UNIVERSIDAD DE SAN MARTN DE PORRES FACULTAD DE ODONTOLOGA

REACCIN INFLAMATORIA DE LA MUCOSA GSTRICA Y ESOFGICA AL PERXIDO DE CARBAMIDA EN ANIMALES DE EXPERIMENTACIN

TESIS
PARA OPTAR EL TTULO PROFESIONAL DE CIRUJANO DENTISTA

PRESENTADA POR:

MARCO ANTONIO BALBIN MIRANDA

BACHILLER EN ODONTOLOGA

LIMA PER 2006

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ASESOR
Q.F. VERNICA CARDENAS TALAVERA

DEDICATORIA
A mis padres, Ral y Gloria por su apoyo. A mis hermanos Juan, Virginia y Fiorella.

AGRADECIMIENTO
A la Q.F. Vernica Crdenas Talavera por sus importantes orientaciones. Al Q.F. Gustavo Guerra Brizuela, Director de SAAAC. UNMS. Facultad de Farmacia y Bioqumica. A la Dra. Mg. Nieves Sandoval Chauca. Directora del Bioterio y responsable del Laboratorio de Vida Silvestre. A la Dra. Sonia Pereyra de INS, del rea de Anatoma Patolgica.

SUMARIO
INTRODUCCIN CAPTULO I 1. MARCO TERICO 1.1. Antecedentes generales y especficos................................................9 1.1.1. Antecedentes generales......................................................... 9 1.1.2. Antecedentes especficos.......................................................12 1.2. Bases tericas.................................................................................... 14 1.2.1. Agente Blanqueador.............................................................. 14 1.2.1.1. Composicin.......................................................... 14 1.2.1.2. Mecanismo de Accin........................................15 1.2.1.3. Proceso de oxidacin del Peroxido de Hidrogeno. 16 1.2.1.4. Caractersticas de un agente Blanqueador..............16 1.2.1.5. Precauciones Generales..17 1.2.1.6. Contraindicaciones Generales................................17 1.2.1.7. Indicaciones ms frecuentes...................................18 1.2.1.8. Mtodos de Blanqueamiento..................................18 1.2.2. Blanqueamiento en casa o Ambulatorio............................... 19 1.2.2.1. Efectos secundarios................................................19 1.2.3. Caracterizacin de la Prueba toxicolgica........................... 20 1.2.4. Toxicidad a la exposicin del agente blanqueador............... 21 1.2.5. Respuesta de la mucosa expuesta al agente blanqueador......24

1.2.6. Inflamacin............... 24 1.2.6.1. Vasodilatacin y aumento de la permeabilidad de los vasos sanguneos.........................................................24 1.2.6.2. Emigracin de las clulas fagocitaras................... 25 1.2.7. Esfago..................................................................................25 1.2.7.1. Histologa............................................................... 26 1.2.7.2. Fisiologa............................................................... 28 1.2.7.3. Esofagitis................................28 1.2.8. Estmago...............................29 1.2.8.1. Histologa............................................................... 30 1.2.8.2. Fisiologa............................................................... 33 1.2.8.3. Gastritis.................................. 33

1.3.

Definicin de conceptos............................................................... 34

CAPTULO II 2. EL PROBLEMA 2.1. Formulacin del problema...........................................................37 2.2. Justificacin................................................................................. 38 2.3. Limitaciones de la investigacin................................................. 38 2.4. Objetivos de la investigacin...................................................... 38 2.4.1. Objetivo general.............................................................. 38 2.4.2. Objetivos especficos.......................................................39 2.5. Hiptesis......................................................................................41 CAPTULO III 3. MATERIALES Y MTODOS 3.1. Tipo de investigacin.................................................................. 42 3.2. Poblacin y muestra.................................................................... 42 3.3. Criterios de inclusin y exclusin............................................... 43 3.4. Diseo metodolgico...................................................................43 3.5. Variables......................................................................................43 3.6. Recursos materiales..................................................................... 44 3.7. Tcnicas de recoleccin de datos................................................ 47 3.8. Anlisis de los resultados............................................................ 53 3.9. Matriz de consistencia................................................................. 54 CAPTULO IV 4. RESULTADOS.................................................................................. 76

CAPTULO V V.0 DISCUSIN 5.1. Discusin......................................................................................105

CAPTULO VI VI.0 CONCLUSIONES 6.1. Conclusiones................................................................................ 108 6.2. Recomendaciones.........................................................................112 6.3. Resumen....................................................................................... 113 FUENTES DE INFORMACIN ANEXOS

INTRODUCCIN
El perxidode carbamida es uno de los agentes bastante empleados en el blanqueamiento dental. Su mecanismo de accin y propiedades han llevado actualmente a una gran demanda de los pacientes que buscan mejorar sus condiciones estticas. Diversos porcentajes de perxido de carbamida son empleados para dicho propsito, existiendo diversas tcnicas de blanqueamiento

profesional y domiciliario, as como sus aplicaciones, las cuales pueden variar en tratamientos de diente vitales y no vitales. No obstante, a su uso, se han registrado algunos estudios citolgicos que parecen indicar una respuesta inflamatoria celular. De otro lado, existen controversias acerca de sus efectos adversos, referidos a su toxicidad tanto en estudios humanos como experimentales. Durante la aplicacin del perxido de carbamida, puede ocurrir pequeas cantidades de ingesta del producto, o en casos extremos, la posibilidad de tragar accidentalmente pequeas cantidades del mismo. Sin embargo, se tiene poca informacin sobre su efecto en la mucosa esofgica y gstrica expuesta de ste modo a un agente blanqueador como el perxido de carbamida, en especial cuando ste es usado bajo tcnicas de uso domiciliario, sin que este claro el efecto de su ingesta an en bajas concentraciones empleadas para el blanqueamiento, por lo que se ha llevado a cabo el presente estudio.

CAPTULO I I.0. MARCO TERICO

1.1. Antecedentes generales y especficos. 1.2. Bases Tericas. 1.3. Definicin de conceptos.

1.1.

ANTECEDENTES GENERALES Y ESPECFICOS

1.1.1. ANTECEDENTES GENERALES Souza M. (1993). Realiz un estudio experimental mltiple, verificando los efectos de agentes de blanqueamiento dental a base de perxido de carbamida al 10% sobre dientes humanos in vitro y sobre la mucosa bucal de ratas. En relacin a los efectos del perxido de carbamida al 10% sobre la mucosa bucal, constat un aumento en la espesura del epitelio y de la capa de queratina, y presencia de clulas epiteliales en al capa espinosa con inclusiones claras en su citoplasma y alteracin del perfil de las papilas epiteliales. El tejido conjuntivo no mostr evidencia de reaccin de tipo inflamatoria.(1) Ly I. (1996). En una reciente investigacin indic que una cantidad promedio de blanqueador comercial usado clnicamente para 10 dientes del maxilar superior (arcada completa) fue 502 mg por aplicacin.(2) Albuquerque R. y col. (1998). Evaluaron los efectos del perxido de carbamida al 10% sobre la proliferacin celular en la mucosa lingual de ratas Wistar, a travs de la expresin inmunohistoqumica del antgeno nuclear de proliferacin celular. Sugirieron que el uso tpico de perxido de carbamida al 10% indujo un aumento del ndice de proliferacin de la mucosa bucal.(3) Ckless F.; Lopes M. (2001). El objetivo del presente estudio fue verificar los efectos de dos productos de blanqueamiento dental casero que liberaban perxido de hidrgeno, en la mucosa bucal y en tejido conjuntivo subcutneo de ratas. Fueron utilizadas 72 ratas (Rattus norvegicus albinus, linaje Wistar) machos adultos con pesos entre 250 a 350g. Los productos evaluados fueron un dentfrico blanqueador conteniendo bicarbonato de sodio y perxido de calcio (crema dental Colgate, bicarbonato de sodio y perxido, Colgate-Palmolive Co.) y un gel de blanqueamiento dental a base de perxido de carbamida al 10% (gel blanqueador dentario Clarigel, Herpo Productos Dentarios LTDA). Los animales fueron divididos aleatoriamente en 3 grupos de 24 ratas cada una: grupo C (grupo control); grupo D (grupo sin igual utilizacin de dentfrico blanqueador) y grupo G (grupo sin igual utilizacin de gel

blanqueador). Los 3 grupos fueron divididos en 4 subgrupos, con 6 ratas cada uno, de acuerdo con los periodos experimentales en subgrupo 2 (sacrificados despus de 2 das); subgrupo 10 (sacrificados despus de 10 das); subgrupo 20 (sacrificados despus de 20 das) y subgrupo 30 (sacrificados despus de 30 das). Con base los resultados obtenidos fue posible construir: a. La aplicacin tpica del dentfrico blanqueador conteniendo bicarbonato de sodio y perxido de calcio ocasion un mayor infiltrado inflamatorio compuesto por linfocitos y plasmocitos, en comparacin al grupo control, en tiempo experimental de 20 das, mientras que el gel blanqueador a base del perxido de carbamida al 10% no ocasion alteraciones microscpicas en comparacin con el grupo control a los 2, 10, 20 y 30 das. b. La introduccin del dentfrico blanqueador conteniendo bicarbonato de sodio y perxido de calcio, as como del gel blanqueador a base de perxido de carbamida al 10% en el tejido conjuntivo subcutneo de las ratas ocasion un mayor infiltrado inflamatorio de intensidad severa y de tejido de granulacin en comparacin con el grupo control, en los tiempos experimentales de 10, 20 y 30 das. (4) Gamze A. 2003. El propsito del actual estudio fue investigar los efectos citotxicos de varios agentes blanqueadores en la lnea mamaria de la clula del carcinoma FMA del ratn. La citotoxicidad de PowerGel y de Opalescence PF fue determinada por la evaluacin del crecimiento y de la variabilidad de la clula en comparacin a los controles. El crecimiento de la clula despus de 24 horas se redujo perceptiblemente en comparacin al grupo de control. Ambos geles afectaron viabilidad de la clula. PowerGel y Opalescence PF demostraron un efecto citotxico sobre el crecimiento de la clula. (5) Zevallos E. (2004). Realiz un estudio para determinar las alteraciones de proliferacin de los fibroblastos y fibras colgenas de pacientes a los cuales se les aplic perxido de carbamida. La poblacin estuvo constituida por 80 paciente de 25 a 35 aos de edad de ambos sexos que

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acuden al servicio de Odontologa del Hospital Alberto Sabogal Sologuren EsSALUD Callao. Que fueron evaluados por el periodo de un mes. La muestra seleccionada fue de 20 pacientes: 12 hombres y 8 mujeres. Se encontr que exista un cambio estadsticamente significativo en la cantidad de fibras colgenas despus del uso de perxido de carbamida al 35%.(6) 1.1.2. ANTECEDENTES ESPECFICOS Woolverton C.; Haywod V.; Haymann H. (1991). Sealaron que respecto a la toxicidad celular, evaluada mediante cultivos de fibroblastos, el perxido de carbamida al 10% produce una reaccin inflamatoria en los cultivos de tejidos similar a la que producen otros materiales utilizados habitualmente en Odontologa como el eugenol.(7) Redmond A.; Cherry D.; Bowers D. Jr. (1993). Realizaron un estudio sobre el efecto toxicolgico de la Ingesta de un agente de blanqueamiento. Para investigar stos efectos, ratas adultas hembras (Sprague Dawley) estuvieron en ayunas durante toda la noche, 10 de las cuales fueron intubadas con el agente de blanqueamiento (5g/Kg peso), mientras que 5 ratas del grupo control recibieron agua desionizada. Tres ratas que recibieron el agente de blanqueamiento murieron en el lapso de una hora. Las ratas sobrevivientes fueron necropsadas a las 2 horas y se tomaron muestras de sangre y del estmago para los anlisis. Las microfotografas del revestimiento del estmago mostraron que la superficie de la mucosa y las glndulas gstricas estaban interrumpidas. Los datos indicaron que la ingesta del agente de blanqueamiento induce un dao mayor a la mucosa gstrica en ratas en el plazo de 2 horas.(8) Haywood B. (1994). Seala que: un elemento de controversia se refiere al potencial de contacto con los tejidos blandos y la ingestin del material durante el tratamiento. Ya que en efecto puede suceder irritacin del tejido gingival, como respuesta del tejido expuesto al perxido.(9) Redmond A. Cherry D.; Bowers D. (1994). Investigaron el efecto toxicolgico por la ingesta de perxido de hidrgeno al 6% en carboxipolimetileno al 99% (Natural White. Inc. CA). Luego de una vigilia

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de una noche, 17 ratas hembras (Sprague Dawley) fueron intubadas con el agente blanqueador (Natural White) (5g/kg PC) y 13 ratas control con agua desionizada. Murieron 3 ratas a las que se les dio el agente blanqueador. Las ratas sobrevivientes fueron sometidas a necropsia a los 15 minutos y una semana despus de la ingesta del agente blanqueador. Los resultados mostraron que la ingesta del agente blanqueador por las ratas produca una dehisencia de la mucosa gstrica en 15 minutos, mientras que la reparacin de la mucosa se present en una semana.(10) Dahl J.; Becher R (1995). Estimaron que casi el 10% del gel de blanqueamiento aplicado podra ser consumido durante su aplicacin, sugiriendo que en un individuo de 60 kg de peso corporal, la exposicin al blanqueador dental fue calculada en (50.2/60)0.84 mg/kg/da, y la exposicin al perxido de carbamida a travs del blanqueador dental conteniendo carbamida al 10% sera de 0.084 mg/kg/da, correspondiendo a 0.028 mg/kg/da de perxido de hidrgeno. Despus de 15 minutos, el estmago estaba groseramente hinchado con gas, y despus de 2 horas el hematocrito sanguneo fue elevado, y la histologa revel heridas en la mucosa gstrica. La mucosa gstrica apareci normal una semana despus y la qumica sangunea se normaliz 2 semanas despus de la exposicin del estmago a 15 y 50 mg de perxdo de carbamida por Kg perxido de carbamida o 150 y 500mg de blanqueador dental que contena perxido de carbamida al 10% por Kg perxido de carbamida result en ulceracin de la mucosa gstrica despus de 1 hora, las lesiones comenzaron a sanar despus de 24 horas. Las ulceraciones de la exposicin al agente blanqueador fueron ms pronunciadas que aquellas observadas despus de una dosis comparable de perxido de carbamida. Esto pudo ser atribuido a la naturaleza hidrofbica del gel y el contenido del carbopol en el agente blanqueador, el cual incrementa probablemente la adherencia tisular y retarda la descomposicin del perxido del hidrgeno.(11)

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Woolverton C.; Haywood V.; Heymann H. (1996). El propsito de este estudio fue evaluar dos soluciones de perxido de carbamida al 10% usado en cubetas protectoras para el blanqueamiento, una contena carbopol (PROXIGEL), y la otra sin carbopol (GLY-OXIDE), en cuanto a la mortalidad, genotoxicidad y citotoxicidad. Los ratones fueron alimentados con ambas soluciones y observados por 72 horas. La genotoxicidad en el ratn fue medida con la prueba de micronucleosis segn la alimentacin dada con ambas soluciones, se les volvi a alimentar con la solucin 24 horas despus y sacrificadas 6 horas ms tarde. La citotoxicidad celular fue medida por la incubacin de cada agente con incluidos de leucocitos perifricos de sangre humanos (HPBL) en 15 minutos y de fibroblasto de ratn a las 48 horas. El 50% de muerte del HPBL por PROXIGEL y GLYOXIDE ocurri entre 5.49 x 10-5 mol/L y 6.10 x 10-4 respectivamente, mientras que el 50% de muerte de fibroblastos ocurri a 1.88 x 10 -7 mol/L y 6.16 x 10-7 mol/kg, respectivamente.(12)

1.2.

BASES TERICAS

1.2.1. AGENTE BLANQUEADOR Hace ms de un siglo Westlake (1895) describe como agente blanqueador una mezcla de perxido y ter. Abbot (1918) Superoxol (mezcla estabilizada de H2O2 al 30%).(12) El perxido de carbamida es tambin conocido como perhidrolurea, perxido de rea carbamida.(13) 1.2.1.1. COMPOSICIN Los agentes blanqueadores son los de perxido de hidrgeno al 35% y los de perxido de carbamida al 10%, 15%, 16%, 20%, 22%, 35%. Estas concentraciones pueden variar de manera no significativa dependiendo de la empresa que los fabrica. El agente blanqueador activo en el perxido de carbamida, es el perxido de hidrgeno. Un gel de perxido de carbamida al 10% contiene usa el

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aproximadamente 3.3 a 3.5% de perxido de hidrgeno; vale decir, una concentracin al 15% de perxido de carbamida, contiene aproximadamente 5% de perxido de hidrgeno; al 20%, contiene aproximadamente 7% de perxido de hidrgeno, el resto es rea. Entonces un blanqueador, a base de perxido de carbamida, contiene: perxido de hidrgeno en mnimo porcentaje, que acta como hidrogenador y oxidante, este va a desprender oxgeno en presencia de peroxidasa y catalasa y se torna efervescente y rea o carbamida en mayor porcentaje; que acta como amortiguador o buffer haciendo ms lenta la liberacin del oxgeno y prolongando el efecto. Se ha descrito entre sus componentes las siguientes sustancias: (14) Perxido de carbamida, como ingrediente activo. Carbopol, es un polmero de carboxipolimetileno, que aumenta la viscosidad, la adherencia y prolonga la liberacin del perxido. Trietanolamina, acta elevando el pH y reduciendo la sensibilidad. Glicerina. Acido ctrico. EDTA. Benzoato de sodio. Saborizantes. Colorantes artificiales.

