E os vrus? Onde entram nessa histria?

E os vrus ?

Os vrus no esto classificados em nenhum domnio da vida

Foram rebaixados como meros agentes qumicos inertes a partir de 1935, quando o vrus do mosaico do tabaco foi cristalizado. Observaram que consistia em um pacote de agentes bioqumicos complexos. Faltavam sistemas de funes metablicas

O que so vrus?
Propriedades virais
Vrus so pequenos parasitas obrigatrios Compostos por material gentico (DNA ou RNA) envolto por camada protica. Pode abrigar algumas protenas virais envolvidas nas infeces O genoma viral dirige a sntese de componentes virais usando a maquinaria metablica da clula (Vrus no possuem a informao gentica que
codifica a maquinaria para a sntese de proteinas (ribossomos)

Os componentes virais so montados dentro da clula e formam novas partculas virais Partculas virais recm formadas so veculos de transmisso de novos genomas para novas clulas ou organismos

Vrus: seres vivos ou seres no vivos?

O conceito de vrus como organismo desafia a maneira como definimos vida

Vrus no se movem No se dividem No crescem

Contudo, os vrus certamente se reproduzem, e se adaptam a novos hospedeiros

Vrus: seres vivos ou seres no vivos?

Propriedades dos organismos: De acordo com a viso clssica
Reproduo Nutrio Respirao Irritabilidade Movimento Crescimento Excreo

Uma viso mais moderna

A vida pode ser definida em termos gerais como o fenmeno associado com a replicao dos sistemas de informao auto codificadores ou Fenmeno associado com a replicao de cidos nucleicos
Rybicki EP, 1996

Vrus, organismos vivos?

Devido s suas caractersticas estruturais, por serem metabolicamente inertes e serem replicados por montagem de partes pr-formadas, ao invs de se multiplicarem por fisso binria, os vrus no se ajustam a nenhum dos sistemas de classificao biolgica.

Um pouco de vida
Esto no limiar entre vida e matria inerte So compostos pelo mesmo tipo de protenas e cidos nuclicos que compem a vida, mas precisam dela para se reproduzir Vida emprestada? Um enorme nmero de vrus se replica e sofre mutaes Neste processo, so formados novos genes, que podem ser incorporados ao genoma do hospedeiro Portanto, os vrus no so matria inanimada

Um novo desafio
O sequenciamento do genoma do vrus mimivirus o maior vrus conhecido Infecta amebas Presena de vrios genes encontrados em organismos celulares Este um desafio para a fronteira estabelecida entre vrus e outros parasitas celulares

Qual a melhor definio de vrus?

Vrus podem ser definidos como organimos acelulares que se replicam dentro de uma clula hospedeira usando a maquinaria metablica da clula para formar novas partculas virais, que protegem e transferem o genoma para outras clulas
SE Luria, JE Darnell, D Baltimore and A Campbell (1978). General Virology, 3rd Edn. John Wiley & Sons, New York, p2 of 578.

Tamanho dos vrus

Tamanho relativo dos microorganismos

MICROORGANISMO TAMANHO MDIO (mm3)

Protistas eucariotos Bactria Espirochetes procariotos Poxvrus Vrus influenza Poliovrus

5,00050,000 550 0.12.0 0.01 0.0005 0.00001

Origem dos vrus

A origem dos vrus na escala evolutiva ainda no conhecida Nenhum fssil viral encontrado at hoje: so muito pequenos e muito frgeis

Teorias da origem dos vrus

Origem pr-celular Involuo de um organismo unicelular: reduo Origem celular

Teorias da origem dos vrus

Origem pr-celular
Formas de vida primordiais

Argumentos contra:
- Todos os vrus so parasitas celulares obrigatrios

Teorias da origem dos vrus

Involuo de um organismo unicelular

Teoria da reduo

Argumentos contra:
-At hoje no foram encontradas formas intermedirias entre vrus e clulas -Todos os outros parasitas (pertencentes aos trs domnios) derivados de clulas conservaram suas caractersticas celulares (Ex: ribossomos, maquinaria para sntese de ATP)

