1.

- Introduccin a Espectroscopa del Infra Rojo (IR) El termino "infra rojo" cubre el rango del espectro de radiacin electromagntico entre 0.78 y 1000 m. En el contexto de espectroscopa de infra rojo, la longitud de onda es medida en nmero de onda (), cuya unidad es cm-1. ( = 1 / en cm). Es importante dividir la regin del IR en tres secciones: near, mid and far infra rojo regin near midle far rango (m) 0.78 - 2.5 2.5 50 50 1 000 rango (cm-1) 12 800 - 4 000 4 000 200 200 - 10

La regin ms til en el IR se da en el rango de 4000 670 cm-1. 2.- Teora de Absorcin del Infra Rojo (IR) Radiacin en la regin del IR no tiene suficiente energa para inducir transiciones electrnicas como aquellas vistas en espectroscopa del UV-Visible. La absorcin del IR esta restringida a compuestos con cambios de energa pequeos asociados con niveles de energa vibracional y rotacional. Para que una molcula absorba radiacin en el rango del IR, las vibraciones y rotaciones dentro de la molcula deben causar un cambio neto en el momento dipolar de la molcula. El campo elctrico alternante de la radiacin interacta con las fluctuaciones del momento dipolar de la molcula. Si la frecuencia de radiacin es la misma que la frecuencia vibracional de la molcula entonces la radiacin ser absorbida, causando un cambio en la amplitud de vibracin de la molcula.

3.- Teora de Absorcin del Infra Rojo (IR) Rotaciones Moleculares Las transiciones rotacionales resultan ser de pequea importancia para el espectroscopista; sin embargo los niveles de energa rotacional no dejan de ser cuantizados. La absorcin del IR por gases produce lneas sobre el espectro desarrollado, pero para las muestras lquidas y slidas, estas lneas se hacen anchas dentro de un rango absorcin continuo, debido a las colisiones moleculares y otro tipo de interacciones.

Vibraciones Moleculares Las posiciones de los tomos en la molcula no son fijas; ellas estn sujetas a un nmero diferente de vibraciones. Las vibraciones pueden ser de dos tipos: de estiramiento y de plegado. 4.- Teora de Absorcin del Infra Rojo (IR) Vibraciones de Estiramiento (stretching) Se da cuando la molcula experimenta cambios en la distancia interatmica a lo largo de los ejes que contienen a los enlaces. Pueden ser simtricas y anti simtricas

5.- Teora de Absorcin del Infra Rojo (IR) Vibraciones de Flexin (bending): Se da cuando los tomos en la molcula se alejan y se acercan deformando el ngulo de enlace. Pueden ser: de balanceo (rocking), de cizalleo (scissoring), de alabeo (wagging) y de torsin (twisting).

6.- Teora de Absorcin del Infra Rojo (IR)

Acoplamiento Vibracional En adicin a las vibraciones ya mencionadas, interacciones entre vibraciones pueden ocurrir (acoplamientos) si la vibracin de los enlaces estn unidos a un simple tomo central. El acoplamineto vibracional esta influenciado por un nmero considerable de factores; *Acoplamiento fuerte de vibraciones de estiramiento, ocurre cuando hay un tomo comn entre los dos enlaces implicados en la vibracin. Acoplamiento de vibraciones de flexin, ocurre cuando hay un enlace comn entre grupos vibrantes *Acoplamiento entre las vibraciones de estiramiento y las vibraciones de flexin, ocurre si el enlace de estiramiento esta implicado en el ngulo de la vibracin de flexin. *Acoplamiento se hace grande cuando los grupos acoplados tienen aproximadamente iguales energas. *No acoplamiento es visto entre grupos separados por dos o ms enlaces 7.- Instrumentacin en Espectroscopa del Infra Rojo (IR) Los instrumentos usados en espectroscopa del IR, se llaman espectrmetros o espectrofotmetros. Ellos tienen la capacidad de registrar espectros en la regin media del infrarojo (4000 cm-1 a 200 cm-1) y proveer informacin a cerca de la estructura molecular de una sustancia. Actualmente se emplea dos tipos de espectrofotmetros: Espectrofotmetro IR de dispersin Espectrofotmetro de transformadas de Fourier (FTIR) Ambos de ellos estn constituidos por componentes como:

Fuente de radiacin Sistema de seleccin de onda (monocromadores) Detectores Sistema de computo 8.- Componentes del Espectrofotmetro Fuente de Radiacin:

