NRB) GRAU DE RISCO

de nveis de riscos biolgicos

Labs Patologia - Distino dos nveis de risco biolgico associado rotina de trabalho NRB-1 NRB-2 NRB-3 NRB-4

Baixo: Servios burocrticos Cadastro de exames Preparo de reagentes no txicos Transporte de material entre os postos Liberao de resultados Atendimento

A. NVEL DE RISCO Baixo a moderado: Moderado a alto: Transporte de Coleta de material para espcimes clnicos. anlise em Processamento de bandejas espcimes para Autoclavao exames (urinlise, parasitologia, anat. Tcnicas de Patol., etc). colorao Preparo de Microscopia lminas para Calibrao de coloraes ou equipamentos sem microscopia direta, cultura de etc) microrganismos Centrifugao de sangue, urina, ou outros lquidos

Alto risco: Preparo de solues corrosivas Manipulao de culturas de Mycobacterium tuberculosis e demais espcies de Mycobacterias patognicas Material sabidamente contaminado com HIV ou HBV Extrao e manipulao de 9

biolgicos. preparo de lminas. Semeadura de material clnico para cultura Manipulao de microrganismos ou culturas potencialmente contaminadas B. PRTICAS DE SEGURANA 1. Acesso de pessoal permitido no Tcnico 2. Acesso de pessoal permitido de outros setores Alertas de atividades de risco para o setor (proibido fumar, proibido alimentos , proibido uso de EPIs na rea no tcnica, etc.) Placas indicativas: Sada de emergncia Chuveiro e 3. lava olhos Sinalizao Delimitao entre setores tcnicos e burocrticos rea de alimentao Extintores Lista e interpretao dos sinais encontrados nas instalaes do laboratrio Cruzada: mos e equipamentos contaminados por pessoal dos setores 3. origem tcnicos ou visita a do risco estes setores Acidentes em geral: Queimaduras, choque eltrico, corte 4. Riscos nenhum dos rejeitos No recomendado proibido

material gentico (RNA ou DNA)

Proibido

Permitido

restrito

Proibido

Alertas de risco para o executante (risco biolgico, uso de EPIs, material contaminado, etc) Alerta de atividades de risco para o setor (proibido fumar, proibido alimentos , lavar as mo, utilizar EPIs, etc.)

Alertas de risco para o executante (risco biolgico, uso de EPIs, material contaminado, etc) Alerta de atividades de risco para o setor (proibido fumar, proibido alimentos, lavar as mo, utilizar EPIs, etc.)

Alertas de risco para o executante (risco biolgico, uso de EPIs, material contaminado, etc) Alerta de atividades de risco para o setor (proibido fumar, proibido alimentos, lavar as mo, utilizar EPIs, etc.)

Frascos e equipamentos contaminados com patgenos de espcimes clnicos Acidentes em geral: Queimaduras, choque eltrico, corte As bandejas devem ser descontaminadas com soluo de hipoclorito

Frascos, aerossol, perfuraes com material biolgico ou equipamentos contaminados Acidentes em geral: Queimaduras, choque eltrico, corte Todo o material utilizado deve ser esterilizado por

Queimaduras Contaminao Acidentes em geral: Queimaduras, choque eltrico, corte

Todo o material utilizado deve ser esterilizado por 10

de sdio Lminas usadas devem ser descartadas em soluo germicida As toalhas de papel ou qualquer lixo resultante desta atividade devem ser autoclavados

flambagem ou autoclavao ou descartado em soluo germicida Os perfuro-cortantes devem ser descartados na caixa rgida para material conataminado

flambagem ou autoclavao ou descartado em soluo germicida Os perfuro-cortantes devem ser descartados na caixa rgida para material conataminado Os resduos qumicos devem ser estocados em recipientes fechados e coletados por uma empresa especializada Sacos plsticos para autoclavao dentro de baldes com indicao de material contaminado Jaleco, luvas Auxiliada por equipamento

5. Transporte de lixo biolgico

No realizada

6. pipitarem No realizada 7. Alimenta o ou aplicao de cosmticos 8.