Teorias da origem dos vrus

Origem celular A mais aceita
Muitos cientistas consideram os vrus como evoluo de "restos" de clulas: a degradao de pedaos de cidos nuclicos celulares que, posteriormente, adquiriram o capsideo e envelope, deu origem aos vrus. Isto explicaria a notvel semelhana entre as sequncias do RNA ou DNA de vrus com as encontradas nos seres vivos

No entanto:
-Como um cido nuclico livre pode ter adquirido um capsdeo? -Estudos de sequenciamento demonstram que a maioria das protenas virais no possuem similaridade (homologia) com protenas celulares

Origem dos vrus

Sistemtica molecular de vrus
Estudos de sequenciamento esto desvendando as origens de vrus importantes Reconstruo de padres evolutivos atravs da comparao de genomas virais e de sequncias virais com sequncias celulares

Sequenciamento Sequenciamento

38870

49220

Evoluo viral
Estudos de filogenia molecular
Vrus coevoluram com seus hospedeiros por longos perodos

Exemplo: Vrus da Herpes= Acredita-se que o vrus da Herpes j existia h cerca de 200
milhes de anos, e que eles infectaram humanos desde o incio de sua especializao rvore filogentica das 20 espcies de Herpes vrus derivada da comparao de sequncias de 7 genes

As trs famlias gnicas diferem na restrio do hospedeiro, tipos de clulas infectadas, e tipos de clulas em que os vrus ficam latentes

Peas fundamentais da histria da vida

Todos os domnios da vida podem ser infectados por vrus Papel na evoluo das espcies Trocam informaes genticas com o hospedeiro Vrus podem ser latentes 3% do genoma humano

Um pouco sobre estrutura

Partcula viral
Cada espcie de vrus apresenta virions de formato caracterstico Genoma viral- DNA ou RNA. O material gentico possui as informaes para a produo de novos vrus Capsdeo- Envoltrio dos vrus. Formado por protenas e tem a funo de proteger o genoma viral. Os capsdeos apresentam diversos formatos, porm todos so compostos de sub-unidades proteicas Envelope- Alguns vrus podem ainda possuir uma membrana lipdica contendo glicoprotenas provenientes da clula que infectam, denominada envelope

Estrutura viral
Genoma viral
formado por DNA ou RNA, de fita dupla ou simples, linear ou circular, de polaridade positiva (senso) ou negativa (anti-senso) Codifica toda a informao gentica necessria para a sua replicao

cido nucleico Os vrus so os nicos organismos que possuem RNA como material gentico
RNA ds ss ds DNA ss

Linear

circular

Linear

circular

Estrutura viral
Capsdeo
Armazena e protege o material gentico viral

helical

Icosadrico

Estrutura viral
Envelope
Membrana lipoprotica, originada da clula hospedeira na qual o vrus foi sintetizado As protenas deste envelope podem ser de origem viral ou celular Protege o genoma viral contido nele e tambm provm o mecanismo pelo qual o vrus invade seu prximo hospedeiro

Vrus no envelopados

Vrus envelopados

Estrutura viral
Envelope

HIV

Replicao viral
1. Absoro
O virion se conecta a um local especfico do receptor numa clula hospedeira e se fusiona com a membrana da clula hospedeira

2. Penetrao
O virion penetra na membrana e o material gentico viral entra na clula hospedeira

3. Liberao
O cido nuclico viral liberado a partir da capsdeo

4. Transcrio e replicao
O material gentico vital reprograma a clula hospedeira para fabricar os componentes virais

5. Montagem
O novo cido nuclico e os capsdeos so montados de maneira a formar virions completos

6. Liberao
Os novos virions so liberados a partir da clula hospedeira

Vrus
Os vrus possuem dois estgios:
-Uma fase dormente extracelular Virions
-Partculas virais que carregam o genoma viral, formadas dentro das clulas a partir de componentes virais -Podem ser referidos com uma fase extracelulardo vrus

-Uma fase ativa intracelular = estgio infeccioso

Exemplos de genomas virais

VRUS Picornavirus Rabies Influenza Rotavirus Parvovirus Herpesvirus GENOMA (+)ssRNA (-)ssRNA (-)ssRNA segmentado dsRNA segmentado ssDNA dsDNA ENVELOPE no sim sim no no sim