Constituido por un slido inerte que al ser calentado electricamente a temperaturas entre 1500 2000 K, emite radiacin en el rango del IR. Existen de diferentes tipos: Lmpara de Nernst, Lmpara de Silicn, lmpara de nicrn. a) Lmpara de Nernst.El elemento incandescente es un cilindro de xido de tierra rara (1-2 mm ,20 mm de largo), cuyos extremos estn sellados a alambres de Pt. Corriente aplicada puede alcanzar temperatura de 2200 K. 9.- Componentes del Espectrofotmetro Fuente de Radiacin: (continuacin) b) Lmpara de Silicn.El elemento incandescente es una varilla de silicn (5 mm. ,50 mm. de largo), Es calentado elctricamente a 1500 K. Requiere de un sistema de enfriamiento para evitar que la varilla se arquee. c) Lmpara de Nicrn.El elemento incandescente es un alambre de nicrn en espiras que calentado elctricamente a 1100 K produce radiacin cuya intensidad es menor que las fuentes anteriores 10.- Componentes del Espectrofotmetro Detectores: Trmicos, piroelctricos, fotoconductores a) Detectores Trmicos.Son termocuplas (par de juntas de diferentes metales) Dos piezas de bismuto fundidas a los extremos de otra pieza de antimonio constituye la termocupla. La diferencia de potencial (voltaje) desarrollada entre las juntas depende de la diferencia de temperatura experimentada entre ellas. b) Detectores Piroelctricos.Construido desde material piroelctrico (sulfato de glicerina), el cual tiene la propiedad de ser polarizado cuando un campo elctrico es aplicado y persistir an cuando el campo es removido. El dispositivo adopta la forma de un emparedado cuando dos placas de electrodo encierran entre s una placa de este material dando forma aun capacitor cuya funcin se hace dependiente de la temperatura. El efecto del calor de la radiacin incidente causa un cambio en la capacitancia del material. 11.- Componentes del Espectrofotmetro

Detectores: Continuacin c) Detector Fotoelctrico.Son hechos de sales de teleruro de mercurio y cadmio. Su estructura comprime una pelcula de material semiconductor depositado sobre una superficie de vidrio. Absorcin de IR promueve electrones de valencia desde un estado no conductor a un estado ms alto y conductor, donde la resistencia elctrica del semiconductor disminuye. Producen mejore respuestas que los detectores piroelctricos: 12.- Espectrofotmetro IR Dispersivo Son de doble haz y sus componentes principales son: fuente de radiacin, detector de la seal, y el monocromador. * El monocromador consiste de un fraccionador de haz rotatorio (beam chopper) y de una rejilla de difraccin. * El fraccionador de haz divide el haz de luz en dos haces un que atraviesa la referencia y el otro la muestra en forma alternada, los rayos transmitidos son conducidos hacia la rejilla de difraccin, cuya funcin es producir un barrido de frecuencia o de longitud, es decir generar un rango de frecuencia entre 400 y 4000 cm-1, para ser registrados por el detector. * El detector recoge la seal como una proporcin entre la intensidad de radiacin absorbida por la muestra y por la referencia; la amplifica para luego transformarla en un espectro que no es ms que un ploteo de % T vs frecuencia (nmero de onda) 13.- Espectrofotmetro de Transformadas de Fourier (FTIR) Opera bajo principios diferentes al instrumento dispersivo El diseo del paso ptico (trayectoria de la radiacin en el instrumento) produce un patrn llamado interferograma. El interferograma es una seal compleja, parecida a la de una onda, contiene todas las frecuencias dentro del rango del IR, registradas en el dominio de tiempo. La aplicacin de los operadores matemticos de las transformadas de Fourier permite transformar el interferograma en un espectrograma en la forma de un ploteo de intensidad vs frecuencia ( o nmero de onda) La ventaja del espectrmetro de IR de Transformadas de Fourier es que puede adquirir el interferograma en menos de un segundo de modo que esposible colectar docenas de interferogramas de la misma muestra y acumularlas en la memorai de un computador.