Sacos plsticos para autoclavao dentro de baldes com indicao de material contaminado Jaleco, luvas Auxiliada por equipamento

Sacos plsticos para autoclavao dentro de baldes com indicao de material contaminado Jaleco, luvas Auxiliada por equipamento

proibida

Proibida

proibida

proibida

Bico de bunsen Cmara de fluxo Minimizao No necessria No necessria laminar de aerossis exausto C. EPIs NECESSRIOS PARA AS ATIVIDADES 1. JALECO OBRIGATRIO OBRIGATRIO OBRIGATRIO Termoresistentes para autoclavao 2. LUVAS No necessrio De ltex ltex para outras atividades Somente em atividades com formao de aerossol :semeadura de espcimes para cultura. Preparo de lminas para colorao pelo Ziehl Nielsen. Processamento de material para exames Manipulao de culturas Centrifugao, etc. Somente em atividades com formao de aerossol :semeadura de espcimes para cultura. Preparo de lminas para colorao pelo Ziehl Nielsen. Processamento de material para exames

Cmara de fluxo laminar exausto

OBRIGATRIO

De ltex

3. MSCARA

No necessrio

No necessrio

No necessrio Obs: o trabalho ser realizado apenas em cmara de fluxo laminar ou capela de exausto

4. CULOS

No necessrio

No necessrio

No necessrio Obs: o trabalho ser realizado apenas em cmara de fluxo laminar ou capela de exausto

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Manipulao de culturas Centrifugao, etc. Somente no preparo de espcimes No necessrio No necessrio onde a No necessrio centrifugao empregada D. EQUIPAMENTOS DE CONTENO DE CONTAMINAO Obrigatrio, podendo ser substitudo pela No necessrio No necessrio No necessrio cmara de fluxo laminar No necessrio No necessrio Pode ser utilizado,
NO OBRIGATRIO

5. Protetor de ouvidos

1. Bico de bunsen 2. cmara de fluxo laminar 3.

LMPADAS ULTRAVIOL ETA

OBRIGATRIO USO obrigatrio AO FINAL DO trabalho 30 minutos (somente para material contaminado) Descontaminao aps qualquer contato com espcime clnico (equipamentos e superfcies) Limpeza diria com hipoclorito 2% nas bancadas e pisos

No necessrio

No necessrio

USO obrigatrio AO FINAL DO DIA - 30 minutos

5.
DESCONTAM INAO QUMICA DA REA

Limpeza diria de rotina

Descontaminao de superfcies aps qualquer contato com espcimes clnicos ou culturas com hipoclorito 2% Limpeza diria com hipoclorito 2% nas bancadas e pisos

Descontaminao aps qualquer contato com espcime clnico (equipamentos e superfcies) Limpeza diria com hipoclorito 2% nas bancadas e pisos

1. TREINAMEN TO

Necessrio, com registro das atividades Necessrio quando apropriado obrigatria

E. OUTRAS NECESSIDADES Programa semestral ou Programa semestral ou aps a entrada de um aps a entrada de um novo funcionrio. Com novo funcionrio. Com registro das atividades registro das atividades Necessrio quando apropriado obrigatria Comunicar imediatamente ao diretor do laboratrio ou mdico responsvel no momento. Realizar registro do acidente e medida tomada Necessrio quando apropriado obrigatria Comunicar imediatamente ao diretor do laboratrio ou mdico responsvel no momento. Realizar registro do acidente e medida tomada

Programa semestral ou aps a entrada de um novo funcionrio. Com registro das atividades Necessrio quando apropriado obrigatria Comunicar imediatamente ao diretor do laboratrio ou mdico responsvel no momento. Realizar registro do acidente e medida tomada

2. vigilncia mdica 3. vacinao (hepatite)

Comunicar imediatamente ao diretor do laboratrio ou mdico 4. acidentes responsvel no momento. Realizar registro do acidente e medida tomada

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6.1- Controle ambiental

6.1.1-Descontaminao de rea aps derramamento de material biolgico ou cultura de microrganismos
1. Notifique imediatamente aos demais funcionrios do setor. 2. Se houver algum risco biolgico associado com a liberao do aerossol todos os funcionrios devem deixar imediatamente o setor. No setor de microbiologia a rea deve ser irradiada por 30 minutos com ultravioleta. 3. Os indivduos envolvidos no acidente devem verificar suas vestimentas quanto a contaminao com o material. Caso tenha ocorrido, as medidas de descontaminao da roupa devem ser tomadas.

