UNIVERSIDAD DE SAN CARLOS DE GUATEMALA CENTRO UNIVERSITARIO METROPOLITANO FACULTAD DE CIENCIAS MDICAS AREA DIDCTICA DE INMUNOLOGA Y MICROBIOLOGA MDICA

TERCER AO 2007 INMUNIDAD INNATA Dr. Mario Roberto Pinto INTRODUCCIN El ser humano vive en un medio ambiente hostil rodeado de microorganismos potencialmente peligrosos para su supervivencia, por lo cual ha desarrollado un conjunto de mecanismos de defensa eficaz e ingenioso (salvo algunas excepciones en enfermedades parasitarias). Estos mecanismos de defensa pueden establecer un estado de inmunidad contra la infeccin (del latin immunitas, libre de) cuya operacionalizacin es la base de la maravillosa asignatura llamada INMUNOLOGA. Estos mecanismos de defensa se han agrupado en dos sistemas funcionales ms o menos distintos pero que estn profundamente interrelacionados. El primer sistema: La inmunidad innata son todas las medidas de resistencia congnita que se activan y operan desde la primera vez que el cuerpo se enfrenta a un microorganismo que ha penetrado a nuestra barrera natural, no requiere de un encuentro o de una exposicin previa a los agentes, ni tampoco se modifican significativamente con exposiciones repetidas, a este microorganismo durante toda la vida de un individuo. La inmunidad innata comprende en primer lugar igual barreras: fsicas y anatmicas, la piel y los epitelios /mucosa) de los tractos respiratorios, digestivo y genitourinario, fisiolgicas como la temperatura, el pH cido de la piel y gstrico, qumicomoleculares como la histamina, la lisozima, protena C reactiva, lectina que se une a la manosa (PBM), protenas que se unen a los lipopolisacridos (PBL) del Complemento y Citoquinas. En segundo lugar las clulas (fagotitos, clulas NK, clulas dendrticas y endoteliales). El segundo sistema es la inmunidad adquirida o adaptativa que es capaz de reconocer y eliminar de manera selectiva microorganismos y molculas extraas especficas (antgenos), no es igual en todos los miembros de una especie, sino que son respuestas a retos antgeno especfico y tiene cuatro atributos caractersticos; Especificidad antignica, diversidad, memoria inmunitaria y presencia o ausencia de autoreconocimiento. Cuando se produce un contacto por primera vez con un microorganismo nuevo es dbil o ausente pero se incrementa sustancialmente con las exposiciones subsecuentes con dicho microorganismo. Este documento sobre la inmunidad innata nos habla especficamente de las barreras fsicas, fisiolgicas y quimiomoleculares y en otra oportunidad se tratarn las clulas (Fagocitos), Complemento y la Inmunidad Adaptativa o Adquirida.