14.- Espectrofotmetro de Transformadas de Fourier (FTIR) (Cont.) Cuando las transformadas de fourier operan sobre la suma acumulada de estos inteferogramas, un espectro con un mejor cociente seal/ruido puede ser producido en la forma de un espectrograma que mostrado como una funcin de intensidad vs frecuencia, resulta ser de gran inters para el espectroscopista. El instrumento de FTIR opera en el modo de un simple haz; para obtener el espectro del compuesto primero debe obtenerse el interferograma y el espectrograma de la referencia (blanco), luego obtener el interferograma y espectrograma de la mezcla muestra ms el blanco. Un programa computacional almacenado en la memoria del computador, automticamente sustraer el espectro de la referencia o blanco del de la mezcla muestra ms blanco, produciendo el espectrograma de la muestra analizada. 15.- Espectrofotmetro FTIR Interferograma Intefermetro Un interferograma es producido por un dispositivo llamado Interfermetro, en el cual la radiacin desde la fuente es dividida en dos haces (Beam splitter), la mitad es reflejada en un espejo fijo y luego devuelto al splitter, viajando una distancia fija. La otra mitad de haz pasa por el splitter e incide en un espejo mvil donde es reflejado y devuelto al splitter, por lo que la distancia recorrida por l es variable con el tiempo. Los dos haces de luz devueltos por los espejos son recombinados en el splitter a travs de un fenmeno de interferencia el cual puede ser constructivo y destructivo

16.- Espectrofotmetro FTIR Interferograma Intefermetro (Cont.) Interferencia constructiva- destructiva

Interferencia constructiva se da cuando la longitud de onda de radiacin generada por el espejo mvil resulta ser un mltiplo (en nmero entero) de la longitud de onda de la radiacin reflejada por el espejo fijo, s ocurre lo contrario entonces se produce una interferencia destructiva. De otro modo la interferencia constructiva puede variar desde una longitud de onda 1 a otra 2 dentro de los lmites del rango del IR (400 a 4000 cm-1) pero como una funcin del tiempo, periodo en el cual el espejo mvil recorre una distancia desde un mnimo hasta un mximo a velocidad constante. En ese sentido la frecuencia de radiacin es funcin del tiempo f(t). Sin embargo debemos recordar que la intensidad de radiacin absorbida por la muestra es una funcin de la frecuencia de onda, es decir I(f), lo cual conlleva a expresar finalmente que la Intensidad es una funcin de frecuencia y de tiempo. I(f(t)) = I(t) 17.- Preparacin de la muestra FTIR La muestra debe ser ubicada en el instrumento mediante un portador de muestra o celda. La celda que resulta ser el soporte de la muestra debe ser hecho de un material cristalino transparente que no absorba radiacin en el rango del IR evaluado (400 a 4000 cm-1). Solamente algunos materiales pueden cumplir con este requisito, tal es el caso del Na Cl y KBr NaCl (barato, no absorbe dentro de los 650 a 4000 cm-1) KBr (caro, no absorbe dentro de los 400 a 4000 cm-1) La muestra puede ser slida o lquida , en algunos casos puede ser gas Muestra Lquida.- Una gota de lquido es colocada entre los platos o discos de NaCl o KBr y por una leve presin sobre los platos la muestra es esparcida entre ellos formando una pelcula uniforme. El espectro obtenido desde esta muestra se refiere como espectro limpio desde que ninguna otra sustancia ha sido usada en el ensayo 18.- Preparacin de la muestra FTIR Muestra Slida.- Tres mtodos pueden ser usados para la preparacin de la muestra en estado slido: a) Mezclar la muestra slida (1-2 mg) con KBr anhidro (0.1-0.3 g) y pulverizarla en un mortero; la mezcla es transferida a un dispositivo para preparar un disco cristalino bajo la aplicacin de presin por arriba de las 30 Ton/in2 con el propsito de fundir el KBr y sellar la muestra dentro de la matriz. El producto no es ms que un pellet de KBr. b) Mezclar la muestra (1 a 2 mg.) pulverizada con aceite mineral llamado NUJOL para crear una suspensin fina y espesa, la cual es

colocada entre los platos de NaCl o KBr. Se debe tener en cuenta que el nujol absorbe radiacin produciendo picos y bandas en 2924, 1462 y 1377 cm-1. c) La muestra es disuelta en solvente orgnico como tetracloruro de carbono el cual absorbe en la regin de los 785 cm-1, debido la estiramiento del enlace C-Cl. 19.- Interpretacin del espectro de IR Un espectrograma de IR o simplemente un espectro determina la posicin y la intensidad relativa de los picos o bandas de absorcin (con una amplitud ancha o estrecha y una intensidad fuerte o dbil) como un ploteo de Intensidad (% transmitancia) vs. nmero de onda (cm-1).