6.1.2-Descontaminao de pequenas reas (INSTRUO PARA DESCONTAMINAO)

4. Colocar os EPIs necessrios. 5. Identificar a rea que necessita de descontaminao. 6. Preparar os sacos para descarte de material contaminado 7. Mover-se lenta e cuidadosamente durante o tratamento da rea com o descontaminante prprio (lcool iodado, hipoclorito, glutaraldedo, lcool 70%, germekil, etc.) evitando a formao de novos aerossis. 8. Cobrir a rea inteira com uma toalha absorvente e deixar o germicida agir por 30 minutos antes de recolher com os fragmentos grosseiros. 9. Colocar o material absorvente nos sacos para descarte e os perfuro cortantes nas caixas rgidas. 11. Remover as luvas cuidadosamente e descarta-las juntamente com o material contaminado. 12. Lavar as mos com gua e sabo e soluo anti-sptica. 13. Registrar o acidente.

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Kit de limpeza
Instruo para descontaminao por escrito e em local de fcil visualizao EPIs P plstica Desinfetantes apropriados (dentro da validade) Toalha de papel absorvente Saco plstico para descarte de material contaminado e caixas rgidas para perfuro cortantes Documentao

6.2 - Esterilizao e descontaminao

6.2.1-Procedimentos gerais de descontaminao Estes procedimentos devem ser seguidos para o descarte de rejeitos: 1. Todo material infeccioso ou equipamento utilizados na rotina do laboratrio devem ser desinfetados antes da lavagem ou de ser jogados no lixo. A autoclavao deve ser o mtodo de escolha , exceto para todo e qualquer material reaproveitvel termolbil ou produtos oxidantes ou que liberem subprodutos txicos quando aquecidos.
2.

O material a ser autoclavado deve ser estocado em sacos brancos fechados, com indicao de MATERIAL CONTAMINADO PARA SER AUTOCLAVADO, dentro de baldes fechados caso no sejam autoclavados no mesmo dia.

3. Material oxidante como hipoclorito ou outro oxidante forte no deve ser autoclavado com material orgnico como papel ou leo. A combinao destes compostos pode produzir uma exploso.
4.

O material para ser lavado aps a autoclavao deve ser estocado em baldes com tampa com a indicao MATERIAL NO INFECCIOSO (PARA SER LAVADO).

6.3-AUTOCLAVAO O termo esterilizao refere-se completa eliminao de patgenos, agente biolgico com capacidade de reproduo ou potencial infeccioso. A esterilizao o melhor mtodo de eliminao do risco biolgico. O uso da autoclave o mtodo mais utilizado nas instituies de sade e pesquisa, assegurando a completa destruio de microrganismos. Este processo
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geralmente envolve aquecimento da gua em uma cmara sob presso gerando vapor sob uma presso de 15 psi, o que ocorre em temperatura de cerca de 121 C por no mnimo 15 minutos. O tempo medido aps a temperatura do material envolvido atingir 121 C. O fator crtico nesta fase a garantia que no fique ar preso no interior do autoclave, o que pode impedir que a temperatura no interior do aparelho atinja os 121o C . para isto deve haver um monitoramento da temperatura com um termmetro-manmentro, bem como controle do processo com uso de um indicador qumico ou biolgico. Caso ocorra interrupo no processo de aquecimento durante a marcao do tempo, TODO O PROCESSO deve ser repetido.

6.3.1-Controle do processo
O melhor controle para esterilizao o uso de esporos de Bacillus stearothermophilus, que so includos com o material a ser esterilizado dentro do autoclave. Esta cultura pode ser adquirida comercialmente sendo a apresentao em ampolas com meio de cultivo e indicador de pH. Aps a esterilizao as ampolas so incubadas na temperatura adequada e verificadas para a viragem do indicador, o que indica que houve crescimento microbiano e falha no processo de autoclavao. Em uma perfeita esterilizao no haver crescimento microbiano ou viragem do pH. Os indicadores qumicos tambm podem ser empregados no controle de esterilizao por autoclavao. A fita de autoclave um exemplo deste indicador. Neste caso o indicador na fita branca muda para uma cor negra ou cinza, indicando que houve uma autoclavao eficiente. Material necessrio para a validao do processo. Um dos processos deve ser utilizado FITA INDICADORA ou INDICADOR BIOLGICO- Para este ultimo ainda so necessrios os seguintes complementos:
1.

Ampolas contendo esporos de Bacillus stearothermophilus

2. Incubadora para a cultura

Teste

atividade

121o C Morre em 13 min. Torna-se escura No muda de cor Em relao Em relao tempo/ temperatura tempo/ temperatura eficientes ineficientes 121o C /15 minutos 15 Sobrevive por 5 min.