Adems de los componentes anteriores, existe tambin la adicin de flor y nitrato de potasio (OpalescencePF al 15 y 20%, de Ultradent Products, In.) o flor nicamente (Nite White Excel al 16 22% de Discus Dental). El perxido de carbamida, tambin se denomina: perxido de urea, perxido de hidrgeno urico, perxido de carbamida hidrogenada, perhidrol rea, hiperol, ortozon o exterol.(14) Price J. en 1999, menciona como componentes bsicos del perxido de carbamida (carboxipolimetileno, carbopol, BF Goodrich), glicerina, fenacetina, cido fosfrico, trolamina (o trietanolamina) y saborizantes. (15)

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1.2.1.2. MECANISMO DE ACCIN La oxidacin es el principal mecanismo de blanqueamiento. Se entiende por oxidante a cualquier especie molecular con un electrn desemparejado en su rbita externa y por lo tanto, tiene una fuerte tendencia a interactuar con otros electrones de modo de generar un par de electrones. En el proceso de blanqueamiento esos oxidantes actan en las uniones de los radicales cromforos (radicales coloridos de los cuales depende el color de las sustancias) y las rompen. De ese modo los pigmentos del esmalte y dentina son alterados obteniendo un efecto blanqueador.(14) Puesto en la boca, el perxido de carbamida se desdobla en perxido de hidrgeno (a 1/3 de su concentracin inicial) y rea. A su vez, el perxido de hidrgeno se desdobla en radicales libres, a este nivel el carbopol, que al ser hidrosoluble y de alto peso molecular retardara la formacin de agua y oxgeno molecular (mejorando la accin del blanqueador). El oxgeno molecular libre o asociado se combinar con las molculas menos asociadas (generalmente de los agentes pigmentantes), degradndolas por oxidacin. (15) 1.2.1.3. PROCESO DE OXIDACIN DEL PERXIDO DE HIDRGENO El perxido de hidrgeno, por su bajo peso molecular penetra fcilmente a la estructura dentaria, es degradado a agua y oxgeno, liberando sus radicales libres perhidroxilos (HO2) por lapsos de tiempo cortos, los cuales estn desemparejados, son muy inestables y altamente oxidantes. La estabilidad la consiguen unindose a los radicales cromforos, rompiendo sus uniones y transformndolos en molculas pequeas que son expulsadas al exterior por difusin (remocin fsica de la mancha), producindose de esta forma el blanqueamiento.(14) 1.2.1.4. CARACTERSTICAS DE UN AGENTE BLANQUEADOR Entre las principales caractersticas que debe tener un agente blanqueador estn: (14)

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eficacia. -

Fcil aplicacin. Debe tener un pH neutro o cercano, para Comprobada liberacin prolongada del

evitar daos sobre los tejidos dentarios o tejidos blandos. perxido, para minimizar la duracin del tratamiento y asegurar su Debe ser muy viscoso y con propiedades de

buena adherencia a la frula de blanqueamiento dental, para evitar la excesiva ingestin del mismo durante el tratamiento, sobre todo, en los de uso domiciliario. paciente. precio razonable. 1.2.1.5. PRECAUCIONES GENERALES Antes de realizar un blanqueamiento, se har un minucioso examen intraoral y se realizar el tratamiento de: caries, enfermedad gingival, periodontal o pulpar, restauraciones con microfiltracin, zonas de erosin, abrasin o abfraccin cervical, se har necesario el estudio radiogrfico de las piezas que uno crea conveniente para descartar cualquier patologa, para no exacerbar estados inflamatorios presentes, o evitar la filtracin del agente blanqueador en estructuras dentarias que induzcan un dao pulpar. As mismo durante el tratamiento se evitar el consumo de cigarrillos, caf, t, sodas, y dems alimentos o bebidas con pigmentos, as como, el consumo de ctricos, porque aumenta el riesgo de sensibilidad durante el tratamiento y porque afectar el nivel de acidez de la saliva.(14) Costo, algunos productos son desmesuradamente costosos, mientras que otros pueden adquirirse a Debe tener una cantidad adecuada de agua De ser posible usar agentes blanqueadores en su composicin, para minimizar la deshidratacin del diente. con saborizantes, para que sea una experiencia agradable para el

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1.2.1.6. CONTRAINDICACIONES GENERALES Este tipo de tratamiento tiene muy pocas contraindicaciones generales y entre estas tenemos:(14) - Embarazo, lactancia y pacientes menores de 16 aos. - Existen estudios que indican que los perxidos, sobre todo los de hidrgeno. Podran aumentar la accin de algunos carcingenos. Entonces, los pacientes con hbitos de ingerir alcohol o consumir tabaco, no debern hacerlo durante los perodos de blanqueamiento, o en todo caso, preferir el tratamiento de blanqueamiento nocturno. - Deber contraindicarse el producto, si el paciente experimenta sensibilidad a alguno de sus componentes. 1.2.1.7. INDICACIONES MS FRECUENTES Las indicaciones ms frecuentes corresponden a etiologas extrnsecas, como, por tabaco, alimentos, bebidas, medicamentos (clorhexidina usada por ms de dos semanas en enjuagatorios), hbitos, materiales de obturacin coronaria: resinas, amalgamas, etc., decoloracin por tetraciclinas. Tambin est indicado en fluorosis, en presencia de decoloracin idioptica y tratamiento complementario a algn tratamiento restaurador: resinas, carillas, jackets, etc.(14) Dientes amarillentos, decolaracin de dientes no vitales (leves).(15) 1.2.1.8. MTODOS DE BLANQUEAMIENTO Schmideser J. en 1999, considera los siguientes mtodos de blanqueamiento: (16) a. Blanqueamiento de dientes vitales En el blanqueamiento de dientes vitales se usan sustancias qumicas sobre el esmalte que, por tanto, actan slo sobre las tinciones del esmalte. Este mtodo tambin se denomina blanqueamiento externo. b. Blanqueamiento de dientes desvitalizados

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En el blanqueamiento de dientes desvitalizados se emplean sustancias qumicas en la cavidad pulpar. Con ello se acta sobre las tinciones en el interior de la dentina coronaria. Se habla tambin de blanqueamiento interno. Price J. en 1999, clasifica el blanqueamiento en blanqueamiento en casa y en el consultorio: (15) a. Blanqueamiento en casa: Se recomienda en casos leves, en pacientes que potencialmente no sean de alto riesgo y que previamente hayan entendido y demostrado su habilidad para llevar a cabo la tcnica. b. Blanqueamiento en el consultorio: Se da en pacientes con pigmentaciones ms intensas o que no han demostrado habilidad suficiente para realizar el blanqueamiento en casa. 1.2.2. BLANQUEAMIENTO EN CASA O AMBULATORIO Este mtodo de blanqueamiento est en el mercado desde 1989. Es ms prometedor en las tinciones naranjas-marrones y las causadas por la edad. La mayora de las sustancias blanqueadoras son ligeramente cidas, de modo que es posible que las superficies radiculares expuestas reaccionen con mucha sensibilidad. Por tanto, estos pacientes deben emplear desde el inicio un dentfrico desensibilizante con fluoruro sdico (p. ej., Sensodyne). (16)

1.2.2.1. EFECTOS SECUNDARIOS DEL BLANQUEAMIENTO EN CASA O AMBULATORIO La tcnica de blanqueamiento en casa o ambulatorio no se fija estrictamente a los dientes. Los agentes tienen contacto prolongado con tejidos bucales y son deglutidos. El uso prolongado del perxido de hidrgeno puede asociarse con daos periodontales, con retardo de heridas, alteracin de la flora microbiana e infecciones oportunistas.

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Si el tratamiento de blanqueamiento es llevado a cabo sin la participacin del profesional, el paciente muchas veces exagera en cuanto a la dosis y frecuencia de aplicacin, tomndose preocupante la exposicin de esos agentes a tbulos dentinarios permeables, restauraciones con microfiltracin, abrasin o erosin cervical; pudiendo originar daos irreversibles a las estructuras dentarias y riesgos a la salud.(14) Entre los efectos secundarios se encuentran:(16)
-

El uso continuado de los perxidos, puede alterar la flora bucal y provocar el crecimiento de Candida albicans papilas. e hipertrofia de las

El poder blanqueador altera la estructura de la sustancia dura dentaria y ha producido pulpitis en experimentos con animales. Un efecto secundario frecuente del blanqueamiento es una

hipersensibilidad temporal.
-

Si no se protege la enca, pueden producirse erosiones En el blanqueamiento de dientes desvitalizados puede aparecer reabsorcin radicular. Los resultados del blanqueamiento desaparecen con el tiempo. Adems puede observarse en el blanqueamiento ambulatorios:(15) -

Irritacin de la enca (frula permeable). Alteracin de la articulacin temporomandibular (uso nocturno de la Dolor de estmago (sobrellenado de la frula y deglucin del

frula). exceso). Cuellos dentarios muy sensibles (tiempo de uso demasiado prolongado). 1.2.3. TOXICIDAD A LA EXPOSICIN DE AGENTE BLANQUEADOR Los ensayos sobre animales de experimentacin, provocaron el temor de la posible toxicidad local o sistmica de los perxidos. (18).

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La dosis letal media de perxido de carbamida al 10% en ratas es de 87,18 a 143,83 mg/Kg, lo cual, traducido a humanos, equivaldra a entre 6,5 y 8 ml del producto ingerido. (19) El perxido de carbamida se descompone en perxido de hidrgeno y perxido de urea. La cantidad de molculas que se liberan de perxido de urea en el blanqueamiento domiciliario fue estudiada por Haywood y Hayman en 1989 y resultaba despreciable desde el punto de vista toxicolgico. (20) Por lo que respecta a la toxicidad celular, evaluada mediante cultivos de fibroblastos, el perxido de carbamida al 10% produce una reaccin inflamatoria similar a la que producen otros materiales utilizados habitualmente en Odontologa como el eugenol.(12) Una encuesta en el boletn de la Clnica Research Association (Christensen, 1991) (24) revel que el 10% de 7617 dentistas haban tenido pacientes que se quejaron de problemas de estmago y/o garganta durante el procedimiento de blanqueamiento. La ingestacin accidental del perxido de carbamida al 35% ha resultado en venenos fatales o cercano a lo fatal o mortal (Humberston y col..1990;(25) Christensen y col. 1992).
(26)

Los

pacientes

vomitaron,

estuvieron

cianticos

experimentaron incapacidad respiratoria. Los primeros sntomas por embolismo de gas venenoso fueron observados en un nio de 2 aos de edad despus de una ingestin no intencional de una solucin de perxido de hidrgeno al 3% (Rackoff; Merton 1990).(27) Desafortunadamente, en cada uno de estos casos la cantidad de perxido de hidrgeno ingerido era desconocida. Entre las observaciones correspondientes hechas en experimentos con animales, un estudio realizado en ratas por (Cherry y col. 1993)
(28)

a las

que se les dieron una dosis de 50g/kg de peso de preparaciones conteniendo perxido de carbamida mostraron signos dependientes de la concentracin, como agotamiento agudo, incluyendo una respiracin superficial o baja y movilidad debilitada, 3 de 22 animales del grupo de

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ratas que recibieron la ms altas concentracin (perxido de carbamida al 35%) murieron dentro de las 48 horas. Los sobresalientes de la ingesta accidental o ingesta intencional para suicidio de soluciones de perxido de hidrgeno al 10% o mayores fueron ms severos que aquellos vistos en concentraciones ms bajas. La ingestin accidental de perxido de carbamida al 35% ha resultado en diversos envenenamientos fatales o casi fatales Estos individuos vomitaron, estuvieron cianticos, y experimentaron convulsiones y falla respiratoria. Infarto cerebral y cambios isqumicos del corazn debido a la embolia de gas tambin han sido observadas. Nios pequeos estn en el alto riesgo de la ingesta accidental. Un nio de dos aos de edad muri luego de tomar 100mL de perxido de hidrgeno al 35%, lo cual corresponde a una dosis de 290mg de perxido de hidrogeno/kg de perxido de carbamida. Adems, la ingesta de una concentracin menor de perxido de hidrgeno ha resultado en una lesin seria. Edema pulmonar y enfisemia intestinal difuso fueron encontrados en la autopsia de un nio de 16 meses de edad que haba tragado aproximadamente 600mg de perxido de hidrgeno/kg de Perxido de Carbamida una solucin de perxido de hidrgeno al 3%. Cuando se le vi al nio por primera vez, energa de la boca y nariz del nio una espuma blanca, y el nio muri 10 horas despus. Embolia de gas de la vena Porta fue observada en un nio de dos aos de edad despus de la ingesta no intencionada de solucin de perxido de hidrgeno al 3%. Una jeringa (3.5g) del perxido de carbamida al 18% mide 210 mg de perxido de hidrgeno. El envenenamiento falta es as no muy probable aunque un nio de dos aos de edad (peso corporal aproximadamente de 12kg) ingiera una jeringa de agente bloqueador. La ulceracin de la mucosa oral, esfago, y estmago, es ms probable que ocurra en tal caso, acompaada por sntomas tales como nuseas, vmito, distencin abdominal, y dolor en la garganta, como ha sido reportado por otras preparaciones que contienen perxido de hidrgeno. Adems es

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importante mantener a las jeringas con agentes blanqueadores fuera del alcance de los nios para prevenir cualquier posible accidente.(30) 1.2.5. RESPUESTA DE LA MUCOSA EXPUESTA AL AGENTE BLANQUEADOR Se cree que varias sustancias activas de los blanqueadores desecaran las mucosas, hacindolas ms susceptibles a los agentes blanqueadores y sus productos de degradacin, muchas veces en un medio cido ms an cuando se usan blanqueadores de base anhidra. (15) Sobre irritacin en la mucosa, una concentracin alta de peroxido de hitrogeno (desde 30 a 35% es custica para las membranas mucosas y puede causar quemadura y blanqueamiento de la gingiva. El perxido de hidrgeno al 1% durante 6 a 48 horas result en dao epitelial e inflamacin aguda en el tejido conectivo suepitelial.(Martin y col. 1968). La aplicacin a largo plazo del perxido de hidrgeno del 3 o 30% en la bolsa de carrilo de un hamster dos veces a la semana result en cambios inflamatorios.(Weitzman y col. 1986). (30) Leonard R.; Haywood V.1997, en ensayos clnicos que usaron perxido de carbamida al 10% en frulas personalizadas, de 25 a 40% de los pacientes reportaron irritacin gingival durante el tratamiento.(31) 1.2.6. INFLAMACIN Se trata de una respuesta defensiva del organismo. La inflamacin consta de tres fases bsicas: (32) - Vasodilatacin y aumento de la permeabilidad de los vasos sanguneos.
-

Emigracin de clulas fagocitarias.

1.2.6.1. VASODILATACIN Y AUMENTO DE LA PERMEABILIDAD DE LOS VASOS SANGUNEOS Inmediatamente despus de producida la lesin del tejido, los vasos sanguneos de la zona alterada se dilatan y se hacen ms permeables. La vasodilatacin consiste en un aumento del dimetro de los vasos

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sanguneos. El aumento de la permeabilidad significa que el vaso permite que pase una mayor cantidad de materiales a travs de su pared. La permeabilidad hace que los materiales defensivos de la sangre pasen a dicha zona. (32) 1.2.6.2. EMIGRACIN DE LAS CLULAS FAGOCITARIAS Alrededor de una hora despus de que se inicie el proceso inflamatorio aparecen en escena los fagocitos. Los neutrfilos comienzan a adherirse a la superficie interna del endotelio de los vasos sanguneos en un proceso llamado marginacin. Cuando la respuesta inflamatoria progresa, los monocitos comienzan a seguir a los neutrfilos hacia la zona infectada. Una vez en los tejidos, los monocitos se transforman en macrfagos. Los neutrfilos predominan en las primeras etapas de la infeccin, pero tienden a morir rpidamente. Los macrfagos entran en escena horas despus. (32) 1.2.7. ANATOMIA DEL ESFAGO El esfago humano es un tubo muscular colapsable situado posterior a la trquea y con una longitud de 23 a 25 cm. Comienza en el extremo inferior de la laringofaringe, pasa a travs del mediastino anterior a la columna vertebral, cruza el diafragma a travs de una abertura denominada hiato esofgico y finaliza en la porcin superior del estmago.(32) Comunica la faringe con el estmago. Funcionalmente, el esfago se divide en esfnter esofgico superior (EES), esfnter esofgico inferior (EEI) y cuerpo esofgico, que se halla comprendido entre ambos esfnteres. (33) a. El esfnter esofgico superior (EES). Est formado por musculatura estriada y lo compone los msculos cricofarngeo y constrictor inferior de la faringe. Manomtricamente, su longitud aproximada es de 2-4cm. El msculo cricofarngeo, est inervado por fibras vagales, y los cuerpos celulares de las fibras motoras se localizan en el ncleo ambiguo.