20.- Interpretacin del espectro de IR En un espectro de IR es posible diferenciar dos regiones que describen de diferente manera la absorcin de radiacin por una muestra y con ella la estructura molecular de una sustancia dentro de la muestra. Una de ellas es la regin de la huella dactilar o fingerprint y la otra es la regin que permite identificar con claridad la presencia de un determinado grupo de tomos o grupo funcional que caracterizan a una entidad qumica o una molcula.

21.- Interpretacin del espectro de IR Regin de la huella dactilar Contiene una serie de bandas de absorcin muy complicadas, que se deben a vibraciones asociadas con la flexin del enlace, ubicadas en el rango entre los 1500 y 400 cm-1 y que no permiten asignar con precisin la naturaleza del arreglo de tomos involucrados en la absorcin; la importancia de esta regin es que c/compuesto produce un patrn de espectro tpico y diferente y que es propio y nico para cada compuesto. Ejm. Espectros IR del 1-propanol y 2-propanol que son diferentes en la region entre 1500 y 400 cm-1.

22.- Interpretacin del espectro de IR Regin de Identificacin de grupos funcionales con precisin En la regin comprendida entre los 3600 y 1500 cm-1 se desarrollan bandas o picos de absorcin que corresponden a vibraciones de estiramiento (stretching), que pueden ser asignadas con precisin a un determinado grupo de tomos o grupo funcional presente en la sustancia que se analiza o evala. Ejm. Espectros IR del cido etanoico (actico) y etanol

23.- Interpretacin del espectro de IR Regin de Identificacin de grupos funcionales con precisin Caso de un Ester

Etanoato de etilo o acetato de etilo: C4H8O2

24.- Interpretacin del espectro de IR Regin de Identificacin de grupos funcionales con precisin Caso de un Cetona Propanona: C3H6O2

25.- Interpretacin del espectro de IR Regin de Identificacin de grupos funcionales con precisin Caso de un Hidroxi-cido Ac. 2-hidroxipropanoico (ac lctico): C3H6O3

26.- Interpretacin del espectro de IR Regin de Identificacin de grupos funcionales con precisin Caso de una amina 1-aminobutano: C4H11N3

27.- Espectroscopia IR y Anlisis Cuantitativo Espectroscopia del IR es un mtodo de anlisis secundario Requiere de un proceso de calibracin usando un grupo de estndares de composicin conocida con el propsito de establecer la relacin entre la intensidad de las bandas de absorpcin y las variables composicionales de inters. La composicin de los estndares debe haber sido determinada por mtodos gravimtricos y / o mtodos qumicos primarios de anlisis.

28.- Espectroscopia IR y Anlisis Cuantitativo

Una vez que la calibracin ha sido hecha, ella puede ser usada para predecir la composicin de la sustancia desconocida bajo ciertas condiciones generales: a) El espectro de la muestra desconocida debe ser registrado bajo las mismas condiciones usadas en el proceso de calibracin (mismos parmetros instrumentales, medios idnticos del manejo de la muestra) b) La composicin de los estndares de calibracin debe ser representativa de aquella que corresponde a la muestra.

29.- Espectroscopia IR y Anlisis Cuantitativo Tratamiento matemtico desde el ms simple al ms complicado es empleado para procesar la etapa de calibracin, el cual se basa en la ley de Beer: a) Tratamiento Modificado: para sistemas hechos de mltiples componentes que requieren tcnicas variadas como la aplicacin de mnimos cuadrados, inversa de mnimos cuadrados y mnimos cuadrados parciales b) Tratamiento No modificado, para un sistema simple que implica un componente disuelto en un solvente sin capacidad de interactuar con el componente

30.- Espectroscopia IR y Anlisis Cuantitativo La capacidad de los sistemas FTIR ha permitido que estas tcnicas sofisticadas de tratamiento matemtico puedan ser implementadas en programas de computo dentro del instrumento y aplicadas directamente a la informacin espectral La aplicacin de la ley de Beer para determinar la cantidad de componente presente en solucin requiere que el coeficiente de absorptibidad sea determinado desde mediciones de absorbancia generadas por una solucin de concentracin conocida El ploteo de absorbancia vs concentracin permite evaluar las desviaciones de la ley de Beer en el rango de concentracin de inters, las cuales pueden ser originadas por: enlaces de hidrogeno, dimerizacin e interacciones intermoleculares.

1. Espectroscopa Atmica La determinacin del tipo de elemento (usualmente un metal) y su concentracin por espectroscopa atmica resulta ser ms sensible, especfica y rpida que los mtodos qumicos tradicionales (va hmeda). Por esta razn en el laboratorio, la espectroscopa atmica ha remplazado largamente a los mtodos tradicionales de anlisis dirigidos a la determinacin y cuantificacin especifica de metales en soluciones muestra.