Replicao viral
The simplest viral life cycle

Vrus com genoma de DNA dupla fita

Replicao do genoma viral

Os vrus possuem os mais diversos genomas

Diferentes estratgias de replicao

DNA dupla fita = se replicam via DNA DNA simples fita = se replicam via DNA RNA dupla fita = se replicam via RNA (+) RNA simples fita com genoma fita positiva= se replicam via RNA RNA fita simples com genoma fita negativa = se replicam via RNA RNA simples fita diplide = se replicam via transcrio reversa com um DNA dupla intermedirio

Exemplos de genomas virais

VRUS Picornavirus Rabies Influenza Rotavirus Parvovirus Herpesvirus GENOMA (+)ssRNA (-)ssRNA (-)ssRNA segmentado dsRNA segmentado ssDNA dsDNA ENVELOPE no sim sim no no sim

Replicao viral
The simplest viral life cycle

Vrus com genoma de DNA dupla fita

Replicao viral
Influenza
RNA fita simples Polaridade negativa

Ciclo de vida do HIV

Replicao viral A habilidade de um vrus em completar todos os passos da replicao viral com sucesso um fator que determina sua infectividade.
As drogas anti-virais interferem nos diferentes estgios deste ciclo

Drogas antivirais
Devem ser capazes de inibir algum ou alguns dos estgios de replicao viral sem ser txicas para as clulas
-Inativar partculas virais -Prevenir ligao viral e/ou entrada do vrus na clula -Prevenir a repliao do genoma viral -Prevenir sntese de protenas virais especficas -Prevenir montagem de novas partculas virais

Exemplo

O Aciclovir (HSV) inibe a sntese do DNA viral por meio de um mecanismo onde haver converso do Aciclovir em Aciclovir Trifosfato com o desencadeamento da interrupo da cadeia de DNA. Sua seletividade de ao depende da interao com duas protenas virais distintas.

Vrus satlites
Vrus que dependem de outros vrus para sua replicao, alm da clula infectada

Exemplo: -Vrus da hepatite delta (HDV)= RNA fita simples circular= incompleto s se multiplica em clulas infectadas pelo vrus da hepatite B.

Ele deficiente em quase todas as protenas necessrias replicao e s pode multiplicar-se em clulas j infectadas pelo vrus da hepatite B, utilizando as enzimas codificadas por ele alm dos recursos da clula humana

Transmisso
Todas as infeces virais obtm acesso clula hospedeira a partir de uma origem fora do corpo. As fontes mais comuns so os indivduos, animais, insetos, alimento, gua, solo ou objetos inanimados infectados Os indivduos infectados so a fonte mais comum das infeces virais, especialmente as pessoas que: -Desenvolveram sintomas no especficos -So assintomticas -Ainda desenvolvero sintomas Os animais ou insetos podem transmitir infeco viral, por exemplo, a raiva que resultado do contato com o animal infectado, e a febre amarela, da picada de um inseto infectado O contato indireto atravs de alimentos, gua, utenslios de cozinha, instrumentos mdicos ou agulhas de tatuagem infectadas, podem transmitir agentes infecciosos

Danos celulares induzidos pelo vrus

Quando um vrus ataca uma clula os efeitos resultantes podem ser devido a uma destas causas:

A ao direta do vrus rompe a clula hospedeira. A replicao viral pode causar

a degenerao ou a ruptura da clula

A presena do vrus aciona uma resposta imunolgica que destri a clula

Quando o dano celular resulta de um mecanismo imunolgico induzido pelo vrus, as defesas do corpo se voltam contra a clula infectada

Por exemplo o vrus da hepatite A no danifica diretamente as clulas do fgado, porm a resposta das prprias clulas de defesa atacam as clulas infectadas pelo vrus da hepatite A.

Bacterifagos
Vrus que infectam bactrias (phago em grego= o que come)

- Vrus que infectam apenas bactrias

-Descobertos por Frederick Twort em 1915 e por Flix DHerelle em 1917 -Dois tipos de ciclos replicativos Ciclo ltico= Vrus se replica e lisa a clula bacteriana liberando novos vrus

Ciclo lisognico= DNA incorporado ao genoma da clula bacteriana. Dividem-se juntamente com genoma celular no processo de diviso celular

Ciclos ltico e lisognico do bacterifago

Classificao Viral
Existem dois sistemas de classificao viral

Sistema hierrquico Classificao de Baltimore

Classificao Viral
Sistema de classificao de organismos Sistema de Linneaean: Filo, classe, ordem, famlia, gnero e espcie Em 1962 Lwoff, R. W. Horne e P. Tournier criaram um sistema de classificao viral baseado no sistema de Linneaean -Filo, classe, ordem, famlia, gnero e espcie -propriedades em comum -tipo de material gentico

O sistema usa quatro propriedades para classificao: -Tipo de cido nucleico presente nas partculas virais (DNA ou RNA); -Simetria e forma do capsdeo -Presenca ou ausncia de envelope -Tamanho da partcula viral

Classificao Viral

- Ordem (-virales). - Famlia (-viridae) - Subfamilia (-virinae) - Genero (-virus) - espcie (tobacco mosaic virus) Por exemplo o vrus Ebola classificado como: - Ordem: Mononegavirales - Famlia: Filoviridae - Gnero: Filovirus - espcie: Ebola virus Zaire

Classificao Viral
Classificao de Baltimore
Baseado na enorme diversidade dos genomas virais e suas estratgias de replicao

David Baltimore
Em contraste de procariotos e eucariotos que possuem genoma de DNA dupla fita que se replica pelo modo semi conservativo os vrus possuem uma diversa variedade de genomas e estratgias de replicao

Todos os vrus devem fazer RNA mensageiro a partir seus genomas

Classificao de Baltimore
I II III IV V VI VII
DNA dupla fita = se replicam via DNA (semi-conservativo)

DNA simples fita = se replicam via DNA (semi-conservativo)

RNA dupla fita = se replicam via RNA (+) (conservativo?) RNA simples fita com genoma fita positiva= se replicam via RNA (semi-conservativo) RNA fita simples com genoma fita negativa = se replicam via RNA (semi-conservativo) RNA simples fita diplide = se replicam via transcrio reversa com um DNA dupla fita intermedirio RNA dupla fita = se replicam via transcriptase reversa com uma RNA fita simples intermedirio

Classificao Viral

Vrus emergentes e reemergentes

Outros vrus entraram na populao humana recentemente devido a mudanas na agricultura, dinmica de populaes (urbanizao), comrcio e mudanas no meio ambiente Exemplos:
vrus da SARS (pneumonia Asitica) HIV Vrus doOeste do Nilo (West NileVirus) vrus da gripe (Influenza)

Vrus emergentes e reemergentes so uma grande causa de preocupao e alvos de extensa pesquisa
Principal fonte de informao de vrus emergentes: Center for Disease Control and prevention (CDC)

Vrus emergentes e reemergentes

West Nile virus -Transmitido por mosquitos que picam pssaros

contaminados -Surgiu pela primeira vem em Uganda- 1937 -Comum na frica e Oriente Mdio -Introduo nos Estados Unidos- Nova York em 1999 -causa febre e sinais de meningite assptica ou encefalite

Esquema do ciclo de vida do West Nile Virus (WNV)

Vrus emergentes e reemergentes

Inoculao de um ovo com H5N1 avirio: Ivestigao da patogenicidade do vrus

Vetores virais
Os vrus, como parasitas obrigatrios so muito eficientes na introduo do seu DNA na clula Teparia gnica viral -Introduo de genes de interesse (vetores virais recombinantes) Vetores mais usados: -retrovrus
-adenovrus -vrus adeno associado
Tratamento de doenas hereditrias, causadas normalmente por defeitos em um nico gene, como a fibrose cstica, as hemofilias

Vacinas
Desenvolvimento de vacinas foi um dos grandes sucessos da histria da biologia do sculo 20 Como vacinas contra febre amarela, poliomelite, raiva

O desenvolvimento de vacinas ainda um dos principais Objetivos da pesquisa em virologia

Vacinas virais
Principais vacinas virais
Vrus/doena
Variola Febre amarela Sarampo Caxumba Rubola Poliomelite Influenza (gripe) Raiva Hepatite B Varicela-zoster Rotavrus HPV

Tipo de vacina
vrus atenuado (eliminao da varola em 1970) vrus atenuado vrus atenuado vrus atenuado vrus atenuado vrus atenuado vrus atenuado ou vrus inativados vrus inativados glicoprotena do envelope viral (vacina de DNA) vrus atenuado vrus atenuado partculas virais similares a vrus