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b. El cuerpo esofgico: Tiene una longitud aproximada de 22cm. Est comprendido en su parte proximal por msculo estriado, tanto en su capa circular longitudinal; a unos 4cm del EES las fibras estriadas son reemplazadas progresivamente por fibras lisas, de forma que la parte distal est compuesta slo por msculo liso. El msculo estriado del cuerpo esofgico est inervado por neuronas somticas motoras cuyas fibras eferentes discurren en los nervios vagos. El msculo liso esta inervado por el sistema nervioso autnomo con inervacin extrnseca compuesta por fibras vagales originadas en el ncleo motor dorsal y por fibras simpticas con origen en los segmentos espinales Dorsal V y Dorsal VI. La inervacin intrnseca est compuesta por la red nerviosa intramural, formada sobre todo por el plexo mientrico. c. El esfnter esofgico inferior: Se caracteriza por ser una zona de elevada presin intraluminal en la unin esfoggicogstrica: a) Consta de msculo circular con propiedades miognicas. b) Muestra una respuesta neural inhibidora en comparacin con la respuesta excitadora del msculo esofgico. La inervacin es simptica y parasimptico, con nervios simpticos procedentes de los cuerpos celulares situados en Dorsal VI - Dorsal x. (33) 1.2.7.1. HISTOLOGA En el tercio superior del esfago la musculatura es de tipo estriado, mientras que en los dos tercios inferiores es lisa. La mucosa esofgica es un epitelio escamoso estratificado con queratinizado. El esfago es el nico tramo del tubo digestivo que carece de serosa.(33) a. Mucosa: La mucosa del esfago consta de epitelio plano estratificado no queratinizado, lmina propia y muscular de la mucosa. Cerca del estmago, la mucosa esofgica tambin contiene glndulas mucosas. La mucosa del esfago se compone de epitelio escamoso estratificado, lamina propia fibroelstica y una capa de msculo liso, la musculares mucosae, dispuesta en sentido longitudinal.

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La mucosa del esfago est constituida por tres capas: epitelio, lmina propia y musculares mucosae.(32) La luz del esfago, recubierta por un epitelio escamoso estratificado no queratinizado de 0.5mm de grosor, suele estar colapsada y slo se abre durante el proceso de la deglucin. Dentro del epitelio se encuentran dispersas clulas presentadoras de antgeno, conocidas como clulas de Langerhans, que fagocitan y degradan antgeno en polipptidos pequeos denominados epitopos. La lmina propia no tiene caractersticas notables. Contiene glndulas esofgicas cardacas, que se localizan en dos regiones del esfago: un agrupamiento cerca de la faringe y el otro cerca de su unin con el estmago. La muscularis mucosae no muestra caractersticas especiales porque consiste nada ms en una capa de fibras de msculo liso orientadas en sentido longitudinal que se engruesan en la cercana del estmago. (33) b. Submucosa: La submucosa contiene tejido conjuntivo, vasos sanguneos y glndulas mucosas. La muscular externa del tercio superior del esfago est formada por msculo esqueltico, la del tercio medio por msculo esqueltico y liso y la del tercio inferior por msculo liso. La capa externa se denomina adventicia y no serosa debido a que el tejido conjuntivo laxo no est recubierto por epitelio (mesotelio) y a que el tejido se fusiona con el tejido conjuntivo de las estructuras circundantes. La submucosa del esfago se compone de tejido conectivo denso, fibroelstico, que aloja las glndulas esofgicas propiamente dichas. Las clulas mucosas tienen ncleo aplanado localizando en la base y acumulaciones apicales de grnulos secretorios llenos de moco. Al parecer el segundo tipo de clulas son las clulas serosas, con ncleo redondo, ubicado en la parte central. Los grnulos secretorios de estas clulas contienen la proenzima pepsingeno y el agente antibacteriano lisozima. Los conductos de estas glndulas vierten su secrecin a la luz del esfago.

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El plexo submucoso se encuentra en su localizacin usual dentro de la mucosa, en la cercana de la capa circular interna de la muscular externa.
(32)

c. Muscular externa y adventicia: La muscular externa del esfago se compone de clulas musculares equelticas y lisas. La muscular externa del esfago est dispuesta en dos capas, circular interna y longitudinal externa. Sin embargo, estas capas musculares son poco comunes porque estn compuestas tanto por fibras de msculo esqueltico como liso. La muscular externa del tercio superior del esfago tiene sobre todo msculo esqueltico; el tercio medio contiene tanto msculo esqueltico como liso y el tercio inferior slo incluye fibras de msculo liso. El esfago est recubierto por una adventicia hasta que perfora el diafragma, despus de lo cual se recubre de serosa. (32) 1.2.7.2. FISIOLOGA Las caractersticas fundamentales de la motilidad esofgica son el peristaltismo primario y secundario; y el tono del esfnter esofgico inferior.(34) El esfago no posee un esfnter anatmico pero presenta dos esfnteres fisiolgicos (el esfnter faringoesofgico y el esfnter gastroesofgico), que impiden el reflujo del esfago a la faringe y del estmago al esfago respectivamente. Un bolo que penetra al esfago se transporta al estmago por la accin peristltica de la muscular externar a un ritmo de unos 50mm/seg. (32) 1.2.7.2. ESOFAGITIS La lesin con inflamacin subsiguiente de la mucosa del esfago. La inflamacin de la mucosa esofgica, como veremos, puede tener muchas causas: (35)

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a. Patogenia: Entre la patogenia se encuentra la ingestin de irritantes, como alcohol, cidos o lcalis corrosivos (en intentos de suicidio), lquidos demasiado calientes (p.ej. el t caliente en irn) y el fumar en exceso. b. Morfologa: Se cree que la infiltracin por eosinfilos es la alteracin histolgica inicial, ya que se observa incluso en ausencia de hiperplasia de la capa basal. La presencia de neutrfilos intraepiteliales indica una lesin ms grave, como ulceracin ms que una esofagitis por reflujo per se. El resultado final en todas ellas es una inflamacin aguda grave, necrosis superficial y ulceracin, con formacin de tejido de granulacin, depsito de detritus purulento, y fibrosis final. 1.2.8. ANATOMA DEL ESTMAGO El estmago humano es una dilatacin del tracto gastrointestinal en forma de J situada justo por debajo del diafragma en las regiones epigstrica, umbilical e hipocondrio izquierdo del abdomen. La porcin superior del estmago es una continuacin del esfago. La porcin inferior desemboca en el duodeno, la primera porcin del intestino delgado. Los anatomistas dividen el estmago en cuatro reas principales: cardias, fondo, cuerpo y ploro. El cardias rodea la abertura superior del estmago. La porcin redondeada situada encima y a la izquierda del cardias es el fondo. Por debajo del fondo se encuentra la gran porcin central del estomago, el cuerpo. La regin inferior del estmago que conecta con el duodeno es el ploro (pyle = puerta; ouros = guardia). Presenta dos partes, el antro pilrico (antrum = cueva) o antro, que conecta con el cuerpo del estmago, y el conducto pilrico, que desemboca en el duodeno. Cuando el estmago esta vaco, la mucosa est dispuesta en grandes pliegues, los pliegues gstricos, que pueden observarse a simple vistas. El borde cncavo medial del estmago recibe el nombre de curvatura menor, y el borde convexo lateral es la curvatura mayor. El ploro comunica con el duodeno a travs de un esfnter denominado esfnter (vlvula) pilrico.

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El estmago se encarga de formar y procesar el alimento ingerido en un equilibrio cido viscoso que se conoce como qumico. El estmago, es la regin ms dilatada del conducto alimentario, es una estructura semejante a un saco que en el adulto promedio puede albergar alrededor de 1500ml de alimento y jugos gstricos en su distensin mxima. El bolo pasa a travs de la unin gastroesofgica al estmago, donde se convierte en un lquido viscoso que se conoce como quimo. El estmago vaca de manera intermitente al duodeno alcuotas de su contenido a travs de la vlvula o esfnter pilrico. El estmago licua el alimento, contina su digestin mediante la produccin de cido clorhdrico y de las enzimas pepsina, renina y lipasa gstrica, y la secrecin de hormonas paracrinas. (32) Es el rgano ms espacioso del tracto gastrintestinal con una capacidad de 1.500mL en el individuo adulto. Dos esfnteres constituyen los lmites del rgano. El cardias es el lmite superior, y el ploro, el inferior. La inervacin del estmago depende del Sistema Nervios Autnomo. Las fibras preganglionares del sistema simptico proceden del sexto al octavo segmento torcico de la mdula espinal, y las posganglionares del plexo celaco. La inervacin parasimptico proviene de los nervios vagos derecho e izquierdo que, recorriendo respectivamente las caras anterior y posterior de la curvatura menor, inervan todo el estmago formando en la regin antropilrica el nervio anterior y posterior de Latarjet. Los vagos conectan con el plexo mientrico de Auerbach y con el submucoso de Meissner. Las fibras procedentes de estos plexos inervan las glndulas y clulas secretoras y la musculatura gstrica. El sistema linftico del estmago se origina en la mucosa. La linfa drena el plexo submucoso y, desde ste, atraviesa la capa muscular hasta el plexo subseroso, desde donde alcanza los ganglios que siguen los trayectos arteriales. (33) 1.2.8.1. HISTOLOGA

28

Normalmente toda la superficie de la mucosa, as como el revestimiento de las fovolas, est formada por clulas superficiales foveolaes. Estas clulas son altas, columnares y mucosecretoras, tienen los ncleos en situacin basal y contienen abundantes grnulos de mucina, de tamao pequeo, en la regin supranuclear.(35) Histolgicamente el fondo y el cuerpo son idnticos. Todas las regiones gstricas muestran rugosidades, pliegues longitudinales de mucosa y submucosa, que desaparecen cuando el estmago se distiende. Las rugosidades permiten expandir el estmago conforme se llena con alimento y jugos gstricos. Adems el recubrimiento epitelial del estmago se invagina en la mucosa y forma fositas gstricas (foveolas), que son ms superficiales en la regin cardiaca y ms profundas en la pilrica. Las fositas gstricas incrementan el rea de superficie del recubrimiento del estmago. En el fondo de cada fosita gstrica desembocan cinco a siete glndulas gstricas de la lmina propia. La pared gstrica esta formado por las mismas cuatro capas bsicas que el resto del tracto gastrointestinal, con algunas modificaciones. (32) a. Mucosa del fondo: La inspeccin microscpica de la mucosa revela una capa de epitelio cilndrico simple (clulas mucosas superficiales) que contiene muchos canales estrechos, denominados criptas gstricas, que se extienden hasta la lmina propia. En la base de las criptas se encuentran las aberturas de las glndulas gstricas.
(29)

Las glndulas

contienen cuatro tipos de clulas secretoras: las clulas principales, las clulas parietales y las clulas mucosas secretan sus productos en la luz gstrica, mientras que las clulas G secretan la hormona gastrina a la sangre. (32) Las glndulas desembocan en unas depresiones de la mucosa denominadas foveolas gstricas. El epitelio glandular vara segn sea su localizacin cardial, fndica o antral.(33) La mucosa del fondo gstrico est constituida por los tres componentes usuales: 1) un epitelio que recubre la luz, 2) un tejido conectivo

29

subyacente, la lmina propia, 3) las capas de msculo liso que forman la muscularis mucosae.(32) b. Epitelio: El epitelio que reviste el estmago secreta un moco visible que se adhiere al recubrimiento gstrico y lo protege. La luz del fondo gstrico est recubierta por un epitelio cilndrico simple compuesto por clulas de recubrimiento de la superficie que elaboran una capa de moco viscoso que se conoce como moco visible. Las clulas de revestimiento de la superficie se continan dentro de las fositas gstricas y forman su recubrimiento epitelial. En la base de estas fositas tambin se encuentran clulas regenerativas, pero como son ms numerosas en el cuello de las glndulas gstricas, se estudian junto con tales glndulas. (32) c. Lmina propia: El tejido conectivo laxo, muy vascularizado, de la lmina propia tiene una poblacin abundante de clulas plasmticas, linfocitos, clulas cebadas, fibroblastos y clulas de msculoliso ocasionales. Gran parte de la lmina propia est ocupada por los 15 millones de glndulas gstricas fndicas (oxnticas) en la regin del fondo. Cada glndula fndica se extiende de la musculares mucosae a la base de la fosita gstrica y se subdivide en tres regiones: 1) istmo, 2) cuello y 3) base, de las cuales la ms larga es esta ltima. El epitelio cilndrico simple que constituye la glndula fndica est compuesto por seis tipos de clulas: de revestimiento de la superficie, parietales (oxnticas), regenerativas (madres), mucosas del cuello, principales (cimgenas) y clulas del sistema neuroendocrino difuso (SNED) (que tambin se conocen como clulas de captacin de precursores amnicos y descarboxilacin (APUD) y clulas enteroendocrinas). (32) c. Submucosa del estmago: El tejido conectivo denso irregular, colagenoso, de la submucosa gstrica tiene una red vascular y linftica abundante que riega la lmina propia y drena los vasos de la misma. La poblacin celular de la submucosa se semeja a la de cualquier tejido conectivo propiamente dicho. El plexo submucoso se sita en su localizacin usual, dentro de la mucosa en la cercana de la musculares externa. (32)

30

d. Muscular externa del estmago: La muscular externa del estmago se compone de tres capas de msculo liso: oblicua profunda, circular media y longitudinal externa. Las clulas de msculo liso de la muscular externa gstrica estn dispuestas en tres capas. La capa oblicua profunda no est bien definida excepto en la regin cardiaca. La capa circular media se observa con claridad a lo largo de la totalidad del estmago y se nota de manera especial en la regin pilrica, donde forma el esfnter pilrico. La capa muscular longitudinal externa es ms obvia en la regin cardiaca y el cuerpo del estmago pero est mal desarrollada en el ploro. La totalidad del estmago est revestida por una serosa, compuesta de un tejido conectivo delgado, laxo, subseroso, recubierto por un epitelio escamoso simple, liso, hmedo. (32) 1.2.8.2. FISIOLOGA Las funciones del estmago son: a) mantener una barrera antimicrobiana que proteja al tubo digestivo superior mediante la secrecin del cido; b) recibir los alimentos y retenerlos el tiempo necesario para que acten sobre ellos las secreciones gstricas, iniciando la digestin; c) evacuar el quimo al duodeno en la proporcin y el momento adecuados; d) originar seales de hambre y saciedad, y e) producir y liberar hormonas. Todas estas funciones de resumen en dos fundamentales: la motilidad gstrica y la secrecin de jugo gstrico. (33) Las porciones proximal y distal del estmago son distintas en sus funciones. La contraccin tnica del estmago proximal evita en condiciones normales el reflujo hacia el esfago, mientras el estmago distal promueve el paso hacia el duodeno. (34) 1.2.8.3. GASTRITIS Bajo el concepto de gastritis se incluye cualquier tipo de inflamacin de la mucosa gstrica, tanto aguda como crnica. En la actualidad existe acuerdo unnime sobre la necesidad de aplicar el concepto de gastritis,

31

en sentido estricto, slo a alteraciones de carcter inflamatorio de la mucosa gstrica en el examen anatomopatolgico. (33) La inflamacin puede ser predominantemente aguda, con infiltracin neutrofilica o crnica, con predominio de linfocitos o clulas plasmticas. La gastritis aguda es un proceso inflamatorio agudo de la mucosa, generalmente transitorio. La inflamacin puede acompaarse de hemorragia en la mucosa y, en los casos ms graves, de erosiones de la mucosa superficial. La forma erosiva grave es una causa importante de hemorragia digestiva. (35) a. Patogenia La gastritis aguda se asocia frecuentemente entre otros: Intentos de suicidio como cidos y lcalis. b. Morfologa En su forma ms leve la lmina propia muestra nicamente un edema moderado y una leve hiperemia. La superficie del epitelio est intacta, y se observan neutrfilos diseminados entre las clulas epiteliales de la mucosa. La presencia de neutrfilos por encima de la membrana basal (dentro del espacio epitelial) es anormal y denota una inflamacin activa (actividad) Con una lesin ms grave de la mucosa se puede producir erosin y hemorragia. La erosin denota prdida del epitelio superficial, que genera un defecto en la mucosa que no cruza la muscularis mucosa. Se acompaa de una infiltracin inflamatoria aguda importante, con salida de exudado fibrinopurulento hacia la luz. Puede producirse hemorragia independientemente, en forma de manchas oscuras, puntiformes, sobre una mucosa hipermica o bien en asociacin a la erosin. La erosin y la hemorragia concurrentes se denominan gastritis hemorrgica erosiva aguda. Se pueden afectar extensas reas de la mucosa gstrica, pero siempre de una forma superficial y muy raramente llega a afectar todo el espesor de la mucosa.

1.3.