BARRERAS NATURALES La piel: Representa el rgano ms extenso del cuerpo. En el adulto tiene una superficie de 1.5 a 2m, tiene tres capas; la ms superficial es la epidermis, la media, dermis y la profunda, hipodermis (tejido graso subcutneo). La epidermis es el estrato superficial y se presenta como un epitelio pavimentoso estratificado. La capa crnea superficial continuamente se est descamando y eliminando a microorganismos potencialmente patgenos (causante de enfermedad) que pueden colonizar la piel. Otro de los mecanismos de proteccin de la piel es la acidez (pH entre 5 y 6) que es producto de la degradacin de cidos grasos y el sudor en las glndulas sudorparas, elimina los microorganismos que se adhieren a las vecindades de las glndulas sudorparas. La mucosa: Se estima que una persona adulta posee 400m de superficie mucosa, ello brinda a los microorganismos patgenos una amplia rea, al medio externo potencialmente colonizable. Para defenderse las mucosas tienen una serie de mecanismos de la inmunidad innata y adquirida. Solo se analizar los primeros. Los epitelios que recubren el tracto respiratorio, gastrointestinal y urogenital, nopresentan una organizacin nica. En la cavidad oral, la faringe, el esfago, la uretra y la vagina, el epitelio es estratificado. La mucosa intestinal est cubierta por un epitelio simple, mientras en las vas areas es simple o estratificado dependiendo de la regin. La continuidad del epitelio constituye una barrera contra la penetracin de los microorganismos y molculas potencialmente perjudiciales, ya que la mucosa lindan con ambientes densamente poblados de microorganismos. El epitelio asociado con las mucosas secreta un lquido viscoso que contiene una glucoprotena denominada mucina, con alta afinidad por el agua y se denomina Moco. Las mucinas son ppticos fibrosos largos cubiertos por una compleja variedad de oligosacridos. La secrecin del moco difiere en su composicin y hay hasta ocho distintos genes para mucinas (MUC 1 a MUC 8) y centenares de oligosacridos diferentes, sus propiedades adhesivas y elsticas le permiten que sea retenido en la superficie epitelial. Es producido constantemente y tiene una vida media corta, es desplazado por el epitelio ciliado en el aparato respiratorio y por el movimiento peristltico en el intestino, si por ejemplo no se desplaza adecuadamente y se retiene, se convierte en un factor favorable a las infecciones por microorganismos. BARRERAS FISIOLGICAS Las ms importantes: la temperatura. El alza en el nivel de temperatura corporal, elimin probablemente algn microorganismo patgeno, y se logra a travs de protenas de shock al calor como la IL-1 y el Factor de Necrosis Tumoral producidos por varias clulas de la inmunidad innata, siendo la ms importante el macrfago. El pH cido del estmago (entre 1 y 2) que elimina un nmero muy grande de microorganismos, pues este es un mecanismo de eliminacin en condiciones normales, pero cuando se altera, ya sea por medicamentos como inhibidores de receptores H2, bloqueadores de la bomba de protones, anticidos, acloridia o ciruga con reduccin de tejido gstrico, condiciona a adquirir infecciones del aparato digestivo. 2

BARRERAS QMICO MOLECULARES En las secreciones y moco se encuentra: La Lactoferrina: abundante en la leche materna y secreciones del aparato respiratorio, tiene una accin antimicrobiana, ya que compite por el hierro libre que es un factor de crecimiento de las bacterias y ocasiona lisis de las mismas al reaccionar con grupos Thil(S). Adems de tener propiedades inmunomoduladoras, estimula la actividad de los fagocitos y clulas NK. La Lisozima: es una endoglucocidasa presente en saliva, lgrimas y moco, ataca la pared bacteriana, hidrolizando el pptidoglicano rompiendo uniones Beta (1-4) glucosdicas establecidas entre el cido N-acetilmurmico y N-acetil-glucosamida dejando a la bacteria vulnerable a su destruccin mediante una lisis osmtica, tambin activa autolisinas bacterianas. Figura 1

Las Defensinas: son polipptidos pequeos de aproximadamente 30 aminocidos de longitud, cargadas positivamente y resistentes a proteasas. Poseen 3 puentes disulfuro internos y en base a esto, se clasifican en defensinas Alfa y Beta. Su mecanismo de accin parece ser la formacin de canales inicos que dependen del voltaje de la membrana microbiana, permitiendo la salida de solutos del interior de las clulas, parece ser que no actan en clulas con colesterol en su membrana, por lo cual no actan sobre clulas de mamferos, son activas contra una amplia variedad de bacterias, hongos y virus envueltos. Las defensinas Alfa se producen y almacenan en los granulocitos y clulas epiteliales especializadas de Paneth que producen adems moco y se producen en respuesta a infecciones. 3

Se han identificado dos defensinas Beta en los humanos: una /hDB-1) que se elaboran y secretan continuamente por las clulas epiteliales de las vas areas y urogenitales y se encuentran en el moco de dichas reas, as como en sangre. Las defensinas (hDB-2) se secreta en piel, pulmn y clulas de la traquea en respuesta al Factor de Necrosis Tumoral Alfa, o al establecer contacto con bacterias y hongos, esta es la razn por lo que a estos pequeos ppticos se les denomina antibiticos peptdicos. Las Aglutininas: Son glucoprotenas cuyos oligosacridos interactan con receptores microbianos, inhibiendo la interaccin de los microorganismos con las protenas de la superficie de las clulas epiteliales regulando la cantidad de los mismos en las mucosas. Las Histatinas: Componen una familia de doce protenas ricas en residuos de histidina presentes en la saliva y tienen una actividad antimicrobiana eficaz. MOLCULAS QUE PARTICIPAN EN EL RECONOCIMIENTO PROPIO DE LA INMUNIDAD INNATA La respuesta inmune innata reconoce estructuras altamente conservadas presentes en grandes grupo de microorganismos denominados Patrones moleculares asociados a Patgenos (PAMP). El reconocimiento es mediado por los Receptores de reconocimiento de Patrones (RRP). Ejemplo de PAMP bacterianas son: lipopolisacridos (LPS), pptidoglicano, cidos lipoteicocicos, mananos, DNA bacteriano, RNA de cadena doble y glucanos. Los PAMP son abundantes, representan estructuras invariables compartidas en los microorganismos patgenos, pero escasos en las clulas del hospedero. Ejemplo el LPS es sintetizado solo por bacterias gram (-), los RRP lo reconocen y activan seales de alerta en el hospedero que dan lugar incluso a una respuesta del sistema inmune adaptativo. Ejemplo LPS en bacterias gram (-), funcionalmente los RRP pueden dividirse en tres clases: secretados, endocticos y de sealizacin. Entre los receptores de reconocimiento de patrones (RRP) secretados, son liberados como molculas solubles, se unen a las paredes bacterianas y funcionan como opsoninas (facilitan la fagocitosis por macrfagos y polimorfonucleares) y activadores de vas de activacin del complemento. Ejemplo: la Protena C reactiva y la lectina de unin a la manosa.

Figura 2

PROTENA C REACTIVA Es producida por los hepatocitos por las citoquinas IL-6, IL-1 y Factor de Necrosis Tumoral Alfa. Se sintetiza junto a otras protenas de Fase aguda de la inflamacin como la protena amiloide P srica, su blanco de accin es la fosforilcolina y otros polisacridos de las superficies microbianas, es una opsonina y activa el complemento por la va clsica, se encuentra en la sangre y se usa como indicador de inflamacin en el laboratorio clnico. LA LECTINA DE UNIN A LA MANOSA (MBL) Es producida por el hgado, su funcin es unirse a residuos de los azcares: manosa, glucosa, fructuosa, N-acetilglucosamina, que se localizan en los extremos expuestos de las cadenas laterales de carbohidratos de glucoprotenas, o glucolpidos microbianos. La MBL est formada por 3 cadenas idnticas de polipptidos, en uno de los extremos existe el receptor para los residuos de los azcares, que se unen de manera independiente, aunque la unin es ms fuerte si las tres cadenas estn unidas a residuos de carbohidratos como se observa en las superficies de las bacterias, levaduras, micobacterias, parsitos y algunos virus cubiertos. En cuanto a las glucoprotenas de la membrana de las clulas de los mamferos estos azcares blanco, se encuentran en cantidades menores y enmarcados por otros carbohidratos como la galactosa y cido silico y no muestran una disposicin especial repetitiva por lo que o no se unen o lo hacen ineficientemente al MBL. El MBL funciona como una opsonina y adems activa el complemento a travs de las 5

vas de activacin de las lectinas al unirse a las protenas sricas con funcin de enzimas esterasas, MASP1, MASP2, MASP3 (protenas sricas asociadas a MBL) cuya fin es producir lisis del microorganismo.

