Aplicao da biotecnologia na cultura do milho (I): eficcia e contribuio do milho Bt no MIP milho

Simone M. Mendes Pesquisador Embrapa Milho e Sorgo

Benefcios

Praticidade

Reduo do uso de inseticida

EFICIENCIA DE CONTROLE Outros Como Controle biolgico

Problemas Concentrao de Mercado

Custo da semente Cerca de 3 aplicaes com defensivos

Resistencia de Insetos pragas

Pragas ALVO do milho no Brasil

Lepidopteros-praga

Spodoptera frugiperda (Smith, 1797)

15 dias

5 dias

Spodoptera frugiperda
30 dias

8 dias

Diatrea sacharallis

Broca Diatrea saccharalis

4 a 12 dias

6 a 14 dias 6 a 14 dias

20 a 79 dias

Helicoverpa zea

Bacillus thuringiensis - Bt
Bactria 1900 - Bacillus soto Berliner (1915) 1920 prod. Massal 1938 Comercial/Frana 1960 Brasil

Bt

Engenharia Gentica

http://www.ornl.gov/sci/techresources/Human_Genome/home.shtml

Liberaes Comerciais de Cultivos Bt no Brasil

Ano de Libera o Evento de milho 2007 2008 Recomendao Disponivel no mercado de rea de safra 2012/2013 refgio 10% sim 10% sim 10% sim 5% sim 10% sim 5% sim 5% sim no 5% sim

2009

2010

2011

Pragas-alvo S.frugiperda, MON 810 Yeldgard Cry1Ab D.saccharalis e H.zea S.frugiperda, Bt11 Agrisure TL Cry1Ab D.saccharalis e H.zea S.frugiperda, TC 1507 Herculex Cry1F D.saccharalis e H.zea S.frugiperda, MON 89034 Yeldgard VTPRo Cry1A.105/Cry2Ab2 D.saccharalis e H.zea S.frugiperda, MIR 162 Agrisure Viptera Vip3Aa20 D.saccharalis e H.zea S.frugiperda, Bt11 X MIR 162 Agrisure Viptera Cry1Ab/VIP3Aa20 D.saccharalis e H.zea MON 89034 + Cry1A.105/Cry2Ab2/C S.frugiperda, TC1507 Power Core PW ry1F D.saccharalis e H.zea MON 88017 YeldgardVT Cry3Bb1 Diabrotica spp. S.frugiperda, TC 1507 x MON 810 Hx YG Cry1Ab/Cry1F D.saccharalis e H.zea S.frugiperda, MON 89034 x MON Genuitiy Cry1A.105/Cry2Ab2/C D.saccharalis e H.zea TM 88O17 SmartStacks ry3Bb1 Diabrotica spp.

Nome comercial

Protena inseticida

__

__

no

Recomendao da empresa detentora do evento

Evoluo de hbridos transgnicos Bt no Brasil. Fonte: Adaptado de CRUZ, SILVA & PEREIRA FILHO, 2011.

120 100
Sobrevivncia 48 h .

No Bt

YG

HX

80

60 40 20 0 1 2
No Bt

3
YG HX

700 600 500

Biomassa larvas (mg)

400 300 200 100 0 1 -100 2 3 4 5

Figura Percentual de Sobrevivncia (A) e biomassa larval(b) ( IC mdia 95%) da fase de larva de Spodoptera frugiperda (Smith), alimentando-se em hbridos de milho-Bt (Cry 1 A(b) e Cry 1 F) e seus respectivos isognicos no-Bt. C

LCM - 7 dias aps ecloso

Milho No-Bt

Milho- Bt Cry 1 A(b)

1 1 Cry 1F
5

N ve l d e d an o s foliares

4,5 4 3,5 3 2,5 2 1,5 1 0,5 0 7 dia s D ia s a p s a i n fe st a o 14 dias

1 Cry 1 A(b) 2 2 Cry 1F 3 3 Cry 1 A(b) 4 4 Cry 1 A(b) 5 5 Cry 1 A(b)

Figura Notas dos nveis de danos foliares, causados pela infestao de LCM avaliado aos 7 e 14 dias aps a infestao.