DEFINICIN DE CONCEPTOS

32

a. Abfraccin: Perdida patolgica de la estructura dentaria a nivel de la unin cemento-adamantina causada por fuerzas biomecnicas resultantes de fuerzas oclusales deflectivas, capaces de generar tensiones que se concentran en la regin cervical, dando como resultado una flexin y fatiga del esmalte y dentina de la regin y consecuentemente su desprendimiento. (36) b. Bicarbonato de sodio: El Bicarbonato Sdico (NaHCO3), o hidrogenocarbonato de sodio, es un compuesto slido cristalino de color blanco muy soluble en agua, con un ligero sabor alcalino parecido al del carbonato sdico. Se puede encontrar como mineral en la naturaleza o se puede producir artificialmente. (37) c. Buffer: Cualquier sustancia que tiende a hacer menor el cambio de valor de PH que de otro modo se producira aadiendo cidos o lcalis. (36) d. Carboxipolimetileno: Polmero hidrosoluble, que acta como agente espesante para la elaboracin de productos qumicos; p.ej., en el uso de la cosmetologa. (36) e. Citoplasma: El citoplasma es la parte del protoplasma que en una clula eucariota se encuentra entre el ncleo celular y la membrana plasmtica. Consiste en una emulsin coloidal muy fina de aspecto granuloso, el citosol o hialoplasma, y en una diversidad de orgnulos celulares que desempean diferentes funciones. (37) f. Cromforo: Dcese del grupo qumico que da un color

determinado a la sustancia que la contiene y que se une con otros grupos (auxocromos) para formar colorantes. (37)

33

g. Dehiscencia: Abertura espontnea de una parte u rgano. Separacin de las capas de una herida quirrgica. (37) h. EDTA: Es un quelante que tiene la propiedad de fijar los iones metlicos de un determinado complejo molecular. (36) i. Epitelio: Revestimiento de las superficies internas y externas del cuerpo, que incluye el revestimiento de los vasos y otras pequeas cavidades. Consiste en clulas unidas por pequeas cantidades de sustancias intercelulares que actan de cemento. (37) j. Genotoxicidad: Alteracin o dao en el material hereditario, producido por algunos agentes ambientales fsicos, qumicos o biolgicos. (36) k. Inmunohistoquimico: Dicese de la aplicacin de las interacciones antgeno -anticuerpo a las tcnicas histoqumicas; p.ej., en el uso de la inmunofluorescencia. (37) l. Mucosa: Es el tejido hmedo que recubre rganos y cavidades corporales particulares en todo el cuerpo, incluyendo la nariz, la boca, los pulmones y el tracto gastrointestinal. Las glndulas junto con la mucosa secretan moco (un lquido espeso). (37) m. Necropsia: Examen de un cuerpo despus de su muerte, (37) n. Perhidrol: Es una forma estabilizada de agua oxigenada concentrada.(36)

o. Tejido conjuntivo: tejido conjuntivo o tejido conectivo, es el tejido biolgico de sostn, con funcin de unir otros tejidos y estructuras. (37)

34

CAPTULO II II.0. EL PROBLEMA

2.1. Formulacin del problema. 2.3. Limitaciones de la investigacin 2.5. Hiptesis. 2.2. Justificacin 2.4. Objetivos de la investigacin.

2.1.

FORMULACIN DEL PROBLEMA

En la actualidad muchos pacientes asisten a la consulta dental por motivos de esttica, solicitando la realizacin de tratamiento de blanqueamiento dental, el cual se logra a travs del uso de agentes blanqueadores. Entre los agentes blanqueadores se encuentra el perxido de carbamida, cuyo agente activo es el perxido de hidrgeno. Si bien su uso ha mostrado eficacia en el tratamiento de dientes vitales y no vitales, existen algunas controversias respecto a los efectos colaterales registrados en algunos estudios en animales de experimentacin y en seres humanos. En seres humanos se han reportado reacciones inflamatorias en mucosa bucal y cambios inflamatorios celulares. Por otro lado, existe la posibilidad de ingesta de perxido de carbamida, usado como agente blanqueador, o de la posibilidad de una ingesta accidental, sobre lo cual se desconoce el efecto que esto podra tener en

35

las mucosas expuestas como lo son el esfago y el estmago, por lo que se ha llevado ha cabo el presente estudio, el cual se ha planteado: Qu grado de respuesta inflamatoria produce la aplicacin de perxido de carbamida cuando es ingerido en la mucosa gstrica y esofgica en animales de experimentacin? 2.2.
-

JUSTIFICACIN

En la actualidad son muchos los pacientes que recurren a un blanqueamiento ambulatorio, sin que exista un control sobre la dosis empleada en el paciente, por lo que es necesario esclarecer las posibilidades de toxicidad por la ingesta accidental de componentes como el perxido de carbamida.

El perxido de carbamida empleado como agente blanqueador a mostrado en algunos casos reacciones inflamatorias y dao no slo al tejido mucogingival; sin embargo existe controversia respecto a su efecto, en mucosas expuestas por ingesta accidental como el esfago y estmago.

Uso frecuente de blanqueadores sin que se tenga conocimiento de los efectos txicos en pacientes, ni en animales de experimentacin.

2.3.

LIMITACIONES DE LA INVESTIGACIN

- Existen pocos estudios respecto al tema de investigacin.

36

2.4.

OBJETIVOS DE LA INVESTIGACIN

2.4.1. OBJETIVO GENERAL Determinar el grado de inflamacin producido por el perxido de carbamida en la mucosa gstrica y esofgica en animales de experimentacin. 2.4.2. OBJETIVOS ESPECFICOS
-

a) Determinar el grado de respuesta inflamatoria celular y vascular en el esfago de animales de experimentacin (ratas) con dosis orales de 50mg/kg, 100mg/kg y 500mg/kg de peroxido de carbamida. b) Determinar el grado de respuesta inflamatoria celular y vascular en el estmago de animales de experimentacin (ratas) con dosis orales de 50mg/kg, 100mg/kg y 500mg/kg de perxido de carbamina.

2.5.

HIPTESIS

El perxido de carbamida induce una respuesta inflamatoria aguda con infiltrado inflamatorio celular y vascular agudo en la mucosa del estmago y esfago cuando es ingerido.

37

CAPTULO III III.0. MATERIALES Y MTODOS

3.1. Tipo de investigacin. 3.3. Criterios de inclusin y exclusin. 3.5. Variables. 3.7. Tcnicas de recoleccin de datos. anlisis de resultados. 3.2. Poblacin y muestra. 3.4. Diseo metodolgico. 3.6. Recursos materiales. 3.8. Matriz de consistencia.

3.1.

TIPO DE INVESTIGACIN

Experimental: Porque se pretende determinar la relacin de causalidad entre las variables Prospectivo: Por el tipo de anlisis de las variables llevada a cabo en un tiempo determinado en el presente. 3.2. POBLACIN Y MUESTRA

48 Ratas Albinas machos Holtzman entre 180 a 315 g de peso aproximadamente fueron empleadas en el estudio, luego distribuidas aleatoriamente: - Grupo # 1: 24 ratas (grupo experimental). 8 Ratas que recibieron 50mg/kg de peso de perxido de carbamida. 8 Ratas que recibieron 100mg/kg de peso de perxido de carbamida.

38

8 Ratas que recibieron 500mg/kg de peso de perxido de carbamida. - Grupo # 2: 24 ratas (Grupo control) 8 Ratas que recibieron suero fisiolgico a un volumen equivalente del grupo experimental que recibieron 50mg/kg de peso de perxido de carbamida. 8 Ratas que recibieron suero fisiolgico a un volumen equivalente del grupo experimental que recibieron 100mg/kg de peso de perxido de carbamida. 8 Ratas que recibieron suero fisiolgico a un volumen equivalente del grupo experimental que recibieron 500mg/kg de peso de perxido de carbamida. 3.3 CRITERIOS DE INCLUSIN Y EXCLUSIN

Criterios de inclusin Ratas machos adultas saludables. Ratas con peso de 180 a 315 g.

Con la misma dieta Criterios de exclusin

Ratas sin certificado de sanidad Que no sean de la misma especie (Holtzman)

3.4.

DISEO METODOLGICO

Comparativo Se contrastaron las muestras para determinar los probables cambios entre ellas. Transversal: Al efectuar una sola observacin a las 24 horas de los efectos adversos de la ingesta de perxido de carbamida.

39

3.5.

VARIABLES
VARIABLE INDEPEDIENTE.- Perxido de carbamida. Dimensin: - Perxido de carbamida. - Suero fisiolgico. Indicador: - Grupo experimental - Grupo control

VARIABLE DEPEDIENTE.- Respuesta inflamatoria. Dimensin: a. Respuesta inflamatoria esfago). Indicador: - Leve - Moderada - Severa - Ausencia de respuesta celular Celular y Dimensin: b. Respuesta inflamatoria esfago) Indicador: - Leve - Moderada - Severa -Ausencia vascular de respuesta vascular y

(estmago

(estmago

VARIABLE INTERVINIENTE.- Tiempo de exposicin. Dosis Dimensin: a. Horas Indicador: 24 horas Dimensin: b. Dosis Indicador: 50, 100 y 500mg/kg (dosis diferenciales)

3.6.
I.

RECURSOS MATERIALES Material e instrumental para la dilucin del perxido de carbamida:

Agente blanqueador opalescente (perxido de carbamida al 10%) Fiolas (100 ml c/u) Pipetas (5 ml c/u) Agua destilada (1L)

40

Papel crap (1 pliego) Papel glacin (1 pliego) Pabilo Campos Guantes de ltex

* Equipos: -

Horno, Marca: Boekel Autoclave, Marca: Poron Balanza analtica. Marca: Metler. Sensibilidad: Mx. 310 g. Min. 0.02 g.

II. -

Material para el clculo de dosis: Lapiceros. Calculadora. Fichas de registro de peso de las ratas y volumen de administracin de perxido de carbamida (grupo experimental) y suero fisiolgico (grupo control).

III. -

Material e instrumental para la administracin de las dosis: 48 ratas albinas macho Holtzman Jaulas de acero Perxido de carbamida Suero fisiolgico Sonda orogstrica Jeringas de tuberculina Guantes para exmen Mascarillas Campos Material e instrumental para la toma de muestra de esfago y estmago:

IV.

41

Mango de bistur # 4 Hojas de bistur # 22 Tijeras rectas Pinzas de diseccin con uas Tijeras Metzenbaum Frascos viales Formol al 10% Guantes para exmen. Mascarillas Campos Engrapador Grapas Pedazos de cartn (3.5 x 1.2 cm y 4 x 1.4 cm) Balanza electrnica. Marca: Sohnle. Mx.: 5 kg. D: 1 g. Cmara digital. Marca: Sony / 5.0 mega pxeles / zoom digital de 12 x. Material e instrumental para la evaluacin histopatolgica: Lminas porta-objetos. Lminas cubre-objetos. Fichas de recoleccin de datos CDs

V. -

* Equipos:

*Equipos: Microscopio ptico. Marca: Nikon, Exlipse E 400 Cmara digital. Marca Olympus / 3.2 mega pxeles / zoom digital de 7.5 x Ordenador Pentium III, para el procesamiento de datos, con los siguientes paquetes informativos: Word Office XP Excel Office XP. Power Point XP.

42

Programa estadstico

*Otros:
-

Alimento balanceado para ratas (nuevo papeadito sper premium purina) Aserrn Agua Violeta de genciana Hisopos. Lapiceros (azul, rojo) Plumones Lpiz Borrador Cuaderno

Recursos Humanos: Bachiller de Odontologa Profesora de la USMP (asesora) Qumico-Farmacutico de la UNMSM. Mdico-Veterinario de la UNMSM. Patloga del Instituto de Salud del Nio.

Recursos Institucionales:
-

Servicio Acadmico Asistencial de Anlisis Clnicos (S.A.A.A.C.) de la Facultad de Farmacia y Bioqumica de la UNMSM. Facultad de Medicina-Veterinaria de la UNMSM. Instituto de Salud del Nio. Departamento de Anatoma- patolgica.

3.7.

TCNICAS DE RECOLECCIN DE DATOS

a. Seleccin de la muestra

43

Se coordin con el Bioterio de la UNMSM para la seleccin de las ratas que cumplieran con los requisitos o criterios de inclusin: a) ratas albinas macho de la raza Holtzman; b) ratas con peso entre 180 y 315 g.; c) ratas con certificado de sanidad; d) ratas alimentadas con la misma dieta (alimento balanceado). b. Procedimiento para la dilucin del perxido de carbamida al 10%: Previo a las diluciones del perxido de carbamida al 10%, se procedi a la esterilizacin del material e instrumental de laboratorio a utilizar. En ste caso, tanto el papel glacin, las fiolas y pipetas, se envolvieron con papel crap y se sujetaron con pabilo, dejando solamente libre la lnea marcatoria (menisco) de las fiolas. Esto se hizo con un doble propsito, evitar la exposicin a la luz a las preparaciones ya que sta podra descomponer el perxido y para poder observar el nivel de enrase hasta que la dilucin alcance el menisco de la fiola. La esterilizacin se realiz en un horno a una temperatura de 180C por tres horas. Tambin se procedi a esterilizar 1 litro de agua destilada en Autoclave a una temperatura de 121C por 20 minutos, para la dilucin del peroxido de carbamida al 10%. Las diluciones se realizaron de acuerdo a las siguientes dosis establecidas: 50mg/kg de peso, 100mg/kg de peso y 500mg/kg de peso. Para una dosis de 50 mg/kg, de la jeringa de Opalescence (perxido de carbamida al 10%) se descarg los 50 mg sobre el papel glacin y se pes en la balanza analtica. Luego, con mucho cuidado, se coloc el papel glacin a modo de embudo en la boca de la fiola y se lav varias veces con agua destilada estril hasta no dejar residuos de gel sobre el papel glacin, luego se completo con el agua estril hasta su enrase. Finalmente, se agit para homogenizar la dilucin. El mismo procedimiento se realiz, con las dosis de 100mg/kg y 500mg/kg, las cuales se refrigeraron y rotularon hasta el da siguiente de su aplicacin en los animales de experimentacin. c. Procedimiento para clculo de dosis: A los tres grupos experimentales se les administr las diluciones del

44

perxido de carbamida de acuerdo a las dosis establecidas para cada grupo. El volumen a administrar para cada rata fue calculado mediante regla de tres simple de acuerdo a las dosis (50mg/kg, 100mg/kg y 500mg/kg) de acuerdo al peso de cada animal y fueron registrados en dos fichas: registro de peso de ratas y volumen de administracin de perxido de carbamida (grupo experimental) y registro de peso de ratas y volumen de administracin de suero fisiolgico (grupo control), (vase pg.) d. Procedimiento para la administracin de las dosis: Los animales de experimentacin, fueron alimentados con una misma dieta (alimento balanceado - papeadito), hasta alcanzar el peso requerido para realizar el presente estudio. Las ratas estuvieron sujetas a ayuno desde la tarde anterior hasta la maana del da siguiente a la aplicacin de las dosis, pero tuvieron acceso al agua ad libitum. Las ratas fueron marcadas previamente con violeta de genciana, para un mejor manejo e identificacin y luego distribuidas a cada grupo de exposicin (experimental y control), que se realiz aleatoriamente. Fueron divididas en 2 grupos; el primer grupo correspondi al grupo experimental conformado por 24 ratas distribuidas en tres grupos de 8 ratas de acuerdo a las dosis de administracin de perxido de carbamida: 50mg/Kg, 100mg/Kg. y 500mg/Kg. El segundo grupo (Control), conformado por 24 ratas distribuidas en tres grupos de 8 ratas de acuerdo al volumen equivalente al grupo experimental. Las diluciones y el suero fisiolgico se administr por va oral, mediante una jeringa de tuberculina y sonda orogstrica. La dilucin se administr inmovilizando al animal, sujetndolo firmemente del cuello y la cola, en posicin vertical con la cabeza hacia arriba. En sta posicin, se introdujo la sonda por la boca, deslizndola lentamente hasta llegar al 1/3 distal del esfago, y a ste nivel se deposit una pequea cantidad de la solucin. Finalmente, se profundiza un poco ms hasta llegar al estmago, donde se dej el resto de la solucin. El mismo procedimiento se realiz con el grupo control.

45

Despus de la administracin de las dosis, a los animales se les coloc en sus respectivas jaulas. Se las observ desde la administracin hasta por un periodo de cuatro horas, sin mostrar reaccin alguna. Fueron alimentadas con alimento balanceado y agua ad libitum 4 horas despus de administrarse las diluciones y el suero fisiolgico a cada grupo respectivamente. Las dosis estuvieron basadas en las recomendaciones de la sociedad de toxicologa Britnica.(38) e. Procedimiento para la toma de muestra de esfago y estmago: Los animales de todos los grupos fueron sacrificados 24 horas despus de la administracin de las soluciones, por dislocacin cervical (desnucamiento cervical). Luego, con el instrumental quirrgico, se procedi a la diseccin y extraccin del esfago y estmago. Una vez obtenidas las muestras, se extendieron en unos pedazos de cartn de 4 x 1.4cm y 3.5 x 1.2cm (cortados de acuerdo al dimetro de la boquilla y tamao de los frascos viales) y con mucho cuidado se fijaron los extremos de las muestras con grapas, de tal forma que el tejido qued desplegado y con la mucosa hacia arriba. Luego, los rganos se colocaron en los frascos con formol al 10% para luego ser evaluados por el histopatlogo. Los frascos se rotularon con las iniciales de cada animal, el tipo de tejido a evaluar (esfago y estmago) y segn al grupo al que pertenecan (experimental y control), pero slo se registr como nmeros (I y II) ms no se seal la dosis (50mg/kg, 100mg/kg y 500mg/kg). Esto se hizo con la finalidad de no interferir en los resultados de la lectura histolgica, ya que la evaluacin de la respuesta inflamatoria y vascular estuvo a cargo de un patlogo, quien permaneci ciego, desconociendo el grupo de exposicin (experimental y control) y dosis (50mg/kg, 100mg/kg y 500mg/kg) al que pertenecan las muestras con respecto al tratamiento de los animales. Los datos que se obtuvieron de la evaluacin histopatolgica fueron registrados en una ficha de recoleccin de datos (vase pg), la cual

46

comprenda de dos partes y que tambin fue completada en dos tiempos, primero por el patlogo, quien report los hallazgos histopatolgicos encontrados en la observacin al microscopio y despus por el bachiller, quien complet la primera parte de la ficha con el nombre y peso de cada animal, medicacin administrada (perxido de carbamida suero fisiolgico) y dosis indicada (50mg/kg, 100mg/kg y 500mg/kg). Dicha ficha fue elaborada teniendo en cuenta los siguientes aspectos: -Tipo de muestra (esfago y estmago). -Grupo de estudio (de acuerdo a las dosis indicadas). f. Procedimiento para la evaluacin histopatolgica: Una vez realizadas las necropsias, las muestras obtenidas fueron sometidas a la tcnica histolgica convencional de inclusin en parafina y coloraciones con hematoxilina y eosina. El procedimiento de la tcnica para la preparacin de las muestras fue la siguiente: f.1. Inclusin en Parafina - Obtencin de la muestra en formol al 10% por 24 horas. - Cortes para el procesamiento de 3-4 m. - Lavado en agua para quitarle el formol. - Deshidratacin en alcoholes (para eliminar el agua de los tejidos): Alcohol de 80% por 1 hora Alcohol de 90% por 1 hora Alcohol de 96% por 1 hora Alcohol de 98% por 1 hora Alcohol de 100% absoluto por 1 hora

- Aclaramiento o diafanizacin en Xilol Q.P (miscible con la parafina), que es sometido a 2 baos de Xilol:

Xilol I Q.P (quimicamente puro) por 1 hora Xilol II Q.P (quimicamente puro) por 1 hora

- Inclusin con parafina fundida. Este procedimiento se realiz 2 veces por 1 cada uno.

