Materia: Laboratorio de Bioqumica Farmacutica PRACTICA 9 HORMONAS

OBJETIVO GENERAL. El alumno conocer el efecto de las hormonas en el crecimiento y desarrollo de tejidos especficos de Paulownia sp. OBJETIVOS ESPECFICOS. Identificar el efecto de diferentes hormonas en el crecimiento de brotes, races y callos. Conocer las ventajas y desventajas de utilizar hormonas en cultivos vegetales para consumo. Evaluar la importancia de realizar un experimento en un ambiente estril adecuado. INTRODUCCIN.

La aplicacin exitosa del cultivo de tejidos vegetales en la propagacin de plantas involucra la regeneracin exitosa de plantas completas a partir de clulas. El control de la morfognesis es afectado por varios factores, como especie, tipo de tejido, componentes del medio y reguladores de crecimiento. La regeneracin directa de brotes, races y callos a partir de cultivos de hojas de Paulownia spp. (especies de rboles utilizados para la produccin de madera) se puede llevar a cabo por el cultivo in vitro en medio suplementado con fitohormonas. La regeneracin de plntulas de especies leosas puede ser por organognesis directa o indirecta (pasando por una fase de callo). El balance adecuado entre las fitohormonas Auxinas y Citocininas favorece la formacin de ciertos tejidos, como brotes, callos y races como se muestra a continuacin.

.9 8.4

DOSIS ALTAS .4 0.0 100.0 ++

Profesores: Karla Macas, Mario J. Aguilar, Aldelmo E. Reyes, Silvia Daz. INGENIERA EN FARMACUTICA UNIDAD PROFESIONAL INTERDISCIPLINARIA DE INGENIERA

Materia: Laboratorio de Bioqumica Farmacutica AUXINAS NAA M (mg/L) 5 (0.93) 50 (9.31) CITOCININA S BA M (mg/L) 50 (11.26) 5 (1.12) 37 0 0 100 25 87 % Explantes con Brotes Races Callos

DOSIS BAJAS
AUXINAS NAA mg/L 0.01 0.1 CITOCININA S BA mg/L 0.1 0.01 20 0 0 50 15 30 % Explantes con Brotes Races Callos

Nombre: Bencil adenina Sinnimos: 6-Bencilaminopurina; N-(Fenilmetil)-1H-purin-6-amina; Bencil(purin-6-il)amina

Estructura molecular

Nombre: cido 1-Naftalen actico Sinnimos: Planofix; cido -Naftilactico; Fruitona; cido 1-Naftaleneacetico; cido Naftalen-1acetico Estructura molecular

Profesores: Karla Macas, Mario J. Aguilar, Aldelmo E. Reyes, Silvia Daz. INGENIERA EN FARMACUTICA UNIDAD PROFESIONAL INTERDISCIPLINARIA DE INGENIERA

Materia: Laboratorio de Bioqumica Farmacutica MATERIALES Y EQUIPO DE LABORATORIO.

Material vegetal: Plntulas de Paolownia spp. establecidas in vitro. Material de laboratorio:

Medio de cultivo MS adicionado con fitohormonas a las siguientes concentraciones: A) BA 0.1 mg/L NAA 0.01 mg/L B) BA 0.01 mg/L NAA 0.1 mg/L

Pinzas para diseccin Bistur con navaja estril Cajas petri estriles Mechero Campana de flujo laminar Cmara de incubacin a 25C

Mtodologa: 1. Encender la campana de flujo laminar 10 minutos antes de comenzar a trabajar. 2. Limpiar la campana de flujo laminar con etanol tcnico para mantener las condiciones
aspticas. 3. Abrir los frascos conteniendo las plntulas de Paolownia sp, sacarlas con ayuda de las

pinzas previamente esterilizadas y colocarlas en una caja petri estril. 4. Seccionar las plntulas con el bistur estril, en fragmentos de 0.5 mm de largo aproximadamente. 5. Colocar los fragmentos de plntulas sobre el medio de cultivo.

Profesores: Karla Macas, Mario J. Aguilar, Aldelmo E. Reyes, Silvia Daz. INGENIERA EN FARMACUTICA UNIDAD PROFESIONAL INTERDISCIPLINARIA DE INGENIERA

Materia: Laboratorio de Bioqumica Farmacutica

6. Cerrar los frascos con los nuevos explantes y sellarlos con parafilm para evitar su contaminacin. 7. Incubar las plntulas a 25C con fotoperiodo de luz: oscuridad de 16/8 horas, durante 15 das, monitoreando el desarrollo cada 3 das. 8. Registrar sus observaciones y realizar estadsticas de la aparicin de brotes, races y callos.
CUESTIONARIO 1. En un diagrama explique las diferentes partes del tejido vegetal de Paulownia sp. 2. Explique el mecanismo por el cual las auxinas y citocininas tienen su efecto sobre el desarrollo de diferentes tejidos en Paulownia sp. 3. Cmo influyen los fotoperiodos en el desarrollo de los tejidos vegetales? 4. Proponga una metodologa para utilizar alguna de estas fitohormonas en un cultivo vegetal que pueda ser para consumo animal. 5. Investigue si el consumo de estas fitohormonas tienen un efecto secundario en animales. 6. Cul es la importancia de realizar esta prctica en un ambiente estril? ANALISIS Y DISCUSION DE RESULTADOS Analizar y discutir sus resultados en base a lo obtenido en la prctica y a la bibliografa consultada. CONCLUSIONES Con los resultados obtenidos, el anlisis, la discusin, los objetivos y la bibliografa consultada dar las conclusiones de la prctica. REFERENCIAS Murashige T, Skoog F (1962) Physiol. Plant., 15: 473-493. Thorpe TA, Harry IS, Kumar PP (1991) Application of micropropagation to forestry. In: Micropropagation, technology and application. Debergh PC and Zimmerman RH (eds) Kluwer Academic Publishers, Dordrecht, The Netherlands, pp. 311-336. Rao CD, Goh CJ, Kumar PP (1996) High frequency adventitious shoot regeneration from excised leaves of Paulownia spp. cultured in vitro. Plant Cell Reports 16:204-209

Profesores: Karla Macas, Mario J. Aguilar, Aldelmo E. Reyes, Silvia Daz. INGENIERA EN FARMACUTICA UNIDAD PROFESIONAL INTERDISCIPLINARIA DE INGENIERA

Materia: Laboratorio de Bioqumica Farmacutica

Profesores: Karla Macas, Mario J. Aguilar, Aldelmo E. Reyes, Silvia Daz. INGENIERA EN FARMACUTICA UNIDAD PROFESIONAL INTERDISCIPLINARIA DE INGENIERA