4
Nota de Dano (Mdia) .

Milho no Bt

3 2 1 Milho Bt Cry 1F 0 Nota 7 dias Nota 14 dias Nota 21 dias Milho Bt Cry 1A(b)

Figura - Nota de dano (mEP) causado pela alimentao de Spodoptera frugiperda nos diferentes tratamentos

Sobrevivncia da fase larval (%)

No-Bt 100 80 60 40 20 0 10
590

Bt

20

30

40

50

60

No Bt
Biomassa 14 dias (mg)

Bt

490 390

B
290 190 90 -10

Figura Viabilidade (A) e biomassa (medida 14 dias aps a ecloso) (B) ( IC mdia 95%) de larvas de Spodoptera frugiperda (Smith), mantidas alimentando-se em seis hbridos de milho-Bt ((Cry 1 A(b)) ) e seus respectivos isognicos no-Bt. Sete Lagoas, Mai. 2009. MENDES et al 2011

10

20

30

40

50

60

100 No Bt Bt 80 60 40 20 0 10 20 30 40 50 60

Figura Percentagem de lagartas recm-eclodidas ( IC mdia 95%) de Spodoptera frugiperda (Smith) em hbridos de milho-Bt e seus respectivos isognicos no- Bt em teste COM CHANCE DE ESCOLHA, medida 24 horas aps. Sete Lagoas, Maio. 2009

% Lagartas (24 horas)

Figura 3. Sobrevivncia at a fase adulta de populaes de Spodoptera frugiperda criadas em folha de milho Bt e corrigida em relao dieta controle pela frmula de Abbot. Colunas claras, indivduos de milho convencional; colunas cinzas, insetos de milho Bt. Mdias erro padro seguidas de mesma letra no diferem entre si pelo teste da diferena mnina significativa de Fisher (P < 0,05).

Figura 8. Biomassa das larvas aos 14 dias de Spodoptera frugiperda coletadas de lavouras de milho Bt e convencional em diferentes regies de Minas Gerais. Barras de erro representam o erro padro. Colunas contendo mesma letra no diferem entre populaes pelo teste da diferena mnina significativa de Fisher (P > 0,05).

Broca Diatrea saccharalis

4 a 12 dias

6 a 14 dias 6 a 14 dias

20 a 79 dias

Diatraea saccharalis
100 90 80 70 60 50 40 30 20 10 0

Figura Sobrevivncia 48 horas aps a ecloso ( IC mdia 95%) de larvas de Diatraea saccharalis, mantidas alimentando-se em seis hbridos de milho-Bt e no-Bt.

Helicoverpa zea
100 90
80 70 60 50 40 30 20 10 0 Conv 1 Cry1F 1 Cry1Ab1 Conv 2 Cry1A.105 Conv. 3 Cry2Ab2 Vip3a

Figura Sobrevivncia 48 horas aps a ecloso ( IC mdia 95%) de larvas de Helicoverpa zea, mantidas alimentando-se em seis hbridos de milho-Bt e no-Bt.

3.5 10 3 2.5 2 1.5 50 Bt 1 0.5 60 60 Bt 20 Bt 30 30Bt 10 Bt 20

Lagartas /Espiga .

40

40 Bt

50

(A)

0 LCM LEM BCA

1.7 10 1.5 1.3 20 Bt 40 50 Bt 30 40 Bt 60 30Bt 50 60 Bt 10 Bt 20

Predadores / E spiga .

1.1 0.9 0.7 0.5 0.3

(B)

0.1 -0.1 O. insidiousus Tesourinhas Predadores tot

Figura 4 - Nmero mdio (IC, P=0,1) de lagartas (A) e predadores (B) por planta de milho Bt e no-Bt, em diferentes idades da planta, em Sete Lagoas-MG, safra 2008-2009.

Ao do Milho Bt

Diferenas entre os eventos eventos Diferenas de suscetibilidade de populaes diferentes Diferenas de suscetibilidade de espcies

Diferenas para os hbridos diferentes no qual o evento foi introgredido Infestao inicial de larvas na lavoura (opo por no plantar Bt)

Interao Tritrfica

Interao Tritrfica

Lagartas

Interao Tritrfica

Tripes

Pulges

Percevejos Fitfagos Lagartas

Cigarrinhas

caros

Interao Tritrfica

plen
Pulges

Tripes

Percevejos Fitfagos Lagartas

Cigarrinhas

caros

Interao Tritrfica

plen
Pulges Predadores

Tripes

Percevejos Fitfagos Lagartas

Cigarrinhas

Parasitides

caros

Interao Tritrfica

plen
Pulges Predadores

Tripes

Percevejos Fitfagos Lagartas

Cigarrinhas caros

Parasitides

Rhopalosiphum maidis
Pulges

Cigarrinhas

Deiois flavopicta

Percevejos

Dichelops furcatus

Diabrotica spp

Outras espcies de Lepidopteros

Spodoptera cosmioides Spodoptera eridania

Pseudaletia spp. Mocis latipes

Importncia Econmica Ecolgica no cultivo

Probabilidade de exposio toxina

Seleo de espcies

Diversidade sistemtica

Conhecimento na especificidade toxica

(Dutton, et al 2003 )

Organismos no-alvo

Inimigos Naturais

Funes Ecolgicas Papel a desempenhar dentro do MR e MIP

Agentes de Controle biolgico

Predadores

Parasitides

- Reduo da quantidade e qualidade de presas ( praga-alvo); - Reduo de aplicao de inseticidas; - Aumento do nmero de pragas secundrias; - Aumento da susceptibilidade da presas ao ataque do predador;

Dutton, 2003 e Pilcher, et al 2005

Consumo direto da protena-Bt

Inimigos Naturais
Indireto - Presa se alimentou da planta-Bt

Reduo de Hospedeiros
(Losey, 2004)

Orius insidiosus

80.000 No-Bt Bt

Sobrevivncia 48 horas

Sobrevivncia

60.000

40.000

20.000

0.000 30K75
Sobrevivncia 4 e 5 nstares .

80.000

No-Bt

Bt

60.000

40.000

20.000

0.000 AG 9010 30K75

Figura Mdia do percentual ( IC, p=0,95) de sobrevivncia 48 horas aps a ecloso e do 4 e 5 nstares de ninfas de Orius insidiosus (Say), quando alimentadas com LCM mantidas em milhoBt e no-Bt. Sete Lagoas-MG, maio de 2009.

Perodo de desenvolvimento
8.000 7.000 No-Bt Bt

Perodos desenvolv. 4 e 5 nstares (dias)

6.000 5.000 4.000 3.000 2.000 1.000 0.000 AG 9010 30K75

Figura Mdia do perodo ( IC, p=0,95) de desenvolvimento do quarto e quinto nstares de Orius insidiosus (Say), quando alimentadas com LCM mantidas em milho-Bt e no-Bt. Sete Lagoas-MG, maio de 2009.

PREFERNCIA
60.000 No-Bt 50.000 % O. insidiosus 40.000 30.000 20.000 10.000 0.000 DKB 330 AG 9010 DKB 350 DKB 390 30K75 30F80 Bt

Figura - Mdia da porcentagem ( IC, p=0,95) de Orius insidiosus em folhas de milhoBt e no-Bt no teste de olfatmetro, avaliado 24 horas aps a liberao. Sete LagoasMG, maio de 2009.

Orius insidiosus

Doru luteipes

Doru luteipes

Spodoptera frugiperda

Nmero de insetos/planta

1 0,8 0,6 0,4 0,2 0 No-Bt Hbridos de milho Bt

Figura - Nmero mdio de LCM e Doru luteipes planta ( IC, p = 0,95) em milho Bt (DKB 390 YG) e no Bt (AG7000) no estdio de V6-V7, em Matozinhos-MG

Doru luteipes
No Bt 7 6 Cry 1 A (b)

Durao dos Nstares .(Dias)

5 4 3 2 1 0

1 Instar

2 Instar

3 Instar

4 Instar

Figura - Perodo de durao de Doru luteipes sobre com larvas de Spodoptera frugiperda alimentadas com folhas de milho-Bt e no-Bt

Doru luteipes
No Bt 30F35 30F35YG Bt 180 160 140

Tembo Busca (min)

120 100 80 60 40 20 0 1 instar 3 instar Tratamentos Adulto

Figura - Tempo de busca (min) de Doru luteipes em larvas de Spodoptera frugiperda alimentadas com folhas de milho-Bt e no-Bt em teste com chance de escolha

Controle Biolgico
30F35HX com tesourinha

4
Nota de Dano (Mdia) .

0 30F35
30F35 com tesourinha 30F35 YG

3 2 1 0

30F35 YG com tesourinha 30F35HX

30F35HX com tesourinha

nota 7 dias

nota 14 dias

Figura - Nota de dano (mEP) causado pela alimentao de Spodoptera frugiperda nos diferentes tratamentos

Figura - Sobrevivncia da fase ninfal de Podisus nigrispinus (Dallas,); Doru luteipes (Scudder) e Orius insidiosus (Say) alimentado com larvas de Spodoptera frugiperda (Smith) que se desenvolveram no hbrido Bt P30K75 YG 25 C; 60 10 UR e fotofase de 12 horas

Tabela 2. Durao do desenvolvimento ninfal (mdia erro padro) de Podisus nigrispinus (Hemiptera: Pentatomidae) e biomassa deste predador no quinto nstar, quando alimentado com larvas de Spodoptera frugiperda mantidas em milho Bt Cry1Ab e controle (milho no Bt).

Presas Bt Segundo 3,4 0,07a

Durao dos nstares (dias) Terceiro 5,95 0,15a Quarto 5,51 0,36a Quinto 10,19 1,02a

Biomassa 19,10 0,91b

2 nstar at adulto (dias)

27,44 1,21a

No Bt

3,09 0,01b

2,83 0,22b

3,72 0,30b

6,04 0,50b

22,47 1,27a

15,46 0,27b

Mdias erro padro seguidas pela mesma letra na coluna no diferem entre si, ao nvel de 5% de probabilidade de erro, pelo teste de Tukey.

Figura 2. Tempo de busca (min) de 2 nstar, 4 nstar e adulto de Podisus nigrispinus a larvas da LCM de 2 dias e 7 dias aps ecloso, alimentadas com milho Cry 1Ab e milho no-Bt. As barras representam o intervalo de confiana () a 95% de probabilidade.

Abundncia de S. frugiperda

-1

Conv

Cry1Ab

Cry1F

Cry(1A105+2Ab2)

Abundncia de larvas de Spodoptera frugiperda, em coletas de cartuchos em glebas com cultivo de milho convencional e glebas com cultivo de milho transgnico em sete fazendas de municpios de Minas Gerais. SAFRA 2010/2011. Barras representam intervalo de 95% de confiana.

PREDADORES 7
6

Abundncia de predadores

Conv

Cry1Ab

Cry1F

Cry(1A105+2Ab2)

Abundncia de PREDADORES, em coletas de cartuchos em glebas com cultivo de milho convencional e glebas com cultivo de milho transgnico em sete fazendas de municpios de Minas Gerais . SAFRA 2010/2011. Barras representam intervalo de 95% de confiana.

Inhauma - CENTRAL
1.4 1.2

Matozinhos Central
1.4 1.2

Abundncia de predadores
Conv Cry1Ab Cry1F

Abundncia de predadores

1.0

1.0

0.8

0.8

0.6

0.6

0.4

0.4

0.2

0.2

0.0

0.0

-0.2

-0.2

Conv
0.45

Cry1Ab

Cry1F

0.9

Varjo de Minas Noroeste

Abundncia de predadores

Tres Cor. SUL

0.8

0.40

Abundncia de predadores

0.7

0.35

0.30

0.6

0.25

0.5

0.20

0.4

0.15

0.3

0.10

0.2

0.05

0.1

0.00

Conv

Cry1Ab

Cry1F

Conv

Cry1Ab

Cry1F

Cry(1A105+2Ab2)

Abundncia de PREDADORES, em coletas de cartuchos em glebas com cultivo de milho convencional e glebas com cultivo de milho transgnico em Quatro municpios de Minas Gerais. . SAFRA 2010/2011. Barras representam intervalo de 95% de confiana.

Monitoramento constante das lavoras

Uso do milho Bt

Pragas no alvo

Manejo de Resistencia

Obrigada

simone@cnpms.embrapa.br 31 3027 1136