47

- Confeccin del bloque (la pieza se coloc en un molde rectangular que contena parafina fundida). - Enfriamiento de los bloques de parafina en hielo. - Cortes en secciones delgadas en el micrtomo de 4-6 m. - Secado en la estufa a 60C por 1 2 horas como mnimo. f.2. Tcnica de Coloracin con Hematoxilina Eosina - Eliminacin de la parafina con Xilol Q.P por 7 minutos - Lavado en alcohol de 96% por unos segundos - Lavado en agua corriente o de cao. - Tincin con Hematoxilina de Harris de 3- 5 minutos. - Lavado en agua corriente. - Se sumerge en agua acidulada al 1% por unos segundos. - Lavado en agua corriente. - Se sumerge en agua carbonatada solucin saturada por unos segundos. - Lavar en agua corriente. - Sumergir en solucin Eosina por 2 minutos (colorea citoplasma de un color rosa) - Lavado en agua corriente. - Deshidratacin en alcoholes:

Alcohol de 96% (2 cambios por dos minutos en cada alcohol) Alcohol de 100% ( 2 cambios por dos minutos en cada alcohol) Xilol I Q.P (quimicamente puro) por 1 minuto. Xilol II Q.P (qumicamente puro) por 1 minuto

- Aclaramiento con Xilol:

- Montaje con blsamo de Canad. Una vez que la muestra fue sometida a los procedimientos de la tcnica histolgica (inclusin en parafina y coloracin con hematoxilina y eosina), descrita arriba, se deriv al patlogo para su estudio bajo microscopa ptica. Para la evaluacin de las poblaciones celulares presentes en el proceso inflamatorio se empleo tcnicas de histometra.

48

Las observaciones histolgicas fueron basadas en la descripcin de las observaciones microscpicas de cada uno de los cortes del tejido, del cual se obtuvo microfotografas de campo, a un aumento de 40x. g. Respuesta inflamatoria aguda de esfago y estmago: La respuesta inflamatoria aguda se bas en la siguiente clasificacin (a un campo de 40x):
1.

Respuesta inflamatoria aguda leve: cuando a la observacin

histopatolgica se determin por la presencia de PMN de 5 a 10 clulas por campo.

2.

Respuesta inflamatoria aguda moderada: cuando a la observacin

histopatolgica se determin por la presencia de PMN de 10 a 15 clulas por campo.

3.

Respuesta inflamatoria aguda severa: cuando a la observacin

histopatolgica se determin por la presencia de PMN de 15 a ms clulas por campo.

4.

Ausencia de respuesta inflamatoria aguda: cuando no se observ

infiltrado inflamatorio celular, ni clulas por campo. h. Respuesta vascular aguda de esfago y estmago: La respuesta vascular aguda se bas en la siguiente clasificacin (a un campo de 40x):
1.

Respuesta

vascular

aguda

leve:

cuando

la

observacin

histopatolgica se determin por la presencia de: vasodilatacin (ligero cambio del calibre vascular),
2.

vasocongestin (pocas clulas

sanguneas-hemates) y neoformacin (poca cantidad de vasos). Respuesta vascular aguda moderada: cuando a la observacin histopatolgica se determin por la presencia de: vasodilatacin (regular cambio del calibre vascular), vasocongestin (mediana cantidad de clulas sanguneas-hemates) y neoformacin (regular cantidad de vasos).

49

3.

Respuesta

vascular

aguda

severa:

cuando

la

observacin

histopatolgica se determin por la presencia de: vasodilatacin (marcado aumento del calibre vascular), vasocongestin (numerosas clulas sanguneas-hemates) y neoformacin (abundantes vasos).
4.

Ausencia de respuesta vascular: cuando no se evidenci los aspectos antes mencionados.

3.8.

ANLISIS DE LOS RESULTADOS

Para comparar las diferencias entre los grupos experimental y control en cuanto a los cambios histopatolgicos sean celulares o de tipo vascular se us la prueba, Kruskall Wallis y Mann Whitney, con = 0.05.

50

3.9.
TTULO PROBLEMA OBJETIVOS MARCO TERICO
Agente Blanqueador pBlanqueamiento en casa o Ambulatorio Caracterizacin de la Prueba toxicolgica Toxicidad a la exposicin del agente blanqueador Respuesta de la mucosa expuesta al agente blanqueador Inflamacin Esfago grado Estmago

MATRIZ DE CONSISTENCIA
HIPTESIS OPERACIONALIZACIN DE VARIABLES VARIABLES
El perxido de carbamida induce una respuesta inflamatoria aguda con infiltrado inflamatorio celular y vascular agudo en la mucosa del estmago y esfago cuando es ingerido.

METODOLOGA ESCAL A
Nominal Diseo de investigacin Comparativo Transversal. Tipo de investigacin Experimental. Prospectivo. Transversal. 48 Ratas Albinas machos Holtzman entre 180 a 315 g de peso aproximadamente fueron empleadas en el estudio, luego distribuidas aleatoriamente: - Grupo # 1: 24 ratas (grupo experimental). 8 Ratas que recibieron 50mg/kg de peso de perxido de carbamida. 8 Ratas que recibieron 100mg/kg de peso de perxido de carbamida. 8 Ratas que recibieron 500mg/kg de peso de perxido de carbamida. - Grupo # 2: 24 ratas (Grupo control) 8 Ratas que recibieron suero fisiolgico a un volumen equivalente del grupo experimental que recibieron 50mg/kg de peso de perxido de carbamida. 8 Ratas que recibieron suero fisiolgico a un volumen equivalente del grupo experimental que recibieron 100mg/kg de peso de perxido de carbamida. 8 Ratas que recibieron suero fisiolgico a un volumen equivalente del grupo experimental que recibieron 500mg/kg de peso de perxido de carbamida.

INDICADORES

Reaccin inflamatoria de la mucosa gstrica y esofgica al perxido de carbamida en animales deexperimentacin

Qu grado de respuesta inflamatoria produce la aplicacin de perxido de carbamida en la mucosa gstrica y esofgica en animales de experimentacin?

OBJETIVO GENERAL Determinar el grado de inflamacin producido por el perxido de carbamida en la mucosa gstrica y esofgica en animales de experimentacin.

VARIABLE INDEPEDIENTE Perxido de carbamida Grupo experimental al 10%. Grupo control VARIABLE DEPEDIENTE.Reaccin inflamatoria.

OBJETIVOS ESPECFICOS Determinar el de respuesta inflamatoria celular y vascular en el esfago de animales de experimentacin (ratas) con dosis orales de 50mg/kg, 100mg/kg y 500mg/kg de peroxido de carbamida.

a. Respuesta inflamatoria celular. Indicador: Leve Ordinal Moderada Severa Ausencia de inflamacin celular b. Respuesta inflamatoria vascular. Indicador: Leve Ordinal Moderada Severa Ausencia de inflamacin vascular.

VARIABLE INTERVINIENTE. Tiempo de exposicin Dosis

a. Horas Indicador: 24 horas b. Dosis Indicador: 50mg/Kg 100mg/Kg 500mg/Kg

Nominal

y Ordinal

51

TTULO

PROBLEMA OBJETIVOS

MARCO TERICO
-

HIPTESIS

OPERACIONALIZACIN DE VARIABLES VARIABLES INDICADORES ESCALA

METODOLOGA

Instrumento: Ficha para registras cambios histopatolgicos a nivel celular y vascular

52

REGISTRO DE PESO DE RATAS Y VOLUMEN DE PERXIDO DE CARBAMIDA AL 10% Y SUERO FISIOLGICO PARA SER ADMINSTRADO
DOSIS 50mg Nombre del animal Peso (gr) 1 2 3 4 5 6 7 8 Oreja Derecha (O.D) Oreja Izquierda (O.I) Cabeza (CA) Nuca (NU) Pata Delantera Derecha (P.D.D) Pata Delantera Izquierda (P.D.I) Pata Trasera Derecha (P.T.D) Pata Trasera Izquierda (P.T.I) 237 197 196 200 190 217 192 217 Volumen a administrar (ml) 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1 Peso (gr) 210 193 220 207 196 180 223 210 Volumen a administrar (ml) 0.2 0.2 0.2 0.2 0.2 0.2 0.2 0.2 Peso (gr) 250 235 261 302 262 277 254 269 Volumen a administrar (ml) 1.3 1.1 1.3 1.5 1.3 1.4 1.3 1.4 100mg 500mg

CONTROL 1 2 3 4 5 6 7 8 Lomo (L) Base de Cola (B.C) Cola (Co) Punta de Cola (P.C) Lomo lateral derecho (L.L.D) Lomo lateral izquierdo (L.L.I) Nuca lateral derecha (N.L.D) Nuca lateral izquierda (N.L.I) 188 199 189 195 214 198 208 203 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1 0.1 311 280 300 215 198 205 199 224 0.3 0.3 0.3 0.2 0.2 0.2 0.2 0.2 244 246 180 230 270 254 265 252 1.2 1.2 0.1 1.2 1.4 1.3 1.3 1.3

53

FICHA

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FOTOGRAFAS

55

Foto-1: Material e instrumental para las diluciones del perxido de carbamida al

10%: agua estril, 3 fiolas (100ml c/u), 3 pipetas (5ml c/u), papel glacin, agente blanqueador Opalescente (perxido de carbamida al 10%), guantes de diagnstico, campo.

56

Foto-2: Esterilizacin del agua destilada (1L), por calor hmedo en Autoclave, a

una To: 121oC x 2 horas.

Foto-3: Esterilizacin de las fiolas, pipetas y papel glacin, por calor seco en

Horno, Marca: Boekel, a una To: 150oC x 1 hora.

Foto-4: Descarga del gel blanqueador de una jeringa de Opalescence (perxido

de carbamida al 10%) sobre papel glacin para pesar y determinar las 3 dosis establecidas de: 50, 100 y 500mg en una balanza analtica. Marca: Metler. Sensibilidad: Mx.: 310gr. Mn: 0.02gr

57

Foto-5: Disposicin del papel glacin a modo de embudo en la boca de la fiola

para que el gel blanqueador se deslice y caiga dentro de sta mediante el chorro continuo de agua estril por medio de una pipeta. Este procedimiento se repite las veces que sean necesarias, hasta lavar y no dejar residuos de gel sobre el papel glacin.

58

Foto-6: Material e instrumental para la aplicacin de las diluciones del

perxido de caramida al 10%: suero fisiolgico, fiolas con las diluciones del perxido de carbamida al 10%(50, 100 y 500mg), balanza electrnica, jeringas de tuberculina, sonda orogstrica, guantes de diagnstico, campo.

Foto-7: Determinacin del peso de la rata mediante una balanza electrnica, la

cual se registr en la ficha de evaluacin para luego, mediante regla de tres simple se obtenga el volumen a ser administrado.

59

Foto-8: Sonda orogstrica utilizada para aplicar las diferentes dosis por va oral.

Foto-9: Introduciendo la sonda en la boca de la rata, la cual se desliza hasta el

tercio distal del esfago donde se deja la mitad de la dosis y finalmente se profundiza hasta llegar al estmago, donde se vierte el resto.

60

Foto-10: Las ratas son colocadas en sus jaulas luego de la aplicacin de sus

respectivas dosis, se las observa algo inquietas, van de un lado a otro. Se continu con la observacin dos y cuatro horas despus sin manifestar reaccin adversa alguna.

61

Foto-11: Material e instrumental para la toma de muestra de esfago y

estmago: frascos viales rotulados, formol al 10%, tijera recta, pinza de diseccin con ua, mango de bistur #4, hojas de bistur #22, tijera metzenbaum, guantes de diagnstico, campo.

Foto-12: Rata sacrificada 24 despus de la aplicacin de la dosis. Diseccin del

esfago y estmago.

62

Foto-13: Una vez obtenidas las muestras, se extendieron en pedazos de cartn

de 4 x 1.4cm y 3.5 x 1.2cm (cortados de acuerdo al dimetro de la boquilla y tamao de los frascos viales). Se fijaron los extremos con grapas, de tal forma que el tejido quede extendido y con la mucosa hacia arriba.

Foto-14: Los rganos son colocados en los frascos con formol al 10% para ser

evaluados por el histopatlogo.

63

fotos de evaluacin histopatolgica son 8 pag

64

65

66

67

68

69

70

71

CAPTULO IV IV. RESULTADOS

Se presentan los siguientes cuadros estadsticos donde se evala carbamida al 10% en animales de experimentacin. la

reaccin inflamatoria de la mucosa gstrica y esofgica al perxido de

72

CUADRO N 1
RESPUESTA INFLAMATORIA CELULAR DEL ESOFAGO AL PEROXIDO DE CARBAMIDA CON DOSIS DE 50 mg/Kg 100 mg/Kg y 500 mg/Kg.

Estadstica de Prueba Kruskal- Wallis

Peroxido de Carbamida al 10% 50 mg 100 mg 500 mg Normal N 2 0 0 % 25.0 0.0 0.0 N 2 0 2 Leve Respuesta Inflamatoria en el Esofago Moderado Severo % N % N % 25.0 0.0 25.0 3 0 1 37.5 0.0 12.5 1 8 5 12.5 100.0 62.5 Total N 8 8 8 % 112.5 100.0 100.0 0.000 p

GRFICO N 1
RESPUESTA INFLAMATORIA CELULAR DEL ESOFAGO AL PEROXIDO DE CARBAMIDA CON DOSIS DE 50 mg/Kg 100 mg/Kg y 500 mg/Kg.

100.0 80.0 60.0 40.0 20.0 0.0 % Normal % Leve % Moderado % Severo

Respuesta Inflamatoria en el Esofago 50 mg 100 mg 500 mg

INFERENCIA DE HIPTESIS Nivel de significancia =0.05 Hiptesis Ho: La respuesta inflamatoria celular en el Esfago de las ratas con el uso de Peroxido de Carbamida al 10% no difiere al administrarse dosis de 50 mg, 100 mg y 500 mg. H1: La respuesta inflamatoria celular en el Esfago de las ratas con el uso de Peroxido de Carbamida al 10% si difiere al administrarse dosis de 50 mg, 100 mg y 500 mg. Nivel de significancia =0.05 Regin critica Si p-valor es menor que 0.05 rechazar Ho Si p-valor mayor que 0.05 aceptar Ho Dado que p =0.000 < 0.05 entonces aceptar H1 y rechazar Ho Conclusin La respuesta inflamatoria celular en el Esfago de las ratas con el uso de Peroxido de Carbamida al 10% si difiere al administrarse dosis de 50 mg, 100 mg y 500 mg.

73

CUADRO N 2
RESPUESTA VASCULAR INFLAMATORIA DEL ESOFAGO AL PEROXIDO DE CARBAMIDA CON DOSIS DE 50 mg/Kg 100 mg/Kg y 500 mg/Kg.

Estadstica de Prueba Kruskal- Wallis

Peroxido de Carbamida al 10% 50 mg 100 mg 500 mg Normal N 0 0 0 % 0.0 0.0 0.0 N 5 7 0 Leve Respuesta Vascular del Esofago Moderado Severo % N % N % 62.5 87.5 0.0 3 1 8 37.5 12.5 100.0 0 0 0 0.0 0.0 0.0 Total N 8 8 8 % 100.0 100.0 100.0 0.002 p

GRFICO N 2
RESPUESTA VASCULAR INFLAMATORIA DEL ESOFAGO AL PEROXIDO DE CARBAMIDA CON DOSIS DE 50 mg/Kg 100 mg/Kg y 500 mg/Kg.

