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UNIVERSIDAD TECNOLOGICA DE MEXICO CAMPUS ECATEPEC

AREA: CIENCIAS DE LA SALUD

PROGRAMA ACADEMICO: LICENCIATURA EN ENFERMERIA

MATERIA: MICROBIOLOGIA

PROFESORA: ELIZABETH MARGARITA SILVA RODRIGUEZ

ALUMNA: GALICIA VALDEZ VERONICA ALEJANDRA

No. DE CUENTA: 13689679

GRUPO: E505

DEFINICION DE MICROSCOPA: El trmino microscopio deriva etimolgicamente del griego mikrs (pequeo) y skoopo (observar) Es el conjunto de tcnicas y mtodos destinados a hacer visible los objetos de estudio que por su pequeez estn fuera del rango de resolucin del ojo normal. El microscopio es el elemento central de la microscopa, el uso del mismo se requiere para producir las imgenes adecuadas, de todo un conjunto de mtodos y tcnicas afines pero extrnsecas al aparato. Exceptuando tcnicas especiales como las utilizadas en microscopio de fuerza atmica, microscopio de iones en campo y microscopio de efecto tnel, la microscopa generalmente implica la difraccin, reflexin o refraccin de algn tipo de radiacin incidente en el sujeto de estudio. DESCUBRIDOR: Las fuentes histricas procedentes de las civilizaciones antiguas como la asiria, la clsica o la rabe, nos hablan ya del poder amplificador de las lentes biconvexas y de la utilizacin de tcnicas de amplificacin de la imagen. El microscopio fue acuado por Jean Faber en 1624. Sin embargo, el impulsor mas significativo de la microscopia fue el holands Anton Van Leeuwenhoek (1632-1723). Anatomista y fisilogo, Leeuwenhoek construy sus propios microscopios con lentes convexas que el mismo pula. Entre sus aportaciones ms importantes est la de ser uno de los primeros en estudiar la composicin de la sangre y en observar y dibujar protozoos; en 1676 descubri las bacterias. HISTORIA Los primeros microscopios denominados simples constaban solamente de una lente, la cual se sostena con la mano y se diriga hacia una fuente de luz para que esta atravesara la lente y el objeto. Estos microscopios producan, no obstante, difracciones y aberraciones, que se corrigieron gracias a la tcnica del Doblete, aportada por Wollastone (1766-1826), aplicando al microscopio ocular astronmico. A principios del siglo XVIII, el microscopio sufre sus modificaciones mas importantes, no solo referente a ptica, sino tambin, an la mecnica. En relacin a esta ltima, cabe mencionar el de Hooke en 1667, con una bola de vidrio que condensaba los rayos luminosos; el microscopio de trpode de Von

Asch 1687, el de la columna de Bonnani 1691 y el de Joblot 1716 con cristal de campo. Una de las aportaciones mas interesantes fue la de Cuff-baker 1744 que confecciono un aparato de columna de movimiento rpido y movimiento micromtrico y con un espejo fijo para concentrar la luz. Este seria el presente del actual microscopio compuesto y produca defectos y aberraciones cromticas y esfricas, a pesar de dar buenas ampliaciones, por lo que se regreso al estudio del microscopio simple, mas sencillo que este y mas efectivo por aquel entonces. El descubrimiento del microscopio contemporneo al de las hupas y se debe a Zacarias Janssen, su primer constructor 1590. El gran paso en el perfeccionamiento de este se debe a Dolland, que con su objetivo apocromtico compuesto de dos lentes superpuestas, una convergente y otra divergente logro mejorar en gran medida las observaciones. A partir de entonces, la evolucin del microscopio compuesto ha sido progresiva, destacando Alemania, Inglaterra y Francia como principales pases impulsores. Asi, hoy podemos hablar de avances tales como: la aplicacin de la tecnologa laser y de la informtica a la microscopia

