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UNIVERSIDADE FEDERAL DO MARANHO CENTRO DE CINCIAS BIOLGICAS E DA SADE DEPARTAMENTO DE

BRUNA LASA MARTINS GABRIEL MATOS MACHADO JONHNATHAN ADRIANO ARAJO DOS ANJOS JOS AIRES DA CUNHA NETO JOS BENEDITO DOS REIS LAULETTA LINDOSO LAISSON DE MOURA FEITOZA MARLIA BRINGEL MELLANIE DELLYLAH TRINTA RIBEIRO PATRCIA TRAVASSOS CUTRIM SERGIO ROBERTO DA SILVA VICTOR NADLER DE ARAJO

RELATRIO DE AULA PRTICA DE BIOQUMICA: AVALIAO DA ATIVIDADE CATALTICA DA AMILASE SALIVAR

So Lus 2013

BRUNA LASA MARTINS GABRIEL MATOS MACHADO JONHNATHAN ADRIANO ARAJO DOS ANJOS JOS AIRES DA CUNHA NETO JOS BENEDITO DOS REIS LAULETTA LINDOSO LAISSON DE MOURA FEITOZA MARLIA BRINGEL MELLANIE DELLYLAH TRINTA RIBEIRO PATRCIA TRAVASSOS CUTRIM SERGIO ROBERTO DA SILVA VICTOR NADLER DE ARAJO

RELATRIO DE AULA PRTICA DE BIOQUMICA: AVALIAO DA ATIVIDADE CATALTICA DA AMILASE SALIVAR Trabalho apresentado disciplina de Bioqumica , do Curso de Medicina, da Universidade Federal do Maranho

So Lus 2013

INTRODUO O amido um polissacardeo formado da unio de vrias molculas de glicose por meio de ligaes glicosdicas, sendo composto pela amilose (no ramificada) e amilopectina (ramificada). Durante a digesto as ligaes so rompidas por hidrlise catalisadas por um grupo de enzimas especficas, as amilases. Quimicamente, a hidrlise pode ser desencadeada pela ao de cidos fortes. Quando tratado com cido sulfrico quente, sofre uma sucesso de hidrlises at se converter totalmente em molculas de sua -ose fundamental, a glicose. J, quando tratado com saliva, se degrada totalmente at glicose, isso ocorre porque encontramos na saliva a enzima -amilase, que atua sobre o amido, realizando a sua hidrlise enzimtica. Atravs desse experimento, comprovaremos o que dito pela literatura.

SUMRIO

1. EXPERIMENTO 1: HIDRLISE CIDA.......................................... 05 2. EXPERIMENTO 2: HIDRLISE ENZIMTICA............................... 06 3. ANEXO FOTOGRFICO 07

1. EXPERIMENTO 1: HIDRLISE CIDA Objetivos: Observar a hidrlise cida do amido at a sua -ose fundamental, a glicose. Materiais: - Soluo de cido sulfrico ( H2SO4); - Soluo de Hidrxido de sdio (NaOH); - Soluo de Amido 1%; - Soluo de Glicose 1%; - Reagente de Benedict; - Gro de Milho (cuscuz); - gua destilada; - Tubos de ensaio e pipetas; - Banho-maria. Procedimentos: - 3 tubos foram marcados A, B e C e neles colocamos: - Tubo A: pequenas partculas de gro de milho, 5ml de gua destilada e 5ml de H2SO4 - Tubo B: utilizado para controle negativo. Foram colocados pequenas partculas de gro de milho e 5ml de gua destilada. - Tubo C: utilizado para controle positivo. Foram colocados 5ml de soluo de Glicose 1%. O tubo foi reservado. - Colocamos os tubos A e B em Banho-maria por 25 minutos; - Passados os 25 minutos, tiramos os tubos e esperamos esfriar; - Foram adicionados 5ml de NaOH no tubo A para poder neutralizar o H2SO4; - No tubo B foram adicionados 5ml de gua destilada. - Reservamos os dois tubos. Em seguida, para comprovar que o amido, por hidrlise cida, se degradou at glicose, usamos o reagente de Benedict. Para isso seguimos os seguintes procedimentos: - Pegamos outros dois tubos e marcamos como A1 e B1; - No tubo A1 adicionamos 2ml do contedo do tubo A mais 2ml do reagente de Benedict; - No tubo B1 adicionamos 2ml do contedo do tubo B mais 2ml do reagente de Benedict; - No tubo C, que havia sido reservado na primeira etapa, adicionamos 2ml do reagente de Benedict. - Depois, pegamos o trs tubos e aquecemos em Banho-maria por 5 minutos. Resultados Obtido: O contedo dos tubos A1 e C ficaram com cor alaranjada, com uma pequena quantidade de precipitado vermelho, o que comprova a reduo. J no Tubo B1(utilizado para controle negativo), no houve mudana significativa, comprovando a no reduo.

2. EXPERIMENTO 2: HIDRLISE ENZIMTICA Nessa hidrlise o amido passa pelas etapas intermedirias AMIDO Cor azul com Lugol

AMILODEXTRINA

Cor roxa com Lugol

ERITODEXTRINA

Cor vermelha com Lugol

ACRODEZTRINA

Cor incolor com Lugol

Objetivos: Observar a hidrlise enzimtica do amido at a sua -ose fundamental, a glicose. Materiais: - Soluo de Amido 1%; - Soluo de Lugol 1%; - Saliva; - Conta-gotas; - Tubos de ensaio e pipetas; - Banho-maria. Procedimentos: - 7 tubos foram marcados A, B, C, D, E, F e G e neles colocamos cada gota de Lugol em cada tubo. - Um tubo de ensaio a parte foi marcado com um X e nele colocamos 10ml de soluo de amido 1%; - Retiramos 1ml desse tubo X e adicionamos ao tubo A; - Colocamos 8 gotas de saliva (fornecida pela aluna Carolina Falco) no tubo X; - A aluna Mellanie Trinta misturou bem (a mesma estava de luva calada); - Marcamos o tempo de mais ou menos 2 minutos e depois colocamos 1ml do contedo do tubo X no tubo B; - Aps mais dois minutos, repetimos o procedimento e colocamos 1ml do contedo do tubo X no tubo C; - E assim fizemos com os demais tubos at chegar ao tubo G; - Depois, pegamos os tubos e aquecemos em Banho-maria por 10 minutos. Resultados Esperado: Desaparecimento gradativo da cor azul do Lugol, indicando a quebra do amido. Resultados Obtido: A cor de todos os tubos ficaram em um tom amarelado, indicando que no

houve quebra total do amido. 3. ANEXO FOTOGRFICO EXPERIMENTO 1: Soluo de cido sulfrico ( H2SO4); Soluo de Hidrxido de sdio (NaOH); Soluo de Amido 1%;

Soluo de Glicose 1%;

Reagente de Benedict;

Gro de Milho (cuscuz);

gua destilada

Tubos de ensaio e pipetas;

Banho-maria.

Resultado:

EXPERIMENTO 2: Soluo de Amido 1%; Soluo de Lugol 1%; Saliva;

Conta-gotas;

Tubos de ensaio e pipetas;

Banho-maria.

Resultado: