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UNIVERSIDADE FEDERAL DA PARABA CENTRO DE CINCIAS AGRRIAS PROGRAMA DE PS-GRADUAO EM AGRONOMIA REA DE CONCENTRAO SEMENTES

TECNOLOGIA DE SEMENTES DE MANGABA (Hancornia speciosa Gomes)

Daniella Incio Barros

Areia - PB Maro - 2006

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DANIELLA INCIO BARROS

TECNOLOGIA DE SEMENTES DE MANGABA (Hancornia speciosa Gomes)

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TECNOLOGIA DE SEMENTES DE MANGABA (Hancornia speciosa Gomes)

Tese apresentada Universidade Federal da Paraba, Centro de Cincias Agrrias, para obteno do ttulo de Doutor em Agronomia, rea de Concentrao Sementes.

Comit de orientao Riselane de Lucena Alcntara Bruno - Orientadora Rejane Maria Nunes Mendona Walter Esfrain Pereira Silvanda de Melo Silva

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TECNOLOGIA DE SEMENTES DE MANGABA (Hancornia speciosa Gomes)

DANIELLA INCIO BARROS

APROVADA: 20 de maro de 2006.

Banca Examinadora

________________________________________ Prof. Dr. Riselane de Lucena Alcntara Bruno Orientadora - CCA/UFPB ________________________________________ Prof. Dr. Sebastio Medeiros Filho Examinador - UFC ________________________________________ Prof. Dr. Salvador Barros Torres Examinador - EMPARN/UFERSA ________________________________________ Prof. Dr. Maria Elita Martins Filho Examinador - UFCG ________________________________________ Prof. Dr. Genildo Bandeira Bruno Examinador - UFPB

A Deus. Aos meus pais Ansio Incio dos Reis e Maria Raimunda Incio Barros. Aos meus avs Didcio Coutinho Barros e Anlia Rocha Barros. Ao meu esposo Helber Vras Nunes.

Dedico.

A minha amada filha que ainda est no meu ventre.

Ofereo.

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AGRADECIMENTOS Deus, pela sade, fora e presena em todos os momentos da minha vida. Universidade Federal da Paraba, Centro de Cincias Agrrias, pela oportunidade oferecida para a realizao deste curso. Ao Programa de Ps-Graduao em Agronomia em especial ao Prof. Genildo Bandeira Bruno, pela acolhida, amizade e apoio no decorrer do curso. Ao CNPq, pela concesso da bolsa de estudo. A Emepa - Empresa Estadual de Pesquisa Agropecuria da Paraba, pelo fornecimento dos frutos de Mangaba durante o transcorrer da pesquisa. Professora Riselane Lucena Alcntara Bruno, pela amizade, estmulo, apoio, confiana e orientao durante a realizao do curso. Aos Professores Sebastio Medeiros Filho, Salvador Barros Torres, Maria Elita Martins Duarte e Genildo Bandeira Bruno pela participao na banca de defesa de tese e pelas valiosas sugestes. Ao Professor Walter Esfrain Pereira, pela amizade, sugestes e anlise estatstica do trabalho. Ao Professor Genaro Viana Dornellas, pela amizade, ajuda e valiosa contribuio na caracterizao morfolgica dos frutos e sementes de mangaba. Professora Rejane Maria Nunes Mendona pela amizade, ajuda, incentivo e apoio na elaborao e conduo dos experimentos. A todos os Professores do Centro de Cincias Agrrias pelos conhecimentos compartilhados, especialmente aos que contriburam com sugestes. Pesquisadora Maria Carmen Bhering (UFV), pela sincera amizade, confiana, apoio incondicional e pelos ensinamentos transmitidos com a pesquisa do tetrazlio. Aos funcionrios da Ps-Graduao em Agronomia, em especial a Ccera Eliane e Zezinho pelo incentivo e ajuda constante. Aos funcionrios do Laboratrio de Anlise de Sementes, Antnio Alves de Lima, Rui Barbosa da Silva, Severino Francisco dos Santos e Pedro Francisco da Silva (in memorian) pela amizade, convivncia, valioso apoio, incentivo e colaborao incansvel na realizao deste trabalho. Aos funcionrios do Setor de Transporte em especial ao Lus Belo dos Santos pela ateno, ajuda e disposio em todos os momentos na aquisio dos frutos de mangaba.

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Aos funcionrios da Biblioteca pela gentileza, disposio e competente atendimento profissional. Aos colegas e amigos da Ps-Graduao pela agradvel convivncia, especialmente aos que me apoiaram e oportunizaram o prazer de uma amizade recproca. As amigas Areienses Ana Isabel, Tereza Helena, Sueli e Edvnia pelo amor, compreenso, oraes, incentivo e disposio em todos os momentos. s crianas Isabella, Arthur, Ester, Brbara, Bruno e Emillie pelo carinho, amor e ajuda nos momentos de distrao. Aos meus amveis pais Ansio Incio dos Reis e Maria Raimunda Incio Barros, pelo amor, incentivo, confiana, apoio infinito e por terem me preparado para o mundo. Aos meus avs Didcio Coutinho Barros e Anlia Rocha Barros, pelo amor, ajuda financeira, confiana e apoio constante. minha querida Tia Maria ngela dos Reis, pelo amor, incentivo, dedicao, confiana e oraes. Aos meus sogros Raimundo Nonato de Souza Nunes e Maria das Graas Vras Nunes, pela amizade, incentivo e apoio incondicional em todos os momentos da minha vida. A meu esposo Helber Vras Nunes, pelo amor, lealdade, compreenso, pelo convvio e ajuda na elaborao deste trabalho. Enfim, a todos aqueles que, de alguma forma, auxiliaram na realizao deste trabalho, o meu reconhecimento e a minha gratido.

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BIOGRAFIA

DANIELLA INCIO BARROS, filha de Ansio Incio dos Reis e Maria Raimunda Incio Barros, nasceu em Gurupi, Estado do Tocantins, em 07 de julho de 1975. Em 1999, graduou-se em Agronomia, pela Universidade Federal do Tocantins (UFT). Em 2000, iniciou o Programa de Ps-Graduao em Fitotecnia da Universidade Federal de Viosa (UFV), sob a orientao da Prof. Denise Cunha Fernandes dos Santos Dias, tendo defendido sua dissertao em fevereiro de 2002. Em 2002, iniciou o Doutorado junto ao Programa de Ps-Graduao em Agronomia da Universidade Federal da Paraba (UFPB), sob a orientao da Prof Riselane de Lucena Alcntara Bruno, defendendo a tese em 20 de maro de 2006.

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SUMRIO LISTA DE FIGURAS..................................................................................................xi LISTA DE TABELAS ...............................................................................................xiii RESUMO.....................................................................................................................1 INTRODUO ............................................................................................................3 REVISO DE LITERATURA ......................................................................................6 REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS.........................................................................15 ARTIGO 1 - MTODOS DE EXTRAO SOBRE A QUALIDADE FISIOLGICA DE SEMENTES DE MANGABA ..................................................................................... 21 RESUMO................................................................................................................... 21 ABSTRACT............................................................................................................... 22 1. INTRODUO ...................................................................................................... 23 2. MATERIAL E MTODOS ..................................................................................... 25 3. RESULTADOS E DISCUSSO ............................................................................ 27 4. CONCLUSES ..................................................................................................... 30 5. REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS ..................................................................... 31 ARTIGO 2 - CARACTERIZAO MORFOLGICA E GERMINAO DE FRUTOS E SEMENTES DE MANGABA..................................................................................34 RESUMO................................................................................................................... 34 ABSTRACT............................................................................................................... 35 1. INTRODUO ...................................................................................................... 36 2. MATERIAL E MTODOS ..................................................................................... 39 3. RESULTADOS E DISCUSSO ............................................................................ 42 4. CONCLUSES ..................................................................................................... 47 5. REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS ..................................................................... 48

ARTIGO 3 - COMPORTAMENTO FISIOLGICO DE SEMENTES DE MANGABA SUBMETIDAS DESSECAO............................................................................. 51 RESUMO................................................................................................................... 51 ABSTRACT............................................................................................................... 52 1. INTRODUO ...................................................................................................... 53 2. MATERIAL E MTODOS ..................................................................................... 55 3. RESULTADOS E DISCUSSO ............................................................................ 58 4. CONCLUSES ..................................................................................................... 63 5. REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS ..................................................................... 64 ARTIGO 4 - TESTE DE TETRAZLIO EM SEMENTES DE MANGABA (Hancornia speciosa Gomes)..................................................................................................... 68 RESUMO................................................................................................................... 68 ABSTRACT............................................................................................................... 70 1. INTRODUO ...................................................................................................... 71 2. MATERIAL E MTODOS ..................................................................................... 74 3. RESULTADOS E DISCUSSO ............................................................................ 77 4. CONCLUSES ..................................................................................................... 83 5. REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS ..................................................................... 84

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LISTA DE FIGURAS ARTIGO 2 Figura 1. Morfologia do fruto e da semente de Mangaba: A - fruto; B - corte longitudinal do fruto, epicarpo (ep) e sementes (s); C - semente, hilo (hi); D - seo longitudinal da semente mostrando a localizao do embrio (e) e do endosperma (en); E - seo transversal da semente; F - vista lateral da semente; G - embrio livre; H - seo longitudinal do embrio, com eixo hipoctilo-radcula (hr) e os cotildones (ct). ............................................ 42 Figura 2. Germinao (a), primeira contagem (b), sementes mortas (c), duras (d) e plntulas anormais (e) de mangaba, sob condies combinadas de substratos e temperaturas... ..................................................................... 46

ARTIGO 3 Figura 1. Teor de gua (a), emergncia de plntulas em areia (b), comprimento da parte area de plntulas (c), condutividade eltrica (d), massa seca de plntulas (e), germinao (f) e primeira contagem de germinao (g) de sementes de mangaba aps a secagem em ambiente laboratrio e dessecador por diferentes tempos... ......................................................... 62

ARTIGO 4 Figura 1. Mtodos de pr-condicionamento das sementes de mangaba para o teste de tetrazlio: A - corte longitudinal paralelo aos cotildones; B - corte na extremidade superior lateral da semente; C - trs cortes na semente dois laterais e um na parte superior oposta ao eixo embrionrio; D - perfurao em rea superior no crtica da semente .................................................. 75

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Figura 2. Classes para a determinao da viabilidade de sementes de mangaba. ................................................................................................... 81 Figura 3. Plntulas de mangaba normais (A) e anormais (B).................................... 81 Figura 4. Correlao entre os valores de germinao e tetrazlio viabilidade em sementes de mangaba.............................................................................. 82

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LISTA DE TABELAS ARTIGO 1 Tabela 1. Mdias das variveis analisadas de sementes de mangaba submetidas a diferentes mtodos de extrao. .............................................................. 27

Tabela 2. Estimativas dos contrastes das variveis analisadas de sementes de mangaba submetidas a diferentes mtodos de extrao......................... 28

ARTIGO 2 Tabela 1. Caractersticas morfolgicas dos frutos e das sementes de mangaba...... 43 Tabela 2. Variveis analisadas na qualidade fisiolgica de sementes de mangaba, sob condies combinadas de substratos e temperaturas....................... 44 Tabela 3. Estimativas dos contrastes das variveis analisadas de sementes de mangaba, sob condies combinadas de substratos e temperaturas..... 44

ARTIGO 3 Tabela 1. Mdias e estimativas dos contrastes das variveis analisadas de sementes de mangaba, da testemunha (0 hora) e fatorial (mtodos de secagem nos tempos de 12, 24, 36 e 48 horas) em dois ambientes de secagem .......... 58 Tabela 2. Mdias das variveis analisadas de sementes de mangaba aps a secagem em ambiente laboratrio e dessecador por diferentes tempos.................................................................................................... 60

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Ficha Catalogrfica elaborada na Seo de Processos Tcnicos da Biblioteca Setorial de Areia-PB, CCA/UFPB. Bibliotecria: Mrcia Maria Marques CRB4 1409 B277t Barros, Daniella Incio Tecnologia de sementes de mangaba (Hancornia speciosa Gomes)./ Adelmo Lima Bastos. Areia, PB: PPGA/CCA/UFPB, 2006. 89f.: il. Tese (Doutorado em Agronomia) pelo Centro de Cincias Agrrias da Universidade Federal da Paraba. rea de concentrao: Sementes. Orientadora: Riselane de Lucena Alcntara Bruno. 1. Mangaba - Hancornia speciosa Gomes. 2. Sementes mangaba. 3. Qualidade fisiolgica - mangaba. 4. Tetrazlio. I. Bruno, Riselane de Lucena Alcntara (Orientadora). II. Ttulo.

RESUMO BARROS, Daniella Incio, D.S., Universidade Federal da Paraba, maro de 2006. Tecnologia de sementes de mangaba (Hancornia speciosa Gomes). Orientadora: Riselane de Lucena Alcntara Bruno. Comit de Orientao: Rejane Maria Nunes Mendona, Walter Esfrain Pereira e Silvanda de Melo Silva. Os estudos foram conduzidos no Laboratrio de Anlise de Sementes, pertencente Universidade Federal da Paraba, localizada em Areia-PB, objetivando obter conhecimentos sobre mtodos de extrao; alternativas para substratos e temperaturas; dessecao e a determinao da viabilidade de sementes de mangaba pelo teste de tetrazlio. O primeiro ensaio seguiu o delineamento experimental inteiramente casualizado com quatro repeties, estudando-se trs mtodos de extrao de sementes: um manual (peneira) e dois mecnicos (despolpadeira e batedeira). Os resultados foram submetidos anlise de varincia, e as mdias comparadas por meio de contrastes ortogonais. Para o segundo ensaio, foi utilizado para descrever e ilustrar morfologicamente frutos e sementes, retirados aleatoriamente de uma amostra. Os dados das caractersticas quantitativas foram submetidos anlise descritiva, obtendo-se as respectivas mdias, coeficiente de variao e desvio padro. Para o estudo da germinao utilizou-se o delineamento inteiramente casualizado com quatro repeties em esquema fatorial 2 x 5: dois substratos (papel germitest e areia esterilizada) e cinco nveis de temperatura (constantes 25, 28, 30 e 35 C e alternada 20 - 30 C). Aps a anlise de varincia generalizada, procedeu-se o desdobramento das interaes. As temperaturas 25, 28, 30 e 35 C foram analisadas atravs de regresso, enquanto a temperatura alternada 20 - 30 C foi estudada atravs do contraste 30 vs 20 - 30 C. O terceiro ensaio seguiu o delineamento experimental inteiramente casualizado com quatro repeties, sendo os tratamentos dispostos em esquema fatorial 2 x 4: dois mtodos de secagem (condio ambiente de laboratrio e dessecador com slica gel) e quatro tempos (12, 24, 36 e 48 horas). Aps a anlise de varincia generalizada, procedeu-se o desdobramento das interaes. O efeito conjunto dos mtodos de secagem e tempos foi analisado atravs de contraste, enquanto a comparao entre os mtodos de secagem pelo teste F e dos tempos atravs de regresso. No quarto ensaio foi utilizado o delineamento experimental inteiramente casualizado com

quatro repeties. Calcularam-se os coeficientes de correlao simples de Pearson (r) entre os testes de tetrazlio (viabilidade) e germinao. Estudou-se inicialmente os seguintes mtodos de pr-condicionamento: semente imersa diretamente na soluo de tetrazlio (testemunha); embebio em papel toalha umedecido a 25 C por 16 e 24 horas; imerso direta em gua a 40 C por 2 e 4 horas com e sem retirada do tegumento; corte longitudinal deixando o embrio exposto; corte na extremidade superior lateral com e sem imerso em gua a 25 C por 4 e 8 horas; trs cortes na semente sendo dois laterais e um na parte superior oposta ao eixo embrionrio para remoo do embrio com e sem imerso em gua; perfurao na rea superior. Em todos os mtodos testados as sementes foram colocadas em BOD a 40 C, em soluo de 2,3,5 trifenil cloreto de tetrazlio, nas concentraes de 0,075; 0,5 e 0,1 % por 30, 60, 90 e 120 minutos. Concluiu-se que: sementes extradas manualmente so de melhor qualidade fisiolgica; as sementes de mangaba, extradas na batedeira apresentam maior viabilidade e vigor e a despolpadeira provoca danos agudos nas sementes; os frutos de mangaba possuem forma elipsoidal com nmero varivel de sementes (2-27); as sementes so ovais, com endosperma crneo e embrio com cotildones foliceos e eixo hipoctiloradcula com plmula e radcula inconspcua; as temperaturas mais adequadas para germinao so 28 e 25 C, em substratos areia e papel; as sementes de mangaba podem ser secadas por perodos inferiores a 36 horas no ambiente laboratrio (temperatura e umidade relativa do ar de 27 C e 45 %) e 48 horas no dessecador, sem alterao em sua qualidade fisiolgica; a secagem no dessecador mais lenta e proporciona sementes mais vigorosas; o teste de tetrazlio pode ser utilizado, para avaliar com rapidez, a viabilidade das sementes de mangaba; para a conduo do teste, as sementes devem ser seccionadas com trs cortes no tegumento para a retirada do embrio e imersas na soluo de tetrazlio a 0,075 %, por 60 a 90 minutos em BOD a 40 C, para o desenvolvimento da colorao ideal.

INTRODUO As frutas mais importantes do ponto de vista econmico tm participao muito significativa no cenrio agrcola do Nordeste, dentre elas pode-se ressaltar a mangaba, o abacaxi, o caju, a banana, a manga, a goiaba, o coco, o mamo, a graviola, o caj e o maracuj. A mangaba muito apreciada na regio Nordeste, por apresentar timo aroma e sabor, boa digestibilidade e alto valor nutritivo, com teor de protenas superior ao de grande parte das frutferas (Parente et al., 1985). Apesar desse crescente interesse, a mangaba continua a ser uma cultura essencialmente extrativista e, salvo algumas raras excees, no existem, ainda, pomares organizados ou implantados com a finalidade de explorao racional para a produo de frutos. A mangaba, juntamente com o caj, o umbu, a ciriguela, a jaca, o bacuri, o aa, a pupunha e outras, constitui um grupo de frutas que, apesar de toda sua potencialidade, so apenas conhecidas e disseminadas em seus centros de diversidade e reas de ocorrncia espontnea (Lederman & Bezerra, 2003). Conforme os dados do Censo Agropecurio realizado pelo IBGE, em 1996, registrado uma produo nacional de 1492 t de frutos com um valor da produo de R$ 448.172.00, porm, sem discriminar as quantidades produzidas individualmente por cada estado ou regio. Mesmo os Estados maiores produtores de mangaba, como a Bahia, a Paraba, o Rio Grande de Norte no dispem dessas informaes. Do volume total de frutos comercializado durante o perodo de 1993 a 2002, cerca de 96 % vieram dos Estados do Rio Grande do Norte (60 %) e Paraba (36 %); sendo os municpios de Cear-Mirim (RN) e Mamanguape (PB), os responsveis pela maior parte dessa produo extrativista (Lederman & Bezerra, 2003). A mangabeira (Hancornia speciosa Gomes) uma espcie frutfera e lactescente da famlia das Apocinceas, com porte mdio, de 2 a 10 metros de

altura. Nativa do Brasil encontra-se vegetando espontaneamente nas regies Sudeste, Centro-Oeste, Norte e Nordeste. Na Paraba, ocorre predominantemente, na mesorregio da Mata Paraibana, com maior freqncia nas reas compreendidas pelas microrregies de Joo Pessoa e dos Litorais Norte e Sul (Aguiar Filho & Bosco, 1998). Tpica da faixa litornea Nordestina, sua populao vem sendo drasticamente reduzida, juntamente com o restante da vegetao nativa, devido especulao imobiliria e ao desmatamento para o cultivo de monoculturas, principalmente coqueiro, cana-de-acar e pastagens (Vieira Neto, 1998). Fruta rica em diversos elementos, vitaminas A, B1, B2 e C, alm de ferro, fsforo, clcio e protenas. Seus frutos possuem grande potencial de mercado uma vez que a procura no atende a demanda, sendo em sua grande maioria provenientes de atividade extrativista. Possuem polpa amarela adocicada, que consumida in natura, como tambm para industrializao sob a forma de doces, gelias, compotas, vinho, vinagre, suco e sorvete (Lederman et al., 2000). A explorao de uma espcie nativa depende de conhecimentos tcnicos a respeito da sua propagao, fundamentais para a definio de tecnologia de explorao racional. A mangabeira pode ser propagada pelo processo sexuado, que o mtodo mais usado pelo fato das sementes no apresentarem problema de dormncia ou pelo processo assexuado atravs da borbulhia, garfagem e encostia (Aguiar & Bosco, 1998). Normalmente, a porcentagem de germinao de sementes de mangaba baixa devido a presena de inibidores na polpa como tambm pelo fato de suas sementes serem recalcitrantes (Lorenzi, 1992; Oliveira & Valio, 1992). Tal fato foi constatado em pesquisa realizada anteriormente por Tavares (1960) que verificou uma diminuio na germinao de sementes de mangaba quando no eram removidos os resduos da polpa.

A maioria das espcies possui sementes cujo perodo de viabilidade pode manter-se, quando o teor de gua e a temperatura so reduzidos durante o armazenamento, sendo estas chamadas ortodoxas (Roberts, 1973). Porm, existe um outro grupo de espcies para as quais no se aplica a regra geral de reduo da temperatura e umidade no armazenamento, e cujo perodo de viabilidade bem mais reduzido. De acordo com Roberts (1973), estes tipos de sementes, chamadas de recalcitrantes no sofrem secagem natural na planta matriz e so liberadas com elevado teor de gua, e se for reduzido a um nvel considerado crtico, geralmente elevado, ocorrer a perda rpida da viabilidade, podendo levar at a morte. Para a grande maioria das fruteiras nativas e exticas, dados sobre a conservao da viabilidade e do vigor ainda so escassos, necessitando de pesquisas referentes s condies ideais de secagem e germinao. Nesse contexto, os objetivos deste trabalho foram: - Avaliar a qualidade fisiolgica de sementes de mangaba extradas sobre diferentes mtodos; - Conhecer aspectos morfolgicos dos frutos e sementes, assim como estudar o efeito de temperaturas e substratos na germinao e vigor de sementes de mangaba; - Verificar o efeito de diferentes mtodos de secagem, sobre a germinao e o vigor de sementes de mangaba; - Desenvolver metodologia para o uso do teste de tetrazlio em sementes de mangaba.

REVISO DE LITERATURA

Semente recalcitrante Segundo Aguiar Filho & Bosco (1998), a propagao da mangabeira pode ser feita pelo processo sexuado, atravs da semente, ou pelo processo assexuado mediante o uso de parte vegetal. Normalmente, a porcentagem de germinao de sementes de mangaba baixa, devido no s a presena de inibidores na polpa como tambm ao fato de suas sementes serem recalcitrantes (Lorenzi, 1992). Tal fato foi constatado em pesquisa realizada por Tavares (1960) onde o mesmo verificou uma diminuio na germinao de sementes dessa espcie quando no eram removidos os resduos da polpa. De acordo com Roberts (1973), as sementes recalcitrantes no sofrem secagem natural na planta matriz e so liberadas com elevado teor de gua, e se for reduzido a um nvel considerado crtico, geralmente elevado, ocorrer a perda rpida da viabilidade, podendo levar at a morte. Porm, existe um outro grupo de espcies para as quais no se aplica a regra geral de reduo da temperatura e teor de gua no armazenamento, e cujo perodo de viabilidade bem mais reduzido. As espcies recalcitrantes que possuem menores perodos de viabilidade so originrias de regies tropicais midas, onde existe um ambiente adequado, aproximadamente constante ao longo do ano, para a germinao de suas sementes, que geralmente no apresentam dormncia. Por outro lado, as espcies recalcitrantes provenientes de regies temperadas, frequentemente possuem algum tipo de dormncia, na maioria das vezes relacionada com exigncia em frio. Esta caracterstica permite-lhes permanecerem viveis at que as condies adversas acabem. A maioria das frutferas tropicais perenes e florestais de clima tropical ou temperado, economicamente importantes, recalcitrante (Chin & Roberts, 1980).

Dentre elas podem ser citadas a mangueira (Mangifera indica) (Simo, 1959; Chacko & Singh, 1971), cacau (Theobroma cacao) (Zink & Rochele, 1994), ip (Tabebuia sp.) (Kageyama & Mrquez, 1981), seringueira (Hevea brasiliensis) (Cardoso et al., 1966; Ccero et al., 1986); alm destas, estudos tm demonstrado o comportamento recalcitrante de outras espcies, como jabuticaba (Myrciaria cauliflora) (Valio & Ferreira, 1992; Mendona, 1999) e mangaba (Hancornia speciosa Gomes) (Parente & Carmona, 1988). Os trabalhos realizados com sementes de fruteiras tropicais recalcitrantes so de certa forma escassos e podem ocorrer erros metodolgicos resultando em classificao equivocada, como ocorreu com Citrus spp. (Barton, 1965) que anteriormente havia sido classificada como recalcitrante e estudos mais recentes demonstram ser mais prxima de ortodoxa (Chin et al., 1984; Farrant et al., 1988). Cogita-se que a falha na germinao ocorrida nos trabalhos antigos deveu-se, presumidamente por morte das sementes durante o processo de secagem e no devido ao baixo teor de gua das sementes. Farrant et al. (1986, 1988) citado por Mendona & Dias (2000), propuseram um modelo para explicar o comportamento geral das sementes recalcitrantes, admitindo pequenas variaes entre as espcies. Porm, as causas pela qual a desidratao das sementes recalcitrantes pode resultar em sua morte ainda no esto bem definidas. A esse respeito, estudos foram realizados, principalmente, com as espcies de Avicennia marina, tipos, sensveis dessecao. Tais autores constataram que a acentuada desidratao das sementes recalcitrantes resulta na remoo da gua livre e de parte da gua de constituio, que se encontra ligada s macromolculas, acarretando perda da integridade e de componentes celulares, uma vez que as sementes embebidas possuem enzimas operacionais, membranas

intactas e mecanismos de reparo que podem tornar-se no-funcionais, quando as sementes sofrem processo de secagem. Para as sementes ortodoxas esses efeitos so reversveis e podem ser retificados durante a embebio, porm nas sementes recalcitrantes, isso no ocorre, sendo possvel que a estrutura de certas enzimas ou protenas estruturais seja permanentemente alterada pela secagem, resultando na perda da atividade biolgica (Berjak et al., 1984; Bewley & Black, 1994).

Avaliao da qualidade fisiolgica das sementes A avaliao da qualidade fisiolgica das sementes fundamental para os diversos segmentos que compem um sistema de produo, pois a descoberta dos efeitos dos fatores que possam afetar a qualidade dessas sementes, depende diretamente, da eficincia dos mtodos utilizados para determin-la (Marcos Filho et al., 1987). Essa avaliao feita tradicionalmente pelo teste de germinao, porm este, apresenta limitaes por fornecer resultados que superestimam o potencial fisiolgico das sementes, devido ao fato de ser conduzido sob condies timas. Diante disto, foram desenvolvidos testes de vigor com a finalidade de fornecer informaes complementares s obtidas no teste de germinao e que permitissem estimar o potencial de emergncia de plntulas em campo sob ampla faixa de condies ambientais. Assim, a viabilidade e o vigor so os parmetros fundamentais utilizados para avaliar a qualidade das sementes. O teste de germinao considerado padronizado, com possibilidade de repetio dos resultados, desde que sejam seguidas as instrues estabelecidas nas Regras para Anlise de Sementes (Brasil, 1992). Por isso, este teste no

conduzido em condies de campo, porque o resultado dificilmente seria reproduzido. A ausncia de uma estreita relao entre a germinao, obtida em laboratrio, e a emergncia das plntulas em campo, levou ao desenvolvimento do conceito de vigor. De acordo com a definio da ISTA em 1977 e AOSA em 1979, Vigor de sementes compreende um conjunto de caractersticas que determinam o potencial para a emergncia e o rpido desenvolvimento de plntulas normais, sob ampla diversidade de condies de ambiente (Carvalho & Nakagawa, 2000). Assim, a avaliao do vigor das sementes realizada com o objetivo bsico de identificar possveis diferenas significativas na qualidade fisiolgica de lotes que apresentem poder germinativo semelhante. McDonald Junior (1975) dividiu os testes de vigor em fsicos, fisiolgicos e bioqumicos. Os fsicos estariam relacionados com caractersticas de tamanho, peso e densidade das sementes; os fisiolgicos utilizam alguns parmetros vinculados germinao e ao crescimento de plntulas, enquanto os bioqumicos avaliam alteraes bioqumicas/moleculares associadas ao vigor das sementes. Para a avaliao da qualidade das sementes uma das principais exigncias, refere-se rapidez na obteno dos resultados, para que as tomadas de decises possam ser agilizadas, principalmente durante as operaes de colheita, processamento e comercializao. Os testes que demandam perodo de tempo curto esto relacionados com os eventos iniciais da deteriorao, conforme sequncia proposta por Delouche & Baskin (1973), baseando-se na integridade das membranas celulares destacam-se os testes de condutividade eltrica e de lixiviao de potssio e na reduo das atividades enzimticas e respiratrias das sementes, o teste de tetrazlio (Abdul-Baki & Anderson, 1973).

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Teste de tetrazlio Dentre os testes que se baseiam na alterao de atividades enzimticas, destaca-se o de tetrazlio, que tem se mostrado uma alternativa interessante pela rapidez na determinao da viabilidade e do vigor, permitindo obter resultados em menos de 24 horas (Delouche et al., 1976; Frana Neto et al., 1988; Costa & Marcos Filho, 1994). O teste de tetrazlio conhecido desde a dcada de 30, quando Kuhn e Jerchel descobriram que os sais de tetrazlio reduziam-se nos tecidos vivos, resultando em um composto de cor vermelha (trifenilformazan), despertando o interesse de vrios cientistas que se dedicaram a estudar o teste (Delouche et al., 1976). Em 1945, Lakon publicou o primeiro trabalho com sementes de milho e de cereais pequenos, descobrindo que o melhor sal para a avaliao da viabilidade das sementes era o 2, 3, 5 trifenil cloreto de tetrazlio. O conhecimento deste princpio e a divulgao de suas aplicaes promoveram grande impulso na pesquisa resultando em diversos trabalhos publicados no mundo todo. Este teste baseia-se na atividade das enzimas desidrogenases, que reduz o sal de tetrazlio nos tecidos vivos da semente, onde ons de hidrognio so transferidos para o referido sal que atua como receptor de H (Delouche et al., 1976). Quando a semente imersa na soluo de tetrazlio, esta se difunde atravs dos tecidos, ocorrendo nas clulas vivas a reao de reduo, resultando na formao de um composto vermelho, no difusvel, conhecido como trifenilformazan, indicando haver atividade respiratria nas mitocndrias e, conseqentemente, que o tecido vivo. Por outro lado, no ocorre a reao no tecido morto que, portanto, no desenvolve a colorao vermelha, conservando-se a sua cor natural (Frana Neto et al., 1988).

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De acordo com Moore (1985), tecidos vigorosos tendem a se colorir gradualmente e uniformemente, desenvolvendo colorao rosa a vermelho brilhante e apresentando-se trgidos quando embebidos. A ocorrncia de vermelho intenso caracterstica de tecidos em deteriorao, que permitem maior difuso da soluo de tetrazlio atravs de suas membranas celulares j comprometidas. J os tecidos mortos no desenvolvem colorao, porque no apresentam atividade enzimtica necessria para a reduo do trifenilformazan, e geralmente, apresentam-se flcidos e com colorao branca opaco ou amarelada. importante ressaltar que tecidos mortos podem ainda apresentar manchas vermelhas, devido atividade de fungos ou bactrias. Segundo Moore (1973), estas diferenas de colorao,juntamente com os conhecimentos de algumas caractersticas das sementes, permitem a avaliao da presena, localizao e natureza dos distrbios dos tecidos embrionrios, podendo fornecer uma estimativa da viabilidade ou vitalidade do embrio. No Brasil, resultados de pesquisas desenvolvidas com sementes de soja por Frana Neto et al. (1981, 1985 e 1988) na Embrapa Soja, esto sendo utilizadas com sucesso em vrios laboratrios. Estes autores desenvolveram uma metodologia que permite no s avaliar a viabilidade e o vigor, como tambm determinar o grau de deteriorao por umidade e por danos mecnicos, e tambm danos ocasionados por secagem e por picada de percevejo. Desta forma, o teste permite o diagnstico detalhado das principais causas de perda da qualidade da semente de soja. Assim, conforme Moore (1985), o teste de tetrazlio tem como objetivos principais determinar o potencial de germinao de um lote de sementes sob condies ideais, classificar as sementes em diferentes categorias de viabilidade e diagnosticar as possveis causas da perda de viabilidade das mesmas. Mesmo apresentando estas caractersticas to interessantes, o uso do teste de tetrazlio ainda no apresenta

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importncia proporcional devido falta de metodologias apropriadas para as diferentes espcies (Marcos Filho et al., 1987). importante ressaltar que, a principal vantagem do teste de tetrazlio reside na possibilidade de avaliao da qualidade das sementes em poucas horas. Os dados obtidos podem ser empregados no estabelecimento de bases para a comercializao como ocorre para algumas forrageiras (Panicum maximum e Brachiaria brizantha), cujo teste de germinao bastante demorado (28 e 21 dias, respectivamente) e que quando recm colhidas apresentam alto percentual de sementes dormentes. Alm disso, um teste indicado para determinar o ponto de colheita e auxiliar no controle de qualidade ps-colheita, fornecendo uma estimativa do vigor. Diversos fatores podem interferir na obteno de resultados satisfatrios no teste de tetrazlio, principalmente aqueles relacionados metodologia de execuo. O uso de soluo de tetrazlio na concentrao adequada um deles. As Regras para Anlise de Sementes (Brasil, 1992) recomendam, para a maioria das espcies, concentraes de 0,5 a 1,0 %, o que provoca o desenvolvimento de colorao vermelha muito intensa (gren) dificultando a interpretao, principalmente na identificao visual entre o tecido vivel e o tecido em estdio avanado de deteriorao. Em virtude disto, mais recentemente, trabalhos realizados com algumas espcies como soja, algodo, amendoim, milho, feijo e caf tm indicado o uso de soluo a 0,075%, que permite o desenvolvimento de colorao ideal tanto nos tecidos vigorosos como nos no vigorosos. Alm da concentrao da soluo de tetrazlio, outro aspecto importante o perodo de tempo necessrio para o desenvolvimento de colorao nas sementes. importante que as sementes

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estejam totalmente submersas na soluo de tetrazlio e que esta no seja exposta luz direta para no ocorrer reao de reduo (Brasil, 1992). Delouche et al. (1976) afirmam que sementes de uma mesma espcie ou at de um mesmo lote, podem apresentar velocidade de colorao diferente. Assim, o perodo de colorao deve ser encerrado quando a intensidade mdia de colorao for tima para a interpretao, pois algumas sementes colorem mais rapidamente enquanto outras mais lentamente. Geralmente, sementes velhas e deterioradas se colorem mais rapidamente e desenvolvem colorao vermelho carmim. Um perodo muito longo de contato das sementes com a soluo pode acarretar o desenvolvimento de colorao muito intensa, prejudicando a interpretao do teste. Para facilitar a penetrao da soluo de tetrazlio, o pr-condicionamento das sementes e corte so necessrios para algumas espcies e recomendados para outras (Brasil, 1992), auxiliando no desenvolvimento de uma colorao mais uniforme e facilitando a interpretao (Delouche et al., 1976). Assim, o prcondicionamento tem como finalidade hidratar os tecidos e promover a reativao enzimtica necessria para o teste. importante ressaltar que, o sucesso no emprego de testes rpidos como mtodo para avaliao do vigor depende, dentre outros fatores, das relaes entre as informaes provenientes do laboratrio e o desempenho das sementes em campo. Diante do exposto, verifica-se que a rapidez na obteno das informaes seguras sobre a qualidade das sementes, a classificao destas em diferentes classes de viabilidade e vigor e a possibilidade de diagnosticar as causas da reduo da qualidade so as principais vantagens do teste. Por outro lado, algumas limitaes tm sido relatadas por Marcos Filho et al. (1987) como: a necessidade de

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pessoal treinado em estruturas embrionrias das sementes, no identificao da presena de patgenos e no permitir verificar a eficincia de tratamento qumico. Segundo Marcos Filho et al. (1987) o teste de tetrazlio ainda no tem uso generalizado principalmente pela falta de treinamento de pessoal e ausncia de conhecimentos sobre a metodologia mais adequada para as vrias espcies. As informaes at ento obtidas a respeito do referido teste indicaram a potencialidade do teste e sua possvel aplicao em maior escala para outras espcies, desde que seja desenvolvida metodologia adequada para as sementes de cada espcie. Portanto, o teste de tetrazlio mostra-se como uma alternativa eficiente para avaliar a viabilidade e o vigor de muitas espcies e permite, muitas vezes, determinar os principais fatores envolvidos na perda da qualidade de um lote de sementes. Contudo, estes objetivos s sero atingidos, se houver disponibilidade de metodologia eficiente e padronizada.

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ARTIGO 1

MTODOS DE EXTRAO SOBRE A QUALIDADE FISIOLGICA DE SEMENTES DE MANGABA

RESUMO A mangaba (Hancornia speciosa Gomes) tem a via sexuada como principal forma de propagao. So escassas as pesquisas referentes extrao de suas sementes, entretanto, a viabilidade e o vigor dependem diretamente do mtodo empregado. O presente trabalho teve com objetivo avaliar a qualidade fisiolgica de sementes de mangaba extradas sobre trs mtodos, sendo um manual (peneira) e outros dois mecnicos (despolpadeira e batedeira), em seguida as mesmas foram submetidasa determinao do teor de gua e aos testes de germinao, condutividade eltrica, primeira contagem, emergncia de plntulas em areia e massa seca de plntulas. A extrao manual proporcionou sementes com maior qualidade fisiolgica e entre os mtodos mecnicos a batedeira resultou em sementes mais viveis e vigorosas enquanto a despolpadeira provocou danos agudos. Termos para indexao: Hancornia speciosa, semente, viabilidade, vigor.

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EXTRACTION METHODS ABOUT MANGABA SEEDS QUALITY

ABSTRACT Mangaba (Hancornia speciosa Gomes) has sexual road sexuada as the main propagation form. Researches regarding the extraction of is seeds are scarce; however, viability and vigor depend directly on the employed method. The present work had as an objective to evaluate extracted mangaba seeds physiologic quality on three methods, in which one is manual (drizzles) and the other two are mechanics (content removing device and mixer), further the mentioned seeds were submitted to humidity, germination, electric conductivity, first count, seedling emergence and seedlings dry mass tests. Manual extraction provided seeds with a larger physiologic quality and, among mechanical methods, the mixer resulted in viable and vigorous seeds obtention, while the content removing device caused sharp damages. Index terms: Hancornia speciosa, seed, viability, vigor

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1. INTRODUO A mangabeira (Hancornia speciosa Gomes) uma planta nativa do Brasil, encontra-se vegetando espontaneamente nas regies Sudeste, Centro-Oeste, Norte e Nordeste. Na Paraba, ocorre predominantemente, na mesorregio da Mata Paraibana, com maior freqncia nas reas compreendidas pelas microrregies de Joo Pessoa e dos Litorais Norte e Sul (Aguiar Filho & Bosco, 1998). Tpica da faixa litornea Nordestina, sua populao vem sendo drasticamente reduzida, juntamente com o restante da vegetao nativa, devido especulao imobiliria e ao desmatamento para o cultivo de monoculturas, principalmente coqueiro, cana-deacar e pastagens (Vieira Neto, 1998). Considerando que trata-se de uma cultura ainda em fase de domesticao temas como avaliao da qualidade fisiolgica das sementes, seleo de gentipos, desenvolvimento e adaptao de prticas culturais e aspectos relacionados com a pr e ps-colheita do fruto, entre outros, necessitam ser melhor investigados. Esse quadro de abandono e destrato das mangabeiras existentes tem sido, por outro lado amenizado pelo interesse de alguns produtores em iniciar um plantio estruturado sob bases comerciais, estimulados pela grande demanda e os bons preos alcanados no mercado informal. Os frutos so do tipo baga de tamanho, formato e cores variados, normalmente, elipsoidais ou arredondados, amarelados ou esverdeados, com pigmentao vermelha ou sem pigmentao, polpa amarela adocicada, rica em vitaminas, ferro, fsforo, clcio e protenas (Aguiar Filho & Bosco, 1998). Suas sementes so achatadas e discides, com colorao castanho-clara (Lederman et al., 2000). A extrao das sementes de mangaba pode ser manual ou mecnica, desde que, sejam utilizados frutos sadios e maduros, apresentando casca amarela ou

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verde - amarelada, com manchas avermelhadas e consistncia macia ou mole, colhidos logo depois da sua queda ao cho (Parente et al., 1986). Contudo, a qualidade fisiolgica das sementes afetada pela polpa aderida semente, mtodo de extrao, cor e tamanho do fruto, armazenamento e dessecao (Tavares, 1960; Pimentel & Santos, 1978; Parente & Machado, 1986; Vieira Neto, 1997; Queiroz & Bianchetti, 2001; Bruno et al., 2004). Estudos tm revelado que as sementes devem ser semeadas o mais rapidamente aps serem extradas do fruto, no sendo recomendado o uso de sementes que tenham sido despolpadas a mais de sete dias, pois a sua viabilidade pode j est comprometida (Pimentel & Santos, 1978). Diante do exposto, o presente trabalho teve como objetivo avaliar a qualidade fisiolgica de sementes de mangaba extradas sobre diferentes mtodos.

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2. MATERIAL E MTODOS Este experimento foi conduzido no Laboratrio de Anlise de Sementes do Centro de Cincias Agrrias da Universidade Federal da Paraba em Areia - PB, no perodo de maro a junho de 2004. Para tanto foram utilizados frutos de mangaba provenientes da Estao Experimental de Mangabeira pertencente a EMEPA Empresa Estadual de Pesquisa Agropecuria da Paraba, localizada em Joo Pessoa - PB. As sementes foram retiradas de frutos maduros coletados logo aps carem ao solo. Foram estudados trs mtodos de extrao das sementes de mangaba sendo um manual (peneira) e outros dois mecnicos (despolpadeira e batedeira). Na extrao manual os frutos foram macerados em peneira de palha, na despolpadeira os frutos foram separados em polpa e sementes e na batedeira as sementes saiam misturadas polpa. Nos trs mtodos de extrao as sementes foram lavadas em gua corrente at a retirada total da polpa aderida. Em seguida, foram desinfestadas com soluo de hipoclorito de sdio a 0,5% e para retirar o excesso de gua foram espalhadas sobre papel toalha permanecendo sombra por 24 horas. A qualidade fisiolgica das sementes de mangaba foi avaliada pela determinao do teor de gua e pelos testes descritos abaixo: Teor de gua (U) - avaliado pelo mtodo da estufa a 105 3 C (Brasil, 1992), utilizando-se quatro subamostra de 25 sementes. Germinao (G) - realizado com quatro subamostras de 50 sementes, que antes do incio do teste foram tratadas com fungicida Benomil - 500 na concentrao de 1,0 g/kg de sementes, em seguida distribudas em folhas de papel germitest, umedecidas com gua destilada numa quantidade equivalente a 2,5 vezes o peso do substrato seco (Brasil, 1992), sendo os rolos confeccionados e mantidos em

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germinador a 28 C, diariamente foram realizadas observaes na porcentagem de plntulas anormais, sementes duras e sementes mortas. Primeira contagem de germinao (PCG) - conduzido conjuntamente com o teste de germinao, sendo a contagem realizada no dcimo quinto dia aps a semeadura e os resultados expressos em porcentagem de plntulas normais (Nakagawa, 1999). Condutividade eltrica (CE) - utilizou-se quatro subamostras de 50 sementes, determinada atravs da pesagem de sementes em balana de preciso de 0,01 g, colocadas para embeber em copos plsticos contendo 75 mL de gua desionizada, a 25 C, durante 24 horas conforme metodologia de Vieira (1994). Emergncia de plntulas em areia (EPA) - conduzido em casa de vegetao onde as sementes tambm foram tratadas com fungicida Benomil-500, na mesma concentrao, posteriormente quatro subamostras de 50 sementes foram

distribudas em bandejas plsticas contendo areia esterilizada e umedecida com a quantidade de gua equivalente a 60 % da capacidade de reteno. Massa seca de plntulas (MSP) - realizado ao final do teste de emergncia em areia, as plntulas foram colocadas em sacos de papel e levados para estufa com circulao de ar forado, mantidos a temperatura de 65 C, onde permaneceram at atingir peso constante. Os resultados foram expressos em gramas por repetio, conforme recomendaes de Nakagawa (1994). O delineamento estatstico utilizado foi o inteiramente casualizado com quatro repeties e os resultados obtidos submetidos anlise de varincia, sendo as mdias comparadas por meio de contrastes ortogonais.

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3. RESULTADOS E DISCUSSO Os valores mdios do teor de gua, germinao, plntulas anormais, sementes duras e mortas, condutividade eltrica, primeira contagem de germinao, emergncia de plntulas em areia e massa seca de plntulas de mangaba esto apresentados na Tabela 1. Independentemente do mtodo de extrao, o teor de gua, germinao e emergncia de plntulas em areia de sementes de mangaba foram altas, variando de 46,2 a 50,4 %, 73,0 a 86,0 % e 80 a 88 %, respectivamente. Barros et al. (2003), estudando diferentes mtodos de secagem de sementes de mangaba, verificaram que o teor de gua das mesmas, na ocasio da instalao do ensaio, estava em torno de 43 %. Parente & Machado (1986), observaram que as sementes obtidas de frutos maduros apresentaram germinao em torno de 86 %.

Tabela 1. Mdias das variveis analisadas de sementes de mangaba submetidas a diferentes mtodos de extrao. Mtodos de extrao Variveis Peneira Despolpadeira Batedeira Teor de gua (%) 50,3 46,2 48,2 Germinao (%) 80,0 73,0 86,0 Plntulas anormais (%) 10,5 14,0 6,0 Sementes duras (%) 4,5 6,0 1,5 Sementes mortas (%) 5,0 7,5 6,5 Condutividade eltrica (S/cm/g) 24,5 23,5 15,4 Primeira contagem (%) 36,7 32,5 40,7 Emergncia de plntulas em areia (%) 84,0 88,0 80,0 Massa seca de plntula (g) 0,1 0,1 0,2 As sementes retiradas na peneira, com teor de gua pouco maior (3,1 %), em relao s extradas mecanicamente, apresentaram mesma porcentagem de germinao (Tabela 2).

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Tabela 2. Estimativas dos contrastes das variveis analisadas de sementes de mangaba submetidas a diferentes mtodos de extrao Estimativas dos contrastes Variveis Peneira vs Despolpadeira Despolpadeira vs e Batedeira Batedeira Teor de gua (%) 3,1 ** -2,0 ** ns Germinao (%) 0,7 -13,5 ** Plntulas anormais (%) 0,5 ns 8,0 ** ns Sementes duras (%) 0,7 4,5 * Sementes mortas (%) -2,0 ns 1,0 ns Condutividade eltrica (S/cm/g) 5,1 ** 8,1 ** ns Primeira contagem (%) 0,1 -8,2 ** Emergncia em areia (%) 0,0 ns 8,0 ns ns Massa seca de plntulas (g) -0,04 -0,06 ns
ns

, * e ** , No significativo, significativo a 5 e 1% de probabilidade, respectivamente, pelo teste F.

Oliveira & Valio (1992), observaram reduo na germinao de sementes de mangaba com teor de gua abaixo de 25 %. Pimentel & Santos (1978), estudando o efeito de diferentes tratamentos para retirada total da polpa aderida as sementes de mangaba, constataram que o mtodo da peneira foi o mais recomendado. Contudo, as sementes extradas na batedeira, apresentaram teor de gua (2,0 %) e germinao (13,5 %) superiores as da despolpadeira. Esta diferena na germinao, provavelmente, no est relacionada ao teor de gua, mas sim a danos na semente causados durante a extrao pela despolpadeira, ocorrendo maior porcentagem de plntulas anormais (8,0 %). Tavares (1960) estudando o efeito de resduos de polpa aderidos a sementes de mangaba, verificou que os mesmos inibem a germinao. Observou-se alteraes da condutividade eltrica (CE) em todos os mtodos de extrao das sementes de mangaba e da primeira contagem de germinao (PCG) entre os mtodos mecnicos. Com maiores valores de condutividade (5,1 e 8,1 S/cm/g) para as sementes extradas na peneira e na despolpadeira,

respectivamente, e menores de primeira contagem de germinao (8,2 %) nas sementes extradas pela despolpadeira. Indicando que a extrao das sementes na peneira apesar de ter ocasionado uma pequena alterao nos sistemas de

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membranas, no promoveu reduo na viabilidade e no vigor das sementes, confirmada pelas porcentagens semelhantes de germinao, plntulas anormais, sementes duras, sementes mortas, emergncia de plntulas em areia e massa seca de plntulas, enquanto na despolpadeira estas alteraes foram mais acentuadas, proporcionando aumento na lixiviao de solutos celulares.

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4. CONCLUSES - Sementes extradas manualmente so de melhor qualidade fisiolgica; - Entre os mtodos mecnicos, as sementes de mangaba, extradas na batedeira apresentam maior viabilidade e vigor; - A despolpadeira provoca danos agudos nas sementes de mangaba.

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ARTIGO 2

CARACTERIZAO MORFOLGICA E GERMINAO DE FRUTOS E SEMENTES DE MANGABA

RESUMO A mangaba uma fruteira nativa de vrias regies e ecossistemas do Brasil, pertence famlia das Apocynaceae, sendo uma espcie de importncia regional, porm ainda pouco explorada. O objetivo deste trabalho foi conhecer aspectos morfolgicos dos frutos e sementes, assim como estudar o efeito de diferentes temperaturas e substratos na germinao e vigor de sementes de mangaba. Para o estudo do fruto foram observados os aspectos: formato; cor; dimenses (comprimento e largura); peso e nmero de sementes por fruto. Para a descrio das sementes foram observados: externamente - cor, dimenses (comprimento, largura e espessura), peso de 1000 sementes, textura e consistncia dos tegumentos, forma e posio do hilo; internamente - tipo de embrio (cotildones, eixo hipoctilo-radcula, plmula) e presena ou ausncia de endosperma. Diariamente foram feitas observaes para germinao, primeira contagem, porcentagens de plntulas normais e anormais, sementes mortas e duras. Os frutos de mangaba possuem forma elipsoidal com nmero varivel de sementes (2 a 27); as sementes so ovais, com endosperma crneo e embrio com cotildones foliceos e eixo hipoctilo-radcula com plmula e radcula inconspcua; as temperaturas mais adequadas para germinao de sementes de mangaba so 28 e 25 C, em substratos areia e papel; Termos para indexao: Hancornia speciosa, descrio morfolgica, viabilidade, vigor.

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MORPHOLOGICAL CHARACTERIZATION AND GERMINATION OF FRUITS AND SEEDS IN MANGABA

ABSTRACT Mangaba is a native fruit tree of some regions and ecosystems from Brazil. It belongs to the Apocynaceae family and it is a species of regional importance, whereas it is still little explored. The objective of this work was to find out morphologic aspects of fruits and seeds besides to study the effect of different temperatures and substrate in mangaba seeds germination and vigor. The following aspects had been considered in order to procedure the fruit study: format; color; dimensions (length and width); weight and number of seeds per fruit. The aspects taken into consideration with the aim of making the seeds description were: externally - color, dimensions (length, width and thickness), 1000 seeds weight, texture and consistency of the teguments, form and position of hilum; internally - embryo type (cotyledons, axle hypocotylradicule, plumule) and presence or absence of endosperm. Daily observations about germination had been made, first counting, normal and abnormal seedlings percentage, deceased and hard seeds. Mangaba fruits possess a form that ellipsoidal, with more than number seeds arrives (2 27); the seeds are oval, with corneous endosperm and embryo with foliaceous cotyledons and hypocotyl-radicule axle with plumule and inconspicuous radicule; temperatures mangaba seeds of 28 and 25 and C for substrate sand and paper. Index Terms: Hancornia speciosa, morphologic description viability, vigor.

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1. INTRODUO A mangabeira (Hancornia speciosa Gomes), uma rvore frutfera, lacticfera, pertencente famlia das Apocinceas, nativa do Brasil, sendo comum nas regies Sudeste, Norte, Centro-Oeste e Nordeste, com abundncia nas reas de tabuleiros costeiros e baixadas litorneas da Regio Nordeste. Rica em diversos elementos, predominando em sua composio as vitaminas A, B1, B2 e C, alm de ferro, fsforo, clcio e protenas (Villachica et al., 1996). utilizvel na produo de doces, xarope, compotas, licores, vinagre, suco e sorvete. Apesar da grande adequabilidade desse fruto explorao agroindustrial, a produo no vem atendendo a demanda, uma vez que o extrativismo ainda a principal forma de explorao (Vieira Neto, 1993). Outro ponto de grande relevncia o aspecto morfolgico da planta, para identificar as plantas de uma dada regio, estudos sobre a ecologia da espcie facilitando a interpretao de testes de germinao, pelos tecnologistas e analistas de sementes (Oliveira, 1993). Autores ressaltam que imprescindvel um melhor conhecimento da germinao, do crescimento, do estabelecimento e da estrutura da planta para compreender a dinmica de populaes vegetais bem como o reconhecimento do estdio em que se encontra (Donadio & Dematt, 2000). Todavia, no Brasil ainda so escassos os trabalhos desta natureza, principalmente, no que se refere a fruteiras nativas. Nas ltimas dcadas, considervel o aumento do conhecimento relativo a anlise de sementes de frutferas nativas, contudo, a maioria delas carece ainda de subsdios bsicos referentes s condies ideais de germinao, onde so ainda encontradas poucas recomendaes e prescries sobre metodologias para anlise de sementes de espcies nativas, comprovado atravs das Regras para Anlise de Sementes (Brasil, 1992) embora as mesmas sejam intensamente cultivadas. A

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explorao de uma espcie nativa depende dos conhecimentos tcnicos a respeito da sua propagao, existem poucas informaes relativas a fatores que afetam a germinao das sementes de mangaba, as quais apresentam comportamento recalcitrante (Parente et al., 1988). Entre os fatores que afetam a germinao das sementes a temperatura, o substrato, a umidade e a luz so os principais (Mayer, 1986; Alves et al., 2002). Os tipos de substratos mais utilizados e prescritos em Brasil (1992) so: pano, papel, toalha, papel de filtro, papel mata borro e areia. O substrato deve manter a disponibilidade de gua e a aerao em propores adequadas (Popinigis, 1985), para evitar a formao de pelculas de gua sobre a semente e assim, restringir a entrada de oxignio (Villagomez et al., 1979). As sementes apresentam comportamento varivel em relao temperatura, pois no h uma temperatura tima e uniforme de germinao para todas as espcies, sendo considerada tima a temperatura na qual a semente expressa o seu potencial mximo de germinao e as temperaturas mxima e mnima os pontos crticos onde abaixo e acima das quais, respectivamente, no ocorre germinao (Popinigis, 1985; Mayer & Poljakoff-Mayber, 1989). Desta forma, a temperatura mxima para a germinao de muitas sementes, encontra-se entre 35 e 40 C e a tima entre 20 e 30 C (Marcos Filho, 1986; Borges & Rena, 1993). Nascimento et al. (2000) estudando o efeito da temperatura sobre a germinao de sementes de Jenipapo (Genipa americana), verificaram que 30 C permitiu a maior germinao, sendo o limite inferior entre 15 e 20C e o superior entre 35 e 40 C, em substrato papel.

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O objetivo do presente trabalho foi conhecer aspectos morfolgicos dos frutos e sementes assim como estudar o efeito de diferentes temperaturas e substratos na germinao e vigor de sementes de mangaba.

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2. MATERIAL E MTODOS A pesquisa foi conduzida no Laboratrio de Anlise de Sementes do Centro de Cincias Agrrias da Universidade Federal da Paraba em Areia-PB. Para tanto, foram utilizados frutos de mangaba provenientes da Estao Experimental de Mangabeira pertencente a Empresa Estadual de Pesquisa Agropecuria da Paraba - Emepa localizada em Joo Pessoa - PB. As sementes foram retiradas de frutos maduros coletados logo aps carem ao solo. Aps a extrao foram lavadas at a completa retirada da polpa, desinfestadas com soluo de hipoclorito de sdio a 0,5%, espalhadas sobre papel toalha e secas sombra por 24 horas. Para descrever e ilustrar morfologicamente os frutos e as sementes de mangaba foram utilizados 100 frutos, retirados aleatoriamente. As observaes foram realizadas com lupa e a olho nu. Foram considerados os seguintes aspectos para a caracterizao do fruto: formato; cor; dimenses (comprimento e largura); peso e nmero de sementes por fruto. Para a descrio das sementes foram feitos cortes transversais e longitudinais com lminas; sendo analisadas as seguintes variveis: externas - cor, dimenses (comprimento, largura e espessura), peso de 1000 sementes (8 subamostras de 100 sementes conforme Brasil, 1992), textura e consistncia dos tegumentos, forma e posio do hilo; internas - tipo de embrio (cotildones, eixo hipoctilo-radcula, plmula) e presena ou ausncia de endosperma. O comprimento, a largura e a espessura dos frutos e das sementes foram medidos, utilizando-se um paqumetro de preciso de 0,1 mm. A terminologia foi adotada conforme Damio-Filho (1993), Barroso et al. (1999 e 2002). O material utilizado nos estudos morfolgicos foi conservado em lcool etlico a 70 % e as ilustraes foram feitas manualmente. Os dados das caractersticas quantitativas

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foram submetidos anlise descritiva, obtendo-se as respectivas mdias, coeficiente de variao e desvio padro. O teor de gua das sementes foi determinado pelo mtodo da estufa a 105 3 C (Brasil, 1992), utilizando quatro repeties de 20 sementes cada. O teste de germinao em papel foi conduzido conjuntamente com a primeira contagem utilizando-se quatro repeties de 25 sementes, que foram semeadas em folhas de papel germitest, umedecidas com gua destilada numa quantidade equivalente a 2,5 vezes o peso do substrato seco conforme Brasil (1992). Os rolos foram mantidos em germinadores temperatura constante de 25, 28, 30 e 35 C e alternada de 20 - 30 C (8 horas de luz). Observaes para a primeira contagem de germinao, porcentagem de plntulas normais, sementes mortas, duras e plntulas anormais foram feitas diariamente. Para o substrato areia lavada e esterilizada, distribuiu-se as sementes (4 repeties de 25 sementes) em bandejas plsticas de 32 x 24 x 10 cm umedecidas com 60 % de sua capacidade de reteno e acondicionadas, juntamente com os rolos de papel, nos respectivos germinadores. O delineamento experimental utilizado foi o inteiramente casualizado com quatro repeties, em esquema fatorial 2 x 5; dois substratos (papel germitest e areia esterilizada) e cinco nveis de temperatura (constantes 25, 28, 30 e 35 C e alternada 20 - 30 C). As caractersticas avaliadas foram: germinao (G), primeira contagem de germinao (PCG), sementes mortas (SM), sementes duras (SD) e plntulas anormais (PA). Aps realizao da anlise de varincia generalizada, procedeu-se o desdobramento das interaes. As temperaturas 25, 28, 30 e 35 C foram

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analisadas atravs de regresso, enquanto a temperatura alternada 20 - 30 C foi estudada atravs do contraste 30 vs 20 - 30 C.

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3. RESULTADOS E DISCUSSO Os frutos de mangaba so do tipo baga de tamanho, formato e cores variados, normalmente, elipsoidais (Figura 1 A). Possui epicarpo fino, amarelo-esverdeado com ou sem pigmentao vermelha e nmero de sementes variveis (Figura 1 B).

Figura 1. Morfologia do fruto e da semente de Mangaba: A - fruto; B - corte longitudinal do fruto, epicarpo (ep) e sementes (s); C - semente, hilo (hi); D - seo longitudinal da semente mostrando a localizao do embrio (e) e do endosperma (en); E - seo transversal da semente; F - vista lateral da semente; G - embrio livre; H - seo longitudinal do embrio, com eixo hipoctilo-radcula (hr) e os cotildones (ct). As sementes possuem colorao castanho clara, forma oval com bordo mais ou menos anguloso (Figura 1 C). O tegumento recoberto de pilosidades (tricomas) de consistncia membrancea, possui hilo central oblongo originado ou formado pela ausncia de parte do tegumento (Figura 1 C). O endosperma da semente de mangaba crneo, de colorao amarelo clara, com bordos angulosos, face interna

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cncava e externa convexa (Figura 1 D). O embrio do tipo axial, contnuo, reto, espatulado, com cotildones foliceos e ovais de colorao branca (Figura 1 G). Eixo hipoctilo-radcula curto, cilndrico com plmula e radcula inconspcua (Figura 1 H). No ponto de origem da plmula, observa-se apenas vestgio de pilosidade. Os valores mdios das caractersticas morfolgicas dos frutos e sementes de mangaba encontram-se na Tabela 1.

Tabela 1. Caractersticas morfolgicas dos frutos e das sementes de mangaba. FRUTOS Comprimento Largura Peso de (mm) (mm) fruto (g) 36,6 29,2 18,3 50,0 40,0 35,8 29,0 21,0 9,1 11,8 13,8 34,0 4,3 4,0 6,2 SEMENTES Comprimento Largura Espessura (mm) (mm) (mm) 10,3 7,5 3,1 12,0 9,0 4,0 7,0 6,0 3,0 13,3 12,6 8,9 1,4 0,9 0,3 Sementes /fruto 8,1 27,0 2,0 57,8 4,7 Peso mil sementes (g) 15,2 16,4 14,4 4,6 0,7

Caractersticas Mdia Mximo Mnimo Coeficiente de variao Desvio padro Caractersticas Mdia Mximo Mnimo Coeficiente de variao Desvio padro

Os valores mdios de germinao, primeira contagem de germinao, sementes mortas, duras e plntulas anormais de mangaba, nos substratos papel e areia, para temperatura 30 C e alternada 20 - 30 C, esto apresentados na Tabela 2. Os resultados de germinao, primeira contagem de germinao e sementes mortas foram afetados, variando de 63 a 86 %, 37 a 77 % e 8 a 18 %, respectivamente. Interaes significativas entre substrato x temperatura so importantes, pois a capacidade de reteno de gua e a quantidade de luz que o

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substrato conduz at a semente podem levar a uma resposta diferenciada para a mesma temperatura (Aguiar et al., 1993).

Tabela 2. Variveis analisadas na qualidade fisiolgica de sementes de mangaba, sob condies combinadas de substratos e temperaturas. Papel Areia Variveis 30 C 20 - 30 C 30 C 20 - 30 C Germinao (%) 63 74 86 81 Primeira contagem de germinao (%) 37 67 73 77 Sementes mortas (%) 18 8 10 8 Sementes duras (%) 7 11 0 2 Plntulas anormais (%) 12 7 4 9 Como pode ser observado na Tabela 3, no substrato papel, a temperatura alternada (20 - 30 C) proporcionou, maiores valores de germinao, primeira contagem e sementes mortas (30, 11, 10 %), em relao temperatura constante (30 C). Resultados semelhantes foram encontrados por Santos et al. (1999), onde a temperatura alternada (20 - 30 C) foi a mais adequada para a germinao de sementes de maracuj, em substrato de papel. J no substrato areia, as temperaturas (30, 20 - 30 C) no alteraram a qualidade fisiolgica das sementes de mangaba. Oliveira et al. (1994) recomendam que sejam estudadas temperaturas alternadas uma vez que elas simulam as flutuaes de temperatura que ocorrem prximo ao solo, em condies naturais.

Tabela 3. Estimativas dos contrastes das variveis analisadas de sementes de mangaba, sob condies combinadas de substratos e temperaturas 30 vs 20 - 30 C Variveis Papel Areia Germinao (%) - 11,0 5,0 ns Primeira contagem (%) - 30,0 ** - 4,0 ns Sementes mortas (%) 10,0 * 2,0 ns Sementes duras (%) - 4,0 ns - 2,0 ns Plntulas anormais (%) 5,0 - 5,0 ns
ns

, , * e **, No significativo e significativo a 10, 5 e 1%, respectivamente, pelo teste Quiquadrado.

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Por ocasio da instalao do ensaio, as sementes apresentaram teor de gua em torno de 43 %. Os valores de germinao, primeira contagem de germinao, sementes mortas, duras e plntulas anormais nos substratos papel e areia, para as demais temperaturas esto apresentados na Figura 2. Observa-se que a germinao e a primeira contagem de plntulas, no substrato areia, foi sempre maior que no papel, com mxima (84 e 75 %) a 28 C, permanecendo acima de 80 e 70 % com temperaturas variando de 26 a 31 C, respectivamente. Temperaturas fora deste intervalo reduzem a germinao e a primeira contagem, com mnima (58 e 54 %) a 35 C. No substrato papel a germinao e o vigor reduziram com o aumento da temperatura, sendo mxima (76 e 69 %) a 25 C e mnima (40 e 29 %) a 35 C. Lopes et al. (2002), pesquisando diferentes substratos e temperaturas (20, 25, 30 e 20 - 30 C) constataram que a temperatura de 30 C proporcionou reduo drstica na germinao de sementes de Muntingia calabura. Alves et al. (2002) trabalhando com sementes de Mimosa caesalpiniaefolia constataram que a temperatura de 25 C foi a mais adequada para os testes de vigor, independentemente do substrato utilizado. As porcentagens de sementes mortas e duras foram constantes (12,3 e 1,5 %), nos substratos papel e areia, respectivamente, no sofrendo, portanto influncia das temperaturas. Contudo, no substrato areia a porcentagem de sementes mortas foi mnima (9 %) a 28 C, permanecendo abaixo de 12 % com temperaturas variando de 25 a 30 C, enquanto, no substrato papel, a porcentagem mnima de sementes duras (7 %) tambm foi obtida a 28 C, permanecendo abaixo de 10 % nas temperaturas de 25 a 30 C.

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Papel
100 Germinao (% ) 80 60 40 20 0 25 28 31 Temperatura (C) 34
Papel = - 194,84 + 21,09**x - 0,4107 x2 R2 = 0,92 Areia = - 415,07 + 35,118**x - 0,6176**x 2 R2 = 0,94

Areia
100 Primeira contagem (% ) 80 60 40 20 0 25 28 31 Temperatura (C) 34
Papel = 168,44 - 3,981**x R2 = 0,64

(a)

(b)
Areia = - 243,86 + 22,786**x - 0,4078*x 2 R2 = 0,99

50 Sementes mortas (% ) 40 30 20 10 0 25

(c)
Papel = 12,25

(d)
50 Sementes duras (% ) 40 30 20 10 0 25 28 31 Temperatura (C) 34
Papel = 365,47 - 26,113**x + 0,473*x 2 R2 = 0,99 Areia = 1,5

Areia = 273,62 - 18,862**x + 0,3359*x 2 R = 0,99


2

28

31 Temperatura (C)

34

50 Plntulas anormais (% ) 40 30 20 10 0 25

(e)
Papel = - 12,292 + 0,7642x R2 = 0,57 Areia = 188,97 - 12,343NSx + 0,2087x2 R2 = 0,62

28

31 Temperatura (C)

34

Figura 2. Germinao (a), primeira contagem (b), sementes mortas (c), duras (d) e plntulas anormais (e) de mangaba, sob condies combinadas de substratos e temperaturas. Com relao ocorrncia de anormalidades, no substrato areia, a menor porcentagem (7 %) foi a 29 C, permanecendo abaixo de 10 % nas temperaturas de 26 a 33 C. J no substrato papel, o aumento da temperatura foi diretamente proporcional porcentagem de plntulas anormais, com mnima (9 %) e mxima (15 %) aos 25 e 35 C.

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4. CONCLUSES - Os frutos de mangaba possuem forma elipsoidal com nmero varivel de sementes (2 a 27); - As sementes de mangaba so ovais, com endosperma crneo e embrio com cotildones foliceos e eixo hipoctilo-radcula com plmula e radcula inconspcua. - As temperaturas mais adequadas para germinao de sementes de mangaba so 28 e 25 C, em substratos areia e papel.

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ARTIGO 3

COMPORTAMENTO FISIOLGICO DE SEMENTES DE MANGABA SUBMETIDAS DESSECAO

RESUMO Em condies normais, as sementes de mangaba (Hancornia speciosa Gomes), perdem a qualidade fisiolgica rapidamente, o que dificulta sua utilizao pelos viveiristas. Em funo da escassez de pesquisas referentes dessecao de suas sementes, o trabalho teve como objetivo avaliar a qualidade fisiolgica de sementes de mangaba submetidas a dois mtodos de secagem (ambiente de laboratrio e dessecador) e cinco perodos (0, 12, 24, 36 e 48 horas). Para isso as sementes foram submetidas aos testes de teor de gua, condutividade eltrica, primeira contagem, germinao, emergncia de plntulas em areia, comprimento da parte area e massa seca de plntulas. As sementes de mangaba podem ser secadas por tempos inferiores a 36 horas no ambiente laboratrio (temperatura e umidade relativa do ar de 27 C e 45 %) e 48 horas em dessecador, sem alterao em sua qualidade fisiolgica, j a secagem no dessecador mais lenta e proporciona sementes mais vigorosas. Termos para indexao: Hancornia speciosa, secagem, viabilidade, vigor.

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PERFORMANCE PHYSIOLOGICAL MANGABA SEEDS SUBMITTED DESICCATION

ABSTRACT In normal conditions, mangaba seeds (Hancornia speciosa Gomes) quickly lose physiological quality, which still makes it difficult for the nurserists to use them. Being scarce the research referring to seeds desiccation, this work had as an objective to evaluate mangaba seeds physiological quality submitted to two drying methods (laboratory environment and desiccator) for five times (0, 12, 24, 36 and 48 hours). Then, such seeds had been submitted to tests moisture content, electric conductivity, first counting, germination, seedlings emergency in sand, aerial part length and seedlings dry mass. Seeds mangaba and they can be dried by time inferior to 36 in laboratory (temperature relative humidity 27 % e 45 %) and 48 hours environment and desiccator, without alteration in their physiological quality. On the other hand, the drying in desiccator is slower and provides more vigorous seeds. Index Terms: Hancornia speciosa, drying, viability, vigor.

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1. INTRODUO A mangabeira (Hancornia speciosa Gomes), planta frutfera e lactescente da famlia das Apocinceas, desenvolve-se em solos com baixa fertilidade, cidos e bem drenados dos ecossistemas de Caatinga, Cerrado, Mata Atlntica e Floresta Amaznica (Lorenzi, 1992). Ocorre predominantemente, na mesorregio da Mata Paraibana, com maior freqncia nas reas compreendidas pelas microrregies de Joo Pessoa e Litorais Norte e Sul (Aguiar Filho & Bosco, 1998). Os frutos so ricos em nitrognio, fsforo, vitamina C e lipdeos, com colorao amarela - avermelhada, casca fina e polpa adocicada, sendo popularmente apreciada na regio Nordeste, por apresentar timo aroma, sabor e boa digestibilidade (Parente et al., 1985), podendo ser consumido in natura ou processados na forma de sorvete, pudim, suco, gelia, vinho, vinagre, xarope e licor (Villachica et al., 1996). A madeira vem sendo utilizada na carpintaria, para confeco de caixas e para a produo de carvo. O ltex, produzido em todas as partes da planta utilizado no tratamento de doenas venreas, tuberculose e verrugas, sendo ainda utilizada para fins ornamentais (Lorenzi, 1992). Sua propagao pode ser via assexuada, mediante o uso de parte vegetal e sexuada, atravs da semente, sendo esta o meio mais comumente utilizado. Como conseqncia, os estudos concentram-se na determinao das condies que propiciem maiores taxas de germinao e vigor das plntulas, tais como profundidade de semeio, tipo de substrato e mtodos de extrao das sementes (Espndola et al., 1992; Santos & Nascimento, 1999; Nogueira et al., 2003; Barros et al., 2005a). Todavia, fatores como luz, umidade, temperatura, presena de sais ou patgenos podem interferir na germinao e no vigor das plntulas (Nogueira & Albuquerque, 2003).

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As sementes de mangaba alm de apresentarem curta longevidade, sendo necessrio o semeio logo aps a extrao dos frutos, tambm considerada recalcitrante, ou seja, a reduo da umidade pode ocasionar danos, prejudicando sua viabilidade e vigor, resultando at em sua morte. Nessas sementes, a gua subcelular est fortemente associada s superfcies macromoleculares assegurando, em parte a estabilidade de membranas e macromolculas. A perda de gua estrutural durante o processo de secagem pode causar alterao de sistemas metablicos e de membranas resultando no incio do processo de deteriorao (Farrant et al., 1988). J a viabilidade dessas sementes reduzida quando o teor de gua atinge valores inferiores aqueles considerados crticos; quando iguais ou inferiores aqueles considerados letais, a perda total da viabilidade (Hong & Ellis, 1992). A sensibilidade das sementes recalcitrantes dessecao depende da espcie sendo os teores crtico e letal de gua relativamente altos, respectivamente, de 27 a 38 % (Chin, 1988; Andrade & Pereira, 1997) e de 12 a 22 % (Ferreira & Santos, 1992; Andrade & Pereira, 1997). O conhecimento dos teores crtico e letal de gua de uma espcie indispensvel para o planejamento e execuo da secagem das sementes. Vrios ensaios com sementes recalcitrantes, buscando o entendimento de sua sensibilidade a dessecao vem sendo realizados, embora no com fruteiras tropicais. Desta forma, o presente trabalho teve como objetivo verificar o efeito de diferentes mtodos de secagem, sobre a germinao e o vigor de sementes de mangaba.

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2. MATERIAL E MTODOS A pesquisa foi conduzida no Laboratrio de Anlise de Sementes do Centro de Cincias Agrrias da Universidade Federal da Paraba em Areia - PB. Foram utilizados frutos de mangaba provenientes da Estao Experimental de Mangabeira pertencente Empresa Estadual de Pesquisa Agropecuria da Paraba - EMEPA localizada em Joo Pessoa - PB. As sementes foram retiradas de frutos maduros coletados logo aps carem ao solo. Aps a extrao foram lavadas at a completa retirada da polpa, desinfestadas com soluo de hipoclorito de sdio a 0,5 % e espalhadas sobre papel toalha. Para retirar o excesso de gua foram secas sombra por 24 horas em local ventilado. Posteriormente as sementes foram submetidas a dois mtodos de secagem: secagem sobre papel toalha em condio ambiente de laboratrio (temperatura e umidade relativa do ar em torno de 27 C e 45 %, respectivamente); e secagem sobre uma tela de arame dentro do dessecador com slica gel na proporo de 1:1 (sementes de mangaba : slica gel). Nos intervalos de 12, 24, 36 e 48 horas, uma amostra de sementes foi retirada em cada ambiente de secagem para a realizao da determinao do teor de gua e dos testes descritos abaixo: Teor de gua (U): foi determinado pelo mtodo da estufa a 105 3 C (Brasil, 1992), utilizando-se quatro subamostras de 20 sementes. Condutividade eltrica (CE): utilizou-se quatro subamostras de 50 sementes, que foram pesadas em balana de preciso de 0,01 g e colocadas para embeber em copos plsticos contendo 75 mL de gua desionizada, a 25 C, durante 24 horas conforme metodologia de Vieira (1994). Primeira contagem de germinao (PCG): conduzido conjuntamente com o teste de germinao, sendo a contagem realizada no dcimo quinto dia aps a

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semeadura e os resultados expressos em porcentagem de plntulas normais (Nakagawa, 1999). Germinao (G): as sementes foram tratadas com fungicida Benomil-500 na concentrao de 1,0 g/kg de sementes, em seguida distribudas em folhas de papel germitest, umedecidas com gua destilada numa quantidade equivalente a 2,5 vezes o peso do substrato seco Brasil (1992) e colocados em germinador a 28 C. Emergncia de plntulas em areia (EPA): realizada em casa de vegetao, onde as sementes tambm foram tratadas com fungicida, na mesma concentrao, posteriormente quatro subamostras de 50 sementes foram distribudas em bandejas plsticas contendo areia esterilizada e umedecida com a quantidade de gua equivalente a 60 % da capacidade de reteno. Comprimento da parte area de plntulas (CPA): realizado ao final do teste de emergncia em areia, onde o comprimento da parte area foi medido com o auxlio de uma rgua graduada em centmetros. Massa seca de plntulas (MSP): tambm realizado ao final do teste de emergncia em areia, onde as plntulas foram colocadas em sacos de papel e levados para estufa com circulao de ar forado, a 65 C, permanecendo at atingir peso constante. Os resultados foram expressos em gramas por repetio, conforme recomendaes de Nakagawa (1994). O delineamento estatstico utilizado foi o inteiramente casualizado com quatro repeties, sendo os tratamentos dispostos em esquema fatorial 2 x 4; dois mtodos de secagem (condio ambiente laboratrio e dessecador com slica gel) e quatro tempos (12, 24, 36 e 48 horas). Aps realizao da anlise de varincia generalizada, procedeu-se o desdobramento das interaes. O efeito conjunto dos mtodos de secagem e

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tempos foi analisado atravs de contraste (testemunha 0 hora vs fatorial mtodos de secagem nos tempos de 12, 24, 36 e 48 horas), enquanto a comparao entre os mtodos de secagem pelo teste F e dos tempos atravs de regresso.

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3. RESULTADOS E DISCUSSO Os valores mdios de teor de gua em base mida, condutividade eltrica, primeira contagem de germinao, germinao, emergncia de plntulas em areia, comprimento da parte area e massa seca de plntulas de mangaba, na ocasio da instalao do ensaio (testemunha) e depois de submetidas aos dois mtodos de secagem nos quatro tempos (fatorial), esto apresentados na Tabela 1. O teor de gua, condutividade eltrica, emergncia de plntulas em areia e comprimento da parte area de plntulas de mangaba foram altamente afetadas, variando de 43,3 a 25,4 % bu.; 33,4 a 50,3 S/cm/g; 71,0 a 54,8 % e 7,1 a 5,7 cm, respectivamente.

Tabela 1. Mdias e estimativas dos contrastes das variveis analisadas de sementes de mangaba, da testemunha (0 hora) e fatorial (mtodos de secagem nos tempos de 12, 24, 36 e 48 horas) em dois ambientes de secagem Testemunha vs Variveis Testemunha Fatorial Fatorial Teor de gua (% bu.) 43,3 25,4 17,9 ** Condutividade eltrica (S/cm/g) 33,4 50,3 -17,0 ** Primeira contagem (%) 75,0 73,6 1,4 ns Germinao (%) 76,0 76,6 -0,6 ns Emergncia em areia (%) 71,0 54,8 16,3 ** Comprimento da parte area (cm) 7,1 5,7 1,4 ** Massa seca de plntulas (g) 0,04 0,03 0,01 ns
ns

, * e **, No significativo e significativo a 5 e 1%, respectivamente, pelo teste F.

Aps a secagem das sementes o teor de gua (17,9 % bu.), emergncia de plntulas em areia (16,3 %) e comprimento da parte area de plntulas (1,4 cm) foi reduzida, enquanto a lixiviao de solutos aumentou (17,0 S/cm/g). Indicando que a secagem ocasionou alterao nos sistemas de membranas, promovendo reduo no vigor das sementes (Tabela 1). A primeira contagem de germinao e a massa seca de plntulas no se mostraram testes sensveis em detectar alteraes no vigor. Todavia, a viabilidade das sementes no foi atingida, mantendo sua germinao inalterada (76,0 a 76,6 %), valores prximos ao encontrado por Barros

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et al. (2005a), onde a germinao de sementes de mangaba foi de 80,0; 72,5 e 85 % extradas na peneira, despolpadeira e batedeira, respectivamente. Geralmente, alteraes na qualidade das sementes tem como conseqncias finais reduo na capacidade germinativa, entretanto, transformaes degenerativas mais sutis, no detectadas no teste de germinao, exercem grande influncia no seu potencial de desempenho (Spinola et al., 2000), comprovado tambm neste trabalho. Assim, os testes de vigor, so parmetros fundamentais para detectar essas informaes e, conseqentemente, teis na escolha da semente a ser utilizada (Vanzolini & Nakagawa, 1998). Barros et al. (2005b), avaliando o efeito de substratos na qualidade fisiolgica de sementes de mangaba, verificou que o substrato areia foi o mais apropriado para avaliao dos testes de vigor. At o tempo de 24 horas de secagem o teor de gua das sementes de mangaba diminuiu de maneira semelhante para ambiente laboratrio e dessecador, respectivamente (28,0 e 30,4 % bu.), entretanto, com 36 e 48 horas de secagem ocorreu reduo mais acentuada no teor de gua no ambiente laboratrio (15,4 e 14,1 % bu.) em relao ao dessecador (26,3 e 18,5 % bu.). Estas alteraes do teor de gua (Tabela 2) no promoveram efeitos sobre a viabilidade das sementes nos dois ambientes avaliados (76 a 78 %). Salomo et al. (2004), estudando o efeito da dessecao de sementes de mangaba sobre sua viabilidade, verificaram que valor de teor de gua inferior a 26 % bu. comprometeu a capacidade germinativa e quando foi inferior a 11 % bu. levou a perda completa da viabilidade. Contudo, com 36 e 48 horas de secagem, ocorreu uma queda no vigor (condutividade eltrica, comprimento da parte area de plntulas e emergncia de plntulas em areia) no ambiente laboratrio (53,1 e 52,3 S/cm/g; 4,6 e 4,4 cm; 25,0 e 19,0 %) em relao ao dessecador (33,8 e 32,7 S/cm/g; 6,5 e 6,1 cm; 66 e 66 %), isto, considerando a

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temperatura e umidade do ar em torno de 27 C e 45 %, respectivamente. A sensibilidade de sementes recalcitrantes ao dessecamento envolve uma

complexidade de componentes relacionados s caractersticas bioqumicas e fisiolgicas intrnsecas espcie e a alguns fatores tais como: velocidade e temperatura de dessecao (Farrant et al., 1988; Berjak et al., 1993). Entretanto sementes de uma mesma espcie, porm de procedncia distinta podem apresentar diferentes graus de tolerncia desidratao, desidratar-se mais lenta ou rapidamente (Salomo et al., 2004). Esta reduo no foi detectada pela massa seca de plntulas e primeira contagem de germinao. No mesmo trabalho, Salomo et al. (2004) encontraram reduo do vigor em sementes com teor de gua inferior a 26 % bu.

Tabela 2. Mdias das variveis analisadas de sementes de mangaba aps a secagem em ambiente laboratrio e dessecador por diferentes tempos Tempos U G CE CPA EPA MSP PCG (h) L D L D L D L D L D L D L D
34,3a 34,8a 76,0a 78,0a 50,2a 45,7a 6,0a 6,4a 74,0a 69,0a 0,03a 0,03a 72,3a 78,0a 28,0a 30,4a 76,0a 78,0a 61,7a 34,2b 6,6a 6,4a 74,0a 66,0a 0,03a 0,03a 72,3a 78,0a 15,4b 26,3a 76,0a 78,0a 53,1a 33,8b 4,6b 6,5a 25,0b 66,0a 0,03a 0,03a 72,3a 78,0a 14,1b 18,5a 76,0a 78,0a 52,3a 32,7b 4,4b 6,1a 19,0b 66,0a 0,03a 0,03a 72,3a 78,0a Mdias seguidas de mesma letra na linha comparam ambientes dentro de cada tempos de secagem e no diferem estatisticamente pelo teste F a 5% de probabilidade. U = teor de gua (% bu.); G = germinao (%); CE = condutividade eltrica (S/cm/g); CPA = comprimento da parte area (cm); EPA = emergncia de plntulas em areia (%); MSP = massa seca de plntulas (g); PCG = primeira contagem de germinao (%); L = secagem em condio ambiente de laboratrio; D = secagem em dessecador com slica gel.

12 24 36 48

Observa-se na Figura 1, conforme j esperado, reduo no teor de gua das sementes com o aumento do tempo de secagem, para os dois ambientes. Estes resultados esto de acordo com os encontrados por Mendona (2000), em sementes de Jabuticaba (Myrciaria spp). O teor de gua de 26 % bu. foi atingido com 26 e 36 horas no ambiente laboratrio e dessecador, respectivamente, desta forma, a secagem no dessecador foi mais lenta. De acordo com Ferreira & Santos (1993), a

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velocidade de secagem varivel para cada espcie, sementes de pupunha (Bactris gasipae) apresentam melhor desempenho com secagem mais lenta, enquanto as de manga (Mangifera indica) com secagem rpida (Fu et al., 1990). Verifica-se reduo linear da emergncia de plntulas com o aumento do tempo de secagem, para os dois ambientes, todavia, o decrscimo para 65 % ocorreu com 20 e 48 horas de secagem no ambiente laboratrio e dessecador, respectivamente (Figura 1). O mesmo foi verificado no comprimento da parte area, que reduziu de 6,5 cm com 24 e 36 horas de secagem no ambiente laboratrio e dessecador, respectivamente. A condutividade eltrica, no ambiente laboratrio, permaneceu constante (54,3 S/cm/g) e maior em relao ao dessecador que teve seu ponto mnimo em torno de 40 horas de secagem (31,9 S/cm/g). Dessa forma a secagem no dessecador, proporcionou sementes mais vigorosas (emergncia de plntulas em areia, comprimento da parte area de plntulas e condutividade eltrica). Resultados semelhantes foram obtidos por Aguiar Filho et al. (1995) avaliando a influncia do tempo de secagem sobre a qualidade de sementes de mangaba. Tanto nos ambientes laboratrio quanto no dessecador a massa seca de plntulas de mangaba manteve-se constante e prximas (0,0345 e 0,0307 g) respectivamente, ao longo dos tempos de avaliao (Figura 1). Resposta semelhante foi encontrado por Mendona (2000), cuja massa seca de plntulas de jabuticaba foi semelhante para os ambientes avaliados. A germinao e a primeira contagem, no ambiente laboratrio, mantiveram-se estveis ao longo dos tempos de secagem, em torno de 75,0 e 72,3 %, enquanto no dessecador, foram pouco acima destes valores at 37 e 36 horas, estando, entretanto, muito prximas at 48 horas (70 e 67 %), respectivamente, indicando pequena influncia da velocidade de secagem das sementes sobre estas variveis.

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Laboratrio
50 Teor de gua (%) 40 30 20 10 0 12 24 36 48 Tempo de secagem (h)
Laboratrio = 42,123 - 0,625**x R = 0,91
2

Dessecador
100 Emergncia em areia (%)

(a)
Dessecador = 36,389 - 0,0805**x - 0,006*x R = 0,99
2 2

(b)
Dessecador = 69 - 0,075**x R = 0,60
2

80 60 40
Laboratrio = 101,5 - 1,7833**x

20 0 12

R = 0,84

24

36

48

Tempo de secagem (h)

Comprimento da parte area (cm)

10 8 6 4 2 0 12

(c)
R = 0,72
2

100 Condutividade eltrica (S cm g)


Laboratrio = 6,1 + 0,0267 x - 0,0014**x
2

(d)
Laboratrio = 54,33

80 60 40 20 0
Dessecador = 59,45 - 1,4117*x + 0,0181*x R = 0,94
2 2

Dessecador = 6,05 + 0,035**x - 0,0007**x R = 0,80


2

24

36

48

12

24

36

48

Tempo de secagem (h)

Tempo de secagem (h)

Massa seca de plntulas (g)

0,1 0,08

(e)
Laboratrio = 0,0345 Dessecador = 0,0307

100 Germinao (%) 80 60 40 20 0

(f)

0,06 0,04 0,02 0 12 24 36 48 Tempo de secagem (h)

Dessecador = 92 - 0,475**x R = 0,76


2

Laboratrio = 75,5

12

24

36

48

Tempo de secagem (h)

100 Primeira contagem (%) 80 60 40 20 0 12

(g)

Laboratrio = 72,25

Dessecador = 89 - 0,4667**x R = 0,90


2

24

36

48

Tempo de secagem (h)

Figura 1. Teor de gua (a), emergncia de plntulas em areia (b), comprimento da parte area de plntulas (c), condutividade eltrica (d), massa seca de plntulas (e), germinao (f) e primeira contagem de germinao (g) de sementes de mangaba aps a secagem em ambiente laboratrio e dessecador por diferentes tempos.

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4. CONCLUSES - As sementes de mangaba podem ser secadas por tempos inferiores a 36 horas no ambiente laboratrio (temperatura e umidade relativa do ar de 27 C e 45 %) e 48 horas em dessecador, sem alterao em sua qualidade fisiolgica; - A secagem no dessecador mais lenta e proporciona sementes mais vigorosas.

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ARTIGO 4

TESTE DE TETRAZLIO EM SEMENTES DE MANGABA (Hancornia speciosa Gomes)

RESUMO As sementes de mangaba apresentam rpida perda da viabilidade pelo fato de suas sementes serem recalcitrantes e possurem germinao relativamente lenta, tornando-se necessrio o desenvolvimento de testes que permitam a obteno rpida e confivel de informaes sobre o potencial de germinao. Esta pesquisa foi executada com o objetivo de desenvolver metodologia apropriada para o uso do teste de tetrazlio em sementes de mangaba. Estudou-se inicialmente os seguintes mtodos de pr-condicionamento: semente imersa diretamente na soluo de tetrazlio (testemunha); embebio em papel toalha umedecido a 25 C por 16 e 24 horas; imerso direta em gua a 40 C por 2 e 4 horas com e sem retirada do tegumento; corte longitudinal deixando o embrio exposto; corte na extremidade superior lateral com e sem imerso em gua a 25 C por 4 e 8 horas; trs cortes na semente, dois laterais e um na parte superior oposta ao eixo embrionrio para remoo do embrio com e sem imerso em gua e perfurao em rea superior. Em todos os mtodos testados as sementes foram colocadas em soluo de 2,3,5 trifenil cloreto de tetrazlio, para colorao, nas concentraes de 0,05; 0,075; e 0,1 % por 30, 60, 90 e 120 minutos, em BOD a 40 C. O teste de tetrazlio pode ser utilizado para avaliar com rapidez a viabilidade das sementes de mangaba; para a conduo do teste, as sementes devem ser seccionadas com trs cortes no

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tegumento para a retirada do embrio e imersas na soluo de tetrazlio a 0,075 %, por 60 a 90 minutos em BOD a 40 C, para o desenvolvimento da colorao ideal. Termos para indexao: pr-condicionamento, concentrao da soluo, perodo de colorao.

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TETRAZOLIUM TEST FOR SEEDS MANGABA (Hancornia speciosa Gomes)

ABSTRACT Mangaba seeds present fast viability loss because the seeds are recalcitrant and possess relatively slow germination. So, the development of tests which allow a fast and trustworthy information attainment on germination potential becomes necessary. This research was executed aiming to develop appropriate methodology for the tetrazolium test use in mangaba seeds. The following pre-conditioning methods were initially studied: immersed seed directly in the tetrazolium solution (witness); imbibition in humidified paper towel at 25 C for 16 and 24 hours; direct immersion in water at 40 C for 2 and 4 hours with and without tegument withdrawal; longitudinal cut leaving the displayed embryo; cut in the extremity lateral superior with and without immersion in water at 25C for 4 and 8 hours; three cuts in the seed, two laterals and one in the opposing superior part to the embryonic axle for removal of the embryo with and without immersion in water and perforation in superior area. In all of the tested methods, the seeds had been placed in solution of 2,3,5 triphenyl chloride of tetrazolium, for coloration, in concentrations of 0,05; 0,075; and 0.1 % for 30, 60, 90 and 120 minutes, in 40 BOD C. The tetrazolium test can be used to evaluate quickly mangaba seeds viability. The most efficient pre-conditioning method is the mangaba seeds embryo withdrawal through three cuts; then, they are immersed in tetrazolium solution at 0,075 % for 60 to 90 minutes in 40 BOD C, for the ideal coloration development. Index Terms: Pre-conditioning, solution concentration, coloration period.

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1. INTRODUO O Nordeste Brasileiro vem se destacando pelo grande nmero de empresas de processamento de polpa de frutas, as quais tem encontrado extrema dificuldade na obteno de matria-prima que garanta seu funcionamento o ano todo. Dentre as mais variadas espcies vegetais que so utilizadas para extrao de polpa, ressaltase a mangabeira (Hancornia speciosa Gomes), rvore frutfera, nativa do Brasil, da famlia das Apocinceas (Nogueira et al., 2003). A mangabeira encontra-se vegetando espontaneamente nas regies Sudeste, Norte, Centro-Oeste e Nordeste, com abundncia nas reas de tabuleiros costeiros e baixadas litorneas da regio Nordeste (Ferreira, 1980; Gonzaga Neto et al., 1987). Seu fruto bastante apreciado por apresentar boa digestibilidade e alto valor nutritivo, com teor de protena (1,3 a 3,0 %) superior ao da maioria das frutferas (Pinheiro et al., 2001). Sua propagao pode ser via assexuada, mediante o uso de parte vegetal e sexuada, atravs da semente, sendo estas o meio mais comumente utilizado. semelhana de muitas fruteiras nativas, ainda so poucos os conhecimentos capazes de contribuir para um maior desenvolvimento da cultura. Dentre os inmeros problemas existentes com esta espcie, pode-se destacar a rpida perda da viabilidade pelo fato de suas sementes serem recalcitrantes, o que tem obrigado semeadura logo aps a remoo dos frutos (Villachica, 1996) e a ao inibitria da polpa do fruto sobre a germinao das sementes (Tavares, 1960; Grigoletto, 1997). O teste de germinao completado somente aps algumas semanas, de maneira que, dependendo principalmente das condies em que forem

armazenadas as sementes, o resultado obtido ao final do teste pode j no mais representar a sua real capacidade de germinao (Nascimento et al., 1997).

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A anlise de sementes um instrumento essencial no controle da qualidade das sementes produzidas e/ou da avaliao da tecnologia de produo empregada (Andrade et al., 1996). A sua principal finalidade determinar o valor de cada amostra para fins de semeadura ou armazenamento. Porm, para a expresso da qualidade de um lote de sementes preciso pessoal tcnico treinado, padronizao de metodologia, procedimentos uniformes e programa de trabalho voltado para a aferio e aperfeioamento das tcnicas empregadas (Figliolia et al., 1993). Camargo (1997) ressalta a importncia do desenvolvimento de testes rpidos para avaliao da viabilidade das sementes, principalmente para aquelas que apresentam baixa capacidade de armazenamento e germinao lenta, onde o teste de germinao apresenta grandes limitaes. Uma das alternativas seria o uso do teste de tetrazlio onde vem sendo usado principalmente devido rapidez na estimativa da germinao das sementes (Botezelli, 1998). Apesar da sua importncia, pela rapidez e preciso na determinao da viabilidade e do vigor, o teste de tetrazlio tem seu uso ainda restrito a poucas espcies como soja - Glycine max (Frana Neto et al., 1999), feijo - Phaseolus vulgaris (Bhering et al., 1999), milho - Zea mays (Dias & Barros, 1999), abbora Cucurbita moschata e abobrinha - Cucurbita pepo (Barros, 2002), melancia Citrullus lunatus (Bhering et al., 2005), amendoim - Arachis hypogaea (Bittencourt & Vieira, 1999), caf - Coffea arabica (Arajo et al., 1997 e Vieira et al., 1998), algodo - Gossypium hirsutum (Vieira & Von Pinho, 1999), braquiria - Brachiaria brizantha (Dias & Alves, 2001), jenipapo - Genipa americana (Nascimento & Carvalho, 1998), maracuj-doce - Passiflora alata (Malavasi et al., 2001), girassol - Helianthus annus (Fontinlli & Bruno, 1997) e pupunha - Bactris gasipaes (Ferreira & Sader, 1987).