TIPOS DE MICROSCOPIOS EL MICROSCOPIO PTICO El microscopio ptico es un instrumento que sirve para aumentar el tamao de un objeto a travs de un sistema de lentes. Puede conseguirse con este mtodo un aumento de hasta 2000 veces. Las partes de las que se compone un microscopio se pueden dividir en partes mecnicas y en parte pticas El microscopio ptico compuesto: El microscopio compuesto ha sido de importancia crucial para la microbiologa como ciencia y es todava, con ciertas variaciones, el principal apoyo de la investigacin microbiolgica rutinaria. Un microscopio compuesto tiene dos lentes o sistemas de lentes, el objetivo, situado cerca del objeto que se observa, y el ocular, que est colocado cerca del ojo. El aumento primario del objeto es producido por la lente objetivo y la imagen se transmite al ocular, donde se realiza el aumento final. El aumento total de un microscopio compuesto es el producto del aumento de su objetivo y de su ocular. Con un objetivo que aumenta x40 y un ocular que aumenta x10 el aumento total es de x400. El microscopio compuesto es pues capaz de conseguir aumentos considerablemente mayores que el microscopio construido con una sola lente. El microscopio ptico de contraste de fases: El microscopio de contraste de fases hace posible ver fcilmente pequeas clulas, incluso sin teir. Las clulas tienen un ndice de refraccin distinto de su alrededor y esta diferencia puede utilizarse para crear una imagen de mucho mayor contraste que la que puede obtenerse con el microscopio ptico normal.

El microscopio ptico de campo oscuro: El microscopio de campo oscuro es un microscopio ptico ordinario cuyo sistema condensador ha sido modificado para dirigir la luz a la preparacin desde los lados de tal modo que slo la luz difractada por la preparacin pasa al ocular y se hace visible. A causa de esta disposicin la muestra aparece iluminada sobre un fondo oscuro. La microscopia de campo oscuro ha posible la observacin en estado vivo de partculas y clulas que de otra manera estaran por debajo de los lmites de resolucin del microscopio ptico, aunque resulten visibles pocos detalles estructurales. La microscopia de campo oscuro ha sido ampliamente usada en el estudio de pequeas clulas mviles tales como Treponema pallidum, la espiroqueta causante de la sfilis, que es invisible con la microscopia ptica ordinaria. El microscopio ptico de fluorescencia: Se utiliza para poner de manifiesto muestras que tienen fluorescencia, bien a causa de la presencia en su interior de sustancias materiales fluorescentes o que han sido tratadas con colorantes fluorescentes. La fluorescencia es la propiedad que tienen muchas sustancias qumicas de emitir luz de un color despus de excitarlas con luz de otro color. En el microscopio de fluorescencia la luz de excitacin es eliminada con un filtro colocado entre el objetivo y el ocular, de modo que slo se ve la luz emitida.

EL MICROSCOPIO ELECTRNICO Para estudiar la estructura interna de los microorganismos es esencial el uso del microscopio electrnico. En este microscopio se utilizan electrones en vez de rayos de luz, y como lentes funcionan unos electroimanes. Todo el sistema opera en el vaco. Cuando los electrones pasan a travs de la preparacin algunos son difractados creando entonces una imagen que se hace visible en una pantalla sensible a los electrones. La resolucin obtenida con el microscopio electrnico es mucho mayor que la conseguida con el microscopio ptico. Mientras que con estructuras ms pequeas que pueden observarse tienen unos 02 m, con el microscopio electrnico pueden verse fcilmente objetos de 0001 m (= 1 nm = 10-9 m). Con el microscopio electrnico es posible ver muchas sustancias incluso de tamao molecular. Sin embargo, a causa de la naturaleza de este instrumento slo pueden examinarse objetos muy delgados. Si se est interesado en ver estructuras internas, incluso una sola bacteria es demasiado gruesa para ser observada directamente. Por consiguiente, para preparar muestras para el microscopio electrnico se necesitan tcnicas especiales de cortes ultra finos. Para seccionar las clulas primero deben ser fijadas y deshidratadas, realizndose habitualmente esto ltimo transfiriendo las clulas a un disolvente orgnico. Despus de la deshidratacin la muestra es incluida en plstico y en este plstico se cortan secciones finas utilizando un ultramicrtomo, por lo general equipado con una cuchilla de diamante. Una sola clula bacteriana, por ejemplo, puede cortarse en cinco o seis secciones muy finas, que son examinadas despus individualmente con el microscopio electrnico. Para obtener suficiente contraste, las preparaciones se tratan con colorantes especiales de la microscopia electrnica, tales como cido

smico, permanganato, uranio, lantano o plomo. Estos materiales estn compuestos por tomos de elevado peso molecular y, por ello, dispersan bien los electrones. Las estructuras celulares teidas con uno de esos materiales presentan un contraste muy aumentado y, por tanto, se ven mejor. El sombreado: Si slo tiene que observarse el contorno de un organismo, no son necesarias secciones finas y sobre la rejilla metlica pueden montarse clulas enteras. Para aumentar el contraste de las clulas entras se recurre generalmente al sombreado. Esto implica el recubrimiento de la muestra con una fina capa de metal como, por ejemplo, paladio, cromo u oro. El metal se deposita sobre el objeto por un lado de forma que se crea una sombra. De esta manera el objeto aparece con grosor y forma. El sombreado se utiliza a menudo para observar apndices superficiales en las bacterias. La tincin negativa: Otro modo de conseguir contraste con el microscopio electrnico es la tincin negativa. Se aplica el mismo principio que en la tincin negativa del microscopio ptico. Se utiliza una sustancia que no penetra la estructura pero que dispersa los electrones. Una de las tinciones negativas ms comnmente utilizadas en la microscopia electrnica se realiza con cido fosfovolfrmico (fosfotngstico). Rplicas de carbono: Para examinar las superficies celulares pueden prepararse rplicas de carbono evaporando sobre la superficie de las clulas una fina capa de carbono que se adapta a los contornos de la superficie celular y que cuando es desprendida resulta suficientemente delgada para poder observarse directamente al microscopio electrnico. Criocorrosin: Otra tcnica de la microscopia electrnica recientemente desarrollada es la de criocorrosin (freeze-etching), que evita la formacin de artefactos al eliminar la fijacin qumica y la inclusin. La muestra que va a examinarse es congelada sin tratamiento qumico y el bloque congelado se corta con una cuchilla de diamante, de tal modo que quedan expuestas porciones de las superficies de las clulas. Se hacen y se examinan entonces rplicas en carbono de esas superficies, pudindose observar estructuras superficiales o internas de las clulas. La mayora de las estructuras celulares vistas en secciones ultrafinas de preparaciones fijadas qumicamente se ven tambin en material congelado, lo que sugiere que esas estructuras no son artefactos. El microscopio electrnico explorador: Otro instrumento reciente para examinar las estructuras superficiales es el microscopio electrnico explorador (scanning electron microscope). El material que se estudia es recubierto con una pelcula fina de un metal pesado tal como el oro. El rayo de electrones es dirigido sobre la preparacin y la va recorriendo y explorando por todas la superficie. Los electrones dispersados por el metal pesado activan una pantalla de observacin produciendo una imagen. Con el microscopio electrnico explorador pueden observarse incluso muestras muy grandes, siendo muy buena la profundidad de campo. El aumento que puede obtenerse oscila entre uno tan bajo como x15 y uno tan alto como x100000, pero slo puede observarse la superficie de un objeto.

BIBLIOGRAFIA * Asimov, I. 1997. Historia de la Ciencia II. Ed. Salvat. 731 pg. *Lozano, V. y Morales, A. 1996. Introduccin a la microscopa electrnica. CoNICET. 246 pg. * Radl, E.M. 1988. Historia de las teoras biolgicas. Tomo II. Hasta el Siglo XIX. Alianza Universidad. 334 pg. *En Internet: http://www.utmem.edu/personal/thjones/hist/c3.htm *Bernis Mateu, J.: Atlas de microscopia, Ediciones Jover, S.A., Barcelona, 1978 *En internet: http://pagina.jccm.es/museociencias/otras%20actividades%20web/material%20 cnr%20web/manual%20de%20microscopia.pdf *http://www.acuanatura.com/cursosonline/tiposdemicroscopios/tiposdemicrosco pios.pdf

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