UNIVERSIDADE FEDERAL DO PARAN DEPARTAMENTO DE QUMICA CQ019 CROMATOGRAFIA

CROMATOGRAFIA EM CAMADA DELGADA (CCD)

Relatrio referente disciplina de Cromatografia do curso de Qumica da Universidade Federal do Paran. Orientado pelo professor Luiz Pereira Ramos Realizado pelas alunas Bruna Pansonatto e Danielle Fernanda Barros

Curitiba Outubro de 2011

INTRODUO A cromatografia um mtodo fsico-qumico de separao dos componentes de uma mistura, realizada atravs da distribuio destes componentes entre duas fases, que esto em contato ntimo. Uma das fases permanece estacionria enquanto a outra se move atravs dela. A cromatografia em camada delgada (CCD) consiste na separao dos componentes de uma mistura atravs da migrao diferencial sobre uma camada delgada de adsorvente retido sobre uma superfcie plana. O processo de separao est fundamentado, principalmente no fenmeno de adsoro. O grande desenvolvimento desta tcnica conseqncia natural das mltiplas vantagens que ela oferece, tais como: fcil compreenso e execuo, separaes em breve espao de tempo, versatilidade, grande reprodutibilidade e baixo custo. Pode ser de aplicao analtica ou preparativa, cuja escala est na dependncia da espessura da camada do adsorvente e da amostra em anlise. Na CCD uma fina camada de adsorvente espalhada sobre uma placa. Na extremidade desta placa recoberta pelo adsorvente e seca, chamada cromatoplaca a amostra aplicada repetidas vezes com o auxlio de um capilar, obtendo-se pequenas manchas. A placa transferida para uma cuba cromatogrfica contendo o solvente, que ascende pela cromatoplaca. Durante o desenvolvimento do cromatograma, os vrios componentes da mistura so separados. A separao baseada em muitos equilbrios dos solutos entre as fases mvel e estacionria e resulta das diferenas de velocidade, nas quais os componentes individuais da mistura migram pela placa. Desenvolvido o cromatograma, a placa removida da cuba e deixada para secar, at que esteja livre do solvente. Se os componentes da amostra forem coloridos, manchas dispostas verticalmente na placa sero visveis. Se os componentes da amostra no forem coloridos, deve-se empregar um mtodo de visualizao como por ex: luz ultravioleta e vapor de iodo. O solvente ou mistura de solventes a serem utilizados, como fase mvel deve ser escolhida cuidadosamente, pois tero papel fundamental na separao de misturas. Entende-se que existe uma competio entre as molculas da fase mvel e da amostra, pela superfcie do adsorvente. Portanto,

na escolha da fase mvel deve-se considerar a natureza qumica das substncias a serem separadas e a polaridade da fase mvel. Solventes muito polares so facilmente adsorvidos pela fase estacionria. A interao do soluto menor e a separao ser prejudicada. Para que haja uma boa separao, o solvente deve ser significativamente menos polar do que os componentes da mistura e deve tambm dissolv-los apreciavelmente. Quando uma fase mvel pura no separa bem os componentes de uma amostra, pode-se utilizar uma mistura. Existem diferentes misturas que promovem igual separao das amostras, entretanto, no geral observa-se que pequenas variaes na composio da fase mvel levam a grandes alteraes no deslocamento das manchas. A velocidade de alguns tipos de reaes orgnicas pode variar muito. Assim, o acompanhamento cromatogrfico por CCD serve como demonstrao rpida e especfica do desenvolvimento da reao, alm de permitir o monitoramento dos parmetros ideais para a realizao das mesmas, tais como: temperatura, tempo e solvente ideal. Lembrando que as condies cromatogrficas empregadas devem favorecer a separao inequvoca de todos os componentes do meio da reao. Sob condies bem estabelecidas, um dado composto percorre sempre uma distncia fixa em relao distncia percorrida pelo solvente. Esta relao chamada valor do Rf e expressa como: Rf = distncia percorrida pela substncia distncia percorrida pelo solvente Quando os parmetros experimentais so especificados, o valor do R f uma constante, para um dado composto, podendo ser usado para auxiliar a identificao de uma substncia.