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Conforme Rodrigues & Santos (1998), o teste de tetrazlio no muito difundido entre espcies perenes, como florestais e frutferas, embora apresente excelentes condies para ser utilizado rotineiramente, uma vez que muitas dessas espcies necessitam de um longo perodo para germinarem. Em vista dessa situao, pesquisa tem sido desenvolvida com sementes de Jenipapo procurando abreviar o prazo requerido para a obteno dos resultados de viabilidade, a partir da padronizao do teste de tetrazlio para cada espcie (Nascimento & Carvalho, 1998). Diante da inexistncia de informaes sobre a avaliao rpida da viabilidade de sementes de mangaba, esta pesquisa foi executada com o objetivo de desenvolver metodologia apropriada para o uso do teste de tetrazlio em sementes dessa espcie.

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2. MATERIAL E MTODOS O trabalho foi conduzido no Laboratrio de Anlise de Sementes, da Universidade Federal da Paraba em Areia-PB, para tanto foram utilizados frutos de mangaba provenientes da Estao Experimental de Mangabeira pertencente a Emepa - Empresa Estadual de Pesquisa Agropecuria da Paraba localizada em Joo Pessoa - PB. As sementes foram retiradas de frutos maduros selecionados logo aps carem ao solo, lavadas at a completa retirada da polpa, espalhadas sobre papel toalha, secas sombra por 24 horas permanecendo em geladeira durante o perodo do ensaio. Para a avaliao da viabilidade das sementes, pelo teste de tetrazlio, estudou-se inicialmente os seguintes mtodos de pr-condicionamento: semente imersa diretamente na soluo de tetrazlio nas concentraes de 0,075; 0,5 e 0,1 % (testemunha); embebio em papel toalha umedecido com quantidade de gua equivalente a 2,5 vezes o peso do papel seco em germinador a 25 C por 16 e 24 horas; imerso direta em gua a 40 C por 2 e 4 horas com e sem retirada do tegumento; corte longitudinal paralelo aos cotildones deixando o embrio exposto (Figura 1 A); corte na extremidade superior lateral da semente com e sem imerso em gua a 25 C por 4 e 8 horas (Figura 1 B); trs cortes na semente, dois laterais e um na parte superior oposta ao eixo embrionrio para remoo do embrio com e sem imerso em gua (Figura 1 C); perfurao na rea superior no crtica da semente (Figura 1 D). As sementes tiveram seus embries removidos manualmente com o auxlio de um estilete, de tal forma que fossem evitados danos em suas estruturas. Em todos os pr-condicionamentos testados as sementes foram colocadas em soluo de 2,3,5 trifenil cloreto de tetrazlio, para colorao, nas concentraes de 0,075; 0,5 e 0,1 % durante 30, 60, 90 e 120 minutos, no escuro

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em BOD a 40 C. Aps cada perodo, os embries foram lavados em gua corrente e mantidos submersos em gua at o momento da avaliao.

Figura 1. Mtodos de pr-condicionamento das sementes de mangaba para o teste de tetrazlio: A - corte longitudinal paralelo aos cotildones; B - corte na extremidade superior lateral da semente; C - trs cortes na semente, dois laterais e um na parte superior oposta ao eixo embrionrio; D - perfurao em rea superior no crtica da semente. Os embries foram analisados individualmente, externa e internamente, aps o seccionamento longitudinal entre os cotildones, observando-se a ocorrncia de danos nas faces interna e externa dos cotildones e do eixo embrionrio, verificando-se ainda a profundidade de cada dano e a sua distncia em relao a reas vitais. Nas sementes de mangaba, as reas vitais incluem o eixo hipoctiloradcula e a regio de insero entre os cotildones e o eixo. A diferenciao de cores dos tecidos foi observada de acordo com os critrios estabelecidos por Moore (1985), ou seja, vermelho brilhante ou rosa brilhante (tecido vivo e vigoroso), vermelho carmim forte (tecido em deteriorao) e branco leitoso ou amarelado (tecido morto). A interpretao foi feita com auxlio de lupa de seis aumentos (6x), com iluminao fluorescente. Definida a metodologia mais adequada para o pr-condicionamento, concentrao da soluo e colorao das sementes, esta foi aplicada, repetindo-a diversas vezes para a caracterizao correta das principais alteraes e sua associao com a viabilidade das sementes. A eficincia do teste de tetrazlio na determinao da viabilidade das sementes de mangaba foi avaliada atravs da

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comparao dos resultados de tetrazlio e germinao, apresentando coerncia com os valores obtidos para plntulas normais e anormais e sementes mortas nos testes de germinao. Dessa forma, as classes de viabilidade foram estabelecidas, sendo assim cada semente foi classificada em vivel e invivel conforme colorao dos tecidos do embrio, presena e localizao dos danos. O teste de germinao foi conduzido utilizando-se quatro repeties de 25 sementes, que antes do incio do teste foram tratadas com fungicida Benomil - 500 na concentrao de 1,0 g/kg de sementes, em seguida distribudas em folhas de papel germitest, umedecidas com gua destilada numa quantidade equivalente a 2,5 vezes o peso do substrato seco (Brasil, 1992), sendo os rolos confeccionados e mantidos em germinador a 28 C por 30 dias. Para o teste de tetrazlio foram utilizadas quatro repeties de 25 sementes, colocadas em copo plstico de 50 mL, adicionando-se a este a soluo de tetrazlio em quantidade suficiente para cobr-las, em BOD a 40 C sob escuro. Utilizou-se o delineamento experimental inteiramente casualizado com quatro repeties. Calcularam-se os coeficientes de correlao simples de Pearson (r) entre os testes de tetrazlio viabilidade e germinao. A significncia dos valores de r foi determinada pelo teste t, a 1 e 5 % de probabilidade.

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3. RESULTADOS E DISCUSSO Dentre os mtodos de pr-condicionamento testados em sementes de mangaba, verificou-se que as sementes imersas diretamente na soluo de tetrazlio (testemunha), as embebidas em papel toalha umedecido por 16 e 24 horas e as perfuradas na rea superior, todas sem a retirada do tegumento, no coloriram. Esta ausncia de colorao pode ser decorrente da presena do tegumento, que dificultou a penetrao da soluo de tetrazlio para o interior da semente. Resultados semelhantes foram obtidos por Zucarelli et al. (1999) e Gonzalez et al. (1997), com sementes de sucar (Gledistchia amorphoides) e quiabo (Hibiscus esculentus) respectivamente, submetidas ao teste de tetrazlio, as quais apresentaram ausncia de colorao, independentemente da concentrao da soluo e do tempo de colorao. Os autores atriburam esses resultados ao

tegumento impermevel, que impediu a penetrao da soluo de tetrazlio. As sementes de mangaba que sofreram um corte na extremidade superior lateral com e sem imerso em gua a 25 C por 4 e 8 horas, s coloriram no local onde foi feito o corte. Esta situao ocorreu em trabalho realizado por Mendona et al. (2001) com sementes de louro-pardo (Cordia trichotoma), onde mesmo aps o maior perodo de exposio e maior concentrao, apenas houve colorao dos tecidos no local do ferimento. Para as sementes imersas diretamente em gua a 40 C por 2 e 4 horas, com retirada do tegumento observou-se que estas desenvolveram colorao nos dois perodos estudados. Ao contrrio, em sementes com a presena do tegumento no houve colorao do embrio pelas razes comentadas anteriormente. De acordo com Costa (1992), importante ressaltar que a imerso direta das sementes em gua no deve ser feita por perodo de tempo excessivo, pois pode acarretar

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reduo na disponibilidade de O2 comprometendo dessa forma, a qualidade das sementes e conseqentemente, levando a obteno de resultados incorretos. Nas sementes seccionadas longitudinalmente com descarte de uma metade a colorao ocorreu apenas superficialmente na parte externa do embrio, demorando cerca de 7 horas, portanto, no se mostrando um mtodo adequado de prcondicionamento. As sementes de mangaba com trs cortes (dois laterais e um na parte superior oposta ao eixo) com e sem imerso em gua, verificou-se que estes facilitaram a retirada do embrio sem causar dano e que ambos foram eficientes apresentando o mesmo comportamento. Todavia, considerando que mtodos mais demorados implicam em maior tempo necessrio para a conduo do teste e obteno dos resultados, o mtodo de pr-condicionamento mais indicado, por permitir o desenvolvimento de colorao adequada, uniforme e com maior rapidez foi o que as sementes sofreram trs cortes sem imerso em gua. De acordo com Delouche et al. (1976), o pr-condicionamento feito de maneira adequada permite que, aps a imerso das sementes na soluo de tetrazlio, ocorra o desenvolvimento da colorao ideal, facilitando a interpretao do teste. As concentraes da soluo de tetrazlio usadas neste ensaio proporcionaram variaes de tonalidades nos embries de mangaba. As de 0,5 e 0,075 % desenvolveram colorao semelhante, onde os tecidos viveis coloriram-se mais uniformemente obtendo coerncia com as recomendaes de Moore (1985). Todavia, mais indicado o uso rotineiro de soluo a 0,075 %, considerando que o sal de tetrazlio um produto caro e que a 0,5 % requer maior consumo deste sal. Concordando, dessa forma, com os resultados obtidos para algumas espcies como soja, algodo, amendoim, milho, feijo e caf os quais tem indicado o uso de

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soluo a 0,075 %, permitindo o desenvolvimento de colorao ideal tanto nos tecidos vigorosos como nos no vigorosos (Barros, 2002). O uso da soluo de tetrazlio a 0,1 % no se mostrou adequado, uma vez que os tecidos vigorosos ao invs de rseo apresentaram-se vermelho um pouco menos intenso que a tonalidade de vermelho observada nos tecidos com leses, o que dificultou a observao dos danos, especialmente em regies vitais do embrio, comprometendo sua interpretao. Bhering et al. (2005), obtiveram resultados semelhantes para o teste de tetrazlio em sementes de melancia (Citrullus lunatus), onde a concentrao da soluo a 0,1 % no se mostrou adequada e a de 0,075% permitiu uma avaliao mais segura devido aos padres de colorao mais uniformes. Com relao ao perodo de colorao, verificou-se que a colorao mais adequada foi obtida quando as sementes foram imersas em soluo de tetrazlio a 0,075 % por 60 a 90 minutos a 40 C, no escuro. Definida a metodologia de pr-condicionamento, concentrao da soluo e colorao, estabeleceu-se classes de nveis de viabilidade, onde cada semente de mangaba avaliada foi qualificada em uma das classes (Figura 2), com base nas observaes de intensidade de colorao, profundidade e localizao dos danos. Para auxiliar no estabelecimento destas classes, foram considerados tambm os resultados da porcentagem de germinao das plntulas obtidas no teste de germinao (Figura 3) conduzido paralelamente ao teste de tetrazlio. Cada foto representa uma semente de mangaba que foi seccionada longitudinalmente. A superfcie externa da semente ilustrada esquerda e a interna direita.

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Classe 1. Sementes viveis: colorao uniforme rosa brilhante, apresentando tecido com aspecto normal e firme.

Classe 2. Sementes viveis: semelhante a anterior s que com pequenas manchas superficiais avermelhadas na face interna dos cotildones. Pequena leso superficial na face externa do eixo embrionrio.

Classe 3. Sementes viveis: apresentam colorao branco leitoso em menos de 50 % dos cotildones, identificando tecido em deteriorao. Extremidade da radcula com colorao vermelha intenso.

Classe 4. Sementes inviveis: ambos os cotildones com a metade superior branco leitoso.

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Classe 5. Sementes inviveis: Eixo embrionrio completamente vermelho carmim intenso.

Classe 6. Sementes inviveis: totalmente branca e vermelho intenso, apresentando tecidos flcidos, caracterizando tecido morto.

Figura 2. Classes para a determinao da viabilidade de sementes de mangaba.

Figura 3. Plntulas de mangaba normais (A) e anormais (B).

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O valor do coeficiente de correlao obtido entre os resultados dos testes encontra-se na Figura 4. Verificou-se que houve correlao positiva e significativa (r= 0,77) entre o teste de germinao e tetrazlio viabilidade. Esses resultados concordam com Pasha & Das (1982), quando consideraram o teste de tetrazlio seguro, confivel e apropriado para determinar o potencial de germinao de lotes de sementes de soja.

100

80 Germinao (%)

60 = 8,501 + 0,8812**x r = 0,77

40

20

0 40 60 80 100 Tetrazlio viabilidade (%)

Figura 4. Correlao entre os valores de germinao e tetrazlio viabilidade em sementes de mangaba.

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4. CONCLUSES - O teste de tetrazlio pode ser utilizado para avaliar com rapidez a viabilidade das sementes de mangaba; - Para a conduo do teste, as sementes devem ser seccionadas com trs cortes no tegumento para a retirada do embrio e imersas na soluo de tetrazlio a 0,075 %, por 60 a 90 minutos em BOD a 40 C, para o desenvolvimento da colorao ideal.

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