100.0 80.0 60.0 40.0 20.0 0.0 % Normal % Leve % Moderado % Severo

Respuesta Vascular Inflamatoria del 50 mg 100 mg 500 mg

INFERENCIA DE HIPTESIS Nivel de significancia =0.05 Hiptesis Ho: La respuesta vascular inflamatoria en el Esfago de las ratas con el uso de Peroxido de Carbamida al 10% no difiere al administrarse dosis de 50 mg, 100 mg y 500 mg. H1: La respuesta vascular inflamatoria en el Esfago de las ratas con el uso de Peroxido de Carbamida al 10% si difiere al administrarse dosis de 50 mg, 100 mg y 500 mg. Nivel de significancia =0.05 Regin critica Si p-valor es menor que 0.05 rechazar Ho Si p-valor mayor que 0.05 aceptar Ho Dado que p =0.002 < 0.05 entonces aceptar H1 y rechazar Ho Conclusin La respuesta vascular inflamatoria en el Esfago de las ratas con el uso de Peroxido de Carbamida al 10% si difiere al administrarse dosis de 50 mg, 100 mg y 500 mg.

74

CUADRO N 3
RESPUESTA INFLAMATORIA CELULAR DEL ESTOMAGO AL PEROXIDO DE CARBAMIDA CON DOSIS DE 50 mg/Kg 100 mg/Kg y 500 mg/Kg.

Estadstica de Prueba Kruskal- Wallis

Peroxido de Carbamida al 10% 50 mg 100 mg 500 mg Normal N 0 0 0 % 0.0 0.0 0.0 N 2 4 4 Leve Respuesta Inflamatoria del Estomago Moderado Severo % N % N % 25.0 50.0 50.0 3 2 2 37.5 25.0 25.0 3 2 2 37.5 25.0 25.0 Total N 8 8 8 % 100.0 100.0 100.0 0.579 p

GRFICO N 3
RESPUESTA INFLAMATORIA CELULAR DEL ESTOMAGO AL PEROXIDO DE CARBAMIDA CON DOSIS DE 50 mg/Kg 100 mg/Kg y 500 mg/Kg.

50.0 40.0 30.0 20.0 10.0 0.0 % Normal % Leve % Moderado % Severo

Respuesta Inflamatoria del Estomago 50 mg 100 mg 500 mg

INFERENCIA DE HIPTESIS Nivel de significancia =0.05 Hiptesis Ho: La respuesta inflamatoria celular en el Estomago de las ratas con el uso de Peroxido de Carbamida al 10% no difiere al administrarse dosis de 50 mg, 100 mg y 500 mg. H1: La respuesta inflamatoria celular en el Estomago de las ratas con el uso de Peroxido de Carbamida al 10% si difiere al administrarse dosis de 50 mg, 100 mg y 500 mg. Nivel de significancia =0.05 Regin critica Si p-valor es menor que 0.05 rechazar Ho Si p-valor mayor que 0.05 aceptar Ho Dado que p = 0.948 > 0.05 entonces rechazar H1 y aceptar Ho Conclusin La respuesta inflamatoria celular en el Estomago de las ratas con el uso de Peroxido de Carbamida al 10% no difiere al administrarse dosis de 50 mg, 100 mg y 500 mg.

75

CUADRO N 4
RESPUESTA VASCULAR INFLAMATORIA DEL ESTOMAGO AL PEROXIDO DE CARBAMIDA CON DOSIS DE 50 mg/Kg 100 mg/Kg y 500 mg/Kg.

Estadstica de Prueba Kruskal- Wallis

Peroxido de Carbamida al 10% 50 mg 100 mg 500 mg Normal N 0 0 0 % 0.0 0.0 0.0 N 4 7 0 Leve Respuesta Vascular del Estomago Moderado Severo % N % N % 50.0 87.5 0.0 4 1 7 50.0 12.5 87.5 0 0 1 0.0 0.0 12.5 Total N 8 8 8 % 100.0 100.0 100.0 0.002 p

GRFICO N 4
RESPUESTA VASCULAR INFLAMATORIA DEL ESTOMAGO AL PEROXIDO DE CARBAMIDA CON DOSIS DE 50 mg/Kg 100 mg/Kg y 500 mg/Kg.

90.0 80.0 70.0 60.0 50.0 40.0 30.0 20.0 10.0 0.0 % Normal % Leve % Moderado % Severo

Respuesta Vascular Inflamatoria del 50 mg 100 mg 500 mg

INFERENCIA DE HIPTESIS Nivel de significancia =0.05 Hiptesis Ho: La respuesta vascular inflamatoria en el Estomago de las ratas con el uso de Peroxido de Carbamida al 10% no difiere al administrarse dosis de 50 mg, 100 mg y 500 mg. H1: La respuesta vascular inflamatoria en el Estomago de las ratas con el uso de Peroxido de Carbamida al 10% si difiere al administrarse dosis de 50 mg, 100 mg y 500 mg. Nivel de significancia =0.05 Regin critica Si p-valor es menor que 0.05 rechazar Ho Si p-valor mayor que 0.05 aceptar Ho Dado que p = 0.000 < 0.05 entonces aceptar H1 y rechazar Ho Conclusin La respuesta vascular inflamatoria en el Estomago de las ratas con el uso de Peroxido de Carbamida al 10% si difiere al administrarse dosis de 50 mg, 100 mg y 500 mg.

76

CUADRO N 5
RESPUESTA INFLAMATORIA CELULAR DEL ESOFAGO AL SUERO FISIOLOGICO CON DOSIS DE 50 mg/Kg 100 mg/Kg y 500 mg/Kg.

Estadstica de Prueba Kruskal- Wallis

Suero Fisiologico 50 mg 100 mg 500 mg Normal N 8 8 8 % 100.0 100.0 100.0 N 0 0 0 Leve Respuesta Inflamatoria del Esofago Moderado Severo % N % N % 0.0 0.0 0.0 0 0 0 0.0 0.0 0.0 0 0 0 0.0 0.0 0.0 Total N 8 8 8 % 100.0 100.0 100.0 1.000 p

GRFICO N 5
RESPUESTA INFLAMATORIA CELULAR DEL ESOFAGO AL SUERO FISIOLOGICO CON DOSIS DE 50 mg/Kg 100 mg/Kg y 500 mg/Kg.

100.0 80.0 60.0 40.0 20.0 0.0 % Normal % Leve % Moderado % Severo

Respuesta Inflamatoria en el Esofago 50 mg 100 mg 500 mg

INFERENCIA DE HIPTESIS Nivel de significancia =0.05 Hiptesis Ho: La respuesta inflamatoria celular en el Esfago de las ratas con el uso de Suero Fisiolgico no difiere al administrarse dosis de 50 mg, 100 mg y 500 mg. H1: La respuesta inflamatoria celular en el Esfago de las ratas con el uso de Suero Fisiolgico si difiere al administrarse dosis de 50 mg, 100 mg y 500 mg. Nivel de significancia =0.05 Regin critica Si p-valor es menor que 0.05 rechazar Ho Si p-valor mayor que 0.05 aceptar Ho Dado que p = 1.000 > 0.05 entonces rechazar H1 y aceptar Ho Conclusin La respuesta inflamatoria celular en el Estomago de las ratas con el uso de Suero Fisiolgico no difiere al administrarse dosis de 50 mg, 100 mg y 500 mg.

77

CUADRO N 6
RESPUESTA VASCULAR INFLAMATORIA DEL ESOFAGO AL SUERO FISIOLOGICO CON DOSIS DE 50 mg/Kg 100 mg/Kg y 500 mg/Kg.

Estadstica de Prueba Kruskal- Wallis

Suero Fisiologico 50 mg 100 mg 500 mg Normal N 2 2 2 % 25.0 25.0 25.0 N 6 6 6 Leve Respuesta Vascular del Esofago Moderado Severo % N % N % 75.0 75.0 75.0 0 0 0 0.0 0.0 0.0 0 0 0 0.0 0.0 0.0 Total N 8 8 8 % 100.0 100.0 100.0 1.000 p

GRFICO N 6
RESPUESTA VASCULAR INFLAMATORIA DEL ESOFAGO AL SUERO FISIOLOGICO CON DOSIS DE 50 mg/Kg 100 mg/Kg y 500 mg/Kg.

80.0 70.0 60.0 50.0 40.0 30.0 20.0 10.0 0.0 % Normal % Leve % Moderado % Severo

Respuesta Vascular Inflamatoria del Esofago 50 mg 100 mg 500 mg

INFERENCIA DE HIPTESIS Nivel de significancia =0.05 Hiptesis Ho: La respuesta vascular inflamatoria en el Esfago de las ratas con el uso de Suero Fisiolgico no difiere al administrarse dosis de 50 mg, 100 mg y 500 mg. H1: La respuesta vascular inflamatoria en el Esfago de las ratas con el uso de Suero Fisiolgico si difiere al administrarse dosis de 50 mg, 100 mg y 500 mg. Nivel de significancia =0.05 Regin critica Si p-valor es menor que 0.05 rechazar Ho Si p-valor mayor que 0.05 aceptar Ho Dado que p = 1.000 > 0.05 entonces rechazar H1 y aceptar Ho Conclusin La respuesta vascular inflamatoria en el Estomago de las ratas con el uso de Suero Fisiolgico no difiere al administrarse dosis de 50 mg, 100 mg y 500 mg.

78

CUADRO N 7
RESPUESTA INFLAMATORIA CELULAR DEL ESTOMAGO AL SUERO FISIOLOGICO CON DOSIS DE 50 mg/Kg 100 mg/Kg y 500 mg/Kg.

Estadstica de Prueba Kruskal- Wallis

Suero Fisiologico 50 mg 100 mg 500 mg Normal N 8 8 8 % 100.0 100.0 100.0 N 0 0 0 Leve Respuesta Inflamatoria del Estomago Moderado Severo % N % N % 0.0 0.0 0.0 0 0 0 0.0 0.0 0.0 0 0 0 0.0 0.0 0.0 Total N 8 8 8 % 100.0 100.0 100.0 1.000 p

GRFICO N 7
RESPUESTA INFLAMATORIA CELULAR DEL ESTOMAGO AL SUERO FISIOLOGICO CON DOSIS DE 50 mg/Kg 100 mg/Kg y 500 mg/Kg.

100.0 80.0 60.0 40.0 20.0 0.0 % Normal % Leve % Moderado % Severo

Respuesta Inflamatoria en el Estomago 50 mg 100 mg 500 mg

INFERENCIA DE HIPTESIS Nivel de significancia =0.05 Hiptesis Ho: La respuesta inflamatoria celular en el Estomago de las ratas con el uso de Suero Fisiolgico no difiere al administrarse dosis de 50 mg, 100 mg y 500 mg. H1: La respuesta inflamatoria celular en el Estomago de las ratas con el uso de Suero Fisiolgico si difiere al administrarse dosis de 50 mg, 100 mg y 500 mg. Nivel de significancia =0.05 Regin critica Si p-valor es menor que 0.05 rechazar Ho Si p-valor mayor que 0.05 aceptar Ho Dado que p = 1.000 > 0.05 entonces rechazar H1 y aceptar Ho Conclusin La respuesta inflamatoria celular en el Estomago de las ratas con el uso de Suero Fisiolgico no difiere al administrarse dosis de 50 mg, 100 mg y 500 mg.

79

CUADRO N 8
RESPUESTA VASCULAR INFLAMATORIA DEL ESTOMAGO AL SUERO FISIOLOGICO CON DOSIS DE 50 mg/Kg 100 mg/Kg y 500 mg/Kg.

Estadstica de Prueba Kruskal- Wallis

Suero Fisiologico 50 mg 100 mg 500 mg Normal N 2 2 2 % 25.0 25.0 25.0 N 6 6 6 Leve Respuesta Vascular del Estomago Moderado Severo % N % N % 75.0 75.0 75.0 0 0 0 0.0 0.0 0.0 0 0 0 0.0 0.0 0.0 Total N 8.0 8.0 8.0 % 100.0 100.0 100.0 1.000 p

GRFICO N 8
RESPUESTA VASCULAR INFLAMATORIA DEL ESTOMAGO AL SUERO FISIOLOGICO CON DOSIS DE 50 mg/Kg 100 mg/Kg y 500 mg/Kg.

80.0 70.0 60.0 50.0 40.0 30.0 20.0 10.0 0.0 % Normal % Leve % Moderado % Severo

Respuesta Vascular Inflamatoria del Estomago 50 mg 100 mg 500 mg

INFERENCIA DE HIPTESIS Nivel de significancia =0.05 Hiptesis Ho: La respuesta vascular inflamatoria en el Estomago de las ratas con el uso de Suero Fisiolgico no difiere al administrarse dosis de 50 mg, 100 mg y 500 mg. H1: La respuesta vascular inflamatoria en el Estomago de las ratas con el uso de Suero Fisiolgico si difiere al administrarse dosis de 50 mg, 100 mg y 500 mg. Nivel de significancia =0.05 Regin critica Si p-valor es menor que 0.05 rechazar Ho Si p-valor mayor que 0.05 aceptar Ho Dado que p = 1.000 > 0.05 entonces rechazar H1 y aceptar Ho Conclusin La respuesta vascular inflamatoria en el Estomago de las ratas con el uso de Suero Fisiolgico no difiere al administrarse dosis de 50 mg, 100 mg y 500 mg.

80

CUADRO N 9
RESPUESTA INFLAMATORIA CELULAR SOBRE LA MUCOSA DEL ESOFAGO ENTRE EL PEROXIDO DE CARBAMIDA Y EL SUERO FISIOLOGICO CON UNA DOSIS DE 50 mg/Kg.

Estadstica de Prueba Mann-Whitney

50 mg N Peroxido Suero Fisiologico 2 8 Normal % 25.0 100.0 N 2 0 Leve Respuesta Inflamatoria Esofago Moderado Severo % N % N % 25.0 0.0 3 0 37.5 0.0 1 0 12.5 0.0 Total N 8.0 8.0 % 100.0 0.002 100.0 p

GRFICO N 9
RESPUESTA INFLAMATORIA CELULAR SOBRE LA MUCOSA DEL ESOFAGO ENTRE EL PEROXIDO DE CARBAMIDA Y EL SUERO FISIOLOGICO CON UNA DOSIS DE 50 mg/Kg.

100.0 80.0 60.0 40.0 20.0 0.0 % Normal % Leve % % Moderado Severo

Respuesta Inflamatoria del Esofago Peroxido Suero Fisiologico

INFERENCIA DE HIPTESIS Nivel de significancia =0.05 Hiptesis Ho: El grado de inflamacin celular sobre la mucosa del Esfago de las ratas de experimentacin entre el Peroxido de Carbamida al 10% y el Suero Fisiolgico no difiere al administrarse dosis de 50mg. H1: El grado de inflamacin celular sobre la mucosa del Esfago de las ratas de experimentacin entre el Peroxido de Carbamida al 10% y el Suero Fisiolgico si difiere al administrarse dosis de 50mg. Nivel de significancia =0.05 Regin critica Si p-valor es menor que 0.05 rechazar Ho Si p-valor mayor que 0.05 aceptar Ho Dado que p = 0.002 < 0.05 entonces aceptar H1 y rechazar Ho Conclusin El grado de inflamacin celular sobre la mucosa del Esfago de las ratas de experimentacin entre el Peroxido de Carbamida al 10% y el Suero Fisiolgico si difiere al administrarse dosis de 50mg.

81

CUADRO N 10
RESPUESTA INFLAMATORIA CELULAR SOBRE LA MUCOSA DEL ESOFAGO ENTRE EL PEROXIDO DE CARBAMIDA Y EL SUERO FISIOLOGICO CON UNA DOSIS DE 100 mg/Kg.

Estadstica de Prueba Mann-Whitney

100 mg N Peroxido Suero Fisiologico 0 8 Normal % 0.0 100.0 N 0 0 Leve Respuesta Inflamatoria Esofago Moderado Severo % N % N % 0.0 0.0 0 0 0.0 0.0 8 0 100.0 0.0 Total N 8.0 8.0 % 100.0 0.000 100.0 p

GRFICO N 10
RESPUESTA INFLAMATORIA CELULAR SOBRE LA MUCOSA DEL ESOFAGO ENTRE EL PEROXIDO DE CARBAMIDA Y EL SUERO FISIOLOGICO CON UNA DOSIS DE 100 mg/Kg.

100.0 80.0 60.0 40.0 20.0 0.0 % Normal % Leve % % Moderado Severo

Respuesta Inflamatoria del Esofago Peroxido Suero Fisiologico

INFERENCIA DE HIPTESIS Nivel de significancia =0.05 Hiptesis Ho: El grado de inflamacin celular sobre la mucosa del Esfago de las ratas de experimentacin entre el Peroxido de Carbamida al 10% y el Suero Fisiolgico no difiere al administrarse dosis de 100mg. H1: El grado de inflamacin celular sobre la mucosa del Esfago de las ratas de experimentacin entre el Peroxido de Carbamida al 10% y el Suero Fisiolgico si difiere al administrarse dosis de 100mg. Nivel de significancia =0.05 Regin critica Si p-valor es menor que 0.05 rechazar Ho Si p-valor mayor que 0.05 aceptar Ho Dado que p = 0.000 < 0.05 entonces aceptar H1 y rechazar Ho Conclusin El grado de inflamacin celular sobre la mucosa del Esfago de las ratas de experimentacin entre el Peroxido de Carbamida al 10% y el Suero Fisiolgico si difiere al administrarse dosis de 100mg.

82

CUADRO N 11
RESPUESTA INFLAMATORIA CELULAR SOBRE LA MUCOSA DEL ESOFAGO ENTRE EL PEROXIDO DE CARBAMIDA Y EL SUERO FISIOLOGICO CON UNA DOSIS DE 500 mg/Kg.