B. stearothermophilus Fita indicadora

autoclavao autoclavao

6.3.2-Critrios de aceitabilidade
A fita indicadora deve mudar de cor Os esporos no devem crescer aps incubao da ampola

6.3.3-Registro
Registrar o resultado em uma planilha de controle de esterilizao.

6.4-Forno Pasteur
O uso de esterilizao seca (Forno Pasteur) menos eficiente que a esterilizao pelo vapor do autoclave. A esterilizao pelo calor seco eficiente quando realizada 160- 180 C por perodos de 2 4 horas. Neste processo o ponto crtico a composio qumica de material que est sendo esterilizado, bem como o arranjo do material no forno. Material termolbil no deve ser utilizado no processo.

6.5-Descontaminao (Desinfeco)
Pode ser definida como a reduo da maioria ou eliminao dos microrganismos patognicos em uma superfcie ou objeto, tornando este objeto incapaz de transmitir doenas. Fatores que determinam a efetividade de um desinfetante a) concentrao do princpio ativo b) quantidade de material orgnico no material a ser descontaminado c) tempo necessrio para a ao d) temperatura e pH e) nvel de contaminao f) tipo de contaminao envolvida g) caractersticas fsicas do material a ser descontaminado

6.5.1- Desinfetantes lquidos

Estes devem ser estocados nos frascos originais em um ambiente de uso exclusivo do pessoal de limpeza. Apenas pequenas quantidades devem ser estocadas no ambiente nos setores para uso rotineiro. As solues diludas de acordo com as especificaes para uso devem ser estocadas por um pequeno perodo, no mximo 48 horas para evitar perda de atividade do produto. Estes

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frascos devem conter as especificaes do produto, bem como o grau de toxicidade que este apresenta, alm da data de preparo e validade. 1) lcool etlico 80% Eficiente desnaturante de lipdios de vrus envelopados e clulas vegetativas de bactrias. No corrosivo. Evapora rapidamente e bastante inflamvel. Uso: descontaminao de superfcies (exceto acrlico) ou na antisepsia da pele, durante a coleta de material para anlise. No utilizar em regio de mucosas. 2) lcool etlico iodado (lcool etlico 80% + 2% de iodo cristal dissolvido) Mais eficiente que o lcool etlico puro devido ao efeito halogneo do iodo. Eficiente desnaturante de lipdios de vrus envelopados e clulas vegetativas de bactrias. No corrosivo. Evapora rapidamente e bastante inflamvel. Uso: descontaminao de superfcies (exceto acrlico). Seu uso deve ser evitado na antisepsia durante a coleta devido alergia ao iodo apresentada por alguns pacientes. 3) Formaldeido e glutaraldedo O uso do Formaldedo na descontaminao ideal a 5% de concentrao do gs na gua. Atividades de descontaminao sob refrigerao utilizando formaldedo devem ser evitadas, pois este ultimo em baixas temperaturas perde atividade. Uma desvantagem do seu uso o odor irritante liberado, podendo causar hipersensibilidade. O glutaraldedo prefervel por ser menos irritante. EPIs especiais principalmente com proteo para os olhos e aparelho respiratrio devem ser utilizados. Uso: Descontaminao de pequenos equipamentos, ou superfcies com alto grau de contaminao. Principalmente em equipamentos metlicos por ser menos corrosivo. 4) Componentes fenlicos Com odor desagradvel e altamente corrosivo, deve ser evitado no laboratrio. Uso: latas de lixo (creolina) 5) Quaternrios de amnio

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Excelentes desinfetantes, com baixa toxicidade e resduos corados, bem como liberao de odores. Apresentam em grande espectro de ao, inclusive contra os bacilos da tuberculose, esporos bacterianos e fungos Descontaminao de tubos, lminas, pipetas e ponteiras, bem como superfcies. Ex. GERMEKIL 6) Componentes clorados Amplamente utilizados , apresentam um grande espectro de ao. Pouco ativo em presena de grandes quantidades de material orgnico. Altamente oxidante e extremamente corrosivo em metais. As solues diludas perdem atividade rpido principalmente quando expostas luz. Desta forma, os frascos devem ser escuros e as solues trocadas a cada 24 horas. A gua sanitria, 25 hipoclorito de sdio, a mais utilizada entre as preparaes comerciais. Uso: Superfcies e cho para a limpeza de rotina. Deve ser utilizada proteo especiais para os olhos e aparelho respiratrio durante a aplicao. 7) Compostos iodados Utilizados geralmente associados com outros compostos (detergentes, lcool, etc). Deve haver um cuidado especial com os indivduos alrgicos. Uso: Equipamentos e superfcies contaminadas ou na anti-sepsia da pele em pacientes no alrgicos. Ex. iodine