Figura 4

CD14 Es una glucoprotena producida por los macrfagos, es secretada pero tambin se une a un receptor en la membrana de los macrfagos por lo que puede encontrarse libre en la sangre y unida a la membrana celular de dichas clulas. Se une a varios lpidos, especialmente a los lipopolisacridos (LPS) de las bacterias gram (-), tambin a las paredes de los estreptococos y el lipoarabinomanano del Mycobacterium tuberculosis, por lo que se sospecha que sean varios los lpidos microbianos. PROTENA DE UNIN A LIPOPOLISACRIDOS (LBP) Es una glucoprotena producida por el hgado, principalmente como respuesta a las protenas de fase aguda de la inflamacin, especialmente por IL-6 e IL-1 y Factor de Necrosis Tumoral Alfa. Se une directamente a la porcin de lpido A del LPS, el complejo resultante se une al CD14 soluble y juntas se unen al receptor tipo Toll 4, 2 y 6 en el macrfago iniciando actividad intracelular que originalmente produce la sntesis de citoquinas inflamatorias que inician y que tambin es el puente que relaciona la Inmunidad Innata con la Adquirida, entre las cuales estn la IL1 y FNT Alfa.

Figura 5

Figura 6 Funcin de un receptor tipo TOLL en la sealizacin Celular por medio (LPS) 8

RECEPTORES DE RECONOCIMIENTO DE PATRONES ENDOCTICOS Se expresan principalmente en la membrana celular de los fagocitos y clulas dendrticas. Al reconocer a los PAMP, estos receptores favorecen el ingreso del patgeno en los fagolisosomas donde son destruidos. Los antgenos son procesados y los pequeos pptidos son colocados en las molculas de Histocompatibilidad clase II o I, los que son presentados por estas clulas a los linfocitos T, para iniciar una respuesta inmune adquirida. En este grupo de receptores endocticos se destacan los receptores de lectina tipo C (RLC), entre los ms conocidos es el receptor de manosa d elos macrfagos, forman una familia estructuralmente relacionadas llamndose colectinas, porque tienen un dominio de colgeno unido al dominio de la lectina dependiente de calcio. RECEPTORES DEL FRAGMENTO Fc DE LAS INMUNOGLOBULINAS (RFc) Esta es una familia de receptores de membrana perteneciente a la superfamilia de las inmunoglobulinas, caracterizada por presencia de dominios similares a los de esta. Algunos de estos receptores presentan una cadena nica, mientras otros integran una cadena Alfa, responsable del reconocimiento de la porcin Fc del anticuerpo y una o ms cadenas adicionales necesarias para la expresin del receptor en la membrana o para la transduccin de seales intracelulares. Los receptores para Fc de los anticuerpos IgG e IgM especialmente en los Fagotitos, clulas dendrticas y epiteliales, son generalmente endocticas y son inductoras de sntesis de citoquina inflamatoria, especialmente en los Macrfagos. El receptor de la IgE es principalmente un receptor de sealizacin que induce la sntesis de citoquinas del grupo TH2 y son importantes en las reacciones alrgicas y parasitarias, tienen 2 tipos de receptores: de alta afinidad en los mastocitos y en los basfilos y de baja afinidad en los Eosinfilos, Macrfagos y Plaquetas. 9