Estadstica de Prueba Mann-Whitney

500 mg N Peroxido Suero Fisiologico 0 8 Normal % 0.0 100.0 N 2 0 Leve Respuesta Inflamatoria Esofago Moderado Severo % N % N % 25.0 0.0 1 0 12.5 0.0 5 0 62.5 0.0 Total N 8.0 8.0 % 100.0 0.000 100.0 p

GRFICO N 11
RESPUESTA INFLAMATORIA CELULAR SOBRE LA MUCOSA DEL ESOFAGO ENTRE EL PEROXIDO DE CARBAMIDA Y EL SUERO FISIOLOGICO CON UNA DOSIS DE 500 mg/Kg.

100.0 80.0 60.0 40.0 20.0 0.0 % Normal % Leve % Moderado % Severo

Respuesta Inflamatoria del Esofago Peroxido Suero Fisiologico

INFERENCIA DE HIPTESIS Nivel de significancia =0.05 Hiptesis Ho: El grado de inflamacin celular sobre la mucosa del Esfago de las ratas de experimentacin entre el Peroxido de Carbamida al 10% y el Suero Fisiolgico no difiere al administrarse dosis de 500mg. H1: : El grado de inflamacin celular sobre la mucosa del Esfago de las ratas de experimentacin entre el Peroxido de Carbamida al 10% y el Suero Fisiolgico si difiere al administrarse dosis de 500mg. Nivel de significancia =0.05 Regin critica Si p-valor es menor que 0.05 rechazar Ho Si p-valor mayor que 0.05 aceptar Ho Dado que p = 0.000 < 0.05 entonces aceptar H1 y rechazar Ho Conclusin El grado de inflamacin celular sobre la mucosa del Esfago de las ratas de experimentacin entre el Peroxido de Carbamida al 10% y el Suero Fisiolgico si difiere al administrarse dosis de 500mg.

83

CUADRO N 12
RESPUESTA VASCULAR INFLAMATORIA SOBRE LA MUCOSA DEL ESOFAGO ENTRE EL PEROXIDO DE CARBAMIDA Y EL SUERO FISIOLOGICO CON UNA DOSIS DE 50 mg/Kg.

Estadstica de Prueba Mann-Whitney

50 mg N Peroxido Suero Fisiologico 0 2 Normal % 0.0 25.0 N 5 6 Leve Respuesta Vascular Esofago Moderado Severo % N % N % 62.5 75.0 3 0 37.5 0.0 0 0 0.0 0.0 Total N 8.0 8.0 % 100.0 0.010 100.0 p

GRFICO N 12
RESPUESTA VASCULAR INFLAMATORIA SOBRE LA MUCOSA DEL ESOFAGO ENTRE EL PEROXIDO DE CARBAMIDA EL SUERO FISIOLOGICO CON UNA DOSIS DE 50 mg/Kg.

80.0 70.0 60.0 50.0 40.0 30.0 20.0 10.0 0.0 % Normal % Leve % Moderado % Severo

Respuesta Vascular Inflamatoria del Esofago Peroxido Suero Fisiologico

INFERENCIA DE HIPTESIS Nivel de significancia =0.05 Hiptesis Ho: El grado de la respuesta vascular inflamatoria sobre la mucosa del Esfago de las ratas de experimentacin entre el Peroxido de Carbamida al 10% y el Suero Fisiolgico no difiere al administrarse dosis de 50mg. H1: El grado de la respuesta vascular inflamatoria sobre la mucosa del Esfago de las ratas de experimentacin entre el Peroxido de Carbamida al 10% y el Suero Fisiolgico si difiere al administrarse dosis de 50mg. Nivel de significancia =0.05 Regin critica Si p-valor es menor que 0.05 rechazar Ho Si p-valor mayor que 0.05 aceptar Ho Dado que p = 0.010 < 0.05 entonces aceptar H1 y rechazar Ho Conclusin El grado de la respuesta vascular inflamatoria sobre la mucosa del Esfago de las ratas de experimentacin entre el Peroxido de Carbamida al 10% y el Suero Fisiolgico si difiere al administrarse dosis de 50mg.

84

CUADRO N 13
RESPUESTA VASCULAR INFLAMATORIA SOBRE LA MUCOSA DEL ESOFAGO ENTRE EL PEROXIDO DE CARBAMIDA Y EL SUERO FISIOLOGICO CON UNA DOSIS DE 100 mg/Kg.

Estadstica de Prueba Mann-Whitney

100 mg N Peroxido Suero Fisiologico 0 2 Normal % 0.0 25.0 N 7 6 Leve Respuesta Vascular Esofago Moderado % N % 87.5 75.0 1 0 12.5 0.0 Severo N 0 0 % 0.0 0.0 N 8.0 8.0 Total % 100.0 0.010 100.0 p

GRFICO N 13
RESPUESTA VASCULAR INFLAMATORIA SOBRE LA MUCOSA DEL ESOFAGO ENTRE EL PEROXIDO DE CARBAMIDA Y EL SUERO FISIOLOGICO CON UNA DOSIS DE 100 mg/Kg.

90.0 80.0 70.0 60.0 50.0 40.0 30.0 20.0 10.0 0.0 % Normal % Leve % Moderado % Severo

Respuesta Vascular Inflamatoria del Esofago Peroxido Suero Fisiologico

INFERENCIA DE HIPTESIS Nivel de significancia =0.05 Hiptesis Ho: El grado de la respuesta vascular inflamatoria sobre la mucosa del Esfago de las ratas de experimentacin entre el Peroxido de Carbamida al 10% y el Suero Fisiolgico no difiere al administrarse dosis de 100mg. H1: El grado de la respuesta vascular inflamatoria sobre la mucosa del Esfago de las ratas de experimentacin entre el Peroxido de Carbamida al 10% y el Suero Fisiolgico si difiere al administrarse dosis de 100mg. Nivel de significancia =0.05 Regin critica Si p-valor es menor que 0.05 rechazar Ho Si p-valor mayor que 0.05 aceptar Ho Dado que p = 0.010 < 0.05 entonces aceptar H1 y rechazar Ho Conclusin El grado de la respuesta vascular inflamatoria sobre la mucosa del Esfago de las ratas de experimentacin entre el Peroxido de Carbamida al 10% y el Suero Fisiolgico si difiere al administrarse dosis de 100mg.

85

CUADRO N 14
RESPUESTA VASCULAR INFLAMATORIA SOBRE LA MUCOSA DEL ESOFAGO ENTRE EL PEROXIDO DE CARBAMIDA Y EL SUERO FISIOLOGICO CON UNA DOSIS DE 500 mg/Kg.

Estadstica de Prueba Mann-Whitney

500 mg N Peroxido Suero Fisiologico 0 2 Normal % 0.0 25.0 N 0 6 Leve Respuesta Vascular Esofago Moderado Severo % N % N % 0.0 75.0 8 0 100.0 0.0 0 0 0.0 0.0 Total N 8.0 8.0 % 100.0 0.000 100.0 p

GRFICO N 14
RESPUESTA VASCULAR INFLAMATORIA SOBRE LA MUCOSA DEL ESOFAGO ENTRE EL PEROXIDO DE CARBAMIDA Y EL SUERO FISIOLOGICO CON UNA DOSIS DE 500 mg/Kg.

100.0 80.0 60.0 40.0 20.0 0.0 % Normal % Leve % % Moderado Severo

Respuesta Vascular Inflamatoria del Peroxido Suero Fisiologico

INFERENCIA DE HIPTESIS Nivel de significancia =0.05 Hiptesis Ho: El grado de la respuesta vascular inflamatoria sobre la mucosa del Esfago de las ratas de experimentacin entre el Peroxido de Carbamida al 10% y el Suero Fisiolgico no difiere al administrarse dosis de 500mg. H1: El grado de la respuesta vascular inflamatoria sobre la mucosa del Esfago de las ratas de experimentacin entre el Peroxido de Carbamida al 10% y el Suero Fisiolgico si difiere al administrarse dosis de 500mg. Nivel de significancia =0.05 Regin critica Si p-valor es menor que 0.05 rechazar Ho Si p-valor mayor que 0.05 aceptar Ho Dado que p = 0.000 < 0.05 entonces aceptar H1 y rechazar Ho Conclusin El grado de la respuesta vascular inflamatoria sobre la mucosa del Esfago de las ratas de experimentacin entre el Peroxido de Carbamida al 10% y el Suero Fisiolgico si difiere al administrarse dosis de 500mg.

86

CUADRO N 15
RESPUESTA INFLAMATORIA CELULAR SOBRE LA MUCOSA DEL ESTOMAGO ENTRE EL PEROXIDO DE CARBAMIDA Y EL SUERO FISIOLOGICO CON UNA DOSIS DE 50 mg/Kg.

Estadstica de Prueba Mann-Whitney

50 mg N Peroxido Suero Fisiologico 0 8 Normal % 0.0 100.0 N 2 0 Leve Respuesta Inflamatoria Estomago Moderado Severo % N % N % 25.0 0.0 3 0 37.5 0.0 3 0 37.5 0.0 Total N 8.0 8.0 % 100.0 0.000 100.0 p

GRFICO N 15
RESPUESTA INFLAMATORIA CELULAR SOBRE LA MUCOSA DEL ESTOMAGO ENTRE EL PEROXIDO DE CARBAMIDA Y EL SUERO FISIOLOGICO CON UNA DOSIS DE 50 mg/Kg.

100.0 80.0 60.0 40.0 20.0 0.0 % Normal % Leve % Moderado % Severo

Respuesta Inflamatoria del Estomago Peroxido Suero Fisiologico

INFERENCIA DE HIPTESIS Nivel de significancia =0.05 Hiptesis Ho: El grado de inflamacin celular sobre la mucosa del Estomago de las ratas de experimentacin entre el Peroxido de Carbamida al 10% y el Suero Fisiolgico no difiere al administrarse dosis de 50mg. H1: El grado de inflamacin celular sobre la mucosa del Estomago de las ratas de experimentacin entre el Peroxido de Carbamida al 10% y el Suero Fisiolgico si difiere al administrarse dosis de 50mg. Nivel de significancia =0.05 Regin critica Si p-valor es menor que 0.05 rechazar Ho Si p-valor mayor que 0.05 aceptar Ho Dado que p = 0.000 < 0.05 entonces aceptar H1 y rechazar Ho Conclusin El grado de inflamacin celular sobre la mucosa del Estomago de las ratas de experimentacin entre el Peroxido de Carbamida al 10% y el Suero Fisiolgico si difiere al administrarse dosis de 50mg.

87

CUADRO N 16
RESPUESTA INFLAMATORIA CELULAR SOBRE LA MUCOSA DEL ESTOMAGO ENTRE EL PEROXIDO DE CARBAMIDA Y EL SUERO FISIOLOGICO CON UNA DOSIS DE 100 mg/Kg.

Estadstica de Prueba Mann-Whitney

100 mg N Peroxido Suero Fisiologico 0 8 Normal % 0.0 100.0 N 4 0 Leve Respuesta Inflamatoria Estomago Moderado Severo % N % N % 50.0 0.0 2 0 25.0 0.0 2 0 25.0 0.0 Total N 8.0 8.0 % 100.0 0.000 100.0 p

GRFICO N 16
RESPUESTA INFLAMATORIA CELULAR SOBRE LA MUCOSA DEL ESTOMAGO ENTRE EL PEROXIDO DE CARBAMIDA Y EL SUERO FISIOLOGICO CON UNA DOSIS DE 100 mg/Kg.

100.0 80.0 60.0 40.0 20.0 0.0 % Normal % Leve % Moderado % Severo

Respuesta Inflamatoria del Estomago Peroxido Suero Fisiologico

INFERENCIA DE HIPTESIS Nivel de significancia =0.05 Hiptesis Ho: El grado de inflamacin celular sobre la mucosa del Estomago de las ratas de experimentacin entre el Peroxido de Carbamida al 10% y el Suero Fisiolgico no difiere al administrarse dosis de 100mg. H1: El grado de inflamacin celular sobre la mucosa del Estomago de las ratas de experimentacin entre el Peroxido de Carbamida al 10% y el Suero Fisiolgico si difiere al administrarse dosis de 100mg. Nivel de significancia =0.05 Regin critica Si p-valor es menor que 0.05 rechazar Ho Si p-valor mayor que 0.05 aceptar Ho Dado que p = 0.000 < 0.05 entonces aceptar H1 y rechazar Ho Conclusin El grado de inflamacin celular sobre la mucosa del Estomago de las ratas de experimentacin entre el Peroxido de Carbamida al 10% y el Suero Fisiolgico si difiere al administrarse dosis de 100mg.

88

CUADRO N 17
RESPUESTA INFLAMATORIA CELULAR SOBRE LA MUCOSA DEL ESTOMAGO ENTRE EL PEROXIDO DE CARBAMIDA Y EL SUERO FISIOLOGICO CON UNA DOSIS DE 500 mg/Kg.

Estadstica de Prueba Mann-Whitney

500 mg N Peroxido Suero Fisiologico 0 8 Normal % 0.0 100.0 N 4 0 Leve Respuesta Inflamatoria Estomago Moderado Severo % N % N % 50.0 0.0 1 0 12.5 0.0 3 0 37.5 0.0 Total N 8.0 8.0 % 100.0 0.000 100.0 p

GRFICO N 17
RESPUESTA INFLAMATORIA CELULAR SOBRE LA MUCOSA DEL ESTOMAGO ENTRE EL PEROXIDO DE CARBAMIDA Y EL SUERO FISIOLOGICO CON UNA DOSIS DE 500 mg/Kg.

100.0 80.0 60.0 40.0 20.0 0.0 % Normal % Leve % Moderado % Severo

Respuesta Inflamatoria del Estomago Peroxido Suero Fisiologico

INFERENCIA DE HIPTESIS Nivel de significancia =0.05 Hiptesis Ho: El grado de inflamacin celular sobre la mucosa del Estomago de las ratas de experimentacin entre el Peroxido de Carbamida al 10% y el Suero Fisiolgico no difiere al administrarse dosis de 500mg. H1: El grado de inflamacin celular sobre la mucosa del Estomago de las ratas de experimentacin entre el Peroxido de Carbamida al 10% y el Suero Fisiolgico si difiere al administrarse dosis de 500mg. Nivel de significancia =0.05 Regin critica Si p-valor es menor que 0.05 rechazar Ho Si p-valor mayor que 0.05 aceptar Ho Dado que p = 0.000 < 0.05 entonces aceptar H1 y rechazar Ho Conclusin El grado de inflamacin celular sobre la mucosa del Estomago de las ratas de experimentacin entre el Peroxido de Carbamida al 10% y el Suero Fisiolgico si difiere al administrarse dosis de 500mg.

89

CUADRO N 18
RESPUESTA VASCULAR INFLAMATORIA SOBRE LA MUCOSA DEL ESTOMAGO ENTRE EL PEROXIDO DE CARBAMIDA Y EL SUERO FISIOLOGICO CON UNA DOSIS DE 50 mg/Kg.

Estadstica de Prueba Mann-Whitney

50 mg N Peroxido Suero Fisiologico 0 2 Normal % 0.0 25.0 N 4 6 Leve Respuesta Vascular Estomago Moderado Severo % N % N % 50.0 75.0 4 0 50.0 0.0 0 0 0.0 0.0 Total N 8.0 8.0 % 100.0 0.003 100.0 p

GRFICO N 18
RESPUESTA VASCULAR INFLAMATORIA SOBRE LA MUCOSA DEL ESTOMAGO ENTRE EL PEROXIDO DE CARBAMIDA Y EL SUERO FISIOLOGICO CON UNA DOSIS DE 50 mg/Kg.

80.0 70.0 60.0 50.0 40.0 30.0 20.0 10.0 0.0 % Normal % Leve % Moderado % Severo

Respuesta Vascular Inflamatoria del Estomago Peroxido Suero Fisiologico

INFERENCIA DE HIPTESIS Nivel de significancia =0.05 Hiptesis Ho: El grado de la respuesta vascular inflamatoria sobre la mucosa del Estomago de las ratas de experimentacin entre el Peroxido de Carbamida al 10% y el Suero Fisiolgico no difiere al administrarse dosis de 50mg. H1: El grado de la respuesta vascular inflamatoria sobre la mucosa del Estomago de las ratas de experimentacin entre el Peroxido de Carbamida al 10% y el Suero Fisiolgico si difiere al administrarse dosis de 50mg. Nivel de significancia =0.05 Regin critica Si p-valor es menor que 0.05 rechazar Ho Si p-valor mayor que 0.05 aceptar Ho Dado que p = 0.003 < 0.05 entonces aceptar H1 y rechazar Ho Conclusin El grado de la respuesta vascular inflamatoria sobre la mucosa del Estomago de las ratas de experimentacin entre el Peroxido de Carbamida al 10% y el Suero Fisiolgico si difiere al administrarse dosis de 50mg.

90

CUADRO N 19
RESPUESTA VASCULAR INFLAMATORIA SOBRE LA MUCOSA DEL ESTOMAGO ENTRE EL PEROXIDO DE CARBAMIDA Y EL SUERO FISIOLOGICO CON UNA DOSIS DE 100 mg/Kg.