2. Principios Espectroscopa Atmica La absorcin y emisin de radiacin en espectroscopa atmica es causada por las transiciones electrnicas de los electrones que se hallan en las capas ms externas. Fotones con energa asociada con este tipo de transiciones son hallados en la regin del espectro electromagntico del UV-Visible, sin embargo las muestras usadas en espectroscopa atmica son tomos individuales en estado gaseoso, ms no molculas disueltas en lquidos (caso de UVVisible). Este hecho produce consecuencias significativas en los espectros producidos. As en espectroscopa atmica los picos son estrechos y bien definidos, pero en UV-visible ellos son anchos y pueden sobrelapar unos con otros. Ello se debe a que la absorcin o emisin se produce desde tomos y no desde molculas por tanto no hay transiciones vibracionales o rotacionales que se superpongan sobre las transiciones electrnicas; y porque adems los tomos estn en estado gaseoso y muy separados unos de otros de modo que no es posible que se desarrollen interacciones entre ellos ni con molculas vecinas. 3.Principios Espectroscopa Atmica Los cambios de energa asociados con una transicin entre dos niveles de energa estn relacionados con longitud de onda de la radiacin absorbida (E = hc/). As para una transicin dada se requiere de la absorcin o radiacin de una cantidad discreta de energa unida a una longitud de onda definida, de modo que cada elemento tiene una estructura electrnica

especifica y definida y con ello un grupo de niveles de energa propio asociado con un espectro tpico con caracterstica particular de huella digital que permite identificar a un elemento en particular. Absorcin ocurre cuando los electrones en su estado basal son promovidos a otros o varios estados excitados. Emisin ocurre cuando los electrones en un estados excitado regresan a niveles ms bajos de energa. Los tomos pueden existir en un nmero de diferentes estados excitados y pueden volver a uno o varios diferentes niveles de menor energa (no necesariamente al estado basal). As que el espectro de emisin puede reunir muchas lneas ms que el de un espectro de absorcin.

4. Principios Espectroscopa Atmica. Espectroscopa atmica es usada para proveer informacin a cerca del tipo y concentracin del analito (usualmente un metal) presente en la muestra. El tipo de analito es determinado midiendo la posicin de los picos en el espectro de absorcin o emisin. La concentracin es determinada midiendo la intensidad de la lnea espectral conocida y que corresponde al analito.

 La reduccin en intensidad de una onda electromagntica que atraviesa la muestra es usada para determinar la absorbancia, la cual est relacionada con la concentracin del analito a travs de la ley de Beer (A = lC). Ejemplo En la prctica hay a menudo desviaciones desde esta ecuacin as que a menudo es necesario preparar una curva de calibracin usando una serie de soluciones estndar preparadas a partir del mismo reactivo que se esta analizando. 5. Espectroscopa de Absorcin Atmica (AAS) Instrumentacin Fuente de radiacin, Chopper, Atomizador, Selector de longitud de onda, Detector. Fuente de Radiacin. En AAS la fuente de radiacin ms usada es la lmpara de ctodo hueco. Este es un tubo hueco lleno de argn o nen que contiene un filamento metlico hecho del mismo elemento a analizar y que acta como el ctodo. Cuando un voltaje es aplicado a travs de los electrodos, la lmpara emite radiacin caracterstica del metal en el ctodo. As si el ctodo es hecho de sodio, un espectro de emisin de sodio es producido y cuando esta radiacin pasa a travs de la muestra conteniendo tomos de sodio, ellos absorbern la radiacin exactamente en la longitud de onda correcta y que promueva la transicin desde un nivel de energa a otro. De modo que diferentes lmparas son necesarias para cada tipo de elemento a ser analizado.

6. Espectroscopa de Absorcin Atmica (AAS) Instrumentacin (Cont.) Chopper (tajador, cortador, picador). La radiacin que arriba al detector proviene de dos diferentes fuentes: Radiacin emitida por el filamento de la lmpara ( la cual es parcialmente absorbida por la muestra) Radiacin que es emitida por los tomos presentes en la muestra y que han sido excitados a altos niveles de energa a partir de la energa suministrada desde el atomizador. Para cuantificar la [ ] del elemento en la muestra es necesario medir la reduccin de la amplitud del rayo de luz que ha pasado a travs de la muestra, ms que la radiacin emitida por la muestra excitada. Esto puede ser hecho usando un dispositivo mecnico llamado chopper en conjuncin con otro dispositivo electrnico que distinga corriente continua de corriente alterna 7. Espectroscopa de Absorcin Atmica (AAS) Instrumentacin (Cont.) Chopper (tajador, cortador, picador) Cont.. El chopper es un disco con una serie de ranuras y que es ubicado entre la fuente de radiacin y la muestra, y opera en movimiento rotacional.