RECEPTORES DE SEALIZACIN Entre estos, los ms importantes son los receptores tipo TOLL (TLR), pertenecen a varias familias de protenas con dominicos repetidos ricos en leucina y dominios de lectina dependientes de calcio. Se denominan estos receptores TOLL, porque se descubrieron en la Drosophila (Mosca de la fruta) que originalmente fue estudiada para definir la polaridad dorsoventral durante el desarrollo embrionario, pero despus se encontr que era su componente esencial en la respuesta inmune antifngica de la mosca. Luego a partir de este descubrimiento se analizaron muchos grupos de protenas en las membranas celulares de mltiples especies de seres vivos incluyendo a los humanos. En los humanos estos receptores tipo TOLL se han descrito 11 de los cuales se han encontrado en 9 de ellos, su participacin especialmente contra bacterias y virus. Tiene su dominio citoplasmtico similar al que expresa la familia de receptores para IL-1. Este dominio, compartido por ambas familias se denomina dominio TIR (TOLL/IL-1 receptor). Entre los casos que se conocen actualmente de los receptores tipo TOLL. El TLR 4 reconoce cido lipoteicoico, LPS, presente en bacterias gram (-), la protena de fusin (F) del virus sincitial respiratorio. El TLR 2 reconoce el peptidoglicano de bacterias gram (+), lipoprotena y lipopptidos de bacterias y glucofosfatidilinositol del parsito Tripanosoma cruzi: Hace heterodmeros con TLR1 o TLR6. El TLR3 reconoce RNA de doble cadena sintetizado por diversos virus en la replicacin. El TLR5 reconoce la flagelina, una protena estructural del flagelo de las bacterias. El TLR9 reconoce DNA microbianos, en particular, segmentos de dinucletidos cpc no metilados. Los receptores (TLR) no siempre tienen el mismo efecto en las clulas, as por ejemplo en las clulas dendrticas de la piel, producen migracin a ganglios linfticos regionales, expresin de molculas coestimuladoras CD80 y CD86 y los HLA (Antgeno de Histocompatibilidad) I y II y la produccin de citoquinas.

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RECEPTORES SCAVENGER (SR) 11

Estos receptores fueron originalmente identificados como receptores de lipoprotenas modificadas involucradas en desarrollo de aterognesis. Actualmente se reconoce que median el reconocimiento de microorganismos de diversos PAMP como lipoprotenas, bacterias, polirribonucletidos y DNA microbianos. Estos receptores se expresan en monocitos-macrfagos y clulas dendrticas, entre los ms reconocidos estn los de tipo A: SR-AI y SR-AII. RECEPTORES PARA PPTICOS FORMILADOS (RPF) Estos se unen al N-propilmetionil pptido que son producidas por las bacterias cuando se establece una infeccin induciendo en los fagotitos especialmente en la quimiotaxis de polimorfonucleares. Este receptor pertenece a los receptores que expresan 7 dominios de transmembrana y se hallan acoplados a protenas reguladoras, son muy parecidos a los receptores para anafilatoxinas C3a y C5a del Complemento, dirigen el movimiento unidireccional leucocitario hacia el Nformilmetionil pptido, tambin estimulan a las clulas endoteliales vecinas para la expresin de molculas de adherencia especialmente las denominadas integrinas.

BIBLIOGRAFA 1. 2.
3. 4. 5. Castellano C., Woltman am. Scheno FP Roos A. Innata Immunity Molecular. Immunol. 2004 41: 133-140. Fainboin L. y Ceffner J. Introduccin a la Inmunologa Humana. 5. Edicin 2,005 Inmunidad Innata. Cap. 2, 9-24. Fainboin L y Ceffner J. Introduccin a la Inmunologa Humana. 5. Edicin 2005 Inmunidad antibacteriana. Cap. 17, 7-12. Goldsby R, Kindtt, Osborne B, Kuby J. Inmunologa. 5a. Edicin 2004. Cap. I, Ed. McGraw Hill. Jane Way Ch, Medzhitov R. Innate Immune Recognition. Ann Rev. Immun. 20, 197-216, April 2002. Mathews C., Van Holdek, Ahern K. Bioqumica, 3a. Edicin 2002, Ed. Pearson. Educacin, S.A. Medzhitou, R. y Janeway C. Innate Immunity N. Engl. J. Med. 2000, 343, 5, 33845. Modlin R, Brightbill H. Godowsk, P. The Toll of Innate Immunity on Microbial Pathogens. 1999 N. Engl. J. Med. 340, 23. 1834-35. Murray P, Rosenthal K. Kobayashi C, Pfaller, A. Microbiologa Mdica, 5a. Edicin 2006, Ed. Elsevier Science. Parslow T, Suites D, Terr A. Imboden J. Inmunologa Bsica y Clnica, 10 Edicin 2001, Inmunidad Innata. Cap. 2, 23-45.

6.
7. 8. 9. 10.

MRP/lr.

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