Estadstica de Prueba Mann-Whitney

100 mg N Peroxido Suero Fisiologico 0 2 Normal % 0.0 25.0 N 7 6 Leve Respuesta Vascular Estomago Moderado Severo % N % N % 87.5 75.0 1 0 12.5 0.0 0 0 0.0 0.0 Total N 8.0 8.0 % 100.0 0.021 100.0 p

GRFICO N 19
RESPUESTA VASCULAR INFLAMATORIA SOBRE LA MUCOSA DEL ESTOMAGO ENTRE EL PEROXIDO DE CARBAMIDA Y EL SUERO FISIOLOGICO CON UNA DOSIS DE 100 mg/Kg.

90.0 80.0 70.0 60.0 50.0 40.0 30.0 20.0 10.0 0.0 % Normal % Leve % Moderado % Severo

Respuesta Vascular Inflamatoria del Estomago Peroxido Suero Fisiologico

INFERENCIA DE HIPTESIS Nivel de significancia =0.05 Hiptesis Ho: El grado de la respuesta vascular inflamatoria sobre la mucosa del Estomago de las ratas de experimentacin entre el Peroxido de Carbamida al 10% y el Suero Fisiolgico no difiere al administrarse dosis de 100mg. H1: El grado de la respuesta vascular inflamatoria sobre la mucosa del Estomago de las ratas de experimentacin entre el Peroxido de Carbamida al 10% y el Suero Fisiolgico si difiere al administrarse dosis de 100mg. Nivel de significancia =0.05 Regin critica Si p-valor es menor que 0.05 rechazar Ho Si p-valor mayor que 0.05 aceptar Ho Dado que p = 0.021 < 0.05 entonces aceptar H1 y rechazar Ho Conclusin El grado de la respuesta vascular inflamatoria sobre la mucosa del Estomago de las ratas de experimentacin entre el Peroxido de Carbamida al 10% y el Suero Fisiolgico si difiere al administrarse dosis de 100mg.

91

CUADRO N 20
RESPUESTA VASCULAR INFLAMATORIA SOBRE LA MUCOSA DEL ESTOMAGO ENTRE EL PEROXIDO DE CARBAMIDA Y EL SUERO FISIOLOGICO CON UNA DOSIS DE 500 mg/Kg.

Estadstica de Prueba Mann-Whitney

500 mg N Peroxido Suero Fisiologico 0 2 Normal % 0.0 25.0 N 0 6 Leve Respuesta Vascular Estomago Moderado Severo % N % N % 0.0 75.0 7 0 87.5 0.0 1 0 12.5 0.0 Total N 8.0 8.0 % 100.0 0.000 100.0 p

GRFICO N 20
RESPUESTA VASCULAR INFLAMATORIA SOBRE LA MUCOSA DEL ESTOMAGO ENTRE EL PEROXIDO DE CARBAMIDA Y EL SUERO FISIOLOGICO CON UNA DOSIS DE 500 mg/Kg.

90.0 80.0 70.0 60.0 50.0 40.0 30.0 20.0 10.0 0.0 % Normal % Leve % Moderado % Severo

Respuesta Vascular Inflamatoria del Estomago Peroxido Suero Fisiologico

INFERENCIA DE HIPTESIS Nivel de significancia =0.05 Hiptesis Ho: El grado de la respuesta vascular inflamatoria sobre la mucosa del Estomago de las ratas de experimentacin entre el Peroxido de Carbamida al 10% y el Suero Fisiolgico no difiere al administrarse dosis de 500mg. H1: El grado de la respuesta vascular inflamatoria sobre la mucosa del Estomago de las ratas de experimentacin entre el Peroxido de Carbamida al 10% y el Suero Fisiolgico si difiere al administrarse dosis de 500mg. Nivel de significancia =0.05 Regin critica Si p-valor es menor que 0.05 rechazar Ho Si p-valor mayor que 0.05 aceptar Ho Dado que p = 0.000 < 0.05 entonces aceptar H1 y rechazar Ho Conclusin El grado de la respuesta vascular inflamatoria sobre la mucosa del Estomago de las ratas de experimentacin entre el Peroxido de Carbamida al 10% y el Suero Fisiolgico si difiere al administrarse dosis de 500mg.

92

CAPTULO V V.0.
5.1. DISCUSIN

DISCUSIN

Los resultados obtenidos en la evaluacin histolgica de los tejidos extrados del esfago y estomago de las ratas de experimentacin evidencian que el perxido de carbamida al 10% produce una reaccin inflamatoria tal como nos lo muestran en su trabajo de investigacin Woolverton C.; Haywod V.; Haymann H. (1991). Si bien es cierto la solucin de perxido de carbamida es diluida para nuestra investigacin hemos encontrado que dosis de 100mg y 500mg afectan la mucosa esofgica y la mucosa gstrica, inclusive no tomando en cuenta el tiempo de administracin como si lo hicieron Redmond A.; Cherry D.; Bowers D. Jr. (1993), quienes comprobaron en su estudio que el efecto toxicolgico de la Ingesta de un agente de blanqueamiento induce un dao mayor a la mucosa gstrica en ratas en el plazo de 2 horas. Se puede decir que, el uso de un agente blanqueador propone el que se cuente con ciertas precauciones para su uso, evitando principalmente el contacto con tejidos blandos como nos lo hace ver Haywood B. (1994). Pues entonces con mayor razn an es el hecho de que su ingesta pueda repercutir en forma potencial en los tejidos de la mucosa esofgica y gstrica, como lo hemos comprobado con nuestro estudio. Ya investigadores como Redmond A. Cherry D.; Bowers D. (1994) observaron el efecto toxicolgico por la ingesta de perxido de hidrgeno

93

al 6% en carboxipolimetileno al 99% (Natural White. Inc.

CA). Sus

resultados nos muestran que la mucosa gstrica de los animales de experimentacin presentan la presencia de ulceras y que inclusive la ingesta de stas sustancias provocaron la muerte de 3 de ellas. Tal como se comprueba en la presente investigacin, por lo que se puede afirmar que el perxido de carbamida al 10% en dosificaciones incluso bajas como de 50mg influye en la presencia de cambios histolgicos de la mucosa esofgica y gstrica compatibles con respuesta inflamatoria celular y vascular. Otros de los investigadores que ha comprobado en sus estudios las consecuencias que se presentan en la mucosa gstrica a la ingestin de perxido de carbamida al 10% son Dahl J.; Becher R (1995), quienes estimaron que casi el 10% del gel de blanqueamiento aplicado podra ser consumido durante su aplicacin, en su investigacin encontraron que si un paciente por casualidad o por el procedimiento mismo del uso del blanqueador se encuentra expuesto a una cantidad de 0.84 mg/kg/da, y la exposicin al perxido de carbamida a travs del blanqueador dental conteniendo perxido de carbamida al 10% sera de 0.084 mg/kg/da, correspondiendo a 0.028 mg/kg/da de perxido de hidrgeno. Lo que ocasiona despus de una exposicin de 15 minutos, que el estmago este groseramente hinchado con gas, y despus de 2 horas el hematocrito sanguneo se presente elevado, probablemente como muestra el presente estudio como consecuencia de la experimentacin. Estudios mucho mas profundos como los realizados por Woolverton C.; Haywood V.; Heymann H. (1996) ponen en evidencia que la repercusin de la ingesta de agentes blanqueadores como el perxido de carbamida pueden repercutir inclusive a nivel de la genotoxicidad y como se ha mencionado antes en el presente trabajo tambin a nivel de la citotoxicidad. reaccin inflamatoria de la mucosa esofgica y gstrica de los animales de

94

Por tanto las condiciones de los cambios inflamatorios que se presentan tanto en mucosa esofgica y como en mucosa gstrica obtenidas en nuestras evaluaciones permiten mostrar que el perxido de carbamida al 10% influye induciendo una respuesta inflamatoria severa aceptndose la hiptesis planteada.

95

CAPTULO VI VI.
6.1. Conclusiones. 6.3. Resumen.

CONCLUSIONES
6.2. Recomendaciones

6.1.
1.

CONCLUSIONES Ingestas pequeas de 50mg de Perxido de Carbamida al 10% son capaces de inducir una respuesta inflamatoria celular en el esfago, cuya intensidad aumenta en proporcin a la dosis ingerida de agente blanqueador, diferencias que fueron estadsticamente significativas (p< 0.05).

2.

Una respuesta vascular inflamatoria moderada en el esfago de las ratas se observa con ingestas de 500mg, mientras que con ingestas de 50 a 100mg la respuesta es predominantemente leve, diferencias que fueron estadsticamente significativas (p< 0.05).

3.

Una respuesta inflamatoria celular leve en el estmago de las ratas fue similar bajo ingestas de 50, 100 y 500mg, sin diferencias estadsticamente significativas (p< 0.05).

4.

Una respuesta vascular inflamatoria moderada se presenta con la ingesta de 500mg, siendo menor con la ingesta de 30 y 100mg que inducen principalmente una respuesta leve, diferencias que estadsticamente fueron significativas (p< 0.05).

96

5.

No se encontraron diferencias en la respuesta inflamatoria celular en el esfago de las ratas con la ingesta de Suero Fisiolgico administrado en dosis de 50 mg, 100 mg y 500 mg (p > 0.05). Caracterizndose la mayora de casos por una condicin normal.

6.

No se encontraron diferencias en la respuesta vascular inflamatoria en el esfago de las ratas con la ingesta de Suero Fisiolgico administrado en dosis de 50 mg, 100 mg y 500 mg (p > 0.05). Caracterizndose todos los casos por una condicin normal.

7.

No se encontraron diferencias en la respuesta inflamatoria celular en el estmago de las ratas con la ingesta de Suero Fisiolgico administrado en dosis de 50 mg, 100 mg y 500 mg (p > 0.05). Caracterizndose la mayora de casos por una condicin normal.

8.

No se encontraron diferencias en la respuesta vascular inflamatoria en el estmago de las ratas con la ingesta de Suero Fisiolgico administrado en dosis de 50 mg, 100 mg y 500 mg (p > 0.05). Caracterizndose la mayora de los casos por una condicin normal.

9.

La ingesta de Perxido de Carbamida al 10% bajo cualquier dosis de 50, 100 y 500mg es capaz de inducir una respuesta inflamatoria celular sobre la mucosa del esfago de las ratas en comparacin con la ingesta de suero fisiolgico.

10.

La ingesta de Perxido de Carbamida al 10% bajo dosis elevadas de 500mg es capaz de inducir una respuesta vascular inflamatoria sobre la mucosa del esfago de las ratas en comparacin con la ingesta de suero fisiolgico, mientras que ingesta menores de 50 a 100mg muestran condiciones similares a la mucosas normales bajo ingesta de suero fisiolgico.

11.

La ingesta de Perxido de Carbamida al 10% bajo cualquier dosis de 50, 100 y 500mg es capaz de inducir una respuesta inflamatoria celular sobre la mucosa del estmago de las ratas en comparacin con la ingesta de suero fisiolgico.

12.

La ingesta de Perxido de Carbamida al 10% bajo dosis elevadas

97

de 500mg es capaz de inducir una respuesta vascular inflamatoria sobre la mucosa del estmago de las ratas en comparacin con la ingesta de suero fisiolgico, mientras que ingesta menores de 50 a 100mg muestran condiciones similares a la mucosas normales bajo ingesta de suero fisiolgico.

98

6.2.

RECOMENDACIONES Se recomienda el uso con suma precaucin de cualquier tipo de

agente blanqueador en lo posible, pues se comprueba que dosificaciones mnimas que puedan ser ingeridas repercuten en la mucosa esofgica o gstrica. La puesta en el mercado de nuevos y ms prcticos sistemas de blanqueamiento dental que prescinden del uso de cubetas y el prolongado uso del agente blanqueador en boca son recomendables Asegurar el uso adecuado del aislamiento en boca, para as evitar el contacto del agente blanqueador y as mismo de su ingesta.

99

6.3.

RESUMEN

El objetivo del presente estudio fue determinar el grado de inflamacin producido por el perxido de carbamida al 10% en la mucosa gstrica y esofgica en animales de experimentacin. Para lo cual un total de 48 Ratas Albinas machos Holtzman entre 180 a 315g de peso fueron empleadas, las que fueron distribuidas aleatoriamente en dos grupos: Grupo # 1 de 24 ratas (grupo experimental): 8 ratas que recibieron 50mg de perxido de carbamida al 10%, 8 ratas que recibieron 100mg de perxido de carbamida al 10% (grupo experimental), 8 ratas que recibieron 500mg de perxido de carbamida al 10% (grupo experimental) y grupo # 2 de 24 ratas (grupo control): 8 ratas que recibieron 50mg de suero fisiolgico, 8 ratas que recibieron 100mg de suero fisiolgico, 8 ratas que recibieron 500mg de suero fisiolgico. Se realizaron diluciones el perxido de carbamida al 10% (50mg, 100mg y 500mg). Al grupo experimental, se le administr las diluciones del perxido de carbamida al 10% de acuerdo a las dosis establecidas para cada subgrupo por va oral, mediante una jeringa de tuberculina y sonda orogstrica, del mismo modo s eprocedi con el grupo control al que se le administr suero fisiolgico. Luego fueron sacrificados 24 horas despus, por traccin rpida del cuello (desnucamiento cervical). Luego, se obtuvieron muestras de esfago y estmago. Las muestras obtenidas fueron sometidas a la tcnica histolgica convencional de inclusin en parafina y coloraciones con hematoxilina y eosina. La respuesta histopatolgica celular y vascular inflamatoria se analiz bajo los siguientes criterios: respuesta inflamatoria (leve, moderada y severa) y respuesta vascular (leve, moderada y severa). Las pruebas de Kruskall Wallis y Mann Whitney, con = 0.05, mostraron que el perxido de carbamida al 10% era capaz de inducir, aun en bajas dosis, respuesta inflamatoria leve celular y vascular en la mucosa de esfago y estmago.

100

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P LAS MO CI TO S : Va rie da d de linf ocit o s p ro ve n ien t e s d e lo s linf ocit o s B

105

HOLA MARCO

LOS GRUPOS DE ESTUDIO ESTAN CONFORMADOS POR 2 GRUPOS DE OBTENIDOS DE 48 RATAS: EXPERIMENTAL 24: CON TRES SUBGRUPOS DE 8 CONTROL 24: CON TRES SUBGRUPOS DE 8 FALTA COMPLETAR LA SIGUIENTE BIBLIOGRAFIA: Cherpry D. y col. Acude toxicological effects of ingested tooth whiteners in female rats. J. Dent. Res. 72: 1298-1303.falta ao
Jablonski S. 1992. Diccionario ilustrado de odontologa. 8va edicin. Editorial Mdica Panamericana S.A. pp. 1, 204, 212, 312, 483, 998,1166. FALTA LUGAR Woolverton C.; Haywood V.; Heymann H. A toxicologic screen of two carbamide peroxide tooth whiteners. FACLT A BBL

106

ANEXOS

p. Toxicidad: Propiedad fisiolgica o biolgica que determina la capacidad de una sustancia qumica para causar perjuicio o producir daos a un organismo vivo por medios no mecnicos. Capacidad de ciertas sustancias de causar intoxicacin, muerte, deterioro o lesiones graves en la salud de seres vivos, al ser ingeridos, inhalados o puestos en contacto con su piel. (37) q. Trietanolamina: Formada por reaccin de amonaco y siruposo, un poco mas pesado que el agua. Se usa principalmente como detergente, emulsificante y plastificante; su facilidad de absorber agua (hidroscopicidad) lo hace til como humectante. (36)

107

1.2.3. CARACTERIZACIN DE LA PRUEBA TOXICOLGICA Las guas OECD para las Pruebas de Qumicos son peridicamente revisadas en luz del progreso cientfico o prcticas de cambios sealados. La gua original 420 fue adoptada en Julio de 1992 como la primera alternativa a la prueba de toxicidad aguda convencional, descrita en la Gua de Prueba 401. En 1984, un nuevo alcance para el examen de toxicidad aguda fue sugerido por la Sociedad de Toxicologa Britnica basado en la administracin en una serie de niveles de dosis fijas. El alcance evit el uso de la muerte de animales como un punto final. El procedimiento fue adoptado por el Consejo como una gua de pruebas en 1992. El principio de la prueba seala que los grupos de animales de un solo sexo son dosificados en un procedimiento de pasos usando las dosis fijas de 5, 50, 300 y 2000 mg/kg (excepcionalmente una dosis fija de 5000 mg/kg puede ser considerada. El nivel de dosis inicial es seleccionado en la base de un estudio como la dosis esperada a producir algunos signos de toxicidad sin causar efectos txicos graves o mortalidad. Posteriores grupos de animales pueden ser dosificados con dosis fijas ms altas o ms bajas, dependiendo de la presencia o ausencia de signos de toxicidad o mortalidad. (17)

Otro estudio ha estimado que el valor del LD en ratones para dos diferentes blanqueadores dentales que contenan perxido de carbamida al 10% estaba entre 87 y 144mg/kg de peso (Woolverton y col. 1991). De otro lado, el agente blanqueador que contiene carbopol, el cual retarda la velocidad de la liberacin de oxigeno del perxido (Haywood; Hayman 1989),
(29)

demostr en estudio experimentales tener la ms alta toxicidad.

Los efectos agudos de la ingestin de perxido de carbamida PC son dependientes de la cantidad ingestada y la concentracin de la solucin de perxido de hidrgeno. r. Gastritis: Es la inflamacin del revestimiento interno del estmago, de origen inflamatorio o txico. (37)

108