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glutamil transferase mtodo cintico

parte da introduo: A GGT uma enzima localizada predominantemente nos hepatcitos , em menor concentrao nos rins e, em concentrao bem menor no epitlio do trato biliar, no intestino , corao, pncreas, bao e crebro. A principal funo dessa enzima catalisar a transferncia de amino cidos e peptdeos atravs das membranas celulares. Os recm nascidos apresentam valores altos de GGT que decaem para valores do adulto em torno de quatro meses de vida. J foi constatado, atravs de estudos, que os indivduos obesos apresentam nveis de GGT mais altos do que as pessoas no obesas. As doenas hepticas ativas compreendem as causas mais comuns de elevao da GGT. Os nveis de GGT so afetados tanto pela leso hepatocelular aguda quanto pela obstruo do trato biliar. Desse modo, a determinao da GGT empregada no diagnostico das doenas hepticas e muito especifica para indicar uma colestase. Nesses quadros clnicos, os nveis de GGT acompanham os da fosfatase alcalina (ALP), porm a GGT mais sensvel e tambm no se eleva nas doenas sseas como a fosfatase alcalina. Um paciente apresentando GGT normal com ALP alta indica uma doena ssea, enquanto uma GGT alta com ALP alto indica uma doena heptica. Devido a leso heptica concomitante, a GGT a sua utilizao para detectar a ingesto de lcool, uma vez que ela pode aumentar mesmo aps pequenas doses de bebida. De acordo com a literatura, cerca de 75% dos bebedores invertebrados e alcolatras crnicos apresentam nveis altos de GGT. Atualmente, a dosagem da GGT recomendada como mtodo de triagem para o alcoolismo. Valores elevados de -GT so mais comumente encontrados nas seguintes patologias: hepatite, cirrose, necrose heptica, tumor heptico, colestase, drogas hepatxicas, ingesto alcolicas, ictercia, pancreatite, isquemia heptica, infarto do miocrdio(4-10 dias aps ) e insuficincia cardaca congestiva. Os valores de GGT podem estar diminudos na fase final da gravidez. As drogas que podem aumentar os nveis da GGT so: lcool, fenobarbital e fenitoina(dilantina). As drogas que podem diminuir os nveis da GGT so: anticoncepcionais orais, citrato, clofibrato, fluoreto e oxalato.

materiais e reagentes utilizados: reativo tampo CAT N 02101 soluo tamponada de glicilglicina 60 mmol/L - pH= 8,2 volume 60 ml reativo substrato CAT N 02102 gama glutamil paranitroanilida 12mol x 30 30 comprimidos. amostra- soro. espectrofotmetro 405 nm= 0,001A. banda de passagem 10 nm. micropipetas e pipetas de 5 mL e 10 mL . cronmetro. Becker de 200mL. cubetas de faces planas. gradinha das cubetas.

Para a preparao de todo o trabalho primeiramente preciso tomar as devidas precaues. A vida til do kit (restivo de tampo e reativo substrato) estvel at seu vencimento impresso na caixa e mantido refrigerado. Evitar deix-lo temperatura ambiente por perodos prolongados para que as enzimas no se degradem. O kit no contm derivados de sangue humano, porm, considerar qualquer amostra de paciente como potencialmente infectante. evitar o contato direto com as amostras. No pipetar reagentes ou amostras com a boca. Descartar as sobras das reaes de acordo com as boas prticas de laboratrio em local prprio para materiais potencialmente infectantes.Para a preparao da amostra no caso do soro foi obtido de maneira usual com anticoagulante HB da LABORLAB, os anticoagulantes que contem citrato, fluoreto e oxalato produzem leve a inibio enzimtica e por isso no podem ser usados. A heparina produz interferncia no mtodo cientifico. As amostras ictercias ou com hemlise moderada ou intensa e hiperlipnicas produzem valores falsamente aumentados. A enzima no soro estvel at 2 semanas refrigerada ou at 6 meses congelada. O mtodo usado foi o cintico,a Tcnica foi preparada primeiramente usando o espectrofotmetro a 405 nm, a temperatura de acordo com a DGKC deve ser a 25 C, a IFCC recomenda 30 C e o comit de enzimas(SSCC)37. O espectrofotmetro deve ser ajustado em uma leitura contra o ar entre 0,200 e 0,300 A. Nos aparelhos com microcubeta termostizada e fluxo continuo acertar o zero em absorbncia contra gua deionizada.