OBJETIVOS Conhecer e utilizar o equipamento para preparao de placas de Utilizar a tcnica de cromatografia em camada delgada em superfcie de cromatografia em camada delgada. slica para separar um mistura de trs corantes, sendo eles: amarelo manteiga, vermelho sudan G e indofenol. Verificar o efeito da polaridade na fase mvel no processo de separao, Determinar os valores de migrao cromatogrfica relativa (Rf) dos observando qual destas tem maior eficincia na separao dos corantes. componentes presentes em cada uma das amostras. MATERIAIS Cromatoplacas: Padro amarelo-manteiga (4-dimetilaminoazo-benzeno); Mistura problema (amarelo-manteiga, vermelho sudan G e indofenol); Combinao (padro + mistura problema); Cuba cromatogrfica de vidro; Tolueno; Acetato de etila; Clorofrmio; Ciclohexano. Ciclohexano - Acetato de Etila 9:1 (%v/v)

PROCEDIMENTOS Uma placa foi utilizada para teste da aplicao das amostras em nvel de concentrao e dimetro das manchas com a fase mvel sendo o clorofrmio. Aps isto, o fronte de corrida da fase mvel das cinco placas restantes foi marcado a uma distncia de 5,5 cm da faixa de aplicao das amostras. Em seguida, foram marcados trs pontos eqidistantes entre si e das bordas das placas a as aplicaes foram feitas. No primeiro ponto foi aplicado a mistura de vermelho sudan, amarelo manteiga e indofenol, no segundo a mistura dos trs corantes mais o amarelo manteiga e no terceiro apenas o amarelo manteiga.

Transferiu-se a primeira cromatoplaca para a cuba cromatogrfica contendo a primeira fase mvel analisada, o frasco foi fechado e a contagem do tempo de corrida foi iniciada. Repete-se o procedimento com as outras fases mveis. Quando as fases mveis atingiram o fronte de corrida, as placas so retiradas dos frascos e a contagem do tempo interrompida. As distncias entre as manchas e a linha de aplicao foram medidas e os respectivos valores de Rf calculados.

RESULTADOS E DISCUSSO Mediante os dados apresentados na Tabela 1, observam-se valores de Rf maiores quando a fase mvel o acetato de etila. Tal fato explicado pela maior afinidade dos corantes com a fase mvel em relao fase estacionria. Sendo o acetato de etila a fase mvel mais polar utilizada, pode-se dizer que os corantes tambm possuem carter polar. No se observa nenhum deslocamento dos componentes quando a fase mvel o ciclo hexano (pouco polar). A no movimentao das amostras indica que os corantes tm maior afinidade pela fase estacionria (slica) do que pela fase mvel, demonstrando mais uma vez que os corantes so polares. Com a utilizao de clorofrmio e tolueno, ocorre a separao dos corantes verificando-se o maior Rf para o amarelo manteiga, por ser o corante menos polar, e o menor para o indofenol, por ser o mais polar. Quando utilizada a fase mvel contendo acetato de etila e ciclo hexano, observa-se um Rf menor para o vermelho sudan em vez do indofenol. O clorofrmio foi o solvente que melhor separou a mistura. O indofenol possui grupos hidroxila que interagem intensamente com a fase estacionria. O grupo hidroxila do vermelho sudan G, em solventes de menor polaridade, est associado internamente com o nitrognio bsico, havendo a formao de ligao hidrognio intramolecular no podendo interagir to intensamente com a fase estacionria e ento, apresenta um valor de Rf maior do que o indofenol. Ao utilizar o acetato de etila e ciclo hexano (1:9), essa ligao hidrognio rompida e o composto passa a interagir mais intensamente com a fase estacionria do que o indofenol, ocasionando a inverso relativa da migrao cromatogrfica dos dois corantes. A explicao para os fenmenos observados dada pela polaridade da fase mvel, estacionria e dos componentes da mistura. Atravs da observao da figura 1, que mostra as caractersticas estruturais dos trs corantes analisados, nota-se que o amarelo manteiga o menos polar, ento dever apresentar menor interao com a fase estacionria polar de slica gel e, por conseqncia o maior valor de Rf. Por esta mesma razo, constata-se que a mancha correspondente ao corante amarelo manteiga tem rea maior

relativamente s manchas observadas para os outros corantes, ou seja, ele apresenta uma maior difusao.

(CH3)2N N N
OH N N
OH

OCH3

Amarelo Manteiga Figura 1 Estrutura dos corantes. CONCLUSO

Vermelho Sudan G

Indofenol Azul

A cromatografia em camada delgada mostrou ser uma boa ferramenta para anlises rpidas e baratas. Existe uma gama de opes para a otimizao de um processo qualitativo como a separao de componentes, pois, se necessrio, a variao do sistema pode ser facilmente executada atravs do ajuste de solventes, o que economicamente vivel. A ordem eluotrpica para os solventes analisados : Cliclo hexano < acetato de etila : cliclo hexano (1:9) < tolueno < clorofrmio < acetato de etila O comportamento dos analitos, fase mvel e fase estacionria ficou dentro do esperado para as anlises efetuadas. REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS [1] COLLINS, C. H., BRAGA, G. L., BONATO, P.S., (Coord.). Introduo a Mtodos Cromatogrficos. 6 ed. Campinas: UNICAMP, 1995. [2] HARRIS, D.C. Anlise qumica quantitativa. 5 ed. Rio de Janeiro: LTC Editora, 2001. [3] Skoog, D. A., Princpios de anlise instrumental, 5. Edio, Editora Bookmann, 2002.