6.6 - SEGURANA BIOLGICA DAS CENTRFUGAS

Devido ao alto ndice de acidentes neste aparelho, principalmente a quebra de tubos com espcimes clnicos e conseqente formao de aerossol que pode expor vrios funcionrios agentes infeciosos, as centrfugas merecem uma ateno especial em relao segurana biolgica. As centrfugas devem ser instaladas em um compartimento isolado, bem ventilado, que deve ser evacuado durante o processo. Caso ocorra um acidente, quebra de tubos, o equipamento deve ser descontaminado com glutaraldedo ou mesmo hipoclorito de sdio. O que fazer em caso de ACIDENTES NA CENTRFUGA: 12Deixe o aerossol baixar durante 30 minutos. Coloque seus EPIs , luvas, mscara e culos de proteo. hipoclorito (gua sanitria), lcool iodado ou lizoforme por no mnimo 15minutos.
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3- Descontamine o suporte da centrfuga com glutaraldedo ou

4- Retire os demais tubos da centrfuga e descontamine a parte interna do equipamento com uma gaze embebida em uma das solues germicidas descritas acima. 5- Descarte os fragmentos do tubo na caixa amarela para perfuro-cortantes. 6- Comunique o incidente ao responsvel pelo setor para que seja providenciada uma nova amostra.

7.0 Manejo do lixo

O lixo do laboratrio dividido em: No contaminado, contaminado e lixo qumico. Todo o lixo contaminado gerado pelo laboratrio deve ser esterilizado antes do descarte. A coleta dever ser efetuada por uma empresa especializada em lixo hospitalar que possua contrato de servio com o laboratrio (Koleta Servios Tcnicos LTDA. Processo em anexo). 7.1 -Tipos de Lixo: 1. Lixo patolgico- Tecidos humanos ou partes do corpo removidas durante cirurgias incluindo material de obstetrcia, autpsias e de procedimentos laboratoriais. Este tipo de lixo deve ser incinerado ou autoclavado e enviado para uma rea de descarte de lixo hospitalar regulamentada. 2. Lixo Biolgico Sangue e produtos sangneos, exsudatos, secrees, aspirados , fezes e outros fluidos corporais que NO devem ser descartados diretamente no sistema de esgoto. Este tipo de lixo DEVE ser tratado de forma que se transforme em um lixo que no oferea risco ambiental. O principal tratamento a AUTOCLAVAO 121 oC/ 35 min. 3. Culturas e estoque de agentes infecciosos Culturas microbianas, equipamentos utilizados para manipulao de culturas (ponteiras, alas, agulhas, etc.). Estes devem ser colocados em sacos plsticos branco com a indicao de lixo biolgico com o smbolo de RISCO BIOLGICO e autoclavados antes do descarte. 4. Prfuro-cortantes (contaminados ou no) Qualquer material capaz de causar perfuraes ou cortes na pele. Entre estes incluem-se agulhas de seringas, pipetase tubos quebrados. Estes devero ser descartados em uma caixa rgida AMARELA que devera ser autoclavada antes do descarte, (em caso de material contaminado). 5. Equipamentos e aparelhos utilizados nos exames- Estes s podero deixar o laboratrio aps sofrerem uma rgida descontaminao a fim de minimizar os riscos de contaminao do pessoal de transporte e manuteno. 6. Resduos lquidos combustveis contaminados- Estes devem ser mantidos em um reservatrio fechado e recolhido por uma empresa especializada.

