Transporte a travs de la membrana.

Secrecin de protenas

Estructura de la membrana citoplasmtica. La estructura general de la membrana citoplasmtica es similar en procariontes y eucariontes. Existen excepciones a este diseo en las arqueas

Estructura general de los lpidos de membrana. a. Unin ster (bacterias y eucariotas). Cadenas laterales formadas por cidos grasos. B. Unin ter (arqueas) Isopreno. Unidad parental de las cadenas laterales de lpidos de arqueas.

b. c.

Estructura de las membranas arqueanas

Funciones de la membrana citoplasmtica

- Barrera osmtica -Transporte de solutos especfico - Estructura de anclaje de protenas y enzimas involucradas en bioenergtica (transportadores de electrones, ATPasas) - Recepcin de estmulos mediante protenas sensoras. - Movilidad celular (quimiotaxis)

Permeabilidad de la membrana citoplasmtica (MC) a diversos solutos

La MC es permeable a: gases (O2, CO2, NH3), mol. pequeas (agua, etanol), mol. liposolubles (glicerol, ac. grasos), cidos y bases dbiles en forma no cargada. El transporte de agua es acelerado por aquaporinas. La mayora de los solutos no pasan pasivamente a travs de la MC y deben ser transportadas por protenas especficas La membrana externa (bacterias G-) es permeable a: mol. pequeas, impermeable a mol. hidroflicas (aa, azcares, iones). Transporte mediado por Porinas.

Transporte mediado por protenas Transportadores o permeasas: son protenas integrales de la MC que catalizan la
transferencia de solutos. Aumentan la velocidad de transporte. Permiten acumular solutos (nutrientes) en el citoplasma en contra del gradiente de concentracin.
P, cte

Difusin, V = P. A. C

A, rea C, dif. conc. soluto

Transporte por permeasas

Saturable Especfico
Cintica de transporte mediado por permeasas vs difusin simple

V = Vmax. (S)/ (Km + (S))

Sensible a inhibicin Sujeto a regulacin

Sistemas de transporte en procariotas

Segn el mecanismo involucrado se clasifican en: 1. Difusin 2. Transporte activo 3. Group translocation o Sistema de las fosfotransferasas (PTS)
1. No requiere energa 2-3. Requieren energa

Difusin Difusin simple, no requiere transportador . Ej. agua, O2 Difusin facilitada, requiere transportador. Ej. glicerol

Transporte activo
Segn fuente de energa se clasifican en:

Primario. Conducido por el metabolismo generador de energa:

- Exporte de H+ generado por T de e durante respiracin, fotosntesis - Exporte de H+ generado por hidrlisis de ATP - Exporte de H+ (bacteriorodopsina), importe de Cl- (halorodopsina) mediado por luz en haloarqueas - Importe de azcares por el sistema PTS - Exporte de Na+ acoplado a reacciones de decarboxilacin de aa Son mecanismos conservadores de energa (menos PTS)

Secundario. La energa es aportada por un gradiente electroqumico generado por

transporte primario (fuerza H+ motiva, PMF, o sodio motiva, SMF) Simport. El soluto es transportado en la misma direccin que el H+/Na+. Antiport. El soluto es transportado en direccin opuesta al H+/Na+. Uniport. Transporte de in a travs del gradiente electroqumico sin involucrar cotransporte de H+ o Na+.

Transporte secundario

Simporte

Antiporte

Uniporte

La toma de solutos mediante mecanismos de simporte es frecuente en las bacterias. Generalmente va acoplado al eflujo de iones H+ o Na+. De este modo se transportan aa, monosacridos y disacridos. Ej. simporte lactosa/H+ (lactosa permeasa, LacY) de E. coli.

Acoplamiento quimiosmtico del transporte secundario en bacterias. RC, cadena respiratoria; LC, lactosa permeasa (LacY); S, sustrato.

Antiport precursor/ producto

Algunas bacterias anaerbicas fermentativas, como las bacterias lcticas, utilizan la energa potencial de una alta conc. de productos de fermentacin dentro de la clula para importar el precursor.

Antiport malato/lactato

Antiport lactosa/galactosa. La lactosa es hidrolizada por b-gal, glu es oxidada en gliclisis. Gal (producto) es intercambiada por lactosa (precursor). Gal excretada es luego utilizada como fuente de C y E cuando lactosa se consumi.

Transporte primario dependiente de ATP. Va del ATP-binding cassette (ABC)

Transporte de maltosa. A, MBP (protena de unin a maltosa), la forma cerrada presenta alta afinidad por el azcar y se une al ABC. Inicia transporte e hidrlisis de ATP. B, transferencia del azcar. C, la maltosa es transportada y se libera MBP.

Las bacterias G- poseen protenas de unin a solutos en periplasma que son liberadas por shock osmtico (Sist. transporte sensible a shock osmtico) Los solutos pasan la membrana ext. a travs de porinas y se unen as prot. especficas en periplasma antes de ser transportado por un complejo unido a mrmbrana. Este complejo une e hidroliza ATP para proveer energa al trasporte : transportadores del tipo ATP-binding cassette (ABC) Sistema ABC es usado para el transporte de aa, azcares, nucletidos , iones y para exportar protenas y compuestos txicos. Existen homlogos de las protenas tipo ABC en todos los organismos.

Sistema group translocation o de las Fosfotransferasas (PTS)

El soluto es modificado (fosforilado) durante el transporte. Usado para transportar carbohidratos. Es un sistema nico de las bacterias, no hay homlogos en las arqueas ni eucariotas. El sistema de las fosfotransferasas (PTS) fosforila y transporta azcares. EI (enzima I) y HPr (prot. que cotiene his) son citoslicas y son comunes a varios sistemas de transporte de azcares. EII (enzima II A, B, C)) estan unidas a membrana y son especficas para cada carbohidrato

Sistemas de transportes de solutos en procariotas

Transporte de protenas a travs de la membrana en procariotas

Las protenas se transportan mediante 3 mecanismos: 1. La ruta general de secrecin (GSP o Sec) 2. La ruta ABC 3. La ruta de translocacin de las argininas gemelas (Twin-arginine Traslocation TAT- pathway)

Las bacterias Gram poseen, adems, sistemas para transportar las protenas a travs de la membrana externa: sistemas de secrecin de protenas

Sistema Sec de bacterias

Es necesario para la viabilidad de las bacterias. Existe en todos los organismos. Protenas sustratos poseen pptido seal en extremo N-terminal Transporta protenas desplegadas. Depende de ATP y FPM Exporta protenas periplasmticas o de membrana externa

Una versin modificada de este sistema permite la insercin de las protenas integrales de membrana (Via SRP, signal recognition particle)

Sistema TAT
Mecanismo preferencial de secrecin de protenas en las arqueas halfilas extremas, su importancia es secundaria en las bacterias. Transporta protenas en estado parcial o totalmente nativo y enzimas con cofactores. Protenas sustratos poseen pptido seal en extremo N-terminal con motivo caracterstico que contiene RR Depende de FPM Exporta protenas secretadas al medio

Sistema de transporte de protenas ABC

Permite el transporte de protenas al medio en un solo paso. Frecuentemente usado por bacterias fitopatgenas para secretar factores de virulencia Protenas sustratos poseen pptido seal en extremo C-terminal, no se remueve despus del transporte. Transporta protenas desplegadas. Depende de ATP. Posee complejo de membrana de la flia transportadores ABC

Inyeccin de protenas dentro de la clula husped mediante Sistema de secrecin tipo III.
Ej. Yersinia (bacteria Gram- patgeno humano