La radiacin desde la fuente de luz emitida en una frecuencia de onda definida es constantemente interrumpida ( apagada y encendida) por este dispositivo, generando corriente alterna. De otro modo la radiacin emitida por los tomos excitados en la muestra resulta ser constante, generando corriente directa. La radiacin total detectada es por tanto una suma de un componente variable y otro componente constante. Dispositivos electrnicos pueden separar la corriente continua de la alterna y ellos son usados para aislar la seal generada por la luz emitida por los tomos en la muestra 8. Espectroscopa de Absorcin Atmica (AAS) Instrumentacin (Cont.) Atomizador. Es usado para convertir la muestra en tomos individuales. El proceso de atomizacin es alcanzado por exposicin de la muestra a altas temperaturas; involucra tres etapas: a) Remocin de agua asociada con las molculas. b) Conversin de las molculas en gas. c) Atomizacin de las molculas Los tomos a temperaturas altas pueden convertirse en especies ionizadas lo cual no es deseado debido a que los espectros atmicos de tomos ionizados son diferentes a aquellos de tomos no ionizados. Consecuentemente es importante usar niveles de temperatura, suficientes para atomizar las molculas pero no para convertir los tomos en iones. Dos tipos de atomizadores son comunes: atomizadores de flama o llama y atomizadores electrotrmicos 9. Espectroscopa de Absorcin Atmica (AAS) Instrumentacin (Cont.) Atomizador de flama o llama:_ Consiste de un nebulizador y un quemador. El nebulizador convierte la solucin en una fino aerosol (neblina) La muestra es forzada a travs de un hueco en una manga por la fuerza succionante del flujo del oxidante y el combustible que corre por la misma va. El flujo del oxidante y del combustible llevan la muestra dentro de la llama.

 El quemador tiene una ranura de 5 a 10 cm de largo y esta ubicado longitudinalmente en la direccin en que propaga la radiacin. Las caractersticas de la llama pueden ser alteradas, variando la proporcin y tipo de oxidante y combustible. Aire-acetileno y xido de nitrgeno-acetileno son las mezclas ms comunes de oxidante y combustible. As llamas de diferentes temperaturas puede ser producidas. Esto es importante porque la energa requerida es para causar atomizacin y no ionizacin y porque ello varia de una sustancia a otra.

10.Espectroscopa de Absorcin Atmica (AAS) Instrumentacin (Cont.) Atomizador electrotrmico: En AAS electrotrmica, la muestra es colocada en un pequeo recipiente (copa) de grafito, la cual es elctricamente calentada a temperaturas (tpicamente entre 2000 3000 oC) suficientemente altas para producir volatilizacin y atomizacin. La copa es ubicada en el instrumento de modo que la radiacin pase a travs de la muestra atomizada. La ventaja de los atomizadores electrotrmicos es que ellos usan pequeas cantidades de muestra y los lmites de deteccin son bajos.

La mayor desventaja es que ellos son caros, son difciles de operar y tienen menor precisin que los atomizadores de flama o llama. 11.Espectroscopa de Absorcin Atmica (AAS) Instrumentacin (Cont.) Selector de onda: Un selector de onda es ubicado en el paso ptico entre la flama o quemador y el detector. Tiene como funcin aislar la lnea espectral de inters desde el resto de la radiacin que viene de la muestra, de modo que solamente la radiacin de la deseada longitud de onda debe alcanzar el detector. Selectores de longitud de onda son tpicamente rejillas monocromadoras o filtros. 12.Espectroscopa de Absorcin Atmica (AAS) Instrumentacin (Cont.) Detector de seal / readout: El detector es un tubo fotomultiplicador que convierte la energa electromagntica seleccionada en una seal elctrica. Muchos instrumentos modernos tienen un computador para mostrar la seal de salida y almacenar o guardar el espectro. 13.Espectroscopa de Emisin Atmica (AES) La espectroscopa de emisin atmica es diferente a la espectroscopa de absorcin atmica, debido a que utiliza la emisin de radiacin desde la muestra, ms no absorcin. Por ello las muestras usualmente tienen que ser calentadas a altas temperaturas de modo que una gran proporcin de los tomos alcancen el estado excitado (cuidado debe ser tomado para asegurar que ionizacin de la muestra ocurra). Existe un nmero de formas en las que la energa pueda ser suministrada a la muestra, ellas incluyen calor, luz, electricidad y ondas de radio. 14.Espectroscopa de Emisin Atmica (AES) Instrumentacion En espectroscopa de emisin atmica, la muestra por si misma acta como la fuente de la radiacin detectada y por tanto no hay necesidad de tener una fuente de radiacin separada o adicional, lo mismo que no es necesario involucrar un chopper.

 La muestra es calentada a temperatura en la que ella es atomizada y una proporcin significante de los tomos alcancen el estado excitado. Emisiones atmicas son producidas cuando los electrones regresan desde el estado excitado a niveles de menor energa. Desde que los niveles de energa permitidos para cada tomo son diferentes, cada uno de ellos tiene un espectro de emisin caractersticos desde el cual ellos pueden ser identificados. La radiacin emitida pasa a travs del selector de longitud de onda para aislar los picos especficos en el espectro correspondientes al tomo de inters, y la intensidad del pico es medido usando un detector y mostrado por instrumento que permite leer la seal de salida 15. Espectroscopa de Emisin Atmica (AES) Instrumentacion Fuente de excitacin y atomizacin.El propsito de esta fuente es atomizar la muestra, y excitar los tomos de modo que ellos emitan cantidad suficiente de radiacin detectable. Las dos formas ms comnmente usadas de fuentes de excitacin y atomizacin son dispositivos: de flama; y de plasma por acoplamiento inductivo (inductively Coupled Plasma (ICP). En AES de flama, un sistema de nebulizador y quemador es usado para atomizar el elemento en la muestra y excitar una proporcin grande de ellos a niveles altos de energa. En AES de ICP, un especial dispositivo es usado para calentar la muestra temperaturas muy altas (6 000 a 10 000 K) en la presencia de iones de argn. El elemento en la muestra no es ionizado a estas temperaturas debido a la alta concentracin de iones de argn. 16.Espectroscopa de Emisin Atmica (AES) Instrumentacin Selector de longitud de onda Selectores de longitud de onda son usados para aislar lneas espectrales particulares desde las otras que conforman el espectro, stas lneas son caractersticas del material que esta siendo estudiado.. Un nmero de diferentes tipos de selectores de onda son disponibles incluyendo filtros y rejillas. Un filtro puede ser solamente usado para medir la intensidad en una longitud de onda particular, mientras una rejilla puede ser usada para medir la intensidad de muchas longitudes de ondas.

 Por tanto un filtro puede, solamente ser usado para analizar un tipo de elemento, mientras que una rejilla puede se usada para medir muchos tipos de elementos. 17.Espectroscopa de Absorcin Atmica (AAS) Espectroscopa de absorcin atmica es un mtodo analtico que se basa en la absorcin de radiacin UV-visible producida por tomos libres en estado gaseoso. La muestra a ser analizada es normalmente disuelta en una solucin acuosa. Esta solucin acuosa es colocada en el instrumento donde es calentada para vaporizar y atomizar el elemento a analizar (metal). Un rayo de luz se deja pasar a travs de la muestra atomizada y la absorcin de la radiacin es medida en una longitud de onda especfica que corresponde al elemento de inters. Informacin a cerca del tipo y concentracin del elemento presente es obtenido midiendo la ubicacin y la intensidad de los picos en el espectro de absorcin. 18. Absorcin Atmica Absorcin Atmica es una tcnica capaz de detectar y determinar cuantitativamente la mayora de los elementos del sistema peridico. Sus campos de aplicacin son muy diversos. Se emplea en el anlisis de aguas, anlisis de suelos, bioqumica, toxicologa, medicina, industria farmacutica, industria alimenticia, industria petroqumica, etc. El equipo que se muestra es un Perkin-Elmer, modelo 2100. Trabaja bajo las modalidades de: Llama (aire/acetileno y nitroso/acetileno). Horno de grafito con un inyector automtico de muestras.