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8.0- ROTULAGEM DE RESDUOS DO LABORATRIO: Material contaminado- Devem ser coletados, entre eles: os resduos slidos, luvas contaminadas, papis, etc, em sacos plsticos brancos com O SMBOLO DE RISCO BIOLGICO, que indica material contaminado. Em caso de necessidade de estocagem antes da autoclavao, estes devem ser depositados em baldes de lixo que apresentem a indicao de lixo contaminado no autoclavado. Material no contaminado- Coletar em sacos plsticos de cor preta e depositar em latas de lixo, com a indicao de LIXO COMUM. Material prfuro-cortante contaminado - Coletar os resduos utilizando os EPIs necessrios e depositar caixas rgidas (cor amarela) prpria para este tipo de material. Esta deve ser autoclavada e enviada para descarte por uma empresa especializada. Lquidos - devem conter a descrio da natureza de solutos e solventes e concentraes. Tambm descrever a quantidade de gua presente. Procure ser o mais exato possvel nas descries. INDICAO DE RESDUOS LQUIDOS: todos devem ser devidamente indicados com sinais de acordo com as normas da ABNT. 1. Resduo COM POTENCIAL fonte de ignio Um lquido que tenha o ponto de fulgor de menos que 140C. Um slido capaz de causar fogo por frico ou absoro de umidade ou que sofre mudanas qumicas espontneas que resultem em queima vigorosa e persistente. 2. Resduos corrosivos Solues aquosas de pH menor ou igual a 2 ou maior ou igual a 12,5 3. Resduos reativos Solues aquosas de materiais instveis que sofram mudanas qumicas violentas sem detonao, possam reagir violentamente com gua formando misturas potencialmente explosivas ou que possam gerar gases perigosos ou possivelmente letais. 4. Resduo txico Resduo que contm um dos seus componentes em concentraes iguais ou maiores que os valores das tabelas de concentrao mxima de resduos txicos. 5. Resduos de processos Utilizado para aqueles resduos que em virtude de algum uso, processo ou procedimento, no atende as especificaes originais do fabricante. Ex.: produtos diludos, misturas reacionais.

Observaes importantes
Um produto comercial (nunca processado) deve ser descartado no frasco original.
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Ex.: pequenos frascos de reagentes antigos nunca utilizados ou com a validade vencida.

8.1-Principais resduos qumicos no laboratrio

1. Solues de formol ou formaldedo: Solues diludas devem ser estocadas em recipentes fechados para posterior coleta para uma empresa especializada. O formaldedo um agente suspeito de provocar cncer com baixos ndices de exposio permitida e poucos sintomas de advertncia. 2. Solues de brometo de etdio Solues muito diludas podem ser descartadas nas linha de esgoto especiais. A concentrao mxima para a execuo destes procedimentos de 5 ppm. No dilua solues propositadamente para atingir este valor. Estas solues so mutagnicas em altas concentraes. 3. Lquidos que sejam fontes de ignio e solventes orgnicos Manter separados solventes halogenados de solvente no-halogenados se possvel. Separe os solventes orgnicos de solues aquosas quando possvel. Mantenha os solventes acidificados separados de outros solventes e resduos cidos. 4. cidos, bases e solues aquosas No misturar cidos inorgnicos fortes ou oxidantes com compostos orgnicos. Manter cidos, bases e solues aquosas contendo metais pesados separados de outros resduos. Evite misturar cidos e bases concentradas num mesmo recipiente. 5. Solues contendo mercrio Mantenha estes resduos separados de todos os outros 6. Materiais corrosivos O piso dos locais de manipulao de produtos corrosivos deve ser conservado o mais seco possvel. Quando diluir cidos com gua, este dever ser adicionado gua, lentamente, agitando continuamente a mistura; a gua nunca dever ser adicionada ao cido. O derrame ou escape de lquidos corrosivos no deve ser absorvido por meio de serragem, estopas, pedaos de pano ou outro material orgnico. Deve-se neutralizar com cal ou absorv-lo com granulado absorvente. Em caso de contato fsico, deve-se lavar abundantemente com gua corrente e procurar imediatamente socorro mdico.

7. Perxidos

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O uso de perxidos deve ser limitado quantidade mnima necessria. Qualquer respingo deve ser imediatamente limpo. Esptulas de metal no devem ser usadas para manusear perxidos; e sim, de madeira ou cermica. Evitar fontes de calor. Solues de perxidos devem ser armazenadas em frascos de polietileno com tampa esmerilhadas, jamais frascos de vidro. Evitar qualquer tipo de impacto tais como, moagem, frico, etc.. Para minimizar a decomposio, os perxidos devem ser estocados em temperaturas baixas, de acordo com a sua solubilidade e ponto de congelamento.