18.Espectroscopia de emisin por plasma de acoplamiento inductivo FUNDAMENTOS DE LA TCNICA Es esta una tcnica de anlisis multi-elemental que utiliza una fuente de plasma de acoplamiento inductivo para disociar los tomos o iones que constituyen la muestra, excitndolos a un nivel donde emiten luz de una longitud de onda caracterstica. Un detector mide la intensidad de la luz emitida y calcula la concentracin de ese elemento, en particular, de la muestra. La lectura de los elementos puede ser axial y radial. En la tradicional configuracin radial, la fuente de plasma es vista desde el lateral, atravesando un estrecho canal central de emisin de el plasma. El sistema axial permite la visin horizontal del canal de emisin en toda su longitud. La visin axial incrementa la longitud de la trayectoria y reduce la seal de ruido de fondo obteniendo como resultado unos lmites de deteccin ms bajos que con la configuracin radial. 20. Espectroscopia de emisin por plasma de acoplamiento inductivo (Cont.) APLICACIONES La versatilidad del ICP-OES hace buena esta tcnica para una amplia variedad de aplicaciones. Esta versatilidad es dada no slo para el gran nmero de elementos que pueden ser determinados rpidamente a niveles traza (ppm, ppb), sino tambin para una amplia variedad de tipos de muestra que pueden ser analizados utilizando esta tcnica. Agricultura y alimentos. Anlisis de suelos, fertilizantes, materias vegetales, alimentos. El anlisis de estos materiales por ICP, requiere una rigurosa

preparacin de la muestra antes de proceder al anlisis (digestiones cidas, micro-ondas....). Algunas aplicaciones tpicas de ICP en esta rea, incluye determinacin de trazas de metales en vino, cerveza, anlisis de suelos para contaminacin por metales pesados, etc.

21. Espectroscopia de emisin por plasma de acoplamiento inductivo (Cont.) APLICACIONES Ejemplos de determinaciones: Cr, Ni y Cu en orina Al en sangre Cr en heces Ni en leche materna B, P y S en huesos

Medio ambiente y aguas En esta rea, previo tratamiento de la muestra con digestiones cidas, microondas, etc., se incluyen anlisis de suelos, sedimentos, tejidos animales y vegetales; adems de varios tipos de aguas. Metales Una dificultad asociada con los metales analizados con ICP es, el gran nmero de interferencias espectrales de algunos metales. Aun as, se obtienen buenos resultados.

22. Espectroscopia de emisin por plasma de acoplamiento inductivo (Cont.) DESCRIPCIN DEL EQUIPO En la actualidad se cuenta con los siguientes equipos Espectrmetro de emisin ptico con plasma de acoplamiento inductivo (ICP-OES) Perkin Elmer Optima 3000 (con visin radial)

Espectrmetro de emisin ptico con plasma de acoplamiento inductivo (ICP-OES) Perkin Elmer 4300 (con visin axial y radial). Ambos equipos disponen de un automuestreador para la introduccin de las muestras.

23. Espectroscopia de emisin por plasma de acoplamiento inductivo (Cont.) DESCRIPCIN DEL EQUIPO Los dos equipos utilizan recirculadores de agua con circuito cerrado para la refrigeracin de los mismos evitando as el sobrecalentamiento de algunas de sus piezas. As mismo, ambos equipos utilizan, argon como fuente principal. Componentes bsicos del equipo: Plasma Monocromador Detector

24. Espectroscopia de emisin por plasma de acoplamiento inductivo (Cont.) ESPECIFICACIONES PARA EL ANLISIS DE LAS MUESTRAS Las muestras deben estar en disolucin acuosa, aciduladas con HNO3 al 2%, bien tapadas y filtradas (la concentracin total de slidos < 1500 ppm). No se admiten muestras de matriz compleja, muestras que contengan HF ni disolventes orgnicos, ya que podran causar daos en las partes internas del equipo. Las muestras a analizar se entregan en tubos de 10 ml colocados en una gradilla y numerados (1,2,3,...)

25. Espectroscopia de emisin por plasma de acoplamiento inductivo (Cont.) APLICACIONES

La versatilidad del ICP-OES hace buena esta tcnica para una amplia variedad de aplicaciones. Esta versatilidad es dada no slo para el gran nmero de elementos que pueden ser determinados rpidamente a niveles traza (ppm, ppb), sino tambin para una amplia variedad de tipos de muestra que pueden ser analizados utilizando esta tcnica. Agricultura y alimentos. Anlisis de suelos, fertilizantes, materias vegetales, alimentos. El anlisis de estos materiales por ICP, requiere una rigurosa preparacin de la muestra antes de proceder al anlisis (digestiones cidas, micro-ondas....).

Algunas aplicaciones tpicas de ICP en esta rea, incluye determinacin de trazas de metales en vino, cerveza, anlisis de suelos para contaminacin por metales pesados, etc.