9.0-RECOLHIMENTO E DESATIVAO DE RESDUOS DO LABORATRIO A finalidade destas indicaes transformar produtos qumicos ativados em derivados incuos para permitir o recolhimento e eliminao segura. Todos os trabalhos devem ser executados por pessoal habilitado com o uso EPIs adequados para cada finalidade. Esta inativao deve ser feita em escala reduzida. Mtodos de eliminao e desativao Solues aquosas de cidos orgnicos: So neutralizadas cuidadosamente com bicarbonato de sdio ou hidrxido de sdio cidos inorgnicos: So diludos em processo normal ou em alguns casos sob agitao em capela adicionando-se gua. A seguir neutraliza-se com soluo de hidrxido de sdio. Bases inorgnicas: So diludas como cidos e neutralizadas com cido sulfrico.

10.0-MANIPULAO DE PRODUTOS QUMICOS

Rotulagem
Todos os frascos, originais do produto ou no, devem conter um rtulo com as seguintes informaes: Nome do produto Quem preparou Concentrao Cuidados Data do preparo Data da validade Condies de estocagem OBSERVAES IMPORTANTES A) Ao reutilizar um frasco vazio certifique-se de que a etiqueta original foi complemente retirada antes de colocar a nova etiqueta.
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B)

Quando encontrar uma embalagem sem rtulo de identificao, descarte o produto.

11- Armazenamento Ao armazenar substncias qumicas, considerar: Incompatibilidades entre os materiais armazenados, principalmente nos almoxarifados. Sistema de ventilao. Sinalizao correta. Disponibilidade de EPIS e EPCs. rea administrativa separada da rea tcnica e da armazenagem.

Produtos Qumicos Incompatveis

Substncias Acetileno Estocagem Incompatvel com: Cloro, bromo, flor, cobre, prata, mercrio xido de cromo IV, cido ntrico, cido perclrico, perxidos, cido Actico permanganato, cido actico, anilina, lquidos e gases combustveis. cido Ntrico cido actico, anilina, lquido e gases combustveis cido Oxlico Prata, sais de mercrio Anidrido actico, lcoois, papel, madeira, clorato de potssio, cido Perclrico perclorato de potssio Amonaco Mercrio, hipoclorito de clcio, iodo, bromo cidos, metais em p, substncias orgnicas ou combustveis Amnio Nitrato finamente divididos Anilina cido ntrico, perxido de hidrognio Carvo Ativo Hipoclorito de clcio, oxidantes Cianetos cidos Cloratos Sais de amnio, cidos, metais em p, enxofre Cobre Acetileno, perxido de hidrognio Cromo IV xido cido actico, naftaleno, glicerina, lquidos combustveis. Hidrocarbonetos Flor, cloro, bromo, perxido de sdio Hidrognio Perxido Cobre, cromo, ferro, lcoois, acetonas, substncias combustveis Nitrato de amnio, perxido de hidrognio, cido ntrico, perxido de Lquidos inflamveis sdio, halogneos Mercrio Acetileno, amonaco Metais Alcalinos gua, tetracloreto de carbono, halogneos Permanganato de Glicerina, etilenoglicol, cido sulfrico Potssio

11.1 - TRANSPORTE DE SUBSTNCIAS PERIGOSAS

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 proibido o transporte de material de risco (inflamveis, explosivos, txicos, irritantes e corrosivos), em motocicletas. O transporte destes produtos dever ser efetuada apenas em carros de carroceiria fechada estando o produto devidamente acondicionado e claramente identificado quanto ao risco que representa (vide informao no rtulo do produto). Alguns produtos includos nesta categoria e freqentemente transportados por nossos funcionrios:

lcool (etanol, metanol) cidos (clordrico, actico, sulfrico, etc.) Formaldedo Gs combustvel (comercial) Hipoclorito Xilol Solventes orgnicos Frascos para coleta de urina de 24 horas com conservante

Nos casos em que o risco da substncia no for identificado , favor contactar o setor de Qualidade- Biossegurana da Patologia (ramal 2121 - Marco Miguel, Mrcio, Nilson, Valria Lessa ou Pedro Ventura).

12-Preparo de Solues

Fazer uma leitura prvia das caractersticas da substncia que est manuseando. Utilizar sempre, EPI especfico. A vidraria utilizada no preparo de solues deve ser de boa qualidade, de preferncia de vidro boro-silicato. Usar sempre, basto com proteo de borracha, teflon ou plstico, para evitar trincar o vidro. No usar vidraria que esteja trincada, lascada ou corroda. Nunca pipetar substncias qumicas com a boca Usar peras de borracha ou pipetadores automticos.

2.1-Procedimentos em caso de acidente com solues:

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Como as substncias apresentam diferentes propriedades, a metodologia de primeiros socorros e descontaminao da rea devero ser realizadas de acordo com a substncia envolvida e as instrues do fabricante contidas no rtulo.

13-INCNDIOS
Como evit-los:
uso adequado das tomadas conforme recomendaes especificadas na "normas bsicas para uso de equipamento eltrico". bujes de gs devem ser armazenados em local bem ventilado na rea externa do prdio. Ateno com substncias potencialmente inflamveis na hora de utilizar o fogo. Estocar substncias potencialmente inflamveis longe de fontes de calor ou tomadas. anuteno do bom estado da parte eltrica do prdio. Manuteno de funcionrios que garantam a segurana do prdio, vigias, durante os fins de semana e feriados.

13.1-EQUIPAMENTO PARA CONTROLAR INCNDIO

Extintores de incndio para produtos qumicos (extintores PQS de p), eletricidade (extintores a gs CO2) e para papis (extintores de gua comprimida) devem estar disponveis. Em Ambientes que utilizam muito equipamento eltrico deve-se ter maior nmero de extintores para eletricidade enquanto aqueles em que o nmero de produtos qumicos for muito grande devem conter extintores PQS em nmero suficiente. Os dois podem ser utilizado em ambos os casos mas com meno do extintor devem ser guardados em local livre e no distantes mais do que a 1 metro do piso e devidamente sinalizados.

Os extintores devem estar com a carga vlida e devem estar a disposio em local acessvel a todos. Recomenda-se em locais com maior periculosidade que haja uma extintor a cada 10m. Tambm recomendvel dentro de laboratrios que contenham muitos solventes ou eqos eltricos. Deve existir no laboratrio uma dio treinada por rgo oficial.

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Utilizesempre o extintor de incndio adequado:

Presso de gua papel

CO2 - eletricidade ( pode ser utilizado c/ menor eficincia para material qumico).

PQS - material inflamvel (pode ser utilizado c/menor eficincia p/eletricidade).

OUTRAS ATIVIDADES QUE DEVEM SER REALIZADAS:

Fechar e remover o bujo de gs, quando possvel. Remover todos os produtos inflamveis, quando possvel. Fechar janelas e portas, quando possvel.

Incndio de pequeno porte

- Seguir corretamente as instrues de uso do extintor que devem ser alocados em local livre e no distantes mais do que a 1 metro do piso e devidamente sinalizados. - Aps o uso do extintor, notificar o servio de segurana para recarregamento.

Precaues em caso de incndio de grande porte

- Manter a calma e dar o alarme. - Desligar imediatamente a capela e fechar as sadas de gs. - Fazer a evacuao com calma. Em caso de fumaa, ande o mais rente possvel do piso.

14. Telefones teis Internos - setores de: Diretoria: Mdicos de planto: Roger Levy Telefone

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Maria Clara Porto Marcos Birro Vera Cuoco Coordenao da Biossegurana Marco Antnio Lemos Miguel: Manuteno 9124-6719 Ramal 2156 Ramal 2157 Externos Bombeiros Polcia Defesa Civil Hospitais prximos: (Zona Sul) H. M. Miguel Couto - Botafogo (Centro) H. M. Souza Aguiar - Centro (Norte) H. E. Getlio Vargas - Penha (Norte) H. M. Salgado Filho - Meier (Oeste) H. E. Carlos Chagas - Mal. Hermes Ministrio da Sade - Instituto Nacional de Controle de Qualidade em Sade - INCQS Informaes sobre AIDS - Hospital Evando Chagas Centro de controle de intoxicaes Luz e Fora Lig-Light CEDAE CEG (gs) 193 190 199 274-6050 296-4114 270-7772 201-9112 390-0123 290-0392 280-1590 260-9749 290-3344 196 120 195 197

15- REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS 1- M. M. de Souza. 1998. Biossegurana no laboratrio clnica. Ed. Eventos 2- CDC/NIH- Biosafety in Microbiological and Biomedical Laboratories 3- Manuais de Legislao Atlas; 39a edio. 1998. Volume 16: Segurana e Medicina do Trabalho. 4- WHO-Laboratory Biosafety Manual. Geneve, 1994.

5- International Organization for Standartization ISO/TC 212/WG 1, Quality management in the Clinical Laboratory 16 Documentos anexos e legenda dos smbolos
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